CZ302050B6

CZ302050B6 - 3alfa-Hydroxy-21ksí,22-oxido-21-homo-5alfa-pregnan-20-on, zpusob jeho výroby a jeho použití

Info

Publication number: CZ302050B6
Application number: CZ20090521A
Authority: CZ
Inventors: Kasal@Alexander; Budešínský@Miloš; Mareš@Pavel; Krištofíková@Zdena
Original assignee: Ústav organické chemie a biochemie, Akademie ved CR, v.v.i.; Fyziologický ústav Akademie ved CR, v.v.i.; Psychiatrické centrum Praha
Priority date: 2009-08-04
Filing date: 2009-08-04
Publication date: 2010-09-15
Also published as: CZ2009521A3

Abstract

3.alfa.-Hydroxy-21.ksi.,22-oxido-21-homo-5.alfa.-pregnan-20-on vzorce II. Zpusob jeho výroby, který spocívá v Mannichove kondenzaci formaldehydu a dimethylaminu, a rozkladu príslušného meziproduktu na 3.alfa.-hydroxy-21-homo-5.alfa.-pregn-21-en-20-on vzorce V, který se epoxiduje peroxidem vodíku v alkalickém prostredí. 3.alfa.-Hydroxy-21.ksi.,22-oxido-21-homo-5.alfa.-pregnan-20-on vzorce II se dále používá pro výrobu léciva urceného k predcházení a potlacení epileptických záchvatu.

Description

Oblast techniky

Tento vynález se týká 3a-hydroxy—21 ξ,22—oxido—21-homo-5a-pregnan-20—onu, způsobu jeho výroby a jeho použití při potlačení epileptických záchvatů.

Dosavadní stav techniky

Epileptické záchvaty jsou projevem náhlých elektrických impulsů projevujících se v části či celém mozku, při němž může, ale nemusí dojít k poruše vědomí. Záchvat může být ztišen řadou látek, které tlumí přenos nervových signálů, jako jsou benzodiazepiny a barbituráty, které působí prostřednictvím receptoru γ-aminomáselné kyseliny (GABA). Nově může být tento receptor modulován i neurosteroidy typu allopregnanolonu vzorce I

Tyto látky působí jako pozitivní allosterické modulátory GABA receptorů tím, že zvyšují proudy jak co do frekvence otevření iontového kanálu, tak i délky jeho otevření. Neurosteroidy tedy mohou být použity jako anestetika, anxiolytika i látky s protikřečovým účinkem [Veleiro AS, Burton G. Structure-Activity Relationships of Neuroactive Steroids Acting on the GABA(A) Receptor. Curr Med Chem 2009; /6:455-72] [Scaglione JB, Jastrzebska I, Krishnan K, Li P, Akk G, Manion BD, Benz A, Tailor A, Rath NP, Evers AS, Zommski CF, Mennerick S, Covey DF. Neurosteroid analogues. 11. Alternativě ring systém scaffolds: gamma-aminobutyric acid receptor modulation and anesthetic actions of benz[f]indenes. J Med Chem 2006:49:4595-605], [Eisenman LN, Shu H-J, Akk G, Wang C, Manion BD, Kress GJ, Evers AS, Steinbach JH, Covey DF, Zorumski CF, Mennerick S. Anticonvulsant and anesthetic effects ofa fluorescent neurosteroid analog activated by visible light. Nátuře Neurosci 2007:70:523-30].

Nevýhodou endogenního allopregnanolonu I je, že se v těle rychle metabolizuje. Proto byla hledána analoga allopregnanolonu, která byla založena na nejrůznějších modifikacích steroidního skeletu [Veleiro AS, Burton G. Structure-Activity Relationships of Neuroactive Steroids Acting on the GABA(A) Receptor. Curr Med Chem 2009:76:455-72].

Nyní jsme překvapivě zjistili, že námi syntetizovaná nová sloučenina, 3a-hydroxy-21^22oxido-21-homo~5a-pregnan-20~on vzorce Π

HO'

H (ID

- 1 CZ 302050 B6 se váže na GABA_a receptor in vitro a v souladu s tím i potlačuje dva typy křečí indukovaných pentylentetrazolem u potkanů srovnatelně s účinky ganaxolonu. Příprava látky vzorce II a její biologická aktivita je předmětem tohoto vynálezu.

Podstata vynálezu

Tento vynález se týká 3a-hydroxy-2^,22-oxido-21-homo-5ct-pregnan-20—onu vzorce II

Dále se tento vynález týká syntézy 3a-hydroxy-2^,22-oxÍdo-21-homo-5a-pregnan-20—onu II, která spočívá v tom, že se známý allopregnanolon vzorce I

za podmínek Mannichovy kondenzace převede na amin vzorce III

jehož N-methylbromid vzorce IV

se rozloží na 2 l-homo-3a-hydroxy-5a-pregn-2 l-en-20—on vzorce V

-2CZ 302050 B6 (V),

který se oxiduje peroxidem vodíku na látku II

(ll).

Tento vynález bude podrobněji ilustrován na následujících příkladech, které není možné brát jako omezení předloženého vynálezu, ale pouze jako jeho ilustraci.

io

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Výroba 3 a-hydroxy-21ξ,22-οχΐάο-21-homo-5 a-pregnan-20—onu (II)

Roztok vodného peroxidu vodíku (33%, 2,0 mL) a hydroxidu sodného (4N, 0,4 mL) v methanolu (8.0 mL) se přidá k roztoku olefinu V (150 mg, 0,45 mmol) ve směsi methanolu a THF (25 mL, 1:1) při Ó°C. Po 4 hodinách se rozpouštědlo částečně odpaří ve vakuu a produkt se vysráží přidáním nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Extrakce octanem ethylnatým poskytne bílé krystaly látky II (120 mg, 76 %). Tt. 172-175 °C (aceton/heptan). [a]_D +122 (CHC1₃, c 0,3). IR (CHC1₃: 3616, 3489, 1001 (OH); 3063 (epoxid); 1712 (C=O). Pro C₂₂H₃₄O₃(346,5) vypočteno: 76,26 %C, 9,89 %H; nalezeno: 76,04 %C, 10,14 %H. Pro NMR spektrum, viz Tabulka 1.

Příklad 2

Výroba 3 a-Hydroxy-21 -homo-5 a-pregn-21 -en-20-onu (V)

Allopregnanolon (I) byl podroben Mannichově reakci a rozkladu příslušné kvartemí amoniové base podle japonských autorů [Hikino H, Okuyama T, Arihara S, Hikino Y, Takemoto T, Moři H, Shibata K. Steroids. 24. Shidasterone, an insect metamorphosing substance from Blechnum35 niponicum - structure. Chem Pharm Bull 1975:23:1458-79], Látka V tvoří bílé krystaly, tt. 153 až 154 °C (aceton/heptan). [a]_D +127 (CHC1₃, c 0,2). IR (CHC1₃): 3616, 3479, 1002 (OH);1689, 1664,1618,1609, 986, 960 (C=C-C=O). Pro C₂₂H₃₄O₂ (330,5) vypočteno: 79,95 %C, 10,37 %H; nalezeno: 79,55 %C, 10,45 %H. NMR spektrum viz následující tabulka.

-3 CZ 302050 B6

Tabulka 1 ^BC a ’Η NMR spektra popisovaných látek

Pozice	Olefin V	hlavní 53% [21*1	vedlejší 47% [215] ^l3C	Epoxid 11 hlavní 53 % [21/řJ	*H	vedlejší 47% [215]
^!3C	Ή
1	32,16	1,32;1,46	32,15	32,16		1,33;1,47
2	28,98	1,63; 1,68	28,97		1,63; 1,68
3	66,52	4,05	66,49		4,05
4	35,83	1,38; 1,51	35,80		1,37:1,53
5	39,09	1,55	39,04	39,06		-1,55
6	28,43	-1,22 (2H)	28,39		-1,22 (2H)
7	31,99	0,97; 1,69	31,94		0,97;l,68
8	35,58	1,3«	35,60	35,48	1,38		1,41
9	54,21	0,81	54,10	54,13	0,83		0,81
10	36,11	-	36,09	36,11	-		-
11	20,76	1,25; 1,60	20,71	20,75		1,27;1,63
12	39,27	1,38;1,89	39,20	39,07	1,51:1,92		l,46;2,04
13	44,96	-	45,78	45,55			-
14	57,00	1,22	56,85	56,87		1,23
15	24,51	1,22; 1,70	24,58	24,48		1,23:1,71
16	22,67	1,64;2,27	22,60	23,02	1,60:2,22		l,70;2,18
17	60,99	2,79	59,16	60,98	2,74		2,72
18	13,66	0,578	14,00	13,96	0,606		0,690
19	11,16	0,774	11,16	0,777		0,787
20	201,07	-	207,60	207,18	-		-
21	137,11	6,42	53,27	52,41	3,46 dd		3,52 dd
		>=17,4, 10,5			7=4,6,2,5	>=4,4, 2,4
22	127,05	5,67 dd,7=10,5,1,5	46,21	47,11	2,76 dd^7=6,4,2,5, 2,87 dd^=6,7, 2,4
		6,20 dd, >=17,4, 1,5			2,95 dd, >=6,4,4,6 2,92 dd, 7=6.7,4,4

-4CZ 302050 B6

Příklad 3

Aktivita

Látka II vykázala v GABA_a receptorovém testu s použitím TBPS jako radioligandu tuto aktivitu: látka modulovala GABA_a receptor s mohutností účinnosti IC₅₀ = 50nM a efektivitou I_max - 40 %. Tento výsledek ukazuje, že tato sloučenina je účinná při ovlivňování stavu řízených inhibičními účinky γ-aminomáselné kyseliny, např. epileptických záchvatů.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 3a-Hydroxy-2^,22-oxido-21-homo-5tt-pregnan-20-on vzorce II (H).

20 2. Způsob výroby sloučeniny vzorce II podle nároku 1, vyznačující se tím, že se známý allopregnanolon vzorce I (O

25 za podmínek Mannichovy kondenzace převede na amin vzorce III který se převede na N-methyl bromid vzorce IV

-5 CZ 302050 B6 jenž se nechá rozložit na 21-homo—3a-hydroxy-5u-pregn-21—en-20-on vzorce V a 21-homo-3a-hydroxy-5a-pregn-21-en-20-on vzorce V se nechá zoxidovat peroxidem vodíku.

10 3. Použití 3a-hydroxy“21^22-oxido-21-homo-5a-pregnan-20-onu vzorce II podle nároku 1 pro výrobu léčiva určeného k předcházení a potlačení epileptických záchvatů.