ES2280423T3 - Tratamiento de la piel basado en el uso de chromolaena odorata. - Google Patents

Abstract

Un procedimiento cosmético para tratar y prevenir estados normales de la piel debidos al cronoenvejecimiento o al fotoenvejecimiento que comprende aplicar sobre la piel una composición tópica que comprende una cantidad eficaz de un extracto acuoso de Chromolaena odorata.

Description

Tratamiento de la piel basado en el uso de Chromolaena odorata.

Esta invención se refiere a un procedimiento cosmético para mejorar el estado y el aspecto de la piel, y al uso de un extracto vegetal en particular para la preparación de composiciones tópicas para mejorar el estado y el aspecto de la piel. Se refiere al uso de extractos de Chromolaena odorata (también conocida, por ejemplo, como hierba de Siam o hierba del diablo) para el tratamiento de las arrugas y/o de la piel fotodañada.

La piel está sometida a un deterioro por alteraciones dermatológicas, agresiones medioambientales (viento, aire acondicionado, calefacción central) o por el proceso de envejecimiento normal (cronoenvejecimiento) que puede acelerarse por la exposición de la piel al sol (fotoenvejecimiento). En los últimos años, la demanda de procedimientos cosméticos para mejorar el aspecto y el estado, y en particular, para revertir, reducir o prevenir los signos visibles de la piel arrugada, envejecida y/o fotodañada, ha crecido enormemente.

Los consumidores buscan cada vez más productos cosméticos "antienvejecimiento" que reviertan, traten o retrasen los signos visibles del cronoenvejecimiento y del fotoenvejecimiento de la piel tales como las arrugas, líneas, flaccidez, hiperpigmentación y léntigos seniles.

Se sabe que el colágeno, la proteína de matriz predominante de la piel, imparte a la piel una resistencia a la extensión. También se sabe en la técnica que los niveles de colágeno de la piel están significativamente reducidos en la piel envejecida y/o fotodañada. Muchos estudios han demostrado que los niveles de colágeno de tipo I de la piel están disminuidos con la edad y/o con un aumento en el daño provocado por la luz solar (véase, por ejemplo, Lavker, R. J., Inv. Derm., (1979), 73, 79-66; Griffiths y col., N. Eng. J. med. (1993) 329, 530-535). La reducción en los niveles de colágeno de la piel se asocia consecuentemente con un descenso en la resistencia a la extensión de la piel, causando arrugas y laxitud. Está ampliamente aceptado que el fortalecimiento de la matriz dérmica mediante el refuerzo de los niveles de colágeno de la piel proporciona beneficios antienvejecimiento y de reparación dérmica. También se sabe, por ejemplo, a partir del documento WO99/47110, que la decorina puede actuar como un marcador de la reparación de la piel.

El extracto de hierba de Siam que comprende extracto de Chromolaena odorata es un conocido extracto para el tratamiento de la piel, que ha encontrado uso en el tratamiento de heridas de tejidos blandos, quemaduras e infecciones cutáneas, por ejemplo, en Vietnam. Típico de la técnica anterior, que demuestra esto, es "The Journal of Alternative and Complimentary Medicine", vol. 2, nº 3, 1996 págs. 335-343, Phan y col.. Éste describe el uso de un extracto acuoso de hojas de hierba de Siam con el propósito mencionado anteriormente, y el efecto del extracto de hierba de Siam (denominado Eupolin por Phan y col.) sobre la contracción de látices de colágeno hidratado por parte de fibroblastos dérmicos humanos. Se ha averiguado que los ungüentos preparados previamente con vaselina basados en la hierba de Siam contienen flavonoides (salvigenina, sakuranetina, isosakuranetina, kaemferid, betulenol, 2-5-7-3-tetra-O-metilquercatagetina, tamarixetina, chalcona 1 y chalcano 2), aceites esenciales (geireno, acetato de bornilo, \beta-eubedeno), triterpenoides de saponina, taninos, ácidos orgánicos y oligoelementos. Los niveles in vitro de extracto de hierba de Siam en composiciones usadas por vía tópica eran típicamente de 50-200
\mug/ml.

Además, en "Plastic and Reconstructive Surgery", marzo de 1998, "Enhanced proliferation of Fibroplasts and Endothelial Cells Treated with an Extract of the Leaves of Chromolaena odorata (Eupolin), a Herbal Remedy for Treating Wounds", Phan y col., se describe el uso del extracto de hierba de Siam para aumentar el crecimiento de los fibroblastos y las células endoteliales, de nuevo en el contexto del tratamiento de quemaduras. En particular, se averiguó que cuando se usaban injertos de piel, el uso de extracto de hierba de Siam acelera la formación del tejido de granulación, y también aumenta la velocidad de síntesis de colágeno. En este estudio se usó un ungüento con extracto de hierba de Siam a unas concentraciones tópicas de 10-230 \mug/ml.

Sorprendentemente los inventores han averiguado que puede obtenerse un tratamiento y una prevención eficaces de estados normales de la piel debidos a un cronoenvejecimiento o a un fotoenvejecimiento, tales como arrugas, líneas, flaccidez, hiperpigmentación y léntigos seniles, mediante la aplicación tópica de composiciones cosméticas que contienen extracto de Chromolaena odorata.

Por lo tanto, se proporciona un procedimiento cosmético según las reivindicaciones anexas en este documento.

Preferiblemente, las composiciones tópicas para su uso en el procedimiento según la invención comprenden extracto de Chromolaena odorata a un nivel del 0,00005 al 10% de la composición tópica, más preferiblemente niveles del 0,0001 al 1,0%, y en ciertas circunstancias, muy preferiblemente del 0,001 al 0,1% en peso de la composición tópica.

Convenientemente, el producto tópico puede estar en forma de una emulsión de aceite en agua.

En relación con la reparación de la piel fotodañada, generalmente está aceptado que los procesos bioquímicos y biológicos asociados con la reparación de heridas y el remodelado de la dermis no son los mismos que los implicados en la reparación del daño provocado por la luz solar. Por ejemplo, se sabe que otros materiales, tales como los extractos de caléndula y de mirra, que inducen la reparación de heridas en la piel, no son tan efectivos en la reparación del daño provocado por la luz solar.

Las composiciones, procedimientos y usos inventivos proporcionan por tanto beneficios antienvejecimiento, que pueden dar como resultado la promoción de una piel suave y blanda, con una mejora en la elasticidad y una reducción o un retraso en la aparición de arrugas y piel envejecida, con una mejora en el color de la piel. También puede conseguirse una mejora general en el aspecto, la textura y el estado, en particular con respecto a la luminosidad, la claridad y el aspecto juvenil general de la piel. La invención puede tener una utilidad particular para proporcionar beneficios en el cuidado de la piel.

El término "tratar", según se usa en este documento, incluye en su ámbito reducir, retrasar y/o prevenir los estados mencionados anteriormente, normales pero cosméticamente indeseables, causados por el proceso normal de envejecimiento. Los signos visibles del envejecimiento, tales como las arrugas, las líneas y/o la flaccidez pueden retrasarse o reducirse. Generalmente puede incrementarse la calidad de la piel y mejorar su aspecto y textura evitando o reduciendo las arrugas y aumentando la flexibilidad, la firmeza, la suavidad, la blandura y la elasticidad de la piel.

Las composiciones, procedimientos y usos según la invención pueden ser útiles para tratar una piel que ya está en un estado arrugado, envejecido y/o fotodañado, o para tratar una piel joven para evitar o reducir los anteriormente mencionados indeseables cambios debidos al proceso normal de envejecimiento/fotoenvejecimiento.

La composición usada según la invención también comprende un vehículo dermatológicamente/cosméticamente aceptable para que actúe como diluyente, dispersante o portador de los principios activos. El vehículo puede comprender materiales empleados habitualmente en los productos de cuidado de la piel, tales como agua, emolientes líquidos o sólidos, aceites de silicona, emulsionantes, disolventes, humectantes, espesantes, polvos, propelentes y similares.

El vehículo será típicamente el 5% al 99,9%, preferiblemente el 25% al 80% en peso de la composición, y en ausencia de otros coadyuvantes cosméticos, puede formar el resto de la composición.

Aparte del extracto del principio activo de Chromolaena odorata, también pueden incluirse otros principios activos específicos beneficiosos para la piel tales como filtros solares, agentes iluminadores de la piel y agentes de bronceado. El vehículo también puede incluir adicionalmente coadyuvantes tales como antioxidantes, perfumes, opacificantes, conservantes, colorantes y tampones.

Para preparar la composición tópica usada en el procedimiento de la presente invención puede emplearse la forma habitual de preparar productos para el cuidado de la piel. Los componentes activos se incorporan generalmente en un portador dermatológicamente/cosméticamente aceptable de una forma convencional. Los componentes activos pueden, en primer lugar, disolverse o dispersarse adecuadamente en una porción del agua u otro disolvente o líquido que se vaya a incorporar en la composición. Las composiciones preferidas son emulsiones de aceite en agua o de agua en aceite o de agua en aceite en agua, aunque en ciertas circunstancias se prefieren las composiciones de agua en aceite.

La composición puede estar en forma de los productos de cuidado de la piel convencionales, tales como una crema, gel o loción, cápsulas o similares. La composición también puede estar en forma del denominado producto "de lavado", por ejemplo, un gel de baño o de ducha, que posiblemente contiene un sistema de administración de los principios activos para promover su adherencia a la piel durante el aclarado. Muy preferiblemente el producto es un producto "de permanencia", esto es, un producto que se aplica sobre la piel sin una etapa deliberada de aclarado poco después de su aplicación sobre la piel.

La composición puede envasarse en cualquier forma adecuada, tal como en un tarro, una botella, un tubo, un envase con aplicador de bola similares, de la forma convencional. Una forma contemplada adicionalmente es una formulación adecuada para su administración como un pulverizado, ya sea a partir de un aerosol impulsado por propelente o a partir de una bomba de pulverización.

La composición usada según la invención también puede formularse en una forma adecuada para su ingestión por vía oral, tal como una cápsula, un comprimido o similar.

El procedimiento de la presente invención puede llevarse a cabo una o más veces al día sobre la piel que requiere tratamiento. La mejora en el aspecto de la piel será visible habitualmente después de 3 a 6 meses o posiblemente antes, dependiendo del estado de la piel, de la concentración de los componentes activos usados en el procedimiento inventivo, de la cantidad de composición usada y de la frecuencia con la que se aplica. En general, se aplica sobre la piel una pequeña cantidad de la composición, por ejemplo, de 0,1 a 5 ml, desde un recipiente o aplicador adecuado, y se extiende y/o se frota sobre la piel usando las manos o los dedos o un dispositivo adecuado. Opcionalmente puede seguir una etapa de aclarado, dependiendo de si la composición está formulada como un producto "de permanencia" o "de aclarado".

Con objeto de que la presente invención se comprenda más fácilmente se proporcionan los siguientes ejemplos únicamente a modo de ilustración.

Ejemplos

De la solicitud europea pendiente de tramitación junto con la presente nº 99908956.8 se sabe que los tratamientos tópicos con ácido retinoico pueden usarse para causar un aumento del procolágeno I y la decorina in vivo. Con este fin se hace referencia a los fragmentos con el título "Identification of procollagen I and decorin upregulation in skin in vivo following topical retinoic acid treatment for comparative purposes" de esa solicitud.

Ejemplo 1 Procedimiento para medir la síntesis de procolágeno-I y decorina en fibroblastos dérmicos humanos Preparación de un medio condicionado de fibroblastos dérmicos

Se sembraron fibroblastos primarios de prepucio humano en el paso 2 (P2) en placas de 12 pocillos a 10.000 células/cm^{2} y se mantuvieron durante 24 horas en una atmósfera con un 5% de dióxido de carbono y un 4% de oxígeno en medio de Eagle modificado por Dulbecco (Dulbeccos Modified Eagles Medium, DMEM) complementado con un 10% de suero bovino fetal. Después de este tiempo, las células se lavaron con DMEM sin suero, y después se incubaron en DMEM nuevo sin suero durante 60 horas adicionales. Las monocapas de fibroblastos se lavaron entonces de nuevo con DMEM sin suero. Los reactivos de la prueba y los controles de vehículo se añadieron a las células por triplicado en un volumen final de 0,4 ml/pocillo con DMEM nuevo sin suero y se incubaron durante 24 horas adicionales. Este medio condicionado de fibroblastos, bien se analizó inmediatamente, o bien se ultracongeló en nitrógeno líquido y se almacenó a -70ºC para futuros análisis. Entonces se contaron las células, y posteriormente los datos del análisis de la transferencia de puntos (dot-blot) se estandarizaron al número de células.

Ensayo por transferencia de puntos del procolágeno-I y la proteína decorina en medio condicionado de fibroblastos dérmicos

Las muestras de medio condicionado de fibroblastos dérmicos tratadas con vehículo (como control) o con los reactivos de prueba se complementaron con ditiotreitol 20 mM (dilución 1:10 de una disolución madre 200 mM) y dodecilsufato sódico al 0,1% (dilución 1:100 de una disolución madre al 10%), se mezclaron bien y después se incubaron a 75ºC durante 2 minutos. Se produjo un patrón para el ensayo mediante la dilución sucesiva de medio condicionado puro de fibroblastos a partir de fibroblastos sembrados a 10.000 células/cm^{2} en un matraz de 175 cm^{2} y se mantuvo en medio DMEM sin suero, según se describió anteriormente.

Posteriormente las muestras del ensayo se aplicaron por triplicado a una lámina prehumedecida de membrana de transferencia Immobilon-P usando el aparato Bio-Dot de 96 pocillos de Bio-Rad según se describe en las recomendaciones del fabricante. Se aplicaron aproximadamente 200 \mul de medio por pocillo. El medio se dejó filtrar a través de la membrana por gravedad (30 minutos), tras lo cual la membrana se lavó dos veces con PBS (200 \mul). Estos lavados con PBS se dejaron filtrar a través de la membrana por gravedad (2 x 15 minutos). El aparato Bio-Dot se conectó entonces a un tubo de vacío, y se llevaron a cabo un tercer y último lavado con PBS bajo succión.

El aparato se desmontó, se retiró la membrana y se cortó rápidamente según se requirió antes de ser colocada en tampón de bloqueo hasta el día siguiente a 4ºC. Las membranas preparadas para los análisis de decorina se bloquearon con BSA al 3% (p/v)/Tween 20 al 0,1% (v/v) en PBS, mientras que las de los análisis del procolágeno-I se bloquearon con leche desnatada seca en polvo al 5% (p/v)/Tween 20 al 0,5% en PBS.

Al día siguiente las membranas se sondaron con una dilución 1:10.000 de anticuerpos primarios contra el procolágeno-I humano (MAB1912; monoclonal de rata; Chemicon Int. Inc., Temecula, CA) o contra la decorina humana (policlonal de conejo; Biogenesis) durante 2 horas a temperatura ambiente. Las membranas se lavaron posteriormente con TBS/Tween 20 al 0,05% (3 x 5 minutos) y después se incubaron con una dilución 1:1000 de fragmentos F(ab')_{2} anti-rata o anti-conejoconjugados con ^{125}I (Amersham), según se requirió durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de esto, las tiras de Immobilon se lavaron de nuevo con TBS/Tween 20 (3 x 5 minutos) antes de dejarlas secar al aire a temperatura ambiente.

Las membranas secas se envolvieron en celofán y se expusieron a una pantalla de almacenamiento de fósforo de Molecular Dynamics durante 16-18 horas. Al final de este tiempo, la pantalla expuesta se barrió con un aparato de radiactividad en placa (Molecular Dynamics Phosphorimager SF) usando el programa informático ImageQuant^{TM}. La intensidad de los puntos se evaluó mediante un análisis de imagen asistido por ordenador usando las herramientas de cuantificación de ImageQuant^{TM}, estandarizadas al número de células, y se determinaron los efectos de varios reactivos de prueba sobre la síntesis de decorina y de procolágeno-I con respecto a un valor de control tratado con vehículo de 100 unidades arbitrarias.

La Tabla 1, a continuación, indica los efectos del extracto de Chromdaena odorata sobre la síntesis de procolágeno-I y decorina en fibroblastos dérmicos humanos, y las cantidades en las que se aplicó. Con objeto de normalizar los resultados, se determinaron los efectos de una sustancia de prueba con respecto a un valor de control tratado con vehículo de 100 unidades arbitrarias. Para la comparación se realizó un estudio con ácido retinoico para evaluar su efecto sobre la síntesis de decorina en fibroblastos dérmicos humanos. Las concentraciones de reactivos usadas en los estudios no influyeron en la viabilidad celular.

El extracto de Chromolaena odorata se preparó concentrando el extracto acuoso obtenido tras hervir hojas de hierba de Siam en agua durante 30 minutos.

El extracto se probó a unos niveles de 0,1 a 1 \mug/ml en un modelo de fibroblastos in vitro que contiene un 4% de oxígeno, según se describió anteriormente.

El modelo se analizó para procolágeno-I y decorina. Sus resultados se muestran a continuación.

TABLA 1

1

Los resultados indican que la síntesis de decorina en el modelo está sustancialmente aumentada incluso con niveles relativamente bajos (por ejemplo, 0,01 \mug/ml) de extracto. También se observan algunos pequeños efectos, pero positivos, sobre la síntesis de procolágeno I, en comparación con el control. La muestra de 1,0 \mug/ml también se probó comparativamente con el ácido retinoico (1 \mum), mostrando un aumento de la decorina, 138 ± 14,0 (p = 0,035, n = 4), determinado con respecto a un valor de control tratado con vehículo de 100 unidades arbitrarias.

Esto indica adicionalmente la magnitud del aumento en la síntesis de decorina en fibroblastos dérmicos humanos efectuada por el extracto de Chromolaena odorata, en comparación con el efecto del ácido retinoico.

Ejemplo 2

La formulación, a continuación, describe una crema de aceite en agua adecuada para los procedimientos y usos según la presente invención. Los porcentajes indicados son en peso de la composición.

2

Ejemplo 3

La formulación, a continuación, describe una crema en emulsión según la presente invención.

3

Las dos composiciones tópicas anteriores del ejemplo 2 y 3 proporcionan un tratamiento cosmético eficaz para mejorar el aspecto de la piel arrugada, envejecida y/o fotodañada, cuando se aplica sobre la piel que se ha deteriorado a través de la edad o el fotoenvejecimiento, o cuando se aplica a una piel joven para ayudar a prevenir o retrasar dichos cambios deteriorantes. Las composiciones pueden procesarse de forma convencional.

Claims (3)

1. Un procedimiento cosmético para tratar y prevenir estados normales de la piel debidos al cronoenvejecimiento o al fotoenvejecimiento que comprende aplicar sobre la piel una composición tópica que comprende una cantidad eficaz de un extracto acuoso de Chromolaena odorata.

2. Un procedimiento cosmético según la reivindicación 1 en el que las condiciones normales de la piel comprenden arrugas, líneas, flaccidez, hiperpigmentación y léntigos seniles.

3. Un procedimiento cosmético según la reivindicación 1 o la reivindicación 2 en el que el extracto está presente a un nivel del 0,0001% al 1% en peso de la composición.