ES2280423T3 - Tratamiento de la piel basado en el uso de chromolaena odorata. - Google Patents
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Abstract
Un procedimiento cosmético para tratar y prevenir estados normales de la piel debidos al cronoenvejecimiento o al fotoenvejecimiento que comprende aplicar sobre la piel una composición tópica que comprende una cantidad eficaz de un extracto acuoso de Chromolaena odorata.
Description
Tratamiento de la piel basado en el uso de
Chromolaena odorata.
Esta invención se refiere a un procedimiento
cosmético para mejorar el estado y el aspecto de la piel, y al uso
de un extracto vegetal en particular para la preparación de
composiciones tópicas para mejorar el estado y el aspecto de la
piel. Se refiere al uso de extractos de Chromolaena odorata
(también conocida, por ejemplo, como hierba de Siam o hierba del
diablo) para el tratamiento de las arrugas y/o de la piel
fotodañada.
La piel está sometida a un deterioro por
alteraciones dermatológicas, agresiones medioambientales (viento,
aire acondicionado, calefacción central) o por el proceso de
envejecimiento normal (cronoenvejecimiento) que puede acelerarse
por la exposición de la piel al sol (fotoenvejecimiento). En los
últimos años, la demanda de procedimientos cosméticos para mejorar
el aspecto y el estado, y en particular, para revertir, reducir o
prevenir los signos visibles de la piel arrugada, envejecida y/o
fotodañada, ha crecido enormemente.
Los consumidores buscan cada vez más productos
cosméticos "antienvejecimiento" que reviertan, traten o
retrasen los signos visibles del cronoenvejecimiento y del
fotoenvejecimiento de la piel tales como las arrugas, líneas,
flaccidez, hiperpigmentación y léntigos seniles.
Se sabe que el colágeno, la proteína de matriz
predominante de la piel, imparte a la piel una resistencia a la
extensión. También se sabe en la técnica que los niveles de colágeno
de la piel están significativamente reducidos en la piel envejecida
y/o fotodañada. Muchos estudios han demostrado que los niveles de
colágeno de tipo I de la piel están disminuidos con la edad y/o con
un aumento en el daño provocado por la luz solar (véase, por
ejemplo, Lavker, R. J., Inv. Derm., (1979), 73,
79-66; Griffiths y col., N. Eng. J. med. (1993)
329, 530-535). La reducción en los niveles de
colágeno de la piel se asocia consecuentemente con un descenso en
la resistencia a la extensión de la piel, causando arrugas y
laxitud. Está ampliamente aceptado que el fortalecimiento de la
matriz dérmica mediante el refuerzo de los niveles de colágeno de la
piel proporciona beneficios antienvejecimiento y de reparación
dérmica. También se sabe, por ejemplo, a partir del documento
WO99/47110, que la decorina puede actuar como un marcador de la
reparación de la piel.
El extracto de hierba de Siam que comprende
extracto de Chromolaena odorata es un conocido extracto para
el tratamiento de la piel, que ha encontrado uso en el tratamiento
de heridas de tejidos blandos, quemaduras e infecciones cutáneas,
por ejemplo, en Vietnam. Típico de la técnica anterior, que
demuestra esto, es "The Journal of Alternative and Complimentary
Medicine", vol. 2, nº 3, 1996 págs. 335-343, Phan
y col.. Éste describe el uso de un extracto acuoso de hojas de
hierba de Siam con el propósito mencionado anteriormente, y el
efecto del extracto de hierba de Siam (denominado Eupolin por Phan
y col.) sobre la contracción de látices de colágeno hidratado por
parte de fibroblastos dérmicos humanos. Se ha averiguado que los
ungüentos preparados previamente con vaselina basados en la hierba
de Siam contienen flavonoides (salvigenina, sakuranetina,
isosakuranetina, kaemferid, betulenol,
2-5-7-3-tetra-O-metilquercatagetina,
tamarixetina, chalcona 1 y chalcano 2), aceites esenciales
(geireno, acetato de bornilo, \beta-eubedeno),
triterpenoides de saponina, taninos, ácidos orgánicos y
oligoelementos. Los niveles in vitro de extracto de hierba de
Siam en composiciones usadas por vía tópica eran típicamente de
50-200
\mug/ml.
\mug/ml.
Además, en "Plastic and Reconstructive
Surgery", marzo de 1998, "Enhanced proliferation of Fibroplasts
and Endothelial Cells Treated with an Extract of the Leaves of
Chromolaena odorata (Eupolin), a Herbal Remedy for Treating
Wounds", Phan y col., se describe el uso del extracto de hierba
de Siam para aumentar el crecimiento de los fibroblastos y las
células endoteliales, de nuevo en el contexto del tratamiento de
quemaduras. En particular, se averiguó que cuando se usaban
injertos de piel, el uso de extracto de hierba de Siam acelera la
formación del tejido de granulación, y también aumenta la velocidad
de síntesis de colágeno. En este estudio se usó un ungüento con
extracto de hierba de Siam a unas concentraciones tópicas de
10-230 \mug/ml.
Sorprendentemente los inventores han averiguado
que puede obtenerse un tratamiento y una prevención eficaces de
estados normales de la piel debidos a un cronoenvejecimiento o a un
fotoenvejecimiento, tales como arrugas, líneas, flaccidez,
hiperpigmentación y léntigos seniles, mediante la aplicación tópica
de composiciones cosméticas que contienen extracto de
Chromolaena odorata.
Por lo tanto, se proporciona un procedimiento
cosmético según las reivindicaciones anexas en este documento.
Preferiblemente, las composiciones tópicas para
su uso en el procedimiento según la invención comprenden extracto
de Chromolaena odorata a un nivel del 0,00005 al 10% de la
composición tópica, más preferiblemente niveles del 0,0001 al 1,0%,
y en ciertas circunstancias, muy preferiblemente del 0,001 al 0,1%
en peso de la composición tópica.
Convenientemente, el producto tópico puede estar
en forma de una emulsión de aceite en agua.
En relación con la reparación de la piel
fotodañada, generalmente está aceptado que los procesos bioquímicos
y biológicos asociados con la reparación de heridas y el remodelado
de la dermis no son los mismos que los implicados en la reparación
del daño provocado por la luz solar. Por ejemplo, se sabe que otros
materiales, tales como los extractos de caléndula y de mirra, que
inducen la reparación de heridas en la piel, no son tan efectivos
en la reparación del daño provocado por la luz solar.
Las composiciones, procedimientos y usos
inventivos proporcionan por tanto beneficios antienvejecimiento,
que pueden dar como resultado la promoción de una piel suave y
blanda, con una mejora en la elasticidad y una reducción o un
retraso en la aparición de arrugas y piel envejecida, con una
mejora en el color de la piel. También puede conseguirse una mejora
general en el aspecto, la textura y el estado, en particular con
respecto a la luminosidad, la claridad y el aspecto juvenil general
de la piel. La invención puede tener una utilidad particular para
proporcionar beneficios en el cuidado de la piel.
El término "tratar", según se usa en este
documento, incluye en su ámbito reducir, retrasar y/o prevenir los
estados mencionados anteriormente, normales pero cosméticamente
indeseables, causados por el proceso normal de envejecimiento. Los
signos visibles del envejecimiento, tales como las arrugas, las
líneas y/o la flaccidez pueden retrasarse o reducirse. Generalmente
puede incrementarse la calidad de la piel y mejorar su aspecto y
textura evitando o reduciendo las arrugas y aumentando la
flexibilidad, la firmeza, la suavidad, la blandura y la elasticidad
de la piel.
Las composiciones, procedimientos y usos según
la invención pueden ser útiles para tratar una piel que ya está en
un estado arrugado, envejecido y/o fotodañado, o para tratar una
piel joven para evitar o reducir los anteriormente mencionados
indeseables cambios debidos al proceso normal de
envejecimiento/fotoenvejecimiento.
La composición usada según la invención también
comprende un vehículo dermatológicamente/cosméticamente aceptable
para que actúe como diluyente, dispersante o portador de los
principios activos. El vehículo puede comprender materiales
empleados habitualmente en los productos de cuidado de la piel,
tales como agua, emolientes líquidos o sólidos, aceites de
silicona, emulsionantes, disolventes, humectantes, espesantes,
polvos, propelentes y similares.
El vehículo será típicamente el 5% al 99,9%,
preferiblemente el 25% al 80% en peso de la composición, y en
ausencia de otros coadyuvantes cosméticos, puede formar el resto de
la composición.
Aparte del extracto del principio activo de
Chromolaena odorata, también pueden incluirse otros
principios activos específicos beneficiosos para la piel tales como
filtros solares, agentes iluminadores de la piel y agentes de
bronceado. El vehículo también puede incluir adicionalmente
coadyuvantes tales como antioxidantes, perfumes, opacificantes,
conservantes, colorantes y tampones.
Para preparar la composición tópica usada en el
procedimiento de la presente invención puede emplearse la forma
habitual de preparar productos para el cuidado de la piel. Los
componentes activos se incorporan generalmente en un portador
dermatológicamente/cosméticamente aceptable de una forma
convencional. Los componentes activos pueden, en primer lugar,
disolverse o dispersarse adecuadamente en una porción del agua u
otro disolvente o líquido que se vaya a incorporar en la
composición. Las composiciones preferidas son emulsiones de aceite
en agua o de agua en aceite o de agua en aceite en agua, aunque en
ciertas circunstancias se prefieren las composiciones de agua en
aceite.
La composición puede estar en forma de los
productos de cuidado de la piel convencionales, tales como una
crema, gel o loción, cápsulas o similares. La composición también
puede estar en forma del denominado producto "de lavado", por
ejemplo, un gel de baño o de ducha, que posiblemente contiene un
sistema de administración de los principios activos para promover
su adherencia a la piel durante el aclarado. Muy preferiblemente el
producto es un producto "de permanencia", esto es, un producto
que se aplica sobre la piel sin una etapa deliberada de aclarado
poco después de su aplicación sobre la piel.
La composición puede envasarse en cualquier
forma adecuada, tal como en un tarro, una botella, un tubo, un
envase con aplicador de bola similares, de la forma convencional.
Una forma contemplada adicionalmente es una formulación adecuada
para su administración como un pulverizado, ya sea a partir de un
aerosol impulsado por propelente o a partir de una bomba de
pulverización.
La composición usada según la invención también
puede formularse en una forma adecuada para su ingestión por vía
oral, tal como una cápsula, un comprimido o similar.
El procedimiento de la presente invención puede
llevarse a cabo una o más veces al día sobre la piel que requiere
tratamiento. La mejora en el aspecto de la piel será visible
habitualmente después de 3 a 6 meses o posiblemente antes,
dependiendo del estado de la piel, de la concentración de los
componentes activos usados en el procedimiento inventivo, de la
cantidad de composición usada y de la frecuencia con la que se
aplica. En general, se aplica sobre la piel una pequeña cantidad de
la composición, por ejemplo, de 0,1 a 5 ml, desde un recipiente o
aplicador adecuado, y se extiende y/o se frota sobre la piel usando
las manos o los dedos o un dispositivo adecuado. Opcionalmente
puede seguir una etapa de aclarado, dependiendo de si la composición
está formulada como un producto "de permanencia" o "de
aclarado".
Con objeto de que la presente invención se
comprenda más fácilmente se proporcionan los siguientes ejemplos
únicamente a modo de ilustración.
De la solicitud europea pendiente de tramitación
junto con la presente nº 99908956.8 se sabe que los tratamientos
tópicos con ácido retinoico pueden usarse para causar un aumento del
procolágeno I y la decorina in vivo. Con este fin se hace
referencia a los fragmentos con el título "Identification of
procollagen I and decorin upregulation in skin in vivo
following topical retinoic acid treatment for comparative
purposes" de esa solicitud.
Se sembraron fibroblastos primarios de prepucio
humano en el paso 2 (P2) en placas de 12 pocillos a 10.000
células/cm^{2} y se mantuvieron durante 24 horas en una atmósfera
con un 5% de dióxido de carbono y un 4% de oxígeno en medio de
Eagle modificado por Dulbecco (Dulbeccos Modified Eagles
Medium, DMEM) complementado con un 10% de suero bovino fetal.
Después de este tiempo, las células se lavaron con DMEM sin suero, y
después se incubaron en DMEM nuevo sin suero durante 60 horas
adicionales. Las monocapas de fibroblastos se lavaron entonces de
nuevo con DMEM sin suero. Los reactivos de la prueba y los controles
de vehículo se añadieron a las células por triplicado en un volumen
final de 0,4 ml/pocillo con DMEM nuevo sin suero y se incubaron
durante 24 horas adicionales. Este medio condicionado de
fibroblastos, bien se analizó inmediatamente, o bien se
ultracongeló en nitrógeno líquido y se almacenó a -70ºC para futuros
análisis. Entonces se contaron las células, y posteriormente los
datos del análisis de la transferencia de puntos
(dot-blot) se estandarizaron al número de
células.
Las muestras de medio condicionado de
fibroblastos dérmicos tratadas con vehículo (como control) o con los
reactivos de prueba se complementaron con ditiotreitol 20 mM
(dilución 1:10 de una disolución madre 200 mM) y dodecilsufato
sódico al 0,1% (dilución 1:100 de una disolución madre al 10%), se
mezclaron bien y después se incubaron a 75ºC durante 2 minutos. Se
produjo un patrón para el ensayo mediante la dilución sucesiva de
medio condicionado puro de fibroblastos a partir de fibroblastos
sembrados a 10.000 células/cm^{2} en un matraz de 175 cm^{2} y
se mantuvo en medio DMEM sin suero, según se describió
anteriormente.
Posteriormente las muestras del ensayo se
aplicaron por triplicado a una lámina prehumedecida de membrana de
transferencia Immobilon-P usando el aparato
Bio-Dot de 96 pocillos de Bio-Rad
según se describe en las recomendaciones del fabricante. Se
aplicaron aproximadamente 200 \mul de medio por pocillo. El medio
se dejó filtrar a través de la membrana por gravedad (30 minutos),
tras lo cual la membrana se lavó dos veces con PBS (200 \mul).
Estos lavados con PBS se dejaron filtrar a través de la membrana por
gravedad (2 x 15 minutos). El aparato Bio-Dot se
conectó entonces a un tubo de vacío, y se llevaron a cabo un tercer
y último lavado con PBS bajo succión.
El aparato se desmontó, se retiró la membrana y
se cortó rápidamente según se requirió antes de ser colocada en
tampón de bloqueo hasta el día siguiente a 4ºC. Las membranas
preparadas para los análisis de decorina se bloquearon con BSA al
3% (p/v)/Tween 20 al 0,1% (v/v) en PBS, mientras que las de los
análisis del procolágeno-I se bloquearon con leche
desnatada seca en polvo al 5% (p/v)/Tween 20 al 0,5% en PBS.
Al día siguiente las membranas se sondaron con
una dilución 1:10.000 de anticuerpos primarios contra el
procolágeno-I humano (MAB1912; monoclonal de rata;
Chemicon Int. Inc., Temecula, CA) o contra la decorina humana
(policlonal de conejo; Biogenesis) durante 2 horas a temperatura
ambiente. Las membranas se lavaron posteriormente con TBS/Tween 20
al 0,05% (3 x 5 minutos) y después se incubaron con una dilución
1:1000 de fragmentos F(ab')_{2} anti-rata
o anti-conejoconjugados con ^{125}I (Amersham),
según se requirió durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de
esto, las tiras de Immobilon se lavaron de nuevo con TBS/Tween 20 (3
x 5 minutos) antes de dejarlas secar al aire a temperatura
ambiente.
Las membranas secas se envolvieron en celofán y
se expusieron a una pantalla de almacenamiento de fósforo de
Molecular Dynamics durante 16-18 horas. Al final de
este tiempo, la pantalla expuesta se barrió con un aparato de
radiactividad en placa (Molecular Dynamics Phosphorimager SF) usando
el programa informático ImageQuant^{TM}. La intensidad de los
puntos se evaluó mediante un análisis de imagen asistido por
ordenador usando las herramientas de cuantificación de
ImageQuant^{TM}, estandarizadas al número de células, y se
determinaron los efectos de varios reactivos de prueba sobre la
síntesis de decorina y de procolágeno-I con respecto
a un valor de control tratado con vehículo de 100 unidades
arbitrarias.
La Tabla 1, a continuación, indica los efectos
del extracto de Chromdaena odorata sobre la síntesis de
procolágeno-I y decorina en fibroblastos dérmicos
humanos, y las cantidades en las que se aplicó. Con objeto de
normalizar los resultados, se determinaron los efectos de una
sustancia de prueba con respecto a un valor de control tratado con
vehículo de 100 unidades arbitrarias. Para la comparación se realizó
un estudio con ácido retinoico para evaluar su efecto sobre la
síntesis de decorina en fibroblastos dérmicos humanos. Las
concentraciones de reactivos usadas en los estudios no influyeron
en la viabilidad celular.
El extracto de Chromolaena odorata se
preparó concentrando el extracto acuoso obtenido tras hervir hojas
de hierba de Siam en agua durante 30 minutos.
El extracto se probó a unos niveles de 0,1 a 1
\mug/ml en un modelo de fibroblastos in vitro que contiene
un 4% de oxígeno, según se describió anteriormente.
El modelo se analizó para
procolágeno-I y decorina. Sus resultados se muestran
a continuación.
Los resultados indican que la síntesis de
decorina en el modelo está sustancialmente aumentada incluso con
niveles relativamente bajos (por ejemplo, 0,01 \mug/ml) de
extracto. También se observan algunos pequeños efectos, pero
positivos, sobre la síntesis de procolágeno I, en comparación con el
control. La muestra de 1,0 \mug/ml también se probó
comparativamente con el ácido retinoico (1 \mum), mostrando un
aumento de la decorina, 138 ± 14,0 (p = 0,035, n = 4), determinado
con respecto a un valor de control tratado con vehículo de 100
unidades arbitrarias.
Esto indica adicionalmente la magnitud del
aumento en la síntesis de decorina en fibroblastos dérmicos humanos
efectuada por el extracto de Chromolaena odorata, en
comparación con el efecto del ácido retinoico.
La formulación, a continuación, describe una
crema de aceite en agua adecuada para los procedimientos y usos
según la presente invención. Los porcentajes indicados son en peso
de la composición.
La formulación, a continuación, describe una
crema en emulsión según la presente invención.
Las dos composiciones tópicas anteriores del
ejemplo 2 y 3 proporcionan un tratamiento cosmético eficaz para
mejorar el aspecto de la piel arrugada, envejecida y/o fotodañada,
cuando se aplica sobre la piel que se ha deteriorado a través de la
edad o el fotoenvejecimiento, o cuando se aplica a una piel joven
para ayudar a prevenir o retrasar dichos cambios deteriorantes. Las
composiciones pueden procesarse de forma convencional.
Claims (3)
1. Un procedimiento cosmético para tratar y
prevenir estados normales de la piel debidos al cronoenvejecimiento
o al fotoenvejecimiento que comprende aplicar sobre la piel una
composición tópica que comprende una cantidad eficaz de un extracto
acuoso de Chromolaena odorata.
2. Un procedimiento cosmético según la
reivindicación 1 en el que las condiciones normales de la piel
comprenden arrugas, líneas, flaccidez, hiperpigmentación y léntigos
seniles.
3. Un procedimiento cosmético según la
reivindicación 1 o la reivindicación 2 en el que el extracto está
presente a un nivel del 0,0001% al 1% en peso de la composición.
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