ES2275816T3 - Composicion que comprende vitamina c preparada durante la aplicacion. - Google Patents

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Abstract

Composición de aplicación tópica para la preparación extemporánea de ácido ascórbico, obteniéndose dicho ácido ascórbico por puesta en contacto de al menos un precursor del ácido ascórbico, y al menos una enzima capaz de convertir dicho precursor, que comprende, en un soporte aceptable, al menos una enzima o un extracto que comprende al menos una enzima, siendo escogida la enzima entre la L-galactono-1, 4-lactona deshidrogenasa, la L-galactosa deshidrogenada, la L-sorbosona deshidrogenada, la L-gulono-1, 4-lactona oxidasa o sus mezclas y un precursor o sustrato escogido entre los precursores químicos o biológicos del ácido ascórbico, con excepción de sus ésteres, siendo acondicionados la enzima y el precursor de manera que no estén en contacto la una con el otro.

Description

Composición que comprende vitamina C preparada durante la aplicación.
La presente invención se refiere a unas composiciones que comprenden vitamina C obtenida por vía enzimática, a la utilización de ciertas enzimas en la preparación de composiciones, y en particular de composiciones cosméticas así como a un procedimiento cosmético que utiliza la aplicación de dichas composiciones sobre la piel.
La vitamina C o ácido ascórbico es un activo, en particular un activo cosmético, muy interesante. Es conocido por estimular el crecimiento del tejido conjuntivo, en particular el del colágeno, y por reforzar las defensas del tejido cutáneo contra las agresiones exteriores. También es conocido por eliminar las manchas y las pigmentaciones de la piel y favorecer la cicatrización de la piel lesionada.
Sin embargo un problema crucial de esta molécula es su inestabilidad que la hace difícil de formular en las composiciones usuales. Además, después de la aplicación de las composiciones, la vitamina C se degrada rápidamente.
Debido a este hecho, existe la necesidad de unas composiciones, en particular unas composiciones cosméticas o dermatológicas, que comprendan ácido ascórbico y que pongan remedio al problema de estabilidad del activo.
La invención se refiere a una composición de aplicación tópica de preparación extemporánea que comprende ácido ascórbico y un soporte aceptable, obteniéndose el ácido ascórbico por puesta en contacto de al menos un precursor de ácido ascórbico, exceptuando los ésteres del ácido ascórbico, y al menos una enzima capaz de convertir dicho precursor.
Según la invención, la vitamina C es generada directamente durante o justo antes de su aplicación sobre la piel, o incluso después de la aplicación, es decir antes de su absorción.
Este proceso resuelve los problemas de formulación inherentes a la vitamina C que se han encontrado hasta la fecha.
Además, según ciertos modos de realización, como la transformación de los precursores por la enzima puede ser progresiva, las composiciones y el procedimiento de la invención permiten obtener una liberación constante y regular en la superficie de la piel; por lo que se produce una mejor biodisponibilidad in vivo y una mayor eficacia de las composiciones.
Además, la presente invención se refiere a la utilización de una o varias enzimas seleccionadas de entre la L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa, la L-galactosa deshidrogenasa, la L-sorbosona deshidrogenasa, la L-gulono-1,4-lactona oxidasa o sus mezclas o de un extracto que las comprenda para la preparación de 
\hbox{ácido ascórbico de  uso tópico.}
Además, la invención se refiere a un tratamiento cosmético por la aplicación sobre la piel de una composición que se ha descrito anteriormente y que se describirá a continuación. Se refiere asimismo a un procedimiento de tratamiento cosmético de la piel que consiste en aplicar sobre la piel de forma simultánea o escalonada en el tiempo al menos una enzima capaz de convertir en ácido ascórbico un precursor del ácido ascórbico, y al menos un precursor del ácido ascórbico, a excepción de sus ésteres.
Según la invención, por precursor se entiende cualquier precursor químico o biológico del ácido ascórbico. Obviamente, cualquier azúcar o sustrato susceptible de ser transformado en vitamina C por al menos una etapa enzimática, por ejemplo una etapa de oxidación, puede ser considerado como precursor, a excepción de los ésteres del ácido ascórbico.
En particular precursores de este tipo son algunos azúcares, y entre los azúcares en particular la L-galactono-1,4-lactona, la L-gulono-1,4-lactona, la D-glucorono-1,4-lactona, el ácido D-glucurónico, la D-mannosa, el ácido D-galacturónico, la D-glucosa, la D-galactosa, la L-galactosa y sus mezclas. Preferentemente, se utiliza la L-galactono-1,4-lactona.
Según la invención, por enzima se entiende cualquier enzima o mezcla de enzimas capaz(capaces) de convertir en vitamina C al menos un precursor de vitamina C, y más particularmente, los precursores citados anteriormente, pudiendo esta o estas enzimas presentarse, más ampliamente, en una o varias de las formas descritas a continuación.
Entre estas enzimas, se pueden citar en particular la L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa, la L-galactosa deshidrogenada, la L-sorbosona deshidrogenasa y la L-gulono-1,4-lactona oxidasa. Se pueden también utilizar sus mezclas. Preferentemente, se utiliza la L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa.
En las composiciones de la invención, las enzimas utilizadas pueden presentarse en forma de extracto bruto, de solución de enzima(s) purificada(s), de enzima(s) inmovilizada(s) sobre una matriz, en particular una matriz sol-gel, en forma sólida o líquida, eventualmente liofilizada(s), incluida(s) en un dispositivo de liberación controlada,
encapsulada(s) o incluida(s) en unos liposomas o cualquier otra forma en la que la enzima o las enzimas, por un lado, y el sustrato, por otro, están separados antes de ser puestos en contacto, justo antes o en el momento de su aplicación.
Así, la enzima puede provenir de unos extractos vegetales, animales, de insectos o incluso de microorganismos, en particular de células, diferenciadas o indiferenciadas, obtenidas in vivo o in vitro, antes o después de ser modificadas genéticamente.
La mayoría de las plantas son consideradas como una fuente de enzima(s) apropiada(s). A título de ejemplo se pueden citar la Arabidopsis thaliana, Rosa sp. y Pea seedlin. Como ejemplo de microorganismo capaz de expresar unas enzimas adecuadas, se puede citar el Aerobacter sp.
El extracto que comprende la enzima puede ser un extracto preparado a partir de cualquier material, en particular de unas células, obteniéndose dicho material por cultivo in vitro. El cultivo de las células in vitro permite obtener un material estandarizado y disponible a lo largo del año contrariamente al obtenido por cultivo in vivo.
Por cultivo in vitro, se entiende el conjunto de las técnicas conocidas por el experto en la materia que permite de forma artificial obtener un organismo (órgano).
En el campo del mundo vegetal, el cultivo in vitro aporta entre otras ventajas la de que los vegetales ya no están sometidos a las estaciones sino que son accesibles todo el año, respondiendo así a los criterios cuantitativos de la industria, y en unas condiciones perfectamente reproducibles puesto que el cultivo tiene lugar en unas condiciones perfectamente controlables de temperatura, de pH, del medio de cultivo y responde al criterio industrial de calidad.
Así, por ejemplo, según la invención, el extracto puede ser un extracto de órgano como las raíces, tallos, hojas, flores, pétalos, frutos, incluso células de órgano, de al menos un vegetal obtenido por cultivo in vitro o incluso un extracto de células desdiferenciadas.
Preferentemente, según la invención, se utilizan preferentemente células vegetales desdiferenciadas.
Por células vegetales desdiferenciadas, se entiende cualquier célula vegetal que no presenta ninguno de los caracteres de una especialización particular y capaz de vivir por sí misma y no en dependencia con otras células. Eventualmente estas células vegetales desdiferenciadas son aptas, bajo el efecto de una inducción, para cualquier diferenciación de acuerdo con su genoma.
Según el método de cultivo seleccionado, y en particular según el medio de cultivo seleccionado, es posible obtener a partir de un mismo explante unas células vegetales desdiferenciadas que presentan caracteres diferentes (Plant propagation by tissue culture, George E.F. y Sherrington P.D., 1984, Exegetics Limited).
Por otra parte, como fuente de enzimas clonadas, se puede señalar la fuente descrita en la solicitud de patente WO 98/02 830.
En las composiciones según la invención, la preparación del ácido ascórbico es realizada poniendo en contacto al menos una enzima o un extracto que comprende al menos una enzima con al menos un sustrato. Según una primera variante, se introduce la enzima o las enzimas, por un lado, y el o los precursor(es), por otro lado, en una composición única, que es preferentemente preparada justo antes de su empleo.
Según una segunda variante, la enzima o las enzimas, por un lado y el o los precursor(es), por otro lado, son acondicionados de tal manera que no están en contacto, una con el otro, en particular antes de su empleo.
Por ejemplo, pueden ser incorporados en dos composiciones diferentes destinadas a mezclarse en el momento de su aplicación, o aplicadas de forma sucesiva o escalonada en el tiempo.
Así, se pueden disponer estas composiciones en dos compartimientos separados; entran de todas formas en comunicación por medio de un conducto común; las composiciones se mezclan en el mismo y/o pueden salir mezclándose, antes o durante su aplicación sobre la piel.
Se describen por ejemplo dispositivos de acondicionamiento de este tipo en dos compartimientos en los documentos FR-A-2045559, FR-A-2105332, FR-A-2258319, FR-A-2293375, FR-A-2586913 o FR-A-2643615.
Por otra parte, también se puede realizar al menos una de las composiciones en forma encapsulada y/o en forma de microcápsulas o de microgranulados que pueden ser incorporados(as) en un vehículo aceptable, por ejemplo en la otra composición.
Así, la enzima y/o el precursor pueden presentarse en forma encapsulada o incluida en unos liposomas, en forma de microcápsulas o de microgranulados.
Las microcápsulas o los microgranulados o los liposomas son aplastados(as) en el momento de la aplicación, o en el momento de la salida de la composición de su embalaje, por cizallado o por rozamiento sobre la piel, por ejemplo, lo que permite la mezcla de la o de las enzima(s) y del o de los precursor(es) en el momento de la aplicación, y la producción de la vitamina C directamente sobre la piel.
Por soporte o medio apropiado para una aplicación tópica, se entiende cualquier medio cosméticamente y/o dermatológicamente aceptable, es decir compatible con la piel y/o los cabellos. Estos medios comprenden usualmente agua, o una mezcla de agua y de cuerpos grasos, o una mezcla de cuerpos grasos.
Como cuerpos grasos que se pueden utilizar en la invención, se pueden citar los aceites minerales (vaselina, aceite mineral), los aceites vegetales y sus derivados hidrogenados, los aceites animales, los aceites de síntesis, los aceites siliconados (dimeticona, ciclometicona) y los aceites fluorados. Como otros cuerpos grasos, se pueden también citar los alcoholes grasos, los ácidos grasos y las ceras.
En particular, las composiciones pueden presentarse en forma de soluciones acuosas, alcohólicas o hidroalcohólicas, de geles hidrófilos o lipófilos, de microemulsiones, de emulsiones agua en aceite o aceite en agua o agua en aceite en agua o aceite en agua en aceite que tienen el aspecto de una crema o de un gel, eventualmente espumantes, en forma de aerosol, o incluso en forma de dispersiones vesiculares que contienen unos lípidos iónicos y/o no iónicos. Estas formas galénicas son preparadas según los métodos usuales de los campos considerados.
De forma conocida, el medio apropiado para una aplicación tópica según la invención puede contener también unos adyuvantes habituales en el campo cosmético o dermatológico, tales como los gelificantes hidrófilos o lipófilos, los tensioactivos, los activos hidrófilos o lipófilos, los conservantes, los antioxidantes, los solventes, los perfumes, las cargas, los filtros y las materias colorantes.
Las cantidades de los diferentes constituyentes de las composiciones según la invención son las utilizadas de forma clásica en los campos considerados.
En las composiciones de la invención, la enzima está presente en una cantidad que varía entre 0,05 y 30% en peso, preferentemente entre 0,1 y 10% en peso, con respecto al peso total de la composición. El precursor está presente en una cantidad que varía entre 0,01 y 50% en peso, preferentemente entre 0,1 y 10% en peso, con respecto al peso total de la composición.
La composición según la invención puede constituir en particular unos productos de protección, de tratamiento o de cuidado para el rostro, para el cuello, para las manos o para el cuerpo, unos productos de bronceado artificial o unos productos para los cabellos, y en particular para el cuidado del cuero cabelludo, por ejemplo en forma de lociones tratantes, de cremas o de geles.
Los ejemplos siguientes se proporcionan a título ilustrativo, con la finalidad de que se entienda mejor la invención, sin por ello limitar su alcance. Las cantidades indicadas son porcentajes en peso.
Ejemplo 1
Crema de cuidado Fase oleosa
Triceteareth-4 fosfato/sodio C_{14}-C_{17} alquil seco sulfonato (Hostacerin CG
vendido por la sociedad Hoescht Celanase) (tensioactivo) 6%
Vaselina 2%
Aceite mineral 4%
Dimeticona 3%
Ciclometicona 3%
Dimeticona copoliol (tensioactivo) 1%
Triclosan (conservante) 0,1%
L-galactono-1,4-lactona 1%
Fase acuosa
Propilenglicol (hidratante) 2%
PEG-20 (organoléptico) 1%
L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa 1%
Fenoxietanol (conservante) 0,4%
Agua qsp \hskip0,5cm 100% 
\vskip1.000000\baselineskip
La L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa es introducida en la fase acuosa en forma encapsulada en unas microcápsulas que contienen también atelocolágeno y unos glicosaminoglicanos.
Estas microcápsulas son sumergidas en el resto de los constituyentes después de preparar la emulsión.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 2
Crema Fase oleosa
Triceteareth-4 fosfato/sodio C_{14}-C_{17} alquil sec. sulfonato (Hostacerin CG
vendido por la sociedad Hoescht Celanase) (tensioactivo) 6%
Vaselina 2%
Aceite mineral 4%
Dimeticona 3%
Ciclometicona 3%
Dimeticona copoliol (tensioactivo) 1%
Triclosan (conservante) 0,1%
L-gulono-1,4-lactona 2%
Fase acuosa
Propilenglicol (hidratante) 2%
PEG-20 (organoléptico) 1%
L-gulono-1,4-lactona deshidrogenasa 2%
Fenoxietanol (conservante) 0,4%
Agua qsp \hskip0,5cm 100% 
\vskip1.000000\baselineskip
La L-gulono-1,4-lactona es introducida en la composición en forma de microesferas que contienen también atelocolágeno y unos glicosaminoglicanos.
Estas microesferas son sumergidas en el resto de los constituyentes después de preparar la emulsión.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 3
Emulsión tratante A. Emulsión que contiene el precursor Fase oleosa
Steareth-2 (tensioactivo) 3%
Steareth-21 (tensioactivo) 2%
PPG-15 estearil éter (tensioactivo) 29,5%
L-galactono-1,4-lactona 0,5%
Fase acuosa
Fenoxietanol (conservante) 0,5%
Agua qsp \hskip0,5cm 100% 
\vskip1.000000\baselineskip
B. Emulsión que contiene la enzima Fase oleosa
Steareth-2 (tensioactivo) 3%
Steareth-21 (tensioactivo) 2%
PPG-15 estearil éter (tensioactivo) 29,5%
Fase acuosa
Fenoxietanol (conservante) 0,5%
L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa 1%
Agua qsp \hskip0,5cm 100% 
\vskip1.000000\baselineskip
Las emulsiones A y B están dispuestas en dos compartimientos separados y son mezcladas en el momento de la aplicación sobre la piel.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 4
Crema solar autobronceadora A. Emulsión que contiene el éster de dihidroxiacetona Fase oleosa
Steareth-2 (tensioactivo) 3%
Steareth-21 (tensioactivo) 2%
PPG-15 estearil éter (tensioactivo) 29,5%
L-galactosa 10%
Fase acuosa
Fenoxietanol (conservante) 0,5%
Agua qsp \hskip0,5cm 100% 
\vskip1.000000\baselineskip
B. Emulsión que contiene la lipasa Fase oleosa
Steareth-2 (tensioactivo) 3%
Steareth-21 (tensioactivo) 2%
PPG-15 estearil éter (tensioactivo) 29,5%
Fase acuosa
Fenoxietanol (conservante) 0,5%
L-galactosa deshidrogenasa 10%
Agua qsp \hskip0,5cm 100% 
\vskip1.000000\baselineskip
Las emulsiones están dispuestas en dos compartimientos diferentes y son puestas en contacto en el momento de su aplicación.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 5
Crema de cuidado Fase oleosa
Triceteareth-4 fosfato/sodio C_{14}-C_{17} alquil sec. sulfonato (Hostacerin CG
vendido por la sociedad Hoescht Celanase) (tensioactivo) 5%
Alcohol estearílico 1%
Vaselina 2%
Aceite mineral 4%
Fenil trimeticona 4%
(Continuación)
Fase oleosa
Ciclometicona 4%
Dimeticona/Dimeticonol (tensioactivo) 2%
Triclosan (conservante) 0,1%
L-galactono-1,4-lactona 0,6%
Fase acuosa
Propilenglicol(hidratante) 2%
PEG-20 (organoléptico) 1%
L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa 0,5%
Fenoxietanol (conservante) 0,2%
Clorofenesin 0,2%
Poliacrilamida/C13-C14 isoparafina/laureth-7 (Sepigel 305 vendido
por la sociedad Seppic) (gelificante) 0,6%
Agua qsp \hskip0,5cm 100%
La L-galacatono-1,4-lactona es introducida en la composición en forma de microesferas que contienen también atelocolágeno y sodio condroitina sulfato.
Estas microesferas son sumergidas en el resto de los constituyentes después de la preparación de la emulsión.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 6
Crema de cuidado para la despigmentación de la piel A. Emulsión que contiene el precursor Fase oleosa
Steareth-2 (tensioactivo) 3%
Steareth-21 (tensioactivo) 2%
PPG-15 estearil éter (tensioactivo) 9%
Alcohol cetílico 2%
Vaselina 5%
Triclosan (conservante) 0,2%
L-galactono-1,4-lactona 1%
Fase acuosa
Propilenglicol (hidratante) 4%
PEG-20 (organoléptico) 5%
Fenoxietanol (conservante) 0,5%
Agua qsp \hskip0,5cm 100% 
\vskip1.000000\baselineskip
B. Emulsión que contiene la enzima Fase oleosa
Steareth-2 (tensioactivo) 3%
Steareth-21 (tensioactivo) 2%
PPG-15 estearil éter (tensioactivo) 9%
Alcohol cetílico 2%
Vaselina 5%
Triclosan (conservante) 0,2%
Fase acuosa
Propilenglicol (hidratante) 4%
PEG-20 (organoléptico) 5%
Fenoxietanol (conservante) 0,5%
L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa 1%
Agua qsp \hskip0,5cm 100%
Las emulsiones A y B están dispuestas en dos compartimientos separados y son puestas en contacto en el momento de su aplicación sobre la piel.

Claims (25)

1. Composición de aplicación tópica para la preparación extemporánea de ácido ascórbico, obteniéndose dicho ácido ascórbico por puesta en contacto de al menos un precursor de ácido ascórbico, y al menos una enzima capaz de convertir dicho precursor, que comprende, en un soporte aceptable, al menos una enzima o un extracto que comprende al menos una enzima, siendo seleccionada la enzima de entre la L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa, la L-galactosa deshidrogenada, la L-sorbosona deshidrogenada, la L-gulono-1,4-lactona oxidasa o sus mezclas y un precursor o sustrato seleccionado de entre los precursores químicos o biológicos del ácido ascórbico, con excepción de sus ésteres, siendo acondicionados la enzima y el precursor de manera que no estén en contacto una con el otro.
2. Composición según la reivindicación 1, caracterizada porque el sustrato es seleccionado de entre la L-galactono-1,4-lactona, la L-gulono-1,4-lactona, la D-glucorono-1,4-lactona, el ácido D-glucurónico, la D-mannosa, el ácido D-galacturónico, la D-glucosa, la D-galactosa, la L-galactosa o sus mezclas.
3. Composición según la reivindicación 1 ó 2, caracterizada porque el sustrato es la L-galactono-1,4-lactona.
4. Composición según una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque la enzima es la L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa.
5. Composición según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque la enzima proviene de extractos de vegetales, de animales, de insectos o incluso de microorganismos, en particular de células, diferenciadas o indiferenciadas, obtenidas in vivo o in vitro.
6. Composición según una de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizada porque la enzima y el precursor están acondicionados en unos compartimientos separados.
7. Composición según una de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizada porque la enzima y/o el precursor se presentan en forma encapsulada.
8. Composición según una de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizada porque la enzima y/o el precursor se presentan en forma de microcápsulas o de microgranulados.
9. Composición según una de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizada porque la enzima se presenta en forma de extracto total, de solución de enzima purificada, de enzima inmovilizada sobre matriz sol-gel, en forma sólida o líquida, en forma líquida o sólida liofilizada o incluida en un dispositivo de liberación controlada.
10. Composición según una de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizada porque la enzima está presente en una cantidad que varía entre 0,05 y 30% en peso con respecto al peso total de la composición.
11. Composición según una de las reivindicaciones 1 a 10, caracterizada porque la enzima está presente en una cantidad que varía entre 0,1 y 10% en peso con respecto al peso total de la composición.
12. Composición según una de las reivindicaciones 1 a 11, caracterizada porque el precursor está presente en una cantidad que varía entre 0,01 y 50% en peso con respecto al peso total de la composición.
13. Composición según una de las reivindicaciones 1 a 12, caracterizada porque el precursor está presente en una cantidad que varía entre 0,1 a 10% en peso con respecto al peso total de la composición.
14. Utilización de una o varias enzimas seleccionadas de entre la L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa, la L-galactosa deshidrogenasa, la L-sorbosona deshidrogenasa, la L-gulono-1,4-lactona oxidasa o sus mezclas o de un extracto que las comprende para la preparación de ácido ascórbico de uso tópico, a partir de un precursor químico o biológico del ácido ascórbico con excepción de sus ésteres, en el seno de una composición de aplicación tópica, estando la enzima y el precursor acondicionados de manera que no estén en contacto una con el otro.
15. Utilización según la reivindicación 14, caracterizada porque la enzima es la L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa.
16. Utilización según la reivindicación 14 ó 15, caracterizada porque la preparación es extemporánea.
17. Utilización según una de las reivindicaciones 14 a 16, caracterizada porque la preparación es realizada por puesta en contacto de la enzima o del extracto vegetal con un substrato.
18. Utilización según una de las reivindicaciones 14 a 17, caracterizada porque la enzima proviene de extracto de vegetales, de animales, de insectos o incluso de microorganismos, particularmente de células, diferenciadas o indiferenciadas, obtenidas in vivo o in vitro.
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19. Utilización según una de las reivindicaciones 14 a 18, caracterizada porque es sustrato es seleccionado de entre la L-galactono-1,4-lactona, la L-gulono-1,4-lactona, la D-glucorono-1,4-lactona, el ácido D-glucurónico, la D-mannosa, el ácido D-galacturónico, la D-glucosa, la D-galactosa, la L-galactosa o sus mezclas.
20. Utilización según una de las reivindicaciones 14 a 19, caracterizada porque el sustrato es la L-galactono-1,4-lactona.
21. Procedimiento de tratamiento cosmético por aplicación sobre la piel de una composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13.
22. Procedimiento de tratamiento cosmético de la piel que consiste en aplicar sobre la piel de forma simultánea o desplazada en el tiempo al menos una enzima capaz de convertir en ácido ascórbico un precursor del ácido ascórbico, siendo escogida la enzima entre la L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa, la L-galactosa deshidrogenasa, la L-sorbosona deshidrogenasa, la L-gulono-1,4-lactona oxidasa o sus mezclas y al menos un precursor del ácido ascórbico, con excepción de sus ésteres, estando acondicionados la enzima y el precursor de manera que no estén en contacto una con el otro.
23. Procedimiento según la reivindicación 22, en que la enzima es la L-galactono-1,4-lactona deshidrogenasa.
24. Procedimiento según la reivindicación 22 ó 23, caracterizado porque el precursor es seleccionado de entre la L-galactono-1,4-lactona, la L-gulono-1,4-lactona, la D-glucorono-1,4-lactona, el ácido D-glucurónico, la D-mannosa, el ácido D-galacturónico, la D-glucosa, la D-galactosa, la L-galactosa o sus mezclas.
25. Procedimiento según una de las reivindicaciones 22 a 24, en que el precursor es la L-galactono-1,4-lactona.
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