ES2269042T3 - Celulas t derivadas de un felino e independientes del il-2. - Google Patents
Celulas t derivadas de un felino e independientes del il-2. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2269042T3 ES2269042T3 ES00111079T ES00111079T ES2269042T3 ES 2269042 T3 ES2269042 T3 ES 2269042T3 ES 00111079 T ES00111079 T ES 00111079T ES 00111079 T ES00111079 T ES 00111079T ES 2269042 T3 ES2269042 T3 ES 2269042T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- vif
- baselineskip
- infected
- fet
- cell
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 title claims abstract description 51
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 14
- 241000282324 Felis Species 0.000 claims abstract description 20
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 159
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 29
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 17
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 claims description 6
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 claims description 6
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 claims 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 claims 2
- 101710201961 Virion infectivity factor Proteins 0.000 claims 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 48
- 241000713800 Feline immunodeficiency virus Species 0.000 description 33
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 16
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 16
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 14
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 13
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 12
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 12
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 9
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 9
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 8
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 5
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 241000726047 Infectious flacherie virus Species 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 4
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- RZCIEJXAILMSQK-JXOAFFINSA-N TTP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 RZCIEJXAILMSQK-JXOAFFINSA-N 0.000 description 3
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- -1 threonyl muramyl dipeptide Chemical compound 0.000 description 3
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 2
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 2
- 241001227713 Chiron Species 0.000 description 2
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 2
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 2
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- DPXDVGDLWJYZBH-GUBZILKMSA-N Arg-Asn-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O DPXDVGDLWJYZBH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 208000004729 Feline Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 241000714174 Feline sarcoma virus Species 0.000 description 1
- 208000012671 Gastrointestinal haemorrhages Diseases 0.000 description 1
- TWHDOEYLXXQYOZ-FXQIFTODSA-N Gln-Asn-Gln Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N TWHDOEYLXXQYOZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- PNENQZWRFMUZOM-DCAQKATOSA-N Gln-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O PNENQZWRFMUZOM-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- JDAYMLXPUJRSDJ-XIRDDKMYSA-N Glu-Trp-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 JDAYMLXPUJRSDJ-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- YDWZGVCXMVLDQH-WHFBIAKZSA-N Gly-Cys-Asn Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O YDWZGVCXMVLDQH-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- IMRNSEPSPFQNHF-STQMWFEESA-N Gly-Ser-Trp Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C12)C(=O)O IMRNSEPSPFQNHF-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N Ile-Ser-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DPUOLKQSMYLRDR-UBHSHLNASA-N Phe-Arg-Ala Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 DPUOLKQSMYLRDR-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- PBWNICYZGJQKJV-BZSNNMDCSA-N Phe-Phe-Cys Chemical compound N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PBWNICYZGJQKJV-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- HXOLCSYHGRNXJJ-IHRRRGAJSA-N Pro-Asp-Phe Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HXOLCSYHGRNXJJ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 206010039793 Seborrhoeic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- UPNRACRNHISCAF-SZMVWBNQSA-N Trp-Lys-Gln Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 UPNRACRNHISCAF-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 1
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 1
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 108091092356 cellular DNA Proteins 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 201000009151 chronic rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 208000007565 gingivitis Diseases 0.000 description 1
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 1
- 208000035861 hematochezia Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000002134 immunopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 208000033065 inborn errors of immunity Diseases 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 201000001245 periodontitis Diseases 0.000 description 1
- 208000028529 primary immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 208000008742 seborrheic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/21—Retroviridae, e.g. equine infectious anemia virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1036—Retroviridae, e.g. leukemia viruses
- C07K16/1045—Lentiviridae, e.g. HIV, FIV, SIV
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56966—Animal cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
- G01N33/56988—HIV or HTLV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5156—Animal cells expressing foreign proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/40—Fusion polypeptide containing a tag for immunodetection, or an epitope for immunisation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
- C12N2740/15034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
- G01N2333/08—RNA viruses
- G01N2333/15—Retroviridae, e.g. bovine leukaemia virus, feline leukaemia virus, feline leukaemia virus, human T-cell leukaemia-lymphoma virus
- G01N2333/155—Lentiviridae, e.g. visna-maedi virus, equine infectious virus, FIV, SIV
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Mycology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
Abstract
Línea de células T no infectada, independiente de IL-2, procedente de felinos.
Description
Células T derivadas de un felino e
independientes de IL-2.
Los gatos domésticos están sometidos a
infecciones por varios retrovirus, incluyendo el virus de la
leucemia felino (VLFe), el virus del sarcoma felino (VSFe), el
oncoronavirus endógeno de tipo C (RD-114) y el virus
formador de sincitios felinos (VFSFe). De éstos, el VLFe es el
patógeno más significativo, produciendo diversos síntomas que
incluyen neoplasmas linforreticulares y mieloides, anemias,
trastornos inmunomediados y un síndrome de inmunodeficiencia que es
similar al síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA).
Recientemente, un determinado mutante de VLFe de replicación
defectuosa, denominado VLFe-SIDA, se ha asociado más
particularmente con propiedades inmunosupresoras.
El descubrimiento del lentivirus
T-linfotropo felino (denominado actualmente virus de
inmunodeficiencia felina, VIF), fue descrito por primera vez por
Pedersen et al. (1987). Las características del VIF han sido
descritas en Yamamoto et al. (después de 1988); Yamamoto
et al. (antes de 1988); y Ackley et al. (1990). Los
datos seroepidemiológicos han demostrado que la infección por VIF
es autóctona para los felinos domésticos y salvajes en todo el
mundo. Una amplia variedad de síntomas están asociados con la
infección por VIF, incluyendo el aborto, la alopecia, la anemia, la
conjuntivitis, la rinitis crónica, la enteritis, la gingivitis, la
hematoquecia, las anomalías neurológicas, la periodontitis y la
dermatitis seborreica. La marca de identificaión inmunológica de los
gatos domésticos infectados con VIF es una eliminación crónica y
progresiva de los linfocitos CD4^{+} felinos de la sangre
periférica, una reducción en la relación celular CD4:CD8 y, en
algunos casos, un aumento de los linfocitos portadores de CD8.
Basándose en las características moleculares, bioquímicas e
inmunopatológicas, actualmente se considera que la infección por VIF
de los gatos es un modelo de SIDA felino mejor que
VLFe-SIDAF.
La clonación y el análisis de las secuencias del
VIF se ha descrito en Olmsted et al. (1989a); Olmsted et
al. (1989b); y Talbott et al. (1989). Hosie y Jarret
(1990) describieron la respuesta serológica de los gatos infectados
con VIF. Los subtipos de virus VIF pueden clasificarse según el
inmunotipo basándose en el nivel de anticuerpos neutralizantes en
cruz producidos por cada cepa (Murphy y Kingsbury, 1990).
Recientemente, se han clasificado virus en subtipos según el
genotipo basándose en la homología de secuencia de nucleótidos. Si
bien el subtipado de VIH y VIF se basa en el genotipo (Sodora et
al., 1994; Rigby et al., 1993; y Louwagie et al.,
1993), se conoce poco acerca de la correlación entre el genotipo e
inmunotipo de los subtipos. Las cepas víricas de VIF se clasifican
actualmente en cuatro subtipos de VIF: A, B, C y D. (Kakinuma et
al., 1995). Los clones aislados y los clones moleculares
infecciosos han sido descritos para todos los subtipos de VIF
excepto para el subtipo C (Sodora et al., 1994). El VIF del
subtipo C solamente ha sido identificado en el ADN celular de los
gatos de Canadá (Sodora et al.; Rigby et al. 1993;
Kakinuma et al., 1995).
En la bibliografía se han descrito numerosas
cepas de VIF y son conocidas por los expertos en la materia. El
VIF_{Pet} se describe en el documento
US-A-5.037.753. Utilizando técnicas
normalizadas, personas de experiencia normal en la materia pueden
aislar fácilmente de gatos infectados otras cepas descritas de VIF.
Los métodos para aislar y cultivar VIF se describen en los
documentos US-A-5.037.753 y
US-A-5.118.602.
El documento WO 93/01278 da a conocer que las
células FeT1M (felinas mezcladas con PBL recientes) se infectan con
VIF_{Pet} y necesitan interleucina-2 para el
crecimiento. El documento WO 93/01278 da a conocer asimismo el
desarrollo y la caracterización de las líneas celulares
FL-4 y FL-6 productoras de VIF
independientes de IL-2; aquellas líneas celulares
presentan los antígenos de superficie característicos de las células
T y producen VIF_{Pet}. Las células FeT-1 y
FL-4 infectadas con VIF son capaces de comunicar
protección a los gatos sometidos a la prueba de provocación con VIF.
El documento US-A-5.275.813 y
Yamamoto et al. 1991 dan a conocer asimismo estas líneas
celulares.
La presente invención se refiere a nuevas líneas
celulares felinas que son susceptibles de infección por múltiples
subtipos de VIF. Las líneas celulares sirven para propagar y
producir múltiples subtipos de VIF, así como para su utilización en
vacunas contra el VIF. Además, las líneas celulares pueden
utilizarse asimismo en lugar de las células mononucleares de la
sangre periférica felina (PBMC) en ensayos de neutralización vírica
del VIF de antisueros felinos.
Un aspecto de la presente invención consiste en
una línea de células T felina, no infectada, independiente de
IL-2. otro aspecto consiste en un método para
producir una línea de células T felina infectada por VIF, que
comprende la infección de células T procedente de una línea de
células T.
La línea celular FeT-J descrita
en la presente memoria es un ejemplo de la invención. Las líneas
celulares de la presente invención pueden producir productos
celulares que pueden aislarse y detectarse utilizando procedimientos
conocidos por el especialista experto. Los anticuerpos contra las
líneas celulares pueden también producirse utilizando métodos
conocidos.
Las líneas celulares no infectadas por VIF
denominadas FeT-1C (nº de registro ATCC CRL 11968) y
FeT-J (nº de registro ATCC CRL 11967) se depositaron
ambas en la American Type Culture Collection, Rockville, Maryland el
24 de agosto de 1995. Las líneas celulares infectadas VIF_{Bang}
(nº de registro ATCC 11975) y VIF_{Shi} (nº de registro ATCC
11976) se depositaron en la American Type Culture Collection el 25
de agosto de 1995.
La línea celular FeT-1C es
dependiente de IL-2, mientras que la línea celular
FeT-J es independiente de IL-2. Esta
última línea celular ilustra la invención; sirve para proporcionar
un vehículo para la inmunización contra VIF de los gatos, así como
para propagar y producir cepas víricas de VIF in vitro. Tanto
en las líneas celulares no infectadas FeT-1C
dependiente de IL-2 como en la FeT-J
independiente de IL-2 se probó más de 20 veces la
actividad de la transcriptasa inversa (RT) en fluidos de cultivo y
la secuencia provírica VIF por PCR, y se confirmaron negativas al
VIF. La línea celular FeT-J fue muy infectable con
todas las cepas de VIF probadas, incluyendo VIF_{Shi},
VIF_{Dix}, VIF_{UK8}, VIF_{Pet} y VIF_{Bang}, pero fue más
difícil infectarla directamente con VIF_{Shi}.
Los anticuerpos neutralizantes del virus (VN) en
una muestra pueden analizarse utilizando líneas celulares no
infectadas de la presente invención. A diferencia de PBMC que
expiran después de un número limitado de atenuaciones y no se
propagan tan fácilmente como las células FeT-J, la
línea celular FeT-J se crea y puede ser fácilmente
conservada en frío para su futura utilización.
Cultivos celulares. Todas las líneas
celulares en suspensión se cultivaron en RPMI 1640 que contenía
suero de ternero fetal (FCS) al 10% inactivado térmicamente. HEPES
(ácido
N-2-hidroxietilpiperazina-n'-2-etansulfónico)
10 mM, L-glutamina 2 mM, 50 \mug/ml de gentamicina
y 2-mercaptoetanol 5\times10^{5} M. Se
enriquecieron células dependientes de IL-2 con 100
U/ml de IL-2 recombinante humana (Cetus Corporation,
Emeryville, Calif.). Las células en suspensión se atenuaron a una
concentración celular de 0,5-4\times10^{6}
células/ml y se volvieron a cultivar en medio de cultivo reciente
dos veces a la semana. Todas las células con monocapa se atenuaron
dos veces a la semana a una concentración celular inicial de
2\times10^{6} células/ml. Los fluidos del cultivo tisular (TCF)
de las células infectadas por VIF se recogieron dos veces a la
semana, se centrifugaron a 3.000 rpm durante 1 hora para eliminar
las células residuales y se almacenaron a -20ºC o a -70ºC para los
TCF programados para se utilizados inmediatamente en el momento de
la experimentación. Las células sensibles al VIF (1\times10^{6}
células/ml) se infectaron con VIF que presenta una actividad de
transcriptasa inversa (RT) de aproximadamente 30.000 cpm/ml.
Purificación del VIF. Los fluidos del
cultivo celular de las líneas celulares infectadas por VIF se
centrifugaron individualmente entre 2.000 y 3.000 rpm durante 1 h
para eliminar las células. El virus en el TCF se sedimentó por
ultracentrifugación a 16.000 rpm durante 2 horas y se
purificó por ultracentrifugación en primer lugar a un gradiente
discontinuo de sacarosa de 10/50% (p/v) y a continuación en un
gradiente continuo de sacarosa al 10/50% (Pedersen et al.,
1987; Yamamoto et al., 1988). Cada una de las cepas víricas
se inactivó con paraformaldehido esterilizado al 1,25% (filtrado
esterilizado a 0,22 \mum) durante 18 h y posteriormente se dializó
extensamente frente a PBS esterilizado. Los virus inactivados se
diluyeron a una concentración de 500 \mug/ml con PBS esterilizado
y 250 \mug/0,5 ml de cada cepa se colocaron en un tubo
esterilizado de microcentrifugadora y se almacenaron a -70ºC. Las
cepas de VIF inactivadas se descongelaron a temperatura ambiente y
se combinaron 250 \mug de virus inactivado en 0,5 ml de PBS
esterilizado con 0,5 ml de adyuvante justo antes de la inmunización.
Las líneas celulares infectadas por VIF se inactivaron por separado
con paraformaldehido esterilizado al 1,25% durante 18 h, se lavaron
3 veces con PBS esterilizado, se volvieron a poner en suspensión en
PBS esterilizado reciente a una concentración de aproximadamente
5,0\times10^{7} células/ml en tubos esterilizados y se
almacenaron a 4ºC. Típicamente, aproximadamente 2,5\times10^{7}
células infectadas inactivadas en 0,5 ml de PBS esterilizado se
combinaron con 0,5 ml de adyuvante justo antes de la inmunización.
Se utilizaron como adyuvante 250 \mug/0,5 ml de dipéptido treonil
muramilo (adyuvante MDP MF75.2; Chiron Corporation, Emeryville,
CA).
Análisis de transcriptasa inversa (RT).
Se analizó la presencia de ADN polimerasa dependiente de ARN (RT) en
sobrenadantes del cultivo celular esencialmente como se describe en
Rey et al. El análisis por RT para detectar el VIF utilizó
poli(rA)-oligo(dT_{12-18})
como cebador exógeno de plantilla, cuatro trifosfatos de
desoxirribonucleótido diferentes, KCl 20 mM con Mg^{++} como
catión divalente y 5 \muCi trifosfato de timidina (TTP) marcado
con [^{3}H] por muestra. Cinco \muCi de [^{3}H]TTP
proporcionaron un recuento medio total de 1.200.000 cpm utilizando
mezcla de fluido de centelleo (1 parte de xileno a 9 partes de
centelleante para recuento biodegradable de Research Products
International) en un contador de centelleo LS250 de Beckman (Beckman
Instruments, Inc, Palo Alto, CA). Como resultado, se determinaron
los valores de RT por debajo de 1.200.000 cpm/ml.
En la Figura 1 se presentan las concentraciones
de RT para VIF_{Bang} y VIF_{Shi}, después de usarlas para
infectar líneas celulares FeT-IC y
FeT-J.
El Ejemplo siguiente ilustra la invención.
\newpage
Una nueva línea felina de células T dependiente
de interleucina-2 (IL-2), denominada
FeT-1C, que es una línea madre de un clon de
FeT-1M dependiente de IL-2, se
utilizó para crear líneas celulares individuales infectadas
crónicamente con VIF_{Pet}, VIF_{Dix}, VIF_{UK8},
VIF_{Bang}, VIF_{Aom2} o VIF_{Shi}. El clon
FeT-1M (denominado también
VIF-Fet1M) descrito en la patente U.S. nº 5.275.813,
se utilizó para producir una línea celular independiente de
IL-2, FL-4 (descrita también en la
patente U.S. nº 5.275.813) que produce constantemente VIF_{Pet}.
La línea celular FeT-1C es muy infectable con
diferentes cepas de los subtipos A, B y D de VIF. La atenuación de
larga duración de la línea celular FeT-1C disminuye
su infectabilidad, especialmente para el subtipo D de VIF; por
consiguiente, el número de atenuaciones debería ser menor de
aproximadamente 35 atenuaciones para las velocidades de infección
óptimas de VIF o para su utilización en ensayos de VN. Los análisis
por PCR semicuantitativos y del antígeno del núcleo vírico indican
que todas las líneas celulares expuestas a VIF fueron
significativamente infectadas con cepas individuales de VIF.
Una línea celular felina independiente de
IL-2 sensible a la infección por VIF se ha
desarrollado también a partir de las células FeT-1C.
Esta línea celular, denominada FeT-J, puede
infectarse con VIF mediante cultivo conjunto utilizando medio o
células infectados con VIF. Por ejemplo, una línea celular
FeT-1C infectada con VIF_{Bang} se cultivó
conjuntamente en ausencia de IL-2 con células
FeT-J no infectadas para crear una línea celular
FeT-J infectada con VIF_{Bang} independiente de
IL-2 (denominada Bang/FeT-J). En el
método de infección del cultivo conjunto, las células
Bang/FeT-1C se combinaron con células
FeT-J no infectadas en una relación desde
aproximadamente 2:1 hasta aproximadamente 10:1 (infectadas:no
infectadas). La mezcla celular se cultivó en medio en ausencia de
IL-2 durante varios días y las células
FeT-1C se dejaron morir. Las células restantes
estaban constituidas por células FeT-J infectadas
con VIF_{Bang}. Por lo tanto, las células FeT-1C
infectadas con VIF pueden utilizarse para infectar las células
FeT-J y crear líneas celulares FeT-J
independientes de IL-2 infectadas con diferentes
subtipos de VIF. El método de cultivo conjunto con células
FeT-1C infectadas con VIF produjo líneas celulares
FeT-J independientes de IL-2 que
producen concentraciones moderadas a elevadas de diferentes subtipos
de VIF.
La línea celular FeT-1C se
infectó también con VIF_{Shi} y se atenuó extensamente para
producir una línea celular dependiente de IL-2
denominada Shi/FeT-1C. La línea celular
Shi/FeT-1C se cultivó conjuntamente después con
FeT-J en ausencia de IL-2 y la línea
celular infectada por VIF_{Shi} independiente de
IL-2 se denominó Shi/FeT-J. La línea
celular Shi/FeT-J independiente de
IL-2 produce concentraciones mayores de VIF_{Shi}
que la línea celular Shi/FeT-1C dependiente de
IL-2 (Figura 1).
El desarrollo de la línea celular
FeT-J infectada con VIF_{Bang} se realizó también
sin la utilización de la línea celular FeT-1C. La
línea celular FeT-J se infectó directamente con
inoculo de VIF_{Bang} exento de células y se atenuó extensamente
sin IL-2. La línea celular productora de
VIF_{Bang} independiente de IL-2 resultante se
denominó Bang/FeT-J. La línea celular
Bang/FeT-J produjo mayores concentraciones de
VIF_{Bang} que la línea celular Bang/FeT-1C
dependiente de IL-2 que se desarrolló infectando la
línea celular FeT-1C con VIF_{Bang} (Figura
1).
Pedersen et al (1987)
Science 235:790-793.
Yamamoto et al (1988a)
Leukemia, diciembre suplemento 2:
204S-215S
Yamamoto et al (1988b)
Am. J. Vet. Res. 49: 1246-1258.
Ackley et al (1990) J.
Virol. 64: 5652-5655.
Olmsted et al (1989a)
Proc. Nat. Acad. Sci. 86: 2448-2452.
Olmsted et al (1989b)
Proc. Nat. Acad. Sci. 86: 8088-8092.
Talbott et al (1989)
Proc. Nat. Acad. Sci. USA 86: 5743-5747.
Hosie and Jarrett (1990)
AIDS 4: 215-220.
Sodora et al (1994) J.
Virol. 68: 2230-2238.
Rigby et al (1993) J.
Gen. Virol. 74: 425-436.
Kakinuma et al (1995) J.
Virology 69(6): 3639-3646.
Murphy and Kingsbury (1990)
"Virus Taxonomy", In Fields Virology, 2nd Ed., B.N. Fields,
D.M. Knipe et al eds, Raven Press, New York, capítulo 2,
págs. 9-36.
Louwagie et al (1993)
AIDS 7: 769-780.
Rey et al (1984)
Biochem. Biophys. Res. Commun. 21:
1247-1253.
Cultivos celulares. Todas las líneas
celulares en suspensión se cultivaron en RPMI 1640 que contenía
suero de ternero fetal (FCS) al 10% inactivado térmicamente. HEPES
(ácido
N-2-hidroxietilpiperazina-n'-2-etansulfónico)
10 mM, L-glutamina 2 mM, 50 \mug/ml de
gentamicina y 2-mercaptoetanol 5\times10^{5} M.
Se enriquecieron células dependientes de IL-2 con
100 U/ml de IL-2 recombinante humana (Cetus
Corporation, Emeryville, Calif.). Las células en suspensión se
atenuaron a una concentración celular de
0,5-4\times10^{6} células/ml y se volvieron a
cultivar en medio de cultivo reciente dos veces a la semana. Todas
las células con monocapa se atenuaron dos veces a la semana a una
concentración celular inicial de 2\times10^{6} células/ml. Los
fluidos del cultivo tisular (TCF) de las células infectadas por VIF
se recogieron dos veces a la semana, se centrifugaron a 3.000 rpm
durante 1 hora para eliminar las células residuales y se almacenaron
a -20ºC o a -70ºC para los TCF programados para se utilizados
inmediatamente en el momento de la experimentación. Las células
sensibles al VIF (1\times10^{6} células/ml) se infectaron con
VIF que presenta una actividad de transcriptasa inversa (RT) de
aproximadamente 30.000 cpm/ml.
Purificación del VIF. Los fluidos del
cultivo celular de las líneas celulares infectadas por VIF se
centrifugaron individualmente entre 2.000 y 3.000 rpm durante 1 h
para eliminar las células. El virus en el TCF se sedimentó por
ultracentrifugación a 16.000 rpm durante 2 horas y se
purificó por ultracentrifugación en primer lugar a un gradiente
discontinuo de sacarosa de 10/50% (p/v) y a continuación en un
gradiente continuo de sacarosa al 10/50% (Pedersen et al.,
1987; Yamamoto et al., 1988). Cada una de las cepas víricas
se inactivó con paraformaldehido esterilizado al 1,25% (filtrado
esterilizado a 0,22 \mum) durante 18 h y posteriormente se
dializó extensamente frente a PBS esterilizado. Los virus
inactivados se diluyeron a una concentración de 500 \mug/ml con
PBS esterilizado y 250 \mug/0,5 ml de cada cepa se colocaron en un
tubo esterilizado de microcentrifugadora y se almacenaron a -70ºC.
Las cepas de VIF inactivadas se descongelaron a temperatura ambiente
y se combinaron 250 \mug de virus inactivado en 0,5 ml de PBS
esterilizado con 0,5 ml de adyuvante justo antes de la inmunización.
Las líneas celulares infectadas por VIF se inactivaron por separado
con paraformaldehido esterilizado al 1,25% durante 18 h, se lavaron
3 veces con PBS esterilizado, se volvieron a poner en suspensión en
PBS esterilizado reciente a una concentración de aproximadamente
5,0\times10^{7} células/ml en tubos esterilizados y se
almacenaron a 4ºC. Típicamente, aproximadamente 2,5\times10^{7}
células infectadas inactivadas en 0,5 ml de PBS esterilizado se
combinaron con 0,5 ml de adyuvante justo antes de la inmunización.
Se utilizaron como adyuvante 250 \mug/0,5 ml de dipéptido treonil
muramilo (adyuvante MDP MF75.2; Chiron Corporation, Emeryville,
CA).
Los ejemplos siguientes ilustran los
procedimientos, incluyendo el mejor modo de poner en práctica la
invención. Estos ejemplos no deberían considerarse como limitativos.
Todos los porcentajes están expresándose peso y todas las
proporciones de la mezcla de disolventes están expresadas en volumen
a menos que se indique de otro modo.
Una nueva línea felina de células T dependiente
de interleucina-2 (IL-2), denominada
FeT-1C, que es una línea madre de un clon de
FeT-1M dependiente de IL-2, se
utilizó para crear líneas celulares individuales infectadas
crónicamente con VIF_{Pet}, VIF_{Dix}, VIF_{UK8},
VIF_{Bang}, VIF_{Aom2} o VIF_{Shi}. El clon
FeT-1M (denominado también
VIF-Fet1M) descrito en la patente U.S. nº 5.275.813,
se utilizó para producir una línea celular independiente de
IL-2, FL-4 (descrita también en la
patente U.S. nº 5.275.813) que produce constantemente VIF_{Pet}.
La línea celular FeT-1C es muy infectable con
diferentes cepas de los subtipos A, B y D de VIF. La atenuación de
larga duración de la línea celular FeT-1C disminuye
su infectabilidad, especialmente para el subtipo D de VIF; por
consiguiente, el número de atenuaciones debería ser menor de
aproximadamente 35 atenuaciones para las velocidades de infección
óptimas de VIF o para su utilización en ensayos de VN. Los análisis
por PCR semicuantitativos y del antígeno del núcleo vírico indican
que todas las líneas celulares expuestas a VIF fueron
significativamente infectadas con cepas individuales de VIF.
Una línea celular felina independiente de
IL-2 sensible a la infección por VIF se ha
desarrollado también a partir de las células FeT-1C.
Esta línea celular, denominada FeT-J, puede
infectarse con VIF mediante cultivo conjunto utilizando medio o
células infectados con VIF. Por ejemplo, una línea celular
FeT-1C infectada con VIF_{Bang} se cultivó
conjuntamente en ausencia de IL-2 con células
FeT-J no infectadas para crear una línea celular
FeT-J infectada con VIF_{Bang} independiente de
IL-2 (denominada Bang/FeT-J). En el
método de infección del cultivo conjunto, las células
Bang/FeT-1C se combinaron con células
FeT-J no infectadas en una relación desde
aproximadamente 2:1 hasta aproximadamente 10:1 (infectadas:no
infectadas). La mezcla celular se cultivó en medio en ausencia de
IL-2 durante varios días y las células
FeT-1C se dejaron morir. Las células restantes
estaban constituidas por células FeT-J infectadas
con VIF_{Bang}. Por lo tanto, las células FeT-1C
infectadas con VIF pueden utilizarse para infectar las células
FeT-J y crear líneas celulares FeT-J
independientes de IL-2 infectadas con diferentes
subtipos de VIF. El método de cultivo conjunto con células
FeT-1C infectadas con VIF produjo líneas celulares
FeT-J independientes de IL-2 que
producen concentraciones moderadas a elevadas de diferentes subtipos
de VIF.
La línea celular FeT-1C se
infectó también con VIF_{Shi} y se atenuó extensamente para
producir una línea celular dependiente de IL-2
denominada Shi/FeT-1C. La línea celular
Shi/FeT-1C se cultivó conjuntamente después con
FeT-J en ausencia de IL-2 y la línea
celular infectada por VIF_{Shi} independiente de
IL-2 se denominó Shi/FeT-J. La línea
celular Shi/FeT-J independiente de
IL-2 produce concentraciones mayores de VIF_{Shi}
que la línea celular Shi/FeT-1C dependiente de
IL-2 (Figura 1).
El desarrollo de la línea celular
FeT-J infectada con VIF_{Bang} se realizó también
sin la utilización de la línea celular FeT-1C. La
línea celular FeT-J se infectó directamente con
inoculo de VIF_{Bang} exento de células y se atenuó extensamente
sin IL-2. La línea celular productora de
VIF_{Bang} independiente de IL-2 resultante se
denominó Bang/FeT-J. La línea celular
Bang/FeT-J produjo mayores concentraciones de
VIF_{Bang} que la línea celular Bang/FeT-1C
dependiente de IL-2 que se desarrolló infectando la
línea celular FeT-1C con VIF_{Bang} (Figura
1).
Las células infectadas con VIF se separaron de
los sobrenadantes por centrifugación, se inactivaron y se utilizaron
como vacuna. Asimismo, el virus VIF completo se sedimentó en el
sobrenadante exento de células infectadas por ultracentrifugación y
se inactivó. Tanto las células infectadas como los virus se
inactivaron por tratamiento con paraformaldehido al 1,25% durante 24
horas a 5ºC, seguido de lavado intenso o diálisis frente a PBS,
respectivamente. Este método inactiva eficazmente el VIF sin
pérdida de inmunogenicidad. Los inmunogenes de VIF producidos según
el método en cuestión son muy eficaces para producir inmunicidad
protectora (Yamamoto et al., 1993; Yamamoto et al.,
1991a; Yamamoto et al., 1991b). Se contempla que las cepas
víricas atenuadas podrían utilizarse en las composiciones de la
vacuna objeto de la invención.
Aunque una línea celular FeT-1C
infectada con VIF_{Shi} se superinfectó con la cepa VIF_{Pet}
para producir una línea celular individual infectada con múltiples
subtipos de VIF (es decir, una línea celular FeT-1C
multi-subtipo A/D), durante los dos meses de
co-infección las concentraciones províricas de
VIF_{Shi} disminuyeron desde el 50% hasta menos del 5% mientras
que las concentraciones províricas de VIF_{Pet} aumentaron
simultáneamente hasta aproximadamente el 50%. Por lo tanto, el
mantenimiento de una línea celular individual infectada con subtipos
múltiples de VIF para su utilización como vacuna contra VIF no es la
forma de realización preferida de la invención en cuestión.
Por consiguiente, en una forma de realización de
la invención en cuestión, las composiciones de la vacuna se
desarrollaron a partir de dos líneas celulares individuales, estando
cada línea infectada con un subtipo diferente de VIF. En una forma
de realización específica, la composición de vacuna contra VIF de
doble subtipo comprendía una combinación de una línea celular
infectada con VIF subtipo A (Pet/FL-4) con una línea
celular infectada con VIF subtipo D (Shi/FeT-1C).
Las líneas celulares infectadas subtipo A y subtipo D se inactivaron
tal como se describió, se combinaron en números de células iguales
(2,5\times10^{7} células cada una en 250 \mug de MDP) y se
utilizaron para inmunizar gatos. Se vacunaron tres gatos SPF con
células Pet/FL-4 inactivadas y otros cuatro gatos se
vacunaron con células Shi/FeT-1C inactivadas
(2,5\times10^{7} células/dosis). Después de una serie de cuatro
vacunaciones, la vacuna de doble subtipo (Pet/FL-4 y
Shi/FeT-1C) produjo anticuerpos
anti-VIF, incluyendo títulos de anticuerpo VN
significativos, para ambas cepas de VIF analizadas (Figura 2 y
Tabla 2, Prueba I). Cuatro gatos vacunados con doble subtipo
(Pet/FL-4 y Shi/FeT-1C) se
sometieron a una prueba de provocación con VIF_{Bang} (50
CID_{50}). Los tres gatos vacunados con Pet/FL-4 y
dos de los gatos vacunados con Shi/FeT-1C se
sometieron a la prueba de provocación con 50 CID_{50} de
VIF_{Bang}. Los dos gatos restantes vacunados con
Shi/FeT-1C se sometieron a la prueba de provocación
con 50 CID_{50} de VIF_{Shi}.
<110> University of Florida, et
al
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<120> VACUNAS CONTRA EL VIF
MULTI-SUBTIPO
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<130> REP0645EP
\vskip0.400000\baselineskip
<140> 00111079.0
\vskip0.400000\baselineskip
<141>
1996-08-25
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 16
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<170> PatentIn Ver 2.1
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 22
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de inmunodeficiencia
felina
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 1
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Gly Ser Trp Phe Arg Ala Ile Ser Ser Trp Lys
Gln Arg Asn Arg Trp}
\sac{Glu Trp Arg Pro Asp Phe}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 2
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 14
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de inmunodeficiencia
felina
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 2
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Gln Glu Leu Gly Cys Asn Gln Asn Gln Phe Phe
Cys Lys Ile}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 3
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 20
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 3
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipgaaatgtata atattgctggg
\hfill20
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 4
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 21
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 4
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipgaattgattt tgattacatc c
\hfill21
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 5
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 20
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 5
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskiptagtagttat agtggtacta
\hfill20
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 6
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 21
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 6
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskiptctttaaggc ttcagtcacc t
\hfill21
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 7
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 21
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 7
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipgtacaaatag tagtagtaca a
\hfill
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 8
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 21
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 8
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskiptctttaaggc ttcagtcacc t
\hfill21
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 9
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 21
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 9
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipgggactacta gcaatggaat a
\hfill21
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 10
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 21
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 10
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipagtgcctcag ttattttatc c
\hfill21
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 21
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 11
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskiptgggactgat gatagtaaaa c
\hfill21
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 12
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 21
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 12
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipagtgcctcag ttattttatc c
\hfill21
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 13
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 21
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 13
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskiptgggactgat aatagtgaaa c
\hfill21
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 14
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 21
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 14
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipagtgcctcag ttattttatc c
\hfill21
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 15
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskiptcatcatttc caacatgtc
\hfill19
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 16
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 20
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: VIF PCR cebador
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 16
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipaatgcttcag ttatttgatc
\hfill20
Claims (18)
1. Línea de células T no infectada,
independiente de IL-2, procedente de felinos.
2. Línea celular según la reivindicación 1,
que presenta las características de identificación de la línea
celular denominada FeT-J y depositada con el número
de registro CRL 11967 de la ATCC.
3. Línea celular según la reivindicación 1,
denominada FeT-J y depositada con el número de
registro CRL 11967 de la ATCC.
4. Método para la producción de una línea de
células T felinas infectada con VIF, que comprende infectar una
célula T procedente de una línea de células T según cualquiera de
las reivindicaciones anteriores con un VIF.
5. Método según la reivindicación 4, en el
que el VIF es del subtipo A, B, C o D.
6. Método según la reivindicación 4, en el
que el VIF es una cepa seleccionada de entre VIF_{Dix},
VIF_{UK8}, VIF_{Bang}, VIF_{Aom1}, VIF_{Aom2}, VIF_{Pet}
y VIF_{Shi}.
7. Método según la reivindicación 4, en el
que la célula está infectada con dos o más cepas diferentes de
VIF.
8. Método según la reivindicación 7, en el
que las cepas de VIF se seleccionan de entre VIF_{Dix},
VIF_{UK8}, VIF_{Bang}, VIF_{Aom1}, VIF_{Aom2}, VIF_{Pet}
y VIF_{Shi}.
9. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 4 a 8, en el que la célula infectada por VIF
expresa una proteína de VIF.
10. Método según la reivindicación 9, en el que
la proteína de VIF comprende la glucoproteína de la envoltura del
VIF o un fragmento de la misma.
11. Método según la reivindicación 10, en el
que la glucoproteína de la envoltura del VIF comprende la secuencia
de aminoácidos representada en la SEC. ID. nº: 1 o SEC. ID. nº:
2.
12. Método según la reivindicación 9, en el
que la proteína de VIF esta codificada por VIFenv,
VIFgag/pro o VIFenv-gag/pro.
13. Método según la reivindicación 4, en el que
la célula está infectada con VIF cepa del virus VIF_{Bang}.
14. Método según la reivindicación 4, en el que
la línea celular infectada con VIF presenta las características de
identificación de la línea celular denominada
Bang/FeT-J y depositada con el número de registro
CRL 11975 de la ATCC.
15. Método según la reivindicación 4, en el que
la línea celular infectada con VIF es la línea celular denominada
Bang/FeT-J y depositada con el número de registro
CRL 11975 de la ATCC.
16. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 4 a 15, que comprende además inactivar el VIF que
infecta la célula infectada por el VIF.
17. Método según cualquiera de las
reivindicaciones 4 a 15, que comprende además atenuar el VIF que
infecta la célula infectada por el VIF.
18. Método según la reivindicación 16 ó 17, en
el que la inactivación o la atenuación comprende exponer la célula
infectada por el VIF a paraformaldehído, formalina, fenol, luz UV o
temperatura elevada.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US51938695A | 1995-08-25 | 1995-08-25 | |
| US519386 | 1995-08-25 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2269042T3 true ES2269042T3 (es) | 2007-04-01 |
Family
ID=24068097
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES00111079T Expired - Lifetime ES2269042T3 (es) | 1995-08-25 | 1996-08-23 | Celulas t derivadas de un felino e independientes del il-2. |
| ES96928989T Expired - Lifetime ES2242967T3 (es) | 1995-08-25 | 1996-08-23 | Vacunas contra el vif multi-subtipo. |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES96928989T Expired - Lifetime ES2242967T3 (es) | 1995-08-25 | 1996-08-23 | Vacunas contra el vif multi-subtipo. |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (5) | US5846825A (es) |
| EP (2) | EP1090985B1 (es) |
| JP (4) | JP4142741B2 (es) |
| KR (2) | KR100502568B1 (es) |
| AT (2) | ATE297218T1 (es) |
| AU (3) | AU728750B2 (es) |
| BR (1) | BR9610343A (es) |
| CA (1) | CA2230029C (es) |
| DE (3) | DE69636440T4 (es) |
| DK (2) | DK0848615T3 (es) |
| ES (2) | ES2269042T3 (es) |
| HK (1) | HK1038584A1 (es) |
| IL (3) | IL123264A0 (es) |
| NZ (3) | NZ502144A (es) |
| PL (2) | PL186706B1 (es) |
| PT (2) | PT848615E (es) |
| WO (1) | WO1997007817A1 (es) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100502568B1 (ko) * | 1995-08-25 | 2005-07-20 | 유니버시티 오브 플로리다 리서치 파운데이션, 인크. | 다수-서브타입 ｆｉｖ 백신 |
| US6254872B1 (en) * | 1995-08-25 | 2001-07-03 | University Of Florida | Multi-subtype FIV vaccines |
| US6458528B1 (en) * | 1998-05-15 | 2002-10-01 | Idexx Laboratories, Inc. | Diagnosis of feline immunodeficiency virus infection using ENV/GAG polypeptide markers |
| US20030091987A1 (en) * | 2001-02-22 | 2003-05-15 | Yamamoto Janet K. | Materials and methods for detecting, preventing, and treating retroviral infection |
| ES2369846T3 (es) | 2001-05-10 | 2011-12-07 | Wyeth Llc | Composición y procedimiento para aumentar la densidad celular en cultivos celulares infectados con lentivirus. |
| EP1622644A2 (en) | 2003-05-12 | 2006-02-08 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Materials and methods for immunizing against fiv infection |
| US7658927B2 (en) * | 2003-05-12 | 2010-02-09 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Materials and methods for immunizing against FIV infection |
| WO2006011919A1 (en) * | 2004-06-30 | 2006-02-02 | Idexx Laboratories, Inc. | Method and device for detecting feline immunodeficiency virus |
| JP2007505320A (ja) | 2003-09-11 | 2007-03-08 | アイデックス ラボラトリーズ インコーポレイテッド | ネコ免疫不全ウイルスの検出のための方法と装置 |
| CA2550264C (en) | 2003-12-18 | 2011-06-28 | Idexx Laboratories, Inc. | Method and device for detecting feline immunodeficiency virus |
| CA2556141A1 (en) | 2004-02-19 | 2005-09-01 | Idexx Laboratories, Inc. | Method and device for detecting feline immunodeficiency virus |
| WO2006011917A1 (en) * | 2004-06-30 | 2006-02-02 | Idexx Laboratories, Inc. | Method and device for detecting feline immunodeficiency virus |
| JP4866848B2 (ja) | 2004-06-30 | 2012-02-01 | アイデックス ラボラトリーズ インコーポレイテッド | ネコ免疫不全ウイルス（ｆｉｖ）のｅｎｖタンパク質のｖ３領域に由来するペプチドの使用を含むｆｉｖを検出するための方法および装置 |
| US7291338B2 (en) | 2005-03-09 | 2007-11-06 | Idexx Laboratories, Inc. | Method and device for detecting feline immunodeficiency virus |
| US8394581B2 (en) | 2007-07-25 | 2013-03-12 | The Kitasato Institute | Test method on feline vaccinated with feline immunodeficiency virus vaccine, and antigen for use in the test |
| WO2011123781A1 (en) | 2010-04-02 | 2011-10-06 | Idexx Laboratories, Inc. | Detection of feline immunodeficiency virus |
| US8596026B2 (en) * | 2010-08-05 | 2013-12-03 | Kraft Foods Group Brands Llc | Vacuum flow wrap packaging system and method of packaging |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6107077A (en) | 1987-08-26 | 2000-08-22 | Yamamoto; Janet K. | Feline lymphoid cell lines capable of producing FIV for FIV diagnostics and vaccines |
| US5118602A (en) | 1987-08-26 | 1992-06-02 | The Regents Of The University Of California | Feline T-lymphotropic lentivirus assay |
| CA1341439C (en) * | 1987-08-26 | 2003-09-23 | Niels C. Pedersen | Feline t-lymphotropic lentivirus |
| AU8007991A (en) * | 1990-06-29 | 1992-01-23 | Daniel Zagury | Methods of inducing immune response to aids virus |
| WO1993001278A1 (en) * | 1991-07-05 | 1993-01-21 | The Regents Of The University Of California | Feline lymphoid cell lines capable of producing fiv |
| GB9219936D0 (en) * | 1992-09-21 | 1992-11-04 | Pitman Moore Inc | Vaccines |
| WO1994020622A1 (en) * | 1993-03-11 | 1994-09-15 | Akzo Nobel N.V. | Polypeptide fragment capable of inducing neutralising antibodies against feline immuno-deficiency virus |
| IT1276509B1 (it) * | 1995-03-31 | 1997-10-31 | Istituto Superiore Della Sanit | Vaccino per la profilassiimmunitaria dell'infezione da virus della immunodeficienza felina del gatto domestico. |
| US6254872B1 (en) | 1995-08-25 | 2001-07-03 | University Of Florida | Multi-subtype FIV vaccines |
| KR100502568B1 (ko) | 1995-08-25 | 2005-07-20 | 유니버시티 오브 플로리다 리서치 파운데이션, 인크. | 다수-서브타입 ｆｉｖ 백신 |
-
1996
- 1996-08-23 KR KR10-2004-7003434A patent/KR100502568B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1996-08-23 JP JP51043097A patent/JP4142741B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-23 CA CA2230029A patent/CA2230029C/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-23 IL IL12326496A patent/IL123264A0/xx active IP Right Grant
- 1996-08-23 DE DE69636440T patent/DE69636440T4/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-23 DE DE69636440A patent/DE69636440D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-23 NZ NZ502144A patent/NZ502144A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-08-23 PT PT96928989T patent/PT848615E/pt unknown
- 1996-08-23 BR BR9610343-4A patent/BR9610343A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-08-23 IL IL16387396A patent/IL163873A0/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-08-23 NZ NZ513388A patent/NZ513388A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-08-23 EP EP00111079A patent/EP1090985B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-23 ES ES00111079T patent/ES2269042T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-23 DK DK96928989T patent/DK0848615T3/da active
- 1996-08-23 DE DE69634820T patent/DE69634820T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-23 AU AU68555/96A patent/AU728750B2/en not_active Expired
- 1996-08-23 PL PL96325376A patent/PL186706B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1996-08-23 ES ES96928989T patent/ES2242967T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-23 AT AT96928989T patent/ATE297218T1/de active
- 1996-08-23 KR KR10-1998-0701326A patent/KR100482616B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1996-08-23 NZ NZ316347A patent/NZ316347A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-08-23 EP EP96928989A patent/EP0848615B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-23 PT PT00111079T patent/PT1090985E/pt unknown
- 1996-08-23 WO PCT/US1996/013580 patent/WO1997007817A1/en active IP Right Grant
- 1996-08-23 DK DK00111079T patent/DK1090985T3/da active
- 1996-08-23 AT AT00111079T patent/ATE335809T1/de active
- 1996-08-23 PL PL35824896A patent/PL188041B1/pl not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-04-29 US US08/841,238 patent/US5846825A/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-10-01 US US09/512,746 patent/US6447993B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1998
- 1998-02-11 IL IL123264A patent/IL123264A/en not_active IP Right Cessation
-
2001
- 2001-02-13 AU AU19725/01A patent/AU772353B2/en not_active Expired
- 2001-10-11 HK HK01107137A patent/HK1038584A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-04-03 US US10/116,196 patent/US6605282B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2003
- 2003-08-06 US US10/636,079 patent/US7311921B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2004
- 2004-07-22 AU AU2004203358A patent/AU2004203358B2/en not_active Expired
- 2004-12-20 JP JP2004368021A patent/JP4413132B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2007
- 2007-05-02 JP JP2007121532A patent/JP5339687B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2007-05-21 US US11/805,048 patent/US20080145381A1/en not_active Abandoned
-
2013
- 2013-01-25 JP JP2013012043A patent/JP2013079286A/ja not_active Withdrawn
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5339687B2 (ja) | 多種サブタイプｆｉｖワクチン | |
| CARLSON et al. | Vaccine protection of rhesus macaques against simian immunodeficiency virus infection | |
| US5275813A (en) | Methods and compositions for vaccinating against feline immunodeficiency virus | |
| US20090263417A1 (en) | Multi-subtype FIV vaccines | |
| US6107077A (en) | Feline lymphoid cell lines capable of producing FIV for FIV diagnostics and vaccines | |
| GARDNER | Vaccination against SIV infection and disease | |
| Ohishi et al. | Augmentation of Bovine Leukemia Virus (BLV)‐Specific Lymphocyte Proliferation Responses in Ruminants by Inoculation with BLV env‐Recombinant Vaccinia Virus: Their Role in the Suppression of BLV Replication | |
| Pu et al. | MHC-restricted protection of cats against FIV infection by adoptive transfer of immune cells from FIV-vaccinated donors | |
| Huisman et al. | Feline immunodeficiency virus subunit vaccines that induce virus neutralising antibodies but no protection against challenge infection | |
| JP2001097885A (ja) | ネコ・レトロウイルスワクチン、およびその調製方法 | |
| MXPA98001570A (es) | Vacunas de virus de inmunodeficiencia felina de subtipos multiples |