DE69636440T2 - IL-2 unabhängige T-Zellen der Katze - Google Patents

IL-2 unabhängige T-Zellen der Katze Download PDF

Info

Publication number
DE69636440T2
DE69636440T2 DE69636440T DE69636440T DE69636440T2 DE 69636440 T2 DE69636440 T2 DE 69636440T2 DE 69636440 T DE69636440 T DE 69636440T DE 69636440 T DE69636440 T DE 69636440T DE 69636440 T2 DE69636440 T2 DE 69636440T2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
fiv
infected
cell line
fet
cell
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
DE69636440T
Other languages
English (en)
Other versions
DE69636440D1 (de
DE69636440T4 (de
Inventor
Janet K. Gainesville Yamamoto
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of California
University of Florida
University of Florida Research Foundation Inc
Original Assignee
University of California
University of Florida
University of Florida Research Foundation Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University of California, University of Florida, University of Florida Research Foundation Inc filed Critical University of California
Publication of DE69636440T2 publication Critical patent/DE69636440T2/de
Application granted granted Critical
Publication of DE69636440T4 publication Critical patent/DE69636440T4/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/21—Retroviridae, e.g. equine infectious anemia virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • C07K16/1036—Retroviridae, e.g. leukemia viruses
    • C07K16/1045—Lentiviridae, e.g. HIV, FIV, SIV
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56966—Animal cells
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56983—Viruses
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56983—Viruses
    • G01N33/56988—HIV or HTLV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/515—Animal cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/515—Animal cells
    • A61K2039/5156—Animal cells expressing foreign proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/40—Fusion polypeptide containing a tag for immunodetection, or an epitope for immunisation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
    • C12N2740/15034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
    • G01N2333/08—RNA viruses
    • G01N2333/15—Retroviridae, e.g. bovine leukaemia virus, feline leukaemia virus, feline leukaemia virus, human T-cell leukaemia-lymphoma virus
    • G01N2333/155—Lentiviridae, e.g. visna-maedi virus, equine infectious virus, FIV, SIV

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)

Description

  • Hintergrund der Erfindung
  • Bei Hauskatzen treten Infektionen durch mehrere Retroviren auf, einschließlich felines Leukämie-Virus (FeLV), felines Sarcoma-Virus (FeSV), endogenes Typ C-Oncoronavirus (RD-114) und felines Syncytia-bildendes Virus (FeSFV). Darunter stellt FeLV das wichtigste Pathogen dar, das verschiedene Symptome hervorruft, einschließlich lymphoretikuläre und myeloide Neoplasmen, Anämien, immunvermittelte Störungen und ein Immunschwächesyndrom, das Ähnlichkeiten mit dem humanen erworbenen Immunschwächesyndrom (AIDS) aufweist. Kürzlich wurde eine spezielle replikationsdefektive FeLV-Mutante mit der Bezeichnung FeLV-AIDS in spezieller Weise mit immunosuppressiven Eigenschaften in Verbindung gebracht.
  • Über die Entdeckung des felinen T-lymphotropen Lentivirus (jetzt als feliner Immunschwächevirus, FIV, bezeichnet) berichteten zunächst Pedersen et al. (1987). Über die Eigenschaften von FIV berichteten Yamamoto et al. (1988a); Yamamoto et al. (1988b); und Ackley et al. (1990). Seroepidemiologische Daten haben gezeigt, dass FIV-Infektionen bei Hauskatzen und Wildkatzen in der gesamten Welt angeboren sind. Eine große Vielzahl von Symptomen tritt bei Infektionen mit FIV auf, einschließlich Abort, Alopezie, Anämie, Konjunktivitis, chronische Rhinitis, Enteritis, Gingivitis, Hämatochezie, neurologische Abnormalitäten, Periodontitis und seborrhoische Dermatitis. Das immunologische Kennzeichen von Hauskatzen, die mit FIV infiziert sind, ist eine chronische und progressive Verarmung an felinen peripheren CD4+-Blutlymphozyten, eine Verringerung des CD4:CD8-Zellverhältnisses und in einigen Fällen eine Zunahme von CD8 aufweisenden Lymphozyten. Auf der Grundlage der molekularen, biochemischen und immunopathologischen Eigenschaften wird eine FIV-Infektion von Katzen nunmehr als ein AIDS-Katzenmodell angesehen, das besser ist als FeLV-FAIDS.
  • Über eine Klonierung und Sequenzanalyse von FIV berichten Olmsted et al. (1989a); Olmsted et al. (1989b); und Talbott et al. (1989). Hosie und Jarret (1990) beschreiben die serologische Reaktion von mit FIV infizierten Katzen. FIV-Virus-Subtypen lassen sich entsprechend dem Immunotyp auf der Grundlage der Konzentration an kreuzneutralisierenden Antikörpern, die durch jeden Stamm hervorgerufen werden, klassifizieren (Murphy und Kingsbury, 1990). Neuerdings werden Viren in Subtypen gemäß dem Genotyp auf der Grundlage der Nucleotidsequenzhomologie klassifiziert. Obgleich die HIV- und FIV-Subtypisierung auf dem Genotyp beruht (Sodora et al., 1994; Rigby et al., 1993; und Louwagie et al., 1993), ist wenig über den Zusammenhang zwischen dem Genotyp und dem Immunotyp von Subtypen bekannt. Virale FIV-Isolate werden derzeit in vier FIV-Subtypen eingeteilt: A, B, C und D (Kakinuma et al., 1995). Infektiöse Isolate und infektiöse molekulare Klone wurden für sämtliche FIV-Subtypen beschrieben, ausgenommen der Subtyp C (Sodora et al., 1994). Der Subtyp C-FIV wurde nur aus zellulärer DNA von Katzen aus Kanada identifiziert (Sodora et al.; Rigby et al., 1993; Kakinuma et al., 1995).
  • Zahlreiche FIV-Isolate wurden in der Literatur beschrieben und sind dem Fachmann geläufig. FIVPet ist in US-A-5 037 753 beschrieben. Weitere FIV-Isolate, die beschrieben wurden, lassen sich vom Fachmann unter Anwendung üblicher Techniken leicht aus infizierten Katzen isolieren. Verfahren zum Isolieren und Züchten von FIV werden in US-A-5 037 753 und US-A-5 118 602 beschrieben.
  • WO-93/01278 führt aus, dass FeT1M-Zellen (feline, gemischte frische PBLs) mit FIVPet infiziert werden und für ihr Wachstum Interleukin-2 benötigen. WO-93/01278 beschreibt ferner die Entwicklung und die Charakterisierung der IL-2-unabhängigen, FIV-erzeugenden Zelllinien FL-4 und FL-6. Diese Zelllinien weisen die charakteristischen Oberflächenantigene von T-Zellen auf und erzeugen FIVPet. Die FIV-infizierten FeT-1 und FL-4-Zellen sind dazu in der Lage, FIV-belastete Katzen zu schützen. US-A-5 275 813 und Yamamoto et al. (1991) beschreiben ebenfalls diese Zelllinien.
  • Zusammenfassende Darstellung der Erfindung
  • Die vorliegende Erfindung betrifft neue feline Zelllinien, die gegenüber einer Infektion durch vielfältige FIV-Subtypen empfindlich sind. Die Zelllinien eignen sich zur Vermehrung und Erzeugung von vielfältigen FIV-Subtypen sowie zur Verwendung in FIV-Vaccinen. Ferner können die Zelllinien anstelle von felinen peripheren mononuklearen Blutzellen (PBMC) bei FIV-Virus-Neutralisationstests von felinen Antiseren verwendet werden.
  • Ein Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft eine nicht-infizierte, IL-2-unabhängige, von Katzen abgeleitete T-Zelllinie. Ein weiterer Aspekt der Erfindung besteht in einem Verfahren zur Herstellung einer FIV-infizierten Katzen-T-Zelllinie, das die Infektion einer T-Zelle aus einer T-Zelllinie umfasst.
  • Ausführliche Beschreibung der Erfindung
  • Die hier beschriebene FeT-J-Zelllinie stellt ein Beispiel für die Erfindung dar. Die erfindungsgemäßen Zelllinien können zelluläre Produkte erzeugen, die unter Anwendung von dem Fachmann geläufigen Verfahren isoliert und nachgewiesen werden können. Antikörper gegen die Zelllinien können ebenfalls unter Anwendung bekannter Verfahren erzeugt werden.
  • Die nicht mit FIV infizierten Zelllinien mit den Bezeichnungen FeT-1C (ATCC-Hinterlegungsnummer CRL 11968) und FeT-J (ATCC-Hinterlegungsnummer CRL 11967) wurden beide bei der American Type Culture Collection, Rockville, Maryland, am 24. August 1995 hinterlegt. Mit FIVBang (ATCC-Hinterlegungsnummer 11975) und mit FIVShi (ATCC-Hinterlegungsnummer 11976) infizierte Zelllinien wurden bei der American Type Culture Collection am 25. August 1995 hinterlegt.
  • Die FeT-1C-Zelllinie ist von IL-2 abhängig, während die FeT-J-Zelllinie von IL-2 unabhängig ist. Die letztgenannte Zelllinie dient zur Erläuterung der Erfindung. Sie eignet sich zur Bereitstellung eines Trägers für die FIV-Immunisierung von Katzen sowie zur in vitro-Vermehrung und -Erzeugung von viralen FIV-Stämmen. Sowohl die IL-2-abhängige nicht-infizierte Zelllinie FeT-1C als auch die IL-2-unabhängige, nicht-infizierte FeT-J-Zelllinie wurden 20 Mal auf ihre reverse Transcriptase (RT)-Aktivität in Kulturflüssigkeiten und durch PCR auf die FIV-provirale Sequenz getestet. Dabei wurden sie als negativ in bezug auf FIV befunden. Die FeT-J-Zelllinie war hochgradig mit sämtlichen getesteten FIV-Stämmen infizierbar, einschließlich FIVShi, FIVDix, FIVUK8, FIVPet und FIVBang, war aber schwieriger direkt mit FIVShi zu infizieren.
  • Virus-neutralisierende (VN) Antikörper in einer Probe können analysiert werden, indem man die erfindungsgemäßen nicht-infizierten Zelllinien verwendet. Im Gegensatz zu PBMC, die nach einer begrenzten Anzahl von Passagen absterben und sich nicht so leicht wie FeT-J-Zellen vermehren, ist die FeT-J-Zelllinie etabliert und lässt sich zur zukünftigen Verwendung leicht durch Einfrieren konservieren.
  • Materialien und Methoden
  • Zellkulturen. Sämtliche Suspensionszelllinien wurden in RPMI 1640 mit einem Gehalt an 10 % wärmeinaktiviertem, fötalem Kälberserum (FCS) gezüchtet. 10 mM HEPES (N-2-Hydroxyethylpiperazin-N'-2-ethansulfonsäure), 2 mM L-Glutamin, 50 μg/ml Gentamicin und 5 × 10–5 M 2-Mercaptoethanol. IL-2-abhängige Zellen wurden mit 100 U/ml rekombinantem humanem IL-2 (Cetus Corporation, Emeryville, Kalifornien) ergänzt. Die Suspensionszellen wurden einer Passage in einer Zellkonzentration von 0,5–4 × 106 Zellen/ml unterzogen und erneut 2-mal wöchentlich in frischem Kulturmedium gezüchtet. Sämtliche Monolayer-Zellen wurden 2-mal wöchentlich einer Passage bei einer anfänglichen Zellkonzentration von 2 × 106 Zellen/ml unterzogen. Die Gewebekulturflüssigkeiten (TCF) von FIV-infizierten Zellen wurden 2-mal wöchentlich geerntet, zur Entfernung von restlichen Zellen 1 Stunde mit 3 000 U/min zentrifugiert und bei –20 °C oder bei –70 °C für die TCF, die für eine sofortige Verwendung beim Test vorgesehen waren, aufbewahrt. FIV-empfindliche Zellen (1 × 106 Zellen/ml) wurden mit FIV mit einer Aktivität an reverser Transkriptase (RT) von etwa 30 000 cpm/ml infiziert.
  • FIV-Reinigung. Gewebekulturflüssigkeiten von FIV-infizierten Zelllinien wurden zur Entfernung von Zellen individuell 1 Stunde mit 2 000 bis 3 000 U/min zentrifugiert. Virus in TCF wurde durch 2-stündige Ultrazentrifugation mit 16 000 U/min pelletisiert und durch Ultrazentrifugation zunächst mit einem 10/50 % (Gew./Vol.) diskontinuierlichen Saccharosegradienten und anschließend mit einem 10/50 % kontinuierlichen Saccharosegradienten gereinigt (Pederson et al., 1987; Yamamoto et al., 1988). Die einzelnen viralen Isolate wurden 18 Stunden mit 1,25 sterilem Paraformaldehyd (0,22 μm steril filtriert) inaktiviert und anschließend gründlich gegen sterile PBS dialysiert. Die inaktivierten Viren wurden mit steriler PBS auf eine Konzentration von 500 μg/ml verdünnt. 250 μg/0,5 ml der einzelnen Stämme wurden in ein steriles Mikrozentrifugenröhrchen gegeben und bei –70 °C aufbewahrt. Die inaktivierten FIV-Stämme wurden auf Raumtemperatur aufgetaut. 250 μg inaktiviertes Virus in 0,5 ml steriler PBS wurde unmittelbar vor der Immunisierung mit 0,5 ml Adjuvans vereinigt. FIV-infizierte Zelllinien wurden getrennt 18 Stunden mit 1,25 % sterilem Paraformaldehyd inaktiviert, 3-mal mit steriler PBS gewaschen, in frischer steriler PBS in einer Konzentration von etwa 5,0 × 107 Zellen/ml in sterilen Röhrchen resuspendiert und bei 4 °C aufbewahrt. Typischerweise wurden etwa 2,5 × 107 inaktivierte, infizierte Zellen in 0,5 ml steriler PBS mit 0,5 ml Adjuvans unmittelbar vor der Immunisierung vereinigt. 250 μg/0,5 ml Threonylmuramyl-dipeptid (MDP MF75.2 Adjuvans; Chiron Corporation, Emeryville, CA) wurde als Adjuvans verwendet.
  • Test auf reverse Transcriptase (RT)
  • Die Anwesenheit von RNA-abhängiger DNA-Polymerase (RT) wurde in Zellkulturüberständen im wesentlichen gemäß den Angaben von Rey et al. getestet. Beim RT-Test zum Nachweis von FIV wurden Poly(RA)-oligo(dT12-18) als exogener Matrizenprimer, vier verschiedene Desoxyribonucleotid-triphosphate, 20 mM KCI mit Mg++ als zweiwertigem Kation und 5 μCi [3H]-markiertes Thymidintriphosphat (TTP) pro Probe verwendet. 5 μCi [3H]-TTP ergaben ein mittleres Gesamtzählergebnis von 1 200 000 cpm unter Verwendung eines Szintillationsflüssigkeitsgemisches (1 Teil Xylol auf 9 Teile biologisch abbaubare Flüssigkeit für die Szintillationszählung der Research Products International) an einem Beckman LS250-Szintillationszähler (Beckman Instruments, Inc., Palo Alto, CA). Als Ergebnis wurden RT-Werte unter 1 200 000 cpm/ml festgestellt.
  • Die RT-Werte für FIVBang und FIVShi nach ihrer Verwendung zur Infektion von FeT-IC und FeT-J-Zelllinien sind in 1 dargestellt. Das folgende Beispiel dient zur Erläuterung der Erfindung.
  • Beispiel 1 – FIV-infizierte Zelllinien
  • Eine neue, von Interleukin-2 (IL-2) abhängige, feline T-Zelllinie mit der Bezeichnung FeT-1 C, bei der es sich um eine Mutterlinie eines IL 2-abhängigen FeT-1M Klons handelt, wurde zur Bereitstellung von individuellen Zelllinien, die chronisch mit FIVPet, FIVDix, FIVUK8, FIVBang, FIVAom2 oder FIVShi infiziert waren, verwendet. Der FeT1M-Klon (auch als FIV-FeT1M bezeichnet) ist im US-Patent 5 275 813 (durch Verweis zum Gegenstand der Beschreibung gemacht) beschrieben. Er wurde zur Herstellung einer IL-2-unabhängigen Zelllinie, nämlich FL-4 (ebenfalls im US-Patent 5 275 813 beschrieben), verwendet, die chronisch FIVPet bildet. Die FeT-1C-Zelllinie ist hochgradig mit verschiedenen Isolaten von FIV-Subtypen A, B und D infizierbar. Eine Langzeitpassage der FeT-1C-Zelllinie verringert deren Infizierbarkeit, insbesondere beim FIV-Subtyp D. Daher soll zur Erzielung optimaler FIV-Infektionsraten oder für die Verwendung bei VN-Tests die Anzahl der Passagen weniger als etwa 35 betragen. Eine halbquantitative PCR und Viruskern-Antigenanalysen zeigten, dass sämtliche mit FIV belasteten Zelllinien signifikant mit individuellen FIV-Stämmen infiziert waren.
  • Eine IL-2-unabhängige feline Zelllinie, die gegenüber einer FIV-Infektion empfindlich ist, wurde ebenfalls aus FeT-1C-Zellen entwickelt. Diese Zelllinie mit der Bezeichnung FeT-J kann mit FIV durch gemeinsame Züchtung unter Verwendung von FIV-infizierten Medien oder Zellen infiziert werden. Beispielsweise wurde eine FIVBang-infizierte Fet-1C-Zelllinie in Abwesenheit von IL-2 gemeinsam mit nicht-infizierten FeT-J-Zellen gezüchtet, um eine IL-2-unabhängige FIVBang-infizierte FeT-J-Zelllinie (mit der Bezeichnung Bang/FeT-J) bereitzustellen. Beim Infektionsverfahren unter gemeinsamer Züchtung wurden Bang/FeT-1C-Zellen mit nicht-infizierten FeT-J-Zellen in einem Verhältnis von etwa 2:1 bis etwa 10:1 (infiziert:nicht-infiziert) vereinigt. Das Zellgemisch wurde im Medium in Abwesenheit von IL-2 mehrere Tage gezüchtet. Man ließ die Fet-1C-Zellen absterben. Die verbleibenden Zellen bestanden aus FIVBang-infizierten FeT-J-Zellen. Somit können FIV-infizierte FeT-1C-Zellen zur Infektion von FeT-J-Zellen und zur Bereitstellung von IL-2-unabhängigen FeT-J-Zelllinien, die mit verschiedenen FIV-Subtypen infiziert sind, verwendet werden. Das Verfahren zur gemeinsamen Züchtung mit FIV-infizierten FeT-1C-Zellen führte zu IL-2-unabhängigen FeT-J-Zelllinien, die mäßige bis hohe Konzentrationen an verschiedenen FIV-Subtypen erzeugen.
  • Die FeT-1C-Zelllinie wurde auch mit FIVShi infiziert und einer ausgedehnten Passagierung zur Erzeugung einer IL-2-abhängigen Zelllinie mit der Bezeichnung Shi/FeT-1C unterzogen. Die Shi/FeT-1C-Zelllinie wurde später gemeinsam mit FeT-J in Abwesenheit von IL-2 gezüchtet. Die erhaltene IL-2-unabhängige FIVShi-infizierte Zelllinie erhielt die Bezeichnung Shi/FeT-J. Die IL-2-unabhängige Shi/FeT-J-Zelllinie erzeugt höhere Konzentrationen an FIVShi als die IL-2-abhängige Shi/FeT-1C-Zelllinie (1).
  • Die Entwicklung einer FeT-J-Zelllinie, die mit FIVBang infiziert ist, wurde auch ohne die Verwendung der FeT-1C-Zelllinie durchgeführt. Die FeT-J-Zelllinie wurde direkt mit zellfreiem FIVBang-Inokulum infiziert und eingehend mit IL-2 passagiert. Die erhaltene IL-2-unabhängige FIVBang-Erzeuger-Zelllinie erhielt die Bezeichnung Bang/FeT-J. Die Bang/FeT-J-Zelllinie erzeugte höhere Konzentrationen an FIVBang als die IL-2-abhängige Bang/FeT-1C-Zelllinie, die durch Infektion der FeT-1C-Zelllinie mit FIVBang entwickelt wurde (1).
  • Literaturverzeichnis
    • Pedersen et al (1987) Science 235:790–793.
    • Yamamoto et al (1988a) Leukemia, December Supplement 2:2045–215S
    • Yamamoto et al (1988b) Am. J. Vet. Res. 49:1246–1258.
    • Ackley et al (1990) J. Virol. 64:5652–5655.
    • Olmsted et al (1989a) Proc. Nat. Acad. Sci. 86:2448–2452.
    • Olmsted et al (1989b) Proc. Nat. Acad. Sci. 86:8088–8092.
    • Talbott et al (1989) Proc. Nat. Acad. Sci. USA 86:5743–5747.
    • Hosie and Jarrett (1990) AIDS 4:215–220.
    • Sodora et al (1994) J. Virol. 68:2230–2238.
    • Rigby et al (1993) J. Gen. Virol. 74:425–436.
    • Kakinuma et al (1995) J. Virology 69(6):3639–3646.
    • Murphy and Kingsbury (1990) "Virus Taxonomy", In Fields Virology, 2nd Ed., B.N. Fields, D.M. Knipe et al eds, Raven Press, New York, Chapter 2, pp. 9–36.
    • Louwagie et al (1993) AIDS 7:769–780.
    • Rey et al (1984) Biochem. Biophys. Res. Commun. 21:1247–1253.

Claims (18)

  1. Nicht-infizierte, IL-2-unabhängige, von Katzen abgeleitete T-Zelllinie.
  2. Zelllinie nach Anspruch 1 mit den identifizierenden Eigenschaften der Zelllinie mit der Bezeichnung FeT-J, die unter der ATCC-Hinterlegungsnummer CRL 11967 hinterlegt worden ist.
  3. Zelllinie nach Anspruch 1 mit der Bezeichnung FeT-J, die unter der ATCC-Hinterlegungsnummer CRL 11967 hinterlegt worden ist.
  4. Verfahren zur Herstellung einer FIV-infizierten Katzen-T-Zelllinie, das die Infektion einer T-Zelle aus einer T-Zelllinie gemäß einem der vorstehenden Ansprüche mit einem FIV umfasst.
  5. Verfahren nach Anspruch 4, wobei das FIV den Untertyp A, B, C oder D aufweist.
  6. Verfahren nach Anspruch 4, wobei es sich beim FIV um einen Stamm handelt, der aus FIVDix, FIVUK8, FIVBang, FIVAom1, FIVAom2, FIVPet und FIVShi ausgewählt ist.
  7. Verfahren nach Anspruch 4, wobei die Zelle mit zwei oder mehr verschiedenen Stämmen von FIV infiziert wird.
  8. Verfahren nach Anspruch 7, wobei die FIV-Stämme aus FIVDix, FIVUK8, FIVBang, FIVAom1, FIVAom2, FIVPet und FIVShi ausgewählt ist.
  9. Verfahren nach einem der Ansprüche 4 bis 8, wobei die FIV-infizierte Zelle ein FIV-Protein exprimiert.
  10. Verfahren nach Anspruch 9, wobei das FIV-Protein ein FIV-Hüllglycoprotein oder ein Fragment davon umfasst.
  11. Verfahren nach Anspruch 10, wobei das FIV-Hüllglycoprotein die in SEQ ID NO. 1 oder SEQ ID NO. 2 dargestellte Aminosäuresequenz umfasst.
  12. Verfahren nach Anspruch 9, wobei das FIV-Protein durch FIVenv, FIVgag/pro oder FIVenv-gag/pro kodiert wird.
  13. Verfahren nach Anspruch 4, wobei die Zelle mit dem FIV-Virusstamm FIVBang infiziert wird.
  14. Verfahren nach Anspruch 4, wobei die FIV-infizierte Zelllinie die identifizierenden Eigenschaften der Zelllinie mit der Bezeichnung Bang/FeT-J aufweist und unter der ATCC-Hinterlegungsnummer CRL 11975 hinterlegt worden ist.
  15. Verfahren nach Anspruch 4, wobei es sich bei der FIV-infizierten Zelllinie um die Zelllinie mit der Bezeichnung Bang/FeT-J handelt, die unter der ATCC-Hinterlegungsnummer CRL 11975 hinterlegt worden ist.
  16. Verfahren nach einem der Ansprüche 4 bis 15, das zusätzlich die Inaktivierung des FIV, das die FIV-infizierte Zelle infiziert, umfasst.
  17. Verfahren nach einem der Ansprüche 4 bis 15, das zusätzlich die Abschwächung des FIV, das die FIV-infizierte Zelle infiziert, umfasst.
  18. Verfahren nach Anspruch 16 oder 17, wobei die Inaktivierung oder Abschwächung die Einwirkung von Paraformaldehyd, Formalin, Phenol, UV-Licht oder erhöhten Temperaturen auf die FIV-infizierte Zelle umfasst.
DE69636440T 1995-08-25 1996-08-23 IL-2 unabhängige T-Zellen der Katze Expired - Lifetime DE69636440T4 (de)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US51938695A 1995-08-25 1995-08-25
US519386 1995-08-25

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE69636440T2 true DE69636440T2 (de) 2006-12-21
DE69636440T4 DE69636440T4 (de) 2007-09-27

Family

ID=24068097

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE69636440T Expired - Lifetime DE69636440T4 (de) 1995-08-25 1996-08-23 IL-2 unabhängige T-Zellen der Katze
DE69636440A Expired - Lifetime DE69636440D1 (de) 1995-08-25 1996-08-23 IL-2 unabhängige T-Zellen der Katze
DE69634820T Expired - Lifetime DE69634820T2 (de) 1995-08-25 1996-08-23 Impfstoff gegen mehrere fiv-subtypen

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE69636440A Expired - Lifetime DE69636440D1 (de) 1995-08-25 1996-08-23 IL-2 unabhängige T-Zellen der Katze
DE69634820T Expired - Lifetime DE69634820T2 (de) 1995-08-25 1996-08-23 Impfstoff gegen mehrere fiv-subtypen

Country Status (17)

Country Link
US (5) US5846825A (de)
EP (2) EP0848615B1 (de)
JP (4) JP4142741B2 (de)
KR (2) KR100502568B1 (de)
AT (2) ATE335809T1 (de)
AU (3) AU728750B2 (de)
BR (1) BR9610343A (de)
CA (1) CA2230029C (de)
DE (3) DE69636440T4 (de)
DK (2) DK0848615T3 (de)
ES (2) ES2269042T3 (de)
HK (1) HK1038584A1 (de)
IL (3) IL163873A0 (de)
NZ (3) NZ502144A (de)
PL (2) PL188041B1 (de)
PT (2) PT848615E (de)
WO (1) WO1997007817A1 (de)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT848615E (pt) * 1995-08-25 2005-10-31 Univ Florida Vacinas de fiv de multiplos subtipos
US6254872B1 (en) * 1995-08-25 2001-07-03 University Of Florida Multi-subtype FIV vaccines
US6458528B1 (en) * 1998-05-15 2002-10-01 Idexx Laboratories, Inc. Diagnosis of feline immunodeficiency virus infection using ENV/GAG polypeptide markers
WO2002067984A2 (en) * 2001-02-22 2002-09-06 University Of Florida Materials and methods for detecting, preventing, and treating hiv and fiv retroviral infection
EP2298343A1 (de) 2001-05-10 2011-03-23 Wyeth LLC Zusammensetzung und Verfahren zur Erhöhung der Zelldichte in Zellkulturen, die mit dem Lentivirus infiziert sind
EP1622644A2 (de) * 2003-05-12 2006-02-08 University Of Florida Research Foundation, Inc. Materialien und verfahren zur impfung gegen fiv infektionen
US7658927B2 (en) * 2003-05-12 2010-02-09 University Of Florida Research Foundation, Inc. Materials and methods for immunizing against FIV infection
AU2005267607B8 (en) 2003-09-11 2009-07-16 Idexx Laboratories, Inc. Method and device for detecting feline immunodeficiency virus
WO2005026733A1 (en) 2003-09-11 2005-03-24 Idexx Laboratories, Inc. Method and device for detecting feline immunodeficiency virus
JP4717009B2 (ja) 2003-12-18 2011-07-06 アイデックス ラボラトリーズ インコーポレイテッド ネコ免疫不全ウイルスの検出のための方法と装置
EP1723425B1 (de) 2004-02-19 2011-04-06 Idexx Laboratories, Inc. Verfahren und vorrichtung zum nachweis von katzen-immunschwächevirus
JP4866848B2 (ja) 2004-06-30 2012-02-01 アイデックス ラボラトリーズ インコーポレイテッド ネコ免疫不全ウイルス（ｆｉｖ）のｅｎｖタンパク質のｖ３領域に由来するペプチドの使用を含むｆｉｖを検出するための方法および装置
AU2005267605B2 (en) * 2004-06-30 2009-03-26 Idexx Laboratories, Inc. Method and device for detecting feline immunodeficiency virus
US7291338B2 (en) 2005-03-09 2007-11-06 Idexx Laboratories, Inc. Method and device for detecting feline immunodeficiency virus
AU2008280898B2 (en) * 2007-07-25 2013-06-27 The Kitasato Institute Test method on feline vaccinated with feline immunodeficiency virus vaccine, and antigen for use in the test
WO2011123781A1 (en) 2010-04-02 2011-10-06 Idexx Laboratories, Inc. Detection of feline immunodeficiency virus
US8596026B2 (en) * 2010-08-05 2013-12-03 Kraft Foods Group Brands Llc Vacuum flow wrap packaging system and method of packaging

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5118602A (en) 1987-08-26 1992-06-02 The Regents Of The University Of California Feline T-lymphotropic lentivirus assay
US6107077A (en) 1987-08-26 2000-08-22 Yamamoto; Janet K. Feline lymphoid cell lines capable of producing FIV for FIV diagnostics and vaccines
CA1341439C (en) * 1987-08-26 2003-09-23 Niels C. Pedersen Feline t-lymphotropic lentivirus
AU8007991A (en) * 1990-06-29 1992-01-23 Daniel Zagury Methods of inducing immune response to aids virus
WO1993001278A1 (en) * 1991-07-05 1993-01-21 The Regents Of The University Of California Feline lymphoid cell lines capable of producing fiv
GB9219936D0 (en) * 1992-09-21 1992-11-04 Pitman Moore Inc Vaccines
EP0670901A1 (de) * 1993-03-11 1995-09-13 Akzo Nobel N.V. Polypeptidfragment das gegen immunoschwäche virus der katze neutralizieriende antikörper induziert
IT1276509B1 (it) * 1995-03-31 1997-10-31 Istituto Superiore Della Sanit Vaccino per la profilassiimmunitaria dell'infezione da virus della immunodeficienza felina del gatto domestico.
US6254872B1 (en) 1995-08-25 2001-07-03 University Of Florida Multi-subtype FIV vaccines
PT848615E (pt) * 1995-08-25 2005-10-31 Univ Florida Vacinas de fiv de multiplos subtipos

Also Published As

Publication number Publication date
US7311921B2 (en) 2007-12-25
BR9610343A (pt) 1999-12-21
AU1972501A (en) 2001-05-03
DE69634820T2 (de) 2006-03-23
DE69636440D1 (de) 2006-09-21
HK1038584A1 (en) 2002-03-22
AU2004203358B2 (en) 2007-10-25
AU2004203358A1 (en) 2004-08-19
KR19990044093A (ko) 1999-06-25
EP1090985A1 (de) 2001-04-11
PL186706B1 (pl) 2004-02-27
NZ316347A (en) 2000-02-28
ATE335809T1 (de) 2006-09-15
DK0848615T3 (da) 2005-10-03
US20080145381A1 (en) 2008-06-19
IL123264A0 (en) 1998-09-24
ES2242967T3 (es) 2005-11-16
PL325376A1 (en) 1998-07-20
IL123264A (en) 2006-09-05
JP5339687B2 (ja) 2013-11-13
PL188041B1 (pl) 2004-11-30
DE69636440T4 (de) 2007-09-27
EP1090985B1 (de) 2006-08-09
KR20040047812A (ko) 2004-06-05
NZ502144A (en) 2001-09-28
PT1090985E (pt) 2006-12-29
NZ513388A (en) 2006-02-24
AU6855596A (en) 1997-03-19
ES2269042T3 (es) 2007-04-01
CA2230029A1 (en) 1997-03-06
EP0848615A1 (de) 1998-06-24
US5846825A (en) 1998-12-08
JP2005261426A (ja) 2005-09-29
WO1997007817A1 (en) 1997-03-06
KR100482616B1 (ko) 2005-09-02
PT848615E (pt) 2005-10-31
JP2013079286A (ja) 2013-05-02
KR100502568B1 (ko) 2005-07-20
AU772353B2 (en) 2004-04-22
CA2230029C (en) 2012-03-27
EP0848615B1 (de) 2005-06-08
IL163873A0 (en) 2005-12-18
JPH11513031A (ja) 1999-11-09
US6605282B2 (en) 2003-08-12
JP4142741B2 (ja) 2008-09-03
ATE297218T1 (de) 2005-06-15
US6447993B1 (en) 2002-09-10
JP2007284442A (ja) 2007-11-01
JP4413132B2 (ja) 2010-02-10
US20040067242A1 (en) 2004-04-08
US20020172941A1 (en) 2002-11-21
DE69634820D1 (de) 2005-07-14
AU728750B2 (en) 2001-01-18
DK1090985T3 (da) 2006-12-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69636440T2 (de) IL-2 unabhängige T-Zellen der Katze
US5275813A (en) Methods and compositions for vaccinating against feline immunodeficiency virus
AU664049B2 (en) Type C-like human retrovirus linked to multiple sclerosis (MS)
Brown et al. Feline immunodeficiency virus infects both CD4+ and CD8+ T lymphocytes
US20090263417A1 (en) Multi-subtype FIV vaccines
Schwarz et al. Properties of mouse leukemia viruses XVI. Suppression of spontaneous fatal leukemias in AKR mice by treatment with broadly reacting antibody against the viral glycoprotein gp 71
US6107077A (en) Feline lymphoid cell lines capable of producing FIV for FIV diagnostics and vaccines
Fleischer et al. Mumps virus replication in human lymphoid cell lines and in peripheral blood lymphocytes: preference for T cells
Fenyö et al. Broad cross-neutralizing activity in serum is associated with slow progression and low risk of transmission in primate lentivirus infections
DE69232650T2 (de) Vakzine gegen katzenleukämievirus
VOWELS et al. Natural killer cell activity of rhesus macaques against retrovirus-pulsed CD4+ target cells
WO1993001278A1 (en) Feline lymphoid cell lines capable of producing fiv
Tam et al. Cytotoxic activities of monoclonal antibodies against the envelope proteins of murine leukemia virus
Avidan et al. Effect of non-H-2-linked genes on anti-virus immune responses and long-term survival in mice persistently infected with E-55+ murine leukemia virus
Gillette et al. Virus-dependent cytostatic activity to mammary tumor cells of lymphocytes from normal mice
Capobianchi et al. Treatment of HIV-infected fibroblasts with human leukocyte antigen (HLA)-DR-inductive cytokines leads to infectious virions with newly acquired HLA-DR
Stephenson et al. Subacute Sclerosing Panencephalitis: Characterization of the Etiological Agent and Its Relationship to the Morbilli Viruses
WO1992008784A1 (en) Human t-lymphotropic virus type 2 from guaymi indians in panama
OMESSA et al. Cells of Cynomolgus Macaques during Acute
MXPA98001570A (en) Feline immunodeficiency vaccines of subtipos multip