ES2262506T3 - Aferesis leucocitaria sanguinea para el tratamiento del vih. - Google Patents
Aferesis leucocitaria sanguinea para el tratamiento del vih.Info
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Abstract
Uso de perlas de acetato de celulosa como soporte absorbente en la producción de un agente para el tratamiento por aféresis de un paciente infectado por el VIH.
Description
Aféresis leucocitaria sanguínea para el
tratamiento del VIH.
Esta invención se refiere a un método que
implica la aféresis leucocitaria de la sangre para el tratamiento de
una enfermedad.
Desde hace mucho tiempo, se conoce la aféresis
terapéutica como una estrategia alternativa para el tratamiento de
trastornos. La técnica conlleva la eliminación de las células o
proteínas que están implicadas en la patogénesis del trastorno, por
ejemplo el factor reumatoide, los complejos inmunológicos y otros
mediadores humorales en el plasma (1, 2). Los procedimientos que
emplean la eliminación selectiva de glóbulos rojos o componentes
del plasma, sin utilizar los fluidos de sustitución, están asociados
a efectos secundarios mínimos (1). Es posible un método ambulatorio
para el enfermo, el cual es más conveniente para el paciente y
reduce el coste del procedimiento (2). También se reducen muchos los
efectos secundarios inaceptables de la farmacoterapia crónica
usando la técnica.
EP-A-0-319961
describe un método para la eliminación selectiva de los granulocitos
de la sangre poniendo la sangre en contacto con un soporte
adsorbente con una afinidad superior para los granulocitos que para
los linfocitos. Esa invención se refiere al tratamiento del cáncer.
En esta solicitud se describe también un aparato para realizar el
método. Un aparato similar está descrito en US 5.725.768.
JP 0193 481 y US 5567 443 describen un método
para el tratamiento de enfermedades inflamatorias poniendo la
sangre de un paciente en contacto con un soporte adsorbente con una
afinidad superior para las células inflamatorias (granulocitos y
monocitos) que su afinidad para los linfocitos. Se entiende que el
método es útil para el tratamiento del síndrome de dificultad
respiratoria del adulto, la artritis reumatoide, las enfermedades
autoinmunológicas, las enfermedades alérgicas y los trastornos de
reflujo después del infarto de miocardio.
Bruisten et al. (Transfusión,
1990;30;833-837) describió la eficiencia de la
filtración de los leucocitos y un proceso de
congelación-descongelación para la eliminación de
las células infectadas con el VIH de la sangre.
El SIDA es una condición de inmunodeficiencia
con peligro para la vida provocado por el VIH (virus de
inmunodeficiencia humana). Después de la confirmación y aparición de
la infección del VIH, el nivel de mortalidad es altísimo. Aún no se
ha establecido ninguna estrategia de tratamiento eficaz para el
tratamiento del SIDA y, debido a un periodo latente largo, también
resulta difícil establecer una medida eficaz para la prevención de
la infección.
Después de la infección con el VIH, los
anticuerpos anti-VIH aparecen en la sangre, en
general al cabo de 6 a 8 semanas. La deficiencia o perturbación del
sistema inmunitario surge produciendo finalmente el SIDA. Por
motivos de conveniencia, se clasifica la fase intermedia como
complejo asociado al SIDA (CAS). Determinadas células infectadas con
el VIH incuban el virus y sirven de depósitos del VIH. Tales
células incluyen las células mononucleares (monocitos/macrófagos) y
los linfocitos CD4^{+} en reposo. Mientras el virus se encuentra
dentro de estas células, está protegido de su erradicación por el
sistema inmunitario. El virus también está protegido del contacto
con los medicamentos administrados y como consecuencia resulta
difícil tratar la condición de forma eficaz.
Los síntomas principales del SIDA incluyen
fiebre, linfadenoma persistente sistémico, la pérdida de peso
(caquexia) y diarrea. Además, se pueden desarrollar enfermedades
infecciosas oportunistas y tumores malignos y agravar profundamente
la condición del paciente. La neuropatía también puede convertirse
en un problema serio y, dependiendo del paciente, también puede
aparecer una enfermedad del sistema nervioso craneal.
Basándose en una evaluación inmunológica de una
enfermedad extendida provocada por el VIH (SIDA), la condición está
caracterizada por una degradación profunda de la respuesta
inmunitaria, incluyendo la disminución de los linfocitos CD4^{+}
T, la producción no regulada de citoquina, la producción mayor de
citoquinas proinflamatorias o inmunosupresoras tal como
TNF-\alpha, IL-1\beta,
IL-6 y IL-10 por los glóbulos rojos
periféricos (3-6) incluyendo los monocitos (3) y
también por granulocitos (4) y la susceptibilidad mayor de las
células inmunológicas a la apoptosis. Se cree que los antígenos del
VIH tal como gp120 ligados a los inmunocomplejos inducen la
apoptosis de las células CD4^{+} (7-12). Se dice
que las TNF-\alpha, IL-1\beta,
IL-6 promueven la replicación del VIH (3). A la vez,
hay una degradación profunda de la capacidad de los monocitos de
los pacientes infectados por el VIH de generar
IL-12 (una citoquina inmunorreguladora). Por lo
tanto, en los individuos sanos, los monocitos producen
principalmente IL-12, mientras que en los individuos
infectados por el VIH, los monocitos producen principalmente
IL-10. Se mostró que la IL-10 tiene
un papel fundamental en los cambios mencionados anteriormente en la
producción de las citoquinas (5, 6). En este contexto, también es
importante indicar que la IL-2 y la
IL-12 reducen la susceptibilidad de las células
CD4^{+} de los pacientes infectados por el VIH a la apoptosis,
mientras que la IL-10 aumenta dicha
susceptibilidad
(13-17).
(13-17).
Actualmente, la estrategia para el tratamiento
de la infección del VIH principalmente consiste en el tratamiento
antirretroviral de alta actividad (TAAA) que incluye un inhibidor de
proteasa. No obstante, mientras en algunos pacientes, el TAAA ha
mostrado que puede aumentar la concentración de las células
CD4^{+} y suprimir la carga viral del VIH en el plasma a niveles
no detectables, hasta ahora no se conoce ningún tratamiento que
pueda actuar sobre los depósitos celulares del VIH, por ejemplo, en
las células incluyendo las células mononucleares
(monocitos/macrófagos) y los linfocitos CD4^{+} en reposo. Estas
células sirven como sitios para un depósito del VIH y como sitios
para la replicación y diseminación del VIH. Esto significa que
cuando se termina el tratamiento, es muy posible que ocurriera una
recaída atribuible a la propagación del VIH desde las células de
depósito mencionadas y la infección de novo. En vista de
esta información y con el fin de eliminar completamente el VIH, se
considera esencial la eliminación de las células infectadas en
reposo (depósitos de VIH latentes). Sin embargo, actualmente, no
existe ningún medicamento que puede actuar sobre los depósitos
celulares del VIH, la carga de ADN de HIV-1 proviral
en las células mononucleares infectadas de forma latente
(macrófagos/monocitos) y los linfocitos CD4^{+} en reposo.
El virus de la hepatitis C (VHC) infecta a las
células, por ejemplo las células hepáticas, y posteriormente
permanece en estas células y en los leucocitos durante un periodo
aparentemente latente. Actualmente, no hay ningún medicamento que
pueda actuar sobre los depósitos celulares del VHC en estas células
infectadas de forma latente.
El micobacterium leprae infecta las células
mononucleares y entonces permanece en ellas. Los tratamientos con
medicamentos actuales, en gran parte, resultan ineficaces contra el
organismo cuando se encuentra dentro de las células.
La presente invención se basa en la observación
sorprendente de que se pueden extraer de forma selectiva los
leucocitos infectados con el VIH de la sangre.
La presente invención prevé el uso de perlas de
acetato de celulosa como un soporte adsorbente en la producción de
un agente para el tratamiento mediante aféresis de un paciente
infectado por el VIH.
En la práctica, la presente invención adsorbe
selectivamente los leucocitos infectados, defectuosos y activados
incluyendo las células mononucleares, es decir los
macrófagos/monocitos, y también los linfocitos activados, por
ejemplo los linfocitos CD4^{+}, incluyendo los linfocitos
CD4^{+} en reposo. Al parecer los leucitos normales, es decir, no
infectados, no activados y no defectuosos, no se adhieren al soporte
adsorbente. Esto resulta sorprendente, ya que los usos anteriores
de la aféresis se basaron en el hecho de que los granulocitos o las
células inflamatorias, clasificadas como granulocitos y monocitos,
fueron adsorbidos selectivamente en preferencia a los linfocitos. A
diferencia de las observaciones anteriores que muestran que la
adsorción selectiva se basa en el tipo de célula, hemos descubierto
que la infección de un leucocito con el VIH ocasiona la adsorción a
una columna de aféresis sea cual sea el tipo de leucocito.
Actualmente, creemos que la infección da como
resultado la unión selectiva de una población de leucocitos a un
soporte adsorbente. En nuestra opinión esto se debe a un cambio en
una propiedad de los leucocitos, por ejemplo un cambio en la
población receptora de la superficie celular, o por ejemplo un
cambio en los tipos de receptores o los números de receptores. Un
cambio en un leucocito provocado por la infección puede ser
considerado como la activación del leucocito, o se puede considerar
el leucocito como defectuoso. No obstante, se pueden activar o
hacer defectuoso los leucocitos de otras maneras que den como
resultado la misma unión o una unión análoga a la de la infección.
La infección, activación y/o defectos pueden dar como resultado los
mismos cambios de la superficie celular o cambios similares, por
ejemplo los cambios pueden ser en el mismo tipo de receptor. No
obstante, puede que éste no sea el caso, y el método de la invención
no depende del mecanismo exacto de la adsorción selectiva de los
leucocitos infectados, activados y/o defectuosos.
Mientras lo que se mencionó anteriormente
constituye la teoría actual para el funcionamiento de la invención,
el solicitante no está limitado por esta teoría.
En la práctica de la invención, ocurre tanto los
efectos descritos anteriormente con relación a la eliminación de
los leucocitos como la recuperación inmunológica.
La recuperación inmunológica denota una mejora
en uno o más aspectos del sistema inmunitario. Un aspecto de la
recuperación inmunológica es una mejora inmunológica. El VIH tiene
un efecto particularmente profundo en el sistema inmunitario de un
individuo.
Otro aspecto de la recuperación inmunológica es
la reconstitución inmunológica provocada por la eliminación de los
leucocitos y la sustitución de dichos leucocitos con otros nuevos.
Otro aspecto más de la recuperación inmunológica puede ser el
resultado de la generación reducida de las citoquinas
inmunosupresoras (TNF).
Parece que determinados aspectos de la
recuperación inmunológica son el resultado de la eliminación de los
leucocitos infectados mientras que otros aspectos pueden ser
completa o parcialmente independientes de la eliminación de los
leucocitos.
En lo que concierne el SIDA, se considera el
recuento de leucocitos CD4 como indicativo del estado del sistema
inmunitario de un sujeto. Cuando la sangre de una persona con el
VIH positivo entra en contacto con un soporte tal como se ha
definido anteriormente el recuento de CD4 de la persona aumenta,
demostrando así una mejora inmunológica, y por lo tanto la
recuperación inmunológica. La presente invención también prevé el
uso de un soporte adsorbente descrito anteriormente en la
producción de un agente o adsorbente para el uso en la aféresis
para los distintos aspectos de la recuperación inmunológica como se
ha descrito anteriormente.
Como se ha explicado anteriormente, el VIH
infecta los macrófagos/monocitos y los linfocitos CD4^{+}. Los
diversos viruses pueden infectar diversas poblaciones de leucocitos.
Los macrófagos/monocitos pueden ser particularmente susceptibles a
la infección debido a su actividad fagocítica. No obstante,
diversos viruses pueden infectar diversas poblaciones de
linfocitos. EL VIH infecta los linfocitos CD4^{+} ya que el virus
entra por medio del receptor CD4. Otros viruses pueden entrar en
los linfocitos por medio de receptores diferentes y por lo tanto
infectar la población de linfocitos que posea ese receptor en
particular.
La invención también prevé, en la práctica, la
eliminación (purgación) de los leucocitos infectados de los sitios
de reposo en un sujeto. Se conoce este tipo de eliminación de
células comúnmente en la técnica como "purgación". Tales
células infectadas incluyen las células mononucleares
(macrófagos/monocitos) y los linfocitos CD4^{+}. El resultado de
la purgación de células infectadas de los sitios de reposo es que
el virus dentro de las células se vuelve susceptible a la
farmacoterapia.
Se deducirán las características y ventajas
mencionadas arriba y otras de la presente invención de la siguiente
descripción y de las reivindicaciones anexas, analizadas junto con
los dibujos anexos, donde:
La Figura 1 indica los componentes estructurales
de una columna de aféresis leucocitaria según una forma de
realización de la invención;
La Figura 2 ilustra los componentes de un
dispositivo de aféresis leucocitaria según una forma de realización
de la invención.
La Figura 3 a la Figura 14 muestran los cambios
biológicos en los pacientes que se someten al tratamiento usando un
método según una forma de realización de la invención.
El término "soporte adsorbente" se utiliza
de aquí en adelante para indicar un material capaz de adsorber las
células por su superficie.
El soporte adsorbente empleado según la
invención tiene una afinidad más elevada para los leucocitos
infectados, activados y/o defectuosos que para los leucocitos no
infectados, no activados o no defectuosos, mientras que no afecta de
forma perjudicial a la sangre que entra en contacto con el
adsorbente.
La eficiencia con la que un tipo de célula
particular es adsorbido por un soporte adsorbente particular es
calculada de la forma siguiente:
Eficiencia de
atrapamiento (%) = \frac{N^{o} \ de \ células \ adsorbidas}{N^{o} \
de \ células \ expuestas \ al \ soporte \ adsorbente} x
100
Los recuentos diferenciales de leucocitos
(recuentos de un tipo de leucocito en particular) son determinados
por un contador diferencial de leucocitos de laboratorio estándar,
por ejemplo TMS H-1 (Technicon). Se calcula el
número de células de un tipo de leucocito particular atrapado por
el soporte en la columna restando el recuento de leucocitos
apropiado en la sangre en la salida de la columna del recuento de
leucocitos correspondiente en la sangre en la entrada de la
columna. El número de células expuestas al soporte es calculado por
el caudal (ml por minuto), tiempo de flujo (tiempo de aféresis) y el
recuento de leucocitos apropiado en la entrada.
No se impone ninguna limitación en particular en
la elección de la forma y el tamaño del soporte adsorbente. No
obstante, es preferible que el soporte adsorbente tenga un tamaño
distinguible de los glóbulos rojos y una forma que tenga una amplia
área de contacto con la sangre con la que va a entrar en contacto,
para permitir un contacto eficaz. Por ejemplo, el soporte
adsorbente puede adoptar la forma de una perla teniendo un diámetro
de aproximadamente 0,1-10 mm. De manera adecuada,
las perlas pueden tener un diámetro en el intervalo de 0,2 a 5,0
mm. Preferiblemente, las perlas pueden tener un diámetro en el
intervalo de 0,5 a 4,0 mm. Más preferiblemente, las perlas pueden
tener un diámetro en el intervalo de 1,0 a 3,0 mm, por ejemplo de
2,0 mm.
La eficiencia de la eliminación de las células
por el soporte adsorbente puede ser mejorada si el soporte
adsorbente tiene una superficie rugosa. Este es el caso en
particular cuando la rugosidad de la superficie del soporte
adsorbente tiene una línea central de altura media Ra definida
según el estándar japonés e industrial 80601-1982,
de 0,2 \mum a 10 \mum y un espaciamiento medio Sm de
irregularidad supercial en el intervalo de 5 \mum a 200 \mum. La
eficacia de una soporte de aféresis adsorbente con tales
características de superficie ha sido descrita en US 5.593.586 y un
método para producir un soporte adsorbente de este tipo ha sido
descrito en US 5.525.279. Es preferible que las perlas de acetato de
celulosa tengan un diámetro en el intervalo de aproximadamente
0,1-10 mm, por ejemplo, de 0,2 a 5,0 mm, por
ejemplo de 0,5 a 4,0 mm, por ejemplo de 1,0 a 3,0 mm, por ejemplo
2,0 mm.
La eficacia de la eliminación de las células por
un soporte adsorbente de acetato de celulosa en general es mejorada
si el soporte adsorbente tiene una superficie rugosa,
particularmente de la manera descrita anteriormente.
Un dispositivo para eliminar leucocitos para
usar con la presente invención comprende medios para hacer que la
sangre que contiene los leucocitos infectados, activados y/o
defectuosos entre en contacto con el soporte adsorbente de tal
manera que la sangre sea tratada con el soporte y a continuación
recuperada. Es preferible que la sangre del paciente en tratamiento
sea sangre periférica. El dispositivo también puede incluir medios
para transportar la sangre de vuelta al paciente. Uno o ambos medios
de transferencia puede incluir un medio de bombeo. Uno o ambos
medios de transferencia puede incluir medios para medir la
velocidad de flujo y/o la presión de la sangre dentro de los medios
de transferencia. Opcionalmente, unos medios que sirvan para
administrar agentes farmacéuticos a la sangre pueden estar
presentes en uno o ambos medios de transferencia.
Una columna de aféresis leucocitaria para usar
con la invención es una columna rellenada con el soporte adsorbente
en forma de perlas bañadas en líquido fisiológico, en particular,
suero fisiológico estéril. Se suministra la sangre a la columna por
medio de un conducto de entrada de sangre, y la sangre sale de la
columna por medio de un conducto de salida de sangre.
Opcionalmente, en conducto de entrada de sangre está conectada a una
vena adecuada en un paciente, tal como una vena en un brazo o una
mano, en general por medio de un medio de transporte, por ejemplo
un tubo. De forma similar, el conducto de salida de sangre puede
estar conectado a otra vena adecuada en un paciente, tal como una
vena en un brazo o una mano.
El protocolo exacto para el uso de un
dispositivo según la presente invención y el método de su uso será
a juicio clínico en cada caso individual.
El caudal de sangre que pasa a través de un
dispositivo de aféresis leucocitaria según la presente invención
puede estar en el intervalo de 5 a 200 ml/min. Preferiblemente, es
de 20 a 50 ml/min. Cuando el caudal es elevado, la hemólisis debida
a una desviación puede resultar desventajosa. La duración de la
aféresis puede estar en el intervalo de 10 minutos a 10 horas. La
duración exacta será a juicio clínico en cada caso individual. La
frecuencia de tratamiento también será a juicio clínico en cada
caso individual. Normalmente, se puede utilizar un régimen de una
aféresis de una duración de una hora una vez por semana, por
ejemplo, con un caudal de 30 ml/min.
Cuando la invención es puesta en práctica
ocurren tanto los efectos descritos anteriormente relacionados a la
eliminación de los leucocitos como la recuperación
inmunológica.
La recuperación inmunológica denota una mejora
en uno o más aspectos del sistema inmunitario. Un aspecto de la
recuperación inmunológica es una mejora inmunológica. El VIH tiene
un efecto particularmente profundo en el sistema inmunitario de un
sujeto.
Otro aspecto de la recuperación inmunológica es
la restitución inmunitaria que resulta de la eliminación de los
leucocitos y su sustitución con leucocitos nuevos. Otro aspecto más
de la recuperación inmunológica puede ser un resultado de la
generación reducida de las citoquinas inmunosupresoras
(TNF-\alpha).
Al parecer, determinados aspectos de la
recuperación inmunológica resultan de la eliminación de los
leucocitos infectados mientras que otros aspectos puede ser completa
o parcialmente independientes de la eliminación de los
leucocitos.
En el caso del SIDA, se considera el recuento de
leucocitos CD4 como indicativo del estado del sistema inmunitario
de un sujeto. Cuando la sangre de una persona con el VIH positivo
entra en contacto con un soporte tal como se ha definido
anteriormente el recuento de CD4 de la persona aumenta, demostrando
así una mejora inmunológica, y por lo tanto la recuperación
inmunológica.
En la práctica, la presente invención tiene los
siguientes efectos en el caso del tratamiento del SIDA cuando la
sangre entra en contacto con el acetato de celulosa:
- a)
- Los leucocitos infectados incluyendo los macrófagos/monocitos son eliminados de la sangre y como consecuencia de esta acción la producción de leucocitos aumenta y se movilizan los leucocitos infectados de forma latente desde los sitios de reposo en el paciente.
- b)
- Como resultado de la acción descrita en (a), se consigue una reducción en el plasma del ARN del VIH-1 y una reducción en el ADN total del VIH-1 (incluyendo la carga de ADN proviral del HIV-1 integrado en las células infectadas de forma latente).
- c)
- La eliminación de los leucocitos infectados y la mayor producción y movilización de los leucocitos dan como resultado una reducción en el número de células T de memoria en reposo (CD4^{+}/CD45^{+}RO), los linfocitos CD4^{+} infectados de forma latente que pueden constituir depósitos del VIH, y un aumento en el número de células T naive (CD4^{+}/CD45^{+}RA).
- d)
- Las acciones del presente método de tratamiento descritas anteriormente en (a), (b) y (c) pueden eliminar ("purgar") los leucocitos infectados con el VIH de los sitios de reposo con el resultado de que la carga de ADN proviral del VIH-1 integrado en el depósito del linfocito CD4^{+} infectado se va haciendo progresivamente susceptible a la farmacoterapia.
- e)
- En el caso de los pacientes con el VIH, se conoce que los leucocitos de la sangre periférica que incluyen los monocitos/macrofágos y los neutrófilos producen cantidades aumentadas de citoquinas proinflamatorias o inmunosupresoras, TNF-\alpha, IL-1\beta, IL-6, IL-10 (véase arriba). La producción de estas citoquinas es suprimida por la presente invención.
- f)
- Como resultado de las acciones en (a) y (e) arriba mencionadas, la actividad de las células T aumenta, por ejemplo, aumenta CD4^{+}/CD25^{+}. CD4^{+}/CD25^{+} representa la actividad de las células T; estas son células T activadas (CD25 es el receptor para IL-2). El aumento en CD4^{+}/CD25^{+} es fundamental para los pacientes con el VIH porque:
- 1)
- producen IL-2,
- 2)
- cuando se activan, activan el ADN proviral y lo hace susceptible a TAAA (medicamentos).
- g)
- Por analogía a pero independientemente de (f), se puede aumentar el número de las células T CD4^{+} y las células T CD8^{+} mediante un método de la presente invención. Este demuestra la recuperación inmunológica.
- h)
- Se conoce que los pacientes con la infección del VIH tienen mayores niveles de complejos inmunológicos ligados a los antígenos del VIH tal como gp120; se cree que el complejo inmunológico gp120 induce la apoptosis de las células CD4^{+}. En base a la evidencia en la literatura (18), en nuestra opinión el método de la presente invención puede eliminar los complejos inmunológicos conteniendo IgG.
Se mantuvieron los cambios en la producción de
TNF\alpha y IL-12 así como los recuentos de CD4
durante el periodo de seguimiento (7 semanas después de cesar la
aféresis G-1).
Se sabe que muchas farmacoterapias del VIH
tienen efectos secundarios, a menudo efectos secundarios severos
que reducen la calidad de vida del paciente. La aféresis tiene
efectos secundarios mínimos ya que no se administra ninguna
sustancia al paciente. Por lo tanto, se puede mejorar el estado de
la enfermedad sin causar muchas molestias o riesgo para la salud al
paciente. Los pacientes que han recibido el tratamiento con aféresis
implicando la eliminación de leucocitos según la presente invención
informaron que el tratamiento no produjo ningún efecto
desagradable.
A continuación se describe un aparato de
aféresis leucocitaria según una forma de realización de la
invención mediante un ejemplo que solo se refiere a la Figura 1 y la
Figura 2 de los dibujos anexos.
La Figura 1 indica los componentes estructurales
de una columna de aféresis leucocitaria según una forma de
realización de la invención;
La Figura 2 ilustra los componentes de un
dispositivo de aféresis leucocitaria según una forma de realización
de la invención.
Una columna de aféresis es un dispositivo de
aféresis leucocitaria extracorporal de tipo adsorbente. Se rellena
la columna del dispositivo con perlas de acetato de celulosa
(soportes adsorbentes) de 2 mm de diámetro bañadas en suero
fisiológico estéril. Entonces, se esteriliza el ensamblaje final y
se realiza la prueba de fuga mediante los procedimientos
estándares. Se realiza la entrada y salida de sangre por medio de
venas adecuadas en las manos izquierda y derecha. Se ha
desarrollado el sistema para la adsorción selectiva de leucocitos
activados o infectados incluyendo monocitos/macrófagos y neutrófilos
mediante un proceso conocido como aféresis leucocitaria. Los
linfocitos normales, no activados y no infectados no se adhieren a
los soportes adsorbentes de la columna. Además, los resultados de
la investigación publicados en la literatura sugieren que los
complejos inmunológicos IgG se enlazan con la superficie de acetato
de celulosa (18), lo cual puede proveer una ventaja adicional.
En la Figura 1 se presenta la estructura de la
columna G-1 (Adacolumn), un dispositivo formado
según la presente invención, y los materiales de sus componentes
están descritos en la Tabla 1. En la Figura 2 se presenta un esbozo
del dispositivo de columna de aféresis leucocitaria G1.
Como se muestra en la Figura 1, la columna
G-1 comprende una columna de policarbonato
(Adacolumn (8)) la cual se rellena con perlas de acetato de celulosa
(soportes adsorbentes (7)) bañadas en suero fisiológico (9). El
contenido de la columna es cerrado por un tapón interno (4), un
tapón externo (5) y una junta tórica (6). La línea de alimentación
de sangre es fijada sobre la columna por un tapón de boquilla (2) y
la junta (3) en el conducto de entrada de sangre (1). Los soportes
adsorbentes tienen un diámetro de 2 mm con un peso total de 220 g.
La columna de policarbonato tienen una longitud de 206 mm y un
diámetro de 60 mm y tiene una capacidad de 335 ml. El volumen total
del suero fisiológico es 130 ml (igual al volumen de la columna
vacía).
Se muestran los componentes de la columna
G-1 (Adacolumn) abajo en la Tabla 2.
| Nombre | Materia prima |
| Soporte adsorbente* | Acetato de celulosa |
| Cuerpo principal* | Policarbonato |
| Tapón externo* | Polipropileno |
| Tapón interno* | Polipropileno |
| Junta tórica* | Caucho de silicona |
| Tapón perforado* | Tereftalato de polietileno |
| Junta | Caucho de silicona |
| Tapón de boquilla | Polipropileno |
| Solución de relleno | Suero fisiológico isotónico |
| Líneas de circuito | Policloruro de vinilo (plastificado) |
| Película de relleno | Película de laminado de nilón/polipropileno, papel sin madera parcialmente permeable |
| al gas o tejido no tejido (Nilón/película de C. P. P.) | |
| *Indica que el componente entra en contacto directo con la sangre. |
Como se muestra en la Figura 2, el dispositivo
de aféresis leucocitaria G-1 comprende una columna
de policarbonato (Adacolumn (26)), líneas de circuito de sangre y un
Adamonitor (23) junto con una bomba (24). La sangre fluye saliendo
de una vena antecubital del paciente (21), pasa a través de un
detector de burbujas (22) a una bomba (24) y un Adamonitor (23). A
continuación, la sangre pasa por un puerto de administración
anticoagulante (25) antes de entrar en un Adacolumn (26). Después de
salir de la columna, la sangre entra en una cámara de goteo (29) a
la que se conectan un puerto de salida de aire de la cámara de goteo
(27) y un manómetro venoso (28). Después de pasar por un detector
de burbujas (30), la sangre vuelve a ser introducida en el paciente
por medio de una vena antecubital (31).
Los siguientes ejemplos no limitativos ilustran
la invención.
Ejemplos 1 a
10
Se seleccionaron pacientes infectados por el
VIH-1 que recibían TAAA, pero que habían
desarrollado una resistencia o respondían parcialmente a la TAAA
para la terapia de aféresis según los criterios de selección
mostrados abajo. Se presentan los resultados de la terapia de
aféresis en los Ejemplos de 1 a 9 abajo y en las Figuras 3 a 14.
Figura 3. Gráfico que muestra el cambio en el
número de copias del ADN del VIH-1 por 10^{5}
linfocitos de sangre periférica (LSP) con el tiempo (en semanas)
durante el transcurso del tratamiento con aféresis de un paciente
con un recuento bajo de ADN del VIH-1 antes del
tratamiento con aféresis.
Figura 4. Gráfico que muestra el cambio en el
número de copias del ADN del VIH-1 por 10^{5}
linfocitos de sangre periférica (LSP) con el tiempo (en semanas)
durante el transcurso del tratamiento con aféresis de un paciente
con un recuento alto de ADN del VIH-1 antes del
tratamiento con aféresis.
Figura 5. Gráfico que muestra el cambio en el
número de copias del ARN del VIH-1 (x10^{3}) por
ml de sangre con el tiempo durante el transcurso del tratamiento con
aféresis de un paciente infectado por el VIH.
Figura 6. Gráfico que muestra el cambio en el
porcentaje de células T CD4^{+}/CD25^{+} con el tiempo (en
semanas) durante el transcurso del tratamiento con aféresis de un
paciente infectado por el VIH.
Figura 7. Gráfico que muestra el cambio en el
número de células T CD4^{+} por \mul de sangre con el tiempo
(en semanas) durante el transcurso del tratamiento con aféresis de
un paciente infectado por el VIH.
Figura 8. Gráfico que muestra el cambio en el
número de células T CD8^{+} por \mul de sangre con el tiempo
(en semanas) durante el transcurso del tratamiento con aféresis de
un paciente infectado por el VIH.
Figura 9. Gráfico que muestra el cambio en la
producción de TNF-\alpha por las células
mononucleares de sangre periférica (en pg/ml) estimulada por SAC con
el tiempo (en semanas) durante el transcurso del tratamiento con
aféresis de un paciente infectado por el VIH. SAC es el
superantígeno de stafilococcus aureus.
Figura 10. Gráfico que muestra el cambio en la
producción de IL-10 (interleuquina 10 en pg/ml)
estimulada por SAC con el tiempo (en semanas) por células
mononucleares de sangre periférica durante el transcurso del
tratamiento con aféresis de un paciente infectado por el VIH.
Figura 11. Gráfico que muestra el cambio en los
niveles de ADN proviral del VIH-1 por 10^{5}
linfocitos de sangre periférica (LSP) en los pacientes A y B con el
tiempo (en semanas) durante el transcurso del tratamiento
con
aféresis.
aféresis.
Figura 12. Gráfico que muestra el cambio en el
nivel de células positivas CD4 (% aumento) y el cambio en la carga
vírica (copias por ml) con el tiempo en el paciente 1 que se está
sometiendo al tratamiento con aféresis.
Figura 13. Gráfico que muestra el cambio en el
nivel de células positivas CD4 (% aumento) y el cambio en la carga
vírica (copias por ml) con el tiempo en el paciente 2 que se está
sometiendo al tratamiento con aféresis.
Figura 14. Gráficos que muestran los cambios en
los niveles de células CD3^{+} (como un porcentaje de
linfocitos), las células CD4^{+} CD28^{+} (TH-1)
(el porcentaje de las células CD28^{+} basadas en las células
CD4^{+}), las células CD5^{+} CD45RA^{+} (el porcentaje de las
células CD45RA^{+} basadas en las células CD4^{+}) y las
células CD4^{+} CD25^{+} (IL-2) (el porcentaje
de las células CD25^{+} basadas en células CD4^{+}) antes y
después del tratamiento en los pacientes 1 y 2 que se están
sometiendo al tratamiento con aféresis.
Los pacientes sometidos a TAAA recibieron el
tratamiento con aféresis usando la columna G-1
anteriormente descrita. Cada paciente recibió una aféresis por
semana durante un periodo de 8 semanas. Cada aféresis tiene una
duración de 60 minutos con un caudal de 30 ml/minuto.
a) Infección de VIH documentada,
b) Varones o mujeres no embarazadas, no
lactantes con más de 18 años,
c) Capacidad y voluntad para dar su
consentimiento informado escrito, de acuerdo con las directrices
italianas, la declaración de Helsinki y las directrices
internacionales e institucionales, y cumplir con la naturaleza
investigadora del estudio,
d) Paciente sometido a terapia TAAA estable
durante al menos 4 meses
Ejemplo
1
El punto de referencia era el nivel de ADN del
VIH-1 antes de comenzar el tratamiento con
aféresis. Inmediatamente después de haber tomado la muestra de
sangre de referencia, el paciente recibió la aféresis; una aféresis
por semana, con un caudal de 30 ml por minuto, cada aféresis
teniendo una duración de 60 minutos. Se muestra la disminución en el
ADN del VIH-1 tras la aféresis con la columna
G-1 en la Figura 3. Se cuantificó el ADN del
VIH-1 usando un ensayo estándar cuantitativo de
reacción en cadena de la polimerasa (Amplicor VIH Monitor^{TM},
Roche, Basilea, Suiza) en las células mononucleares de sangre
periférica. Los resultados indican que la aféresis con la columna
G-1 puede eliminar las células del VIH infectadas
en reposo. No se conoce ningún medicamento que pueda hacer disminuir
de forma tan rápida la carga del ADN-VIH.
\newpage
Ejemplo
2
Inmediatamente después de haber tomado la
muestra de sangre de referencia, el paciente recibió la aféresis;
una aféresis por semana, a un caudal de 30 ml por minuto, cada
aféresis teniendo una duración de 60 minutos. Se muestra la
disminución del ADN del VIH-1 por aféresis con la
columna G-1 en la Figura 4. De nuevo (como en el
caso del Ejemplo 1), los resultados indican que la aféresis con la
columna G-1 puede eliminar las células del VIH
infectadas en reposo. No se conoce ningún medicamento que pueda
hacer disminuir de forma tan rápida la carga de
ADN-VIH.
Ejemplo
3
Inmediatamente después de haber tomado la
muestra de sangre de referencia, el paciente recibió la aféresis;
una aféresis por semana, a un caudal de 30 ml por minuto, cada
aféresis teniendo una duración de 60 minutos. Se muestra la
disminución del ADN-VIH-1 por
aféresis con la columna G-1. Se cuantificó el ARN
del VIH-1 usando un ensayo competitivo de reacción
en cadena de la polimerasa transcriptasa inversa cuantitativa
estándar.
Ejemplo
4
Inmediatamente después de haber tomado la
muestra de sangre de referencia, el paciente recibió la aféresis;
una aféresis por semana, a un caudal de 30 ml por minuto, cada
aféresis teniendo una duración de 60 minutos. Se muestra el aumento
en el porcentaje de células T CD44/CD25^{+} después de la
aféresis con la columna G-1 en la Figura 6. Se midió
el número de linfocitos CD4^{+}/CD25^{+} usando un citómetro de
flujo Epics XL (Coulter Electronics, Inc.) empleando 100 \mul de
EDTA de sangre periférica incubada durante 30 minutos a 4°C con
anticuerpo monoclonal anti-CD25 marcado con
fluorocromo ficoeritrina.
CD4^{+}/CD25^{+} representa la actividad de
las células-T; las células T CD4^{+}/CD25^{+}
son células T activadas. CD25 es la
\alpha-subunidad del receptor IL-2
que es necesaria para la unión de alta afinidad de
IL-2. Es expresado por las células T activadas pero
no por las que están en reposo. El aumento en CD4^{+}/CD25^{+}
es fundamental para los pacientes con el VIH porque
- 1)
- producen IL-2,
- 2)
- las células T activadas activan el ADN proviral y lo hace susceptible al TAAA (medicamentos). Esto facilita la eliminación de los linfocitos infectados de forma latente (células en reposo infectadas).
Ejemplo
5
Inmediatamente después de haber tomado la
muestra de sangre de referencia, el paciente recibió la aféresis;
una aféresis por semana, a un caudal de 30 ml por minuto, cada
aféresis teniendo una duración de 60 minutos. Se muestra el aumento
en las células T CD4^{+} después de la aféresis con la columna
G-1 en la Figura 7. Se midió el número de linfocitos
CD4^{+} empleando un citómetro de flujo Epics XL (Coulter
Electronics, Inc.) usando 100 \mul de EDTA de sangre periférica
incubada durante 30 minutos a 4°C con el anticuerpo monoclonal
anti-CD4 marcado con fluorocromo ficoeritrina Rojo
Texas.
El recuento de células T CD4^{+} es un
indicador clave de los síntomas de la enfermedad del VIH; un
aumento en el recuento de células CD4^{+} se suele considerar como
un indicador de la remisión del VIH y la mejora del paciente.
Ejemplo
6
Inmediatamente después de haber tomado la
muestra de sangre de referencia, el paciente recibió la aféresis;
una aféresis por semana, a un caudal de 30 ml por minuto, cada
aféresis teniendo una duración de 60 minutos. Se muestra el aumento
en las células T CD8^{+} después de la aféresis con la columna
G-1 en la Figura 8. Se midió el número de linfocitos
CD84 usando un citómetro de flujo Epics XL (Coulter Electronics,
Inc.) usando 100 \mul de EDTA de sangre periférica incubada
durante 30 minutos a 4°C con el anticuerpo monoclónico
anti-CD8 marcado por fluorocromo isotiocianato de
fluoresceína.
Se provoca la proliferación de las células T
CD8^{+} mediante los niveles aumentados de IL-2
(actuando por medio del receptor IL-2 como se
describe en relación al Ejemplo 4 anterior).
Ejemplo
7
Inmediatamente después de haber tomado la
muestra de sangre de referencia, el paciente recibió la aféresis;
una aféresis por semana, a un caudal de 30 ml por minuto, cada
aféresis teniendo una duración de 60 minutos. Se muestra el descenso
brusco en la producción de TNF por las células mononucleares de la
sangre periférica en la Figura 9. Se midió la producción de TNF por
las células mononucleares de sangre periférica (CMSP) cultivando
3x10^{6} CMSP por pocillo en placas de 24 pocillos de LINBRO (Flow
laboratories, Inc. McLean, VA) a 37°C en atmósfera húmeda, 7%
CO_{2}. A continuación las CMSP no fueron estimuladas o fueron
estimuladas con LPS (SIGMA Diagnostics St. Louis, MO) a una
concentración de 1 \mug/ml. Se cosechó el sobrenadante después de
48 horas de cultivo y entonces se evaluó la producción de citoquina
con un ensayo ELISA disponible en el mercado (Genzyme, Cambridge,
MA).
TNF-\alpha es un factor
patológico principal en la enfermedad de la infección del VIH. No
se conoce ningún medicamento que pueda producir una reducción tan
rápida en la producción de TNF-\alpha por las
células mononucleares de sangre periférica.
Ejemplo
8
Inmediatamente después de haber tomado la
muestra de sangre de referencia, el paciente recibió la aféresis;
una aféresis por semana, a un caudal de 30 ml por minuto, cada
aféresis teniendo una duración de 60 minutos. Se muestra el descenso
brusco en la producción de IL-10 (interleuquina 10)
por las células mononucleares de sangre periférica posterior a la
aféresis con la columna G-1 en la Figura 10. Se
midió la producción de IL-10 por las células
mononucleares de sangre periférica (CMSP) mediante el cultivo
3x10^{6} de CMSP por pocillo en una placa de 24 pocillos de
LINERO (Flow laboratories, Inc.) a 37°C en una atmósfera húmeda, 7%
CO_{2}. A continuación, las CMSP no fueron estimuladas o fueron
estimuladas con la hemaglutinación pasiva PHA (M form, Grand Island,
NY) con una dilución de 1:100. El sobrenadante fue cosechado
después de 48 horas de cultivo y entonces se evaluó la producción
de citoquina con un ensayo ELISA disponible en el mercado (Genzyme,
Cambridge, MA).
La IL-10 es un factor patológico
principal en la enfermedad de la infección del VIH. La
IL-10 es un supresor inmunológico potente. Suprime
la producción de citoquina por los macrófagos y así suprime de
forma indirecta la activación de las células T. Esto contrarresta
las acciones de la IL-2 y IL-12 en
la inmunidad celular y en consecuencia la IL-10 hace
que deje de funcionar de forma efectiva el sistema inmunitario.
Ejemplo
9
Se emparejaron dos pares de pacientes con el VIH
dentro de cada par por estado de enfermedad (A y B). Los pacientes
de control sólo fueron tratados con TAAA, mientras los pacientes
G-1 fueron tratados con TAAA y con aféresis. El
punto de referencia fue el nivel de ADN del VIH-1
al principio del estudio antes de comenzar el tratamiento con
aféresis. Inmediatamente después de la muestra de sangre, los
pacientes de G-1 recibieron la aféresis; una
aféresis por semana, a un caudal de 30 ml por minuto, cada aféresis
teniendo una duración de 60 minutos. Se muestra el cambio en el ADN
del VIH-1 durante las 8 semanas de tratamiento en
la Figura 11. El ADN del VIH-1 disminuye bruscamente
en los pacientes que recibieron aféresis, pero no en los pacientes
tratados solamente con TAAA. El ADN del VIH-1 fue
medido de la misma manera descrita en el Ejemplo 1.
El siguiente Ejemplo 10 adicional no limitativo
ilustra más la invención. El Ejemplo 10 describe una investigación
preliminar sobre el método y aparato de la invención. Los Ejemplos
1 a 9 se refieren a las investigaciones posteriores y más
profundas.
Ejemplo
10
Se utiliza como aparato de tratamiento de la
sangre para el tratamiento de una enfermedad infectada con el VIH,
un aparato de circulación externa compuesto por la combinación de
una columna de hemoperfusión directa (capacidad: aproximadamente 335
ml) rellena de perlas de acetato de celulosa (220 g; diámetro: 2
mm) y un aparato hemocatártico tipo adsorción ("ADAMONITOR
MM6-P", nombre comercial; fabricado por Otsuka
Nshi K.K.) [clinical Study on Use of
Granulocyte-Removing Apparatus (G-1)
for Chronic Rheumatism'', Ensho (Inflammation), 17(1),
57-80 (1997)].
Los resultados de las pruebas clínicas del
aparato de circulación externa descrito anteriormente, dichos
resultados se describirán posteriormente en la presente, forman
parte de los resultados de un estudio de fase II que se realizó
siguiendo los procedimientos legítimos en Italia (EVALUACIÓN DE
FASE II SOBRE LA SEGURIDAD Y EFICACIA DE LOS MEDICAMENTOS
ANTIRRETROVIRALES COMBINADOS Y LA COLUMNA G-1: UN
ESTUDIO PILOTO).
Entre los pacientes sometiéndose al tratamiento
con una preparación antirretroviral (ARV) compuesta por la
combinación de dos inhibidores de la transcriptasa inversa análogos
de los nucleósidos y un inhibidor de proteasa, se eligieron los
pacientes infectados por el VIH como sujetos para el tratamiento
según el siguiente estándar: pacientes que mantienen condiciones
estables durante al menos cuatro meses y generalmente durante un
año debido a la quimioterapia ARV, teniendo números de células CD4
positivas que no han aumentado un 10% o más de los puntos de
referencia correspondientes (los valores correspondientes antes de
que el comienzo de la terapia ARV llevara a las condiciones
estables) (pacientes immunológicamente no responsivos al ARV), y
teniendo más de 50.000 copias del ARN del VIH o mostrando una
disminución del ARN del VIH no superior a 0,5 log (\leq 0,5 log)
desde que el comienzo de TAAA
debido a la quimioterapia ARV llevara a las condiciones estables (pacientes virológicamente no responsivos al ARV).
debido a la quimioterapia ARV llevara a las condiciones estables (pacientes virológicamente no responsivos al ARV).
El tratamiento de la enfermedad infectada por el
VIH mediante el aparato de circulación externa según la presente
invención fue realizado en sustancialmente la misma manera que el
estudio clínico en el reumatismo crónico como se describe en el
informe mencionado arriba. Se realizó el tratamiento una vez a la
semana estableciendo la cantidad de sangre que se hace circular
externamente por tratamiento, basándose en un caudal de sangre de
30 ml/minuto y un tiempo de circulación externa de 60 minutos como
estándar.
Se muestran los resultados del tratamiento del
Paciente 1 (48 años, varón) y del Paciente 2 (43 años, varón) en la
Tabla 3.
Los elementos probados en la Tabla 3 fueron
todos medidos mediante los métodos empleados de forma común en la
técnica e incluyen el número de leucocitos, el número de
neutrófilos, el número de monocitos, el número de eosinofilos, el
número de linfocitos, el número de marcadores de superficie de
linfocitos, el número de hemoglobinas, el número de plaquetas, y la
carga vírica.
Específicamente, se determinó el número de cada
marcador de superficie de linfocito como resultado de una medición
por citometría de flujo mientras se usaba un anticuerpo monoclonal
del marcador. "CD3" indica el número de células positivas CD3,
"#CD4" el número de células positivas CD4, "%CD4" el
porcentaje de las células positivas CD4 basadas en linfocitos,
"CD4/8" la proporción de las células positivas CD4 a las
células positivas CD8, "CD4+CD45RA+" el porcentaje de células
positivas CD45RA basadas en las células positivas CD4,
"CD4_CD25+(IL-2)" el porcentaje de células
positivas CD25 basadas en las células positivas CD4, y
"CD4+CD28+(Th-1)" el porcentaje de células
positivas CD28 basadas en las células positivas CD4.
Además, se determina cada carga vírica como
resultado de una medición de una concentración sérica del ARN del
VIH por el método RT-PCR (cp: el número de copias
por ml).
Basándose en los resultados mostrados en la
Tabla 3 y la Tabla 4, se muestran los índices (%) de aumentos en el
número de células positivas CD4 de los puntos de referencia
respectivos y las variaciones en la carga vírica (el número de
copias) en la Figura 12 (Paciente 1) y en la Figura 13 (Paciente
2), respectivamente. Además, las variaciones en el porcentaje de
células positivas CD3 basadas en linfocitos y las variaciones en
"CD4+CD45RA+", "CD4+CD25+(IL-2)" y
"CD4+CD28+(th-1)" se muestran en la Figura 14
(Paciente 1: puntos, Paciente 2: círculos).
En lo que se refiere al Paciente 1 y al Paciente
2, ya se observaron los aumentos (50 a 70%) en el número de
linfocitos positivos CD4 posterior al tratamiento por la presente
invención (tan pronto como 60 minutos después del comienzo), y este
efecto duró 3 a 7 días o incluso durante más tiempo. Además, al
realizar la segunda terapia (tratamiento), se observó que este
efecto duró 7 días o más en ambos pacientes.
| 1ª aféresis | 3 días más tarde | 2ª aféresis | |||
| Punto de referencia | 60 min | Punto de referencia | 60 min | ||
| Número de leucocitos | 5.300 | 4.200 | |||
| Número de neurofilos | 2.300 | 2.500 | 2.800 | 2.900 | 2.400 |
| Número de monocitos | 500 | 300 | 200 | 700 | 400 |
| Número de eosinofilos | 20 | 10 | 20 |
| 1ª aféresis | 3 días más tarde | 2ª aféresis | |||
| Punto de referencia | 60 min | Punto de referencia | 60 min | ||
| Número de linfocitos | 1.600 | 1.100 | 1.500 | 1.600 | 1.300 |
| CD3 | 791 | 1.179 | 1.130 | ||
| #CD4 | 219 | 323 | 365 | 234 | 333 |
| %CD4 | 19,9 | 20,2 | 24,3 | 19,6 | 22,7 |
| CD4/8 | 0,45 | 0,44 | 0,53 | 0,40 | 0,50 |
| CD4+CD45RA+ | 0,60 | 13,10 | |||
| CD4+CD25+(IL-2) | 10,2 | 18,02 | |||
| CD4+CD28+(Th-1) | 7,00 | 16,30 | |||
| Número de hemoglobinas | 14,2 | 13,5 | 14,0 | 14,6 | 13,8 |
| Número de plaquetas | 130 | 124 | 127 | 143 | 129 |
| Carga vírica | 89.000cp | 20.000cp |
| 1ª aféresis | 2ª aféresis | ||||
| Punto de referencia | 60 min | 75 min | Punto de referencia | 60 min | |
| Número de leucocitos | 6.000 | 5.000 | |||
| Número de neurofilos | 2.400 | 2.300 | 2.500 | 1.700 | 2.000 |
| Número de monocitos | 700 | 600 | 500 | 700 | 500 |
| Número de eosinofilos | 30 | 10 | 0 | ||
| Número de linfocitos | 1.800 | 2.600 | 2.500 | 3.300 | 2.200 |
| CD3 | 1.541 | 2.213 | 2.078 | ||
| #CD4 | 284 | 478 | 488 | 468 | 451 |
| %CD4 | 15,0 | 18,0 | 19,5 | 14,0 | 20,0 |
| CD4/8 | 0,24 | 0,29 | 0,33 | ||
| CD4+CD45RA+ | 4,10 | 5,40 | |||
| CD4+CD25+(IL-2) | 12,02 | 19,02 | |||
| CD4+CD28+(Th-1) | 8,60 | 12,90 | |||
| Número de hemoglobinas | 13,4 | 12,7 | 12,6 | 14,8 | 13,6 |
| Número de plaquetas | 187 | 169 | 166 | 253 | 194 |
| Carga vírica | 31.000cp | 26.000cp |
Se presupone que estos aumentos rápidos en el
número de linfocitos positivos CD4 son atribuibles a la
recuperación y la mejora de la función mieloide por el tratamiento
de acuerdo con la presente invención y la formación de nuevas
células positivas CD3, especialmente un grupo de células naive tal
como las células positivas CD45RA, células positivas CD25 y células
positivas CD28, como se muestra en la Figura 14. Tal aumento es un
aumento que no ha sido observado de ninguna manera en los métodos
convencionales para el tratamiento de enfermedades infectadas por
el VI H. Además, se ha reconocido que el método de tratamiento
según la presente invención provoca una reducción en la carga vírica
y por lo tanto mejora su efecto.
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Claims (9)
1. Uso de perlas de acetato de celulosa como
soporte absorbente en la producción de un agente para el tratamiento
por aféresis de un paciente infectado por el VIH.
2. Uso según la reivindicación 1
caracterizado por el hecho de que el soporte adsorbente es
una perla que tiene un diámetro dentro del intervalo de 0,1 a 10,0
mm.
3. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
1 a 2 caracterizado por el hecho de que el soporte
adsorbente es una perla que tiene un diámetro dentro del intervalo
de 0,2 a 5,0 mm.
4. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
1 a 3 caracterizado por el hecho de que el soporte
adsorbente es una perla que tiene un diámetro dentro del intervalo
de 0,5 a 4,0 mm.
5. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
1 a 4 caracterizado por el hecho de que el soporte
adsorbente es una perla que tiene un diámetro dentro del intervalo
de 1,0 a 3,0 mm.
6. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
1 a 5 caracterizado por el hecho de que el soporte
adsorbente tiene una superficie rugosa.
7. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
1 a 6 caracterizado por el hecho de que el soporte
adsorbente tiene irregularidades en su superficie teniendo una
altura media de línea de centro Ra definida según el estándar
industrial japonés B0601-1982, de 0.2 \mum a 10
\mum y un espaciamiento medio Sm de irregularidad dentro del
intervalo de 5 \mum a 200 \mum.
8. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
1 a 7 caracterizado por el hecho de que el soporte
adsorbente comprende perlas de acetato de celulosa con un diámetro
dentro del intervalo entre 0,1 y 1,0 mm.
9. Uso según cualquiera de las reivindicaciones
1 a 8 caracterizado por el hecho de que la sangre es
separada en plasma y otros componentes y el plasma entra en contacto
con el soporte adsorbente.
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