ES2254043T1 - Proteinas fluorescentes y cromoproteinas procedentes de especies hidrozoa que no son aequorea y metodos para usarlas. - Google Patents
Proteinas fluorescentes y cromoproteinas procedentes de especies hidrozoa que no son aequorea y metodos para usarlas.Info
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Abstract
Molécula aislada de ácido nucleico que codifica una proteína fluorescente o una cromoproteína, seleccionada del grupo que consta de: (a) un ácido nucleico que codifica una proteína que comprende la secuencia de aminoácido mostrada en los números de secuencia: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20 ó 22; (b) un ácido nucleico que comprende una secuencia nucleótida mostrada en los números de secuencia: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19 ó 21; (c) un ácido nucleico que se hibrida, bajo condiciones severas, al ácido nucleico de (a) o (b) , descrito anteriormente; (d) un ácido nucleico que codifica una proteína que tiene al menos un 75% de identidad de secuencia con respecto a la secuencia de aminoácido de (a) , descrita anteriormente; (e) un ácido nucleico que tiene al menos un 70% de identidad de secuencia con respecto a la secuencia nucleótida de (b) , descrita anteriormente; (f) un ácido nucleico que codifica una proteína que tiene una sustitución, supresión o inserción de al menos un aminoácidoen la secuencia de aminoácido mostrada en los números de secuencia: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20 ó 22; (g) un derivado o mimético del ácido nucleico de (a) , (b) , (c) , (d) , (e) o (f) , descrito anteriormente; (h) un mutante del ácido nucleico de (a) , (b) , (c) , (d) o (e) , descrito anteriormente; (i) un ácido nucleico diferente del ácido nucleico de (b) , (c) , (d) , (e) , (f) , (g) o (h) , descrito anteriormente, debido a la degeneración del código genético; y (j) un fragmento del ácido nucleico de (a) o (b) , descrito anteriormente.
Claims (24)
1. Molécula aislada de ácido nucleico que
codifica una proteína fluorescente o una cromoproteína, seleccionada
del grupo que consta de:
(a) un ácido nucleico que codifica una proteína
que comprende la secuencia de aminoácido mostrada en los números de
secuencia: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20 ó 22;
(b) un ácido nucleico que comprende una secuencia
nucleótida mostrada en los números de secuencia: 1, 3, 5, 7, 9, 11,
13, 15, 17, 19 ó 21;
(c) un ácido nucleico que se hibrida, bajo
condiciones severas, al ácido nucleico de (a) o (b), descrito
anteriormente;
(d) un ácido nucleico que codifica una proteína
que tiene al menos un 75% de identidad de secuencia con respecto a
la secuencia de aminoácido de (a), descrita anteriormente;
(e) un ácido nucleico que tiene al menos un 70%
de identidad de secuencia con respecto a la secuencia nucleótida de
(b), descrita anteriormente;
(f) un ácido nucleico que codifica una proteína
que tiene una sustitución, supresión o inserción de al menos un
aminoácido en la secuencia de aminoácido mostrada en los números de
secuencia: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20 ó 22;
(g) un derivado o mimético del ácido nucleico de
(a), (b), (c), (d), (e) o (f), descrito anteriormente;
(h) un mutante del ácido nucleico de (a), (b),
(c), (d) o (e), descrito anteriormente;
(i) un ácido nucleico diferente del ácido
nucleico de (b), (c), (d), (e), (f), (g) o (h), descrito
anteriormente, debido a la degeneración del código genético; y
(j) un fragmento del ácido nucleico de (a) o (b),
descrito anteriormente.
2. Molécula de ácido nucleico según la
reivindicación 1, en la que dicho ácido nucleico está aislado de un
organismo de la clase Hydrozoa.
3. Molécula de ácido nucleico según la
reivindicación 1, en la que dicho ácido nucleico está aislado de un
organismo del suborden Anthomedusae.
4. Molécula de ácido nucleico según la
reivindicación 1, en la que dicho ácido nucleico está aislado del
género Phialidium.
5. Vector que comprende la molécula de ácido
nucleico según la reivindicación 1.
6. Casete de expresión que comprende (a) la
molécula de ácido nucleico según la reivindicación 1; y (b)
elementos de regulación para la expresión de dicha molécula de ácido
nucleico en la célula huésped deseada.
7. Célula que comprende la molécula de ácido
nucleico según la reivindicación 1, el vector según la
reivindicación 5 o el casete de expresión según la reivindicación
6.
8. Línea celular estable que comprende la
molécula de ácido nucleico según la reivindicación 1, el vector
según la reivindicación 5 o el casete de expresión según la
reivindicación 6.
9. Planta transgénica que comprende la molécula
de ácido nucleico según la reivindicación 1, el vector según la
reivindicación 5 o el casete de expresión según la reivindicación
6.
10. Animal transgénico que comprende la molécula
de ácido nucleico según la reivindicación 1, el vector según la
reivindicación 5 o el casete de expresión según la reivindicación
6.
11. Método de producción de una proteína
fluorescente o de una cromoproteína, comprendiendo dicho método los
pasos de (a) aportar una molécula de ácido nucleico según la
reivindicación 1 unida operativamente a unos elementos adecuados de
regulación de la expresión, (b) expresar la proteína fluorescente o
la cromoproteína de dicha molécula de ácido nucleico, y (c) aislar
la proteína de manera que quede sustancialmente libre de otras
proteínas.
12. Molécula de ácido nucleico que comprende un
fragmento de la molécula de ácido nucleico según la reivindicación
1, codificando dicho fragmento un péptido de una longitud de al
menos 100 aminoácidos.
13. Molécula de ácido nucleico que tiene una
secuencia muy parecida o idéntica a una secuencia nucleótida de una
longitud de al menos 300 residuos de la molécula de ácido nucleico
según la reivindicación 1.
14. Proteína fluorescente o cromoproteína aislada
seleccionada del grupo que consta de:
(a) una proteína que comprende la secuencia de
aminoácido mostrada en los números de secuencia: 2, 4, 6, 8, 10, 12,
14, 16, 18, 20 ó 22;
(b) una proteína codificada por la molécula de
ácido nucleico que comprende una secuencia nucleótida mostrada en
los números de secuencia: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19 ó
21;
(c) una proteína que tiene al menos un 75% de
identidad de secuencia con respecto a la secuencia de aminoácido de
(a) o (b), descrita anteriormente;
(d) un mutante de la proteína de (a), (b) o (c),
descrita anteriormente;
(e) una proteína que tiene una sustitución,
supresión o inserción de al menos un aminoácido en la secuencia de
aminoácido mostrada en los números de secuencia: 2, 4, 6, 8, 10, 12,
14, 16, 18, 20 ó 22;
(f) un derivado de la proteína de (a), (b), (c),
(d) o (e), descrito anteriormente;
(g) un fragmento de la proteína de (a), (b), (c),
(d), (e) o (f), descrito anteriormente; y
(h) una proteína que tiene una secuencia muy
parecida o idéntica a una secuencia de aminoácido de una longitud de
al menos 100 residuos de (a) o (b), descrita anteriormente.
15. Proteína de fusión que comprende la proteína
según la reivindicación 14.
16. Anticuerpo que se une específicamente a la
proteína según la reivindicación 14.
17. Conjunto que comprende el ácido nucleico
según la reivindicación 1, el vector según la reivindicación 5, el
casete de expresión según la reivindicación 6, la proteína según la
reivindicación 14, la proteína de fusión según la reivindicación 15
o medios para producirla.
18. Sonda o cebador oligonucleótido que comprende
la secuencia nucleótida capaz de hibridarse a la secuencia
nucleótida seleccionada del grupo consistente en los números de
secuencia: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19 ó 21.
19. Método de etiquetado de una molécula
biológica, que comprende el paso de acoplar dicha molécula biológica
a la proteína según la reivindicación 14.
20. Método de etiquetado de una célula que
comprende el paso de producir la proteína según la reivindicación 14
en la célula.
21. Método de etiquetado de un organelo celular
que comprende el paso de producir la proteína según la
reivindicación 14 fundida con la señal de localización subcelular
adecuada en la célula.
22. Método de análisis de una molécula biológica,
una célula o un organelo celular, que comprende el paso de detectar
la señal de fluorescencia de la proteína según la reivindicación 14
ó 15.
23. Método de análisis de una molécula biológica,
una célula o un organelo celular, que comprende el paso de expresar
la molécula de ácido nucleico según la reivindicación 1 en una
célula.
24. Método de detección de una molécula biológica
que comprende el paso de detectar la señal de fluorescencia de la
proteína según la reivindicación 14 ó 15.
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