ES2253879T3 - Mu-1, miembro de la familia del receptor de citoquina. - Google Patents

Mu-1, miembro de la familia del receptor de citoquina.

Info

Publication number
ES2253879T3
ES2253879T3 ES99911454T ES99911454T ES2253879T3 ES 2253879 T3 ES2253879 T3 ES 2253879T3 ES 99911454 T ES99911454 T ES 99911454T ES 99911454 T ES99911454 T ES 99911454T ES 2253879 T3 ES2253879 T3 ES 2253879T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
protein
amino acid
sec
nucleotide
sequence
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES99911454T
Other languages
English (en)
Inventor
Debra Donaldson
Michelle Ungar
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Genetics Institute LLC
Original Assignee
Genetics Institute LLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=21908554&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2253879(T3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Genetics Institute LLC filed Critical Genetics Institute LLC
Application granted granted Critical
Publication of ES2253879T3 publication Critical patent/ES2253879T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/715Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00Drugs for disorders of the respiratory system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06Antiasthmatics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00Drugs for disorders of the nervous system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02Ophthalmic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02Immunomodulators
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02Immunomodulators
    • A61P37/06Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06Antianaemics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2319/00Fusion polypeptide
    • C07K2319/30Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Obesity (AREA)

Abstract

Se describen polinucleótidos codificantes de la cadena de la superfamilia de receptores de hematopoyetina MU-1. Se describen también proteínas MU-1 y procedimientos para su producción.

Description

MU-1, miembro de la familia del receptor de citoquina.
Campo de la invención
La presente invención se refiere a nuevos miembros de la familia de proteínas del receptor de citoquina de mamíferos (incluyendo sin limitación las proteínas del receptor humano y murino), a los fragmentos de las mismas y a polinucleótidos recombinantes y a las células útiles para la expresión de dichas proteínas.
Antecedentes de la invención
Se ha identificado una variedad de moléculas reguladoras, conocidas como hematopoyetinas, que están implicadas en el desarrollo y en la proliferación de varias poblaciones de células hematopoyéticas o sanguíneas. La mayoría de las hematopoyetinas presentan determinadas actividades biológicas interactuando con un receptor en la superficie de las células diana. Los receptores de citoquina se componen normalmente de una, dos o tres cadenas. Muchos receptores de citoquina y algunas citoquinas, tales como IL-12 p40, son miembros de la superfamilia de proteínas del receptor de hematopoyetina. La identificación de nuevos miembros de la superfamilia del receptor de hematopoyetina puede ser útil en la regulación de la hematopoyesis, en la regulación de respuestas inmunitarias y en la identificación de otros miembros de la superfamilia de la hematopoyetina, incluyendo las citoquinas y los receptores. La entrada de la base de datos EMBL, HSAC2303 (26-jun-1997; número de registro AC002303) se refiere a una secuencia de ADN genómico procedente de un clon de BAC que comprende el ADN del cromosoma 16 humano.
Sería deseable identificar y determinar el ADN y la secuencia de proteínas para los miembros de la superfamilia de receptor de hematopoyetina desconocidas hasta ahora.
Sumario de la invención
Según la presente invención, se dan a conocer polinucleótidos que codifican la cadena de la superfamilia del receptor de hematopoyetina MU-1, incluyendo sin limitación los de procedencia murina y humana.
En determinadas formas de realización, la invención proporciona un polinucleótido aislado que comprende una secuencia de nucleótidos seleccionada de entre el grupo que está constituido por:
(a)
la secuencia de nucleótidos de la SEC. ID. nº: 1;
(b)
la secuencia de nucleótidos de la SEC. ID. nº: 1 desde el nucleótido 238 hasta el nucleótido 1852;
(c)
la secuencia de nucleótidos de la SEC. ID. nº: 1 desde el nucleótido 301 hasta el nucleótido 1852;
(d)
la secuencia de nucleótidos de la SEC. ID. nº: 1 desde el nucleótido 301 hasta el nucleótido 945 o desde el nucleótido 238 hasta el nucleótido 945;
(e)
una secuencia de nucleótidos que oscila entre la secuencia de la secuencia de nucleótidos especificada en cualquiera de (a) a (d) como resultado de la degeneración del código genético; y
(f)
una secuencia de nucleótidos que codifica una especie homóloga de la secuencia de SEC. ID nº: 2, en la que dicha secuencia de nucleótidos codifica una proteína que tiene la actividad biológica de la proteína MU-1 representada por SEC. ID nº: 2 en un análisis de la producción de interferón \gamma de ratón o humano y/o de la proliferación de células del bazo, células de los ganglios linfáticos o de timocitos.
La secuencia de nucleótidos puede estar ligada funcionalmente a una secuencia de control de expresión.
La invención proporciona también polinucleótidos aislados que comprenden una secuencia de nucleótidos que codifica un péptido o una proteína que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada de entre el grupo constituido por:
(a)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2;
(b)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2 desde el aminoácido 22 hasta el 538;
(c)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2 desde el aminoácido 22 hasta el 236;
(d)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2 desde el aminoácido 1 hasta el 236; y
(e)
fragmentos de (a) a (d) que tienen la actividad biológica del péptido o de la proteína según (a) a (d) en un análisis de la producción de interferón \gamma de ratón o humano y/o de la proliferación de células del bazo, células de los ganglios linfáticos o timocitos.
Se proporcionan también células huésped, preferentemente células de mamífero, transformadas con polinucleótidos.
En otras formas de realización, la invención proporciona un procedimiento para la producción de una proteína MU-1. El procedimiento comprende:
(a)
cultivar un cultivo de células huésped de la presente invención en un medio de cultivo adecuado; y
(b)
purificar la proteína MU-1 humana procedente del cultivo.
Se proporcionan también proteínas producidas según estos métodos.
La presente invención también proporciona una proteína MU-1 aislada que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada de entre el grupo constituido por:
(a)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2;
(b)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2 desde el aminoácido 22 hasta el 538;
(c)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2 desde el aminoácido 22 hasta el 236;
(d)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2 desde el aminoácido 1 hasta el 236;
(e)
fragmentos de (a) a (d) que tienen la actividad biológica de la de la proteína MU-1 según (a) a (d) en un análisis de la producción de interferón \gamma de ratón o humano y/o de la proliferación de células del bazo, células de los ganglios linfáticos o timocitos; y
(f)
una secuencia de aminoácidos codificada por una secuencia de nucleótidos capaz de hibridarse en condiciones muy seguras de 0,1 \times SSC a 65ºC con la secuencia de nucleótidos especificada en cualquiera de las reivindicaciones 1(a)-(c) o con la secuencia de nucleótidos de la SEC. ID nº: 1 desde el nucleótido 301 hasta el nucleótido 945.
En otras formas de realización preferidas, la secuencia de aminoácidos especificada forma parte de una proteína de fusión (con una secuencia de aminoácidos adicional no derivada de MU-1). Las proteínas de fusión preferidas comprenden un fragmento de anticuerpo, tal como un fragmento de Fc.
También se proporcionan composiciones farmacéuticas que comprenden una proteína de la presente invención y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
La presente invención proporciona además composiciones que comprenden un anticuerpo que reacciona específicamente con una proteína de la presente invención.
Descripción detallada de las formas de realización preferidas
Los inventores de la presente solicitud han identificado y proporcionado por primera vez polinucleótidos que codifican la cadena de la superfamilia del receptor de hematopoyetina MU-1 (en lo sucesivo "MU-1" o "proteína MU-1"), incluyendo sin limitación los polinucleótidos que codifican la MU-1 humana.
Se utilizó una zona de 70 aminoácidos del receptor de IL5 humano(LMTNAFISIIDDLSKYDVQVRAAVSSM
CREAGLWSEWSQPIYVGNDEHKPLREWFVIVIMATICFILLIL, SEC. ID nº: 3) para explorar la base datos EST de GenBank que utiliza el algoritmo TBLASTN. Se identificó la secuencia dentro del clon AC002303 de BAC genómico procedente del cromosoma 16p12 humano con homología a esta zona, lo que sugiere que este segmento podría codificar un gen de un nuevo receptor de hematopoyetina. El examen de los marcos de lectura abiertos dentro de 1000 bp de nucleótido 40.886 pusieron de manifiesto un marco de lectura de 270 bp que cuando se utilizó en una exploración de BLASTP de GenPept identificó exclusivamente miembros de la familia del receptor de citoquina. Un codón de terminación presente al final de este marco de lectura se interpretó como indicación de transición sobre un límite exón/intrón.
Se determinó a continuación si el ARN estaba transcrito en un gen contenido en este clon BAC del cromosoma 16p12. Se sintetizaron cebadores de PCR basándose en el segmento mayor de ORF que contenía la secuencia de péptidos conservada dentro de la familia del receptor de citoquina. Los cebadores GAGTCCGAGGAGAA
AGCTGATCTCA (5p) (SEC. ID nº: 4) y GAAAGATGACCGGGTCACTCCATT (3p) (SEC. ID nº: 5) se utilizaron en las PCR para cribar los bancos de fagos de varios tejidos humanos (Clontech). Los productos de PCR del tamaño de 164 bp esperado que se hibridaron específicamente con un oligonucleótido marcado con 32-P de la secuencia
ACTCGAGCTATGAGCTGCAGGTGCGGGCA (SEC. ID nº: 6) se observaron en un fago de pulmón, riñón, placenta y corazón. Utilizando el oligonucleótido ACTCGAGCTATGAGCTGCAGGTGCGGGCA (SEC. ID nº: 7) se identificó, se purificó y se secuenció un clon de ADNc completo NN14-1b (MU-1). La secuencia del ADN y la secuencia de los aminoácidos previstos se presentan en la SEC. ID nº: 1 y SEC. ID nº: 2, respectivamente. El marco de lectura abierto codifica un nuevo miembro de la familia del receptor de hematopoyetina. Presenta una secuencia principal, pares de cisteína conservados, PP y WSXWS (SEC. ID nº: 8) motivos característicos de la familia así como un dominio transmembrana y un dominio citoplásmico extenso. La alineación FASTA ulterior de esta secuencia con GenPept presentó la mayor homología con IL-2Rb humana. La secuencia de aminoácidos prevista de la cadena del receptor incluye una supuesta secuencia señal de los aminoácidos 1 a 21. Se cree que la MU-1 humana madura tiene la secuencia de aminoácidos 24 a 538 de SEC. ID nº: 2. El dominio transmembrana se encuentra en los aminoácidos 237 a
254.
El ADNc de MU-1 se depositó en la American Type Culture Collection el 10 de marzo de 1998, con número de registro ATCC ____.
Algunas formas de proteínas MU-1 menores de la longitud completa están comprendidas dentro de la presente invención y se mencionan en la presente memoria conjuntamente las formas completa y madura tales como "MU-1" o "proteínas MU-1". Pueden producirse proteínas MU-1 menores de la longitud completa expresando un fragmento correspondiente del polinucleótido que codifica la proteína MU-1 completa (SEC. ID nº: 4 o SEC. ID nº: 6). Estos fragmentos de polinucleótido correspondientes forman también parte de la presente invención. Los polinucleótidos modificados descritos anteriormente pueden prepararse por técnicas de biología molecular normalizadas, que comprenden la construcción de mutantes apropiados con la delección deseada, métodos de mutagénesis dirigida al sitio o mediante la reacción en cadena de la polimerasa utilizando cebadores de oligonucleótido apropiados.
Para los objetivos de la presente invención, una proteína presenta "una actividad biológica de la cadena de la superfamilia del receptor de hematopoyetina de MU-1" si posee una o más de las actividades biológicas de la proteína MU-1 madura correspondiente.
MU-1 o los fragmentos activos de la misma (proteínas MU-1) pueden fusionarse a moléculas transportadoras tales como las inmunoglobulinas. Por ejemplo, las formas solubles de la MU-1 pueden fusionarse mediante secuencias "enlazadoras" al fragmento Fc de una inmunoglobulina. Pueden utilizarse asimismo otras proteínas de fusiones, tales como aquellas con GST, Lex-A o MBP.
La invención también comprende variantes alelas de la secuencia de nucleótidos como las publicadas en la SEC. ID nº: 1, es decir, formas alternativas naturales del polinucleótido aislado de la SEC. ID nº: 1 que también codifican las proteínas MU-1, preferentemente aquellas proteínas con actividad biológica de MU-1. También están incluidos en la invención los polinucleótidos aislados que se hibridan con la secuencia de nucleótidos publicada en la SEC. ID nº: 1 en condiciones muy severas (por ejemplo, 0,1 \times SSC a 65ºC). Los polinucleótidos aislados que codifican las proteínas MU-1 pero que se diferencian de la secuencia de nucleótidos publicada en la SEC. ID nº: 1 en virtud de la degeneración del código genético están también comprendidos en la presente invención. Las variaciones en la secuencia de nucleótidos publicadas en la SEC. ID nº: 1 que se producen por mutaciones puntuales o por modificaciones inducidas están también incluidas en la invención.
La presente invención también proporciona polinucleótidos que codifican homólogos de la MU-1 humana de otras especies animales, particularmente de otras especies de mamíferos. Pueden identificarse y aislarse especies homólogas preparando sondas u operadores de las secuencias murinas o humanas dadas a conocer en la presente memoria y cribando un banco de una especie apropiada, tales como por ejemplo los bancos construidos a partir de las PBMC, timo o testículos de las especies relevantes.
Los polinucleótidos aislados de la invención pueden estar funcionalmente ligados a una secuencia de control de expresión tales como los vectores de expresión pMT2 o pED dados a conocer en Kaufman et al., Nucleic Acid Res. 19, 4485-4490 (1991), a fin de producir la proteína MU-1 por ingeniería genética. En la técnica se conocen muchas secuencias de control de expresión adecuadas. También se conocen los métodos generales de expresión de proteínas recombinantes y están ejemplificados en R. Kaufman, Methods in Enzymology 185, 537-566 (1990). Tal como se define en la presente memoria "ligado funcionalmente" significa enzimática o químicamente ligado para formar un enlace covalente entre el polinucleótido aislado de la invención y la secuencia de control de expresión, de tal modo que la proteína MU-1 esté expresada por una célula huésped que ha sido transformada (transfectada) con el polinucleótido ligado y la secuencia de control de expresión.
Numerosos tipos de células pueden actuar como células huésped adecuadas para la expresión de la proteína MU-1. Puede utilizarse cualquier tipo de célula capaz de expresar la proteína MU-1 operativa. Las células huésped de mamífero adecuadas comprenden, por ejemplo, células COS de mono, células de ovario de hámster chino (CHO), células 293 de riñón humano, células A431 epidérmicas humanas, células Colo205 humanas, células 3T3, células CV-1, otras líneas celulares de primates transformadas, células diploides normales, cepas celulares procedentes de cultivos in vitro de tejido primario, explantes primarios, células HeLa, células L de ratón, células BHK, HL-60, U937, HaK, Rat2, BaF3, 32D, FDCP-1, PC12, M1x o C2C12.
La proteína MU-1 puede también producirse uniendo funcionalmente el polinucleótido aislado de la invención a secuencias de control adecuadas en uno o más vectores de expresión de insecto y empleando un sistema de expresión de insecto. Los materiales y métodos para los sistemas de expresión bacilovirus/célula de insecto están disponibles en el mercado en forma de kit en, p. ej., Invitrogen, San Diego, California, U.S.A. (kit MaxBac®) y dichos métodos son bien conocidos en la técnica, como se describe en Summers y Smith, Texas Agricultural Experiment Station Bulletin No. 1555 (1987). Las formas solubles de la proteína MU-1 pueden también producirse en células de insecto utilizando polinucleótidos aislados apropiados como se describió anteriormente.
Como alternativa, la proteína MU-1 puede producirse en eucariotas inferiores tales como levaduras o en procariotas tales como bacterias. Las cepas de levadura adecuadas comprenden cepas de Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, Kluyveromyces, Candida o cualquier cepa de levadura capaz de expresar proteínas heterólogas. Las cepas bacterianas adecuadas comprenden Escherichia coli, Bacillus subtilis, Salmonella typhimurium, o cualquier cepa bacteriana capaz de expresar proteínas heterólogas.
La expresión en bacterias puede producir la formación de cuerpos de inclusión que incorporan la proteína recombinante. Por este motivo, el replegamiento de la proteína recombinante puede ser necesario para producir material activo o más activo. En la técnica se conocen varios métodos de obtención de proteínas heterólogas plegadas correctamente a partir de cuerpos de inclusión bacteriana. Estos métodos generalmente implican solubilizar la proteína de los cuerpos de inclusión, a continuación desnaturalizar la proteína completamente utilizando un agente caótropo. Cuando están presentes restos de cisteína en la secuencia de aminoácidos primaria de la proteína, es necesario con frecuencia realizar el replegamiento en un medio que permita la formación correcta de los enlaces disulfuro (sistema redox). Los métodos generales de replegamiento se dan a conocer en Kohno, Meth. Enzym., 185:187-195 (1990). El documento EP 0433225 y la solicitud pendiente de trámite USSN 08/163.877 describen otros métodos apropia-
dos.
La proteína MU-1 de la invención puede también expresarse como producto de animales transgénicos, p. ej., como componente de la leche de vacas, cabras, cerdos u ovejas transgénicas que están caracterizadas por células somáticas o germinales que contienen una secuencia de polinucleótidos que codifica la proteína MU-1.
La proteína MU-1 de la invención puede prepararse cultivando un cultivo de células huésped transformado en condiciones de cultivo necesarias para expresar la proteína deseada. La proteína expresada resultante puede purificarse a continuación a partir del medio de cultivo o de los extractos celulares. Las formas solubles de la proteína MU-1 de la invención pueden purificarse a partir del medio acondicionado. Las formas ligadas a la membrana de la proteína MU-1 de la invención pueden purificarse preparando una fracción de la membrana total procedente de la expresión celular y extrayendo las membranas con un detergente no iónico tal como Triton X-100.
La proteína MU-1 puede purificarse utilizando los métodos conocidos por los expertos en la materia. Por ejemplo, la proteína MU-1 de la invención puede concentrase utilizando un filtro de concentración de proteínas disponible en el mercado, por ejemplo, una unidad de ultrafiltración Amicon o Millipore Pellicon. Después de la etapa de concentración, el concentrado puede aplicarse a una matriz de purificación tal como un medio de filtración en gel. Como alternativa, puede emplearse una resina de intercambio aniónico, por ejemplo, una matriz o sustrato que tenga grupos dietilaminoetilo (DEAE) o polietilenimina (PEI) pendientes. Las matrices pueden ser de acrilamida, agarosa, dextrano, celulosa u otros tipos empleados normalmente en la purificación de proteínas. Como alternativa, puede emplearse una etapa de intercambio catiónico. Los intercambiadores catiónicos adecuados comprenden varias matrices insolubles que comprenden grupos de sulfopropilo o de carboximetilo. Son preferibles los grupos sulfopropilo (p. ej., columnas de S-Sepharose®). La purificación de la proteína MU-1 del sobrenadante del cultivo puede también comprender una o más etapas en columna sobre resinas de afinidad tales como concanavalina A-agarosa, heparina-toyopearl® o Cibacrom blue 3GA Sepharose®; o mediante cromatografía de interacción hidrófoba utilizando resinas tales como éter fenílico, éter butílico o éter propílico; o por cromatografía de inmunoafinidad. Por último, pueden emplearse una o más etapas de cromatografía líquida de alto rendimiento en fase inversa (RP-HPLC) empleando medio RP-HPLC hidrófobo, p. ej., gel de sílice con metilo pendiente u otros grupos alifáticos para purificar más la proteína MU-1. Pueden también utilizarse columnas de afinidad que incluyen anticuerpos contra la proteína MU-1 en la purificación según métodos conocidos. Pueden también emplearse alguna o todas las etapas de purificación anteriores en varias combinaciones o con otros métodos conocidos, para proporcionar una proteína recombinante aislada sustancialmente purificada. Preferentemente, la proteína MU-1 aislada se purifica para que esté sustancialmente exenta de otras proteínas de
mamífero.
Las proteínas MU-1 de la invención también pueden utilizarse para cribar agentes que pueden unirse a MU-1. Los análisis de enlace que utilizan una proteína de unión deseada, inmovilizada o no, son bien conocidos en la técnica y pueden emplearse para esta finalidad utilizando la proteína MU-1 de la invención. Pueden utilizarse ensayos de cribado a base de células purificadas o a base de proteínas (exentos de células) para identificar dichos agentes. Por ejemplo, la proteína MU-1 puede inmovilizarse en forma purificada en un portador y pueden determinarse los ligandos de fijación o potenciales a la proteína MU-1 purificada.
Las proteínas MU-1, purificadas en las células o producidas por ingeniería genética, pueden utilizarse como composición farmacéutica cuando se combinan con un portador farmacéuticamente aceptable. Dicha composición puede contener, además de MU-1 o de inhibidor y portador, varios diluyentes, cargas, sales, tampones, estabilizantes, solubilizantes y otros materiales bien conocidos en la técnica. La expresión "farmacéuticamente aceptable" significa un material no tóxico que no interfiere con la eficacia de la actividad biológica del o de los ingrediente(s) activo(s). Las características del portador dependerán de la vía de administración.
La composición farmacéutica de la invención puede contener también citoquinas, linfocinas u otros factores hematopoyéticos tales como M-CSF, GM-CSF, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-14, IL-15, G-CSF, factor de células madre y eritropoyetina. La composición farmacéutica puede también incluir anticuerpos anti-citoquina. La composición farmacéutica puede contener factores trombolíticos o antitrombóticos tales como el activador plasminógeno y el Factor VIII. La composición farmacéutica puede contener además otros agentes antiinflamatorios. Dichos factores y/o agentes adicionales pueden estar incluidos en la composición farmacéutica para producir un efecto sinérgico con la proteína MU-1 aislada o para minimizar los efectos secundarios producidos por la proteína MU-1 aislada. A la inversa, la proteína MU-1 aislada puede incluirse en formulaciones de la citoquina, linfocina, otro factor hematopoyético, trombolítico o antitrombótico o agente antiinflamatorio concreto para minimizar los efectos secundarios de la citoquina, linfocina, otro factor hematopoyético, trombolítico o antitrombótico o agente antiinflamatorio.
La composición farmacéutica de la invención puede estar en forma de liposoma en el cual se combina la proteína MU-1 aislada, además de otros portadores farmacéuticamente aceptables, con agentes anfipáticos tales como lípidos que existen en formas acumuladas como micelas, monocapas insolubles, cristales líquidos o capas laminares que están en solución acuosa. Los lípidos adecuados para la formulación liposómica comprenden, sin limitación, monoglicéridos, diglicéridos, sulfátidos, lisolecitina, fosfolípidos, saponina, ácidos biliares y similares. La preparación de dichas formulaciones liposómicas está dentro del alcance del experto en la materia, tal como se da a conocer, por ejemplo, en la patente U.S. nº 4.235.871; patente U.S. nº 4.501.728; patente U.S. nº 4.837.028; y patente U.S. nº 4.737.323.
Tal como se utiliza en la presente memoria, la expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" significa la cantidad total de cada componente activo de la composición farmacéutica o del método que es suficiente para presentar una utilidad significativa en el paciente, p. ej. mejoría de síntomas, cicatrización, o aumento de la velocidad de cicatrización de dichas enfermedades. Cuando se aplica a un individuo el ingrediente activo, administrado solo, la expresión se refiere al ingrediente solo. Cuando se aplica a una combinación, la expresión se refiere a las cantidades combinadas de ingredientes activos que producen el efecto terapéutico, si se administra en combinación, en serie o simultánea-
mente.
En la puesta en práctica del método de tratamiento o en la utilización de la presente invención, se administra una cantidad terapéuticamente eficaz de proteína MU-1 aislada a un mamífero. La proteína MU-1 aislada puede administrarse según el método de la invención ya sea sola o en combinación con otras terapias tales como los tratamientos que emplean citoquinas, linfocinas u otros factores hematopoyéticos. Cuando se administra conjuntamente con una o más citoquinas, linfocinas u otros factores hematopoyéticos, la proteína MU-1 puede administrarse ya sea simultáneamente con la(s) citoquina(s), linfocina(s), otro(s) factor(es) hematopoyético(s), trombolítico(s) o factores antitrombolíticos o sucesivamente. Si se administra sucesivamente, el médico adjunto decidirá la secuencia de administración apropiada de la proteína MU-1 en combinación con citoquina(s), linfocina(s), otro(s) factor(es) hematopoyético(s), factores trombolíticos o antitrombolíticos.
La administración de la proteína MU-1 utilizada en la composición farmacéutica o para poner en práctica el método de la presente invención puede realizarse por una variedad de vías convencionales, tales como por ingestión oral, inhalación o cutánea, subcutánea o por inyección intravenosa. Es preferible la administración intravenosa al paciente.
Cuando se administra por vía oral una cantidad terapéuticamente eficaz de proteína MU-1, la proteína MU-1 estará en forma de comprimido, cápsula, polvo, solución o elixir. Cuando se administra en forma de comprimido, la composición farmacéutica de la invención puede contener además un excipiente sólido tal como gelatina o un adyuvante. El comprimido, cápsula y polvo contiene aproximadamente del 5 al 95% de proteína MU-1 y preferentemente desde aproximadamente 25 al 90% de proteína MU-1. Cuando se administra en forma líquida, puede añadirse un excipiente líquido tal como agua, vaselina, aceites de origen animal o vegetal tales como aceite de cacahuete, aceite mineral, aceite de soja o aceite de sésamo o aceites sintéticos. La forma líquida de la composición farmacéutica puede contener además solución salina fisiológica, dextrosa u otra solución de sacárido, o glicoles tales como etilenglicol, propilenglicol o polietilenglicol. Cuando se administra en forma líquida, la composición farmacéutica contiene aproximadamente del 0,5 al 90% en peso de proteína MU-1 y preferentemente desde aproximadamente 1 al 50% de proteína
MU-1.
Cuando se administra una cantidad terapéuticamente eficaz de proteína MU-1 por inyección intravenosa, cutánea o subcutánea, la proteína MU-1 estará en forma de solución acuosa parenteralmente aceptable, exenta de pirógenos. La preparación de dichas soluciones de proteína parenteralmente aceptables, que tienen posibilidades con respecto al pH, isotonicidad, estabilidad y similares, está comprendida en la experiencia en la materia. Una composición farmacéutica preferida para inyección intravenosa, cutánea o subcutánea contiene, además de la proteína MU-1 un vehículo isotónico tales como cloruro de sodio inyectable, solución inyectable de Ringer, dextrosa inyectable, dextrosa y cloruro de sodio inyectables, solución inyectable de Ringer lacteada u otro vehículo conocido en la técnica. La composición farmacéutica de la presente invención puede contener además estabilizantes, conservantes, tampones, antioxidantes u otros aditivos conocidos por los expertos en la materia.
La cantidad de proteína MU-1 en la composición farmacéutica de la presente invención dependerá de la naturaleza y gravedad de la enfermedad en tratamiento y de la naturaleza de los tratamientos anteriores que ha recibido el paciente. Por último, el médico adjunto decidirá la cantidad de proteína MU-1 con la que tratar a cada paciente. Inicialmente, el médico adjunto administrará bajas dosis de proteína MU-1 y observará la respuesta del paciente. Pueden administrarse dosis mayores de proteína MU-1 hasta que se obtenga el efecto terapéutico óptimo en el paciente y este punto de dosificación generalmente no se incrementa más. Se contempla que las diversas composiciones farmacéuticas utilizadas para poner en práctica el método de la presente invención deberían contener aproximadamente 0,1 \mug a aproximadamente 100 \mug de proteína MU-1 por kilo de peso corporal.
La duración de la terapia intravenosa que utiliza la composición farmacéutica de la presente invención oscilará, dependiendo de la gravedad de la enfermedad en tratamiento y del estado y respuesta idiosincrásica potencial de cada paciente. Se contempla que la duración de cada aplicación de proteína MU-1 estará comprendida en el intervalo entre 12 y 24 horas de administración intravenosa continua. Por último, el médico adjunto decidirá la duración apropiada de la terapia intravenosa utilizando la composición farmacéutica de la presente invención.
Es de esperar que el polinucleótido y las proteínas de la presente invención presenten una o más utilizaciones o actividades biológicas (incluyendo las asociadas a los ensayos citados en la presente memoria) identificadas a continuación. Las utilizaciones o actividades descritas para las proteínas de la presente invención pueden proporcionarse mediante la administración o utilización de dichas proteínas o mediante la administración o utilización de los polinucleótidos que codifican dichas proteínas (tales como, por ejemplo, en las terapias génicas o vectores adecuados para la introducción de ADN).
Actividad de citoquina y de proliferación/diferenciación celular
Una proteína de la presente invención puede presentar actividad de citoquina, de proliferación celular (ya sea provocando o inhibiendo) o de diferenciación celular (ya sea provocando o inhibiendo) o puede provocar la producción de otras citoquinas en determinadas poblaciones celulares. Muchos factores proteicos descubiertos hasta la fecha, incluyendo todas las citoquinas conocidas, han presentado actividad en uno o más ensayos de proliferación celular dependientes de uno o más factores y por consiguiente los ensayos sirven como confirmación conveniente de la actividad de las citoquinas. La actividad de una proteína de la presente invención se demuestra mediante uno cualquiera de los numerosos ensayos de proliferación celular dependientes del factor de rutina para las líneas celulares que incluyen, sin limitación, 32D, DA2, DA1G, T10, B9, B9/11, BaF3, MC9/G, M+ (preB M+), 2E8, RB5, DA1, 123, T1165, HT2, CTLL2, TF-1, Mo7e y CMK.
La actividad de una proteína de la invención puede medirse, entre otros medios, por los siguientes métodos:
Los ensayos destinados a la proliferación de linfocitos T o de timocitos comprenden sin limitación los descritos en: Current Protocols en Immunology, editado por J.E. Coligan, A.M. Kruisbeek, D.H. Margulies, E.M. Shevach, W. Strober, Pub. Greene Publishing Associates y Wiley-Interscience (Capítulo 3, In Vitro assays for Mouse Lymphocyte Function 3.1-3.19; capítulo 7, Immunologic studies in Humans); Takai et al., J. Immunol. 137:3494-3500, 1986; Bertagnolli et al., J. Immunol. 145:1706-1712, 1990; Bertagnolli et al., Cellular Immunology 133:327-341, 1991; Bertagnolli et al., J. Immunol. 149:3778-3783, 1992; Bowman et al., J. Immunol. 152:1756-1761, 1994.
Los ensayos destinados a la producción de citoquinas y/o a la proliferación de células de bazo, células de ganglios linfáticos o a los timocitos comprenden, sin limitación, los descritos en: Polyclonal T cell stimulation, Kruisbeek, A.M. y Shevach, E.M. en Current Protocols in Immunology. J.E.e.a. Coligan eds. Vol. 1 págs. 3.12.1-3.12.14, John Wiley and Sons, Toronto. 1994; y Measurement of mouse and human Interferon \gamma, Schreiber, R.D. en Current Protocols in Immunology. J.E.e.a. Coligan eds. Vol 1 págs. 6.8.1-6.8.8, John Wiley and Sons, Toronto. 1994.
Los ensayos destinados a la proliferación y diferenciación de células hematopoyéticas y linfopoyéticas comprenden, sin limitación, los descritos en: Measurement of Human and Murine Interleukin 2 and Interleukin 4, Bottomly, K., Davis, L.S. y Lipsky, P.E. en Current Protocols in Immunology. J.E.e.a. Coligan eds. Vol. 1 págs. 6.3.1-6.3.12, John Wiley and Sons, Toronto. 1991; deVries et al., J. Exp. Med. 173:1205-1211, 1991; Moreau et al., Nature 336:690-692, 1988; Greenberger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 80:2931-2938, 1983; Measurement of mouse and human interleukin 6-Nordan, R. en Current Protocols in Immunology. J.E.e.a. Coligan eds. Vol. 1 págs. 6.6.1-6.6.5, John Wiley and Sons, Toronto. 1991; Smith et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 83:1857-1861, 1986; Measurement of human Interleukin 11-Bennett, F., Giannotti, J., Clark, S.C. y Turner, K.J. en Current Protocols in Immunology. J.E.e.a. Coligan eds. Vol. 1 págs. 6.15.1 John Wiley and Sons, Toronto, 1991; Measurement of mouse and human Interleukin 9-Ciarletta, A., Giannotti, J., Clark, S.C. y Turner, K.J. en Current Protocols in Immunology. J.E.e.a. Coligan eds. Vol 1 págs. 6.13.1, John Wiley and Sons, Toronto, 1991.
Los ensayos destinados a las respuestas del clon de linfocito T a los antígenos (que identificarán, entre otros, a proteínas que afectan las interacciones de APC-linfocitos T así como a los efectos directos de los linfocitos T por medición de la proliferación y de la producción de citoquina) comprenden, sin limitación, los descritos en: Current Protocols en Immunology, editado por J.E. Coligan, A.M. Kruisbeek, D.H. Margulies, E.M. Shevach, W. Strober, Pub. Greene Publishing Associates y Wiley-Interscience (capítulo 3, In Vitro assays for Mouse Lymphocyte Function; capítulo 6, Cytokines and their cellular receptors; capítulo 7, Immunologic studies in Humans); Weinberger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 77:6091-6095, 1980; Weinberger et al., Eur. J. Immun. 11:405-411, 1981; Takai et al., J. Immunol. 137:3494-3500, 1986; Takai et al., J. Immunol. 140:508-512, 1988.
Estimulación inmunitaria o actividad supresora
Una proteína de la presente invención también puede presentar estimulación inmunitaria o actividad supresora inmunitaria, incluyendo sin limitación las actividades para las que se describen los ensayos en la presente memoria. Una proteína puede ser útil en el tratamiento de varias insuficiencias y trastornos inmunitarios (incluyendo la inmunoinsuficiencia combinada grave (SCID)), p. ej., en la regulación (por aumento o disminución) del crecimiento y en la proliferación de los linfocitos T y/o B, así como efectuando la actividad citolítica de las células NK y de otras poblaciones celulares. Estas insuficiencias inmunitarias pueden ser genéticas o pueden estar causadas por infecciones víricas (p. ej., VIH) así como bacterianas o micóticas o pueden proceder de trastornos autoinmunitarios. Más particularmente, las causas de enfermedades infecciosas por infección vírica, bacteriana, micótica u otras pueden tratarse utilizando una proteína de la presente invención, que comprende las infecciones por VIH, virus de hepatitis, herpesvirus, micobacterias, Leishmania spp., paludismo spp. y varias infecciones micóticas tal como la candidiasis. Desde luego, a este respecto, puede ser también útil una proteína de la presente invención en la que generalmente pueda ser deseable un refuerzo para el sistema inmunitario, es decir, en el tratamiento del
cáncer.
Los trastornos autoinmunitarios que pueden tratarse utilizando una proteína de la presente invención comprenden, por ejemplo, la enfermedad del tejido conectivo, esclerosis múltiple, lupus eritematoso sistémico, artritis reumatoide, inflamación pulmonar autoinmunitaria, síndrome de Guillain-Barre, tiroiditis autoinmunitaria, diabetes mellitus dependiente de insulina, miastemia grave, enfermedad injerto contra huésped y enfermedad ocular inflamatoria autoinmunitaria. Dicha proteína de la presente invención puede también ser útil en el tratamiento de reacciones y afecciones alérgicas, tales como el asma (particularmente el asma alérgico) u otros problemas respiratorios. Otras afecciones, en las que se desea la supresión inmunitaria (incluyendo, por ejemplo, el trasplante de órganos), pueden también tratarse utilizando una proteína de la presente invención.
El ADN de MU-1 también cartografía el locus cromosómico para la enfermedad de Crohn. Como resultado, pueden utilizarse las proteínas de la presente invención para tratar la enfermedad de Crohn y otras enfermedades inflamatorias del intestino.
Utilizando las proteínas de la invención también puede ser posible regular las respuestas inmunitarias, de numerosas maneras. La regulación por disminución puede ser en forma de inhibición o bloqueo de una respuesta inmunitaria ya en evolución o puede implicar la prevención de la producción de una respuesta inmunitaria. Las funciones de los linfocitos T activados pueden inhibirse suprimiendo la respuesta de los linfocitos T o provocando la tolerancia específica en los linfocitos T o ambas. La inmunosupresión de las respuestas de los linfocitos T es generalmente un proceso activo, no específico del antígeno que requiere la exposición continua de los linfocitos T al agente supresor. La tolerancia, que implica la inducción no sensible o la energía en los linfocitos T, es distinguible de la inmunosupresión que generalmente es específica del antígeno y persiste después que ha cesado la exposición al agente tolerante. Funcionalmente, puede demostrarse la tolerancia por la falta de respuesta de los linfocitos T en la reexposición al antígeno específico en ausencia del agente tolerante.
La regulación por disminución en la prevención de una o más funciones del antígeno (incluyendo sin limitación las funciones de antígeno del linfocito B (tal como, por ejemplo, B7)), p. ej., impidiendo la síntesis de linfocina en grandes concentraciones por los linfocitos T activados, será útil en situaciones de trasplante de tejido, piel y órganos y en la enfermedad de injerto contra huésped (GVHD). Por ejemplo, el bloqueo de la función de los linfocitos T debe producir una reducción de la destrucción del tejido en el trasplante de tejido. Típicamente, en los trasplantes de tejido, el rechazo del trasplante se inicia mediante su reconocimiento como extraño por los linfocitos T, seguido de una reacción inmunitaria que destruye el trasplante. La administración de una molécula que inhibe o bloquea la interacción de un antígeno de linfocito B7 con su(s) ligando(s) natural(es) en las células inmunitarias (tal como una forma monómera soluble de un péptido con actividad B7-2 solo o junto con una forma monómera de un péptido con actividad de otro antígeno de linfocitos B (p. ej. B7-1, B7-3) o anticuerpo de bloqueo), antes del trasplante puede conducir a la fijación de la molécula al o a los ligando(s) natural(es) en las células inmunitarias sin transmitir la correspondiente señal coestimulante. El bloqueo de la función del antígeno del linfocito B en este material impide la síntesis de citoquina por las células inmunitarias, tales como los linfocitos T, y por este motivo actúa como inmunosupresor. Además, la falta de coestimulación puede también ser suficiente para energizar los linfocitos T provocando de este modo tolerancia en un paciente. La producción de tolerancia de larga duración por los reactivos de bloqueo del antígeno del linfocito B puede evitar la necesidad de la administración repetida de estos reactivos de bloqueo. Para conseguir inmunosupresión o tolerancia suficiente en un paciente, puede ser necesario bloquear la función de una combinación de antígenos del linfocito B.
La eficacia de determinados reactivos de bloqueo para impedir el rechazo del trasplante de órganos o la GVHD puede evaluarse utilizando modelos animales que pronostican la eficacia en el hombre. Ejemplos de sistemas apropiados que pueden utilizarse comprenden los trasplantes alogeneicos cardíacos en ratas y los trasplantes xenogeneicos de células del islote pancreático, los cuales se han utilizado para examinar los efectos inmunosupresores de las proteínas de fusión CTLA4Ig in vivo tal como se describe en Lenschow et al., Science 257:789-792 (1992) y Turka et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:11102-11105 (1992). Además, pueden utilizarse modelos murinos de GVHD (véase Paul ed., Fundamental Immunology, Raven Press, Nueva York, 1989, págs. 846-847) para determinar el efecto de bloqueo de la función de antígeno de linfocito B in vivo en el desarrollo de esta enfermedad.
La función de bloqueo del antígeno puede también ser terapéuticamente útil para el tratamiento de enfermedades autoinmunitarias. Muchos trastornos autoinmunitarios son el resultado de la activación inapropiada de los linfocitos T que son reactivos frente al propio tejido y que estimulan la producción de citoquinas y autoanticuerpos involucrados en la patología de las enfermedades. La prevención de la activación de los linfocitos T autorreactivos puede reducir o eliminar los síntomas de la enfermedad. La administración de reactivos que bloquean la coestimulación de los linfocitos T obstruyendo las interacciones receptor:ligando de los antígenos del linfocito B puede utilizarse para inhibir la activación de los linfocitos T y para impedir la producción de autoanticuerpos o citoquinas derivadas de linfocitos T que pueden estar implicadas en el proceso patológico. Además, los reactivos de bloqueo pueden producir tolerancia específica al antígeno de los linfocitos T autorreactivos que podrían conducir a un alivio a largo plazo de la enfermedad. La eficacia de los reactivos de bloqueo para la prevención o alivio de los trastornos autoinmunitarios puede determinarse utilizando numerosos modelos animales bien caracterizados de enfermedades autoinmunitarias humanas. Los ejemplos incluyen la encefalitis autoinmunitaria experimental murina, el lupus eritematoso sistémico en ratones MRL/lpr /lpr o en ratones híbridos NZB, la artritis del colágeno autoinmunitaria murina, la diabetes mellitus en ratones NOD y ratas BB y la miastemia grave (véase Paul ed., Fundamental Immunology, Raven Press, Nueva York, 1989, págs. 840-856).
La regulación del aumento de una función del antígeno (preferentemente una función de antígeno del linfocito B) como medio de regulación por aumento de respuestas inmunitarias, también puede ser útil en terapia. La regulación por aumento de las respuestas inmunitarias puede resultar una forma de aumentar una respuesta inmunitaria existente o producir una respuesta inmunitaria inicial. Por ejemplo, el aumento de una respuesta inmunitaria estimulando la función del antígeno del linfocito B puede ser útil en los casos de infección vírica. Además, las enfermedades víricas diseminadas tales como la gripe, el catarro común y la encefalitis podrían aliviarse mediante la administración de formas estimulantes de antígenos de linfocito B de forma generalizada.
Como alternativa, las respuestas inmunitarias antivíricas pueden potenciarse en un paciente infectado eliminando los linfocitos T del paciente, coestimulando los linfocitos T in vitro con APC pulsados con antígeno vírico ya sea expresando un péptido de la presente invención o junto con una fórmula estimulante y un péptido soluble de la presente invención y reintroduciendo los linfocitos T activados in vitro en el paciente. Otro método de potenciar las respuestas inmunitarias antivíricas consistiría en aislar las células infectadas de un paciente, transfectarlas con un ácido nucleico que codifica una proteína de la presente invención tal como se describe en la presente memoria de modo que las células expresen toda o una parte de la proteína en su superficie y reintroducir las células transfectadas en el paciente. Las células infectadas serían ahora capaces de liberar una señal coestimulante, y por esta razón activar, a los linfocitos T in vivo.
En otra aplicación, la regulación por aumento o la potenciación de la función del antígeno (preferentemente la función de antígeno del linfocito B) puede ser útil para la producción de inmunidad tumoral. Las células tumorales (p. ej., sarcoma, melanoma, linfoma, leucemia, neuroblastoma, carcinoma) transfectadas con un ácido nucleico que codifica por lo menos un péptido de la presente invención pueden administrarse a un paciente para superar la tolerancia específica al tumor en el paciente. Si se desea, puede transfectarse la célula tumoral para expresar una combinación de péptidos. Por ejemplo, las células tumorales extraídas de un paciente pueden transfectarse ex vivo con un vector de expresión que dirige la expresión de un péptido que presenta actividad de tipo B7-2 solo o junto con un péptido que presenta actividad de tipo B7-1 y/o actividad de tipo B7-3. Las células tumorales transfectadas se devuelven a paciente para producir la expresión del péptido en la superficie de la célula transfectada. Como alternativa, pueden utilizarse técnicas de terapia génica para dirigir una célula tumoral para la transfección in vivo.
La presencia del péptido de la presente invención que tiene la actividad de un o unos antígenos de linfocitos B en la superficie de la célula tumoral proporciona la señal de coestimulación necesaria a los linfocitos T para provocar una respuesta inmunitaria mediada por linfocitos T contra las células tumorales transfectadas. Además, las células tumorales que carecen de moléculas MHC de clase I o MHC de clase II o que no pueden volver a expresar suficientes cantidades de moléculas MHC de clase I o MHC de clase II, pueden transfectarse con el ácido nucleico que codifica toda o una parte (p. ej., de un fragmento truncado del dominio citoplasmático) de una proteína de la cadena \alpha de MHC de clase I y la proteína \beta_{2} microglobulina o una proteína de la cadena \alpha de MHC de clase II y una proteína de la cadena \beta de MHC de clase II para expresar de este modo las proteínas MHC de clase I o MHC de clase II en la superficie celular. La expresión de MHC apropiada de clase I o clase II junto con un péptido que posee actividad de un antígeno de linfocito B (p. ej., B7-1, B7-2 y B7-3) produce una respuesta inmunitaria mediada por el linfocito T contra la célula tumoral transfectada. Opcionalmente, un gen que codifica un montaje de cadena complementaria que bloquea la expresión de una proteína asociada a MHC de clase II, tal como la cadena invariable, puede también transfectarse conjuntamente con un ADN que codifica un péptido que posee la actividad de un antígeno de linfocito B para favorecer la presentación de antígenos asociados al tumor y producir inmunidad tumoral específica. Por lo tanto, la producción de una respuesta inmunitaria mediada por linfocitos T en un paciente humano puede ser suficiente para superar la tolerancia específica tumoral en el paciente.
La actividad de una proteína de la invención puede, entre otros medios, medirse mediante los métodos siguientes:
Los análisis adecuados de citotoxicidad de timocitos o esplenocitos, incluyen sin limitación, los descritos en: Current Protocols in Immunology, ed. por J.E. Coligan, A.M. Kruisbeek, D.H. Margulies, E.M. Shevach, W. Strober, Pub. Greene Publishing Associates y Wiley-Interscience (capítulo 3, In Vitro assays for Mouse Lymphocyte Function 3.1-3.19; capítulo 7, Immunologic studies in Humans); Herrmann et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:2488-2492, 1981; Herrmann et al., J. Immunol. 128:1968-1974, 1982; Handa et al., J. Immunol. 135:1564-1572, 1985; Takai et al., J. Immunol. 137:3494-3500, 1986; Takai et al., J. Immunol. 140:508-512, 1988; Herrmann et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:2488-2492, 1981; Herrmann et al., J. Immunol. 128:1968-1974, 1982; Handa et al., J. Immunol. 135:1564-1572, 1985; Takai et al., J. Immunol. 137:3494-350, 1986; Bowmanet et al., J. Virology 61:1992-1998; Takai et al., J. Immunol. 140:508-512, 1988; Bertagnolli et al., Cellular Immunology 133:327-341, 1991; Brown et al., J. Immunol. 153:3079-3092, 1994.
Los análisis para las respuestas a la inmunoglobulina dependiente de linfocitos T y el intercambio de isótopos (que identificarán, entre otros, proteínas que modulan las respuestas del anticuerpo dependiente del linfocito T y que afectan los perfiles Th1/Th2) comprenden, sin limitación, los descritos en: Maliszewski, J. Immunol. 144:3028-3033, 1990; y Assays for B cell function: In vitro antibody production, Mond., J.J. y Brunswick, M. en Current Protocols in Immunology. J.E.e.a. Coligan eds. Vol. 1 págs. 3.8.1-3.8.16, John Wiley and Sons, Toronto, 1994.
Los análisis por reacción de linfocitos mezclados (MLR) (que identificarán, entre otros, las proteínas que generan principalmente respuestas a Th 1 y CTL), comprenden, sin limitación, los descritos en: Current Protocols in Immunology, ed. por J.E. Coligan, A.M. Kruisbeek, D.H. Margulies, E.M. Shevach, W. Strober, Pub. Greene Publishing Associates y Wiley-Interscience (capítulo 3, In Vitro assays for Mouse Lymphocyte Function 3.1-3.19; capítulo 7, Immunologic studies in Humans); Takai et al., J. Immunol. 137:3494-3500, 1986; Takai et al., J. Immunol. 140:508-512, 1988; Bertagnolli et al., J. Immunol. 149:3778-3783, 1992.
Los análisis dependientes de las células dendríticas (que identificarán, entre otros, las proteínas expresadas por las células dendríticas que activan linfocitos T naturales activos) comprenden, sin limitación, los descritos en: Guery et al., J. Immunol. 134:536-544, 1995; Inaba et al., Journal of Experimental Medicine 173:549-559; 1991; Macatonia et al., Journal of Immunology 154:5071-5079, 1995; Porgador et al., Journal of Experimental Medicine 182:255-260, 1995; Nair et al., Journal of Virology 67:4062-4069, 1993; Huang et al., Science 264:961-965, 1994; Macatonia et al., Journal of Experimental Medicine 169:1255-1264, 1989; Bhardwaj et al., Journal of Clinical Investigation 94:797-807, 1994; e Inaba et al., Journal of Experimental Medicine 172:631-640, 1990.
Los análisis de supervivencia/apoptosis de linfocitos (que identificarán, entre otros, las proteínas que impiden la apoptosis después de la producción del superantígeno y las proteínas que regulan la homeostasis de linfocitos) comprenden, sin limitación, los descritos en: Darzynkiewicz et al., Cytometry 13:795-808, 1992; Gorczyca et al., Leukemia 7:659-670, 1993; Gorczyca et al., Cancer Research 53:1945-1951, 1993; Itoh et al., Cell 66:233-243, 1991; Zacharchuk, Journal of Immunology 145:4037-4045, 1990; Zamai et al., Cytometry 14:891-897, 1993; Gorczyca et al., International Journal of Oncology 1:639-648, 1992.
Los análisis de proteínas que influyen en las etapas iniciales de cometido y desarrollo de linfocitos T comprenden, sin limitación, los descritos en: Antica et al., Blood 84:111-117, 1994; Fine et al., Cellular Immunology 155:111-122, 1994; Galy et al., Blood 85:2770-2778, 1995; Toki et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:7548-7551, 1991.
Actividad reguladora de hematopoyesis
Una proteína de la presente invención puede ser útil en la regulación de la hematopoyesis y, por consiguiente, en el tratamiento de las insuficiencias celulares mieloides y linfoides. Incluso la actividad biológica marginal en ayuda de las células formadoras de colonias o de las líneas celulares dependientes del factor indica la implicación en la regulación de la hematopoyesis, p. ej. en ayuda del crecimiento y proliferación de las células madre eritroides solas o en combinación con otras citoquinas, indicando de este modo utilidad, por ejemplo, en el tratamiento de varias anemias o para su utilización juntamente con la irradiación/quimioterapia para estimular la producción de precursores eritroides y/o células eritroides; en ayuda del crecimiento y proliferación de células mieloides tales como los granulocitos y monocitos/macrófagos (es decir, la actividad tradicional de CSF) útiles, por ejemplo, junto con la quimioterapia para prevenir o tratar la mielosupresión consiguiente; en ayuda del crecimiento y proliferación de megacariocitos y por consiguiente de plaquetas permitiendo de este modo la prevención o tratamiento de varios trastornos de las plaquetas tales como la trombocitopenia y generalmente para su utilización en lugar de transfusiones de plaquetas o complementario a éstas; y/o en ayuda del crecimiento y proliferación de las células madre hematopoyéticas que son capaces de madurar alguna y todas las células hematopoyéticas mencionadas anteriormente y por lo tanto encuentran utilidad terapéutica en varios trastornos de células madre (tales como los tratados normalmente con trasplante, incluyendo, sin limitación, anemia aplásica y hemoglobinuria nocturna paroxísmica), así como en la repoblación del compartimento de las células madre tras la irradiación/quimioterapia, ya sean in vivo o ex vivo (es decir, juntamente con el trasplante de médula ósea o con el trasplante de células madre periféricas (homólogos o heterólogos)) como células normales o manipuladas genéticamente para la terapia génica.
La actividad de una proteína de la invención puede, entre otros medios, medirse por los métodos siguientes:
Los análisis adecuados para la proliferación y diferenciación de varias líneas hematopoyéticas se citaron anteriormente.
Los análisis de diferenciación de células madre embrionarias (que identificarán, entre otras, proteínas que influyen en la hematopoyesis por diferenciación embrionaria) comprenden, sin limitación, los descritas en: Johansson et al., Cellular Biology 15:141-151, 1995; Keller et al., Molecular and Cellular Biology 13:473-486, 1993; McClanahan et al., Blood 81:2903-2915, 1993.
Los análisis para la supervivencia y diferenciación de las células madre (que identificarán, entre otras, las proteínas que regulan la linfo-hematopoyesis) comprenden, sin limitación, las descritas en: Methylcellulose colony forming
assays, Freshney, M.G. En Culture of Hematopoietic Cells. R.I. Freshney et al., eds. Vol. págs. 265-268, Wiley-Liss, Inc., Nueva York, NY. 1994; Hirayama et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89:5907-5911, 1992; Primitive hematopoietic colony forming cells with high proliferative potencial, McNiece, L.K. y Briddell, R.A. En Culture of Hematopoietic Cells. R.I. Freshney et al., eds. Vol págs. 23-39, Wiley-Liss, Inc., Nueva York, NY. 1994; Neben et al., Experimental Hematology 22:353-359, 1994; Cobblestone area forming cell assay, Ploemacher, R.E. En Culture of Hematopoietic Cells. R.I. Freshney et al., vol págs. 1-21, Wiley-Liss, Inc., Nueva York, NY. 1994; Long term bone marrow cultures in the presence of stromal cells, Spooncer, E., Dexter, M. y Allen, T. En Culture of Hematopoietic Cells. R.I. Freshney et al., eds. Vol págs. 163-1779, Wiley-Liss, Inc., Nueva York, NY. 1994; Long term culture initiating cell assay, Sutherland, H.J. En Culture of Hematopoietic Cells. R.I. Freshney et al., eds. Vol. págs 139-162, Wiley-Liss, Inc., Nueva York, NY. 1994.
Utilizaciones y utilidades de la invención
Los polinucleótidos proporcionados por la presente invención pueden ser utilizados por la comunidad científica para varias finalidades. Los polinucleótidos pueden utilizarse para expresar proteínas recombinantes para análisis, caracterización o utilización terapéutica. Como marcadores para tejidos en los que la proteína correspondiente se expresa preferentemente (ya sea de manera constitutiva o en una etapa determinada de diferenciación o desarrollo del tejido o en estados patológicos); como marcadores de peso molecular en geles de Southern; como marcadores o etiquetas de cromosomas (cuando se marquen) para identificar cromosomas o para cartografiar posiciones génicas relacionadas; para comparar con las secuencias de ADN endógeno en los pacientes para identificar trastornos genéticos potenciales; como sondas para hibridar y descubrir de este modo nuevas secuencias de ADN relacionadas; como fuente de información para deducir cebadores de PCR destinados a la toma de huellas genética; como sonda para "sustraer" secuencias conocidas en el proceso de descubrir otros polinucleótidos nuevos; para seleccionar y preparar oligómeros destinados al acoplamiento a un "chip génico" u otro soporte, incluyendo el examen de modelos de expresión; para construir anticuerpos anti-proteína utilizando técnicas de inmunización de ADN; y como antígeno para construir anticuerpos anti-ADN o provocar otra respuesta inmunitaria. Cuando el polinucleótido codifica una proteína que se une o que se une potencialmente a otra proteína (tal como, por ejemplo, en una interacción receptor-ligando), el polinucleótido también puede utilizarse en ensayos de trampa de interacción (tal como, por ejemplo, el descrito en Gyuris et al., Cell 75:791-803 (1993))para identificar polinucleótidos que codifican la otra proteína con la que tiene lugar la unión o para identificar inhibidores de la interacción con la unión.
Las proteínas proporcionadas por la presente invención pueden utilizarse asimismo en un análisis para determinar la actividad biológica, incluyendo en un panel de proteínas múltiples para cribado de alto rendimiento; para construir anticuerpos o para producir otra respuesta inmunitaria; como reactivo (incluyendo el reactivo marcado) en análisis diseñados para determinar cuantitativamente las concentraciones de la proteína (o su receptor) en los fluidos biológicos; como marcadores para tejidos en los que se expresa principalmente la proteína correspondiente (ya sea constitutivamente o en una etapa determinada de la diferenciación o desarrollo del tejido o en un estado patológico); y, desde luego, para aislar receptores o ligandos correlativos. Cuando la proteína se une o puede unirse a otra proteína (tal como, por ejemplo, en una interacción receptor-ligando), la proteína puede utilizarse para identificar otra proteína con la que se produce la unión o para identificar los inhibidores de la interacción de la unión. Las proteínas implicadas en estas interacciones de enlace pueden también utilizarse para identificar péptidos o pequeñas moléculas de inhibidores o agonistas de la interacción de enlace.
Alguno o todos estos servicios de la investigación pueden desarrollarse en calidad de reactivo o en formato de kit para su comercialización como productos para investigación.
Los métodos para realizar las utilizaciones relacionadas anteriormente son bien conocidos por los expertos en la materia. Las referencias que describen dichos métodos incluyen sin limitación "Molecular Cloning: A Laboratory Manual", 2ª ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Sambrook, J., E.F. Fritsch y T. Maniatis eds., 1989, y "Methods in Enzymology: Guide to Molecular Cloning Techniques", Academic Press, Berger, S.L. y A.R. Kimmel eds., 1987.
Utilizaciones en nutrición
Los polinucleótidos y proteínas de la presente invención pueden también utilizarse como fuentes o complementos nutritivos. Dichas utilizaciones incluyen sin limitación la utilización como complemento de proteínas o aminoácidos, la utilización como fuente de carbono, la utilización como fuente de nitrógeno y la utilización como fuente de carbohidratos. En tales casos la proteína o polinucleótido de la invención puede añadirse al alimento de un organismo determinado o puede administrarse como una preparación sólida o líquida por separado, tal como en forma de polvo, píldoras, soluciones, suspensiones o cápsulas. En el caso de microorganismos, la proteína o polinucleótido de la invención puede añadirse en o sobre el medio en el que se cultiva el microorganismo.
Las proteínas MU-1 de la invención pueden utilizarse también para inmunizar animales para obtener anticuerpos policlonales y monoclonales que reaccionen específicamente con la proteína MU-1 y que puedan inhibir la unión de los ligandos al receptor. Dichos anticuerpos pueden obtenerse utilizando la MU-1 completa como inmunógeno o utilizando fragmentos de MU-1. Pueden utilizarse también fragmentos más pequeños de la MU-1 para inmunizar animales. Los inmunógenos peptídicos pueden contener además un resto de cisteína en el terminal carboxilo y se conjugan con un hapteno tal como la hemocianina de la lapa californiana (KLH). Pueden generarse inmunógenos peptídicos adicionales sustituyendo los restos de tirosina por restos de tirosina sulfatados. Los métodos de síntesis de dichos péptidos son conocidos en la técnica, por ejemplo, como en R.P. Merrifield, J. Amer. Chem. Soc. 85, 2149-2154 (1963); J.L. Krstenansky, et al., FEBS Lett. 211, 10 (1987).
Los anticuerpos neutralizantes o no neutralizantes (preferentemente los anticuerpos monoclonales) que se unen a la proteína MU-1 pueden ser también productos terapéuticos útiles para determinados tumores y también en el tratamiento de las enfermedades descritas anteriormente. Estos anticuerpos monoclonales neutralizantes pueden ser capaces de bloquear la unión del ligando a la cadena del receptor de MU-1.
(1) INFORMACIÓN GENERAL:
\vskip0.800000\baselineskip
(i)
SOLICITANTE: Genetics Institute, Inc.
\vskip0.800000\baselineskip
(ii)
TÍTULO DE LA INVENCIÓN: RECEPTOR DE MU-1
\vskip0.800000\baselineskip
(iii)
NÚMERO DE SECUENCIAS: 8
\vskip0.800000\baselineskip
(iv)
DIRECCIÓN DE LA CORRESPONDENCIA
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
DESTINATARIO: Genetics Institute, Inc.
\vskip0.500000\baselineskip
(B)
CALLE: 87 Cambridge Park Drive
\vskip0.500000\baselineskip
(C)
CIUDAD: Cambridge
\vskip0.500000\baselineskip
(D)
ESTADO: MA
\vskip0.500000\baselineskip
(E)
PAÍS: Estados Unidos
\vskip0.500000\baselineskip
(F)
CÓDIGO POSTAL: 02140
\vskip0.800000\baselineskip
(v)
MEDIO LEGIBLE POR ORDENADOR:
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
TIPO DE SOPORTE: Disquete
\vskip0.500000\baselineskip
(B)
ORDENADOR: IBM PC compatible
\vskip0.500000\baselineskip
(C)
SISTEMA OPERATIVO: PC-DOD/MS-DOS
\vskip0.500000\baselineskip
(D)
PROGRAMA INFORMÁTICO: PatentIn Release 1.0, Versión 1.30
\vskip0.800000\baselineskip
(vi)
DATOS ACTUALES DE LA SOLICITUD:
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
NÚMERO DE SOLICITUD:
\vskip0.500000\baselineskip
(B)
FECHA DE SOLICITUD:
\vskip0.500000\baselineskip
(C)
CLASIFICACIÓN:
\vskip0.800000\baselineskip
(viii)
CONSULTOR/APODERADO:
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
NOMBRE: Brown, Scott A.
\vskip0.500000\baselineskip
(B)
NÚMERO DE REGISTRO: 32.724
\vskip0.500000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE REFERENCIA/ETIQUETA: GI5320-PCT
\vskip0.800000\baselineskip
(ix)
INFORMACIÓN DE TELECOMUNICACIONES:
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
TELÉFONO: 617-498-8224
\vskip0.500000\baselineskip
(B)
FAX: 617-876-5851
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID nº 1:
\vskip0.800000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 2.665 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
(B)
TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
(C)
TIPO DE FILAMENTO: doble
\vskip0.500000\baselineskip
(D)
TIPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.800000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº: 1:
\vskip1.000000\baselineskip
1
2
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID nº 2:
\vskip0.800000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 538 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
(C)
TIPO DE FILAMENTO:
\vskip0.500000\baselineskip
(D)
TIPOLOGIA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº: 2:
\vskip1.000000\baselineskip
3
4
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID nº 3:
\vskip0.800000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 70 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
(C)
TIPO DE FILAMENTO:
\vskip0.500000\baselineskip
(D)
TIPOLOGIA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº: 3:
\vskip1.000000\baselineskip
5
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID nº 4:
\vskip0.800000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 25 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
(B)
TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
(C)
TIPO DE FILAMENTO: una
\vskip0.500000\baselineskip
(D)
TIPOLOGIA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: otro ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
DESCRIPCIÓN: /desc. = "oligonucleótico"
\vskip0.800000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº: 4:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
GAGTCCGAGG AGAAAGCTGA TCTCA
\hfill
25
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID nº 5:
\vskip0.800000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 24 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
(B)
TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
(C)
TIPO DE FILAMENTO: una
\vskip0.500000\baselineskip
(D)
TIPOLOGIA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: otro ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
DESCRIPCIÓN: /desc. = "oligonucleótico"
\vskip0.800000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº: 5:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
GAAAGATGAC CGGGTCACTC CATT
\hfill
24
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID nº 6:
\vskip0.800000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 29 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
(B)
TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
(C)
TIPO DE FILAMENTO: una
\vskip0.500000\baselineskip
(D)
TIPOLOGIA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: otro ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
DESCRIPCIÓN: /desc. = "oligonucleótico"
\vskip0.800000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº: 6:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
ACTCGAGCTA TGAGCTGCAG GTGCGGGCA
\hfill
29
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID nº 7:
\vskip0.800000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 29 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
(B)
TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
(C)
TIPO DE FILAMENTO: una
\vskip0.500000\baselineskip
(D)
TIPOLOGIA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: otro ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
DESCRIPCIÓN: /desc. = "oligonucleótico"
\vskip0.800000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº: 7:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
ACTCGAGCTA TGAGCTGCAG GTGCGGGCA
\hfill
29
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID nº 8:
\vskip0.800000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 5 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
(C)
TIPO DE FILAMENTO:
\vskip0.500000\baselineskip
(D)
TIPOLOGIA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº: 8:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Trp Ser Xaa Trp Ser}

Claims (24)

1. Polinucleótido aislado que comprende una secuencia de nucleótidos seleccionada de entre el grupo constituido por:
(a)
la secuencia de nucleótidos de la SEC. ID. nº: 1;
(b)
la secuencia de nucleótidos de la SEC. ID. nº: 1 desde el nucleótido 238 hasta el nucleótido 1852;
(c)
la secuencia de nucleótidos de la SEC. ID. nº: 1 desde el nucleótido 301 hasta el nucleótido 1852;
(d)
la secuencia de nucleótidos de la SEC. ID. nº: 1 desde el nucleótido 301 hasta el nucleótido 945 o desde el nucleótido 238 hasta el nucleótido 945;
(e)
una secuencia de nucleótidos que oscila entre la secuencia de la secuencia de nucleótidos especificada en cualquiera de (a) a (d) como resultado de la degeneración del código genético; y
(f)
una secuencia de nucleótidos que codifica una especie homóloga de la secuencia de SEC. ID nº: 2, en la que dicha secuencia de nucleótidos codifica una proteína que tiene la actividad biológica de la proteína MU-1 representada por SEC. ID nº: 2 en un análisis de la producción de interferón \gamma de ratón o humano y/o de la proliferación de células del bazo, células de los ganglios linfáticos o de timocitos.
2. Polinucleótido según la reivindicación 1, en el que la secuencia de nucleótidos puede estar ligada funcionalmente a una secuencia de control de expresión.
3. Célula huésped transformada con el polinucleótido según la reivindicación 2.
4. Célula huésped según la reivindicación 3, en la que dicha célula es una célula de mamífero.
5. Procedimiento para la producción de una proteína MU-1, comprendiendo dicho procedimiento las etapas siguientes:
(a)
cultivar un cultivo de la célula huésped de la reivindicación 3 en un medio de cultivo adecuado; y
(b)
purificar la proteína MU-1 procedente del cultivo.
6. Proteína MU-1 aislada que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada de entre el grupo constituido por:
(a)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2;
(b)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2 desde el aminoácido 22 hasta el 538;
(c)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2 desde el aminoácido 22 hasta el 236;
(d)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2 desde el aminoácido 1 hasta el 236;
(e)
fragmentos de (a) a (d) que tienen la actividad biológica de la proteína MU-1 según (a) a (d) en un análisis de la producción de interferón \gamma de ratón o humano y/o de la proliferación de células del bazo, células de los ganglios linfáticos o de timocitos; y
(f)
una secuencia de aminoácidos codificada por una secuencia de nucleótidos capaz de hibridarse en condiciones muy severas de 0,1 \times SSC a 65ºC con la secuencia de nucleótidos especificada en cualquiera de las reivindicaciones 1(a) a (c) o con la secuencia de nucleótidos de la SEC. ID nº: 1 desde el nucleótido 301 hasta el nucleótido 945.
7. Composición farmacéutica que comprende una proteína según la reivindicación 6 y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
8. Anticuerpo, que reacciona específicamente con una proteína según la reivindicación 6.
9. Anticuerpo según la reivindicación 8, en el que el anticuerpo es un anticuerpo neutralizante.
10. Anticuerpo según las reivindicaciones 8 ó 9, en la que el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal.
11. Composición que comprende un anticuerpo según cualquiera de las reivindicaciones 8 a 10.
12. Polinucleótido aislado que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un péptido o proteína que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada de entre el grupo constituido por:
(a)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2;
(b)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2 desde el aminoácido 22 hasta el 538;
(c)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2 desde el aminoácido 22 hasta el 236;
(d)
la secuencia de aminoácidos de la SEC. ID. nº: 2 desde el aminoácido 1 hasta el 236; y
(e)
fragmentos de (a) a (d) que tienen la actividad biológica del péptido o de la proteína según (a) a (d) en un análisis de la producción de interferón \gamma de ratón o humano y/o de la proliferación de células del bazo, células de los ganglios linfáticos o de timocitos.
13. Proteína según la reivindicación 6, en la que dicha secuencia de aminoácidos forma parte de una proteína de fusión.
14. Proteína según la reivindicación 13, en la que dicha secuencia de aminoácidos está fusionada a un fragmento Fc.
15. Proteína según la reivindicación 14, en la que dicha secuencia de aminoácidos está fusionada a dicho fragmento Fc mediante secuencias enlazadoras.
16. Proteína según cualquiera de las reivindicaciones 6 ó 13 a 15, o anticuerpo según cualquiera de las reivindicaciones 8 a 10 para su utilización en terapia.
17. Proteína o anticuerpo según la reivindicación 16 para la utilización especificada en la presente memoria, en la que dicha proteína o anticuerpo está destinada al tratamiento de un trastorno autoinmunitario, de una reacción o afección alérgica o del rechazo del trasplante de tejido, piel u órgano o de la enfermedad injerto contra huésped (GVHD).
18. Utilización de la proteína según cualquiera de las reivindicaciones 6 ó 13 a 15, o del anticuerpo según cualquiera de las reivindicaciones 8 a 10 para la preparación de una composición farmacéutica destinada al tratamiento de un trastorno autoinmunitario, de una reacción o afección alérgica o del rechazo del trasplante de tejido, piel u órgano o de la enfermedad injerto contra huésped (GVHD).
19. Anticuerpo según las reivindicaciones 16 ó 17, para la utilización especificada en la presente memoria, o para la utilización del anticuerpo según la reivindicación 18, en el que el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal neutralizante capaz de bloquear el enlace del ligando a la cadena del receptor de MU-1 representada por la SEC. ID. nº: 2.
20. Proteína o anticuerpo según la reivindicación 17 ó 19 para la utilización especificada en la presente memoria, o para la utilización de la proteína o del anticuerpo según la reivindicación 18 ó 19, en la que dicho trastorno autoinmunitario es uno seleccionado de entre el grupo constituido por enfermedad del tejido conectivo, esclerosis múltiple, lupus eritematoso sistémico, artritis reumatoide, inflamación pulmonar autoinmunitaria, síndrome de Guillain-Barré, tiroiditis autoinmunitaria, diabetes mellitus dependiente de insulina, miastenia grave, enfermedad injerto contra huésped, enfermedad ocular inflamatoria autoinmunitaria y enfermedad inflamatoria del intestino, particularmente la enfermedad de Crohn.
21. Proteína o anticuerpo según la reivindicación 20, para la utilización especificada en la presente memoria, o para la utilización de la proteína o del anticuerpo según la reivindicación 20, en la que dicho trastorno autoinmunitario es la artritis reumatoide.
22. Proteína o anticuerpo según la reivindicación 20, para la utilización especificada en la presente memoria, o para la utilización de la proteína o del anticuerpo según la reivindicación 20, en la que dicho trastorno autoinmunitario es el lupus eritematoso sistémico.
23. Proteína o anticuerpo según la reivindicación 20, para la utilización especificada en la presente memoria, o para la utilización de la proteína o del anticuerpo según la reivindicación 20, en la que dicho trastorno autoinmunitario es la enfermedad inflamatoria del intestino, particularmente la enfermedad de Crohn.
24. Proteína o anticuerpo según la reivindicación 17 ó 19, para la utilización especificada en la presente memoria, o para la utilización de la proteína o del anticuerpo según la reivindicación 18 ó 19, en la que dicha reacción o afección alérgica es el asma u otro problema respiratorio.
ES99911454T 1998-03-17 1999-03-17 Mu-1, miembro de la familia del receptor de citoquina. Expired - Lifetime ES2253879T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US09/040,005 US6057128A (en) 1998-03-17 1998-03-17 MU-1, member of the cytokine receptor family
US40005 1998-03-17

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2253879T3 true ES2253879T3 (es) 2006-06-01

Family

ID=21908554

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES99911454T Expired - Lifetime ES2253879T3 (es) 1998-03-17 1999-03-17 Mu-1, miembro de la familia del receptor de citoquina.

Country Status (9)

Country Link
US (3) US6057128A (es)
EP (4) EP1681348A1 (es)
JP (3) JP2001527423A (es)
AT (1) ATE313626T1 (es)
AU (1) AU758824B2 (es)
DE (1) DE69929019T2 (es)
DK (1) DK0994947T3 (es)
ES (1) ES2253879T3 (es)
WO (1) WO1999047675A1 (es)

Families Citing this family (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6057128A (en) * 1998-03-17 2000-05-02 Genetics Institute, Inc. MU-1, member of the cytokine receptor family
US7189400B2 (en) 1998-03-17 2007-03-13 Genetics Institute, Llc Methods of treatment with antagonists of MU-1
US7198789B2 (en) * 1998-03-17 2007-04-03 Genetics Institute, Llc Methods and compositions for modulating interleukin-21 receptor activity
CA2330547A1 (en) * 1998-06-24 1999-12-29 Chugai Research Institute For Molecular Medicine, Inc. Novel hemopoietin receptor proteins
WO2000008152A1 (en) * 1998-08-04 2000-02-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Novel orphan cytokine receptors
AU2004203069B2 (en) * 1998-09-23 2008-06-12 Zymogenetics Inc. Cytokine Receptor Zalpha11
US6803451B2 (en) 1998-09-23 2004-10-12 Zymogenetics, Inc. Cytokine receptor zalpha11 polypeptides
DK1115862T3 (da) * 1998-09-23 2009-11-16 Zymogenetics Inc Cytokinreceptor Zalpha11
US6576744B1 (en) * 1998-09-23 2003-06-10 Zymogenetics, Inc. Cytokine receptor zalpha11
ATE377076T1 (de) * 1999-03-09 2007-11-15 Zymogenetics Inc Humanes cytokin als ligand des zalpha rezeptors und dessen verwendungen
US6307024B1 (en) * 1999-03-09 2001-10-23 Zymogenetics, Inc. Cytokine zalpha11 Ligand
AU5142300A (en) * 1999-05-18 2000-12-05 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Il-9/il-2 receptor-like molecules and uses thereof
US20020090680A1 (en) * 1999-05-18 2002-07-11 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Novel IL-9/IL-2 receptor-like molecules and uses thereof
US6777539B2 (en) * 2000-04-05 2004-08-17 Zymogenetics, Inc. Soluble zalpha11 cytokine receptors
ES2276795T3 (es) * 2000-05-11 2007-07-01 Genetics Institute, Llc Mu-1, miembro de la familia del receptor de citoquina.
CA2460916A1 (en) * 2001-10-04 2003-04-10 Laura Carter Methods and compositions for modulating interleukin-21 receptor activity
US20040016010A1 (en) * 2002-04-17 2004-01-22 Marion Kasaian IL-21 receptor knockout animal and methods of use thereof
EP2377549A1 (en) * 2002-06-07 2011-10-19 ZymoGenetics, Inc. Use of IL-21 for treating viral infections
EP1553982A4 (en) * 2002-07-15 2008-03-26 Wyeth Corp METHOD AND COMPOSITIONS FOR MODULATING THE DEVELOPMENT AND FUNCTION OF T-HELPER CELLS (T sb H / sb)
US20070092485A1 (en) * 2002-11-15 2007-04-26 Zymogenetics, Inc. Cytokine zalpha11 ligand
DE60330044D1 (de) 2002-12-13 2009-12-24 Zymogenetics Inc Il-21-produktion in prokaryontischen wirten
MXPA05009556A (es) * 2003-03-14 2005-11-16 Wyeth Corp Anticuerpos contra receptor de il-21 humano y sus usos.
ZA200507235B (en) * 2003-03-21 2007-03-28 Wyeth Corp Treating immunological disorders using agonists of interleukin-21/interleukin-21 receptor
CA2538083A1 (en) * 2003-09-25 2005-04-07 Zymogenetics, Inc. Methods of treating autoimmune diseases using il-21
PL1758610T3 (pl) * 2004-05-20 2012-11-30 Zymogenetics Inc Sposoby leczenia raka z zastosowaniem IL-21 i terapii przeciwciałem monoklonalnym
US20070111941A1 (en) * 2004-06-09 2007-05-17 Zymogenetics, Inc. Cytokine receptor zalpha11
JP2008508885A (ja) * 2004-08-05 2008-03-27 ワイス インターロイキン−21受容体活性を中和すること
GT200600148A (es) * 2005-04-14 2006-11-22 Metodos para el tratamiento y la prevencion de fibrosis
AU2006340750B2 (en) 2005-11-28 2013-03-07 Zymogenetics, Inc. IL-21 antagonists
WO2007114861A2 (en) * 2005-11-28 2007-10-11 Zymogenetics, Inc. Il-21 receptor antagonists
WO2010055366A2 (en) 2007-12-07 2010-05-20 Zymogenetics, Inc. Anti-human il-21 monoclonal antibodies
AR071885A1 (es) * 2008-05-23 2010-07-21 Wyeth Corp Proteinas de union al receptor de interleuquina 21
AR072136A1 (es) * 2008-05-23 2010-08-11 Wyeth Corp Metodos de tratamiento que utilizan proteinas de union del receptor de in-terleuquina 21
US12012441B2 (en) 2020-10-26 2024-06-18 Neptune Biosciences Llc Engineered human IL-21 cytokines and methods for using the same

Family Cites Families (62)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4235871A (en) 1978-02-24 1980-11-25 Papahadjopoulos Demetrios P Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles
US4501728A (en) 1983-01-06 1985-02-26 Technology Unlimited, Inc. Masking of liposomes from RES recognition
US4737323A (en) 1986-02-13 1988-04-12 Liposome Technology, Inc. Liposome extrusion method
US5011912A (en) 1986-12-19 1991-04-30 Immunex Corporation Hybridoma and monoclonal antibody for use in an immunoaffinity purification system
US4837028A (en) 1986-12-24 1989-06-06 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5567584A (en) 1988-01-22 1996-10-22 Zymogenetics, Inc. Methods of using biologically active dimerized polypeptide fusions to detect PDGF
DE721983T1 (de) 1988-01-22 2002-07-04 Zymogenetics, Inc. Verfahren zur herstellung von biologisch-aktive Dimerpeptiden
US6018026A (en) 1988-01-22 2000-01-25 Zymogenetics, Inc. Biologically active dimerized and multimerized polypeptide fusions
US5750375A (en) 1988-01-22 1998-05-12 Zymogenetics, Inc. Methods of producing secreted receptor analogs and biologically active dimerized polypeptide fusions
US5116964A (en) 1989-02-23 1992-05-26 Genentech, Inc. Hybrid immunoglobulins
US5225538A (en) 1989-02-23 1993-07-06 Genentech, Inc. Lymphocyte homing receptor/immunoglobulin fusion proteins
US5216131A (en) 1989-02-23 1993-06-01 Genentech, Inc. Lymphocyte homing receptors
US6406697B1 (en) 1989-02-23 2002-06-18 Genentech, Inc. Hybrid immunoglobulins
US5098833A (en) 1989-02-23 1992-03-24 Genentech, Inc. DNA sequence encoding a functional domain of a lymphocyte homing receptor
GB8927546D0 (en) 1989-12-06 1990-02-07 Ciba Geigy Process for the production of biologically active tgf-beta
US6136310A (en) 1991-07-25 2000-10-24 Idec Pharmaceuticals Corporation Recombinant anti-CD4 antibodies for human therapy
US5447851B1 (en) 1992-04-02 1999-07-06 Univ Texas System Board Of Dna encoding a chimeric polypeptide comprising the extracellular domain of tnf receptor fused to igg vectors and host cells
CZ25697A3 (en) 1994-07-29 1997-09-17 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
FR2742156A1 (fr) 1995-12-06 1997-06-13 Sanofi Sa Polypeptide recepteur de l'il-13
US5710023A (en) 1996-03-01 1998-01-20 Genetics Institute, Inc. IL-13 cytokine receptor chain
AU2326097A (en) 1996-03-13 1997-10-01 Zymogenetics Inc. Cytokine-receptor expressed in testis cells
WO1997047742A1 (en) 1996-06-12 1997-12-18 Smithkline Beecham Corporation Hr-1 receptor
EP0812913A3 (en) * 1996-06-12 1999-08-04 Smithkline Beecham Corporation HR-1 receptor, a receptor of the cytokine receptors family
AU6175696A (en) 1996-06-12 1998-01-07 Human Genome Sciences, Inc. Hr-1 receptor
WO1998010638A1 (en) 1996-09-10 1998-03-19 Amrad Operations Pty. Ltd. Therapeutic molecules
AUPO224696A0 (en) 1996-09-11 1996-10-03 Amrad Operations Pty. Limited A novel haemopoietin receptor and genetic sequences encoding same
EP1005552A1 (en) * 1997-01-16 2000-06-07 Genetics Institute, Inc. Member of the hematopoietin receptor superfamily
US20010025022A1 (en) 1997-11-26 2001-09-27 Kikly Kristine Kay Hnovilr
US6057128A (en) 1998-03-17 2000-05-02 Genetics Institute, Inc. MU-1, member of the cytokine receptor family
US7198789B2 (en) 1998-03-17 2007-04-03 Genetics Institute, Llc Methods and compositions for modulating interleukin-21 receptor activity
US7189400B2 (en) 1998-03-17 2007-03-13 Genetics Institute, Llc Methods of treatment with antagonists of MU-1
US6509057B2 (en) * 1998-04-01 2003-01-21 Sumitomo Osaka Cement, Co., Ltd. Antibacterial, antifungal or antialgal article and process for producing same
CA2330547A1 (en) 1998-06-24 1999-12-29 Chugai Research Institute For Molecular Medicine, Inc. Novel hemopoietin receptor proteins
WO2000008152A1 (en) 1998-08-04 2000-02-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Novel orphan cytokine receptors
US6576744B1 (en) 1998-09-23 2003-06-10 Zymogenetics, Inc. Cytokine receptor zalpha11
US6803451B2 (en) 1998-09-23 2004-10-12 Zymogenetics, Inc. Cytokine receptor zalpha11 polypeptides
DK1115862T3 (da) 1998-09-23 2009-11-16 Zymogenetics Inc Cytokinreceptor Zalpha11
WO2000027882A1 (en) 1998-11-06 2000-05-18 Smithkline Beecham Corporation Hnovilr
US6307024B1 (en) 1999-03-09 2001-10-23 Zymogenetics, Inc. Cytokine zalpha11 Ligand
ATE377076T1 (de) 1999-03-09 2007-11-15 Zymogenetics Inc Humanes cytokin als ligand des zalpha rezeptors und dessen verwendungen
US20020090680A1 (en) 1999-05-18 2002-07-11 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Novel IL-9/IL-2 receptor-like molecules and uses thereof
AU5142300A (en) 1999-05-18 2000-12-05 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Il-9/il-2 receptor-like molecules and uses thereof
JP2003523179A (ja) 1999-11-18 2003-08-05 シェーリング コーポレイション 哺乳動物レセプタータンパク質;関連する試薬および方法
EP1244708B8 (en) 1999-12-23 2007-03-07 ZymoGenetics, Inc. Method for treating inflammation
US6777539B2 (en) 2000-04-05 2004-08-17 Zymogenetics, Inc. Soluble zalpha11 cytokine receptors
DE10019727A1 (de) * 2000-04-20 2001-10-25 Alcatel Sa Netzwerkserver
ES2276795T3 (es) 2000-05-11 2007-07-01 Genetics Institute, Llc Mu-1, miembro de la familia del receptor de citoquina.
JP2002157737A (ja) * 2000-05-12 2002-05-31 Tdk Corp 光記録方法および光記録媒体
US6680563B2 (en) * 2001-06-27 2004-01-20 Thomson Licensing S.A. Color picture tube having a low expansion tension mask attached to a higher expansion frame
US6719302B2 (en) * 2001-07-02 2004-04-13 Vertex, Inc. Symmetrical gasket for a pipe joint with increased surface contact
CA2460916A1 (en) 2001-10-04 2003-04-10 Laura Carter Methods and compositions for modulating interleukin-21 receptor activity
DK1451322T3 (da) 2001-11-05 2010-02-01 Zymogenetics Inc Il-21-antagonister
US20040016010A1 (en) 2002-04-17 2004-01-22 Marion Kasaian IL-21 receptor knockout animal and methods of use thereof
EP1553982A4 (en) 2002-07-15 2008-03-26 Wyeth Corp METHOD AND COMPOSITIONS FOR MODULATING THE DEVELOPMENT AND FUNCTION OF T-HELPER CELLS (T sb H / sb)
MXPA05009556A (es) 2003-03-14 2005-11-16 Wyeth Corp Anticuerpos contra receptor de il-21 humano y sus usos.
ZA200507235B (en) 2003-03-21 2007-03-28 Wyeth Corp Treating immunological disorders using agonists of interleukin-21/interleukin-21 receptor
KR20070014181A (ko) 2004-05-19 2007-01-31 와이어쓰 면역글로불린 생성 및 아토피 질환의 조절
JP2008508885A (ja) 2004-08-05 2008-03-27 ワイス インターロイキン−21受容体活性を中和すること
GT200600148A (es) 2005-04-14 2006-11-22 Metodos para el tratamiento y la prevencion de fibrosis
WO2009100035A2 (en) 2008-02-01 2009-08-13 Wyeth Interleukin-21 (il-21) and il-21 receptor (il-21r) modulation of regulatory t cells and forkhead box p3 (foxp3)
AR071885A1 (es) 2008-05-23 2010-07-21 Wyeth Corp Proteinas de union al receptor de interleuquina 21
AR072136A1 (es) 2008-05-23 2010-08-11 Wyeth Corp Metodos de tratamiento que utilizan proteinas de union del receptor de in-terleuquina 21

Also Published As

Publication number Publication date
DE69929019T2 (de) 2006-08-03
US7994292B2 (en) 2011-08-09
EP2228448A1 (en) 2010-09-15
AU3009399A (en) 1999-10-11
EP1688495A1 (en) 2006-08-09
ATE313626T1 (de) 2006-01-15
WO1999047675A1 (en) 1999-09-23
US6057128A (en) 2000-05-02
US7705123B2 (en) 2010-04-27
JP2001527423A (ja) 2001-12-25
DK0994947T3 (da) 2006-04-18
AU758824B2 (en) 2003-04-03
JP2013188214A (ja) 2013-09-26
DE69929019D1 (de) 2006-01-26
US20080167241A1 (en) 2008-07-10
EP0994947B1 (en) 2005-12-21
JP2010057489A (ja) 2010-03-18
EP1681348A1 (en) 2006-07-19
US20100130729A1 (en) 2010-05-27
EP0994947A1 (en) 2000-04-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2253879T3 (es) Mu-1, miembro de la familia del receptor de citoquina.
ES2242966T3 (es) Ctla-8humana y usos de proteinas relacionadas con ctla-8.
US8048984B2 (en) Human GIL-19/AE289 proteins
ES2295026T3 (es) Proteinas gil-19/ae289 humanas y polinucleotidos que codifican las mismas.
EP1005552A1 (en) Member of the hematopoietin receptor superfamily
US20030049798A1 (en) MU-1, member of the cytokine receptor family
ES2276795T3 (es) Mu-1, miembro de la familia del receptor de citoquina.
AU2001263088A1 (en) MU-1, member of the cytokine receptor family
AU2003208117C1 (en) MU-1, member of the cytokine receptor family
AU769279B2 (en) U4, a member of the hematopoietin receptor superfamily
MXPA99010596A (es) Mu-1, miembro de la familia de receptores de la citocina
US20020192779A1 (en) Secreted protein, BA3.1, and polynucleotides encoding same
EP1897950A2 (en) Human GIL-19/AE289 proteins and polynucleotides encoding same
MXPA00009834A (es) U4, un miembro de la superfamilia de receptores de hematopoyetina