ES2232976T3

ES2232976T3 - Derivados de 2-pirrolidinona sustituidos en posicion 4 para reducir el nivel extracelular de glutamato.

Info

Publication number: ES2232976T3
Application number: ES98963476T
Authority: ES
Inventors: Thomas J. Feuerstein; Rainer Knorle
Original assignee: Universitaetsklinikum Freiburg; Albert Ludwigs Universitaet Freiburg
Current assignee: Universitaetsklinikum Freiburg; Albert Ludwigs Universitaet Freiburg
Priority date: 1997-11-18
Filing date: 1998-11-17
Publication date: 2005-06-01
Anticipated expiration: 2018-11-17
Also published as: EP1032560B1; US6384069B1; EP1032560A1; CA2310319A1; PT1032560E; DE59812460D1; JP2001523659A; EP1486487A1; ATE285768T1; CY1105658T1; DK1032560T3; WO1999025683A1; DE19751062A1

Abstract

Derivado de 2-pirrolidinona de la fórmula general **(Fórmula)** en la que R1 y R2 forman, en común con el átomo de carbono situado en la posición 4 del anillo de pirrolidinona, un anillo saturado o insaturado, de cinco a diez miembros, que, junto a átomos de carbono, puede tener hasta 2 heteroátomos escogidos entre átomos de oxígeno, azufre y nitrógeno, y que está sin sustituir o sustituido con hasta 3 sustituyentes escogidos entre el conjunto que consta de grupos hidroxilo, grupos amino, radicales alquilo de C1-C4, radicales alcoxi de C1-C4 y radicales alquil-amino de C1-C4, R3, R4, R5 y R6 representan, en cada caso independientemente unos de otros, átomos de hidrógeno, átomos de halógeno, grupos hidroxilo, grupos amino, radicales alquilo de C1-C10, radicales alcoxi de C1-C10, radicales alquilamino de C1-C10 o radicales arilo de C6-C10, y R7 representa un átomo de hidrógeno o bien un radical alquilo de C1-C10 o radical acilo de C1-C10, o de una sal farmacológicamente compatible de éste, para su utilización como sustancia activa terapéutica.

Description

Derivados de 2-pirrolidinona sustituidos en posición 4 para reducir el nivel extracelular de glutamano.

El glutamato (Glu) es el transmisor excitatorio esencial en el sistema nervioso central. Unas altas concentraciones extracelulares de Glu en el espacio extracelular conducen a unos daños excitotóxicos (véase la cita de Siesjö BK, Bengtsson F, Grampp W, Theander S, 1989, Calcium, excitotoxins, and neuronal death in the brain [El calcio, las excitotoxinas, y muerte neuronal en el cerebro] Ann N Y Acad Sci 568:234-251). Ejemplos de tales enfermedades del sistema nervioso central, en las que la excitotoxicidad desempeña un cometido, son apoplejía, hipoglicemia, hipoxia, traumas y epilepsia como trastornos agudos, pero también trastornos crónicos en el sentido de la neuro-degeneración, tales como la enfermedad de Alzheimer, la demencia en el caso de SIDA, la esclerosis lateral amiotrófica, la enfermedad de Parkinson, el alcoholismo crónico, y otros. En el caso de dolores crónicos, una transmisión glutamatérgica aumentada (que va acompañada por una concentración extracelular aumentada de Glu) es responsable de modificaciones plásticas y participa esencialmente en la patogénesis de la "enfermedad dolorosa", que está alejada de la causa propiamente dicha (véase la cita de Liu HT, Mantyh PW, Basbaum AI, 1997, NMDA-receptor regulation of substance P release from primary afferent nociceptors [Regulación por el receptor de NMDA de la liberación de la sustancia P desde nociceptores aferentes primarios]. Nature 386: 721-724).

Unas sustancias, que, por medio de la disminución del nivel extracelular de Glu, impidan la excitotoxicidad del Glu y las modificaciones plásticas provocadas por el Glu, tendrían una ventaja decisiva para la terapia y la profilaxis de los citados cuadros patológicos.

Varias sustancias, que (presuntamente) influyen sobre la transmisión glutamatérgica, son conocidas o ya se encuentran en el mercado como medicamentos. A ellas pertenecen el inhibidor de la liberación de Glu, riluzol (véase la cita de Bryson HM, Fulton B, Benfield P, 1996, Riluzole. A review of its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties and therapeutic potential in amyotrophic lateral sclerosis [Riluzol, una revisión de sus propiedades farmacodinámicas y farmacocinéticas, y de su potencial terapéutico en la esclerosis lateral amiotrófica]. Drugs 52: 549-563) y la lamotrigina. Este último, sin embargo, a pesar de afirmaciones originalmente opuestas, no actúa como un inhibidor específico de la secreción de Glu (véase la cita de Waldmeier PC, Martin P, Stocklin K, Portet C, Schmutz M, 1996, Effect of carbamazepine, oxcarbazepine and lamotrigine on the increase in extracellular glutamate elicited by veratridine in rat cortex and striatum [Efecto de carbamazepina, oxcarbazepina y lamotrigina en el aumento en cuanto a glutamato extracelular inducido por veratridina en el córtex y el cuerpo estriado de ratas]. Naunyn Schmiedeberg=s Arch Pharmacol 354:164-172). También el derivado de GABA, gabapentina, ha de inhibir, en el intervalo milimolar de concentraciones, la síntesis de Glu (véase la cita de Goldlust A, Su TZ, Welty DF, Taylor CO, Oxender DL, 1995, Effects of anticonvulsant drug gabapentin on the enzymes in metabolic pathways of glutamate and GABA [Efectos del medicamento anticonvulsivo gabapentina sobre las enzimas de las trayectorias metabólicas de glutamato y GABA]. Epilepsy Res 22:1-11); estas concentraciones no se pueden alcanzar, sin embargo, in vivo.

Algunos derivados de la 2-pirrolidinona, sustituidos en las posiciones 1, 3 y 5, son conocidos como sustancias eficaces como anticonvulsivas y/o que posiblemente influyen sobre la transmisión glutamatérgica (véase la cita de Nakamura J, Miwa T, Mori Y, Sasaki H, Shibasaki J, 1991, Comparative studies on the anticonvulsant activity of lipophilic derivatives of gamma-aminobutyric acid and 2-pyrrolidinone in mice [Estudios comparativos de la actividad anticonvulsiva de derivados lipófilos de ácido gamma-aminobutírico y 2-pirrolidinona en ratones]. J Pharmacobiodyn 14:1-8; Reddy PA, Hsiang BC, Latifi TN, Hill MW, Woodward KE, Rothman SM, Ferrendelli JA, Covey DF, 1996, 3,3-Dialkyl- and 3-alkyl-3-benzyl-substituted 2-pyrrolidinones: a new class of anticonvulsant agents [2-pirrolidinonas sustituidas con 3,3-dialquilo y 3-alquilo-3-bencilo: una nueva clase de agentes anticonvulsivos]. J Med Chem 39: 1.898-1.906; De la Mora MP, Tapia R, 1973, Anticonvulsant effect of 5-ethyl,5-phenyl,2-pirrolidinone and its possible relationship to \gamma-aminobutyric acid-dependent inhibitory mechanisms [Efecto anticonvulsivo de la 5-etil,5-fenil,2-pirrolidinona y su posible relación con mecanismos inhibitorios dependientes de ácido \gamma-aminobutírico]. Biochem Pharmacol. 22:2.635-2.639).

La publicación Arzneimittelforschung 10, 1960, páginas 243-250 divulga en el no XVII de la Tabla 1 el compuesto

1

Este compuesto no se considera, sin embargo, como especialmente eficaz, como se desprende de la discusión en la columna derecha en la página 249 de esta publicación. La publicación tampoco contiene ninguna mención de que se emplee este compuesto como medicamento.

Hoy en día no existe ningún medicamento satisfactorio que disminuya de manera eficaz el nivel de glutamato extracelular. También los medicamentos riluzol y lamotrigina, que ya se encuentran en el comercio, son sólo débilmente eficaces como inhibidores de la liberación de Glu, y por metabolización o por su mecanismo de acción muestran unos efectos secundarios, que limitan su empleo terapéutico.

Por tanto es una misión del invento poner a disposición nuevas sustancias medicamentosas o bien nuevos medicamentos, que sean eficaces en el caso de enfermedades, que se han de atribuir a un nivel elevado de glutamato, y que, por lo tanto, se puedan emplear para la profilaxis y el tratamiento de enfermedades del sistema nervioso central, tales como apoplejía, hipoglicemia, hipoxia, traumas y epilepsia, la enfermedad de Alzheimer, la demencia en el caso de SIDA, la esclerosis lateral amiotrófica, la enfermedad de Parkinson y el alcoholismo crónico. Estos nuevos medicamentos no han de tener las desventajas de los medicamentos conocidos en el estado de la técnica.

De manera preferida, los medicamentos pueden influir sobre la transmisión glutamatérgica y el nivel de glutamato extracelular y/o impedir la despolarización y la sobreexcitación de células postsinápticas, por ejemplo, por glutamato segregado presinápticamente.

A fin de resolver el problema planteado por esta misión, se ponen a disposición, conforme al invento, un derivado de 2-pirrolidinona de la fórmula general

2

en la que

R^{1} y R^{2} forman, en común con el átomo de carbono situado en la posición 4 del anillo de pirrolidinona, un anillo saturado o insaturado, de cinco a diez miembros, que, junto a átomos de carbono, puede tener hasta 2 heteroátomos escogidos entre átomos de oxígeno, azufre y nitrógeno, y que está sin sustituir o sustituido con hasta 3 sustituyentes escogidos entre el conjunto que consta de grupos hidroxilo, grupos amino, radicales alquilo de C_{1}-C_{4}, radicales alcoxi de C_{1}-C_{4} y radicales alquil-amino de C_{1}-C_{4},

R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6} representan, en cada caso independientemente unos de otros, átomos de hidrógeno, átomos de halógeno, grupos hidroxilo, grupos amino, radicales alquilo de C_{1}-C_{10}, radicales alcoxi de C_{1}-C_{10}, radicales alquil-amino de C_{1}-C_{10} o radicales arilo de C_{6}-C_{10}, y

R^{7} representa un átomo de hidrógeno o bien un radical alquilo de C_{1}-C_{10} o radical acilo de C_{1}-C_{10},

o sales farmacológicamente compatibles de éste,

para su utilización como sustancia activa terapéutica.

Los radicales alquilo, al igual que los componentes alquilo de los radicales alcoxi y de los radicales alquil-amino, pueden ser lineales o ramificados.

Sorprendentemente, se ha encontrado que ciertos derivados de 2-pirrolidinona, que tienen en la posición 4 un sustituyente tal como se ha definido precedentemente, manifiestan un excelente efecto en el caso de la disminución del nivel de glutamato extracelular y, por lo tanto, se pueden utilizar para la profilaxis y el tratamiento de enfermedades del sistema nervioso central tales como apoplejía, hipoglicemia, hipoxia, traumas y epilepsia, la enfermedad de Alzheimer, la demencia en el caso de SIDA, la esclerosis lateral amiotrófica, la enfermedad de Parkinson y el alcoholismo crónico. Los compuestos pueden impedir asimismo de manera preferida la despolarización y la sobreexcitación de células postsinápticas, por ejemplo, por el glutamato segregado presinápticamente. Una sustitución de los derivados de 2-pirrolidinona, conformes al invento, en las posiciones 3 y 5 del anillo de pirrolidinona, es ampliamente acrítica, siempre y cuando que esté garantizada la sustitución en la posición 4 del anillo de pirrolidinona. Se prefieren los derivados de 2-pirrolidinona, que no están sustituidos en las posiciones 3 y 5, o que tienen uno o dos sustituyentes alquilo con hasta 10 átomos de carbono, de manera preferida hasta 6 átomos de carbono, y/o uno o dos sustituyentes arilo con 6 a 10 átomos de carbono, de manera preferida grupos fenilo.

También es ampliamente acrítica una sustitución del átomo de nitrógeno de los derivados de 2-pirrolidinona, pero, de manera preferida, el átomo de nitrógeno de los derivados de 2-pirrolidinona conformes al invento está sin sustituir o sustituido con un radical alquilo de C_{1}-C_{6} o un radical acilo de C_{1}-C_{6}.

Para los derivados de 2-pirrolidinona, conformes al invento, es esencial la sustitución en la posición 4 del anillo de pirrolidinona.

Cuando los radicales R^{1} y R^{2} son diferentes, tal como en la forma de realización antes descrita del invento, los derivados reivindicados de 2-pirrolidinona muestran una isomería óptica. Conforme al invento, se abarca tanto la forma R pura como también la forma S pura de los derivados de pirrolidinona, pero también se abarcan mezclas racémicas arbitrarias de las formas R y S.

Conforme al invento, se prefiere especialmente que los radicales R^{1} y R^{2} formen, en común con el átomo de carbono situado en la posición 4 del anillo de pirrolidinona, un anillo saturado o insaturado de cinco a diez miembros. Este anillo puede tener hasta dos heteroátomos escogidos entre átomos de oxígeno, azufre y nitrógeno, y puede estar sin sustituir o sustituido con hasta tres sustituyentes escogidos entre grupos hidroxilo, grupos amino, radicales alquilo de C_{1}-C_{4}, radicales alcoxi de C_{1}-C_{4} y radicales alquil-amino de C_{1}-C_{4}. De manera preferida, sin embargo, los radicales R^{1} y R^{2} forman un anillo sin sustituir, que preferiblemente no tiene heteroátomos de ningún tipo, que de manera preferida está saturado y de manera especialmente preferida consta de seis átomos de carbono, estando incluido el átomo de carbono situado en la posición 4 del anillo de 2-pirrolidinona. Un derivado de 2-pirrolidinona, especialmente preferido, del invento es la 8-aza-espiro[5,4]decan-9-ona (lactama de gabapentina).

3

Siempre y cuando que por lo menos uno de los radicales R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6} sean diferentes de hidrógeno, junto a los isómeros ópticos (que están abarcados conforme al invento) también se presentan isómeros estructurales. Todos los isómeros estructurales, así como sus mezclas, se abarcan por los derivados de 2-pirrolidinona conformes al invento.

En lugar del derivado de 2-pirrolidinona, tal como se ha definido precedentemente, se pueden utilizar también sales farmacológicamente compatibles, en particular sales por adición de ácidos, del derivado de 2-pirrolidinona.

Los compuestos conformes al invento se pueden preparar de una manera en sí conocida. Así, la 8-aza-espiro[5,4]decan-9-ona, especialmente preferida conforme al invento, ya se ha descrito en la bibliografía (véase la cita de Kearney A.S., Mehta S.C., Radebaugh G.W., The effect of cyclodextrins on the rate of intramolecular lactamization of gabapentin in aqueous solution [El efecto de ciclodextrinas sobre el régimen de lactamización intramolecular de gabapentina en una solución acuosa]. International Journal of Pharmaceutics, 78 (1992), 25-34, así como la cita, ya discutida precedentemente, de Arzneimittelforschung 10, 1960, páginas 243-250), pero no se ha propuesto una utilización de este compuesto como sustancia activa terapéutica. La 8-aza-espiro[5,4]decan-9-ona, preferida conforme al invento, se puede considerar como una lactama del conocido compuesto gabapentina, y p.ej. se puede preparar mediante irradiación con luz ultravioleta de una solución acuosa de gabapentina, tamponada con fosfato. Mediante lactamización de derivados de gabapentina, sustituidos de una manera correspondiente, se pueden preparar derivados sustituidos de la 8-aza-espiro[5,4]decan-9-ona. Se prefieren los derivados que tienen un radical alquilo de C_{1}-C_{4}, un halógeno, un grupo hidroxilo o un grupo amino, de manera preferida un radical alquilo de C_{1}-C_{4} o un átomo de halógeno.

El compuesto se puede preparar también según el siguiente esquema.

4

El éster monometílico de ácido 1,1-ciclohexano-diacético se hace reaccionar pasando por el correspondiente cloruro de ácido para dar la azida. La azida se degrada según el procedimiento de Curtius para dar el isocianato. A continuación, se hidroliza el isocianato para dar el éster ciclohexanometílico de ácido 1-metilamino-1-acético. El calentamiento de esta sustancia en metanol alcalino, bajo reflujo durante tres días, proporciona la 8-aza-espiro[5,4]decan-9-ona o lactama de gabapentina.

Una prescripción general de síntesis para las 2-pirrolidinonas sustituidas en la posición 4, conformes al invento, parte, apoyándose en la síntesis de derivados de GABA sustituidos en la posición 3, publicada por Andruszkiewicz y Silverman (R. Andruszkiewicz y R.B. Silverman, Synthesis 953-955 (1989)) de ésteres de ácidos carboxílicos insaturados en \alpha,\beta (1), sustituidos correspondientemente, que son accesibles, entre otras maneras, a través de una reacción de Reformatzky. Después de haber reaccionado con nitrometano, se obtiene, en una reaccion por adición de Michael, un compuesto de nitro (2), que, después de una reducción con hidrógeno elemental, se transforma en el correspondiente compuesto de amino (3). Después de una disociación del éster y de la activación de la función de carboxilato por medio de un grupo bien saliente (p.ej. una transformación en el halogenuro de ácido carboxílico), se obtiene, mediando ciclización, la correspondiente 2-pirrolidinona sustituida en la posición 4.

\vskip1.000000\baselineskip

5

100

6

Las composiciones conformes al invento se pueden formular de una manera en sí conocida para dar medicamentos para mamíferos, de manera preferida para seres humanos. En los medicamentos, las composiciones conformes al invento se presentan en mezcla con un vehículo farmacéutico orgánico o inorgánico, que es apropiado para administraciones por vía enteral o parenteral. Se prefiere especialmente la administración por vía oral de las composiciones conformes al invento por medio de tabletas, cápsulas, polvos, o en una forma líquida, tal como la de suspensiones, en solución o como una emulsión o un jarabe.

En el caso de la formulación como tabletas, se utilizan usuales vehículos de medicamentos, tales como citrato de sodio, lactosa, celulosa microcristalina y almidón, agentes lubricantes tales como ácido silícico anhidro, aceite de ricino hidrogenado, estearato de magnesio, lauril-sulfato de sodio y talco, así como agentes aglutinantes tales como pasta de almidón, glucosa, lactosa, goma arábiga, manita, trisilicato de magnesio y talco. Cuando las composiciones conformes al invento se han de administrar a través de líquidos, se pueden utilizar vehículos líquidos usuales.

Asimismo, es posible una formulación para inyecciones e infusiones o como supositorios, tal como es conocida en el sector especializado y se ha descrito en obras clásicas competentes.

Las composiciones conformes al invento se pueden formular, asimismo de manera en sí conocida, como formulaciones de depósito o como medicamentos con una liberación retardada o demorada.

La forma de las dosis de las composiciones conformes al invento depende de la composición especial y de otros factores, y puede ser determinada por un experto en la materia basándose en el estado del paciente que se ha de tratar, en la gravedad y en el tipo de la enfermedad que se ha de tratar, en los posibles efectos secundarios de los compuestos, etc.

Los Ejemplos ilustran el invento

Ejemplo 1

Se preparó una solución de gabapentina (100 \muM) en un tampón fisiológico (su composición se indica seguidamente) con un valor del pH de 7,4, y se irradió con luz ultravioleta (a 260 y 330 nanómetros) durante dos horas a 37ºC. Como se ha descrito en la cita de Kearney A.S. y colaboradores, International Journal of Pharmaceutics, 78 (1992), 25-34, en este caso se forma lentamente la lactama 8-aza-espiro[5,4]decan-9-ona. Debido a la lenta velocidad de la reacción, según Kearney y colaboradores (1992) se supone un rendimiento de aproximadamente 1%, lo que corresponde a una solución 1 \muM.

La eficacia de esta solución para disminuir el nivel de glutamato extracelular se mostró con ayuda de experimentos de superfusión en secciones de cerebros de ratas. A este fin se utilizaron unas secciones con un espesor de 350 \mum del striatum (cuerpo estriado) de una rata. Se colocan en cada caso dos secciones en una cámara de superfusión con un volumen muerto (inactivo) extremadamente pequeño, de aproximadamente 100 \mul. A continuación, éstas se enjuagan a 37ºC con un tampón fisiológico (concentraciones en mM: NaCl 121, KCl 1,8, CaCl_{2} 1,3, MgSO_{4} 1,2, NaHCO_{3} 25, KH_{2}PO_{4} 1,2, glucosa 11, valor del pH 7,4, 95% de O_{2}/5% de CO_{2} saturado). Después de una perfusión previa, que sirve sobre todo para eliminar partículas de tejido y aminoácidos, que son liberados debido a una lesión del tejido, se reúnen fracciones de material superfundido con un caudal de 400 a 800 \mul por cinco minutos. Seis de las 12 cámaras que hay a disposición se enjuagan a fondo continuamente a partir del comienzo de la perfusión previa con la solución aproximadamente 1 \muM de 8-aza-espiro[5,4]decan-9-ona, las cámaras restantes, que se enjuagan con el tampón, sirven como testigos. Los materiales superfundidos obtenidos se filtran (tamaño de poros 0,45 \mum) y mediante una HPLC (cromatografía en fase líquida de alto rendimiento) se determinan las concentraciones de aminoácidos. Detalles del procedimiento se han descrito, por ejemplo, en la cita de R. Knörle y colaboradores, Neuroscience Letters 221 (1977), 169-172.

Los resultados muestran una manifiesta disminución de la concentración de glutamato extracelular por medio de la 8-aza-espiro[5,4]decan-9-ona. En el caso de las muestras, que contienen el compuesto conforme al invento, se encontraron 0,12 \muM de glutamato, CI_{95} = [0,10, 0,13], mientras que en los ensayos testigos se encontraron 0,24 \muM de glutamato, CI_{95} = [0,19, 0,29].

Ejemplo 2

El efecto neuroprotector de los compuestos conformes al invento se comprobó in vivo sobre la base de la publicación en Invest Opthalmol Vis Sci 39: 1.063-1.066, 1998. Se encontraron los siguientes resultados:

10 ratas se trataron, al comienzo de un aumento de la presión intraocular unilateral, durante una hora, con NaCl al 0,9% por vía i.p. (intraperitoneal) . Después de 6 horas se llevó a cabo el tratamiento de nuevo con NaCl al 0,9% por vía i.p.. Después de 14 días, se sacrificaron las ratas, y se investigaron las células ganglionales retinales. En comparación con el respectivo ojo testigo, había sobrevivido solamente un 17,4% (\forall4%) de las células ganglionales retinales. Las ratas se comportaron en los 14 días después del ensayo de manera totalmente no llamativa, y no murió ningún animal.

En el grupo de ensayo, asimismo a base de 10 ratas, al comienzo de un aumento de la presión intraocular unilateral durante una hora, se administraron 50 mg/kg de 8-aza-espiro[5,4]decan-9-ona por vía i.p. El compuesto se administró, de nuevo en una dosis de 50 mg/kg, 6 horas después del aumento intraocular de la presión. Después de 14 días se sacrificaron las ratas, y se investigaron las células ganglionales retinales. Se mostró que, en comparación con el respectivo ojo testigo, sobrevivió un 35% (\forall7%) de las células ganglionales retinales. Las ratas se comportaron en los 14 días después del ensayo de manera totalmente no llamativa, y no murió ningún animal.

Este ensayo muestra claramente el aumento de las células ganglionales retinales que sobreviven después de una isquemia retinal debida a la presión, desde 17,4% (\forall4%) hasta 35,0%(\forall4%). La neurodegeneración en este modelo de glaucoma está basada en una toxicidad causada por Glu y mediada por el receptor de NMDA.

Ejemplo 3

En otro ensayo in vivo se pudo demostrar que el mecanismo isquémico de acción de los compuestos conformes al invento está basado en una reducción del Glu segregado.

Secciones de hipocampo de rata con un espesor de 350 \mum se incubaron a 37ºC durante 60 minutos en 3 ml de medio. El medio contenía, para la marcación de la agrupación (del inglés pool) endógena de Gln, 2 \muM de [^{3}H]-Gln. A continuación, las secciones sintetizan Glu. Las secciones se lavaron y luego se sometieron a una superfusión con un tampón durante 50 minutos. A intervalos de 5 minutos, se extrajeron en total 15 muestras de superfusión por cromatografía con intercambio de aniones de [^{3}H]-Glu, y se midieron por recuento de la escintilación en líquido. A partir del [^{3}H]-Glu, que se había extraído de las muestras de superfusión y de las secciones de tejidos después de la superfusión, se calcularon las velocidades fraccionales de la liberación de [^{3}H]-Glu.

La lactama de gabapentina se comprobó primero en un modelo, en el que se había provocado la liberación por estimulación eléctrica. La liberación responde en este modelo tanto a tetrodotoxina (TTX) como también a iones de Ca^{++} extracelulares. Después de la incubación con Gln titriado, los secciones se sometieron a una superfusión y se estimularon eléctricamente dos veces, empleándose 540 impulsos de 4 ms, 6 Hz y 60 mA. La superfusión se llevó a cabo a la temperatura ambiente, y no a 37ºC. Además, estaban presentes 100 \muM del agente bloqueador de la absorción de Glu, PDC, a fin de reducir la absorción renovada de Glu liberado. Se añadieron TTX o la lactama de gabapentina a partir de 15 minutos antes de la segunda estimulación. Se encontró que la liberación de Glu, provocada eléctricamente, es inhibida parcialmente por la TTX, pero no por la lactama de gabapentina. La liberación casi fisiológica de Glu no es influida por tanto por la lactama de gabapentina.

El modelo del [^{3}H]-Glu, formado endógenamente, se utilizó asimismo para la producción de condiciones isquémicas in vitro. Para la situación "casi isquémica" de una sección, durante la superfusión se reemplazaron el oxígeno y la glucosa por nitrógeno y sacarosa. La sacarosa se utilizó en lugar de glucosa 11 mM, a fin de obtener la osmolaridad del líquido de superfusión. Es sabido que la sacarosa no puede ser desdoblada in vitro en glucosa y fructosa. Al contrario que en el caso de los ensayos, en los que la liberación de [^{3}H]-Glu se había provocado eléctricamente, y para estimular una isquemia de manera tan buena como sea posible, la liberación de [^{3}H]-Glu durante la incubación y la superfusión se llevó a cabo a 37ºC. Se comprobó que la alta concentración usual del agente inhibidor de la absorción de Glu, PDC, a saber de 100 \muM, disminuía manifiestamente la respuesta a la isquemia. Por lo tanto, todos los ensayos se llevaron a cabo en presencia de sólo 3 \muM de PDC, lo que aumentó manifiestamente el efecto de la isquemia.

Se encontró que, en este modelo in vitro de isquemia, la lactama de gabapentina disminuye significativamente la segregación neurotóxica de [^{3}H]-Glu.

Los compuestos impiden por consiguiente inequívocamente in vitro el gran aumento del nivel de tritio-Glu extracelular en secciones de hipocampo de ratas (previamente cargadas con tritio-glutamina) después de haber reemplazado el O_{2} por N_{2} y la glucosa por sacarosa, y concretamente en aproximadamente un 50%. La liberación casi fisiológica de Glu, mediada por el potencial de acción, no fue influida, sin embargo, por la lactama de gabapentina.

Ejemplo comparativo 1

Se repitió el Ejemplo 1, con la modificación de que la solución que contenía gabapentina no se irradió con luz ultravioleta, sino que se utilizó directamente en el ensayo. La solución de comparación contiene, por lo tanto, exclusivamente gabapentina, pero nada de 8-aza-espiro[5,4]decan-9-ona. En el caso de los correspondientes ensayos, no se pudo encontrar ninguna diferencia entre las muestras, que se habían tratado con la solución de gabapentina, y las muestras de comparación.

Ejemplo comparativo 2

Se repitió el Ejemplo 2 precedente, pero en lugar de 8-aza-espiro[5,4]decan-9-ona se empleó el compuesto gabapentina, estructuralmente similar. Se puso de manifiesto que la gabapentina no mostraba ningún efecto de protección frente a una neurodegeneración en este modelo de glaucoma.

Claims

1. Derivado de 2-pirrolidinona de la fórmula general

7

en la que

o de una sal farmacológicamente compatible de éste,

para su utilización como sustancia activa terapéutica.

2. Derivado de 2-pirrolidinona de acuerdo con la reivindicación 1, en donde los radicales R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6} representan átomos de hidrógeno.

3. Derivado de 2-pirrolidinona de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en donde los radicales R^{1} y R^{2} forman, en común con el átomo de carbono situado en la posición 4 del anillo de pirrolidinona, un anillo de hidrocarburo saturado de seis miembros.

4. Derivado de 2-pirrolidinona de acuerdo con la reivindicación 3, a saber 8-aza-espiro[5,4]decan-9-ona.

5. Utilización de un derivado de 2-pirrolidinona de la fórmula general

8

en la que

o de una sal farmacológicamente compatible de éste,

para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento y/o a la prevención de enfermedades, que están basadas en un elevado nivel de glutamato extracelular.

6. Utilización de acuerdo con la reivindicación 5, en donde los radicales R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6} representan átomos de hidrógeno.

7. Utilización de acuerdo con la reivindicación 5 ó 6, en donde los radicales R^{1} y R^{2} forman, en común con el átomo de carbono situado en la posición 4 del anillo de pirrolidinona, un anillo de hidrocarburo saturado de seis miembros, que está sin sustituir o sustituido con un sustituyente, seleccionado entre un grupo de hidroxilo, un grupo amino, un átomo de halógeno o un radical alquilo de C_{1}-C_{4}.

8. Utilización de acuerdo con la reivindicación 7, en la que el derivado de 2-pirrolidinona es 8-aza-espiro[5,4]decan-9-ona.

9. Utilización de un derivado de 2-pirrolidinona, tal como se ha definido en una de las reivindicaciones 5 a 8, en que el medicamento sirve para la prevención y el tratamiento de una apoplejía.