ES2220109T3

ES2220109T3 - 5-heterociclilpirazolo (4,3-d) pirimidin-7-onas para el tratamiento de la disfuncion erectil masculina.

Info

Publication number: ES2220109T3
Application number: ES99944076T
Authority: ES
Inventors: Zhihua Sui; Jihua Guan; Mark J. Macielag
Original assignee: Ortho McNeil Pharmaceutical Inc
Current assignee: Janssen Pharmaceuticals Inc
Priority date: 1998-09-04
Filing date: 1999-09-02
Publication date: 2004-12-01
Anticipated expiration: 2019-09-02
Also published as: JP4717210B2; US6077841A; PT1109814E; CA2342830C; DK1109814T3; JP2002524460A; DE69916627T2; WO2000014088A1; EP1109814B1; ATE264861T1; DE69916627D1; EP1109814A1; AU5704199A; CA2342830A1

Abstract

Un compuesto de fórmula (I) **(fórmula)** donde R1 y R2 son cada uno independientemente seleccionados entre hidrógeno o alquilo C1-C6; R3 es seleccionado entre **(fórmula)** es un anillo heteroaromático de cinco miembros que consiste en átomos de carbono y en uno a tres heteroátomos seleccionados entre N, O o S; R4, R5, R6 y R7 son cada uno independientemente seleccionados entre hidrógeno, alquilo C1-C6, alquilo C1-C6 fluorado, ciano, (hidroxi)alquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, alcoxi C1-C6 fluorado, alcanoílo C1-C6, halógeno, hidroxi, alquil (C1-C6)-NR8R9, NR8R9, CONR8R9 o SO2NR8R9; R8 es seleccionado entre hidrógeno o alquilo C1-C6; R9 es seleccionado entre hidrógeno, alquilo C1-C6 o alquil(C1-C6)-NR13R14, o R8 y R9, junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un grupo pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo o 4-N(R10)piperazinilo no substituido o substituido, donde el substituyente es seleccionado entre alquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, NR11R12 o ONR11R12; R10 es seleccionado entre hidrógeno, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C6, (hidroxi)alquilo C1-C6, arilo, heteroarilo, aralquilo, aralquenilo o C(O)NH2; R11 y R12 son cada uno independientemente seleccionados entre hidrógeno, alquilo C1-C6, (hidroxi)alquilo C1-C6 o (alcoxi C1-C6)alquilo C1-C6, y R13 y R14 son cada uno independientemente seleccionados entre hidrógeno o alquilo C1-C6, o R13 y R14, junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un grupo pirrolidinilo, piperidinilo o morfolinilo no substituido o substituido, donde el substituyente es seleccionado entre alquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, NR11R12 o CONR11R12; siempre que, cuando R3 sea **(fórmula)**.

Description

5-heterociclilpirazolo[4,3-d]pirimidin-7-onas para el tratamiento de la disfunción eréctil masculina.

Campo de la invención

Esta invención se relaciona con determinados nuevos compuestos, con sus síntesis y con su utilización para el tratamiento de la disfunción eréctil masculina. Más concretamente, los compuestos de la presente invención son 5-heterociclilpirazolopirimidinonas útiles para el tratamiento de la disfunción eréctil masculina.

Antecedentes de la invención

La disfunción eréctil (DE) se define como la incapacidad para conseguir o mantener una erección suficientemente rígida para un coito satisfactorio. Actualmente se estima que aproximadamente un 7-8% de la población masculina sufre de algún grado de DE, el equivalente de al menos 20 millones de hombres solamente en los Estados Unidos. Como la probabilidad de DE aumenta con la edad, se supone que la incidencia de esta condición se elevará en el futuro, al aumentar la edad media de la población.

La disfunción eréctil puede ser la consecuencia de factores psicógenos y/u orgánicos. Aunque la DE es multifactorial, ciertos subgrupos de la población masculina tienen mayor probabilidad de presentar los síntomas del trastorno. En particular, los pacientes con diabetes, hipertensión, enfermedad cardíaca y esclerosis múltiple tienen una prevalencia particularmente alta de DE. Además, los pacientes que toman determinadas clases de fármacos, tales como antihipertensores, antidepresivos, sedantes y ansiolíticos, están más predispuestos a sufrir de DE.

Los tratamientos para la DE incluyen una variedad de agentes farmacológicos, dispositivos de vacío y prótesis de pene. Entre los agentes farmacológicos, actualmente se usan en la práctica papaverina, fentolamina y alprostadil. Estos agentes son sólo efectivos tras inyección intracavernosa o intrauretral y se asocian a efectos colaterales tales como priapismo, fibrosis, dolor de pene y hematoma en el punto de inyección. Los dispositivos de vacío son un tratamiento alternativo no invasivo para la ED. Estos dispositivos producen una erección creando una presión negativa alrededor del eje del pene, dando lugar a un mayor flujo sanguíneo hacia el cuerpo cavernoso por dilatación arterial pasiva. Aunque esta forma de terapia es frecuentemente efectiva en la DE de origen orgánico, como quejas se incluyen la falta de espontaneidad y el tiempo implicado en la utilización de un dispositivo mecánico y la dificultad y la incomodidad en la eyaculación. Se han utilizado una variedad de prótesis de pene semirrígidas o inflables con algún éxito, particularmente en hombres diabéticos. Estos dispositivos son considerados, en general, cuando han fallado otras opciones de tratamiento y se asocian a un mayor riesgo de infección e isquemia.

Recientemente, el inhibidor de la fosfodiesterasa V (PDEV), sildenafilo (Viagra®) fue aprobado por la FDA como una medicación oralmente efectiva para el tratamiento de la DE. El sildenafilo, 5-[2-etoxi-5-(4-metilpiperazin-1-ilsulfonil)fenil]-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona, y una serie de análogos relacionados y su uso como agentes antiangina están descritos en las Patentes EE.UU. Nº 5.250.534 y 5.346.901. El uso de sildenafilo y análogos relacionados para tratar la disfunción eréctil masculina está descrito en la Publicación de Solicitud Internacional PCT Nº WO 94/28902, publicada el 22 de Diciembre de 1994. En estudios clínicos, el fármaco mejoraba la función sexual en aproximadamente un 70% de los hombres que sufren DE de etiología psicógena u orgánica. Sin embargo, el fármaco mostró una eficacia menos dramática en pacientes que habían experimentado una prostatectomía radical, con mejores erecciones en un 43% de los pacientes que tomaban sildenafilo frente a un 15% que tomaban placebo. Además, el uso de sildenafilo se asocia a varios efectos colaterales no deseados, incluyendo dolor de cabeza, rubor y visión de color alterada, que se producen como resultado de efectos no selectivos sobre una variedad de tejidos. A pesar de estos inconvenientes, el fármaco es considerado por los pacientes como preferible a otros tratamientos que conllevan la introducción de medicación directamente en el pene mediante inyección, el uso de un dispositivo externo o un procedimiento quirúrgico.

Dinh y col. (J. Org. Chem., 1975, 40, 2825) describen la preparación de 5-hidroximetil-2-furanil- y 5-benciloxi-2-furanil-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-onas como subproductos e intermediarios en la preparación de análogos de formicina B.

Bacon y col., en la Patente EE.UU. Nº 5.294.612, describen una serie de 6-heterociclilpirazolo[3,4-d]pirimidin-4-onas inhibidoras de la fosfodiesterasa y su uso en el tratamiento de la enfermedad cardiovascular.

WO-A-9616657 describe el uso de ciertas 5-fenilpirazolo[4,3]pirimidin-7-onas para el tratamiento de la disfunción eréctil.

La erección del pene estimulada sexualmente es el resultado de una interacción compleja de procesos fisiológicos que implican al sistema nervioso central, al sistema nervioso periférico y al músculo liso. Concretamente, la liberación de óxido nítrico por los nervios no adrenérgicos y no colinérgicos y el endotelio activa la guanilil ciclasa y aumenta los niveles intracelulares de cGMP en el cuerpo cavernoso. El aumento en el cGMP intracelular reduce los niveles de calcio intracelular, dando lugar a relajación del músculo liso trabecular, que a su vez da lugar a expansión del volumen corporal y a compresión de las vénulas subtunicales, lo que conduce a la erección del pene.

Se espera que los agentes que aumentan la concentración de cGMP en el tejido peneano, ya sea por una mayor liberación o por una menor destrucción del cGMP, sean tratamientos efectivos para la DE. Los niveles intracelulares de Cgmp están regulados por las enzimas implicadas en su formación y en su degradación, a saber, las guanilato ciclasas y las nucleótido cíclico fosfodiesterasas ("PDE"). Hasta la fecha, se han descrito al menos nueve familias de PDE de mamíferos, cinco de las cuales son capaces de hidrolizar el cGMP, activo, en GMP, inactivo, en condiciones fisiológicas (PDE I, II, V, VI y IX). La PDE V es la isoforma predominante en el cuerpo cavernoso humano. Se esperaría, por lo tanto, que los inhibidores de la PDEV aumentaran la concentración de cGMP en el cuerpo cavernoso y aumentaran la duración y la frecuencia de la erección del pene.

También se ha encontrado la PDEV en las plaquetas humanas y en el músculo liso vascular, lo que sugiere un papel de esta enzima en la regulación de las concentraciones intracelulares de cGMP en el tejido cardiovascular. Ciertamente, se ha visto que los inhibidores de la PDEV producen vasorrelajación dependiente del endotelio potenciando los aumentos en el cGMP intracelular inducidos por el óxido nítrico. Más aún, los inhibidores de la PDEV disminuyen selectivamente la presión arterial pulmonar en modelos animales de insuficiencia cardíaca congestiva y de hipertensión pulmonar. Por ello, además de su utilidad en la DE, los inhibidores de la PDEV tendrían probablemente un beneficio terapéutico en condiciones como la insuficiencia cardíaca, la hipertensión pulmonar y la angina.

En consecuencia, es un objeto de la invención identificar compuestos que inhiban las fosfodiesterasas, específicamente la PDEV. Es otro aspecto de la invención identificar compuestos que sean útiles para el tratamiento de la disfunción sexual, particularmente de la disfunción eréctil en animales machos. Es aún otro objeto de la invención identificar métodos para tratar la disfunción sexual, especialmente la disfunción eréctil, usando los compuestos de la presente invención.

Describimos ahora una serie de 5-heteroci-clilpirazolil[4,3-d]pirimidin-7-onas con capacidad para inhibir la fosfodiesterasa de tipo 5 en un ensayo enzimático.

Resumen de la invención

La presente invención se dirige a un compuesto de fórmula (I)

1

donde

R^{1} y R^{2} son cada uno independientemente seleccionados entre hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6};

R^{3} es seleccionado entre

2

3

es un anillo heteroaromático de cinco miembros que consiste en átomos de carbono y en uno a tres heteroátomos seleccionados entre N, O o S;

R^{4}, R^{5}, R^{6} y R^{7} son cada uno independientemente seleccionados entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilo C_{1}-C_{6} fluorado, ciano, (hidroxi)alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6} fluorado, alcanoílo C_{1}-C_{6}, halógeno, hidroxi,
alquil(C_{1}-C_{6})-NR^{8}R^{9}, NR^{8}R^{9}, CONR^{8}R^{9} o SO_{2}NR^{8}R^{9};

R^{8} es seleccionado entre hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6};

R^{9} es seleccionado entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6} o alquil(C_{1}-C_{6})-NR^{13}R^{14}, o

R^{8} y R^{9}, junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un grupo pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo o
4-N(R^{10})piperazinilo no substituido o substituido, donde el substituyente es seleccionado entre alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, NR^{11}R^{12} o ONR^{11}R^{12};

R^{10} es seleccionado entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{6}, (hidroxi)alquilo C_{1}-C_{6}, arilo, heteroarilo, aralquilo, aralquenilo o C(O)NH_{2}; preferiblemente, R^{10} es seleccionado entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, (hidroxi)alquilo C_{1}-C_{6}, arilo, heteroarilo, aralquilo, aralquenilo o C(O)NH_{2};

R^{11} y R^{12} son cada uno independientemente seleccionados entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, (hidroxi)alquilo C_{1}-C_{6} o (alcoxi C_{1}-C_{6})alquilo C_{1}-C_{6}, y

R^{13} y R^{14} son cada uno independientemente seleccionados entre hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6}, o

R^{13} y R^{14}, junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un grupo pirrolidinilo, piperidinilo o morfolinilo no substituido o substituido, donde el substituyente es seleccionado entre alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, NR^{11}R^{12} o CONR^{11}R^{12};

siempre que, cuando R^{3} sea

4

y R^{5} y R^{6} sean ambos hidrógeno, entonces R^{4} sea seleccionado entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquilo C_{1}-C_{6} fluorado, ciano, (hidroxi)alquilo C_{2}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6} fluorado, alcanoílo C_{1}-C_{6}, halógeno, hidroxi, alquil(C_{1}-C_{6})-NR^{8}R^{9}, NR^{8}R^{9}, CONR^{8}R^{9} o SO_{2}NR^{8}R^{9},

y sus sales farmacéuticamente aceptables.

En una realización, la invención se dirige al compuesto de fórmula (I) donde

R^{1} y R^{2} son cada uno independientemente seleccionados entre hidrógeno y alquilo C_{1}-C_{4};

R^{3} es seleccionado entre

5

es un anillo heteroaromático de cinco miembros seleccionado entre pirrolilo, furanilo, tienilo o imidazolilo;

R^{4} y R^{6} son cada uno independientemente seleccionados entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, alquilo C_{1}-C_{4} fluorado, ciano, (hidroxi)alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4} fluorado, alcanoílo C_{1}-C_{4}, halógeno, hidroxi, alquil(C_{1}-C_{4})-NR^{8}R^{9}, NR^{8}R^{9}, CONR^{8}R^{9} o SO_{2}NR^{8}R^{9};

R^{5} es seleccionado entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4} o alcoxi C_{1}-C_{4};

R^{8} es seleccionado entre hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{4};

R^{9} es seleccionado entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4} o alquil(C_{1}-C_{4})-NR^{13}R^{14}, o

R^{8} y R^{9}, junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un grupo pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo o
4-N(R^{10})piperazinilo no substituido o substituido, donde el substituyente es seleccionado entre alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, NR^{11}R^{12} o ONR^{11}R^{12};

R^{10} es seleccionado entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, (hidroxi)alquilo C_{1}-C_{4}, arilo, heteroarilo, aralquilo(C_{1}-C_{4}), aralquenilo(C_{1}-C_{4}) o C(O)NH_{2};

siempre que, cuando R^{3} sea

6

y R^{5} sea hidrógeno, entonces R^{4} sea seleccionado entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, alquilo C_{1}-C_{4} fluorado, ciano, (hidroxi)alquilo C_{2}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4} fluorado, alcanoílo C_{1}-C_{4}, halógeno, hidroxi, alquil(C_{1}-C_{4})-NR^{8}R^{9}, NR^{8}R^{9}, CONR^{8}R^{9} o SO_{2}NR^{8}R^{9}, y

el resto de las variables son como se ha definido anteriormente,

y sus sales farmacéuticamente aceptables.

En una clase de la invención, el compuesto de fórmula (I) es seleccionado entre

7

donde Y es seleccionado entre O, S o N-R^{15}, donde R^{15} es seleccionado entre hidrógeno y alquilo C_{1}-C_{4}, y

todas las demás variables son como se ha definido anteriormente,

y sus sales farmacéuticamente aceptables.

Es ilustrativa de la invención una composición farmacéutica consistente en un vehículo farmacéuticamente aceptable y cualquiera de los compuestos antes descritos. Una ilustración de la invención es una composición farmacéutica preparada mezclando cualquiera de los compuestos antes descritos y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Es ilustrativo de la invención un procedimiento para preparar una composición farmacéutica consistente en mezclar cualquiera de los compuestos antes descritos y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

La invención también proporciona el uso de los compuestos aquí reivindicados en la fabricación de un medicamento para tratar la disfunción sexual, especialmente la disfunción eréctil masculina y/o la impotencia, en un sujeto que lo necesite.

Descripción detallada de la invención

La presente invención proporciona 5-heterociclilpirazolopirimidinonas substituidas útiles para el tratamiento de la disfunción sexual, especialmente de la DE. Aunque los compuestos de la presente invención son útiles primariamente para el tratamiento de la disfunción sexual masculina o de la disfunción eréctil, pueden ser también útiles para el tratamiento de la disfunción sexual femenina relacionada con alteraciones del clítoris y del parto prematuro y la dismenorrea.

Más concretamente, los compuestos de la presente invención son de la fórmula I

8

donde todas las variables son como se ha definido anteriormente.

Los compuestos de fórmula I pueden existir en equilibrio tautomérico con la correspondiente forma enol como compuestos de fórmula (VII):

9

Aunque se piensa que los compuestos existen predominantemente en la forma ceto como compuestos de fórmula (I) se representarán como tales a lo largo de esta descripción, se entenderá que la invención contempla ambas formas tautoméricas, así como sus mezclas, y que todas esas formas y sus mezclas quedan incluidas en el alcance de la presente invención.

Para uso en medicina, las sales de los compuestos de esta invención se refieren a "sales farmacéuticamente aceptables" no tóxicas. Otras sales pueden ser, sin embargo, útiles en la preparación de compuestos según esta invención o de sus sales farmacéuticamente aceptables. Como sales farmacéuticamente aceptables adecuadas de los compuestos se incluyen sales de adición de ácido, que pueden formarse, por ejemplo, mezclando una solución del compuesto con una solución de un ácido farmacéuticamente aceptable, tal como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido succínico, ácido acético, ácido benzoico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido carbónico o ácido fosfórico. Más aún, cuando los compuestos de la invención llevan un resto ácido, como sales farmacéuticamente aceptables adecuadas de los mismos se pueden incluir sales de metales alcalinos, por ejemplo sales de sodio o de potasio; sales de metales de tierras alcalinas, por ejemplo sales de calcio o de magnesio, y sales formadas con ligandos orgánicos adecuados, por ejemplo sales de amonio cuaternario. Así, como sales farmacéuticamente aceptables representativas se incluyen las siguientes:

Acetato, bencenosulfonato, benzoato, bicarbonato, bisulfato, bitartrato, borato, bromuro, edetato de calcio, camsilato, carbonato, cloruro, clavulanato, citrato, dihidrocloruro, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, gluceptato, gluconato, glutamato, glicolilarsanilato, hexilrresorcinato, hidrabamina, bromhidrato, clorhidrato, hidroxinaftoato, yoduro, isotionato, lactato, lactobionato, laurato, malato, maleato, mandelato, mesilato, metilbromuro, metilnitrato, metilsulfato, mucato, napsilato, nitrato, sal de N-metilglucamina amonio, oleato, pamoato-(embonato), palmitato, pantotenato, fosfato/difosfato, poligalacturonato, salicilato, estearato, sulfato, subacetato, succinato, tanato, tartrato, teoclato, tosilato, trietyoduro y valerato.

La presente composición incluye en su alcance profármacos de los compuestos de esta invención. En general, dichos profármacos serán derivados funcionales de los compuestos que son fácilmente convertibles in vivo en el compuesto requerido. Así, en los métodos de tratamiento de la presente invención, el término "administración" abarcará el tratamiento de los diversos trastornos descritos con el compuesto específicamente revelado o con un compuesto que puede no estar específicamente revelado, pero que se convierte en el compuesto especificado in vivo tras su administración al paciente. Se describen procedimientos convencionales para la selección y preparación de derivados profármacos adecuados, por ejemplo, en "Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985.

Cuando los compuestos según esta invención tienen al menos un centro quiral, pueden existir, en consecuencia, como enantiómeros. Cuando los compuestos poseen dos o más centros quirales, pueden adicionalmente existir como diastereómeros. Hay que entender que todos esos isómeros y mezclas de los mismos quedan incluidos dentro del alcance de la presente invención. Más aún, algunas de las formas cristalinas de los compuestos pueden existir como polimorfos y, como tales, se pretende que queden incluidos en la presente invención. Además, algunos de los compuestos pueden formar solvatos con agua (es decir, hidratos) o solventes orgánicos comunes y se pretende que dichos solvatos queden también incluidos en el alcance de esta invención.

El término "sujeto", tal como se utiliza aquí, se refiere a un animal, preferiblemente un mamífero, más preferiblemente un humano, que ha sido objeto de tratamiento, observación o experimento.

El término "cantidad terapéuticamente efectiva", tal como se utiliza aquí, significa aquella cantidad de compuesto activo o de agente farmacéutico que provoca la respuesta biológica o medicinal en un sistema tisular, animal o humano que esté siendo buscada por un investigador, veterinario, doctor en medicina u otro clínico, que incluye alivio de los síntomas de la enfermedad o trastorno bajo tratamiento.

El término "alquilo" significará alcanos de cadena lineal o ramificada de uno a seis átomos de carbono, o cualquier número dentro de este rango. Por ejemplo, los radicales alquilo incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, t-butilo, n-pentilo, 3-(2-metil)butilo, 2-pentilo, 2-metilbutilo, neopentilo, n-hexilo, 2-hexilo y 2-metilpentilo. De forma similar, los grupos alquenilo y alquinilo incluyen alquenos y alquinos de cadena lineal y ramificada de 1 a 8 átomos de carbono o cualquier número dentro de este rango.

El término "arilo" indica grupos aromáticos tales como fenilo y naftilo.

El término "aralquilo" significa un grupo alquilo C_{1}-C_{6} substituido con un grupo arilo (por ejemplo, bencilo, feniletilo). De forma similar, el término "aralquenilo" significa un grupo alquenilo C_{1}-C_{6} substituido con un grupo arilo.

El término "halógeno" incluirá yodo, bromo, cloro y flúor.

El símbolo

10

y el término "anillo heteroaromático de cinco miembros", según se utiliza aquí, representa un sistema de anillo aromático monocíclico estable de cinco miembros que consiste en átomos de carbono y en uno a tres heteroátomos seleccionados entre N, O o S. El anillo heteroaromático puede estar unido en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que dé lugar a la creación de una estructura estable. Más aún, cuando el anillo heteroaromático está substituido, por ejemplo por substituyentes R^{4}, R^{5} o R^{6}, el(los) substituyente(s) puede(n) estar unido(s) en cualquier átomo de carbono o heteroátomo en el anillo que dé lugar a la creación de una estructura estable. Como ejemplos de anillos heteroaromáticos de cinco miembros se incluyen, aunque sin limitación, furanilo, imidazolilo, isoxazolilo, oxazolilo, pirazolilo, pirrolilo, tienilo, tiazolilo, tiadiazolilo y triazolilo.

El símbolo

11

representa un sistema de anillo heteroaromático benzo-fusionado de nueve miembros que consiste en átomos de carbono y en uno a tres heteroátomos seleccionados entre N, O o S. El anillo heteroaromático benzo-fusionado puede estar unido a cualquier heteroátomo o átomo de carbono que dé lugar a la creación de una estructura estable. Más aún, cuando el anillo heteroaromático benzo-fusionado está substituido, por ejemplo por substituyentes R^{4}, R^{5}, R^{6} o R^{7}, el(los) substituyente(s) puede(n) estar unido(s) en cualquier átomo de carbono o heteroátomo en el anillo que dé lugar a la creación de una estructura estable. Como ejemplos de anillos heteroaromáticos benzo-fusionados de nueve miembros se incluyen, aunque sin limitación, benzimidazolilo, benzofuranilo, benzotienilo, benzisoxazolilo, benzoxazolilo, indazolilo, indolilo, benzotiazolilo, benzotiadiazolilo y benzotriazolilo.

El término "heteroarilo", tal como se usa aquí, representa un sistema de anillo aromático monocíclico estable de cinco o seis miembros o un sistema de anillo heteroaromático benzo-fusionado de nueve o diez miembros que consiste en átomos de carbono y de uno a tres heteroátomos seleccionados entre N, O o S. El grupo heteroarilo puede estar unido en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que dé lugar a la creación de una estructura estable. Como ejemplos de grupos heteroarilo se incluyen, aunque sin limitación, piridilo, pirimidinilo, tienilo, furanilo, imidazolilo, isoxazolilo, oxazolilo, pirazolilo, pirrolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo, benzimidazolilo, benzofuranilo, benzotienilo, benzisoxazolilo, benzoxazolilo, indazolilo, indolilo, benzotiazolilo, benzotiadiazolilo, benzotriazolilo, quinolinilo o isoquinolinilo. Como grupos heteroarilo preferidos se incluyen piridilo, pirimidinilo, tiazolilo, imidazolilo, benzimidazolilo, quinolinilo e isoquinolinilo.

Bajo la nomenclatura estándar usada a través de esta descripción, se describe primeramente la porción terminal de la cadena lateral designada, seguido de la funcionalidad adyacente hacia el punto de unión. Así, por ejemplo, un substituyente "fenil-alquilamido(C_{1}-C_{6})-alquilo(C_{1}-C_{6})" se refiere a un grupo de la fórmula:

12

Tal como se usa aquí, el término "composición" pretende cubrir un producto que contiene los ingredientes especificados en las cantidades especificadas, así como cualquier producto que se produzca como resultado, directa o indirectamente, de combinaciones de los ingredientes especificados en las cantidades especificadas.

Se pretende que la definición de cualquier substituyente o variable (por ejemplo, R^{10} en la Reivindicación 3) en una localización particular en una molécula sea independiente de sus definiciones en cualquier otra parte de esa molécula. Se entiende que los substituyentes y los patrones de substitución sobre los compuestos de esta invención pueden ser seleccionados por alguien con conocimientos ordinarios en la técnica para obtener compuestos que son químicamente estables y que pueden ser fácilmente sintetizados por técnicas conocidas en este campo, así como por los métodos aquí mostrados.

La utilidad de los compuestos para tratar la DE puede ser determinada según el procedimiento descrito en el Ejemplo 4 aquí dado. Adicionalmente, se describen métodos para determinar las actividades inhibitorias de la cGMP PDE y de la cAMP PDE de los compuestos, que son indicativas de su utilidad para tratar la DE, en WO 93/06104, WO 93/07149, WO 93/12095, WO 94/00453, WO 94/05661 y WO 96/16657.

La presente invención, por lo tanto, proporciona un método de tratamiento de la disfunción eréctil en un sujeto que lo necesite, que consiste en administrar cualquiera de los compuestos aquí definidos en una cantidad efectiva para tratar la DE. El compuesto puede ser administrado a un paciente por cualquier vía convencional de administración, incluyendo, aunque sin limitación, la intravenosa, oral, subcutánea, intramuscular, intradérmica y parenteral. La cantidad del compuesto que resulta efectiva para tratar la DE es de entre 0,1 mg por kg y 20 mg por kg de peso corporal del sujeto.

La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas consistentes en uno o más compuestos de esta invención en asociación con un vehículo farmacéuticamente aceptable. Preferiblemente, estas composiciones están en formas de dosificación unitaria, tales como tabletas, píldoras, cápsulas, polvos, gránulos, soluciones o suspensiones parenterales estériles, pulverizaciones en aerosol o líquidas dosificadas, gotas, ampollas, dispositivos autoinyectores o supositorios, para administración oral, parenteral, intranasal, sublingual o rectal, o para administración por inhalación o insuflación. Alternativamente, la composición puede presentarse en una forma adecuada para administración semanal o mensual; por ejemplo, se puede adaptar una sal insoluble del compuesto activo, tal como la sal decanoato, para obtener una preparación depot para inyección intramuscular. Para preparar composiciones sólidas, tales como tabletas, se mezcla el principal ingrediente activo con un vehículo farmacéutico, por ejemplo ingredientes convencionales de tabletas tales como almidón de maíz, lactosa, sacarosa, sorbitol, talco, ácido esteárico, estearato de magnesio, fosfato dicálcico o gomas, y otros diluyentes farmacéuticos, por ejemplo agua, para formar composición de preformulación sólida que contiene una mezcla homogénea de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Al hacer referencia a estas composiciones de preformulación como homogéneas, se quiere decir que el ingrediente activo está uniformemente disperso por toda la composición, de tal forma que la composición puede subdividirse fácilmente en formas de dosificación igualmente efectivas, tales como tabletas, píldoras y cápsulas. Esta composición de preformulación sólida es subdividida después en formas de dosificación unitaria del tipo descrito anteriormente que contienen de 5 a aproximadamente 1.000 mg del ingrediente activo de la presente invención. Las tabletas o píldoras de la nueva composición pueden ser revestidas o combinadas de algún otro modo para obtener una forma de dosificación que aporte la ventaja de una acción prolongada. Por ejemplo, la tableta o la píldora pueden consistir en un componente de dosificación interno y un componente de dosificación externo, estando este último en forma de envuelta sobre el primero. Los dos componentes pueden estar separados por una capa entérica que sirva para resistir la desintegración en el estómago y permite al componente interno pasar intacto al duodeno o tener liberación retardada. Se puede usar una variedad de material para dichas capas o revestimientos entéricos, cuyos materiales incluyen una serie de ácidos poliméricos con materiales tales como goma laca, alcohol cetílico y acetato de celulosa.

Las formas líquidas a las que se pueden incorporar las nuevas composiciones de la presente invención para administración oral o por inyección incluyen soluciones acuosas, jarabes adecuadamente saborizados, suspensiones acuosas u oleosas y emulsiones saborizadas con aceites comestibles, tales como aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo, aceite de coco o aceite de cacahuete, así como elixires y vehículos farmacéuticos similares. Como agentes dispersantes o suspensores adecuados para suspensiones acuosas se incluyen gomas sintéticas y naturales, tales como tragacanto, acacia, alginato, dextrano, carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, polivinilpirrolidona o gelatina.

Cuando los procedimientos para la preparación de los compuestos según la invención dan lugar a una mezcla de estereoisómeros, estos isómeros pueden ser separados por técnicas convencionales, tales como cromatografía preparatoria. Los compuestos pueden ser preparados en forma racémica, o los enantiómeros individuales pueden ser preparados por síntesis enantioespecífica o por resolución. Los compuestos pueden ser resueltos, por ejemplo, en sus componentes enantioméricos por técnicas estándar, tales como la formación de pares diastereoméricos por formación de sales con un ácido ópticamente activo, tal como ácido (-)-di-p-toluoil-d-tartárico y/o ácido (+)-di-p-toluoil-l-tartárico, seguido de cristalización fraccionada y regeneración de la base libre. Los compuestos pueden ser también resueltos por formación de ésteres o amidas diastereoméricos, seguida de separación cromatográfica y eliminación del auxiliar quiral. Alternativamente, los compuestos pueden ser resueltos usando una columna de HPLC quiral.

Durante cualquiera de los procesos de preparación de los compuestos de la presente invención, puede ser necesario y/o deseable proteger grupos sensibles o reactivos de cualquiera de las moléculas en cuestión. Se puede conseguir por medio de grupos protectores convencionales, tales como los descritos en Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973, y T.W. Greene y P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1991. Los grupos protectores pueden ser eliminados en una etapa posterior conveniente usando métodos conocidos en la técnica.

El método de tratamiento de la DE descrito en la presente invención puede ser también llevado a cabo usando una composición farmacéutica consistente en cualquiera de los compuestos aquí definidos y un vehículo farmacéuticamente aceptable. La composición farmacéutica puede contener entre aproximadamente 5 mg y 1.000 mg, preferiblemente entre aproximadamente 10 y 500 mg, del compuesto y puede estar constituido en cualquier forma adecuada para el modo de administración seleccionado. Los vehículos incluyen excipientes farmacéuticos necesarios e inertes, incluyendo, aunque sin limitación, ligantes, agentes suspensores, lubricantes, saborizantes, edulcorantes, conservantes, colorantes y revestimientos. Las composiciones adecuadas para administración oral incluyen formas sólidas, tales como píldoras, tabletas, capsulitas, cápsulas (incluyendo cada una formulaciones de liberación inmediata, de liberación programada en el tiempo y de liberación mantenida), gránulos y polvos, y formas líquidas, tales como soluciones, jarabes, elixires, emulsiones y suspensiones. Como formas útiles para la administración parenteral se incluyen soluciones, emulsiones y suspensiones estériles.

Ventajosamente, los compuestos de la presente invención pueden ser administrados en una sola dosis diaria, o se puede administrar la dosificación diaria total en dosis divididas de dos, tres o cuatro veces al día. Más aún, los compuestos de la presente invención pueden ser administrados en forma intranasal mediante uso tópico de vehículos intranasales adecuados, o por parches cutáneos transdérmicos bien conocidos para quienes tienen conocimientos ordinarios en la técnica. Para ser administrada en forma de sistema de administración transdérmica, la administración de la dosificación será, por supuesto, continua, más que intermitente, a lo largo de todo el régimen de dosificación.

Por ejemplo, para la administración oral en forma de tableta o cápsula, se puede combinar el principio activo con un vehículo oral inerte no tóxico farmacéuticamente aceptable, tal como etanol, glicerol, agua y similares. Más aún, cuando se desee o sea necesario, se pueden incorporar también a la mezcla ligantes, lubricantes, agentes desintegrantes y agentes colorantes adecuados. Como ligantes se incluyen, sin limitación, almidón, gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas tales como acacia, tragacanto u oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio y similares. Como desintegrantes se incluyen, sin limitación, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma xantano y similares.

Las formas líquidas pueden incluir agentes suspensores o dispersantes adecuadamente saborizados, tales como gomas sintéticas y naturales, por ejemplo tragacanto, acacia, metilcelulosa y similares. Para la administración parenteral, se desean suspensiones y soluciones estériles. Se emplean preparaciones isotónicas que contienen, en general, conservantes adecuados cuando se desea la administración intravenosa.

El compuesto de la presente invención puede ser también administrado en forma de sistemas de administración mediante liposomas, tales como pequeñas vesículas unilamelares, grandes vesículas unilamelares y vesículas multilamelares. Se pueden formar liposomas a partir de una variedad de fosfolípidos, tales como colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas.

Los compuestos de la presente invención pueden ser también administrados mediante el uso de anticuerpos monoclonales como vehículos individuales con los que se copulan las moléculas del compuesto. Los compuestos de la presente invención pueden ser también copulados con polímeros solubles como vehículos de fármaco dirigibles. Dichos polímeros pueden incluir polivinilpirrolidona, copolímero de pirano, polihidroxipropilmetacrilamidafenol, polihidroxietilaspartamidafenol o polietilenoxidopolilisina substituida con un residuo de palmitoílo. Más aún, los compuestos de la presente invención pueden copularse con una clase de polímeros biodegradables útiles para conseguir la liberación controlada de un fármaco, por ejemplo ácido poliláctico, poli-épsilon-caprolactona, ácido polihidroxibutírico, poliortoésteres, poliacetales, polidihidropiranos, policianoacrilatos y copolímeros de bloques entrecruzados o anfipáticos de hidrogeles.

Los compuestos de esta invención pueden ser administrados en cualquiera de las composiciones anteriores y según regímenes de dosificación establecidos en la técnica siempre que se requiera el tratamiento de la DE.

La dosificación diaria de los productos puede variar en un amplio margen entre 5 y 1.000 mg por humano adulto al día. Para la administración oral, se dispone preferiblemente de las composiciones en forma de tabletas que contienen 5,0, 10,0, 15,0, 25,0, 50,0, 100, 250 y 500 milígramos del componente activo para el ajuste sintomático de la dosificación al paciente que ha de ser tratado. Una cantidad efectiva del fármaco es ordinariamente suministrada a un nivel de dosificación de aproximadamente 0,1 mg/kg a aproximadamente 20 mg/kg de peso corporal al día. Preferiblemente, el margen es de aproximadamente 0,2 mg/kg a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal al día y especialmente de aproximadamente 0,5 mg/kg a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal al día. Los compuestos pueden ser administrados en un régimen de 1 a 4 veces al día.

Las dosificaciones óptimas a administrar pueden ser fácilmente determinadas por los expertos en la técnica y variarán con el compuesto particular usado, el modo de administración, la concentración de la preparación y el avance de la condición de la enfermedad. Además, factores asociados al paciente particular en tratamiento, incluyendo la edad del paciente, el peso, la dieta y el tiempo de administración, darán como resultado la necesidad de ajustar las dosificaciones.

Las abreviaturas usadas en la descripción, particularmente en los Esquemas y en los Ejemplos, son las siguientes:

DMAP	=	dimetilaminopiridina
DMF	=	dimetilformamida
DMSO	=	sulfóxido de dimetilo
Et_{3}N	=	trietilamina
EtOH	=	etanol
MeOH	=	metanol
t.a.	=	temperatura ambiente
TEA	=	trietilamina

Los compuestos de la invención pueden ser preparados por reacción de un compuesto de fórmula general (II):

13

donde R^{1} y R^{2} son como se ha definido previamente y

14

es un anillo heteroaromático de cinco miembros adecuadamente substituido o un anillo heteroaromático benzo-fusionado de nueve miembros adecuadamente substituido según se ha definido para R^{3} anteriormente, con una amina adecuadamente substituida según se ha definido antes para R^{8} y R^{9}. La reacción es generalmente llevada a cabo a temperatura ambiente, preferiblemente en presencia de un solvente, por ejemplo un alcanol que contiene uno a tres átomos de carbono, usando un exceso de la amina para eliminar el ácido subproducto, HCl.

Los compuestos de la fórmula general (II) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (III):

15

\newpage

por reacción con ácido clorosulfónico a temperaturas de desde -20ºC hasta 50ºC, dependiendo de la reactividad del resto heterocíclico,

16

Los compuestos de la fórmula general (III) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (IV):

17

por aplicación de métodos de ciclación conocidos para la formación del anillo de pirimidinona. Así, por ejemplo, la ciclación puede ser efectuada por tratamiento de (IV) con una base, tal como hidróxido de sodio o carbonato de potasio, en un medio de etanol-agua a temperatura de reflujo durante 2-65 horas. Alternativamente, los compuestos de la fórmula general (III) pueden ser también obtenidos por tratamiento de (IV) con ácido polifosfórico a, o casi a, 140ºC durante 6-18 horas.

Los compuestos de la fórmula general (IV) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (V):

18

por reacción con un compuesto de la fórmula general (VI):

19

donde

20

es como se ha definido previamente. La reacción es generalmente llevada a cabo usando un exceso de (VI) en presencia de un exceso de una amina terciaria alifática, tal como trietilamina, para que actúe como depurador para el ácido subproducto (HCl), eventualmente en presencia de un catalizador, tal como 4-dimetilaminopiridina, en un solvente inerte, tal como diclorometano, a una temperatura de 0ºC a la temperatura ambiente durante 2-24 horas.

Las aminas usadas en la reacción con (II) para formar los compuestos de la invención, los aminopirazoles de fórmula (V) y los cloruros de acilo de fórmula (VI), cuando no pueden ser adquiridos comercialmente, pueden ser fácilmente preparados por alguien con conocimientos ordinarios en la técnica por procedimientos sintéticos convencionales, según la literatura precedente, a partir de materiales de partida fácilmente accesibles y usando reactivos y condiciones de reacción estándar.

Como una ilustración más de la síntesis de los compuestos de la invención, en el Esquema I se detalla la preparación de 5-[3-etoxi-5-(4-metilpiperazinil-sulfonil)tiofen-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona y 5-[3-hidroxi-5-(4-metil-piperazinilsulfonil)tiofen-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona. Así, el material de partida, el pirazol 1, reaccionó con el cloruro de tiofenocarbonilo 2 para dar el intermediario 3. Se efectuó la ciclación de 3 con hidróxido de sodio en etanol para dar 4. La clorosulfonilación, seguida de reacción con N-metilpiperazina, dio el compuesto 5 y el compuesto 6.

Esquema I

21

Se muestran los siguientes Ejemplos para ayudar a entender la invención y no pretenden ser limitantes, ni han de ser considerados como tal, en modo alguno de la invención mostrada en las reivindicaciones que se darán a continuación.

A menos que se indique en contrario, las ^{1}H RMN fueron realizadas en un instrumento Bruker AC 300 de 300 MHz.

Ejemplo 1 5-[3-Etoxi-5-(4-metilpiperazinilsulfonil)tiofen-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7- ona (5) y 5-[3-hidroxi-5-(4-metilpiperazinilsulfonil)-tiofen-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo-[4,3-d]pirimidin-7-ona (6) a) 4-(3-Etoxitiofeno-2-carboxamido)-1-metil-3-n-propilpirazol-5-carboxamida (3)

Se añadió cloruro de 3-etoxitiofeno-2-carbo-nilo 2, preparado por reacción de ácido 3-etoxitiofeno-2-carboxílico (2,79 g, 16,2 mmol) con cloruro de oxalilo, a una solución de 4-amino-1-metil-3-n-propilpirazol-5-car-boxamida 1 (2,08 g, 11,4 mmol), DMAP (28 mg, 0,23 mmol) y Et_{3}N (1,64 g, 16,2 mmol) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (30 ml) a 0ºC y se agitó a t.a. durante 24 h. Se lavó la mezcla con HCl 1N y se secó con MgSO_{4}. La cromatografía (gel de sílice, hexano:acetato de etilo = 3:1) dio un sólido blanco; p.f.: 103-104ºC; ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta 0,87 (t, J=7 Hz, 3H), 1,39 (t,J=7 Hz, 3H), 1,56 (sxt, J=7 Hz, 2H), 2,43 (t, J=7 Hz, 2H), 3,88 (s, 3H), 4,32 (c, J=7 Hz, 2H), 7,18 (d, J=6 Hz, 1H), 7,66 (s amplio, 1H), 7,75 (s amplio, 1H), 7,81 (d, J=6 Hz, 1H), 8,87 (s, 1H); MS (m/z): 337 (MH^{+}).

b) 5-(3-Etoxitiofen-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona (4)

Se calentó una mezcla de 3 (1,15 g, 3,42 mmol) y NaOH (284 mg, 7,1 mmol) en etanol (11 ml) y agua (34 ml) a 80ºC durante 65 h. Después de enfriar hasta la t.a., se formó un precipitado blanco. La filtración y la desecación a vacío dieron 0,625 g del producto. Se extrajo el filtrado con CH_{2}Cl_{2} y se lavó la fase orgánica con HCl 1N y salmuera y se secó con MgSO_{4}. La evaporación del solvente dio producto adicional; p.f.: 151-152ºC. ^{1}H RMN (CDCl_{3}) \delta 1,00 (t, J=7 Hz, 3H), 1,54 (t, J=7 Hz, 3H), 1,82 (sxt, J=7 Hz, 2H), 2,86 (t, J=7 Hz, 2H), 4,23 (s, 3H), 4,34 (c, J=7
Hz, 2H), 6,87 (d, J= 6 Hz, 1H), 7,37 (d, J=6 Hz, 1H); MS (m/z): 319 (MH^{+}).

c) 5-[3-Etoxi-5-(4-metilpiperazinilsulfonil)tiofen-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimi- din-7-ona (5) y 5-[3-hidroxi-5-(4-metilpiperazinilsulfo-nil)tiofen-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo- [4,3-d]pirimidin-7-ona (6)

Se añadió el compuesto 4 (165 mg, 0,517 mmol) a ácido clorosulfónico (0,35 ml, 5,2 mmol) a 0ºC. Se agitó la mezcla bajo nitrógeno a 50ºC durante 24 h. Se añadió hielo y se extrajo la mezcla con una mezcla de CH_{2}Cl_{2}/MeOH (9:1) y se secó con Na_{2}SO_{4}. Después de la evaporación del solvente, se obtuvo un sólido blanco que contenía, por análisis de RMN, predominantemente 5-(5-clorosulfonil-3-etoxitiofen-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona y una pequeña cantidad de 5-(5-clorosulfonil-3-hidroxitiofen-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona. Se añadió este sólido blanco (90 mg, 0,456 mmol) a una solución de metilpiperazina (137 mg, 1,37 mmol) en metanol (abs., 15 ml) y se agitó a t.a. durante 4 días. Se evaporó el solvente y se disolvió el residuo en CH_{2}Cl_{2}/MeOH (9:1) y se lavó con Na_{2}CO_{3} saturado. Se extrajo la capa acuosa con CH_{2}Cl_{2}/MeOH (9:1). Se combinaron las capas orgánicas y se secaron con MgSO_{4}. El residuo obtenido tras la evaporación del solvente contenía dos compuestos. Se llevó a cabo la separación y la purificación por cromatografía en columna (gel de sílice). Se obtuvo el compuesto 5 como un sólido blanco por elución con acetato de etilo; p.f.: 219-220ºC; ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta 0,94 (t, J=7 Hz, 3H), 1,42 (t, J=7 Hz, 3H), 1,74 (sxt, J=7 Hz, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,40 (m, 4H), 2,76 (t, J=7 Hz, 2H), 3,35 (m, 4H), 4,14 (s, 3H), 4,44 (c, J=7 Hz, 2H), 7,72 (s, 1H), 10,79 (s amplio, 1H); MS (m/z) 481 (MH^{+}). Se preparó la sal clorhidrato añadiendo una solución de HCl en dioxano (4,0 M, 0,2 ml) a una suspensión de la base libre (6,0 mg) en MeOH (1 ml) y agitando durante 1 h. Después de la eliminación de los solventes a vacío, se obtuvo un sólido blanco; p.f.: 225ºC (desc.).

Se obtuvo el compuesto 6 como un sólido blanco por elución con metanol al 10% en acetato de etilo. Se preparó la sal clorhidrato añadiendo una solución de HCl en dioxano (4,0 M, 0,2 ml) a una suspensión de la base libre (6,0 mg) en MeOH (1 ml) y agitando durante 1 h. Después de la eliminación de los solventes a vacío, se obtuvo un sólido blanco; p.f.: 257ºC (desc.); ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta 0,95 (t, J=7 Hz, 3H), 1,75 (t, J=7 Hz, 2H), 2,49 (s, 3H), 2,70 (m, 6H), 3,15 (m, 4H), 4,15 (s, 3H), 7,61 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 10,85 (s, 1H); MS (m/z) 453 (MH^{+}), 451 (MH^{-}).

Ejemplo 2 5-(7-Etoxibenzofuran-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona (7) a) 4-(7-Etoxibenzofuran-2-carboxamido)-1-metil-3-n-propilpirazol-5-carboxamida

A partir de cloruro de 7-etoxibenzofuran-2-carbonilo (4,124 g, 20 mmol) 1 (1,82 g, 10 mmol), DMAP (32,5 mg, 0,27 mmol) y Et_{3}N (2,02 g, 20 mmol) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (65 ml), usando el mismo procedimiento que para 3, se obtuvo el compuesto del título como un sólido blanco; p.f.: 219-221ºC; ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta 0,86 (t, J=7 Hz, 3H), 1,43 (t, J=7 Hz, 3H), 1,56 (sxt, J=7 Hz, 2H), 2,42 (t, J=7 Hz, 2H), 3,91 (s, 3H), 4,28 (c, J=7 Hz, 2H), 7,10 (d, J=6 Hz, 1H), 7,26 (t, J=6 Hz, 1H), 7,35 (d, J=6 Hz, 1H), 7,50 (s amplio, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,76 (s amplio, 1H); MS (m/z): 371 (MH^{+}),

b) 5-(7-Etoxibenzofuran-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona (7)

A partir de 4-(7-etoxibenzofuran-2-carboxamido)-1-metil-3-n-propilpirazol-5-carboxamida (281,5 mg, 0,76 mmol) y NaOH (63 mg, 1,573 mmol) en MeOH/H_{2}O (10 ml/6,5 ml), usando el procedimiento para 4, se obtuvo el compuesto del título 7 como un sólido blanco; p.f.: 227-229ºC; ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta 0,98 (t,J=7 Hz, 3H), 1,46 (t, J=7 Hz, 3H), 1,78 (sxt, J=7 Hz, 2H), 2,84 (t, J=7 Hz, 2H), 4,17 (s, 3H), 4,29 (c, J=7 Hz, 2H), 7,06 (d, J=6 Hz, 1H), 7,24 (t, J=6 Hz, 1H), 7,31 (d, J=6 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H); MS (m/z): 353 (MH^{+}).

Ejemplo 3

Los precursores de cloruro de sulfonilo para los compuestos 8, 9, 11 y 32 pudieron ser preparados esencialmente como se ha descrito en el Ejemplo 1c con las siguientes condiciones:

1): se obtuvo 5-(4-clorosulfonil-7-etoxibenzofu-ran-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona por reacción de 5-(7-etoxibenzofuran-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona (7) con 12 equivalentes de ácido clorosulfónico a una temperatura de -7 a 0ºC durante 3 h;

2): se obtuvo 5-[4,6-bis(clorosulfonil)-7-etoxi-benzofuran-2-il]-1-metil-3-n-propil-6,7-dihi-dro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona por reacción de 5-(7-etoxibenzofuran-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona (7) con 12 equivalentes de ácido clorosulfónico a 20ºC durante 18 h, y

3): se obtuvo 5-(4-clorosulfonil-1-metilpirrol-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazo-lo[4,3-d]pirimidin-7-ona por reacción de 5-(1-metilpirrol-2-il)-1-metil-3-n-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona (7) con 100 equivalentes de ácido clorosulfónicos a 20ºC durante 4 días.

Ejemplo 4

Como realización específica de una composición oral, se formulan 100 mg del compuesto 5 del Ejemplo 1 con suficiente lactosa finamente dividida para obtener una cantidad total de 580 a 590 mg con objeto de rellenar una cápsula de gel duro de tamaño O.

Siguiendo los procedimientos aquí descritos, se prepararon los siguientes compuestos de la Tabla 1.

TABLA 1

22

23

24

25

26

27

Ejemplo 5

Como se ha mencionado previamente, los expertos en la técnica entenderán que los compuestos que aumentan la liberación o que inhiben la destrucción del cGMP del tejido del cuerpo cavernoso promoverán la erección del pene. Por lo tanto, se describe un método para medir la capacidad de los compuestos para aumentar los niveles de cGMP estimulados por óxido nítrico (NO) en el tejido peneano.

Métodos biológicos Medición de los niveles de cGMP en los anillos de tejido del cuerpo cavernoso Preparación de tejidos

Se matan conejos blancos de Nueva Zelanda machos (2,5 kg) con una sobredosis de pentobarbitona y se extirpan rápidamente los penes. Se retira el tejido epidérmico y conectivo y se cortan los penes longitudinalmente en dos tiras iguales y luego lateralmente para obtener aproximadamente 20 segmentos. Se disecciona cuidadosamente la uretra y se desecha. Se juntan estos segmentos de cuerpos cavernosos de todos los animales y se incuban en medio esencial mínimo de Dulbecco (MEM) a 37ºC durante 1 h con cambios regulares de medio para permitir que los tejidos se recuperen de la manipulación preparatoria.

Efecto del compuesto de ensayo sobre la formación de cGMP

Se preparan los tejidos como antes; se incuban dos discos peneanos para cada dosis de fármaco en 200 \mul de MEM con varias concentraciones del compuesto de ensayo y adición de nitroprusiato de sodio ("SNP") (concentración final 10 \mumol/l). El SNP se destruye espontáneamente en solución acuosa para generar NO. Después de preincubar los tejidos con los compuestos durante 10 min. a 37ºC, se estimula la formación de cGMP con diversas concentraciones de SNP. Se incuban entonces los tubos a 37ºC durante otros 30 min. y se detiene la reacción añadiendo 200 \mul de 1 mol/l de ácido perclórico. Se ultrasonican los tejidos (impulsos de 3x20 s, MSE Soniprep) y se obtiene una pella del tejido residual por centrifugación. Después de centrifugar, se toman alícuotas de sobrenadante y se neutralizan con 0,5 mol/l de K_{3}PO_{4}. Después de una dilución apropiada en tampón de ensayo, se miden las concentraciones de cGMP por radioinmunoensayo (kit ^{125}I de doble rango de Amersham) siguiendo las instrucciones del fabricante. Los límites inferiores de detección son 1 fmol para los ensayos de cGMP.

Ensayo de nucleótido cíclicos fosfodiesterasas (PDE) Aislamiento de las PDE

Se aislaron las PDE de tejidos de conejo según el protocolo descrito por Boolell y col. en International Journal of Impotence Research, 1996, 8, 47-52, con modificaciones menores. Básicamente, los tejidos fueron homogeneizados en un tampón helado que contenía HEPES 20 mM (pH 7,2), sacarosa 0,25 M, EDTA 1 mM y sulfonilfluoruro de fenilmetilo ("PMSF") 1 mM. Se centrifugaron los homogenados a 100.000 g durante 60 minutos a 4ºC. Se filtró el sobrenadante a través de un filtro de 0,2 \muM y se cargó en una columna de intercambio aniónico Mono Q de Pharmacia (volumen de lecho 1 ml), que fue equilibrada con HEPES 20 mM, EDTA 1 mM y PMSF 0,5 mM. Después de eliminar por lavado las proteínas no unidas, se eluyeron las enzimas con un gradiente lineal de NaCl 100-500 mM en el mismo tampón (35 a 60 ml totales, dependiendo del tejido). Se operó la columna a una velocidad de flujo de 1 ml/min. y se recogieron fracciones de 1 ml. Se juntaron las fracciones que contenían diversas actividades PDE por separado y se usaron en estudios posteriores.

Medición de la inhibición de la PDE V

Se llevó a cabo el ensayo de PDE esencialmente como describen Thompson y Appleman en Biochemistry, 1971, 10, 311-316, con modificaciones menores. Resumiendo, se estudió la enzima en MgCl_{2} 5 mM, Tris HCl 15 mM (pH 7,4), 0,5 mg/ml de seroalbúmina bovina, cGMP o cAMP 1 \muM, 0,1 \muCi de [^{3}H]-cGMP o [^{3}H]-cAMP y 2-10 \mul de elución de la columna. El volumen total del ensayo era de 100 \mul. Se incubó la mezcla de reacción a 30ºC durante 30 minutos. Se detuvo la reacción hirviendo durante 1 minuto y se enfrió después sobre hielo. Se convirtieron aún los [^{3}H]-5'-mononucleótidos en [^{3}H]-nucleótidos no cargados añadiendo 25 \mul de 1 mg/ml de veneno de serpiente (Ophio- phagus hannah) e incubando a 30ºC durante 10 minutos. Se detuvo la reacción por adición de 1 ml de suspensión de resina AG1-X2 de Bio-Rad (1:3). Todos los nucleótidos cargados se unieron a la resina y sólo los [^{3}H]-nucleótidos permanecieron en el sobrenadante después de centrifugar. Se tomó una alícuota de 350 \mul y se contó por centelleo líquido. Se expresó la actividad PDE como pmol de nucleótido cíclico hidrolizado/min./ml de preparación enzimática. Se llevaron a cabo los estudios de inhibidores en tampón de ensayo con una concentración final de DMSO del 10%. En estas condiciones, la hidrólisis del substrato no sobrepasó el 15%. La formación de producto aumentaba con el tiempo y la concentración enzimática de forma lineal.

En la Tabla 2 se describen las actividades inhibitorias de la PDEV para compuestos representativos de la presente invención. Los datos son presentados como la CI_{50} (\muM) o como porcentaje de inhibición a una concentración dada de compuesto de ensayo.

TABLA 2

28

29

Mientras que la descripción que antecede muestra los principios de la presente invención, dando ejemplos con fines ilustrativos, se entenderá que la práctica de la invención ampara todas las variaciones, adaptaciones y/o modificaciones habituales en la medida en que entren dentro del alcance de las siguientes reivindicaciones.

Claims

1. Un compuesto de fórmula (I)

30

donde

R^{3} es seleccionado entre

31

32

R^{8} es seleccionado entre hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6};

R^{10} es seleccionado entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, cicloalquilo C_{3}-C_{6}, (hidroxi)alquilo C_{1}-C_{6}, arilo, heteroarilo, aralquilo, aralquenilo o C(O)NH_{2};

siempre que, cuando R^{3} sea

33

y sus sales farmacéuticamente aceptables.

2. El compuesto de la Reivindicación 1, donde R^{1} y R^{2} son cada uno independientemente seleccionados entre hidrógeno y alquilo C_{1}-C_{4};

R^{3} es seleccionado entre

34

35

R^{4} y R^{6} son cada uno independientemente seleccionados entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, alquilo C_{1}-C_{4} fluorado, ciano, (hidroxi)alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4} fluorado, alcanoílo C_{1}-C_{4}, halógeno, hidroxi, alquil(C_{1}-C_{4})- NR^{8}R^{9}, NR^{8}R^{9}, CONR^{8}R^{9} o SO_{2}NR^{8}R^{9};

R^{8} es seleccionado entre hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{4};

R^{8} y R^{9}, junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un grupo pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo o
4-N(R^{10})piperazinilo no substituido o substituido, donde el substituyente es seleccionado entre alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, NR^{11}R^{12} o CONR^{11}R^{12}, y

siempre que, cuando R^{3} sea

36

y sus sales farmacéuticamente aceptables.

3. El compuesto de la Reivindicación 2, seleccionado entre

37

38

y sus sales farmacéuticamente aceptables.

4. El compuesto de la Reivindicación 1, donde R10 es seleccionado entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, (hidroxi)alquilo C_{1}-C_{6}, arilo, heteroarilo, aralquilo, aralquenilo o C(O)NH_{2}, y sus sales farmacéuticamente aceptables.

5. Una composición farmacéutica consistente en un vehículo farmacéuticamente aceptable y un compuesto de la Reivindicación 1.

6. El uso de un compuesto según cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 4 en la fabricación de un medicamento para tratar la disfunción sexual en un sujeto.

7. El uso según la Reivindicación 6, donde la disfunción sexual es la disfunción eréctil masculina.

8. El uso de un compuesto según cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 4 en la fabricación de un medicamento para tratar la impotencia en un sujeto macho.

9. El uso de un compuesto según cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 4 en la fabricación de un medicamento para aumentar la concentración de cGMP en el tejido peneano en un sujeto macho.