ES2206981T3

ES2206981T3 - Dihomo-seco-colestanos con dos enlaces insaturados en la cadena lateral.

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Publication number: ES2206981T3
Application number: ES98940201T
Authority: ES
Inventors: Pierre Barbier; Peter Mohr; Marc Muller; Christopher Self
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 1997-07-17
Filing date: 1998-07-10
Publication date: 2004-05-16
Anticipated expiration: 2018-07-10
Also published as: EP0998455B1; EP0998455A1; JP2001510183A; US5994569A; DE69818673T2; WO1999003828A1; CA2296145A1; DE69818673D1; AU8860298A; AR013217A1

Abstract

Derivados de 24a,25B-dihomo-9,10-secocolestano poliinsaturados representados por la fórmula (I) en la que A es un enlace simple o doble, B{sup,1} y B{sup,2} son cada uno independientemente uno del otro CH=CH o C`C, T es CH{sub,2} o CH{sub,2}CH{sub,2}, X es -CH{sub,2} o >C=CH{sub,2}, R{sup,1} es H, F o OH, R{sup,2} y R{sup,3} son cada uno independientemente uno de otro alquilo inferior o CF3, o bien C(R{sup,2},R{sup,3}) es cicloalquiloC{sub,3-6}. Estos compuestos son útiles en el tratamiento o la prevención de los trastornos dependientes de la vitamina D y de las enfermedades autoinmunes dependientes de la IL-12, en particular la soriasis, el epitelioma basocelular, trastornos de queratinización y queratosis, leucemia osteoporosis, fallo renal acompañado de hiperparatiroidismo, esclerosis múltiple rechazo de trasplante, síntoma de injerto contra huésped, artritis reumatoide, diabetes melitus insulinodependiente, enfermedad intestina, choque séptico y encefalomielitis alérgica.

Description

Dihomo-seco-colestanos con dos enlaces insaturados en la cadena lateral.

El invento se refiere a nuevos derivados de 24a,24b-dihomo-9,10-secocolestano de la fórmula I:

1

en donde

A es un enlace simple o doble,

B^{1} es CH = CH,

B^{2} es CH = CH o C \equiv C,

T es CH_{2} o CH_{2}CH_{2},

X es -CH_{2} o > C = CH_{2},

R^{1} es H, F u OH,

R^{2} y R^{3} son cada uno, independientemente, alquilo de C_{1}-C_{4} o CF_{3}, o C(R^{2},R^{3}) es cicloalquilo de C_{3}-C_{6} con la condición de que la configuración en el C-átomo 20 no es S cuando A es un enlace simple, B^{1} es CH = CH, B^{2} es CH = CH o C \equiv C, T es CH_{2}, X es C = CH_{2}, R^{1} es OH, R^{2} y R^{3} son cada uno, independientemente, alquilo de C_{1-4} o C(R^{2},R^{3}) son cicloalquilo de C_{3}-C_{6}.

El presente invento se refiere además a un procedimiento para la preparación de los compuestos de fórmula I, composiciones farmacéuticas que contienen el compuesto de fórmula I, y el empleo de los compuestos de fórmula I para el tratamiento de trastornos dependientes de la vitamina D y para la preparación de composiciones farmacéuticas para el tratamiento de trastornos dependientes de la vitamina D.

La EP-A-441 467 describe derivados de vitamina D con una cadena lateral poli-insaturada.

Esteroides 60(4), 1995, 324-32 describe un análogo de vitamina D con una cadena lateral conjugada poli-insaturada: grupo C \equiv C en posición 23-24 y un grupo C = C en posición 24a-24b.

La EP-A-742 203 describe análogos de vitamina D con un grupo C = C en posición 24a-24b (cadena lateral monoinsaturada) útil en el tratamiento de trastornos relacionados con vitamina D.

El término "trastornos dependientes de vitamina D" se refiere a trastornos que pueden tratarse o prevenirse con la administración de compuestos que tienen actividad de vitamina D, tal como vitamina D_{3} o derivados, en particular sus derivados hidroxilados, por ejemplo calcitriol o calcipotriol. Ejemplos de estos trastornos son enfermedades de la piel hiperpro-liferativas tal como psoriasis, carcinomas celulares basales, trastornos de queratinización y queratosis; trastornos neoplasticos tal como leucemia; trastornos de las glándulas sebaceas tal como acné y dermatitis seborreica; osteoporosis, hiperparatiroidismo acompañado de fallo renal; y enfermedades que requieren modulación del sistema inmune, tal como esclerosis múltiple, rechazo de transplante e injerto frente a trastorno huésped.

En particular, los compuestos de fórmula I pueden utilizarse en la prevención y tratamiento de enfermedades autoinmunes IL-12-dependientes tal como artritis reumatoide, psoriasis, diabetes mellitus dependiente de insulina, esclerosis múltiple, enfermedad de intestinos inflamatoria, shock séptico y encefalomielitis alérgica.

Los grupos de alquilo de C_{1-4} preferidos son grupos de alquilo de cadena lineal, tal como butilo, propil etilo, y particularmente metilo. Los grupos de cicloalquilo de C_{3-6} preferidos son ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.

Los compuestos preferidos de la fórmula I son aquellos en donde B^{1} y B^{2} son ambos -CH = CH-, en donde la cadena lateral es:

2

particularmente:

(5Z,7E,23E,24aE)-(1R,3S)-24a,24b-dihomo-9,10-seco-colesta-5,57,10(19),23,24a-penteno-1,3,25-triol, y los siguientes:

(7E,23E,24aE)-(1R,3R)-24a,24b-dihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23,24a-tetraen-1,3,25-triol,

(5Z,7E,23E,24aE)-(1R,3S)-24a,24b-dihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),23,24a-penten-1,3,25-triol,

(5Z,7E,23E,24aE)-(1S,3R)-17a,24a-trihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),23,24a-penten-1,3,25-triol,

(7E,23E,24aE)-(1R,3S)-17a,24a,24b-trihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23,24a-tetraen-1,3,25-triol,

(5Z,7E,23E,24aE)-(3S)-17a,24a,24b-trihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),23,24a-penten-3,25-diol,

(7E,23E,24aE)-(1R,3S)-17a,24a,24b-trihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,17,23,24a-penten-1,3,25-triol,

(5Z,7E,23E,24aE)-(1S,3R)-17a,24a,24b-trihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),17,23,24a-hexen-1,3,25-diol,

(5Z,7E,23E,24aE)-(1S,3S)-17a,24a,24b-trihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),23,24a-hexen-1,3,25-triol,

(7E,23E,24aE)-(1R,3S)-24a,24b-trihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,16,23,24a-penten-1,3,25-triol,

(5Z,7E,23E,24aE)-(1S,3S)-24a,24b-dihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),16,23,24a-penten-1,3,25-diol,

(5Z,7E,23E,24aE)-(3S)-24a,24b-trihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),16,23,24a-hexen-3,25-diol.

Otros compuestos preferidos de la fórmula I son aquellos en donde B^{1} es -CH = CH- y B^{2} es –C \equiv C; o sea compuestos de fórmula I en donde la cadena lateral es

3

particularmente

(7E,23E)-(1R,3S)-17a,24a,24b-trihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23,24a-trien-24a-ino-1,3,25-triol

(5Z,7E,23E)-(1S,3R)-17a,24a,24b-trihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),23-tetraen-24a-ino-1,3,25-triol

(7E,23E)- y (7E,23Z)-(1R,3S)-24a,24b-trihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23-trien-24a-ino-1,3,25-triol,

(7E,23E)- y (7E,23Z)-(1R,3S)-24a,24b,26a,26b-tetrahomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23-trien-24a-ino-1,3,25-triol,

(7E,23E)- y (7E,23Z)-(1R,3S)-26,26,26,27,27,27-hexifluoro-24a,24b-dihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23-
trien-24a-ino-1,3,25-triol,

(7E,23E,24aE)- y (7E,23Z,24aE)-(1R,3S)-24a,24b,26a,26b-tetra-homo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23-tetraen-24a-ino-1,3,25-triol,

(7E,23E),24aE- y (7E,23Z,24aE)-(1R,3S)-26,26,26,27,27,27-hexa-fluoro-24a,24b-dihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23,24a-tetraen-24a-ino-1,3,25-triol.

Otro grupo de compuestos preferidos son aquellos en donde B^{1} es -CH-CH-, B^{2} es C \equiv C- y C(R^{2}, R^{3}) es cicloalquilo de C_{3-6}, en particular

\newpage

(7E,23E)- y (7E,23Z)-(1R,3S)-25-(1-hidroxi-ciclopentil)-24a,24b-dihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23-trien-24a-ino-1,3,25-diol,

(7E,23E,24aE)- y (7E,23Z,24aE)-(1R,3S)-25-(1-hidroxi-ciclopen-til)-24a,24b-dihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23,24a-tetra-en-24a-ino-1,3,25-diol.

Los compuestos de fórmula I pueden obtenerse mediante disociación de cualquier grupo sililo-protector L y L' contenido en un compuesto de fórmula II

4

en donde R^{11} es H, F u O-L, y R^{4} es H o L', y A, B^{1}, B^{2}, T, R, R^{2} y R^{3} son como se ha definido antes.

Ejemplos de grupos sililo protectores L y L' son ter-butil-dimetilsililo (TBDMS), ter-butil-difenilsililo (TBDPS) o trimetilsililo (TMS).

La disociación de grupos silo protectores en los compuestos II puede efectuarse con fluoruro de tetrabutilamonio (TBAF) en un disolvente tal como tetrahidrofurano (THF) a una temperatura de hasta 60ºC.

Los compuestos de fórmula II, en donde ambos B^{1} y B^{2} son CH = CH, se obtienen mediante acoplamiento de un fosfinóxido de fórmula III

5

con una cetona de fórmula IV

6

El acoplamiento puede efectuarse haciendo reaccionar una solución del fosfinóxido III en THF con butil litio y luego con una cetona IV a -78ºC.

Las cetonas IV pueden obtenerse mediante oxidación de los dioles correspondientes de fórmula V

7

si se desea seguido de sililación de las hidroxi cetonas obtenidas de fórmula

8

La oxidación puede efectuarse en N,N-dimetilformamida (DMF) o en CH_{2}Cl_{2} con dicromato de piridinio (PDC), o con N-óxido de 4-metilmorfolina y cantidades catalíticas de perrutenato de tetrapropilamonio, en presencia de tamiz molecular.

La sililación de VI puede efectuarse en THF o en CH_{2}Cl_{2} por ejemplo con TMS-imidazol.

Los dioles V pueden obtenerse a partir de ésteres de fórmula VII

9

en donde L'' es un grupo sililo-protector, de preferencia TBDMS, vía los alcoholes de fórmula VIII

10

La conversión de los ésteres VII en los alcoholes VIII puede llevarse a cabo en THF con CeCl_{3}, seguido de reacción con metil-litio en éter a -78ºC.

La desprotección de VIII frente al diol V puede efectuarse con TBAF en THF.

Alternativamente, un silil éter VII puede desprotegerse primero, por ejemplo mediante reacción con ácido hidrofluórico acuoso en THF, y convertirse el éster-alcohol obtenido en el alcohol V de igual modo que se ha descrito antes para la conversión de los ésteres VII en los alcoholes VIII.

Los ésteres de la fórmula VII pueden obtenerse a partir de aldehidos de fórmula IX

11

Así pues, puede hacerse reaccionar una solución de trimetil-4-fosfonocrotonato en THF con hexametildisilazida lítica (LiHMDS) en THF a -78ºC, y hacerse reaccionar el anión obtenido a -40ºC con una solución de un aldehido IX en THF.

Alternativamente, la solución de trimetil-4-fosfonocrotonato en THF se desprotona a -78ºC con una solución de diisopropilamida lítica (LDA), obtenida de diisopropilamina y n-butil-litio, en THF, y reaccionar el anión obtenido a -78ºC con una solución de un aldehido IX en THF.

Los aldehidos IX pueden obtenerse a partir de alcoholes de fórmula X

12

mediante reacción con cloruro de tosilo en presencia de dimetilamino-piridina en diclorometano, haciendo reaccionar luego el tosilato obtenido con NaCN en sulfóxido de dimetilo (DMSO) a 90ºC, y haciendo reaccionar el cianuro resultante con hidruro de dibutilaluminio (DIBAH) en diclorometano a -10ºC.

En una variante, que se prefiere cuando A es un doble enlace, el alcohol de la fórmula X se convierte en el aldehido correspondiente, por ejemplo con reactivo de Swern, obtenido a partir de cloruro de oxalilo, DMSO y trietilamina. Este aldehido de fórmula XI

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se hace reaccionar a -78ºC con una solución de iluro, obtenida de por si mediante reacción de cloruro de (metoximetil) trifenilfosfonio en THF con n- o sec-butil-litio. El enoléter resultante puede hidrolizarse luego, por ejemplo, con ácido clorhídrico, al aldehido IX.

Los alcoholes X son conocidos o pueden obtenerse de modo análogo a los compuestos conocidos.

Un alcohol X con la configuración no natural en el átomo de C metilado en posición 20 de la vitamina D_{3}, puede obtenerse mediante epimerización del aldehido correspondiente XI con configuración natural, con 1,5-diaza-biciclo[4.3.0]non-5-en (DBN) en THF, seguido de reducción con borohidruro sódico y separación cromatográfica del alcohol deseado X.

Los compuestos de fórmula X en donde T es CH_{2}CH_{2} pueden prepararse como se describe en la patente Europea 0 771 789, como se expone en el Esquema reaccional 1 que sigue:

De conformidad con el esquema 1, el compuesto (1) [Synthesis 957 (1993)] se reduce para dar el alcohol ecuatorial (2), que se transforma en (4) vía el tiocarbamato (3). El compuesto (4) puede hidroborarse para dar (5). La oxidación del alcohol, por ejemplo, con piridinioclorocromato o TPAP y equilibrado con t-butóxido potásico da (6), que puede reducirse para dar el compuesto (7). La acetilación de (7) y disociación de la función de ter.-butil éter da (8) que se oxida y desacila para dar cetoalcohol (9). Para la formación de la cadena lateral de vitamina D_{3} el grupo de alcohol de (9) está apropiadamente protegido, por ejemplo mediante un grupo protector de silil éter Z, de preferencia el grupo ter-butil-dimetil-sililo, para obtener (10).

La cetona (10) se convierte mediante una reacción de Wittig en el compuesto (11) del que se obtiene (12) mediante una reacción de eno con paraformaldehido y cloruro de dimetilaluminio, o con paraformaldehido y BF_{3}\cdotEt_{2}O. La hidrogenación catalítica de (12) da (13).

Esquema 1

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en donde Z es un grupo protector hidroxi, de preferencia un grupo sililo como, por ejemplo el grupo de ter.-butildimetil-
sililo.

Los fosfinoxidos de fórmula III son conocidos o pueden obtenerse en modo análogo a los compuestos conocidos. Así pues, aquellos en donde X es CH_{2} pueden prepararse como se muestra en el Esquema formulativo 2 que sigue:

\newpage

Esquema 2

15

en donde L y R^{11} son como se ha definido antes.

De conformidad con el Esquema 2, la cetona XV se convierte mediante una reacción de Peterson en el éster XVI del que se obtiene el alcohol XVIII mediante reducción. La reacción de XVII con N-clorosuccinimida en presencia de dimetilazufre da el cloruro XVIII. La reacción de XVIII con difenilfosfina-litio y operando con H_{2}O_{2} al 5% en acetato de etilo da el fosfinóxido III'.

El Esquema reaccional 3 que sigue muestra los fosfinóxidos III que tienen la configuración 3\alpha innatural pueden prepararse como se describe en Tetrahedron Letters 1992:2455 y 4364 y 1996:5589.

En el Esquema 3, TBHP significa ter-butil-hidroperóxido, TBDPS significa butil-difenilsililo, PPTS significa p-toluensulfonato de piridinio, Red-Al significa dihidro-bis(2-metoxietoxi)aluminato sódico, y NCS significa N-cloro-succinimida.

Esquema 3

16

1500

Los compuestos de fórmula II, en donde R^{4} es H y B^{2} es C = C pueden obtenerse mediante desprotonación de un compuesto de fórmula XII

150

con una base, tal como butil-litio, seguido de la adición de una cetona de fórmula O = C(R^{2},R^{3}).

Los compuestos de fórmula II, en donde B^{2} es C = C pueden reducirse de modo selectivo a aquellos en donde B^{2} es CH = CH, por ejemplo con hidruro de litioaluminio en presencia de metilato sódico.

Los compuestos de fórmula XII pueden obtenerse mediante acoplamiento de Wittig-Horner de una cetona de la fórmula XIII

160

con un fosfinoxido de fórmula III, en presencia de una base, tal como LiHMDS.

Las cetonas XIII pueden obtenerse desprotegiendo un compuesto de fórmula XIV

17

por ejemplo con ácido fluorhídrico en THF/acetonitrilo seguido de oxidación del alcohol obtenido, por ejemplo con PDC en DMF.

Los compuestos de fórmula XIV en donde B^{1} es CH = CH, pueden obtenerse mediante reacción de Witting-Horner del aldehido correspondiente de fórmula IX con 3-dietilfosfito-1-trimetilsilanil-prop-1-ina, en presencia de LiHMDS.

Los compuestos de fórmula XIV, en donde B^{1} es C = C pueden obtenerse tratando el alcohol correspondiente de fórmula X con anhídrido triflico (anhídrido de trifluorometan-sulfonilo) y haciendo reaccionar el triflato resultante mediante sustitución nucleofílica (J.A.C.S. 119, 1997, 4353) con 4-trimetilsilil-butadiin-1-litio.

En una variante, pueden obtenerse alcoholes de fórmula VIIIb

18

a partir de los dibromuros olefínicos XV vía reacción de Corey-Fuchs, o sea, tratamiento con BuLi, seguido de enfriamiento del acetiluro resultante con la cetona apropiada y, si se desea, reducción selectiva del triple enlace, por ejemplo con hidruro de litio aluminio.

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Los intermedios XV se obtienen a partir de aldehidos XVI con un método conocido, o sea reacción con trifenilfosfina y CBr_{4} en CH_{2}Cl_{2}.

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Estos últimos pueden sintetizarse a partir de los aldehidos de fórmula IX con una reacción de Wittig altamente E-selectiva con el iluro estabilizado (carbetoxime-tilen)trifenilfosforano, seguido de reducción del éster \alpha, \beta-insaturado con DIBAL-H en THF y reoxidación con MnO_{2} en CH_{2}Cl_{2}.

Los intermedios de fórmula II y los de las fórmulas IV, V y VI son nuevos y como tales constituyen otro objeto del presente invento.

Los ejemplos que siguen ampliarán la ilustración del invento.

Ejemplo 1

a) Se disuelve el compuesto (S)-2-[(1R,3aR,4S,7aR)-4-(ter-butil-dimetilsilaniloxi)-7a-metil-octahidro-inden-1-il]-propan-1-ol (5,00 g; 15,31 mmol) en diclorometano (75 ml) a temperatura ambiente. Se adiciona cloruro de tosilo (8,76 g; 45,93 mmol; 3 equivalentes) y dimetil-amino-piridina (5,61 g; 45,93 mmol; 3 equivalentes). Se deja reaccionar la mezcla durante la noche. Se vierte la mezcla reaccional sobre salmuera y se extrae con acetato de etilo. Se seca la fase orgánica sobre sulfato sódico y se separan los disolventes. El tosilato crudo se utiliza directamente en la etapa siguiente. El tosilato intermedio se disuelve en DMSO (35 ml), NaCN (2,25 g; se adicionan 45,93 mmol; 3 equivalentes) y se calienta durante 2 horas a 90ºC. Se vierte la mezcla reaccional en agua y se extrae con hexano/acetato de etilo 1:1. Se seca la fase orgánica sobre sulfato sódico y se separan los disolventes. El cianuro crudo se utiliza directamente en la etapa siguiente. El cianuro intermedio se disuelve en diclorometano (50 ml), se adiciona lentamente DIBAH a -10ºC (38,3 ml de una solución 1,2 M; 45,93 mmol; 3 equivalentes) y se agita durante 2 horas a -10ºC. Se deja elevar la temperatura por encima de punto de congelación y se adiciona una solución acuosa 1M de cloruro amónico. Después de 10 minutos Se adiciona éter/HCl acuoso 1N (30 ml) y se deja reaccionar durante 15 minutos. Se extrae la mezcla reaccional con acetato de etilo. Se seca la fase orgánica sobre sulfato sódico y se separan los disolventes. Después de cromatografía flash (hexano/acetato de etilo 95:5) se obtiene (R)-3-[(1R,3aR,4S,7aR)-4-(ter-butil-dimetilsilaniloxi)-7a-metil-octa-hidro-inden-1-il]-butan-1-al en forma de un sólido céreo incoloro.

b) Se disuelve trimetil-4-fosfonocrotonato (1,7 g; 8,2 mmol; 1,2 equivalentes) en THF anhidro (20 ml). Se adiciona cuidadosamente a -78ºC LiHMDS (8,2 ml de una solución 1M en THF; 8,2 mmol; 1,2 equivalentes). Después de 15 minutos se calienta la mezcla reaccional hasta -40ºC y se adiciona luego en solución en THF (R)-3-[(1R,3aR,4S,7aR)-4-(ter-butil-dimetilsilaniloxi)-7a-metil-octahidro-inden-1-il]-butan-1-al. Después de 15 minutos se deja que la mezcla reaccional alcance la temperatura ambiente. Luego se vierte la mezcla reaccional sobre salmuera y se extrae con acetato de etilo. Se lava la fase orgánica con salmuera y se seca sobre sulfato sódico. Se separan los disolventes y se cromatografía la mezcla cruda sobre gel de sílice (eluente: n-hexano/acetato de etilo 96/4). Se obtiene 1,81 gramos (63%) de E-isómero puro, éster metílico del ácido (3E,5E)-(R)-6-[(1R,3aR,4S,7aR)-4-(ter-butil-dimetilsilaniloxi)-7a-metil-octahidro-inden-1-il]-octa-3,5-dienoico en mezcla con su Z-isómero (645 mg; 23%).

EM: (M-CH_{3})^{+} 405

IR: cm^{-1} 3429; 2953; 2863; 1721; 1641; 1614; 1464; 1434; 1355; 1328; 1308; 1255; 1167; 1144; 1084; 1022; 1000; 973; 950; 925; 836; 773; 688.

c) Se disuelve éster metílico del ácido (3E,5E)-(R)-6-[(1R,3aR,4S,7aR)-4-(ter-butil-dimetilsilaniloxi)-7a-metil-octa-hidro-inden-1-il]-octa-3,5-dienóico (500 mg; 1,19 mmol) en tHF (20 ml) y se adiciona ácido fluorhídrico (40%) (10 ml) y se agita a temperatura ambiente durante la noche. Se vierte la mezcla reaccional sobre una solución saturada de hidrogencarbonato y se extrae con acetato de etilo. Se lava la fase orgánica con salmuera y se seca sobre sulfato sódico. Se separan los disolventes y se cromatografía la mezcla cruda sobre gel de sílice (eluente: n-hexano/acetato de etilo 75/25). Se obtienen 268 mg (74%) del éster-alcohol intermedio, éster metílico del ácido (3E,5E)-(R)-6-[(1R,3aR,4S,7aR)-4-hidroxi-7a-metil-octahidro-inden-1-il]-octa-3,5-dienoico. Ester éster-alcohol intermedio (265 mg; 0,865 mmol) se disuelve en THF anhidro (20 l) y se adiciona cloruro de cerio anhidro III (704 mg; 2,85 mmol; 3,3 equivalentes). A 78ºC se adiciona a gotas metil-litio (2,7 ml de una solución 1,6 M; 4,32 mmol; 5 equivalentes) y se deja reaccionar la mezcla durante una hora. Se vierte la mezcla reaccional sobre agua helada y se extrae con acetato de etilo. Se lava la fase orgánica con salmuera y se seca sobre sulfato sódico. Se separan los disolventes y se cromatografía la mezcla cruda sobre gel de sílice (eluente: n-hexano/acetato de etilo 7/3). Se obtienen 199 mg (75%) de (3E,5E)-(1R,3aR,4S,7aR)-1-[(R)-7-hidroxi-1,7-dimetil-octa-3,5-dienil]-7a-metil-octahidro-inden-4-ol en forma de cristales incoloros.

PF = 110-112ºC

EM: (M)^{+} 306

IR: cm^{-1} 3394; 2969; 2943; 2880; 1652; 1627; 1451; 1372; 1232; 1166; 1135; 991; 942.

d) El compuesto (3E,5E)-(1R,3aR,4S,7aR)-1-[(R)-7-hidroxi-1,7-dimetil-octa-3,5-dienil]-7a-metil-octahidro-
inden-4-ol (180 mg; 0,587 mmol) se disolvió en DMF (6 ml). Se adicionó en porciones PDC (332 mg; 0,88 mmol; 1,5 equivalentes) a temperatura ambiente, y se reanudó la agitación durante una hora. Luego se virtió la mezcla reaccional sobre salmuera enfriada, se extrajo dos veces con acetato de etilo, se lavó dos veces con salmuera, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se separó el disolvente. Después de cromatografía flash (eluente: hexano/acetato de etilo 67/33) se obtuvo el intermedio de hidroxicetona en forma de un aceite incoloro. Este intermedio se disolvió en THF seco (5 ml). Luego, a 0ºC se adicionó secuencialmente 1-trimetilsilil-imidazol (61,6 \mul; 0,42 mmol), imidazol (14,3 mg; 0,21 mmol; 0,5 equivalente) y cloruro de trimetilsililo (26,6 \mul; 0,21 mmol; 0,5 equivalente). Después de veinte minutos a -0ºC se dejó que la mezcla reaccional alcanzara lentamente la temperatura ambiente. Luego se virtió la mezcla reaccional sobre salmuerada enfriada, se extrajo con acetato de etilo, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se separaron los disolventes. Después de cromatografía flash (eluente: hexano/acetato de etilo 9/1) se obtuvo el compuesto (3E,5E)-(1R,3aR,7aR)-1-[(R)-1,7-dimetil-7-trimetilsilaniloxi-octa-3,5-dienil]-7a-metil-octahidro-inden-4-ona (105 mg; rendimiento del 51%) en forma de un aceite incoloro.

EM: (M)^{+} 376

RMN: (250 Mhz; CDCl_{3}; J = Hz): 6,12 (dd; J = 15,2, 10,4; 1H); 6,01 (dd; J = 14,8, 10,4; 1H); 5,68 (d; J = 15,4; 1H); 5,64 (m; 1H); 2,46 (dd; J= 12,5, 8,5; 1H); 2,32-1,32 (m; 14H); 1,34 (s, 6H); 0,97 (d; J = 6,0; 3H); 0,65 (s,3H); 0,12 (s, 9H).

e) Se disolvió el compuesto óxido de Z-(3S,5R)-[2-[3,5-bis-(ter-butil-dimetil-silaniloxi)-2-metilen-ciclohexiliden]-etil]-difenil-fosfina (149 mg; 0,255 mmol; 2 equivalentes) en THF seco (3 ml). A -78ºC se adicionó lentamente butil-litio (1,6 M en hexano; 0,24 ml; 0,382 mmol; 3 equivalentes). La mezcla reaccional viró a un color rojo intenso y se agitó durante 30 minutos. Luego se adicionó lentamente el compuesto (3E,5E)-(1R,3aR,7aR)-1-[(R)-1,7-dimetil-7-trimetilsilaniloxi-octa-3,5-dienil]-7a-metil-octahidro-inden-4-ona (48 mg; 0,127 mmol). Después de una hora a -78ºC se dejó que la mezcla reaccional alcanzara la temperatura ambiente. Luego se virtió la mezcla reaccional sobre salmuerada enfriada, se extrajo con éter, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se separaron los disolventes. Después de cromatografía flash (eluente: hexano/acetato de etilo 95/5) se obtuvo el compuesto (5Z,7E,23E,24aE)-(1R,3S)-1,3-bis-(ter-butil-dimetil-silaniloxi)-24a,24b-dihomo-25-trimetilsilaniloxi-9,10-seco-colesta-5,7,10-(19),23,24a-pentano (58 mg; rendimiento del 61%) en forma de una espuma incolora.

f) El compuesto sililado (5Z,7E,23E,24aE)-(1R,3S)-1,3-bis-(ter-butil-dimetil-silaniloxi)-24a,24b-dihomo-25-trimetilsila-niloxi-9,10-secocolesta-5,7,10(19),23,24a-penteno (54 mg; 0,073 mmol) se disolvió en una solución 1 molar de TBAF en THF (2 ml; 2 mmol; 10 equivalentes) y se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Luego se virtió la mezcla reaccional sobre salmuera enfriada, se extrajo con acetato de etilo, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se separó el disolvente. Después de cromatografía flash (eluente: hexano/isopropanol 73/27), se obtuvo el compuesto (5Z,7E,-23E,24aE)-(1R,3S)-24a,24b-dibromo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),-23,24a-penten-1,3,25-triol en forma de cristales incoloros (29 mg; rendimiento del 90%).

EM: (M)^{+} 400

IR: cm^{-1} 3431; 2877; 1632; 1380; 1058; 996.

De modo análogo al ejemplo 1 se obtuvo:

Ejemplo 2 (7E,23E,24aE)-(1R,3R)-24a,24b-dihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23,24a-tetraen-1,3,25-triol

EM: (M)^{+} 428

IR: cm^{-1} 3419; 2946; 2929; 2873; 2848; 1627; 1446; 1377; 1158; 1048; 989, utilizando óxido de (3R,5R)-[2-[3,5-bis-(ter-butil-dimetil-silaniloxi)-ciclohexiliden]-etil]-difenil-fosfina en la reacción de acoplamiento e).

Ejemplo 3 (5Z,7E,23E,24aE)-(1S,3S)-24a,24b-dihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),23,24a-penten-1,3,25-triol

EM: (M)^{+} 440

IR: cm^{-1} 3313; 2952; 2922; 2854; 1652; 1460; 1377; 1366; 1259; 1235; 1149; 1066; 1049; 1016; 989; 9,13,

utilizando óxido de (3S,5S)-[2-[3,5-bis-(ter-butil-difenil-silaniloxi)-2-metilen-ciclohexiliden]-etil]-difenil-fosfina en la reacción de acoplamiento e).

Ejemplo 4

a) Se preparó a -70ºC reactivo de Swern adicionando lentamente 1,70 ml de DMSO absoluto a 0,947 ml de cloruro de oxalilo, disuelto en 27 ml de CH_{2}Cl_{2}. 15 minutos después se adicionó lentamente 3,43 g de (S)-2-[(1R,4aR,5S,8aR)-5-(ter-butildimetil-silaniloxi)-8a-metil-decahidro-naftalen-1-il]-pro-pan-1-ol (síntesis descrita en El ejemplo 12 de ref., disuelto en 10 ml de CH_{2}Cl_{2}. Después de 0,25 h se adicionó a gotas 4,8 ml de NEt_{3} y se dejó que la temperatura alcanzara -30ºC. Se enfrió la reacción virtiéndola sobre hielo triturado/NH_{4}Cl, se extrajo con éter, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hgexano/AcOEt = 97/3) dio (S)-2-[(1R,4aR,5S,8aR)-5-(ter-butildimetil-silaniloxi)-8a-metil-decahidro-naftalen-1-il]-propionaldehido en forma de un aceite incoloro.

b) Se enfrió a -10º una suspensión de 6,54 g de cloruro de (metoximetil)trifenilfosfonio en 38 ml de THF absoluto y se trató con 11,3 ml de nBuLi (1,5 M, hexano). 15 minutos después se enfrió la solución de iluro rojo intenso a 78º y se adicionó lentamente 3,225 g de (S)-2-[(1R,4aR,5S,8aR)-5-(ter-butil-dimetil-silaniloxi)-8a-metil-decahidro-naftalen-1-il]-propionaldehido en 21 ml de THF absoluto y se mantuvo la mezcla reaccional durante 60 minutos a esta temperatura. El reparto entre hexano y EtOH/H_{2}O = 8/2, lavado de la fase superior con EtOH/H_{2}O = 8/2, secado sobre sulfato sódico, evaporación y cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 98/2) dio 3,11 g de un intermedio enoléter en forma de mezcla E/Z, contaminado con algunas impurezas que se separaron después de la etapa siguiente: Este enoléter se hidrolizó disolviéndolo en 35 ml de THF conteniendo 12,5 ml de HCl acuoso al 25%. Después de 2,5 h a temperatura ambiente se virtió la mezcla reaccional sobre hielo triturado, se extrajo con éter, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 98/2) dio 1,76 g de (R)-3-[(1R,4aR,5S,8aR)-5-(ter-butildimetil-silaniloxi)-8a-metil-decahidro-naftalen-1-il]-butiraldehido en forma de un aceite incoloro.

c) Se preparó una solución de litio-diisopropilamida (LDA) a partir de 11 mmol de diisopropilamina y 9,9 mmol de nBuLi (1,55 M, hexano) en 21 ml de THF absoluto. Después de enfriamiento hasta -78º se adionó 2,22 g de éster metílico del ácido (E)-4-(dimetoxi-fosforil)-but-2-enoico en 10 ml de THF absoluto. Luego se adicionó 1,873 g de (R)-3-[(1R,4aR,5S,8aR)-5-(ter-butildimetil-silaniloxi)-8a-metil-decahidro-naftalen-1-il]-butiraldehido en 10 ml de THF absoluto y se dejó reaccionar durante 1 hora a -78º. Luego se virtió la mezcla sobre hielo triturado/NH_{4}Cl, se extrajo con éter, lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 97/3) dio 1,311 g de éster metílico del ácido (2E,4E)-(R)-7-[(1R,4aR,5S,8aR)-5-(ter-butildimetil-silaniloxi)-8a-metil-decahidro-naftalen-1-il]-octa-2,4-dienoico en forma de un aceite amarillo pálido, contaminado con vestigios del 2E, 4Z-isómero.

EM: (M-CH_{3})^{+ 419,} (M-t-butilo)^{+} 377.

d) Se adiconó 1,311 g de éster metílico del ácido (2E,4E)-(R)-7-[(1R,4aR,5S,8aR)-5-(ter-butildimetilsilaniloxi)-8a-metil-decahidro-naftalen-1-il]-octa-2,4-dienoico en 35 ml de THF absoluto. Se adicionaron 2,45 g de CeCl_{3} anhidro y se enfrió la mezcla hasta -78º. Luego se inyectaron 6,0 ml de MeLi (1,5 M, éter) mediante jeringa. 1 hora después se enfrió la reacción mediante vertido sobre hielo triturado / NH_{4}Cl, se extrajo con éter, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcEt = 8/2) dio 954 mg de (3E,5E)-(R)-8-[(1R,4aR,5S,8aR)-5-(ter-butildimetil-silaniloxi)-8a-metil-decahidro-naftalen-1-il]-2-metil-nona,3,5-dien-2-ol en forma de un aceite incoloro.

e) Se trataron 954 mg de (3E,5E)-(R)-8-[(1R,4aR,5S,8aR)-5-(ter-butildimetil-silaniloxi)-8a-metil-decahidro-naftalen-1-il]-2-metil-nona,3,5-dien-2-ol con 10 equivalentes de TBAF anhidro (2M en THF) a 55º durante 24 horas. Se virtió la mezcla reaccional sobre hielo triturado(NH_{4}Cl, se extrajo con éter, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía (SiO_{2}, hexano/-AcOEt = 7/3) dio 685 mg de (1S,4aR,5R,8aR)-5-((3E,5E)-(R)-7-hidroxi-1,7-dimetil-octa-3,5-dienil)-4a-metil-decahidro-nafta-len-1-ol en forma de aceite amarillo pálido.

f) Se agitó durante 0,25 h a temperatura ambiente 459 mg de N-óxido de 4-metilmorfolina, 40 mg de perrutenato de tetrapopilamonio y 2,53 g de tamices moleculares (polvo, 4\ring{A}). Se adicionaron 590 mg de (1S,4aR,5R,8aR)-5-[(3E,5E)-(R)-(7-hidroxi-1,7-dimetil-octa-3,5-dienil)]-4a-metil-decahidro-nafta-len-1-ol disuelto en 5 ml de CH_{2}Cl_{2} y se mantuvo la mezcla durante 2 horas y media a temperatura ambiente. La dilución con éter, filtración sobre SiO_{2}, evaporación y cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt:7/3) dio 283 mg de (4aR,5R,8aR)-5-[(3E,5E)-(R)-(7-hidroxi-1,7-dimetil-octa-3,5-dienil)]4a-metil-octahidro-naftalen]-1-ona además de 166 mg de una mezcla de producto y alcohol de partida.

g) Se hizo reaccionar a 40º 323 mg de (4aR,5R,8aR)-5-((3E,5E)-(R)-7-hidroxi-1,7-dimetil-octa-3,5-dienil)-4a-metil-octahidro-naftalen-1-ona con 1,33 ml de TMS-imidazol (9 equivalentes) en 8 ml de CH_{2}Cl_{2}. Después de unas pocas horas se virtió la mezcla sobre hielo triturado, se extrajo con éter, se lavó con agua, secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 9/1) dio 326 mg de (4a,R,5R,8aR)-5-[(3E,5E)-(R)-(1,7-dimetil-7-trime-tilsilaniloxi-octa-3,5-dienil)]-4a-metil-octahidro-nafta-len-1-ona en forma de un aceite incoloro.

EM: (M)^{+} 390, (M-CH_{3})^{+} 375.

h) Se disolvieron 597 mg de óxido de (Z)-(3S,5R)-[2-[3,5-bis-(t-butildimetil-silaniloxi)-2-metilen-ciclohexiliden]-etil]-difenil-fosfina en 10 ml de THF absoluto y se trató a -78º con 0,640 ml de nBuLi (1,6M, hexano). Después de 10 minutos se adicionaron 200 mg de (4aR,5R,8aR)-5-[(3E,5E)-(R)-(1,7-dimetil-7-trimetilsilaniloxi-octa-3,5-dienil)]-4a-metil-octahidro-nafta-len-1-ona, disuelto en 0,5 ml de THF absoluto y se mantuvo la mezcla durante media hora a 78º y durante media hora a 0º. Después de enfriamiento con hielo triturado/KH_{2}PO_{4}, se extrajo el producto con éter, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se separaron los disolventes. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt) dio en las fracciones menos polares 91 mg de (5Z,7E,23E,24aE)-(1S,3R)-1,3-bis-(t-butildimetil-silaniloxi)-25-trimetilsilaniloxi-17a,24a,24b-trihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10-(19),23,24a-penten y en las mas polares 149 mg de cetona de partida. Por último se eluyó el óxido de fosfina en exceso con hexano/AcOEt = 1/1.

i) Se trataron 91 mg de (5Z,7E,23E,24aE)-(1S,3R)-1,3-bis-(t-butildimetil-silaniloxi)-25-trimetilsilaniloxi-17a,24a,
24b-trihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),23,24a-penten con 10 equivalentes de TBAF anhidro (1M en THF) a 40º durante 2 horas. Se virtió la mezcla reaccional sobre hielo triturado / NH_{4}Cl, se extrajo con éter, se lavó con agua, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/iPrOH = 8/2) dio 50 mg de (5Z,7E,23E,24aE)-(1S,3R)-17a,24a,24b-trihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),23,24a-penten-1,3,25-triol en forma de espuma blanca.

EM: (M+1)^{+} 455, (M-H_{2}O)^{+} 436;

RMN: (1H, delta, TMS) 0,70 (s, 3H), 0,89 (d, 3H), 1,33 (s, 6H), 1,1-2,1 (m, 20H), 2,15-2,35 (m, 2H), 2,61 (dd, 1H), 2,87 (br d, 1H), 4,24 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 5,00 (br s, 1H), 5,34 (br, s 1H), 5,57-5,75 (m, 2H), 5,91-6,04 (m, 2H), 6,18 (dd, 1H), 6,37 (d, 1H);

IR (cm^{-1}): 2925, 2855, 1052, 987.

Ejemplo 5 (7E,23E,24aE)-(1R-3R)-17a,24a,24b-trihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23,24a-tetraen-1,3,25-triol

Se preparó de modo análogo al ejemplo 1, pero utilizando en la etapa h) óxido de (3R,5R)-[2-[3,5-bis-(t-butildimetil-silaniloxi)-ciclohexiliden]-etil]-difenil-fosfina.

EM: (M)^{+} 442, (M-H_{2}O)^{+}424;

RMN: (1H, delta, TMS) 0,70 (s, 3H), 0,89 (d, 3H), 1,33 (s, 6H), 1,1-2,05 (m, 21 H), 2,22 (br qui, 2H), 2,49 (dxd, 1H)), 2,70-2,91 (m, 2H), 4,06 (m, 1H), 4,14 (m, 1H) 5,63 (dxt, 1H), 5,69 (d, 1H), 5,83 (d, 1H), 5,97 (dxd, 1H), 6,18 (dxd, 1H), 6,31 (d);

IR (cm^{-1}): 2923, 2855, 1459, 1377.

Ejemplo 6 (5Z,7E,23E,24aE)-(3S)-17a,24a,24b-trihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),23,24a-pentan-3,25-diol

Se preparó de modo análogo al ejemplo 1, pero utilizando en la etapa h) óxido de (Z)-(S)-[2-[5-(t-butildimetil-silaniloxi)-2-metilen-ciclohexiliden]-etil]-difenil-fosfina.

EM: (M)^{+} 438, (M-H_{2}O)^{+} 420, (M-CH_{3})^{+} 405;

RMN: (1H, delta, TMS) 0,70 (s, 3H), 0,89 (d, 3H), 1,33 (s, 6H), 1,1-2,5 (m, 23H), 2,58 (dxd, 1H), 2,87 (br d, 1H), 3,94 (m, 1H), 4,81 (br s, 1H), 5,06 (br s, 1H), 5,64 (dxt, 1H), 5,69 (d, 1H), 5,92-6,05 (m, 2H), 6,13-6,27 (m, 2H).

Ejemplo 7 (7E,23E,24aE)-(1R,3R)-17a,24a,24b-trihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,17,23,24a-penten-1,3,25-triol

Se preparó como sigue:

a) Se preparó reactivo de Swern a -78ºC adicionando lentamente 1,6 ml de DMSO absoluto, disuelto en 4 ml de CH_{2}Cl_{2}, a 0,908 ml de cloruro de oxalilo en 26 ml de CH_{2}Cl_{2}. 15 minutos después se adicionaron lentamente 3,27 g de (S)-2-[(4aR,5S,8aS)-5-(ter-butildimetilsilaniloxi)-8a-metil-3,4,4a,5,6,7,8,8a-octahidro-naftalen-1-il]-propan-1-ol (síntesis descrita en el ejemplo 12 de referencia) disuelto en 11 ml de CH_{2}Cl_{2}. Después de 0,3 h., se adicionó a gotas 4,6 ml de NEt_{3} y se dejó que la temperatura alcanzara -15ºC. Se enfrió la reacción mediante vertido sobre hielo triturado/NH_{4}Cl, se extrajo con éter, lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 97/3 dio (S)-2-[(4aR,5S,8aS)-5-(ter-butildimetilsilaniloxi)-8a-metil-3,4,4a,5,6,7,8,8a-octa-hidro-naftalen-1-il]-propionaldehido con rendimiento casi cuantitativo.

EM: M^{+} 336, (M-t-butilo)^{+} 279.

b) Una suspensión de 7,17 g de cloruro de (metoxi-metil)trifenilfosfonio en 50 ml de THF absoluto se enfrió hasta -20º y se trató con 12,1 ml de nBuLi (1,55 M, hexano). 30 minutos después se enfrió la solución de iluro rojo profundo hasta -78º y 3,525 g de (S)-2-[(4aR,5S,8aS)-5-(ter-butildimetilsilaniloxi)-8a-metil-3,4,4a,5,6,7,8,8a-octa-hidro-naftalen-1-il]-propionaldehido disuelto en 21 ml de THF absoluto, se adicionó lentamente y se mantuvo la mezcla reaccional durante 45 minutos a dicha temperatura. El reparto entre hexano y EtOH/H_{2}O = 8/2, lavado de la fase superior con EtOH/H_{2} = 8/2, secado sobre sulfato de magnesio, evaporación i. V. y cromatografía (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 99/1) generó 2,590 g de un intermedio anoléter en forma de una mezcla E/Z. Este enoléter se hidrolizó mediante disolución en 30 ml de THF conteniendo 10 ml de 25% de HCl acuoso. Después de 90 minutos a temperatura ambiente se virtió la mezcla reaccional sobre hielo triturado, se extrajo con éter, lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 98/2 dio 2,424 g de (R)-3-[(4aR,5S,8aS)-5-(ter-butildimetil-silaniloxi)-8a-metil-3,4,4a,5,6,7,8,8a-octahidro-naftalen-1-il]-butiraldehido en forma de aceite amarillento.

c) Se preparó una solución de LDA adicionando a 0º 9,79 ml de nBuLi (1,55 M, hexano) a 2,30 ml de diisopropilamina. Después de enfriamiento hasta -78º, se adicionaron 2,872 g de éster metílico del ácido (E)-4-(dimetoxi-fosforil)-but-2-enoico, disuelto en 17 ml de THF absoluto. 90 minutos después se adicionaron 2,424 de (R)-3-[(4aR,5S,8aS)-5-(ter-butildimetil-silaniloxi)-8a-metil-3,4,4a,5,6,7,8,8a-octahidro-naftalen-1-il]-butiraldehido disuelto en 15 ml de THF absoluto y se dejó reaccionar durante 2 horas a -78º y 1,5 h a -40º. Luego se virtió la mezcla sobre hielo triturado/NH_{4}Cl, se extrajo con éter, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía instantánea (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 97/3), seguido de MPLC (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 98,9/1,9 y cristalización en hexano, dio 1,367 g de éster metílico del ácido (2E,4E)-(R)-7-[(4aR,5S,8aS)-5-(ter-butildimetil-silanil-oxi)-8a-metil-3,4,4a,5,6,7,8,8a-octahidronaftalen-1-il]-octa-2,4-dienoico en forma de cristales blancos de punto de fusión 59-64º.

EM: M^{+} 432, (M-t-butilo)^{+} 375.

d) Se disolvió en 75 ml de THF absoluto 1,365 g de éster metílico del ácido (2E,4E)-(R)-7-[(4aR,5S,8aS)-5-(ter-butil-dimetil-silaniloxi)-8a-metil-3,4,4a,5,6,7,8,8a-octahidro-nafta-len-1-il]-octa-2,4-dienoico. Se adicionaron 2,566 g de CeCl3 anhidro y se enfrió la suspensión resultante hasta -78º. Se adicionó a gotas con jeringa 6,9 ml de MeLi (1,6 M, éter), se enfrió la reacción mediante vertido sobre hielo triturado, se extrajo con AcOEt, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó i. V. La cromatografía (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 9/1) dio 1.250 g de (3E,5E)-(R)-8-[(4aR,5S,8aS)-5-(ter-butildimetil-silaniloxi)-8a-metil-3,4,4a,5,6,7,8,8a-octahi-dro-naftalen-1-il]-2-metil-nona-3,5-dien-2-ol en forma de un aceite incoloro.

e) Se trataron 1,245 g de (3E,5E)-(R)-8-[(4aR,5S,8aS)-5-(ter-butildimetil-silaniloxi)-8a-metil-3,4,4a,5,6,7,8,8a-octa-hidro-naftalen-1-il]-2-metil-nona-3,5-dien-2-ol con 12 equivalentes de TBAF anhidro (1M en THF) a 55º durante 22 horas. Se virtió la mezcla reaccional sobre hielo triturado/NH_{4}Cl, se extrajo con éter, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía instantánea (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 7/3) dio 929 mg de z(1S,4aS,8aR)-5-[(3E,5E)-(R)-7-hidroxi-1,7-dimetil-octa-3,5-dienil)]-4a-metil-1,2,3,4,4a,7,8,8a-octahidro-naftalen-1-ol en forma de aceite incoloro además de 62 mg de silil éter de partida.

f) Se agitó durante 0,25 h, 785 mg de N-óxido de 4-metilmorfolina, 1,45 g de tamices moleculares (polvo, 4\ring{A}), y 925 mg de (1S,4aS,8aR)-5-[(3E,5E)-(R)-7-hidroxi-1,7-dimetil-octa-3,5-dienil)]-4a-metil-1,2,3,4,4a,7,8,8a-octahidro-naftalen-1-ol disuelto en 16 ml de CH_{2}Cl_{2} y 1,6 ml de acetonitrilo. Se adicionaron 102 mg de perrutenato de tetrapropilamonio y la mezcla se mantuvo durante 22 horas a temperatura ambiente. La dilución con éter, filtración sobre SiO_{2}, evaporación y cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 7/3) dio 425 mg de (4aS,8aR)-5-[(3E,5E)-(R)-7-hidroxi-1,7-dimetil-octa-3,5-die-nil)]-4a-metil-3,4,4a,7,8,8a-hexahidro-2H-naftalen-1-ona además de 99 mg de una mezcla de producto y alcohol secundario de partida.

EM: M^{+} 316, (M-CH_{3})^{+} 301.

g) Se hizo reaccionar a temperatura ambiente 420 mg de (4aS,8aR)-5-((3E,5E)-(R)-7-hidroxi-1,7-dimetil-octa-3,5-dienil)-4a-metil-3,4,4a,7,8,8a-hexahidro-2H-naftalen-1-ona con 0,389 ml de TMS-imidazol (2 equivalentes) en 1,3 ml de CH_{2}Cl_{2}. Después de 20 horas se virtió la mezcla sobre hielo triturado, se extrajo con éter, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 95/5) dio 463 mg de (4aS,8aR)-5-[(3E,5E)-(R)-(1,7-dimetil-7-trimetilsilaniloxi-octa-3,5-dienil)]-4a-metil-3,4,4a,7,8,8a-hexahidro-2H-naftalen-1-ona en forma de un aceite incoloro.

EM: M^{+} 388, (M-CH_{3})^{+} 373.

h) Se disolvieron 820 mg de óxido de (3R,5R)-[2-[3,5-bis-(t-butildimetil-silaniloxi)-ciclohexiliden]-etil]-difenil-fosfina en 7,5 ml de THF absoluto y se trató a -78º con 1,0 ml de nBuLi (1,55 M, hexano). Después de 60 minutos se adicionaron 310 mg de (4a,S,8aR)-5-[(3E,5E)-(R)-(1,7-dimetil-7-trimetil-silaniloxi-octa-3,5-dienil)]-4a-metil-3,4,4a,7,8,8a-hexahidro-2H-naftalen-1-ona en 1,5 ml de THF absoluto y se mantuvo la mezcla durante 0,75 h a -78º y durante 0,5 h a 0º. Después de enfriamiento con hielo triturado / NH_{4}Cl, se extrajo el producto con éter, se lavó con agua, se secó sobre sulfato de magnesio y se separaron los disolventes i. V. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 98,5/1,5) dio 191 mg de (7E,23E,24aE)-(1R,3R)-1,3-bis-(t-butildimetil-silaniloxi)-25-trimetilsilani-loxi-17a,-24a,24b-trihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,17,23,24a-penteno. El aumento de la polaridad (95/5) dio en adición 182 mg de cetona de partida.

i) Se trataron 187 mg de (7E,23E,24aE)-(1R,3R)-1,3-bis-(t-butildimetil-silaniloxi)-25-trimetilsilaniloxi-17a,24a,
24b-tri-homo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,17,23,24a-pentano con 13 equivalentes de TBAF anhidro (1M en THF) a 45º durante 2 horas. Se virtió la mezcla reaccional sobre hielo triturado/NH_{4}Cl, se extrajo con éter, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/iPrOH = 8/2) dio 105 mg de (7E,23E,24aE)-(1R,3R)-17a,24a,24b-trihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,17,23,-24a-penten-1,3,25-triol en forma de una espuma blanca.

EM: M^{+} 440, (M-H_{2}O)^{+} 422;

RMN: (1H, delta, TMS) 0,76 (s, 3H), 1,01 (d, 3H), 1,33 (s, 6H), 1,1-2,2 (m, 20H), 2,49 (dd, 1H), 2,75 (dd, 1H), 2,85 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 4,13 (m, 1H), 5,37 (m, 1H), 5,64 (dxt, 1H), 5,71 (d, 1H), 5,88 (d, 1H), 5,97 (dd, 1H), 6,17 (dd, 1H), 6,31 (d, 1H);

IR (cm^{-1}): 2922, 2854, 1455, 1376.

Ejemplo 8 (5Z,7E,23E,24aE)-(1S,3R)-17a,24a,24b-trihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),1723,24a-hexen-1,3,25-triol

Se preparó de modo análogo al ejemplo 7, pero utilizando en la etapa h) el óxido de (Z)-(3S,5R)-[2-[3,5-bis-(t-butildimetil-silaniloxi)-2-metilen-ciclohexiliden]-etil]-difenil-fosfina.

EM: (M)^{+} 452, (M-H_{2}O)^{+} 434;

RMN: (1H, delta, TMS) 0,76 (s, 3H), 1,02 (d, 3H), 1,33 (s, 6H), 1,0-2,25 (m, 18H), 2,32 (dd, 1H), 2,62 (dd, 1H), 2,89 (br d, 1H), 4,24 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 5,02 (br s, 1H), 5,35 (br s, 1H), 5,38 (m, 1H), 5,55-5,77 (m, 2H), 5,94-6,06 (m, 2H), 6,17 (dd, 1H); 6,39 (d, 1H);

IR (cm^{-1}).

Ejemplo 9 (5Z,7E,23E,24aE)-(1S,3S)-17a,24a,24b-trihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),17,23,24a-hexen-1,3,25-triol

Se preparó de modo análogo al ejemplo 7, pero utilizando en la etapa h) (z)-(3s,5s)-[2-[3,5-BIS-(t-butildimetil-silaniloxi)-2-metilen-ciclohexiliden]-etil]-difenil-fosfina.

EM: (M+H)^{+}453, (M-H_{2}O)^{+} 434);

RMN: (1H, delta, TMS) 0,76 (s, 3H), 1,02 (d, 3H), 1,33 (s, 6H), 1,2-2,7 (m, 19 H), 2,85 (br d, 1H), 4,06 (m, 2H), 4,33 (m, 1H), 5,02 (br s, 1H), 5,31 (br, s, 1H), 5,35 (m, 1H), 5,56-5,66 (m, 1H), 5,70 (d, 1H), 5,92-6,10 (m, 2H), 6,18 (dd, 1H), 6,44 (d, 1H).

Ejemplo 10 (5Z,7e,23E,24aE)-(1S,3S)-17a,24a,24b-trihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),23,24a-penten-1,3,25-triol

Se preparó de modo análogo al ejemplo 4, pero utilizando en la etapa h) óxido de (Z)-(3S,5S)-[2-[3,5-bis-(t-butildimetil-silaniloxi)-2-metilen-ciclohexiliden]-etil]-difenil-fosfina.

EM: (M)^{+} 454, (M-HO)^{+} 437;

RMN: (1H, delta, TMS) 0,70 (s, 3H), 0,89 (d, 3H), 1,33 (s, 6H), 1,2-2,3 (m, 20H), 2,44 (dd, 1H), 2,52-2,71 (m, 2H), 2,90 (br d, 1H), 4,06 (m, 1H), 4,33 (m, 1H), 5,02 (br s, 1H), 5,31 (br s, 1H), 5,56-5,70 (m, 1H), 5,70 (d, 1H), 5,92-6,05 (m, 2H), 6,17 (dd, 1H), 6,43 (d, 1H).

Ejemplo 11 de referencia

El óxido de fosfina de fórmula III utilizado en los ejemplos 9 y 10 se obtuvo como sigue:

a) Se disolvió 14,11 g (126 mmol) de propargil-trimetilsilano en 125 ml de tolueno absoluto y se enfrió hasta -17º. Se adicionó lentamente 81,1 ml de n-BuLi (1,55 M, hexano) mientras se mantenía la temperatura por debajo de -5º. 5 minutos después se adicionó a esta solución de Li-acetiluro 126 ml de Me_{2}AlCl (1M, hexano). Luego se hizo descender la temperatura hasta -45º y se adicionaron 6,90 ml de (R)-epiclorhidrina (88 mmol), disuelto en 50 ml de tolueno. Luego se extrajo el baño refrigerado y se dejó que la mezcla reaccional alcanzara la temperatura ambiente durante 24 horas. Después de enfriamiento cuidadoso con agua enfriada por hielo y filtración se extrajo el producto con éter, se lavó con NH_{4}Cl, se secó sobre sulfato sódico y se separó el disolvente i. V. La cromatografía Flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 86/14 dio 12,01 g de (R)-1-cloro-5-trimetilsilanil-hex-4-in-2-ol en forma de aceite incoloro, 97% según GC.

EM: (M+H)^{+} 205, (M-CH_{3})^{+} 189, (M-Cl)^{+} 169.

b) Se disolvieron 13,04 g (63,7 mmol) de (R)-1-cloro-6-trimetilsilanil-hex-4-in-2-ol en 260 ml de EtOH absoluto y se hidrogenó, en presencia de 9 gotas de quinolina, sobre 1,70 g de catalizador Lindlar a temperatura ambiente y 10^{5} Pa de H2. El progreso de la reacción fue seguido mediante GC. Después de 2 horas se filtró la mezcla reaccional y se separó el disolvente. i. V. La cromatografía de flash corta (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 85/15) dio 12,97 g de (Z)-(R)-1-cloro-6-trimetilsilanilo-hex-4-en-2-ol en forma de aceite incoloro.

EM: (M)^{+} 206, (M-HOSi(CH_{3})_{3})^{+} 116.

c) Se disolvieron 12,97 g (62,7 mmol) de (Z)-(R)-1-cloro-trimetilsilanil-hex-4-en-2-ol en 215 ml de THF absoluto. Se adicionó una solución de 60,34 g (1,08 mol) de KOH en 61 g de agua y se agitó la mezcla heterogénea a 30º durante 24 horas, hasta que el análisis de GC indicó la desaparición de la clorhidrina de partida. Luego se virtió la mezcla reaccional sobre hielo triturado/NH_{4}Cl, se extrajo con éter, se secó sobre sulfato sódico, y se separaron los disolventes i. V. De este modo se aislaron 10,5 g de (Z)-(R)-trimetil-(4-oxiranil-but-2-enil)-silano, pureza del 93% según GC, que se utilizó tal cual para la etapa siguiente.

d) Se disolvieron 24,5 ml (174 mmol) de tetrahidro-2-(2-propiniloxi)-2H-pirano en 285 ml de THF absoluto y se desprotonó a -13º -6º mediante la lenta adición de 112 ml de nBuLi (1,55 M, hexano). 20 minutos después se enfrió la solución hasta -75º y se adicionaron 21,85 ml de BF \cdot EtOEt. Luego se adicionaron, dentro de 75 minutos, y mientras se mantenía la temperatura inferior a -70º, 10,51 g de (Z)-(R)-trimetil-(4-oxiranil-but-2-enil)-silano, disuelto en 96 ml de THF. La mezcla reaccional se mantuvo durante otros 50 minutos a esta temperatura y luego se virtió sobre hielo triturado/NaHCO_{3}, se extrajo con éter, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 8/2) dio 17,83 g de (Z)-(5R)-9-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-1-trimetil-silanil-non-2-en-7-in-5-ol en forma de un aceite incoloro (mezcla epimérica 1:1).

e) Se disolvieron 17,83 g (57,4 mmol) de (Z)-(5R)-9-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-1-trimetilsilanil-non-2-en-7-in-5-ol en 210 ml de tolueno absoluto. A -15º se adicionaron 30,6 ml de t-butil-hidroperóxido (3M, tolueno), seguido de 761 mg (5 mol %) de vanadio-oxiacetilacetona. Luego se elevó la temperatura dentro de 16 horas hasta 22º. La TLC indicó la desaparición de la olefina de partida. Mientras se refrigeraba en un baño de hielo se adicionaron 13,5 ml (115 mmol) de trimetilfosfito con el fin de destruir el exceso de hidroperóxido, 90 minutos mas tarde, se adicionó una solución de 39,8 g de TBAF seco en 125 ml de THF y se mantuvo la mezcla reaccional durante 90 minutos a temperatura ambiente. Luego se virtió la solución homogénea sobre hielo triturado, se extrajo con AcOEt, se lavó con agua, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 6/4) dio 10,40 g de (3S,5S)-9-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-non-1-en-7-in-3,5-diol en forma de un aceite ligeramente amarillo (mezcla epimérica 1:1).

EM (CI): (M+NH_{4})^{+} 272, (M+Na)^{+} 277.

f) Se disolvieron 10,40 g (40,9 mmol) de (3S,5S)-9-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-non-1-en-7-in-3,5-diol en 30 ml de DMF absoluto y se trató sucesivamente con 18,9 g (6,8 equivalentes) de imidazol y 35,5 ml (3,4 equivalentes) de ter-butil-cloro-difenilsilano. Después de agitación durante 20 horas a 40º, se virtió la mezcla reaccional sobre hielo triturado/EtOEt. La elaboración usual seguida de cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 96/6) dio 25,16 g de (5S,7S)-2-[5,7-bis-(ter-butil-difenil-silaniloxi)-non-8-en-2-iniloxi]-tetrahidro-pirano en forma de un aceite incoloro (mezcla epimérica 1:1).

g) Se desprotegieron 25,16 g (34,4 mmol) de (5S,7S)-2-[5,7-bis-(ter-butil-difenil-silaniloxi)-non-8-en-2-iniloxi]-tetrahidro-pirano mediante tratamiento a temperatura ambiente con 1,30 g (15% molar) de p-toluensulfonato de piridinio en 290 ml de MeOH absoluto. La solución se vuelve gradualmente homogénea. Después de 18 horas se enfrió la mezcla reaccional mediante vertido sobre hielo triturado/Na_{2}CO_{3}, se extrajo con éter, se lavó con agua, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt-82/18) dio 19,17 g de (5S,7S)-5,7-bis-(ter-butil-difenil-silaniloxi)-non-8-en-2-in-1-ol en forma de cristales amarillentos de punto de fusión 114-116º.

EM: (M-t-butilo)^{+} 589.

h) Se disolvieron 6,80 g (10,5 mmol) de (5S,7S)-5,7-bis-(ter-butil-difenil-silaniloxi)-non-S-en-2-in-1-ol en 40 ml de EtOEt absoluto y se trató a 0º con 8,0 ml de Red-Al (3,5 M, tolueno). Después de 90 minutos a temperatura ambiente la TLC indicó que quedaba todavía algo de acetileno de partida. Se adicionaron 2 ml mas de Red-Al (3,5 M, tolueno) y se dejó reaccionar durante 2 horas mas. Mientras se enfriaba con un baño de hielo se inyectaron 1,13 ml de AcOEt con el fin de destruir el reactivo en exceso. El matraz de reacción se enfrió luego hasta -75º y se trató con una solución de 8,95 g (35 mmol) de I_{2} en 45 ml de THF. Después de 15 minutos se separó el baño refrigerante y se enfrió la mezcla reaccional cuando la temperatura interna había alcanzado -25º, virtiéndole hielo triturado/pirosulfito sódico. La extracción con éter, lavado con agua, secado sobre sulfato sódico y evaporación de los disolventes dejaron un producto crudo, que se purificó mediante cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt = 83/17), lo que dio 3,99 g de (Z)-(5R,7S)-5,7-bis-(ter-butil-difenil-silaniloxi)-3-yodo-nona-2,8-dien-1-ol en forma de una goma incolora.

EM (CI): (M+NH_{4})^{+} 792.

i) Se disolvieron 3,99 g (5,15 mmol) de (Z)-(5R,7S)-5,7-bis-(ter-butil-difenil-silaniloxi)-3-yodo-nona-2,8-dien-1-ol en 34 ml de CH_{3}CN absoluto y se trató bajo exclusión cuidadosa se oxígeno con 7,2 ml (10 equivalentes) de NEt_{3} y 595 mg (515 \mumol) de (Ph_{3}P)_{4}Pd. La mezcla se mantuvo a 60º durante 5 horas y luego se virtió sobre hielo triturado/NH_{4}Cl, se extrajo con éter, se lavó con NH_{4}Cl, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2},hexano/AcOEt = 83/17) dio 2,95 g de (Z)-(3S,5S)-2-[3,5-bis-(ter-butil-difenil-silaniloxi)-2-metilen-ciclohexiliden]-etanol en forma rojiza. MS: (M-H_{2}O)^{+} 628, (M-HOCH_{2})^{+} 615, (M-t-butilo)^{+} 589.

j) Se trató a -10º 1,31 g (9,81 mmol) de N-cloro-succinimida en 34 ml de CH_{2}Cl_{2} absoluto con 749 \mul (10,2 mmol) de sulfuro de dimetilo. 15 minutos después se adicionó lentamente a la suspensión blanca resultante y a la misma temperatura 2,95 g (4,559 mmol) de (Z)-(3S,5S)-2-[3,5-bis-(ter-butil-difenil-silaniloxi)-2-metilen-iclohexiliden]-etanol, disuelto en 10 ml de CH_{2}Cl_{2} y luego se agitó durante 30 minutos mas a temperatura ambiente. La mezcla reaccional se virtió luego sobre hielo triturado, se extrajo con éter, se lavó con agua, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/AcOEt-97,5/2,5) dio 2,76 g de (Z)-(3S,5S)-1-(2-cloro-etiliden)-3,5-bis-(ter-butil-difenilsilaniloxi)-2-me-tilen-ciclohexano en forma de espuma amarillenta.

k) Se desprotonó a -10º 847 \mul (10,2 mmol) de difenilfosfina en 16 ml de THF absoluto con 3,05 ml de nBuLi (1,5M, hexano). Luego se enfrió la solución hasta -75º y se adicionó a gotas 2,76 g (4,15 mmol) de (Z)-(3S,5S)-1-(2-cloro-etiliden)-3,5-bis-(ter-butil-difenil-silaniloxi)-2-metilen-ciclohexano, disuelto en 16 ml de THF absoluto. 10 minutos después se inyectaron 190 \mul de agua y se dejó que la mezcla reaccional alcanzara la temperatura ambiente. Luego se separaron todos los disolventes i. V., se recogió el residuo en 33 ml de CH_{2}Cl_{2} y se trató con 81 ml de H_{2}O_{2} al 5%. Después de agitación durante 75 minutos se separaron las fases, se extrajo la fase acuosa con AcOEt, se lavaron las fases orgánicas con pirosulfito sódico, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó hasta sequedad. La cromatografía flash (SiO_{2}, hexano/-AcOEt = 45/55) dio 2,534 g de óxido de (Z)-(3S,5S)-[2-[3,5-bis-(ter-butil-difenil-silaniloxi)-2-metilen-ciclohexiliden]-etil]-difenil-fosfina en forma de espuma incolora.

EM: (M)^{+} 830, (M-t-butilo)^{+} 773

RMN: (1H, delta, TMS) 0,94 (s, 9H), 1,04 (s, 9H), 1,96 (m, 1H), 2,11 (m, 1H), 2,89-3,05 (m, 2H), 3,11 (m,
1H), 3,36 (m, 1H), 4,73 (br s, 1H), 5,15 (q, 1H), 5,42 br s, 1H), 7,06 (dxt, 2H)), 7,23-7,62 (m, 3= H).

Ejemplo 12 de referencia

Los alcohol-éteres de fórmula X utilizados como materiales de partida en los ejemplos 4a) y 7a) anteriores se obtuvieron como se ha descrito en los ejemplos 1 a 14 de la patente europea 0 771 789, o sea, a partir de (4aS,5S)-5-ter-butoxi-4a-metil-4,4a,5,6,7,8-hexahidro-2(3H)-naftalenona, vía:

a) (2S,4aS,5S)-5-ter-butoxi-4a-metil-21,3,4,4a,5,6,7,8-octahidro-naftalen-2-ol,

b) (2S,4aS,5S)-O-(5-ter-butoxi-4a-metil, 2,3,4,4a,5,6,7,8-octahidro-naftalen-2-il)éster del ácido imidazol-1-carbotioico,

c) (4S,4aS)-4-ter-butoxi-4a-metil-1,2,3,4,4a,5,6,7-octahidro-naftaleno,

d) (1S,4aS,5S,8aS)-y (1R,4aS,5S,8aR)-5-ter-butoxi-4a-metil-decahidro-naftalen-1-ol,

e) (4aS,5S,8aR)-5-ter-butoxi-4a-metil-octahidro-naftalen-1-ona,

f) (1S,4aS,5S,8aR)-5-ter-butoxi-4a-metil-decahidro-naftalen-1-ol,

g) éster (1S,4aS,5S,8aR)-5-ter-butoxi-4a-metil-decahidro-naftalen-1-ílico del ácido acético,

h) éster (1S,4aS,5S,8aR)-5-hidroxi-4a-metil-decahidro-naftalen-1-ílico del ácido acético,

i) éster (1S,4aS,8aR)-4a-metil-5-oxo-decahidronaftalen-1-ílico del ácido acético,

j) (4aR,5S,8aS)-5-hidroxi-8a-metil-octahidro-naftalen-1-ona,

k) (4aR,5S,8aS)-5-(ter-butil-dimetil-silaniloxi)-8a-metil-octahidro-naftalen-1-ona,

l) (1S,4aS,8aR)-ter-butil-(5-etiliden-4a-metil-decahidro-naftalen-1-iloxi)-dimetil-silano,

m) (S)-2-[(4aR,5S,8aS)-5-(ter-butil-dimetil-silaniloxi)-8a-metil-3,4,4a,5,6,7,8,8a-octahidro-naftalen-1-il]-pro-
pan-1-ol, y

n) (S)-2-[(1R,4aR,5S,8aR)-5-(ter-butil-dimetil-silaniloxi)-8a-metil-decahidro-naftalen-1-il]-propan-1-ol.

Ejemplo 13

La reacción de Wittig-Horner del aldehido de fórmula IX, (R)-3-[(1R,3aR,4S,7aR)-4-(ter-butil-dimetilsilaniloxi)-7a-metil-octahidro-inden-1-il]-butan-1-al, con 3-dietilfosfito-1-trimetilsilanil-prop-1-ina da el compuesto de fórmula XIV, (1R,3aR,4S,7aR)-4-(ter-butil-dimetilsilaniloxi)-1-[(R)-1-metil-6-trimetilsilanil-hexa-3-en-5-inil]-7a-metil-octahidro-indeno en una mezcla E/Z 2:1 con rendimiento del 83%. Después de eliminación de los grupos sililo (HF acuoso en THF/acetonitrilo), se oxidó el alcohol secundario resultante con PDC en DMF para dar la cetona de fórmula XIII, (1R,3aR,7aR)-1-[(R)-1-metil-hexa-3-en-5-inil]-7a-metil-octahidro-inden-4-ona en una mezcla E/Z 1:1 con rendimiento del 45%.

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El acoplamiento de Wittig-Horner de esta cetona con el anillo A, óxido de (3R,5R)-[2-[3,5-bis-(ter-butil-dimetilsilaniloxi)-ciclohexiliden]-etil]-difenil-fosfina, da el intermedio de fórmula XII, (7E)-(1R,3R)-1,3-bis-(ter-butil-dimetilsilaniloxi)-19,27-dinor-9,10-seco-colesta-5,7,23-trien-25-ina en una mezcla 23 E/Z 1:1 con rendimiento del 86%.

Después de desprotonación de este intermedio y adición de una cetona de fórmula O-C(R^{2},R^{3}), por ejemplo acetona, hexafluoro-acetona, ciclopentanona; o 3-pentanona, y separación de los grupos sililo (TBAF en THF), se obtienen los derivados de enina siguientes:

a) mezcla 1:1 de (7E,23E)- y (7E,23Z)-(1R,3R)-24a,24b-dihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23-trien-24a-ino-1,3,25-triol,

b) mezcla 1:1 de (7E,23E)- y (7E,23Z)-(1R,3R)-24a,24b,26a-265b-tetrahomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23-trien-24a,ino-1,3,25-triol,

c) mezcla 1:1 de (7E,23E)- y (7E,23Z)-(1R,3R)-25-(1-hidroxi-ciclopentil)-24a,24b-dihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23-trien-24a-ino-1,3,5-diol,

d) mezcla 2:1 de (7E,23E)- y (7E,23Z)-(1R,3R)-26,26,26,27,27,27,27-hexafluoro-24a,24b-dihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23-trien-24a-ino-1,3,25-triol.

Estos derivados eno-ino pueden transformarse en los derivados dieno correspondientes mediante tratamiento con LiALH4 en presencia de MeONa:

e) mezcla 1:1 de (7E,23E24aE)- y (7E,23Z,24aE)-(1R,3R)-24a,24b,26a,26b-tetrahomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23,24a-tetraen-24a-ino-1,3,25-triol,

f) mezcla 1:1 de (7E,23E,24aE)- y (7E,23Z,24aE)-(1R,3R)-25-(1-hidroxi-ciclopentil)-24a,24b-dihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23,24a-tetraen-24a-ino-1,3,25-diol,

g) mezcla 2:1 de (7E,23E,24aE)- y (7E,23Z,24aE)-(1R,3R)-26,26,26,27,27,27-hexafluoro-24a,24b-dihomo-19-nor-9,10-seco-colesta-5,7,23,24a-tetraen-24a-ino-1,3,25-triol.

Las propiedades farmacéuticas de los compuestos de fórmula I pueden determinarse de conformidad con los procedimientos siguientes:

Ensayo in vitro para inhibición de IL-12

Se obtuvieron células THP-1 de American_Tissue Culture Colection y se cultivaron en medio completo. Con fines de ensayo para producción de IL-12, se estimularon células THP-1, 1,25 x 10^{6} células/ml, con cepas S. aureus Cowan (SAC) e interferón-\gamma recombinante humano (huIFN-\gamma), (1000 U/ml). Alternativamente sangre completa periférica humana diluida 1:6 (cultivo de 1 ml en placas de 48 pocillos) se cebó con hulIFN-\gamma (1000 U/ml), durante 16 horas a 37ºC, y luego se estimuló con SAC. Se recogieron los sobrenandantes del cultivo después de 48 horas, y se congeló a -290ºC hasta que se ensayó.

Se midió la producción de IL-12 mediante Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay específico (ELISA), utilizando anticuerpo 20C2 (heterodímero p40-p35 de IL-12 anti humano de rata), a 2,5 \mug/ml en tampón de recubrimiento, y anticuerpo 4D6 de peroxidasa-conjugado (IL-12 anti humano de rata) a 250 ng/ml en tampón de ensayo (como se describe en Zhang, M., M.K. Gately, E. Wang, J. Gong, S.F. Wolf, S. Lu, R.L. Modlin, y P.F. Barnes, 1994, Interleukin 12 en el sitio de enfermedad en tuberculosis, J. Clin. Invest. 93:1733-1739). Se adicionó a pocillos duplicados estandard (IL-12 humano recombinante, 800 pg/ml a 6 pg/ml) y muestras conteniendo sobrenandantes de cultivo (100 \mul), diluido en tampón de ensayo. Se leyó la absorbencia a 450-650 nm. las concentraciones de IL-12 desconocidas de las muestras se leyeron a partir de la curva estandard correspondiente y se multiplicaron por el factor de dilución correspondiente. La producción de IL-12 máxima varia entre 200 y 400 pg/ml.

Se diluyeron análogos de vitamina liofilizada D_{3} diluidos en EtOH en la oscuridad y en frío a una concentración de 2 mM. Se prepararon diluciones en serie (1 \muM - 1 pM) en EtOH. Se adicionó 10 \mul de cada dilución a 1 ml de cultivo. Los valores de CI_{50} para la inhibición de producción de IL-12 mediante análogos de vitamina D_{3} se exponen en la tabla siguiente:

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Ejemplo	CI_{50} (nM)

1	10
3	30
4	1
8	1
13a	10
13c	10
13d	10
13e	1
13f	10
Calcitriol	60

A partir de los resultados anteriores puede verse que los compuestos de fórmula I inhiben de modo eficiente la producción in vitro de IL-12.

Los compuestos de fórmula I como se ha descrito antes pueden administrarse oralmente, para el tratamiento de enfermedades de la piel hiperproliferativas tales como psoriasis, carcinomas celulares basales, trastornos de queratinización y queratosis, o para el tratamiento de enfermedades neoplásticas tal como leucemia, o para el tratamiento de enfermedades que requieren modulación del sistema inmune, tal como esclerosis múltiple, rechazo de transplantes, injerto frente a enfermedad huésped, o para el tratamiento de osteoporosis e hiperparatiroidismo, a animales de sangre caliente que precisan un tratamiento de esta índole. Mas concretamente, los compuestos de fórmula I como se ha descrito antes, pueden administrarse oralmente a un humano adulto en dosis que están en la gama de alrededor de 0,5 a 1000 \mug por día para el tratamiento de las enfermedades anteriores.

Los compuestos de fórmula I pueden administrarse oralmente para la prevención y tratamiento de enfermedades autoinmunes IL-12 dependientes, esclerosis múltiple, enfermedad de intestinos inflamatoria, shock séptico y encefalomielitis alérgica, a animales de sangre caliente que precisen un tratamiento de esta índole; puede administrarse oralmente a humanos adultos en dosis en la gama de 0,5 a 1000 \mug por día.

Los compuestos de fórmula I como se ha descrito antes pueden administrarse tópicamente, para el tratamiento de enfermedades de la piel hiperproliferativas tal como psoriasis, a animales de sangre caliente que precisen un tratamiento de esta índole. Mas concretamente, los compuestos de fórmula I, como se ha descrito antes, pueden administrarse tópicamente en dosis que están en la gama de alrededor de 0,5 a 1000 \mug por gramo de formulación tópica por día, para el tratamiento de las enfermedades antes indicadas.

La dosis de los compuestos de fórmula I puede variar dentro de amplios límites, dependiende de la enfermedad que ha de tratarse, la edad y el estado individual del paciente y de la forma de administración y, evidentemente, se ajustará a las exigencias individuales en cada caso particular.

Las formas de dosificación oral que comprenden los compuestos de fórmula I del invento pueden incorporarse en cápsulas, comprimidos y similares con materiales de vehículo aceptables. Ejemplos ilustratrivos de estos materiales de vehículo que pueden incorporarse en cápsulas y similares son los siguientes: un emulgente tal como polietilenglicol; un solubilizante tal como triglicérido de cadena corta, por ejemplo Migliol; un ligante tal como goma de tragacanto, acacia, almidón de maíz, o gelatina; un excipiente tal como fosfato dicálcico; un agente desintegrante tal como almidón de maíz, almidón de patata, ácido algénico y similares; un lubricante tal como estearato de magnesio, un agente edulcorante tal como sucrosa, lactosa, o sacarina; un agente saborizante tal como menta, esencia de pirola o cereza. Pueden estar presentes varios otros materiales como revestimiento o modificar de otro modo la forma física de la unidad de dosificación. Por ejemplo pueden revestirse comprimidos con laca, azúcar, o ambos. Un jarabe o elixir puede contener el compuesto activo, sucrosa como un agente edulcorante, metil y propil parabens como conservantes, un colorante, y un saborizante tal como sabor a cereza o naranja.

Formas de dosificación tópicas que comprenden los compuestos de fórmula I del invento incluyen: ungüentos y cremas que abarcan formulaciones que tienen bases de tipo oleaginoso absorbables, acuosolubles y emulsión, tal como petrolato, lanolina, polietilenglicoles y similares. Lociones son preparados líquidos y varian desde soluciones simples a preparados acuosos o hidroalcohólicos conteniendo sustancias finamente divididas. Las lociones pueden contener agentes de suspensión o dispersión, por ejemplo, derivados de celulosa tal como etil celulosa, metil celulosa, y similares; gelatina o gomas, que incorporan el ingrediente activo en un vehículo constituido por agua, alcohol, glicerina y similares. Los geles son preparados semi-sólidos obtenidos mediante gelificación o solución o suspensión del ingrediente activo en un vehículo portador. Los vehículos que pueden ser hidros o anhidros, se gelifican utilizando un agente gelificante, tal como, carboxi polimetileno, y neutralizarse para obtener una consistencia de gel apropiada con el empleo de álcalis, tal como, hidróxido sódico y aminas, tal como, polietilencocoamina.

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Como aquí se utiliza el término "tópico" denota el uso del ingrediente activo, incorporado en un vehículo farmacéutico apropiado, y aplicarse en el sitio del trastorno para ejercer la acción local. Así pues, la composición tópica incluye aquellas formas farmacéuticas en donde el compuesto se aplica externamente mediante contacto directo con la piel. Las formas de dosificación tópicas comprenden geles, cremas, lociones, ungüentos, polvos, aerosoles y otras formas convencionales para aplicar medicación a la piel obtenidas mezclando los compuestos de fórmula I con materiales de vehículo tópicos farmacéuticos conocidos.

Las composiciones farmacéuticas que siguen pueden prepararse en forma de por sí conocida:

Ejemplo A

Cápsula de gelatina blanda	mg/cápsula
Compuesto I	0,0001-1
Hidroxitolueno butilado (BHT)	0,016
Hidroxianisol butilado (BHA)	0,016
Aceite de coco fraccionado (Neobee M-5)
o Miglyol 812 c.s.	160,0

Ejemplo B

Cápsula de gelatina blanda	mg/cápsula
Compuesto I	0,0001-1
alfa-tocoferol	0,016
Miglyol 812	160,0

Ejemplo C

Crema tópica	mg/g
Compuesto I	0,005-1
Alcohol cetílico	1,5
Alcohol estearílico	2,5
Span 60 (monoestearato de sorbitan)	2,0
Arlacel 165 (mezcla de gliceril monoestearato
y polioxietilen glicol estearato)
Tweeen 60 (polisorbato 60)	1,0
Aceite mineral	4,0
Propilenglicol	5,0
Propilparaben	0,05
BHA	0,05
Solución de sorbitol	2,0
Edetatodisódico	0,01
Metilparaben	0,18
Agua destilada	c.s.

Claims

1. Derivados de 24a,24b-dihomo-9,10-secocolestenano poli-insaturados de fórmula I:

21

en donde

A es un enlace simple o doble,

B^{1} es CH = CH,

B^{2} es CH = CH o C = C,

T es CH_{2} o CH_{2}CH_{2},

X es -CH_{2} o > C = CH_{2},

R^{1} es H, F u OH,

R^{2} y R^{3} son cada uno, independientemente, alquilo de C_{1}-C_{4} o CF_{3}, o C(R^{2},R^{3}) es cicloalquilo de C_{3}-C_{6} con la condición de que la configuración en el C-átomo 20 no es S cuando A es un enlace simple, B^{1} es CH = CH, B^{2} es CH = CH o C = C, T es CH_{2}, X es C = CH_{2}, R^{1} es OH, R^{2} y R^{3} son cada uno, independientemente, alquilo de C_{1-4} o C(R^{2},R^{3}) son cicloalquilo de C_{3}-C_{6}.

2. Los compuestos de la reivindicación 1, en donde R^{1} es H u OH.

3. Los compuestos de la reivindicación 2, en donde la cadena lateral es:

22

4. El compuesto de la reivindicación 1 ó 2, o sea

(5Z,7E,23E,24aE)-(1R,3S)-24a,24b-dihomo-9,10-seco-colesta-5,7,10(19),23,24a-penten-1,3,25-triol.

5. Los compuestos de la reivindicación 1 ó 2 del grupo siguiente:

6. Los compuestos de la reivindicación 1, en donde B^{1} es -CH = CH- y B^{2} es C = C-.

7. Los compuestos de la reivindicación 6, en donde la cadena lateral es:

23

y R^{2} y R^{3} son como se ha definido en la reivindicación 1.

8. Los compuestos de conformidad con la reivindicación 1, del grupo

9. Los compuestos de la reivindicación 1, en donde B^{1} es -CH-CH-, B^{2} es C \equiv C- y C(R^{2}, R^{3}) es cicloalquilo de C_{3-6}.

10. los compuestos de la reivindicación 9

11. Los compuestos de las fórmulas II, IV y V:

24

25

26

en donde R^{11} es H, F u OL, R^{4} es H o L', L y L' son grupos sililo protectores y A, B^{1}, B^{2}, T, R, R^{2} y R^{3} son como se ha definido en la reivindicación 1, con la condición de que en el compuesto II la configuración en el C-átomo 20 no es S cuando A es un enlace simple, B^{1} es CH = CH,B^{2} es CH = CH o C \equiv C, T es CH_{2}, X es C = CH_{2}, y R^{11} es OL.

12. Composición farmacéutica para el tratamiento o prevención de trastornos dependientes de vitamina D y de enfermedades autoinmunes IL-12-dependientes que comprende un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-10 como ingrediente activo.

13. Composición farmacéutica, de conformidad con la reivindicación 12, para el tratamiento o prevención de psoriasis, carcinomas celulares basales, trastornos de quera-tinización y queratosis, leucemia, osteoporosis, hiperpara-tiroidismo acompañado de fallo renal, esclerosis múltiple, rechazo de transplantes, injerto frente a trastorno huésped, artritis reumatoide, diabetes mellitus insulina-dependiente, enfermedad de intestinos inflamatoria, shock séptico y encefalomielitis alérgica.

14. Procedimiento para la preparación de los compuestos de fórmula I, de conformidad con la reivindicación 1, que comprende disociar cualquier grupo sililo-protector L y L' contenido en un compuesto de fórmula II:

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en donde R^{11} es H, F u O-L, R^{4} es H o L', y A, B^{1}, B^{2}, T, R, R^{2} y R^{3} son como se ha definido en la reivindicación 1.

15. Los compuestos, de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para uso en el tratamiento o prevención de trastornos dependientes de vitamina D y de enfermedades autoinmunes IL-12-dependientes.

16. Los compuestos de la reivindicación 15, para el tratamiento o prevención de psoriasis, carcinomas celulares basales, trastornos de queratinización y queratosis, leucemia, osteoporosis, hiperparatiroidismo acompañado de fallo renal, esclerosis múltiple, rechazo de transplantes, injerto frente a trastorno huésped, artritis reumatoide, diabetes mellitus insulina-dependiente, enfermedad de intestinos inflamatoria, shock séptico y encefalomielitis alérgica.

17. El empleo de los compuestos de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para la preparación de composiciones farmacéuticas para el tratamiento o prevención de trastornos dependientes de vitamina D y de enfermedades autoinmunes IL-12- dependientes.

18. El empleo, de conformidad con la reivindicación 17, para la preparación de composiciones farmacéuticas para el tratamiento o prevención de psoriasis, carcinomas celulares basales, trastornos de queratinización y queratosis, leucemia, osteoporosis, hiperparatiroidismo acompañado de fallo renal, esclerosis múltiple, rechazo de transplantes, injerto frente a trastorno huésped, artritis reumatoide, diabetes mellitus insulina-dependiente, enfermedad de intestinos inflamatoria, shock séptico y encefalomielitis alérgica.