EP1148879A2 - Verwendung von pyrazol-carbonsäureamiden - Google Patents

Verwendung von pyrazol-carbonsäureamiden

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Publication number
EP1148879A2
EP1148879A2 EP00909096A EP00909096A EP1148879A2 EP 1148879 A2 EP1148879 A2 EP 1148879A2 EP 00909096 A EP00909096 A EP 00909096A EP 00909096 A EP00909096 A EP 00909096A EP 1148879 A2 EP1148879 A2 EP 1148879A2
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
general formula
anemia
compounds
treatment
optionally
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
EP00909096A
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Jürgen Stoltefuss
Gabriele Bräunlich
Berthold Hinzen
Thomas Krämer
Josef Pernerstorfer
Thomas STÜDEMANN
Ulrich Nielsch
Martin Bechem
Emanuel Lohrmann
Christoph Gerdes
Michael Sperzel
Klemens Lustig
Lorenz Mayr
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bayer AG
Original Assignee
Bayer AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bayer AG filed Critical Bayer AG
Publication of EP1148879A2 publication Critical patent/EP1148879A2/de
Withdrawn legal-status Critical Current

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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/12—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond

Definitions

  • the present invention relates to the use of pyrazolecarboxamides for the production of medicaments for the prophylaxis and / or treatment of anemias, new pyrazolecarboxamides and processes for their preparation.
  • EPO Erythropoietin
  • the EPO levels in the blood are usually low, but if the O 2 content in the blood drops, there is an increase in EPO synthesis and therefore an increase in EPO levels in the blood. As a result, the hematopoiesis is stimulated and the hematocrit increases. This leads to an increase in the O 2 transport capacity in the blood. If the number of erythrocytes is sufficient to transport enough O 2 , the EPO blood concentration drops again.
  • a lack of oxygen supply can have a number of causes, such as excessive blood loss, long stays at high altitudes, but also kidney failure or bone marrow suppression.
  • Rh EPO recombinant human (rh) EPO stimulates erythropoiesis and has therefore been used in the treatment of severe anemias. Rh EPO is also used to increase the body's own blood cells in order to reduce the need for foreign blood transfusions.
  • rh EPO is not available orally and must therefore i.p., i.v. or subcutaneously, which limits its use to the treatment of severe anemia.
  • Substituted pyrazoles are known from publication WO 97/19039.
  • the pyrazole derivatives are synthesized on the solid phase. After cleavage, pyrazole phenyl carboxamides are obtained. The use as a medicine is not described.
  • the present invention now relates to the use of pyrazolecarboxamides of the general formula (I),
  • A, D, E and G are the same or different and stand for hydrogen, halogen, trifluoromethyl, hydroxy or for (C, -C 6 ) -alkyl or for (C, -C 6 ) -alkoxy,
  • R 1 represents hydrogen or (C, -C 6 ) alkyl
  • R 2 represents (C 6 -C ) 0 ) aryl or a 5- to 6-membered aromatic, optionally benzo-fused heterocycle with up to 3 heteroatoms from the series S, N and / or O, the aromatic ring systems listed above optionally up to 3 times the same or different due to halogen, tri- fluoromethyl, trifluoromethoxy, (C, -C 6 ) alkyl, (C, -C 6 ) alkoxy or (C, -C 6 ) alkoxycarbonyl may be substituted,
  • medicinal products which are suitable for the prophylaxis and / or treatment of diseases, for example anemia.
  • the compounds can exist in stereoisomeric forms which either behave like image and mirror image (enantiomers) or do not behave like image and mirror image (diastereomers).
  • the invention relates to both the enantiomers or diastereomers or their respective mixtures.
  • the racemic forms can be separated into the stereoisomerically uniform constituents in a known manner.
  • Physiologically acceptable salts of the compounds can be salts of the substances according to the invention with mineral acids, carboxylic acids or sulfonic acids. Particularly preferred are, for example, salts with hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, phosphoric acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, toluenesulfonic acid, benzenesulfonic acid, naphthalenedisulfonic acid, acetic acid, propionic acid, lactic acid, tartaric acid, citric acid, fumaric acid, maleic acid or benzoic acid.
  • Salts which can be mentioned are salts with customary bases, such as, for example, alkali metal salts (for example sodium or potassium salts), alkaline earth metal salts (for example calcium or magnesium salts) or ammonium salts derived from ammonia or organic amines such as, for example, diethylamine, triethylamine, ethyldiisopropylamine, procaine, dibenzylamine, N-methylmorpholine, dihydroabietylamine, 1-ephenamine or methylpiperidine.
  • alkali metal salts for example sodium or potassium salts
  • alkaline earth metal salts for example calcium or magnesium salts
  • ammonium salts derived from ammonia or organic amines such as, for example, diethylamine, triethylamine, ethyldiisopropylamine, procaine, dibenzylamine, N-methylmorpholine, dihydroabietylamine, 1-ephenamine or methylpipe
  • (C 6 -C 10 ) aryl generally represents an aromatic radical having 6 to 10 carbon atoms.
  • Preferred aryl radicals are phenyl and naphthyl.
  • (C, -C 6 ) alkyl represents a straight-chain or branched alkyl radical having 1 to 6 carbon atoms.
  • a straight-chain or branched alkyl radical having 1 to 4 carbon atoms is preferred. Examples include: methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, tert-butyl, n-pentyl and n-hexyl.
  • a straight-chain or branched alkyl radical having 1 to 3 carbon atoms is particularly preferred.
  • (C r C 6 ) alkoxy represents a straight-chain or branched alkoxy radical having 1 to 6 carbon atoms.
  • a straight-chain or branched alkoxy radical having 1 to 4 carbon atoms is preferred. Examples include: methoxy, ethoxy, n-propoxy, isopropoxy, tert-butoxy, n-pentoxy and n-hexoxy.
  • a straight-chain or branched alkoxy radical having 1 to 3 carbon atoms is particularly preferred.
  • (C i -C fi ) - Alkoxycarbonyl stands for a straight-chain or branched alkoxycarbonyl radical with 1 to 6 carbon atoms.
  • a straight-chain or branched alkoxycarbonyl radical having 1 to 4 carbon atoms is preferred. Examples include: methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, n-propoxycarbonyl, isopropoxycarbonyl and tert-butoxycarbonyl.
  • a straight-chain or branched alkoxycarbonyl radical having 1 to 3 carbon atoms is particularly preferred.
  • Row S, O and / or N stands for example for pyridyl, pyrimidyl, pyridazinyl, Thienyl, furyl, pyrrolyl, thiazolyl, oxazolyl or imidazolyl. Pyridyl, pyrimidyl, pyridazinyl, furyl and thienyl are preferred.
  • a 5- to 6-membered aromatic benzocondensed heterocycle with up to 3 heteroatoms from the series S, O and / or N represents, for example, benzothiophene
  • Indole, quinoline or benzofuran, benzothiophene and quinoline are preferred.
  • A, D, E and G are the same or different and represent hydrogen, fluorine, chlorine, bromine or trifluoromethyl,
  • R 1 represents hydrogen or methyl
  • R 2 represents phenyl, furyl, thienyl, benzothiophene or pyridyl, the aromatic ring systems listed above optionally being up to 2 times identical or different by fluorine, chlorine, bromine, trifluoromethyl, trifluoromethoxy,
  • (C, -C 4 ) alkyl or (C, -C 4 ) alkoxy or (C, -C 4 ) alkoxycarbonyl may be substituted
  • A, D, E and G stand for hydrogen and
  • R 1 represents hydrogen or methyl
  • R 2 represents phenyl, benzothiophene or pyridyl, where the aromatic ring systems listed above may optionally be substituted by fluorine, chlorine, bromine, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, methyl or methoxy
  • the invention also relates to new substances of the general formula (Ia) in which
  • a ', D', E ', G' and R 1 have the meaning of A, D, E, G and R 1 given above,
  • R 3 represents a (C, -C 4 ) alkyl radical
  • R 1 has the meaning given above, reacted, the compounds then split off from the resin and optionally (ie for R 1 ⁇ H) separated into the isomers,
  • carboxylic acid derivative e.g. carboxylic acid halide, anhydride or imidazolide
  • Inert organic solvents which do not change under the reaction conditions are suitable as solvents for the processes described above.
  • halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, trichloromethane,
  • Tetrachloromethane 1, 2-dichloroethane, trichloroethane, tetrachloroethane, 1,2-dichloro- ethylene or trichlorethylene, hydrocarbon such as benzene, xylene, toluene, hexane or cyclohexane, dimethylformamide, dimethylacetamide, acetonitrile or DMSO as well as ethers such as diethyl ether, dioxane or tetrahydrofuran. It is also possible to use mixtures of the solvents. Dimethylformamide and dichloromethane are particularly preferred.
  • the reactions described above generally take place in a temperature range from -78 ° C. to the reflux temperature, preferably from 0 ° C. to the boiling point of the solvent used.
  • the reactions described above can be carried out at normal, elevated or reduced pressure (e.g. from 0.5 to 5 bar). Generally one works at normal pressure.
  • Suitable dehydrating reagents for process [B] are carbodiimides such as, for example, diisopropylcarbodiimide, dicyclohexylcarbodiimide or N- (3-dimethylaminopropyl) -N'-ethylcarbodiimide hydrochloride or carbonyl compounds such as carbonyldiimidazole or 1, 2-oxazolyl compounds such as 2-ethazolium compounds such as 2-ethazolium compounds 5-phenyl-l, 2-oxazolium-3-sulfonate or propanephosphoric anhydride or isobutylchloroformate or benzotriazolyloxy-tris- (dimethylamino) phosphonium hexyfluorophosphate or phosphonic acid diphenyl ester amide or methanesulfonyl chloride, optionally in the presence of base or methylamine aminoline triethene such as triethylamine or ethy
  • amino-functionalized polystyrenes are used as the solid phase.
  • Amino-functionalized polystyrene-polyethylene copolymers which are modified with a polyethylene glycol chain are preferred.
  • So-called SAM resins (abbreviation for standard amide resin) and RAM resins (abbreviation for Rink amide resin) are particularly preferred. Examples of amino functional, usable according to the invention ,
  • Resized resins are Tentagel SAM (S 30022) and Tentagel R RAM (R 28 023), both from Rapp Polymer GmbH.
  • the compounds of formula (V) are new and can be prepared, for example, by
  • R 3 represents a (C, -C 4 ) alkyl radical
  • R 1 has the meaning given above, reacted in inert solvents and the esters of the general formula (VIII) obtained
  • R 1 is H
  • N-alkylation isomeric mixtures with R 1 ⁇ H are prepared, which are separated by suitable separation methods in compounds of the formula (V) with R 1 for (C, -C 6 ) -alkyl which are then saponified,
  • R 2 has the meaning given above
  • R 4 represents a (C, -C 4 ) alkyl chain
  • R 2 and R 4 have the meaning given above
  • Inert organic solvents which do not change under the reaction conditions are suitable as solvents for processes [C] and [D]. These include halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, trichloromethane, carbon tetrachloride, 1, 2-dichloroethane, trichloroethane, tetrachloroethane, 1, 2-dichloroethylene or trichlorethylene, hydrocarbons such as benzene, xylene, toluene, hexane or cyclohexane, dimethylformamide, acetylene methanol, tetrahydrofuran, tetrahydrofuran Ethanol, 2-propanol or DMSO. It is also possible to use mixtures of the solvents. Ethanol and DMSO are particularly preferred.
  • the usual acidic and basic catalysts preferably acid (e.g. para-toluenesulfonic acid chloride), are suitable as catalysts.
  • the reactions described above generally take place in a temperature range from -78 ° C. to the reflux temperature, preferably from 0 ° C. to the boiling point of the solvent used.
  • the reactions described above can be carried out at normal, elevated or reduced pressure (e.g. from 0.5 to 5 bar). Generally one works at normal pressure.
  • the saponification of the carboxylic acid esters is carried out by customary methods by treating the esters in inert solvents with customary bases or acids, the salts initially formed in the case of basic saponification being treated with
  • Acid can be converted into the free carboxylic acids.
  • the usual inorganic bases are suitable as bases for the saponification. These preferably include alkali metal hydroxides or alkaline earth metal hydroxides such as sodium hydroxide, lithium hydroxide, potassium hydroxide or barium hydroxide, or Alkali carbonates such as sodium or potassium carbonate or sodium hydrogen carbonate. Sodium hydroxide or lithium hydroxide are particularly preferably used.
  • Suitable solvents for the saponification are water or the organic solvents customary for saponification. These preferably include alcohols such as methanol,
  • Alcohols such as methanol, ethanol, propanol or isopropanol are particularly preferably used. It is also possible to use mixtures of the solvents mentioned. Water / tetrahydrofuran or water / ethanol is preferred.
  • the saponification is generally carried out in a temperature range from 0 ° C. to + 100 ° C., preferably from 0 ° C. to + 80 ° C.
  • the saponification is generally carried out at normal pressure. But it is also possible to work under negative pressure or overpressure (e.g. from 0.5 to 5 bar).
  • the base or the acid is generally used in an amount of 1 to 3 mol, preferably 1 to 2.5 mol, based on 1 mol of the ester.
  • Molar amounts of the reactants are particularly preferably used.
  • the compounds of the general formulas (VI) and (XI) are known per se or can be prepared by customary methods [cf. Erne, D. et al., Helv. Chim. Acta 62: 994-1006 (1979); Hasegawa, E. et al. J. Org. Chem. 56 (1991), 1631-1635; Watanabe, Kenichi et al., Bull. Chem. Soc. Jpn. 55 (1988) 3208-3211].
  • the compounds of the general formula (VII), (VIII), (IX), (X) and (XII) are partly new or known and can be prepared as described above.
  • the compounds of the general formula (I) used according to the invention and the new substances of the general formula (Ia) have an unforeseeable, valuable pharmacological activity spectrum and are therefore suitable for the treatment and prophylaxis of diseases.
  • anemia such as, for example, premature anemia, anemia in chronic renal failure, anemia after chemotherapy and anemia in HIV patients, and thus also for the treatment of severe anemia.
  • the application is preferably oral, transdermal or parenteral. Oral application is very particularly preferred, which is a further advantage over the therapy of anemias with rh-EPO known from the prior art.
  • the compounds according to the invention act in particular as erythropoietin sensitizers.
  • Erythropoiesis is increased, in particular that the oxygen supply is improved. Surprisingly, they are orally active, which significantly improves and at the same time simplifies the therapeutic use with the exclusion or reduction of the known side effects.
  • the present invention thus also relates to the use of EPO sensitizers for stimulating erythropoiesis, in particular for the prophylaxis and / or treatment of anemia, preferably severe anemia such as premature anemia, anemia in the case of chronic renal failure, anemia after chemotherapy or anemia in HIV -Patients. Besides that comes the
  • EPO sensitizers in the case of completely intact endogenous EPO production for additional stimulation of erythropoiesis, which can be used in particular with autologous blood donors.
  • the compounds according to the invention thus enable efficient stimulation of erythropoiesis and consequently prophylaxis or therapy of anemias which intervenes before the stage in which the conventional treatment methods with EPO are used. This is because the compounds according to the invention allow an effective influence on the body's own EPO, whereby the direct administration of EPO with the associated disadvantages can be avoided.
  • the present invention therefore furthermore relates to medicaments and pharmaceutical compositions which contain at least one compound of the general formula (I) together with one or more pharmacologically acceptable auxiliaries or excipients, and to their use for stimulating erythropoiesis, in particular for the purposes of prophylaxis and / or or treatment of anemia, such as premature anemia, anemia with chronic kidney failure, anemia after chemotherapy or anemia in HIV patients.
  • anemia such as premature anemia, anemia with chronic kidney failure, anemia after chemotherapy or anemia in HIV patients.
  • CD34 positive cells from this cell fraction were isolated by means of a commercial purification method (CD34 multisort kit from Miyltenyi).
  • CD34-positive cells (6000-10000 cells / ml) were in stem cell medium (0.9%
  • mice Normal mice are treated with test substances over several days. The application takes place intraperitoneally, subcutaneously or by os.
  • Preferred solvents are Solutol / DMSO / sucrose / NaCl solution or glycofurol.
  • the new active ingredients can be converted in a known manner into the customary formulations, such as tablets, dragées, pills, granules, aerosols, syrups, emulsions, suspensions and solutions, using inert, non-toxic, pharmaceutically suitable excipients or solvents.
  • the therapeutically active compound should in each case be present in a concentration of about 0.5 to 90% by weight of the total mixture, i.e. in amounts sufficient to achieve the dosage range indicated.
  • the formulations are prepared, for example, by stretching the active ingredients with solvents and / or carriers, optionally using emulsifiers and / or dispersants, e.g. in the case of the use of water as a diluent, organic solvents, if appropriate
  • Auxiliary solvents can be used.
  • the application is carried out in the usual way, preferably orally, transdermally or parenterally, in particular perlingually or intravenously.
  • it has proven to be advantageous to administer amounts of approximately 0.01 to 10 mg / kg, preferably approximately 0.1 to 10 mg / kg, of body weight in the case of intravenous administration in order to achieve effective results.
  • the resin (100 mg, 0.2 mmol) is suspended in dimethylacetamide and 2 ml of a 1.5 M solution of methylhydrazine in dimethylacetamide are added. The mixture is stirred at 70 ° C. for 48 hours. Then the liquid

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Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft neue und bekannte Pyrazolcarbonsäureamide der allgemeinen Formeln (I) und (Ia). Ausserdem wird die Herstellung der Pyrazolcarbonsäureamide entweder über Festphasenchemie oder über die neuen Pyrazolcarbonsäuren beschrieben. Die Pyrazolcarbonsäureamide werden als Arzneimittel, insb esondere als Medikamente zur Behandlung von Anämien verwendet.

Description

Verwendung von Pyrazol-Carbonsäureamiden
Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung von Pyrazolcarbonsäureamiden zur Herstellung von Arzneimitteln zur Prophylaxe und/oder Behandlung von Anämien, neue Pyrazolcarbonsäureamide sowie Verfahren zu ihrer Herstellung.
Erythropoetin (EPO) ist ein Glykoprotein mit einem Molekulargewicht von ungefähr 34 000 Da. Über 90 % der EPO-Synthese finden in der Niere statt, und das dort pro- duzierte EPO wird ins Blut sezerniert. Die primäre physiologische Funktion von EPO ist die Regulation der Erythropoese im Knochenmark. Dort stimuliert EPO die Proliferation und Reifung der erythroiden Vorläuferzellen.
Die EPO-Spiegel im Blut sind normalerweise niedrig, sinkt aber der O2-Gehalt des Blutes ab, dann kommt es zu einem Anstieg der EPO-Synthese und dadurch auch zu einem Anstieg der EPO-Spiegel im Blut. Dies hat zur Folge, daß die Hämatopoese stimuliert wird und daß der Hämatokrit steigt. Hierdurch kommt es zu einer Steigerung der O2-Transportkapazität im Blut. Wenn die Erythrozytenzahl ausreicht, um genügend O2 zu transportieren, dann fällt die EPO-Blutkonzentration wieder ab. Eine mangelnde Sauerstoffversorgung (Hypoxie) kann eine Reihe von Ursachen haben, z.B. starker Blutverlust, längerer Aufenthalt in großen Höhen, aber auch Niereninsuffizienz oder Knochenmarksuppression.
Es ist bekannt, daß rekombinantes humanes (rh) EPO die Erythropoese stimuliert und somit in der Therapie von schweren Anämien Anwendung gefunden hat. Weiterhin wird rh EPO zur Vermehrung der körpereigenen Blutzellen eingesetzt, um die Notwendigkeit von Fremdbluttransfusionen zu vermindern.
Jedoch sind starke Nebenwirkungen, die bei der Gabe von rh EPO auftreten, bekannt. Dazu gehören die Entstehung und Verstärkung des Bluthochdrucks, Verursachung einer Encephalopathie-ähnlichen Symptomatik bis hin zu tonisch-klonischen Krämpfen und cerebralem oder myocardialem Infarkt durch Thrombosen.
Ferner ist rh EPO nicht oral verfugbar und muß daher i.p., i.v. oder subcutan appli- ziert werden, wodurch die Anwendung auf die Therapie schwerer Anämie begrenzt ist.
Aus der Publikation WO 97/19039 sind substituierte Pyrazole bekannt. Die Synthese der Pyrazol-Derivate erfolgt an der festen Phase. Nach Abspaltung erhält man Pyra- zolphenyl-Carbonsäureamide. Die Verwendung als Arzneimittel ist nicht beschrieben.
Die vorliegende Erfindung betrifft nun die Verwendung von Pyrazolcarbonsäureamiden der allgemeinen Formel (I),
in welcher
A, D, E und G gleich oder verschieden sind und für Wasserstoff, Halogen, Trifluormethyl, Hydroxy oder für (C,-C6)-Alkyl oder für (C,-C6)-Alkoxy stehen,
R1 für Wasserstoff oder für (C,-C6)-Alkyl steht,
R2 für (C6-C)0)-Aryl oder einen 5- bis 6-gliedrigen aromatischen, gegebenenfalls benzokondensierten Heterocyclus mit bis zu 3 Heteroatomen aus der Reihe S, N und/oder O steht, wobei die oben aufgeführten aromatischen Ringsysteme gegebenenfalls bis zu 3 -fach gleich oder verschieden durch Halogen, Tri- fluormethyl, Trifluormethoxy, (C,-C6)-Alkyl, (C,-C6)-Alkoxy oder (C,-C6)- Alkoxycarbonyl substituiert sein können,
und ihren Tautomeren und den jeweiligen Salzen,
als Arzneimittel, die sich zur Prophylaxe und/oder Behandlung von Erkrankungen, beispielsweise von Anämien, eignen.
Im Fall, daß R1 für Wasserstoff steht, erhält man Tautomere der Formeln
Die Verbindungen können in Abhängigkeit von dem Substitutionsmuster in stereoisomeren Formen, die sich entweder wie Bild und Spiegelbild (Enantiomere), oder die sich nicht wie Bild und Spiegelbild (Diastereomere) verhalten, existieren. Die Erfindung betrifft sowohl die Enantiomeren oder Diastereomeren oder deren jeweilige Mischungen. Die Racemformen lassen sich ebenso wie die Diastereomeren in bekannter Weise in die stereoisomer einheitlichen Bestandteile trennen.
Physiologisch unbedenkliche Salze der Verbindungen können Salze der erfmdungs- gemäßen Stoffe mit Mineralsäuren, Carbonsäuren oder Sulfonsäuren sein. Besonders bevorzugt sind z.B. Salze mit Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, Toluolsulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Naphthalindisulfonsäure, Essigsäure, Propionsäure, Milchsäure, Weinsäure, Zitronensäure, Fumarsäure, Maleinsäure oder Benzoesäure. Als Salze können Salze mit üblichen Basen genannt werden, wie beispielsweise Alkalimetallsalze (z.B. Natrium- oder Kaliumsalze), Erdalkalisalze (z.B. Calcium- oder Magnesiumsalze) oder Ammoniumsalze, abgeleitet von Ammoniak oder organischen Aminen wie beispielsweise Diethylamin, Triethylamin, Ethyldiisopropylamin, Prokain, Dibenzylamin, N-Methylmorpholin, Dihydroabietylamin, 1-Ephenamin oder Methyl- piperidin.
(C6-C10)-Aryl steht im allgemeinen für einen aromatischen Rest mit 6 bis 10 Kohlenstoffatomen. Bevorzugte Arylreste sind Phenyl und Naphthyl.
(C,-C6)-Alkyl steht für einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Beispielsweise seien genannt: Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, tert.Butyl, n-Pentyl und n-Hexyl. Besonders bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen.
(CrC6)-Alkoxy steht für einen geradkettigen oder verzweigten Alkoxyrest mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Alkoxyrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Beispielsweise seien genannt: Methoxy, Ethoxy, n-Propoxy, Isopropoxy, tert.Butoxy, n-Pentoxy und n-Hexoxy. Besonders bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Alkoxyrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen.
(C i -Cfi)- Alkoxycarbonyl steht für einen geradkettigen oder verzweigten Alkoxycarb- onylrest mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder ver- zweigter Alkoxycarbonylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Beispielsweise seien genannt: Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, n-Propoxycarbonyl, Isopropoxycarbonyl und tert.Butoxycarbonyl. Besonders bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Alkoxycarbonylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen.
Ein 5- bis 6-gliedriger aromatischer Heterocyclus mit bis zu 3 Heteroatomen aus der
Reihe S, O und/oder N steht beispielsweise für Pyridyl, Pyrimidyl, Pyridazinyl, Thienyl, Furyl, Pyrrolyl, Thiazolyl, Oxazolyl oder Imidazolyl. Bevorzugt sind Pyridyl, Pyrimidyl, Pyridazinyl, Furyl und Thienyl.
Ein 5- bis 6-gliedriger aromatischer benzokondensierter Heterocyclus mit bis zu 3 Heteroatomen aus der Reihe S, O und/oder N steht beispielsweise für Benzothiophen,
Indol, Chinolin oder Benzofuran, bevorzugt sind Benzothiophen und Chinolin.
Bevorzugt verwendet werden Verbindungen der allgemeinen Formel
in welcher
A, D, E und G gleich oder verschieden sind und für Wasserstoff, Fluor, Chlor, Brom oder Trifluormethyl stehen,
R1 für Wasserstoff oder Methyl steht,
R2 für Phenyl, Furyl, Thienyl, Benzothiophen oder Pyridyl steht, wobei die oben aufgeführten aromatischen Ringsysteme gegebenenfalls bis zu 2-fach gleich oder verschieden durch Fluor, Chlor, Brom, Trifluormethyl, Trifluormethoxy,
(C,-C4)-Alkyl oder (C,-C4)-Alkoxy oder (C,-C4)-Alkoxycarbonyl substituiert sein können
und ihre Tautomeren sowie die jeweiligen Salze.
Besonders bevorzugt verwendet werden Verbindungen der allgemeinen Formel (I), in welcher
A, D, E und G für Wasserstoff stehen und
R1 für Wasserstoff oder Methyl steht und
R2 für Phenyl, Benzothiophen oder Pyridyl steht, wobei die oben aufgeführten aromatischen Ringsysteme gegebenenfalls durch Fluor, Chlor, Brom, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Methyl oder Methoxy substituiert sein können
und ihre Tautomeren sowie deren Salze.
Ganz besonders bevorzugt verwendet werden die in der folgenden Tabelle aufge- führten Verbindungen:
und deren Salze.
Die Erfindung betrifft außerdem neue Stoffe der allgemeinen Formel (la), in welcher
A', D', E', G' und R1 die oben angegebene Bedeutung von A, D, E, G und R1 haben,
und
für CF3 oder OCF3 (d.h. mit anderen Worten L = R2 mit R2 = para-C6H4-CF oder para-C6H4-OCF3) steht.
und ihren Tautomeren und jeweiligen Salze.
Ganz besonders bevorzugt ist die erfindungsgemäße Verbindung folgender Struktur:
und deren Salze.
Außerdem wurden Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel (I) und der neuen Stoffe der allgemeinen Formel (la) gefunden, die dadurch gekennzeichnet sind, daß man
[A] Verbindungen der allgemeinen Formel (II) in welcher
A, D, E und G die oben angegebene Bedeutung haben,
an ein aminofunktionalisiertes Harz kuppelt und dann mit Verbindungen der allgemeinen Formel (III)
R OOC-R2 (III),
in welcher
R die oben angegebene Bedeutung hat
und
R3 für einen (C,-C4)- Alkylrest steht,
an der Festphase umsetzt und anschließend mit Verbindungen der allgemeinen Formel (IV)
H*%'R1 (IV),
H in welcher
R1 die oben angegebene Bedeutung hat, umsetzt, die Verbindungen anschließend vom Harz abspaltet und gegebenenfalls (d.h. für R1 ≠ H) in die Isomeren trennt,
oder
[B] Pyrazolcarbonsäuren der allgemeinen Formel (V)
in welcher
R . 1 , r R> 2 , A, D, E und G die oben angegebene Bedeutung haben,
gegebenenfalls in Gegenwart eines Dehydratisierungsmittels oder über ein aktiviertes Carbonsäure-Derivat (z.B. Carbonsäurehalogenid, -anhydrid oder -imidazolid) mit Ammoniak umsetzt.
Die Verfahren können durch folgende Formelschemata beispielhaft erläutert werden:
Verfahren [A]:
Verfahren [B]:
Als Lösemittel für die zuvor beschriebenen Verfahren eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern.
Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan, Trichlormethan,
Tetrachlormethan, 1 ,2-Dichlorethan, Trichlorethan, Tetrachlorethan, 1,2-Dichlor- ethylen oder Trichlorethylen, Kohlenwasserstoff wie Benzol, Xylol, Toluol, Hexan oder Cyclohexan, Dimethylformamid, Dimethylacetamid, Acetonitril oder DMSO sowie Ether wie beispielsweise Diethylether, Dioxan oder Tetrahydrofuran.. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Dimethylformamid und Dichlormethan.
Die zuvor beschriebenen Reaktionen erfolgen im allgemeinen in einem Temperaturbereich von -78°C bis zu Rückflußtemperatur, bevorzugt von 0°C bis Siedepunkt des benutzten Lösemittels.
Die zuvor beschriebenen Umsetzungen können bei normalem, erhöhtem oder bei erniedrigtem Druck durchgeführt werden (z.B. von 0,5 bis 5 bar). Im allgemeinen arbeitet man bei Normaldruck.
Als Dehydratisierungsreagenzien für das Verfahren [B] eignen sich Carbodiimide wie beispielsweise Diiso-propylcarbodiimid, Dicyclohexylcarbodiimid oder N-(3- Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid oder Carbonylverbindun- gen wie Carbonyldiimidazol oder 1 ,2-Oxazoliumverbindungen wie 2-Ethyl-5-phe- nyl-l,2-oxazolium-3-sulfonat oder Propanphosphorsäureanhydrid oder Isobutylchlo- roformat oder Benzotriazolyloxy-tris-(dimethylamino)phosphonium-hexyfluorophos- phat oder Phosphonsäurediphenylesteramid oder Methansulfonsäurechlorid, gegebenenfalls in Anwesenheit von Basen wie Triethylamin oder N-Ethylmorpholin oder N- Methylpiperidin oder Dicyclohexylcarbodiimid und N-Hydroxysuccinimid. Bevorzugt ist Carbonyldiimidazol (CDI).
Als feste Phase werden die üblichen aminofunktionalisierten Polystyrole eingesetzt. Bevorzugt sind aminofunktionalisierte Polystyrol-Polyethylen Copolymere, die mit einer Polyethylenglycolkette modifiziert sind. Besonders bevorzugt sind sogenannte SAM-Harze (Abkürzung für Standard-Amid-Harz) und RAM-Harze (Abkürzung für Rink-Amid-Harz). Beispiele für erfindungsgemäß verwendbare, aminofunktionali- .
- 13 -
sierte Harze sind Tentagel SAM (S 30022) und Tentagel R RAM (R 28 023), beide von der Firma Rapp Polymere GmbH.
Die Verbindungen der allgemeinen Formeln (II), (III) und (IV) sind an sich bekannt.
Die Verbindungen der Formel (V) sind neu und können beispielsweise hergestellt werden, indem man
[C] Verbindungen der allgemeinen Formel (VI),
in welcher
A, D, E, G, und R die oben angegebene Bedeutung haben
und
R3 für einen (C,-C4)- Alkylrest steht,
mit Verbindungen der allgemeinen Formel (VII)
H2NVιι ι--R1
N'
(VII),
in welcher
R1 die oben angegebene Bedeutung hat, in inerten Lösemitteln umsetzt und die erhaltenen Ester der allgemeinen Formel (VIII)
in welcher
A, D, E, G, R , R und R die oben angegebene Bedeutung haben,
im Falle, daß R1 für einen (C,-C6)-Alkylrest steht, in die Isomeren trennt und zu Carbonsäuren der allgemeinen Formel (V) verseift,
und im Fall, daß R1 für H steht, zunächst durch N-Alkylierung isomere Gemische mit R1 ≠ H herstellt, die durch geeignete Trennmethoden in Verbindungen der Formel (V) mit R1 für (C,-C6)-Alkyl getrennt werden, welche anschließend verseift werden,
oder
[D] man im Fall, daß R1 für Methyl steht, Aldehyde der Formel (IX)
in welcher
R2 die oben angegebene Bedeutung hat,
mit Acetophenonen der allgemeinen Formel (X) in welcher
R4 für eine (C,-C4)-Alkylkette steht,
gegebenenfalls in Gegenwart eines Katalysators umsetzt,
und die entstehenden Verbindungen der Formel (XI)
in welcher
R2 und R4 die oben angegebene Bedeutung haben,
mit Methylhydrazin zu Verbindungen der Formel (XII)
in welcher
R und R die oben angegebene Bedeutung haben,
umsetzt,
aus denen durch Hydrolyse wie oben beschrieben, die Verbindungen der Formel (V) mit R1 = Methyl erhalten werden. Als Lösemittel für die Verfahren [C] und [D] eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan, Trichlormethan, Tetrachlormethan, 1 ,2-Dichlorethan, Trichlorethan, Tetrachlorethan, 1 ,2-Dichlorethylen oder Trichlorethylen, Kohlenwasserstoff wie Benzol, Xylol, Toluol, Hexan oder Cyclohexan, Dimethylformamid, Tetrahydrofuran, Acetonitril oder Alkohole wie Methanol, Ethanol, 2-Propanol oder DMSO. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Ethanol und DMSO.
Für die unter [A] beschriebene Umsetzung des Aldehyds mit den Acetophenonen kommen als Katalysator die üblichen sauren und basischen Katalysatoren in Betracht, vorzugsweise Säure (z.B. para-Toluolsulfonsäurechlorid).
Die zuvor beschriebenen Reaktionen erfolgen im allgemeinen in einem Temperaturbereich von -78°C bis zu Rückflußtemperatur, bevorzugt von 0°C bis Siedepunkt des benutzten Lösemittels.
Die zuvor beschriebenen Umsetzungen können bei normalem, erhöhtem oder bei erniedrigtem Druck durchgeführt werden (z.B. von 0,5 bis 5 bar). Im allgemeinen arbeitet man bei Normaldruck.
Die Verseifung der Carbonsäureester erfolgt nach üblichen Methoden, indem man die Ester in inerten Lösemitteln mit üblichen Basen oder Säuren behandelt, wobei im Fall der basischen Verseifung die zunächst entstehenden Salze durch Behandeln mit
Säure in die freien Carbonsäuren überführt werden können.
Als Basen eignen sich für die Verseifung die üblichen anorganischen Basen. Hierzu gehören bevorzugt Alkalihydroxide oder Erdalkalihydroxide wie beispielsweise Natriumhydroxid, Lithiumhydroxid, Kaliumhydroxid oder Bariumhydroxid, oder Alkalicarbonate wie Natrium- oder Kaliumcarbonat oder Natriumhydrogencarbonat. Besonders bevorzugt werden Natriumhydroxid oder Lithiumhydroxid eingesetzt.
Als Lösemittel eignen sich für die Verseifung Wasser oder die für eine Verseifung üblichen organischen Lösemittel. Hierzu gehören bevorzugt Alkohole wie Methanol,
Ethanol, Propanol, Isopropanol oder Butanol, oder Ether wie Tetrahydrofuran oder Dioxan, oder Dimethylformamid oder Dimethylsulfoxid. Besonders bevorzugt werden Alkohole wie Methanol, Ethanol, Propanol oder Isopropanol verwendet. Ebenso ist es möglich, Gemische der genannten Lösemittel einzusetzen. Bevorzugt ist Wasser/Tetrahydrofuran oder Wasser/Ethanol.
Die Verseifung wird im allgemeinen in einem Temperaturbereich von 0°C bis +100°C, bevorzugt von 0°C bis +80°C durchgeführt.
Im allgemeinen wird die Verseifung bei Normaldruck durchgeführt. Es ist aber auch möglich, bei Unterdruck oder bei Überdruck zu arbeiten (z.B. von 0,5 bis 5 bar).
Bei der Durchführung der Verseifung wird die Base oder die Säure im allgemeinen in einer Menge von 1 bis 3 mol, bevorzugt von 1 bis 2,5 mol bezogen auf 1 mol des Esters eingesetzt. Besonders bevorzugt verwendet man molare Mengen der Reaktan- den.
Die Verbindungen der allgemeinen Formeln (VI) und (XI) sind an sich bekannt oder nach üblichen Methoden herstellbar [vgl. Erne, D. et al., Helv. Chim. Acta 62(1979), 994-1006; Hasegawa, E. et al. J. Org. Chem. 56 (1991), 1631-1635; Watanabe, Ken- ichi et al., Bull. Chem. Soc. Jpn. 55 (1988) 3208-3211].
Die Verbindungen der allgemeinen Formel (VII), (VIII), (IX), (X) und (XII) sind teilweise neu oder bekannt und können wie oben beschrieben hergestellt werden. Die erfindungsgemäß verwendeten Verbindungen der allgemeinen Formel (I) und die neuen Stoffe der allgemeinen Formel (la) zeigen ein nicht vorhersehbares, wertvolles pharmakologisches Wirkspektrum und sind daher zur Behandlung und Prophylaxe von Erkrankungen geeignet.
Sie können bevorzugt in Arzneimitteln eingesetzt werden zur Behandlung und Prophylaxe von Anämien, wie beispielsweise bei Frühgeborenen- Anämie, Anämie bei chronischer Niereninsuffizienz, Anämie nach einer Chemotherapie und der Anämie bei HIV-Patienten, somit auch zur Behandlung von schweren Anämien.
Auch bei völlig intakter endogener EPO-Produktion kann durch die Gabe der erfindungsgemäßen Verbindungen eine zusätzliche Stimulation der Erythropoese induziert werden, was insbesondere bei Eigenblutspendern ausgenutzt werden kann.
Für die Applikation der erfindungsmäßen und erfindungsgemäß verwendeten Verbindungen kommen alle üblichen Applikationsformen in Betracht. Vorzugsweise erfolgt die Applikation oral, transdermal oder parenteral. Ganz besonders bevorzugt ist die orale Applikation, worin ein weiterer Vorteil gegenüber der aus dem Stand der Technik bekannten Therapie von Anämien mit rh-EPO liegt.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen wirken insbesondere als Erythropoetin-Sensi- tizer.
Als Erythropoetin-Sensitizer werden Verbindungen bezeichnet, die in der Lage sind, die Wirkung des im Körper vorhandenen EPO so effizient zu beeinflussen, daß die
Erythropoese gesteigert wird, insbesondere daß die Sauerstoffversorgung verbessert wird. Sie sind überaschenderweise oral wirksam, wodurch die therapeutische Anwendung unter Ausschluß oder Reduktion der bekannten Nebenwirkungen wesentlich verbessert und gleichzeitig vereinfacht wird. Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist somit auch die Verwendung von EPO- Sensitizern zur Stimulation der Erythropoese, insbesondere zur Prophylaxe und/oder Behandlung von Anämien, vorzugsweise schweren Anämien wie beispielsweise Frühgeborenen-Anämie, Anämie bei chronischer Niereninsuffizienz, Anämie nach Chemotherapie oder auch Anämie bei HIV-Patienten. Daneben kommt auch die
Gabe von EPO-Sensitizern bei völlig intakter endogener EPO-Produktion zur zusätzlichen Stimulation der Erythropoese in Betracht, was insbesondere bei Eigenblutspendern ausgenutzt werden kann.
Besonders bevorzugt ist die orale Applikation dieser sogenannten EPO-Sensitizer für die zuvor genannten Zwecke.
Somit ermöglichen die erfindungsgemäßen Verbindungen eine effiziente Stimulation der Erythropoese und folglich eine Prophylaxe bzw. Therapie von Anämien, die noch vor dem Stadium eingreift, in welchem die herkömmlichen Behandlungsmethoden mit EPO einsetzen. Denn die erfindungsgemäßen Verbindungen erlauben eine wirksame Beeinflussung des körpereigenen EPO, woduch die direkte Gabe von EPO mit den damit verbundenen Nachteilen vermieden werden kann.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind also Arzneimittel und pharmazeutische Zusammensetzungen, die mindestens eine Verbindung der allgemeinen Formel (I) zusammen mit einem oder mehreren pharmakologisch unbedenklichen Hilfs- oder Trägerstoffen enthalten, sowie deren Verwendung zur Stimulation der Erythropoese, insbesondere zu Zwecken der Prophylaxe und/oder Behandlung von Anämien, wie z.B. Frühgeborenenanämien, Anämien bei chronischer Niereninsuffizienz, Anämien nach einer Chemotherapie oder Anämien bei HIV-Patienten. Testbeschreibung (in vitro)
Zeilproliferation von humanen erythroiden Norläuferzellen
20 ml Heparin-Blut wurden mit 20 ml PBS verdünnt und für 20 min (220xg) zentrifugiert. Der Überstand wurde verworfen, die Zellen wurden in 30 ml PBS resuspendiert und auf 17 ml Ficoll Paque (d=1.077g/ml, Pharmacia) in einem 50 ml Röhrchen pipettiert. Die Proben wurden für 20 min bei 800xg zentrifugiert. Die mononukleären Zellen an der Grenzschicht wurden in ein neues Zentrifugenröhrchen überführt, mit dem 3-fachem Volumen mit PBS verdünnt und für 5 min bei 300xg zentrifugiert.
Die CD34-positiven Zellen aus dieser Zellfraktion wurden mittels eines kommerziellen Aufreinigungsverfahrens (CD34 Multisort Kit von Miyltenyi) isoliert.
CD34-positive Zellen (6000-10000 Zellen/ml) wurden in Stammzellmedium (0.9%
Methylzellulose, 30% Kälberserum, 1% Albumin (Rind), lOOμM 2-Mercaptoethanol und 2 mM L-Glutamin) von StemCell Technologies Inc. resuspendiert. 10 mU/ml humanes Erythropoietin, 10 ng/ml humanes IL-3 und 0-1 OμM Testsubstanz wurden zugesetzt. 500 μl ertiefung (24- Wellplatten) wurden für 14 Tage bei 37°C in 5% CO2, 95% Luft kultiviert.
Kulturen wurden mit 20 ml 0.9%w/v ΝaCl-Lösung verdünnt, für 15 min bei 600xg zentrifugiert und in 200 μl 0,9%w/v ΝaCl resuspendiert. Zur Bestimmung der Zahl der erythroiden Zellen, wurden 50μl der Zellsuspension zu lOμl Benzidin-Färbe- lösung (20μg Benzidin in 500 μl DMSO, 30μl H2O2 und 60 μl konz. Essigsäure) pipettiert. Die Zahl der blauen Zellen wurde mikroskopisch ausgezählt. Testbeschreibung Hämatokrit-Maus
Normale Mäuse werden mit Testsubstanzen über mehrere Tage behandelt. Die Applikation erfolgt intraperitoneal, subkutan oder per os. Bevorzugte Lösungsmittel sind Solutol/DMSO/Sacharose/NaCl-Lösung oder Glycofurol.
Vom Tag 0 (vor der ersten Applikation) bis zu ca. 3 Tagen nach der letzten Applikation werden mehrfach ca. 70 μl Blut durch Punktion des retroorbitalen Venenplexus mit einer Hämatokritkapillare entnommen. Die Proben werden zentrifugiert und der Hämatokrit durch manuelle Ablesung bestimmt. Primärer Parameter ist der Häma- tokritanstieg gegenüber dem Ausgangswert der behandelten Tiere im Vergleich zur Veränderung des Hämatokrit in der Placebo-Kontrolle (zweifach normierter Wert).
Die neuen Wirkstoffe können in bekannter Weise in die üblichen Formulierungen überführt werden, wie Tabletten, Dragees, Pillen, Granulate, Aerosole, Sirupe, Emulsionen, Suspensionen und Lösungen, unter Verwendung inerter, nicht toxischer, pharmazeutisch geeigneter Trägerstoffe oder Lösungsmittel. Hierbei soll die therapeutisch wirksame Verbindung jeweils in einer Konzentration von etwa 0,5 bis 90- Gew.-% der Gesamtmischung vorhanden sein, d.h. in Mengen, die ausreichend sind, um den angegebenen Dosierungsspielraum zu erreichen.
Die Formulierungen werden beispielsweise hergestellt durch Verstrecken der Wirkstoffe mit Lösungsmitteln und/oder Trägerstoffen, gegebenenfalls unter Verwendung von Emulgiermitteln und/oder Dispergiermitteln, wobei z.B. im Fall der Benutzung von Wasser als Verdünnungsmittel gegebenenfalls organische Lösungsmittel als
Hilfslösungsmittel verwendet werden können.
Die Applikation erfolgt in üblicher Weise, vorzugsweise oral, transdermal oder parenteral, insbesondere perlingual oder intravenös. Im allgemeinen hat es sich als vorteilhaft erwiesen, bei intravenöser Applikation Mengen von etwa 0,01 bis 10 mg/kg, vorzugsweise etwa 0,1 bis 10 mg/kg Körpergewicht zur Erzielung wirksamer Ergebnisse zu verabreichen.
Trotzdem kann es gegebenenfalls erforderlich sein, von den genannten Mengen abzuweichen, und zwar in Abhängigkeit vom Körpergewicht bzw. der Art des Applikationsweges, vom individuellen Verhalten gegenüber dem Medikament, der Art von dessen Formulierung und dem Zeitpunkt bzw. Intervall, zu welchen die Verabreichung erfolgt. So kann es in einigen Fällen ausreichend sein, mit weniger als der vorgenannten Mindestmenge auszukommen, während in anderen Fällen die genannte obere Grenze überschritten werden muß. Im Falle der Applikation größerer Mengen kann es empfehlenswert sein, diese in mehreren Einzelgaben über den Tag zu verteilen.
O 00/45894 _ 23 _ PCT/EPOO/ 00519
Herstellungsbeispiele
Beispiel 1
3-(4-Aminocarbonylphenyl)-5-(4-bromphenyl)- 1 -methyl-pyrazol
Tentagel SAM Harz (100 mg, Beladung 0.22 mmol/g) wird in Dimethylformamid (10 ml) suspendiert, mit Acetophenon-4-carbonsäure (144 mg, 0.88 mmol), TBTU (TBTU = o-(Benztriazol-l-yl)-N,N,N',N'-tetramethyl-uronium-tetrafluoroborat) (282 mg, 0.88 mmol) und DIEA (DIEA = Diisopropylethylamid) (16 mg, 0.12 mmol) versetzt und über Nacht bei Raumtemperatur geschüttelt. Anschließend wird die flüssige Phase abgesaugt und das Harz mit Dimethylformamid, Methanol, Methylenchlorid und Diethylether (je zweimal 5 ml)gewaschen.
Für die Claisen-Kondensation wird das Harz (100 mg, 0.21 mmol) unter Argon in
Dimethylacetamid (10 ml) suspendiert, mit 4-Brom-benzoesäuremethylester (812 mg, 3.78 mmol) versetzt und 10 min bei Raumtemperatur geschüttelt. Dann wird NaH (Disp. in Mineralöl, 60%ig, 96.6 mg, 2.52 mmol) zugegeben und die Mischung 1 h bei 90°C geschüttelt. Anschließend wird die flüssige Phase abgesaugt und das Harz mit Dimethylformamid, Methanol, Methylenchlorid und Diethylether (je zweimal 5 ml) gewaschen.
Für die Kondensation wird das Harz (100 mg, 0.2 mmol) in Dimethylacetamid suspendiert und mit 2 ml einer 1.5 M Lösung von Methylhydrazin in Dimethylacetamid versetzt. Die Mischung wird 48h bei 70°C gerührt. Anschließend wird die flüssige
Phase abgesaugt und das Harz mit Dimethylformamid, Methanol, Methylenchlorid und Diethylether (je zweimal 5 ml) gewaschen. Zur Abspaltung wird das Harz (100 mg) mit 2 ml einer l : l-(v:v)-Mischung von Methylenchlorid und Trifluoressigsäure versetzt und 1 h bei Raumtemperatur geschüttelt. Die flüssige Phase wird abgetrennt, die feste Phase mit Methylenchlorid nachgewaschen und die vereinigten flüssigen Phasen werden eingedampft. Das Produkt fällt als Regioisomerengemisch in einer Ausbeute von 4 mg, und mittels präpa- rativer HPLC wird das gewünschte Isomer abgetrennt.
HPLC: 3.33 und 3.39 min, Eluent: aq. 0.05% TFA (A), 0.05% TFA in Acetonitril (B); LiChrosper 100 RP-18; Temp. 40°C; Fluß = 2.5 ml/min; Gradient: t=0 min:
90%A, 10%B; t=5 min: 10%A, 90%B; t=7 min: 10%A, 90%B; t=7.05 min: 90%A, 10%B; t=8 min: 90%A, 10%B. MS ES+: 356 found
In Analogie zu der aufgeführten Vorschrift des Beispiels 1 werden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele hergestellt:
Methode [AI: HPLC: Eluent: aq. 0.05% TFA (A), 0.05% TFA in Acetonitril (B); Symmetry C18; Temp. 40°C; Gradient: t=0 min: 10%A, 90%B, Fluß: 0.5 ml/min; t=4 min: 90%A, 10%B, Fluß: 0.5 ml; t=6 min/min: 90%A, 10%B, Fluß: 0.5 ml/min; t=6.1 min: 10%A, 90%B, Fluß: 1.0 ml/min; t=7.5 min: 10%A, 90%B, Fluß: 0.5 ml/min
Methode [B]: HPLC: Eluent: aq. 0.05% TFA (A), 0.05% TFA in Acetonitril (B); LiChrosper 100 RP-18; Temp. 40°C; Fluß = 2.5 ml/min; Gradient: t=0 min: 90%A, 10%B; t=5 min: 10%A, 90%B; t=7 min: 10%A, 90%B; t=7.05 min: 90%A, 10%B; t=8 min: 90%A, 10%B.
Methode \ \: HPLC: Eluent: aq. 0.05% TFA (A), 0.05% TFA in Acetonitril (B); LiChrosper 100 RP-18; Temp. 40°C; Fluß = 1.5 ml/min; Gradient: t=0 min: 100%A, 0%B; t=8 min: 0%A, 100%B; t=9 min: 0%A, 100%B; t=9.10 min: 100%A, 0%B; t=10 min: 100%A, 0%B.
Methode \D . HPLC: Eluent: aq. 0.05% TFA (A), 0.05% TFA in Acetonitril (B); Vydac TPB 10 C18; Temp. 40°C; Fluß = 4 ml/min; Gradient: 1=0.5 min: 90%A, 10%B; t=6.2 min: 10%A, 90%B; t=7 min: 10%A, 90%B; t=7.05 min: 90%A, 10%B; t=7.5 min: 900%A, 10%B.

Claims

Patentansprüche
1. Verwendung von Pyrazolcarbonsäureamiden der allgemeinen Formel (I),
in welcher
A, D, E und G gleich oder verschieden sind und für Wasserstoff, Halogen, Trifluormethyl, Hydroxy oder für (C,-C6)- Alkyl oder für (C,-C6)-Alkoxy stehen,
R1 für Wasserstoff oder für (C,-C6)- Alkyl steht,
R2 für (C6-Cl0)-Aryl oder einen 5- bis 6-gliedrigen aromatischen, gegebe- nenfalls benzokondensierten Heterocyclus mit bis zu 3 Heteroatomen aus der Reihe S, N und/oder O steht, wobei die oben aufgeführten aromatischen Ringsysteme gegebenenfalls bis zu 3 -fach gleich oder verschieden durch Halogen, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, (C,-C6)- Alkyl, (C,-C6)-Alkoxy oder (C,-C6)-Alkoxycarbonyl substituiert sein können,
und ihren Tautomeren sowie den jeweiligen Salzen
zur Herstellung von Arzneimitteln zur Prophylaxe und/oder Behandlung von Erkrankungen, insbesondere Anämien.
2. Verwendung gemäß Anspruch 1 , wobei in der allgemeinen Formel (I) A, D, E und G gleich oder verschieden sind und für Wasserstoff, Fluor, Chlor, Brom oder Trifluormethyl stehen,
R! für Wasserstoff oder Methyl steht,
R2 für Phenyl, Furyl, Thienyl, Benzothiophen oder Pyridyl steht, wobei die oben aufgeführten aromatischen Ringsysteme gegebenenfalls bis zu 2-fach gleich oder verschieden durch Fluor, Chlor, Brom, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, (C,-C4)-Alkyl oder (C,-C4)-Alkoxy oder (C,-C4)-Alkoxycarbonyl substituiert sein können.
3. Verwendung gemäß Anspruch 1, wobei in der allgemeinen Formel (I)
A, D, E und G für Wasserstoff stehen,
R1 für Wasserstoff oder Methyl steht
und
R2 für Phenyl, Thienyl, Benzothiophen oder Pyridyl steht, wobei die oben aufgeführten aromatischen Ringsysteme gegebenenfalls durch Fluor, Chlor, Brom, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Methyl oder Methoxy substituiert sein können.
4. Verwendung von Pyrazolcarbonsäureamiden gemäß Anspruch 1, wobei die
Verbindungen der allgemeinen Formel (I) die folgenden Strukturen aufweisen:
5. Pyrazolcarbonsäureamide der allgemeinen Formel (la)
in welcher
A', D', E', G' und R1 die oben angegebene Bedeutung von A, D, E, G und R1 haben,
und
L für CF, oder OCF, steht.
6. Pyrazolcarbonsäureamid der allgemeinen Formel (la) gemäß Anspruch 5 mit folgender Struktur:
7. Verfahren zur Herstellung von Pyrazolcarbonsäureamiden der allgemeinen Formel (I) gemäß Ansprüchen 5 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß man
[A] Verbindungen der allgemeinen Formel (II)
in welcher
A, D, E und G die oben angegebene Bedeutung haben,
an ein aminofunktionalisiertes Harz kuppelt und dann mit Verbindungen der allgemeinen Formel (III)
R3OOC-R2 (III), in welcher
R2 die oben angegebene Bedeutung hat
und R3 für einen (C,-C4)-Alkylrest steht,
an der Festphase umsetzt und anschließend mit Verbindungen der allgemeinen Formel (IV)
H_N^N-R (IV),
H in welcher
R1 die oben angegebene Bedeutung hat,
umsetzt, die Verbindungen anschließend vom Harz abspaltet und gegebenenfalls (nämlich für R1 ≠ H) in die Isomeren trennt,
oder
[B] Pyrazolcarbonsäuren der allgemeinen Formel (V)
in welcher
R , R , A; D; E und G die oben angegebene Bedeutung haben,
gegebenenfalls in Gegenwart eines Dehydratisierungsmittels oder über ein aktiviertes Carbonsäure-Derivat mit Ammoniak umsetzt.
8. Arzneimittel, enthaltend mindestens ein Pyrazolcarbonsäureamid gemäß Ansprüchen 1 bis 6 sowie pharmakologisch unbedenkliche Formulierungsmittel.
9. Arzneimittel gemäß Ansprüchen 1 bis 6 zur Prophylaxe und/oder Behandlung von Anämien.
10. Arzneimittel gemäß Ansprüchen 1 bis 6 zur Behandlung von bei Frühgeborenen-Anämie, Anämie bei chronischer Niereninsuffizienz, Anämie nach einer Chemotherapie und der Anämie bei HIV-Patienten.
11. Arzneimittel nach Anspruch 8 zur Stimulation der Erythropoese von Eigenblutspendern.
12. Pyrazolcarbonsäureamide gemäß Anprüchen 5 und 6 zur Behandlung und
Prophylaxe von Erkrankungen
13. Verwendung von Erythropoetin- Sensitizern zur Herstellung von Arzneimitteln oder pharmazeutischen Zusammensetzungen zur Prophylaxe und/oder Behandlung von Anämien.
14. Verwendung nach Anspruch 13 zur Herstellung von Arzneimitteln oder pharmazeutischen Zusammensetzungen zur Prophylaxe und/oder Behandlung von Frühgeborenen-Anämien, Anämien bei chronischer Niereninsuffizienz, Anämien nach einer Chemotherapie und Anämien bei HIV-Patienten.
15. Verwendung von Erythropoetin-Sensitizern zur Herstellung von Arzneimitteln oder pharmazeutischen Zusammensetzungen zur Stimulation der Erythropoese von Eigenblutspendern.
6. Verwendung nach einem der Ansprüche 13 bis 15, dadurch gekennzeichnet, dass die Erythropoetin-Sensitizer peroral appliziert werden.
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