EP0904058A1 - Pharmazeutische zubereitung in form von liposomen - Google Patents

Pharmazeutische zubereitung in form von liposomen

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EP0904058A1
EP0904058A1 EP97929185A EP97929185A EP0904058A1 EP 0904058 A1 EP0904058 A1 EP 0904058A1 EP 97929185 A EP97929185 A EP 97929185A EP 97929185 A EP97929185 A EP 97929185A EP 0904058 A1 EP0904058 A1 EP 0904058A1
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EP
European Patent Office
Prior art keywords
acid
use according
liposomes
lipid
drug
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP97929185A
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Georg Böck
Herbert Stricker
Bernd Disse
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Boehringer Ingelheim International GmbH
Boehringer Ingelheim Pharma GmbH and Co KG
Original Assignee
Boehringer Ingelheim International GmbH
Boehringer Ingelheim Pharma GmbH and Co KG
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Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Ingelheim International GmbH, Boehringer Ingelheim Pharma GmbH and Co KG filed Critical Boehringer Ingelheim International GmbH
Publication of EP0904058A1 publication Critical patent/EP0904058A1/de
Withdrawn legal-status Critical Current

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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/06—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes

Definitions

  • the present invention relates to a pharmaceutical preparation in the form of liposomes, suitable for the solubilization of poorly soluble drugs, in particular of poorly soluble neurokinin antagonists, such as.
  • B (+) - camphor-3-carbonyl- (2S, 4R) -4-hydroxypyrolyl (2S) -2-naphthylalanyl- (2-methoxyphenyl) piperazide [BIIC 1996 BS] or 1-methylindol-3-yl-carbonyl - [4 (R) - hydrxoy] -L-prolyl- [3- (2-naphthyl)] - L-alanine-N-benzyl-N-methylamide [FK 888],
  • Liposomes are generally understood to be spherical structures - with a diameter of 25 nm to several ⁇ m - from one or more concentric lipid bilayers with an aqueous interior.
  • Such lipid vesicles can be produced by finely mechanical distribution of phospholipids (e.g. lecithin) in aqueous media. They are not only used as membrane models in biochemistry or molecular biology, but can also be used as carriers for drugs.
  • liposomes Numerous active substances are known from the prior art which are enclosed in liposomes or adsorbed on liposomes. Such liposomal systems are always preferred when the active ingredient is to be released over a longer period of time, undesired drug effects are to be reduced, the active ingredient is to be stabilized or liposomes are to be used as carrier-selective drug vehicles [P. Tyle and B.P. Ram, Targeted Therapeutic Systems, Marcel Dekker Inc., New York, 1990; G. Gregoriadis, Liposome Technology Vol. III, Targeted Drug Delvery and Biological Interaction, CRC Press Inc., Boca Raton, 1984]. Sufficiently water-soluble drugs have mostly been included in the above-mentioned liposomes [M.J.
  • the aspect of drug solubilization by liposomes has recently become increasingly important.
  • the legalities of liposomal drug inclusion have so far remained relatively unexplored.
  • the aim of drug solubilization in general is to To have drug in a mostly aqueous formulation in a molecularly disperse distribution. This formulation can then be administered by the known routes of application.
  • Drug preparations solubilized by liposomes should meet the following criteria:
  • the drug should be included in the liposome bilayer in molecularly dispersed form, provided that the ratio of the included drug to the amount of lipid used is as high as possible.
  • the drug liposomes should have a drug and size stability adapted to the intended use.
  • sterile liposome preparations for example by disinfection filtration with membrane filters with a pore diameter of 0.2 ⁇ m.
  • Small liposomes, i.e. ⁇ 200 nm liposome diameter should be aimed for in order to maintain sufficient stability of the liposomes during mechanical agitation. This is necessary, for example, when atomizing aqueous liposome preparations using pneumatic nozzle atomizers for inhalation application.
  • auxiliaries are to be used as solubilizers.
  • the liposome components presented by way of example are suitable as constituents of the body, among other things, because they are non-toxic on the one hand and well tolerated on the other hand, and are broken down by the body without leaving any residue.
  • the object of the present invention is now to provide a drug formulation based on liposomes for the solubilization of poorly soluble drugs, in particular for neurokinin (tachykinin) antagonists, as described in the general formula, the preferred areas and in the exemplary embodiments of WO 95/30687 to be disclosed.
  • poorly soluble drugs in particular for neurokinin (tachykinin) antagonists, as described in the general formula, the preferred areas and in the exemplary embodiments of WO 95/30687 to be disclosed.
  • a primary object of the present invention is to provide a drug formulation based on liposomes for the solubilization of the active ingredients (+) -campher-3-carbo ⁇ yl- (2S, 4R) -4-hydroxyprolyl- (2S) -2- naphthylalanyl- (2-methoxyphenyl) p ⁇ peraz ⁇ d [BIIC 1996 BS] and 1-methyl ⁇ ndol-3-yl-carbonyl- [4 (R) -hydrxoy] -L-prolyl- [3- (2-naphthyl)] - L-alan ⁇ n -N-benzyl-N-methylamide [FK 888] (see Ann Drug Data Rep 15 (1993) 252).
  • corticoids - such as flunisolide hemihydrate or beclomethasone dipropionate - can also be used to liposomally include compounds with the invention
  • BIIC 1996 is a non-selective neurokinin antagonist, which binds to the NK-
  • liposome compositions according to the invention are distinguished, inter alia, by the fact that liposome-forming, amphiphilic auxiliaries, the physicochemical character of the hydrophilic molecular part of which is determined by glycerol or inositol, are particularly suitable for large amounts of poorly soluble medicinal substances - in particular the neurokine antagonists BIIC already mentioned 1996 BS and FK 888 - to be enclosed in liposomes
  • the liposome-forming auxiliaries correspond to the general formulas I and II in FIG. 1, in which R ⁇ and R2 in both general formulas independently of one another have a branched or unbranched alkyl radical of a natural, semisynthetically or fully synthetically producible fatty acid - saturated or unsaturated character Have 1 to 30 carbon atoms
  • saturated, unbranched fatty acids are formic acid, acetic acid, propionic acid, butyric acid, valenic acid, capronic acid, onanthic acid, caprylic acid, pelargonic acid, capric acid, undecanoic acid, lauric acid, maric acid, stearic acid, stanic acid, paladic acid, palmitic acid, palmitic acid, palmitic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid, pentadic acid,
  • monounsaturated, unbranched fatty acids examples include acrylic acid, crotonic acid, palmitoleic acid, oleic acid, erucic acid
  • Sorbic and linoleic acids are examples of double-saturated, unbranched fatty acids
  • triple-saturated unbranched fatty acids are linolenic and elaosteen acids
  • Arachidonic acid and clupanodonic acid are examples of a four- and five-fold unsaturated, unbranched fatty acid
  • Docosahexaenoic acid is an example of a six-fold unsaturated unbranched fatty acid
  • Phosphatidyl glycerols and phosphatidyl ion soles in the form of the free acids or their salts - in particular in the form of the alkali salts - are preferably used, and the sodium salts are very particularly preferably used
  • phosphatidylglycerols are particularly preferably used
  • DMPG-Na dimystoylphosphatidylglycerol
  • DPPG-Na dipalmitoylphosphatidylglycerol
  • DSPG-Na distearoylphosphatidylglycerol
  • the following compounds are particularly preferably used as phosphatidylinositols
  • DMPI-Na dimystoylphosphatidylinositol
  • DPPI-Na dipalmitoylphosphatidylinositol
  • DSPI-Na disteraroylphosphatidylinositol
  • the liposome components according to the invention are characterized in that they are added to any further liposome components in proportions of greater than 0 mol% up to 100 mol%.
  • the liposomes produced by means of the liposome components according to the invention - in particular BIIC 1996-containing liposomes - have the following advantages.
  • the content of the pharmaceutically active component can be greatly increased by adding the liposome components according to the invention. For this reason, in order to achieve a high active ingredient concentration, a cost-intensive increase in the concentration of the other liposome components can be dispensed with
  • the liposome components according to the invention are indispensable for the simple production of active substance-containing liposomes in a size range ⁇ 200 nm
  • the concentration of the solubilized drug can be controlled by varying the total lipid content
  • lipid (s) are to be understood to mean all constituents of the liposome bilayer with the exception of the liposomally enclosed pharmaceutical substance
  • the liposomes from the liposome components proposed according to the invention can be produced by various methods.
  • the following examples explain the processes for the production of liposomes with lipophilic drugs for the lipid compositions according to the invention and are known per se from the prior art. [MJ Ostro, Liposomes, Marcel Dekker, New York, 1983; G. Gregroiadis, Liposome Technology Vol. I, Preparation of Liposomes, CRC Press Inc. Boca Raton, 1984]:
  • the size of the liposomes resulting from spontaneous vesicle formation during hydration can be varied. This dispersion can take place through mechanical energy input of different origins, for example by simple hand shaking, use of shaking devices, by extrusion through membrane filters with a precisely defined pore size, extrusion under high pressure through various narrow nozzles, through the use of various stirring and mixing devices and through ultrasonication .
  • liposomes containing active substances Due to the spontaneous vesicle formation of freeze-dried lipid-drug mixtures, liposomes containing active substances are formed during the hydration. During the hydration of freeze-dried liposomes, drug-containing liposomes are reconstituted
  • Liposomes produced with the liposome components according to the invention can po, ⁇ v, sc, ⁇ c, dermal, intrapulmonal, nasal, ip, rectally, in ocular or be applied intracerebrally
  • the lipids under consideration were weighed into a round-bottomed flask with a long neck and dissolved with a suitable mixture of chloroform and methanol, possibly using warmth. Drug dissolved in methanol was pipetted in. The solvent mixture was spun off on a rotary evaporator and dried. To completely remove residual solvent, the lipid film was subsequently dried in a vacuum drying cabinet. After gassing with nitrogen, the lipid film was stored at -18 ° C. until hydration. To prepare the liposomes, lipid film was hydrated with 5% (m / V) glucose solution. The hydration was carried out at 75 ° C.
  • the liposome size was always less than 100 nm on average Filtration through a membrane filter with a pore size of 0.2 ⁇ m, the liposome size, the drug content and the lipid content were determined in the filtrate.
  • DAB 10 filtration through bacteria-retaining filters
  • the four lipids DSPG-Na, Pl-Na, DPPS and DPPA were tested in combination with 30 mol% HSPC for their inclusion capacity with regard to BIIC 1996 BS.
  • a lipid concentration of 5 ⁇ mol / ml and a drug concentration of 10.2 mg were used / ml
  • Fig. 2 shows the corresponding result, according to which only the lipids containing glycerol and inositol showed a satisfactory result.
  • the quotient D / L denotes the molar ratio of liposomally enclosed BIIC 1996 BS and lipid Example 2
  • HSPC / DSPG-Na was tested as a lipid mixture in varying compositions.
  • the drug concentrations were varied between 0 mg / ml to 10.2 mg / ml
  • FIG. 8 and FIG. 9 represent the results graphically, they demonstrate that with increasing amount of the drug used, the amount of the liposomally included drug increased linearly up to the saturation limit. The amount of BIIC 1996 BS included could thus be controlled excellently
  • the drug concentrations were varied between 0 mg / ml to 10.2 mg / ml and the liposome size after production, Examined 2 days after manufacture and 28 days after manufacture.
  • the storage conditions were 4 ° C and room temperature (19 - 24 ° C) with the exclusion of light.
  • Liposome dispersions of the lipid composition HSPC / DSPG-Na. (30/70) with the drug concentration 3.5 mg / ml and HSPC / DSPG-Na / CH (21/49/30) with the drug concentration 3.0 mg / ml were used in one Lipid concentration of 45 ⁇ mol / ml nebulized with the Respirgard II ⁇ 10 nebulizing system.
  • the nozzle gas flow was 6 l / min, the nebulization time 22.53 min + 2.13 min (x + SD). Before and after nebulization, the nebulizing solution in the reservoir was examined for the drug content.
  • Fig. 14 illustrates the great content stability of the liposomes under consideration under very strong mechanical stress, such as occurs during nozzle atomization.
  • phosphatidylglycerols and phosphatidylinositols in particular the structural formula of the sodium salt of phosphatidylglycerols and phosphatidylinositols [G Cevc, D Marsh, Phosphohpid Bilayers, Physical Pnnciples and Models, John Wiley & Sons Ine, New York, 1987, D Arnd , I Fichtner, Liposomes, Representation - Properties - Application, Akademie Verlag Berlin, 1986]
  • FIG. 2 Influence of different lipids on the liposomal inclusion of BIIC 1996 BS (example 1)
  • Lipid 5 ⁇ mol / ml The data shown are the arithmetic mean from 3 determinations. The error bars represent the standard deviation
  • the data shown are the arithmetic mean values from 3 determinations.
  • the error bars represent the standard deviation
  • BIIC 1996 BS shows the influence of phosphatidyl-glycerol on the liposomal inclusion of BIIC 1996 BS in three-component lipid systems with constant cholesterol content (example 2) Inclusion rates 2 days after production.
  • Lipid 45 ⁇ mol / ml The data shown are the arithmetic mean of 3 determinations. The error bars represent the standard deviation.
  • Fig. 5 shows the influence of phosphatidyl-glycerol on the liposomal
  • the data shown are the arithmetic mean values from 3 determinations.
  • the error bars represent the standard deviation.
  • Fig. 6 shows the influence of phosphatidyl-glycerol on the liposomal
  • the data shown are the arithmetic mean values from 3 determinations.
  • the error bars represent the standard deviation. shows the influence of the lipid concentration on the liposomal inclusion of BIIC 1996 BS (example 3)
  • the data shown are the arithmetic mean values from FIG. 3
  • the error bars represent the standard deviation
  • the data shown are the arithmetic mean values from 3 determinations.
  • the error bars represent the standard deviation
  • the data shown are the arithmetic mean values from 3 determinations.
  • the error bars represent the standard deviation 381 PC17EP97 / 03108
  • Lipid composition HSPC / DSPG-Na / CH (30/70) use concentrations lipid 45 ⁇ mol / ml
  • the data shown are the arithmetic mean values from 3 determinations.
  • the error bars represent the standard deviation
  • the data shown are the arithmetic mean values from FIG. 3
  • Lipid composition HSPC / DSPG-Na (30/70) use concentrations lipid 45 ⁇ mol / ml
  • the data shown are the arithmetic mean values from 3 determinations.
  • the error bars represent the standard deviation.
  • Fig. 13 shows the influence of storage conditions and use concentrations of the drug on the size of BIIC 1996 BS liposomes (Example 6).
  • Liposome sizes after production (•), after 2 days (D), after 28 days after storage at 4 ° C ( ⁇ ) and after 28 days storage at room temperature (19 - 24 ° C) (O) with the light closed.
  • Lipid composition HSPC / DSPG-Na (21/49/30)
  • the data shown are the arithmetic mean values from FIG. 3
  • Fig. 14 shows nebulization stability of BIIC 1996 BS liposome dispersions (Example 7).
  • the liposome dispersions were nebulized using the Respirgard II ⁇ 10 system.
  • the data shown are the arithmetic mean of 5 determinations.
  • the error bars represent the standard deviation.

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Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft eine pharmazeutische Zubereitung in Form von Liposomen, geeignet für die Solubilisation von schwer löslichen Arzneistoffen, insbesondere von schwer löslichen Neurokinin-Antagonisten, wie beispielsweise (+)-Campher-3-carbonyl-(2S, 4R)-4-hydroxypyrolyl-(2S)-2-naphthylalanyl-(2-methoxyphenyl)piperazid oder 1-Methylindol-3-yl-carbonyl-[4(R)-hydroxy]-L-prolyl-[3-(2-naphthyl)]-L-alanin-N-benzyl-N-methylamid.

Description

Pharmazeutische Zubereitung in Form von Liposomen
Die vorliegende Erfindung betrifft eine pharmazeutische Zubereitung in Form von Liposomen, geeignet für die Solubilisation von schwer löslichen Arzneistoffen, insbesondere von schwer löslichen Neurokinin-Antagonisten, wie z. B. (+)- Campher-3-carbonyl-(2S, 4R)-4-hydroxypyrolyl(2S)-2-naphthylalanyl-(2- methoxyphenyl)piperazid [BIIC 1996 BS] oder 1-Methylindol-3-yl-carbonyl-[4(R)- hydrxoy]-L-prolyl-[3-(2-naphthyl)]-L-alanin-N-benzyl-N-methylamid [FK 888],
Unter Liposomen versteht man im allgemeinen kugelförmige Gebilde - mit einem Durchmesser von 25 nm bis mehrere μm - aus einer oder mehreren konzentrischen Lipid-Doppelschicht(en) mit einem wäßrigen Innenraum. Derartige Lipidvesikel lassen sich durch mechanische Feinstverteilung von Phospholipiden (z.B. Lecithin) in wäßrigen Medien herstellen. Sie dienen nicht nur in der Biochemie oder Molekularbiologie als Membranmodelle, sondern können auch als Träger für Arzneimittel eingesetzt werden.
Aus dem Stand der Technik sind zahlreiche Wirkstoffe bekannt, welche in Liposomen eingeschlossen oder an Liposomen adsorbiert werden. Derartige liposomale Systeme werden immer dann bevorzugt, wenn der Wirkstoff über einen längeren Zeitraum freigesetzt werden soll, unerwünschte Arzneistoffwirkungen gesenkt werden sollen, der Wirkstoff stabilisiert werden soll oder Liposomen als tragetselektives Arzneistoffvehikel dienen sollen [P. Tyle und B.P. Ram, Targeted Therapeutic Systems, Marcel Dekker Inc., New York, 1990; G. Gregoriadis, Liposome Technology Vol. III, Targeted Drug Delvery and Biological Interaction, CRC Press Inc., Boca Raton, 1984]. In Liposomen oben genannter Zielsetzung wurden bislang meist hinreichend wasserlösliche Arzneistoffe eingeschlossen [M.J. Ostro, Liposome - From Biophysics to Therapeutics, Marcel Dekker Inc., New York, 1987, G. Gregoriadis Liposome Technology Vol. II, Incorporation of Drugs, Proteins and Genetic Material, CRC Press Inc., Boca Raton 1984].
Seit kurzem gewinnt der Aspekt der Arzneistoff-Solubilisierung durch Liposomen zunehmende Bedeutung. Im Rahmen erster Forschungsarbeiten blieben die Gesetzmäßigkeiten des liposomalen Arzneistoffeinschlusses bislang jedoch relativ unerforscht. Ziel der Arzneistoffsolubilisierung allgemein ist es, den Arzneistoff in einer meist wäßrigen Formulierung in molekulardisperser Verteilung vorliegen zu haben. Diese Formulierung kann dann auf den bekannten Applikationswegen verabreicht werden.
Durch Liposomen solubilisierte Arzneistoff-Zubereitungen sollten folgende Kriterien erfüllen:
Der Arzneistoff sollte im Liposomen-Bilayer in molekulardisperser Form eingeschlossen werden unter der Maßgabe, daß das Verhältnis von eingeschlossenem Arzneistoff zur eingesetzten Lipidmenge möglichst hoch ist. Ebenso sollten die Arzneistoff-Liposomen eine dem Verwendungszweck angepaßte Wirkstoff- und Größenstabilität aufweisen.
Für eine Vielzahl von Applikationsformen ist es unabdingbar, sterile Liposomenpräparationen herstellen zu können, so zum Beispiel durch Entkeimungsfiltration mit Membranfiltern mit 0,2 μm Porendurchmesser. Kleine Liposomen, d.h. < 200 nm Liposomendurchmesser, sind anzustreben, um eine hinreichende Stabilität der Liposomen bei mechanischer Agitation zu erhalten. Dies ist zum Beispiel bei der Vernebelung wäßriger Liposomenzubereitungen mittels pneumatischer Düsenzerstäuber für die inhalative Applikation erforderlich. Zur Vermeidung von embolischen Infusions-Zwischenfällen muß gewährleistet sein, daß die Größe der injizierten Liposomen einerseits einen kritischen Wert nicht überschreitet, und daß andererseits die Liposomen nach intravenöser Verabreichung keine Aggregate dieser kritischen Größe bilden. Für die Anwendung am Patienten allgemein, sowie für die intravenöse Applikation im Besonderen, sind als Solubilisatoren nur physiologisch unbedenkliche Hilfsstoffe einzusetzen. Die beispielhaft vorgestellten Liposomenkomponenten sind als körpereigene Bestandteile unter anderen dazu geeignet, weil sie auf der einen Seite nicht toxisch und auf der anderene Seite gut verträglich sind, und vom Körper rückstandslos abgebaut werden.
Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht nunmehr darin, eine Arzneistoffformulierung auf der Basis von Liposomen für die Solubilisierung schwer löslicher Arzneistoffe insbesondere für Neurokinin (Tachykinin)- Antagonisten, wie sie in der allgemeinen Formel, den bevorzugten Bereichen und in den Ausführungsbeispielen der WO 95/30687 offenbart werden, zur Verfügung zu stellen. - Eine vornehmliche Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, eine Arzneistoffformulierung auf der Basis von Liposomen für die Solubilisierung der Wirkstoffe (+) -Campher-3-carboπyl-(2S,4R)-4-hydroxyprolyl-(2S)-2- naphthylalanyl-(2-methoxyphenyl)pιperazιd [BIIC 1996 BS] und 1-Methylιndol-3- yl-carbonyl-[4(R)-hydrxoy]-L-prolyl-[3-(2-naphthyl)]-L-alanιn-N-benzyl-N- methylamid [FK 888] (vgl Ann Drug Data Rep 15 (1993) 252) zur Verfugung zu stellen Daneben lassen sich aber auch mit Corticoiden - wie z B Flunisolid Hemihydrat oder Beclomethason Dipropionat - liposomale Einschlußverbindungen mit den erfmdungsgemaß vorgeschlagenen Verbindungen herstellen
BIIC 1996 ist ein nicht selektiver Neurokinin-Antagonist, der mit Affinitaten im nanomolaren Bereich an den NK-|-, NK2- und NK3-Rezepor bindet überraschenderweise wurde gefunden, daß die erfindungsgemaßen Liposomenformuherungen zur Solubilisierung von pharmazeutischen Wirkstoffen, die mit den im folgenden beschriebenen Liposomenkomponenten hergestellt werden, besondere Vorteile aufweisen Die erfindungsgemaßen arzneistoffhaltigen Liposomenpraparationen losen somit die eingangs genannte Aufgabenstellung und stellen daher einen beachtlichen Fortschritt bei der Solubilisation von schwer wasserlöslichen, lipophilen Arzneistoffen dar
Die erfindungsgemaßen Liposomenzusammensetzungen zeichnen sich u a dadurch aus, daß liposomenbildende, amphiphile Hilfsstoffe, deren physikalisch- chemischer Charakter des hydrophilen Molekulanteils von Glycerol oder Inositol bestimmt wird, in besonderer Weise dazu geeignet sind, große Mengen von schwer löslichen Arzneistoffen - insbesondere die schon erwähnten Neurokininantagonisten BIIC 1996 BS und FK 888 - in Liposomen einzuschließen
Gemäß der Erfindung entsprechen die liposomenbildenden Hilfsstoffe den allgemeinen Formeln I und II der Abb 1 , in denen R^ und R2 in beiden allgemeinen Formeln unabhängig voneinander einen verzweigten oder unverzweigten Alkylrest einer naturlichen, halb- oder vollsynthetisch herstellbaren Fettsaure - gesattigten oder ungesättigten Charakters - mit 1 bis 30 Kohlenstoffatomen aufweisen
Als Beispiel für gesattigte unverzweigte Fettsauren seien genannt Ameisensaure, Essigsaure, Propionsaure, Buttersaure, Valeπansaure, Capronsaure, Onanthsaure, Caprylsaure, Pelargonsaure, Caprinsaure, Undecansaure, Launnsaure, Tπdecansaure, Myπstinsaure, Pentadecansaure, Palmitinsaure, Margarinsaure, Stearinsaure, Nonadecansaure, Arachinsaure, Behensaure, Lignocennsaure, Cerotmsaure, Melissinsaure Als Beispiel für gesattigte verzweigte Fettsauren seien genannt Isobuttersaure, Isovaleπansaure, Tubercolosteaπnsaure
Als Beispiele für einfach ungesättigte unverzweigte Fettsauren seien genannt Acrylsaure, Crotonsaure, Palmitoleinsaure, Olsaure, Erucasaure
Als Beispiele für zweifach gesattigte unverzweigte Fettsauren seien Sorbin- und Linolsaure genannt
Als Beispiele für dreifach gesattigte unverzweigte Fettsauren seien Linolen- und Elaosteaπnsaure genannt
Als Beispiele für eine vier- und fünffach ungesättigte unverzweigte Fettsaure seien jeweils Arachidonsaure und Clupanodonsaure genannt
Als Beispiel für eine sechsfach ungesättigte unverzweigte Fettsaure sei Docosahexaensaure genannt
Bevorzugt werden Phosphatidyl-Glycerole und Phosphatidyl-Ionsitole in Form der freien Sauren oder deren Salzen - insbesondere in Form der Alkali-Salze - eingesetzt, ganz besonders bevorzugt werden die Natriumsalze eigesetzt
Besonders bevorzugt werden folgende Phosphatidylglycerole eingesetzt
Natrium-Salze von Dimyπstoylphosphatidylglycerol (DMPG-Na), Dipalmitoylphosphatidylglycerol (DPPG-Na) und Distearoylphosphatidylglycerol (DSPG-Na)
Als Phosphatidylinositole werden besonders bevorzugt folgende Verbindungen eingesetzt
Natrium-Salze von Dimyπstoylphosphatidylinositol (DMPI-Na), Dipalmitoylphosphatidylinositol (DPPI-Na) und Disteraroylphosphatidylinositol (DSPI-Na)
Fig 1 gibt zur Verdeutlichung den strukturellen Aufbau von Phosphatidylglycerolen und Phosphatidyhnositolen, insbesondere die Strukturformel des Natriumsalzes von Phosphatidylglycerolen und Phosphatidyl- Inositolen wieder Die erfindungsgemäßen Liposomenkomponenten sind dadurch charakterisiert, daß sie zu beliebigen weiteren Liposomenkomponenten in Anteilen von größer 0 mol-% bis zu 100 mol-% zugesetzt werden.
Die mittels der erfindungsgemaßen Liposomenbestandteile hergestellten Liposomen - insbesondere BIIC 1996-haltιge Liposomen - weisen folgende Vorteile auf.
1 Der Gehalt der pharmazeutisch wirksamen Komponente kann durch Zugabe der erfindungsgemäßen Liposomenkomponenten stark gesteigert werden. Zur Erlangung einer hohen Wirkstoffkonzentration kann aus diesem Grunde auf eine kostenintensive Konzentrationssteigerung der übrigen Liposomenbestandteile verzichtet werden
2 Durch Variation des molaren Anteils der erfindungsgemäßen Liposomenkomponenten kann der Maximaleinschluß des Arzneistoffs über einen weiten Bereich gesteuert werden
3 Für die einfache Herstellung von wirkstoffhaltigen Liposomen in einem Größenbereich <200 nm sind die erfindungsgemäßen Liposomenkomponenten unabdingbar
4. Durch Variation des Gesamtlipidgehaltes kann die Konzentration des solubiliserten Arzneistoffs gesteuert werden
5 Der liposomal eingeschlossene Arzneistoff - insbesondere der Neurokininantagonist BIIC 1996 BS - stabilisiert die Liposomen hinsichtlich des Größenwachstums.
6 Durch Cholesterolzusatz können Liposomen mit untermaximal eingeschlossenem Arzneistoff hinsichtlich des Größenwachstums stabilisiert werden
7. Sowohl bei mechanischer Agitation, als auch bei fortschreitender Lagerdauer weisen arzneistoffhaltige Liposomen keine Tendenz zur Freigabe von vormals eingeschlossenem Arzneistoff auf.
Unter Lιpιd(en) sind im folgenden alle Bestandteile der Liposomenbilayer mit Ausnahme des liposomal eingeschlossenen Arzneistoffs zu verstehen Die Liposomen aus den erfindungsgemäß vorgeschlagenen Liposomenbestandteilen können nach verschiedenen Verfahren hergestellt werden. Die folgenden Beispiele erläutern die Verfahren zur Herstellung von Liposomen mit lipophilen Arzneistoffen für die erfindungsgemäßen Lipidzusammensetzungen und sind an sich aus dem Stand der Technik bekannt. [M. J. Ostro, Liposomes, Marcel Dekker, New York, 1983; G. Gregroiadis, Liposome Technology Vol. I, Preparation of Liposomes, CRC Press Inc. Boca Raton, 1984]:
Mechanische Methoden
Die Hydratisierung der aus organischen Medien gewonnenen Lipid-Arzneistoff- Mischungen oder Hydratisierung von Lipiden und Arzneistoff ohne vorherige "Filmbildung" aus organischer Lösung, erfolgt mit wäßrigen Dispersionsmitteln.
Die durch spontane Vesikelbildung während der Hydratation entstandenen Liposomen können in ihrer Größe variiert werden. Diese Dispergierung kann durch mechanischen Energieeintrag unterschiedlicher Genese erfolgen, so zum Beispiel durch einfache Handschüttelung, Einsatz von Schüttelgeräten, durch Extrusion durch Membranfilter genau definierter Porengröße, Extrusion unter hohem Druck durch diverse enge Düsen, durch Einsatz verschiedenster Rühr- und Mix-Geräte und durch Ultrabeschallung.
Lösungsmittelentzug
Entfernung eines organischen Lösungsmittels aus W/O-Emulsionen, bestehend aus organischem Lösungsmittel, Wasser, Lipide und Arzneistoff.
Injektionsmethode
Injektion organischer Lipid-Arzneistoff-Lösungen in wäßrige Dispersionsmittel mit oder ohne nachfolgender Entfernung des organischen Lösungsmittels.
Detergensmethode
Detergensentfernung aus Lipid-Arzneistoff-Detergens-Mizellen beispielsweise via Dialyse. Gefriertrocknungsmethode
Durch spontane Vesikelbildung gefriergetrockneter Lipid-Arzneistoff-Mischungen, entstehen bei der Hydratation wirkstoffhaltige Liposomen Bei der Hydratation gefriergetrockneter Liposomen werden arzπeistoffhaltige Liposomen rekonstituiert
Fπer-Tau-Methode
Durch wiederholtes Frieren und Auftauen wäßriger Lipid-Arzneistoff-Systeme entstehen Liposomendispersionen
Einzelne Apphkationsformen der erfindungsgemaßen Liposomenformulierungen sind nachfolgend aufgeführt, ohne jedoch die Vielfältigkeit der Einsatzmoglichkeiten des erfindungsgemaßen Systems zu beschranken Mit den erfindungsgemaßen Liposomenkomponenten hergestellte Liposomen können p o , ι v , s c , ι c , dermal, intrapulmonal, nasal, i p , rektal, i m ocular oder intrazerebral appliziert werden
Die beschriebene Erfindung wird nunmehr in den nachfolgenden Beispielen erläutert Verschiedenartige, andere Ausgestaltungen werden für den Fachmann aus der vorliegenden Beschreibung ersichtlich Es wird jedoch ausdrücklich darauf hingewiesen, daß die Beispiele und die Beschreibung lediglich zur Erläuterung vorgesehen und nicht als Einschränkung der Erfindung anzusehen sind
Beispiele
Vorbemerkung
Allgemeine Herstellungsmethode für die folgenden Beispiele
Die betrachteten Lipide wurden in einen Rundkolben mit langem Hals eingewogen und mit einer geeigneten Mischung aus Chloroform und Methanol, eventuell unter Anwendung von Warme gelöst. In Methanol gelöster Arzneistoff wurde zupipettiert. Am Rotationsverdampfer wurde das Lösungsmittelgemisch abrotiert und getrocknet. Zur vollständigen Entfernung von Restlösungsmittel wurde der Lipidfilm im Vakuumtrockenschrank nachgetrocknet Nach Stickstoffbegasung wurde der Lipidfilm bis zur Hydration bei -18°C gelagert. Zur Herstellung der Liposomen wurde Lipidfilm mit Glucoselösung 5 % (m/V) hydratisiert. Die Hydratation wurde über ca 4 Stunden bei 75°C durchgeführt, wobei zu leichteren Dispergierung und Hydratisierung des Lipid-Arzneistoffgemisches dem Ansatz ca 10 - 13 Glaskugeln mit einem Durchmesser von 6 mm zugegeben wurden Von Zeit zu Zeit wurde der Rundkolben wahrend der Hydration per Hand kräftig geschüttelt. Die entstandenen Liposomen wurden zur Größenreduktion einer Ultrabeschallung unterzogen Hierzu wurde die Liposomendispersion in dickwandige Beschallungsglaser umgefüllt und mit dem Branson Sonifier B 15 Cell Disruptor beschallt Für die Standardansatzgrόße von 10 ml wurden folgende Geräteparameter gewählt. Schalistab 1/2"; Beschallungsdauer 20 Minuten, Beschallungsart gepulst; Duty Cycle 70 %; Output Control 8, Temperierbad 50°C Zur Entfernung von Metallabrieb, größeren Liposomen und nicht-hposomal- eingeschlossenem Arzneistoff wurde die abgekühlte Praparation zuerst 15 min mit 1900 g zentrifugiert, und anschließend der Zentrifugationsüberstand durch einen Menbranfilter mit Porenweite 0,2 μm gedrückt Die Liposomengröße wurde im Filtrat bestimmt und die Praparation 24 Stunden bei 4°C und 24 Stunden bei Raumtemperatur gelagert. Die Liposomengröße war im Mittel stets kleiner 100 nm. Nach abermaliger Filtration durch einen Membranfilter mit Porenweite 0,2 μm wurde im Filtrat die Liposomengröße, der Arzneistoffgehalt und der Lipidgehalt bestimmt Für Untersuchungen über den Lagerungszeitraum wurden die Chargen zweigeteilt und nach "Filtration durch bakteπenzuruckhaltende Filter" (DAB 10) bei den Temperaturen 4°C und Raumtemperatur unter Lichtabschluß eingelagert Tabelle 1
Abkürzungen der verwendeten Lipide
Abkürzung Lipid
DSPG-Na Distearoylphosphatidylglycerol, Na-Salz
HSPC Hydriertes Soja-Phosphatidylcholin (Handelsname
Phospholipon® 100 H, Fa. Nattermann, Köln (D))
CH Cholesterol
Pl-Na Phosphatidyl-Inositol, Na-Salz
DPPS Dipalmitolylphosphatidylsenn
DPPA Dipalmitoylphosphatidylsaure
Beispiel 1
Einfluß verschiedener Lipide auf den liposomalen Einschluß von BIIC 1996 BS
Die vier Lipide DSPG-Na, Pl-Na, DPPS und DPPA wurden in einer Kombination mit 30 mol-% HSPC auf ihr Einschlußvermögen bezüglich BIIC 1996 BS getestet Zum Einsatz kam eine Lipidkonzentration von 5 μmol/ml und eine Arzneistoffkonzentration von 10,2 mg/ml Abb. 2 zeigt das entsprechende Resultat, wonach nur die glycerol- und inositol-haltigen Lipide ein befπedigendes Ergebnis zeigten Der Quotient D/L bezeichnet das molare Verhältnis von liposomal eingeschlossenem BIIC 1996 BS und Lipid Beispiel 2
Einfluß von Phosphatidyl-Glycerol auf den liposomalen Einschluß von BIIC 1996 BS
Als Lipidmischung wurde HSPC/DSPG-Na in variierenden Zusammensetzungen getestet.
Tab. 2 faßt die untersuchten Lipidmischungen zusammen:
Tabelle 2
Untersuchte Lipidmischungen
HSPC DSPG-Na CH
[mol-%] [mol-%] [mol-%]
70 30 0
50 50 0
30 70 0
0 100 0
49 21 30
35 35 30
21 49 30
0 70 30
0 85 15
0 55 45
0 40 60
27,75 64,75 7,5
25,5 59,5 15
16,5 38,5 45
12 28 60
Je mehr DSPG-Na den verschiedenen Lipidmischungen zugesetzt wird, umso mehr Wirkstoff (BIIC 1996 BS) konnte liposomal eingeschlossen werden. Bei der betrachteten Lipidkonzentration von 45 μmol/ml sind mit der angewendeten Herstellungsmethode ohne DSPG-Na-Zusatz keine Praparationeπ mit Liposomen <200 nm herstellbar
Fig 3 - Fig 6 stellen die Ergebnisse graphisch dar
Beispiel 3
Einfluß der Lipidkonzentration auf den liposomalen Einschluß von BIIC 1996 BS Für die Lipidzusammensetzungen HSPC/DSPG-Na/CH (21/49/30) und HSPC/DSPG-Na (30/70) wurden die Lipidkonzentrationen von 0 μmol/ml bis 75 μmol/ml variiert Abb 7 zeigt, daß die Menge an eingeschlossenem BIIC 1996 BS mit steigender Lipidkonzentration zunimmt, so daß sich der Arzneistoffgehalt steuern ließ
Beispiel 4
Einfluß der Einsatzkonzentration des Arzneistoffs auf den liposomalen Einschluß von BIIC 1996 BS
Für die Lipidzusammensetzungen HSPC/DSPG-Na (30/70) und HSPC/DSPG- Na/CH (21/49/30) wurden die Arzneistoffkonzentrationen zwischen 0 mg/ml bis 10,2 mg/ml variiert
Fig 8 und Fig 9 stellen die Ergebnisse graphisch dar, sie belegen, daß mit steigender Menge des eingesetzten Arzneistoffs die Menge des liposomal eingeschlossenen Arzneistoffs bis zur Sattigungsgrenze linear zunahm Die Menge des eingeschlossenen BIIC 1996 BS ließ sich so hervorragend steuern
Beispiel 5
Einfluß von Lagerbedingungen und Einsatzkonzentration auf den Arzneistoffgehalt von BIIC 1996 BS-Liposomen
Für die Lipidzusammensetzungen HSPC/DSPG-Na (30/70) und HSPC/DSPG- Na/Cl (21/49/30) wurden die Arzneistoffkonzentrationen zwischen 0 mg/ml bis 10,2 mg/ml variiert und die Einschlußraten 2 Tage nach Herstellung und 28 Tage nach Herstellung untersucht. Die Lagerbedingungen waren 4°C und Raumtemperatur (19 - 24°C) unter Lichtabschluß. Fig. 10 und Fig. 11 stellen die Ergebnisse graphisch dar, die zeigen, daß der Arzneistoffeinschluß sich während des Untersuchungszeitraumes nicht signifikant veränderte.
Beispiel 6
Einfluß von Lagerbedingungen und Einsatzkonzentration auf die Größe von BIIC 1996 BS-Liposomen
Für die Lipidzusammensetzungen HSPC/DSPG-Na (30/70) und HSPC/DSPG- Na/CH (21/49/30) wurden die Arzneistoffkonzentrationen zwischen 0 mg/ml bis 10,2 mg/ml variiert und die Liposomengröße nach Herstellung, 2 Tage nach Herstellung und 28 Tage nach Herstellung untersucht. Die Lagerbedingungen waren 4°C und Raumtemperatur (19 - 24°C) unter Lichtabschluß.
Steigende BIIC 1996 BS-Mengen stabilisierten die Liposomengröße (Fig. 12). Ein Cholesterolzusatz von 30 mol-% stabilisierte Liposomen mit unter maximal eingeschlossenem Arzneistoff hinsichtlich des Größenwachstums (Fig. 13).
Beispiel 7
Stabilität von BIIC 1996 BS-Liposomen
Liposomendispersionen der Lipidzusammensetzung HSPC/DSPG-Na.(30/70) mit der Arzneistoffkonzentration 3,5 mg/ml und HSPC/DSPG-Na/CH (21/49/30) mit der Arzneistoffkonzentration 3,0 mg/ml wurden bei einer Lipidkonzentration von 45 μmol/ml mit dem Respirgard II δ10-Vemebelungssystem vernebelt. Der Düsengasfiuß betrug 6 l/min, die Vernebelungsdauer 22,53 min + 2,13 min (x + SD). Vor und nach der Vernebelung wurde die im Reservoir befindliche Vernebelungslösung hinsichtlich des Arzneistoffgehaltes untersucht. Mittels des Andersen 1-AFCM Non-Viable Ambient Particie Sizing Sampler Mark II, betπeben mit wasserdampfgesättigter Zuluft, aufgefangenes Aerosol wurde, ebenfalls untersucht. Fig. 14 verdeutlicht die große Gehaltsstabilität der betrachteten Liposomen bei sehr starker mechanischer Belastung, wie sie während der Düsenvemebelung auftritt. Erläuterung der Zeichnungen
Fig 1 zeigt den strukturellen Aufbau von Phosphatidylglycerolen und Phosphatidylinositolen - insbesondere die Strukturformel des Natriumsalzes von Phosphatidylglycerolen und Phosphatidyl-Iπositolen [G Cevc, D Marsh, Phosphohpid Bilayers, Physikal Pnnciples and Models, John Wiley & Sons Ine , New York, 1987, D Arndt, I Fichtner, Liposomen, Darstellung - Eigenschaften - Anwendung, Akademie Verlag Berlin, 1986]
Fig 2 Einfluß verschiedener Lipide auf den liposomalen Einschluß von BIIC 1996 BS (Beispiel 1 )
Einschlußraten 2 Tage nach Herstellung Lipidzusammensetzung HSPC / Lipid (30/70) Einsatzkonzentrationen BIIC 1996 BS > 10 mg/ml
Lipid 5 μmol/ml Die gezeigten Daten sind die arithmetischen Mittelwerte aus 3 Bestimmungen Die Fehlerbalken repräsentieren die Standardabweichung
Fig 3 zeigt den Einfluß von Phosphatidyl-Glycerol auf den liposomalen Einschluß von BIIC 1996 BS (Beispiel 2)
Einschlußraten 2 Tage nach Herstellung Einsatzkonzentrationen BIIC 1996 BS > 10 mg/ml
Lipid 45 μmol/ml
Die gezeigten Daten sind die arithmetischen Mittelwerte aus 3 Bestimmungen Die Fehlerbalken repräsentieren die Standardabweichung
Fig 4 zeigt den Einfluß von Phosphatidyl-Glycerol auf den liposomalen Einschluß von BIIC 1996 BS in Dreikomponentenlipidsystemen mit konstantem Cholesterolanteil (Beispiel 2) Einschlußraten 2 Tage nach Herstellung. Einsatzkoπzentrationen: BIIC 1996 BS > 10 mg/ml
Lipid 45 μmol/ml Die gezeigten Daten sind die arithmetischen Mittelwerte aus 3 Bestimmungen. Die Fehlerbalken repräsentieren die Standardabweichung.
Fig. 5: zeigt den Einfluß von Phosphatidyl-Glycerol auf den liposomalen
Einschluß von BIIC 1996 BS in Zweikomponentenlipidsystemen mit Cholesterol (Beispiel 2).
(•) D/L = D/DSPG-Na (D) D/L = D/(DSPG-Na + CH) Einschlußraten 2 Tage nach Herstellung Einsatzkonzentrationen: BIIC 1996 BS > 10 mg/ml
Lipid 45 μmol/ml
Die gezeigten Daten sind die arithmetischen Mittelwerte aus 3 Bestimmungen. Die Fehlerbalken repräsentieren die Standardabweichung.
Fig. 6: zeigt den Einfluß von Phosphatidyl-Glycerol auf den liposomalen
Einschluß von BIIC 1996 BS in Dreikomponentensystemen mit variablem Cholesterolanteil (Beispiel 2).
(•) D/L = D/(HSPC + DSPG-Na) (D) D/L = D/(HSPC + DSPG-Na + CH) Einschlußraten 2 Tage nach Herstellung Einsatzkonzentrationen: BIIC 1996 BS > 10 mg/ml
Lipid 45 μmol/ml
Die gezeigten Daten sind die arithmetischen Mittelwerte aus 3 Bestimmungen. Die Fehlerbalken repräsentieren die Standardabweichung. gibt den Einfluß der Lipidkonzentration auf den liposomalen Einschluß von BIIC 1996 BS (Beispiel 3) wieder
(•) HSPC/DSPG-Na (30/70) (O) HSPC/DSPG-Na/CH (21/49/30) Einschlußraten 2 Tage nach Herstellung Einsatzkonzentrationen BIIC 1996 BS > 10 mg/ml
Die gezeigten Daten sind die arithmetischen Mittelwerte aus 3
Bestimmungen
Die Fehlerbalken repräsentieren die Standardabweichung
zeigt den Einfluß der Einsatzkonzentration des Arzneistoffs auf den liposomalen Einschluß von BIIC 1996 BS (Beispiel 4)
Einschlußraten 2 Tage nach Herstellung Lipidzusammensetzung HSPC/DSPG-Na (30/70) Einsatzkonzentrationen Lipid 45 μmol/ml
Die gezeigten Daten sind die arithmetischen Mittelwerte aus 3 Bestimmungen Die Fehlerbalken repräsentieren die Standardabweichung
zeigt den Einfluß der Einsatzkonzentration des Arzneistoffs auf den liposomalen Einschluß von BIIC 1996 BS (Beispiel 4)
Einschlußraten 2 Tage nach Herstellung Lipidzusammensetzung HSPC/DSPG-Na/CH (21/49/30) Einsatzkonzentrationen Lipid 45 μmol/ml
Die gezeigten Daten sind die arithmetischen Mittelwerte aus 3 Bestimmungen Die Fehlerbalken repräsentieren die Standardabweichung 381 PC17EP97/03108
16
zeigt den Einfluß der Einsatzkonzentration des Arzneistoffs auf den liposomalen Einschluß von BIIC 1996 BS (Beispiel 5)
Einschlußraten 2 Tage nach Herstellung und 28 Tagen nach Lagerung bei 4°C und Raumtemperatur unter Lichtabschluß Lipidzusammensetzung HSPC/DSPG-Na/CH (30/70) Einsatzkonzentrationen Lipid 45 μmol/ml
Die gezeigten Daten sind die arithmetischen Mittelwerte aus 3 Bestimmungen Die Fehlerbalken repräsentieren die Standardabweichung
zeigt den Einfluß von Lagerbedingungen und Einsatzkonzentration des Arzneistoffs auf den liposomalen Einschluß von BIIC 1996 BS (Beispiel 5)
Einschlußraten 2 Tage nach Herstellung und 28 Tagen nach Lagerung bei 4°C und Raumtemperatur unter Lichtabschluß
Lipidzusammensetzung HSPC/DSPG-Na/CH (21/49/30)
Einsatzkonzentrationen Lipid 45 μmol/ml
Die gezeigten Daten sind die arithmetischen Mittelwerte aus 3
Bestimmungen Die Fehlerbalken repräsentieren die
Standardabweichung
zeigt den Einfluß von Lagerbedingungen und Einsatzkonzentrationen des Arzneistoffs auf die Große von BIIC 1996 BS-Liposomen (Beispiel 6)
Liposomengroßen nach Herstellung (•), nach 2 Tagen (D), nach 28 Tagen, nach Lagerung bei 4°C (■) und nach 28 Tagen Lagerung bei Raumtemperatur (19 - 24°C) (O) unter Lichtabschluß
Lipidzusammensetzung HSPC/DSPG-Na (30/70) Einsatzkonzentrationen Lipid 45 μmol/ml Die gezeigten Daten sind die arithmetischen Mittelwerte aus 3 Bestimmungen. Die Fehlerbalken repräsentieren die Standardabweichung.
Fig. 13: zeigt den Einfluß von Lagerbedingungen und Einsatzkonzentrationen des Arzneistoffs auf die Größe von BIIC 1996 BS-Liposomen (Beispiel 6).
Liposomengrößen nach Herstellung (•), nach 2 Tagen (D), nach 28 Tagen nach Lagerung bei 4°C (■) und nach 28 Tagen Lagerung bei Raumtemperatur (19 - 24°C) (O) unter Lichtabschluß.
Lipidzusammensetzung: HSPC/DSPG-Na (21/49/30)
Einsatzkonzentrationen: Lipid 45 μmol/ml
Die gezeigten Daten sind die arithmetischen Mittelwerte aus 3
Bestimmungen. Die Fehlerbalken repräsentieren die
Standardabweichung.
Fig. 14: gibt Vernebelungsstabilität von BIIC 1996 BS-Liposomendispersionen (Beispiel 7) wieder.
Die Liposomendispersionen wurden mit dem Respirgard II δ10-System vernebelt.
Einsatzkonzentrationeπ:
BIIC 1996 BS HSPC/DSPG-Na (30/70) 3,5 mg/ml
HSPC/DSPG-Na/CH (21/49/30) 3,0 mg/ml Lipidkonzentration 45 μmol/ml
Düsengasfluß 6 l/min; Vernebelungsdauer 22,53 + 2,13 min (x + SD). Die gezeigten Daten sind die arithmetischen Mittelwerte aus 5 Bestimmungen. Die Fehlerbalken repräsentieren die Standardabweichung.

Claims

Patentansprüche
1. Verwendung von Phosphatidylglycerolen der allgemeinen Formel I und Phosphatidylinositolen der allgemeinen Formel II
in denen R-| und R2 in beiden allgemeinen Formeln unabhängig voneinander einen verzweigten oder unverzweigten Alkylrest einer natürlichen, halb- oder vollsynthetisch herstellbaren Fettsäure - gesättigten oder ungesättigten Charakters - mit 1 bis 30 Kohlenstoffatomen bedeutet, zur Herstellung einer pharmazeutischen Zubereitung in Form von Liposomen für schwer lösliche pharmazeutische Wirkstoffe.
2. Verwendung nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, daß R-i oder R2 unabhängig voneinander den Alkylrest einer gesättigten unverzwetgten Fettsäure aus der Gruppe Ameisensäure, Essigsäure, Propionsäure, Buttersäure, Valeriansäure, Capronsäure, Önanthsäure, Caprylsäure, Pelargonsäure, Caprinsäure, Undecansäure, Laurinsäure, Tridecansäure, Myristinsäure, Pentadecansäure, Palmitinsäure, Margarinsäure, Stearinsäure, Nonadecansäure, Arachinsäure, Behensäure, Lignocerinsäure, Cerotinsäure oder Melissinsäure bedeuten können.
3. Verwendung nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, daß R-| oder R2 unabhängig voneinander den Alkylrest einer gesättigten und verzweigten Fettsäure aus der Gruppe Isobuttersäure, Isovaleriansäure, Tubercolostearinsäure bedeuten können.
4. Verwendung nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, daß R-| oder R2 unabhängig voneinander den Alkylrest einer ungesättigten und unverzweigten Fettsäure aus der Gruppe Acrylsäure, Crotonsäure, Palmitoleinsäure, Ölsäure, Erucasäure bedeuten können.
5. Verwendung nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, daß Ri oder R2 unabhängig voneinander den Alkylrest einer zweifach ungesättigten und unverzweigten Fettsäure aus der Gruppe Sorbinsäure oder Linolsäure bedeuten können.
6. Verwendung nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, daß R-| oder R2 unabhängig voneinander den Alkylrest einer dreifach ungesättigten und unverzweigten Fettsäure aus der Gruppe Linolensäure oder Elaostearinsäure bedeuten können.
7. Verwendung nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, daß R-| oder R2 unabhängig voneinander Arachidonsäure, Clupanodonsäure oder Docosahexaensäure bedeuten können.
8. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Phosphatidyl-Glycerole und Phosphatidyl-Inositole in Form der freien Säuren oder deren Salze eingesetzt werden.
9. Verwendung nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß die Phosphatidyl-Glycerole und Phosphatidyl-Inositole in Form ihrer Alkali-Salze eingesetzt werden.
10. Verwendung nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß die Phosphatidyl-Glycerole und Phosphatidyl-Inositole in Form ihrer Natriumsalze eingesetzt werden.
11. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 10, dadurch gekennzeichnet, daß als Phosphatidylglycerole der allgemeinen Formel I die Natrium-Salze von Dimyristoylphosphatidylglycerol (DMPG-Na), Dipalmitoylphosphatidylglycerol (DPPG-Na) und Distearoylphosphatidylglycerol (DSPG-Na) in Konzentrationen von 0 bis 100 mol-% bezogen auf die Bestandteile der liposomalen Lipiddoppelschicht eingesetzt werden.
12. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 11 , dadurch gekennzeichnet, daß als Phosphatidylinositole der allgemeinen Formel I die Natrium-Salze von Dimyristoylphosphatidylinositol (DMPI-Na), Dipalmitoylphosphatidylinositol (DPPI-Na) und Disteraroylphosphatidylinositol (DSPI-Na) in Konzentrationen von 0 bis 100 mol-% bezogen auf die Bestandteile der liposomalen Lipiddoppelschicht eingesetzt werden.
13. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 12, dadurch gekennzeichnet, daß als Arzneimittel schwer-wasserlösliche pharmazeutische Wirkstoffe eingesetzt werden.
14. Verwendung nach Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, daß als pharmazeutische Wirkstoffe schwer lösliche Neurokinin (Tachykinin)- Antagonisten eingesetzt werden.
15. Verwendung nach Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, daß als Neurokinin Antagonisten (+) -Campher-3-carbonyl-(2S,4R)-4-hydroxyprolyl-(2S)-2- naphthylalanyl-(2-methoxyphenyl)piperazid oder 1 -Methylindol-3-yl-carbonyl- [4(R)-hydrxoy]-L-prolyl-[3-(2-naphthyl)]-L-alanin-N-benzyl-N-methylamid eingesetzt werden.
16. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 12, dadurch gekennzeichnet, daß als pharmazeutische Wirkstoffe Corticoide eingesetzt werden.
17. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 12, dadurch gekennzeichnet, daß als pharmazeutische Wirkstoffe Flunisolid Hemihydrat oder Beclomethason Dipropionat eingesetzt werden.
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