EA032552B1 - Препараты с контролируемым высвобождением для доставки ингибиторов hif-1 - Google Patents

Препараты с контролируемым высвобождением для доставки ингибиторов hif-1 Download PDF

Info

Publication number
EA032552B1
EA032552B1 EA201491710A EA201491710A EA032552B1 EA 032552 B1 EA032552 B1 EA 032552B1 EA 201491710 A EA201491710 A EA 201491710A EA 201491710 A EA201491710 A EA 201491710A EA 032552 B1 EA032552 B1 EA 032552B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
polymer
poly
polymer conjugate
drug
conjugate according
Prior art date
Application number
EA201491710A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201491710A1 (ru
Inventor
Джастин Скот Хэйнс
Питер Энтони Кампочиаро
Цзе Фу
Original Assignee
Дзе Джонс Хопкинс Юниверсити
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Дзе Джонс Хопкинс Юниверсити filed Critical Дзе Джонс Хопкинс Юниверсити
Publication of EA201491710A1 publication Critical patent/EA201491710A1/ru
Publication of EA032552B1 publication Critical patent/EA032552B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6905—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a colloid or an emulsion
    • A61K47/6907—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a colloid or an emulsion the form being a microemulsion, nanoemulsion or micelle
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/10—Ophthalmic agents for accommodation disorders, e.g. myopia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Other Resins Obtained By Reactions Not Involving Carbon-To-Carbon Unsaturated Bonds (AREA)

Abstract

Предложены лекарственные препараты с контролируемым высвобождением для доставки одного или более ингибиторов HIF-1. Препараты с контролируемым высвобождением содержат один или более ингибиторов HIF-1, конъюгированных с или диспергированных в полимерном носителе. В некоторых случаях один или более ингибиторов HIF-1 диспергированы или инкапсулированы в полимерной матрице. В предпочтительных вариантах осуществления один или более ингибиторов HIF-1 ковалентно связаны с полимером, образуя конъюгат полимер-лекарственное средство. Из полимерных носителей могут быть образованы имплантаты, микрочастицы, наночастицы или их сочетание для введения. Препараты с контролируемым высвобождением ингибиторов HIF-1 обеспечивают продолжительное благоприятное терапевтическое действие, при этом снижаются побочные эффекты за счет высвобождения низких уровней одного или более ингибиторов HIF-1 и/или конъюгатов ингибиторов HIF-1 в течение продолжительного периода времени. Лекарственные препараты с контролируемым высвобождением для доставки одного или более ингибиторов HIF-1 можно использовать для лечения или профилактики заболевания или нарушения у пациента, которое связано с васкуляризацией, включая рак, ожирение, а также глазные заболевания, такие как мокрая ВДМ.

Description

Изобретение относится к полимерным препаратам с контролируемым высвобождением для доставки эффективного количества одного или более ингибиторов ΗΙΕ-1, в частности, в глаза, а также к способам их применения для лечения и профилактики заболеваний, в частности для лечения или профилактики глазных заболеваний.
Уровень техники изобретения
Индуцируемый гипоксией фактор 1 (ΗΙΕ-1) представляет собой транскрипционный фактор, который контролирует экспрессию более 60 генов-мишеней, продукты которых играют ключевую роль во многих процессах, включая ангиогенез. Например, экспрессия фактора роста эндотелия сосудов (УЕСЕ), наиболее важного известного регулятора ангиогенеза, стимулируется ΗΙΕ-1. Активный ΗΙΕ-1 состоит из альфа (ΗΙΕ-1α, 2α) и бета (ΗΙΕ-1β) субъединиц, которые димеризуются и связываются с консенсусными последовательностями (отвечающими на гипоксию элементами, ΗΒΕ) в регуляторных областях геновмишеней. В нормоксии ΗΙΕ-1 гидроксилируется и взаимодействует с белком Гиппеля-Линдау (рУНЬ), субъединицей Е3 убиквитин-лигазы, который делает ΗΙΕ мишенью для деградации. В отсутствие кислорода гидроксилирование ΗΙΕ ингибируется, что предотвращает связывание с рУИЬ и приводит к его накоплению внутри клетки. Повышенные уровни внутриклеточных ΗΙΕ-1α и ΗΙΕ-2α связаны со многими процессами аберрантной васкуляризации.
Из-за его важной роли в ангиогенезе ΗΙΕ-1 представляет собой перспективную мишень при лечении и профилактике заболеваний и нарушений, связанных с окулярной неоваскуляризацией. Попытки разработать клинически эффективные методы лечения были серьезно затруднены из-за сложности введения и поддержания терапевтически эффективного количества ингибиторов ΗΙΕ-1 в течение продолжительного периода времени. Кроме того, многие ингибиторы ΗΙΕ-1 являются цитотоксическими и проявляют серьезные побочные эффекты и/или токсичность, особенно при введении в ткани глаза.
Для лечения хронических заболеваний глаз существует потребность в способах длительного действия для доставки ингибиторов ΗΙΕ-1 в глаза. Препараты, обеспечивающие продолжительную доставку ΗΙΕ-1, позволят свести к минимуму возможную токсичность, связанную с введением многих ингибиторов ΗΙΕ-1. Препараты, обеспечивающие продолжительную доставку ΗΙΕ-1, будут также поддерживать подавление УЕСЕ и других стимуляторов ангиогенеза, максимально повышать эффективность, способствовать регрессу неоваскуляризации и позволят свести к минимуму вероятность возникновения катастрофических осложнений, включая субретинальное кровоизлияние. Кроме того, уменьшение потребности в частых инъекциях снизит риск эндофтальмита и уменьшит бремя частых посещений клиники, основного затруднения для пациентов и их семей.
В документах Уокоуата с1 а1., Сапсег Векеагсй, 1990, 50, 1693-1700, \УО 92/07866 (Ишуегайу о£ Техак 8ук1ет), ϋδ 5710135 (Ьеепбетк е1 а1.) и Оеокаткат е1 а1., Вю1есйпо1оду апб Вюепщпееппд. 2008, 101(2), 400-407 предлагают различные коньюгаты полимеров и лекарственных средств.
Таким образом, целью изобретения является предложение препаратов ингибиторов ΗΙΕ-1 с повышенной стабильностью, безопасностью и эффективностью.
Целью изобретения также является предложение препаратов лекарственного средства, способных эффективно доставлять терапевтические уровни одного или более ингибиторов ΗΙΕ-1 в течение продолжительного периода времени.
Еще одной целью изобретения является предложение усовершенствованных способов лечения или профилактики глазных заболеваний или нарушений.
Сущность изобретения
В документе описаны лекарственные формы препаратов с контролируемым высвобождением для доставки одного или более ингибиторов ΗΙΕ-1, конъюгированных с, или диспергированных в полимерном носителе для контролируемой доставки. Полимерную матрицу можно создавать из не биоразлагаемых или биоразлагаемых полимеров; однако предпочтительно полимерная матрица является биоразлагаемой. Из полимерной матрицы можно формировать имплантаты (например, стержни, диски, пластины и так далее), микрочастицы, наночастицы или их сочетание для доставки. После введения один или более ингибиторов ΗΙΕ-1 высвобождаются в течение продолжительного периода времени, либо при распаде полимерной матрицы, диффузии одного или более ингибиторов из полимерной матрицы, либо в результате и того и другого. При использовании конъюгата полимер-лекарственное средство можно получать частицы с более контролируемыми нагрузками лекарственного средства и профилями высвобождения лекарственного средства. Кроме того, растворимость конъюгата можно контролировать так, чтобы сводить к минимуму концентрацию растворимого лекарственного средства и, следовательно, токсичность.
В предпочтительных вариантах осуществления один или более ингибиторов ΗΙΕ-1 ковалентно связаны с полимером, образуя конъюгат полимер-лекарственное средство. Из конъюгатов полимерлекарственное средство затем можно формировать имплантаты (например, стержни, пластины, диски и так далее), микрочастицы, наночастицы или их сочетания для доставки в глаза. При использовании конъюгата полимер-лекарственное средство можно получать частицы с более контролируемыми нагрузками лекарственного средства и профилями высвобождения лекарственного средства. Кроме того, растворимость конъюгата можно контролировать, изменяя растворимость полимерной части и/или узла
- 1 032552 ветвления (Υ в химической структуре полимера) так, чтобы сводить к минимуму концентрацию растворимого лекарственного средства и, следовательно, токсичность.
В некоторых вариантах осуществления полимерный конъюгат, представленный следующей формулой (Α-ΧΑ-Υ- ( (Ζ)ο- (Х)р- (А) ч) п, где А представляет собой, независимо для каждого случая, ингибитор фактора, индуцируемого гипоксией 1-альфа (ΗΙΡ-1), выбранный из доксорубицина, даунорубицина, темсиролимуса, рапамицина, эверолимуса, топотекана, камптотецина, гелданамицина, генистеина, иринотекана, сорафениба, стауроспорина, РБ98059(2-(2-амино-3-метоксифенил)-4Н-1-бензопиран-4-он), 2-метоксиэстрадиола и ΥΟ-1 (3(5'-гидроксиметил-2'-фурил)-1-бензилиндазол);
X представляет собой, независимо для каждого случая, гидрофобный полимерный сегмент, выбранный из поли(молочной кислоты), поли(гликолевой кислоты), поли(молочной кислоты-со-гликолевой кислоты), поликапролактона и полиангидрида или их сополимеров;
Υ представляет собой одно из следующего:
Ζ представляет собой, независимо для каждого случая, гидрофильный полимерный сегмент, выбранный из поли(алкиленгликоля), полисахарида, поли(винилового спирта), поливинилпирролидона и блок-сополимера полиоксиэтилена (плюроник®); и о равно 1;
р и ц независимо равны 0 или 1;
т равно целому числу от одного до двадцати; и η равно целому числу от двух до шести, при условии, что А не является доксорубицином, когда т и η оба равны единице.
Иллюстративные конъюгаты полимер-лекарственное средство данного типа представлены общими формулами, приведенными ниже (А-Х)т-¥- (Ζ)η (А-Х)т-¥- ( Ζ—X) п (А-Х)т-¥- (Ζ-Χ-Α)η, где А представляет собой, независимо для каждого случая, ингибитор ΗΙΡ-1;
X представляет собой, независимо для каждого случая, гидрофобный полимерный сегмент;
Υ отсутствует или представляет собой узел ветвления;
Ζ представляет собой, независимо для каждого случая, гидрофильный полимерный сегмент;
т представляет собой количество ветвей А-Х и равно целому числу от одного до двадцати; и η представляет собой количество ветвей Ζ, Ζ-Х и Ζ-Х-А и равно целому числу от нуля до двадцати, более предпочтительно от одного до двадцати, при условии, что А не является доксорубицином, когда т и η оба равны единице.
А представляет собой, независимо для каждого случая, ингибитор ΗΙΡ-1. В некоторых случаях ингибитор ΗΙΡ-1 представляет собой антрациклин, такой как доксорубицин (ΌΧΚ) или даунорубицин (ΌΝΚ).
Один или более гидрофобных полимерных сегментов могут представлять собой любой биосовместимый гидрофобный полимер или сополимер. В некоторых случаях гидрофобный полимер или сополимер является биоразлагаемым. Примеры подходящих гидрофобных полимеров включают, но не ограничиваются ими, сложные полиэфиры, такие как полимолочная кислота, полигликолевая кислота или поликапролактон, полиангидриды, такие как полисебациновый ангидрид, а также сополимеры любых вышеперечисленных. В предпочтительных вариантах осуществления гидрофобный полимер представляет собой полиангидрид, такой как полисебациновый ангидрид, или его сополимер.
Профиль распада одного или более гидрофобных полимерных сегментов можно выбирать для оказания влияния на скорость высвобождения активного средства ΐη νΐνο. Например, гидрофобные полимерные сегменты можно выбирать так, чтобы они распадались в течение периода времени от семи дней до 2 лет, более предпочтительно от семи дней до 56 недель, более предпочтительно от четырех недель до
- 2 032552 недель, наиболее предпочтительно от восьми недель до 28 недель.
Один или более гидрофильных полимерных сегментов могут представлять собой любой гидрофильный биосовместимый нетоксичный полимер или сополимер. В некоторых вариантах осуществления один или более гидрофильных полимерных сегментов содержат поли(алкиленгликоль), такой как полиэтиленгликоль (ΡΕΘ). В конкретных вариантах осуществления один или более гидрофильных полимерных сегментов представляют собой линейные цепи ΡΕΘ.
В некоторых вариантах осуществления, когда присутствуют и гидрофобные и гидрофильные полимерные сегменты, общая средневзвешенная молекулярная масса одного или более гидрофильных полимерных сегментов предпочтительно будет больше, чем средневзвешенная молекулярная масса гидрофобного полимерного сегмента. В некоторых случаях общая средневзвешенная молекулярная масса гидрофильных полимерных сегментов по меньшей мере в пять раз, более предпочтительно по меньшей мере в десять раз, наиболее предпочтительно по меньшей мере в пятнадцать раз больше, чем средневзвешенная молекулярная масса гидрофобного полимерного сегмента.
Узел ветвления в случае его наличия может представлять собой органическую молекулу, содержащую три или более функциональных групп. Предпочтительно, узел ветвления будет содержать функциональные группы по меньшей мере двух различных типов (например, один или более спиртов и одну или более карбоновых кислот, или один или более галогенидов и одну или более карбоновых кислот). В таких случаях различные функциональные группы, присутствующие на узле ветвления, могут быть независимо доступны для синтетической модификации, допуская ковалентное присоединение гидрофобных и гидрофильных сегментов к узлу ветвления в контролируемых стехиометрических соотношениях. В некоторых вариантах осуществления узел ветвления представляет собой поликарбоновую кислоту, такую как лимонная кислота, виннокаменная кислота, муциновая кислота, глюконовая кислота или 5гидроксибензол-1,2,3-трикарбоновая кислота.
В некоторых вариантах осуществления конъюгат полимер-лекарственное средство образован из одного гидрофобного полимерного сегмента и двух или более гидрофильных полимерных сегментов, ковалентно связанных через мультивалентный узел ветвления. Иллюстративные конъюгаты полимерлекарственное средство такого типа представлены общей формулой, приведенной ниже
где А представляет собой ингибитор ΗΙΕ-1;
X представляет собой гидрофобный полимерный сегмент;
Υ представляет собой узел ветвления;
Ζ представляет собой, независимо для каждого случая, гидрофильный полимерный сегмент; и η равно целому числу от двух до десяти.
А представляет собой, независимо для каждого случая, ингибитор ΗΙΕ-1. В некоторых случаях ингибитор ΗΙΕ-1 представляет собой антрациклин, такой как доксорубицин (ΌΧΚ) или даунорубицин (ΌΝΚ).
В некоторых вариантах осуществления гидрофильные полимерные сегменты содержат поли(алкиленгликоль), такой как полиэтиленгликоль (ΡΕΘ), предпочтительно линейные цепи ΡΕΘ. В некоторых вариантах осуществления конъюгаты содержат от двух до шести гидрофильных полимерных сегментов.
В предпочтительных вариантах осуществления гидрофобный полимер представляет собой полиангидрид, такой как полисебациновый ангидрид, или его сополимер. В некоторых вариантах осуществления гидрофобный полимерный сегмент представляет собой поли(1,6-бис-(п-карбоксифенокси)гексан-сосебациновую кислоту) (поли(СΡΗ-8А) или поли(1,3-бис-(п-карбоксифенокси)пропан-со-себациновую кислоту) (поли(СΡΡ-8А).
В некоторых вариантах осуществления узел ветвления связывает один гидрофобный полимерный сегмент с тремя гидрофильными полиэтиленгликолевыми полимерными сегментами. В некоторых случаях конъюгат полимер-лекарственное средство может быть представлен формулой I ,Б—РЕС
А—X—Б--Б—РЕС ^Б—РЕС
Формула I, где А представляет собой ингибитор ΗΙΕ-1;
Б представляет собой, независимо для каждого случая, эфир (например, -Ο-), тиоэфир (например, -8-), вторичный амин (например, -ΝΗ-), третичный амин (например, -ΝΚ-), вторичный амид (например, -ΝΗΟΟ-; -ΟΟΝΗ-), третичный амид (например, -ΝΚΟΟ-; -ΟΟΝΚ-), вторичный карбамат (например, -ΟΟΟΝΗ-; -ΝΗΟΟΟ-), третичный карбамат (например, -ΟΟΟΝΚ-; -ΝΚΟΟΟ-), мочевину (например, -ΝΗΟΟΝΗ-; -ΝΚΟΟΝΗ-; -ΝΗΟΟΝΚ-, -ΝΚΟΟΝΚ-), сульфинильную группу (например, -8Ο-) или сульфо
- 3 032552 нильную группу (например, -8ОО-);
К представляет собой, отдельно для каждого случая, алкильную, циклоалкильную, гетероциклоалкильную, алкиларильную, алкенильную, алкинильную, арильную или гетероарильную группу, необязательно замещенную одним-пятью заместителями, независимо выбранными из алкила, циклопропила, циклобутилового эфира, амина, галогена, гидроксила, эфира, нитрила, СР3, сложного эфира, амида, мочевины, карбамата, тиоэфира, карбоновой кислоты и арила;
ΡΕΘ представляет собой полиэтиленгликолевую цепь; и
X представляет собой гидрофобный полимерный сегмент.
В некоторых вариантах осуществления узел ветвления представляет собой молекулу лимонной кислоты и гидрофильные полимерные сегменты представляют собой полиэтиленгликоль. В таких случаях конъюгат полимер-лекарственное средство может быть представлен формулой ΙΑ
РЕС —РЕС
РЕС
Формула ΙΑ, где Α представляет собой ингибитор ΗΙΡ-1;
И представляет собой, независимо для каждого случая, О или ΝΗ;
ΡΕΘ представляет собой полиэтиленгликолевую цепь; и
X представляет собой гидрофобный полимерный сегмент.
X может быть любым биосовместимым гидрофобным полимером или сополимером. В предпочтительных вариантах осуществления гидрофобный полимер или сополимер является биоразлагаемым. В предпочтительных вариантах осуществления гидрофобный полимер представляет собой полиангидрид, такой как полисебациновый ангидрид, или его сополимер.
Конъюгаты полимер-лекарственное средство можно использовать для формирования имплантатов (например, стержней, дисков, пластин и так далее), наночастиц или микрочастиц с улучшенными свойствами для контролируемой доставки ингибиторов ΗΙΡ-1.
Предложены также фармацевтические композиции, содержащие имплантаты (например, стержни, диски, пластины и так далее), наночастицы, микрочастицы или их сочетания для контролируемого высвобождения одного или более ингибиторов ΗΙΡ-1 в сочетании с одним или более фармацевтически приемлемыми эксципиентами. Наночастицы, микрочастицы или их сочетания могут быть образованы из одного или более конъюгатов полимер-лекарственное средство, или смесей конъюгатов полимерлекарственное средство с одним или более полимерами. Имплантаты (например, стержни, диски, пластины и так далее), наночастицы, микрочастицы или их сочетания могут быть также образованы из полимерной матрицы, в которой один или более ингибиторов ΗΙΡ-1 диспергированы или инкапсулированы.
Фармацевтические композиции можно вводить для лечения или профилактики заболевания или нарушения у пациента, которое связано с васкуляризацией, включая рак и ожирение. В предпочтительном варианте осуществления фармацевтические композиции вводят для лечения или профилактики заболевания или нарушения у пациента, которое связано с окулярной неоваскуляризацией. После введения один или более ингибиторов ΗΙΡ-1 высвобождаются в течение продолжительного периода времени в концентрациях, которые являются достаточно высокими, чтобы производить терапевтический эффект, однако достаточно низкими, чтобы не допускать неприемлемые уровни цитотоксичности, и при этом высвобождение продолжается гораздо дольше, чем в случае ингибитора без конъюгата.
Это продемонстрировано в случае препаратов с контролируемым высвобождением, содержащих антрациклины. Инъекция в стекловидное тело антрациклинов подавляет интраокулярную неоваскуляризацию, однако этот эффект недолговечен, поскольку антрациклины быстро выводятся из заднего сегмента глаза. Кроме того, антрациклины слишком токсичны для клинического применения, на что указывает резкое сокращение амплитуд Ь-волны скотопической ЭРГ и дегенерация сетчатки. Однако введение препарата с контролируемым высвобождением антрациклина (например, наночастиц, образованных из конъюгата полимер-лекарственное средство формулы Ι) обеспечивает более сильную и продолжительную антиангиогенную активность без признаков токсичности. Препарат с контролируемым высвобождением ΗΙΡ-1 обеспечивает длительный терапевтический эффект без побочных эффектов за счет высвобождения низких уровней ингибитора ΗΙΡ-1 в течение продолжительного периода времени.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1Α-Β приведены гистограммы, отображающие площадь хориоидальной неоваскуляризации (ХНВ) ^Νν) (в мм2), наблюдаемую в глазах мышей С57ВЕ/6 через 14 дней после разрыва у них мембраны Бруха лазерной фотокоагуляцией без введения ингибитора ΗΙΡ-1 и после введения различных количеств доксорубицина или даунорубицина. В случае значений ХНВ, измеренных после введения ΗΙΡ-1,
- 4 032552 площадь ХНВ, наблюдаемая после введения ΗΙΡ-1 (светлые столбики) представлена рядом с площадью ХНВ, наблюдаемой в парных глазах (ПГ) (РЕ), оставленных без лечения. Столбики представляют среднюю (±8ЕМ) площадь хориоидальной НВ. На фиг. 1А приведены графики площади ХНВ (в мм2), наблюдаемой в глазах мышей С57ВБ/6 через 14 дней после разрыва у них мембраны Бруха лазерной фотокоагуляцией без введения ингибитора ΗΙΡ-1 (в оба глаза (ОГ) (ВЕ) мыши инъецировали только растворитель, левый столбик) и после введения 10, 1,0 и 0,1 мкг даунорубицина (ΌΝΚ). В глазах, в которые инъецировали 10 мкг ΌΝΚ, наблюдали статистически значимое сокращение площади ХНВ (Р<0,001, п=10) по сравнению с парными глазами, в которые инъецировали только растворитель. В глазах, в которые инъецировали 1,0 мкг и 0,1 мкг ΌΝΚ, не наблюдали статистически значимое сокращение площади ХНВ (для 1,0 мкг Р<0,082, п=10; для 0,1 мкг Р<0,399, п=10) по сравнению с парными глазами, в которые инъецировали только растворитель. На фиг. 1В приведены графики площади ХНВ (в мм2), наблюдаемой в глазах мышей С57ВБ/6 через 14 дней после разрыва у них мембраны Бруха лазерной фотокоагуляцией без введения ингибитора ΗΙΡ-1 (в оба глаза (ОГ) мыши инъецировали только растворитель, левый столбик) и после введения 10, 1,0 и 0,1 мкг доксорубицина (ЭХЕ. светлые столбики). В глазах, в которые инъецировали 10 мкг ΌΧΚ, наблюдали статистически значимое сокращение площади ХНВ (Р<0,001, п=10) по сравнению с парными глазами, в которые инъецировали только растворитель. В глазах, в которые инъецировали 1,0 мкг и 0,1 мкг ΌΧΚ, не наблюдали статистически значимое сокращение площади ХНВ (для 1,0 мкг Р<0,071, п=10; для 0,1 мкг Р<0,322, п=10) по сравнению с парными глазами, в которые инъецировали только растворитель. На обеих фиг. 1А и 1В средняя площадь ХНВ была сходной в парных глазах (ПГ) и глазах мышей, которым в оба глаза (ОГ) инъецировали только растворитель, это свидетельствовало о том, что отсутствовал системный эффект от интраокулярных инъекций ингибитора ΗΙΡ-1;
на фиг. 2А-В приведены гистограммы, отображающие площадь ретинальной неоваскуляризации (РНВ) (ΡΝΥ) (в мм2), наблюдаемую в глазах мышей С57ВБ/6 с индуцированной кислородом ишемической ретинопатией через пять дней после введения контроля-растворителя (буфер РВ8 без ингибитора ΗΙΡ-1) и после введения различных количеств доксорубицина или даунорубицина. Столбики представляют среднюю (±8ЕМ) площадь РНВ. На фиг. 2А приведены графики площади РНВ (в мм2), наблюдаемой в глазах мышей С57ВБ/6 с индуцированной кислородом ишемической ретинопатией через пять дней после введения контроля-растворителя (буфер РВ8 без ингибитора ΗΙΡ-1, левый столбик) и после введения 1,0, 0,1 и 0,01 мкг даунорубицина (ΌΝΚ). В глазах, в которые инъецировали 1,0 мкг и 0,1 мкг ΌΝΚ, наблюдали статистически значимое сокращение площади РНВ (для 1 мкг Р<0,001, п=6; для 0,1 мкг Р=0,013, п=8). В глазах, в которые инъецировали 0,01 мкг ΌΝΚ, не наблюдали статистически значимое сокращение площади РНВ (Р=0,930, п=6). На фиг. 2В приведены графики площади РНВ (в мм2), наблюдаемой в глазах мышей С57ВБ/6 с индуцированной кислородом ишемической ретинопатией через пять дней после введения контроля-растворителя (буфер РВ8 без ингибитора ΗΙΡ-1, левый столбик) и после введения 1,0, 0,1 и 0,01 мкг доксорубицина (ΌΧΚ). В глазах, в которые инъецировали 1,0 мкг ΌΧΚ, наблюдали статистически значимое сокращение площади РНВ (Р<0,001, п=8). В глазах, в которые инъецировали 0,1 мкг и 0,01 мкг ΌΧΚ, не наблюдали статистически значимое сокращение площади РНВ (для 0,1 мкг Р=0,199, п=7; для 0,01 мкг, Р=0,096, п=8);
фиг. 3А представляет собой график, демонстрирующий эффективность препарата с контролируемым высвобождением ингибитора ΗΙΡ-1 (в частности, наночастиц ОХЕ-Р8А-РЕС3,) в лечении ХНВ в модели ХНВ на мышах. Фиг. 3А представляет собой гистограмму, отображающую площадь ХНВ (в мм2), наблюдаемую в глазах мышей С57ВБ/6 через 14 дней после разрыва у них мембраны Бруха лазерной фотокоагуляцией без введения ингибитора ΗΙΡ-1 (только растворитель инъецировали в оба глаза (ОГ) мышей, левый столбик) и после введения 10, 1,0 и 0,1 мкг наночастиц ОХЕ-Р8А-РЕС3,. В случае значений ХНВ, измеренных после введения различных количеств наночастиц ПХК.-Р8А-РЕС3, площадь ХНВ, наблюдаемая после введения наночастиц, графически изображена рядом с площадью ХНВ, наблюдаемой в парных газах (ПГ), оставленных без лечения. Столбики представляют среднюю (±8ЕМ) площадь ХНВ. Во всех глазах, в которые инъецировали 10 мкг, 1,0 мкг и 0,1 мкг наночастиц ПХВ-Р8А-РЕС3, наблюдали статистически значимое сокращение площади ХНВ (для 10 мкг Р<0,001, п=10; для 1,0 мкг Р=0,009, п=10; для 0,1 мкг Р=0,007, п=10) по сравнению с парными глазами, в которые инъецировали только растворитель;
фиг. 3В представляет собой график, демонстрирующий эффективность препарата с контролируемым высвобождением ингибитора ΗΙΡ-1 (в частности, наночастиц ОХЕ-Р8А-РЕС3) в лечении сформировавшейся ХНВ в модели ХНВ на мышах. В этом случае, мембрану Бруха у мышей С57ВБ/6 разрывали лазерной фотокоагуляцией и давали возможность ХНВ разрастаться в течение семи дней. Затем в одной группе измеряли базовую площадь ХНВ и остальных мышей лечили инъекцией 1 мкг наночастиц ΌΧΚ.Р8А-РЕС3 в один глаз и инъекцией только растворителя в парный глаз. Еще через семь дней измеряли площадь ХНВ в глазах, которые лечили ^ΧЕ-Р8А-РЕС3 и растворителем. На фиг. 3В приведена гистограмма, отображающая площадь ХНВ (в мм2), наблюдаемую через семь дней после введения 1 мкг наночастиц ^ΧЕ-Р8А-РЕС3 (левый столбик) и 14 дней после разрыва мембраны Бруха лазерной фотокоагуляцией. Площадь ХНВ (в мм2), наблюдаемую через семь дней после введения 1 мкг наночастиц ΌΧΚ.Р8А-РЕС3 и 14 дней после разрыва мембраны Бруха лазерной фотокоагуляцией, сравнивали с площадью
- 5 032552
ХНВ, измеренной в парных глазах, в которые инъецировали только растворитель (центральный столбик), через 14 дней после разрыва мембраны Бруха лазерной фотокоагуляцией и семь дней после инъекции растворителя и не подвергавшихся лечению глазах через семь дней после разрыва мембраны Бруха лазерной фотокоагуляцией (базовая линия; правый столбик). Наблюдали статистически значимое сокращение площади ХНВ (Р<0,001, п=10), как относительно парных глаз, в которые инъецировали только растворитель (центральный столбик), так и относительно базовой ХНВ, наблюдаемой через семь дней после разрыва мембраны Бруха лазерной фотокоагуляцией в не подвергавшихся лечению глазах (правый столбик), это свидетельствовало о том, что лечение ΌΧΒ-Ρ8Α-ΡΕΟ3 не только значительно уменьшало ХНВ (сравните левый и средний столбики), но также способствовало регрессу существующей ХНВ (сравните левый и правый столбики);
фиг. 4 представляет собой график, демонстрирующий эффективность препарата с контролируемым высвобождением ингибитора ΗΙΕ-1 (в частности, наночастиц ΌΧΒ-Ρ8Α-ΡΕΟ3) в лечении РНВ у мышей с индуцированной кислородом ишемической ретинопатией. Фиг. 4 представляет собой гистограмму, отображающую площадь РНВ (в мм2), наблюдаемую в глазах мышей С57ВЬ/6 с индуцированной кислородом ишемической ретинопатией через пять дней после введения контроля-растворителя (буфер РВ8 без ингибитора ΗΙΕ-1, правый столбик) и после введения 1 мкг наночастиц ΌΧΚ.-Ρ8Α-ΡΕΟ3 (левый столбик). Столбики представляют среднюю (±8ΕΜ) площадь РНВ. Наблюдали статистически значимое сокращение площади РНВ (Ρ<0,001, п=8) по сравнению с парными глазами, в которые инъецировали только растворитель;
на фиг. 5А-В приведены графики, демонстрирующие способность препарата с контролируемым высвобождением ингибитора ΗΙΕ-1 (в частности, наночастиц ΌΧΒ-Ρ8Α-ΡΕΟ3) подавлять субретинальную неоваскуляризацию (НВ) у трансгенных мышей, у которых промотор родопсина направляет экспрессию νΕΟΕ в фоторецепторах (тйо/АЕСЕ мыши), в течение по меньшей мере 35 дней. В постнатальный день (Ρ) 14, гемизиготным по тйо/νΕΟΕ мышам делали интраокулярную инъекцию 10 мкг наночастиц ΌΧΒΡ8Α-ΡΕΟ3 в один глаз и только растворителя (буфера ΡΒ8) в парный глаз. Фиг. 5Α представляет собой гистограмму, отображающую площадь НВ (в мм2) на сетчатку, наблюдаемую через четыре недели после интраокулярной инъекции 10 мкг наночастиц ΌΧΒ-Ρ8Α-ΡΕΟ3 (левый столбик). Наблюдали статистически значимое сокращение площади НВ на сетчатку (Ρ=0,042, п=5) по сравнению с парными глазами, в которые инъецировали только растворитель. Фиг. 5В представляет собой гистограмму, отображающую площадь НВ (в мм2) на сетчатку, наблюдаемую через пять недель после интраокулярной инъекции 10 мкг наночастиц ΌΧΒ-Ρ8Α-ΡΕΟ3 (левый столбик). Наблюдали статистически значимое сокращение площади НВ на сетчатку (Ρ=0,007, п=5) по сравнению с парными глазами, в которые инъецировали только растворитель;
на фиг. 6Α приведен график, демонстрирующий распределение объема микрочастиц по размерам, определенное с использованием СоиЙет ΜυΐΙίδίζοΓ. На фиг. 6В приведен график, демонстрирующий распределение объема наночастиц по размерам, определенное с использованием СоиЙет МиШжет;
на фиг. 7Α приведен график, демонстрирующий количество высвобожденного конъюгата лекарственного средства (нМ) во внутриглазную жидкость (ВЖ) (АН) в зависимости от времени (дни) из микрочастиц и наночастиц, инъецированных в глаза кроликов. Фиг. 7В представляет собой гистограмму для сравнения количеств высвобожденного конъюгата лекарственного средства ΌΧΚ. (нМ) во внутриглазной жидкости (ВЖ) и стекловидном теле в глазах кроликов, в которые инъецировали частицы. Время (дни) составляло 105 для животных, которым вводили наночастицы, и 115 для животных, которым вводили микрочастицы;
на фиг. 8 приведен график, демонстрирующий высвобождение конъюгата доксорубицина (ΌΧΚ.) ш уйто (мкг) в зависимости от времени (дни) для полимерных стержней, содержащих 10% ΌΧΚ. (·), 30% ΟΧΗ () и 50% ΟΧΗ (А);
на фиг. 9Α приведен график, демонстрирующий ш уйто профиль высвобождения конъюгата доксорубицина (ОХИ) из микрочастиц, полученных из ОХИ-8А-РЕС3 () и ОХИ-8А-СРН-РЕС (А). На фиг. 9В приведен график, демонстрирующий ш уйто профиль высвобождения конъюгата доксорубицина (ΌΧΚ.) из микрочастиц, полученных из ΟΧΡ-8Α-ί.’ΡΗ-ΡΕΟ3 (А).
Подробное описание изобретения
I. Определения.
Используемый в настоящем документе термин активное средство относится к физиологически или фармакологически активному веществу, которое действует на местном и/или на системном уровне в организме. Активное средство представляет собой вещество, которое вводят пациенту для лечения (например, лекарственное средство), профилактики (например, профилактическое средство) или диагностики (например, диагностическое средство) заболевания или нарушения. Используемый в настоящем документе термин офтальмическое лекарственное средство или офтальмическое активное средство относится к средству, которое вводят пациенту для облегчения, отсрочки начала или предотвращения одного или более симптомов глазного заболевания или нарушения, или диагностическому средству, полезному для визуализации или иной оценки состояния глаза.
Используемый в настоящем документе термин эффективное количество или терапевтически эф
- 6 032552 фективное количество означает количество конъюгата полимер-лекарственное средство, эффективное для облегчения, отсрочки начала или предотвращения одного или более симптомов, в частности, глазного заболевания или нарушения. В случае возрастной дегенерации макулы, эффективное количество конъюгата полимер-лекарственное средство отсрочивает начало, уменьшает или предотвращает потерю зрения у пациента. Используемый в настоящем документе термин биосовместимый и биологически совместимый, как правило, относится к материалам, которые, вместе с любыми их метаболитами или продуктами распада, в целом, нетоксичны для реципиента и не вызывают никаких существенных неблагоприятных эффектов в организме реципиента. Вообще говоря, биосовместимые материалы представляют собой материалы, которые не вызывают существенный воспалительный или иммунный ответ при введении пациенту.
Используемый в настоящем документе термин биоразлагаемый полимер, в целом, относится к полимеру, который будет распадаться или эродировать в результате действия ферментов и/или гидролиза в физиологических условиях на меньшие по размеру единицы или химические вещества, которые могут быть метаболизированы, элиминированы или выведены из организма субъекта. Время распада зависит от состава, морфологии, например пористости, размеров частиц полимера, а также от окружающей среды.
Используемый в настоящем документе термин гидрофильный означает свойство наличия сродства к воде. Например, гидрофильные полимеры (или гидрофильные полимерные сегменты) представляют собой полимеры (или полимерные сегменты), которые преимущественно растворимы в водных растворах и/или имеют тенденцию поглощать воду. Как правило, чем более гидрофильным является полимер, тем более этот полимер имеет тенденцию растворяться, смешиваться или смачиваться водой.
Используемый в настоящем документе термин гидрофобный означает свойство отсутствия сродства, или даже отталкивание воды. Например, чем более гидрофобным является полимер (или полимерный сегмент), тем более этот полимер (или полимерный сегмент) имеет тенденцию не растворяться, не смешиваться или не смачиваться водой.
О гидрофильности и гидрофобности можно говорить как об относительных понятиях, например, но без ограничения, о спектре гидрофильности/гидрофобности в группе полимеров или полимерных сегментов. В некоторых вариантах осуществления, в которых описаны два или более полимеров, термин гидрофобный полимер может быть использован на основании относительной гидрофобности полимера в сравнении с другим, более гидрофильным полимером.
Используемый в настоящем документе термин наночастица, в целом, относится к частице, имеющей диаметр, такой как средний диаметр, от примерно 10 нм вплоть до, но не включительно, примерно 1 микрон, предпочтительно от 100 нм до примерно 1 мкм. Частицы могут иметь любую форму. Наночастицы, имеющие сферическую форму, как правило, называют наносферы.
Используемый в настоящем документе термин микрочастица, в целом, относится к частице, имеющей диаметр, такой как средний диаметр, от примерно 1 мкм до примерно 100 мкм, предпочтительно от примерно 1 мкм до примерно 50 мкм, более предпочтительно от примерно 1 до примерно 30 мкм. Микрочастицы могут иметь любую форму. Микрочастицы, имеющие сферическую форму, как правило, называют микросферы.
Используемый в настоящем документе термин молекулярная масса, в целом, относится к относительной средней длине цепи блочного полимера, если не указано иное. На практике, молекулярную массу можно оценивать или характеризовать с использованием различных методов, включая гельпроникающую хроматографию (ГПХ) (СРС) или капиллярную вискозиметрию. Определенную методом ГПХ молекулярную массу называют средневзвешенной молекулярной массой (М\т). в отличие от среднечисловой молекулярной массы (Мп). Метод капиллярной вискозиметрии позволяет оценивать молекулярную массу как характеристическую вязкость, определяемую в разбавленном растворе полимера с использованием определенного набора условий концентрации, температуры и растворителя.
Используемый в настоящем документе термин средний размер частиц, в целом, относится к статистическому среднему размеру частиц (диаметру) в популяции частиц. Диаметр практически сферической частицы можно называть физическим или гидродинамическим диаметром. Диаметр несферической частицы можно предпочтительно называть гидродинамическим диаметром. При использовании в настоящем документе, диаметр несферической частицы может означать наибольшее линейное расстояние между двумя точками на поверхности частицы. Средний размер частиц можно измерять с помощью методов, известных в данной области, таких как метод динамического рассеяния света.
Термины монодисперсное и однородное распределение по размеру используются в настоящем документе взаимозаменяемо и описывают популяцию наночастиц или микрочастиц, в которой все частицы имеют одинаковый или почти одинаковый размер. При использовании в настоящем документе, монодисперсное распределение означает распределение частиц, при котором 90% или более распределения находится в пределах 15% от среднего размера частиц, более предпочтительно в пределах 10% от среднего размера частиц, наиболее предпочтительно в пределах 5% от среднего размера частиц.
Используемый в настоящем документе термин фармацевтически приемлемый относится к соединениям, носителям, эксципиентам, композициям и/или лекарственным формам, которые с медицинской точки зрения подходят для использования в контакте с тканями человека и животных без чрезмерной
- 7 032552 токсичности, раздражения, аллергической реакции или других проблем или осложнений, с разумным соотношением польза/риск.
Используемый в настоящем документе термин узел ветвления относится к части конъюгата полимер-лекарственное средство, которая служит для присоединения нескольких гидрофильных полимерных сегментов к одному концу гидрофобного полимерного сегмента или нескольких гидрофобных полимерных сегментов к одному концу гидрофильного сегмента.
Используемый в настоящем документе термин ингибитор ΗΙΡ-1 относится к лекарственному средству, которое снижает уровень ΗΙΡ-1 и/или его способность стимулировать транскрипцию генов, содержащих отвечающий на гипоксию элемент в их области промотора.
Используемый в настоящем документе термин имплантат, в целом, относится к полимерному устройству или элементу, имеющему определенную структуру, размер, или иным образом сконфигурированному для имплантации, предпочтительно путем инъекции или хирургической имплантации, в определенный участок тела так, чтобы оказывать терапевтическое полезное действие за счет высвобождения одного или более ингибиторов ΗΙΡ-1 в течение продолжительного периода времени в участке имплантации. Например, интраокулярные имплантаты представляют собой полимерные устройства или элементы, которые имеют определенную структуру, размер, или иным образом сконфигурированы для размещения в глазу, предпочтительно путем инъекции или хирургической имплантации, и лечения одного или более глазных заболеваний или нарушений за счет высвобождения одного или более ингибиторов ΗΙΡ-1 в течение длительного периода времени. Интраокулярные имплантаты, как правило, биосовместимы с физиологическими условиями в глазу и не вызывают неблагоприятные побочные эффекты. Как правило, интраокулярные имплантаты могут быть помещены в глаз без нарушения зрения.
Диапазоны значений, определенных в настоящем документе, включают все значения в пределах диапазона, а также все поддиапазоны в пределах диапазона. Например, если диапазон определен как целое число от 0 до 10, диапазон охватывает все целые числа в пределах диапазона, а также любые и все поддиапазоны в пределах диапазона, например, 1-10, 1-6, 2-8, 3-7, 3-9 и так далее.
ΙΙ. Конъюгаты полимер-лекарственное средство.
Предложены конъюгаты с контролируемым высвобождением, содержащие один или более ингибиторов ΗΙΡ-1, конъюгированных с, или диспергированных в полимерном носителе для контролируемого высвобождения одного или более ингибиторов ΗΙΡ-1. При введении конъюгатов с контролируемым высвобождением ингибиторов ΗΙΡ-1 активность повышается и продлевается, тогда как токсичность снижается или исключается.
В некоторых вариантах осуществления один или более ингибиторов ΗΙΡ-1 диспергированы или инкапсулированы в полимерной матрице для доставки в глаза. Полимерную матрицу можно создавать из не биоразлагаемых или биоразлагаемых полимеров; однако предпочтительно полимерная матрица является биоразлагаемой. Из полимерной матрицы можно формировать имплантаты, микрочастицы, наночастицы или их сочетания для доставки в глаза. После введения один или более ингибиторов ΗΙΡ-1 высвобождаются в течение продолжительного периода времени, либо при распаде полимерной матрицы, диффузии одного или более ингибиторов из полимерной матрицы, либо в результате и того, и другого. При использовании конъюгата полимер-лекарственное средство можно получать частицы с более контролируемыми нагрузками лекарственного средства и профилями высвобождения лекарственного средства.
В некоторых вариантах осуществления препарат с контролируемым высвобождением содержит частицы, образованные из одного или более конъюгатов полимер-лекарственное средство. Конъюгаты полимер-лекарственное средство представляют собой блок-сополимеры, содержащие один или более ингибиторов ΗΙΡ-1, ковалентно связанных с блок-сополимером. Как правило, конъюгаты полимерлекарственное средство содержат ингибитор ΗΙΡ-1, один или более гидрофобных полимерных сегментов и один или более гидрофильных полимерных сегментов. В некоторых случаях один или более гидрофильных полимерных сегментов присоединены к одному или более гидрофобным полимерным сегментам с помощью узла ветвления. При использовании конъюгата полимер-лекарственное средство можно получать частицы с более контролируемыми нагрузками лекарственного средства и профилями высвобождения лекарственного средства. Кроме того, растворимость конъюгата можно контролировать так, чтобы сводить к минимуму концентрацию растворимого лекарственного средства и, следовательно, токсичность.
В некоторых вариантах осуществления конъюгат полимер-лекарственное средство содержит один или более ингибиторов ΗΙΡ-1, ковалентно присоединенных к биоэродируемому полимерному сегменту. Предпочтительно, биоэродируемый сегмент, к которому присоединен ингибитор ΗΙΡ-1, состоит из одного или более мономеров, которые имеют низкую растворимость в водном растворе. В некоторых вариантах осуществления один или более мономеров имеют растворимость в воде менее чем 2 г/л, более предпочтительно менее чем 1 г/л, более предпочтительно менее чем 0,5 г/л, наиболее предпочтительно менее чем 0,3 г/л.
А. Структура конъюгатов полимер-лекарственное средство.
Предложены конъюгаты полимер-лекарственное средство, которые содержат ингибитор ΗΙΡ-1, ковалентно присоединенный к блок-сополимеру.
- 8 032552
В одном варианте осуществления конъюгат имеет формулу (А-Х)т-¥- ( (Ζ)ο-(Х)р-(А)ч)п, где А представляет собой, независимо для каждого случая, ингибитор ΗΙΡ-1;
X представляет собой, независимо для каждого случая, гидрофобный полимерный сегмент;
Υ отсутствует или представляет собой узел ветвления;
Ζ представляет собой, независимо для каждого случая, гидрофильный полимерный сегмент;
о, р и ς независимо равны 0 или 1;
т представляет собой количество ветвей А-Х и равно целому числу от одного до двадцати; и η представляет собой количество ветвей Ζ, Ζ-Х и Ζ-Х-А и равно целому числу от нуля до двадцати, более предпочтительно от одного до двадцати, при условии, что А не является доксорубицином, когда т и η оба равны единице.
Иллюстративные конъюгаты полимер-лекарственное средство представлены общими формулами, приведенными ниже
(А-Х)т-¥- (Ζ)η
(А-Х) т- Υ- (ζ-Х)п
(А-Х) т- Υ- (Ζ-Χ-Α)
где А представляет собой, независимо для каждого случая, ингибитор ΗΙΡ-1;
Х представляет собой, независимо для каждого случая, гидрофобный полимерный сегмент;
Υ отсутствует или представляет собой узел ветвления;
Ζ представляет собой, независимо для каждого случая, гидрофильный полимерный сегмент; и т представляет собой количество ветвей А-Х и равно целому числу от одного до двадцати; и η представляет собой количество ветвей Ζ, Ζ-Х и Ζ-Х-А и равно целому числу от нуля до двадцати, более предпочтительно от одного до 20, при условии, что А не является доксорубицином, когда т и η оба равны единице.
А представляет собой, независимо для каждого случая, ингибитор ΗΙΡ-1. В некоторых случаях активное средство представляет собой антрациклин, такой как доксорубицин (ИХК) или даунорубицин (ΌΝΚ).
Один или более гидрофобных полимерных сегментов могут представлять собой любой биосовместимый гидрофобный полимер или сополимер. В некоторых случаях гидрофобный полимер или сополимер является биоразлагаемым. Примеры подходящих гидрофобных полимеров включают, но не ограничиваются ими, сложные полиэфиры, такие как полимолочная кислота, полигликолевая кислота или поликапролактон, полиангидриды, такие как полисебациновый ангидрид, а также их сополимеры. В предпочтительных вариантах осуществления гидрофобный полимер представляет собой полиангидрид, такой как полисебациновый ангидрид, или его сополимер.
Профиль распада одного или более гидрофобных полимерных сегментов можно выбирать для оказания влияния на скорость высвобождения активного средства ίη νίνο. Например, гидрофобные полимерные сегменты можно выбирать так, чтобы они распадались в течение периода времени от семи дней до 2 лет, более предпочтительно от семи дней до 56 недель, более предпочтительно от четырех недель до 56 недель, наиболее предпочтительно от восьми недель до 28 недель.
Один или более гидрофильных полимерных сегментов могут представлять собой любой гидрофильный биосовместимый нетоксичный полимер или сополимер. В некоторых вариантах осуществления один или более гидрофильных полимерных сегментов содержат поли(алкиленгликоль), такой как полиэтиленгликоль (РЕО). В конкретных вариантах осуществления один или более гидрофильных полимерных сегментов представляют собой линейные цепи РЕО.
В некоторых случаях конъюгат полимер-лекарственное средство содержит только один гидрофильный полимерный сегмент (т.е. η равно единице). В предпочтительных вариантах осуществления конъюгат полимер-лекарственное средство содержит более чем одну гидрофильную полимерную цепь (т.е. η больше единицы). В некоторых вариантах осуществления конъюгат полимер-лекарственное средство содержит от двух до шести, более предпочтительно от трех до пяти гидрофильных полимерных цепей. В одном варианте осуществления конъюгат полимер-лекарственное средство содержит три гидрофильных полимерных сегмента.
В тех случаях, когда присутствуют и гидрофобные и гидрофильные полимерные сегменты, общая молекулярная масса одного или более гидрофильных полимерных сегментов предпочтительно будет больше, чем молекулярная масса гидрофобного полимерного сегмента. В некоторых случаях общая молекулярная масса гидрофильных полимерных сегментов по меньшей мере в пять раз, более предпочтительно по меньшей мере в десять раз, наиболее предпочтительно по меньшей мере в пятнадцать раз больше, чем молекулярная масса гидрофобного полимерного сегмента.
Узел ветвления, в случае его наличия, может представлять собой органическую молекулу, содержащую три или более функциональных групп. Предпочтительно, узел ветвления будет содержать функциональные группы по меньшей мере двух различных типов (например, один или более спиртов и одну или более карбоновых кислот, или один или более галогенидов и одну или более карбоновых кислот или
- 9 032552 один или более аминов). В таких случаях различные функциональные группы, присутствующие на узле ветвления, могут быть независимо доступны для синтетической модификации, допуская ковалентное присоединение гидрофобных и гидрофильных сегментов к узлу ветвления в контролируемых стехиометрических соотношениях. В некоторых вариантах осуществления узел ветвления представляет собой поликарбоновую кислоту, такую как лимонная кислота, виннокаменная кислота, муциновая кислота, глюконовая кислота или 5-гидроксибензол-1,2,3-трикарбоновая кислота.
В некоторых вариантах осуществления конъюгат полимер-лекарственное средство образован из одного гидрофобного полимерного сегмента и двух или более гидрофильных полимерных сегментов, ковалентно связанных через мультивалентный узел ветвления. Иллюстративные конъюгаты полимерлекарственное средство такого типа представлены общей формулой, приведенной ниже
где А представляет собой, независимо для каждого случая, ингибитор ΗΙΡ-1;
X представляет собой гидрофобный полимерный сегмент;
Υ представляет собой узел ветвления;
Ζ представляет собой, независимо для каждого случая, гидрофильный полимерный сегмент; и η равно целому числу от нуля до 300, более предпочтительно от нуля до пятидесяти, более предпочтительно от нуля до тридцати, наиболее предпочтительно от нуля до десяти.
А, независимо для каждого случая, представляет собой ингибитор ΗΙΡ-1. В некоторых случаях ингибитор ΗΙΡ-1 представляет собой антрациклин, такой как доксорубицин (ΏΧΡ) или даунорубицин (ΏΝΡ).
Гидрофобный полимерный сегмент может представлять собой любой биосовместимый гидрофобный полимер или сополимер. В некоторых случаях гидрофобный полимерный сегмент также является биоразлагаемым. Примеры подходящих гидрофобных полимеров включают, но не ограничиваются ими, сополимеры молочной кислоты и гликолевой кислоты, полиангидриды, поликапролактон, а также их сополимеры. В некоторых вариантах осуществления гидрофобный полимер представляет собой полиангидрид, такой как полисебациновый ангидрид.
Один или более гидрофильных полимерных сегментов могут представлять собой любой гидрофильный биосовместимый нетоксичный полимер или сополимер. Гидрофильный полимерный сегмент может представлять собой, например, поли(алкиленгликоль), полисахарид, поли(виниловый спирт), полипирролидон или их сополимеры. В предпочтительных вариантах осуществления один или более гидрофильных полимерных сегментов представляют собой или состоят из полиэтиленгликоля (РБО).
В некоторых вариантах осуществления конъюгат полимер-лекарственное средство содержит от трех до шести, более предпочтительно от трех до пяти гидрофильных полимерных цепей. В одном варианте осуществления конъюгат полимер-лекарственное средство содержит три гидрофильных полимерных сегмента.
Узел ветвления может представлять собой, например, органическую молекулу, содержащую несколько функциональных групп. Предпочтительно, узел ветвления будет содержать функциональные группы по меньшей мере двух различных типов (например, спирт и несколько карбоновых кислот или карбоновую кислоту и несколько спиртов). В некоторых вариантах осуществления узел ветвления представляет собой поликарбоновую кислоту, такую как молекула лимонной кислоты.
В некоторых вариантах осуществления узел ветвления связывает один гидрофобный полимерный сегмент с тремя гидрофильными полиэтиленгликолевыми полимерными сегментами. В некоторых случаях конъюгат полимер-лекарственное средство может быть представлен формулой I
Ь—РЕС
А—X—1_--1_—РЕС —РЕС
Формула I, где А представляет собой ингибитор ΗΙΓ-1;
Б представляет собой, независимо для каждого случая, эфир (например, -Ο-), тиоэфир (например, -8-), вторичный амин (например, -ΝΗ-), третичный амин (например, -ΝΚ-), вторичный амид (например, -ΝΗΟΟ-; -ΟΟΝΗ-), третичный амид (например, -ΝΡΟΟ-; -ΟΟΝΚ-), вторичный карбамат (например, -ΟΟΟΝΗ-; -ΝΗΟΟΟ-), третичный карбамат (например, -ΟΟΟΝΚ-; -ΝΡΟΟΟ-), мочевину (например, -ΝΗΟΟΝΗ-; -ΝΡΟΟΝΗ-; -ΝΗΟΟΝΚ-, -ΝΡΟΟΝΚ-), сульфинильную группу (например, -8Ο-) или сульфонильную группу (например, -8ΟΟ-);
Р представляет собой, отдельно для каждого случая, алкильную, циклоалкильную, гетероциклоалкильную, алкиларильную, алкенильную, алкинильную, арильную или гетероарильную группу, необязательно замещенную одним-пятью заместителями, независимо выбранными из алкила, циклопропила, циклобутилового эфира, амина, галогена, гидроксила, эфира, нитрила, СР3, сложного эфира, амида, мочевины, карбамата, тиоэфира, карбоновой кислоты и арила;
- 10 032552
РЕО представляет собой полиэтиленгликолевую цепь; и
X представляет собой гидрофобный полимерный сегмент.
В некоторых вариантах осуществления узел ветвления представляет собой молекулу лимонной кислоты и гидрофильные полимерные сегменты представляют собой полиэтиленгликоль. В таких случаях конъюгат полимер-лекарственное средство может быть представлен формулой ΙΑ
где Α представляет собой ингибитор ΗΙΡ-1;
Ό представляет собой, независимо для каждого случая, О или ΝΗ;
РЕО представляет собой полиэтиленгликолевую цепь; и
X представляет собой гидрофобный полимерный сегмент.
В некоторых вариантах осуществления Ό представляет собой, в каждом отдельном случае, О. В других вариантах осуществления Ό представляет собой, в каждом отдельном случае, ΝΗ. В других вариантах осуществления Ό представляет собой, независимо для каждого случая, О или ΝΗ.
В некоторых вариантах осуществления конъюгат полимер-лекарственное средство представлен следующей формулой
где Α представляет собой ингибитор ΗΙΡ-1; и
X представляет собой гидрофобный полимерный сегмент, предпочтительно полиангидрид.
В. Ингибиторы ΗΙΡ-1.
Конъюгаты полимер-лекарственное средство содержат один или более ингибиторов ΗΙΡ-1. Любой подходящий ингибитор ΗΙΡ-1 можно включать в конъюгаты полимер-лекарственное средство. Предпочтительно, один или более ингибиторов ΗΙΡ-1 представляют собой ингибиторы ΗΙΡ-1α. Ингибиторы могут быть малыми молекулами и/или биомолекулами или макромолекулами (например, белками, ферментами, нуклеиновыми кислотами, факторами роста, полисахаридами, липидами и так далее). В некоторых случаях низкомолекулярное активное средство имеет молекулярную массу менее чем примерно 2000 г/моль, предпочтительно менее чем примерно 1500 г/моль, более предпочтительно менее чем примерно 1200 г/моль, наиболее предпочтительно менее чем примерно 1000 г/моль. В других вариантах осуществления низкомолекулярное активное средство имеет молекулярную массу менее чем примерно 500 г/моль. Биомолекулы, как правило, имеют молекулярную массу более чем примерно 2000 г/моль и могут состоять из повторяющихся единиц, таких как аминокислоты (пептиды, белки, ферменты и так далее) или азотистые основания (нуклеиновые кислоты).
В предпочтительном варианте осуществления один или более ингибиторов ΗΙΡ-1 представляют собой антрациклины. Антрациклины, такие как доксорубицин (ΌΧΚ) и даунорубицин (ΌΝΚ), представляют собой противораковые химиотерапевтические средства, которые связываются с ДНК и подавляют пролиферацию раковых клеток. Независимо от их активности в отношении клеточной пролиферации ΌΧΚ и ΌΝΚ подавляют транскрипционную активность ΗΙΡ-1.
Антрациклины представляют собой гликозиды, агликон которых является тетрациклическим производным антрахинона. Термин антрациклин охватывает соединения класса природных антрациклинов, а также их синтетические или полусинтетические аналоги и производные, их пролекарства и их фармацевтически приемлемые соли. Используемые в настоящем документе термины аналоги и производные, как правило, относятся к соединениям, в которых сохранено антрациклиновое ядро, т.е. тетрациклическое ядро, но существует различие по одной или более функциональным группам, присоединенным к ядру. В некоторых вариантах осуществления производные и аналоги отличаются по фрагменту агликона и/или сахарному остатку, присоединенному к молекуле.
Любой антрациклин, который обеспечивает терапевтический эффект, может быть включен в конъюгаты полимер-лекарственное средство. Предпочтительно, антрациклин представляет собой соединение, которое используется или подходит для клинического применения в качестве антинеопластического средства при химиотерапии рака. Примеры природных соединений в классе антрациклинов включают даунорубицин и доксорубицин, которые продуцируются микроорганизмами, принадлежащими к роду 81гер1ошусе§.
Примеры предпочтительных антрациклинов включают доксорубицин, даунорубицин, 13дезоксидоксорубицин (также известный как ОРХ-100), иодоксорубицин, эпирубицин, ТНР-адриамицин, идарубицин, меногарил, аклациномицин Α (также известный как акларубицин), зорубицин, пираруби
- 11 032552 цин, валрубицин, амрубицин, иодоксорубицин, неморубицин, (4К)-1-(4-карбокси-1-оксобутил)-4гидрокси-Ь-иролил-Ь-аланил-Ь-серил(2К)-2-циклогексилглицил-Ь-глютаминил-Ь-серил-Ь-лейцин (также известный как Ь 377202), 4'-дезокси-4'-иодоксорубицин. Дополнительные антрациклины, которые можно включать в конъюгаты иолимер-лекарственное средство, известны в данной области. См., например, 8иага!о е! а1. СЫшюаоддц 9-19 (Артй 1990); ЕА. Ьо^п: Рйаттас. Т1ег. 60: 185-214 (1993); ЕМ. Агсатопе: Вюсй1Ш1е, 80, 201-206 (1998); С. Моппеге!: Еиг. I. Мей. Сйет. 36: 483-493 (2001) и патенты США № 4438015, 4672057, 5646177, 5801257 и 6284737.
Конъюгат иолимер-лекарственное средство может также содержать фармацевтически приемлемую соль антрациклина. В некоторых случаях может быть желательным включать соль антрациклина в конъюгат полимер-лекарственное средство из-за одного или более полезных физических свойств солей, например повышенной стабильности или желательной растворимости, или профиля растворения. Соли соединений антрациклина можно получать с использованием стандартных методов, известных в данной области. Список подходящих солей можно найти, например, в книге КенипдЮп'к Рйагтасеийса1 8с1епсек, 20111 ей., ЕарршсоИ А1Шатк & АПОпк, Ва1йтоге, МО, 2000, р. 704.
Конъюгат полимер-лекарственное средство может также содержать пролекарство антрациклина. Пролекарства антрациклина представляют собой соединения, которые могут превращаться в биологически активный антрациклин, либо ш у1уо после введения, либо ш νίΙΐΌ до введения соединения. Примеры подходящих пролекарств антрациклина известны в данной области. См, например, патент США № 5710135 Ьеепйетк е! а1., патент США № 6268488, выданный ВагЬак III е! а1., АО 92/19639, выданный I. [ассщеку е! а1., К. Вокк1е! е! а1. Сапсег Кек. 54: 2151-2159 (1994), 8. Апйпапотеп)апайагу е! а1. Вюотд. Мей. С1ет Ье!!. 2: 1093-1096 (1992) и Е-Р. Секкоп е! а1. Апй-Сапсег Эгид Оек. 9: 409-423 (1994).
Другие подходящие ингибиторы ΗΙΕ-1 включают, без ограничения, полиамиды, такие как эхиномицин (Ы8С-13502) (Копд е! а1., Сапсег Кекеагсй, 65(19): 9047-9055 (2005) и О1епуик е! а1., Ргос. Ыа!1. Асай. 8с1. И8А 101: 16768-16773 (2004)), который ингибирует взаимодействие между ΗΙΕ и ДНК; эпидитиодикетопиперазины, такие как хетомин (Кипд е! а1., Сапсег Се11. 6(3): 33-43 (2004)), который ингибирует взаимодействие между ΗΙΕ и р300; бензоазагетероциклы, такие как УС-1 (3-(5'-гидроксиметил-2'фурил)-1-бензилиндазол) (Уео е! а1., 1оигпа1 оГ !1е Ыа!юпа1 Сапсег 1пкй!и!е. 95(7): 516-525 (2003)); радицикол и его аналоги, такие как КР58333 (КигеЬауакЫ е! а1., Сапсег Кекеагсй 92: 1342-1351 (2001)); рапамицины, включая рапамицин и его аналоги, такие как темсиролимус (СС1779) и эверолимус (КАЭ001) (Мащтйег е! а1. Ыа!иге МейЮпе 10: 594-601 (2004)); гелданамицины, включая гелданамицин и его аналоги, такие как 17-аллиламино-17-деметоксигелданамицин (17-ААС) и 17-диметиламиноэтиламино-17деметоксигелданамицин (17-ЭМАС); квинокармицина моноцитрат (КА2152) и продукт его гидроцианации ΌΧ-52-1 (Ы8С-607097) (Карщагйа е! а1. Сапсег Кекеагсй. 62(15): 4316-4324 (2002)); аналоги камптотецина (ингибиторы топоизомеразы I) (Кар1кагйа е! а1., Сапсег Кекеагсй 62(15): 4316-4324 (2002)), такие как топотекан (N80609699). камптотецин, сложный 20-эфир(8) (N80-606985). и 9-глицинамидо-20(8)камптотецин НС1 Щ8С-639174); средства, нарушающие структуру микротрубочек (Ексшп е! а1. Сапсег Кекеагсй 65(19): 9021-9028 (2005)), такие как паклитаксел, доцетаксел, 2-метоксиэстрадиол, винкристин, дискодермолид и эпотилон В; ингибиторы тиоредоксина (Ае1к1 е! а1. Мо1еси1аг Сапсег Тйетареийск, 2: 235-243 (2003)), такие как РХ-12 (1-метилпропил-2-имидазолил дисульфид) и плейротин; ингибиторы Р13-киназы (Лайд е! а1. Се11 Сго\\111 апй П1ГГетеп!1а!юп 12: 363-369 (2001)), такие как вортманнин и ЬУ294002; ингибиторы протеинкиназы-1 (МЕК-1), такие как РЭ98059 (2'-амино-3'метоксифлавон); РХ12 (1-метилпропил-2-имидазолил дисульфид); плейротин РХ-478; хиноксалин 1,4-диоксиды; натрия бутират (№1В); натрия нитропуррузид (8№); 103Ό5Β (Тап е! а1., Сапсег Кекеатсй 65:605-612 (2005)); РХ-478 (8-2-амино-3-[4У-Х№бис-(2-хлорэтил)амино]фенилпропионовой кислоты Ν-оксид дигидрохлорид) (Ае1к1 е! а1., Мо1еси1аг Сапсег Тйетареийск 3: 233-244 (2004) ); ингибиторы деацетилазы гистонов, такие как [(Е)-(18,48,108,21К)-7-[(2)этилиден]-4,21-диизопропил-2-окса-12,13-дитиа-5,8,20,23-тетраазабицикло[8,7,6]трикос-16-ен-3,6,9,19,22-пентанон (ЕК.901228, депсипептид) и ЕК228 (ЕК901228) Щ8С 630176) (М1е-Ьее е! а1., Вюсйет1са1 апй Вюрйукка1 Кекеатсй Соттишсайопк 300(1): 241-246 (2003)); генистеин; инданон; стауроспорин; кумарины; аналоги барбитуровой и тиобарбитуровой кислоты; аналоги (арилоксиацетиламино)бензойной кислоты, 2-метоксиэстрадиол и его аналоги, дигоксин и другие сердечные гликозиды (Ζΐκπίβ е! а1. РNА8 105: 19579), акрифлавин (Ьее е! а1. РNА8 106: 17910) и соединения гидроксамовой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор НГР-1 представляет собой рапамицин, темсиролимус, эверолимус, гелданамицин, эхиномицин, доксорубицин, даунорубицин, камптотецин, топотекан, иринотекан или бортезомиб.
С. Гидрофобный полимерный сегмент.
Конъюгаты полимер-лекарственное средство могут содержать один или более гидрофобных полимерных сегментов. Гидрофобные полимерные сегменты могут представлять собой гомополимеры или сополимеры.
В предпочтительных вариантах осуществления гидрофобный полимерный сегмент представляет собой биоразлагаемый полимер. В тех случаях, когда гидрофобный полимер является биоразлагаемым, профиль распада полимера можно выбирать для оказания влияния на скорость высвобождения активного
- 12 032552 средства ίη νίνο. Например, можно выбирать гидрофобный полимерный сегмент, чтобы он распадался в течение периода времени от семи дней до 2 лет, более предпочтительно от семи дней до 56 недель, более предпочтительно от четырех недель до 56 недель, наиболее предпочтительно от восьми недель до 28 недель.
Примеры подходящих гидрофобных полимеров включают полигидроксикислоты, такие как поли(молочная кислота), поли(гликолевая кислота) и поли(молочная кислота-со-гликолевая кислота); полигидроксиалканоаты, такие как поли-3-гидроксибутират или поли-4-гидроксибутират; поликапролактоны; поли(ортоэфиры); полиангидриды; поли(фосфазены); поли(гидроксиалканоаты); поли(лактид-со-капролактоны); поликарбонаты, такие как поликарбонаты на основе тирозина; полиамиды (включая синтетические и природные полиамиды), полипептиды и поли(аминокислоты); полиэфирамиды; сложные полиэфиры; поли(диоксаноны); поли(алкиленалкилаты); гидрофобные полиэфиры; полиуретаны; полиэфиры, содержащие сложноэфирные группы; полиацетали; полицианоакрилаты; полиакрилаты; полиметилметакрилаты; полисилоксаны; сополимеры поли(оксиэтилена)/поли(оксипропилена); поликетали; полифосфаты; полигидроксивалераты; полиалкиленоксалаты; полиалкиленсукцинаты; поли(малеиновые кислоты), а также их сополимеры.
В предпочтительных вариантах осуществления гидрофобный полимерный сегмент представляет собой полиангидрид. Полиангидрид может представлять собой алифатический полиангидрид, ненасыщенный полиангидрид или ароматический полиангидрид. Репрезентативные полиангидриды включают полиадипиновый ангидрид, полифумаровый ангидрид, полисебациновый ангидрид, полималеиновый ангидрид, полияблочный ангидрид, полифталевый ангидрид, полиизофталевый ангидрид, полиаспарагиновый ангидрид, политерефталевый ангидрид, полиизофталевый ангидрид, поликарбоксифеноксипропановый ангидрид, поликарбоксифеноксигексановый ангидрид, а также сополимеры этих полиангидридов с другими полиангидридами в различных мольных соотношениях. Другие подходящие полиангидриды раскрыты в патентах США № 4757128, 4857311, 4888176 и 4789724. Полиангидрид также может быть сополимером, содержащим полиангидридные блоки.
В некоторых вариантах осуществления гидрофобный полимерный сегмент представляет собой полисебациновый ангидрид. В некоторых вариантах осуществления гидрофобный полимерный сегмент представляет собой поли(1,6-бис-(п-карбоксифенокси)гексан-со-себациновую кислоту) (поли(СРН-8А). В некоторых вариантах осуществления гидрофобный полимерный сегмент представляет собой поли(1,3бис-(п-карбоксифенокси)пропан-со-себациновую кислоту) (поли(СРР-8А).
Молекулярную массу гидрофобного полимера можно варьировать для получения конъюгатов полимер-лекарственное средство, которые образуют частицы, имеющие свойства, например, скорость высвобождения лекарственного средства, оптимальные для конкретных вариантов применения. Г идрофобный полимерный сегмент может иметь молекулярную массу от примерно 150 Да до 1 МДа. В некоторых вариантах осуществления гидрофобный полимерный сегмент имеет молекулярную массу от примерно 1 кДа до примерно 100 кДа, более предпочтительно от примерно 1 кДа до примерно 50 кДа, наиболее предпочтительно от примерно 1 кДа до примерно 25 кДа.
В некоторых случаях гидрофобный полимерный сегмент имеет молекулярную массу, которая меньше чем средняя молекулярная масса одного или более гидрофильных полимерных сегментов конъюгата полимер-лекарственное средство. В предпочтительном варианте осуществления гидрофобный полимерный сегмент имеет молекулярную массу менее чем примерно 5 кДа.
Ό. Гидрофильные полимеры.
Конъюгаты полимер-лекарственное средство могут также содержать один или более гидрофильных полимерных сегментов. Предпочтительно, конъюгаты полимер-лекарственное средство содержат более одного гидрофильного полимерного сегмента. В некоторых вариантах осуществления конъюгат полимер-лекарственное средство содержит от двух до шести, более предпочтительно от трех до пяти гидрофильных полимерных сегментов. В некоторых вариантах осуществления конъюгат полимер-лекарственное средство содержит три гидрофильных полимерных сегмента.
Каждый гидрофильный полимерный сегмент может независимо представлять собой любой гидрофильный биосовместимый (т.е. не вызывающий существенный воспалительный или иммунный ответ) нетоксичный полимер или сополимер. Примеры подходящих полимеров включают, но не ограничиваются ими, поли(алкиленгликоли), такие как полиэтиленгликоль (РЕС), поли(пропиленгликоль) (РРС), а также сополимеры этиленгликоля и пропиленгликоля, поли(оксиэтилированный полиол), поли(олефиновый спирт), поливинилпирролидон, поли(гидроксиалкилметакриламид), поли(гидроксиалкилметакрилат), поли(сахариды), поли(аминокислоты), поли(гидроксикислоты), поли(виниловый спирт), а также их сополимеры, терполимеры и смеси.
В предпочтительных вариантах осуществления один или более гидрофильных полимерных сегментов содержат поли(алкиленгликолевую) цепь. Поли(алкиленгликолевые) цепи могут содержать от 8 до 500 повторяющихся единиц, более предпочтительно от 40 до 500 повторяющихся единиц. Подходящие поли(алкиленгликоли) включают полиэтиленгликоль, полипропилен-1,2-гликоль, поли(пропиленоксид), полипропилен-1,3-гликоль, а также их сополимеры. В некоторых вариантах осуществления один или более гидрофильных полимерных сегментов представляют собой цепи РЕС. В таких случаях цепи РЕС
- 13 032552 могут быть линейными или разветвленными, как те, которые описаны в патенте США № 5932462. В некоторых вариантах осуществления цепи РЕС являются линейными.
Каждый из одного или более гидрофильных полимерных сегментов может независимо иметь молекулярную массу от примерно 300 Да до 1 МДа. Гидрофильный полимерный сегмент может иметь молекулярную массу в диапазоне из любых молекулярных масс, перечисленных выше. В некоторых вариантах осуществления каждый из одного или более гидрофильных полимерных сегментов имеет молекулярную массу от примерно 1 кДа до примерно 20 кДа, более предпочтительно от примерно 1 кДа до примерно 15 кДа, наиболее предпочтительно от примерно 1 кДа до примерно 10 кДа. В предпочтительном варианте осуществления каждый из одного или более гидрофильных полимерных сегментов имеет молекулярную массу примерно 5 кДа.
Е. Узлы ветвления.
Конъюгаты, необязательно, содержат узел ветвления, который служит для связывания нескольких гидрофильных полимерных сегментов с одним концом гидрофобного полимерного сегмента. Узел ветвления может представлять собой любой органический, неорганический или металлоорганический фрагмент, который является поливалентным, так, чтобы обеспечивать более двух точек присоединения. В предпочтительных вариантах осуществления узел ветвления представляет собой органическую молекулу, содержащую несколько функциональных групп.
Функциональные группы могут представлять собой любой атом или группу атомов, которая содержит по меньшей мере один атом, не являющийся ни углеродом, ни водородом, при условии, что эти группы должны быть способны вступать в реакцию с гидрофобными и гидрофильными полимерными сегментами. Подходящие функциональные группы включают галогены (бром, хлор и йод); кислородсодержащие функциональные группы, такие как гидроксилы, эпоксиды, карбонилы, альдегиды, сложный эфир, карбоксилы и кислые хлориды; азотсодержащие функциональные группы, такие как амины и азиды; а также серосодержащие группы, такие как тиолы. Функциональная группа может также представлять собой углеводородный фрагмент, содержащий одну или более неароматических пи-связей, например, алкин, алкен или диен. Предпочтительно, узел ветвления будет содержать функциональные группы по меньшей мере двух различных типов (например, один или более спиртов и одну или более карбоновых кислот или один или более галогенидов и один или более спиртов). В таких случаях различные функциональные группы, присутствующие на узле ветвления, могут быть независимо доступны для синтетической модификации, допуская ковалентное присоединение гидрофобных и гидрофильных сегментов к узлу ветвления в контролируемых стехиометрических соотношениях.
После реакции гидрофобных и гидрофильных полимерных сегментов с функциональными группами на узле ветвления один или более гидрофобных полимерных сегментов и один или более гидрофильных полимерных сегментов будут ковалентно присоединены к узлу ветвления через связывающие фрагменты. Особенности связывающих фрагментов будут определяться особенностями функциональной группы и реакционноспособным локусом гидрофобных и гидрофильных полимерных сегментов (поскольку эти элементы вступают в реакцию с образованием связывающего фрагмента или предшественника связывающего фрагмента). Примеры подходящих связывающих фрагментов, которые связывают полимерные сегменты с узлом ветвления, включают вторичные амиды (-ΟΘΝΗ-), третичные амиды (-ΟΘΝΒ-), вторичные карбаматы (-ΘΟΘΝΗ-; -ΝΗΟΘΘ-), третичные карбаматы (-ΘΟΘΝΚ-; -ΝΚΟΘΘ-), мочевины (-ΝΗΟΘΝΗ-; -ΝΚΟΘΝΗ-; -ΝΗΟΘΝΚ-, -ΝΚΟΘΝΚ-), карбинолы (-СНОН-, -СВОН-), эфиры (-О-) и сложные эфиры (-СОО-, -СЩО2С-, СЖО2С-), где В представляет собой алкильную группу, арильную группу или гетероциклическую группу. В некоторых вариантах осуществления полимерные сегменты связаны с узлом ветвления через сложный эфир (-СОО-, -СЩО2С-, СΗВΟ2С-), вторичный амид (-СО№Ш) или третичный амид (-СОИВ-), где В представляет собой алкильную группу, арильную группу или гетероциклическую группу.
В некоторых вариантах осуществления узел ветвления представляет собой поликарбоновую кислоту, такую как лимонная кислота, виннокаменная кислота, муциновая кислота, глюконовая кислота или 5гидроксибензол-1,2,3-трикарбоновая кислота. Иллюстративные узлы ветвления включают следующие органические соединения:
- 14 032552
Р. Синтез конъюгатов полимер-лекарственное средство.
Конъюгаты полимер-лекарственное средство можно получать с использованием методов синтеза, известных в данной области. Репрезентативные методологии для получения конъюгатов полимерлекарственное средство описаны ниже. Подходящий метод синтеза конкретного конъюгата полимерлекарственное средство можно определять с учетом ряда факторов, таких как структура конъюгата полимер-лекарственное средство, особенности полимеров, которые составляют конъюгат, особенности активного средства, а также структура соединения в целом в том, что касается совместимости функциональных групп, стратегий использования защитных групп и наличия лабильных связей.
В дополнение к методологиям синтеза, описанным ниже, в данной области известны реакции и стратегии, полезные для получения конъюгатов полимер-лекарственное средство, альтернативные тем, которые описаны в настоящем документе. См., например, Матей, Абуапсеб Огдашс СйешЩгу 51й Еб1ΐίοπ, 2001, Ш|1еу-1п1ег8С1епсе РиЫюайоп, ЫеА Уогк.
Как правило, конъюгаты полимер-лекарственное средство получают, создавая сначала полимерный компонент конъюгата полимер-лекарственное средство, а затем ковалентно присоединяя активное средство. Например, схемы 1 и 2 иллюстрируют синтез конъюгата полимер-доксорубицин, содержащего доксорубицин, связанный с полимерным сегментом из поли(себацинового ангидрида), к которому присоединена одна полиэтиленгликольная цепь (ΏΧΡ-ΡδΑ-ΡΕΘ).
Схема 1
Схема 2
На первом этапе себациновую кислоту нагревают с обратным холодильником в уксусном ангидри- 15 032552 де, получая ацилированный предшественник полисебациновой кислоты (Рге8А). Избыток Рге8А затем объединяют с метиловым эфиром полиэтиленгликоля и полимеризуют в безводных условиях полимеризации горячего расплава. Как показано на схеме 2, полученный полимер (РЕС-Р8А) затем может вступать в реакцию с доксорубицином, с образованием конъюгата полимер-лекарственное средство (ΏΧΚР8А-РЕС).
Синтез иллюстративного конъюгата полимер-лекарственное средство, содержащего несколько гидрофильных полимерных сегментов (три цепи РЕС), присоединенных к гидрофобному полимерному сегменту (поли(себациновому ангидриду)) через узел ветвления (лимонная кислота), описан на схемах 3 и 4.
В случае конъюгатов полимер-лекарственное средство, содержащих узел ветвления, синтез конъюгата полимер-лекарственное средство будет, как правило, начинаться с последовательного присоединения гидрофобного полимерного сегмента и гидрофильных полимерных сегментов к узлу ветвления, с получением полимерной части конъюгата полимер-лекарственное средство. Как показано на схеме 3, сначала лимонная кислота вступает в реакцию с СН3О-РЕО-№Н2 в присутствии Ν,Ν'-дициклогексилкарбодиимида (ИСС) и каталитического количества 4-диметиламинопиридина (ИМАР), с образованием амидных связей между цепями РЕС и тремя остатками карбоновой кислоты узла ветвления из лимонной кислоты. Полученное соединение затем вступает в реакцию с ацилированным предшественником полисебациновой кислоты (Рге8А) и полимеризуется в безводных условиях полимеризации горячего расплава. Как показано на схеме 4, полученный полимер (РЕС3-Р8А) затем вступает в реакцию с доксорубицином, с образованием конъюгата полимер-лекарственное средство (ИХК-Р8А-РЕС3).
Схема 3
Схема 4
III. Частицы и имплантаты для контролируемой доставки ингибиторов Н1Р-1.
Предложены полимерные имплантаты (например, стержни, диски, пластины и так далее), микро- 16 032552 частицы и наночастицы для контролируемой доставки одного или более ингибиторов ΗΙΡ-1, либо образованные из конъюгатов, либо содержащие конъюгаты, диспергированные или инкапсулированные в матрице. В некоторых вариантах осуществления частицы или имплантаты содержат один или более ингибиторов ΗΙΡ-1, диспергированных или инкапсулированных в полимерной матрице. В предпочтительных вариантах осуществления частицы или имплантаты образованы из конъюгатов полимерлекарственное средство, содержащих один или более ингибиторов ΗΙΡ-1, которые ковалентно связаны с полимером.
Α. Частицы, образованные из конъюгатов полимер-лекарственное средство.
Микрочастицы и наночастицы можно формировать из одного или более конъюгатов полимерлекарственное средство. В некоторых случаях частицы образованы из одного конъюгата полимерлекарственное средство (т.е. частицы образованы из конъюгата полимер-лекарственное средство, который содержит одно и то же активное средство, гидрофобный полимерный сегмент, узел ветвления (при наличии) и гидрофильный полимерный сегмент или сегменты).
В других вариантах осуществления частицы образованы из смеси двух или более различных конъюгатов полимер-лекарственное средство. Например, частицы могут быть образованы из двух или более конъюгатов полимер-лекарственное средство, содержащих разные ингибиторы ΗΙΡ-1 и один и тот же гидрофобный полимерный сегмент, узел ветвления (при наличии) и гидрофильный полимерный сегмент или сегменты. Такие частицы можно использовать, например, для совместного введения двух или более ингибиторов ΗΙΡ-1. В других случаях частицы образованы из двух или более конъюгатов полимерлекарственное средство, содержащих один и тот же ингибитор ΗΙΡ-1 и разные гидрофобные полимерные сегменты, узлы ветвления (при наличии) и/или гидрофильные полимерные сегменты. Такие частицы можно использовать, например, для варьирования скорости высвобождения ингибиторов ΗΙΡ-1. Частицы также могут быть образованы из двух или более конъюгатов полимер-лекарственное средство, содержащих разные ингибиторы ΗΙΡ-1 и разные гидрофобные полимерные сегменты, узлы ветвления (при наличии) и/или гидрофильные полимерные сегменты.
Частицы также могут быть образованы из смесей конъюгатов полимер-лекарственное средство с одним или более дополнительными полимерами. В этих случаях один или более дополнительных полимеров могут представлять собой любой из не биоразлагаемых или биоразлагаемых полимеров, описанных в разделе В ниже, хотя биоразлагаемые полимеры являются предпочтительными. В данных вариантах осуществления можно выбирать характерные особенности и количество одного или более дополнительных полимеров, например, для оказания влияния на стабильность частиц, т.е. время, необходимое для распространения до участка, где желательна доставка, и время, желательное для доставки.
В композициях, описанных в настоящем документе, полезны частицы, имеющие средний размер частиц от 10 нм до 1000 мкм. В предпочтительных вариантах осуществления частицы имеют средний размер частиц от 10 нм до 100 мкм, более предпочтительно от примерно 100 нм до примерно 50 мкм, более предпочтительно от примерно 200 нм до примерно 50 мкм. В некоторых вариантах осуществления частицы представляют собой наночастицы, имеющие диаметр от 500 до 700 нм. Частицы могут иметь любую форму, но, как правило, имеют сферическую форму.
В некоторых вариантах осуществления популяция частиц, образованных из одного или более конъюгатов полимер-лекарственное средство, представляет собой монодисперсную популяцию частиц. В других вариантах осуществления популяция частиц, образованных из одного или более конъюгатов полимер-лекарственное средство, представляет собой полидисперсную популяцию частиц. В некоторых случаях, когда популяция частиц, образованных из одного или более конъюгатов полимер-лекарственное средство, представляет собой полидисперсную популяцию частиц, более 50, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90 или 95% распределения частиц по размерам находится в пределах 10% от среднего размера частиц.
Предпочтительно, частицы, образованные из одного или более конъюгатов полимер-лекарственное средство, содержат значительные количества гидрофильного полимера, такого как РЕС. на своей поверхности.
В. Частицы, содержащие один или более ингибиторов ΗΙΡ-1, диспергированных в полимерной матрице.
Можно также получать частицы, содержащие один или более ингибиторов ΗΙΡ-1, диспергированных или инкапсулированных в полимерной матрице. Матрица может быть образована из не биоразлагаемых или биоразлагаемых матриц, хотя биоразлагаемые матрицы являются предпочтительными. Полимер выбирают на основании времени, необходимого для стабильности ίη νίνο, т.е. времени, необходимого для распространения до участка, где желательна доставка, и времени, желательного для достаРеирезентативными синтетическими полимерами являются поли(гидроксикислоты), такие как поли(молочная кислота), поли(гликолевая кислота) и поли(молочная кислота-со-гликолевая кислота), поли(лактид), поли(гликолид), поли(лактид-со-гликолид), полиангидриды, полиортоэфиры, полиамиды, поликарбонаты, полиалкилены, такие как полиэтилен и полипропилен, полиалкиленгликоли, такие как поли(этиленгликоль), полиалкиленоксиды, такие как поли(этиленоксид), полиалкилентерефталаты, такие как поли(этилентерефталат), поливиниловые спирты, поливиниловые эфиры, поливиниловые сложные эфиры, поливиниловые галогениды, такие как поли(винилхлорид), поливинилпирролидон, полисилокса
- 17 032552 ны, поли(виниловые спирты), поли(винилацетат), полистирол, полиуретаны и их сополимеры, дериватизированные целлюлозы, такие как алкилцеллюлоза, гидроксиалкилцеллюлозы, эфиры целлюлозы, сложные эфиры целлюлозы, нитроцеллюлозы, метилцеллюлоза, этилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксибутилметилцеллюлоза, ацетат целлюлозы, пропионат целлюлозы, ацетат бутират целлюлозы, ацетат фталат целлюлозы, карбоксилэтилцеллюлоза, триацетат целлюлозы и натриевая соль сульфата целлюлозы (совместно называемые в настоящем документе синтетические целлюлозы), полимеры акриловой кислоты, метакриловой кислоты или их сополимеры или производные, включая сложные эфиры, поли(метилметакрилат), поли(этилметакрилат), поли(бутилметакрилат), поли(изобутилметакрилат), поли(гексилметакрилат), поли(изодецилметакрилат), поли(лаурилметакрилат), поли(фенилметакрилат), поли(метилакрилат), поли(изопропилакрилат), поли(изобутилакрилат) и поли(октадецилакрилат) (совместно называемые в настоящем документе полиакриловые кислоты), поли(масляная кислота), поли(валериановая кислота) и поли(лактид-со-капролактон), их сополимеры и смеси. Используемый в настоящем документе термин производные включает полимеры, имеющие замены, добавления химических групп, например, алкила, алкилена, гидроксилирования, окисления и другие модификации, обычно используемые специалистами в данной области.
Примеры предпочтительных биоразлагаемых полимеров включают полимеры гидроксикислот, таких как молочная кислота и гликолевая кислота, а также сополимеры с РЕС, полиангидриды, поли(орто)эфиры, полиуретаны, поли(масляную кислоту), поли(валериановую кислоту), поли(лактид-сокапролактон), их смеси и сополимеры.
Примеры предпочтительных природных полимеров включают белки, такие как альбумин и проламины, например зеин, а также полисахариды, такие как альгинат, целлюлоза и полигидроксиалканоаты, например, полигидроксибутират.
Стабильность матрицы ίη νίνο можно регулировать в процессе производства за счет использования таких полимеров, как полилактид-со-гликолид, сополимеризованный с полиэтиленгликолем (РЕС). РЕС в случае экспонирования на внешней поверхности может продлевать время циркуляции этих материалов, поскольку он является гидрофильным.
Примеры предпочтительных не биоразлагаемых полимеров включают этиленвинилацетат, поли(мет)акриловую кислоту, полиамиды, их сополимеры и смеси.
В композициях, описанных в настоящем документе, полезны частицы, имеющие средний размер частиц от 10 нм до 1000 мкм. В предпочтительных вариантах осуществления частицы имеют средний размер частиц от 10 нм до 100 мкм, более предпочтительно от примерно 100 нм до примерно 50 мкм, более предпочтительно от примерно 200 нм до примерно 50 мкм. В некоторых вариантах осуществления частицы представляют собой наночастицы, имеющие диаметр от 500 до 700 нм. Частицы могут иметь любую форму, но, как правило, имеют сферическую форму.
С. Методы получения микрочастиц и наночастиц.
Микрочастицы и наночастицы можно получать с использованием любого подходящего метода формирования полимерных микро- или наночастиц, известного в данной области. Метод, используемый для получения частиц, будет зависеть от множества факторов, включая характеристики полимеров, присутствующих в конъюгате полимер-лекарственное средство или полимерной матрице, а также желаемый размер частиц и распределение по размерам. Тип ингибитора(ов) ΗΙΕ-1, включаемых в состав частиц, также может являться одним из факторов, поскольку некоторые ингибиторы ΗΙΕ-1 являются нестабильными в присутствии некоторых растворителей, в определенных диапазонах температур и/или в определенных диапазонах рН.
В ситуациях, когда желательно получать монодисперсную популяцию частиц, частицы могут быть образованы с помощью метода, которым получают монодисперсную популяцию наночастиц. Альтернативно, можно использовать методы получения наночастиц с полидисперсным распределением, и частицы можно разделять методами, известными в данной области, такими как просеивание, после образования частиц для получения популяции частиц, имеющих желаемый средний размер частиц и распределение частиц по размерам.
Обычные методы получения микрочастиц и наночастиц включают, но не ограничиваются ими, выпаривание растворителя, формирование частиц горячим расплавом, удаление растворителя, сушку распылением, обращение фаз, коацервацию и низкотемпературное литье. Подходящие методы образования частиц кратко описаны ниже. Фармацевтически приемлемые эксципиенты, включая изменяющие рН средства, дезинтегрирующие средства, консерванты и антиоксиданты, необязательно, можно включать в частицы в процессе образования частиц.
1. Выпаривание растворителя.
В данном методе конъюгат полимер-лекарственное средство (или полимерную матрицу и один или более ингибиторов ΗΙΕ-1) растворяют в летучем органическом растворителе, таком как метиленхлорид. Затем органический раствор, содержащий конъюгат полимер-лекарственное средство, суспендируют в водном растворе, содержащем поверхностно-активное вещество, такое как поли(виниловый спирт). Полученную эмульсию перемешивают до испарения большей части органического растворителя, при этом остаются твердые наночастицы. Полученные в результате наночастицы промывают водой и сушат в те
- 18 032552 чение ночи в лиофилизаторе. Таким методом можно получать наночастицы с разными размерами и морфологией.
Конъюгаты полимер-лекарственное средство, содержащие лабильные полимеры, такие как некоторые полиангидриды, могут разрушаться в процессе изготовления из-за присутствия воды. Для этих полимеров можно использовать следующие два метода, которые осуществляют в полностью безводных органических растворителях.
2. Формирование частиц горячим расплавом.
В данном методе конъюгат полимер-лекарственное средство (или полимерную матрицу и один или более ингибиторов ΗΙΡ-1) сначала расплавляют, а затем суспендируют в несмешиваемом растворителе (таком как силиконовое масло) и при непрерывном перемешивании нагревают до 5°С выше температуры плавления конъюгата полимер-лекарственное средство. После стабилизации эмульсии ее охлаждают до отверждения частиц конъюгата полимер-лекарственное средство. Полученные в результате наночастицы промывают декантацией с подходящим растворителем, таким как петролейный эфир, получая сыпучий порошок. Внешние поверхности частиц, полученных таким методом, как правило, гладкие и плотные. Формирование частиц горячим расплавом можно использовать для получения частиц, содержащих конъюгаты полимер-лекарственное средство, которые гидролитически нестабильны, например, в случае некоторых полиангидридов. Предпочтительно, конъюгат полимер-лекарственное средство, используемый для получения микрочастиц данным методом, будет иметь общую молекулярную массу менее 7 5000 Да.
3. Удаление растворителя.
Для получения частиц из конъюгатов полимер-лекарственное средство, которые гидролитически нестабильны, также можно использовать удаление растворителя. В данном методе конъюгат полимерлекарственное средство (или полимерную матрицу и один или более ингибиторов ΗΙΡ-1) диспергируют или растворяют в летучем органическом растворителе, таком как метиленхлорид. Эту смесь затем суспендируют путем перемешивания в органическом масле (таком как силиконовое масло) для получения эмульсии. Из эмульсии образуются твердые частицы, которые затем можно выделять из супернатанта. Морфология внешних поверхностей сфер, полученных данным методом, в значительной степени зависит от особенностей конъюгата полимер-лекарственное средство.
4. Сушка распылением.
В данном методе конъюгат полимер-лекарственное средство (или полимерную матрицу и один или более ингибиторов ΗΙΡ-1) растворяют в органическом растворителе, таком как метиленхлорид. Раствор прокачивают через сопло микронизации с приводом от потока сжатого газа, и полученный аэрозоль суспендируют в циклоне нагретого воздуха, давая возможность растворителю испаряться из микрокапель, с образованием частиц. Данным методом можно получать частицы с размерами в диапазоне 0,1-10 мкм.
5. Обращение фаз.
Частицы из конъюгатов полимер-лекарственное средство можно формировать с использованием метода обращения фаз. В данном методе конъюгат полимер-лекарственное средство (или полимерную матрицу и один или более ингибиторов ΗΙΡ-1) растворяют в хорошем растворителе, и раствор выливают в сильный осадитель для конъюгата полимер-лекарственное средство для спонтанного образования, при благоприятных условиях, микрочастиц или наночастиц. Метод можно использовать для получения наночастиц с широким диапазоном размеров, включая, например, от примерно 100 нм до примерно 10 мкм, как правило, имеющих узкое распределение частиц по размерам.
6. Коацервация.
Методы получения частиц с использованием коацервации известны в данной области, например, описаны в ОВ В-929406; ОВ В-929 401 и патентах США № 3266987, 4794000 и 4460563. Коацервация заключается в разделении раствора конъюгата полимер-лекарственное средство (или полимерной матрицы и одного или более ингибиторов ΗΙΡ-1) в две несмешивающиеся жидкие фазы. Одна фаза является плотной фазой коацервата, содержащей конъюгат полимер-лекарственное средство в высокой концентрации, тогда как вторая фаза содержит конъюгат полимер-лекарственное средство в низкой концентрации. В плотной фазе коацервата конъюгат полимер-лекарственное средство образует капли с размерами в нанометровом или микрометровом диапазоне, которые затвердевают в частицы. Коацервацию можно вызывать изменением температуры, добавлением осадителя или добавлением микросоли (простая коацервация), либо добавлением другого полимера, в результате чего образуется межполимерный комплекс (сложная коацервация).
7. Низкотемпературное литье.
Методы для литья при очень низких температурах микросфер с контролируемым высвобождением описаны в патенте США № 5019400, выданном СошЬо1х с1 а1. В данном методе конъюгат полимерлекарственное средство (или полимерную матрицу и один или более ингибиторов ΗΙΡ-1) растворяют в растворителе. Смесь затем распыляют в сосуд, содержащий жидкий осадитель при температуре ниже точки замерзания раствора конъюгата полимер-лекарственное средство, который замораживает капли конъюгата полимер-лекарственное средство. По мере того как капли и осадитель для конъюгата полимер-лекарственное средство нагреваются, растворитель в каплях оттаивает и экстрагируется в осадитель,
- 19 032552 что делает микросферы твердыми.
Ό. Имплантаты, образованные из конъюгатов полимер-лекарственное средство.
Из одного или более конъюгатов полимер-лекарственное средство можно формировать имплантаты. В предпочтительных вариантах осуществления имплантаты представляют собой интраокулярные имплантаты. Подходящие имплантаты включают, но не ограничиваются ими, стержни, диски, пластины и тому подобное.
В некоторых случаях имплантаты получают из одного конъюгата полимер-лекарственное средство (т.е. имплантаты образованы из конъюгата полимер-лекарственное средство, который содержит одно и то же активное средство, гидрофобный полимерный сегмент, узел ветвления (при наличии) и гидрофильный полимерный сегмент или сегменты).
В других вариантах осуществления имплантаты образованы из смеси двух или более различных конъюгатов полимер-лекарственное средство. Например, имплантаты могут быть образованы из двух или более конъюгатов полимер-лекарственное средство, содержащих разные ингибиторы ΗΙΕ-1 и один и тот же гидрофобный полимерный сегмент, узел ветвления (при наличии) и гидрофильный полимерный сегмент или сегменты. Такие имплантаты можно использовать, например, для совместного введения двух или более ингибиторов ΗΙΤ-1. В других случаях имплантаты образованы из двух или более конъюгатов полимер-лекарственное средство, содержащих один и тот же ингибитор ΗΙΤ-1 и разные гидрофобные полимерные сегменты, узлы ветвления (при наличии) и/или гидрофильные полимерные сегменты. Такие имплантаты можно использовать, например, для варьирования скорости высвобождения ингибиторов ΗΙΤ-1. Имплантаты также могут быть образованы из двух или более конъюгатов полимерлекарственное средство, содержащих разные ингибиторы ΗΙΤ-1 и разные гидрофобные полимерные сегменты, узлы ветвления (при наличии) и/или гидрофильные полимерные сегменты.
Имплантаты также могут быть образованы из полимерной матрицы, в которой диспергированы или инкапсулированы один или более ингибиторов ΗΙΤ-1. Матрица может быть образована из любых не биоразлагаемых или биоразлагаемых полимеров, описанных в разделе В выше, хотя биоразлагаемые полимеры являются предпочтительными. Состав полимерной матрицы выбирают на основании времени, необходимого для стабильности ίη νίνο, т.е. времени, необходимого для распространения до участка, где желательна доставка, и времени, желательного для доставки.
Имплантаты также могут быть образованы из смесей конъюгатов полимер-лекарственное средство с одним или более полимерами, описанными в разделе В выше.
1. Размер и форма имплантата.
Имплантаты могут быть любой геометрической формы, например в виде волокон, листов, пленок, микросфер, шариков, круглых дисков, стержней или пластин. Размер имплантата определяется такими факторами, как переносимость имплантата, расположение имплантата, ограничения по размерам ввиду предложенного способа введения имплантата, легкость обработки и так далее.
При использовании листов или пленок размеры листов или пленок будут находиться в диапазоне по меньшей мере примерно 0,5 мм х 0,5 мм, как правило, примерно 3-10 мм х 5-10 мм с толщиной примерно 0,1-1,0 мм для простоты обработки. При использовании волокон диаметр волокна, как правило, будет находиться в диапазоне от примерно 0,05 до 3 мм и длина волокна будет, как правило, находиться в диапазоне от примерно 0,5 до 10 мм.
Размер и форму имплантата также можно использовать для контроля скорости высвобождения, периода лечения и концентрации лекарственного средства в зоне имплантации. Более крупные имплантаты будут доставлять пропорционально большую дозу, но в зависимости от отношения площади поверхности к массе могут иметь более низкую скорость высвобождения. Конкретный размер и геометрическую форму имплантата выбирают в соответствии с участком имплантации.
Интраокулярные имплантаты могут быть сферическими и не сферическими по форме. В случае имплантатов сферической формы имплантат может иметь наибольший размер (например, диаметр) от примерно 5 мкм до примерно 2 мм или от примерно 10 мкм до примерно 1 мм для введения с помощью иглы, более 1 мм или более 2 мм, например 3 мм или до 10 мм, для введения путем хирургической имплантации. Если имплантат имеет не сферическую форму, имплантат может иметь наибольший размер или наименьший размер от примерно 5 мкм до примерно 2 мм или от примерно 10 мкм до примерно 1 мм для введения с помощью иглы, более 1 мм или более 2 мм, например 3 мм или до 10 мм, для введения путем хирургической имплантации.
Стекловидная камера глаза человека способна вмещать относительно крупные имплантаты различной геометрической формы, имеющие длину, например, 1-10 мм. Имплантат может представлять собой цилиндрическую гранулу (например, стержень) с размерами примерно 2 мм х 0,75 мм (диаметр). Имплантат может представлять собой цилиндрическую гранулу с длиной от примерно 7 мм до примерно 10 мм и диаметром от примерно 0,75 мм до примерно 1,5 мм. В некоторых вариантах осуществления имплантат имеет форму экструдированного волокна с диаметром примерно 0,5 мм, длиной примерно 6 мм и массой примерно 1 мг. В некоторых вариантах осуществления размер соответствует или близок к таковому у имплантатов, уже одобренных для интраокулярной инъекции при помощи иглы: диаметр 460 мкм и длина 6 мм, а также диаметр 370 мкм и длина 3,5 мм.
- 20 032552
Также могут быть разработаны интраокулярные имплантаты, обладающие по меньшей мере некоторой гибкостью, как для облегчения введения имплантата в глаз, например в стекловидную камеру, так и для последующего размещения имплантата. Общая масса имплантата, как правило, составляет примерно 250-5000 мкг, более предпочтительно примерно 500-1000 мкг. В некоторых вариантах осуществления интраокулярный имплантат имеет массу примерно 500 мкг, 750 мкг или 1000 мкг.
2. Методы изготовления.
Имплантаты можно изготавливать любыми подходящими методами, известными в данной области. Примеры подходящих методов для изготовления имплантатов включают методы выпаривания растворителя, методы разделения фаз, методы с использованием границы раздела фаз, методы литья, методы литьевого прессования, методы экструзии, методы коэкструзии, метод вырезания прессованием, методы вырубной штамповки, компрессионный нагрев, а также их сочетания. Подходящие методы изготовления имплантатов можно выбирать с учетом многих факторов, включая свойства полимер/полимерных сегментов, присутствующих в имплантате, свойства одного или более ингибиторов ΗΙΕ-1, присутствующих в имплантате, а также желаемую форму и размер имплантата. Подходящие методы изготовления имплантатов описаны, например, в патенте США № 4997652 и публикации патентной заявки США № И8 2010/0124565.
В некоторых случаях можно использовать методы экструзии, чтобы избежать необходимости в растворителях в процессе изготовления имплантата. При использовании методов экструзии полимер/полимерные сегменты и ингибитор ΗΙΕ-1 выбирают так, чтобы они были стабильны при температурах, необходимых для производства, как правило, по меньшей мере примерно 85°С. Однако в зависимости от природы полимерных компонентов и одного или более ингибиторов ΗΙΕ-1 в методах экструзии можно использовать температуры от примерно 25°С до примерно 150°С, более предпочтительно от примерно 65°С до примерно 130°С.
Имплантаты можно получать коэкструзией для создания покрытия, охватывающего всю или часть поверхности имплантата. Такие покрытия могут быть эродируемыми или не эродируемыми и могут быть непроницаемыми, полупроницаемыми или проницаемыми для ингибитора ΗΙΕ-1, воды или их сочетаний. Такие покрытия можно использовать для дополнительного контроля высвобождения ингибитора ΗΙΕ-1 из имплантата.
Для получения имплантатов можно использовать компрессионные методы. При использовании компрессионных методов часто получают имплантаты с более высокими скоростями высвобождения, чем при использовании методов экструзии. В компрессионных методах можно использовать давление примерно 50-150 фунтов на квадратный дюйм, более предпочтительно примерно 70-80 фунтов на квадратный дюйм, даже более предпочтительно примерно 76 фунтов на квадратный дюйм и использовать температуру от примерно 0°С до примерно 115°С, более предпочтительно примерно 25°С.
Ιν. Фармацевтические препараты.
Фармацевтические препараты содержат один или более конъюгатов полимер-лекарственное средство в сочетании с одним или более фармацевтически приемлемыми эксципиентами. Репрезентативные эксципиенты включают растворители, разбавители, изменяющие ρΗ средства, консерванты, антиоксиданты, суспендирующие средства, увлажняющие средства, модификаторы вязкости, тонизирующие средства, стабилизаторы, а также их сочетания. Подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты предпочтительно выбирают из материалов, которые, в целом, признаны безопасными (СКА8) и могут быть введены индивидууму, не вызывая нежелательные биологические побочные эффекты или нежелательные взаимодействия.
В некоторых случаях фармацевтический препарат содержит только один тип конъюгата или полимерных частиц для контролируемого высвобождения ингибиторов ΗΙΕ-1 (например, препарат, содержащий частицы конъюгата полимер-лекарственное средство, при этом частицы конъюгата полимерлекарственное средство, включенные в фармацевтический препарат, имеют один и тот же состав). В других вариантах осуществления фармацевтический препарат содержит два или более различных типов конъюгатов или полимерных частиц для контролируемого высвобождения ингибиторов ΗΙΕ-1 (например, фармацевтический препарат содержит две или более популяций частиц конъюгата полимерлекарственное средство, при этом популяции частиц конъюгата полимер-лекарственное средство имеют разные химические составы, разные средние размеры частиц и/или разные распределения частиц по размерам).
А. Дополнительные активные средства.
В дополнение к одному или более ингибиторам ΗΙΕ-1, присутствующим в полимерных частицах, препарат может содержать одно или более дополнительных диагностических и/или профилактических средств. Активные средства могут представлять собой низкомолекулярное активное средство или биомолекулу, такую как фермент или белок, полипептид или нуклеиновая кислота. Подходящие низкомолекулярные активные средства включают органические и металлоорганические соединения. В некоторых случаях низкомолекулярное активное средство имеет молекулярную массу менее чем примерно 2000 г/моль, более предпочтительно менее чем примерно 1500 г/моль, наиболее предпочтительно менее чем
- 21 032552 примерно 1200 г/моль. Низкомолекулярное активное средство может быть гидрофильным, гидрофобным или амфифильным соединением.
В некоторых случаях одно или более дополнительных активных средств могут быть инкапсулированы в, диспергированы в, или иным способом связаны с частицами, образованными из одного или более конъюгатов полимер-лекарственное средство. В некоторых вариантах осуществления одно или более дополнительных активных средств также могут быть растворены или суспендированы в фармацевтически приемлемом носителе.
В случае фармацевтических композиций для лечения глазных заболеваний препарат может содержать одно или более офтальмических лекарственных средств. В конкретных вариантах осуществления офтальмическое лекарственное средство представляет собой лекарственное средство, используемое для лечения, профилактики или диагностики заболевания или нарушения заднего сегмента глаза. Неограничивающие примеры офтальмических лекарственных средств включают средства против глаукомы, средства против ангиогенеза, противоинфекционные средства, противовоспалительные средства, факторы роста, иммунодепрессанты, противоаллергические средства, а также их сочетания.
Репрезентативные средства против глаукомы включают аналоги простагландина (такие как травопрост, биматопрост и латанопрост), антагонисты бета-андренергических рецепторов (такие как тимолол, бетаксолол, левобетаксолол и картеолол), агонисты адренергического рецептора альфа-2 (такие как бримонидин и апраклонидин), ингибиторы карбоангидразы (такие как бринзоламид, ацетазоламин и дорзоламид), миотики (т.е. парасимпатомиметики, такие как пилокарпин и экотиопат), агонисты серотонинергических, мускариновых, дофаминергических рецепторов и агонисты адренергических рецепторов (такие как апраклонидин и бримонидин).
Репрезентативные средства против ангиогенеза включают, но не ограничиваются ими, антитела к фактору роста эндотелия сосудов (УЕОР), такие как бевацизумаб (авастин®) и гйиРАЬ У2 (ранибизумаб, луцентис®), и другие анти-УЕОР соединения, включая афлиберцепт (эйлеа®); макуген® (пегаптаниб натрия, анти-УЕОР аптамер или ΕΥΕ001) (Еус1сс11 Рйагтасеийсак); фактор(ы) пигментного эпителия (РЕИР); ингибиторы СОХ-2, такие как целекоксиб (целебрекс®) и рофекоксиб (виокс®); интерферон альфа; интерлейкин-12 (1Ь-12); талидомид (таломид®) и его производные, такие как леналидомид (ревлимид®); свкаламин; эндостатин; ангиостатин; ингибиторы рибозимов, такие как ангиозим® (81гпа ТНсгареийсв); многофункциональные антиангиогенные средства, такие как неовастат® (АЕ-941) (Лс1сгпа ЬаЬогаЮпсв, ОиеЬес СПу, Сапаба); ингибиторы рецепторов тирозинкиназы (НТК), такие как сунитиниб (сутент®); ингибиторы тирозинкиназы, такие как сорафениб (нексавар®) и эрлотиниб (тарцева®); антитела к рецептору эпидермального фактора роста, такие как панитумумаб (вектибикс®) и цетуксимаб (эрбитукс®), а также другие средства против ангиогенеза, известные в данной области.
Противоинфекционные средства включают противовирусные средства, антибактериальные средства, противопаразитарные средства и противогрибковые средства. Репрезентативные противовирусные средства включают ганцикловир и ацикловир. Репрезентативные антибиотики включают аминогликозиды, такие как стрептомицин, амикацин, гентамицин и тобрамицин, ансамицины, такие как гелданамицин и гербимицин, карбацефемы, карбапенемы, цефалоспорины, гликопептиды, такие как ванкомицин, тейкопланин и телаванцин, линкозамиды, липопептиды, такие как даптомицин, макролиды, такие как азитромицин, кларитромицин, диритромицин и эритромицин, монобактамы, нитрофураны, пенициллины, полипептиды, такие как бацитрацин, колистин и полимиксин В, хинолоны, сульфонамиды и тетрациклины.
В некоторых случаях активное средство представляет собой противоаллергическое средство, такое как олопатадин и эпинастин.
Противовоспалительные средства включают как нестероидные, так и стероидные противовоспалительные средства. Подходящие стероидные активные средства включают глюкокортикоиды, прогестины, минералокортикоиды и кортикостероиды.
Офтальмическое лекарственное средство может находиться в своей нейтральной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли. В некоторых случаях может быть желательным получение препарата, содержащего соль активного средства, из-за одного или более полезных физических свойств солей, например, повышенной стабильности или желательной растворимости или профиля растворения.
Как правило, фармацевтически приемлемые соли можно получать реакцией форм свободной кислоты или основания активного средства со стехиометрическим количеством соответствующего основания или кислоты в воде или в органическом растворителе, или в их смеси; как правило, предпочтительными являются неводные среды, такие как эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил. Фармацевтически приемлемые соли включают соли активного средства, полученные из неорганических кислот, органических кислот, соли щелочных металлов и соли щелочно-земельных металлов, а также соли, образованные в результате реакции лекарственного средства с подходящим органическим лигандом (например, четвертичные соли аммония). Списки подходящих солей можно найти, например, в книге ΡαηίπβΙοη'β Рйагтасеибса1 Зсюпссв, 20111 еб., ЫрртсоИ Аббате & \νί11<ίη5, ВаШтоге, ΜΌ, 2000, р. 704. Примеры офтальмических лекарственных средств, иногда вводимых в форме фармацевтически приемлемой соли, включают тимолол малеат, бримонидин тартрат и диклофенак натрий.
- 22 032552
В некоторых случаях активное средство представляет собой диагностическое средство визуализации или иной оценки состояния глаза. Иллюстративные диагностические средства включают парамагнитные молекулы, флуоресцентные соединения, магнитные молекулы и радиоактивные изотопы, средства для рентгенографии и контрастные вещества.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит один или более местных анестетиков. Репрезентативные местные анестетики включают тетракаин, лидокаин, аметокаин, пропаракаин, лигнокаин и бупивакаин. В некоторых случаях одно или более дополнительных средств, таких как фермент гиалуронидаза, также добавляют в препарат для ускорения и улучшения распределения местного анестетика.
В. Препараты для введения в глаза.
Частицы, образованные из конъюгатов полимер-лекарственное средство, предпочтительно будут сформулированы в виде раствора или суспензии для инъекций в глаза.
Фармацевтические препараты для введения в глаза предпочтительно находятся в виде стерильного водного раствора или суспензии частиц, образованных из одного или более конъюгатов полимерлекарственное средство. Приемлемые растворители включают, например, воду, раствор Рингера, фосфатно-солевой буфер (РВ8) и изотонический раствор хлорида натрия. Препарат может также представлять собой стерильный раствор, суспензию или эмульсию в нетоксичном, парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, таком как 1,3-бутандиол.
В некоторых случаях препарат распространяют или упаковывают в жидкой форме. Альтернативно, препараты для введения в глаза можно упаковывать в твердой форме, получаемой, например, путем лиофилизации соответствующего жидкого препарата. Перед введением твердое вещество можно восстанавливать с помощью соответствующего носителя или разбавителя.
Растворы, суспензии или эмульсии для введения в глаза могут быть забуферены с помощью эффективного количества буфера, необходимого для поддержания рН, подходящего для введения в глаза. Подходящие буферы хорошо известны специалистам в данной области и некоторыми примерами полезных буферов являются ацетатный, боратный, карбонатный, цитратный и фосфатный буферы.
Растворы, суспензии или эмульсии для введения в глаза могут также содержать одно или более тонизирующих средств для регулирования изотонического диапазона препарата. Подходящие тонизирующие средства хорошо известны в данной области и некоторые примеры включают глицерин, маннит, сорбит, хлорид натрия и другие электролиты.
Растворы, суспензии или эмульсии для введения в глаза могут также содержать один или более консервантов для предотвращения бактериального загрязнения офтальмических препаратов. Подходящие консерванты известны в данной области и включают полигексаметиленбигуанидин (РНМВ), бензалкония хлорид (ВАК), стабилизированные оксихлор-комплексы (также известные как Ригйе®), фенилртути ацетат, хлорбутанол, сорбиновую кислоту, хлоргексидин, бензиловый спирт, парабены, тимеросал, а также их смеси.
Растворы, суспензии или эмульсии для введения в глаза могут также содержать один или более эксципиентов, известных в данной области, таких как диспергирующие средства, увлажняющие средства и суспендирующие средства.
V. Способы применения.
Лекарственные препараты с контролируемым высвобождением для доставки одного или более ингибиторов ΗΙΡ-1 можно использовать для лечения или профилактики заболевания или нарушения у пациента, которое связано с васкуляризацией, включая рак и ожирение. В предпочтительном варианте осуществления фармацевтические композиции вводят для лечения или профилактики заболевания или нарушения у пациента, которое связано с окулярной неоваскуляризацией. После введения один или более ингибиторов ΗΙΡ-1 высвобождаются в течение продолжительного периода времени в концентрациях, которые являются достаточно высокими, чтобы производить терапевтический эффект, однако достаточно низкими, чтобы не допускать цитотоксичности.
При введении в глаза частицы высвобождают низкую дозу одного или более активных средств в течение продолжительного периода времени, предпочтительно более чем 3, 7, 10, 15, 21, 25, 30 или 45 дней. Структуру конъюгата полимер-лекарственное средство или состав полимерной матрицы, морфологию частиц и дозировку вводимых частиц можно специально приспосабливать для введения терапевтически эффективного количества одного или более активных средств в глаза в течение продолжительного периода времени, при этом сводя к минимуму побочные эффекты, такие как сокращение амплитуд Ьволны скотопической ЭРГ и дегенерация сетчатки.
А. Г лазные заболевания и нарушения.
Фармацевтические композиции, содержащие частицы для контролируемого высвобождения одного или более ингибиторов ΗΙΡ-1, можно вводить в глаза пациента, который нуждается в этом, для лечения или профилактики одного или более глазных заболеваний или нарушений. В некоторых случаях глазное заболевание или нарушение затрагивает задний сегмент глаза. Используемый в настоящем документе термин задний сегмент глаза означает задние две трети глаза, включая переднюю гиалоидную мембрану и все оптические структуры позади нее, такие как стекловидное тело, сетчатка, сосудистая оболочка и
- 23 032552 зрительный нерв.
В предпочтительных вариантах осуществления фармацевтическую композицию, содержащую частицы, образованные из одного или более конъюгатов полимер-лекарственное средство, предложенных в настоящем документе, вводят для лечения или профилактики интраокулярного неоваскулярного заболевания. В некоторых вариантах осуществления частицы образованы из конъюгата полимер-лекарственное средство, содержащего антрациклин, такой как даунорубицин или доксорубицин.
Глазные заболевания, особенно те, которые характеризуются окулярной неоваскуляризацией, представляют собой значительную проблему общественного здравоохранения. Интраокулярные неоваскулярные заболевания характеризуются неконтролируемым ростом сосудов в одной или более областях глаза. Неконтролируемая васкуляризация повреждает и/или затемняет одну или более структур в глазах, приводя к потере зрения. Интраокулярные неоваскулярные заболевания включают пролиферативные ретинопатии, хориоидальную неоваскуляризацию (ХНВ), возрастную дегенерацию макулы (ВДМ), диабетическую и другие связанные с ишемией ретинопатии, диабетический отек макулы, патологическую близорукость, болезнь Гиппеля-Линдау, гистоплазмоз глаз, окклюзию центральной вены сетчатки (ОЦВС), неоваскуляризацию роговицы и ретинальную неоваскуляризацию (РНВ). Интраокулярные неоваскулярные заболевания поражают миллионы людей во всем мире, во многих случаях приводя к серьезной потере зрения и снижению качества жизни и производительности труда.
Возрастная дегенерация макулы (ВДМ) является одной из ведущих причин тяжелой, невосполнимой потери зрения у пожилых людей, Вге881ег е! а1. ΙΑΜΑ, 291: 1900-1901 (2004). ВДМ характеризуется широким спектром клинических и патологических признаков, таких как бледно-желтые пятна, известные как друзы, разрушение пигментного эпителия сетчатки (ПЭС), хориоидальная неоваскуляризация (ХНВ) и дисковидная дегенерация макулы. Различают сухую (т.е. не экссудативную) или мокрую (т.е. экссудативную) ВДМ. Сухая ВДМ характеризуется наличием очагов повреждения, называемых друзами. Мокрая ВДМ характеризуется неоваскуляризацией в центре поля зрения.
Хотя мокрая ВДМ встречается реже, она является причиной 80-90% случаев тяжелой потери зрения, связанной с ВДМ (Еетлз е! а1. Лгс11. Ор11111ато1. 102: 1640-2 (1984)). Причина возникновения ВДМ неизвестна. Тем не менее, очевидно, что риск развития ВДМ увеличивается с возрастом. ВДМ также связана с факторами риска, включая заболевание в семейном анамнезе, курение, окислительный стресс, диабет, употребление алкоголя и воздействие солнечного света.
Мокрая ВДМ, как правило, характеризуется ХНВ области макулы. Хориоидальные капилляры разрастаются и проникают через мембрану Бруха, достигая пигментного эпителия сетчатки (ПЭС). В некоторых случаях капилляры могут прорастать в субретинальное пространство. Повышенная проницаемость новообразованных капилляров приводит к накоплению серозной жидкости или крови под ПЭС и/или ниже, или внутри нейросенсорной сетчатки. Снижение зрения происходит, когда центральная ямка набухает или отделяется. Может развиваться фиброзная метаплазия и организация, приводя к увеличению количества субретинальной массы, называемой дисковидным шрамом, что является последней стадией ВДМ и связано с постоянной потерей зрения (БАтко Ό.1. Ν. Епд1. 1. Меб. 331: 95-106 (1994)).
Другие глазные заболевания и нарушения, такие как увеит, также трудно поддаются лечению существующими методами лечения. Увеит является общим термином для обозначения воспаления любых компонентов увеального тракта, таких как радужка, цилиарное тело или сосудистая оболочка. Воспаление вышележащих слоев сетчатки, называемое ретинитом, или зрительного нерва, называемое невритом зрительного нерва, может происходить с сопутствующим увеитом или без него.
Осложнения увеита в глазах могут приводить к глубокой и необратимой потере зрения, особенно если он вовремя не диагностирован или лечение было неправильным. Наиболее частые осложнения увеита включают отслоение сетчатки, неоваскуляризацию сетчатки, зрительного нерва или радужки, а также цистоидный отек макулы. Отек макулы (ОМ) может происходить, если набухание, утечка и фоновая диабетическая ретинопатия (ФДР) имеет место в макуле, центральной 5% области сетчатки, наиболее важной для зрения. ОМ является распространенной причиной тяжелых нарушений зрения.
Было предпринято множество попыток лечения интраокулярных неоваскулярных заболеваний, а также заболеваний, связанных с хроническим воспалением глаз, фармацевтическими препаратами. Попытки разработать клинически эффективные методы лечения были серьезно затруднены из-за сложности введения и поддержания терапевтически эффективного количества фармацевтических препаратов в тканях глаза в течение продолжительного периода времени. Кроме того, многие фармацевтические препараты вызывают значительные побочные эффекты и/или токсичность при введении в ткани глаза.
Интраокулярные неоваскулярные заболевания являются глазными заболеваниями или нарушениями, которые характеризуются окулярной неоваскуляризацией. Неоваскуляризация может происходить в одной или более областях глаза, включая роговицу, сетчатку, слой сосудистой оболочки или радужку. В некоторых случаях глазное заболевание или нарушение характеризуется образованием новых кровеносных сосудов в слое сосудистой оболочки глаза (т.е. хориоидальной неоваскуляризацией, ХНВ). В некоторых случаях глазное заболевание или нарушение характеризуется образованием кровеносных сосудов, происходящих из вен сетчатки и продолжающихся вдоль внутренней (стекловидной) поверхности сетчатки (т.е. ретинальной неоваскуляризацией, РНВ).
- 24 032552
Иллюстративные неоваскулярные заболевания глаз включают возрастную дегенерацию макулы, связанную с хориоидальной неоваскуляризацией, пролиферативную диабетическую ретинопатию (диабетическую ретинопатию, связанную с неоваскуляризацией сетчатки, преретинальной области или радужки), пролиферативную витреоретинопатию, ретинопатию недоношенных, патологическую близорукость, болезнь Гиппеля-Линдау, синдром предполагаемого гистоплазмоза глаз (СПГГ), а также состояния, связанные с ишемией, такие как окклюзия ветки вены сетчатки, окклюзия центральной вены сетчатки, окклюзия ветки артерии сетчатки и окклюзия центральной артерии сетчатки.
Неоваскуляризация может быть вызвана опухолью. Опухоль может быть либо доброкачественной, либо злокачественной опухолью. Иллюстративные доброкачественные опухоли включают гамартомы и нейрофибромы. Иллюстративные злокачественные опухоли включают хориоидальную меланому, увеальную меланому радужки, увеальную меланому цилиарного тела, ретинобластому или метастатическое заболевание (например, метастазы в сосудистой оболочке).
Неоваскуляризация может быть связана с ранением глаза. Например, рана может возникать в результате травматического повреждения глазного яблока, например, рваная рана роговицы. Альтернативно, рана может возникать в результате офтальмологических хирургических операций.
Конъюгаты полимер-лекарственное средство можно вводить для профилактики или снижения риска пролиферативной витреоретинопатии после витреоретинальной хирургической операции, профилактики помутнения роговицы после операции на роговице (такой как трансплантация роговицы и эксимерлазерная хирургия), профилактики закрытия угла передней камеры после трабекулоэктомии или для профилактики или значительного замедления рецидива птеригиума.
Конъюгаты полимер-лекарственное средство можно вводить для лечения или профилактики глазного заболевания, вызванного воспалением. В таких случаях конъюгат полимер-лекарственное средство предпочтительно содержит противовоспалительное средство. Иллюстративные воспалительные глазные заболевания включают, но не ограничиваются ими, увеит, эндофтальмит, а также офтальмологическую травму или хирургическую операцию.
Глазное заболевание может также быть инфекционным глазным заболеванием, таким как ретинопатия ВИЧ, токсокароз, токсоплазмоз и эндофтальмит.
Фармацевтические композиции, содержащие частицы, образованные из одного или более конъюгатов полимер-лекарственное средство, можно также использовать для лечения или профилактики одного или более заболеваний, затрагивающих другие части глаза, таких как сухой кератит, мейбомит, глаукома, конъюнктивит (например, аллергический конъюнктивит, весенний конъюнктивит, гигантский папиллярный конъюнктивит, атопический кератоконъюнктивит), неоваскулярная глаукома с неоваскуляризацией радужки и воспаление радужки.
1. Способы введения.
a. Маршрут введения.
Препараты, описанные в настоящем документе, можно вводить местной инъекцией в стекловидное тело (например, инъекцией в переднюю, среднюю и заднюю область стекловидного тела), подконъюнктивальной инъекцией, внутрикамерной инъекцией, инъекцией в переднюю камеру через височную сторону лимба, интрастромальной инъекцией, инъекцией в субхороидальное пространство, инъекцией в роговицу, субретинальной инъекцией и интраокулярной инъекцией. В предпочтительном варианте осуществления фармацевтическую композицию вводят инъекцией в стекловидное тело.
Имплантаты, описанные в настоящем документе, можно вводить в глаз с использованием подходящих методов имплантации, известных в данной области. В некоторых вариантах осуществления имплантаты вводят инъекцией в стекловидное тело с помощью иглы, например иглы 22 калибра. Помещение имплантата в стекловидное тело можно варьировать с точки зрения размера имплантата, формы имплантата, а также заболевания или нарушения, которое предстоит лечить.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции и/или имплантаты, описанные в настоящем документе, вводят совместно с одним или более дополнительными активными средствами. Используемый в настоящем документе термин совместное введение означает введение препарата с контролируемым высвобождением одного или более ингибиторов ΗΙΡ-1 совместно с одним или более дополнительными активными средствами в составе одной и той же лекарственной формы, а также введение с использованием разных лекарственных форм одновременно или практически одновременно. Используемый в настоящем документе термин практически одновременно, как правило, означает в пределах десяти минут, предпочтительно в пределах пяти минут, более предпочтительно в пределах двух минут, наиболее предпочтительно в пределах одной минуты.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции и/или имплантаты, описанные в настоящем документе, вводят совместно с одним или более дополнительными средствами лечения глазного неоваскулярного заболевания или нарушения. В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции и/или имплантаты, описанные в настоящем документе, вводят совместно с одним или более средствами против ангиогенеза, такими как бевацизумаб (авастин®), луцентис® или афлиберцепт (эйлеа®).
b. Дозировка.
- 25 032552
Предпочтительно, частицы будут высвобождать эффективное количество одного или более ингибиторов ΗΙΕ-1 в течение продолжительного периода времени. В предпочтительных вариантах осуществления частицы высвобождают эффективное количество одного или более ингибиторов ΗΙΕ-1 в течение по меньшей мере двух недель, более предпочтительно в течение по меньшей мере четырех недель, более предпочтительно в течение по меньшей мере шести недель, наиболее предпочтительно в течение по меньшей мере восьми недель. В некоторых вариантах осуществления частицы высвобождают эффективное количество одного или более ингибиторов ΗΙΕ-1 в течение трех месяцев или более.
В некоторых случаях фармацевтический препарат вводят пациенту, который нуждается в этом, в терапевтически эффективном количестве для уменьшения хориоидальной неоваскуляризации. В некоторых случаях фармацевтический препарат вводят пациенту, который нуждается в этом, в терапевтически эффективном количестве для уменьшения ретинальной неоваскуляризации.
с. Терапевтическая эффективность.
В случае возрастной дегенерации макулы терапевтическую эффективность для пациента можно измерять путем одного или более из перечисленного: оценка среднего изменения наилучшей корригированной остроты зрения (ВСУА) от исходного уровня до уровня в желаемый момент времени, оценка доли пациентов, острота зрения которых снизилась менее чем на 15 знаков (три строчки) в желаемый момент времени по сравнению с исходным уровнем, оценка доли пациентов, острота зрения которых повысилась более чем или ровно на 15 знаков (три строчки) в желаемый момент времени по сравнению с исходным уровнем, оценка доли пациентов с остротой зрения по таблице Снеллена, эквивалентной 20/2000 или хуже, в желаемый момент времени, оценка с помощью анкеты зрительных функций Национального офтальмологического института США, а также оценка размера ХНВ и степени утечки при ХНВ в желаемый момент времени с использованием флуоресцентной ангиографии.
В некоторых вариантах осуществления у по меньшей мере 25%, более предпочтительно по меньшей мере 30%, более предпочтительно по меньшей мере 35%, наиболее предпочтительно по меньшей мере 40% пациентов с недавно возникшей ХНВ, которых лечили препаратами, описанными в настоящем документе, наступило улучшение остроты зрения на три или более строчек.
В. Другие заболевания и нарушения.
Лекарственные препараты с контролируемым высвобождением для доставки одного или более ингибиторов ΗΙΕ-1 можно использовать для лечения заболевания или нарушения у пациента, которое связано с васкуляризацией, включая рак и ожирение.
Изобретение будет дополнительно разъяснено со ссылкой на следующие неограничивающие примеры.
Примеры
Пример 1. Получение частиц конъюгата полиангидрид-лекарственное средство.
Синтез полимера.
(Полиэтиленгликоль)3-со-поли(себациновую кислоту) (РЕС3-Р8А) получали поликонденсацией в расплаве. Вкратце, себациновую кислоту нагревали с обратным холодильником в уксусном ангидриде, получая предшественник полимера себациновой кислоты (ацил-δΑ). Соединение лимонная кислотаполиэтиленгликоль (РЕС3) получали методами, известными в данной области (Веп-8йаЬа1 δ. е1 а1. Масгото1. Вю8С1. 6: 1019-1025 (2006)). 2,0 г ΟΉ,Ο-ΡΕΟ-ΝΗ^ 26 мг лимонной кислоты, 83 мг дициклогексилкарбодиимида (ОСС) и 4,0 мг 4-(диметиламино)пиридина (ЭМАР) добавляли к 10 мл метиленхлорида. Эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем осаждали, промывали эфиром и высушивали в вакууме, выделяя РЕС3. Затем ацил-δΑ (90% по массе) и РЕС3 (10 мас.%) полимеризовали при 180°С в течение 30 мин. Газообразный азот подавали в колбу на 30 с каждые 15 мин. Реакцию проводили в течение 30 мин. Полимеры охлаждали до температуры окружающей среды, растворяли в хлороформе и осаждали избытком петролейного эфира. Осадок собирали фильтрованием и высушивали в вакууме до постоянного веса.
Получение наночастиц ^XΡ-ΡδΑ-ΡЕС3.
Наночастицы ^XΡ-ΡδΑ-ΡЕС3 получали, растворяя ΡЕ63-ΡδΑ и ЭХЕ в определенных соотношениях в 3 мл дихлорметана и 1 мл ДМСО и проводя реакцию в течение 2 ч при 50° перед гомогенизацией (Ь4КТ, δ^1νе^коη МасЫпек, Еак1 Ьопдтеаботе, МА) в 100 мл водного раствора, содержащего 1% поливинилового спирта (25 кДа, δίβΐηη). Затем частицы отверждали, давая возможность хлороформу испаряться при комнатной температуре в течение 2 ч при перемешивании. Частицы собирали центрифугированием (20000/д в течение 20 мин при 4°С) и дважды промывали дважды дистиллированной водой. Размер частиц определяли методом динамического рассеяния света на приборе 2еЕ^1/ег №то Ζδ (Ма1уегп !пк1гитеп1к, δоиΐйЬо^оидй, МА). Измерение размеров проводили при 25°С при угле рассеяния света 90°.
Высвобождение ΌΧΚ из наночастиц ^XΚ-ΡδΑ-ΡЕ63 ш уйго.
Наночастицы ЭХК^А-РЕ63 суспендировали в фосфатно-солевом буфере (ΓΒδ, ρΗ 7,4) в концентрации 2 мг/мл и инкубировали при 37°С на вращающейся платформе (140 об/мин). В выбранные моменты времени супернатант собирали центрифугированием (13500*д в течение 5 мин) и частицы ресуспендировали в свежем ΡВδ. Содержание ΌΧΚ определяли по поглощению при 480 нм.
Результаты.
- 26 032552
Наночастицы ΌΧΚ-ΡδΑ-РЕСз, полученные выше, содержали 23,6% ΌΧΚ (по массе) и имели средний размер частиц 647 нм. Исследования ίη νίίτο показали, что ΌΧΚ постоянно высвобождался из наночастиц в виде конъюгата с себациновой кислотой в течение срока вплоть до двух недель в условиях погружения в РВ§ при 37°С без начальной фазы быстрого высвобождения лекарственного средства (т.е. без взрывного эффекта).
Пример 2. Лечение хориоидальной неоваскуляризации в мышиной модели ХНВ.
Материалы и методы.
Беспатогенных мышей С57ВБ/6 (Сйаг1ез КАег, А11ш1пд1оп, МА) использовали в экспериментах в соответствии с положением об использовании животных в офтальмологических исследованиях Ассоциации по исследованиям зрения и офтальмологии и руководящими принципами комитета по содержанию и использованию лабораторных животных Университета Джона Хопкинса.
Хориоидальную НВ индуцировали путем разрыва мембраны Бруха лазерной фотокоагуляцией, как описано ранее (ТоЬе Т. е! а1., Ат. 1. РаШо1. 135(5): 1641-1646 (1998)). Вкратце, 5-6-недельных самок мышей С57ВБ/6 анестезировали кетамина гидрохлоридом (100 мг/кг массы тела) и расширяли им зрачки. Лазерную фотокоагуляцию (размер пятна 75 мкм, продолжительность 0,1 с, 120 мВт) проводили в положениях на 9, 12 и 3 ч на заднем полюсе каждого глаза с использованием щелевой лампы диодного лазера ОспЫдЫ СЬ (1пбех, МошПат У1ете, СА) в качестве системы доставки и ручного покровного стекла в качестве контактной линзы для осмотра сетчатки. Образование при воздействии лазера волдыря, который указывает на разрыв мембраны Бруха, является важным фактором в создании ХНВ; таким образом, только ожоги, при которых образовывался волдырь, включали в исследование.
Сразу после индуцированного лазером разрыва мембраны Бруха мыши были рандомизированы в различные группы лечения для интраокулярных инъекций. Инъекции в стекловидное тело выполняли под препаровальной лупой с использованием системы Нагтагб Ритр М|сгот)есПоп 8уз1ет и стеклянных микропипеток с оттянутым концом.
Через 1, 4, 7 и 14 дней после инъекции были сделаны фотографии глазного дна при помощи камеры М1сгоп III® (Рйоетх Кезеагсй ЬаЬогаФпез 1пс., Р1еазап!оп, СА). Через 14 дней мышам проводили перфузию 1 мл РВ§, содержащего флуоресцеин-меченый декстран в концентрации 25 мг/мл (средняя молекулярная масса 2Л06 Да; Фдта-АИпск §1. Ьошз, МО) и плоские препараты хориоида изучали под флуоресцентным микроскопом. Изображения получали с помощью цифровой камеры №коп 01Ц11а1 §1111 Сатега ΌΧΜ1200 (Ы1коп 1п51гитеп15 1пс., №\ν Уогк, ΝΥ). Программное обеспечение для анализа изображений (1таде-Рго® Р1из; МеФа СуЬетейсз, Фкег §ргтд, МО) использовали для измерения общей площади ХНВ в каждом участке разрыва, при этом исследователь не был осведомлен о группах лечения.
Лечение индуцированной кислородом ишемической ретинопатии.
Мышей С57ВБ/6 помещали в условия с 75% содержанием кислорода в постнатальный день (Р) 7, в Р12 возвращали в условия комнатной атмосферы и проводили интраокулярную инъекцию РВ§ или РВ§ с содержанием даунорубицина, доксорубицина или наночастиц ПАК-Р^А-РЕС^ В день Р17 измеряли площадь ретинальной НВ на поверхности сетчатки. Вкратце, мышам в возрасте Р17 проводили интраокулярную инъекцию 1 мкл антитела крысы против мышиной молекулы клеточной адгезии тромбоцитов и эндотелиальных клеток 1 (РЕСАМ-1) (Рйагтшдеп, §ап 1озе, СА), через 12 ч их подвергали эвтаназии и глаза фиксировали в РВ§-забуференном формалине в течение 5 ч при комнатной температуре. Сетчатки иссекали, промывали и инкубировали с поликлональным антителом козы против иммуноглобулинов крысы, конъюгированным с А1еха 488 Д^йтодеп, Саг1зЬаб, СА), в разведении 1:500 при комнатной температуре в течение 45 мин и монтировали плоские препараты для исследования. Наблюдатель, не осведомленный о группах лечения, измерял площадь НВ на сетчатку путем анализа изображения.
Лечение индуцированной УЕСБ ретиналвной неоваскуляризации.
Гемизиготным трансгенным по родопсину/УЕСБ мышам, экспрессирующим УЕСБ в фоторецепторах, проводили интраокулярную инъекцию 1 мкл РВ§ или РВ§, содержащего 10 мкг наночастиц ΌΧΒР§А-РЕС3, в день Р14. В день Р21, Р28, Р35, Р42 или Р49 мышей анестезировали, проводили перфузию флуоресцеин-меченым декстраном (средняя молекулярная масса 2Л06; §1дта-А1бпсй), и плоские препараты сетчатки изучали под флуоресцентным микроскопом (Ахюзкор2 р1из; 2е155, Тйогпетооб, ΝΥ) при увеличении 400х, что создавало узкую глубину резкости, так что, когда неоваскуляризация вдоль внешнего края сетчатки попадала в фокус, остальная часть сосудов сетчатки находилась вне фокуса, что позволяло легко разграничивать и количественно оценивать неоваскуляризацию. Изображения были оцифрованы при помощи видеокамеры с прибором с зарядовой связью в трехцветной палитре (Соо1 ^АРТМРго; МеФа СуЬегпейсз, Фкег §рг1пц, МО) и устройства ввода и регистрации кадров изображений. Программное обеспечение для анализа изображений (1таде-Рго Р1из 5,0; МеФа СуЬегпеБсз, Фкег §ргтд, МО) использовали для распознавания флуоресцентно окрашенных областей неоваскуляризации и для расчета общей площади неоваскуляризации на сетчатку. Исследователь, проводящий анализ изображений, не был осведомлен о группах лечения.
Запись электроретинограмм (ЭРГ).
Взрослым мышам С57ВБ/6 проводили интраокулярную инъекцию 1 мкл РВ§ или РВ§, содержащего 0,1, 1,0 или 10 мкг даунорубицина или доксорубицина, либо 1,0 или 10 мкг наночастиц ^XΒ-Ρ§Α
- 27 032552
РЕС3. Скотопическую и фотопическую ЭРГ записывали через один, семь и 14 дней после инъекции с использованием прибора Екрюи ЕКС Э|адпо5у5. Для скотопических записей мышей адаптировали к темноте в течение ночи, а для фотопических записей мышей адаптировали в течение 10 мин к фоновому белому свету с интенсивностью 30 кд/м2. Мышей анестезировали внутрибрюшинной инъекцией кетамина гидрохлорида (100 мг/кг массы тела) и ксилазина (5 мг/кг массы тела). Зрачки расширяли мидрином Р с содержанием 0,5% тропикамида и 0,5% фенилэфрина гидрохлорида (8аи1еи Рйагтасеийсак Со., Окака, 1араи). Мышей помещали на подложку, нагретую до 39°С, и платиновые петлевые электроды помещали на каждую роговицу после нанесения раствора для гониоскопической линзы (А1соп ЬаЬк, Еой Аог111. ТХ). Электрод сравнения помещали подкожно в передней части скальпа между глазами и заземляющий электрод вводили в хвост. Г олову мыши удерживали в стандартном положении в чашеобразном осветителе, создающем безориентирное зрительное пространство, что обеспечивало одинаковое освещение глаз. Записи для обоих глаз проводили одновременно со сбалансированным электрическим сопротивлением. Запись скотопических ЭРГ проводили при 11 уровнях интенсивности белого света в диапазоне от 3,00 до 1,40 1од кд-с/м2. Для каждой интенсивности вспышки рассчитывали средние значения из шести измерений. Запись фотопических ЭРГ проводили при трех уровнях интенсивности белого света в диапазоне от 0,60 до 1,40 1од кд-с/м2 при уровне фона 30 кд/м2. Для каждой интенсивности вспышки рассчитывали средние значения из пяти измерений.
Измерение толщины наружного ядерного слоя (НЯС).
Измеряли толщину НЯС. Взрослым мышам С57ВЬ/6 проводили интраокулярную инъекцию 1 мкл РВ8 или РВ8, содержащего 0,1, 1,0 или 10 мкг даунорубицина или доксорубицина, либо 1,0 или 10 мкг наночастиц ПХВ-Р8А-РЕСз. Мышей подвергали эвтаназии и маркировали положение на 12:00 на лимбе роговицы, глаза удаляли и погружали в соединение с оптимальной температурой для нарезания. Замороженные срезы толщиной десять микрометров нарезали параллельно 12:00 или 9:00 меридиану через зрительный нерв и фиксировали в 4% параформальдегиде. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином, изучали под микроскопом Ахюккор ХеХ, ТйогтгооД ΝΥ) и изображения отцифровывали при помощи видеокамеры с прибором с зарядовой связью (ССЭ) в трехцветной палитре (1К-ТИ40А; ТокЫЬа, Токуо, 1арап) и устройством ввода и регистрации кадров изображений. Программное обеспечение 1таде-Рго Р1ц§ (Меб1а СуЬетеИск, 8йуег 8ргтд, ΜΌ) использовали для определения контуров НЯС. Исследователь, не осведомленный о группах лечения, измерял толщину НЯС в шести точках, соответствующих 25% (81), 50% (82) и 75% (83) расстояния между верхним полюсом и зрительным нервом и 25% (11), 50% (12) и 75% (13) расстояния между нижним полюсом и зрительным нервом.
Статистический анализ.
Данные выражали в виде среднего значения ±8ЕМ. Статистический анализ проводили с использованием критерия Стьюдента и Р<0,05 считали значимым.
Результаты.
Антрациклины подавляют хориоидальную и ретинальную НВ.
В мышиной модели хориоидальной НВ (ТоЬе Т. е! а1. Ат. 1. Ра1йо1. 153: 1641-1646 (1998)), которая позволяет прогнозировать эффекты лекарственного средства у пациентов с неовакуляризацией при ВДМ (8а1§Ып Υ. е! а1. 1. Се11 Р11У5Ю1. 195: 241-248 (2003)), интраокулярная инъекция 10 мкг ΌΝΚ приводила к подавлению хориоидальной НВ, тогда как инъекция 1 или 0,1 мкг не оказывала существенного влияния (фиг. 1А). Аналогично, интраокулярная инъекция 10 мкг ΌΧΚ приводила к подавлению хориоидальной НВ и инъекции 1 или 0,1 мкг не оказывали существенного влияния (фиг. 1В).
У новорожденных мышей с индуцированной кислородом ишемической ретинопатией моделью для прогнозирования эффектов лечения при пролиферативной диабетической ретинопатии, интраокулярная инъекция 1 мкг ΌΝΚ приводила к значительному сокращению площади ретинальной НВ, доза 0,1 мкг вызывала небольшое сокращение и доза 0,01 мкг не оказывала существенного влияния (фиг. 2А). НВ визуализировали на плоских препаратах сетчатки после ш у|уо иммунофлуоресцентного окрашивания анти-РЕСАМ1, методики, позволяющей избирательно окрашивать НВ и сосуды стекловидного тела. Интраокулярная инъекция 1 мкг ΌΧΚ, но не 0,1 или 0,01 мкг, приводила к значительному сокращению площади ретинальной НВ (фиг. 2В). Через пять дней после инъекции 1 мкг ΌΝΚ или ΌΧΚ осажденное лекарственное средство визуализировали на поверхности сетчатки. Средняя площадь хориоидальной или ретинальной НВ в парных глазах существенно не отличалась от таковой в глазах мышей, которым в оба глаза инъецировали растворитель, что свидетельствовало об отсутствии системного эффекта от интраокулярных инъекций ΌΝΚ или ΌΧΚ
Эффект интраокулярных инъекций ΌΝΚ или ΌΧΒ на функцию сетчатки.
Поскольку ΌΝΚ и ΌΧΚ являются антиметаболитами, а также ингибиторами Н1Е-1, авторы изобретения изучили их влияние на функцию сетчатки, оцениваемую при помощи ЭРГ. Через четырнадцать дней после интраокулярных инъекций 1 мкг, но не 0,1 мкг, ΌΝΚ или ΌΧΚ наблюдали значительное сокращение средних амплитуд скотопической и фотопической Ь-волн. Эти данные свидетельствуют о том, что хотя ΌΝΚ и ΌΧΒ сильно подавляют НВ глаз, болюсные инъекции свободных лекарственных средств могут вызывать токсичность для сетчатки.
Токсичность для сетчатки после интраокулярной инъекции дигоксина.
- 28 032552
Ранее было показано, что интраокулярные инъекции 0,01-0,25 мкг дигоксина приводят к подавлению транскрипционной активности ΗΙΡ-1 и НВ глаз (Υοδίιίάη Т. с1 а1. РА8ЕВ 1. 24: 1759-1767 (2010)). Для изучения возможности того, что пагубные эффекты ΌΧΚ и ΌΝΚ на функцию сетчатки связаны с подавлением ими активности ΗΙΕ-1, определяли влияние интраокулярной инъекции 0,25 и 0,05 мкг дигоксина на функцию сетчатки. Через неделю после интраокулярной инъекции 0,25 мкг дигоксина наблюдали значительное сокращение средней амплитуды скотопической а-волны, средней амплитуды скотопической Ьволны и средней амплитуды фотопической Ь-волны. Также наблюдали уменьшение толщины наружного ядерного слоя в 3 из 6 точках сетчатки, в которых проводили измерения, что свидетельствовало о гибели фоторецепторных клеток. Эти результаты согласуются с наличием значительной токсичности после интраокулярной инъекции 0,25 мкг дигоксина. Интраокулярная инъекция 0,05 мкг дигоксина была менее токсичной, но все еще вызывала значительное сокращение средних амплитуд скотопической и фотопической Ь-волн. Таким образом, в случае как антрациклинов, так и дигоксина, инъекция свободного лекарственного средства в глаза несет риск токсичности для сетчатки.
Эффект ΌΧΚ-полимерных наночастиц на НВ глаз.
Эффект интраокулярной инъекции наночастиц с ΌΧΚ сначала был протестирован на мышах с индуцированной лазером хориоидальной НВ. После индуцированного лазером разрыва мембраны Бруха мыши С57ВБ/6 получали интраокулярную инъекцию 10, 1 или 0,1 мкг наночастиц ОХВ-Р8А-РЕС3. Фотографии глазного дна животных, получавших 1 мкг наночастиц ОХК-Р8Л-РЕС3. показали большую оранжевую массу наночастиц, расположенных на задней поверхности сетчатки через 1 день после инъекции, которая медленно уменьшалась с течением времени и все еще была хорошо видна в день 14. Частицы оставались видимыми на протяжении периодов времени вплоть до пяти недель.
У мышей, перфузированных флуоресцеин-меченым декстраном для визуализации хориоидальной НВ методом флуоресцентной микроскопии в день 14, площадь хориоидальной НВ выглядела меньшей по размеру в глазах, получавших интраокулярную инъекцию наночастиц ПХК-Р8А-РЕС3, по сравнению с парными глазами, в которые инъецировали РВ8. Анализ изображений подтвердил, что по сравнению с глазами, в которые инъецировали РВ8, средняя площадь хориоидальной НВ была значительно меньше в глазах, в которые инъецировали 10, 1 или 0,1 мкг наночастиц ПХК-Р8А-РЕС3 (фиг. 3А).
Эффект наночастиц ПХК-Р8А-РЕС3 на уже сформировавшуюся хориоидальную НВ исследовали, давая возможность НВ разрастаться в течение 7 дней, а затем инъецируя 1 мкг наночастиц ЭХК-Р8АРЕС3. Через семь дней после инъекции в глазах, в которые инъецировали наночастицы ПХК-Р8А-РЕС3, наблюдаемая средняя площадь хориоидальной НВ была значительно меньше, чем та, которую наблюдали в контрольных глазах, в которые инъецировали РВ8, и кроме того, значительно меньше, чем исходная величина хориоидальной НВ, имеющей место через 7 дней (фиг. 3В). Это свидетельствовало о том, что наночастицы ПХК-Р8А-РЕС3 вызывали регресс сформировавшейся хориоидальной НВ.
Препарат наночастиц ПХК-Р8А-РЕС3 также изучали с использованием модели индуцированной ишемией ретинальной неоваскуляризации (8ιηί11ι Б.Е.И. с1 а1. ΙηνοδΙ. Ορ1ι11ι;·ι1ιηο1. Υίδ. 8сЕ 35: 101-111 (1994)). Интраокулярные инъекции 1 мкг наночастиц ПХК-Р8А-РЕС3 приводили к значительному сокращению средней площади ретинальной НВ по сравнению с парными глазами, в которые инъецировали РВ8 (фиг. 4).
Длительное подавление НВ после интраокулярной инъекции ЭХК-полимерных наночастиц трансгенным по гко/УЕСЕ мышам.
Трансгенные по гко/УЕСЕ мыши, у которых промотор родопсина направляет экспрессию УЕСЕ в фоторецепторах, характеризуются постоянной экспрессией УЕСЕ, начиная с постнатального дня (Р) 7, и являются прекрасной моделью для тестирования продолжительности действия лекарственного средства (Ο1<ηιηοΙο Ν. е1. а1. Ат. 1. РаЛо1. 151: 281-291 (1997)).
В день Р14 гемизиготные по гко/УЕСЕ мыши получали интраокулярную инъекцию 10 мкг наночастиц ЭХК-Р8А-РЕС3 в один глаз и РВ8 в парный глаз. Через 4 (фиг. 5А) или 5 недель (фиг. 5В) средняя площадь субретинальной НВ была значительно меньше в глазах, в которые инъецировали наночастицы с ЭХК, чем в парных глазах, в которые инъецировали растворитель.
Интраокулярная инъекция 1 или 10 мкг наночастиц с ЭХК не вызывала токсичноств, определяемую путем измерения ЭРГ или толщины НЯС.
Через 14 дней после интраокулярной инъекции 10 мкг ПХК-Р8А-РЕС3 не наблюдали значительных различий в амплитудах скотопической или фотопической Ь-волны по сравнению с глазами, в которые инъецировали РВ8. Также не было различий в толщине наружного ядерного слоя, что свидетельствовало о том, что наночастицы с ЭХК не вызывали гибель фоторецепторных клеток.
Пример 3. Фармакокинетические исследования на кроликах.
Материалы и методы.
Получения полимера РЕС3-Р8А.
(Полиэтиленгликоль)3-со-поли(себациновую кислоту) (РЕС3-Р8А) синтезировали конденсацией в расплаве. Вкратце, себациновую кислоту нагревали с обратным холодильником в уксусном ангидриде, получая предшественник полимера себациновой кислоты (ацил-8А). Полиэтиленгликоль (РЕС3) получали смешиванием СΗ3Ο-РЕС-NΗ2 (2,0 г), лимонной кислоты (26 г), дициклогексилкарбодиимида (ЭСС;
- 29 032552 мг) и 4-(диметиламино)пиридина (ОМАР, 4,0 мг), которые добавляли к 10 мл метиленхлорида, перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем осаждали, промывали эфиром и высушивали в вакууме. Затем ацил-8А (90 мас.%) и РЕС3 (10 мас.%) полимеризовали при 180°С в течение 30 мин. Газообразный азот подавали в колбу на 30 с каждые 15 мин. Полимеры охлаждали до температуры окружающей среды, растворяли в хлороформе и осаждали избытком петролейного эфира. Осадок собирали фильтрованием и высушивали в вакууме до постоянного веса, получая полимер РЕС3-Р8А.
Получение наночастиц и микрочастиц ОХК-Р8А-РЕС3.
Для получения наночастиц ОХК-Р8А-РЕС3 80 мг РЕС3-Р8А растворяли в 6 мл дихлорметана (ДХМ) и 20 мг доксорубицина гидрохлорида (ΌΧΡ) (ΝοίΟοιη ЬЬС, ЭигНат. ЫС) растворяли в 2 мл диметилсульфоксида (ДМСО). Растворы полимера и лекарственного средства смешивали и оставляли при 50°С на 30 мин. Полученную смесь гомогенизировали в 50 мл 1% раствора поливинилового спирта (ПВС) (25 кДа, Ро1у8С1епсе, Νίΐοδ, 1Ь) при 10000 об/мин в течение 3 мин с использованием гомогенизатора Ь4КТ (ЗШегкоп МасЫпек, Еай Ьопдтеаботе, МА). Суспензию частиц перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч для удаления дихлорметана. Частицы собирали центрифугированием (20000/д в течение 20 мин при 4°С) и промывали трижды сверхчистой водой перед лиофилизацией.
Микрочастицы ОХК-Р8А-РЕС3 получали аналогичным образом. Вкратце, 200 мг РЕС3-Р8А растворяли в 3 мл ДХМ и смешивали с 40 мг ΌΧΚ, растворенного в 1,5 мл ДМСО. После инкубации при 50°С в течение 30 мин смесь гомогенизировали в 100 мл ПВС при 3000 об/мин в течение 1 мин. После перемешивания в течение 2 ч частицы собирали центрифугированием (9000/д в течение 25 мин) и промывали трижды перед лиофилизацией.
Характеристика частиц.
Размер частиц определяли на приборе СоиНег МиШыгег IV (Весктап-СоиИег 1пс., Ри11ег1оп, СА). Определяли размеры более 100000 частиц для каждой партии микрочастиц, чтобы определить средний диаметр частиц. Морфологию частиц характеризовали методом сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) с холодным катодом в режиме полевой эмиссии (ЗЕОЬ 18М-6700Р, РеаЬобу, МА). Нагрузку лекарственного средства определяли, растворяя сухой порошок частиц в ДХМ и ДМСО и измеряя поглощение на УФ спектрофотометре при длине волны 490 нм.
Эксперименты на животных.
Для данных исследований использовали пигментированных кроликов ЭШсН-ВеИей (п=10). С животными обращались в соответствии с положением об использовании животных в офтальмологических исследованиях Ассоциации по исследованиям зрения и офтальмологии и руководящими принципами комитета по содержанию и использованию лабораторных животных Университета Джона Хопкинса. Для интраокулярных инъекций и сбора внутриглазной жидкости животных анестезировали внутримышечной инъекцией кетамина (25 мг/кг) и ксилазина (2,5 мг/кг). Когда животные находились под воздействием седативных средств, их зрачки расширяли 2,5% раствором фенилэфрин гидрохлорида и 10% раствором тропикамида. Поверхность глаз анестезировали, закапывая 0,5% раствор пропаракаина гидрохлорида.
Для инъекции иглу 26 калибра осторожно вводили в полость стекловидного тела на 1,5 мм позади надвисочной стороны лимба, при этом конец иглы был направлен в середину стекловидного тела. Суспензию микро- или наночастиц СВ-АМЭ-101 в объеме 0,1 мл вводили в правые глаза и 0,1 мл растворителя (РВ8) вводили в левые глаза. Иглу выдерживали на месте в течение 10 секунд до извлечения, чтобы предотвратить рефлюкс из входного отверстия. Животных возвращали в клетки и контролировали до окончания действия анестезии.
В указанные моменты времени внутриглазную жидкость отбирали (~0,1 мл), вводя иглу 30 калибра через лимб и извлекая внутриглазную жидкость. Образцы хранили при ~80°С до использования. В конце исследования (день 105 для животных, получавших наночастицы, и день 115 для животных, получавших микрочастицы) животных подвергали эвтаназии с использованием пентобарбитала (>150 мг/кг). У животных извлекали глазные яблоки, стекловидное тело выделяли и хранили при -80°С до использования.
Количественное определение методом ВЭЖХ высвобожденного конъюгата лекарственного средства в образцах внутриглазной жидкости и стекловидного тела кроликов.
Перед количественным определением содержания лекарственного средства методом ВЭЖХ 100 мкл образца внутриглазной жидкости или образца стекловидного тела смешивали с 200 мкл метанола и инкубировали при 4°С в течение 3 ч. После центрифугирования (15000/д, 10 мин) и фильтрования через 0,2-мкм РТРЕ фильтр 150 мкл фильтрата вводили инжектором в систему ВЭЖХ \Уа1ег5, снабженную колонкой с18 с обращенно-фазовой смолой (5 мкм, 4,6/250 мм; Сгасе, ИеегВеИ, 1Ь). Высвобожденный конъюгат лекарственного средства элюировали изократической подвижной фазой, содержащей воду и ацетонитрил (60:40 об.%), со скоростью 1 мл/мин и проводили детекцию с использованием детектора флуоресценции (длина волны возбуждения: 500 нм, длина волны излучения: 551 нм). По оценкам, предел обнаружения составлял 10 нг/мл. Серию водных растворов ΌΧΚ. в различных концентрациях использовали в качестве калибровочных стандартов. Данные анализировали с использованием программного обеспечения Етро^ег 3 для анализа данных хроматографии (\Уа1ег5 Согрогайоп, МПГогД МА).
Результаты.
Микрочастицы и наночастицы ПХВ-Р8А-РЕС3.
- 30 032552
Микрочастицы и наночастицы, состоящие из конъюгата ВХВ-8А-РЕС3, синтезировали и характеризовали, как описано. Размер частиц определяли до лиофилизации и после восстановления в растворителе (РВ8). До лиофилизации средний размер микрочастиц составлял 27,2+1,0 мкм, а наночастиц 0,98+0,02 мкм (табл. 1; фиг. 6). Средняя нагрузка лекарственного средства в случае микрочастиц составляла 13% и в случае наночастиц составляла 20% (табл. 1).
Таблица 1. Характеристика микро- и наночастиц ОХВ-Р8А-РЕС3
Тип Название образца Объем частиц по диаметру Средняя нагрузка лекарственного средства (по массе)
До лиофилизации После восстановления в РВЗ
Микрочастицы 27,2+10,4 мкм 24,3+8,3 мкм 13%
Наночастицы 0,98+0,74 мкм 3,7+2,0 мкм 20%
Анализ методом СЭМ показал наличие дискретных частиц ожидаемого размера. На фиг. 6А и 6В показано распределение объема частиц по размерам для микрочастиц и наночастиц соответственно.
Длительность высвобождения лекарственного средства после введения в СТ кроликам.
Кролики получали инъекцию в стекловидное тело (0,1 мл) микрочастиц или наночастиц ΌΧΒ-РЗАРЕС3 в правый глаз и инъекцию только растворителя (РВ8) в левый глаз. В указанные моменты времени внутриглазную жидкость (~0,1 мл) собирали и анализировали на присутствие высвобожденного конъюгата лекарственного средства количественным анализом на основе ВЭЖХ. В день 115 (группа микрочастиц) или день 105 (группа наночастиц) животных подвергали эвтаназии и собирали внутриглазную жидкость и стекловидное тело. Уровни высвобожденного лекарственного средства в ВЖ сравнивали с уровнями в стекловидном теле для каждого животного.
У всех кроликов наблюдали стабильное высвобождение лекарственного средства после введения частиц в стекловидное тело (фиг. 7А, табл. 2).
Таблица 2. Фармакокинетика доставки частиц ОХВ-Р8А-РЕС3 в стекловидное тело кроликов
ОХВ-Р5А-РЕС. Микрочастицы = ОХН-Р5А-РЕ63 Наночастицы
День ~............... Концентрация иХН _______ 4..74 + 2.23мкг/мл | День Концентрация 3ΧΗ ..вовнутриглазной ж _______ 6.91 ± 2.40 мкг/мл
7 3.45 +. 1.76 мкг/мл ; 8 2.61 + 1.11 мкг/мл
17 1.63 + 0.65 мкг/мл 1 Ϊ8 1.51 ± 0.77 мкг/мл
31 0.78 + 0.52 мкг/мл ! 33 0.75 + 0.41 мкг/мл
64 0.16 + 0.21 мкг/мл Ϊ 5? 0.37 ± 0.27мкг/мл
92 0.21 + 0,45-мкг/мл ; 9? 5 0.22 + 0.26 мкг/мл
115 0.05 + 0.08 мкг/мл Ϊ 105 0.13 ± 0.18 мкг/мл
Данные представлены в виде среднего значения +8Ό.
Уровни, значительно превышающие предел количественного определения ВЭЖХ анализа (10 нг/мл или 20 нМ), наблюдали в ВЖ животных, получавших как микрочастицы, так и наночастицы, на протяжении всего исследования, 115 и 105 дней соответственно (фиг. 7А). Прямое сравнение уровней высвобожденного лекарственного средства в ВЖ с уровнями в стекловидном теле выявило, что уровни в стекловидном теле были значительно выше, чем уровни, измеренные в ВЖ, вплоть до 188 раз выше в стекловидном теле, чем в ВЖ (табл. 3, фиг. 7В). Средние уровни высвобожденного лекарственного средства в случае животных, получавших микрочастицы, в день 115 составляли 0,09+0,13 мкМ в ВЖ и 7,12+12,92 мкМ в стекловидном теле. В случае животных, получавших наночастицы, в день 105 средние уровни высвобожденного лекарственного средства составляли 0,23+0,31 мкМ в ВЖ и 11,91+10,45 мкМ в стекловидном теле (табл. 3). Уровни лекарственного средства в стекловидном теле были в 77-90 раз выше, чем уровни лекарственного средства, измеренные в ВЖ.
На фиг. 7А приведен график, демонстрирующий количество высвобожденного конъюгата лекарственного средства ΌΧΒ (нМ) в зависимости от времени (дни) во внутриглазной жидкости (ВЖ) кроликов, получавших инъекцию в стекловидное тело микрочастиц и наночастиц. На фиг. 7В приведена гистограмма для сравнения количеств высвобожденного лекарственного средства во внутриглазной жидкости (ВЖ) и стекловидном теле кроликов, получавших наночастицы и микрочастицы, в дни 105 и 115 соответственно.
- 31 032552
Таблица 3. Сравнение уровней высвобожденного лекарственного средства во внутриглазной жидкости и в стекловидном теле
Лечение Концентрация ϋΧΚ Отношение (мкМ)
Внутриглазная жидкость Стекловидное тело „ Стекловидное тело/ Внутриглазная жидкость
мкг/мл мкМ мкг/мл мкМ
Микрочастицы
Кролик 1 0.020 0.034 0.34 0.59 17
Кролик 2 0.184 0.317 17.50 30.17 95
Кролик 3 0.014 0.024 1.75 3.01 125
Кролик 4 0.030 0.052 0.79 1.37 27
Кролик 5 0.002 0.004 0.27 0.47 122
Среднее 0.05+0.08 0.09+0.13 4.13+7.50 7.12+12.92 77+52
Наночастицы
Кролик 1 0.10 0.17 4.81 8.30 50
Кролик 2 0.06 0.10 1.65 2.84 29
Кролик 3 0.45 0.77 17.32 29.86 39
Кролик 4 0.03 0.06 6.31 10.88 188
Кролик 5 0.03 0.05 4.44 7.66 144
Среднее 0.13+0.18 0.23+0.31 6.91+6.06 11.91+10.45 90+72
Данные представлены в виде среднего значения ±8Ό.
Доставка микро- или наночастиц ΌΧΚ-Ρ8Α-ΡΕΟ3 в стекловидное тело глаз кролика приводила к долгосрочному высвобождению лекарственного средства, продолжающемуся в течение по меньшей мере 115 или 105 дней, соответственно, на протяжении исследования. Уровни высвобожденного лекарственного средства, измеренные в стекловидном теле, были намного выше, чем уровни, измеренные во внутриглазной жидкости, в среднем в 77-90 раз выше.
Эти данные указывают на замедленное высвобождение из ΌΧΚ-Ρ8Α-ΡΕΟ3 при доставке в глаза и свидетельствуют о том, что ΌΧΚ-Ρ8Α-ΡΕΟ3 будет многообещающим способом лечения НВ глазных заболеваний, включая ВДМ с НВ.
Пример 4. Синтез и т уДго оценка полностью биоразлагаемых стержней из ΌΧΚ-Ρ8Α-ΡΕΟ3.
Были успешно получены конъюгаты ΌΧΚ-Ρ8Α-ΡΕΟ3 в форме стержней с диаметром 0,5 мм, длиной 0,5 см и массой 1 мг с тремя уровнями нагрузки лекарственного средства доксорубицина (ΌΧΚ), 10%, 30 и 50%. Конъюгат ΌΧΚ высвобождался т уДго стабильно в течение по меньшей мере 25 дней в случае всех трех типов стержней.
Материалы и методы.
Получение полимера ΡΕΟ3-Ρ8Α.
(Полиэтиленгликоль)3-со-поли(себациновую кислоту) (ΡΕΟ3-Ρ8Α) синтезировали конденсацией в расплаве. Вкратце, себациновую кислоту нагревали с обратным холодильником в уксусном ангидриде, получая предшественник полимера себациновой кислоты (ацил-δΑ). Полиэтиленгликоль (ΡΕΟ3) получали смешиванием (ΊΙ3Ο-Ρ1'Χ'.ι-\Π2 (2,0 г), лимонной кислоты (26 г), дициклогексилкарбодиимида (ЭСС; 83 мг) и 4-(диметиламино)пиридина (ΌΜΑΡ, 4,0 мг), которые добавляли к 10 мл метиленхлорида, перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем осаждали, промывали эфиром и высушивали в вакууме. Затем ацил-δΑ (90 мас.%) и ΡΕΟ3 (10 мас.%) полимеризовали при 180°С в течение 30 мин. Газообразный азот подавали в колбу на 30 с каждые 15 мин. Полимеры охлаждали до температуры окружающей среды, растворяли в хлороформе и осаждали избытком петролейного эфира. Осадок собирали фильтрованием и высушивали в вакууме до постоянного веса, получая полимер ΡΕΟ3-Ρ3Α.
Получение стержней из ΌΧΚ-Ρ3Α-ΡΕΟ3.
При получении стержней ΌΧΚ-Ρ3Α-ΡΕΟ3 использовали три различные концентрации ΌΧΚ для получения стержней с уровнями нагрузки лекарственного средства 10, 30 и 50 мас.%. Для стержней с нагрузкой лекарственного средства 10, 30 и 50% ΡΕΟ3-Ρ3Α и доксорубицина гидрохлорид (ΌΧΚ) (\е(Оет ЬЬС, ЭигИат, ΝΌ) добавляли к СНС13 в соотношениях 9:1, 7:3 и 1:1 (по массе). ΡΕΟ3-Ρ3Α и ΌΧΚ инкубировали при 50°С в течение одного часа, после чего СНС13 удаляли в вакууме. Продукт реакции растирали в тонкий порошок и затем прессовали в стеклянную трубку с диаметром 0,5 мм, которую использовали в качестве формы. Стержни выдавливали из пресс-формы и нарезали длиной 0,5 см. Каждый стержень весил примерно 1 мг (0,9-1,2 мг).
Высвобождение лекарственного средства т уДго.
Один стержень (~1 мг) помещали в 1 мл фосфатно-солевого буфера ^ВЗ, рН 7,4) и инкубировали при 37°С на вращающейся платформе (140 об/мин). В выбранные моменты времени супернатант собирали и добавляли свежий ΡΒδ. Концентрацию конъюгата ΌΧΚ определяли по поглощению при 480 нм.
Результаты.
Получали конъюгаты ΌΧΚ-Ρ3Α-ΡΕΟ3 в форме стержней с тремя различными уровнями нагрузки
- 32 032552 лекарственного средства, 10, 30 и 50%. Конъюгаты ΟΧΕ-РЗА-РЕС, формовали в стержни с диаметром 0,5 мм, длиной 0,5 см и массой 1 мг.
Продолжительность высвобождения лекарственного средства ш νίΐΓΟ оценивали с использованием стержней из ΟΧΕ-РЗА-РЕС, с уровнями нагрузки лекарственного средства 10, 30 и 50% (фиг. 8). Высвобождение лекарственного средства из стержней всех трех типов было стабильным в течение по меньшей мере 25 дней.
Эти данные демонстрируют, что возможен синтез конъюгатов ^ΧΚ-РЗА-РЕС3 в форме стержней. Стержни, состоящие из конъюгатов ΟΧΕ-РЗА-РЕС, с различными концентрациями лекарственного средства, были успешно синтезированы, и все стержни демонстрировали стабильное высвобождение лекарственного средства ш νίΐΓΟ. Эти данные также свидетельствуют о том, что можно получать стержни с различными размерами, массой и содержанием лекарственного средства и оптимизировать скорости высвобождения лекарственного средства для достижения наиболее эффективного профиля доставки лекарственного средства для каждого доставляемого лекарственного средства и для каждого терапевтического показания.
Пример 5. Получение полимерных конъюгатов ^ΧЕ-РСРΗ-РЗА-РЕС3.
Микрочастицы, состоящие из полностью биоразлагаемого конъюгата полимер-лекарственное средство ^ΧЕ-РЗА-РСРΗ-РЕС3. были синтезированы и демонстрировали более низкую скорость высвобождения лекарственного средства и более стабильную продолжительность высвобождения лекарственного средства по сравнению с микрочастицами ΟΧΕ-РЗА-РЕС,. Добавление СРΗ к полимеру повышало гидрофобность конъюгата полимер-лекарственное средство, что приводило к увеличению продолжительности высвобождения лекарственного средства, предположительно, вследствие уменьшения растворимости ΌΧΚ.
Материалы и методы
Синтез 1,6-бис (п-карбоксифенокси)гексана (СРЩ 1,6-бис-(п-карбоксифенокси)гексан (СРЩ синтезировали, как описано Сошх (1966). Вкратце, п-гидроксибензойную кислоту (27,6 г) и гидроксид натрия (16,0 г) в воде (80 мл) перемешивали и нагревали до температуры флегмы. 1,6-дибромгексан (96%, 15,7 мл) добавляли в течение 30 мин, поддерживая смесь при температуре флегмы, и нагревали с обратным холодильником в течение дополнительных 3,5 ч. Гидроксид натрия (4,0 г), растворенный в воде (10 мл), добавляли к смеси и нагревали с обратным холодильником еще в течение 2 ч перед тем, как оставить реакционную смесь на ночь при комнатной температуре. Динатриевую соль выделяли фильтрованием, промывали 40 мл метанола и растворяли в дистиллированной воде. Раствор нагревали до 60-70°С и подкисляли 6Η серной кислотой. Двухосновную кислоту выделяли фильтрованием и высушивали до постоянного веса в вакууме.
Синтез Р^еСРΗ.
1,6-бис-(п-Карбоксифенокси)гексан (СРЩ (10,0 г) нагревали с обратным холодильником в 200 мл уксусного ангидрида в течение 30 мин в атмосфере азота с последующим удалением непрореагировавшей дикислоты фильтрованием и растворителя испарением. Осадок перекристаллизовывали из диметилформамида и этилового эфира, промывали сухим этиловым эфиром и высушивали до постоянного веса в вакууме.
Синтез предшественника полимера РЕС3-РЗА-РСРΗ.
(Полиэтиленгликоль)3-со-поли(себациновая кислота)-со-поли(СРΗ) (РЕС3-ЗА-СРЩ синтезировали конденсацией в расплаве. Вкратце, себациновую кислоту нагревали с обратным холодильником в уксусном ангидриде, получая предшественник полимера себациновой кислоты (ацил-ЗА). Полиэтиленгликоль (РЕС3) получали смешиванием СЩО-РЕС-ΝΗ (2,0 г), лимонной кислоты (26 г), дициклогексилкарбодиимида (ЭСС; 83 мг) и 4-(диметиламино)пиридина (ОМАР, 4,0 мг), которые добавляли к 10 мл метиленхлорида, перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем осаждали, промывали эфиром и высушивали в вакууме. Затем РЕС3 (10% мас./об.), ацил-ЗА (60% мас./об.) и Р^еСРΗ (30% мас./об.) полимеризовали при 180°С в течение 30 мин. Газообразный азот подавали в колбу на 30 с каждые 15 мин. Полимеры охлаждали до температуры окружающей среды, растворяли в хлороформе и осаждали избытком петролейного эфира. Осадок собирали фильтрованием и высушивали в вакууме до постоянного веса, получая предшественник полимера РЕС^РЗА-РСРИ
Получение микрочастиц ^ΧЕ-РЗА-РСРΗ-РЕС3.
Для получения микрочастиц ^ΧЕ-РЗА-РСРΗ-РЕС3 200 мг РЕС3-РЗА-РСРΗ растворяли в 3 мл дихлорметана (ДХМ) и смешивали с 40 мг доксорубицина гидрохлорида (ΌΧΚ) (№10ет ЬЬС, ЭигНат, ΝΟ), растворенного в 1,5 мл ДМСО. После инкубации при 50°С в течение 30 мин смесь гомогенизировали в 100 мл ПВС при 3000 об/мин в течение 1 мин. После перемешивания в течение 2 ч частицы собирали центрифугированием (9000*д в течение 25 мин) и промывали трижды перед лиофилизацией.
Характеристика частиц.
Размер частиц определяли на приборе Сои11ег МиИЫхег Ιν (Весктап-Сои11ег Шс., Ри11ег1оп, СА). Определяли размеры более 100000 частиц для каждой партии микрочастиц, чтобы определить средний диаметр частиц.
Высвобождение лекарственного средства ш νίίτο.
- 33 032552
Микрочастицы 1)ХР-Р8А-РСР11-РР'С3 (2 мг) суспендировали в фосфатно-солевом буфере (РВ8, ρΗ 7,4) и инкубировали при 37°С на вращающейся платформе (140 об/мин). В выбранные моменты времени супернатант собирали центрифугированием (13500*§ в течение 5 мин) и частицы ресуспендировали в свежем РВ8. Содержание конъюгата ΌΧΚ определяли по поглощению при 480 нм.
Результаты.
Микрочастицы 1)ХР-Р8Л-РСР11-РЕ'Сн были синтезированы и имели средний размер 24,3±8,7 мкм с уровнем нагрузки лекарственного средства 13,9%.
Продолжительность высвобождения ΐπ νΐΐΓΟ лекарственного средства сравнивали для микрочастиц 1)ХР-Р8Л-РСР11-РНС3 и микрочастиц ΌΧΚ-Ρ8Α-ΡΕΟ3 (средний размер 22,5±8,3 мкм). Микрочастицы ΌΧΚ-Ρ8Α-ΡΕΟ3 демонстрировали стабильное высвобождение лекарственного средства в течение 45 дней, в то время как микрочастицы ^XΚ-Ρ8Α-ΡСΡΗ-ΡΕС3 демонстрировали меньшую скорость высвобождения лекарственного средства, и высвобождение лекарственного средства было стабильным в течение более 75 дней (фиг. 9).
Были синтезированы микрочастицы, состоящие из полностью биоразлагаемого конъюгата полимерлекарственное средство Е)ХР-Р8А-РСР11-РР'С3. Микрочастицы □ХР-РВА-РСРИ-РРС; демонстрировали более низкую скорость высвобождения лекарственного средства и более стабильную продолжительность высвобождения лекарственного средства по сравнению с микрочастицами 1)ХИ-Р8А-РЕ'С3. частицами, в которые не был добавлен полимер РСРН Добавление ΡСΡΗ к полимеру повышало гидрофобность высвобождаемого конъюгата лекарственного средства, что, как ожидалось, должно снижать растворимость Е)ХР. и приводило к большей продолжительности высвобождения лекарственного средства.
Полученные данные демонстрируют, что путем изменения химических свойств полимера для повышения гидрофобности высвобождаемого конъюгата лекарственного средства можно изменять уровень и продолжительность высвобождения лекарственного средства, свидетельствуя о том, что параметры можно оптимизировать для получения более эффективного профиля доставки лекарственного средства для каждого доставляемого лекарственного средства и для каждого терапевтического показания. Схема 1
Схема 2
- 34 032552

Claims (45)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Полимерный конъюгат, представленный следующей формулой:
    (А-Х)т-¥- ( (Ζ)ο-(Х)р- (А)ч)п, где А представляет собой ингибитор фактора, индуцируемого гипоксией 1-альфа (ΗΙΓ-1), выбранный из доксорубицина, даунорубицина, темсиролимуса, рапамицина, эверолимуса, топотекана, камптотецина, гелданамицина, генистеина, иринотекана, сорафениба, стауроспорина, ΡΌ98059 (2'-амино-3'метоксифлавон), 2-метоксиэстрадиола и ΥΟ-1 (3-(5'-гидроксиметил-2'-фурил)-1-бензилиндазол);
    X представляет собой гидрофобный полимерный сегмент, выбранный из поли(молочной кислоты), поли(гликолевой кислоты), сополимера молочной и гликолевой кислот, поликапролактона и полиангидрида или их сополимеров;
    Υ представляет собой остаток одного из следующих соединений:
    Ζ представляет собой гидрофильный полимерный сегмент, выбранный из поли(алкиленгликоля), полисахарида, поли(винилового спирта), поливинилпирролидона и блок-сополимера полиоксиэтилена (плюроник®); и о равно 1;
    р и ц независимо равны 0 или 1;
    т равно целому числу от 1 до 20;
    η равно целому числу от 2 до 6 при условии, что А не является доксорубицином, когда т и η, оба, равны единице.
  2. 2. Полимерный конъюгат по п.1, в котором А выбирается из темсиролимуса, рапамицина, эверолимуса и стауроспорина.
  3. 3. Полимерный конъюгат по п.1 или 2, в котором Ζ представляет собой поли(алкиленгликоль).
  4. 4. Полимерный конъюгат по п.3, в котором Ζ представляет собой полиэтиленгликоль.
  5. 5. Полимерный конъюгат по любому из пп.1-4, в котором X является биоразлагаемым.
  6. 6. Полимерный конъюгат по п.5, в котором X выбирается из группы, состоящей из поликапролактона, полиангидридов, а также их сополимеров.
  7. 7. Полимерный конъюгат по п.6, в котором X представляет собой полиангидрид.
  8. 8. Полимерный конъюгат по п.7, в котором X представляет собой полисебациновый ангидрид.
  9. 9. Полимерный конъюгат по п.7, в котором X представляет собой 1,6 бис-(пкарбоксифенокси)гексан (ΟΡΗ) или сочетание поли-ΟΡΗ (ΡΟΡΗ) и полисебацинового ангидрида.
  10. 10. Полимерный конъюгат по п.1, в котором Υ представляет собой лимонную кислоту.
  11. 11. Полимерный конъюгат по п.1, представленный следующей формулой:
    Α-Χ-Υ- (Ζ)η, где А представляет собой ингибитор фактора, индуцируемого гипоксией 1-альфа (ΗΙΓ-1), выбранный из доксорубицина, даунорубицина, темсиролимуса, рапамицина, эверолимуса, топотекана, камптотецина, гелданамицина, генистеина, иринотекана, сорафениба, стауроспорина, ΡΌ98059 (2'-амино-3'метоксифлавон), 2-метоксиэстрадиола и ΥΟ-1 (3-(5'-гидроксиметил-2'-фурил)-1-бензилиндазол);
    X представляет собой гидрофобный полимерный сегмент, выбранный из поли(молочной кислоты), поли(гликолевой кислоты), сополимера молочной и гликолевой кислот, поликапролактона и полиангидрида;
    Υ представляет собой одно из следующего:
    - 35 032552
    Ζ представляет собой гидрофильный полимерный сегмент, выбранный из поли(алкиленгликоля), полисахарида, поли(винилового спирта), поливинилпирролидона и блок-сополимера полиоксиэтилена (плюроник®); и η равно целому числу от 2 до 6.
  12. 12. Полимерный конъюгат по п.11, в котором Α выбирается из темсиролимуса, рапамицина, эверолимуса и стауроспорина.
  13. 13. Полимерный конъюгат по п.11 или 12, в котором Ζ представляет собой поли(алкиленгликоль).
  14. 14. Полимерный конъюгат по п.13, в котором Ζ представляет собой полиэтиленгликоль.
  15. 15. Полимерный конъюгат по любому из пп. 11-14, в котором X является биоразлагаемым.
  16. 16. Полимерный конъюгат по п.15, в котором X выбирается из группы, состоящей из поликапро лактона, полиангидридов, а также их сополимеров.
  17. 17. Полимерный конъюгат по п.16, в котором X представляет собой полиангидрид.
  18. 18. Полимерный конъюгат по п.17, в котором X представляет собой полисебациновый ангидрид.
  19. 19. Полимерный конъюгат по п.16, в котором X представляет собой 1,6 бис-(пкарбоксифенокси)гексан (СРЩ или сочетание СΡΗ и полисебацинового ангидрида.
  20. 20. Полимерный конъюгат по любому из пп.11-19, в котором η равно 3.
  21. 21. Полимерный конъюгат по п.11, в котором Υ представляет собой лимонную кислоту.
  22. 22. Полимерный конъюгат по п.11, представленный формулой ΙΑ где Α представляет собой ингибитор ΗΙΡ-1, выбранный из доксорубицина, даунорубицина, темси ролимуса, рапамицина, эверолимуса, топотекана, камптотецина, гелданамицина, генистеина, иринотекана, сорафениба, стауроспорина, ΡΌ98059, 2-метоксиэстрадиола и Υ^ί;
    Ό представляет собой О;
    РЕС представляет собой полиэтиленгликолевую цепь;
    X представляет собой гидрофобный полимерный сегмент, выбранный из поли(молочной кислоты), поли(гликолевой кислоты), сополимера молочной и гликолевой кислот, поликапролактона и полиангид рида.
  23. 23. Полимерный конъюгат по п.22, в котором Α выбирается из темсиролимуса, рапамицина, эверолимуса и стауроспорина.
  24. 24. Полимерный конъюгат по п.22 или 23, в котором X является биоразлагаемым.
  25. 25. Полимерный конъюгат по п.24, в котором X представляет собой полиангидрид.
  26. 26. Полимерный конъюгат по п.25, в котором X представляет собой полисебациновый ангидрид.
  27. 27. Полимерный конъюгат по п.25, в котором X представляет собой 1,6 бис-(пкарбоксифенокси)гексан (СРЩ или сочетание СΡΗ и полисебацинового ангидрида.
  28. 28. Полимерный конъюгат по п.1, в котором X выбирается из поли(молочной кислоты), поли(гликолевой кислоты) и сополимера молочной и гликолевой кислот.
  29. 29. Полимерный конъюгат по п.11, в котором X выбирается из поли(молочной кислоты), поли(гликолевой кислоты) и сополимера молочной и гликолевой кислот.
  30. 30. Полимерный конъюгат по п.22, в котором X выбирается из поли(молочной кислоты), поли(гликолевой кислоты) и сополимера молочной и гликолевой кислот.
  31. 31. Множество микро- и/или наночастиц, содержащих конъюгат по любому из пп.1-30.
  32. 32. Препарат, содержащий полимерный конъюгат по любому из пп.1-30 и/или частицы по п.31 в
    - 36 032552 фармацевтически приемлемом носителе.
  33. 33. Препарат по п.32, в котором А выбирается из темсиролимуса, рапамицина, эверолимуса и стауроспорина.
  34. 34. Препарат по п.33, в котором X представляет собой полиангидрид.
  35. 35. Препарат по п.34, в котором X представляет собой полисебациновый ангидрид.
  36. 36. Полимерный конъюгат по п.35, в котором X представляет собой 1,6 бис-(пкарбоксифенокси)гексан (СРН) или сочетание СРН и полисебацинового ангидрида.
  37. 37. Способ лечения заболевания или нарушения, связанного с аберрантной васкуляризацией, включающий введение пациенту, который нуждается в этом, препарата по п.32, в фармацевтически приемлемом эксципиенте, в форме микро- и/или наночастиц или импланта.
  38. 38. Способ лечения глазного заболевания или нарушения, связанного с аберрантной васкуляризацией, включающий введение в глаза пациента, который нуждается в этом, препарата по п.32, в фармацевтически приемлемом эксципиенте, в форме микро- и/или наночастиц или импланта или в фармацевтически приемлемой форме для введения в глаза.
  39. 39. Способ по п.38, в котором глазное заболевание или нарушение представляет собой интраокулярное неоваскулярное заболевание, нарушение или повреждение.
  40. 40. Способ по п.39, в котором интраокулярное неоваскулярное заболевание или нарушение выбирают из группы, состоящей из возрастной дегенерации макулы, связанной с хориоидальной неоваскуляризацией, пролиферативной диабетической ретинопатии, пролиферативной витреоретинопатии, ретинопатии недоношенных, патологической близорукости, болезни Гиппеля-Линдау, синдрома предполагаемого гистоплазмоза глаз (СПГГ), а также состояний, связанных с ишемией, таких как окклюзия ветки вены сетчатки, окклюзия центральной вены сетчатки, окклюзия ветки артерии сетчатки и окклюзия центральной артерии сетчатки, неоваскуляризации, связанной с опухолью, неоваскуляризации, связанной с раной глаза, ретинальной неоваскуляризации, отторжения трансплантата роговицы, осложнений после хирургической операции, которые вызывают неоваскуляризацию, осложнений после травмы, которые вызывают неоваскуляризацию, а также их сочетаний.
  41. 41. Способ по п.40, в котором заболевание или нарушение представляет собой мокрую возрастную дегенерацию макулы.
  42. 42. Способ по п.40, в котором заболевание или нарушение включает хориоидальную неоваскуляризацию.
  43. 43. Способ по п.42, в котором композиция обеспечивает эффективное количество одного или более активных средств для сокращения площади хориоидальной неоваскуляризации, измеряемой методом флуоресцентной ангиографии, по меньшей мере на 15%.
  44. 44. Способ по п.40, в котором заболевание или нарушение включает ретинальную неоваскуляризацию.
  45. 45. Способ по п.44, в котором композиция обеспечивает эффективное количество одного или более активных средств для сокращения площади ретинальной неоваскуляризации, измеряемой методом флуоресцентной ангиографии, по меньшей мере на 15%.
    - 37 032552
    П (глаза)
EA201491710A 2012-03-16 2013-03-12 Препараты с контролируемым высвобождением для доставки ингибиторов hif-1 EA032552B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261611931P 2012-03-16 2012-03-16
PCT/US2013/030533 WO2013138343A1 (en) 2012-03-16 2013-03-12 Controlled release formulations for the delivery of hif-1 inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201491710A1 EA201491710A1 (ru) 2015-04-30
EA032552B1 true EA032552B1 (ru) 2019-06-28

Family

ID=47913636

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201491710A EA032552B1 (ru) 2012-03-16 2013-03-12 Препараты с контролируемым высвобождением для доставки ингибиторов hif-1

Country Status (9)

Country Link
US (2) US8962577B2 (ru)
EP (1) EP2825206A1 (ru)
JP (1) JP5883539B2 (ru)
CN (1) CN104363924B (ru)
AU (1) AU2013232297B2 (ru)
CA (1) CA2867381C (ru)
EA (1) EA032552B1 (ru)
HK (1) HK1206270A1 (ru)
WO (1) WO2013138343A1 (ru)

Families Citing this family (54)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2538929A4 (en) 2010-02-25 2014-07-09 Univ Johns Hopkins PROLONGED DELIVERY OF THERAPEUTIC AGENTS TO AN OCULAR COMPARTMENT
EP2600901B1 (en) 2010-08-06 2019-03-27 ModernaTX, Inc. A pharmaceutical formulation comprising engineered nucleic acids and medical use thereof
US10307372B2 (en) 2010-09-10 2019-06-04 The Johns Hopkins University Rapid diffusion of large polymeric nanoparticles in the mammalian brain
DE19177059T1 (de) 2010-10-01 2021-10-07 Modernatx, Inc. N1-methyl-pseudouracile enthältendes ribonucleinsäuren sowie ihre verwendungen
WO2012135805A2 (en) 2011-03-31 2012-10-04 modeRNA Therapeutics Delivery and formulation of engineered nucleic acids
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
LT3682905T (lt) 2011-10-03 2022-02-25 Modernatx, Inc. Modifikuoti nukleozidai, nukleotidai ir nukleorūgštys bei jų naudojimas
PL2791160T3 (pl) 2011-12-16 2022-06-20 Modernatx, Inc. Kompozycje zmodyfikowanego mrna
EP2825206A1 (en) 2012-03-16 2015-01-21 The Johns Hopkins University Controlled release formulations for the delivery of hif-1 inhibitors
JP6138904B2 (ja) 2012-03-16 2017-05-31 ザ・ジョンズ・ホプキンス・ユニバーシティー 活性剤の送達のための非線状マルチブロックコポリマー薬物コンジュゲート
US9878056B2 (en) 2012-04-02 2018-01-30 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
DE18200782T1 (de) 2012-04-02 2021-10-21 Modernatx, Inc. Modifizierte polynukleotide zur herstellung von proteinen im zusammenhang mit erkrankungen beim menschen
WO2013166408A1 (en) 2012-05-03 2013-11-07 Kala Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical nanoparticles showing improved mucosal transport
US11596599B2 (en) 2012-05-03 2023-03-07 The Johns Hopkins University Compositions and methods for ophthalmic and/or other applications
KR102140989B1 (ko) 2012-05-03 2020-08-04 칼라 파마슈티컬스, 인크. 개선된 점막 수송을 나타내는 제약 나노입자
US9827191B2 (en) 2012-05-03 2017-11-28 The Johns Hopkins University Compositions and methods for ophthalmic and/or other applications
AU2013256008B2 (en) 2012-05-04 2016-02-25 The Johns Hopkins University Lipid-based drug carriers for rapid penetration through mucus linings
RS63237B1 (sr) 2012-11-26 2022-06-30 Modernatx Inc Terminalno modifikovana rnk
US10568975B2 (en) 2013-02-05 2020-02-25 The Johns Hopkins University Nanoparticles for magnetic resonance imaging tracking and methods of making and using thereof
WO2014152211A1 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Moderna Therapeutics, Inc. Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
ES2947557T3 (es) 2013-09-06 2023-08-11 Vanda Pharmaceuticals Inc Tratamiento de afecciones mediadas por CYR61 y VEGF
US10023626B2 (en) 2013-09-30 2018-07-17 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
EA201690675A1 (ru) 2013-10-03 2016-08-31 Модерна Терапьютикс, Инк. Полинуклеотиды, кодирующие рецептор липопротеинов низкой плотности
US9617222B1 (en) 2014-03-31 2017-04-11 Senju Pharmaceutical Co., Ltd. Alkynyl indazole derivative and use thereof
US9987241B2 (en) 2014-09-25 2018-06-05 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Enzyme conjugate and prodrug cancer therapy
US11331392B2 (en) 2014-12-04 2022-05-17 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Biodegradable thermo-responsive polymers and uses thereof
US10398742B2 (en) 2014-12-15 2019-09-03 The Johns Hopkins University CVS transplantation for treatment of bacterial vaginosis
AU2015362621B2 (en) 2014-12-15 2019-01-17 The Johns Hopkins University Sunitinib formulations and methods for use thereof in treatment of ocular disorders
WO2016118506A1 (en) * 2015-01-20 2016-07-28 The Johns Hopkins University Compositions for the sustained release of anti-glaucoma agents to control intraocular pressure
AU2016211696B2 (en) 2015-01-27 2018-05-10 The Johns Hopkins University Hypotonic hydrogel formulations for enhanced transport of active agents at mucosal surfaces
EP3280761A1 (en) * 2015-04-06 2018-02-14 The Johns Hopkins University Shape memory particles for biomedical uses
EP3337491A4 (en) * 2015-08-19 2019-04-10 Children's Research Institute, Children's National Medical Center COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING TRANSPLANT HOST REACTION
WO2017035408A1 (en) 2015-08-26 2017-03-02 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Compounds for treatment of immune and inflammatory disorders
AR106018A1 (es) 2015-08-26 2017-12-06 Achillion Pharmaceuticals Inc Compuestos de arilo, heteroarilo y heterocíclicos para el tratamiento de trastornos médicos
US9808531B2 (en) 2015-09-22 2017-11-07 Graybug Vision, Inc. Compounds and compositions for the treatment of ocular disorders
CN108367079B (zh) 2015-11-12 2022-11-22 灰色视觉公司 用于治疗的聚集性微粒
WO2017190148A1 (en) * 2016-04-29 2017-11-02 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and compositions for the prevention and treatment of surgical adhesions
ES2902006T3 (es) 2016-06-27 2022-03-24 Achillion Pharmaceuticals Inc Quinazolina y compuestos indol para tratar trastornos médicos
RU2019103384A (ru) 2016-07-26 2020-08-26 Дзе Юниверсити Оф Норт Каролина Эт Чепел Хилл Опосредуемая вектором иммунологическая толерантность глаз
CN110603252A (zh) 2017-03-01 2019-12-20 艾其林医药公司 用于治疗医学障碍的芳基、杂芳基和杂环药物化合物
CA3056923A1 (en) 2017-03-23 2018-09-27 Graybug Vision, Inc. Drugs and compositions for the treatment of ocular disorders
EP3621654A4 (en) 2017-05-10 2021-02-17 Graybug Vision, Inc. PROLONGED-RELEASE MICROPARTICLES AND SUSPENSIONS OF THESE INTENDED FOR MEDICAL THERAPY
US11786607B2 (en) 2017-06-15 2023-10-17 Modernatx, Inc. RNA formulations
US11446365B2 (en) 2017-08-09 2022-09-20 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Antimalarial enzyme conjugates, kits containing same, and methods of producing and using same
MX2020002348A (es) 2017-08-31 2020-10-08 Modernatx Inc Métodos de elaboración de nanopartículas lipídicas.
WO2020041301A1 (en) 2018-08-20 2020-02-27 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compounds for the treatment of complement factor d medical disorders
CN113271926A (zh) 2018-09-20 2021-08-17 摩登纳特斯有限公司 脂质纳米颗粒的制备及其施用方法
WO2020081723A1 (en) 2018-10-16 2020-04-23 Georgia State University Research Foundation, Inc. Carbon monoxide prodrugs for the treatment of medical disorders
WO2021168239A1 (en) * 2020-02-21 2021-08-26 The Johns Hopkins University Suprachoroidal delivery of drug particles to reduce toxicity
WO2022006269A1 (en) * 2020-06-30 2022-01-06 The Johns Hopkins University Non-intuitive combination of drug delivery carriers of the same drug for synergistic growth delay of solid tumors
CN115364199A (zh) * 2021-05-19 2022-11-22 远大医药（中国）有限公司 包含pedf衍生的短肽的组合物及其制备方法和用途

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4997652A (en) * 1987-12-22 1991-03-05 Visionex Biodegradable ocular implants
WO1992007866A1 (en) * 1990-11-01 1992-05-14 Board Of Regents, The University Of Texas System Anthracycline analogues bearing latent alkylating substituents
US5710135A (en) * 1995-06-27 1998-01-20 Pharmachemie B.V. Anthracycline prodrugs, method for preparation as well as their use in selective chemotherapy
US5932462A (en) * 1995-01-10 1999-08-03 Shearwater Polymers, Inc. Multiarmed, monofunctional, polymer for coupling to molecules and surfaces

Family Cites Families (142)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR901228A (fr) 1943-01-16 1945-07-20 Deutsche Edelstahlwerke Ag Système d'aimant à entrefer annulaire
GB929401A (en) 1958-12-22 1963-06-19 Upjohn Co Encapsulated emulsions and processes for their preparation
GB929405A (en) 1958-12-22 1963-06-19 Upjohn Co Processes for the encapsulation of particles
GB969808A (en) 1962-06-08 1964-09-16 Boots Pure Drug Co Ltd Anthelmintic compositions and compounds
US4027676A (en) 1975-01-07 1977-06-07 Ethicon, Inc. Coated sutures
US4201216A (en) 1976-12-15 1980-05-06 Ethicon, Inc. Absorbable coating composition for sutures
IT1148784B (it) 1980-04-09 1986-12-03 Eurand Spa Procedimento per la preparazione di microcapsule in un veicolo liquido
US4438015A (en) 1981-08-24 1984-03-20 Lever Brothers Company Lavatory cleansing block
US4757128A (en) 1986-08-01 1988-07-12 Massachusetts Institute Of Technology High molecular weight polyanhydride and preparation thereof
US4888176A (en) 1984-05-21 1989-12-19 Massachusetts Institute Of Technology Controlled drug delivery high molecular weight polyanhydrides
US4794000A (en) 1987-01-08 1988-12-27 Synthetic Blood Corporation Coacervate-based oral delivery system for medically useful compositions
GB2172594B (en) 1985-03-22 1988-06-08 Erba Farmitalia New morpholino derivatives of daunorubicin and doxorubicin
US4857602A (en) 1986-09-05 1989-08-15 American Cyanamid Company Bioabsorbable surgical suture coating
US4789724A (en) 1986-10-17 1988-12-06 Massachusetts Institute Of Technology Preparation of anhydride copolymers
US4857311A (en) 1987-07-31 1989-08-15 Massachusetts Institute Of Technology Polyanhydrides with improved hydrolytic degradation properties
US5019400A (en) 1989-05-01 1991-05-28 Enzytech, Inc. Very low temperature casting of controlled release microspheres
JP2517760B2 (ja) * 1989-05-11 1996-07-24 新技術事業団 水溶性高分子化医薬製剤
US4994074A (en) 1990-02-01 1991-02-19 Ethicon, Inc. Copolymers of ε-caprolactone, glycolide and glycolic acid for suture coatings
US5552160A (en) 1991-01-25 1996-09-03 Nanosystems L.L.C. Surface modified NSAID nanoparticles
US5696298A (en) 1991-03-19 1997-12-09 Cytrx Corporation Polyoxypropylene/polyoxyethylene copolymers with improved biological activity
FR2676058B1 (fr) 1991-04-30 1994-02-25 Hoechst Lab Prodrogues glycosylees, leur procede de preparation et leur utilisation dans le traitement des cancers.
WO1993017669A1 (en) 1992-02-28 1993-09-16 Board Of Regents, The University Of Texas System Photopolymerizable biodegradable hydrogels as tissue contacting materials and controlled-release carriers
JPH09504308A (ja) 1993-07-23 1997-04-28 マサチューセッツ インスティチュート オブ テクノロジー 非直鎖状の親水性−疎水性マルチブロックコポリマーのナノ粒子およびマイクロ粒子
US5565215A (en) * 1993-07-23 1996-10-15 Massachusettes Institute Of Technology Biodegradable injectable particles for imaging
US5540930A (en) 1993-10-25 1996-07-30 Pharmos Corporation Suspension of loteprednol etabonate for ear, eye, or nose treatment
US5522842A (en) 1994-03-11 1996-06-04 Poly-Med, Inc. Absorbable Ε-caprolactone polymers as suture coatings displaying auto catalyzed hydrolysis
DE69509377T2 (de) 1994-03-11 1999-11-18 Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai, Tokio/Tokyo Anthracyclin-derivate, die ein trifluormethylierte zuckereinheiten enthalten
IT1272234B (it) 1994-05-02 1997-06-16 Consiglio Nazionale Ricerche Derivati glutationici delle antracicline e procedimento per ottenerli.
US6007845A (en) 1994-07-22 1999-12-28 Massachusetts Institute Of Technology Nanoparticles and microparticles of non-linear hydrophilic-hydrophobic multiblock copolymers
US5576311A (en) 1994-11-30 1996-11-19 Pharmos Corporation Cyclodextrins as suspending agents for pharmaceutical suspensions
US5628981A (en) 1994-12-30 1997-05-13 Nano Systems L.L.C. Formulations of oral gastrointestinal diagnostic x-ray contrast agents and oral gastrointestinal therapeutic agents
US6413539B1 (en) 1996-10-31 2002-07-02 Poly-Med, Inc. Hydrogel-forming, self-solvating absorbable polyester copolymers, and methods for use thereof
US5869130A (en) 1997-06-12 1999-02-09 Mac Dermid, Incorporated Process for improving the adhesion of polymeric materials to metal surfaces
GB9713980D0 (en) 1997-07-03 1997-09-10 Danbiosyst Uk New conjugates
KR20010023852A (ko) * 1997-09-10 2001-03-26 루트거스, 주립대학교 치료적으로 유용한 분해 산물을 갖는 폴리안하이드라이드
US6235869B1 (en) 1998-10-20 2001-05-22 United States Surgical Corporation Absorbable polymers and surgical articles fabricated therefrom
MXPA01007895A (es) 1999-02-03 2003-07-21 Biosante Pharmaceuticals Inc Particulas terapeuticas de fosfato de calcio, metodos de manufactura y usos.
US20040258763A1 (en) 1999-02-03 2004-12-23 Bell Steve J.D. Methods of manufacture and use of calcium phosphate particles containing allergens
US6270806B1 (en) 1999-03-03 2001-08-07 Elan Pharma International Limited Use of peg-derivatized lipids as surface stabilizers for nanoparticulate compositions
US6287588B1 (en) 1999-04-29 2001-09-11 Macromed, Inc. Agent delivering system comprised of microparticle and biodegradable gel with an improved releasing profile and methods of use thereof
US6268488B1 (en) 1999-05-25 2001-07-31 Barbas, Iii Carlos F. Prodrug activation using catalytic antibodies
US20060194008A1 (en) 1999-09-22 2006-08-31 Princeton University Devices with multiple surface functionality
US6589549B2 (en) 2000-04-27 2003-07-08 Macromed, Incorporated Bioactive agent delivering system comprised of microparticles within a biodegradable to improve release profiles
US6495164B1 (en) 2000-05-25 2002-12-17 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. I Preparation of injectable suspensions having improved injectability
PE20020146A1 (es) 2000-07-13 2002-03-31 Upjohn Co Formulacion oftalmica que comprende un inhibidor de ciclooxigenasa-2 (cox-2)
WO2002013701A1 (en) 2000-08-17 2002-02-21 Tyco Healthcare Group Lp Sutures and coatings made from therapeutic absorbable glass
AU2002220002B2 (en) 2000-10-31 2006-12-14 Evonik Corporation Methods and compositions for enhanced delivery of bioactive molecules
AU3840802A (en) 2000-11-01 2002-06-03 Merck Patent Gmbh Methods and compositions for the treatment of diseases of the eye
GB0027357D0 (en) 2000-11-09 2000-12-27 Bradford Particle Design Plc Particle formation methods and their products
US6932894B2 (en) 2001-05-15 2005-08-23 Therasense, Inc. Biosensor membranes composed of polymers containing heterocyclic nitrogens
ATE296628T1 (de) 2001-08-01 2005-06-15 Merck Patent Gmbh Integrinhemmer zur behandlung von augenkrankheiten
GB0122318D0 (en) 2001-09-14 2001-11-07 Novartis Ag Organic compounds
DE10146264A1 (de) 2001-09-20 2003-04-17 Ecolab Gmbh & Co Ohg Verwendung von O/W-Emulsionen zur Kettenschmierung
CA2487940C (en) 2002-06-05 2009-09-22 University Of Florida Ophthalmic drug delivery system
US7122189B2 (en) * 2002-08-13 2006-10-17 Enzon, Inc. Releasable polymeric conjugates based on aliphatic biodegradable linkers
JP2006516262A (ja) 2002-12-17 2006-06-29 ナステック・ファーマシューティカル・カンパニー・インコーポレーテッド Ｙ２受容体結合ペプチドの粘膜送達促進のための組成物および方法ならびに肥満症の治療法および予防法
MXPA05007146A (es) 2002-12-30 2005-09-21 Nektar Therapeutics Al Corp Copolimeros en bloque de polipeptido-poli(etilenglicol) de ramificaciones multiples como vehiculos para suministro de farmacos.
WO2004064860A1 (en) 2003-01-17 2004-08-05 Children's Hospital Medical Center Use of tff2, or agents inducing tff2, in the therapy of allergies
US20050009910A1 (en) 2003-07-10 2005-01-13 Allergan, Inc. Delivery of an active drug to the posterior part of the eye via subconjunctival or periocular delivery of a prodrug
GB0328630D0 (en) 2003-12-10 2004-01-14 Medpharm Ltd Metered dose inhalation preparations
US7357810B2 (en) 2003-12-18 2008-04-15 Ethicon, Inc. High strength suture with absorbable core and suture anchor combination
US7329271B2 (en) 2003-12-18 2008-02-12 Ethicon, Inc. High strength suture with absorbable core
EP1701704A2 (en) 2003-12-31 2006-09-20 Pfizer Products Inc. Solid compositions of low-solubility drugs and poloxamers
EP1713514B1 (en) 2004-01-28 2021-11-24 Johns Hopkins University Drugs and gene carrier particles that rapidly move through mucous barriers
CN101052644A (zh) 2004-02-05 2007-10-10 因特拉迪格姆公司 治疗眼新生血管化疾病的RNAi治疗药物
WO2005117938A2 (en) 2004-04-13 2005-12-15 Regents Of The University Of Minnesota Methods of treating ocular conditions
KR100974733B1 (ko) 2004-04-28 2010-08-06 안지오디바이스 인터내셔널 게엠베하 가교된 생합성물질을 형성하기 위한 조성물 및 시스템, 및이와 관련된 제조 및 사용 방법
ES2246694B1 (es) 2004-04-29 2007-05-01 Instituto Cientifico Y Tecnologico De Navarra, S.A. Nanoparticulas pegiladas.
US20050244469A1 (en) 2004-04-30 2005-11-03 Allergan, Inc. Extended therapeutic effect ocular implant treatments
BRPI0510485A (pt) 2004-04-30 2007-11-13 Allergan Inc implantes inibidores de tirosina cinase intravìtreos biodegradáveis
US7771742B2 (en) 2004-04-30 2010-08-10 Allergan, Inc. Sustained release intraocular implants containing tyrosine kinase inhibitors and related methods
WO2006080951A2 (en) 2004-07-01 2006-08-03 Yale University Targeted and high density drug loaded polymeric materials
ATE465760T1 (de) 2004-07-27 2010-05-15 Dsm Ip Assets Bv Längliches chirurgisches reparaturprodukt auf basis von uhmwpe filamenten
US8354476B2 (en) 2004-12-10 2013-01-15 Kala Pharmaceuticals, Inc. Functionalized poly(ether-anhydride) block copolymers
JP2009533314A (ja) 2005-04-13 2009-09-17 ファイザー・プロダクツ・インク ナノ粒子を含む貧溶性薬物を持続放出するための注射用デポ製剤および方法
JP2009510182A (ja) 2005-07-28 2009-03-12 （オーエスアイ）アイテツク・インコーポレーテツド シクリトールリンカーポリマー抱合体
AU2006282888A1 (en) * 2005-08-25 2007-03-01 Emory University HIF inhibitors
US20070071756A1 (en) 2005-09-26 2007-03-29 Peyman Gholam A Delivery of an agent to ameliorate inflammation
US8168584B2 (en) 2005-10-08 2012-05-01 Potentia Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating age-related macular degeneration by compstatin and analogs thereof
US20070093461A1 (en) 2005-10-26 2007-04-26 Bausch & Lomb Incorporated Effect of Loteprednol etabonate on vascular dysfunction
US20070149593A1 (en) 2005-12-23 2007-06-28 Alcon, Inc. PHARMACEUTICAL FORMULATION FOR DELIVERY OF RECEPTOR TYROSINE KINASE INHIBITING (RTKi) COMPOUNDS TO THE EYE
WO2007084418A2 (en) 2006-01-13 2007-07-26 Surmodics, Inc. Microparticle containing matrices for drug delivery
WO2007089864A2 (en) 2006-01-30 2007-08-09 Angiotech Pharmaceuticals, Inc. Sutures and fibrosing agents
EP1818348A1 (en) 2006-02-10 2007-08-15 Mnemoscience GmbH Polymer material for useful medical devices
US20070231360A1 (en) 2006-03-28 2007-10-04 Minu, L.L.C. Neural conduit agent dissemination
US20080166411A1 (en) 2006-04-10 2008-07-10 Pfizer Inc Injectable Depot Formulations And Methods For Providing Sustained Release Of Poorly Soluble Drugs Comprising Nanoparticles
US20070249536A1 (en) 2006-04-25 2007-10-25 Ma Peter X Three-component polyanhydride copolymers and a method of forming the same
JP2009537662A (ja) 2006-05-15 2009-10-29 タイコ ヘルスケア グループ リミテッド パートナーシップ ハロゲン化環状ラクトンおよびハロゲン化環状ラクトンから製造されるポリマー
KR100787131B1 (ko) * 2006-07-04 2007-12-21 한국생명공학연구원 Ｈｉｆ―１ 활성을 저해하는 화합물, 이의 제조방법 및이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물
EP2046293A2 (en) 2006-07-10 2009-04-15 Medigene AG Use of a cationic colloidal preparation for the diagnosis and treatment of ocular diseases
AU2007277035A1 (en) 2006-07-27 2008-01-31 University Of Florida Research Foundation, Inc. Compositions and methods for treating or preventing ophthalmic light toxicity
AU2007292902B8 (en) 2006-09-08 2013-09-05 Johns Hopkins University Compositions and methods for enhancing transport through mucus
US8821943B2 (en) 2006-09-12 2014-09-02 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Methods and compositions for targeted delivery of therapeutic agents
US8394488B2 (en) 2006-10-06 2013-03-12 Cordis Corporation Bioabsorbable device having composite structure for accelerating degradation
MX2009004856A (es) 2006-11-09 2009-06-05 Alcon Res Ltd Matriz polimerica insoluble en agua para suministro de farmaco.
US8309222B2 (en) 2007-04-25 2012-11-13 Covidien Lp Coated filaments
WO2008137066A1 (en) 2007-05-02 2008-11-13 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Use of compacted nucleic acid nanoparticles in non-viral treatments of ocular diseases
US20080287341A1 (en) 2007-05-18 2008-11-20 Danyang Chen Treatment of vascular abnormalities using nanoparticles
CA2690244C (en) * 2007-06-26 2016-08-09 Ofra Benny-Ratsaby Metap-2 inhibitor polymersomes for therapeutic administration
US8217134B2 (en) 2007-08-30 2012-07-10 Bezwada Biomedical, Llc Controlled release of biologically active compounds
CA2702082A1 (en) 2007-10-08 2009-04-16 Fovea Pharmaceuticals Sa Aqueous ophthalmic formulations
WO2009100176A2 (en) 2008-02-07 2009-08-13 Abbott Laboratories Pharmaceutical dosage form for oral administration of tyrosine kinase inhibitor
US20090226531A1 (en) 2008-03-07 2009-09-10 Allergan, Inc. Methods and composition for intraocular delivery of therapeutic sirna
US8920788B2 (en) * 2008-03-18 2014-12-30 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha High-molecular weight conjugate of physiologically active substances
TW201019963A (en) 2008-09-10 2010-06-01 Abbott Lab Polyethylene glycol lipid conjugates and uses thereof
ES2617913T3 (es) 2008-10-10 2017-06-20 Polyactiva Pty Ltd Conjugados de polímero biodegradable - resto bioactivo
US20100094340A1 (en) 2008-10-15 2010-04-15 Tyco Healthcare Group Lp Coating compositions
US9095506B2 (en) 2008-11-17 2015-08-04 Allergan, Inc. Biodegradable alpha-2 agonist polymeric implants and therapeutic uses thereof
US20100152831A1 (en) 2008-12-12 2010-06-17 Medtronic Vascular, Inc. Implantable Medical Devices Having Multiblock Copolymers
US20120052041A1 (en) 2009-02-04 2012-03-01 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Polymeric nanoparticles with enhanced drug-loading and methods of use thereof
US8062653B2 (en) 2009-02-18 2011-11-22 Bezwada Biomedical, Llc Controlled release of nitric oxide and drugs from functionalized macromers and oligomers
WO2010101992A1 (en) 2009-03-03 2010-09-10 Alcon Research, Ltd. Pharmaceutical composition for delivery of receptor tyrosine kinase inhibiting (rtki) compounds to the eye
WO2010114770A1 (en) 2009-03-30 2010-10-07 Cerulean Pharma Inc. Polymer-agent conjugates, particles, compositions, and related methods of use
US10952965B2 (en) 2009-05-15 2021-03-23 Baxter International Inc. Compositions and methods for drug delivery
KR20120099371A (ko) 2009-08-05 2012-09-10 피어이스 에이지 리포칼린 뮤테인의 조절 방출 제형
WO2011060446A2 (en) 2009-11-16 2011-05-19 Angiotech Pharmaceuticals, Inc. Braided self-retaining sutures and methods
EP2335686A1 (en) 2009-12-21 2011-06-22 LEK Pharmaceuticals d.d. An aqueous intravenous nanosuspension with reduced adverse effects
GB0922624D0 (en) 2009-12-24 2010-02-10 Croda Int Plc Inverse emulsions
NL2004047C2 (en) 2010-01-04 2011-07-05 D O R C Dutch Ophthalmic Res Ct International B V An ophthalmic surgical device and a method of performing ophthalmic surgery.
EP2538929A4 (en) 2010-02-25 2014-07-09 Univ Johns Hopkins PROLONGED DELIVERY OF THERAPEUTIC AGENTS TO AN OCULAR COMPARTMENT
US20130071349A1 (en) 2010-03-02 2013-03-21 Allergan, Inc. Biodegradable polymers for lowering intraocular pressure
WO2011109730A2 (en) 2010-03-04 2011-09-09 The General Hospital Corporation Methods and systems of matching voice deficits with a tunable mucosal implant to restore and enhance individualized human sound and voice production
US10307372B2 (en) 2010-09-10 2019-06-04 The Johns Hopkins University Rapid diffusion of large polymeric nanoparticles in the mammalian brain
CA2816977C (en) 2010-11-05 2019-10-29 The Johns Hopkins University Compositions and methods relating to reduced mucoadhesion
US9327037B2 (en) 2011-02-08 2016-05-03 The Johns Hopkins University Mucus penetrating gene carriers
JP6125488B2 (ja) 2011-03-23 2017-05-10 エシコン・エルエルシーＥｔｈｉｃｏｎ ＬＬＣ 自己保持可変ループ縫合材
KR20140045930A (ko) 2011-03-29 2014-04-17 썬 케미칼 비.브이. 폴리우레탄을 포함하는2-코트 차단시스템
RU2631599C2 (ru) 2011-12-14 2017-09-25 Дзе Джонс Хопкинс Юниверсити Наночастицы, легче проникающие в слизистую оболочку или вызывающие меньше воспаления
US20130217657A1 (en) 2011-12-21 2013-08-22 Insite Vision Incorporated Combination anti-inflammatory ophthalmic compositions
AU2013209452B2 (en) 2012-01-19 2015-11-05 The Johns Hopkins University Nanoparticle formulations with enhanced mucosal penetration
JP6138904B2 (ja) 2012-03-16 2017-05-31 ザ・ジョンズ・ホプキンス・ユニバーシティー 活性剤の送達のための非線状マルチブロックコポリマー薬物コンジュゲート
EP2825206A1 (en) 2012-03-16 2015-01-21 The Johns Hopkins University Controlled release formulations for the delivery of hif-1 inhibitors
US20140107025A1 (en) 2012-04-16 2014-04-17 Jade Therapeutics, Llc Ocular drug delivery system
KR102140989B1 (ko) 2012-05-03 2020-08-04 칼라 파마슈티컬스, 인크. 개선된 점막 수송을 나타내는 제약 나노입자
US9827191B2 (en) 2012-05-03 2017-11-28 The Johns Hopkins University Compositions and methods for ophthalmic and/or other applications
KR20150006869A (ko) 2012-05-03 2015-01-19 칼라 파마슈티컬스, 인크. 개선된 점막 수송을 나타내는 제약 나노입자
WO2013166408A1 (en) 2012-05-03 2013-11-07 Kala Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical nanoparticles showing improved mucosal transport
AU2013256008B2 (en) 2012-05-04 2016-02-25 The Johns Hopkins University Lipid-based drug carriers for rapid penetration through mucus linings
MX363147B (es) 2012-09-17 2019-03-11 Pfizer Inc Star Nanoparticulas terapeuticas que comprenden un agente terapeutico y metodos para realizarlas y usarlas.
US20150265541A1 (en) 2012-09-20 2015-09-24 Akina, Inc. Biodegradable Microcapsules Containing Filling Material
AU2014236455B2 (en) 2013-03-14 2018-07-12 Forsight Vision4, Inc. Systems for sustained intraocular delivery of low solubility compounds from a port delivery system implant
CA2908645A1 (en) 2013-04-01 2014-10-09 Allergan, Inc. Microsphere drug delivery system for sustained intraocular release

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4997652A (en) * 1987-12-22 1991-03-05 Visionex Biodegradable ocular implants
WO1992007866A1 (en) * 1990-11-01 1992-05-14 Board Of Regents, The University Of Texas System Anthracycline analogues bearing latent alkylating substituents
US5932462A (en) * 1995-01-10 1999-08-03 Shearwater Polymers, Inc. Multiarmed, monofunctional, polymer for coupling to molecules and surfaces
US5710135A (en) * 1995-06-27 1998-01-20 Pharmachemie B.V. Anthracycline prodrugs, method for preparation as well as their use in selective chemotherapy

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A. DONG, J. SHEN, M. ZENG, P. A. CAMPOCHIARO: "Vascular cell-adhesion molecule-1 plays a central role in the proangiogenic effects of oxidative stress", PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES, NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES, vol. 108, no. 35, 30 August 2011 (2011-08-30), pages 14614 - 14619, XP055060257, ISSN: 00278424, DOI: 10.1073/pnas.1012859108 *
FIEGEL, J. FU, J. HANES, J.: "Poly(ether-anhydride) dry powder aerosols for sustained drug delivery in the lungs", JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE, ELSEVIER, AMSTERDAM., NL, vol. 96, no. 3, 18 May 2004 (2004-05-18), NL, pages 411 - 423, XP004505675, ISSN: 0168-3659, DOI: 10.1016/j.jconrel.2004.02.018 *
Masayuki Yokoyama ET AL.: "CHARACTERIZATION AND ANTICANCER ACTIVITY OF THE MICELLE-FORMING POLYMERIC ANTICANCER DRUG ADRIAMYCIN-CONJUGATED POLYETHYLENE GLYCOL POLYASPARTIC ACID BLOCK COPOLYMER", 15 March 1990 (1990-03-15), pages 1693-1700, XP055060134, Retrieved from the Internet: URL:http://cancerres.aacrjournals.org/content/50/6/1693.full.pdf#page=1&view=FitH, [retrieved on 2013-04-18], abstract, figure 1 *
SUDHIR P. DEOSARKAR, MALGOR RAMIRO, FU JIE, KOHN LEONARD D., HANES JUSTIN, GOETZ DOUGLAS J.: "Polymeric particles conjugated with a ligand to VCAM-1 exhibit selective, avid, and focal adhesion to sites of atherosclerosis", BIOTECHNOLOGY AND BIOENGINEERING, WILEY �ETC.|, vol. 101, no. 2, 1 October 2008 (2008-10-01), pages 400 - 407, XP055060107, ISSN: 00063592, DOI: 10.1002/bit.21885 *
Takeshi Iwase et al.: "Safe and Effective Polymeric-Doxorubicin Conjugate Nanoparticles for Prolonged Antiangiogenic Activity in the Eye", 8 May 2012 (2012-05-08), XP002695866, Retrieved from the Internet: URL:http://www.abstractsonline.com/Plan/ViewAbstract.aspx?mID=2866&sKey=ebc9c74c-9d11-43d0-9d5c-060396c9ca9a&cKey=33638dc5-1717-4e08-8287-5344c389580c&mKey={F0FCE029-9BF8-4E7C-B48E-9FF7711D4A0E}, [retrieved on 2013-05-17], abstract *
TANG, B.C. ; FU, J. ; WATKINS, D.N. ; HANES, J.: "Enhanced efficacy of local etoposide delivery by poly(ether-anhydride) particles against small cell lung cancer in vivo", BIOMATERIALS., ELSEVIER SCIENCE PUBLISHERS BV., BARKING., GB, vol. 31, no. 2, 1 January 2010 (2010-01-01), GB, pages 339 - 344, XP026746005, ISSN: 0142-9612, DOI: 10.1016/j.biomaterials.2009.09.033 *

Also Published As

Publication number Publication date
JP5883539B2 (ja) 2016-03-15
US20130274217A1 (en) 2013-10-17
HK1206270A1 (en) 2016-01-08
US9950072B2 (en) 2018-04-24
CA2867381C (en) 2016-09-20
EA201491710A1 (ru) 2015-04-30
AU2013232297A1 (en) 2014-10-23
US20150141359A1 (en) 2015-05-21
WO2013138343A1 (en) 2013-09-19
CN104363924A (zh) 2015-02-18
CA2867381A1 (en) 2013-09-19
US8962577B2 (en) 2015-02-24
AU2013232297B2 (en) 2016-01-14
CN104363924B (zh) 2018-04-17
JP2015511987A (ja) 2015-04-23
EP2825206A1 (en) 2015-01-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA032552B1 (ru) Препараты с контролируемым высвобождением для доставки ингибиторов hif-1
US11660349B2 (en) Non-linear multiblock copolymer-drug conjugates for the delivery of active agents
AU2019202037B2 (en) Sunitinib formulations and methods for use thereof in treatment of ocular disorders
KR102520771B1 (ko) 전안방내 약물 전달 데포
US20180008718A1 (en) Compositions for the sustained release of anti-glaucoma agents to control intraocular pressure
US20190275001A1 (en) Sunitinib formulations and methods for use thereof in treatment of ocular disorders