EA029953B1 - Молекулы антител, которые связываются с il-17a и il-17f - Google Patents

Молекулы антител, которые связываются с il-17a и il-17f Download PDF

Info

Publication number
EA029953B1
EA029953B1 EA200900492A EA200900492A EA029953B1 EA 029953 B1 EA029953 B1 EA 029953B1 EA 200900492 A EA200900492 A EA 200900492A EA 200900492 A EA200900492 A EA 200900492A EA 029953 B1 EA029953 B1 EA 029953B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
antibody
seeg
sequence
human
bei
Prior art date
Application number
EA200900492A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200900492A1 (ru
Inventor
Ралф Адамс
Эндрью Джордж Попплуэлл
Стивен Эдуард Рейпки
Original Assignee
Юсб Фарма С.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Юсб Фарма С.А. filed Critical Юсб Фарма С.А.
Publication of EA200900492A1 publication Critical patent/EA200900492A1/ru
Publication of EA029953B1 publication Critical patent/EA029953B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/04—Drugs for disorders of the respiratory system for throat disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/244—Interleukins [IL]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)

Abstract

Описаны молекулы антител, обладающих специфичностью в отношении антигенных детерминант как IL-17A, так и IL-17F, терапевтические применения молекул антител и способы получения молекул антител.

Description

изобретение относится к молекулам антител, обладающим специфичностью в отношении антигенных детерминант как 1Ь-17А, так и 1Б-17Р. Настоящее изобретение относится также к терапевтическим применениям молекул антител и способам их получения.
Интерлейкин 17 (1Ь-17), известный также как СТЬА-8 или 1Ь-17А, представляет собой провоспалительный цитокин, который стимулирует секрецию широкого разнообразия других цитокинов из различных неиммунных клеток. 1Ь-17Л обладает способностью индуцировать секрецию 1Ь-6, 1Ь-8, РОЕ2, МСР1 и О-С8Р адгезивными клетками типа фибробластов, кератиноцитов, эпителиальных и эндотелиальных клеток и обладает также способностью индуцировать экспрессию 1САМ-1 на поверхности клеток, пролиферацию Т-клеток и рост и дифференцировку человеческих СБ34+-клеток-предшественников в нейтрофилы при совместном культивировании в присутствии облученных фибробластов (Ροδδίβζ и др., Ιπί. Кеу. Iттυηο1. 16, 1998, сс. 541-551). 1Б-17А продуцируется главным образом активированными Тклетками памяти и действует путем связывания с повсеместно распространенными рецепторами, находящимися на клеточной поверхности (1Ь-17К) (Уао и др., Су1окше, 9, 1997, сс. 794-800). Он может действовать также путем связывания с комплексом 1Ь-17КА и 1Ь-17КС (Тоу и др., ί. 1ттипо1. 177(11), 2006, сс. 36-39). 1Ь-17-продуцирующие Т-клетки, обозначенные как "ТН17-клетки", участвуют в патогенезе определенных типов рака (Аеауег и др., ГттипБу, 24, 2006, сс. 677-688; Бапдо\У5к1 и др., 442, 2006, сс. 461-465; Гуакига и Ыидате, 1. С1ш. ГпуеА 116, 5, 2006, сс. 1218-1222).
Идентифицирован ряд гомологов 1Ь-17, которые играют сходную или другую роль в регуляции воспалительных ответов. Обзор данных, касающихся семейств цитокинов/рецепторов 1Ь-17, представлен у Оитоп!, Ехрей Ορίη. ТБег. РаЮпК 13, 2003, сс. 287-303. Одним из таких гомологов является 1Ь-17Р, известный также как 1Ь-24 и МЬ-1, который идентичен 1Ь-17А примерно на 55% и, по-видимому, связывается с теми же рецепторами, что и 1Ь-17А (Ко1к и Ьшбеп, ГттипБу, 21, 2004, сс. 467-476; НутоуЩ и др., ЕМВО 1. 20(19), 2001, сс. 5332-5341; Кие81пег и др., 1оитпа1 о£ 1ттипо1оду, 179, 2007, сс. 5462-5473).
Как 1Ь-17А, так и 1Ь-17Р могут находиться как в форме гомодимерных, так и в форме гетеродимерных белков, которые все продуцируются активированными человеческими СБ4+-Т-клетками (АпдБ1 и др., 1. Бю1. СБет. 282 (18), 2007, сс. 13447-13455).
ГБ-17 может принимать участие в целом ряде заболеваний, опосредуемых аномальными иммунными ответами, таких как ревматоидный артрит и воспаление дыхательных путей, а также отторжение трансплантата органа и противоопухолевый иммунитет. Ингибиторы активности ГЬ-17 хорошо известны в данной области, например, слитый белок мышиный 1Ь-17К:человеческий Рс, мышиный растворимый 1Ь-17К и моноклональное антитело к 1Ь-17 применяли для демонстрации роли 1Ь-17 на различных моделях ревматоидного артрита (ЬиЬЬег15 и др., 1. 1ттипо1. 167, 2001, сс. 1004-1013; СБаБаиб и др., АбБпШ Ке8., 3, 2001, сс. 168-177). Кроме того, нейтрализующие поликлональные антитела применяли для снижения перитонеального спайкообразования (СБипд и др., ί. Ехр. Меб., 195, 2002, сс. 1471-1478). Выведенные из крыс антитела к человеческому ГЬ-17 описаны в АО 04/106377. Гуманизированное антитело к 1Ь-17, аффинность которого характеризуется значением, составляющим примерно 220 пМ, описано в АО 2006/054059. Моноклональное полностью человечье антитело к 1Ь-17, аффинность которого характеризуется значением, составляющим примерно 188 пМ, описано в АО 2006/013107. Антитела, связывающиеся с 1Ь-17Р и гетеродимерами 1Ь-17А/1Р-17Р, описаны в АО 2006/088833. Антитела, которые специфически связываются с гетеродимером 1Ь-17А/1Р-17Р, описаны в АО 2005/010044.
Антагонистическое действие в отношении 1Ь-17Р ассоциировано с защитой от астмы (КауадисЫ и др., 1. А11егду СБп. 1ттипо1. 117(4), 2006, сс. 795-801), и 1Б-17Р, вероятно, играет роль в патологии артрита (ЬиЬЬегК Сштеп! Оршюп щ 1пуе8ЙдаБопа1 Ότυ§8, 4(5), 2003, сс. 572-577).
Таким образом, антагонисты 1Б-17А и 1Б-17Р двойного действия могут быть более эффективными, чем антагонист однонаправленного действия, при лечении опосредуемых 1Б-17 заболеваний. Антитела, которые связываются с Ι6-17Λ и 1Б-17Р, описаны в АО 2007/106769, опубликованной 20 сентября 2007 г.
При создании изобретения удалось продемонстрировать, что можно выделять антитело, которое обладает способностью связываться и с 1Ь-17А, и с 1Б-17Р и обладает нейтрализующей активностью в отношении обеих изоформ 1Б-17. Таким образом, в настоящем изобретении предложено антитело к ГЬ17, которое обладает способностью связываться как с 1Ь-17А, так и с 1Б-17Р. В частности, антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, обладает способностью специфически связываться как с 1Ь-17А, так и с 1Ь-17Р, т.е. антитело не связывается с другими изоформами 1Б-17. Предпочтительно антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, связывается также с гетеродимером 1Р-17А/1Р-17Р. Предпочтительно антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, нейтрализует активность и 1Ь-17А, и 1Б-17Р. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, нейтрализует также активность гетеродимера 1Р-17А/1Р-17Р. Таким образом, антитела, предлагаемые в настоящем изобретении, обладают ценным свойством, поскольку они могут ингибировать биологическую активность и 1Ь-17А, и 1Б-17Р. Так, настоящее изобретение относится также к применению указанных антител для лечения и/или профилактики заболевания, опосредуемого либо одним, либо обоими Ι6-17Λ и 1Ь-17Р, таких как аутоиммунное или воспалительное заболевание или рак.
В контексте настоящего описания понятие "нейтрализующее антитело" означает антитело, которое обладает способностью нейтрализовать связанную с передачей сигнала биологическую активность и 1Ь- 1 029953
17А, и 1Ь17Р, например, путем блокады связывания 1Ь-17А и 1Ь17Р с одним или несколькими их рецепторами и путем блокады связывания гетеродимера 1Ь-17А/1Р-17Р с одним или несколькими его рецепторами. Должно быть очевидно, что понятие «нейтрализующее» в контексте настоящего описания относится к снижению связанной с передачей сигнала биологической активности, которое может быть частичным или полным. Кроме того, должно быть очевидно, что степень нейтрализации активности 1Ь-17А и 1Ь-17Р антителом может быть одинаковой или различной. В одном из вариантов осуществления изобретения степень нейтрализации активности гетеродимера 1Р-17А/1Ь-17Р может быть такой же или отличаться от степени нейтрализации активности 1Ь-17А или 1Ь-17Р.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитела, предлагаемые в настоящем изобретении, специфически связываются с 1Ь-17А и 1Ь-17Р. Понятие "специфически связываются" означает, что антитела обладают более высокой аффинностью в отношении полипептидов 1Ь-17А и 1Ь-17Р (включая гетеродимер 1Р-17АДР-17Р), чем в отношении других полипептидов. Предпочтительно полипептиды 1Ь17А и 1Ь-17Р являются человеческими. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело связывается также с 1Ь-17Р макака-крабоеда.
Полипептиды 1Ь-17А или 1Ь-17Р или смесь их обоих, или клетки, экспрессирующие один из указанных полипептидов, или оба, можно применять для получения антител, которые специфически распознают оба полипептида. Полипептиды 1Ь-17 (1Ь-17А и 1Ь-17Р) могут представлять собой "зрелые" полипептиды или их биологически активные фрагменты или производные, которые предпочтительно включают сайт связывания рецептора. Предпочтительно полипептиды 1Ь-17 представляют собой зрелые полипептиды. Полипептиды 1Ь-17 можно получать с помощью процессов, хорошо известных в данной области, из созданных с помощью генной инженерии клеток-хозяев, содержащих экспрессионные системы, или их можно выделять из встречающихся в естественных условиях биологических источников. В контексте настоящего описания понятие "полипептиды" включает пептиды, полипептиды и белки. Если специально не указано иное, то их применяют взаимозаменяемо. Полипептид 1Ь-17 может в некоторых случаях являться частью более крупного белка, такого как слитый белок, например слитый с аффинной меткой белок. Антитела к указанным полипептидам можно получать, если для этого необходима иммунизация животного, путем введения полипептидов в животное, предпочтительно в животное, кроме человека, используя хорошо известные общепринятые протоколы (см., например, НапйЬоок оГ Ехрет1теп1а1 1ттипо1оду, под ред. Ό.Μ. ХУет т. 4, изд-во В1аск\уе11 БаепйПс РиЬЬзЬегз, ОхГогй, Епд1апй, 1986). Можно иммунизировать различных теплокровных животных, таких как кролики, мыши, крысы, овцы, коровы или свиньи. Однако наиболее предпочтительными являются мыши, кролики, свиньи и крысы.
Антитела, предназначенные для применения согласно настоящему изобретению, включают полные антитела и их функционально активные фрагменты или производные и могут представлять собой (но не ограничиваясь только ими) моноклональные, мультивалентые, мультиспецифические, гуманизированные или химерные антитела, домены антител, например УН, УЬ, УНН, одноцепочечные антитела, РаЬфрагменты, РаЬ'- и Р(аЬ')2-фрагменты и эпитопсвязывающие фрагменты любой из указанных выше конструкций. Другие фрагменты антител включают фрагменты, описанные в международных заявках на патент \УО 2005/003169, \УО 2005/003170 и \УО 2005/003171. Фрагменты антител и методы их получения хорошо известны в данной области (см., например, Уегта и др., 1оитиа1 оГ 1ттипо1одюа1 МеШойз, 216, 1998, сс. 165-181; Айац и Ьа^зоп, ТЬегареийс апйЬоФез. Эгид Эе51дп Ке\ае\У5 - ОпПпе 2(3), 2005, сс. 209-217).
Антитела, предназначенные для применения согласно настоящему изобретению, включают молекулы иммуноглобулинов и иммунологически активные участки молекул иммуноглобулинов, т. е. молекул, которые содержат антигенсвязывающий центр, который специфически связывается с антигеном. Молекулы иммуноглобулинов, предлагаемые в изобретении, могут относиться к любому классу (например, 1дО, 1дЕ, 1дМ, 1дЭ и 1дА) или подклассу молекул иммуноглобулинов.
Моноклональные антитела можно получать с помощью любого метода, известного в данной области, такого как метод гибридом (КоЫет и МЙ51еш, Ыа1ите, 256, 1975, сс. 495-497), метод триом, метод гибридом человеческих В-клеток (Ко/Ьог и др., 1ттипо1оду Тойау, 4, 1983, с.72) и метод ЕВУ-гибридом (Со1е и др., Мопос1опа1 АпЬЬоФез апй Сапсег ТЬегару, изд-во А1ап К Ызз, 1пс., 1985, сс. 77-96).
Антитела, предназначенные для применения согласно настоящему изобретению, можно создавать с помощью методов, основанных на использовании антител индивидуальных лимфоцитов путем клонирования и экспрессии кДНК вариабельных областей иммуноглобулинов, которые вырабатываются индивидуальными лимфоцитами, отобранными по признаку производства специфических антител, например, с помощью методов, описанных у ВаЬсоок, 1. и др., Ргос. ЫаЙ. Асай. 8ск И8А 93(15), 1996, сс.7843-78481; \УО 92/02551; \УО 2004/051268 и международной заявке на патент \УО 2004/106377.
Гуманизированные антитела представляют собой молекулы антител из видов кроме человека, которые имеют один или несколько гипервариабельных участков (СОК) из видов кроме человека и каркасный участок из молекулы человеческого иммуноглобулина (см., например, ИБ 5585089; \УО 91/09967).
Химерные антитела представляют собой такие антитела, кодируемые генами иммуноглобулина, которые созданы с помощью генной инженерии таким образом, что гены легкой и тяжелой цепи состоят из сегментов генов иммуноглобулинов, принадлежащих к разным видам. Эти химерные антитела, вероятно,
- 2 029953
являются менее антигенными. Бивалентные антитела можно получать методами, известными в данной области (Μίΐδΐβίη и др., Ыа1иге 305, 1983, сс. 537-539; №0 93/08829, Тгаипескег и др., ЕМВО, 1. 10, 1991, сс. 3655-3659). Мультивалентные антитела могут обладать несколькими специфичностями или могут быть моноспецифическими (см., например, №0 92/22853 и №0 05/113605).
Антитела, предназначенные для применения согласно настоящему изобретению, можно создавать также с помощью различных методов фаговой презентации, и они включают описанные у Вппктап и др., 1. 1ттипо1. Ме1йоЙ8, 182, 1995, сс. 41-50), А тех и др., 1. 1ттипо1. Ме1йоЙ8, 184, 1995, сс.177-186), КеШеЬогоидй и др., Еиг. 1. 1ттипо1., 24, 1994, сс. 952-958), Регас и др., Оепе, 187, 1997, сс. 9-18), Вийоп и др., ААзпсех ш 1ттипо1о§у, 57, 1994, сс. 191-280) и в №0 90/02809; №0 91/10737; №0 92/01047; №0 92/18619; №0 93/11236; №0 95/15982; №0 95/20401 и ИЗ 5698426; 5223409; 5403484; 5580717; 5427908; 5750753; 5821047; 5571698; 5427908; 5516637; 5780225; 5658727; 5733743 и 5969108. Методы получения одноцепочечных антител, например, описанные в ИЗ 4946778, можно адаптировать для получения одноцепочечных антител, которые связываются с 1Ь-17Л и 1Ь-17Р. Кроме того, для экспрессии гуманизированных антител можно использовать трансгенных мышей или другие организмы, включая другие виды млекопитающих.
Остатки варибельных областей антитела, как правило, нумеруют согласно номенклатуре Кэбота и др. Эта номенклатура описана у КаЬа! и др., 1987 в Зесщепсех оГ Рго1ет8 оГ 1ттипо1одюа1 1п1еге81, изд-во ИЗ ЭераПтеЩ оГ НеаИЬ апй Нитап Зегуюех, ΝΙΗ, ИЗЛ (далее Кэбот и др., выше). В настоящем описании использовали указанную систему нумерации, если специально не указано иное.
Нумерация остатков по Кэботу не всегда соответствует непосредственно линейной нумерации аминокислотных остатков. Фактическая линейная аминокислотная последовательность может содержать меньше аминокислот или дополнительные аминокислоты, по сравнению с точной нумерацией по Кэботу, что соответствует укорочению структурного компонента или встраиванию в структурный компонент, представляющий собой либо каркасный, либо гипервариабельный участок (СЭР) основной структуры вариабельной области. Правильную нумерацию по Кэботу остатков можно определять для данного антитела путем сравнительного анализа гомологии остатков в последовательности антитела и "стандартной", пронумерованной по Кэботу последовательности.
СЭР вариабельной области тяжелой цепи локализованы на остатках 31-35 (СЭР-Н1), остатках 5065 (СЭР-Н2) и остатках 95-102 (СЭР-Н3) согласно номенклатуре Кэбота. Однако согласно номенклатуре СНоОиа (СНоОиа С. и Бехк А.М. 1. Мо1. Вю1., 196, 1987, сс. 901-917), петля, эквивалентная СЭР-Н1, простирается от остатка 26 до остатка 32. Таким образом, в контексте настоящего описания "СЭР-Н1" содержит остатки 26-35, что соответствует комбинации номенклатуры Кэбота и определения по СНоОиа на основе топологии петли.
СГОР вариабельной области легкой цепи локализованы на остатках 24-34 (СЭР-Б1). остатках 50-56 (СГОР-Е2) и остатках 89-97 (СЭР-Б3) согласно номенклатуре Кэбота.
Одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является нейтрализующее антитело, обладающее специфичностью в отношении человеческого 1Ь-17А и человеческого 1Ь-17Р, которое содержит тяжелую цепь, где вариабельная область тяжелой цепи содержит по меньшей мере один СЭР, соответствующая СГОР-Н1 последовательность которого представлена в ЗЕО ГО N0:1, СЭР, соответствующая СГОР-Н2 последовательность которого представлена в ЗЕО ГО N0:2, и СЭР, соответствующая СГОР-Н3 последовательность которого представлена в ЗЕО ГО N0:3.
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является нейтрализующее антитело, обладающее специфичностью в отношении человеческого ГО-17А и человеческого ГО-17Р, которое содержит тяжелую цепь, где вариабельная область тяжелой цепи содержит по меньшей мере два из СЭР-Н1, СЭР-Н2 и СГОР-Н3 вариабельной области тяжелой цепи, которые выбраны из следующих последовательностей: последовательность, представленная в ЗЕО ГО N0:1, которая соответствует СЭР-Н1, последовательность, представленная в ЗЕО ГО N0:2, которая соответствует СЭР-Н2, и последовательность, представленная в ЗЕО ГО N0:3, которая соответствует СЭР-Н3. Например, антитело может содержать тяжелую цепь, в которой СЭР-Н1 имеет последовательность, представленную в ЗЕО ГО N0:1, а СГОР-Н2 имеет последовательность, представленную в ЗЕО ГО N0:2. В альтернативном варианте антитело может содержать тяжелую цепь, в которой СЭР-Н1 имеет последовательность, представленную в ЗЕО ГО N0:1, а СГОР-Н3 имеет последовательность, представленную в ЗЕО ГО N0:3, или антитело может содержать тяжелую цепь, в которой СЭР-Н2 имеет последовательность, представленную в ЗЕО ГО N0:2, а СГОР-Н3 имеет последовательность, представленную в ЗЕО ГО N0:3. Для того чтобы избежать двусмысленности, следует отметить, что при этом включены все перестановки.
Одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является нейтрализующее антитело, обладающее специфичностью в отношении человеческого ГО-17А и человеческого ГО-17Р, которое содержит тяжелую цепь, где вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность, представленную в ЗЕО ГО N0:1, которая соответствует СЭР-Н1, последовательность, представленную в ЗЕО ГО N0:2, которая соответствует СЭР-Н2, и последовательность, представленную в ЗЕО ГО N0:3, которая соответствует СГОР-Н3.
Одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является нейтрализующее антитело,
- 3 029953
обладающее специфичностью в отношении человеческого ГО-17А и человеческого ГО-17Р, которое содержит легкую цепь, где вариабельная область легкой цепи содержит по меньшей мере один СГОК, соответствующая СОК-Ь1 последовательность которого представлена в 8ЕС ГО N0:4, СОК. соответствующая СГОР-Е2 последовательность которого представлена в 8ЕС ГО N0:5, и СОК, соответствующая СГОКЬ3 последовательность которого представлена в 8ЕС ГО N0:6.
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является нейтрализующее антитело, обладающее специфичностью в отношении человеческого ГО-17Л и человеческого ГО-17Р, которое содержит легкую цепь, где вариабельная область легкой цепи содержит по меньшей мере два из СОК-Ы, СГОК-Е2 и С0К-Ь3 вариабельной области легкой цепи, которые выбраны из следующих последовательностей: последовательность, представленная в 8ЕС ГО N0:4, которая соответствует СОК-Ы, последовательность, представленная в 8ЕС ГО N0:5, которая соответствует СОК-Ь2, и последовательность, представленная в 8ЕС ГО N0:6, которая соответствует С0К-Ь3. Например, антитело может содержать легкую цепь, в которой С0К-Ы имеет последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:4, а С0К-Е2 имеет последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:5. В альтернативном варианте антитело может содержать легкую цепь, в которой С0К-Ы имеет последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:4, а С0К-Ь3 имеет последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:6, или антитело может содержать легкую цепь, в которой СГОК-БТ имеет последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:5, а С0К-Ь3 имеет последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:6. Для того чтобы избежать двусмысленности, следует отметить, что при этом включены все перестановки.
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является нейтрализующее антитело, обладающее специфичностью в отношении человеческого ГО-17Л и человеческого ГО-17Р, которое содержит легкую цепь, где вариабельная область легкой цепи содержит последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:4, которая соответствует СОК-Ы, последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:5, которая соответствует СОК-Ь2, и последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:6, которая соответствует СОК-Ь3.
Молекулы антител, предлагаемые в настоящем изобретении, предпочтительно содержат комплементарную легкую цепь или комплементарную тяжелую цепь соответственно.
Таким образом, согласно одному из вариантов осуществления изобретения антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, содержит тяжелую цепь, где вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:1, которая соответствует С0К-Н1, последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:2, которая соответствует С0К-Н2, и последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:3, которая соответствует С0К-Н3, и легкую цепь, где вариабельая область легкой цепи содержит последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:4, которая соответствует СОК-Ы, последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:5, которая соответствует СОК-Ь2, и последовательность, представленную в 8ЕС ГО N0:6, которая соответствует С0К-Е3.
Должно быть очевидно, что можно осуществлять одну или несколько аминокислотных замен в СОК, предлагаемых в настоящем изобретении, без существенного изменения способности антитела связываться с ГО-17Л и ГО-17Р и нейтрализовать активность ГО-17Л и ГО-17Р. Специалист в данной области легко может оценить воздействие любых аминокислотных замен на связывание и нейтрализацию, например, с помощью, методов, представленных в настоящем описании. Таким образом, настоящее изобретение относится к антителу, которое содержит один или несколько СОК, выбранных из СОКН-1 (8ЕС ГО N0:1), СОКН-2 (8Е0 ГО N0:2), СОКН-3 (8Е0 ГО N0:3), СОКЬ-1 (8Е0 ГО N0:4), СОКЬ-2 (8Е0 ГО N0:5) и СОКЬ-3 (8ЕС ГО N0:6), в котором одна или несколько аминокислот в одном или нескольких СОК заменена другой аминокислотой. Также должно быть очевидно, что длину одного или нескольких СОК можно изменять без существенного изменения способности антитела связываться с ГО-17А и ГО-17Р и нейтрализовать активность ГО-17А и ГО-17Р.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, содержит тяжелую цепь, где вариабельная область тяжелой цепи содержит три СОК, при этом последовательность СОКН-1 идентична или подобна по меньшей мере на 60% последовательности, представленной в 8ЕС ГО N0:1, последовательность СОКН-2 идентична или подобна по меньшей мере на 60% последовательности, представленной в 8ЕС ГО N0:2, и/или последовательность СОКН-3 идентична или подобна по меньшей мере на 60% последовательности, представленной в 8ЕС ГО N0:3. В другом варианте осуществления изобретения антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, содержит тяжелую цепь, где вариабельная область тяжелой цепи содержит три СОК, при этом последовательность СОКН-1 идентична или подобна по меньшей мере на 70, 80, 90, 95 или 98% последовательности, представленной в 8ЕС ГО N0:1, последовательность СОКН-2 идентична или подобна по меньшей мере на 70, 80, 90, 95 или 98% последовательности, представленной в 8ЕС ГО N0:2, и/или последовательность СОКН-3 идентична или подобна по меньшей мере на 70, 80, 90, 95 или 98% последовательности, представленной в 8ЕС ГО N0:3.
В контексте настоящего описания понятие "идентичность" означает, что в любом конкретном положении линеаризованных последовательностей находится аминокислотный остаток, идентичный для обеих последовательностей. В контексте настоящего описания понятие "подобие" означает, что в любом
- 4 029953
конкретном положении линеаризованных последовательностей в обеих последовательностях находится аминокислотный остаток подобного типа. Например, лейцин можно заменять изолейцином или валином. Другие аминокислоты, которые часто замещают друг другом, включают (но не ограничиваясь только ими) фенилаланин, тирозин и триптофан (аминокислоты с ароматическими боковыми цепями); лизин, аргинин и гистидин (аминокислоты с основными боковыми цепями); аспартат и глутамат (аминокислоты с кислотными боковыми цепями); аспарагин и глутамин (аминокислоты, несущие амид в боковой цепи); и цистеин и метионин (аминокислоты с содержащими серу боковыми цепями).
Степень идентичности и подобия можно легко рассчитывать (СотрШа0опа1 Мо1еси1аг Вю1оду, под ред. Ьекк А.М., изд-во 0хГогб ишуегейу Рте88, №\ν Уотк, 1988; Вюсотрибпд. 1пГогта1к8 апб Сепоте Рго)есК под ред. ЗтИй Ό.^., изд-во Асабетк Рге88, №\ν Уотк, 1993; Сотри1ет Апа1у818 оГ Зесщепсе Оа1а, ч. 1, под ред. СтбГш А.М. и Огбйп Н.С., изд-во Нитапа Рге88, Ыете 1ет8еу, 1994; Зесщепсе АпаЕъК ш Мо1еси1аг Вк1оду, под ред. Ненце С., изд-во Асабетк Рте88, 1987; и Зедиепсе Апа1у818 Рптег, под ред. СпЬ8коу М. и Эеуегеих 1., изд-во М З1оск1оп Рте88, №\ν Уотк, 1991).
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, содержит легкую цепь, где вариабельная область легкой цепи содержит три СОК, при этом последовательность СОКЬ-1 идентична или подобна по меньшей мере на 60% последовательности, представленной в ЗЕО ГО N0:4, последовательность СОКЬ-2 идентична или подобна по меньшей мере на 60% последовательности, представленной в ЗЕО ГО N0:5, и/или последовательность СОКЬ-3 идентична или подобна по меньшей мере на 60% последовательности, представленной в ЗЕО ГО N0:6. В другом варианте осуществления изобретения антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, содержит легкую цепь, где вариабельная область легкой цепи содержит три СОК, при этом последовательность СОКЬ-1 идентична или подобна по меньшей мере на 70, 80, 90, 95 или 98% последовательности, представленной в ЗЕО ГО N0:4, последовательность СОКЬ-2 идентична или подобна по меньшей мере на 70, 80, 90, 95 или 98% последовательности, представленной в ЗЕО ГО N0:5, и/или последовательность СОКЬ-3 идентична или подобна по меньшей мере на 70, 80, 90, 95 или 98% последовательности, представленной в ЗЕО ГО N0:6.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, представляет собой моноклональное антитело.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, представляет собой химерное антитело.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, представляет собой молекулу антитела с трансплантированными СОК, которая содержит один или несколько СОК, последовательности которых представлены в ЗЕО ГО N0:1-6. В контексте настоящего описания понятие "молекула антитела с трансплантированными СОК" относится к молекуле антитела, в котором тяжелая и/или легкая цепь содержит один или несколько СОК (включая при необходимости один или несколько модифицированных СОК) из донорского антитела (например, мышиного моноклонального антитела), трансплантированного в каркасный участок вариабельной области тяжелой и/или легкой цепи акцепторного антитела (например, человеческого антитела) (см. обзор Уаидйап и др., №Лиге Вю1есйпо1оду, 16, 1998, сс. 535-539). В одном из вариантов осуществления изобретения в каркасный участок человеческого антитела чаще, чем полный СОК, трансплантируют только один или несколько определяющих специфичность остатков из любого одного из СОК, представленных выше в настоящем описании (см., например, КаНншп и др., Ме1йоб8, 36, 2005, сс. 25-34). В одном из вариантов осуществления изобретения в каркасный участок человеческого антитела переносят только определяющие специфичность остатки из одного или нескольких СОК, представленных выше в настоящем описании. В другом варианте осуществления изобретения в каркасный участок человеческого антитела переносят только определяющие специфичность остатки из каждого из СОК, представленного выше в настоящем описании.
Когда осуществляют трансплантацию СОК или определяющих специфичность остатков, то можно применять любую приемлемую акцепторную последовательность каркасного участка вариабельной области вне зависимости от класса/типа донорского антитела, из которого СОК выведены, включая каркасные участки мышей, приматов и человека. Предпочтительно антитело с трансплантированными СОК, предлагаемое в настоящем изобретении, имеет вариабельную область, которая содержит человеческие акцепторные каркасные участки, а также один или несколько описанных выше СОК или определяющих специфичность участков. Таким образом, одним из вариантов осуществления изобретения является нейтрализующее антитело с трансплантированными СОК, в котором вариабельная область содержит человеческие акцепторные каркасные участки и нечеловеческие донорские СОК.
Примерами человеческих каркасных участков, которые можно применять согласно настоящему изобретению являются К0Ь, ЯЕ^М, КЕ1, ЕЙ, ТиК, ТЕ1, ЬАУ и РОМ (Кэбот и др., выше). Например, К0Ь и УЕ\УМ можно применять для тяжелой цепи, КЕ1 можно применять для легкой цепи, а ЕЙ, ЬАУ и РОМ можно применять как для тяжелой, так и для легкой цепи. В другом варианте можно применять последовательности человеческой зародышевой линии; они доступны на сайте ЬИр://уЬа8е.ттссре.сат.ас.ик/
В случае антитела с трансплантированными СОК, предлагаемого в настоящем изобретении, акцеп- 5 029953
торные тяжелые и легкие цепи не обязательно должны быть получены из одного и того же антитела, а могут при необходимости содержать гибридные цепи, имеющие каркасные участки из различных цепей.
Предпочтительный каркасный участок для тяжелой цепи антитела с трансплантированными СЭК. предлагаемого в настоящем изобретении. выводят из последовательности 1-3 3-07 человеческой подгруппы УН3 в сочетании с 1Н4. Таким образом. изобретение относится к нейтрализующему антителу с трансплантированными СОК. содержащему по меньшей мере один нечеловеческий донорский СОК. в котором каркасный участок тяжелой цепи выводят из последовательности 1-3 3-07 человеческой подгруппы УН3 в сочетании с 1Н4. Последовательность человеческого 1Н4 представляет собой (ΥΡΌΥ)ΑθρθΤΕντνδδ. Мотив ΥΕΌΥ является частью СЭК-Н3 и не является частью каркасного участка 4 (Кауе1сЬ IV. и др.. Се11.. 27. 1981. сс. 583-591).
Предпочтительный каркасный участок для легкой цепи антитела с трансплантированными СОК. предлагаемого в настоящем изобретении. выводят из последовательности 2-1-(1) Ь4 человеческой зародышевой линии подгруппы νΚ1 в сочетании с Ж1. Таким образом. изобретение относится к нейтрализующему антителу с трансплантированными СОК. содержащему по меньшей мере один нечеловеческий донорский СОК. в котором каркасный участок легкой цепи выводят из последовательности человеческой подгруппы νΚ1 2-1-(1) Ь4 в сочетании с ЖТ. Последовательность Ж1 представляет собой (АТ)ЕСОСТКМЕЖ Мотив АТ является частью СОК-Ь3 и не является частью каркасного участка 4 (Н1е1ег Р.А. и др.. 1. ΒίοΙ. СЬет.. 257. 1982. сс.1516-1522).
Кроме того. не является обязательным. чтобы в антителе с трансплантированными СОК. предлагаемом в изобретении. каркасные участки имели точно такую же последовательность. что и в акцепторном антителе. Например. наиболее часто встречающиеся остатки можно заменять на более редкие для конкретного класса или типа акцепторной цепи. В другом варианте отобранные остатки в акцепторных каркасных участках можно заменять так. чтобы они соответствовали остатку. обнаруженному в этом же положении в донорском антителе (см. КеюЬтаии и др.. Ыа1иге. 332. 1998. сс. 323-324). Указанные изменения должны быть минимально необходимыми для проявления аффинности донорского антитела. Протокол выбора остатков в акцепторных каркасных участках. которые можно изменять. изложен в АО 91/09967.
Предпочтительно в молекуле антитела с трансплантированными СОК. предлагаемой в настоящем изобретении. если акцепторные тяжелые цепи имеют последовательность 1-3 3-07 человеческой подгруппы νΉ3 в сочетании с 1Н4. оба акцепторных каркасных участка тяжелой цепи содержат помимо одного или нескольких донорских СОК донорский остаток. по меньшей мере. в положении 94 (согласно Кэботу и др. (выше)). Таким образом. в изобретении предложено антитело с трансплантированными СОК. в котором. по меньшей мере. остаток в положении 94 вариабельной области тяжелой цепи представляет собой донорский участок.
Предпочтительно в молекуле антитела с трансплантированными СОК. предлагаемой в настоящем изобретении. если акцепторные легкие цепи имеют последовательность 2-1-(1) Ь4 человеческой подгруппы νΚ1 в сочетании с Ж1. то не осуществляют перенос никаких донорских остатков. т.е. переносят только СОК. Таким образом. в изобретении предложено антитело с трансплантированными СОК. в донорский каркасный участок которого перенесены только СОК.
Донорские остатки представляют собой остатки из донорского антитела. т.е. антитела. из которого первоначально получены СОК.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело. предлагаемое в настоящем изобретении. содержит тяжелую цепь. где вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность. представленную в δΕΟ ΙΌ N0:9 (§Н9).
В другом варианте осуществления изобретения антитело. предлагаемое в настоящем изобретении. содержит тяжелую цепь. где вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность. которая по меньшей мере на 60% идентична или подобна последовательности. представленной в δΕΟ ΙΌ N0:9. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело. предлагаемое в настоящем изобретении. содержит тяжелую цепь. где вариабельная область тяжелой цепи содержат последовательность. которая по меньшей мере на 70. 80. 90. 95 или 98% идентична или подобна последовательности. представленной в δΕΟ ΙΌ N0:9.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело. предлагаемое в настоящем изобретении. содержит легкую цепь. где вариабельная область легкой цепи содержат последовательность. представленную в δΕΟ ΙΌ N0:7 (§Ь7).
В другом варианте осуществления изобретения антитело. предлагаемое в настоящем изобретении. содержит легкую цепь. где вариабельная область легкой цепи содержит последовательность. которая по меньшей мере на 60% идентична или подобна последовательности. представленной в δΕΟ ΙΌ N0:7. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело. предлагаемое в настоящем изобретении. содержит легкую цепь. где вариабельная область легкой цепи содержат последовательность. которая по меньшей мере на 70. 80. 90. 95 или 98% идентична или подобна последовательности. представленной в δΕΟ ΙΌ N0:7.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело. предлагаемое в настоящем изобрете- 6 029953
нии, содержит тяжелую цепь, где вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность, представленную в 8ЕО ГО N0:9, и легкую цепь, где вариабельная область легкой цепи содержит последовательность, представленную в 8Е0 ГО N0:7.
В другом варианте осуществления изобретения антитело содержит тяжелую цепь и легкую цепь, где вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность, которая по меньшей мере на 60% идентична или подобна последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:9, и вариабельная область легкой цепи содержит последовательность, которая по меньшей мере на 60% идентична или подобна последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:7. Предпочтительно антитело содержит тяжелую цепь, где вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность, которая по меньшей мере на 70, 80, 90, 95 или 98% идентична или подобна последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:9, и легкую цепь, где вариабельная область легкой цепи содержит последовательность, которая по меньшей мере на 70, 80, 90, 95 или 98% идентична или подобна последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:7.
Как указано выше, молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, представляет собой молекулу полного антитела, имеющего полноразмерные тяжелые и легкие цепи, или его фрагмент, такой как домен антитела, например УН, УЬ, УНН, РаЬ-фрагмент, модифицированный РаЬ-фрагмент, РаЬ'-, Р(аЬ')2-, Ρν- или 8сРу-фрагмент.
Домены константных областей молекулы антитела, предлагаемой в изобретении, если они присутствуют, можно выбирать, принимая во внимание предполагаемую функцию молекулы антитела, и прежде всего эффекторные функции, которые могут требоваться. Например, домены константных областей могут представлять собой домены человеческого 1дА, Ι§Ό, 1дЕ, 1д0 или 1дМ. В частности, можно применять домены константных областей человеческого 1д0, прежде всего изотипов 1д01 и 1д03, когда молекула антитела предназначена для терапевтических применений и требуются эффекторные функции антитела. В другом варианте можно применять изотипы 1д02 и 1д04, когда молекула антитела предназначена для терапевтических применений, но при этом не требуются эффекторные функции антитела, например, предназначена только для блокады активности ГО-17А. Например, можно применять молекулы 1д04, в которых серин в положении 241 заменен на пролин, которые описаны у Апда1 и др., Мо1еси1аг 1ттипо1оду, 30 (1), 1993, сс. 105-108. Наиболее предпочтительным является домен константной области 1дО4, несущий такую замену.
В одном из вариантов осуществления изобретения тяжелая цепь антитела содержит СН1-домен и легкая цепь антитела содержат СЬ-домен либо каппа-, либо лямбда-цепи.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, представляет собой нейтрализующее антитело, обладающее специфичностью в отношении человеческого ГО-17А и человеческого ГО-17Р, в котором константная область тяжелой цепи содержит константную область человеческого 1дО4, в которой серин в положении 241 заменен на пролин, описанную у Апда1 и др. выше. Таким образом, в настоящем изобретении предложено антитело, в котором тяжелая цепь содержит или состоит из последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:15.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит тяжелую цепь, где тяжелая цепь содержит последовательность, которая по меньшей мере на 60% идентична или подобна последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:15. Предпочтительно антитело содержит тяжелую цепь, где тяжелая цепь содержит последовательность, которая по меньшей мере на 70, 80, 90, 95 или 98% идентична или подобна последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:15.
В одном из вариантов осуществления изобретения молекула антитела, предлагаемого в настоящем изобретении, содержит легкую цепь, которая содержит последовательность, представленную в 8Е0 ГО N0:11.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит легкую цепь, где легкая цепь содержит последовательность, которая по меньшей мере на 60% идентична или подобна последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:11. Предпочтительно антитело содержит легкую цепь, где легкая цепь содержит последовательность, которая по меньшей мере на 70, 80, 90, 95 или 98% идентична или подобна последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:11.
Одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является антитело, в котором тяжелая цепь содержит или состоит из последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:15, а легкая цепь содержит или состоит из последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:11.
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело содержит тяжелую цепь и легкую цепь, где тяжелая цепь содержит последовательность которая по меньшей мере на 60% идентична или подобна последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:15, и легкая цепь содержит последовательность, которая по меньшей мере на 60% идентична или подобна последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:11. Предпочтительно антитело содержит тяжелую цепь, где тяжелая цепь содержит последовательность, которая по меньшей мере на 70, 80, 90, 95 или 98% идентична или подобна последовательности, представленной в 8Е0 ГО N0:15, и легкую цепь, где легкая цепь содержит последовательность, которая по меньшей мере на 70, 80, 90, 95 или 98% идентична или подобна последовательности, представленной в 8ЕО ГО N0:11.
- 7 029953
Настоящее изобретение относится также к специфической области или эпитопу человеческого 1Ь17А и/или специфической области или эпитопу человеческого 1Ь-17Р и/или специфической области или эпитопу человеческого гетородимера 1Ь-17А/Р, которая/который связывается антителом, предлагаемым в настоящем изобретении, в частности антителом, которое содержит последовательность тяжелой цепи дН9 (5>Еф ГО N0:9) и/или последовательность легкой цепи §Ь7 (8Еф ГО N0:7).
Специфическую область или эпитоп человеческого ГО-17А и/или специфическую область или эпитоп человеческого ГО-17Р и/или специфическую область или эпитоп человеческого гетородимера 1Ь17А/Р можно идентифицировать с помощью любого пригодного метода картирования эпитопа, известного в данной области, в сочетании с любыми из антител, предлагаемых в настоящем изобретении. Примерами указанных методов является скрининг пептидов различных длин, введенных из ГО-17А и ГО-17Р, в отношении связывания с антителом, предлагаемым в настоящем изобретении, с определением наименьшего фрагмента, который может специфически связываться с антителом, который содержит последовательность эпитопа, распознаваемую антителом. Пептиды ГО-17 можно получать с помощью синтеза или путем протеолитического расщепления соответствующего полипептида ГО-17. Пептиды, которые связываются с антителом, можно идентифицировать, например, с помощью масс-спектрометрического анализа. В другом примере ЯМР-спектроскопию можно применять для идентификации эпитопа, который связывается антителом, предлагаемым в настоящем изобретении. После идентификации являющийся эпитопом фрагмент, который связывается антителом, предлагаемым в настоящем изобретении, можно использовать при необходимости в качестве иммуногена для получения дополнительных нейтрализующих антител, которые связывают этот эпитоп.
Антитела, которые обладают способностью перекрестно блокировать связывание антитела, предлагаемого в настоящем изобретении, в частности антитела, содержащего последовательность тяжелой цепи дН9 (8Е0 ГО N0:9) и последовательность легкой цепи §Ь7 (8Е0 ГО N0:7), также можно применять для нейтрализации активности ГО-17А и ГО-17Р. Таким образом, настоящее изобретение относится также к нейтрализующему антителу, связывающемуся с человеческим ГО-17А и человеческим ГО-17Р, которое перекрестно блокирует связывание любого из описанных выше антител с человеческим ГО-17А и/или человеческим ГО-17Р и/или человеческим гетеродимером ГО-17А/Р, и/или связывание которым ГО-17А и/или ГО-17Р, и/или человеческого гетеродимера ГО-17А/Р перекрестно блокируется одним из указанных антител. В одном из вариантов осуществления изобретения такое антитело связывается с тем же эпитопом, что и описанное выше антитело. В другом варианте осуществления изобретения перекрестно блокирующее нейтрализующее антитело связывается с эпитопом, который граничит и/или перекрывается с эпитопом, с котором связывается описанное выше антитело. В другом варианте осуществления этого объекта изобретения перекрестно блокирующее нейтрализующее антитело не связывается с тем же эпитопом, что и антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, или эпитопом, который граничит и/или перекрывается с указанным эпитопом.
Перекрестно блокирующие антитела можно идентифицировать с помощью любого приемлемого метода, известного в данной области, например, с помощью конкурентного ЕЫ8А или В1Асоге-анализа, в которых перекрестно блокирующее антитело к человеческому ГО-17А и/или человеческому ГО-17Р препятствует связыванию антитела, предлагаемого в настоящем изобретении, или наоборот.
Одним из вариантов осуществления изобретения является нейтрализующее антитело, связывающееся с человеческим ГО-17А и человеческим ГО-17Р, которое перекрестно блокирует связывание антитела, тяжелая цепь которого содержит последовательность дН9 (8Е0 ГО N0:9) и легкая цепь которого содержит последовательность §Ь7 (8Е0 ГО N0:7), с человеческим ГО-17А и человеческим ГО-17Р. В одном из вариантов осуществления изобретения перекрестно блокирующие антитела, предлагаемые в настоящем изобретении, блокируют связывание антитела, которое содержит последовательность тяжелой цепи дН9 (8Е0 ГО N0:9) и последовательность легкой цепи §Ь7 (8Е0 ГО N0:7), с ГО-17А более чем на 80%, предпочтительно более чем на 85%, более предпочтительно более чем на 90%, еще более предпочтительно более чем на 95%, и с ГО-17Р более чем на 80%, предпочтительно более чем на 85%, более предпочтительно более чем на 90%, еще более предпочтительно более чем на 95%.
Одним из вариантов осуществления изобретения является нейтрализующее антитело, которое связывается с человеческим ГО-17А и человеческим ГО-17Р, которое перекрестно блокирует связывание антитела, тяжелая цепь которого содержит последовательность дН9 (8Е0 ГО N0:9) и легкая цепь которого содержит последовательностье §Ь7 (8Е0 ГО N0:7), с человеческим ГО-17А и с человеческим ГО-17Р, и с человеческим гетеродимером ГО-17А/Р. В одном из вариантов осуществления изобретения перекрестно блокирующие антитела, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют связывание антитела, которое содержит последовательность тяжелой цепи дН9 (8Е0 ГО N0:9) и последовательность легкой цепи §Ь7 (8Е0 ГО N0:7), с ГО-17А более чем на 80%, предпочтительно более чем на 85%, более предпочтительно более чем на 90%, еще более предпочтительно более чем на 95%, и с ГО-17Р более чем на 80%, предпочтительно более чем на 85%, более предпочтительно более чем на 90%, еще более предпочтительно более чем на 95%, и с гетеродимером ГО-17А/Р более чем на 80%, предпочтительно более чем на 85%, более предпочтительно более чем на 90%, еще более предпочтительно более чем на 95%.
Одним из вариантов осуществления изобретения является нейтрализующее антитело, которое свя- 8 029953
зывается с человеческим 1Ь-17Л и человеческим 1Ь-17Р, которое перекрестно блокирует связывание антитела, тяжелая цепь которого содержит последовательность дН9 (8ЕО ГО N0:9) и легкая цепь которого содержит последовательностье §Ь7 (8Е0 ГО N0:7), с человеческим ГО-17Л, или человеческим ГО-17Р, или с человеческим гетеродимером 1Ь-17Л/Р. В одном из вариантов осуществления изобретения перекрестно блокирующие антитела, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют связывание антитела, содержащего последовательность тяжелой цепи дН9 (8Е0 ГО N0:9) и последовательность легкой цепи §Ь7 (8Е0 ГО N0:7), с ГО-17Л, или ГО-17Р, или ГО-17Л/Р более чем на 80%, предпочтительно более чем на 85%, более предпочтительно более чем на 90%, еще более предпочтительно более чем на 95%.
В альтернативном или дополнительном варианте этого объекта изобретения связывание нейтрализующих антител с человеческим ГО-17Л и человеческим ГО-17Р можно перекрестно блокировать с помощью антитела, содержащего последовательность тяжелой цепи дН9 (8Е0 ГО N0:9) и последовательность легкой цепи §Ь7 (8Е0 ГО N0:7). Таким образом, изобретение относится к молекуле нейтрализующего антитела, которая связывается с человеческим ГО-17Л и с человеческим ГО-17Р, связывание которой с человеческим ГО-17Л и человеческим ГО-17Р блокируется антителом, содержащим последовательность тяжелой цепи §Н9 (8Е0 ГО N0:9) и последовательность легкой цепи §Ь7 (8Е0 ГО N0:7). В одном из вариантов осуществления этого объекта изобретения связывание нейтрализующих антител с человеческим 1Ь-17Л и человеческим ГО-17Р ингибируется антителом, содержащим последовательность тяжелой цепи дН9 (8Е0 ГО N0:9) и последовательность легкой цепи §Ь7 (8Е0 ГО N0:7), более чем на 80%, предпочтительно более чем на 85%, более предпочтительно более чем на 90%, еще более предпочтительно более чем на 95%.
Другим вариантом осуществления изобретения является молекула нейтрализующего антитела, которая связывается с человеческим ГО-17Л и с человеческим ГО-17Р, связывание которой с человеческим ГО-17Л и человеческим ГО-17Р и с гетеродимером 1Ь-17Л/Р блокируется антителом, содержащим последовательность тяжелой цепи дН9 (8Е0 ГО N0:9) и последовательность легкой цепи §Ь7 (8Е0 ГО N0:7). В одном из вариантов осуществления этого объекта изобретения связывание нейтрализующих антител с человеческим ГО-17Л и человеческим ГО-17Р и с человеческим гетеродимером ГО-17Л/Р ингибируется антителом, содержащим последовательность тяжелой цепи дН9 (8Е0 ГО N0:9) и последовательность легкой цепи §Ь7 (8Е0 ГО N0:7), более чем на 80%, предпочтительно более чем на 85%, более предпочтительно более чем на 90%, еще более предпочтительно боле чем на 95%.
Изобретение относится также к молекуле нейтрализующего антитела, которая связывается с человеческим ГО-17Л и человеческим ГО-17Р, связывание которой с человеческим ГО-17Л, или человеческим ГО-17Р, или человеческим 1Ь-17Л/Р перекрестно блокируется антителом, содержащим последовательность тяжелой цепи §Н9 (8Е0 ГО N0:9) и последовательность легкой цепи §Ь7 (8Е0 ГО N0:7). В одном из вариантов осуществления этого объекта изобретения связывание нейтрализующих антител с человеческим ГО-17Л, или с человеческим ГО-17Р, или с человеческим гетеродимером ГО-17Л/Р ингибируется антителом, содержащим последовательность тяжелой цепи дН9 (8Е0 ГО N0:9) и последовательность легкой цепи §Ь7 (8Е0 ГО N0:7), более чем на 80%, предпочтительно более чем на 85%, более предпочтительно более чем на 90%, еще более предпочтительно боле чем на 95%.
В любом объекте настоящего изобретения молекула антитела предпочтительно обладает высокой аффинностью к связыванию, предпочтительно на наномолярном, еще более предпочтительно пикомолярном уровне. Как должно быть очевидно, аффинность к связыванию антитела, предлагаемого в настоящем изобретении, с человечески ГО-17Л может отличаться от аффинности к связыванию этого же антитела с человеческим ГО-17Р и/или гетеродимером 1Ь-17Л/Р. Например, молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к ГО-17Л более высокой, чем аффинность к 1Ь17Р. Например, молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к ГОПА, по меньшей мере в 10 раз более высокой, чем ее аффинность к связыванию с ГО-17Р. Например, молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к ГО-17Л, по меньшей мере в 50 раз более высокой, чем ее аффинность к связыванию с ГО-17Р. Например, молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к ГО-17А, по меньшей мере в 100 раз более высокой, чем ее аффинность к связыванию с ГО-17Р. Например, молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к ГО-17Р более высокой, чем аффинность к ГО-17А. Например, молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к ГО-17А такой же, как и ее аффинность к ГО-17Р. Например, молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к ГО-17Р на пикомолярном уровне и аффинностью к ГО-17Р на наномолярном уровне. Например, молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к ГО-17Р на наномолярном уровне и аффинностью к ГО-17А на пикомолярном уровне. Например, молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью и к ГО-17А, и к ГО17Р на наномолярном уровне. Например, молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью и ГО-17А, и ГО-17Р на пикомолярном уровне.
Предпочтительно молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к связыванию ГО-17А, которая характеризуется значением, составляющим менее 10 нМ. В одном из вариантов осуществления изобретения молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, об- 9 029953
ладает аффинностью к связыванию 1Ь-17А, которая характеризуется значением, составляющим менее 500пМ. В одном из вариантов осуществления изобретения молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к связыванию 1Ь-17А, которая характеризуется значением, составляющим менее 100 пМ. В одном из вариантов осуществления изобретения молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к связыванию 1Ь-17А, которая характеризуется значением, составляющим менее 20 пМ. В одном из вариантов осуществления изобретения молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к связыванию 1Ь-17А, которая характеризуется значением, составляющим менее 16 пМ.
Предпочтительно молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к связыванию 1Ь-17Р, которая характеризуется значением, составляющим менее 10 нМ. В одном из вариантов осуществления изобретения молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к связыванию 1Ь-17Р, которая характеризуется значением, составляющим менее 2 нМ. В одном из вариантов осуществления изобретения молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к связыванию 1Ь-17Р, которая характеризуется значением, составляющим менее 1,75 нМ.
Предпочтительно молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к связыванию гетеродимера 1Ь-17А/Р, которая характеризуется значением, составляющим менее 10 нМ. В одном из вариантов осуществления изобретения молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к связыванию гетеродимера 1Ь-17А/Р, которая характеризуется значением, составляющим менее 500 пМ. В одном из вариантов осуществления изобретения молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к связыванию гетеродимера 1Ь17А/Р, которая характеризуется значением, составляющим менее 150 пМ. В одном из вариантов осуществления изобретения молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к связыванию гетеродимера 1Ь-17А/Р, которая характеризуется значением, составляющим менее 116 пМ.
В одном из вариантов осуществления изобретения молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к связыванию 1Ь-17Р макака-крабоеда, которая характеризуется значением, составляющим менее 2 нМ. В одном из вариантов осуществления изобретения молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает аффинностью к связыванию 1Ь-17Р макакакрабоеда, которая характеризуется значением, составляющим менее 1,03 нМ.
Должно быть очевидно, что аффинность антител, предлагаемых в настоящем изобретении, можно изменять с помощью любого приемлемого метода, известного в данной области. Таким образом, настоящее изобретение относится также к вариантам молекул антител, предлагаемых в настоящем изобретении, которые обладают улучшенной аффинностью к 1Ь-17А и/или 1Ь-17Р. Такие варианты можно получать с помощью различных протоколов созревания аффинности, включая мутацию СЭР (Уапд и др., 1. Мо1. ΒίοΙ., 254, 1995, сс. 392-403), перестановку цепи (Маткк и др., Вю/ТесйПо1о§у, 10, 1992, сс. 779-783), применение штаммов-мутаторов Е. сой (Ьоте и др., 1. Мо1. Βίο1., 250, 1996, сс. 359-368), перестановку ДНК (Райеп и др., Сигг. Θρίη. Вю1ес1ию1.. 8, 1997, сс. 724-733), фаговую презентацию (Тйошркоп и др., 1. Мо1. Вю1., 256, 1996, сс.77-88) и "8ехиа1" ПЦР (Статей и др., ЫаШте, 391, 1998, сс. 288-291). У Уаидйап и др. (выше) обсуждены указанные методы созревания аффинности.
В одном из вариантов осуществления изобретения молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, нейтрализует активность 1Ь-17А и 1Ь-17Р, например, что установлено в анализах ίη уйто, описанных в примерах. Одним из вариантов осуществления настоящего изобретение является нейтрализующее антитело, которое обладает специфичностью в отношении человеческого 1Ь-17А и 1Ь-17Р, которое обладает способностью ингибировать активность 0,8 нМ человеческого 1Ь-17А на 50% при концентрации менее 5 нМ и активность 4,2 нМ 1Ь-17Р на 50% при концентрации менее 12 нМ, где ингибирующую активность оценивают по индуцируемому 1Ь-17А или 1Ь-17Р высвобождению 1Ь-6 из клеток линии Не1а. В одном из вариантов осуществления изобретения концентрация, при которой антитело ингибирует 1Ь-17Л на 50%, составляет менее 3 нМ. В одном из вариантов осуществления изобретения концентрация, при которой антитело ингибирует 1Ь-17Р на 50%, составляет менее 11 нМ. В одном из вариантов осуществления изобретения применяемые в этом анализе человеческий 1Ь-17А и человеческий 1Ь-17Р представляют собой рекомбинантный человеческий 1Ь-17А и 1Ь-17Р. В одном из вариантов осуществления изобретения нейтрализующее антитело представляет собой нейтрализующее гуманизированное антитело или полностью человеческое антитело.
При необходимости антитело, предназначенное для применения согласно настоящему изобретению, можно конъюгировать с одной или несколькими эффекторной(ыми) молекулой(ами). Очевидно, что эффекторная молекула может представлять собой индивидуальную эффекторную молекулу или две или большее количество эффекторных молекул, сцепленных таким образом, что они образуют отдельный фрагмент, который можно присоединять к антителам, предлагаемым в настоящем изобретении. Если требуется применять фрагмент антитела, сцепленный с эффекторной молекулой, то его можно получать с помощью стандартных химических методов или методов рекомбинантой ДНК, при которых фрагмент антитела сцепляют либо непосредственно, либо через сшивающий агент с эффекторной молекулой. Ме- 10 029953
тоды конъюгации указанных эффекторных молекул с антителами хорошо известны в данной области (см. Не11к1гот и др., Сои!го11еб Огид Оейуегу, 2-е изд., под ред. КоЪшкои и др., 1987, сс. 623-653; ТЬогре и др., 1ттиио1. Кеу., 62, 1982, сс. 119-158 и ОиЪо\Ус1ик и др., РЬагтасо1оду апб ТЬегареибск, 83, 1999, сс. 67-123). Конкретные химические методики включают, например, описанные в АО 93/06231, АО 92/22583, АО 89/00195, АО 89/01476 и АО 03031581. В другом варианте эффекторная молекула представляет собой белок или полипептид, для присоединения которых можно применять методы рекомбинантной ДНК, например методы, описанные в АО 86/01533 и ЕР 0392745.
Понятие "эффекторная молекула" в контексте настоящего описания включает, например, противоопухолевые вещества, лекарственные средства, токсины, биологически активные белки, например ферменты, другие антитела или фрагменты антител, синтетические или встречающиеся в естественных условиях полимеры, нуклеиновые кислоты и их фрагменты, например ДНК, РНК и их фрагменты, радионуклиды, прежде всего радиойодид, радиоизотопы, хелатирующие металлы, наночастицы и репортерные группы, такие как флуоресцентные соединения или соединения, которые можно выявлять с помощью ЯМР-спектроскопии или спектроскопии электронного спинового резонанса (ΕδΚ).
Примерами эффекторных молекул могут являться цитоксины или цитотоксические агенты, включая любой агент, который оказывает вредное воздействие на клетки (например, уничтожает их). Примерами являются комбрестатины, доластатиты, эпотилоны, стауроспорин, майтансиноиды, спонгистатины, ризоксин, галихондрины, роридины, гемиастерлины, таксол, цитохаластин В, грамицидин Ό, этидия бромид, эметин, митомицин, этопозид, тенопозид, винкристин, винбластин, колхицин, доксорубицин, даунорубицин, дигидроксиантрациндион, митоксантрон, митрамицин, актиномицин Ό, 1-дегидротестостерон, глюкокортикоиды, прокаин, тетракаин, лидокаин, пропранолол и пуромицин и их аналоги или гомологи.
Эффекторные молекулы представляют собой также (но не ограничиваясь только ими) антиметаболиты (например, метотрексат, 6-меркаптопурин, 6-тиогуанин, цитарабин, 5-фторурацил, декарбазин), алкилирующие агенты (например, мехлоретамин, тиотэпа, хлорамбуцил, мелфалан, кармустин (ΒδΝυ) и ломустин (СС^), циклотосфамид, бусулфан, дибромоманнит, стрептозотоцин, митомицин С и цисдихлодиамин платины(П) (ΌΌΡ, цисплатин), антрациклины (например, даунорубицин (прежнее название дауномицин) и доксорубицин), антибиотики (например, дактиномицин (прежнее название актиномицин), блеомицин, митрамицин, антрамицин (АМС), калихеамицины или дуокармицины) и антимитотические средства (например, винкристин и винбластин).
Другие эффекторные молекулы могут представлять собой также молекулы хелатирующих радио111 9А 177 213 252 192 188 188
нуклидов, такие как 1и и Ύ, Ьи , висмут , калифорний , иридий и вольфрам /рений ; или лекарственные средства, такие как (но не ограничиваясь только ими) алкилфосфохолины, ингибиторы топоизомеразы I, таксоиды и сурамин.
Другие эффекторные молекулы представляют собой белки, пептиды и ферменты. Представляющие интерес ферменты включают (но не ограничиваясь только ими) протеолитические ферменты, гидролазы, лиазы, изомеразы, трансферазы. Представляющие интерес белки, полипептиды и пептиды включают (но не ограничиваясь только ими) иммуноглобулины, токсины, такие как абрин, рицин А, экзотоксин Ркеиботоиак или дифтерийный токсин, белок, такой как инсулин, фактор некроза опухоли, α-интерферон, βинтерферон, фактор роста нервов, тромбоцитарный фактор роста или тканевой активатор плазминогена, тромботический агент или антиангиогенный агент, например ангиостатин или эндостатин, или модификатор биологического ответа, такой как лимфокин, интерлейкин-1 (1Ь-1), интерлейкин-2 (1Ь-2), интерлейкин-6 (1Ь-6), колониестимулирующий фактор роста гранулоцитов-макрофагов (ОМ-С8Р), гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (О-С8Р), фактор роста нервов (ΝΟΡ) или другие факторы роста и иммуноглобулины.
Другие эффекторные молекулы могут включать выявляемые субстанции, которые можно применять, например, для диагностики. Примерами выявляемых субстанций являются, например, различные ферменты, простетические группы, флуоресцентные вещества, люминесцентные вещества, биолюминесцентные вещества, радиоактивные нуклиды, испускающие позитроны металлы (предназначенные для применения в позитронной эмиссионной томографии) и нерадиоактивные парамагнитные ионы металлов (см. общие сведения в υδ 4741900, касающиеся ионов металлов, которые можно конъюгировать с антителами для применения в качестве средств диагностики). Приемлемыми ферментами являются пероксидаза из хрена, щелочная фосфатаза, бета-галактозидаза или ацетохолинэстераза; приемлемыми простетическими группами являются стрептавидин, авидин и биотин; приемлемыми флуоресцентными веществами являются умбеллиферон, флуоресцеин, флуоресцеина изотиоцианат, родамин, дихлотриазиниламин флуоресцеина, дансилхлорид и фикоэритрин; приемлемым люминесцентным веществом является люминол; приемлемыми биолюминесцентными веществами являются люцифераза, люциферин и экворин; а приемлемыми радиоактивными нуклидами являются 1251, 1311,1П1и и 99Тс.
Другим примером эффекторной молекулы является молекула, которая может удлинять время полужизни антитела ш угуо и/или снижать иммуногенность антитела, и/или улучшать введение антитела через эпителиальный барьер в иммунную систему. Примерами приемлемых молекул этого типа являются полимеры, альбумин, альбуминсвязывающие белки или альбуминсвязывающие соединения, например,
- 11 029953
описанные в АО 05/117984.
Если эффекторная молекула представляет собой полимер, то она может, как правило, представлять собой синтетический или встречающийся в естественных условиях полимер, например необязательно замещенный прямоцепочечный или разветвленный полиалкиленовый, полиалкениленовый или полиоксиалкиленовый полимер или разветвленный или неразветвленный полисахарид, например гомо- или гетерополисахарид.
Конкретными необязательными заместителями, которые могут присутствовать в вышеуказанных синтетических полимерах, являются одна или несколько гидроксигрупп, метильных групп или метоксигрупп.
Конкретными примерами синтетических полимеров являются необязательно замещенный прямоцепочечный или разветвленный поли(этиленгликоль), поли(пропиленгликоль), поли(виниловый спирт) или их производные, прежде всего необязательно замещенный поли(этиленгликоль), такой как метоксиполи(этиленгликоль) или его производные.
Конкретными встречающимися в естественных условиях полимерами являются лактоза, амилоза, декстран, гликоген или их производные.
Подразумевается, что понятие "производные" в контексте настоящего описания включает реактивные производные, например тиолселективные реактивные группы, такие как малеимиды и т.п. Реактивная группа может быть сцеплена с полимером непосредственно или через линкерный сегмент. Очевидно, что остаток такой группы в некоторых случаях может формировать часть продукта в качестве линкерной группы между фрагментом антитела и полимером.
Размер полимера может при необходимости варьироваться, но, как правило, он должен иметь среднюю молекулярную массу от 500 до 50000 Да, предпочтительно от 5000 до 40000 Да и более предпочтительно от 20000 до 40000 Да. Размер полимера можно, в частности, выбирать на основе предназначения продукта, например способности локализоваться в определенных тканях, таких как опухоли, или удлинять время полужизни в кровотоке (см. обзор у Сйаршаи, Лбуаисеб Эгид ИеНуегу Рсую\у5. 54, 2002, сс. 531-545). Так, например, если продукт должен покидать кровоток и проникать в ткань, например, при применении для лечения опухоли, то в этом случае может оказаться целесообразным применять низкомолекулярный полимер, например с молекулярной массой примерно 5000 Да. При применении, когда продукт сохраняется в кровотоке, может оказаться целесообразным применять высокомолекулярный полимер, например с молекулярной массой от 20000 до 40000 Да.
Наиболее предпочтительными полимерами являются полиалкиленовый полимер, такой как поли(этиленгликоль) или прежде всего метоксиполи(этиленгликоль) или его производные, и предпочтительно с молекулярной массой от примерно 15000 до примерно 40000 Да.
В одном из примеров антитела, предназначенные для применения согласно настоящему изобретению, присоединяют к поли(этиленгликольным) (ПЭГ) звеньям. В одном конкретном примере антитело представляет собой фрагмент антитела, и молекула ПЭГ может быть присоединена через любую доступную боковую группу аминокислоты или концевую функциональную группу аминокислоты, локализованную во фрагменте антитела, например любую свободную аминогруппу, иминогруппу, тиольную, гидроксильную или карбоксильную группу. Указанные аминокислоты могут встречаться в естественных условиях во фрагменте антитела или могут быть сконструированы во фрагменте с помощью методов рекомбинантной ДНК (см., например, И8 5219996; И8 5667425; АО 98/25971). В одном из примеров молекула антитела, предлагаемая в настоящем изобретении, представляет собой модифицированный РаЬфрагмент, при этом модификация представляет собой добавление к С-концу тяжелой цепи одной или нескольких аминокислот для обеспечения присоединения эффекторной молекулы. Предпочтительно дополнительные аминокислоты образуют модифицированную шарнирную область, содержащую один или несколько остатков цистеина, к которым можно присоединять эффекторную молекулу. Для присоединения двух или большего количества молекул ПЭГ можно применять множественные сайты.
Предпочтительно молекулы ПЭГ ковалентно связывают через тиольную группу по меньшей мере одного остатка цистеина, локализованного во фрагменте антитела. Каждую молекулу полимера, присоединенную к модифицированному фрагменту антитела, можно ковалентно связывать с атомом серы остатка цистеина, локализованного во фрагменте. Ковалентная связь, как правило, представляет собой дисульфидную связь или, в частности, связь типа сера-углерод. Когда в качестве точки присоединения соответствующим образом активированной эффекторной молекулы используют тиольную группу, то можно применять, например, тиолселективные производные, такие как малеимиды, и производные цистеина. Активируемый полимер можно применять в качестве исходного материала для получения модифицированных полимером фрагментов антител, описанных выше. Активированный полимер может представлять собой любой полимер, содержащий тиолреактивную группу, такую как α-галокарбоновая кислота или эфир, например йодацетамид, имид, например малеимид, винилсульфон или дисульфид. Указанные исходные продукты можно получать из поступающих в продажу материалов (например, от фирмы №к1аг, прежнее название 8кеаг\уа1ег Ро1утег8 1пс., Хантсвилл, шт. Алабама, США) или можно приготавливать из поступающих в продажу исходных продуктов с помощью общепринятых химических процессов. Конкретные молекулы ПЭГ включают метокси-ПЭГ-амин с молекулярной массой 20 кДа (который
- 12 029953
можно получать от фирмы №к1аг. прежнее название 8йеатуа1ег; Карр Ро1утеге; и 8ипВю) и М-ПЭГ-8РА (который можно получать от фирмы Ыек1ат. прежнее название 8йеатуа1ег).
В одном из вариантов осуществления изобретения антитело представляет собой модифицированный РаЪ-фрагмент. который является ПЭГилированным. т.е. несет ПЭГ (поли(этиленгликоль)). ковалентно присоединенный к нему. например. с помощью метода. описанного в ЕР 0948544 [см. также "Ро1у(еИу1епд1усо1) Сйет1к1гу. Вю1есйшса1 апб Вютебюа1 Аррйсайопк". под ред. Т МШоп Натк. изд-во Р1епит Ргекк. №\у Уогк. 1992. "Ро1у(еИу1епд1усо1) СйетЦйу апб Вю1одюа1 Аррйсайопк". под ред. 1. Мй1оп Натк и 8. Байркку. изд-во Атепсап Сйетюа1 8ос1е1у. АаккшдЮп ОС. 1997 и "В1осоп]идайоп Рго1еш Соирйпд Тескпищек Гот Не Вютебюа1 8аепсек». под ред. М. Ак1ат и А. Оеп1. изд-во Огоуе РиЪйкйетк. йеи Уогк. 1997; Сйартап. А. Абуапсеб Эгид Оейуету Кеу1еук. 54. 2002. сс. 531-545]. В одном из примеров ПЭГ присоединяют к цистеину в шарнирной области. В одном из примеров модифицированный ПЭГ РаЪ-фрагмент имеет малеимидную группу. ковалентно связанную с одной тиольной группой в модифицированной шарнирной области. Остаток лизина можно ковалентно связывать с малеимидной группой и к каждой из аминогрупп на остатке лизина можно присоединять метоксиполи(этиленгликольный) полимер с молекулярной массой примерно 20000 Да. Общая молекулярная масса. ПЭГ. присоединенного к РаЪ-фрагменту может составлять примерно 40000 Да.
Одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является молекула нейтрализующего антитела. обладающая специфичностью в отношении человеческого 1Б-17А и человеческого 1Ь-17Р. которая представляет собой модифицированный РаЪ-фрагмент. имеющий тяжелую цепь. которая содержит последовательность. представленную в 8ЕО ГО N0:9. и легкую цепь. которая содержит последовательность. представленную в 8ЕО ГО N0:7. и несущая на С-конце тяжелой цепи модифицированную шарнирную область. которая содержит по меньшей мере один остаток цистеина. к которому присоединена эффекторная молекула. Предпочтительно эффекторная молекула представляет собой ПЭГ и ее присоединяют в помощью методов. описанных в АО 98/25971 и АО 2004072116. прим этом лизилмалеимидную группу присоединяют к остатку цистеина на С-конце тяжелой цепи. и каждая аминогруппа остатка лизила ковалентно связана с метоксиполи(этиленгликольным) звеном. молекулярная масса которого составляет примерно 20000 Да. Таким образом. общая молекулярная масса ПЭГ. присоединенного к антителу. составляет примерно 40000 Да.
В другом примере эффекторные молекулы можно присоединять к фрагментам антител с помощью методов. описанных в международных заявках на патент АО 2005/003169. АО 2005/003170 и АО 2005/003171.
Настоящее изобретение относится также к выделенной последовательности ДНК. кодирующей тяжелую и/или легкую цепь(и) молекулы антитела. предлагаемого в настоящем изобретении. Предпочтительно последовательность ДНК кодирует тяжелую или легкую цепь молекулы антитела. предлагаемого в настоящем изобретении. Последовательность ДНК. предлагаемая в настоящем изобретении. может представлять собой синтетическую ДНК. например. полученную с помощью химического процессинга. кДНК. геномную ДНК или любую их комбинацию.
Последовательности ДНК. которые кодируют молекулу антитела. предлагаемую в настоящем изобретении. можно получать методами. хорошо известными специалистам в данной области. Например. последовательности ДНК. кодирующие часть или все тяжелые или легкие цепи антитела. можно синтезировать при необходимости из определенных последовательностей ДНК или на основе соответствующих аминокислотных последовательностей.
ДНК. кодирующие акцепторные каркасные последовательности. широко доступны специалистам в данной области и их легко можно синтезировать на основе их известных аминокислотных последовательностей.
Стандартные методы молекулярной биологии можно применять для получения последовательностей ДНК. кодирующих молекулу антитела. предлагаемого в настоящем изобретении. Требуемые последовательности ДНК можно синтезировать полностью или частично с использованием методов синтеза олигонуклеотидов. При необходимости можно применять сайтнаправленный мутагенез и полимеразную цепную реакцию (ПЦР).
Примерами приемлемых последовательностей являются последовательности. представленные в 8ЕО ГО МЭ:8; 8ЕО ГО Ш:10; 8ЕО ГО ^:13; 8ЕО ГО Ш:14; 8ЕО ГО Ш:17 и 8ЕО ГО Ш:18. Нуклеотиды 1-57 в 8ЕО ГО NО: 18 и 1-60 в 8ЕЦ ГО NО:14 кодируют последовательность сигнального пептида из мышиного антитела В72.3 (Айййе и др.. Рто1еш Епд. 1(6). 1987. сс. 499-505.). которая отщепляется с высвобождением молекулы нейтрализующего антитела. предлагаемой в настоящем изобретении.
Настоящее изобретение относится также к клонирующему или экспрессионному вектору. содержащему одну или несколько последовательностей ДНК. предлагаемых в настоящем изобретении. Таким образом. изобретение относится к клонирующему или экспрессионному вектору. содержащему одну или несколько последовательностей ДНК. кодирующих антитело. предлагаемое в настоящем изобретении. Предпочтительно клонирующий или экспрессионный вектор содержит две последовательности ДНК. кодирующие легкую цепь и тяжелую цепь молекулы антитела. предлагаемой в настоящем изобретении. соответственно. Предпочтительно вектор. предлагаемый в настоящем изобретении. содержит последова- 13 029953
тельности, представленные в 5>ЕО ГО N0:14 и 8Е0 ГО N0:18. Нуклеотиды 1-57 в 8Е0 ГО N0: 18 и 1-60 в 8Е0 ГО N0: 14 кодируют последовательность сигнального пептида из мышиного антитела В72.3 (остатки 1-19 в 8Е0 ГО N0: 16 и 1-20 в 8Е0 ГО N0:12 соответственно), которая наиболее предпочтительно отщепляется с высвобождением молекулы нейтрализующего антитела, предлагаемой в настоящем изобретении.
Общие методы, с помощью которых можно конструировать векторы, методы трансфекции и методы культивирования хорошо известны специалистам в данной области. В этой связи следует упомянуть в качестве ссылки "Сштеп! Рто1осок ίη Мо1еси1аг Вю1о§у", под ред. Р.М. Ли8иЬе1, изд-во \УПсу 1п1ет8с1епсе, №\ν Уотк, 1999 и руководство Машайк Мапиа1, опубликованное изд-вом Со1б 8ртт§ НагЬог РиЬйкЫпд.
Изобретение относится также к клетке-хозяину, содержащей один или несколько клонирующих или экспрессионных векторов или одну или несколько последовательностей ДНК, кодирующих антитело, предлагаемое в настоящем изобретении. Любую приемлемую систему клетка-хозяин/вектор можно применять для экспрессии последовательностей ДНК, кодирующих молекулу антитела, предлагаемую в настоящем изобретении. Можно применять бактериальные, например Е. сой, и другие микробные системы или можно применять также эукариотические, например из млекопитающих клетки-хозяева. Приемлемые клетки-хозяева из млекопитающих включают клетки СНО, миеломы или гибридомы.
Настоящее изобретение относится также к способу получения молекулы антитела, предлагаемой в настоящем изобретении, заключающемуся в том, что культивируют клетку-хозяина, содержащую вектор, предлагаемый в настоящем изобретении, в условиях, пригодных для запуска экспрессии белка с ДНК, кодирующей молекулу антитела, предлагаемую в настоящем изобретении, и выделяют молекулу антитела.
Молекула антитела может содержать только полипептид тяжелой или легкой цепи, в этом случае только последовательность, кодирующую полипептид тяжелой цепи или легкой цепи, следует использовать для трансфекции клеток-хозяев. Для производства продуктов, содержащих и тяжелые, и легкие цепи, клеточную линию можно трансфектировать двумя векторами, первым вектором, кодирующим полипептид легкой цепи, и вторым вектором, кодирующим полипептид тяжелой цепи. В другом варианте можно применять один вектор, включающий последовательности, кодирующие полипептиды легкой цепи и тяжелой цепи.
Поскольку антитела, предлагаемые в настоящем изобретении, можно применять для лечения и/или профилактики патологического состояния, настоящее изобретение относится также к фармацевтической или диагностической композиции, содержащей молекулу антитела, предлагаемую в настоящем изобретении, в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами, разбавителями или носителями. Таким образом, изобретение относится к применению антитела, предлагаемого в настоящем изобретении, для приготовления лекарственного средства. Композиция, как правило, может поставляться в виде части стерильной фармацевтической композиции, которая обычно может включать фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтическая композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, может дополнительно содержать фармацевтически приемлемый адъювант.
Настоящее изобретение относится также к способу получения фармацевтической или диагностической композиции, заключающемуся в том, что добавляют и смешивают молекулу антитела, предлагаемую в настоящем изобретении, с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами, разбавителями или носителями.
Молекула антитела может представлять собой единственное действующее вещество в фармацевтической или диагностической композиции или может быть объединена с другими действующими веществами, включая ингредиенты, представляющие собой другие антитела, например, антитело к ТОТ1, антитело к ΣΕ-1β, антитело к Т-клеткам, антитело к 1РХу или антитело к ЬР§, или ингредиенты, не представляющие собой антитела, такие как ксантины.
Фармацевтические композиции предпочтительно содержат антитело, предлагаемое в изобретении, в терапевтически эффективном количестве. Понятие "терапевтически эффективное количество" в контексте настоящего описания относится к количеству терапевтического агента, которое необходимо для лечения, облегчения или предупреждения целевого заболевания или состояния, или которое обладает выраженным терапевтическим или профилактическим действием. Для любого антитела терапевтически эффективное количество можно оценивать первоначально либо в анализах на культурах клеток или на созданных на животных моделях, как правило, на грызунах, кроликах, собаках, свиньях или приматах. Созданные на животных модели можно применять также для определения соответствующего диапазона концентраций и путей введения. Такую информацию затем можно использовать для определения требуемых доз и путей введения людям.
Точное терапевтически эффективное количество для человека должно зависеть от серьезности болезненного состояния, общего состояния здоровья индивидуума, возраста, веса тела и пола индивидуума, диеты, времени и частоты введения, комбинации(ий) лекарственных средств, реакции чувствительности и толерантности/ответа на терапию. Это количество можно определять с помощью общепринятых экспериментов, и это находится в компетенции лечащего врача. Как правило, терапевтически эффективное количество может составлять от 0,01 до 50 мг/кг, предпочтительно от 0,1 до 20 мг/кг. Удобно, когда
- 14 029953
фармацевтические композиции представляют собой стандартные дозы, которые содержат предварительно определенное количество действующего вещества, предлагаемого в изобретении, на дозу.
Композиции можно вводить пациенту индивидуально или в сочетании (например, одновременно, последовательно или раздельно) с другими агентами, лекарственными средствами или гормонами.
Доза, в которой вводят молекулу антитела, предлагаемую в настоящем изобретении, зависит от природы состояния, подлежащего лечению, уровня имеющегося воспаления или от того, предполагается ли использовать молекулу антитела в профилактических целях или для лечения существующего состояния.
Частота введения доз должна зависеть от времени полужизни молекулы антитела и продолжительности ее действия. Если молекула антитела имеет короткое время полужизни (например, от 2 до 10 ч), то ее может оказаться необходимым применять в виде одной или нескольких доз в день. В другом варианте, если молекула антитела имеет длительное время полужизни (например, от 2 до 15 дней), то ее может оказаться необходимым применять один раз в день, один раз в неделю или даже один раз каждый 1 или 2 месяца.
Фармацевтически приемлемый носитель не должен сам индуцировать производство антител, вредных для индивидуума, которому вводят композицию, и не должен быть токсичным. Приемлемыми носителями могут быть крупные медленно метаболизирующиеся молекулы, такие как белки, полипептиды, липосомы, полисахариды, полимолочные кислоты, полигликолевые кислоты, полимерные аминокислоты, сополимеры аминокислот и неактивные вирусные частицы.
Можно использовать фармацевтически приемлемые соли, например соли минеральных кислот, такие как гидрохлориды, гидробромиды, фосфаты и сульфаты, или соли органических кислот, такие как ацетаты, пропионаты, малонаты и бензоаты.
Фармацевтически приемлемые носители в терапевтических композициях могут дополнительно содержать жидкости, такие как вода, физиологический раствор, глицерин и этанол. Кроме того, в таких композициях могут присутствовать вспомогательные вещества, такие как смачивающие или эмульгирующие агенты или рН-забуферивающие субстанции. Такие носители позволяют приготавливать на основе фармацевтических композиций различные формы в виде таблеток, пилюль, драже, капсул, жидкостей, гелей, сиропов, густых суспензий и суспензий, предназначенные для приема внутрь пациентом.
Предпочтительными формами применения являются формы, пригодные для парентерального введения, например, путем инъекции или инфузии, например, путем болюсной инъекции или непрерывной инфузии. Когда продукт предназначен для инъекции или инфузии, он может иметь форму суспензии, раствора или эмульсии в масляном или водном наполнителе и может содержать вещества, предназначенные для приготовления препаративных форм, такие как суспендирующие вещества, консерванты, стабилизаторы и/или диспергирующие вещества. В другом варианте молекула антитела может присутствовать в сухой форме, предназначенной для восстановления перед применением соответствующей стерильной жидкостью.
После включения в препаративную форму композиции, предлагаемые в изобретении, можно вводить непосредственно индивидууму. Подлежащие лечению индивидуумы могут представлять собой животных. Однако предпочтительно композиции адаптируют для введения человеку.
Фармацевтические композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, можно вводить любыми из многочисленных путей, включая (но не ограничиваясь только ими) оральный, внутривенный, внутримышечный, внутриартериальный, интрамедуллярный, подоболочечный, внутрижелудочковый, трансдермальный, чрескожный (см., например, АО 98/20734), подкожный, внутрибрюшинный, интраназальный, энтеральный, местный, подъязычный, внутривагинальный или ректальный пути. Для введения фармацевтических композиций, предлагаемых в изобретении, можно применять также гипоспреи. Как правило, терапевтические композиции можно приготавливать в виде предназначенных для инъекций или жидких растворов или суспензий. Можно получать также твердые формы, пригодные для растворения или суспендирования в жидких наполнителях перед инъекцией.
Непосредственное введение композиций следует, как правило, осуществлять путем инъекции, подкожно, внутрибрюшинно, внутривенно или внутримышечно или вводить в интерстициальное пространство ткани. Композиции можно вводить также в область повреждения. Применяемая схема приема лекарственного средства может быть основана на использовании однократной дозы или нескольких доз.
Должно быть очевидно, что действующее вещество в композиции должно представлять собой молекулу антитела. Само по себе оно может быть чувствительно к расщеплению в желудочно-кишечном тракте. Таким образом, если композицию вводят путем, предусматривающим попадание в желудочнокишечный тракт, то композиция должна содержать агенты, которые защищают антитело от расщепления, но которые позволяют антителу высвобождаться после его абсорбции в желудочно-кишечном тракте.
Подробное обсуждение фармацевтически приемлемых носителей представлено в ВстшдЮп! Ркагтасеийса1 Заспссх. изд-во Маек РиЬйкЮпд Сотрапу, N.1., 1991.
Также подразумевается, что антитело, предлагаемое в настоящем изобретении, можно применять в целях генной терапии. Для этого последовательности ДНК, кодирующие тяжелые и легкие цепи молекулы антитела под контролем соответствующих компонентов ДНК, интродуцируют пациенту так, чтобы
- 15 029953
происходила экспрессия цепей антитела с последовательности ДНК и их сборка ш 5ίΙιι.
Настоящее изобретение относится также к молекуле, предназначенной для применения с целью контроля воспалительных заболеваний. Предпочтительно молекулу антитела можно применять для снижения воспалительного процесса или для предупреждения воспалительного процесса.
Настоящее изобретение относится также к молекуле антитела, предлагаемой в настоящем изобретении, для применения с целью лечения или профилактики патологического нарушения, опосредуемого 1Ь-17А и/или 1Ь-17Р, или ассоциированного с повышенными уровнями 1Ь-17А и/или 1Ь-17Р. Предпочтительно патологическое состояние выбирают из группы, включающей инфекции (вирусные, бактериальные, грибные и паразитарные), эндотоксический шок, ассоциированный с инфекцией, артрит, ревматоидный артрит, астму, воспаление тазовых органов, болезнь Альцгеймера, болезнь Крона, воспалительное заболевание кишечника, неспецифический язвенный колит, болезнь Пейрони, болезнь чрева, болезнь мочевого пузыря, пилонидальную болезнь, перитонит, псориаз, васкулит, спайки, связанные с хирургическим вмешательством, "удар", диабет типа I, артрит Лайма, менингоэнцефалит, опосредумые иммунной системой воспалительные нарушения центральной и периферической нервной системы, такие как рассеянный склероз и синдром Гийена-Барре, другие аутоиммунные нарушения, панкреатит, травму (хирургическое вмешательство), реакцию трансплантат против хозяина, отторжение трансплантата, рак (как плотные опухоли, такие как меланомы, гепатобластомы, саркомы, плоскоклеточные карциномы, переходно-клеточные виды рака, различные виды рака яичника, так и гематологические злокачественные заболевания и прежде всего острый миелолейкоз, хронический миелолейкоз, рак желудка и рак ободочной кишки), болезни сердца, включая ишемические заболевания, такие как инфаркт миокарда, а также атеросклероз, внутрисосудистую коагуляцию, резорбцию кости, остеопороз, периодонтит и гипохлоргидрию.
Настоящее изобретение относится также к молекуле антитела, предлагаемой в настоящем изобретении, которую можно применять для лечения или профилактики боли.
Настоящее изобретение относится также к применению молекулы антитела, предлагаемой в настоящем изобретении, для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения или профилактики патологического нарушения, опосредуемого 1Б-17А и/или ГО-17Р или ассоциированного с повышенным уровнем ГО-17А и/или ГО-17Р. Предпочтительно патологическое нарушение представляет собой ревматоидный артрит или рассеянный склероз.
Настоящее изобретение относится также к применению молекулы антитела, предлагаемой в настоящем изобретении, для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения или профилактики боли.
Молекулу антитела, предлагаемую в настоящем изобретении, можно применять в любой терапии, при которой требуется снижать воздействие 1Б-17А и/или ГО-17Р на организм человека или животного. ГО-17А и/или ГО-17Р могут находиться в кровотоке или могут присутствовать в нежелательных высоких концентрациях в конкретной области организма, например в месте воспаления.
Молекулу антитела, предлагаемую в настоящем изобретении, предпочтительно применяют для контроля воспалительного заболевания, аутоиммунного заболевания или рака.
Настоящее изобретение относится также к способу лечения человека или животного, страдающего или имеющего риск возникновения нарушения, опосредуемого или 1Б-17А, и/или ГО-17Р, заключающемуся в том, что вводят индивидууму в эффективном количестве молекулу антитела, предлагаемую в настоящем изобретении.
Молекулу антитела, предлагаемую в настоящем изобретении, можно применять также для диагностики, например диагностики ш У1уо и выявления статуса заболевания, в котором принимают участие 1Ь17А и/или ГО-17Р.
Ниже настоящее изобретение дополнительно описано с помощью примеров, которые даны только с целью иллюстрации, и со ссылкой на приведенные чертежи, на которых показано
на фиг. 1
а) У-область легкой цепи антитела СА028_0496 (8Е0 ГО ЫО:7),
б) У-область тяжелой цепи антитела СА028_0496 (8Е0 ГО ЫО:9),
в) СОКН1 (81 ГО) ГО ЫО:1), СГОКН2 (81 ГО) ГО ЫО:2), СГОКН3 (81 ГО) ГО ЫО:3), С1ЖР1 (81 ГО) ГО ЫО:4), С1ЖР2 (81 ГО) ГО ΝΘ:5), С1ЖР.3 (81 ГО) ГО ЫО:6) антитела СА028_496,
г) легкая цепь антитела СА028_496 (8Е0 ГО NО:11),
д) тяжелая цепь антитела СА028_496 (8Е0 ГО NО:15),
е) ДНК, кодирующая легкую цепь антитела СА028_496, включая сигнальную последовательность
(81ГО) ГО Ш:14),
ж) ДНК, кодирующая тяжелую цепь антитела СА028496, включая сигнальную последовательность
(81ГО) ГО Ш:18); на фиг 2
а) воздействие антитела СА028_0496 (обозначено как АЬ#496 в сноске) на индуцируемое человеческим ГО-17 производство ГО-6 в клетках линии Не1а,
б) воздействие антитела СА028_0496 (обозначено как АЬ#496 в сноске) на индуцируемое человече- 16 029953
ским 1Б-17Р производство 1Б-6 в клетках линии Не1а.
Манипуляции с ДНК и общие методы.
Штамм Е. соН ГОУаР' (фирма РтП'одеп) применяли для трансформации и общепринятого выращивания культуры. Ферменты для рестрикции и модификации ДНК получали от фирм КосИе ОшдпоФсз Ыд. и \е\у Епд1апд Вю1аЬ§. Для получения плазмид использовали наборы типа Мах1 Р1азт1б рипйсайоп (фирма ОРАСтЕХ, каталожный № 12165). Реакции секвенирования ДНК осуществляли с помощью набора типа АВ1 Рпзт В1д 1)уе 1егтта1ог зециепстд (каталожный № 4304149) и осуществляли их на автоматическом секвенаторе типа АВ1 3100 (фирма Аррйей Вюзуз1етз). Данные анализировали с помощью программы ЛиЮЛ^етЫег (фирма Аррйей Вюзуз1етз).
Олигонуклеотиды получали от фирмы РтП'одеп. Концентрацию 1дС определяли с помощью ЕБГОА для ансамбля 1дС.
Изоформы Ш-17.
Рекомбинатные ГО-17А и ΙΡ-17Ρ покупали у фирмы Κ&Ό 8уз1етз. Рекомбинатный гетеродимер ГО17А/Р получали, связывая Ш-17А и ΙΡ-17Ρ с помощью СШлинкера. Гетеродимер имел следующую последовательность(8Ер ΙΌ N0:19):
ΜΟΙΤΙΡΚΝΡΟΟΡΝδΕϋΚΝΡΡΚΤνΜνΝΕΝΙΡΙΝΚΝΤΝΤΝΡΚΚ.δδΟΥΥΝΚ.δΤδΡλνΝΕ
ΗΚ.ΝΕϋΡΕΚΥΡδνΐν/ΕΑΚ€ΚΗΕΟ€ΙΝΑΟΟΝνϋΥΗΜΝδνΡΙ09ΕΙΕνΕΚΚ.ΕΡΡΗΟΡ
ΝδΡΡΕΕΚΙΕνδνΟΕΤανΤΡίνΗΗνΑΟΟΟΟδΟΟΟΟδΟΟΟΟδΟΟΟΟδΚΚΙΡΚνΟΗΤ
ΡΡρΚΡΕδΟΡΡνΡΟΟδΜΚΕΟΙΟΙΙΝΕΝρΚ.νδΜδΚΝΙΕδΚ.δΤδΡ\νΝΥΤνΤλνθΡΝΚ.ΥΡ
δΕννρΑρΟΚΝΕΟΟΙΝΑρΟΚΕΟΙδΜΝδνΡΙΟΡΕΤΕννΚΚΚΗρΟΟδνδΡρΕΕΚνΕν
ТУОСТСУТРУШНУС}.
Рекомбинантый ΙΡ-17Ρ макака-крабоеда имел следующую последовательность (ЗЕО ГО N0:20): ΜΡΚΙΡΚνϋΗ'ΡΡΡΟΚΡΕδαΡΡνΡΕϋδΜΚΡΝΤΟΙΙΝΕΝΟΡνδΜδΡΝΙΕδΚδΡδΡΑ'ΝΥ ТУТ\УОРАПт\8РУУрАрСКН1ХХЛХАраКРТ)18МХ$УРадЕТРУЕ®ЕКР1(К;С δ V ЗРРЬЕКУЬУТУОСТС УТР У1ННУ<3.
Последовательность ДНК, кодирующую гетеродимер ГО-17А/Р, химически синтезировали на фирме Еп1е1есИоп СтЬН и субклонировали во рЕТ43.1а в сайтах Же1/Хйо1.
Последовательность ДНК, кодирующую ГО-17Р макака-крабоеда, амплифицировали с помощью ПЦР, используя праймеры, которые обеспечивали интродукцию сайтов рестрикции \с.1е1 и ХИоР ПЦРпродукты встраивали путем лигирования в рСК4В1ип1-Т0Р0 и последовательность подтверждали перед расщеплением и встраиванием путем лигирования в рЕТ43.1а в сайты Же1/Хйо1.
ДНК рЕТ43.1а, кодирующую изоформы ΙΕ-17, применяли для трансфекции клеток линии ВЕ21(1)Е3) и отобранные устойчивые к карбенициллину клоны выращивали при 37°С в течение ночи в 2ТУ-бульоне, содержащем 2% глюкозы и 50 мкг/мл карбенициллина. Затем культуры разводили и выращивали в такой же среде до ОП600 0,5-0,7, осуществляя индукцию с помощью 1 мМ ИПТГ, и выращивали при 37°С в течение еще 4-5 ч.
Клетки собирали центрифугированием и из клеток получали внутриклеточные тельца. Внутриклеточные тельца солюбилизировали в 50 мМ Трис-НС1, 5М гидрохлориде гуанидиния, 50 мМ №С1, 1 мМ ЭДТК, 2 мМ восстановленном глутатионе, 0,2 мМ окисленном глутатионе, рН 8,5. Осуществляли повторную укладку белка ГО-17 путем добавления по каплям солюбилизованного белка в вышеуказанный буфер без гидрохлорида гуанидиния при интенсивном перемешивании. Конечный объем выбирали таким образом, чтобы конечная концентрация белка не превышала 0,1 мг/мл.
Раствор, содержащий повторно уложенный белок, при необходимости концентрировали перед заменой буфера на 10 мМ МЕ8, рН 6. Затем белок вносили в колонку, заполненную Сефарозой 8Р НР, уравновешенную 20 мМ МЕЗ рН 6. Белок элюировали с помощью линейного градиента 0-500 мМ ЖС1 в МЕЗ рН 6, используя объем, равный 10 объемам колонки. Для Ш-17Р градиент повышали до 600 мМ ЖС1. Для дополнительной очистки Ш-17 соответствующие фракции, полученные из колонки, заполненной Сефарозой ЗР НР, объединяли, концентрировали и разводили 20 мМ САР30 (рН 10) и вносили в колонку Мопо О, уравновешенную 20 мМ САР30. Белок элюировали с помощью линейного градиента 0250 мМ ЖС1 в 20 мМ САР30, используя объем, равный 20 объемам колонки. Фракции, содержащие ГО17, объединяли и нейтрализовали 1М МЕЗ, рН 6.
Пример 1. Получение нейтрализующего антитела к ГО-17.
Самок крыс линии Зргадие 1);ж1у иммунизировали рекомбинантным человеческим ГО-17 (который покупали у фирмы К & Ό зуз1етз). Крыс подвергали четырем иммунизациям, используя по 20 мкг ГО-17 в 100 мкл адъюванта Фрейнда. Антитело 225. которое связывается с человеческим ГО-17, выделяли с помощью методов, описанных в \Х0 04/051268. Гены вариабельной области тяжелой цепи (УН) и вариабельной области легкой цепи (УБ) антитела 225 выделяли и секвенировали с последующим клонированием с помощью ПЦР с обратной транскриптазой.
Создавали серии гуманизированных УБ- и УН-областей, используя акцепторные участки человече- 17 029953
ской У-области и изменяя количество донорских остатков в каркасных участках. Создавали 8 несущих трансплантаты УЬ-областей (§Ь1-8) и 9 несущих трансплантаты УН-областей (дН1-9), и гены создавали путем сборки олигонуклеотидов и ПЦР-мутагенеза.
Несущие трансплантаты последовательности легких цепей субклонировали в экспрессионном векторе человеческой легкой цепи рКН10.1, который содержит ДНК, кодирующую человеческую константную область С-каппа (аллотип Кт3). Несущие трансплантаты последовательности тяжелых цепей субклонировали в экспрессионном векторе человеческой гамма-4 цепи рУЪ§4Р РЬ, который содержит ДНК, кодирующую человеческую константную гамма-4-область, которая имеет стабилизирующую шарнирную область мутацию 8241Р (Апда1 и др., выше). Плазмидами совместно трансфектировали СНО-клетки и полученные антитела подвергали скринингу в отношении способности связываться с ГО-17 и нейтрализующей активности. Трансфекции СНО-клеток осуществляли, используя процедуру на основе ЫроГес1атшс™ 2000, согласно инструкциям производителя (фирма 1пУйтодеп, каталожный № 11668).
Отбирали наиболее оптимальный с позиций экспрессии, аффинности и нейтрализующей способности трансплантат (§Ь7§Н9), который обозначили как СА028_0496. Последовательности У-области этого антитела представлены на фиг. 1(а) и (б) и в 8ЕС ГО N0: 7 и 9 для легкой цепи (§Ь7) и тяжелой цепи (дН9) соответственно.
Акцепторный каркасный участок тяжелой цепи представлял собой последовательность 1-3 3-07 человеческой зародышевой линии УН3 с каркасным участком 4, выведенным из этой части человеческой РН-области зародышевой линии РН4. Акцепторный каркасный участок легкой цепи представлял собой последовательность УК1 2-1-(1) Ь4 человеческой зародышей линии с каркасным участком 4, выведенным из этой части человеческой РК-области зародышевой линии РК1.
Пример 2. Антитело СА028_0496 нейтрализует ГО-17 и ГО-17Р и гетеродимер ГО-17А/Р.
Клетки линии Не1а.
Определяли эффективность антитела СА028_0496 в отношении человеческого рекомбинантного ГО17 и человеческого рекомбинантного ГО-17Р в клетках линии Не1а и сравнивали с эффективностью антитела СГОР435 (\У0 06/054059). Клетки линии Не1а получали из банка клеток АТСС (АтСС ССЬ-2).
Клетки выращивали в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (ΌΜΕΜ), дополненной 10% фетальной бычьей сывороткой, пенициллином, гентамицином и глутамином. Высевали по 1х104 клеток в 96-луночные плоскодонные планшеты для культуры ткани. Клетки инкубировали в течение ночи и однократно отмывали буфером для анализа. Либо человеческий ГО-17А (25 нг/мл), либо человеческий ГО-17Р (125 нг/мл) инкубировали в присутствии фиксированной концентрации человеческого ΤΝΡα, эту смесь предварительно инкубировали с антителом СА028_0496 или антителом СИР435. Затем к клеткам линии Не1а добавляли цитокин плюс антитело и инкубировали клетки в течение ночи. Производство ГО-6 в супернатанте клеточной культуры было пропорционально количеству ГО-17А/ГО-17Р, добавленному к клеткам. Уровни человеческого ГО-6 оценивали с помощью ЕЫ8А и количественно определяли путем сравнения с известными стандартными концентрациями человеческого ГО-6.
Полученные данные (фиг. 2а и 2б) свидетельствуют о том, что антитело СА028_0496 эффективно нейтрализовало человеческий рекомбинантный ГО-17А, а также обладало определенной активностью в отношении человеческого ГО-17Р. Данные этих экспериментов свидетельствуют о том, что значение 1С50, характеризующее эффективность антитела СА028_0496 в отношении человеческого рекомбинантного ГО-17 (взятого в концентрации 25 нг/мл), составляло 43 нг/мл, а значение 1С50 в отношении рекомбинантного ГО-17Р (взятого в концентрации 125 нг/мл) составляло 1477 нг/мл.
Таким образом, эффективность антитела СА028_0496 в отношении человеческого рекомбинантного ГО-17 (0,78нМ) характеризовалась значением 1С50 0,29 М, в отношении человеческого рекомбинантного ГО-17Р (4,16 нМ) значением 1С50 10,18 нМ (рассчитано в пересчете на 1§С, принимая, что средняя молекулярная масса 1дС4 составляет 145000 и что ГО-17А и ГО-17Р представляют собой димеры).
Человеческие микроглиальные клетки.
Человеческие микроглиальные клетки (полученные от фирмы ТС8 Се11\уог1<5) высевали в плоскодонный 96-луночный планшет из расчета 5000 клеток на лунку в общем объеме 100 мкл и выдерживали в течение 24 ч, давая прикрепиться к пластику. В этот момент времени добавляли в трех повторностях титрованные растворы (5, 1, 0,2 и 0,04 мкг/мл) человеческого рекомбинантного ГО-17А, человеческого рекомбинантного ГО-17Р, рекомбинантного ГО-17Р макака-крабоеда и человеческого рекомбинантного гетеродимера ГО-17А/Р в присутствии 10 нг/мл человеческого рекомбинантного ΤΝΡα и без ΤΝΡα. Контрольные лунки не содержали стимулятор, содержали только ГО-17А (100 нг/мл), только ΤΝΡα и ГО-17А в сочетании с ΤΝΡα. Все цитокины добавляли в общем объеме 110 мкл/лунку, получая общий объем на лунку 210 мкл. В экспериментах, которые проводили с использованием антител, клетки высевали таким же образом. Через 24 ч добавляли антитела и цитокины в одно и то же время с получением указанных конечных концентраций в общем конечном объеме 200 мкл.
После дополнительной инкубации в течение 24 ч при 37°С супернатанты собирали и замораживали до -20°С и хранили до анализа. Для анализа супернатанты разводили в соотношении 1/10 и оценивали ГО6 с помощью набора для человеческого ГО-6 фирмы Μ8Ό согласно инструкциям производителя.
- 18 029953
Установлено, что все изученные изоформы 1Ь-17 обладали активностью в этом анализе, прежде всего в присутствии ΤΝΡα.
Эффективность антитела СА028_0496 в отношении человеческого рекомбинантного 1Ь-17Л и человеческого рекомбинантного 1Ь-17Р, рекомбинантного 1Ь-17Р макака-крабоеда и человеческого рекомбинантного гетеродимера 1Ь-17Л/Р в клетках человеческой микроглии оценивали в присутствии ΤΝΡα и сравнивали с эффективностью контрольного антитела и специфического в отношении 1Ь-17Л антитела с помощью описанного выше метода.
Контрольное антитело не обладало активностью в отношении всех изученных цитокинов.
Антитело СА028_0496 обладало ингибирующей активностью в отношении всех трех цитокинов 1Ь17, 1Ь-17Г и 1Ь-17А/Р, включая 1Ь-17Г макака-крабоеда, в то время как специфическое в отношении 1Ь17А антитело обладало ингибирующей активностью только в отношении 1Ь-17А и гетеродимера 1Ь-17 А/Р.
Пример 3. Аффинность антитела СА028_0496 (человеческие константные области 1§О4) к 1Ь-17А и 1Ь-17Р.
В1А (анализ бимолекулярного взаимодействия) осуществляли с помощью устройства Ыасоте 3000 (фирма В1асоте АВ).
Все эксперименты осуществляли при 25°С. Очищенный с помощью аффинной хроматографии Рсфрагмент козьего античеловеческого 1§О, специфического для Рс-фрагмента (фирма Нсккоп 1ттипоКекеагск), иммобилизовывали на сенсорном чипе СМ5 путем аминного сочетания до уровня захвата (иммобилизации) =6000 единиц ответа (КП). Буфер НВ8-ЕР (10 мМ НЕРЕ8 рН 7,4, 0,15 М ΝαΟ. 3 мМ ЭДТК, 0,005% 8игГас1ап1 Р20, фирма В1асоте АВ) использовали в качестве подвижного буфера со скоростью потока 10 мкл/мин. Инъекцию 10 мкл антитела СА028_0496 (1,81 мг/мл) использовали для захвата иммобилизованным античеловеческим 1§0-Рс. Человеческие изоформы 1Ь-17А и 1Ь-17 титровали в присутствии иммобилизованного антитела СА028_0496 с использованием двукратных разведений от 50нМ до менее 1нМ при скорости потока 30 мкл/мин. Поверхность регенерировали путем инъекции 30 мкл 40 мМ НС1 и последующей однократной инъекции 5 мкл 5 мМ №ГОН.
Получали с дублированием кривые связывания с учетом вычета основного уровня и анализировали с помощью программного обеспечения В1Аеуа1иа1юп (версия 3.2) согласно стандартным процедурам. Кинетические параметры определяли с помощью алгоритма аппроксимации.
Аффинность связывания антитела СА028_0496 с 1Ь-17А характеризовалась значением 16 пМ, а с 1Ь-17Р - 1750 пМ. Антитело СА028_0496 не связывалось с другими изоформами 1Ь-17 (1Ь-17В, С, И и Е). Таким образом, антитело СА028_0496 специфически связывалось с 1Ь-17А и 1Ь-17Р.
Пример 4. Аффинность антитела СА028_0496 (константные области мышиного 1§О1) к 1Ь-17А, 1Ь17Р макака-крабоеда и гетеродимера 1Ь-17А/Р.
В1А (анализ биомолекулярного взаимодействия) осуществляли с помощью устройства В1асоте 3000 (фирма В1асоте АВ).
Все эксперименты осуществляли при 25°С. Очищенный с помощью аффинной хроматографии Р(аЬ')2-фрагмент козьего антимышиного 1дО, специфического для Рс-фрагмента (фирма 1асккоп 1ттипоКекеатск), иммобилизовывали на сенсорном чипе СМ5 путем аминного сочетания до
уровня захвата (иммобилизации), составляющего =6000 единиц ответа (КИ). Буфер НВ8-ЕР (10 мМ ΗΕΡΕδ рН 7,4, 0,15 М №С1, 3 мМ ЭДТК, 0,005% 8игГас1ап1 Р20, фирма В1асоте АВ) использовали в качестве подвижного буфера со скоростью потока 10 мкл/мин. Инъекцию 10 мкл антитела СА028_0496 (4 мкг/мл) использовали для захвата иммобилизованным антимышиным 1§0-Рс. Человеческий 1Ь-17А, 1Ь17Р макака-крабоеда и гетеродимер А/Р титровали в присутствии иммобилизованного антитела СА028_0496 с использованием двукратных разведений от 25 нМ до менее 1 нМ при скорости потока 30 мкл/мин. Поверхность регенерировали путем инъекции при скорости потока 10 мкл/мин 10 мкл 40мМ НС1 с последующей инъекцией 5 мкл 5мМ ΝηΘΗ.
Получали с дублированием кривые связывания с учетом вычета основного уровня и анализировали с помощью программного обеспечения В1Аеуа1иа1юп (версия 3.2) согласно стандартным процедурам. Кинетические параметры определяли с помощью алгоритма аппроксимации.
Аффинность связывания антитела СА028_0496 с 1Ь-17А характеризовалась значением 21 пМ, с гетеродимером 1Ь-17А/Р - 116 пМ и с 1Ь-17Р макака-крабоеда - 1030 пМ.
Должно быть очевидно, что приведенные примеры даны только с целью лучшего понимания настоящего изобретения и не направлены на его ограничение, и что под объем приведенной ниже формулы изобретения подпадают модификации деталей. Предпочтительные признаки каждого варианта осуществления изобретения распространяются на каждый из других вариантов осуществления изобретения с учетом соответствующих изменений (тШабк тШапШк). Все публикации, включая (но не ограничиваясь только ими) патенты и заявки на патент, процитированные в настоящем описании, включены в него в качестве ссылки в той степени, как если бы было указано, что каждая индивидуальная публикация или заявка на патент была специально и индивидуально полностью включена в качестве ссылки.
- 19 029953
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> ЮСБ ФАРМА С.А.
АДатз, Ка1рП Рорр1еме11, АпДгеи Карескт, ЗЕерПеп
<120> Молекулы антител, которые связываются с 1Б-17А и 1Ь-17Р
<130> 00035-И001
<160> 20
<170> РаЕепЕ1п уегзъоп 3.3
<210> 1
<211> 10
<212> РКТ
<213> КаЕЕиз гаЕЕиз
<400> 1
О1у РПе ί ТПг РПе Зег Азр Туг Азп МеЕ А1а
1 5 10
<210> 2
<211> 17
<212> РКТ
<213> искусственная
<220>
<223> СЕКН2
<400> 2
ТПг 11е ί ТПг Туг С1и С1у Агд Азп ТПг Туг Туг Агд Азр Зег Ча1 Ьуз
1 5 10 15
О1у
<210> 3
<211> 16
<212> РКТ
<213> искусственная
<220>
<223> СЕКН3
<400> 3
Рго Рго ΐ О1п Туг Туг С1и О1у Зег 11е Туг Агд Ьеи Тгр РПе А1а Нтз
1 5 10 15
<210> 4
<211> 11
<212> РКТ
<213> искусственная
<220>
<223> СЬКЫ
<400> 4
Агд А1а ι Азр 61и Зег Ча1 ТПг ТПг Ьеи МеЕ Нтз
1 5 10
- 20 029953
<210> 5
<211> 7
<212> РКТ
<213> КаЕЕиз гаЕЕиз
<400> 5
Ьеи Уа1 Зег Азп Агд 61и Зег 1 5
<210> 6
<211> 9
<212> РКТ
<213> КаЕЕиз гаЕЕиз
<400> 6
Θ1π Θ1π ТЕг Тгр Зег Азр Рго Тгр ТЕг 1 5
<210> 7
<211> 108
<212> РКТ
<213> искусственная
<220>
<223> дЬ7
<400> 7
А1а 1 11е Θ1π Ьеи ТЕг 5 Θ1π Зег Рго Зег Зег 10 Ьеи Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
Азр Агд Уа1 ТЕг 11е ТЕг Суз Агд А1а Азр С1и Зег Уа1 ТЕг ТЕг Ьеи
20 25 30
МеЬ Низ Тгр Туг Θ1π Θ1π Ьуз Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг Ьеи Уа1 Зег Азп Агд С1и Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РЕе Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у ТЕг Азр РЕе ТЕг Ьеи ТЕг 11е Зег Зег Ьеи С1п Рго
65 70 75 80
С1и Азр РЕе А1а ТЕг Туг Туг Суз С1п С1п ТЕг Тгр Зег Азр Рго Тгр
85 90 95
ТЕг РЕе С1у Θ1π С1у ТЕг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 8
<211> 324
<212> ДНК
<213> искусственная
<220>
<223> дЬ7
- 21
029953
<400> 8
дссаБссадс Бдасссадад сссББссБсБ сБсадсдсса дБдБсддада сададБдасБ 60
аББассБдса дддсБдасда аадсдБдасс асаББдаБдс асБддБасса асадаадссБ 120
ддсааадссс ссаадсБссБ даБсБаБсБд дБББссааБс дддадБсБдд адБссссадс 180
аддББсадсд дсадБдддБс БддаасБдас БББасссБда сааБсБссБс асБссадссс 240
даадаБББсд ссассБасБа ББдссадсад асББддадсд асссББддас аБББддасад 300
ддсасаааад БддадаБсаа дсдБ 324
<210> 9
<211> 125
<212> РКТ
<213> искусственная
<220>
<223> дН9
<400> 9
С1и 1 Уа1 С1п ^еи Уа1 5 С1и Зег С1у С1у С1у 10 ^еи Уа1 С1п Рго С1у 15 С1у
Зег ^еи Агд ^еи Зег Суз А1а А1а Зег С1у РНе ТНг РНе Зег Азр Туг
20 25 30
Азп МеБ А1а Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у ^уз С1у ^еи С1и Тгр Уа1
35 40 45
А1а ТНг 11е ТНг Туг С1и С1у Агд Азп ТНг Туг Туг Агд Азр Зег Уа1
50 55 60
^уз С1у Агд РНе ТНг 11е Зег Агд Азр Азп А1а ^уз Азп Зег ^еи Туг
65 70 75 80
^еи С1п МеБ Азп Зег ^еи Агд А1а С1и Азр ТНг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Зег Рго Рго Θ1π Туг Туг С1и С1у Зег 11е Туг Агд ^еи Тгр РНе
100 105 110
А1а Нтз Тгр С1у Θ1π С1у ТНг ^еи Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120 125
<210> 10
<211> 375
<212> ДНК
<213> искусственная
<220>
<223> дН9
<400> 10
даддББсадс БсдББдааБс сддаддсдда сБсдБдсадс сБдддддсБс сББдсддсБд 60
адсБдсдсБд ссадБддсББ сасБББсадс даББасааБа БддссБдддБ дсдссаддсс 120
- 22 029953
ссаддсаадд дбсбддадбд ддбддссаса аббассбабд адддсадааа сасббаббас 180
сдддаббсад бдааадддсд абЬЬассабс адсадддаба абдсааадаа садбсбдбас 240
сбдсадабда асбсбсбдад адсбдаддас ассдсбдбсб асЬаббдбдс аадсссассс 300
садбасбабд адддсбсааб сбасадаббд Ьддбббдссс аббддддсса дддаасасбд 360
дбдассдбсб сдадс 375
<210> 11
<211> 214
<212> РКТ
<213> искусственная
<220>
<223> <ЗЬ7+константная область
<400> 11
А1а 1 11е С1п Ьеи ТЬг 5 С1п Зег Рго Зег Зег 10 Ьеи Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
Азр Агд Уа1 ТЬг 11е ТЬг Суз Агд А1а Азр С1и Зег Ла1 ТЬг ТЬг Ьеи
20 25 30
Меб Н1з Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг Ьеи Уа1 Зег Азп Агд С1и Зег С1у Ла1 Рго Зег Агд РЬе Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у ТЬг Азр РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи С1п Рго
65 70 75 80
С1и Азр РЬе А1а ТЬг Туг Туг Суз С1п С1п ТЬг Тгр Зег Азр Рго Тгр
85 90 95
ТЬг РЬе С1у С1п С1у ТЬг Ьуз Ла1 С1и 11е Ьуз Агд ТЬг Уа1 А1а А1а
100 105 110
Рго Зег Ла1 РЬе 11е РЬе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Ьеи Ьуз Зег С1у
115 120 125
ТЬг А1а Зег Ла1 Ла1 Суз Ьеи Ьеи Азп Азп РЬе Туг Рго Агд С1и А1а
130 135 140
Ьуз Уа1 С1п Тгр Ьуз Ла1 Азр Азп А1а Ьеи С1п Зег С1у Азп Зег С1п
145 150 155 160
С1и Зег Уа1 ТЬг С1и С1п Азр Зег Ьуз Азр Зег ТЬг Туг Зег Ьеи Зег
165 170 175
Зег ТЬг Ьеи ТЬг Ьеи Зег Ьуз А1а Азр Туг С1и Ьуз Низ Ьуз Уа1 Туг
180 185 190
А1а Суз С1и Уа1 ТЬг Низ С1п С1у Ьеи Зег Зег Рго Уа1 ТЬг Ьуз Зег
- 23
029953
195 200 205
РЬе Азп Агд С1у С1и Суз 210
<210> 12
<211> 234
<212> РКТ
<213> искусственная
<220>
<223> сигнал+дЬ7+константная область
<400> 12
Меб 1 Зег Уа1 Рго ТЬг 5 С1п Уа1 Ьеи
Азр А1а Агд Суз 20 А1а 11е С1п Ьеи
А1а Зег Уа1 35 С1у Азр Агд Уа1 ТЬг 40
Уа1 ТЬг 50 ТЬг Ьеи Меб Низ Тгр 55 Туг
Ьуз 65 Ьеи Ьеи 11е Туг Ьеи 70 Уа1 Зег
Агд РЬе Зег С1у Зег 85 С1у Зег С1у
Зег Ьеи С1п Рго 100 С1и Азр РЬе А1а
Зег Азр Рго 115 Тгр ТЬг РЬе С1у С1п 120
ТЬг Уа1 130 А1а А1а Рго Зег Уа1 135 РЬе
Ьеи 145 Ьуз Зег С1у ТЬг А1а 150 Зег Уа1
Рго Агд С1и А1а Ьуз 165 Уа1 С1п Тгр
С1у Азп Зег С1п 180 С1и Зег Уа1 ТЬг
Туг Зег Ьеи 195 Зег Зег ТЬг Ьеи ТЬг 200
Нтз Ьуз Уа1 Туг А1а Суз С1и Уа1
С1у Ьеи 10 Ьеи Ьеи Ьеи Тгр Ьеи 15 ТЬг
ТЬг 25 С1п Зег Рго Зег Зег 30 Ьеи Зег
11е ТЬг Суз Агд А1а 45 Азр С1и Зег
С1п С1п Ьуз Рго 60 С1у Ьуз А1а Рго
Азп Агд С1и 75 Зег С1у Уа1 Рго Зег 80
ТЬг Азр 90 РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е 95 Зег
ТЬг 105 Туг Туг Суз С1п С1п 110 ТЬг Тгр
С1у ТЬг Ьуз Уа1 С1и 125 11е Ьуз Агд
11е РЬе Рго Рго 140 Зег Азр С1и С1п
Уа1 Суз Ьеи 155 Ьеи Азп Азп РЬе Туг 160
Ьуз Уа1 170 Азр Азп А1а Ьеи С1п 175 Зег
С1и 185 С1п Азр Зег Ьуз Азр 190 Зег ТЬг
Ьеи Зег Ьуз А1а Азр 205 Туг С1и Ьуз
ТЬг Низ С1п С1у Ьеи Зег Зег Рго
- 24
029953
210 215 220
Уа1 ТНг Ьуз Зег РНе Азп Агд 61у 61и Суз 225 230
<210> 13
<211> 645
<212> ДНК
<213> искусственная
<220>
<223> дЬ7+константная область
<400> 13
дссабссадс бдасссадад сссббссбсб сбсадсдсса дбдбсддада сададбдасб 60
аббассбдса дддсбдасда аадсдбдасс асаббдабдс асбддбасса асадаадссб 120
ддсааадссс ссаадсбссб дабсбабсбд дбббссаабс дддадбсбдд адбссссадс 180
аддббсадсд дсадбдддбс бддаасбдас бббасссбда саабсбссбс асбссадссс 240
даадабббсд ссассбасба ббдссадсад асббддадсд асссббддас абббддасад 300
ддсасаааад бддадабсаа дсдбасддба дсддссссаб сбдбсббсаб сббсссдсса 360
бсбдабдадс адббдааабс бддаасбдсс бсбдббдбдб дссбдсбдаа баасббсбаб 420
сссадададд ссааадбаса дбддааддбд дабаасдссс бссаабсддд баасбсссад 480
дададбдбса сададсадда садсааддас адсассбаса дссбсадсад сасссбдасд 540
сбдадсааад садасбасда дааасасааа дбсбасдссб дсдаадбсас ссабсадддс 600
сбдадсбсдс ссдбсасааа дадсббсаас аддддададб дббад 645
<210> 14
<211> 705
<212> ДНК
<213> искусственная
<220>
<223> сигнал+дЬ7+константная область
<400> 14
абдбсадббс ссасасаддб дсбдддссбд сббсбдббдб ддсбсассда бдсбаддбдб 60
дссабссадс бдасссадад сссббссбсб сбсадсдсса дбдбсддада сададбдасб 120
аббассбдса дддсбдасда аадсдбдасс асаббдабдс асбддбасса асадаадссб 180
ддсааадссс ссаадсбссб дабсбабсбд дбббссаабс дддадбсбдд адбссссадс 240
аддббсадсд дсадбдддбс бддаасбдас бббасссбда саабсбссбс асбссадссс 300
даадабббсд ссассбасба ббдссадсад асббддадсд асссббддас абббддасад 360
ддсасаааад бддадабсаа дсдбасддба дсддссссаб сбдбсббсаб сббсссдсса 420
бсбдабдадс адббдааабс бддаасбдсс бсбдббдбдб дссбдсбдаа баасббсбаб 480
сссадададд ссааадбаса дбддааддбд дабаасдссс бссаабсддд баасбсссад 540
дададбдбса сададсадда садсааддас адсассбаса дссбсадсад сасссбдасд 600
сбдадсааад садасбасда дааасасааа дбсбасдссб дсдаадбсас ссабсадддс 660
- 25 029953
сбдадсбсдс ссдбсасааа дадсббсаас аддддададб дббад
<210> 15
<211> 452
<212> РКТ
<213> искусственная
<220>
<223> дН9+константаня область
<400> 15
705
С1и 1 Уа1 е1п Ьеи Уа1 5 <31и Зег <31у <31у <31у 10 Ьеи Уа1 <31п Рго <31у 15 О1у
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег <31у РЬе ТЬг РЬе Зег Азр Туг
20 25 30
Азп Меб А1а Тгр Уа1 Агд <31п А1а Рго <31у Ьуз О1у Ьеи <31и Тгр Уа1
35 40 45
А1а ТЬг 11е ТЬг Туг <31и <31у Агд Азп ТЬг Туг Туг Агд Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз <31у Агд РЬе ТЬг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Зег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи е1п Меб Азп Зег Ьеи Агд А1а <31и Азр ТЬг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Зег Рго Рго <31п Туг Туг <31и <31у Зег 11е Туг Агд Ьеи Тгр РЬе
100 105 110
А1а Низ Тгр <31у е1п <31у ТЬг Ьеи Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТЬг
115 120 125
Ьуз е1у Рго Зег Уа1 РЬе Рго Ьеи А1а Рго Суз Зег Агд Зег ТЬг Зег
130 135 140
С1и Зег ТЬг А1а А1а Ьеи <31у Суз Ьеи Уа1 Ьуз Азр Туг РЬе Рго <31и
145 150 155 160
Рго Уа1 ТЬг Уа1 Зег Тгр Азп Зег <31у А1а Ьеи ТЬг Зег <31у Уа1 Низ
165 170 175
ТЬг РЬе Рго А1а Уа1 Ьеи <31п Зег Зег <31у Ьеи Туг Зег Ьеи Зег Зег
180 185 190
Уа1 Уа1 ТЬг Уа1 Рго Зег Зег Зег Ьеи <31у ТЬг Ьуз ТЬг Туг ТЬг Суз
195 200 205
Азп Уа1 Азр Низ Ьуз Рго Зег Азп ТЬг Ьуз Уа1 Азр Ьуз Агд Уа1 <31и
210 215 220
Зег Ьуз Туг <31у Рго Рго Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго <31и РЬе Ьеи
- 26
029953
225 230 235 240
С1у С1у Рго Зег Уа1 РЬе Ьеи РЬе Рго Рго Ьуз Рго Ьуз Азр ТЬг Ьеи
245 250 255
Меб 11е Зег Агд ТЬг Рго С1и Уа1 ТЬг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег
260 265 270
С1п С1и Азр Рго С1и Уа1 С1п РЬе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и
275 280 285
Уа1 Низ Азп А1а Ьуз ТЬг Ьуз Рго Агд С1и С1и С1п РЬе Азп Зег ТЬг
290 295 300
Туг Агд Уа1 Уа1 Зег Уа1 Ьеи ТЬг Уа1 Ьеи Низ С1п Азр Тгр Ьеи Азп
305 310 315 320
С1у Ьуз С1и Туг Ьуз Суз Ьуз Уа1 Зег Азп Ьуз С1у Ьеи Рго Зег Зег
325 330 335
11е С1и Ьуз ТЬг 11е Зег Ьуз А1а Ьуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п
340 345 350
Уа1 Туг ТЬг Ьеи Рго Рго Зег С1п С1и С1и Меб ТЬг Ьуз Азп С1п Уа1
355 360 365
Зег Ьеи ТЬг Суз Ьеи Уа1 Ьуз С1у РЬе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1
370 375 380
С1и Тгр С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ьуз ТЬг ТЬг Рго
385 390 395 400
Рго Уа1 Ьеи Азр Зег Азр С1у Зег РЬе РЬе Ьеи Туг Зег Агд Ьеи ТЬг
405 410 415
Уа1 Азр Ьуз Зег Агд Тгр С1п С1и С1у Азп Уа1 РЬе Зег Суз Зег Уа1
420 425 430
Меб Низ С1и А1а Ьеи Низ Азп Низ Туг ТЬг С1п Ьуз Зег Ьеи Зег Ьеи
435 440 445
Зег Ьеи 61у Ьуз 450
<210> 16
<211> 471
<212> РКТ
<213> искусственная
<220>
<223> сигнал+дН9+константная область
<400> 16
Меб С1и Тгр Зег Тгр Уа1 РЬе Ьеи РЬе РЬе Ьеи Зег Уа1 ТЬг ТЬг С1у
- 27
029953
1 5 10 15
Уа1 Низ Зег С1и Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1и Зег С1у С1у С1у Ьеи Уа1 С1п
20 25 30
Рго С1у С1у Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег С1у РАе ТАг РАе
35 40 45
Зег Азр Туг Азп МеЬ А1а Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи
50 55 60
С1и Тгр Уа1 А1а ТАг 11е ТАг Туг С1и С1у Агд Азп ТАг Туг Туг Агд
65 70 75 80
Азр Зег Уа1 Ьуз С1у Агд РАе ТАг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп
85 90 95
Зег Ьеи Туг Ьеи С1п МеЬ Азп Зег Ьеи Агд А1а С1и Азр ТАг А1а Уа1
100 105 110
Туг Туг Суз А1а Зег Рго Рго С1п Туг Туг С1и С1у Зег 11е Туг Агд
115 120 125
Ьеи Тгр РАе А1а Низ Тгр С1у С1п С1у ТАг Ьеи Уа1 ТАг Уа1 Зег Зег
130 135 140
А1а Зег ТАг Ьуз С1у Рго Зег Уа1 РАе Рго Ьеи А1а Рго Суз Зег Агд
145 150 155 160
Зег ТАг Зег С1и Зег ТАг А1а А1а Ьеи С1у Суз Ьеи Уа1 Ьуз Азр Туг
165 170 175
РАе Рго С1и Рго Уа1 ТАг Уа1 Зег Тгр Азп Зег С1у А1а Ьеи ТАг Зег
180 185 190
С1у Уа1 Низ ТАг РАе Рго А1а Уа1 Ьеи С1п Зег Зег С1у Ьеи Туг Зег
195 200 205
Ьеи Зег Зег Уа1 Уа1 ТАг Уа1 Рго Зег Зег Зег Ьеи С1у ТАг Ьуз ТАг
210 215 220
Туг ТАг Суз Азп Уа1 Азр Низ Ьуз Рго Зег Азп ТАг Ьуз Уа1 Азр Ьуз
225 230 235 240
Агд Уа1 С1и Зег Ьуз Туг С1у Рго Рго Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго
245 250 255
С1и РАе Ьеи С1у С1у Рго Зег Уа1 РАе Ьеи РАе Рго Рго Ьуз Рго Ьуз
260 265 270
Азр ТАг Ьеи МеЬ 11е Зег Агд ТАг Рго С1и Уа1 ТАг Суз Уа1 Уа1 Уа1
275 280 285
- 28
029953
Азр Уа1 290 Зег С1п С1и Азр Рго 295 С1и Уа1 С1п РНе Азп 300 Тгр Туг Уа1 Азр
С1у Уа1 С1и Уа1 Низ Азп А1а Ьуз ТНг Ьуз Рго Агд С1и С1и С1п РНе
305 310 315 320
Азп Зег ТНг Туг Агд Уа1 Уа1 Зег Уа1 Ьеи ТНг Уа1 Ьеи Низ С1п Азр
325 330 335
Тгр Ьеи Азп С1у Ьуз С1и Туг Ьуз Суз Ьуз Уа1 Зег Азп Ьуз С1у Ьеи
340 345 350
Рго Зег Зег 11е С1и Ьуз ТНг 11е Зег Ьуз А1а Ьуз С1у С1п Рго Агд
355 360 365
С1и Рго С1п Уа1 Туг ТНг Ьеи Рго Рго Зег С1п С1и С1и МеН ТНг Ьуз
370 375 380
Азп С1п Уа1 Зег Ьеи ТНг Суз Ьеи Уа1 Ьуз С1у РНе Туг Рго Зег Азр
385 390 395 400
11е А1а Уа1 С1и Тгр С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ьуз
405 410 415
ТНг ТНг Рго Рго Уа1 Ьеи Азр Зег Азр С1у Зег РНе РНе Ьеи Туг Зег
420 425 430
Агд Ьеи ТНг Уа1 Азр Ьуз Зег Агд Тгр С1п С1и С1у Азп Уа1 РНе Зег
435 440 445
Суз Зег Уа1 МеН Низ С1и А1а Ьеи Низ Азп Низ Туг ТНг С1п Ьуз Зег
450 455 460
Ьеи Зег Ьеи Зег Ьеи С1у Ьуз
465 470
<210> 17
<211> 1963
<212> ДНК
<213> искусственная
<220>
<223> дН9+константная область
<400> 17
даддННсадс НсдННдааНс сддаддсдда сНсдНдсадс сНдддддсНс сННдсддсНд 60
адсНдсдсНд ссадНддсНН сасНННсадс даННасааНа НддссНдддН дсдссаддсс 120
ссаддсаадд дНсНддадНд ддНддссаса аННассНаНд адддсадааа сасННаННас 180
сдддаННсад Ндааадддсд аНННассаНс адсадддаНа аНдсааадаа садНсНдНас 240
сНдсадаНда асНсНсНдад адсНдаддас ассдсНдНсН асНаННдНдс аадсссассс 300
садНасНаНд адддсНсааН сНасадаННд НддНННдссс аННддддсса дддаасасНд 360
- 29
029953
дЕдассдЕсЕ сдадсдсЕЕс Еасааадддс ссаЕссдЕсЕ ЕсссссЕддс дсссЕдсЕсс 420
аддадсассЕ ссдададсас адссдсссЕд ддсЕдссЕдд ЕсааддасЕа сЕЕссссдаа 480
ссддЕдасдд ЕдЕсдЕддаа сЕсаддсдсс сЕдассадсд дсдЕдсасас сЕЕсссддсЕ 540
дЕссЕасадЕ ссЕсаддасЕ сЕасЕсссЕс адсадсдЕдд ЕдассдЕдсс сЕссадсадс 600
ЕЕдддсасда адассЕасас сЕдсаасдЕа даЕсасаадс ссадсаасас сааддЕддас 660
аадададЕЕд дЕдададдсс адсасаддда дддадддЕдЕ сЕдсЕддаад ссаддсЕсад 720
сссЕссЕдсс Еддасдсасс ссддсЕдЕдс адссссадсс садддсадса аддсаЕдссс 780
саЕсЕдЕсЕс сЕсасссдда ддссЕсЕдас сассссасЕс аЕдсссаддд ададддЕсЕЕ 840
сЕддаЕЕЕЕЕ ссассаддсЕ ссдддсадсс асаддсЕдда ЕдссссЕасс ссаддсссЕд 900
сдсаЕасадд ддсаддЕдсЕ дсдсЕсадас сЕдссаадад ссаЕаЕссдд даддасссЕд 960
ссссЕдассЕ аадсссассс саааддссаа асЕсЕссасЕ сссЕсадсЕс адасассЕЕс 1020
ЕсЕссЕссса даЕсЕдадЕа асЕсссааЕс ЕЕсЕсЕсЕдс ададЕссааа ЕаЕддЕсссс 1080
саЕдсссасс аЕдсссаддЕ аадссаассс аддссЕсдсс сЕссадсЕса аддсдддаса 1140
ддЕдсссЕад адЕадссЕдс аЕссадддас аддссссадс сдддЕдсЕда сдсаЕссасс 1200
ЕссаЕсЕсЕЕ ссЕсадсасс ЕдадЕЕссЕд дддддассаЕ садЕсЕЕссЕ дЕЕсссссса 1260
ааасссаадд асасЕсЕсаЕ даЕсЕсссдд ассссЕдадд ЕсасдЕдсдЕ ддЕддЕддас 1320
дЕдадссадд аадассссда ддЕссадЕЕс аасЕддЕасд ЕддаЕддсдЕ ддаддЕдсаЕ 1380
ааЕдссаада сааадссдсд ддаддадсад ЕЕсаасадса сдЕассдЕдЕ ддЕсадсдЕс 1440
сЕсассдЕсс Едсассадда сЕддсЕдаас ддсааддадЕ асаадЕдсаа ддЕсЕссаас 1500
аааддссЕсс сдЕссЕссаЕ сдадаааасс аЕсЕссааад ссаааддЕдд дасссасддд 1560
дЕдсдадддс сасаЕддаса даддЕсадсЕ сддсссассс ЕсЕдсссЕдд дадЕдассдс 1620
ЕдЕдссаасс ЕсЕдЕсссЕа садддсадсс ссдададсса саддЕдЕаса сссЕдссссс 1680
аЕсссаддад дадаЕдасса адаассаддЕ садссЕдасс ЕдссЕддЕса ааддсЕЕсЕа 1740
ссссадсдас аЕсдссдЕдд адЕдддадад сааЕдддсад ссддадааса асЕасаадас 1800
сасдссЕссс дЕдсЕддасЕ ссдасддсЕс сЕЕсЕЕссЕс Еасадсаддс ЕаассдЕдда 1860
саададсадд Еддсаддадд ддааЕдЕсЕЕ сЕсаЕдсЕсс дЕдаЕдсаЕд аддсЕсЕдса 1920
саассасЕас асасадаада дссЕсЕсссЕ дЕсЕсЕдддЕ ааа 1963
<210> 18
<211> 2020
<212> ДНК
<213> искусственная
<220>
<223> сигнал+дН9+константная область
<400> 18
аЕддааЕддЕ ссЕдддЕсЕЕ ссЕдЕЕЕЕЕс сЕЕЕсЕдЕса саассддддЕ дсасадсдад 60
дЕЕсадсЕсд ЕЕдааЕссдд аддсддасЕс дЕдсадссЕд ддддсЕссЕЕ дсддсЕдадс 120
ЕдсдсЕдсса дЕддсЕЕсас ЕЕЕсадсдаЕ ЕасааЕаЕдд ссЕдддЕдсд ссаддсссса 180
- 30 029953
ддсаадддбс бддадбдддб ддссасаабб ассбабдадд дсадааасас ббаббассдд 240
даббсадбда аадддсдабб бассабсадс адддабаабд сааадаасад бсбдбассбд 300
садабдаасб сбсбдададс бдаддасасс дсбдбсбасб аббдбдсаад сссассссад 360
басбабдадд дсбсаабсба садаббдбдд бббдсссабб ддддссаддд аасасбддбд 420
ассдбсбсда дсдсббсбас ааадддссса бссдбсббсс сссбддсдсс сбдсбссадд 480
адсассбссд ададсасадс сдсссбдддс бдссбддбса аддасбасбб ссссдаассд 540
дбдасддбдб сдбддаасбс аддсдсссбд ассадсддсд бдсасассбб сссддсбдбс 600
сбасадбссб саддасбсба сбсссбсадс адсдбддбда ссдбдсссбс садсадсббд 660
ддсасдаада ссбасассбд саасдбадаб сасаадссса дсаасассаа ддбддасаад 720
ададббддбд ададдссадс асадддаддд адддбдбсбд сбддаадсса ддсбсадссс 780
бссбдссбдд асдсассссд дсбдбдсадс сссадсссад ддсадсаадд сабдссссаб 840
сбдбсбссбс асссддаддс сбсбдассас сссасбсабд сссадддада дддбсббсбд 900
дабббббсса ссаддсбссд ддсадссаса ддсбддабдс сссбасссса ддсссбдсдс 960
абасаддддс аддбдсбдсд сбсадассбд ссаададсса бабссдддад дасссбдссс 1020
сбдассбаад сссассссаа аддссааасб сбссасбссс бсадсбсада сассббсбсб 1080
ссбсссадаб сбдадбаасб сссаабсббс бсбсбдсада дбссааабаб ддбсссссаб 1140
дсссассабд сссаддбаад ссаасссадд ссбсдсссбс садсбсаадд сдддасаддб 1200
дсссбададб адссбдсабс садддасадд ссссадссдд дбдсбдасдс абссассбсс 1260
абсбсббссб садсассбда дббссбдддд ддассабсад бсббссбдбб ссссссаааа 1320
сссааддаса сбсбсабдаб сбсссддасс ссбдаддбса сдбдсдбддб ддбддасдбд 1380
адссаддаад ассссдаддб ссадббсаас бддбасдбдд абддсдбдда ддбдсабааб 1440
дссаадасаа адссдсддда ддадсадббс аасадсасдб ассдбдбддб садсдбссбс 1500
ассдбссбдс ассаддасбд дсбдаасддс ааддадбаса адбдсааддб сбссаасааа 1560
ддссбсссдб ссбссабсда даааассабс бссааадсса ааддбдддас ссасддддбд 1620
сдадддссас абддасадад дбсадсбсдд сссасссбсб дсссбдддад бдассдсбдб 1680
дссаассбсб дбсссбасад ддсадссссд ададссасад дбдбасассс бдсссссабс 1740
ссаддаддад абдассаада ассаддбсад ссбдассбдс сбддбсааад дсббсбассс 1800
садсдасабс дссдбддадб дддададсаа бдддсадссд дадаасаасб асаадассас 1860
дссбсссдбд сбддасбссд асддсбссбб сббссбсбас адсаддсбаа ссдбддасаа 1920
дадсаддбдд саддадддда абдбсббсбс абдсбссдбд абдсабдадд сбсбдсасаа 1980
ссасбасаса садаададсс бсбсссбдбс бсбдддбааа 2020
<210> 19
<211> 286
<212> РКТ
<213> искусственная
<220>
- 31 029953
<223> гетеродимер 1Ь-17А/Р
<400> 19
Мер 1 С1у 11е ТЬг 11е 5 Рго Агд Азп Рго С1у 10 Суз Рго Азп Зег С1и 15 Азр
Ьуз Азп РЬе Рго Агд ТЬг Уа1 Мер Уа1 Азп Ьеи Азп 11е Низ Азп Агд
20 25 30
Азп ТЬг Азп ТЬг Азп Рго Ьуз Агд Зег Зег Азр Туг Туг Азп Агд Зег
35 40 45
ТЬг Зег Рго Тгр Азп Ьеи Низ Агд Азп С1и Азр Рго С1и Агд Туг Рго
50 55 60
Зег Уа1 11е Тгр С1и А1а Ьуз Суз Агд Низ Ьеи С1у Суз 11е Азп А1а
65 70 75 80
Азр С1у Азп Уа1 Азр Туг Низ Мер Азп Зег Уа1 Рго 11е С1п С1п С1и
85 90 95
11е Ьеи Уа1 Ьеи Агд Агд С1и Рго Рго Низ Суз Рго Азп Зег РЬе Агд
100 105 110
Ьеи С1и Ьуз 11е Ьеи Уа1 Зег Уа1 С1у Суз ТЬг Суз Уа1 ТЬг Рго 11е
115 120 125
Уа1 Низ Низ Уа1 А1а С1у С1у С1у С1у Зег С1у С1у С1у С1у Зег С1у
130 135 140
С1у С1у С1у Зег С1у С1у С1у С1у Зег Агд Ьуз 11е Рго Ьуз Уа1 С1у
145 150 155 160
Низ ТЬг РЬе РЬе С1п Ьуз Рго С1и Зег Суз Рго Рго Уа1 Рго С1у С1у
165 170 175
Зег Мер Ьуз Ьеи Азр 11е С1у 11е 11е Азп С1и Азп С1п Агд Уа1 Зег
180 185 190
Мер Зег Агд Азп 11е С1и Зег Агд Зег ТЬг Зег Рго Тгр Азп Туг ТЬг
195 200 205
Уа1 ТЬг Тгр Азр Рго Азп Агд Туг Рго Зег С1и Уа1 Уа1 С1п А1а С1п
210 215 220
Суз Агд Азп Ьеи С1у Суз 11е Азп А1а С1п С1у Ьуз С1и Азр 11е Зег
225 230 235 240
Мер Азп Зег Уа1 Рго 11е С1п С1п С1и ТЬг Ьеи Уа1 Уа1 Агд Агд Ьуз
245 250 255
Низ С1п С1у Суз Зег Уа1 Зег РЬе С1п Ьеи С1и Ьуз Уа1 Ьеи Уа1 ТЬг
260 265 270
- 32 029953
ναι Θίγ Суз тлг Суз ναι тьг Рго ναι 11е Ηΐ3 Ηί3 ναι Θ1η
275 280 285
<210> 20
<211> 134
<212> РКТ
<213> искусственная
<220>
<223> 1Ь-17Р макака-крабоеда
<400> 20
Меб 1 Агд Ьуз 11е Рго 5 Ьуз Уа1 С1у Низ ТЬг 10 РЬе РЬе Θ1η Ьуз Рго 15 С1и
Зег Су3 Рго Рго Уа1 Рго С1и С1у Зег Меб Ьуз Ьеи Азр ТЬг С1у 11е
20 25 30
11е Азп С1и Азп Θ1η Агд Уа1 Зег Меб Зег Агд Азп 11е С1и Зег Агд
35 40 45
Зег ТЬг Зег Рго Тгр Азп Туг ТЬг Уа1 ТЬг Тгр Азр Рго Азп Агд Туг
50 55 60
Рго Зег С1и Уа1 Уа1 Θ1η А1а Θ1η Суз Ьуз Низ Ьеи С1у Суз 11е Азп
65 70 75 80
А1а Θ1η С1у Ьуз С1и Азр 11е Зег Меб Азп Зег Уа1 Рго 11е Θ1η Θ1η
85 90 95
С1и ТЬг Ьеи Уа1 Ьеи Агд Агд Ьуз Низ Θ1η С1у Суз Зег Уа1 Зег РЬе
100 105 110
Θ1η Ьеи С1и Ьуз Уа1 Ьеи Уа1 ТЬг Уа1 С1у Суз ТЬг Суз Уа1 ТЬг Рго
115 120 125
Уа1 11е Низ Низ Уа1 Θ1η
130

Claims (18)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Нейтрализующее антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которое(ый) связывается с человеческим 1Ь-17А или 1Ь-17Р и включает тяжелую цепь и легкую цепь, где вариабельный домен тяжелой цепи содержит последовательность, представленную в §ЕЦ ГО N0: 9, и вариабельный домен легкой цепи содержит последовательность, представленную в §ЕЦ ГО N0: 7, или последовательность, по меньшей мере на 95% идентичную ей, и где аффинность антитела к связыванию ГО-17А характеризуется величиной менее 20 пМ, а аффинность антитела к связыванию с ГО-17Р характеризуется величиной менее 2 нМ.
  2. 2. Нейтрализующее антитело по п.1, имеющее тяжелую цепь, которая содержит последовательность, представленную в §ЕЦ ГО N0: 9, и легкую цепь, которая содержит последовательность, представленную в §ЕЦ ГО N0: 7.
  3. 3. Нейтрализующее антитело по п.2, которое связывается с человеческим ГО-17А и человеческим ГО-17Р, имеет тяжелую цепь, включающую последовательность в §ЕЦ ГО N0: 15, и легкую цепь, вклю- 33 029953
    чающую последовательность. представленную в 8ЕЦ ГО NО: 11.
  4. 4. Нейтрализующее антитело по п.1. где фрагмент антитела представляет собой домен антитела. РаЪ. РаЪ'. Р(аЪ')2. ксРу или его эпитопсвязывающий фрагмент.
  5. 5. Нейтрализующее антитело по п.1. где антитело или его фрагмент представляет собой антитело с привитыми СОК.
  6. 6. Антитело по одному из пп.1-5. где антитело или его фрагмент конъюгировано/конъюгирован с одной или несколькими эффекторной(ыми) молекулой(ами).
  7. 7. Выделенная последовательность ДНК. кодирующая тяжелую и легкую цепи антитела по одному из пп.1-5.
  8. 8. Клонирующий или экспрессионный вектор. содержащий одну или несколько последовательностей ДНК по п.7.
  9. 9. Вектор по п.8. где вектор содержит последовательности. представленные в 8ЕЦ ГО NО: 14 и 8ЕЦ ГО Ш: 18.
  10. 10. Клетка-хозяин для экспрессии антитела по любому из пп.1-5. содержащая:
    ί) последовательность ДНК. кодирующую тяжелую цепь указанного антитела. и ίί) последовательность ДНК. кодирующую легкую цепь указанного антитела.
  11. 11. Клетка-хозяин по п.10. включающая один или несколько клонирующих или экспрессионных векторов по п.8 или 9.
  12. 12. Способ получения антитела по одному из пп.1-5. включающий культивирование клетки-хозяина по п.10 и выделение антитела.
  13. 13. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики патологического нарушения. которое опосредуется ГО-17А и/или ГО-17Р или которое ассоциировано с повышенным уровнем ГО-17А или ГО-17Р. содержащая антитело по любому из пп.1-5 в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами. разбавителями или носителями.
  14. 14. Фармацевтическая композиция по п.13. дополнительно содержащая антитело к ΤΝΡ.
  15. 15. Применение антитела по одному из пп.1-5 для лечения или профилактики патологического нарушения. которое опосредуется ГО-17А и/или ГО-17Р или которое ассоциировано с повышенным уровнем ГО-17А или ГО-17Р.
  16. 16. Применение по п.15. где патологическое состояние выбирают из группы. включающей инфекции (вирусные. бактериальные. грибные и паразитарные). эндотоксический шок. ассоциированный с инфекцией. артрит. ревматоидный артрит. астму. воспаление тазовых органов. болезнь Альцгеймера. болезнь Крона. воспалительное заболевание кишечника. неспецифический язвенный колит. болезнь Пейрони. целикарию. болезнь желчного пузыря. пилонидальную болезнь. перитонит. псориаз. васкулит. спайки. связанные с хирургическим вмешательством. инсульт. диабет типа I. артрит Лайма. менингоэнцефалит. опосредумые иммунной системой воспалительные нарушения центральной и периферической нервной системы. такие как рассеянный склероз и синдром Гийена-Барре. другие аутоиммунные нарушения. панкреатит. травму (хирургическое вмешательство). реакцию трансплантат против хозяина. отторжение трансплантата. рак (как плотные опухоли. такие как меланомы. гепатобластомы. саркомы. плоскоклеточные карциномы. переходно-клеточные виды рака. различные виды рака яичника. так и гематологические злокачественные заболевания и. в частности. острый миелолейкоз. хронический миелолейкоз. рак желудка и рак ободочной кишки). болезни сердца. включая ишемические заболевания. такие как инфаркт миокарда. а также атеросклероз. внутрисосудистую коагуляцию. резорбцию кости. остеопороз. периодонтит и гипохлоргидрию.
  17. 17. Применение фармацевтической композиции по п.13 или 14 для лечения или профилактики патологического нарушения. которое опосредуется ГО-17А и/или 1Б-17Р или которое ассоциировано с повышенным уровнем ГО-17А или ГО-17Р.
  18. 18. Применение по п.17. где патологическое состояние выбирают из группы. включающей инфекции (вирусные. бактериальные. грибные и паразитарные). эндотоксический шок. ассоциированный с инфекцией. артрит. ревматоидный артрит. астму. воспаление тазовых органов. болезнь Альцгеймера. болезнь Крона. воспалительное заболевание кишечника. неспецифический язвенный колит. болезнь Пейрони. целикарию. болезнь желчного пузыря. пилонидальную болезнь. перитонит. псориаз. васкулит. спайки. связанные с хирургическим вмешательством. инсульт. диабет типа I. артрит Лайма. менингоэнцефалит. опосредумые иммунной системой воспалительные нарушения центральной и периферической нервной системы. такие как рассеянный склероз и синдром Гийена-Барре. другие аутоиммунные нарушения. панкреатит. травму (хирургическое вмешательство). реакцию трансплантат против хозяина. отторжение трансплантата. рак (как плотные опухоли. такие как меланомы. гепатобластомы. саркомы. плоскоклеточные карциномы. переходно-клеточные виды рака. различные виды рака яичника. так и гематологические злокачественные заболевания и. в частности. острый миелолейкоз. хронический миелолейкоз. рак желудка и рак ободочной кишки). болезни сердца. включая ишемические заболевания. такие как инфаркт миокарда. а также атеросклероз. внутрисосудистую коагуляцию. резорбцию кости. остеопороз. периодонтит и гипохлоргидрию.
    - 34 029953
    (а) Вариабельная область легкой цепи антитела СА028 496 (ЗЕ() ГО N0:7) АЮЬТСЗРЗЗЬЗАЗУСОКУПТСЕАОЕЗУТТЬМНМУООКРСКАРКЬЫУЬУЗЫКЕЗСУРЗЕР 3Ο5Ο3σΤΟΕΤΕΤΙ33Ε0ΡΕΌΡΑΤΥΥ0<2<2ΤΝ3ϋΡΝΤΡΟ<2σΤΚνΕΙΚΚ
    (б) Вариабельная область тяжелой цепи антитела СА028 496 (8Е() ГО N0:9) ЕМ0ЬУЕ5СССЬУ<2РСе5ЬКЬ5САА5СРТР5ОУЫМАШ7К0АРСЗКОЬЕЮУАТ1ТУЕ<ЗК11ТУ ΥΚΌ5νΚ(3ΚΡΤΙ3ΚΌΝΑΚΝ3ΕΥΕ0ΜΝ3ΕΚΑΕΟΤΑνΥΥΟΑ3ΡΡζ)ΥΥΕΟ3ΙΥΡΕΝΡΑΗΝ(30Ο ТЬУТУЗЗ
    (в)
    ΟϋΚΗΙ: ΟΡΤΡ3ΌΥΝΜΑ (3Εζ) ГО N0:1)
    ΟϋΚΗ2: ΤΙΤΥΕ<3ΚΝΤΥΥΡΌ3νκα (ЗЕ() ГО N0:2)
    0ϋΚΗ3: ΡΡ<2ΥΥΕΟ3ΙΥΚΙΛΊΡΑΗ (3Εζ) ГО N0:3)
    ΟϋΚΕΙ: ЕАОЕЗУТТЬМН (3Ε<3 ГО N0:4)
    ΟϋΚΕ2: ЬУЗЫЕЕЗ (3Ε(} ГО N0:5)
    ΟϋΚΙΑ: <2<2ΤΝ3ϋΡΝΤ (3Εζ) ГО N0:6)
    (г) Легкая цепь антитела СА028 496 (ЗЕ<2 ГО N0:11)
    А10ЬТОЗРЗЗЬЗАЗУСПРУТ1ТСРАОЕЗУТТЬМНМУООКРСКАРКЬЫУЬУЗЫЕЕЗСУР
    ЗКРЗСЗСЗСТОРТЬТ133Ь<2РЕОРАТУУС<20ТИЗОРМТРС<2СТКУЕ1ККТУААР5УР1Р
    РРЗОЕСЪКЗСТАЗУУСЬЬЫЫРУРЕЕАКУСИКУЕЫАЬОЗСЫЗОЕЗУТЕСОЗКЕЗТУЗЬЗЗ
    ТЬТЬЗКАОУЕКНКУУАСЕУТНОСЬЗЗРУТКЗРЫЕСЕС
    (д) Тяжелая цепь антитела СА028_496 (ЗЕ<2> ГО N0:15)
    ЕУ0ЬУЕЗСбеЬУ0РСС5ЬКЬ5САА5СРТР5ВУЫМАЮУК0АРСКСЬЕЮУАТ1ТУЕСКЫТУ
    ΥΚΏ3νΚ(3ΚΡΤΙ8ΚϋΝΑΚΝ5ΕΥΙι0ΜΝ8ΕΚΑΕΟΤΑνΥΥΟΑ3ΡΡ0ΥΥΕ63ΙΥΚΕΝΡΑΗΝΟ0σ
    ТЬУТУЗЗАЗТКСРЗУРРЬАРСЗЕЗТЗЕЗТААЬССЬУКОУРРЕРУТУЗМЫЗСАЬТЗСУНТ
    РРАУЬСЗЗСЬУЗЬЗЗУУТУРЗЗЗЬСТКТУТСЫУОНКРЗЫТКУОКЕУЕЗКУСРРСРРСРА
    ΡΕΡΕΟΟΡ3νΡΕΡΡΡΚΡΚϋΤΕΜΙ3ΕΤΡΕνΤ0νννΌν30ΕΌΡΕν0ΡΝΝΥνϋθνΕνΗΝΑΚΤΚ
    ΡΚΕΕ0ΡΝ3ΤΥΚνν3νΕΤνΕΗΩϋΝΕΝΟΚΕΥΚΟΚν5ΝΚΟΕΡ53ΙΕΚΤΙ3ΚΑΚΟ<2ΡΚΕΡ<2νΥ
    ΤΙιΡΡ3ζ)ΕΕΜΤΚΝζ)ν5ΙιΤ0ΙΛ7ΚΟΡΥΡ5ΟΙΑνΕΐ"ίΕ3Ν<3ζ)ΡΕΝΝΥΚΤΤΡΡνΐιΌ30Ο5ΡΡΙιΥ3
    КЬТУОКЗЕИ0ЕСЖУРЗСЗУМНЕАЬНЫНУТ<2К5Ь5Ь5ЬСК
    (е) ДНК, кодирующая легкую цепь антитела СА028_496, включая сигнальную последовательность (8Е() ГО N0:14)
    аДдДсадДДсссасасаддДдсДдддссДдсДДсДдДДдДддсДсассдаДдсДаддДд
    ДдссаДссадсДдасссададсссДДссДсДсДсадсдссадДдДсддадасададДда
    сДаДДассДдсадддсДдасдааадсдДдассасаДДдаДдсасДддДассаасадаад
    ссДддсааадсссссаадсДссДдаДсДаДсДддДДДссааДсдддадДсДддадДссс
    садсаддДДсадсддсадДдддДсДддаасДдасДДДасссДдасааДсДссДсасДсс
    адсссдаадаДДДсдссассДасДаДДдссадсадасДДддадсдасссДДддасаДДД
    ддасадддсасаааадДддадаДсаадсдДасддДадсддссссаДсДдДсДДсаДсДД
    сссдссаДсДдаДдадсадДДдаааДсДддаасДдссДсбдДДдДдДдссДдсДдааДа
    асДДсДаДсссадададдссааадДасадДддааддДддаДаасдсссДссааДсдддД
    аасДсссаддададДдбсасададсаддасадсааддасадсассДасадссДсадсад
    сасссДдасдсДдадсааадсадасДасда
    - 35 029953
    дааасасааадЦсЕасдссЕдсдаадЪсасссаЕсадддссЪдадсЪсдсссдЕсасаа
    ададсЬЕсаасаддддададкдЪЕад
    (ж) ДНК, кодирующая тяжелую цепь антитела СА028 496, включая сигнальную последовательность (5Е<3 ГО N0:18)
    аЦддааЦддЕссЦдддЦсЪЦссЪдЪЕЪЕЪссЪЬЬсЕдЕсасаассддддЪдсасадсда
    ддЦЦсадсЦсдЦЦдааЦссддаддсддасЕсдЦдсадссЦдддддсЕссЦЦдсддсРда
    дсЕдсдсЦдссадЦддсЦЦсасЦЦЦсадсдаЦЦасааЦаЦддссЪдддЦдсдссаддсс
    ссаддсаадддЕсЕддадЕдддЬддссасааШассЦаЦдадддсадааасасЦЦаЦЦа
    ссдддаФ^садЪдааадддсдаЪЪЪассаРсадсадддаЕааЕдсааадаасадЕсЕдЦ
    ассЦдсадаЦдаасЪсЦсЬдададсЦдаддасассдсЪдЦсЕасЦаЦЦдЦдсаадссса
    ссссадЕасЕаЕдадддсЦсааЪсЦасадаЦЦдЬддЦЦЦдсссаЦЦддддссадддаас
    асЦддЪдассдЪсСсдадсдсСЪсЪасааадддсссаЪссдЕсЪЕсссссЕддсдсссЕ
    дсЕссаддадсассЦссдададсасадссдсссЦдддсЬдссЪддЕсааддасЕасЦЪс
    сссдаассддЕдасддЕдЦсдЦддаасЕсаддсдсссЦдассадсддсдЦдсасассЬЕ
    сссддсЕдЕссЕасадЪссЕсаддасЁсЦасЦсссЦсадсадсдЬддЕдассдЬдсссЦ
    ссадсадсЕЪдддсасдаадассЕасассЪдсаасдЦадаЦсасаадсссадсаасасс
    ааддЦддасаадададЦрддЦдададдссадсасадддадддадддЕдЬсЬдсЦддаад
    ссаддсбсадсссЕссЬдссЦддасдсассссддсЕдбдсадссссадсссадддсадс
    ааддсаЕдссссаЦсЁдЦсЪссЪсасссддаддссЦсЪдассассссасЕсаЦдсссад
    ддададддЕсЦрсЪддаСЪЪЪЪссассаддсЪссдддсадссасаддсЪддаЕдссссС
    ассссаддсссЪдсдсабасаддддсаддЕдсЪдсдсЕсадассЕдссаададссабаР
    ссдддаддасссЦдссссЪдассЕаадсссассссаааддссааасЕсЦссасЦсссЦс
    адсЕсадасассЦЦсЕсЦссЦсссадаЕсЦдадЦаасЦсссааЦсЪЪсЦсЕсЦдсадад
    ЕссаааЕаЕддЦсссссаЕдсссассаЕдсссаддЦаадссаасссаддссЪсдсссЬс
    садсЦсааддсдддасаддЦдсссЕададЬадссЕдсаЪссадддасаддссссадссд
    ддЦдсЦдасдсаЦссассЦссаЪсЕсЦЦссЦсадсассЦдадЕЦссЦддддддассаЕс
    адЦсЦЦссЦдЦЦссссссаааасссааддасасЕсЦсаЪдаЦсЕсссддассссЕдадд
    СсасдЬдсдЕддЦддеддасдбдадссаддаадассссдаддЕссадббсаасСддбас
    дЦддаЦддсдЦддаддЪдсаЦааЪдссаадасааадссдсдддаддадсадЦЕсаасад
    сасдЦассдЬдЪддЦсадсдЕссЬсассдЦссЪдсассаддасЪддсЪдаасддсаадд
    адЕасаадЕдсааддЦсЦссаасаааддссЕсссдЦссЁссаЦсдадаааассаЬсЕсс
    ааадссаааддРдддасссасддддЦдсдадддссасаЕддасададдЦсадсЕсддсс
    сасссЦсЦдсссЕдддадЕдассдсЕдЕдссаассЕсЦдЬсссЕасадддсадссссда
    дадссасаддЦдЦасасссЦдсссссаЕсссаддаддадаЦдассаадаассаддЦсад
    ссЦдассЦдссЦддЕсаааддсЦЦсЕассссадсдасаЕсдссдЦддадЦдддададса
    аЕдддсадссддадаасаасЕасаадассасдссЪсссдЪдсЕддасбссдасддсЕсс
    ЕЪсЕЕссЕсЕасадсаддсЕаассдбддасаададсаддЪддсаддаддддааЕдЪсЕЕ
    сЦсаЦдсЦссдЦдаЦдсаЦдаддсЦсЕдсасаассасЦасасасадаададссЪсЕссс
    ЦдЬсЕсЦдддЦааа
EA200900492A 2006-10-18 2007-10-18 Молекулы антител, которые связываются с il-17a и il-17f EA029953B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB0620729.4A GB0620729D0 (en) 2006-10-18 2006-10-18 Biological products
PCT/GB2007/003983 WO2008047134A2 (en) 2006-10-18 2007-10-18 Antibody molecules which bind il-17a and il-17f

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200900492A1 EA200900492A1 (ru) 2009-10-30
EA029953B1 true EA029953B1 (ru) 2018-06-29

Family

ID=37507977

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200900492A EA029953B1 (ru) 2006-10-18 2007-10-18 Молекулы антител, которые связываются с il-17a и il-17f

Country Status (27)

Country Link
US (6) US8303953B2 (ru)
EP (3) EP3524623A1 (ru)
JP (4) JP2010506580A (ru)
KR (1) KR20090078355A (ru)
CN (1) CN101589061B (ru)
AU (1) AU2007311689B2 (ru)
BR (1) BRPI0717768B8 (ru)
CA (1) CA2666458C (ru)
CO (1) CO6180467A2 (ru)
CY (2) CY1117963T1 (ru)
DK (2) DK2076539T3 (ru)
EA (1) EA029953B1 (ru)
ES (2) ES2588596T3 (ru)
GB (1) GB0620729D0 (ru)
HR (2) HRP20161069T1 (ru)
HU (2) HUE043667T2 (ru)
IL (1) IL198061B (ru)
LT (1) LT2514764T (ru)
MX (1) MX2009003973A (ru)
PL (2) PL2514764T3 (ru)
PT (2) PT2514764T (ru)
RS (1) RS55031B1 (ru)
SG (1) SG175652A1 (ru)
SI (2) SI2514764T1 (ru)
TR (1) TR201907599T4 (ru)
WO (1) WO2008047134A2 (ru)
ZA (1) ZA200902460B (ru)

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ544317A (en) 2003-07-08 2009-05-31 Genentech Inc IL-17 A/F heterologous polypeptides and therapeutic uses thereof
US7790163B2 (en) 2006-03-10 2010-09-07 Zymogenetics, Inc. Antibodies that bind both IL-17A and IL-17F and methods of using the same
US7910703B2 (en) 2006-03-10 2011-03-22 Zymogenetics, Inc. Antagonists to IL-17A, IL-17F, and IL-23P19 and methods of use
US20070218065A1 (en) 2006-03-10 2007-09-20 Jaspers Stephen R Antibodies that bind both il-17a and il-17f and methods of using the same
GB0612928D0 (en) 2006-06-29 2006-08-09 Ucb Sa Biological products
GB0620729D0 (en) 2006-10-18 2006-11-29 Ucb Sa Biological products
MX2009011763A (es) 2007-04-30 2009-12-11 Interdigital Tech Corp Verificacion y deteccion de error de señalizacion de retroalimentacion en sistemas de comunicacion inalambrica mimo.
GB0807413D0 (en) * 2008-04-23 2008-05-28 Ucb Pharma Sa Biological products
KR101508086B1 (ko) * 2008-05-05 2015-04-07 노비뮨 에스 에이 항-ｉｌ-１７ａ／ｉｌ-１７ｆ 교차-반응성 항체 및 그의 사용 방법
US8790642B2 (en) 2008-08-29 2014-07-29 Genentech, Inc. Cross-reactive and bispecific anti-IL-17A/F antibodies
EP2356140A2 (en) * 2008-10-07 2011-08-17 Novimmune Sa Il-17-mediated transfection methods
EP2810652A3 (en) 2009-03-05 2015-03-11 AbbVie Inc. IL-17 binding proteins
RU2605318C2 (ru) 2009-05-05 2016-12-20 Новиммун С.А. Анти-il-17f антитела и способы их применения
RU2012149227A (ru) 2010-05-20 2014-06-27 Аблинкс Нв Биологические материалы, относящиеся к her3
GB201100282D0 (en) 2011-01-07 2011-02-23 Ucb Pharma Sa Biological methods
US10208349B2 (en) 2011-01-07 2019-02-19 Ucb Biopharma Sprl Lipocalin 2 as a biomarker for IL-17 inhibitor therapy efficacy
ES2632583T3 (es) 2011-01-14 2017-09-14 Ucb Biopharma Sprl Anticuerpo que se une a IL-17A e IL-17F
BR112013020025A2 (pt) 2011-02-08 2017-03-21 Merck Patent Gmbh derivados de aminoestatina para o tratamento de artrose
WO2012125680A1 (en) * 2011-03-16 2012-09-20 Novartis Ag Methods of treating vasculitis using an il-17 binding molecule
US20140105855A1 (en) * 2011-04-06 2014-04-17 Kenan Christopher Garcia Structural based design of il-17 dominant negative mutants
UA117218C2 (uk) * 2011-05-05 2018-07-10 Мерк Патент Гмбх Поліпептид, спрямований проти il-17a, il-17f та/або il17-a/f
IN2014DN09417A (ru) 2012-05-10 2015-07-17 Bioatla Llc
ES2685553T3 (es) * 2012-06-12 2018-10-09 Orega Biotech Antagonistas de isoformas de IL-17 y sus usos
CN104231080B (zh) * 2013-03-15 2019-07-02 中国医学科学院药物研究所 全人源抗人白介素17a单链抗体
GB201310544D0 (en) 2013-06-13 2013-07-31 Ucb Pharma Sa Obtaining an improved therapeutic ligand
WO2015070697A1 (zh) * 2013-11-18 2015-05-21 上海恒瑞医药有限公司 Il-17a结合物及其用途
TWI713453B (zh) 2014-06-23 2020-12-21 美商健生生物科技公司 干擾素α及ω抗體拮抗劑
WO2016123329A2 (en) * 2015-01-28 2016-08-04 Genentech, Inc. Gene expression markers and treatment of multiple sclerosis
CN108251431B (zh) 2015-03-05 2020-12-08 北京百特美博生物科技有限公司 双载体系统及其用途
MX2018005031A (es) * 2015-10-27 2018-06-13 Ucb Biopharma Sprl Metodos de tratamiento con anticuerpos anti interleucina 17a/17f (il-17a/f).
EA201990673A1 (ru) * 2016-09-14 2019-08-30 Бэйцзин Ханми Фарм. Ко., Лтд. Антитела, специфически связывающиеся с il-17a, и их функциональные фрагменты
GB201719447D0 (en) * 2017-11-23 2018-01-10 Ucb Biopharma Sprl Pharmaceutical composition
AU2021296436A1 (en) 2020-06-23 2023-02-02 Novartis Ag Methods of treating Thyroid Eye Disease and Graves' Orbitopahy using Interleukin-17 (IL-17) antagonists
CN112390890B (zh) * 2020-11-06 2022-06-24 江苏荃信生物医药股份有限公司 一种定量检测血清中抗人白介素17单克隆抗体含量的酶联免疫分析方法
WO2024028436A1 (en) * 2022-08-04 2024-02-08 The University Of Birmingham Novel interleukin-17a (il-17a)-derived peptide and neutralizing antibody (ab17-ipl-1)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005010044A2 (en) * 2003-07-08 2005-02-03 Genentech, Inc. Il-17 a/f heterologous polypeptides and therapeutic uses thereof
WO2006088833A2 (en) * 2005-02-14 2006-08-24 Wyeth Interleukin-17f antibodies and other il-17f signaling antagonists and uses therefor
WO2007106769A2 (en) * 2006-03-10 2007-09-20 Zymogenetics, Inc. Antibodies that bind both il-17a and il-17f and methods of using the same

Family Cites Families (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4741900A (en) 1982-11-16 1988-05-03 Cytogen Corporation Antibody-metal ion complexes
GB8422238D0 (en) 1984-09-03 1984-10-10 Neuberger M S Chimeric proteins
DK336987D0 (da) 1987-07-01 1987-07-01 Novo Industri As Immobiliseringsmetode
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
GB8719042D0 (en) 1987-08-12 1987-09-16 Parker D Conjugate compounds
GB8720833D0 (en) 1987-09-04 1987-10-14 Celltech Ltd Recombinant dna product
HU208610B (en) 1988-06-28 1993-12-28 Du Pont Pesticidal and plant growth regulating composition in tablet form
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
WO1990002809A1 (en) 1988-09-02 1990-03-22 Protein Engineering Corporation Generation and selection of recombinant varied binding proteins
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
GB8907617D0 (en) 1989-04-05 1989-05-17 Celltech Ltd Drug delivery system
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
US5780225A (en) 1990-01-12 1998-07-14 Stratagene Method for generating libaries of antibody genes comprising amplification of diverse antibody DNAs and methods for using these libraries for the production of diverse antigen combining molecules
WO1991010737A1 (en) 1990-01-11 1991-07-25 Molecular Affinities Corporation Production of antibodies using gene libraries
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
CA2090126C (en) 1990-08-02 2002-10-22 John W. Schrader Methods for the production of proteins with a desired function
US5698426A (en) 1990-09-28 1997-12-16 Ixsys, Incorporated Surface expression libraries of heteromeric receptors
EP0564531B1 (en) 1990-12-03 1998-03-25 Genentech, Inc. Enrichment method for variant proteins with altered binding properties
DK1471142T3 (da) 1991-04-10 2009-03-09 Scripps Research Inst Heterodimere receptor-biblioteker under anvendelse af fagemider
GB9112536D0 (en) 1991-06-11 1991-07-31 Celltech Ltd Chemical compounds
GB9113120D0 (en) 1991-06-18 1991-08-07 Kodak Ltd Photographic processing apparatus
GB9120467D0 (en) 1991-09-26 1991-11-06 Celltech Ltd Anti-hmfg antibodies and process for their production
WO1993008829A1 (en) 1991-11-04 1993-05-13 The Regents Of The University Of California Compositions that mediate killing of hiv-infected cells
DE69233782D1 (de) 1991-12-02 2010-05-20 Medical Res Council Herstellung von Autoantikörpern auf Phagenoberflächen ausgehend von Antikörpersegmentbibliotheken
US5733743A (en) 1992-03-24 1998-03-31 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
EP0733070A1 (en) 1993-12-08 1996-09-25 Genzyme Corporation Process for generating specific antibodies
ATE243745T1 (de) 1994-01-31 2003-07-15 Univ Boston Bibliotheken aus polyklonalen antikörpern
FR2716640B1 (fr) 1994-02-28 1996-05-03 Procedes Machines Speciales Dispositif de centrage et de blocage d'une pièce en vue de son rodage à l'aide d'un rodoir à expansion.
US5516637A (en) 1994-06-10 1996-05-14 Dade International Inc. Method involving display of protein binding pairs on the surface of bacterial pili and bacteriophage
US6309636B1 (en) * 1995-09-14 2001-10-30 Cancer Research Institute Of Contra Costa Recombinant peptides derived from the Mc3 anti-BA46 antibody, methods of use thereof, and methods of humanizing antibody peptides
JP2978435B2 (ja) 1996-01-24 1999-11-15 チッソ株式会社 アクリロキシプロピルシランの製造方法
US5980898A (en) 1996-11-14 1999-11-09 The United States Of America As Represented By The U.S. Army Medical Research & Material Command Adjuvant for transcutaneous immunization
GB9625640D0 (en) 1996-12-10 1997-01-29 Celltech Therapeutics Ltd Biological products
EP1053751A1 (en) 1999-05-17 2000-11-22 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Compositions and methods for treating cell proliferation disorders
US20070160576A1 (en) * 2001-06-05 2007-07-12 Genentech, Inc. IL-17A/F heterologous polypeptides and therapeutic uses thereof
US6908963B2 (en) 2001-10-09 2005-06-21 Nektar Therapeutics Al, Corporation Thioester polymer derivatives and method of modifying the N-terminus of a polypeptide therewith
EP2468439B1 (en) 2002-08-16 2015-11-25 Allied Machine & Engineering Corp. Drilling tool and method for producing port seals
EP1570267B1 (en) 2002-12-03 2011-10-12 UCB Pharma, S.A. Assay for identifying antibody producing cells
GB0303337D0 (en) 2003-02-13 2003-03-19 Celltech R&D Ltd Biological products
GB0312481D0 (en) * 2003-05-30 2003-07-09 Celltech R&D Ltd Antibodies
GB0315450D0 (en) 2003-07-01 2003-08-06 Celltech R&D Ltd Biological products
GB0315457D0 (en) 2003-07-01 2003-08-06 Celltech R&D Ltd Biological products
SI1644412T2 (sl) 2003-07-01 2018-11-30 Ucb Biopharma Sprl Modificirani fab fragmenti protiteles
EP2974742A1 (en) 2003-11-21 2016-01-20 UCB Biopharma SPRL Method for the treatment of multiple sclerosis by inhibiting il-17 activity
GB0411186D0 (en) 2004-05-19 2004-06-23 Celltech R&D Ltd Biological products
GB0412181D0 (en) 2004-06-01 2004-06-30 Celltech R&D Ltd Biological products
EP1765865A2 (en) * 2004-06-10 2007-03-28 ZymoGenetics, Inc. Soluble zcytor14, anti-zcytor14 antibodies and binding partners and methods of using in inflammation
GB0417487D0 (en) 2004-08-05 2004-09-08 Novartis Ag Organic compound
GB0425569D0 (en) 2004-11-19 2004-12-22 Celltech R&D Ltd Biological products
JP2008526205A (ja) * 2004-12-31 2008-07-24 ジェネンテック・インコーポレーテッド Ｂｒ３に結合するポリペプチド及びその使用
PT1963368E (pt) 2005-12-13 2012-09-14 Lilly Co Eli Anticorpos anti-il-17
US7790163B2 (en) * 2006-03-10 2010-09-07 Zymogenetics, Inc. Antibodies that bind both IL-17A and IL-17F and methods of using the same
TW200815469A (en) * 2006-06-23 2008-04-01 Astrazeneca Ab Compounds
GB0612928D0 (en) 2006-06-29 2006-08-09 Ucb Sa Biological products
ATE530578T1 (de) 2006-08-11 2011-11-15 Schering Corp Antikörper gegen il-17a
GB0620729D0 (en) * 2006-10-18 2006-11-29 Ucb Sa Biological products
GB0807413D0 (en) 2008-04-23 2008-05-28 Ucb Pharma Sa Biological products
ES2632583T3 (es) * 2011-01-14 2017-09-14 Ucb Biopharma Sprl Anticuerpo que se une a IL-17A e IL-17F

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005010044A2 (en) * 2003-07-08 2005-02-03 Genentech, Inc. Il-17 a/f heterologous polypeptides and therapeutic uses thereof
WO2006088833A2 (en) * 2005-02-14 2006-08-24 Wyeth Interleukin-17f antibodies and other il-17f signaling antagonists and uses therefor
WO2007106769A2 (en) * 2006-03-10 2007-09-20 Zymogenetics, Inc. Antibodies that bind both il-17a and il-17f and methods of using the same

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Anti-human Il-17 antibody" 28 August 2007 (2007-08-28), R&D SYSTEMS, INC., XP002474646 ISBN: 1-800-343-7475 Retrieved from the Internet: URL:http://www.rndsystems.com/pdf/af317na.pdf> [retrieved on 2008-03-27] the whole document *
DAVIES, J. RIECHMANN, L.: "Affinity improvement of single antibody VH domains: residues in all three hypervariable regions affect antigen binding", IMMUNOTECHNOLOGY., ELSEVIER SCIENCE PUBLISHERS BV., NL, vol. 2, no. 3, 1 September 1996 (1996-09-01), NL, pages 169 - 179, XP004070292, ISSN: 1380-2933, DOI: 10.1016/S1380-2933(96)00045-0 *
HOLT, L.J. HERRING, C. JESPERS, L.S. WOOLVEN, B.P. TOMLINSON, I.M.: "Domain antibodies: proteins for therapy", TRENDS IN BIOTECHNOLOGY., ELSEVIER PUBLICATIONS, CAMBRIDGE., GB, vol. 21, no. 11, 1 November 2003 (2003-11-01), GB, pages 484 - 490, XP004467495, ISSN: 0167-7799, DOI: 10.1016/j.tibtech.2003.08.007 *

Also Published As

Publication number Publication date
TR201907599T4 (tr) 2019-06-21
EP2076539A2 (en) 2009-07-08
CY1121672T1 (el) 2020-07-31
HRP20190932T1 (hr) 2019-07-26
US20140186355A1 (en) 2014-07-03
EP2076539B1 (en) 2016-06-08
CY1117963T1 (el) 2017-05-17
PL2076539T3 (pl) 2016-12-30
US20100266609A1 (en) 2010-10-21
CN101589061A (zh) 2009-11-25
ES2588596T3 (es) 2016-11-03
BRPI0717768B8 (pt) 2021-05-25
BRPI0717768A2 (pt) 2013-11-05
HUE029448T2 (en) 2017-02-28
GB0620729D0 (en) 2006-11-29
ZA200902460B (en) 2010-07-28
PT2076539T (pt) 2016-09-02
US10308723B2 (en) 2019-06-04
US8303953B2 (en) 2012-11-06
ES2729064T3 (es) 2019-10-30
IL198061B (en) 2018-10-31
US9890219B2 (en) 2018-02-13
JP6329516B2 (ja) 2018-05-23
MX2009003973A (es) 2009-04-28
US8617847B2 (en) 2013-12-31
RS55031B1 (sr) 2016-11-30
EP2514764B1 (en) 2019-03-06
JP2017169569A (ja) 2017-09-28
DK2514764T3 (da) 2019-06-03
PT2514764T (pt) 2019-06-12
EP2514764A3 (en) 2013-02-20
US20130102030A1 (en) 2013-04-25
EA200900492A1 (ru) 2009-10-30
KR20090078355A (ko) 2009-07-17
HUE043667T2 (hu) 2019-08-28
JP2014050391A (ja) 2014-03-20
CO6180467A2 (es) 2010-07-19
EP2514764A2 (en) 2012-10-24
AU2007311689A1 (en) 2008-04-24
SI2514764T1 (sl) 2019-07-31
HRP20161069T1 (hr) 2016-10-21
WO2008047134A3 (en) 2008-06-12
JP5856121B2 (ja) 2016-02-09
JP2010506580A (ja) 2010-03-04
SI2076539T1 (sl) 2016-09-30
US20150322147A1 (en) 2015-11-12
IL198061A0 (en) 2011-08-01
DK2076539T3 (da) 2016-08-15
BRPI0717768B1 (pt) 2021-01-05
CN101589061B (zh) 2014-09-17
EP3524623A1 (en) 2019-08-14
PL2514764T3 (pl) 2019-08-30
LT2514764T (lt) 2019-06-10
JP2015227342A (ja) 2015-12-17
US20170306052A1 (en) 2017-10-26
US20140044732A1 (en) 2014-02-13
SG175652A1 (en) 2011-11-28
CA2666458C (en) 2018-06-19
CA2666458A1 (en) 2008-04-24
WO2008047134A2 (en) 2008-04-24
AU2007311689B2 (en) 2013-05-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA029953B1 (ru) Молекулы антител, которые связываются с il-17a и il-17f
JP5693844B2 (ja) ヒトｉｌ−１７に結合する抗体分子
JP6648080B2 (ja) Ｐｄ−ｌ１に結合する抗原結合蛋白質
CN111423511B (zh) 与pd-1结合的抗原结合蛋白
US10421816B2 (en) Multivalent antibodies
JP6526089B2 (ja) 抗神経成長因子抗体ならびにそれを調製および使用する方法
ES2373953T3 (es) Moléculas de anticuerpos con especificidad para il-1 beta humana.
JP5183210B2 (ja) ヒトｉｌ−１７に対する特異性を有する中和抗体分子
EA018044B1 (ru) Антитело, специфичное в отношении интерлейкина-6 (ил-6) человека
KR20080099290A (ko) 암 치료용 ｉｌ-17 길항 항체
US10668148B2 (en) Fully human anti-C-X-C chemokine receptor 3 (CXCR3) antibodies and methods of use thereof
EP3390445A1 (en) Multi-specific antibody molecules having specificity for tnf-alpha, il-17a and il-17f
KR20200058322A (ko) 항-pd-l1 항체 및 il-7 융합체
KR20230166120A (ko) 새로운 tnfr2 결합 분자

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM