EA027800B1 - Производные 3-фенилизохинолин-1(2h)-она в качестве ингибиторов parp-1 - Google Patents

Abstract

В изобретении представлены замещенные производные 3-фенилизохинолин-1(2Н)-она, выбранные из группы, состоящей из 4-(2-аминоэтокси)-3-(4-бромфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она, 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(3-трифторметилфенил)-2Н-изохинолин-1-она, 4-(2-аминоэтокси)-3-(3-бром-4-морфолин-4-илфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она, 4-(2-аминоэтокси)-3-(4-хлорфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она, 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(4-фторфенил)-2Н-изохинолин-1-она, 3-[4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-3-ил]бензонитрила, 4- (2-аминоэтокси)-3-(4-бромфенил)-7,8-дифтор-2Н-изохинолин-1-она, 4-(2-аминоэтокси)-3-(4-хлор-3-метилфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она, 4-(2-аминоэтокси)-3-(3,4-дихлорфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она и 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(3-фтор-4-метоксифенил)-2Н-изохинолин-1-она, которые селективно ингибируют активность поли(АДФ-рибоза)полимеразы PARP-1 в отношении поли(АДФ-рибоза)полимеразы PARP-2. Поэтому соединения по настоящему изобретению полезны при лечении заболеваний, таких как злокачественная опухоль, сердечно-сосудистые заболевания, поражение центральной нервной системы и различные формы воспаления. В настоящем изобретении предложены также способы получения этих соединений, фармацевтические композиции, содержащие эти соединения, и способы лечения заболеваний с применением фармацевтических композиций, содержащих эти соединения.

Description

(57) В изобретении представлены замещенные производные 3-фенилизохинолин-1(2Н)-она, выбранные из группы, состоящей из 4-(2-аминоэтокси)-3-(4-бромфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она, 4(2-аминоэтокси)-7-фтор-3 -(3 -трифторметилфенил)-2Н-изохинолин-1 -она, 4-(2-аминоэтокси)-3 -(3 бром-4-морфолин-4-илфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она, 4-(2-аминоэтокси)-3-(4хлорфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она, 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(4-фторфенил)-2Низохинолин-1 -она, 3 -[4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-1 -оксо-1,2-дигидроизохинолин-З ил]бензонитрила, 4- (2-аминоэтокси)-3-(4-бромфенил)-7,8-дифтор-2Н-изохинолин-1-она, 4(2-аминоэтокси)-3-(4-хлор-3-метилфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она, 4-(2-аминоэтокси)-3(3,4-дихлорфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она и 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(3-фтор-4метоксифенил)-2Н-изохинолин-1-она, которые селективно ингибируют активность поли(АДФрибоза)полимеразы РАКР-1 в отношении поли(АДФ-рибоза)полимеразы РАКР-2. Поэтому соединения по настоящему изобретению полезны при лечении заболеваний, таких как злокачественная опухоль, сердечно-сосудистые заболевания, поражение центральной нервной системы и различные формы воспаления. В настоящем изобретении предложены также способы получения этих соединений, фармацевтические композиции, содержащие эти соединения, и способы лечения заболеваний с применением фармацевтических композиций, содержащих эти соединения.

Настоящее изобретение относится к производным 3-фенилизохинолин-1(2Н)-она, которые селективно ингибируют активность поли(АДФ-рибоза)полимеразы РАКР-1 в отношении поли(АДФрибоза)полимеразы РАКР-2. Поэтому соединения по настоящему изобретению полезны в лечении заболеваний, таких как злокачественная опухоль, сердечно-сосудистые заболевания, поражение центральной нервной системы и различные формы воспаления. В настоящем изобретении предложены способы получения этих соединений, фармацевтические композиции, содержащие эти соединения, и способы лечения заболеваний с применением фармацевтических композиций, содержащих эти соединения.

Поли(АДФ-рибоза)полимеразы принадлежат к семейству из 18 членов, которые катализируют присоединение звеньев АДФ-рибозы к ДНК или другим акцепторным белкам, что влияет на такие разнообразные клеточные процессы, как репликация, транскрипция, дифференциация, регуляция генов, разрушение белков и сохранение веретена. РАКР-1 и РАКР-2 являются единственными ферментами из числа РАКР, которые активируются повреждением ДНК и вовлечены в репарацию ДНК.

РАКР-1 представляет собой ядерный белок, состоящий из трех доменов: Ν-терминального ДНКсвязывающего домена, содержащего два цинковых пальца, домена аутомодификации и С-терминального каталитического домена. РАКР-1 связывается через домен цинковые пальцы с однонитиевыми разрывами ДНК (88В), отщепляет НАД' и присоединяет множественные звенья АДФ-рибозы к белкаммишеням, таким как гистоны и различные ДНК-репаративные ферменты. Это приводит к высоко отрицательно заряженной мишени, которая, в свою очередь, ведет к расплетанию и репарации поврежденной ДНК по пути основной эксцизионной репарации. На моделях нокаутированных мышей делеция РАКР-1 ухудшает репарацию ДНК, но это не эмбриональная леталь. Мыши с двойным нокаутом РАКР-1 и РАКР-2 наоборот погибают на раннем эмбриогенезе, что указывает на то, что эти два фермента проявляют не совсем перекрывающиеся функции. Повышенная экспрессия и/или активность РАКР-1 показана на различных опухолевых клеточных линиях, включая злокачественные лимфомы, гепатоклеточную карциному, карциному шейки матки, карциному толстой и прямой кишки, лейкоз. Это может дать возможность опухолевым клеткам выдерживать генотоксический стресс и повышать их устойчивость к ДНК-разрушающим агентам. В результате было показано, что ингибирование РАКР-1 посредством малых молекул делает чувствительными опухолевые клетки к цитотоксической терапии (например, темозоломид, платина, ингибиторы топоизомеразы и радиация). По-видимому, существует значительный диапазон между способностью ингибитора РАКР к усилению терапевтического эффекта и нежелательными побочными эффектами. Тогда как терапевтическое применение ингибиторов РАКР в комбинации с разрушающими ДНК агентами не ново, применение таких агентов в качестве монотерапии, в частности, дефицита в опухолевом генетическом окружении в гомологичной рекомбинантной репарации ДНК, представляет новый подход. Пациенты с гетерозиготными мутациями в зародышевой линии в гомологичных генах рекомбинантной репарации либо ВКСА-1, либо ВКСА-2 характеризуются высокими прижизненными рисками развития злокачественных опухолей молочной железы и других. Опухоли, возникающие у носителей мутации, имеют обычно утраченную аллель дикого типа и не экспрессируют функциональные белки ВКСА-1 и ВКСА-2.

Поэтому утрата этих двух белков ведет к опухолеспецифической дисфункции в репарации двухнитиевых разрывов ДНК гомологической рекомбинацией. Известно, что когда РАКР-1 ингибируют, основная эксцизионная репарация снижена и однонитиевые разрывы ДНК, которые образуются во время нормального клеточного цикла, продолжают существовать. Также было установлено, что репликативные вилки, которые встречают неустраненный разрыв, могут образовывать двухнитиевые разрывы, которые обычно восстанавливают гомологичной рекомбинацией. Опухолевые клетки, которые являются дефектными по гомологичной рекомбинантной репарации, такие как мутанты ВКСА-1 и ВКСА-2, являются поэтому высокочувствительными к ингибированию РАКР в сравнении с клетками дикого типа. Это полностью соответствует концепции синтетической летальности, по которой два дефекта пути сами по себе безвредны, но в комбинации становятся летальными: ингибиторы РАКР могут быть более эффективны для пациентов, имеющих опухоли со специфическими дефектами репарации ДНК, не воздействуя негативно на нормальные гетерозиготные ткани. Предполагаемая популяция пациентов включает, помимо мутантов ВКСА, которые представляют собой большинство врожденных злокачественных опухолей молочной железы и яичников, также существенную часть спорадических злокачественных опухолей с дефектами по гомологичной рекомбинантной репарации, феномен, называемый ВКСАиевв. Например, метилирование промоторов генов ВКСА-1 или ΡАNСΡ и амплификация гена ΕΜ8Υ, который кодирует взаимодействующий с ВКСА-2 белок. Расширяя разумное обоснование синтетической летальности РАКР и ВКСА-1 и ВКСА-2, вероятно предположить, что дефициты любого гена, который не избыточен в репарации двухнитиевых разрывов, должен быть чувствителен к ингибированию РАКР. Например, было также показано, что дефицит АТМ, обнаруженный у пациентов с Т-клеточным пролимфоцитарным лейкозом и В-клеточным хроническим лимфоцитарным лейкозом, и злокачественной опухолью молочной железы, и мутации СНК2 в зародышевой линии, идентифицируемые в саркоме, злокачественной опухоли молочной железы, злокачественной опухоли яичника и опухолях головного мозга, синтетически летальны в комбинации с дефицитом РАКР, а также дефицитами других известных белков НК пути (включая КАИ51, Ό881, КАИ54, КРА1, №81, АТК, СНК1, СНК2, Ι^;ΛΝ(Ό2. РАХ'СА. РАХ'СС и ρΤΕΝ). Мутации в

- 1 027800

РАМ'С и ΡΆΝΟΟ выявлены в злокачественной опухоли поджелудочной железы. Метилирование промотора ΡΆΝΟΡ было обнаружено в карциномах яичников, молочной железы, шейки матки, легкого. Первые клинические данные о том, что злокачественная опухоль с мутированным ВКСА может быть чувствительна к монотерапии ингибитором РАКР, были получены на I фазе испытаний перорального, низкомолекулярного ингибитора РЛКР олапариба. На фазе I в расширенной популяции носителей мутации ВКСЛ частота объективных ответов 47% установлена у 19 пациентов с мутациями ВКСА и злокачественной опухолью молочной железы, яичников и предстательной железы. Другие ингибиторы РАКР, такие как рукапариб и велипариб, как в настоящее время известно, находятся на II фазе клинических испытаний в комбинированной терапии, а также монотерапии. Предварительные данные состоят в том, что эти препараты показывают низкую токсичность в монотерапии. Во всяком случае, ожидается, принимая во внимание длительный курс лечения или комбинирование, что соединения с высокой селективностью в отношении РАКР-1 проявят еще меньшую токсичность.

РАКР-1 вовлечен также в ангиогенез. В частности, ингибирование РАКР-1, по-видимому, приводит к пониженной аккумуляции индуцируемого гипоксией фактора транскрипции 1а, важного регулятора адаптации опухолевых клеток к гипоксии.

Провоспалительный стимулирующий триггер высвобождает провоспалительные медиаторы, которые вызывают продуцирование пероксинитратных и гидроксильных радикалов, которые, в свою очередь, приводят к однонитиевому разрыву ДНК с последующей активацией РАКР-1. Сверхактивация РАКР-1 влечет за собой истощение НАД+ и энергетических запасов, завершаясь дисфункцией и некрозом клеток. Этот механизм клеточного суицида вовлечен в патомеханизм острого нарушения мозгового кровообращения, ишемии миокарда, диабета, связанной с диабетом дисфункции сердечно-сосудистой системы, шока, травматического поражения центральной нервной системы, артрита, колита, аллергического энцефаломиелита и различных других форм воспаления. Особый интерес представляет активация посредством РАКР-1 транскрипции, опосредованной ядерным фактором кВ, которая играет центральную роль в экспрессии воспалительных цитокинов, хемокинов и медиаторов воспаления.

В рамках исследования на азотных гетероциклах в 1оигпа1 оГ 1йе Сйеш1са1 8ос1е1у, Регкт Тгапзаеΐϊοπδ 1, (1977), (9), 959-65 описаны 3-фенил-1(2Н)-изохинолиноны. Изохинолин-1(2Н)-оны с фармакологической активностью описаны в 8с1епсе оГ ВуШНеыз (2005), 15, 839-906. Некоторые патентные заявки описывают изохинолиновые производные для лечения глаукомы, ЕР389995, артериосклероза и гиперлипопротеинемии, ЕР 591937. В \\'() 2002090334 от имени ΚϋΏΟδ РНАКМ описаны изохинолиноновые производные, применяемые для ингибирования активности РАКР. В \\'() 2008092292 описан способ лечения патологического состояния, связанного с мелатониновым рецептором, с применением 2замещенных (2Н)-изохинолинонов. В \\'О 2010133647 описаны 1(2Н)-изохинолиноны, активные в качестве ингибиторов РАКР-1, от имени Мчлчапо Меб1са1 8с1енсез. Некоторые специфические соединения в приведенной выше \\'О 2010133647 исключены из представленной общей формулы.

Настоящее изобретение относится к производным 3-фенилизохинолин-1(2Н)-она, которые обладают селективной ингибирующей активностью в отношении РАКР-1 по сравнению с РАКР-2 и, таким образом, полезны в терапии злокачественной опухоли, сердечно-сосудистых заболеваний, поражения центральной нервной системы и воспаления.

Таким образом, первой задачей изобретения является получение соединения формулы (I)

выбранного из

4-(2-аминоэтокси)-3-(4-бромфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она,

4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(3-трифторметилфенил)-2Н-изохинолин-1-она,

4-(2-аминоэтокси)-3-(3-бром-4-морфолин-4-илфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она,

4-(2-аминоэтокси)-3-(4-хлорфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она,

4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(4-фторфенил)-2Н-изохинолин-1-она,

3- [4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-3-ил]бензонитрила,

4- (2-аминоэтокси)-3-(4-бромфенил)-7,8-дифтор-2Н-изохинолин-1-она, 4-(2-аминоэтокси)-3-(4-хлор-3-метилфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она, 4-(2-аминоэтокси)-3-(3,4-дихлорфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она и 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(3-фтор-4-метоксифенил)-2Н-изохинолин-1-она; или оптического изомера, или их фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение также относится к способам синтеза производных 3-фенилизохинолин1(2Н)-она формулы (I),

- 2 027800 где К и Κι представляют собой водород;

К₂ представляет собой водород;

К₃ представляет собой фтор, хлор, бром, циано или необязательно замещенную группу, выбранную из линейного или разветвленного С1-С₆алкила, С1-С₆алкокси, полифторированного С1-С₆алкила, 5- - 6членного гетероциклила, содержащего 1-2 гетероатома, выбранных из азота и кислорода; или К₃ может быть представлен диоксолильным или диоксинильным кольцом, конденсированным с фенильным кольцом;

Кд представляет собой водород или фтор, и когда Кд представляет собой водород, η равен числу от 1 до 5; когда Кд представляет собой фтор, η равен числу от 0 до 5; состоящим из стандартных синтетических преобразований.

Как указано выше, авторами обнаружено, что соединения формулы (I), как определено выше, являются сильнодействующими и селективными ингибиторами РАКР-1 в отношении РАКР-2 и, следовательно, полезными в лечении злокачественной опухоли, сердечно-сосудистых заболеваний, поражения центральной нервной системы и для противовоспалительной терапии. Поэтому настоящим изобретением также обеспечивается способ лечения заболеваний, опосредованных белком РАКР-1, который включает введение нуждающемуся в этом млекопитающему, предпочтительно человеку, эффективного количества соединения формулы (I), как определено выше.

Предпочтительный способ по настоящему изобретению состоит в лечении заболеваний, опосредованных белком РАКР-1, выбранных из группы, состоящей из злокачественной опухоли, сердечнососудистых заболеваний, поражения центральной нервной системы и воспаления.

Другим предпочтительным способом по настоящему изобретению является лечение специфических типов злокачественной опухоли, включающих, но, не ограничиваясь ими, карциному, такую как мочевого пузыря, молочной железы, толстой кишки, почки, печени, легкого, включая мелкоклеточный рак легкого, пищевода, желчного пузыря, яичника, поджелудочной железы, желудка, шейки матки, щитовидной железы, предстательной железы и кожи, включая плоскоклеточную карциному; гематопоэтические опухоли лимфоидной линии, включая лейкоз, острый лимфоцитарный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, В-клеточную лимфому, Т-клеточную лимфому, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, волосатоклеточную лимфому и лимфому Беркита; гематопоэтические опухоли миелоидной линии, включая острый и хронический миелогенный лейкоз, синдром миелодисплазии и промиелоцитарный лейкоз; опухоли мезенхимального происхождения, включая фибросаркому, саркому Юинга и рабдомиосаркому; опухоли центральной и периферической нервных систем, включая астроцитому, нейробластому, глиому, глиобластому и невриному; другие опухоли, включая меланому, семиному, тератокарциному, остеосаркому, пигментную ксеродерму, кератоксантому, фолликулярный рак щитовидной железы и саркому Капоши.

Кроме того, способ настоящего изобретения также относится к подавлению опухолевого ангиогенеза и метастазов.

Другой предпочтительный способ по настоящему изобретению состоит в лечении специфических типов сердечно-сосудистых заболеваний, включающих, но, не ограничиваясь ими, реперфузионное повреждение миокарда, кардиомиопатию и диабетическую дисфункцию сердечно-сосудистой системы.

Еще один предпочтительный способ по настоящему изобретению состоит в лечении специфических типов поражений центральной нервной системы, включающих, но, не ограничиваясь ими, острое нарушение мозгового кровообращения, травму головного мозга и нейродегенеративные расстройства.

Еще один предпочтительный способ по настоящему изобретению состоит в лечении специфических типов воспалительных заболеваний, включающих, но, не ограничиваясь ими, колит, артрит и увеит.

Настоящее изобретение также относится к способу селективного ингибирования активности белка РАКР-1 ίη νίίτο, включающему приведение в контакт указанного белка с эффективным количеством соединения формулы (I), как определено выше.

Кроме того, настоящее изобретение относится к способу лечения, включающему соединение формулы (I) в комбинации с радиационной терапией или химиотерапевтическим режимом для одновременного, раздельного или последовательного применения в противораковой терапии.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, носитель или разбавитель.

В дополнение к соединению формулы (I) фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может дополнительно содержать одно или более химиотерапевтических, например цитостатических или цитотоксических, средств, агентов типа антибиотиков, алкилирующих средств, антиметаболитических средств, гормональных препаратов, иммунологических средств, средств интерферонового типа, ингибиторов циклооксигеназы (например, ингибиторы СОХ-2), ингибиторов матриксной металлопротеиназы, ингибиторов теломеразы, ингибиторов тирозинкиназы, средств против рецептора фактора роста, анти-НЕК-средств, анти-ЕОРК-средств, средств против ангиогенеза (например, ингибиторы ангиогенеза), ингибиторов фарнезилтрансферазы, ингибиторов гак-гаГ-путей сигнальной трансдукции, ингибиторов

- 3 027800 клеточного цикла, других ейкк-ингибиторов, тубулинсвязывающих средств, ингибиторов топоизомеразы I, ингибиторов топоизомеразы II и тому подобное. Предпочтительно химиотерапевтическое средство представляет собой алкилирующее средство. Еще более предпочтительно алкилирующим средством является темозоломид.

Кроме того, изобретение обеспечивает лекарственное средство, содержащее соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, как определено выше, и одно или более химиотерапевтических средств в качестве комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в противораковой терапии. Предпочтительно химиотерапевтическое средство представляет собой алкилирующее средство. Еще более предпочтительно алкилирующим средством является темозоломид.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено выше, для применения в качестве лекарственного средства, предпочтительно в качестве лекарственного средства с противораковой активностью.

Кроме того, изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено выше, для применения в способе лечения заболевания, опосредованного белком РАКР-1, предпочтительно злокачественной опухоли, сердечно-сосудистых заболеваний, поражения нервной системы и воспаления.

Наконец, изобретение обеспечивает применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено выше, в производстве лекарственного средства для лечения заболевания, опосредованного белком РАКР-1.

Настоящее изобретение также обеспечивает способы синтеза замещенных производных формулы (I), полученных способом, состоящим из стандартных синтетических преобразований.

Если хиральный центр или другая форма изомерного центра присутствует в соединении по настоящему изобретению, предполагается, что данным изобретением охвачены все формы такого изомера или изомеров, включая энантиомеры и диастереомеры. Соединения, содержащие хиральный центр, могут быть использованы в виде рацемической смеси, энантиомерно обогащенной смеси, либо рацемическая смесь может быть разделена с применением хорошо известных методов, и отдельный энантиомер может быть использован как таковой. В случаях, когда соединения содержат ненасыщенные углеродуглеродные двойные связи, как цис-ΙΖ). так и транс-(Е) изомеры охватываются объемом настоящего изобретения.

Термин фармацевтически приемлемая соль соединения формулы (I) означает такие соли, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства исходного соединения. Такие соли включают кислотно-аддитивные соли с неорганическими кислотами, такими как хлористо-водородная, бромистоводородная, азотная, фосфорная, серная, перхлорная кислота и тому подобное, или с органическими кислотами, такими как уксусная, аскорбиновая, трифторуксусная, пропионовая, гликолевая, (Ό)- или (Ь)молочная, щавелевая, фумаровая, малеиновая, метансульфоновая, этансульфоновая, бензойная, птолуолсульфоновая, салициловая, коричная, миндальная, винная, лимонная, янтарная, изэтионовая и малоновая кислота.

Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) также включают соли с неорганическими или органическими основаниями, например щелочными или щелочно-земельными металлами, в частности гидроксиды, карбонаты или бикарбонаты натрия, калия, кальция, аммония или магния, ациклическими или циклическими аминами, предпочтительно метиламином, этиламином, диэтиламином, триэтиламином, пиперидином и подобным.

Если не указано иное, при ссылке на соединения формулы (I) как таковые, а также на любую фармацевтическую композицию с ними или любое, включающее их терапевтическое лечение, настоящее изобретение включает все изомеры, таутомеры, гидраты, сольваты, комплексы, носители, Ν-оксиды и фармацевтически приемлемые соли соединений по настоящему изобретению.

В случаях, когда соединения могут существовать в таутомерных формах, таких как кетоенольные таутомеры, предполагается, что каждая таутомерная форма включена в настоящее изобретение, существующая ли в равновесной или преимущественно в единственной форме.

Под термином галоген подразумевается атом фтора, хлора, брома или йода.

Под термином линейный или разветвленный С₁-С₆алкил подразумеваются любая из групп, такая как, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, втор-бутил, н-пентил, нгексил и тому подобное.

Под термином линейный или разветвленный С₁-С₆алкокси подразумевается любая из групп, такая как, например, метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси, трет-бутокси, вторбутокси, н-пентокси, н-гексокси и тому подобное.

Под термином С₃-С₇циклоалкил подразумевается, если не указано иное, 3-7-членное полностью углеродное моноциклическое кольцо, которое может содержать одну или более двойных связей, но не содержит полностью сопряженной π-электронной системы. Примерами циклоалкильных групп, среди прочего, являются циклопропан, циклобутан, циклопентан, циклопентен, циклогексан, циклогексен и циклогексадиен.

- 4 027800

Под термином гетероциклил подразумевается 3-8-членное насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, где один или более атомов углерода заменены гетероатомами, такими как азот, кислород и сера. Неограничивающими примерами гетероциклильных групп являются, например, пиран, пирролидин, пирролин, имидазолин, имидазолидин, пиразолидин, пиразолин, тиазолин, тиазолидин, дигидрофуран, тетрагидрофуран, 1,3-диоксолан, пиперидин, пиперазин, морфолин и тому подобное.

Термин арил означает моно-, би- или поликарбоциклический углеводород с 1-4 циклическими системами, необязательно дополнительно конденсированными или связанными друг с другом простыми связями, где по меньшей мере одно из карбоциклических колец является ароматическим, где термин ароматический означает полностью сопряженную π-электронную систему связей. Неограничивающими примерами таких арильных групп являются фенильная, α- или β-нафтильная или бифенильная группы.

Термин гетероарил, как используется в данном описании, означает ароматические гетероциклические кольца, как правило, 5-8-членные гетероциклы с 1-3 гетероатомами, выбранными из Ν, О или 8; гетероарильное кольцо необязательно может быть дополнительно конденсировано или связано ароматическими и неароматическими карбоциклическими и гетероциклическими кольцами. Неограничивающими примерами таких гетероарильных групп являются, например, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, индолил, имидазолил, тиазолил, изотиазолил, пирролил, фенилпирролил, фурил, фенилфурил, оксазолил, изоксазолил, пиразолил, тиенил, бензотиенил, изоиндолинил, бензоимидазолил, индазолил, хинолинил, изохинолинил, 1,2,3-триазолил, 1-фенил-1,2,3-триазолил, 2,3-дигидроиндолил, 2,3дигидробензофуранил, 2,3-дигидробензотиофенил, бензопиранил, 2,3-дигидробензоксазинил, 2,3дигидрохиноксалинил и тому подобное.

Под термином циано подразумевается остаток -ΟΝ.

Под термином нитро подразумевается группа -ΝΟ₂.

Под термином алкенил или алкинил подразумевается любая из указанных выше линейных или разветвленных С₂-С₆алкильных групп, дополнительно содержащих двойную или тройную связь. Неограничивающими примерами алкенильных или алкинильных групп по изобретению являются, например, винил, аллил, 1-пропенил, изопропенил, 1-бутенил, 2-бутенил, 3-бутенил, 2-пентенил, 1-гексенил, этинил, 2-пропинил, 4-пентинил и тому подобное.

Под термином полифторированный алкил подразумевается любая из указанных выше линейных или разветвленных С₁-С₆алкильных или алкоксигрупп, замещенных более чем одним атомом фтора, такая как, например, трифторметил, трифторэтил, 1,1,1,3,3,3-гексафторпропил и тому подобное.

Под термином гидроксиалкил подразумевается любой из указанных выше С₁-С₆алкилов, содержащих гидроксильную группу, такой как, например, гидроксиметил, 2-гидроксиэтил, 3-гидроксипропил и тому подобное.

Из всего вышесказанного для специалиста в данной области будет очевидно, что любая группа, название которой является составным названием, например ариламино, должна толковаться, как обычно, по частям, ее образующим, например, как аминогруппа, которая дополнительно замещена арилом, где арил является таким, как определено выше.

Аналогично, любой из терминов, таких как, например, арилокси, алкилтио, алкиламино, диалкиламино, алкоксикарбонил, алкоксикарбониламино, гетероциклилкарбонил, гетероциклилкарбониламино, циклоалкилоксикарбонил и тому подобное, включает группы, где алкильные, алкокси, арильные, С₃С₇циклоалкильные и гетероциклильные составляющие являются такими, как определено выше.

Когда К₃ представляет собой диоксолильное или диоксинильное кольцо, конденсированное с фенильным кольцом, подразумевается, что имеются в виду такие соединения формулы (I), как представлено ниже

, например,

Согласно настоящему изобретению и если не указано иное К₃, представляющая собой линейный или разветвленный С₁-С₆алкил, С₁-С₆алкокси, полифторированный С₁-С₆алкил, 5-6-членный гетероциклил, содержащий 1-2 гетероатома, выбранных из азота и кислорода, может быть необязательно замещена по любому из свободных положений одной или более группами, например 1-6 группами, независимо выбранными из галогена, нитро, оксогрупп (=Ο), циано, С₁-С₆алкила, полифторированного алкила, полифторированного алкокси, С2-С6алкенила, С2-С6алкинила, гидроксиалкила, арила, арилалкила, гетероарила, гетероарилалкила, гетероциклила, гетероциклилалкила, С₃-С₇циклоалкила, гидрокси, алкокси, арилокси, гетероциклилокси, метилендиокси, алкилкарбонилокси, арилкарбонилокси, циклоалкенилокси, гетероциклилкарбонилокси, алкилиденаминокси, карбокси, алкоксикарбонила, арилоксикарбонила, циклоалкилоксикарбонила, гетероциклилалкилоксикарбонила, амино, уреидо, алкиламино, диалкиламино, ариламино, диариламино, гетероциклиламино, формиламино, алкилкарбониламино, арилкарбониламино, гетероциклилкарбониламино, аминокарбонила, алкиламинокарбонила, диалкиламинокарбонила, ариламинокарбонила, гетероциклиламинокарбонила, алкоксикарбониламино, гидроксиаминокарбонила, ал- 5 027800 коксиимино, алкилсульфониламино, арилсульфониламино, гетероциклилсульфониламино, формила, алкилкарбонила, арилкарбонила, циклоалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфонила, арилсульфонила, аминосульфонила, алкиламиносульфонила, диалкиламиносульфонила, ариламиносульфонила, гетероциклиламиносульфонила, арилтио, алкилтиофосфоната и алкилфосфоната. В свою очередь, по необходимости каждый из указанных выше заместителей может быть дополнительно замещен одной или более перечисленными выше группами.

Предпочтительно настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I), перечисленным ниже:

4-(2-аминоэтокси)-3-(4-бромфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1 -он,

4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(3-трифторметилфенил)-2Н-изохинолин-1-он,

4-(2-аминоэтокси)-3-(3-бром-4-морфолин-4-илфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-он,

4-(2-аминоэтокси)-3-(4-хлорфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-он,

4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(4-метансульфонилфенил)-2Н-изохинолин-1-он,

4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(4-фторфенил)-2Н-изохинолин-1-он,

3- [4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-1-оксо-1, 2-дигидроизохинолин-3-ил]бензонитрил,

4- (2-аминоэтокси)-3-(4-бромфенил)-7,8-дифтор-2Н-изохинолин-1-он, 4-(2-аминоэтокси)-3-(4-хлор-3-метилфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-он, 4-(2-аминоэтокси)-3-(3,4-дихлорфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-он, 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(3-фтор-4-метоксифенил)-2Н-изохинолин-1-он.

Настоящее изобретение также относится к способам получения соединений формулы (I), как определено выше.

Соединение формулы (I) может быть получено основными способами синтеза, описанными ниже в способе А и способе В.

Способ А.

Соответственно способ по настоящему изобретению включает следующие стадии: стадию 1) защиты соединения формулы (II)

где К₃ и К₄ являются такими, как определено выше, с помощью соединения формулы ΡΟ-Χ (III), где ΡΘ представляет собой подходящую защитную группу, и X представляет собой подходящую уходящую группу;

стадию 2) перегруппировки полученного соединения формулы (IV)

где К₃, К₄ и ΡΟ являются такими, как определено выше; стадию 3) алкилирования полученного соединения формулы (V)

где К₃, К₄ и ΡΟ являются такими, как определено выше, соединением формулы (VI)

Н'

I

где К₂ является таким, как определено выше; К' и К₁' имеют такие же значения, как К и К₁ соответственно, но могут также независимо означать СООК₆, где К₆ представляет собой необязательно замещенный линейный или разветвленный С₁-С₆алкил подобно, например, трет-бутилу, или необязательно замещенный линейный или разветвленный арилС₁-С₆алкил подобно, например, бензилу; К₅ представляет собой подходящую группу, такую как галоген, например бром, хлор или йод, п-толуолсульфонат, метансульфонат, трифторметансульфонат или гидроксильную группу;

стадию 4) снятия защиты полученного соединения формулы (VII)

- 6 027800

где К', Κι', К₂, К₃, К4 и ΡΘ являются такими, как определено выше, с получением соединения формулы (I), как определено выше, необязательно преобразования соединения формулы (I) в другое соединение формулы (I) известными химическими взаимодействиями и/или преобразования соединения формулы (I) в его фармацевтически приемлемую соль, или преобразования соли в свободное соединение формулы (I).

Приведенная ниже схема 1 иллюстрирует последовательность стадий способа по настоящему изобретению согласно способу А.

Согласно стадии 1 способа соединение формулы (II), как определено выше, подвергают взаимодействию с соединением формулы (III), где ΡΘ представляет собой защитную группу, такую как метил, 1фенилэтил, п-метоксибензил, бензил и тому подобное, в присутствии основания, такого как карбонат серебра и тому подобное, в подходящем растворителе, таком как толуол, бензол, Ν,Ν-диметилформамид (ДМФА), Ν,Ν-диметилацетамид (ΏΜΑ), ацетонитрил (ΛΟΝ), этилацетат (ЕЮАс), тетрагидрофуран (ТГФ), диоксан и тому подобное, при температуре в диапазоне от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником, с получением соединения формулы (IV), как определено выше.

Согласно стадии 2 способа соединение формулы (IV), как определено выше, нагревают или обычным способом, или микроволновым облучением в растворителе, таком как изопропанол, этанол, метанол и тому подобное, с получением соединения формулы (V), как определено выше. Перегруппировка может быть осуществлена, как описано в Зсйепкег, К. Нек. СЫт. Ас1а 1968, 51, 413-21 или в Шапц, 8. е! а1., 1. Βΐοοτβ. Мед. СЬет. Ье«. 2002, 12, 2367-2370.

Согласно стадии 3 способа соединение формулы (V), как определено выше, подвергают взаимодействию с соединением формулы (VI), как определено выше, в присутствии подходящего основания, такого как карбонат натрия, калия или цезия, гидрокарбонат натрия или калия, триэтиламин, диизопропилэтиламин, пиридин, гидрид натрия или калия и тому подобное, в соответствующем растворителе, таком как ДМФА, ΏΜΑ, АСН ацетон, метанол, этанол, ТГФ, диоксан, дихлорметан (ОСМ) и тому подобное, при температуре в диапазоне от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником, с получением соединения формулы (VII), как определено выше. Когда К₅ представляет собой бром, взаимодействие предпочтительно осуществляют при комнатной температуре (КТ) в ΏΜΑ в качестве растворителя, используя карбонат цезия в качестве основания. Когда К₅ представляет собой гидроксил, взаимодействие предпочтительно осуществляют в присутствии подходящего реагента, такого как, например, диэтилазодикарбоксилат (ΏΕΑΏ), диизопропилазодикарбоксилат (1)Ш)), ди-трет-бутилазодикарбоксилат (ΏΒΑΏ), 1,1'-(азодикарбонил)дипиперидин (ΑΏΏΡ), и реагента, такого как, например, триметилфосфин, три-трет-бутилфосфин, трифенилфосфин и тому подобное, в подходящем растворителе, таком как ТГФ, ДМФА, ОСМ, толуол, бензол и тому подобное, при температуре в диапазоне от 0°С до КТ.

Согласно стадии 4 способа конечное снятие защиты соединения формулы (VII), как определено выше, для получения соединения формулы (I), как определено выше, может быть выполнено в одну или две стадии, в зависимости от характера групп ΡΘ, К' и К₁'.

Например, когда ΡΘ представляет собой бензильную, п-метоксибензильную или метильную группу, и по меньшей мере одна из К' и К₁' групп соединения формулы (VII) представляет собой кислотолабильную азотную защитную группу, такую как трет-бутоксикарбонильная группа и тому подобное, снятие защиты лактама и аминогруппы осуществляют одновременно, и соединение формулы (I), как определено выше, может быть получено удалением этих защитных групп в кислотных условиях, предпочтительно в присутствии неорганической или органической кислоты, такой как ΤΕΑ, хлористоводородная или метансульфоновая кислота, трибромид бора или трихлорид алюминия, в подходящем

- 7 027800 растворителе, таком как Ώ0Μ, дихлорэтан, диоксан, низший спирт, такой как метанол или этанол, при температуре в диапазоне от КТ до температуры кипения с обратным холодильником.

Альтернативно, когда РО представляет собой бензильную группу, и по меньшей мере одна из К' и Κι' групп соединения формулы (VII) представляет собой азотную защитную группу, такую как бензилоксикарбонил и тому подобное, снятие защиты лактама и аминогруппы осуществляют одновременно, и соединение формулы (I), как определено выше, может быть получено удалением этих защитных групп в условиях восстановления, таких как, например, в присутствии водорода или источника водорода, такого как, например, муравьиная кислота, формиат аммония, циклогексен, 1,4-циклогексадиен и 1,3циклогексадиен, и катализатора гидрирования в подходящем растворителе, таком как этанол, метанол, ΕίΟΑο или их смесь, и где катализатор обычно представляет собой металл, наиболее часто производное палладия, такое как, например, палладий на углероде, гидроксид палладия или палладиевая чернь.

Альтернативно, когда РО представляет собой бензильную группу, и по меньшей мере одна из К' и К₁' групп соединения формулы (VII) представляет собой азотную защитную группу, такую как метоксикарбонил, этоксикарбонил, 9-флуоренилметоксикарбонил и тому подобное, соединение формулы (I), как определено выше, может быть получено сначала удалением этих защитных групп в основных условиях, таких как, например, карбонат натрия, калия или цезия, гидроксид натрия, калия или бария, гидразин, пиперидин, морфолин и тому подобное, в подходящем растворителе, таком как метанол, этанол, вода, ДМФА, ΏΜΑ и тому подобное, при температуре в диапазоне от КТ до температуры кипения с обратным холодильником, и затем удалением бензильной группы (РО) в условиях кислотности или восстановления, как описано выше, или наоборот.

Способ В.

Соответственно способ по настоящему изобретению включает следующие стадии: стадию 3') алкилирования соединения формулы (V)

где К₃ и К₄ являются такими, как определено выше, соединением формулы (ν^)

В

I

где К, К₁, К₂ и К₅ являются такими, как определено выше; или стадию 3) алкилирования соединения формулы (V'), как определено выше, соединением формулы тъ)

где К₂ и К₅ являются такими, как определено выше, и один из К' и К₁' или оба представляют собой СООК₆, где К₆ является таким, как определено выше;

стадию 4') снятия защиты полученного соединения формулы (VIII)

где К₂, К₃ и К₄ являются такими, как определено выше, и один из К' и К₁' или оба представляют собой СООК₆, где К₆ является таким, как определено выше; с получением соединения формулы (I), как определено выше, необязательно преобразования соединения формулы (I) в другое соединение формулы (I) известными химическими взаимодействиями, и/или преобразования соединения формулы (I) в его фармацевтически приемлемую соль, или преобразования соли в свободное соединение формулы (I).

Приведенная ниже схема 2 иллюстрирует последовательность стадий способа по настоящему изобретению согласно способу В.

- 8 027800

Согласно стадии 3' способа и аналогично стадии 3 способа А соединение формулы (V), как определено выше, подвергают взаимодействию с соединением формулы ^а), как определено выше, в присутствии основания, такого как карбонат натрия, калия или цезия, гидрокарбонат натрия или калия, триэтиламин, диизопропилэтиламин, пиридин, гидрид натрия или калия и тому подобное, в подходящем растворителе, таком как ДМФА, ΌΜΑ, ΑΟΝ, ацетон, метанол, этанол, ТГФ, диоксан, дихлорметан (ΌϋΜ) и тому подобное, при температуре в диапазоне от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником, с получением соединения формулы (I), как определено выше. Когда К₅ представляет собой бром, взаимодействие предпочтительно осуществляют при комнатной температуре (КТ) в ΌΜΑ в качестве растворителя, используя карбонат цезия в качестве основания. Когда К₅ представляет собой гидроксил, взаимодействие предпочтительно осуществляют в присутствии подходящего реагента, такого как например диэтилазодикарбоксилат (ΌΕΑΌ), диизопропилазодикарбоксилат (ΌΙΑΌ), ди-третбутилазодикарбоксилат (ΌΒΑΌ), 1,1'-(азодикарбонил)дипиперидин (ΑΌΌΡ), и реагента, такого как, например, триметилфосфин, три-трет-бутилфосфин, трифенилфосфин и тому подобное, в подходящем растворителе, таком как ТГФ, ДМФА, ΌϋΜ, толуол, бензол и тому подобное, при температуре в диапазоне от 0°С до КТ.

Согласно стадии 3 способа и аналогично стадии 3' соединение формулы (V'), как определено выше, подвергают взаимодействию с соединением формулы (νΐ6), содержащим по меньшей мере одну азотную защитную группу СООК_б, в тех же условиях, как описано выше.

Согласно стадии 4' способа, конечное снятие защиты соединения формулы (VIII), как определено выше, с получением соединения формулы (I), как определено выше, осуществляют в зависимости от природы группы (групп) Кб.

Например, когда СООК представляет собой кислотолабильную азотную защитную группу, такую как, например, трет-бутоксикарбонильная группа, она может быть удалена предпочтительно в присутствии неорганической или органической кислоты, такой как ΤΡΑ, хлористо-водородная или метансульфоновая кислота, трибромида бора или трихлорида алюминия, в подходящем растворителе, таком как ^СΜ, дихлорэтан, диоксан, низший спирт, такой как метанол или этанол, при температуре в диапазоне от КТ до температуры кипения с обратным холодильником.

Альтернативно, когда СООКб представляет собой основно-лабильную азотную защитную группу, такую как, например, 9-флуоренилметоксикарбонильная группа, она может быть удалена предпочтительно в основных условиях, таких как, например, карбонат натрия, калия или цезия, гидроксид натрия, калия или бария, гидразин, пиперидин, морфолин и тому подобное, в подходящем растворителе, таком как метанол, этанол, вода, ДМФА, ΌΜΑ и тому подобное, при температуре в диапазоне от КТ до температуры кипения с обратным холодильником.

Альтернативно, когда СООКб представляет собой азотную защитную группу, такую как, например, бензилоксикарбонильная группа, она может быть удалена в условиях восстановления, таких как, например, в присутствии водорода или источника водорода, такого как, например, муравьиная кислота, формиат аммония, циклогексен, 1,4-циклогексадиен и 1,3-циклогексадиен, и катализатора гидрирования в подходящем растворителе, таком как этанол, метанол, ΕίОΑс или их смесь, при температуре в диапазоне от КТ до температуры кипения с обратным холодильником, и где катализатор обычно представляет собой металл, наиболее часто производное палладия, такое как, например, палладий на углероде, гидроксид палладия или палладиевая чернь.

По необходимости или по желанию способы включают преобразование соединения формулы (II), или формулы (IV), или формулы (V), или формулы (VII), или формулы (V), или формулы (VIII) в соответствующее соединение формулы (II), или формулы (IV), или формулы (V), или формулы (VII), или формулы (V), или формулы (VIII) соответственно посредством известных химических взаимодействий.

Известными химическими взаимодействиями для возможных преобразований соединений формулы (I), или формулы (II), или формулы (IV), или формулы (V), или формулы (VII), или формулы (V), или

- 9 027800 формулы (VIII) в соответствующие соединения формулы (I), или формулы (II), или формулы (IV), или формулы (V), или формулы (VII), или формулы (V'), или формулы (VIII) соответственно являются, например:

Преобразование А). Преобразование соединения формулы (I), или формулы (II), или формулы (IV), или формулы (V), или формулы (VII), или формулы (V), или формулы (VIII), как определено выше, где К₃ представляет собой галоген, в соответствующее соединение формулы (I), или формулы (II), или формулы (IV), или формулы (V), или формулы (VII), или формулы (V'), или формулы (VIII) соответственно, где К₃ представляет собой циано.

Преобразование В). Преобразование соединения формулы (I), или формулы (II), или формулы (IV), или формулы (V), или формулы (VII), или формулы (V), или формулы (VIII), как определено выше, где К₃ представляет собой галоген, в соответствующее соединение формулы (I), или формулы (II), или формулы (IV), или формулы (V), или формулы (VII), или формулы (V), или формулы (VIII) соответственно, где К₃ представляет собой гетероциклил.

Преобразование С). Преобразование соединения формулы (I) или формулы (VII), как определено выше, где по меньшей мере один из К и К! представляет собой водород, в соответствующее соединение формулы (I) или формулы (VII) соответственно, где К и К! являются такими, как определено выше, но не могут одновременно являться атомами водорода.

Преобразование Ό). Преобразование соединения формулы (I), как определено выше, где К₃ представляет собой водород, в соответствующее соединение формулы (I), где К₃ представляет собой галоген.

Все указанные выше способы являются аналогами, которые могут быть осуществлены хорошо известными методами и в соответствующих условиях, известных в данной области, как описано, например, в §шйй, Мюйас1 - Матсй'8 Абмапссб Отдашс СНстЫгу: гсас1юп8 тссЬашзтз апб ПгисЩгс - б!й Εάίίίοη, Мюйас1 В. §тйй апб 1спу МагсЬ, Ιοίιη \УПсу & δοηδ Пк.. Ысте Уогк (ΝΥ), 2007.

Согласно преобразованию А соединение формулы (I), или формулы (II), или формулы (IV), или формулы (V), или формулы (VII), или формулы (V), или формулы (VIII), как определено выше, где К₃ представляет собой галоген, может быть преобразовано в соответствующее соединение формулы (I), или формулы (II), или формулы (IV), или формулы (V), или формулы (VII), или формулы (V), или формулы (VIII) соответственно, где К₃ представляет собой циано, обработкой источником цианида, таким как, например, цианид меди (I), цианид цинка, ферроцианид калия и тому подобное, необязательно в присутствии палладиевого катализатора, такого как, например, диацетат палладия (II), тетракис(трифенилфосфин) палладий(0), трис(дибензилиденацетон) дипалладий(О) и тому подобное; необязательно в присутствии подходящего лиганда, такого как, например, 2-дициклогексилфосфино-2',4',б'-триизопропилбифенил, три-трет-бутилфосфинтетрафторборат и тому подобное; необязательно в присутствии металлического цинка; необязательно в присутствии подходящего основания, такого как, например, карбонат натрия или цезия и тому подобное, в соответствующем растворителе, таком как, например, ДМФА, ОМА, АС^ диоксан, Ν-метилпирролидон и тому подобное, при температуре в диапазоне от КТ до температуры кипения с обратным холодильником.

Согласно преобразованию В соединение формулы (I), или формулы (II), или формулы (IV), или формулы (V), или формулы (VII), или формулы (V ), или формулы (VIII), как определено выше, где К₃ представляет собой галоген, предпочтительно бром, может быть преобразовано в соответствующее соединение формулы (I), или формулы (II), или формулы (IV), или формулы (V), или формулы (VII), или формулы (V ), или формулы (VIII) соответственно, где К₃ представляет собой гетероциклил, обработкой гетероциклом, таким как, например, пиперидин и пирролидин, в присутствии палладиевого катализатора, такого как, например, диацетат палладия (II), тетракис(трифенилфосфин)палладий(О), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) и тому подобное; подходящего основания, такого как, например, трет-бутоксид натрия, карбонат натрия или цезия и тому подобное, и подходящего лиганда, такого как, например, 2-(ди-трет-бутилфосфино)бифенил и тому подобное, в соответствующем растворителе, таком как, например, ДМФА, ОМА, АС^ диоксан, Ν-метилпирролидон, толуол и тому подобное, при температуре в диапазоне от КТ до температуры кипения с обратным холодильником.

Согласно преобразованию С соединение формулы (I) или формулы (VII), как определено выше, где по меньшей мере один из К' и К!' представляет собой водород, может быть преобразовано в соответствующее соединение формулы (I) или формулы (VII) соответственно, где К и К! являются такими, как определено выше, но не могут одновременно являться атомами водорода, путем взаимодействия исходного вещества с подходящим альдегидом или кетоном в присутствии восстанавливающего агента, такого как триацетоксиборгидрид натрия, триацетоксиборгидрид тетраметиламмония, цианоборгидрид натрия, боргидрид натрия, цинк, необязательно в присутствии протонсодержащей кислоты, такой как ТРА, хлористо-водородная, уксусная, муравьиная кислота и тому подобное, или в присутствии кислоты Льюиса, такой как хлорид цинка, бромид цинка, хлорид оловаЦУ), хлорид титанаЦУ), трифторид бора и тому подобное, в соответствующем растворителе, таком как метанол, этанол, ЭСМ, уксусная кислота, ДМФА и тому подобное, при температуре в диапазоне от 0°С до КТ.

Согласно преобразованию Ό соединение формулы (I), как определено выше, где К₃ представляет собой водород, может быть преобразовано в соответствующее соединение формулы (I), где К₃ представ- 10 027800 ляет собой галоген, обработкой источником электрофильных галогенов подобно, например Νбромсукцинимиду, Ν-хлорсукцинимиду, Ν-иодсукцинимиду, пиридинийгидробромидпербромиду, брому, йоду, бромисто-водородной кислоте/перекиси водорода, в подходящем растворителе, таком как ацетонитрил, Ν,Ν-диметилформамид, диоксан, тетрагидрофуран, диметилсульфоксид, уксусная кислота, вода, при температуре в диапазоне приблизительно от комнатной температуры до температуры кипения с обратным холодильником и за период времени, варьируемый приблизительно от 1 до 96 ч.

Из всего вышесказанного для специалиста в данной области будет очевидно, что любое соединение формулы (I), содержащее функциональную группу, которая может быть в дальнейшем преобразована в другую функциональную группу обработкой хорошо известными в данной области методами, таким образом, приводящей к другим соединениям формулы (I), как предполагается, охватывается объемом настоящего изобретения. Согласно любому из вариантов способа получения соединений формулы (I) исходные вещества и любые другие реагенты являются известными или легко могут быть получены известными способами. В частности, соединения формулы (III), (VI), (У1а) и (У1Ь) являются коммерчески доступными или могут быть получены известными способами, и соединения формулы (II) и (V) могут быть получены согласно АО 2010133647.

Из всего вышесказанного для специалиста в данной области будет очевидно, что при получении соединений формулы (I) по любому из указанных выше вариантов способа необязательные функциональные группы в исходных соединениях или соответствующих им промежуточных соединениях, которые могут привести к нежелательным побочным реакциям, необходимо соответственно защищать общепринятыми способами. Подобным образом, преобразование этих последних в незащищенные соединения может быть осуществлено известными способами, описанными, например, в: Огеепе, ТПеобога А. апб Аи1д, Ре!ег О.М. - Рго!;есПуе Огоирз ίη Огдашс 5упШе818, ТЫгб Εάίίίοπ, .1оИп АПеу & δοπδ ^с., Νηυ Уогк (ΝΥ), 1999.

Как легко понять, если соединения формулы (I), полученные описанным выше способом, получают в виде смеси изомеров, их разделение с применением общепринятых методов на отдельные изомеры формулы (I) входит в объем настоящего изобретения.

Общепринятые методы разделения рацематов включают, например, разделительную кристаллизацию диастереоизомерных солевых производных или препаративную хиральную ВЭЖХ и тому подобное. Общие методы разделения соединений, содержащих один или более асимметрических центров, приведены, например, в 1асцие8, 1еап; Со11е4, Апбге; АПеп, δатие1 Н., Епапйотегз, Касета1ез апб Кезо1иПопз, .1о1т АПеу & δοпδ ^с., №\ν Υ/ιΑ (ΝΥ), 1981.

Кроме того, соединения формулы (I) по изобретению могут также быть получены методами комбинаторной химии, широко известными в данной области, например, осуществлением указанных выше взаимодействий между промежуточными соединениями параллельным и/или последовательным способом и обработкой в условиях твердофазного синтеза (δΡδ).

Фармакология.

РАКР-1 представляет собой индуцируемую повреждением ДНК полимеразу, которая катализирует расщепление НАД+ на никотинамид и АДФ-рибозу и затем использует последнюю в синтезе разветвленной нуклеиновой кислоты подобно полимерам [поли(АДФ-рибоза)]. Наиболее исчерпывающе поли(ДЦФ-риболилированным) белком ш уАо является сам РАКР-1, за которым следуют гистоны. РАКР-1 ответственен за 90% этой вызванной повреждением ДНК активности, тогда как оставшиеся 10% обусловлены РАКР-2.

Биохимический анализ.

Оценку аффинности тестируемых соединений и их селективности в отношении рассматриваемых различных изоформ РАКР производят анализом методом замещения.

Идентификацию соединений, способных к связыванию нескольких белков РАКР, осуществляют методом скрининга, включающим стадии:

а) обеспечения реакционной смеси, содержащей исследуемую изоформу белка РАКР, соединение формулы (№)

где К₇ представляет собой атом водорода или метильную группу, В представляет собой группу (СНДт-ΝΗ-, где т равно 2-6; р равно 0 или 1, и X^- представляет собой противоион, и серийные разведения исследуемого соединения;

Ь) сравнения поляризационного сигнала, генерируемого в отсутствии тестируемого соединения, с поляризационным сигналом, генерируемым в присутствии различных концентраций тестируемого со- 11 027800 единения, и

с) оценки способности тестируемого соединения замещать соединение формулы ЦР), как определено выше, измеряемой пониженным уровнем флуоресцентной поляризации.

Предпочтительно по приведенному выше способу скрининга либо белок РАКР и зонд на основе производного 5Н-фенантридин-6-она формулы ЦР) предварительно смешивают, либо белок РАКР и тестируемое соединение предварительно смешивают. В дальнейшем предпочтительном методе скрининга белки РАКР представляют собой РАКР-1 и РАКР-2. Термин белок РАКР охватывает полноразмерные нативные белки, а также их фрагмент. Более предпочтительно К₇ представляет собой водород или метил, р равно 0 или 1; когда р равно 1, т равно 3 или 6, X^- представляет собой трифторацетат. Зонд на основе производного 5Н-фенантридин-6-она формулы (№) был выбран за его способность к связыванию с белками РАКР, охватывающими как полноразмерные нативные белки, так и их фрагмент.

Поляризационный сигнал может быть измерен, например, с помощью планшет-ридера, такого как 8арЙ1ге2 (Тесап). Анализ применен для исследования соединений по настоящему изобретению. Способность к замещению тестируемых соединений формулы (I) коррелируется с аффинностью соединений в отношении НАД-кармана фермента. Специфические зонды формулы (№), используемые в испытании:

Р1. трифторацетат 9-диметиламино-11,11-диметил-1-(3-{метил[(6-оксо-5,6-дигидрофенантридин-2илкарбамоил)метил]карбамоил}пропил)-2,3,4,11-тетрагидронафто[2,3-д]хинолиния;

Р2. трифторацетат 9-диметиламино-11,11-диметил-1-[3-(3-{[(6-оксо-5,6-дигидрофенантридин-2илкарбамоил)метил]аминопропилкарбамоил)пропил]-2,3,4,11-тетрагидронафто[2,3-д]хинолиния;

Р3. трифторацетат 9-диметиламино-11,11-диметил-1-[3-(6-{[(6-оксо-5,6-дигидрофенантридин-2илкарбамоил)метил]амино}гексилкарбамоил)пропил]-2,3,4,11-тетрагидронафто[2,3-д]хинолиния.

Соединение формулы (№), как определено выше, может быть получено, как описано в ШО 2010133647.

Испытание основано на применении зонда формулы (№), который связывается с НАДсвязывающим карманом и использует преимущество существенного изменения поляризационного сигнала, наблюдаемого при связывании зонда с РАКР-1 и РАКР-2. О способности зонда формулы (№) связывать полноразмерные РАКР-1 и РАКР-2 и достоверности испытания ранее сообщалось в ШО 2010133647.

Константа аффинности связывания (КБ) и/или БС₅₀ тестируемых соединений могут быть определены, как описано в ШО 2010133647.

Испытание с применением либо зонда Р1, либо зонда Р3 используют для оценки биохимической эффективности соединений формулы (I), как приведено в табл. 1.

Таблица 1

Соединение	РАКР-1 ЩСбо мкМ)	РАКР-1 (Κά мкМ) *	РАКР-2 ЩСбо мкМ)	РАКР-2 (Κά мкМ)	РАКР-3 ЩСбо мкМ)	РАКР-3 (Κά мкМ)
(1)	<0,25+	<0, 01 +	1,89	1,03	<0,20 +	0, 02
(2)	<0,25	0, 03	2,73	1,96	0,75	-
(ЗИ	<0,25	0, 04	8,3	7,2	0,38	-
(4)	<0,25	<0, 01	0,53	0,24	0,32	0, 09
(5)#	<0,25	0, 01	1,59	1	0,29	-
(6)#	<0,25	0, 01	1,06	0,54	0,36	-
(7)#	<0,25	0, 04	1, 65	1,19	0,29	-
(8)	<0,25	<0, 01	2, 62	-	0,22	0, 03
(Ю)	<0,25	0, 03	1,93	-	0,27	0, 07
(И)	<0,25	0, 02	1,73	-	<0,20	0, 02
(12)	<0,25	<0, 01	1,7	-	<0,20	0, 02
(13)	<0,25	<0, 01	2,31	-	0,21	0, 034
(14)	<0,25	<0, 01	1,21	-	<0,20	0, 01
(15) #	<0,25	0, 01	2,04	-	<0,20	0, 02
(18) #	<0,25	0, 06	1,78	-	<0,20	0, 02
(19) #	<0,25	0, 03	>10	-	<0,20	0, 02
(20) #	<0,25	0, 02	3,22	-	<0,20	<0, 01 +
(21)	<0,25	<0, 01	2,72	-	0,25	0, 05

* - испытание производят с соединением Р3 в качестве зонда. Во всех остальных случаях используют соединение Р1 в качестве зонда.

I - пределы чувствительности анализа с учетом ошибки аппроксимации <50%.

Соединения, помеченные не включены в объем настоящего изобретения.

Из приведенных выше данных для специалиста в данной области будет очевидно, что соединения формулы (I) по настоящему изобретению являются весьма сильнодействующими в качестве ингибиторов РАКР-1 и высокоселективными в сопоставлении с РАКР-2 (сравните значения БС₅₀ и Кб для РАКР-1, РАКР-2 и РАКР-3 в приведенной выше табл. 1).

Испытания на клетках.

РАК-анализ.

Клеточную активность ингибиторов РАКР-1 оценивают, измеряя ингибирование индуцируемого пероксидом водорода образования РАК в клеточной линии НеБа (ЕСАСС). Клеточные уровни РАК оценивают иммуноцитохимически и количественно оценивают на приборе Аггау8сап νΤί (Се11от1с§ Тйегто

- 12 027800

8с1епЦйе).

Исследования проводят следующим образом: 6000 клеток/лунка высевают в 96-луночные планшеты Е1тег) в МЕМ/10% РС8 и инкубируют в течение 24 ч при 37°С, 5% диоксида углерода. Затем добавляют тестируемые соединения в требуемой концентрации за 30'. После чего индуцируют повреждение ДНК добавлением перекиси водорода при концентрации 0,1 мМ в течение 15 мин. Кривые изменения концентрации получают в МЕМ/10% РС8 из исходных растворов соединений в диметилсульфоксиде (ДМСО), и конечная концентрация ДМСО равна 0,002% (об./об.). Дублирующие лунки для каждой точки концентрации подготавливают с типичной наибольшей концентрацией соединения 20 мкМ и при серийном разведении 1:3. Планшеты сушат и фиксируют, добавляя охлажденный раствор метанол-ацетон (70:30) за 15 мин при КТ; фиксирующий раствор отсасывают и лунки сушат на воздухе в течение 5 мин и затем дегидратируют в ΡΒ8. Неспецифические участки связывания блокируют, инкубируя лунки в течение 30 мин в ΡΒ8, содержащем 5% (мас./об.) ΡΒ8-0,05% твин 20. Затем лунки инкубируют в течение 1 ч при КТ в ΡΒ8, содержащем мышиное моноклональное антитело против ΡΑΚ (Αη!ΐ-ΡΑΚ, Моизе тАЬ 10Н, ТиНр Са! № 1020), разведенное 1:200 в блокирующем растворе. После 3 промывок в ΡΒ8 лунки инкубируют в ΡΒ8 (мас./об.)-5% ΡΒ8-0,05% твин 20, содержащем 2 мкг/мл конъюгированного с Су2 козьего антимышиного вторичного антитела (Атегзйат кНаппаст Βίο^Η са!. № ΡΑ 42002) (максимум абсорбции 489 нм, максимум флуоресценции 506 нм) и 1 мкг/мл ΙΤΑΙΗ (максимум абсорбции 359 нм, максимум флуоресценции 461 нм) (4',6-диамидино-2-фенилиндолдилактат) (81§та са!. № Ό9564), высокочувствительный краситель для окрашивания нуклеиновых кислот. После еще 3 раз промывки в ΡΒ8 клеточную иммунореактивность по ΡΑΚ оценивают с использованием прибора Α^^ау8саη νΤί с объективом 2е1§§ 10Χ 0,5 Ν.Α. и применением алгоритма Су1о1о\1сИу.У3 (Се11от1с§/Тйегто Р1§йег) с фильтром ΧΡ100. По меньшей мере 10 областей, соответствующих по меньшей мере 900 клеткам, считывают для каждой лунки. Значения Ю₅₀ представляют концентрацию соединения, при которой клеточный ΡΑΚ-сигнал снижается на 50% по сравнению с необработанными контролями. Используют следующую формулу:

1С₅0=Дно+ (Верх-Дно) / (1 + 10^Л ( (ЬодЕС₅₀-Х) ) ) ;

X представляет собой логарифм концентрации; Ю₅₀ означает ответ; Ю₅₀ начинается на дне и расходится до верха в форме буквы 8. В указанных выше испытаниях соединения формулы (I) по настоящему изобретению ингибируют образование ΡΑΚ при значениях Ю₅₀ ниже 1 мкМ, как показано в табл. 2, где они сопоставляются с эталонным соединением А, 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(4-феноксифенил)-2Низохинолин-1-оном, которое описано в патентной заявке ШО 2010133647 и соответствует второму отклоненному соединению по настоящей патентной заявке.

Таблица 2

Соединение	РАК-анализ (1Сбо мкМ)	Соединение	РАК-анализ (1Сбо мкМ)
Эталон, соединение А	0,23	(12)	0, 02
(1)	0, 01	(13)	0,0002
(2)	0, 03	(14)	0, 001
(4)	0, 02	(15)	0, 13
(5)#	0, 1	(18)	0, 13
(7)#	0,21	(19)	0, 07
(8)	0, 01	(20)	0, 08
(Ю)	0, 06	(21)	0, 006
(11)	0, 01

Соединения, помеченные не включены в объем настоящего изобретения.

Испытание на колониеобразование.

ΒΚСΑ-1-мутированные клетки рака молочной железы М^Α-МΒ-436 выращивают при плотности 600 клетки/см² в среде КИМР дополненной 10% фетальной бычьей сывороткой. Спустя 24 ч добавляют различные дозы соединений начиная с концентрации 10 мкМ в двух повторах. Спустя 10 дней клетки фиксируют и окрашивают кристаллическим фиолетовым. Подсчитывают колонии, используя инфракрасный сканер (Обуззеу М-Сог). Антипролиферативный ГС₅₀ рассчитывают, используя Ρ^^δт.

Фармакокинетика.

Фармакокинетический профиль и биодоступность при пероральном введении соединений изучают на мышах (Βа1Ь,Nи/Nи, Наг1ап, Иа1у) в аб Нос фармакокинетических исследованиях. Соединения формулируют в смеси 10% твин 80/декстроза для внутривенного струйного введения, тогда как пероральные введения производят, используя соединения, формулированные в 0,5% метилцеллюлозе. Задают однократное введение при дозе 10 мг/кг и используют по три животных для каждого способа введения. Все образцы крови забирают из ретроорбитальной вены спустя 5, 30 мин, 1, 3, 6, 24 ч после внутривенного введения и спустя 15, 30 мин, 1, 3, 6, 24 ч после перорального введения. Образцы плазмы получают осаждением плазменного белка путем добавления 200 мкл ацетонитрила к 20 мкл плазмы в 96-луночном планшете. После накрывания крышкой и перемешивания вихревым способом планшеты центрифугируют в течение 15 мин при 4000 об/мин. Супернатант рассматривают как конечный экстракт и инжектируют в систему ЖХ-МС-МС (система СВЭЖХ: Ша!ег§ Αс^и^!у, использующая аналитическую колонку ВЕН С18 50*2,1 мм, 1,7 мкм; МС-измерительный прибор: Ша!ег§ Τ^^, снабженный источником электрораспылительной ионизации, оперирующим в режиме определения положительных ионов). Нижний

- 13 027800 предел количественных колебаний составляет 5,0 нг/мл, верхний предел количественных колебаний составляет 5000 нг/мл. Применяют некомпартментный метод (линейный метод трапеций и линейнорегрессионный анализ зависимости преобразованных в натуральный логарифм концентраций плазмы от временных данных). Абсолютную биодоступность (Е) вычисляют из соотношения средняя пероральная-в.в. (внутривенная) доза-нормализованные значения плазменной АИС (площади под кривой).

Используемые в данном описании сокращения имеют следующее значение:

АИС - площадь под кривой зависимости плазменной концентрации от времени до последней поддающейся обнаружению концентрации

С1 - плазменный клиренс;

Стах - максимальная плазменная концентрация;

Т1/2 - конечный период полувыведения;

νάδδ - объем распределения в равновесном состоянии.

Некоторые иллюстративные соединения формулы (I) оценивали по фармакокинетическим параметрам, приведенным в табл. 3 в виде среднего значения.

Таблица 3

Соединение	С1 (в.в. струйн.) мл/мин/кг	νό33 (в.в. струйн.) л/кг	лис (п.о.) мкм·час ы	Стах (п.о.) МКМ	Т1/2 (п.о.) часы	Г по лис %
(1)	12	3, 6	27	6	3, 9	107
(4)	44,45	7,8	5, 6	3	1,43	83
(8)	28,2	5, 2	7,5	2,85	3	74
(12)	46, 3	4,5	8,15	3, 15	1,77	109
(13)	45	5, 7	10	2	3	128
(14)	20,5	4,2	20,3	2,8	3,5	136
(21)	45, 4	6, 5	10,5	4, 6	3, 9	133

Из приведенного выше для специалиста в данной области будет очевидно, что соединения формулы (I) обладают фармакокинетическими профилями и пероральной биодоступностью в диапазоне от хороших до превосходных.

Исследования эффективности ιη νίνο.

Самцов бестимусных Νιι/Νιι, С1)1 от Сйаг^ КАег (Иа1у), содержат в соответствии с Директивой Совета Европейского Сообщества № 86/609/ЕЕС по защите животных, используемых в экспериментальных или других научных целях, в клетках с покрытием из фильтровальной бумаги, стерильным кормом и подстилкой и подкисленной водой. Фрагменты Сарап-1 рака поджелудочной железы человека имплантируют подкожно. Отбирают мышей с пальпируемой опухолью (100-200 мм³) и рандомизируют на контрольную и обрабатываемые группы. В каждую группу включают семь животных. Обработку начинают по прошествии одного дня после рандомизации. Соединения формулы (I) вводят пероральным способом в виде метилцеллюлозной суспензии. Во время экспериментов размер опухоли регулярно измеряют кронциркулем и вычисляют опухолевую массу, как описано в 31теош М. е! а1., Сапсег ΙΚτ'δ 64, 1094-1101 (2004). Ингибирование роста опухоли (ТС1, %) вычисляют по уравнению: %ТС1=100-(средняя опухолевая масса обработанной группы/средняя опухолевая масса контрольной группы)*100.

Характерное соединение формулы (I), соединение 1, оценивают на противоопухолевую активность, используя модель Сарап-1 мутированного ВКСА-2 мышей в комбинации с темозоломидом. Соединение 1 вводят пероральным способом при дозе 100 мг/кг ежедневно в течение 14 последовательных дней (дни 1-14). Темозоломид вводят пероральным способом при дозе 50 мг/кг на 3, 4, 5, 6, 7 и 8 дни. Каждые 3 дня измеряют рост опухоли и массу тела. Рост опухоли определяют кронциркулем. Регистрируют два диаметра и массу опухоли вычисляют по следующей формуле: длина (мм)хширина²/2. Эффект противоопухолевой обработки оценивают как задержку наступления экспоненциального роста опухоли (см. в качестве справочной информации Апбсапсег Φυ§δ 7:437-60, 1996). Эту задержку (значение Т-С) определяют как разность во времени (в днях), требуемом для опухолей в обрабатываемой группе (Т) и контрольной группе (С) для достижения заранее заданного размера (1г). Токсичность оценивают на основании снижения массы тела и уровня выживаемости животных. Результаты приведены в табл. 4.

Таблица 4

Обработка	ТС1 (%)	веть (%)	Т-С (дни)	Токсичность
Соединение 1, 100 мг/кг*	21	3	4	0/7
Темозоломид 50 мг/кг**	13	2,5, 1		0/7
Темозоломид 50 мг/кг+ соединение 1, 100 мг/кг***	94	8	>40	0/7

* - пероральные обработки производят ежедневно с 1 по 14 день.

** - обработки производят пероральным способом один раз в день на 3, 4, 5, 6, 7 и 8 дни.

*** _ обработки соединением 1 с 1 по 14 день, обработки темозоломидом на 3, 4, 5, 6, 7, 8 дни.

Т-С, наблюдаемое в случае комбинации соединения 1 с темозоломидом, превосходит ожидаемое, полученное простым сложением Т-С однократных обработок, свидетельствуя о сильном синергизме. Из приведенного выше для специалиста в данной области будет очевидно, что соединения формулы (I) обладают хорошими синергическими, ингибирующими опухолевый рост активностями в комбинации с

- 14 027800 цитотоксическими средствами.

Таким образом, настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I), полезным в терапии.

Соединения формулы (I) по настоящему изобретению, полезные для лечения млекопитающих, например людей, могут быть введены общепринятыми способами, и уровни доз зависят от возраста, массы, состояний пациента и способа введения.

Например, подходящая дозировка для перорального введения соединения формулы (I) может изменяться в диапазоне приблизительно от 1 до 1000 мг на дозу при приеме 1-5 раз в день. Соединения по изобретению могут быть введены в различных лекарственных формах, например перорально, в форме таблеток, капсул, таблеток, покрытых сахарной или пленочной оболочкой, жидких растворов или суспензий; ректально в форме суппозиториев; парентерально, например внутримышечно или посредством внутривенной, и/или интратекальной, и/или интраспинальной инъекции или инфузии.

Как указано выше, настоящее изобретение также включает фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с фармацевтически приемлемым эксципиентом, который может быть носителем или разбавителем.

Фармацевтические композиции, содержащие соединения по изобретению, обычно получают описанными ниже общепринятыми способами и вводят в подходящей фармацевтической форме. Например, твердые пероральные формы могут содержать вместе с активным соединением разбавители, например лактозу, декстрозу, сахарозу, целлюлозу, кукурузный крахмал или картофельный крахмал; лубриканты, например диоксид кремния, тальк, стеариновую кислоту, стеарат магния или кальция и/или полиэтиленгликоли; связующие средства, например крахмалы, смолу акации, желатин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливинилпирролидон; дезинтегранты, например крахмал, альгиновую кислоту, альгинаты или крахмалгликолят натрия; шипучие смеси; красители; подсластители; увлажняющие средства, такие как лецитин, полисорбаты, лаурилсульфаты, и в большинстве случаев нетоксичные и фармакологически неактивные вещества, применяемые в фармацевтических составах. Эти фармацевтические препараты могут быть изготовлены известным способом, например способами смешения, гранулирования, таблетирования, нанесения сахарного покрытия или пленочного покрытия.

Жидкие дисперсии для перорального введения могут представлять собой, например сиропы, эмульсии и суспензии. Например, сиропы могут содержать в качестве носителя сахарозу или сахарозу с глицерином и/или маннитом и сорбитом.

Суспензии и эмульсии могут содержать в качестве примеров носителей природную камедь, агар, альгинат натрия, пектин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливиниловый спирт. Суспензия или растворы для внутримышечных инъекций могут содержать вместе с активным соединением фармацевтически приемлемый носитель, например стерильную воду, оливковое масло, этилолеат, гликоли, например пропиленгликоль, и при необходимости подходящее количество гидрохлорида лидокаина.

Растворы для внутривенных инъекций или инфузий могут содержать в качестве носителя стерильную воду или предпочтительно они могут быть в форме стерильных, водных, изотонических, солевых растворов или они могут содержать пропиленгликоль в качестве носителя.

Суппозитории могут содержать вместе с активным соединением фармацевтически приемлемый носитель, например масло какао, полиэтиленгликоль, поверхностно-активное вещество - полиоксиэтиленовый эфир сорбита и жирной кислоты или лецитин.

Экспериментальная часть.

В отношении любого конкретного соединения формулы (I) по изобретению, необязательно в форме фармацевтически приемлемой соли, см. экспериментальную часть и формулу изобретения. Что касается последующих примеров, соединения по настоящему изобретению синтезируют, используя описанные в данном описании способы или другие способы, хорошо известные в данной области.

Используемые в данном описании сокращения и обозначения имеют следующие значения:

мкМ - микромолярный;

мкл - микролитр;

мкм - микрометр;

моль - моли;

мМ - миллимолярный;

ммоль - миллимоли;

нм - нанометры;

г - граммы;

мг - миллиграммы; нг - нанограммы;

ЭС₅₀ - полумаксимальная концентрация замещения;

ГС₅₀ - полумаксимальная ингибирующая концентрация;

РАК - [поли(АДФ-рибоза)];

МЕМ - минимальная питательная среда;

РС8 - фетальная телячья сыворотка;

РВ§ - фетальная бычья сыворотка;

- 15 027800

ΡΒδ - забуференный фосфатом физиологический раствор;

ЖХ-МС - жидкостная хроматография-масс-спектрометрия;

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография;

ТСХ - тонкослойная хроматография;

ЯМР - ядерный магнитный резонанс;

МГц - мегагерц;

Гц - герц;

- константа связывания; м.д. - миллионные доли; δ - химический сдвиг;

ДМСО-д₆ - дейтерированный диметилсульфоксид;

СЭС - дейтерированный хлороформ;

ΑСN - ацетонитрил;

ΕΐΟΑс - этилацетат;

ЭСМ - дихлорметан;

ΌΜΑ - Ν,Ν-диметилацетамид;

ДМФА - Ν,Ν-диметилформамид;

ТГФ - тетрагидрофуран;

ΤΡΑ - трифторуксусная кислота;

ЕЫ - ионизация при электрораспылении;

КТ - комнатная температура;

К, - время удерживания; мин - минуты; ч - час(ы).

Следующие примеры даны с целью лучшей иллюстрации настоящего изобретения без наложения на него какого-либо ограничения.

Как использовано в данном описании, символы и условные обозначения, применяемые в способах, схемах и примерах, соответствуют применяемым в современной научной литературе, например в 1оитпа1 оГ (Не Лтепсап СЬетюа1 8ос1е1у или в 1оитпа1 оГ Вю1ощса1 СЬет181гу.

Если не указано иное, все вещества получены от коммерческих поставщиков с наивысшей степенью очистки и использовались без дополнительной очистки. Безводный растворитель, такой как ДМФА, ТГФ, ЭСМ и толуол, получен от ΑΙάήΛ СНетюа1 Сотрапу. Все взаимодействия, включающие воздухоили влагочувствительные соединения, осуществляли в атмосфере азота или аргона.

Общая очистка и аналитические способы.

Флэш-хроматографию осуществляли на силикагеле (Мегск дгабе 9395, 60 А).

При необходимости соединения очищали препаративной ВЭЖХ на колонке ΡНеηοтеηеx Сетий С18 (21x250 мм, 10 мкм) или на колонке \Уа1ег5 X Тегга ΚΡ 18 (19x100 мм, 5 мкм), используя систему \У;йег5 РгасБопБупх ЗуЧет. снабженную детектором 2996 ΡΌΑ, и масс-спектрометр с одной квадрупольной линзой ΖΟ2000, с ионизацией при электрораспылении (положительный и отрицательный режим). Подвижная фаза А представляла собой смесь 0,1% ΤΡΑ/ΑΌΝ 95/5, и подвижная фаза В представляла собой ΑСN. Градиент от 10 до 90% В за 15 мин, удерживание 90% В в течение 3 мин. Скорость потока 20 мл/мин. Альтернативно, подвижная фаза А представляла собой смесь 0,05% гидроксида аммония/ΑСN 95/5 и подвижная фаза В представляла собой ΑСN. Градиент от 10 до 90% В за 12 мин, удерживание 90% В в течение 2 мин. Скорость потока 20 мл/мин.

ВЭЖХ-МС/УФ-анализы осуществляли на ионной ловушке БС’О ЭесаХБ (ТЬегто, 8ап 1о§е, υδ), снабженной источником ионов с электрораспылением. Масс-спектрометр соединен с системой ВЭЖХ 8итуеуот (ТЬегто, 8ап 1о§е, И8) с УФ-детектором с фотодиодной матрицей (УФ-детектирование 215-400 нм). Использовали колонку ΡЬеηοтеηеx Сет1т С18 со1итп 110 Α 50x4,6 мм, размер частиц 3 мкм. Подвижная фаза А представляла собой смесь 5 мМ ацетатно-аммонийный буфер (рН 5,5 с помощью уксусной кислоты)/ΑСN 95/5, и подвижная фаза В представляла собой смесь 5 мМ ацетатно-аммонийный буфер (рН 5,5 с помощью уксусной кислоты)МЛН 5/95. Градиент от 0 до 100% В за 7 мин, удерживание 100% В в течение 2 мин. Скорость потока 1 мл/мин. Объем вводимой пробы 10 мкл. Времена удерживания (К, ВЭЖХ) даны в минутах. Масса представлена как отношение т/ζ.

Как сообщалось ранее (М. Со1отЬо, Ρ.Κ. 81г1ог1, V. Κ^ζζο, КарШ Соттип Ма88 8рес!гот 2004, 18(4), 511-517), масс-спектры высокого разрешения с Е8!(+) (НКМ8) получали на масс-спектрометре О-ТоГ ИШша (^а1ет8, МапсЬеЧег ИК) непосредственно соединенном с микро-ВЭЖХ-системой Α§^1еηΐ 1100 (Ба1о Α1ω, υδ).

Спектры 'Н-ЯМР регистрировали при постоянной температуре 28°С на спектрометре Уапап ΣΝΟVΑ 400, работающем на 400,5 МГц и снабженном 5 мм по оси ζ зондом косвенного детектирования ΡΡС (¹Η{¹⁵Ν-³¹Ρ}).

'Н-химические сдвиги приводились относительно остаточных сигналов растворителя (ДМСО-д₆

- 16 027800 при 2,50 м.д. и СЭСЕ, при 7,27 м.д.). Данные представлены следующим образом: химический сдвиг δ, мультиплетность с - синглет, д - дублет, т - триплет, кв - квартет, ушир. с - уширенный синглет, тд - триплет дублетов, дд - дублет дублетов, ддд - дублет дублетов дублетов, м - мультиплет, константы связывания (I, Гц) и число протонов.

Исходные вещества для способа А.

Следующие новые соединения формулы (II) получали, как описано в ^02010133647, с использованием подходящих исходных веществ:

3-(4-Бромфенил)-7-фтор-4Н-бензо[£][1,4]оксазепин-5-он [(II), К₃=4-Вг, К₄=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,08 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-й₆) δ м.д. 6,94 (с, 1Н), 7,20 (дд, Σ_ΗΓ=9,0, 1_НН=4,6 Гц, 1Н), 7,41-7,45 (м, 3Н), 7,50 (дд, 1_НР=9,0, Э_НН=3,1 Гц, 1Н), 7,57-7,61 (м, 2Н), 9,97 (ушир.с, 1Н).

НРМ8 (ΕδΣ) вычислено для С· 5 Ι ΒιΓΝΌ; [М+Н]+ 333,9874, найдено 333,9877.

3- (3-Бромфенил)-7-фтор-4Н-бензо[£][1,4]оксазепин-5-он [(II), К₃=3-Вг, К|=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,06 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-й₆) δ м.д. 6,98 (с, 1Н), 7,20 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=4,6 Гц, 1Н), 7,34-7,36 (м, 1Н), 7,41-7,46 (м, 1Н), 7,48-7,52 (м, 2Н), 7,56-7,59 (м, 1Н), 7,67 (т, 1=1,8 Гц, 1Н), 9,97 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (ΕδΣ) вычислено для С 5 Ι ΒιΓΝΟ; [М+Н]+ 333,9874, найдено 333,9876.

4- (7-Фтор-5-оксо-4,5-дигидробензо[£] [1,4]оксазепин-3-ил)бензонитрил [(II), Κ₃=4-ΟΝ, К₄=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 5,16 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-й₆) δ м.д. 7,10 (с, 1Н), 7,23 (дд, Σ_ΗΓ=9,0, 1_НН=4,6 Гц, 1Н), 7,42-7,47 (м, 1Н), 7,50 (дд, 1_НР=8,8, Э_НР=3,3 Гц, 1Н), 7,68 (д, 1=8,6 Гц, 2Н), 7,86 (д, 1=8,6 Гц, 2Н), 10,05 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Е8Ц вычислено для С₁₆Н₁₀Р^О₂ [М+Н]+ 281,0721, найдено 281,0725.

3-(4-Хлорфенил)-7-фтор-4Н-бензо[Е| [1,4]оксазепин-5-он [(II), К₃=4-С1, К₄=Н].

ВЭЖХ (254 нм) : К 6,52 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-й₆) δ м.д. 6,93 (с, 1Н), 7,20 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=4,6 Гц, 1Н), 7,41-7,44 (м, 1Н), 7,44-7,52 (м, 5Н), 9,97 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (ΕδΣ) вычислено для С5Г СПХО- [М+Н]+ 290,0379, найдено 290,0376.

7-Фтор-3-(4-метансульфонилфенил) -4Н-бензо[£][1,4]оксазепин-5-он [(II), К₃=4^О₂Ме, К₄=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 4,60 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-й₆) δ м.д. 3,23 (с, 3Н), 7,08 (с, 1Н), 7,23 (дд, Σ_ΗΓ=9,0, 1_НН=4,6 Гц, 1Н), 7,41-7,46 (м, 1Н), 7,51 (дд, ,1.... 9,0, Э_НН=3,3 Гц, 1Н), 7,75 (д, 1=8,4 Гц, 2Н), 7,93 (д, 1=8,4 Гц, 2Н), 10,06 (с, 1Н).

НКМ5 (Εδ^ вычислено для СкД^ОА [М+Н]+ 334,0544, найдено 334,0546.

7-Фтор-3-(4-фторфенил)-4Н-бензо[!][1,4]оксазепин-5-он [(II), К₃=4-Р, К₄=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,13 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-й₆) δ м.д. 6,87 (с, 1Н), 7,20 (дд, 1_НР=8,9, 1_НН=4,5 Гц, 1Н), 7,18-7,26 (м, 2Н), 7,40-7,45 (м, 1Н), 7,48-7,56 (м, 3Н), 9,94 (ушир.с, 1Н).

НКМ5 (Εδ^ вычислено для С₁₅Н₁₀Р^О₂ [М+Н]+ 274,0674, найдено 274,0681.

7-Фтор-3-(3-трифторметилфенил)-4Н-бензо[£][1,4]оксазепин-5-он [(II), К₃=3-СР₃, К₄=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,88 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-й₆) δ м.д. 7,05 (с, 1Н), 7,20 (дд, Σ_ΗΓ=9,0, 1_НН=4,4 Гц, 1Н), 7,41-7,46 (м, 1Н), 7,51 (дд, 1_НР=9,0, Э_НН=3,3 Гц, 1Н), 7,63 (дд, 1=7,7, 6,8 Гц, 1Н), 7,73 (д, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,80 (д, 1=6,8 Гц, 1Н), 10,05 (ушир.с, 1Н).

НИ^ (Εδ^ вычислено для С₁₆Н₁₀Р^О₂ [М+Н]+ 324,0642, найдено 324,0628.

7-Фтор-3-(4-морфолин-4-илфенил-4Н-бензо[!][1,4]оксазепин-5-он [(II), К₃=4-(морфолин-4-ил),

К4=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 5,32 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-й₆) δ м.д. 3,11-3,15 (м, 4Н), 3,70-3,75 (м, 4Н), 6,77 (с, 1Н), 6,94 (д, 1=9,0 Гц, 2Н), 7,18 (дд, ,1.... 9,0, 1нн=4,6 Гц, 1Н), 7,32 (д, 1=9,0 Гц, 2Н), 7,39-7,44 (м, 1Н), 7,49 (дд, 1нр=9,0, 1нн=3,3 Гц, 1Н), 9,82 (ушир.с, 1Н).

I ΙΗ\1δ (Εδ^ вычислено для С1₉Н₁₈РЩО₃ [М+Н]+ 341,1296, найдено 341,1294.

3-(3-Бром-4-морфолин-4-илфенил)-7-фтор-4Н-бензо[1] [1,4]оксазепин-5-он [(II), К₃=3-Вг-4(морфолин-4-ил), К4=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,03 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-й₆) δ м.д. 2,95-3,00 (м, 4Н), 3,70-3,77 (м, 4Н), 6,90 (с, 1Н), 7,16 (д, 1=8,4 Гц, 1Н),

7,20 (дд, ,1.... 9,0, 1_НН=4,6 Гц, 1Н), 7,39-7,44 (м, 1Н), 7,47 (дд, 1=8,4, 2,2 Гц, 1Н), 7,49 (дд, Σ_ΗΓ=9,0, Э_НН=3,3 Гц, 1Н), 7,68 (д, 1=2,2 Гц, 1Н), 9,91 (ушир.с, 1Н).

IПКМЯ (Εδ^ вычислено для С₁₉Н₁₇ВгР^О₃ [М+Н]+ 419,0401, найдено 419,0401.

3-(4-Бромфенил)-6,7-дифтор-4Н-бензо[!][1,4]оксазепин-5-он [(II), К₃=4-Вг, К₄=Р].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,55 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-й₆) δ м.д. 7,05-7,12 (м, 1Н), 7,07 (с, 1Н), 7,43-7,50 (м, 2Н), 7,57-7,62 (м, 2Н), 7,607,67 (м, 1Н), 10,12 (ушир.с, 1Н).

- 17 027800

НКМ8 (Ε8Σ) вычислено для С₁₅Н₉ВгР₂ЫО₂ [М+Н]+ 351,9779, найдено 351,9778.

3-(3,Д-Дихлорфенил)-7-фтор-ДН-бензо[Г][1,Д]оксазепин-5-он [(II), К₃=3,Д-дихлор, К₄=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,91 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-ά..) δ м.д. 7,03 (с, 1Н), 7,20 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=Д,6 Гц, 1Н), 7,41-7,46 (м, 1Н), 7,46-7,52 (м, 2Н), 7,66 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,75 (д, 1=2,2 Гц, 1Н), 9,99 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8Σ) вычислено для С₁₅Н₉С1₂РЫО₂ [М+Н]+ 323,9989, найдено 323.9992.

3-(4-Хлор-3-метилфенил)-7-фтор-4Н-бензо[Г][1,4]оксазепин-5-он [(II), К₃=4-Хлор-3-метил, К₄=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,92 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-ά..) δ м.д. 2,33 (с, 3Н), 6,91 (с, 1Н), 7,20 (дд, 1нр=9,0, 1нн=4,6 Гц, 1Н), 7,32 (дд, 1=8,4, 2,0 Гц, 1Н), 7,40-7,45 (м, 2Н), 7,46-7,52 (т, 2Н), 9,93 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8Σ) вычислено для С₁₆Н₁₂С1РЫО₂ [М+Н]+ 304,0535, найдено 304,0540.

3-(3,4-Дифторфенил)-7-фтор-4Н-бензо[Г][1,4]оксазепин-5-он [(II), К₃=3,4-Дифтор, К₄=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 5,47 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-ά..) δ м.д. 6,95 (с, 1Н), 7,20 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=4,6 Гц, 1Н), 7,32-7,36 (м, 1Н), 7,40-7,45 (м, 1Н), 7,45-7,51 (м, 2Н), 7,57-7,62 (м, 1Н), 9,97 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Е8Ц вычислено для СМ 1.С11РХ0· [М+Н]+ 292,0580, найдено 292,0586.

3-(3-Бром-4-пирролидин-1-илфенил)-7-фтор-4Н-бензо[Г][1,4]оксазепин-5-он [(II), К₃=3-Бром-4пирролидин-1-ил, К4=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 7,53 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-ά..) δ м.д. 1,84-1,90 (м, 4Н), 3,30-3,40 (м, перекрытый сигналом воды, 4Н), 6,82 (с, 1Н), 6,93 (д, 1=8,8 Гц, 1Н), 7,19 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=4,6 Гц, 1Н), 7,31 (дд, 1=8,8, 2,2 Гц, 1Н), 7,39-7,44 (м, 1Н), 7,49 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=3,3 Гц, 1Н), 7,55 (д, 1=2,2 Гц, 1Н), 9,87 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Е8Ц вычислено для С₁₉Н₁₇ВгРЫ₂О₂ [М+Н]+ 403,0452, найдено 403,0451.

3-(2,3-Дигидробензо[1,4]диоксин-6-ил)-7-фтор-4Н-бензо[Г][1,4]оксазепин-5-он [(II), К₃=2,3дигидро[1,4]диоксинил, К₄=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 5,95 мин, ¹Н ЯМР (ДМСО-ά..) δ м.д. 4,24 (с, 4Н), 6,79 (с, 1Н), 6,86 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 6,93 (дд, 1=8,4, 2,2 Гц, 1Н), 6,95 (д, 1=2,2 Гц, 1Н), 7,19 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=4,6 Гц, 1Н), 7,39-7,44 (м, 1Н), 7,46-7,49 (м, 1Н), 9,83 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Е8Ц вычислено для С1₇Н₁₃РЫО₄ [М+Н]+ 314,0823, найдено 314,0825.

3-Бензо[1,3]диоксол-5-ил-7-фтор-4Н-бензо[Г][1,4]оксазепин-5-он [(II), К=[1,3] диоксолил, К₄=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 5,13 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-ά..) δ м.д. 6,04 (с, 4Н), 6,81 (с, 1Н), 6,92-6,96 (м, 2Н), 7,04 (д, 1=1,6 Гц, 1Н), 7,19 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=4,6 Гц, 1Н), 7,40-7,44 (м, 1Н), 7,49 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=3,3 Гц, 1Н, 1Н), 9,86 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Е8^ вычислено для С1₆Н₁₁РЫО₄ [М+Н]+ 300,0667, найдено 300,0660.

7-Фтор-3-(3-фтор-4-метоксифенил)-4Н-бензо[Г][1,4] оксазепин-5-он [(II), К₃=3-фтор-4-метокси, К4=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,08 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-йе) δ м.д. 3,85 (с, 3Н), 6,88 (с, 1Н), 7,16-7,22 (м, 2Н), 7,25 (дд, 1=8,4, 2,2 Гц, 1Н), 7,35 (дд, 1_НР=12,6, 1_НН=2,2 Гц, 1Н), 7,40-7,44 (м, 1Н), 7,49 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=3,3 Гц, 1Н), 9,91 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Е8^ вычислено для С1₆Н₁₂Р₂ЫО₃ [М+Н]+ 304,0780, найдено 304,0781.

Пример 1.

Способ А.

Стадия 1.

5-Бензилокси-3-(4-бромфенил)-7-фторбензо[Г] [1,4]оксазепин [(IV), К₃=4-Вг, К₄=Н, РО=бензил].

3-(4-Бромфенил)-7-фтор-4Н-бензо[Г][1,4]оксазепин-5-он (7,0 г, 0,021 моль) растворяли в толуоле (100 мл). Добавляли бензилбромид (4,3 г, 0,025 моль) и Ад₂СО₃ (8,6 г, 0,031 моль), и реакционную смесь нагревали при 80°С до исчезновения исходного вещества. Раствор фильтровали через слой целита и концентрировали досуха. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (нгексан/Е1ОАс=7:1) с получением указанного в заголовке соединения (5,3 г, выход 60%) в виде густого желтого масла.

ВЭЖХ (254 нм): К 9,10 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-ά..) δ м.д. 5,47 (с, 2Н), 7,05 (с, 1Н), 7,20 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=4,6 Гц, 1Н), 7,34-7,39 (м, 1Н), 7,40-7,46 (м, 3Н), 7,50-7,53 (м, 2Н), 7,46-7,53 (м, 3Н), 7,54-7,57 (м, 2Н).

НКМ8 (Е8Ц вычислено для С₂₂Н₁₆ВгРЫО₂ [М+Н]+ 424,0343, найдено 424,0331.

Согласно этой же методике, но используя соответствующие исходные вещества, получали следующие соединения:

5-Бензилокси-3-(3-бромфенил)-7-фторбензо[Г][1,4]оксазепин [(IV), К₃=3-Вг, К₄=Н, РО=бензил].

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 9,11 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-ά..) δ м.д. 5,47 (с, 2Н), 7,08 (с, 1Н), 7,21 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=4,6 Гц, 1Н), 7,24-7,28 (м, 1Н), 7,35-7,38 (м, 1Н), 7,41-7,51 (м, 5Н), 7,55-7,59 (м, 3Н), 7,74 (т, 1=1,8 Гц, 1Н).

- 18 027800

ΗΚΜδ (Εδ^ вычислено для С₂₂Н₁₆ВгР^₂ [Μ+Η]+ 424,0343, найдено 424,0331.

5-Бензилокси-3-(3,4-дихлорфенил)-7-фторбензо[1][1,4]оксазепин [(IV), К₃=3,4-дихлор, Κ=Η,

РО=бензил].

ВЭЖХ (254 нм): К₄ 9,14 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-б₆) δ м.д. 5,48 (с, 2Н), 7,14 (с, 1Н), 7,21 (дд, .Ι....9.0. 1_нн=4,б Гц, 1Н), 7,34-7,38 (м, 1Н), 7,40-7,51 (м, 4Н), 7,53-7,58 (м, 3Η), 7,77 (т, 1=1,8 Гц, 1Н).

ΗΚΜδ (Ε8Γ) вычислено для С₂₂Н₁₅С1₂Р^₂ [М+Н]+ 414,0459, найдено 414,0457.

Стадия 2.

1-Бензилокси-3-(4-бромфенил)-7-фторизохинолин-4-ол [(V), К₃=4-Вг, Κ₄=Η, РО=бензил].

5-Бензилокси-3-(4-бромфенил)-7-фторбензо[Г|[1,4]оксазепин (830 мг, 1,96 ммоль) растворяли в изопропаноле, дегазировали при пониженном давлении и продували аргоном. Реакционную смесь нагревали при 140°С и микроволновом облучении в течение 1 ч. Затем растворитель выпаривали досуха с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества, которое использовали без дальнейшей очистки (750 мг, выход 90%).

ВЭЖХ (254 нм): К 8,75 мин.

'II ЯМР (ДМСО-б₆) δ м.д. 5,59 (с, 2Н), 7,31-7,35 (м, 1Н), 7,39-7,43 (м, 2Н), 7,54-7,59 (м, 2Н), 7,65 (д, 1=8,6 Гц, 2Н), 7,72-7,78 (м, 1Н), 7,83 (дд, 1_НР=9,3, 1_ΗΗ=2,6 Гц, 1Н), 8,13 (д, 1=8,б Гц, 2Н), 8,32 (дд, 1_НР=9,3, 1_НН=5,3 Гц, 1Н), 9,51 (ушир.с, 1Н).

ΗΚΜδ (Εδϋ вычислено для С₂₂Η_1бΒ^ΡNО₂ [Μ+Η]+ 424,0343 обнаружено, 424,0335.

Согласно этой же методике, но используя соответствующие исходные вещества, получали следующие соединения:

1-Бензилокси-3-(3-бромфенил)-7-фторизохинолин-4-ол [(V), К₃=3-Вг, Κ₄=Η, РО=бензил].

ВЭЖХ (254 нм): К₄ 8,40 мин.

'Н ЯМР (ДМСО-б₆) δ м.д. 5,59 (с, 2Н), 7,30-7,46 (м, 4Н), 7,52 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,55-7,59 (м, 2Н), 7,73-7,76 (м, 1Н), 7,85 (дд, 1_НР=9,5, 1_ΗΡ=2,4 Гц, 1Н), 8,17 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 8,31 (с, 1Н), 8,32 (дд, 1_ΗΡ=9,2, 1_НР=5,3 Гц, 1Н), 9,59 (ушир.с, 1Н).

ΗΚΜδ (Ε8Γ) вычислено для С₂₂Н₁₆ВгР^₂ [Μ+Η]+ 424,0343, найдено 424,0337.

1-Бензилокси-3-(3,4-дихлорфенил)-7-фторизохинолин-4-ол [(V), К₃=3,4-дихлор, Κ4=Η, РО=бензил].

ВЭЖХ (254 нм): К 9,14 мин.

'Н ЯМР (ДМСО-б₆) δ м.д. 5,60 (с, 2Н), 7,32-7,35 (м, 1Н), 7,39-7,43 (м, 2Н), 7,54-7,58 (м, 2Н), 7,72 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,75-7,80 (м, 1Н), 7,86 (дд, 1_НР=9,3, 1_ΗΡ=2,6 Гц, 1Н), 8,19 (дд, 1=8,4, 2,2 Гц, 1Н), 8,33 (дд, 1_НР=9,2, 1_НР=5,3 Гц, 1Н), 8,37 (д, 1=2,2 Гц, 1Н), 9,75 (ушир.с, 1Н).

ΗΚΜδ (Ε8Γ) вычислено для С₂₂Η₁5С1₂ΡNО₂ [М+Н]+ 414,0459, найдено 414,0447.

Стадия 3. трет-Бутиловый эфир {2-[1-бензилокси-3-(4-бромфенил)-7-фторизохинолин-4илоксиэтил}карбаминовой кислоты [(VII), Κ'=Κ₂=Κ4=Η, К=трет-бутоксикарбонил, К₃=4-Вг, РО=бензил].

К раствору 1-бензилокси-3-(4-бромфенил)-7-фторизохинолин-4-ола (2,34 г, 5,5 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутилового эфира (2-бромэтил)карбаминовой кислоты [(VI), Κ'=Κ₂=Η, Щ-третбутоксикарбонил] (1,48 г, 6,6 ммоль) в ΌΜΑ (20 мл) добавляли С§₂СО₃ (2,34 г, 0,7 ммоль), и реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение ночи при КТ. Затем раствор разбавляли водой, и водную фазу экстрагировали ЕЮЛс. Органические экстракты объединяли, сушили над №^О₄, концентрировали, и остаток очищали флэш-хроматографией (н-гексан/ΕΐОΑс=9:1) с получением, таким образом, указанного в заголовке соединения (1,87 г, выход 60%).

ВЭЖХ (254 нм): Κ₄ 9,24 мин.

'Н ЯМР (ДМСО-б₆) δ м.д. 1,39 (с, 9Н), 3,27-3,33 (м, перекрытый сигналом воды, 2Н), 3,66 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 5,63 (с, 2Н), 7,12 (т, 1=7,0, 1Η), 7,32-7,37 (м, 1Н), 7,40-7,45 (м, 2Н), 7,56-7,60 (м, 2Н), 7,69 (д, 1=8,4 Гц, 2Н), 7,73-7,79 (м, 1Н), 7,88 (дд, 1_ΗΡ=9,2, 1_ΗΗ=2,6 Гц, 1Н), 8,14 (д, 1=8,4 Гц, 2Н), 8,22 (дд, 1_ΗΡ=9,0, 1ηη=5,3 Гц, 1Н).

ΗΚΜδ (Εδ^ вычислено для С₂9Η₂9Β^ΡN₂О₄ [Μ+Η]+ 567,1289, найдено 567,1298.

Согласно этой же методике, но используя соответствующие исходные вещества, получали следующие соединения:

трет-Бутиловый эфир {2-[1-бензилокси-3-(3-бромфенил)-7-фторизохинолин-4-илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VII), Κ'=Κ₂=Κ₄=Η, Щ-трет-бутоксикарбонил, Κ₃=3-Βγ, РО=бензил].

ВЭЖХ (254 нм): Κ₄ 9,71 мин.

ΊI ЯМР (ДМСО-б₆) δ м.д. 1,38 (с, 9Н), 3,23-3,28 (м, 2Н), 3,67 (т, 1=5,5 Гц, 2Н), 5,63 (с, 2Н), 7,04 (т, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,33-7,37 (м, 1Н), 7,40-7,44 (м, 2Н), 7,46 (дд, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,56-7,60 (м, 2Н), 7,60 (дд, 1=7,8, 1,1 Гц, 1Н), 7,74-7,79 (м, 1Н), 7,90 (дд, 1_ΗΡ=9,2, 1_нн=2,4 Гц, 1Н), 8,16 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 8,22 (м, 1Н), 8,24 (дд, 1ηρ=9,0, 1нн=5,3 Гц, 1Н).

ΗΚΜδ (Εδ^ вычислено для С₂₉Н₂₉ВгР^О₄ [Μ+Η]+ 567,1289, найдено 567,1302.

трет-Бутиловый эфир {2-[1-бензилокси-3-(3-цианофенил)-7-фторизохинолин-4-илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VII), Κ'=Κ₂=Κ₄=Η, Щ-трет-бутоксикарбонил, Κ₃=3-ΟΝ, РО=бензил].

ВЭЖХ (254 нм): Κ₄ 7,69 мин.

- 19 027800 ¹Н ЯМР (ДМСОА) δ м.д. 1,36 (с, 9Н), 3,22-3,26 (м, 2Н), 3,67 (т, 1=5,5 Гц, 2Н), 5,65 (с, 2Н), 7,06 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 7,35-7,38 (м, 1Н), 7,40-7,45 (м, 2Н), 7,57-7,62 (м, 2Н), 7,69-7,73 (м, 1Н), 7,76-7,81 (м, 1Н), 7,87-7,94 (м, 2Н), 8,24 (дд, Ίηρ=9,2, Э_нн=5,3 Гц, 1Н), 8,42 (т, 1=1,5 Гц, 1Н), 8,46 (ддд, 1=7,9, 1, 6, 1,1 Гц, 1Н).

НКМ8 (Ε8Ι) вычислено для Α₀Η₂₉ΡΝ₃Ο₄ [М+Н]+ 514,2137, найдено 514,2142.

трет-Бутиловый эфир {2-[1-бензилокси-3-(3,4-дихлорфенил)-7-фторизохинолин-4-илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VII), К' IV II) Н, К₁'=трет-бутоксикарбонил, IV=3,4-дихлор, РО=бензил].

ВЭЖХ (254 нм): I 9,72 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 1,38 (с, 9Н), 3,26-3,32 (м, 2Н), 3,69 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 5,63 (с, 2Н), 7,09 (т, 1=5,3 Гц, 1Н), 7,33-7,36 (м, 1Н), 7,40-7,44 (м, 2Н), 7,57-7,60 (м, 2Н), 7,72 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,75-7,80 (м, 1Н), 7,90 (дд, 1_ет=9,3, Ίηη=2,4 Гц, 1Н), 8,18 (дд, 1=8,4, 2,0 Гц, 1Н), 8,24 (дд, 1_ет=9,2, Ίηη=5,3 Гц, 1Н), 8,27 (д, 1=2,0 Гц, 1Н).

НКМ8 (Ε8Ι) вычислено для Α₉Η₂₈α₂ΡΝ₂Ο₄ [М+Н]+ 557,1405, найдено 557,1420.

Стадия 4. Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-3-(4-бромфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение 1, К=К₁=К₂=К₄=Н, IV=4-Вг]

трет-Бутиловый эфир {2-[1-бензилокси-3-(4-бромфенил)-7-фторизохинолин-4-илоксиэтил)карбаминовой кислоты (1,51 г, 2,6 ммоль) обрабатывали смесью трифторуксусная кислота/ЭСМ=1:2 (7,5 мл) и перемешивали в течение 2 час при КТ. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт обрабатывали диэтиловым эфиром, фильтровали, растворяли в метаноле и добавляли 4М НС1 в диоксане (6 мл). Раствор оставляли перемешиваться на 1 ч при КТ, концентрировали и обрабатывали диэтиловым эфиром, фильтровали, промывали диэтиловым эфиром и сушили, с получением указанного в заголовке соединения.

ВЭЖХ (254 нм): I 3,99 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 2,97-3,04 (м, 2Н), 3,68 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 7,64-7,69 (м, 2Н), 7,69-7,72 (м, 2Н), 7,72-7,76 (м, 1Н), 7,92 (дд, 1^=9,0, Ϊηη=2,7 Гц, 1Н), 7,98 (ушир.с, 3Н), 8,04 (дд, 1^=9,0, Ϊηη=5,1 Гц, 1н), 11,51 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8^ вычислено для Α₇Η₁₅ΒγΡΝ₂Ο₂ [М+Н]+ 377,0296, найдено 377,0296.

Согласно этой же методике, но используя соответствующие исходные вещества, получали следующие соединения:

Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-3-(3-бромфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение 5, К=К₁=К₂=К₄=Н, IV=3-Вг]

ВЭЖХ (254 нм): I 3, 99.

¹Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 2,96-3,01 (м, 2Н), 3,70 (т, 1=5,1 Гц, 2Н), 7,46-7,50 (м, 1Н), 7,68-7,71 (м, 1Н), 7,72-7,77 (м, 2Н), 7,87 (с, 1Н), 7,92 (дд, 1_ет=9,3, Ί_ΗΗ=2,6 Гц, 1Н), 8,01 (ушир.с, 3Н), 8,04 (дд, 1^=9,3, Ίηη=5,3 Гц, 1Н), 11,52 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8^ вычислено для Α₇Η₁₅ΒγΡΝ₂Ο₂ [М+Н]+ 377,0296, найдено 377,0298.

Гидрохлорид 3-[4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-1 -оксо-1,2-дигидроизохинолин-3-ил] бензонитрила [(I),

ВЭЖХ (254 нм): I 3,55 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-бб) δ м.д. 2,94-3,03 (м, 2Н), 3,68 (т, 1=5,2 Гц, 2Н), 7,69-7,74 (м, 1Н), 7,73-7,79 (м, 1Н), 7,91-7,98 (м, 2Н), 7,99 (ушир.с, 3Н), 8,01-8,06 (м, 1Н), 8,06 (дд, .^=8,9, Д_НН=5,1, 1Н), 8,13 (с, 1Н).

НКМ8 (Ε8^ вычислено для Α₈Η₁₅ΡΝ₃Ο₂ [М+Н]+ 324,1143, найдено 324,1152.

Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(4-пирролидин-1-илфенил)-2Н-изохинолин-1-она [(I), со- 20 027800 единение 7, К=К₁=К2=К₄=Н, К₃=4-пирролидин-1-ил]

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 4,48 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-06) δ м.д. 1,95-2,02 (м, 4Н), 2,97-3,03 (м, 2Н), 3,28-3,32 (м, 4Н), 3,65 (т, 1=5,2 Гц, 2Н), 6,62 (д, 1=8,8 Гц, 2Н), 7,57 (д, 1=8,8 Гц, 2Н), 7,66-7,70 (м, 1Н), 7,87 (дд, 1не=9,3, 1нн=2,6 Гц, 1Н), 7,99 (дд, 1не=9,0, 1нн=5,1, 1Н), 8,00 (ушир.с, 3Н), 11,23 (ушир.с, 1Н).

НКМЗ (ЕМ) вычислено для С^^Е^Ог [М+Н]+ 368,1769, найдено 368,1769.

4-(2-Аминоэтокси)-3-(3,4-дихлорфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-он трифторацетат [(I), соединение 14, К=К1=К₂=К4=Н, К₃=3,4-дихлор].

трет-Бутиловый эфир {2-[1 -бензилокси-3 -(3,4-дихлорфенил)-7-фторизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты (85 мг, 0,15 ммоль) обрабатывали смесью трифторуксусная кислота/ОСМ=1:10 (4,5 мл) и перемешивали в течение 8 ч при КТ. Затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт обрабатывали диэтиловым эфиром и фильтровали с получением, таким образом, 55 мг указанного в заголовке соединения (выход 76%) в виде белого твердого вещества.

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 3,50 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-бб) δ м.д. 3,04 (т, 1=5,5 Гц, 2Н), 3,69 (т, 1=5,5 Гц, 2Н), 7, 70-7, 77 (м, 4Н), 7,90 (ушир.с, 3Н), 7,93 (дд, 1не=8,4, 1нн=2,7 Гц, 1Н), 8,04 (дд, 1не=8,4, 1нн=5,1 Гц, 1Н), 11,55 (ушир.с, 1Н).

НКМЗ (ЕМ) вычислено для СпН1₄С1₂Р^О₂ [М+Н]+ 367,0411, найдено 367,0421.

Исходные вещества для способа В.

Следующие новые соединения формулы (V) получали, как описано в \\'О 2010133647, с использованием подходящих исходных веществ:

4-(7-Фтор-4-гидрокси-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-3-ил) бензонитрил [(V), К₃=4-СН К₄=Н]. ВЭЖХ (254 нм): К₁ 4,88 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 7,70-7,75 (м, 1Н), 7,85-7,88 (м, 3Н), 7,91-7,94 (м, 2Н), 8,05 (дд, Ι_ΗΡ=9,0, ί_ΗΗ=5,3 Гц, 1Н), 8,77 (ушир.с, 1Н), 11,29 (ушир.с, 1Н).

НКМЗ (ЕМ) вычислено для С1₆Н1₀Р^О₂ [М+Н]+ 281,0721, найдено 281,0729. 3-(4-Хлорфенил)-7-фтор-4-гидрокси-2Н-изохинолин-1-он [(V ), К₃=4-С1, К₄=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 4,38 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 7,50-7,54 (м, 2Н), 7,66-7,72 (м, 3Н), 7,87(дд, Ι_ΗΡ=9,3, 1_НН=2,7 Гц, 1Н), 8,02 (дд, 1не=9,0, 1нн=5,3 Гц, 1Н), 8,51 (ушир.с, 1Н), 11,20 (ушир.с, 1Н).

т/ζ (ЕМ) 290 [М+Н]+.

НКМЗ (ЕМ) вычислено для С1₅Η₁₀С1ΡNО₂ [М+Н]+ 290,0379, найдено 290,0381. 7-Фтор-4-гидрокси-3-(4-метансульфонилфенил)-2Н-изохинолин-1-он [(V), К₃=4-8О₂Ме, К₄=Н]. ВЭЖХ (254 нм): К₁ 3,70 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-ае) δ м.д. 3,27 (с, 3Н), 7,70-7,75 (м, 1Н), 7,90 (дд, 1не=9,3, 1нн=2,7 Гц, 1Н), 7,92-7,95 (м, 2Н), 7,99-8,02 (м, 2Н), 8,06 (дд, Ι_ΗΡ=9,0, 1_НН=5,1 Гц, 1Н), 8,75 (ушир.с, 1Н), 11,30 (ушир.с, 1Н).

НКМЗ (ЕМ) вычислено для С1₆Η1₃ΡNО₄3 [М+Н]+ 334,0544, найдено 334,0535. 7-Фтор-3-(4-фторфенил)-4-гидрокси-2Н-изохинолин-1-он [(V ), К₃=4-Р, К₄=Н]. т/ζ (ЕМ) 274 [М+Н]+

НКМЗ (ЕМ) вычислено для С1₅Н₁₀Р^О₂ [М+Н]+ 274,0674, найдено 274,0680. 7-Фтор-4-гидрокси-3-(3-трифторметилфенил)-2Н-изохинолин-1-он [(V), К₃=3-СР₃, К₄=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 5,73 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-а6) δ м.д. 7,66-7,78 (м, 3Н), 7,89 (дд, 1не=9,3, 1нн=2,7 Гц, 1Н), 7,95-7,99 (м, 1Н), 8,02 (с, 1Н), 8,04 (дд, 1не=9,0, 1нн=5,1 Гц, 1Н), 8,67 (ушир.с, 1Н), 11,33 (ушир.с, 1Н).

НКМЗ (ЕМ) вычислено для С1₆Н1₀Р^О₂ [М+Н]+ 324,0642, найдено 324,0642.

7-Фтор-4-гидрокси-3-(4-морфолин-4-илфенил)-2Н-изохинолинон [(V), К₃=4-(морфолин-4-ил),

К4=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 4,10 мин.

¹Н ЯМР (ДМСОЧ) δ м.д. 3,17-3,20 (м, 4Н), 3,74-3,78 (м, 4Н), 7,01 (д, 1=9,0 Гц, 2Н), 7,57 (д, 1=9,0

- 21 027800

Гц, 2Н), 7,63-7,68 (м, 1Н), 7,83 (дд, 1_НР=9,3, 1_НН=2,7 Гц, 1Н), 7,97 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=5,3 Гц, 1Н), 8,22 (ушир.с, 1Н), 10,99 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8Ι) вычислено для С1 Р₈Р\О_; [М+Н]+ 341,1296, найдено 341,1287.

3-(3-Бром-4-морфолин-4-илфенил)-7-фтор-4-гидрокси-2Н-изохинолин-1-он [(V), К₃=3-Вг-4(морфолин-4-ил), К=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 4,77 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 3,01-3,05 (м, 4Н), 3,76-3,80 (м, 4Н), 7,24 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,63-7,71 (м, 2Н), 7,86 (дд, 1_НР=9,3, 1_НН=2,7 Гц, 1Н), 7,92 (с, 1Н), 8,01 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=5,3 Гц, 1Н), 8,49 (ушир.с, 1Н), 11,14 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8Ι) вычислено для С₁₉Н₁₇ВгР^О₃ [М+Н]+ 419,0401, найдено 419,0385.

3-(4-Бромфенил)-7,8-дифтор-4-гидрокси-2Н-изохинолинон [(V), К₃=4-Вг, К₄=Р].

ВЭЖХ (254 нм): К 5,44 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 7,57-7,63 (м, 2Н), 7,63-7,68 (м, 2Н), 7,74-7,80 (м, 1Н), 7,83-7,91 (м, 1Н), 8,52 (ушир.с, 1Н), 11,15 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8Ι) вычислено для С 5 РВгРХО; [М+Н]+ 351,9779, найдено 351,9778.

3-(3,4-Дихлорфенил)-7-фтор-4-гидрокси-2Н-изохинолинон [(V), К₃=3, 4-дихлор, К^Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 2,32 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 7,64-7,67 (м, 1Н), 7,69-7,63 (м, 1Н), 7,71-7,74 (м, 1Н), 7,88 (дд, 1_НР=9,3, 1_НН=2,7 Гц, 1Н), 7,91 (с, 1Н), 8,04 (1_НР=9,0, 1_НН=5,3 Гц, 1Н), 8,69 (ушир.с, 1Н), 11,25 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8Ι) вычислено для С 5 ВСВВХСВ [М+Н]+ 323,9989, найдено 323,9988.

3-(4-Хлор-3-метилфенил)-7-фтор-4-гидрокси-2Н-изохинолин-1-он [(V'), К₃=4-хлор-3-метил, К4=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 5,72 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 2,38 (с, 3Н), 7,47-7,55 (м, 2Н), 7,65 (с, 1Н), 7,67-7,61 (м, 1Н), 7,86 (дд, 1_НР=9,3, 1_НН=2,7 Гц, 1Н), 8,01 (1_НР=9,0, 1_НН=5,3 Гц, 1Н), 8,49 (ушир.с, 1Н), 11,13 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8Ι) вычислено для С₁₆Н₁₂СГОДО₂ [М+Н]+ 304,0535, найдено 304,0536.

3-(3,4-Дифторфенил)-7-фтор-4-гидрокси-2Н-изохинолин-1-он [(V), К₃=3,4-дифтор, К4=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 4,23 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 7,30-7,34 (м, 1Н), 7,50-7,55 (м, 2Н), 7,68-7,73 (м, 1Н), 7,87 (дд, 1_НР=9,3, 1нн=2,7г4, 1Н), 8,01 Ц...9.0. 1нн=5,3 Гц, 1Н), 8,60 (ушир.с, 1Н), 11,21 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8Ι) вычислено для ^₅Η₉Ρ₃ΝΟ₂ [М+Н]+ 292,0580, найдено 292,0581.

3-(2,3-Дигидробензо[1,4]диоксин-6-ил)-7-фтор-4-гидрокси-2Н-изохинолин-1-он [(V'), К₃=2,3дигидро [1,4] диоксинил, К4=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 4,82 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 4,28 (с, 4Н), 6,92 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,13 (дд, 1=8,4, 2,0 Гц, 1Н), 7,19 (д, 1=2,0Гц, 1Н), 7,64-7,69 (м, 1Н), 7,84 (дд, 1_НР=9,3, 1_НН=2,7 Гц, 1Н), 7,98 (1_НР=9,0, 1_НН=5,3 Гц, 1Н), 8,30 (ушир.с, 1Н), 11,01 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8Ι) вычислено для ^₇Η₁₃ΡΝΟ₄ [М+Н]+ 314,0823, найдено 314,0825.

3-Бензо[1,3]диоксол-5-ил-7-фтор-4-гидрокси-2Н-изохинолин-1-он [(V'), К₃=[1,3] диоксолил, К4=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 4,78 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 6,07 (с, 2Н), 7,00 (д, 1=8,2 Гц, 1Н), 7,15 (дд, 1=8,2, 1,5 Гц, 1Н), 7,21 (д, 1=1,5 Гц, 1Н), 7,64-7,70 (м, 1Н), 7,85 (дд, 1_НР=9,3, 1_НН=2,7 Гц, 1Н), 7,99 (1_НР=9,0, 1_НН=5,3 Гц, 1Н), 8,33 (ушир.с, 1Н), 11,04 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8Ι) вычислено для ^<5ΗιιΡΝΟ₄ [М+Н]+ 300,0667, найдено 300,0659.

7-Фтор-3 -(3 -фтор-4-метоксифенил)-4-гидрокси-2Н-изохинолин-1 -он [(V'), К₃=3-фтор-4-метокси, К4=Н].

ВЭЖХ (254 нм): К 4,99 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 3,89 (с, 3Н), 7,25 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=8,4, 1Н), 7,48 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,54 (дд, .Р...12.8. 1нн=2,0 Гц, 1Н), 7,65-7,71 (м, 1Н), 7,86 (дд, 1нт=9,3, 1нн=2,7 Гц, 1Н), 8,01 (1нт=9,0, 1нн=5,1 Гц, 1Н), 8,45 (ушир.с, 1Н), 11,11 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8Ι) вычислено для СНВХСВ [М+Н]+ 304,0780, найдено 304,0777.

Пример 2.

Способ В.

Стадия 3.

трет-Бутиловый эфир {2-[3-(4-хлорфенил)-7-фтор-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты [(УШ), К'=К₂=К4=Н, КАтрет-бутоксикарбонил, К₃=4-С1].

К раствору 3-(4-хлорфенил)-7-фтор-4-гидрокси-2Н-изохинолин-1-она (100 мг, 0,346 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутилового эфира (2-бромэтил)карбаминовой кислоты [(У1Ъ), К'=К₂=Н, К₁' =трет-бутоксикарбонил] (78 мг, 0,346 ммоль) в ДМФА (2 мл) добавляли Св₂СО₃ (135 мг, 0,41 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при КТ, пока не израсходуется исходное вещество.

Растворитель выпаривали досуха, остаток разбавляли водой и водную фазу экстрагировали ЭСМ. Органический экстракт сушили над №₂8О₄, и растворитель удаляли при пониженном давлении. Неочи- 22 027800 щенный продукт очищали флэш-хроматографией (смесь н-гексан/Е1ОЛс=7:3) с получением указанного в заголовке соединения (100 мг, выход 67%) в виде светло-желтого твердого вещества.

т/ζ (Е81) 433 [М+Н]+.

НКМ8 (Е81) вычислено для С₂₂Н₂₃С1Р^О₄ [М+Н]+ 433,1325, найдено 433,1327.

Согласно этой же методике, но используя соответствующие исходные вещества, получали следующие соединения:

трет-Бутиловый эфир {2-[7-фтор-3 -(4-метансульфонилфенил)-1 -оксо-1,2-дигидроизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VIII), К'=К₂=К₄=Н, К^-трет-бутоксикарбонил, К₃=4-8О₂СН₃].

т/ζ (Е81) 494 [Μ+ΝΗ₄+].

ННМ8 (Е81) вычислено для Сб Ι. ΓΝ Ο..8 [М+Н]+ 477,1490, найдено 477,1482.

трет-Бутиловый эфир {2-[7-фтор-3 -(4-фторфенил)-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VIII), К'=К₂=К4=Н, Щ-трет-бутоксикарбонил, К₃=4-Р].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,32 мин.

ΊI ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 1,36 (с, 9Н), 3,04-3,11 (м, 2Н), 3,45 (т, 1=5,5 Гц, 2Н), 6,82 (т, 1=5,2 Гц, 1Н), 7,27-7,34 (м, 2Н), 7,64-7,70 (м, 1Н), 7,71-7,78 (м, 2Н), 7,89 (дд, 1_НР=9,3, 1_НН=2,7 Гц, 1Н), 7,94 (дд, 1_НР=9,1, 1_НН=5,6 Гц, 1Н), 11,41 (ушир.с, 1Н).

ННМ8 (Е8Ц вычислено для С₂₂Н₂₃Р^₂О₄ [М+Н]+ 439,1440, найдено 439,1423.

трет-Бутиловый эфир {2-[3-(4-бромфенил)-7,8-дифтор-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VIII), К'=К₂=Н, КУ-трет-бутоксикарбонил, К₃=4-Вг, К₄=Р].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,66 мин.

ΊI ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 1,37 (с, 9Н), 3,03-3,14 (м, 2Н), 3,44 (т, 1=5,4 Гц, 2Н), 6,87 (т, 1=5,2 Гц, 1Н), 7,61-7,72 (м, 5Н), 7,82-7,92 (м, 1Н), 11,37 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Еб) вычислено для С₂₂Н₂₂ВтР₂^О₄ [М+Н]+ 495,0726, найдено 495,0720. трет-Бутиловый эфир 2-[3 -(3,4-дихлорфенил)-7 -фтор-1 -оксо-1,2-дигидроизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VIII), К'=К₂=К4=Н, Κι' =трет-бутоксикарбонил, К₃=3,4-дихлор].

ВЭЖХ (254 нм): К 3,53 мин.

НКМ8 (Е8Ц вычислено для С₂₂Н₂₂С1₂Р^О₄ [М+Н]+ 467,0935, найдено 467,0934. трет-Бутиловый эфир {2-[3 -(4-хлор-3 -метилфенил)-7 -фтор-1 -оксо-1,2-дигидроизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VIII), К'=К₂=К₄=Н, К₁'=трет-бутоксикарбонил, К₃=4-Хлор-3метил].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,94 мин.

ΊI ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 1,37 (с, 9Н), 2,41 (с, 3Н), 3,08-3,14 (м, 2Н), 3,48 (т, 1=5,5 Гц, 2Н), 6,84 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 7,50 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 7,58 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 7,65-7,70 (м, 1Н), 7,70 (ушир.с, 1Н), 7,89 (дд, 1_НР=9,3, 1_НН=2,7 Гц, 1Н), 7,94 (1_НР=8,2, 1_НН=5,3 Гц, 1Н), 11,34 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Е8Ц вычислено для С₂₃Н₂₅С1Р^О₄ [М+Н]+ 447,1482, найдено 447,1476.

трет-Бутиловый эфир {2-[3-(3,4-дифторфенил)-7-фтор-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VIII), К'=К₂=К4=Н, Щ-трет-бутоксикарбонил, К₃=3,4-дифтор].

НКМ8 (Е8Ц вычислено для С₂₂Н₂₂Р^₂О₄ [М+Н]+ 435,1526, найдено 435,1521.

трет-Бутиловый эфир {2-[3-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-6-ил)-7-фтор-1-оксо-1,2дигидроизохинолин-4-илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VIII), К'=К₂=К4=Н, Щ-третбутоксикарбонил, К₃=2,3-дигидро [ 1,4]диоксинил].

НКМ8 (Е8Ц вычислено для С₂₄Н₂₆Р^О₆ [М+Н]+ 457,1769, найдено 457,1772.

трет-Бутиловый эфир [2-(3 -бензо [ 1,3]диоксол-5-ил-7 -фтор-1 -оксо-1,2-дигидроизохинолин-4илокси)этил]карбаминовой кислоты [(VIII), К'=К₂=К₄=Н, К₁'=трет-бутоксикарбонил, К₃=[1,3]диоксолил].

НКМ8 (Е8Ц вычислено для С₂₃Н₂₄Р^О₆ [М+Н]+ 443,1613, найдено 443,1616.

трет-Бутиловый эфир {2-[7-фтор-3-(3-фтор-4-метоксифенил)-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VIII), К'=К₂=К₄=Н, Щ-трет-бутоксикарбонил, К₃=3-фтор-4метокси].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,29 мин.

Ίί ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 1,36 (с, 9Н), 3,05-3,12 (м, 2Н), 3,48 (т, 1=5,5 Гц, 2Н), 3,91 (с, 3Н), 6,85 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 7,27 (дд, 1_НР=8,9 Гц, 1_НН=8,4, 1Н), 7,50 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,56 (д, 1_НР=Н,9 Гц, 1Н), 7,65-7,70 (м, 1Н), 7,89 (дд, 1нр=9,3, 1нн=2,7 Гц, 1Н), 7,93 Ц...8.6. 1нн=5,1 Гц, 1Н), 11,33 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Е8Ц вычислено для С₂₃Н₂₅Р^₂О₅ [М+Н]+ 447,1726, найдено 447,1713.

Стадия 3.

трет-Бутиловый эфир {2-[3-(4-цианофенил)-7-фтор-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VIII), К'=К₂=К₄=Н, К^-трет-бутоксикарбонил, К₃=4-СЩ·

Смесь РЬ₃Р (422 мг, 1,6 ммоль) и трет-бутилового эфира (2-гидроксиэтил)карбаминовой кислоты (174 мг, 1,08 ммоль) растворяли в безводном ТГФ (3 мл), и полученный раствор охлаждали до 0°С. Реакционную смесь обрабатывали ΌΕΆΌ (235 мг, 1,35 ммоль) и перемешивали в течение 10 мин. Затем добавляли 4-(7-фтор-4-гидрокси-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-3-ил)бензонитрил (150 мг, 0,54 ммоль), и реакционную смесь оставляли перемешиваться на 3 ч при КТ до исчезновения исходного вещества. Рас- 23 027800 творитель удаляли в вакууме, и неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (ОСМ/метанол=95:5), с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

ВЭЖХ (254 нм): К 5,66 мин. т/ζ (ΕδΣ) 424 [М+Н]+.

ΗΚΜδ (Εδ^ вычислено для С₂₃Н₂₃Р^О₄ [М+Н]+ 424,1667, найдено 424,1672.

Согласно этой же методике, но используя соответствующие исходные вещества, получали следующие соединения:

трет-Бутиловый эфир {2-[7-фтор-1-оксо-3-(3-трифторметилфенил)-1,2-дигидроизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VIII), К' К₂ К₄ Н, К₁'=трет-бутоксикарбонил, К₃=3-СР₃].

ВЭЖХ (254 нм): К 6,54 мин. т/ζ (ΕδΣ) 467 [М+Н]+.

ΗΚΜδ (ΕδΓ) вычислено для С^Н^Рд^Од [М+Н]+ 467,1589, найдено 467,1592.

трет-Бутиловый эфир {2-[7-фтор-3-(4-морфолин-4-илфенил)-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VIII), К'=К₂=Кд=Н, К₁'=трет-бутоксикарбонил, К₃=4-(морфолин-4ил)].

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 5,74 мин. т/ζ (ΕδI) 484 [М+Н]+.

ΗΚΜδ (Εδ^ вычислено для С₂₆Н₃₁Р^О₅ [М+Н]+ 484,2242, найдено 484,2237.

трет-Бутиловый эфир {2-[3-(3-бром-4-морфолин-4-илфенил)-7-фтор-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-4-илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VIII), К' К₂ К₄ Н, К1'=трет-бутоксикарбонил, К₃=3-Вг-4(морфолин-4-ил)].

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 6,42 мин. т/ζ (ΕδI) 562 [М+Н]+.

ΗΚΜδ (Εδ^ вычислено для С₂₆Н₃₀ВгР^О₅ [М+Н]+ 562,1347, найдено 562,1341.

Стадия 4'.

Гидрохлорид 4-[4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-1-оксо-1, 2-дигидроизохинолин-3-ил]бензонитрила [(I),

трет-Бутиловый эфир {2-[3-(4-цианофенил)-7-фтор-1-оксо-1, 2-дигидроизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты (40 мг, 0,09 ммоль) растворяли в метаноле и обрабатывали 4М НС1 (0,6 мл, 2,4 ммоль) в диоксане в течение 5 ч. Растворитель выпаривали, полученный остаток смывали метанолом и диэтиловым эфиром до образования осадка. Твердое вещество отфильтровывали и промывали диэтиловым эфиром с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (26 мг, выход 80%).

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 3,52 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-б₆) δ м.д. 2,97-3,04 (м, 2Н), 3,65 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 7,74-7,78 (м, 1Н), 7,88-7,92 (м, 2Н), 7,94 (дд, 1_НР 9,3, 1_НН=2,6 Гц, 1Н), 7,96 (ушир.с, 3Н), 7,96-8,00 (м, 2Н), 8,07 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=5,3 Гц, 1Н), 11,65 (ушир.с, 1Н).

нκмδ (Εδ^ вычислено для С₁₈Н₁₅Р^О₂ [М+Н]+ 324,1143, найдено 324,1150.

Согласно этой же методике, но используя соответствующие исходные вещества, получали следующие соединения:

Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-3-(4-хлорфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение 8, К=К1=К₂=К4=Н, К3=4-СК|

ВЭЖХ (2 54 нм): К₁ 3, 93.

¹Н ЯМР (ДМСО-б₆) δ м.д. 3,00 (т, 1=5,2 Гц, 2Н), 3,67 (т, 1=5,2 Гц, 2Н), 7,55-7,59 (м, 2Н), 7,70-7,77 (м, 3Н), 7,92 (дд, 1нр=9,4, 1нн=2,7 Гц, 1Н), 7,96 (ушир.с, 3Н), 8,03 (дд, 1нр=9,1, 1нн=5,2 Гц, 1Н), 11,51 (ушир.с, 1Н).

I (1<\1δ (ΕδI) вычислено для СпН^СВДОг [М+Н]+ 333,0801, найдено 333,0797.

Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(4-метансульфонилфенил)-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение 9, К=К₁=К₂=К₄=Н, К₃=4^О₂Ме].

- 24 027800

ВЭЖХ (254 нм): К 3,37 мин.

X ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 3,02 (м, 2Н), 3,31 (с, 3Н), 3,70 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 7,74-7,79 (м, 1Н), 7,94 (дд, 1нр=9,2, 1_НН=2,5 Гц, 1Н), 7,97-8,02 (м, 5Н), 8,03-8,06 (м, 2Н), 8,07 (дд, 1_НР=8,8, Э_НН=5,1 Гц, 1Н), 11,61 (ушир.с, 1Н).

НКМЗ (Ε3Ι) вычислено для С₁₈Н₁₈РЫ₂О₄З [М+Н]+ 377,0966, найдено 377,0963.

Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(4-фторфенил)-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение 10, К К К-К. Н, К3=4-Г]

ВЭЖХ (254 нм): К 3,64 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-Х) δ м.д. 2,94-3,03 (м, 2Н), 3,66 (т, 1=5,2 Гц, 2Н), 7,31-7,38 (м, 2Н), 7,70-7,78 (м, 3Н), 7,92 (дд, 1нр=9,3, 1нн=2,8 Гц, 1Н), 7,97 (ушир.с, 3Н), 8,03 (дд, 1нр=8,8, 1нн=5,4 Гц, 1Н), 11,49 (ушир.с, 1Н).

НИМЗ (Ε3Ι) вычислено для С^Н^^Ог [М+Н]+ 317,1096, найдено 317,1101.

Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(3-трифторметилфенил)-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение 2, И И, И₂ И₄ Н, К₃=3-СЕ₃]

ВЭЖХ (254 нм): К 4,25 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-Х) δ м.д. 2,90-2,96 (м, 2Н), 3,66 (д, 1=5,1 Гц, 2Н), 7,70-7,76 (м, 2Н), 7,83 (д, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,91 (дд, 1_НР=9,2, 1_НН=2,7 Гц, 1Н), 7,98 (ушир.с, 3Н), 7,98-8,02 (м, 2Н), 8,04 (дд, Э_НР=8,8, Э_НН=5,5 Гц, 1н), 11,61 (ушир.с, 1Н).

НИМЗ (Ε3Ι) вычислено для С₁₈Н₁₅Р₄Ы₂О₂ [М+Н]+ 367,1064, найдено 367,1067.

Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(4-морфолин-4-илфенил)-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение 3, И И| И₂ И₄ Н, К₃=4-(морфолин-4-ил)]

ВЭЖХ (254 нм): К 3,70 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-Й6) δ м.д. 2,97-3,03 (м, 2Н), 3,21-3,25 (м, 4Н), 3,67 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 3,74-3,79 (м, 4Н), 7,04 (д, 1=9,0 Гц, 2Н), 7,68-7,72 (м, 1н), 7,62 (д, 1=9, 0 Гц, 2Н), 7,88 (дд, Э_НР=9,3, 1_НН=2,7 Гц, 1Н), 8,02 (дд, 1нр=8,8, 1нн=5,3 Гц, 1Н), 8,04 (ушир.с, 3Н), 11,29 (ушир.с, 1Н).

НИМЗ (Ε3Ι) вычислено для СиН^О [М+Н]+ 384,1718, найдено 384,1722.

Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-3-(3-бром-4-морфолин-4-илфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение 4, И И| И₂ И₄ Н, К₃=3-Вг-4-(морфолин-4-ил)]

ВЭЖХ (254 нм): К 4,17 мин.

¹Н ЯМР (ДМСОМ) δ м.д. 2,97-3,04 (м, 2Н), 3,04-3,09 (м, 4Н), 3,70 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 3,77-3,81 (м, 4Н), 7,25 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,71-7,76 (м, 2Н), 7,90 (дд, 1нр=9,2, 1_нн=2,7 Гц, 1Н), 7,93 (д, 1=1,8 Гц, 1Н), 8,03

- 25 027800 (ушир.с, 3Н), 8,04 (дд, 1^=9,0, 1нн=4,8 Гц, 1Н), 11,43 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Е8^ вычислено для С₂₁Н₂₂ВгРХ₃О₃ [М+Н]+ 462,0823, найдено 462,0833.

Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-3-(4-бромфенил)-7,8-дифтор-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение

12, К=К₁=К₂=Н, К₃=4-Вг, К, Р|

ВЭЖХ (254 нм): 3,96 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-б₆) δ м.д. 2,94-3,04 (м, 2Н), 3,64 (т, 1=5,4 Гц, 2Н), 7,63-7,68 (м, 2Н), 7,69-7,73 (м, 2Н), 7,76-7,81 (м, 1Н), 7,86-7,95 (м, 1Н), 7,97 (ушир.с, 3Н), 11,45 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Ε8Σ) вычислено для С₁₇Н₁₄ВгР₂Х₂О₄ [М+Н]+ 395,0201, найдено 395,0199. 4-(2-Аминоэтокси)-3-(3,4-дихлорфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-он [(I), соединение 14,

К=К₁=К₂=К₄=Н, К₃=3,4-дихлор]

Неочищенный гидрохлорид, полученный как описано выше, очищали препаративной ВЭЖХ на колонке РЬепотепех Оетт1 С18 (21x250 мм, 10 мкм), используя систему \4'а1е1> РгасйопРупх 8у§1еш, снабженную детектором 2996 ΡΌΑ, и масс-спектрометром с одной квадрупольной линзой ΖΟ2 000, с ионизацией при электрораспылении (положительный и отрицательный режимы). Подвижная фаза А представляла собой смесь 0,05% XI РАСА 95/5, и подвижная фаза В представляла собой АСИ. Градиент от 30 до 100% В за 15 мин, удерживание 100% В в течение 3 мин. Скорость потока 20 мл/мин.

ВЭЖХ (254 нм): 3,50 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 2,67 (т, 1=5, 9 Гц, 2Н), 3,49 (т, 1=5,9 Гц, 2Н), 7,68-7,71 (м, 1Н), 7,71-7,76 (м, 2Н), 7,89 (дд, 1нр=9,3, 1нн=2,7 Гц, 1Н), 7,97 (д, 1=1,8 Гц, 1Н), 8,02 (дд, 1нр=9,0, 1нн=5,1 Гц, 1Н).

НКМ8 (Ε8Σ) вычислено для С₁₇Н₁₄С1₂РХ₂О₂ [М+Н]+ 367,0411, найдено 367,0421.

Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-3-(4-хлор-3-метилфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение 13, К=К₁=К₂=К₄=Н, К₃=4-хлор-3-метил]

ВЭЖХ (254 нм): 4,20 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 2,41 (с, 3Н), 3,01 (т, 1=5,5 Гц, 2Н), 3,67 (т, 1=5,5 Гц, 2Н), 7,52-7,55 (м, 1Н), 7,56-7,60 (м, 1Н), 7,70 (д, 1=1,5 Гц, 1Н), 7,71-7,76 (м, 1Н), 7,90 (дд, 1_НР=9,2, 1_НН=2,7 Гц, 1Н), 7,98 (ушир.с, 3Н), 8,04 (дд, ,Р·. 9.0. 1нн=5,1 Гц, 1Н), 11,45 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (е8Ц вычислено для С₁₈Н₁₇С1РХ₂О₂ [М+Н]+ 347,0957, найдено 347,0964.

Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-3-(3,4-дифторфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение 15, К=К₁=К₂=К₄=Н, К₃=3,4-дифтор]

ВЭЖХ (254 нм): К 2,85 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-а₆) δ м.д. 3,02 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 3,68 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 7,55-7,60 (м, 2Н), 7,72-7,76 (м, 1Н), 7,76-7,80 (м, 1Н), 7,92 (дд, 1_НР=9,2, 1_нн=2,7 Гц, 1Н), 7,98 (ушир.с, 3Н), 8,05 (дд, 1_нн=9,0, 1_НР=5,1 Гц, 1н), 11,52 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Е8^ вычислено для С₁₇Н₁₄Р₃Х₂О₂ [М+Н]+ 335,1002, найдено 335,1006.

4-(2-Аминоэтокси)-3-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-6-ил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-он [(I), соединение 19, К=К₁=К₂=К₄=Н, К₃=2,3-дигидро[1,4]диоксинил]

- 26 027800

Неочищенный гидрохлорид, полученный как описано выше, очищали препаративной ВЭЖХ на колонке Рйспотспсх Остни С18 (21x250 мм, 10 мкм), используя систему Аа1сг5 РгасйопЬупх 8у§1ст, снабженную детектором 299б РОЛ, и масс-спектрометром с одной квадрупольной линзой ΖΡ2000, с ионизацией при электрораспылении (положительный и отрицательный режимы). Подвижная фаза А представляла собой смесь 0,05% ΝΗ₃ΜΧΝ 95/5, и подвижная фаза В представляла собой АСК Градиент от 5 до 95% В за 25 мин, удерживание 95% В в течение 3 мин. Скорость потока 20 мл/мин.

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 3,б7 мин.

^!Н ЯМР (ДМСО-б_б) δ м.д. 2,б5 (т, 1=5,7 Гц, 2Н), 3,47 (т, 1=5,7 Гц, 2Н), 4,27-4,32 (м, 4Н), б,95 (д, >8,б Гц, 1Н), 7,18 (дд, >8,б, 2,0 Гц, 1Н), 7,19 (д, 1=2,0 Гц, 1Н), 7,бб-7,70 (м, 1Н), 7,88 (дд, 1_НР=9,3, 1нн=2,7 Гц, 1Н), 7,99 (дд, 1нр=9,0, 1нн=5,3 Гц, 1Н).

НКМ8 (Е8Ц вычислено для С^вРКОд [М+Н]+ 357,1245, найдено 357,1241.

Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-3-бензо[1,3]диоксол-5-ил-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение 20, К=К₁=К₂=К₄=Н, К₃=[1,3]диоксолил]

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 2,74 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-бб) δ м.д. 2,97-3,04 (м, 2Н), 3,б8 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), б,11 (с, 2Н), 7,04 (д, 1=8,1 Гц, 1Н),

7,21 (дд, 1=8,1, 1,5 Гц, 1Н), 7,24 (д, 1=1,5 Гц, 1Н), 7,б9-7,74 (м, 1Н), 7,89 (дд, 1нр=9,2, 1нн=2,7 Гц, 1Н), 8,00 (ушир.с, 3Н), 8,02 (дд, 1нр=8,8, 1нн=5,1 Гц, 1Н).

НКМ8 (Е8Ц вычислено для С₁₈Н_1бРК₂О₄ [М+Н]+ 343,1089, найдено 343,1082.

Гидрохлорид 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(3-фтор-4-метоксифенил)-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение 21, К=К₁=К₂=К₄=Н, К₃=3-фтор-4-метокси]

ВЭЖХ (254 нм): К₁ 3,75 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-бб) δ м.д. 2,98-3,04 (м, 2Н), 3,б7 (т, 1=5,1 Гц, 2Н), 3,92 (с, 3Н), 7,28 (дд, 1_НР=9,0, 1_НН=8,4 Гц, 1Н), 7,52 (д, 1=8,4 Гц, 1н), 7,58 (дд, 1_НР=12,б, 1_НН=2,0 Гц, 1Н), 7,70-7,75 (м, 1Н), 7,91 (дд, 1_НР=9,3, 1_НН=2,7 Гц, 1Н), 8,00 (ушир.с, 3Н), 8,03 (дд, 1_НР=9,2, 1_НР=4,8 Гц, 1Н), 11,42 (ушир.с, 1Н).

НКМ8 (Е8Г) вычислено для С^Н^^Оэ [М+Н]+ 347,1202, найдено 347,119б.

Преобразование А.

3-(1-Бензилокси-7-фтор-4-гидроксиизохинолин-3-ил)бензонитрил [(V), К₃=3-СК, К₄=Н, РО=бензил]

Смесь 1-бензилокси-3-(3-бромфенил)-7-фторизохинолин-4-ола (400 мг, 0,94 ммоль), Ζη (33 мг, 0,5 ммоль), Ζη(%Ν)₂ (241 мг, 2 ммоль), Рб₂(бЬа)₃СНС1₃ (59 мг, 0,05б ммоль) и три-третбутилфосфинтетрафторбората (44 мг, 0,15 ммоль) растворяли в дегазированном Ν-метилпирролидоне (20 мл).

После дегазирования смеси при пониженном давлении ее подвергали действию азота и нагревали до 90°С в течение 2 ч. Затем реакционную смесь охлаждали, фильтровали, разбавляли водой и экстрагировали ЕЮАс. Объединенные органические слои промывали водой, сушили над Ка₂8О₄ и упаривали досуха.

Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (н-гексан/ЕЮАс=8:2) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (210 мг, выход б0%).

¹Н ЯМР (СЭС1₃) δ м.д. 5,10 (с, 2Н), 7,20-7,4б (м, 9Н), 7,51-7,58 (м, 2Н), 8,13-8,21 (м, 1Н).

- 27 027800

НКМЗ (ЕЗ^ вычислено для С2эН16ЕЫ2О2 [М+Н]+ 371,1191, найдено 371,1193.

Преобразование В.

трет-Бутиловый эфир {2-[7-фтор-1 -оксо-3-(4-пирролидин-1 -илфенил)-1,2-дигидроизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты [(VII), К'=К₂=Н, К₁'=трет-бутоксикарбонил, К₃=4-пирролидин-1-ил, Κ4=Η, РО=бензил].

Смесь трет-бутилового эфира 2-[1-бензилокси-3-(4-бромфенил)-7-фторизохинолин-4илокси]этил}карбаминовой кислоты (100 мг, 0,176 ммоль), трет-бутоксида натрия (26 мг, 0,264 ммоль), Рй(ОАс)₂ (2 мг, 0,007 ммоль), 2-(ди-трет-бутилфосфино)бифенила (5 мг, 0,016 ммоль) и пирролидина (18 мг, 0,25 ммоль) растворяли в толуоле (3 мл). Реакционную смесь дегазировали, продували аргоном и нагревали до 90°С в течение 2 ч. Раствор фильтровали через слой целлита, и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток разбавляли ЕЮАс, и органическую фазу промывали насыщенным раствором соли.

Органический экстракт сушили над Ыа₂ЗО₄ и упаривали досуха. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (н-гексан/ЕЮАс=85:15) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества, т/ζ (ЕЗ^ 558 [М+Н]+.

НРМЗ (ЕЗ^ вычислено для С₃₃Н₃₇ЕЫ₃О₄ [М+Н]+ 558,2763, найдено 558,2768.

Преобразование Ό.

4-(2-аминоэтокси)-3-(3-бром-4-пирролидин-1-илфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-он [(I), соединение 18, К=К₁=К₂=К₄=Н, К₃=3-бром-4-пирролидин-1-ил]

К перемешиваемой суспензии гидрохлорида 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(4-пирролидин-1илфенил)-2Н-изохинолин-1-она [(I), соединение 7, К=К₁=К₂=Н, К₃=4-пирролидин-1-ил, К4=Н] (15 мг, 0,037 ммоль) в сухом ТГФ (0,3 мл), поддерживаемой при комнатной температуре, добавляли гидробромидпербромид пиридиния (13 мг, 0,04 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, затем летучие компоненты испаряли в вакууме, и полученный неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ на колонке Рйепотепех ОетЫ С18 (21x250 мм, 10 мкм), используя систему ΑπΕΓδ ЕгасйопЕупх Зуδΐет, снабженную детектором 2996 РОЛ и масс-спектрометром с одной квадрупольной линзой Ζ^2000, с ионизацией при электрораспылении (положительный и отрицательный режим). Подвижная фаза А представляла собой смесь 0,05% ЫН₃/АСЫ 95/5, и подвижная фаза В представляла собой АСЫ. Градиент от 5 до 95% В за 25 мин, удерживание 95% В в течение 3 мин. Скорость потока 20 мл/мин.

ВЭЖХ (254 нм): Κ 4,76 мин.

¹Н ЯМР (ДМСО-Й6) δ м.д. 1,88-1,93 (м, 4Н), 2,69 (т, 1=5,7 Гц, 2Н), 3,40-3,44 (м, 4Н), 3,48 (т, 1=5,7 Гц, 2Н), 7,00 (д, 1=8,6 Гц, 1Н), 7,58 (дд, 1=8,6, 2,0 Гц, 1Н), 7,66-7,70 (м, 1Н), 7,85-7,88 (м, 2Н), 7,99 (дд, 1не=9,0, 1нн=5,1 Гц, 1Н).

НКМЗ (ЕЗ^ вычислено для С₂₁Н₂₂ВгЕЫ₃О₂ [М+Н]+ 446,0874, найдено 446,0880.

Claims (11)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Соединение, выбранное из группы, состоящей из

   4-(2-аминоэтокси)-3-(4-бромфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она,

   4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3 -(3-трифторметилфенил)-2Н-изохинолин-1 -она,

   4-(2-аминоэтокси)-3-(3-бром-4-морфолин-4-илфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она,

   4-(2-аминоэтокси)-3-(4-хлорфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она,

   4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3 -(4-фторфенил)-2Н-изохинолин-1 -она,

   3- [4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-3-ил]бензонитрила,

   4- (2-аминоэтокси)-3-(4-бромфенил)-7,8-дифтор-2Н-изохинолин-1-она,

   4-(2-аминоэтокси)-3-(4-хлор-3-метилфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она, 4-(2-аминоэтокси)-3-(3,4-дихлорфенил)-7-фтор-2Н-изохинолин-1-она и 4-(2-аминоэтокси)-7-фтор-3-(3-фтор-4-метоксифенил)-2Н-изохинолин-1-она, или его фармацевтически приемлемая соль.
2. 2. Способ получения соединения формулы (I)

   - 28 027800 где К и К₁ представляют собой водород;

   К₂ представляет собой водород;

   К₃ представляет собой фтор, хлор, бром, циано или необязательно замещенную группу, выбранную из линейного или разветвленного С₁-С₆ алкила, С₁-С₆ алкокси, полифторированного С₁-С₆алкила, 5-6членного гетероциклила, содержащего 1-2 гетероатома, выбранные из азота и кислорода; или К₃ может быть представлен диоксолильным или диоксинильным кольцом, конденсированным с фенильным кольцом;

   К₄ представляет собой водород или фтор, и когда К₄ представляет собой водород, п равен числу от 1 до 5;

   когда К₄ представляет собой фтор, п равен числу от 0 до 5;

   или оптического изомера или их фармацевтически приемлемой соли;

   включающий:

   стадию 1) защиты соединения формулы (II) где К₃ и К₄ являются такими, как определено выше, с помощью соединения формулы РО-Х (III), где РО представляет собой защитную группу, выбранную из группы, состоящей из метила, 1-фенилэтила, бензила и п-метоксибензила, и X представляет собой уходящую группу;

   стадию 2) перегруппировки полученного соединения формулы (IV) где К3, К4 и РО являются такими, как определено выше; стадию 3) алкилирования полученного соединения формулы (V) где К3, К4 и РО являются такими, как определено выше, соединением формулы (VI)

   Н'

   I где К₂ является таким, как определено выше; К' и К₁' имеют такие же значения, как К и К₁ соответственно, как определено выше, но могут также независимо представлять собой СООЩ, где Кб представляет собой необязательно замещенный линейный или разветвленный С₁-С₆ алкил или необязательно замещенный линейный или разветвленный арил-С₁-С₆ алкил; К₅ представляет группу, выбранную из группы, состоящей из галогена, п-толуолсульфоната, метансульфоната, трифторметансульфоната и гидроксильной группы;

   стадию 4) снятия защиты с полученного соединения формулы (VII) где К', К₁', К₂, К₃, К₄ и РО являются такими, как определено выше, с получением соединения формулы (I) как определено выше.
3. 3. Способ селективного ингибирования активности белка РАКР-1 т νίΐΓΟ, включающий приведение в контакт указанного белка с эффективным количеством соединения или его фармацевтически приемлемой соли по п.1.
4. 4. Фармацевтическая композиция, обладающая способностью селективно ингибировать активность поли(АДФ-рибоза)полимеразы РАКР-1 в отношении поли(АДФ-рибоза)полимеразы РАКР-2 и содержа- 29 027800 щая терапевтически эффективное количество соединения или его фармацевтически приемлемой соли по п.1 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, носитель или разбавитель.
5. 5. Фармацевтическая композиция по п.4, дополнительно содержащая одно или более химиотерапевтических средств, выбранное из группы алкилирующих средств.
6. 6. Фармацевтическая композиция по п.5, где алкилирующее средство представляет собой темозоломид.
7. 7. Средство, включающее соединение или его фармацевтически приемлемую соль по п. 1 и одно или более химиотерапевтических средств, в качестве комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в противораковой терапии.
8. 8. Средство по п.7, в котором химиотерапевтическое средство представляет собой алкилирующее средство.
9. 9. Средство по п.8, в котором алкилирующее средство представляет собой темозоломид.
10. 10. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по п.1 в качестве лекарственного средства для лечения заболевания, опосредованного активностью белка поли(АДФрибоза)полимеразы ΡΑΚΡ-1, выбранного из группы, состоящей из злокачественной опухоли, сердечнососудистых заболеваний, поражения центральной нервной системы и воспаления.
11. 11. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по п.1 в изготовлении лекарственного средства для лечения заболевания, опосредованного белком поли(АДФ-рибоза)полимеразы ΡΑΚΡ-1, выбранного из группы, состоящей из злокачественной опухоли, сердечно-сосудистых заболеваний, поражения центральной нервной системы и воспаления.