EA027648B1

EA027648B1 - КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ ЭМБРИОНАЛЬНЫЕ СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ ЧЕЛОВЕКА (ЭСКч) ИЛИ КЛЕТКИ-ПРОИЗВОДНЫЕ ЭСКч, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

Info

Publication number: EA027648B1
Application number: EA200801943A
Authority: EA
Inventors: Гита Шроф
Original assignee: Гита Шроф
Priority date: 2006-03-07
Filing date: 2007-03-06
Publication date: 2017-08-31
Also published as: EP2422796A2; US10545135B2; CN101420964A; JP5649786B2; MX2008011279A; PH12014501028A1; IL193702A; EP2422794A2; US20140051110A1; CA2644922C; US9488643B2; EP2422799A2; US20130122486A1; EP2422803A2; US9804151B2; EP2422802A2; US20090123433A1; DK1993575T3; EP1993575B1; US9134299B2

Abstract

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, которая содержит препарат эмбриональных стволовых клеток человека и их производных, а также к способам их введения в организм человека, в результате которого происходит клиническое обращение симптомов, излечивание, стабилизация или остановка дегенеративных явлений при множестве состояний, заболеваний, которые в настоящее время неизлечимы и смертельны. Настоящее изобретение также относится к способам получения эмбриональных стволовых клеток человека, которые не содержат продуктов животного происхождения, фидерных клеток, факторов роста, фактора ингибирования лейкоза, дополнительных комбинаций минералов, добавок аминокислот, добавок витаминов, фактора роста фибробластов, мембраносвязанного фактора Стила, растворимого фактора Стила и кондиционированной среды.

Description

(54) КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ ЭМБРИОНАЛЬНЫЕ СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ ЧЕЛОВЕКА (ЭСКч) ИЛИ КЛЕТКИ-ПРОИЗВОДНЫЕ ЭСКч, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

027648 Β1 (31) 582/ПЕ172006; 1500/БЕЬ/2006; 60/844,350 (32) 2006.03.07; 2006.06.26; 2006.09.14 (33) ΙΝ; ΙΝ; ϋδ (43) 2009.04.28 (86) РСТ/1В2007/002292 (87) \У() 2007/141657 2007.12.13 (71)(72)(73) Заявитель, изобретатель и патентовладелец: ШРОФ ГИТА (ΙΝ) (74) Представитель:

Нилова М.И. (Κϋ) (56) №ΑΝΟ №.-Н. ЕТ ЛЬ.: Нитап етЬгуошс 81ет се11 1ше8 аге соп1атша1еб: №Ьа1 8Ьои1б тее бо? ΗΌΜΆΝ

ΚΕΡΚΟυυΟΤΊΟΝ 2005 ΌΝΙΤΕΏ ΚΙΝΟΏΟΜ, νσ1. 20, по. 11, 2005, раде8 2987-2989, ΧΡ002466325 Ι88Ν: 0268-1161 14602350 1Ье теЬо1е боситеп1 раде 2988, 1е11-Ьапб со1итп, 1а81 рагадгарЬ

ΥΌ-Α-0218549

ΑΜΙΤ М. ЕТ ЛЬ.: 'Теебег Ьауег- апб 8егит-Егее СиНиге оГ Нитап ЕтЬгуошс 81ет Се118 ΒΙΟΕΟΟΥ ΟΕ ΚΕΡΚΟϋ^ΤΙΟΝ 2004 υΝΙΤΕϋ 8ТЛТЕ8, νσ1. 70, по. 3, 2004, радев 837-845, ΧΡ002466324 Ι88Ν: 0006-3363 аЫгасТ, раде 837, 1ей-Ьапб со1итп, рагадгарЬ 1 - раде 838, 1ей-Ьапб со1итп, рагадгарЬ 1 раде 842, 1ей-Ьапб со1итп, рагадгарЬ 2 - раде 844, пдЫ-Ьапб со1итп, 1а81 рагадгарЬ

ΚΕΙΜΑΝ8ΚΑΥΑ I. ЕТ ЛЬ.: Нитап етЬгуошс 81ет се118 беотеб теНЬои! Геебег се11в 1,.\\СЕТ ТНЕ, ^ΑNСЕТ Е1МЕЕЕ1). ΕΟΝΠΟΝ, ΟΒ, νσ1. 365, по. 9471, 7 Мау 2005 (2005-05-07), радев 1636-1641, ΧΡ004882308 Ι88Ν: 0140-6736 аЬ81гас1 раде 1636, 1ей-Ьапб со1итп, рагадгарЬ 1 - раде 1638, пдЫ-Ьапб со1итп, 1а81 рагадгарЬ раде 1640, пдЫ-Ьапб со1итп, рагадгарЬ 2 - раде 1641, 1ей-Ьапб со1итп, рагадгарЬ 2

8ΤΟ,ίΕΟΥΚΕ Ρ. ЕТ ΑΣ.: 'ΉυΜΑΝ-8ΕΚυΜ ΜΑΤΚΙΧ 8υΡΡΟΚΤ8 υΝΏΙΕΡΕΚΕΝΤΙΑΤΕΏ ΟΚΟΥ'ΤΙΙ ΟΕ ΗυΜΑN ΕΜΒΚΥΟΝΚ 8ТЕМ СЕЕЕ8 8ТЕМ СЕЕЕ8, Α^ΡΗΑΜЕ^ ΡΚΕ88, ΏΑΥΤΟΝ, ΟΚ υ8, νσ1. 23, по. 7, Απ^δί 2005 (200508), раде8 895-902, ΧΡ009065121 Ι88Ν: 1066-5099 аЬ81гас1 раде 895, 1ей-Ьапб со1итп, рагадгарЬ 1 - раде 896, пдЫ-Ьапб со1итп, рагадгарЬ 1 раде 900, 1ей-Ьапб со1итп, рагадгарЬ 1 - раде 901, пдЫ-Ьапб со1итп, рагадгарЬ 1

Е/ \8Н1 Т. ЕТ ΑΕ.: Еоте 02 1еп8юп8 апб 1Ье ргесепЕоп оГ бйГегепйайоп оГ ЬЕ8 се118 ΡΚΟСЕЕ^INΟ8 ΟΕ ТНЕ ΝΑΤΙΟΝΑΕ ДСШЕМУ ΟΕ 8ΟΕ^Ε8 ΟΕ ТНЕ υΝΙΤΕϋ 8ΤΑΤΕ8 ΟΕ ΑΜΕΚΚΑ 29 ΜΑΚ 2005 υΝΙΤΕϋ 8ΤΑΤΕ8, νσ1. 102, по. 13, 29 МагсЬ 2005 (2005-03-29), раде8 4783-4788, ΧΡ002466326 Ι88Ν: 0027-8424 аЬ81гас1 раде 4783, 1ей-Ьапб со1итп, рагадгарЬ 2 - пдЫ-Ьапб со1итп, рагадгарЬ 2; йдиге 1 раде 4787, пдЫ-Ьапб со1итп, рагадгарЬ 3 - раде 4788, пдЫЬапб со1итп, рагадгарЬ 2

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Способ размножения эмбриональных стволовых клеток человека (ЭСКч) и/или клетокпроизводных ЭСКч, где клетки-производные ЭСКч выбраны из группы, состоящей из гематопоэтических стволовых клеток-предшественников, нейрональных стволовых клеток-предшественников, мезенхимальных стволовых клеток-предшественников, инсулин-продуцирующих стволовых клетокпредшественников, стволовых клеток-предшественников гепатоцитов, сердечных стволовых клетокпредшественников, эпителиальных стволовых клеток-предшественников, альбумин-продуцирующих стволовых клеток-предшественников, билирубин-продуцирующих стволовых клеток-предшественников и их смесей, включающий:

(а) добавление суспензии ЭСКч и/или клеток-предшественников ЭСКч к среде для культуры кле- 105 027648 ток, состоящей из минимальной поддерживающей среды, агониста человеческого хорионического βгонадотропина фХГч) и прогестина; и (Ь) культивирование клеток, полученных на этапе (а), при температуре от приблизительно 34 до приблизительно 38°С и содержании углекислого газа в окружающей среде от приблизительно 3,5 до приблизительно 6% в течение от приблизительно 12 до приблизительно 48 ч, причем полученная суспензия клеток содержит смесь недифференцированных и дифференцированных клеток.
2. Способ получения клеток для этапа (а) в способе по п.1, включающий:

(a) сбор эмбриона возрастом 2-7 дней в среду, состоящую из минимальной поддерживающей среды, (b) выделение ЭСКч из эмбриона механическим образом.
3. Способ по п.2, в котором выделение ЭСКч осуществляют встряхиванием.
4. Способ по п.1, в котором указанное культивирование осуществляют в инкубаторе для культур клеток, снабженном водяной рубашкой.
5. Способ по п.1, в котором культивирование осуществляют, по существу, в анаэробных условиях.
6. Способ по п.1, в котором культивирование осуществляют в биосовместимом контейнере.
7. Способ по п.6, в котором культивирование осуществляют, по существу, в анаэробных условиях.
8. Способ по п.1, в котором указанное культивирование осуществляют в биологически совместимом контейнере, объем которого почти полностью занят средой и который поддерживают в вертикальном положении.
9. Способ по п.1, в котором полученные клетки являются в основном недифференцированными.
10. Способ по п.9, в котором полученные клетки характеризуются соотношением недифференцированных к дифференцированным клеткам от приблизительно 4:1 до приблизительно 10:1.
11. Способ по п.2, в котором ЭСКч выделяют из 3-дневного эмбриона.
12. Способ по п.1, дополнительно включающий стадию проверки полученных клеток на наличие загрязнений.
13. Способ по п.1, в котором объемное соотношение суспензии клеток к среде для культуры клеток на этапе (а) составляет от приблизительно 1:3,5 до приблизительно 1:35.
14. Способ по п.1, отличающийся тем, что размноженные ЭСКч и/или клетки-производные ЭСКч не содержат фидерных клеток, продуктов животного происхождения, факторов роста, фактора ингибирования лейкоза, фактора роста фибробластов, витаминных добавок, мембраносвязанного фактора Стила, растворимого фактора Стила и кондиционированной среды.
15. Способ криоконсервации ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, полученных способом по п.1, включающий:

(a) добавление агента криоконсервации к полученной суспензии клеток, (b) замораживание суспензии клеток при температуре от приблизительно -15 до приблизительно 72°С с последующим хранением.
16. Способ по п.15, в котором объемное отношение количества указанного агента криоконсервации к количеству культуральной среды составляет от приблизительно 1:500 до приблизительно 16:1000.
17. Способ по п.15, в котором указанное хранение осуществляют в биологически совместимом контейнере.
18. Способ по п.15, в котором клетки замораживают при температуре от приблизительно -18 до приблизительно -20°С.
19. Способ получения частично дифференцированных ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, включающий:

(a) добавление суспензии ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, полученных способом по п.1 или полученных способом по п.15, после размораживания в среду для культур клеток, состоящую из минимальной поддерживающей среды; и (b) инкубацию суспензии клеток, полученных на этапе (а), при температуре от приблизительно 34 до приблизительно 38°С и содержании углекислого газа в окружающей среде от приблизительно 3,5 до приблизительно 6% в течение от приблизительно 12 до приблизительно 48 ч; причем полученная суспензия клеток содержит частично дифференцированные клетки.
20. Способ по п.19, в котором указанная среда для клеточной культуры представляет собой КРМ1 или ΌΜΕΜ.
21. Способ по п.19, в котором указанную инкубацию осуществляют в инкубаторе для культур клеток, снабженном водяной рубашкой.
22. Способ по п.19, включающий дополнительно этап проверки клеток на наличие загрязнений.
23. Способ по п.19, в котором инкубацию осуществляют в биологически совместимом контейнере.
24. Способ по п.19, в котором объемное отношение суспензии клеток к среде для культур клеток на этапе (а) составляет от 1:3,5 до приблизительно 1:35.
25. Способ по п.23, в котором контейнер поддерживают в горизонтальном положении.
26. Способ по п.19, отличающийся тем, что ЭСКч и/или клетки-производные ЭСКч не содержат фидерных клеток, продуктов животного происхождения, факторов роста, фактора ингибирования лейко- 106 027648 за, фактора роста фибробластов, витаминных добавок, мембраносвязанного фактора Стила, растворимого фактора Стила и кондиционированной среды.
27. Способ криоконсервации ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, полученных способом по п.19, включающий:

(a) добавление агента криоконсервации к суспензии клеток;

(b) замораживание суспензии клеток при температуре от приблизительно -15 до приблизительно 72°С;

(c) хранение замороженных клеток.
28. Способ по п.27, в котором объемное отношение количества указанного агента криоконсервации к количеству культуральной среды составляет от приблизительно 1:500 до приблизительно 16:1000.
29. Способ по п.26, в котором хранение замороженных клеток осуществляют в биологически совместимом контейнере.
30. Способ по п.26, в котором клетки замораживают при температуре от приблизительно -18 до приблизительно 20°С.
31. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний, нарушений или состояний, при которых введение эмбриональных стволовых клеток человека (ЭСКч) и/или клеток-производных ЭСКч может оказать благоприятный для субъекта эффект, включающая терапевтически эффективное количество ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, причем указанные ЭСКч и/или клетки-производные ЭСКч получены способом по любому из пп.1, 15, 19 или 27, и при этом указанные ЭСКч и/или клетки-производные ЭСКч суспендированы в фармацевтически приемлемом биосовместимом растворе.
32. Фармацевтическая композиция по п.31, отличающаяся тем, что указанная композиция находится в готовой к применению дозированной форме.
33. Фармацевтическая композиция по п.32, отличающаяся тем, что указанная готовая к применению дозированная форма представляет собой заполненный шприц.
34. Фармацевтическая композиция по п.32, отличающаяся тем, что ЭСКч и/или их производные имеют достаточную жизнеспособность, чтобы быть терапевтически эффективными.
35. Фармацевтическая композиция по п.34, отличающаяся тем, что жизнеспособность ЭСКч и/или их производных больше 40%.
36. Фармацевтическая композиция по п.31, отличающаяся тем, что раствор представляет собой физиологический раствор.
37. Фармацевтическая композиция по п.31, в которой терапевтически эффективное количество ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч составляет от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн клеток в от приблизительно 0,25 до приблизительно 100 мл биологически совместимого раствора, предпочтительно от приблизительно 750000 до приблизительно 80 млн клеток в от приблизительно 0,25 до приблизительно 10 мл биологически совместимого раствора.
38. Фармацевтическая композиция по п.31, в которой терапевтически эффективное количество гематопоэтических стволовых клеток-предшественников или нейрональных стволовых клетокпредшественников составляет от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн клеток.
39. Фармацевтическая композиция по п.31, отличающаяся тем, что заболевания, нарушения или состояния выбраны из группы, состоящей из рака, инсульта, генетических заболеваний, заболеваний печени, нарушений развития, дегенеративных нарушений, наследственных заболеваний или травматических заболеваний нервной системы, заболеваний сосудов, кожных заболеваний и нарушений, аутоиммунных заболеваний, глазных заболеваний, заболеваний почек, заболеваний сердца, заболеваний опорнодвигательного аппарата, репродуктивных нарушений и нарушений фертильности, артрита и заболеваний крови.
40. Фармацевтическая композиция по п.31, отличающаяся тем, что заболевания, нарушения или состояния выбраны из группы, состоящей из острого миелолейкоза, аденокарциномы, артрита, астроцитомы, атрофии слухового нерва, аутизма, аутоиммунных заболеваний, болезни Альцгеймера, анкилозирующего спондилита, мышечной дистрофии Бекера, повреждения головного мозга, ожогов, острого нарушения мозгового кровообращения, церебрального паралича, комы, изъязвления роговицы, отторжения трансплантата роговицы, кортико-базальной дегенерации нервной системы, ишемической болезни сердца, диабета, слабоумия, синдрома Дауна, мышечной дистрофии Дюшенна, терминальной стадии почечной недостаточности, паралича Эрба, лице-лопаточно-плечевой мышечной дистрофии, нарушений фертильности, атаксии Фридрейха, сердечной недостаточности, гепатомы, наследственного спинального бокового амиотрофического склероза, хореи Хантингтона, болезни Краббе, дистрофии тазового пояса, цирроза печени, дегенерации желтого пятна, умственной отсталости, рассеянного склероза, бокового амиотрофического склероза, инфаркта миокарда, нефротического синдрома, болезни Ниманна-Пика, незаживающих изъязвлений кожных покровов, оливопонтоцеребеллярной дегенерации, атрофии зрительного нерва, болезни Паркинсона, энцефалопатии вследствие электротравмы, энцефалопатии, связанной с введением антирабической вакцины, пролежней, прогрессирующего супрануклеарного паралича, псориаза, атрофии глазного яблока, рестриктивной кардиомиопатии, пигментного ретинита, блокады правой ножки предсердно-желудочкового пучка, саркоидоза, синусовой брадикардии, опухоли спинного

- 107 027648 мозга, спинальной мышечной дистрофии, спинально-церебеллярной атаксии, синдрома СтивенаДжонсона, системной красной волчанки, тромбоцитопении, талассемии, язвенного колита, вегетативного состояния, муковисцедоза, интерстициального заболевания легких, азооспермии, первичного нарушения функции яичников, ящурных язв, гормонального дисбаланса, остеоартрита, синдрома Хорнера, несовершенного остеогенеза, каналопатии и гипогаммаглобулинемии.
41. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний, нарушений или состояний, при которых введение эмбриональных стволовых клеток человека (ЭСКч) и/или клеток-производных ЭСКч может оказать благоприятный для субъекта эффект, включающая терапевтически эффективное количество ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, где ЭСКч и/или клетки-производные ЭСКч получены способом по пп.1, 15, 19 или 27, и в которой указанные ЭСКч и/или клетки-производные ЭСКч заключены в биологически совместимую селективно проницаемую структуру или матрикс.
42. Фармацевтическая композиция по п.41, в которой ЭСКч и/или клетки-производные ЭСКч выбраны из гематопоэтических стволовых клеток-предшественников, нейрональных стволовых клетокпредшественников, комбинации гематопоэтических стволовых клеток-предшественников и нейрональных стволовых клеток-предшественников.
43. Фармацевтическая композиция по п.41, в которой биологически совместимая структура или матрикс выбраны из группы, состоящей из биополимеров, полипептидов, белков, полисахаридов, фибронектина, коллагена, ламинина, кератина, фибрина, фибриногена, гиалуроновой кислоты, гепаринсульфата, хондроитин-сульфата, агарозы и желатина.
44. Композиция по п.41, в которой ЭСКч и/или клетки-производные ЭСКч заключены в смесь агарозы и коллагена или смесь агарозы и желатина.
45. Способ лечения заболевания, нарушения или состояния, при котором введение эмбриональных стволовых клеток человека (ЭСКч) и/или клеток-производных ЭСКч может оказать благоприятный для субъекта эффект, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п.31 или 41.
46. Способ по п.45, в котором заболевание, нарушение или состояние выбирают из группы, состоящей из рака, инсульта, генетических заболеваний, заболеваний печени, нарушений развития, дегенеративных заболеваний, наследственных заболеваний или травматических заболеваний нервной системы, заболеваний сосудов, кожных заболеваний и нарушений, аутоиммунных заболеваний, глазных заболеваний, заболеваний почек, заболеваний сердца, заболеваний опорно-двигательного аппарата, репродуктивных нарушений и нарушений фертильности, артрита и заболеваний крови.
47. Способ по п.45, в котором заболевание, нарушение или состояние представляет собой нарушение развития, выбранное из группы, состоящей из аутизма, церебрального паралича, задержки умственного развития, паралича Эрба, умственной отсталости, прогрессирующего супрануклеарного паралича; или дегенеративное заболевание, выбранное из группы, состоящей из болезни Альцгеймера, кортикобазальной дегенерации, глухоты (атрофии слухового нерва), слабоумия, атаксии Фридрейха, бокового амиотрофического склероза, рассеянного склероза, оливопонтоцеребеллярной атрофии, болезни Паркинсона и спинально-церебеллярной атаксии; или травматическое нарушение нервной системы, выбранное из группы, состоящей из повреждения головного мозга, комы, энцефалопатии вследствие электротравмы, энцефалопатии, связанной с введением антирабическй вакцины, повреждения или травмы спинного мозга и вегетативного состояния; или острое нарушение мозгового кровообращения или инсульт; или наследственное нарушение, выбранное из группы, состоящей из наследственного спинального бокового амиотрофического склероза и хореи Хантингтона; или нарушение печени и почек, выбранное из группы, состоящей из цирроза печени, терминальной стадии хронической почечной недостаточности, нефротического синдрома и болезни Ниманна-Пика; или заболевание кожи, выбранное из группы, состоящей из артрита, атеросклероза, ожогов, незаживающих язв, пролежней, псориаза, системной красной волчанки и саркоидоза; или аутоимунное заболевание, выбранное из группы, состоящей из тромбоцитопении, системной красной волчанки, саркоидоза и язвенного колита; или генетическое заболевание, выбранное из группы, состоящей из синдрома Дауна, анкилозирующего спондилоартрита, талассемии и хореи Хантингтона; или заболевание глаз, выбранное из группы, состоящей из атрофии зрительного нерва, атрофии глазного яблока, дегенерации желтого пятна, пигментного ритинита, ссадины роговицы, отторжения трансплантата роговицы и изъязвления роговицы; или заболевание опорно-двигательного аппарата, выбранное из группы, состоящей из мышечной дистрофии Дюшенна, лице-лопаточно-плечевой мышечной дистрофии, дистрофии тазового пояса, спинальной мышечной атрофии и мышечной дистрофии Бекера; или заболевание сердца, выбранное из группы, состоящей из инфаркта миокарда, блокады правой ножки предсердно-желудочкового пучка, рестриктивной кардиомиопатии, сердечной недостаточности, синусной брадикардии и ишемической болезни сердца, или выбрано из группы, состоящей из острого миелолейкоза, аденокарциномы надпочечника, астроцитомы, гепатомы и опухоли спинного мозга и сахарного диабета.
48. Способ лечения субъекта, страдающего заболеванием, нарушением или состоянием, при котором введение эмбриональных стволовых клеток человека (ЭСКч) и/или клеток-производных ЭСКч может оказать благоприятный для субъекта эффект, включающий введение терапевтически эффективного

- 108 027648 количества фармацевтической композиции по п.31 или 41, причем введение осуществляют путем внутримышечной инъекции, внутривенной инъекции или перидуральной инъекции, или через перидуральный катетер, или путем ретробульбарной инъекции, или подкожной инъекции, или внутрисердечной инъекции, или внутрикистозной инъекции, или интратекальной инъекции, или местного применения или путем введения в пораженные ткани, или путем внутривенного вливания, или при помощи небулайзера, или в форме аэрозоля, или внутривагинальным путем или путем местного закапывания в глаза или местного закапывания в уши.
49. Способ по п.48, в котором терапевтически эффективное количество ЭСКч и/или клетокпроизводных ЭСКч составляет от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн клеток.
50. Способ по п.48, в котором заболевание, нарушение или состояние выбраны из группы, состоящей из рака, инсульта, генетических заболеваний, заболеваний печени, нарушений развития, дегенеративных заболеваний, наследственных нарушений или травматических нарушений нервной системы, заболеваний сосудов, заболеваний и нарушений кожи, аутоиммунных заболеваний, заболеваний глаз, заболеваний почек, заболеваний сердца, заболеваний опорно-двигательного аппарата, нарушений репродуктивной функции и нарушений фертильности, артрита и заболеваний крови; или в котором заболевание, нарушение или состояние выбирают из группы, состоящей из миелолейкоза, аденокарциномы, артрита, астроцитомы, атрофии слухового нерва, аутизма, аутоиммунных заболеваний, болезни Альцгеймера, анкилозирующего спондилита, мышечной дистрофии Бекера, повреждения головного мозга, ожогов, острого нарушения мозгового кровообращения, церебрального паралича, комы, изъязвления роговицы, отторжения трансплантата роговицы, кортико-базальная дегенерации нервной системы, ишемической болезни сердца, диабета, слабоумия, синдрома Дауна, мышечной дистрофии Дюшенна, терминальной стадии почечной недостаточности, паралича Эрба, лице-лопаточно-плечевой мышечной дистрофии, нарушений фертильности, атаксии Фридрейха, сердечной недостаточности, гепатомы, наследственного спинального бокового амиотрофического склероза, хореи Хантингтона, холезни Краббе, дистрофии тазового пояса, цирроза печени, дегенерации желтого пятна, умственной отсталости, рассеянного склероза, бокового амиотрофического склероза, инфаркта миокарда, нефротического синдрома, болезни НиманнаПика, незаживающих изъязвлений кожных покровов, оливопонтоцеребеллярной дегенерации, атрофии зрительного нерва, болезни Паркинсона, энцефалопатии вследствие электротравмы, энцефалопатии, связанной с введением антирабической вакцины, пролежней, прогрессирующего супрануклеарного паралича, псориаза, атрофии глазного яблока, рестриктивной кардиомиопатии, пигментного ретинита, блокады правой ножки предсердно-желудочкового пучка, саркоидоза, синусовой брадикардии, опухоли спинного мозга, спинальной мышечной дистрофии, спинально-церебеллярной атаксии, синдрома СтивенаДжонсона, системной красной волчанки, тромбоцитопении, талассемии, язвенного колита, вегетативного состояния, муковисцедоза, интерстициальное заболеваний легких, азооспермии, первичного нарушения функции яичников, ящурных язв, гормонального дисбаланса, остеоартрита, синдрома Хорнера, несовершенного остеогенеза, каналопатии и гипогаммаглобулинемии.
51. Способ по п.48, при котором введение ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч не вызывает опухоли, тератомы или хромосомных изменений.
52. Способ лечения травмы спинного мозга у субъекта, включающий следующие этапы:

(a) введение от приблизительно 750000 до приблизительно 80 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч путем подкожной инъекции;

(b) повторение этапа (а) и последующее введение терапевтически эффективного количества ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч путем внутримышечной инъекции;

(c) введение терапевтически эффективного количества ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, где указанные клетки включают нейрональные стволовые клетки-предшественники и стволовые клеткипредшественники гематопоэза, путем внутривенной инъекции или вливания;

(ά) введение терапевтически эффективного количества ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, при котором указанные клетки включают нейрональные стволовые клетки-предшественники, путем эпидуральной инъекции и повторение указанной дозы в зависимости от состояния субъекта, которое оценивают путем клинического и/или неврологического осмотра;

(е) введение терапевтически эффективного количества ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, при котором указанные клетки включают нейрональные стволовые клетки-предшественники, путем каудальной инъекции;

(£) введение терапевтически эффективного количества ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, при котором указанные клетки включают нейрональные стволовые клетки-предшественники, путем интратекальной инъекции или через катетер, вводимый под паутинную оболочку;

(д) введение терапевтически эффективного количества ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, при котором указанные клетки включают нейрональные стволовые клетки-предшественники, путем эпидуральной инъекции или через эпидуральный катетер;

(Ь) введение терапевтически эффективного количества ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч путем инъекции в спинной мозг с обеих сторон позвоночника;

(ί) введение терапевтически эффективного количества ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч пу- 109 027648 тем внутривенного вливания;

причем сначала выполняют этапы (а) и (Ъ), а остальные этапы можно выполнять в любом порядке, и ЭСКч и/или их производные, применяемые на этапах (а)-(1), получены способом по п.1 или 19.
53. Способ по п.52, включающий дополнительно повторение этапа (ί), а затем этапа (д) до тех пор, пока у субъекта не будут обнаружены клинические признаки выздоровления от указанной травмы спинного мозга.
54. Способ по п.52, в котором указанные клетки на этапе (а) и на этапе (Ъ) включают гематопоэтические стволовые клетки-предшественники и нейрональные стволовые клетки-предшественники, и указанные клетки суспендированы в 0,25-1,0 мл биологически совместимого раствора.
55. Способ по п.52, в котором указанное терапевтически эффективное количество указанных клеток на этапе (ί) от приблизительно 750000 до приблизительно 11 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, причем указанные клетки суспендированы в 2,0-4,0 мл биологически совместимого раствора.
56. Способ по п.52, в котором указанное терапевтически эффективное количество на этапе (д) составляет от приблизительно 750000 до приблизительно 80 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, причем указанные клетки суспендированы в 15-40 мл биологически совместимого раствора.
57. Способ по п.52, в котором указанное лечение приводит к снижению выраженности пролежней.
58. Способ лечения нарушений развития нервной системы, дегенеративных заболеваний нервной системы, наследственных заболеваний нервной системы, травмы нервной системы или острого нарушения мозгового кровообращения, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, которые включают нейрональные стволовые клетки-предшественники и/или стволовые клеткипредшественники гемопоэза, путем внутривенной инъекции, подкожной инъекции, внутримышечной инъекции, интратекальной инъекции, путем эпидурального вливания через катетер или вливания под паутинную оболочку мозга через катетер.
59. Способ лечения заболеваний кожи, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клетокпроизводных ЭСКч, которые включают гематопоэтические стволовые клетки-предшественники, путем подкожной или внутривенной инъекции.
60. Способ по п.59, в котором указанная фармацевтическая композиция смешана с биологически совместимым носителем для нанесения на поврежденную кожу.
61. Способ по п.60, в котором указанный биологически совместимый носитель представляет собой гель, мазь, пасту или аэрозольный спрей.
62. Способ лечения пролежней, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 80 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, путем местного нанесения и путем внутримышечной инъекции.
63. Способ лечения аутоиммунных заболеваний, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, путем внутримышечной инъекции, внутривенной инъекции, подкожной инъекции, внутрисуставной инъекции или внутривенного вливания или их комбинации.
64. Способ лечения генетических нарушений, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, причем указанные клетки включают нейрональные стволовые клеткипредшественники и/или клетки-предшественники гематопоэтических стволовых клеток, путем внутривенной инъекции, подкожной инъекции, внутримышечной инъекции, интратекальной инъекции, эпидурального вливания через катетер или вливания через катетер под паутинную оболочку мозга или их комбинации.
65. Способ лечения гангрены, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, путем внутривенной инъекции, внутримышечной инъекции, или местного нанесения на границу жизнеспособной и мертвой тканей или с применением комбинации этих способов.
66. Способ лечения состояний, связанных со старением, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, путем внутривенной инъекции, подкожной инъекции, интрамакулярной инъекции или местного нанесения.
67. Способ по п.66, в котором указанный биологически совместимый носитель представляет собой гель, мазь, пасту или аэрозольный спрей.
68. Способ лечения сахарного диабета, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн эмбриональных инсулин-продуцирующих стволовых клеток-предшественников, путем внутривенной или внутримышечной инъекции или обоими путями.
69. Способ лечения сердечно-сосудистых заболеваний, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч

- 110 027648 и/или клеток-производных ЭСКч, которые включают гематопоэтические стволовые клеткипредшественники, путем внутривенной инъекции, подкожной инъекции, внутримышечной инъекции, внутрисердечной инъекции, ангиографии, предпочтительно в ходе ангиографии либо их комбинации.
70. Способ лечения заболеваний печени и почек, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, которые включают гематопоэтические стволовые клетки-предшественники, альбумин-продуцирующие стволовые клетки-предшественники и билирубин-продуцирующие стволовые клетки-предшественники, путем внутривенной инъекции, подкожной инъекции, внутримышечной инъекции, внутривенного вливания или местной инъекции либо с применением комбинации указанных путей.
71. Способ лечения нарушений репродуктивной функции или нарушений фертильности, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, которые включают гематопоэтические стволовые клетки-предшественники, путем местной внутримышечной инъекции, интратестикулярной инъекции или путем подкожной инъекции под эпидидимис либо путем комбинации указанных способов.
72. Способ лечения заболеваний опорно-двигательного аппарата, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, которые включают нейрональные стволовые клеткипредшественники и/или гематопоэтические стволовые клетки-предшественники, путем внутривенной инъекции, подкожной инъекции, внутримышечной инъекции или внутривенного вливания через катетер либо путем комбинации указанных способов.
73. Способ лечения заболеваний глаз, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клетокпроизводных ЭСКч, которые включают нейрональные стволовые клетки-предшественники, гематопоэтические стволовые клетки-предшественники и/или стволовые клетки-предшественники клеток мезенхимы, путем местной внутривенной инъекции, подкожной инъекции, внутримышечной инъекции, ретробульбарной инъекции, инъекции в стекловидное тело, или путем местного применения, или путем нанесения на контактные линзы, либо путем комбинации указанных способов.
74. Способ лечения заболеваний легких, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клетокпроизводных ЭСКч, которые включают нейрональные стволовые клетки-предшественники и/или гематопоэтические стволовые клетки-предшественники, путем внутримышечной инъекции, внутривенной инъекции, в форме спрея или при помощи небулайзера либо с применением комбинации указанных способов.
75. Способ лечения гормональных нарушений, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, которые включают нейрональные стволовые клетки-предшественники и/или гематопоэтические стволовые клетки-предшественники, путем внутримышечной инъекции или внутривенной инъекции либо их комбинации.
76. Способ лечения ящурных язв или других язв, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, которые включают нейрональные стволовые клетки-предшественники и/или стволовые клетки-предшественники гематопоэтических клеток, путем внутримышечной инъекции или внутривенной инъекции или их комбинации.
77. Способ лечения остеоартрита коленного и тазобедренного суставов, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 или 41, содержащей от приблизительно 750000 до приблизительно 160 млн ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, которые включают нейрональные стволовые клеткипредшественники и/или стволовые клетки-предшественники гематопоэтических клеток, путем внутримышечной инъекции, внутривенной инъекции или внутрисуставной инъекции или их комбинации.
78. Способ доставки лекарственного средства субъекту, включающий культивирование ЭСКч и/или клеток-производных ЭСКч, полученных способом по п.1 или 19, в присутствии лекарственного средства, причем ЭСКч и/или клетки-производные ЭСКч поглощают указанное лекарственное средство, и введение указанных клеток субъекту, что обеспечивает доставку лекарственного средства.