EA026688B1 - 2-МЕТИЛСУЛЬФАНИЛ-6-НИТРО-7-ОКСО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИНИД L-АРГИНИНИЯ ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА - Google Patents

2-МЕТИЛСУЛЬФАНИЛ-6-НИТРО-7-ОКСО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИНИД L-АРГИНИНИЯ ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА Download PDF

Info

Publication number
EA026688B1
EA026688B1 EA201600364A EA201600364A EA026688B1 EA 026688 B1 EA026688 B1 EA 026688B1 EA 201600364 A EA201600364 A EA 201600364A EA 201600364 A EA201600364 A EA 201600364A EA 026688 B1 EA026688 B1 EA 026688B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
nitro
triazinide
oxo
triazolo
dihydrate
Prior art date
Application number
EA201600364A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201600364A1 (ru
Inventor
Олег Николаевич ЧУПАХИН
Владимир Леонидович РУСИНОВ
Евгений Нарциссович УЛОМСКИЙ
Константин Валерьевич САВАТЕЕВ
Степан Сергеевич БОРИСОВ
Наталья Александровна НОВИКОВА
Светлана Яковлевна ЛОГИНОВА
Сергей Владимирович БОРИСЕВИЧ
Павел Владимирович СОРОКИН
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "Уральский центр биофармацевтических технологий"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "Уральский центр биофармацевтических технологий" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "Уральский центр биофармацевтических технологий"
Publication of EA201600364A1 publication Critical patent/EA201600364A1/ru
Publication of EA026688B1 publication Critical patent/EA026688B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/53—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with three nitrogens as the only ring hetero atoms, e.g. chlorazanil, melamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C07C279/14—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

Заявляемое изобретение относится к области биологически активных соединений и касается 2-метилсульфанил-6-нитро-7-оксо-1,2,4-триазоло[5,1-c][1,2,4]триазинида L-аргининия дигидрата, обладающего противовирусным действием, предназначенного для лечения и профилактики вирусных заболеваний человека и животных, преимущественно Лихорадки Западного Нила, и может быть использовано в химико-фармацевтической промышленности, научно-исследовательских лабораториях, лечебных учреждениях, а также ветеринарии. Техническим результатом, на достижение которого направлено заявляемое изобретение, является создание нового эффективного средства азолоазинового ряда, обладающего противовирусной активностью в отношении группы РНК-содержащих вирусов, и снижение зависимости активного соединения от клеточного метаболизма. Указанный технический результат достигается тем, что создано новое лекарственное средство 2-метилсульфанил-6-нитро-7-оксо-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид L-аргининия дигидрат, обладающий противовирусным действием и имеющий формулуУказанный технический результат достигается тем, что способ получения 2-метилсульфанил-6-нитро-7-оксо-1,2,4-триазоло[5,1-c][1,2,4]триазинид L-аргининия дигидрат включает смешивание растворенного в воде аргинина и растворенного в водно-этанольной смеси (1:1) 2-метилтио-6-нитро-7-оксо-1,2,4триазоло[5,1-с]триазинида натрия дигидрата, после чего полученную смесь кипятят, затем охлаждают, выпавший осадок отфильтровывают и сушат.

Description

Заявляемое изобретение относится к области биологически активных соединений и касается 2метилсульфанил-6-нитро-7-оксо-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинида Ь-аргининия дигидрата, обладающего противовирусным действием, предназначенного для лечения и профилактики вирусных заболеваний человека и животных, преимущественно Лихорадки Западного Нила, и может быть использовано в химико-фармацевтической промышленности, научно-исследовательских лабораториях, лечебных учреждениях, а также ветеринарии.
Актуальность проблемы противовирусной терапии, в особенности в условиях быстрой мутации вирусов, выявления новых возбудителей опасных и медленных вирусных инфекций, вызывает постоянную потребность в новых средствах, которые бы обладали высокой эффективностью и устойчивостью при мутациях вирусов, продолжительным действием, низкой токсичностью и отсутствием побочных эффектов при лечении. В связи с этим, важным фактором является возможность получения синтетических лекарственных препаратов, а также создание доступной технологии их получения.
В настоящее время заболеваемость лихорадкой Западного Нила (далее - ЛЗН) в мире, и, в частности, на территории Российской Федерации продолжает увеличиваться.
За 10 месяцев 2012 г. в странах Европейского Союза, Российской Федерации и на территории сопредельных государств зарегистрировано 923 случая заболевания ЛЗН, в том числе: в Греции - 161, Венгрии - 17, Италии - 50, Румынии - 14, Алжире - 1, Хорватии - 5, Республике Македония- 6, Израиле - 83, Косово - 4, Черногории - 1, Российской Федерации - 447, территории Палестинской автономии - 2, Сербии - 69, Тунисе - 63 (см. \\уу\у.ейс.еигора.еи/еп/11еа111иор1ск/\уек1_пПе_Ге\'егЛУек1-№1е-Ге\'егтарк/Радек/2012-!аЪ1е.акрх).
По данным Центра по контролю и предотвращению заболеваний США только за сентябрь-октябрь
2012 году в США в 48 штатах зарегистрировано 5674 случаев заболевания ЛЗН, в т.ч. 2969 нейроинвазивных случаев (что составляет 51%), при этом 3491 (62,0%) человек были госпитализированы, из них 286 случаев (5,0%) закончились летальным исходом (см. \Уек1 №1е νίπικ апй о!Ьег АгЪо\ага1 Фкеакек Иш!ей 8!а!ек, 2012 // МогЫйПу апй МойаШу \Уеек1у Керотк - 2013. - 62(25); 513-517).
Эпидемический процесс ЛЗН имеет ряд особенностей, как в эпидемиологических, так и клинических аспектах: раннее начало и позднее окончание эпидсезона, выраженная сезонность заболевания; различия в клинических проявлениях и структуре заболеваемости, определяемой количеством заболевших, их возрастом, территорией, на которой зафиксировано заболевание и т.д., при этом на территориях старых и новых очагов наблюдается увеличение доли заболевших ЛЗН сельских жителей, значительное увеличение доли заболевших возрастной категории 20-29 лет (хотя доминирующей группой, попрежнему, остается возрастная категория 60 лет и старше), появление новых клинических проявлений инфекции, а именно изменение структуры мест заражения ЛЗН - значительное увеличение группы населения, заразившейся при выезде в места отдыха на природу как на территории Российской Федерации, так и зарубежных стран (см. Информационное письмо Главного санитарного врача РФ Г.Г.Онищенко от 22.02.2013 г. №01/1990-13-32 Прогноз эпидемиологической ситуации по лихорадке Западного Нила на
2013 год).
Расширение ареала распространения ЛЗН и увеличение заболеваемости подталкивает исследователей и разработчиков к поиску и производству эффективных неспецифических противовирусных препаратов в отношении данной инфекции. Однако попытки изучения эффективности отдельных соединений ш ν^ι^о и ш νί\Ό (см. Ойе1о1а Н.А. ΑπΗνίΓηΙ асО\Лу оГ Упа/о1е оп терйсайоп оГ ν^^иκеκ 1ко1е!ей ш №депа. 1п: §1едеп!Ьа1ет ЬаШу К. еййотк. Ситтеп! сЬешоШетару. Уо1.1. \Уак1ипд1оп: Ашепсап 8ос1е1у оГ МютоЫо1оду. - 1978, ^о1.1. - Р.3343-3345; Фгйап I., Впеке Т., ИкЬет N. е! а1. К^Ъаν^^^п шЫЪйк \Уек1 №1е \агик герПсаОоп апй суЮраЙис еГГес! ш пеига1 се11к//й. ИтГссС Όίκ. -2000, - νо1.182. - Р.1214-1217. §ЬаЬат А., Ьикйд 8., Ако\' Υ. е! а1. ИйТетеп! раШодешсйу оГ епсеркаПйс 1ода\агикек ш огдапоИрю сиИитек оГ кр1па1 согй кЬсек//Т №игокск Кек. -1990, - νо1.25. - Р.345-352. Апйегкоп ТР., ТТ КаЬа1. ЕГйсасу оГ ш!ег£етоп а1рЬа-2Ъ апй τίЪа\апп адате! \Уек1 №1е \агик ш ν^!^о//Ете^д. 1пГ. Όίκ. - 2002, - νо1.8, п. 1. - Р. 107-108; Логинова С.Я., Ковальчук А.В., Борисевич СВ. и др.; Противовирусная эффективность индуктора интерферона амиксина в отношении экспериментальной формы лихорадки Западного Нила//Вопр. вирусол. - 2004, - №2, - с. 1417; Логинова С.Я., Борисевич СВ., Пащенко Ю.И., Бондарев В.П. Профилактика и терапия экспериментальной формы лихорадки Западного Нила//Антибиот. и химиотер. - 2009, - т. 54, №№ 11-12, - с. 17-20, Логинова С.Я., Борисевич СВ., Максимов В.А., Бондарев В.П. Оценка токсичности неспецифических медицинских противовирусных средств, предназначенных для профилактики и лечения опасных и особо опасных вирусных инфекций//Антибиот. и химиотер. - 2009, - т. 54, №№ 3-4, - с. 11-14.), так и не привели к их применению при лечении ЛЗН.
С учетом изложенного, поиск и разработка новых эффективных средств, предназначенных для профилактики и лечения ЛЗН, являются актуальными.
В широком кругу синтетических лекарственных средств, проявляющих противовирусное действие, значительное место занимают азолоазины, содержащие в структуре молекулы мостиковый атом азота.
Из уровня техники известны тиадиазолотриазины, проявляющие активность в отношении вируса гепатита В, вируса Коксаки (см. А.М. Демченко, В.В. Кислый, З.Б. Квачева, М.О. Лозинський. Синтез и противовирусная активность производных [1,3,4]тиадиазоло[2,3-с][1,2,4]триазина. Журнал органичной
- 1 026688 та фармацевтичной химии, 2003, т. 1, вып.1-2, стр. 55-58; М.А. Е1-Ваба\\Т А.А. ΕΙ-ВагЬагу, Υ.Μ. Ьокккаа, Ма1 Е1-Эа1у. Зупйеык апб Ью1одюа1 еуа1иабоп οί коте ηονβΐ УЫ'-Ык-ОУЧ-Тпа/шЧ-уО бюагЬохуйс ааб аппбек апб коте Гикеб ппдк \νί11ι 1.2.4-1г1а/1пе ппд. Ркокрк., Зи1Гиг, 8Шсоп апб Ре1а1еб Е1етепкк, 2002, ν. 177, рр. 587-596).
Противовирусной активностью в отношении герпеса обладают пиразоло[5,1-с][1,2,4]триазины (С. Вгау1, А. Согей Скеакку, ТА. Согйе1б, КМ. Сптек. 4-СагЬоху руга/о1е бепуаЮк ак апйага1 адеШк. АО 2007039146; Р.А. АбаЬу, А.Н. Е1дкапбоиг, М.А. АЫ, Υ.Μ. 1Ьгакет. Зупйеык, геасбопк, апб апкМга1 асОуЧу оГ 1-(1Ь-ругаго1о[3,4-Ь]руг1б1п-5-у1)е1Ьапопе апб руг1бо[2',3':3,4]руга7о1о[5,1-с][1,2,4]йагте бепуабуек РЬокрЬ., Зи1Гиг, 8йсоп апб Ке1акеб Е1етепкк, 2006, ν. 181, № 5, рр. 1087-1102).
Противовирусным действием в отношении гриппа и герпеса обладают триазоло[5,1-с] - 1,2,4триазины (У.А. РПкйпоу, М.М. Ког1оук'кй, Ь.У. Веп/ек С.У. Вбекк'ка, Ι.Μ. Ьогкпк'ки,; Е.С. Кодоскл, 8ко1оте1, М.И. Κνίν. ΝΌΙ Ер1бетю1, ка С1д1ет. М1кгоЬю1одюкпи 2кигпа1. 2001, 63, № 2, 14-19; В.Л. Русинов, Е.Н. Уломский, О.Н. Чупахин, М.М. Зубаиров, А.Б. Капустин, Н.И. Митин и др. Синтез и противовирусная активность 6-нитро-7-оксо-4,7-дигидроазоло[5,1-с][1,2,4]триазинов. Химико-фармацевтический журнал. 1990, № 9, с. 41-44).
Анализ известных технических решений показал, что аналоги 1,2,4-триазоло[1,5-а]триазинов - 1, 2, 4-триазоло [1,5-а] пиримидины, являются перспективным направлением поиска новых противовирусных соединений.
Наиболее близким по структуре и проявляемой противовирусной активности к заявляемому соединению (прототипом) является натриевая соль 2-метилтио-6-нитро-7-оксо-[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-(4Н)она, имеющая формулу
τι (см. патент РФ № 2294936 на изобретение Натриевая соль 2-метилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она, дигидрат, обладающая противовирусной активностью, дата подачи 29.06.2005 г., опубликовано 10.03.2007 г.).
Техническим результатом, на достижение которого направлено заявляемое изобретение, является создание нового эффективного средства азолоазинового ряда, обладающего противовирусной активностью в отношении группы РНК-содержащих вирусов, и снижение зависимости активного соединения от клеточного метаболизма.
Указанный технический результат достигается тем, что создано новое лекарственное средство 2метилсульфанил-6-нитро-7-оксо-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид Ь-аргининия дигидрат, обладающее противовирусным действием и имеющее формулу
Указанный технический результат достигается тем, что способ получения 2-метилсульфанил-6нитро-7-оксо-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид Ь-аргининия дигидрат, включающий смешивание растворенного в воде аргинина и растворенного в водно-этанольной смеси (1:1) 2-метилтио-6-нитро-7оксо-1,2,4триазоло[5,1-с]триазинида натрия дигидрата, после чего полученную смесь кипятят на водяной бане, затем охлаждают, выпавший осадок отфильтровывают и сушат.
Технических решений, совпадающих с совокупностью существенных признаков заявляемого изобретения, не выявлено, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого изобретения такому условию патентоспособности как новизна.
Заявляемые существенные признаки, предопределяющие получение указанного технического результата, явным образом не следуют из уровня техники, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого изобретения такому условию патентоспособности как изобретательский уровень.
Условие патентоспособности промышленная применимость подтверждено на примерах конкретного применения.
Техническая задача решена путем модификации молекулы натриевой соли 2-метилтио-6-нитро-7оксо-[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-(4Н)-она, в частности, заменой катиона натрия биогенным аминокислотным аргининиевым фрагментом.
Синтез 2-метилсульфанил-6-нитро-7-оксо-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинида Ь-аргининия дигидрата осуществляют следующим образом:
- 2 026688
В круглодонную колбу объемом 50 мл, снабженную нагревательной баней, мешалкой и обратным шариковым холодильником с водяным охлаждением, загружают 2,1 г (0,01 моль) аргинина, добавляют 9 мл воды и при комнатной температуре при перемешивании доводят смесь до полного растворения. Далее в другую круглодонную колбу объемом 50 мл, снабженную нагревательной баней, мешалкой и обратным шариковым холодильником с водяным охлаждением, загружают 2,53 г (0,01) моль 2-метилтио-6-нитро-7оксо-1,2,4триазоло[5,1-с]триазинида натрия дигидрата, добавляют 20 мл водно-этанольной смеси (1:1) и при нагревании до температуры 20-25°С смесь доводят до растворения.
Полученные растворы сливают друг с другом и кипятят на водяной бане в течение 10 мин при температуре 90-95°С. Реакционную массу охлаждают, отфильтровывают выпавший осадок, который затем сушат при комнатной температуре в течение суток (24 ч).
Полученное соединение 2-метилтио-6-нитро-7-оксо-1,2,4триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид Ьаргининия дигидрат имеет следующие физико-химические характеристики: Тпл >300°С; Найдено С 30,30%, Н - 4,86%, N - 32,08%. Брутто-формула - €11Η18Ν10Ο58·2 Н2О. Вычислено: С - 30,14 %, Н - 5,06%, N - 31,95 %.Спектр 1Н ЯМР (400 МГц, ϋ2Ο), δ (м.д): 1.702 (м, 2Н, СН2), 1.918 (м, 2Н, СН2), 2.651 (с, 3Η, 8СН3), 3.245 (м., 2Н, СН2), 3.786 (м, 1Н, СН).
Заявленное соединение представляет собой желтое аморфное вещество, растворимое в воде, диметилформамиде, диметилсульфоксиде и не растворимое в хлороформе, этаноле, бензоле.
Осуществление заявляемого изобретения подтверждается примерами конкретного выполнения.
Пример 1. Оценка цитотоксичности исследуемого соединения с использованием постоянной культуры клеток ОМК-АН (1Д).
Для формирования сплошного монослоя в пробирки вносили по 1 мл суспензии клеток с плотностью 200 тыс./мл, инкубировали при температуре (37,0±0,5)°С, 5% СО2. Затем ростовую среду удаляли и вносили свежую питательную среду, содержащую различные концентрации исследуемого препарата (от 1000 до 6,25 мкг/мл). Затем пробирки инкубировали в течение 5 суток при температуре (37,0±0,5)°С, 5% СО2. Используя световой микроскоп, наблюдали за состоянием монослоя клеток: частичная или полная деструкция монослоя клеток, повреждение отдельных клеток, образование клеточного синцития. Контрольными образцами являлись пробирки с монослоем, в которые была внесена поддерживающая среда без препарата.
Результаты оценки цитотоксичности исследуемого соединения свидетельствуют, что субстанция активного вещества в концентрации 500 мкг/мл не вызывает видимых изменений в культуре клеток (см. табл. 1).
Таблица 1. Изучение цитотоксичности заявляемого соединения в культуре клеток ОМК-ЛН (1Д)
Препа- рат Частота цитопатического эффекта при применении заявляемого соединения в концентрации, мкг/мл ЦПД50, мкг/мл МПК, мкг/мл 1/2 МПК,
1000,0 500,0 250,0 125,0| 62,5 31,3 15,5 7,3 мкс/мл
Заявля- емое соеди- нение 2/4 0/4 0/4 0/4 0/4 0/4 0/4 0/4 1000,0 500,0 250,0
Пример 2. Изучение эффективности субстанции в отношении вируса Западного Нила в культуре клеток ОМК-АН (1Д).
Монослой культуры клеток ОМК-АН (1Д) инфицировали вирусом Западного Нила в дозе 0,05 БОЕ/клетку. Адсорбцию вируса проводили при температуре 37°С, 5% СО2, в течение 60 мин. По окончании инкубирования монослой трижды промывали поддерживающей средой, содержащей по 100 ед./мл пенициллина и стрептомицина, для удаления не адсорбировавшегося вируса и вносили исследуемые соединения в концентрации, составляющей 1/2 МПК. Субстанцию растворяли в поддерживающей питательной среде до нужной концентрации. На каждое соединение использовали не менее 10 пробирок с монослоем клеток. Инкубирование проводили при температуре 37°С, 5% СО2, в течение 48 ч. Далее проводили криодеструкцию клеток и объединяли пробы. Инфекционный титр в объединенных пробах определяли титрованием методом формирования негативных колоний под агаровым покрытием в культуре клеток ОМК-АН (1Д).
Результаты изучения противовирусной активности заявленного соединения свидетельствуют о том, что препарат подавляет репродукцию вируса 3Н на 2,31д, при этом коэффициент ингибирования составил
- 3 026688
99,5% (см. табл. 2).
Таблица 2. Изучение эффективности заявляемого соединения в культуре клеток ОМК-ЛН (1Д) в отношении вируса Западного Нила
Препарат Концентрация заявляемого соединения, мкг/мл Уровень накопления вируса, 1д БОЕ/мл Снижение уровня накопления вируса, 1д БОЕ/мл Коэффициент ингибирования репродукции вируса, процент
Заявляемое соединение 250,0 4,2 2,3 99,5
К дозы - 7,8 -
Таким образом, заявляемое химическое соединение не токсично в используемых концентрациях, обладает значимой противовирусной активностью ίη νίΐτο в отношении вируса Западного Нила.

Claims (5)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение 2-метилсульфанил-6-нитро-7-оксо-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид Б-аргининия дигидрат, имеющее формулу
  2. 2. Способ получения 2-метилсульфанил-6-нитро-7-оксо-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид Баргининия дигидрата по п.1, включающий смешивание растворенного в воде аргинина и растворенного в водно-этанольной смеси (1:1) 2-метилтио-6-нитро-7-оксо-1,2,4-триазоло[5,1-с]триазинида натрия дигидрата, после чего полученную смесь кипятят, затем охлаждают, выпавший осадок отфильтровывают и сушат.
  3. 3. Применение 2-метилсульфанил-6-нитро-7-оксо-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид Б-аргининия дигидрата по п.1 в качестве противовирусного средства.
  4. 4. Применение по п.3, в котором вирус представляет собой РНК-содержащий вирус.
  5. 5. Применение по п.4, в котором РНК-содержащий вирус представляет собой вирус Лихорадки Западного Нила.
EA201600364A 2013-11-01 2014-10-21 2-МЕТИЛСУЛЬФАНИЛ-6-НИТРО-7-ОКСО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИНИД L-АРГИНИНИЯ ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА EA026688B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2013148984/04A RU2536874C1 (ru) 2013-11-01 2013-11-01 2-МЕТИЛСУЛЬФАНИЛ-6-НИТРО-7-ОКСО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c] [1,2,4]ТРИАЗИНИД L-АРГИНИНИЯ ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА
PCT/RU2014/000794 WO2015065243A1 (ru) 2013-11-01 2014-10-21 2-метилсульфанил-6-нитро-7-оксо-1, 2, 4-триазоло [5, 1-c] [1, 2, 4] триазинид l-аргининия дигидрат, обладающий активностью в отношении вируса лихорадки западного нила

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201600364A1 EA201600364A1 (ru) 2016-09-30
EA026688B1 true EA026688B1 (ru) 2017-05-31

Family

ID=53004693

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201600364A EA026688B1 (ru) 2013-11-01 2014-10-21 2-МЕТИЛСУЛЬФАНИЛ-6-НИТРО-7-ОКСО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИНИД L-АРГИНИНИЯ ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА

Country Status (5)

Country Link
US (1) US9790227B2 (ru)
EP (1) EP3064501B1 (ru)
EA (1) EA026688B1 (ru)
RU (1) RU2536874C1 (ru)
WO (1) WO2015065243A1 (ru)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017144709A1 (en) 2016-02-24 2017-08-31 Doring International Gmbh Anti-viral drug
WO2017144708A2 (en) 2016-02-24 2017-08-31 Doring International Gmbh Anti-viral drug
WO2018035509A2 (en) * 2016-08-19 2018-02-22 Grl, Inc. Small molecules having antiviral properties

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2294936C1 (ru) * 2005-06-29 2007-03-10 Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования Уральский Государственный Технический Университет-УПИ Натриевая соль 2-метилтио-6-нитро-1,2-4-триазоло[5,1-c]-1,2,4-триазин-7(4h)-она, дигидрат, обладающая противовирусной активностью
RU2365591C2 (ru) * 2007-05-21 2009-08-27 Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского Уральского отделения Российской академии наук ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ И СОДЕРЖАЩЕЕ 2-МЕТИЛТИО-5-МЕТИЛ-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7(3Н)-ОН

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4005133A (en) * 1975-10-14 1977-01-25 The Upjohn Company PGF2.sub.α, L-Arginine salt
RU2058307C1 (ru) * 1994-03-01 1996-04-20 Научно-технологическое предприятие "Лиганд" Соли 2-морфолино-5-фенил-6н-1,3,4-тиадиазина и 4,7-дигидро-6-нитро-7-оксо-[1,2,4]-триазоло [5,1-с] [1,2,4]-триазинов, обладающие бактерицидной активностью в отношении возбудителя микоплазмоза
EP1918289A3 (en) * 2002-05-28 2009-08-19 Wockhardt Limited Crystalline nadifloxacin arginine salt form
WO2007039146A1 (en) 2005-09-23 2007-04-12 Smithkline Beecham Corporation 4-carboxy pyrazole derivatives as anti-viral agents
RU2402552C2 (ru) * 2008-12-23 2010-10-27 Российская Федерация, от имени которой выступает Федеральное Агентство по науке и инновациям НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-н-ПРОПИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ И НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-н-БУТИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ
WO2015016818A1 (en) * 2013-07-29 2015-02-05 Ghias Asghar Novel azolo-1,2,4-triazine derived antiviral oral therapeutic

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2294936C1 (ru) * 2005-06-29 2007-03-10 Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования Уральский Государственный Технический Университет-УПИ Натриевая соль 2-метилтио-6-нитро-1,2-4-триазоло[5,1-c]-1,2,4-триазин-7(4h)-она, дигидрат, обладающая противовирусной активностью
RU2365591C2 (ru) * 2007-05-21 2009-08-27 Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского Уральского отделения Российской академии наук ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ И СОДЕРЖАЩЕЕ 2-МЕТИЛТИО-5-МЕТИЛ-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7(3Н)-ОН

Also Published As

Publication number Publication date
EP3064501B1 (en) 2019-08-21
RU2536874C1 (ru) 2014-12-27
EP3064501A1 (en) 2016-09-07
EA201600364A1 (ru) 2016-09-30
US9790227B2 (en) 2017-10-17
WO2015065243A1 (ru) 2015-05-07
US20160318934A1 (en) 2016-11-03
EP3064501A4 (en) 2017-04-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102827187B (zh) 氟喹诺酮醛缩异烟腙及其制备方法和应用
DE69122259T2 (de) 5-iod-6-amino-1,2-benzopyrane und deren analoge
ES2684755T3 (es) Métodos para preparar inhibidores de la replicación de virus de la gripe
CN101410114B (zh) A3腺苷受体别构调节剂
US20130281396A1 (en) Treatment of diseases by epigenetic regulation
EA026688B1 (ru) 2-МЕТИЛСУЛЬФАНИЛ-6-НИТРО-7-ОКСО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИНИД L-АРГИНИНИЯ ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА
WO2018174442A1 (ko) 코로나 바이러스 감염으로 인한 질환 치료용 화합물
RU2330036C1 (ru) НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 5-МЕТИЛ-6-НИТРО-1,2,4,-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7-ОНА ДИГИДРАТ
RU2404182C2 (ru) НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-ЭТИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ
JP5171815B2 (ja) ４−アミノ−３−アリールアミノ−６−アリールピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン誘導体、その製造方法及び抗ウイルス性作用物質としての使用
Xie et al. Anti-AIDS (acquired immune deficiency syndrome) agents. 17. New brominated hexahydroxybiphenyl derivatives as potent anti-HIV agents
CN112125920A (zh) 一类多环苯并双呋喃化合物及其作为抗rsv药物中的应用
CN114748466B (zh) Napyradiomycin类化合物在制备猪伪狂犬病病毒抑制剂中的应用
JP2007126456A (ja) ７−［４−（４−ナフタレン−１−イル−ピペラジン−１−イル）−ブトキシ］−３，４−ジヒドロ−１ｈ−［１，８］ナフチリジン−２−オンの結晶性塩
RU2452490C1 (ru) Лекарственное средство с активностью против семейства герпес-вирусов
CS238038B1 (en) Medical drug with antivirus effect
RU2443705C1 (ru) Средство, обладающее антибактериальной активностью
JP6071012B2 (ja) ４−アミノ−３−フェニルアミノ−６−フェニルピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン誘導体、その製造および抗ウイルス剤としての使用
RU2529487C1 (ru) 5-метил-6-нитро-7-оксо-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-альфа]пиримидинид l-аргининия моногидрат
JPS58174367A (ja) キノリン誘導体及びその製法
CN108440508B (zh) 吡嗪药物及其制备方法、组合物及在胃肠病人护理的应用
KR900006124B1 (ko) Gem-디할로 및 테트라할로-1,12-디아미노-4,9-디아자-도데칸 및 이들의 제조방법
CN106061948A (zh) 水溶性的4‑氮杂鬼臼毒素类似物
IE48389B1 (en) 2,3-dihydroimidazo(1,2-c)pyrimidines,their preparation,formulations containing them and their use as pharmaceuticals
RU2340614C2 (ru) 2-r-4-(аллилоксиметил)-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4н)-оны и 2-r-4-(пропаргилоксиметил)-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин7(4н)-оны, обладающие противовирусным действием

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU