CN114748466B - Napyradiomycin类化合物在制备猪伪狂犬病病毒抑制剂中的应用 - Google Patents
Napyradiomycin类化合物在制备猪伪狂犬病病毒抑制剂中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于抗病毒领域，具体涉及Napyradiomycin类化合物在制备猪伪狂犬病病毒抑制剂中的应用，所述的Napyradiomycin类化合物为：Napyradiomycin A1、Napyradiomycin B1、A80915G、和/或A80915G‑8″‑acid。本发明首次发现Napyradiomycin类化合物对动物病毒猪伪狂犬病毒抑制活性较强；特别是NapyradiomycinsA1、A4这2个化合物对猪伪狂犬病毒体外半数抑制浓度(LC50)分别为0.63、0.74μg/mL，其药物的治疗指数(TI)分别为8.73、14.29；显著高于阳性对照利巴韦林的IC50(14.16μg/mL)和TI(2.82)。
Description
技术领域
本发明属于抗病毒领域，具体涉及Napyradiomycin类化合物在制备猪伪狂犬病病毒抑制剂中的应用。
背景技术
伪狂犬病病毒(pseudorabies virus，PRV)属于疱疹病毒科中的α疱疹病毒亚科，引起家畜和某些野生动物的传染病，其中对猪的危害最大，每年给世界养猪业造成巨大的经济损失。猪伪狂犬病(pseudorabies，PR)是由猪伪狂犬病毒(pseudorabies virus，PRV)引起不同生长阶段猪发生的一种急性、高度接触性传染病，以神经系统障碍和脏器损伤为主要特征。该病对不同年龄的猪都有危害，成年猪耐过后成为长期的带毒、排毒污染源。世界动物卫生组织(OIE)将该病列为B类动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。自2011年以来，伪狂犬病毒变异株的出现导致免疫过的猪再次出现伪狂犬病症状。
目前，还没有特效药物可治愈由猪伪狂犬病毒(pseudorabies virus，PRV)引起的猪伪狂犬病，多通过接种疫苗辅以对症治疗的方式对病猪进行治疗。因此，研究开发一种针对猪伪狂犬病毒的兽用药物意义重大。
Napyradiomycin类化合物拥有独特的结构和多样的生物活性，具有重要的生物学意义，但对于抗病毒活性的研究未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供了Napyradiomycin类化合物在制备猪伪狂犬病病毒抑制剂中的应用，所述的Napyradiomycin类化合物为：NapyradiomycinA1、NapyradiomycinB1、Naphthomevalin、A80915G、和/或A80915G-8″-acid。
为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：
Napyradiomycin类化合物在制备猪伪狂犬病病毒抑制剂中的应用，所述的Napyradiomycin类化合物为：NapyradiomycinA1、NapyradiomycinB1、A80915G、和/或A80915G-8″-acid，是以Napyradiomycin类化合物为有效成分或有效成分之一，用于猪伪狂犬病病毒抑制剂。
具体的所述的：
NapyradiomycinA1：
Chemical Formula:C25H30Cl2O5
Exact Mass:480.15
NapyradiomycinB1：
Chemical Formula:C25H29Cl3O5
Exact Mass:514.11
A80915G：
Chemical Formula:C25H30O5
Exact Mass:410.21
A80915G-8″-acid：
Chemical Formula:C25H28O7
Molecular Weight:440.49。
本发明的保护范围还包括：
上述的Napyradiomycin类化合物在制备治疗或预防猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus)感染的药物中的应用。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：
本发明首次发现Napyradiomycin类化合物对猪伪狂犬病毒抑制活性较强；特别是NapyradiomycinsA1、A4这2个化合物对猪伪狂犬病毒半数抑制浓度(IC50)分别为0.63、0.74μg/mL，其药物的治疗指数(TI)分别为8.73、14.29；显著高于阳性对照利巴韦林的IC50(14.16μg/mL)和TI(2.82)。NapyradiomycinsA1、A4这两个化合物的药物安全性较高，具有优异的抑制猪伪狂犬病毒的活性，为兽用抗病毒制剂的开发提供了新的选择性。
具体实施方式
本发明所述技术方案，如未特别说明，均为本领域的常规方案；所述试剂或材料，如未特别说明，均来源于商业渠道。本发明所述物质，如未特别说明，均来源于商业合成。
申请人在以兽用病毒靶标的药物的筛选中，发现了Napyradiomycin类新化合物NapyradiomycinA4，该化合物对猪伪狂犬病毒抑制活性较强，结构式如下：
Chemical Formula:C25H30Cl2O6
Exact Mass:496.14
同时申请人还筛选出了另外两种新的Napyradiomycin类化合物，分别为：
A80915H：
Chemical Formula:C25H30O7
Exact Mass:442.20
A80915I：
Chemical Formula:C25H30O7
Exact Mass:442.20
本申请中，现有的Napyradiomycin类化合物为：
Napyradiomycin A1
Chemical Formula:C25H30Cl2O5
Exact Mass:480.15
Napyradiomycin B1：
Chemical Formula:C25H29Cl3O5
Exact Mass:514.11
Naphthomevalin：
Chemical Formula:C25H31ClO5
Exact Mass:446.19
A80915G：
Chemical Formula:C25H30O5
Exact Mass:410.21
A80915G-8″-acid：
Chemical Formula:C25H28O7
Molecular Weight:440.49。
实施例2：
MTT法测定Napyradiomycin类化合物对猪伪狂犬病毒半数抑制浓度
1.细胞与病毒
非洲绿猴肾细胞(Vero)，猪伪狂犬病毒(PRV)由华中农业大学谭臣教授提供。
2.病毒TCID50测定
PRV的半数组织培养感染剂量TCID50测定于长满单层细胞的96孔板中进行，病毒液在维持液中作连续的10倍稀释，每个浓度8个重复，每日观察细胞病变(CPE)，记录高于50％和低于50％病变孔的病毒稀释度，根据Reed–Muench method计算比距，获得TCID50。
3.药物的半数中毒浓度(CC50)测定
96孔板中长满单层的Vero细胞，弃掉上清，加入PBS洗1-2次，加入含不同浓度药物的培养基，37℃培养48小时。弃掉上清，加入MTT染色，37℃培养4小时，弃掉上清，加入DMSO终止反应，37℃培养10分钟，检测OD450nm值。细胞存活率按公式计算，细胞存活率(％)＝(药物组平均OD450nm值/细胞对照组平均OD450nm值)×100％。用SPSS 16.0分析软件的Probit回归法计算药物的半数中毒浓度CC50。
4.药物的半数抑制浓度(IC50)测定
96孔板中长满单层的Vero细胞，弃掉上清，加入PBS洗1-2次，加入含不同浓度药物的培养基及PRV病毒液(100TCID50)，同时设置不加药物的病毒对照孔和细胞对照孔，37℃培养48-72小时。当病毒对照孔出现病变达50％以上时，弃掉上清，加入PBS洗1-2次，加入MTT染色，37℃培养4小时，弃掉上清，加入DMSO终止反应，37℃培养10分钟，检测OD450nm值。病毒抑制率按公式计算，病毒抑制率(％)＝[(试验组平均OD450nm值-病毒对照组平均OD450nm值)/(细胞对照组平均OD450nm值-病毒对照组平均OD450nm值)]×100％。用SPSS16.0分析软件的Probit回归法计算药物的半数抑制浓度IC50。
5.药物的治疗指数(TI)
治疗指数(TI)＝CC50/IC50，值越大越说明抗病毒潜力越大。其中TI>2为有效低毒，1<TI<2为低效有毒，TI<1无临床使用价值。
6.结果：
96孔板中长满单层的Vero细胞，加入PRV病毒液(100TCID50)和不同浓度的药物(40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL)，37℃培养48-72小时，显微镜下观察CPE(细胞病变)，同时与阳性对照利巴韦林和阿昔洛韦做比较，结果见表1。
表1 Napyradiomycin类化合物对猪伪狂犬病毒的抑制活性
“-”表示无抑制活性。
从表1可以看出，Napyradiomycins A1、B1、A80915G、A80915G-8″-acid、Napyradiomycin A4对猪伪狂犬病毒均表现出抑制作用，尤其是Napyradiomycins A1、A4对猪伪狂犬病毒的抑制作用极为明显，IC50分别为0.63、0.74μg/mL；治疗指数(TI)分别为8.73、14.29，显著高于阳性对照药剂利巴韦林。说明这两个化合物的药物安全性较高，具有优异的抑制猪伪狂犬病毒的活性。此外，Napyradiomycin B1、A80915G-8″-acid这两个化合物对猪伪狂犬病毒的IC50分别为3.63、9.61μg/mL，其TI>2.0，为有效低毒化合物。A80915G的对猪伪狂犬病毒的IC50值为3.39μg/mL，其治疗指数1<TI<2，为低毒有效化合物。同为Napyradiomycin类化合物的Naphthomevalin、A80915I和A80915H对猪伪狂犬病毒无抑制活性。
Claims (2)
1.Napyradiomycin A1化合物在制备猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus)抑制剂中的应用，所述的Napyradiomycin A1的结构式为：
2.Napyradiomycin A1化合物在制备治疗或预防猪伪狂犬病病毒感染的药物中的应用。
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| CN103194543A (zh) * | 2012-10-26 | 2013-07-10 | 华中农业大学 | 一种猪伪狂犬病毒的高通量药物筛选的方法 |
| CN103421706A (zh) * | 2013-05-15 | 2013-12-04 | 中国科学院南海海洋研究所 | 链霉菌、新化合物及其制备方法和在制备抗菌抗肿瘤药物中的应用 |
| CN105399721A (zh) * | 2013-05-15 | 2016-03-16 | 中国科学院南海海洋研究所 | 新化合物及其制备方法和在制备抗菌抗肿瘤药物中的应用 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Napyradiomycin A1, an inhibitor of mitochondrial complexes I and II;Kohta Yamamoto;Antibiot;第65卷(第4期);211-214 * |
| Napyradiomycin A4 and Its Relate Compounds, a New Anti-PRV Agent and Their Antibacterial Activities, from Streptomyces kebangsaanensis WS-68302;Zhang, Yani 等;Molecules;第28卷(第2期);1-12 * |
| 来源于链霉菌Streptomyces albiflaviniger菌株YN-10-2的纳皮拉霉素类化合物的结构和活性;郭凯等;厦门大学学报(自然科学版);第55卷(第4期);478-484 * |
| 海洋微生物溶菌酶体外抗菌抗病毒活性研究;张琇等;中国农业科学;第11卷;2626-2631 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114748466A (zh) | 2022-07-15 |
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