EA024689B1 - Ингибиторы тирозинкиназы брутона - Google Patents

Abstract

В изобретении предложены соединения общей формулы Iгде переменные раскрыты в данном тексте, которые ингибируют Btk. Предложенные соединения полезны для модуляции активности Btk и лечения заболеваний, связанных с избыточной активностью Btk. Кроме того, эти соединения полезны для лечения воспалительных и аутоиммунных заболеваний, связанных с аномальной пролиферацией В-клеток, таких как ревматоидный артрит. Предложены также композиции, содержащие соединения формулы I и по меньшей мере один носитель, разбавитель или эксципиент.

Description

Настоящее изобретение относится к применению новых производных, которые ингибируют В!к и полезны для лечения аутоиммунных и воспалительных заболеваний, вызванных аномальной активацией В-клеток. Новые соединения, описанные в данном тексте, полезны для лечения ревматоидного артрита и астмы.

Протеинкиназы составляют одно из самых больших семейств ферментов человека и регулируют множество различных сигнальных процессов путем присоединения фосфатных групп к белкам (Т. НиШсг. Се11, 1987, 50:823-829). В частности, тирозинкиназы фосфорилируют белки по фенольной группе тирозиновых остатков. Семейство тирозинкиназ включает члены, которые контролируют клеточный рост, миграцию и дифференцировку. Аномальная киназная активность вовлечена в патогенез множества заболеваний человека, включая различные виды рака, аутоиммунные и воспалительные заболевания. Поскольку протеинкиназы стоят в ряду ключевых регуляторов клеточной сигнальной системы, они представляют собой мишень для модуляции клеточной функции посредством низкомолекулярных ингибиторов киназ и, таким образом, являются хорошей мишенью для разработки лекарств. Помимо лечения патологических процессов, опосредованных киназами, селективные и эффективные ингибиторы активности киназ полезны также для исследования клеточных сигнальных процессов и выявления других клеточных мишеней, представляющих терапевтический интерес.

Имеются надежные свидетельства тому, что В-клетки играют ключевую роль в патогенезе аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний. Лекарственные средства на основе белка, которые истощают популяцию В-клеток, например Кйихап, эффективны против вызванных антителами воспалительных заболеваний, таких как ревматоидный артрит (Как!е!!ег е! а1. Аппи. Кеу. Меб. 2004, 55:477). Поэтому ингибиторы протеинкиназ, которые участвуют в активации В-клеток, должны представлять собой полезные терапевтические средства для патологических состояний, опосредованных В-клетками, таких как продукция аутоантител.

Сигнальный путь, опосредованный рецептором В-клеток (ВСК), контролирует целый ряд В-клеточных реакций, включая пролиферацию и дифференцировку в зрелые клетки, продуцирующие антитела. ВСК является ключевым регуляторным пунктом активности В-клеток, и аномалии в сигнальной системе могут стать причиной дисрегуляции пролиферации В-клеток и образования патогенных аутоантител, что приводит к различным аутоиммунным и/или воспалительным заболеваниям. Тирозинкиназа Брутона (В!к) представляет собой не ассоциированную с ВСК-рецептором киназу, расположенную вблизи мембраны и стоящую в сигнальном пути сразу после ВСК. Было показано, что недостаток В!к блокирует ВСК-опосредованный сигнальный путь, и поэтому ингибирование В!к может представлять собой полезный терапевтический подход для блокирования патологических процессов, опосредованных В-клетками.

В!к является членом Тес-семейства тирозинкиназ, и было показано, что она является ключевым регулятором раннего развития В-клеток, а также активации и выживаемости зрелых В-клеток (Кйап е! а1. 1ттипИу, 1995, 3:283; Е11ше1ег е! а1. 1. Ехр. Меб. 2000, 192:1611). Мутации В!к у человека приводят к состоянию Х-связанной агаммаглобулинемии (ХЬА) (в обзоре: Кокеп е! а1. №\ν Епд. 1. Меб. 1995, 333:431 апб Ьшбуа11 е! а1. 1ттипо1. Кеу. 2005, 203:200). У таких пациентов ослаблен иммунитет, а также показано, что у них нарушено созревание В-клеток, понижен уровень иммуноглобулинов и периферических В-клеток, снижен Т-клеточный независимый иммунный ответ, а также ослаблена мобилизация кальция после ВСК-стимуляции.

Роль, которую играет В!к в аутоиммунных и воспалительных заболеваниях, доказана также с помощью моделей В!к-дефицитных мышей. В преклинических мышиных моделях системной красной волчанки (§ЬЕ) В!к-дефицитные мыши демонстрируют существенное улучшение в прогрессировании заболевания. Кроме того, В!к-дефицитные мыши резистентны по отношению к коллаген-индуцируемому артриту Лаптоп апб Но1тбаЫ СПп. Ехр. 1ттипо1. 1993, 94:459). Была показана дозозависимая эффективность селективного ингибитора В!к в мышиной модели артрита (Ζ. Рап е! а1., Сйет. Меб Сйет. 2007, 2:58-61).

В!к экспрессируется также клетками, отличными от В-клеток, которые могут быть вовлечены в прогрессирование заболевания. Например, В!к экспрессируется тучными клетками, и тучные клетки из В!к-дефицитного костного мозга демонстрируют нарушенную антиген-индуцируемую дегрануляцию (1теак1 е! а1. 1. Вю1. Сйет. 2005, 280:40261). Это говорит о том, что В!к может быть полезной для лечения патологических реакций тучных клеток, таких как аллергия и астма. Кроме того, моноциты от пациентов с ХЬА, у которых отсутствует активность В!к, демонстрируют сниженную продукцию ΤΝΕ-альфа после стимуляции (Нопгооб е! а1. 1. Ехр. Меб. 197:1603, 2003). Таким образом, ΤΝΕ-альфа-опосредованное воспаление можно модулировать низкомолекулярными ингибиторами В!к. Кроме того, сообщалось, что В!к участвует в апоптозе (1к1ат апб διηίΐΐι 1ттипо1. Кеу. 2000, 178:49) и поэтому ингибиторы В!к могут быть полезными для лечения конкретных типов В-клеточных лимфом и лейкозов (Ее1бйайп е! а1. 1. Ехр. Меб. 2005, 201:1837).

- 1 024689

Сущность изобретения

В настоящем изобретении предложены В1к-ингибирующие соединения формулы I и способы их применения, описанные ниже.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I

в которой каждый X представляет собой независимо СН или Ν;

К представляет собой -К¹, -К¹-К²-К³ или -К?-К³;

К¹ представляет собой возможно замещенный 1 или 2 заместителями 5-12-членный моноциклический или бициклический гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома Ν, где бициклический гетероарил содержит по меньшей мере одно ароматическое кольцо и где указанный заместитель выбран из С^алкила или оксогруппы;

К² представляет собой -С(=О), ^(=Ο)Ν&², -О или -8(=О)2; каждый К² представляет собой С1_далкил;

К³ представляет собой С^алкил, циклопропилметил, ди-С^алкиламино, 3-8-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-2 гетероатома, выбранных из N и О, азетидинил-С^далкил, каждый из которых, возможно, содержит в качестве заместителя одну или две следующие группы: С1_далкил, галоген, азетидинил;

Υ² представляет собой СН или Ν;

Υ³ представляет собой Н или Р;

Υ⁴ представляет собой Сз__бциклоалкил или С^далкил, возможно содержащий один заместитель, выбранный из цианогруппы; или его фармацевтически приемлемая соль.

В настоящем изобретении предложен способ лечения воспалительного и/или аутоиммунного состояния, включающий введение нуждающемуся в лечении пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I, представляющего собой ингибитор В1к.

В настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, включающая соединениеингибитор В1к любой формулы I, смешанное по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или разбавителем.

Подробное описание изобретения

Определения.

Форма единственного числа по отношению к некоторой сущности обозначает одну или несколько таких сущностей; например термин соединение относится к одному или более соединений или по меньшей мере к одному соединению. Таким же образом, термины один, один или более и по меньшей мере один могут быть использованы в данном тексте равнозначно.

Выражение как определено выше в данном тексте относится к наиболее широкому определению для каждой группы, приведенной в описании сущности изобретения или в наиболее широком пункте формулы. Во всех других осуществлениях, представленных ниже, заместители, которые могут присутствовать в каждом осуществлении и которые не определены однозначно, включают наиболее широкое определение, представленное в описании сущности изобретения.

В настоящем описании используемые в промежуточных фразах или в пунктах формулы термины включает(ют) и включающий следует толковать в открытом значении. Это означает, что эти термины следует интерпретировать как синонимы фраз имеющий по меньшей мере или включающий по меньшей мере. В отношении способа термин включающий означает, что такой способ включает, по меньшей мере, перечисленные стадии, но может включать и дополнительные стадии. В контексте соединения или композиции термин включающий означает, что такое соединение или такая композиция включает, по меньшей мере, перечисленные признаки или компоненты, но может включать также дополнительные признаки или компоненты.

В данном тексте, если не указано иное, слово или употребляется во включающем значении союза и/или, а не в исключающем значении союза или/или.

Термин независимо в данном тексте указывает на то, что переменная применяется в каждом случае безотносительно наличия или отсутствия переменной, имеющей такое же или другое значение в одном и том же соединении. Так, в соединении, в котором К встречается дважды и определен как независимо углерод или азот, оба К могут представлять собой углерод, оба К могут представлять собой азот или один К может представлять собой углерод, а другой - азот.

- 2 024689

В тех случаях, когда любая переменная встречается более одного раза в любом фрагменте или любой формуле, обозначающей или описывающей соединения, используемые или заявленные в настоящем изобретении, ее определение в каждом случае независимо от ее определения в любом другом случае. Кроме того, комбинации заместителей и/или переменных допустимы только, если такие соединения соответствуют стабильным соединениям.

Символ * в конце связи или символ , проведенный через связь, обозначает место присоединения функциональной группы или другой химической группы к остальной части молекулы, фрагментом которой они являются. Так, например:

Связь, проведенная внутрь циклической системы (в отличие от связи, проведенной к определенной вершине)? указывает на то, что эта связь может находиться при любом подходящем кольцевом атоме.

Термин возможно или по выбору в данном тексте означает, что описанное далее событие или обстоятельство может, но не обязательно, иметь место и что такое описание включает случаи, в которых указанное событие или обстоятельство имеют место, и случаи, в которых они не имеют место. Например, возможно замещенный означает, что такая возможно замещенная группа может включать атом водорода или заместитель.

Выражение возможная связь означает, что такая связь может присутствовать или отсутствовать, и такое описание включает одинарную, двойную и тройную связи. Если указано, что заместитель представляет собой связь или отсутствует, то атомы, присоединенные к таким заместителям, непосредственно соединены.

Термин примерно данном тексте обозначает приблизительно, в районе, грубо или около. В тех случаях, когда термин примерно используется вместе с числовым диапазоном, он модифицирует этот диапазон, расширяя его границы выше и ниже указанных числовых значений. В общем случае термин примерно используется в данном тексте для модификации численных величин выше и ниже указанного значения с колебанием 20%.

Некоторые соединения формулы I могут проявлять таутомерию. Таутомерные соединения могут существовать ввиду двух или более взаимопревращающихся форм. Прототропные таутомеры возникают вследствие миграции ковалентно связанного атома водорода между двух атомов. Таутомеры обычно существуют в равновесии, и попытки выделить индивидуальные таутомеры, как правило, приводят к смеси, химические и физические свойства которой соответствуют смеси соединений. Положение равновесия зависит от химических свойств молекулы. Например, у многих алифатических альдегидов и кетонов, например в ацетоне, преобладает кетоформа, в то время как у фенолов преобладает енольная форма. Подобные прототропные таутомеры включают кетоенольные (-С(=О)-СН- <=> -С(-ОН)=СН-), амидо/имидно-кислотные (-С(=О)-ЫН- <=> -С(-ОН)=Ы-) и амидиновые (-С(=ИК)-ИН- <=> ^(-ΝΗΚ)=Ν-) таутомеры. Два последних особенно характерны для гетероарильных и гетероциклических колец, и настоящее изобретение включает все таутомерные формы таких соединений.

Технические и научные термины, используемые в данном тексте, имеют общепринятое значение, известное специалисту в той области техники, к которой относится настоящее изобретение, если не определено иное. В тексте даны ссылки на многочисленные материалы и методы, известные специалисту в данной области техники. К авторитетным справочным изданиям, где представлены общие принципы фармакологии, относятся следующие: Оообтаи аиб Обтаи'к ТЬе РЬаппасо1ощса1 Ва818 о£ ТЬегареибск, 10'¹' Еб., МсСга\у НШ Сотрашек 1ис., №\у Уогк (2001). Любые подходящие материалы и/или методы, известные специалисту в данной области техники, можно применять при осуществлении настоящего изобретения. Тем не менее, в настоящем изобретении описаны предпочтительные материалы и методы. Материалы, реагенты и т.п., на которые даны ссылки в ниже следующем описании и примерах, можно получить из коммерческих источников, если не указано иное.

Определения, описанные в данном тексте, можно применять с получением химически релевантных комбинаций, таких как гетероалкиларил, галогеналкилгетероарил, арилалкилгетероциклил, алкилкарбонил, алкоксиалкил и т.п. Если термин алкил используется как окончание, следующее за другим термином (как, например, здесь: фенилалкил или гидроксиалкил), он обозначает алкильную группу, раскрытую выше, содержащую один или два заместителя, выбранных из другой указанной группы. Так, например, фенилалкил обозначает алкильную группу, содержащую один или два фенильных заместителя, и таким образом, включает бензил, фенилэтил и бифенил. Алкиламиноалкил представляет собой алкильную группу, содержащую в качестве заместителя одну или две алкиламиногруппы. Термин гидроксиалкил включает 2-гидроксиэтил, 2-гидроксипропил, 1-(гидроксиметил)-2-метилпропил, 2-гидроксибутил, 2,3-дигидроксибутил, 2-(гидроксиметил), 3-гидроксипропил и т.д. Таким образом, в данном тексте термин гидроксиалкил обозначает подмножество гетероалкильных групп, раскрытых ниже. Термин -(ар)алкил обозначает либо незамещенный алкил, либо аралкильную группу. Термин (гетеро)арил или (гет)арил обозначает либо арильную, либо гетероарильную группу.

Термин спироциклоалкил, используемый в данном тексте, означает спироциклическую циклоалкильную группу, такую как, например, спиро[3.3]гептан. Термин спирогетероциклоалкил, используе- 3 024689 мый в данном тексте, означает спироциклический гетероциклоалкил, такой как, например, 2,6-диаза-спиро[3.3]гептан.

Термин ацил, используемый в данном тексте, обозначает группу формулы -С(=О)К, в которой К представляет собой водород или низший алкил, раскрытый в данном описании. Термин алкилкарбонил, используемый в данном тексте, обозначает группу формулы С(=О)К, в которой К представляет собой алкил, раскрытый в данном описании. Термин С_!-6ацил обозначает группу -С(=О)К, содержащую 1-6 атомов углерода. Термин арилкарбонил, используемый в данном тексте, обозначает группу формулы С(=О)К, в которой К представляет собой арильную группу; термин бензоил, используемый в данном тексте, обозначает арилкарбонильную группу, в которой К представляет собой фенил.

Термин эфир, используемый в данном тексте, обозначает группу формулы -С(=О)ОК, в которой К представляет собой низший алкил, раскрытый в данном описании.

Термин алкил, используемый в данном тексте, обозначает насыщенный моновалентный углеводородный остаток с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащий от 1 до 10 атомов углерода. Термин низший алкил обозначает углеводородный остаток с линейной или разветвленной цепью, содержащий от 1 до 6 атомов углерода. Термин С_1-10алкил, используемый в данном тексте, обозначает алкил, состоящий из 1-10 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают, без ограничения, низшие алкильные группы, в том числе метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил или пентил, изопентил, неопентил, гексил, гептил и октил.

Если термин алкил используется как окончание, следующее после другого термина (как, например, здесь: фенилалкил или гидроксиалкил), это обозначает алкильную группу, раскрытую выше, содержащую один или два заместителя, выбранных из другой указанной группы. Таким образом, например, фенилалкил обозначает радикал К'К-, в котором К' представляет собой фенильный радикал, а К представляет собой алкиленовый радикал, раскрытый в данном описании, при этом подразумевается, что место присоединения фенилалкильной группы находится на алкиленовом радикале. Примеры арилалкиловых радикалов включают, без ограничения, бензил, фенилэтил и 3-фенилпропил. Термины арилалкил или аралкил понимают аналогичным образом, за исключением того, что К' представляет собой арильный радикал. Термины (гет)арилалкил или (гет)аралкил понимают аналогичным образом, за исключением того, что К' представляет собой по выбору арильный или гетероарильный радикал.

Термины галогеналкил или галоген-низший алкил или низший галогеналкил обозначает углеводородный остаток с линейной или разветвленной цепью, содержащий от 1 до 6 атомов углерода, при этом один или более атомов углерода замещены одним или более атомами галогена.

Термин алкилен или алкиленил, используемый в данном тексте, обозначает бивалентный насыщенный углеводородный радикал, включающий от 1 до 10 атомов углерода (например, (СН₂)_П), или разветвленный насыщенный бивалентный углеводородный радикал, включающий от 2 до 10 атомов углерода (например, -СНМе- или -СН₂СН(1-Рг)СН₂-), если не указано иное. За исключением метилена, открытые валентности алкиленовой группы не расположены при одном и том же атоме. Примеры алкиленовых радикалов включают, без ограничения, метилен, этилен, пропилен, 2-метилпропилен, 1,1-диметилэтилен, бутилен, 2-этилбутилен.

Термин алкоксигруппа, используемый в данном тексте, обозначает -О-алкильную группу, в которой алкил раскрыт выше, например метокси-, этокси-, н-пропилокси-, изопропилокси-, н-бутилокси-, изобутилокси-, трет-бутилокси-, пентилокси- и гексилоксигруппы, включая их изомеры.

Термин низшая алкоксигруппа, используемый в данном тексте, обозначает алкоксигруппу, включающую низшую алкильную группу, раскрытую ранее. Термин С1_-1₀алкоксигруппа, используемый в данном тексте, обозначает -О-алкил, в котором алкил представляет собой Сыо.

Термин РСу₃ обозначает фосфин, трижды замещенный тремя циклическими радикалами.

Термины галогеналкоксигруппа, или галоген-низшая алкоксигруппа, или низшая галогеналкоксигруппа обозначает низшую алкоксигруппу группу, в которой один или более атомов углерода содержат в качестве заместителя один или более атомов галогена.

Термин гидроксиалкил, используемый в данном тексте, обозначает алкильный радикал, раскрытый в данном описании, в котором от 1 до 3 атомов водорода на различных атомах углерода замещен(ы) гидроксигруппами.

Термины алкилсульфонил и арилсульфонил, используемые в данном тексте, обозначают группу формулы -§(=О)₂К, в которой К представляет собой алкил или арил, соответственно при этом алкил и арил раскрыты в данном описании. Термин гетероалкилсульфонил, используемый в данном тексте, обозначает группу формулы -§(=О)₂К, в которой К представляет собой гетероалкил, раскрытый в данном описании.

Термины алкилсульфониламиногруппа и арилсульфониламиногруппа, используемые в данном тексте, обозначают группу формулы -ЛК'§(=О)₂К, в которой К представляет собой алкил или арил, соответственно, К' представляет собой водород или С^залкил, при этом алкил и арил раскрыты в данном описании.

Термин циклоалкил, используемый в данном тексте, обозначает насыщенное карбоциклическое кольцо, содержащее от 3 до 8 атомов углерода, т.е. циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогек- 4 024689 сил, циклогептил или циклооктил. Термин Сз_7циклоалкил, используемый в данном тексте, обозначает низший циклоалкил, включающий от 3 до 7 атомов углерода в карбоцикле.

Термин карбоксиалкил, используемый в данном тексте, обозначает алкильную частицу, в которой один атом водорода замещен карбоксильной группой, при этом подразумевается, что точка присоединения гетероалкильного радикала находится на атоме углерод. Термин карбоксигруппа или карбоксил обозначает группу -СО₂Н.

Термин гетероарил или гетероароматический, используемый в данном тексте, обозначает моноциклический или бициклический радикал, включающий от 5 до 12 кольцевых атомов, содержащий по меньшей мере одно ароматическое или частично ненасыщенное кольцо, включающее от четырех до восьми атомов в кольце, в том числе один или более гетероатомов Ν, О, или 8, при этом оставшиеся атомы кольца представляют собой атомы углерода, при этом подразумевается, что место присоединения гетероарильного радикала расположено на ароматическом или частично ненасыщенном кольце. Специалисту в данной области техники хорошо известно, что гетероарильные кольца носят менее ароматичный характер, по сравнению с их полностью углеродными аналогами. Поэтому в целях изобретения гетероарильная группа должна лишь в некоторой степени проявлять ароматический характер. Примеры гетероарильных групп включают моноциклические ароматические гетероциклы, содержащие от 5 до 6 атомов кольца и от 1 до 3 гетероатомов, и представляют собой, без ограничения, пиридинил, пиримидинил, пиразинил, оксазинил, пирролил, пиразолил, имидазолил, оксазолил, 4,5-дигидрооксазолил, 5,6-дигидро4Н-[1,3]оксазолил, изоксазол, тиазол, изотиазол, триазолин, тиазиазол и оксадиаксолин, которые, возможно, содержат один или более, предпочтительно один или два заместителя, выбранных из группы, включающей гидроксигруппу, цианогруппу, алкил, алкоксигруппу, тиогруппу, низшую галогеналкоксигруппу, алкилтиогруппу, галоген, низший галогеналкил, алкилсульфинил, алкилсульфонил, галоген, аминогруппу, алкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, аминоалкил, алкиламиноалкил и диалкиламиноалкил, нитрогруппу, алкоксикарбонил и карбамоил, алкилкарбамоил, диалкилкарбамоил, арилкарбамоил, алкилкарбониламиногруппу и арилкарбониламиногруппу. Примеры бициклических радикалов включают, без ограничения, 4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-ил, хинолинил, изохинолинил, бензофурил, бензотиофенил, бензоксазол, бензизоксазол, бензотиазол, нафтиридинил,

5.6.7.8- тетрагидро-[1,6]нафтиридинил и бензизотиазол. Бициклические радикалы, возможно, замещены по любому кольцу, при этом место присоединения расположено на кольце, содержащем гетероатом.

Термин гетероциклил, или гетероциклоалкил, или гетероцикл, используемый в данном тексте, обозначает моновалентный насыщенный циклический радикал, состоящий из одного или более колец, предпочтительно от одного до двух колец, в том числе спироциклические кольцевые системы, состоящие из 3-8 атомов в каждом кольце, включающий один или более кольцевых гетероатомов (выбранных из Ν, О или 8(О)_0-2), и который, возможно, независимо содержит один или более, предпочтительно один или два заместителя, выбранных из следующих: гидроксигруппа, оксогруппа, цианогруппа, низший алкил, низшая алкоксигруппа, низшая галогеналкоксигруппа, алкилтиогруппа, галоген, низший галогеналкил, гидроксиалкил, нитрогруппа, алкоксикарбонил, аминогруппа, алкиламиногруппа, алкилсульфонил, арилсульфонил, алкиламиносульфонил, ариламиносульфонил, алкилсульфониламиногруппа, арилсульфониламиногруппа, алкиламинокарбонил, ариламинокарбонил, алкилкарбониламиногруппа, арилкарбониламиногруппа, а также их ионные формы, если не указано иное. Примеры гетероциклических радикалов включают, без ограничения, морфолинил, пиперазинил, пиперидинил, азетидинил, пирролидинил, гексагидроазепинил, оксетанил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенил, оксазолидинил, тиазолидинил, изоксазолидинил, тетрагидропиранил, тиоморфолинил, хинуклидинил и имидазолинил, а также их ионные формы. Примерами могут быть также бициклические системы, например

3.8- диазабицикло[3.2.1]октан, 2,5-диазабицикло[2.2.2]октан, или октагидропиразино[2,1-с][1,4]оксазин.

Ингибиторы В!к.

Данное изобретение связано с патентом США № 7902194, поступившим 24 июня 2009 г., заявкой на патент США, сер. № 12/711312, поданной 24 февраля 2010 г., и заявкой на патент США сер. № 12/978187, поданной 10 января 2011 г., содержание которых включено в настоящее описание полностью посредством ссылки.

Соединения общей формулы I, раскрытые в данном тексте, включают замену обычного арильного связующего кольца на пиридинил в связывающем положении, что приводит к совершенно иным и неожиданно улучшенным свойствам, таким как 1) общее увеличение растворимости; 2) увеличение равномерности распределения полярности по скелету молекулы, поскольку амфифильный вектор менее выражен; и 3) общее улучшение в связывании с плазменными белками, что приводит к возрастанию свободной концентрации лекарственного вещества в плазме крови человека и крысы.

- 5 024689

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I

в которой каждый X представляет собой независимо СН или Ν;

К представляет собой -К¹, -К^К²-К³ или -К?-К³;

К¹ представляет собой возможно замещенный 1 или 2 заместителями 5-12-членный моноциклический или бициклический гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома Ν, где бициклический гетероарил содержит по меньшей мере одно ароматическое кольцо и где указанный заместитель выбран из С^алкила или оксогруппы;

К² представляет собой -С(=О), -^=Ο)Ν&²', -О или -8(=О)2; каждый К² представляет собой С^алкил;

К³ представляет собой С^алкил, циклопропилметил, ди-С^алкиламино, 3-8-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-2 гетероатома, выбранных из N и О, азетидинил-С^алкил, каждый из которых, возможно, содержит в качестве заместителя одну или две следующие группы: С^алкил, галоген, азетидинил;

Υ² представляет собой СН или Ν;

Υ³ представляет собой Н или Р;

Υ⁴ представляет собой С3_-бциклоалкил или С^алкил, возможно содержащий один заместитель, выбранный из цианогруппы, или его фармацевтически приемлемая соль.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой X представляет собой СН.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой X представляет собой Ν.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Υ³ представляет собой Н, X представляет собой Ν.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Υ³ представляет собой Р, X представляет собой Ν.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Υ⁴ представляет собой трет-бутил, Υ³ представляет собой Р, X представляет собой Ν.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Υ² представляет собой СН.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Υ² представляет собой Ν.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Х представляет собой Ν, Υ² представляет собой СН.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Υ³ представляет собой Н.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Υ³ представляет собой Р.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой X представляет собой Ν и Υ³ представляет собой Р.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Υ⁴ представляет собой циклопропил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой X представляет собой Ν и Υ⁴ представляет собой циклопропил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой циклопропил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой X представляет собой Ν, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой циклопропил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Υ⁴ представляет собой диметиламиногруппу.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой X представляет собой Ν и Υ⁴ представляет собой диметиламиногруппу.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой диметиламиногруппу.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой X представляет собой Ν, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой диметиламиногруппу.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой X представляет собой Ν и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой X представляет собой Ν, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К -К -К , К представляет собой пиридил, К представляет собой -С(=О) и К представляет собой морфолинил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой

3 1 7 3

-К -К -К , К представляет собой пиридил, К представляет собой -С(=О), К представляет собой морфолинил и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К -К -К , К представляет собой пиридил, К представляет собой -С(=О), К представляет собой морфолинил, X представляет собой N и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К -К -К , К представляет собой пиридил, К представляет собой -С(=О), К представляет собой морфолинил, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К -К -К , К представляет собой пиридил, К представляет собой -С(=О), К представляет собой морфолинил, X представляет собой Ν, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой К¹ и К¹ представляют собой 4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-ил, возможно содержащий в качестве заместителя С_1-4алкил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой К¹ и К¹ представляет собой 4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-ил, возможно содержащий в качестве заместителя С1-4алкил, и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой К¹, и К¹ представляет собой 4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-ил, возможно содержащие в качестве заместителя С_1-4алкил, X представляет собой N и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой К¹ и К¹ представляет собой 4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-ил, возможно содержащий в качестве заместителя С_1-4алкил, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой К¹ и К¹ представляет собой 4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-ил, возможно содержащий в качестве заместителя С_1-4алкил, X представляет собой Ν, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой третбутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К¹-К³, К¹ представляет собой пиридил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К¹-К³, К¹ представляет собой пиридил, К³ представляет собой азетидинил-С_1-4алкил и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К?-К³, К¹ представляет собой пиридил, К³ представляет собой азетидинил-С_1-4алкил, X представляет собой N и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К¹-К³, К¹ представляет собой пиридил, К³ представляет собой азетидинил-С1-4алкил, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К?-К³, К¹ представляет собой пиридил, К³ представляет собой азетидинил-С_1-4алкил, X представляет собой Ν, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой 12 3 1 2 3

-К -К -К , К представляет собой пиридил, К представляет собой -О и К представляет собой азетидинил-С_1-4алкил, возможно замещенный одним или двумя атомом галогена.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К¹-К²-К³, К¹ представляет собой пиридил, К² представляет собой -О, К³ представляет собой азетидинилС_1-4алкил, возможно замещенный одним или двумя атомами галогена и Υ⁴ представляет собой третбутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К¹-К²-К³, К¹ представляет собой пиридил, К² представляет собой -О, К³ представляет собой азетидинилС_1-4алкил, возможно замещенный одним или двумя атомом галогена, X представляет собой N и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К¹-К²-К³, К¹ представляет собой пиридил, К² представляет собой -О, К³ представляет собойазетидинил- 7 024689

С^алкил, возможно замещенный одним или двумя атомами галогена, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой 12 3 1 2 3

-К -К -К , К представляет собой пиридил, К представляет собой -О, К представляет собойазетидинилС_1-4алкил, возможно замещенный одним или двумя атомами галогена, X представляет собой Ν, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К -К -К , К представляет собой пиридил, К представляет собой -С(=О) и К представляет собой диметиламиногруппу.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К¹-К²-К³, К¹ представляет собой пиридил, К² представляет собой -С(=О), К³ представляет собой диметиламиногруппу и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К¹-К²-К³, К¹ представляет собой пиридил, К² представляет собой -С(=О), К³ представляет собой диметиламиногруппу, X представляет собой N и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К¹-К²-К³, К¹ представляет собой пиридил, К² представляет собой -С(=О), К³ представляет собой диметиламиногруппу, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой -К¹-К²-К³, К¹ представляет собой пиридил, К² представляет собой -С(=О), К³ представляет собой диметиламиногруппу, X представляет собой Ν, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой

-К -К -К , К представляет собой пиридил, К представляет собой -§(=О)₂ и К представляет собой метил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой 12 3 1 2 3

-К -К -К , К представляет собой пиридил, К представляет собой -§(=О)₂ и К представляет собой метил и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой 12 3 1 2 3

-К -К -К , К представляет собой пиридил, К представляет собой -§(=О)₂ и К представляет собой метил,

X представляет собой N и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой 12 3 1 2 3

-К -К -К , К представляет собой пиридил, К представляет собой -§(=О)₂ и К представляет собой метил,

Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, в которой К представляет собой 12 3 1 2 3

-К -К -К , К представляет собой пиридил, К представляет собой -§(=О)₂ и К представляет собой метил, X представляет собой Ν, Υ³ представляет собой Р и Υ⁴ представляет собой трет-бутил.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I, выбранное из группы, в которую входит:

6-трет-Бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(Т-метил-1^,12',3'₁4^|,5^,,6'гекса гид ро-[3,4']5ипиридинил-6-и лам ин о)-6-оксо-1,6-д и гидропиридазин-3- ил]пиридин-2-ил}-2Н-фталазин-1-он;

6-трет-Бутил-8-фтор-2-(3-гидроксиметил-4-{1-метил-5-[5-((5)-1-метилпирролидин-2и л )-п и рид ин-2-иламино]-6-оксо-1,6-д и гцдропиридазин-3-ил}-п иридин-2- ил )-2Нфталазин-1-он;

6-трет-Бутил-8-фтор-2-(3-гидроксиметил-4-{1-метил-5-[5-(морфолин-4- карбонил )пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигид ропиридазин-3-ил}-пиридин-2-ил)-2Нфталазин-1-он;

6-трет-Бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[5-(5-метансульфонилпиридин-2иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигид ропирид азин-3- ил]-пиридин-2-ил}-2Н-фталазин1-он;

6-{6-[2-(6-трет-Бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3-гидроксиметилпиридин-4ил]-2-метил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино)-Л/,Л/-диметилникотинамид;

- 8 024689

6-{6-[2-(6-Циклопропил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-3гидроксиметилпиридин-4-ил]-2-метил-3-оксо-2,3-дигид ропирцдазин-4-иламино}Л/,Л/-Диметилникотинамид;

6-трет-Бутил-2-(3-гидроксиметил-4-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил )-пиридин2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропирид азин-3-ил}-пирцдин-2-ил)-2Н-фталазин-1-он; 2'-(6-трет-Бутил-8-фтор-1-оксо-1/7-фталазин-2-ил)-3'-гидроксиметил-1-метил-5-[5(морфолин-4-карбонил )-пиридин-2-иламино]-1Н-[3_]4']бипирцдинил-б-он; 2'-(6-трет-Бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3'-гидроксиметил-5-(5метансульфонилпирцдин-2-иламино)-1-метил-1Н-[3,4']бипиридинил-6-он; 6-[2'-(6-трет-Бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3'-гидроксиметил-1-метил-6оксо-1,6-дигид ро-[3,4']бипиридинил-5-иламино]-Л/,Л/-диметилникотинамид; 2'-(6-Циклопропил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-3'-гидроксиметил-1-метил-5[5-(морфолин-4-карбонил)-пиридин-2-иламино]-1Н-[3,4']бипиридинил-6-он;

6-трет- Бутил-2-(3-гидроксимети л-4-{1 -метил-5-[5-((5)-1 -метил пирролидин-2-ил)пиридин-2-иламино]-б-оксо-1,6-дигидропирцдазин-3-ил}-пиридин-2-ил)-2/7фталазин-1-он;

6-трет-Бутил-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(1'-метил-1'.2',3'₁4',5'₁б'-гексагидро[3,4']бипиридинил-6-иламино)-6-оксо-1,6-дигид ропиридазин-3-ил]-пирцдин-2-ил}-2Нфталазин-1-он;

6-трет-Бутил-2-{4-[5-(1'-е1Иу1-Г,2^,,3',4^,,5^,,6'-гексагидро-[3,4^,]бипиридинил-6-иламино)1- метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]-3-гидроксиметилпиридин-2-ил}-8-фтор2Н-фталазин-1-он;

2- (4-{5-[5-(2-Азетидин-1-ил-1,1-диметилэтокси)-пиридин-2-иламино]-1-метил-6-оксо1.6- дигидропиридазин-3-ил}-3-гидроксиметилпиридин-2-ил)-6-трет-бутил-8-фтор2Н-фталазин-1-он;

2-(4-{5-[5-(2-Азетидин-1-ил-1,1-диметилэтокси)-пиридин-2-иламино]-1-метил-6-оксо1.6- дигидропиридазин-3-ил}-3-гидроксиметилпиридин-2-ил)-6-трет-бутил-2Нфталазин-1-он;

2-{4-[5-(5-Азетидин-1-илметил-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6дигидропиридазин-3-ил]-3-гидроксиметилпиридин-2-ил}-6-трет-бутил-8-фтор-2/7фталазин-1-он;

6-трет-Бутил-8-фтор-2-{3- гид роксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7тетрагид рол иразол [1,5-а]пирази н-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигид рол иридазин-3-ил]пиридин-2- ил}-2Я-фталазин-1 -он;

- 9 024689

6-трет-Бутил-2-{3-гидро1(симетил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7тетрагид рол и разол [1,5-э] пиразин-2-иламино)-6-оксо-1, б-дигид ропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Н-фталазин-1-он;

6-Циклопропил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7тетрагид рол и разол [1,5-а] пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигид ропиридазин-3-ил]пиридин-2- ил]-2Н-изохинолин-1 -он;

б-трет-Бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-оксетан-3-ил-4,5,6,7тетрагид рол и разол [1,5-а] пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигид ропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил]-2/7-фталазин-1-он;

6-трет-Бутил-2-{4-[5-(5-этил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1мети л-б-оксо-1,6-д игидроп иридази н-3-ил]-3-гидроксиметилпи рид ин-2-и л}-8-фтор2Н-фталазин-1-он;

6-трет-Бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7тетрагид рол и разол [1,5-а] пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигид ропиридазин-3-ил]пиридин-2- ил]-2Н-изохинолин-1 -он;

6-трет-Бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-оксетан-3-ил-4,5,6,7тетрагид рол и разол [1,5-э] пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигид ропиридазин-3-ил]пиридин-2- ил}-2Н-изохинолин-1 -он;

б-трет-Бутил-2-{4-[5-(5-этил-4,5,б,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1мети л-6-оксо-1,6-д игидроп иридази н-3-ил]-3-гидроксиметилпи рид ин-2-и л}-8-фтор2Н-изохинолин-1-он;

6-трет-Бутил-2-{4-[5-(5-циклопропилметил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]-3-гидроксиметилпиридин-2и л}-8-фтор-2Н-фталазин-1 -он;

6-трет-Бутил-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1-ил)-1,1-диметилэтокси]-пиридин-2иламино}-1-метил-6-о ксо-1,6-дигид ропирцдазин-3-ил)-3-гидрокси метилпиридин-2ил]-8-фтор-2Н-изохинолин-1-он;

4-(6-трет-Бутил-8-фтор-1 -оксо-1 Н-фталази н-2-ил)-3-гид роксиметил-1 '-метил-5'- [5(морфол ин-4-карбонил)-пиридин-2-иламино]-1Ή- [2,3']бипирид и нил-б'-он,

4-(6-трет-Бутил-8-фтор-1 -оксо-1 Н-фталази н-2-ил)-3-гид роксиметил-5'-( 5метансульфонилпиридин-2-иламино)-Г-метил-ГН-[2,3']бипиридинил-6'-он; 6-трет-Бутил-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1-ил)-1,1-диметилэтокси]-пиридин-2иламино}-1-мет ил-6-оксо-1,6-дигид ропирцдазин-3-ил)-3-гцдрокси метилпиридин-2ил]-8-фтор-2Н-фталазин-1-он;

2-(8-Фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5э]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигид ропиридазин-3-ил]-пиридин-2-ил}-1-оксо-1,2дигидро-изохинолин-6-ил)-2-метилпропионитрил;

2-{2-[4-(5-{5-[2-(3,З-дифторазетидин-1 -ил)-1,1-д и метилэтокси]-п иридин-2-иламино}1-мети л-6-оксо-1,6-дигид ропиридазин-3-ил)-3- гид роксиметилпиридин-2-ил]-8-фтор1 -оксо-1,2-дигид ро-изохинол и н-6-ил}-2-метилп рол ион итри л;

6-трет-Бутил-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1-ил)-1,1-диметилэтокси]-пиридин-2иламино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигид ропиридазин-3-ил)- 3-гид роксиметилпиридин-2ил]-2Н-фталазин-1-он; и

6-трет-Бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-5-окси-4,5,6,7тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Н-фталазин-1-он.

В настоящем изобретении предложен способ лечения воспалительного и/или аутоиммунного состояния, включающий введение нуждающемуся в лечении пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I.

- 10 024689

В настоящем изобретении предложен способ лечения ревматоидного артрита, включающий введение нуждающемуся в лечении пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I.

В настоящем изобретении предложен способ лечения астмы, включающий введение нуждающемуся в лечении пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I.

В настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, включающая соединение формулы I.

В настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, включающая соединение формулы I, смешанное по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или разбавителем.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I для применения в качестве терапевтически активного вещества.

В настоящем изобретении предложено применение соединения формулы I в изготовлении лекарственного средства для лечения воспалительного расстройства.

В настоящем изобретении предложено применение соединения формулы I в изготовлении лекарственного средства для лечения аутоиммунного расстройства.

В настоящем изобретении предложено применение соединения формулы I в изготовлении лекарственного средства для лечения ревматоидного артрита.

В настоящем изобретении предложено применение соединения формулы I в изготовлении лекарственного средства для лечения астмы.

В настоящем изобретении предложено применение соединения формулы I для лечения воспалительного расстройства.

В настоящем изобретении предложено применение соединения формулы I для лечения аутоиммунного расстройства.

В настоящем изобретении предложено применение соединения формулы I для лечения ревматоидного артрита.

В настоящем изобретении предложено применение соединения формулы I для лечения астмы.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I для применения в лечении воспалительного расстройства.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I для применения в лечении аутоиммунного расстройства.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I для применения в лечении ревматоидного артрита.

В настоящем изобретении предложено соединение формулы I для применения в лечении астмы.

В настоящем изобретении предложены соединение, способ или композиция, описанные в данном тексте.

В настоящем изобретении предложены соединение, способ или композиция, описанные в данном тексте.

Соединения - ингибиторы В!к.

Выбранные примеры соединений, охватываемых настоящим изобретением и включенных в объем настоящего изобретения, представлены в табл. I. Эти нижеследующие примеры и способы получения представлены с той целью, чтобы помочь специалисту в данной области техники лучше понять и практически осуществить настоящее изобретение. Следует понимать, что они не ограничивают объем настоящего изобретения, но лишь являются его примером и наглядным представлением.

В общем случае номенклатура, использованная в настоящем описании, получена на основе ΑυΤΟΝΟΜ™ ν.4.0, компьютеризированной системы Института Бельштейна для генерирования систематической номенклатуры ШРАС. В случае несоответствия между изображенной структурой и приведенным для этой структуры названием большая значимость приписывается изображенной структуре. Кроме того, если стереохимия структуры или части структуры не указана посредством, например жирной или пунктирной линии, следует считать, что такая структура или часть структуры охватывает все ее стереоизомеры.

В табл. I изображены примеры производных пиридазинона общей формулы I.

- 11 024689

Таблица I

- 12 024689

1-7	6-трет-Бугил-2-(3-гидрокси метил- 4-{1 -метил-5-[5-(морфолин-4- карбонил)-пирцдин-2-иламино]-6- оксо-1,6-дигид ропиридазин-3-ил}- пиридин-2-ил)-2Н-фталазин-1-он	Υ'Ν ό θ N4 О
ί-νγ <^Ν О	-Μ
	2'-(6-трет-Бутил-8-фтор-1-оксо-	1 Ο^Ν- 1 ιΙ		Γί*
	1Н-фталазин-2-ил)-3'-	ΗΝ |
1-8	гидроксиметил-1-метил-5-[5- (морфол ин-4-карбон ил)-пиридин-	г Р	О	Ρ
	2-иламино]-1Н-[3,4']бипиридинил- 6-он	кхО
	2'-(6-трет-Бутил-8-фтор-1-оксо-	1 ο^ν.	Αν χ^Ν О
1-9	1 Н-фталазин-2-и л)-3'- гцдроксиметил-5-(5- метансульфонилпиридин-2-	ΗΝ I 6	и Ρ
	иламино)-1-метил-1Н-	V
	[3,4']бипиридинил-6-он	0=8=0 1
	6-[2'-(6-трет-Бутил-8-фтор-1-оксо-	1 Ο*^Ν- 1 И	г о%<
1-10	1 Н-фталазин-2-и л)-3'- гцдроксиметил-1-метил-6-оксо- 1,6-дигидро-[3,4']бипиридинил-5-	ΗΝ [ ί^Ν	4ί>Ν Ο	ο Ρ
	иламино]-Л1,Л/-
	диметилникотинамид	Ο^4ΝΖ’ 1

1-11	2-(6-Циклопропил-8-фтор-1 -оксо- 1 Н-изохинолин-2-и л)-3’- гидроксиметил-1-метил-5-[5- (морфолин-4- карбонил )-п иридин- 2-иламино]-1Н-[3,4']бипиридинил- 6-он	О.. ΗΝ Г Чх, <Г	I О ι N ),	.ΟΗ-,ίχ Αν Ο	0^ Ρ
	6-трет-Бутил-2-(3-гидроксиметил-	О,	I		ΥϊΡ
	4-{1-метил-5-[5-((3)-1-	ΗΝ		γυ\	-Μ
1-12	метилпирролидин-2-ил)-пиридин-			δ
	2-иламино]-6-оксо-1,6-	о
	дигидропиридазин-3-ил}-пиридин-
	2-ил)-2Н-фталазин-1-он		Ν

- 13 024689

1-13

1-14

6-трет-Бутил-2-{3-гидроксиметил4-[1-метил-5-(1'-метилТ.г'.З'Д'.б'.б'-гексагидро[3,4']бипиридинил-6-иламино)-6оксо-1,6-дигидропиридазин-З-ил]пиридин-2-ил}-2Н-фталазин-1-он

6-трет-Бутил-2-{4-[5-(1'-этилТ.г'.З'Л'.Б'.б'-гексагидро[3,4']бипиридинил-6-иламино)-1метил-6-оксо-1,6дигидропиридазин-3-ил]-3ги д рокси мети л пирид и н-2-ил}-8фтор-2Н-фталазин-1-он

1-15	2-(4-{5-[5-(2-Азетидин-1-ил-1,1- диметилэтокси)-пиридин-2- иламино]-1-метил-6-оксо-1,6- дигидропиридазин-3-ил}-3- гидрокси метил пиридин-2-ил)-6- трет-бутил-8-фтор-2Н-фталазин- 1-он	[А Ά О Р Λ Ώ
1-16	2- (4-{5-[5-(2-Азетид ин-1 -ил-1,1- диметил этокси)-пиридин-2- иламино]-1-метил-6-оксо-1,6- д игид рол и рид ази н- 3- ил)-3- ги д рокси мети л пирид и н-2-ил)-6- трет-бутил-2Н-фтапазин-1 -он	φΝ О О-х-ч Λ Ώ

1-17	2-{4-[5-(5-Азетидин-1-илметил-1- метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1- метил-6-оксо-1,6- дигидропиридазин-3-ил]-3- гид рокси метилпиридин-2-ил}-6- трет-бутил-8-фтор-2Я-фталазин- 1-он	А Ά о Г <4 &
1-18	6-трет-Бутил-8-фтор-2-{3- гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5- метил-4,5,6,7- тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин- 2-иламино)-6-оксо-1,6- дигидропиридазин-3-ил]-пиридин- 2-ил}-2Н-фталазин-1-он	°γΝ·Ν А О Р О /

- 1Д 024689

1-19	6-трет-Бутил-2-{3-гидроксиметил- 4-[1-метил-5-(5- метил -4.5,6,7- тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин- 2-иламино)-6-оксо-1,6- дигид ропиридазин-3-ил]-пиридин- 2-ил)-2Н-фталазин-1-он	ΟγΝ·Ν ΗΝ^Α 8 Ν—' /
ΛΛ- Ν О	Μ
	6-Циклопропил-8-фтор-2-{3- гид рокси метил-4-[1 - метил-5-(5-	γ'>	.ΟΗλ,	Γίγ
	метил-4,5,6,7-		Ааг
Ι-20	тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-	А 1	Ο	Γ
	2-иламино)-6-оксо-1,6-	О /-Ν
	дигид ропиридазин-3-ил]-пиридин-	о
	2-ил}-2Н-изохинолин-1-он	Ν—' Ζ

1-21	6-трет-Бутил-8-фтор-2-{3- гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5- оксетан-З-ил-4,5,6,7- тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин- 2-иламино)-6-оксо-1,6- дигидропиридазин-3-ил]-пиридин- 2-ил}-2Н-фталазин-1-он	ΟγΝ.Ν ΗΝ» ь $	Λ А <^Ν	20^ Ο Γ
	6-трет-Бутил-2-{4-[5-(5-этил-	θγΝ.Ν		Иг
	4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-	ηνΆΑ	γΝγ	ΛΑ
Ι-22	а]пиразин-2-иламино)-1-метил-6- оксо-1,6-дигидропиридазин-З-ил]- 3-гидроксиметилпиридин-2-ил}-8- фтор-2Н-фтапазин-1-он	ι V 8 Ν-' ς	Ο	Ρ
	6-трет-Бутил-8-фтор-2-{3- гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-	°γΑ II		ИИ
	метил-4,5,6,7-	/Υ-Άχ ΗΝ Τ	νΝΥ
Ι-23	тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-	Αν	Ο	Ρ
	2-иламино)-6-оксо-1,6-	&
	дигидропиридазин-3-ил]-пиридин-	ο
	2-ил)-2Н-изохинолин-1-он	Ζ
	6-трет-Бутил-8-фтор-2-{3-	θγΝ.Ν
	гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5- оксетан-З-ил-4,5,6,7-	Αα ΗΝ Λ	Λ-Ν·	о г
Ι-24	тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин- 2-иламино)-6-оксо-1,6- дигидропиридазин-3-ил]-пиридин- 2-ил}-2Н-изохинолин-1-он	Λ Ο Ν-'
Ρ

- 15 024689

1-25	6-трет-Бутил-2-{4-[5-(5-этил- 4,5,6,7-тетрагидропира зол[1 5- з]пиразин-2-иламино)-1-метил-6- оксо-1,6-дигид ропиридазин-3-ил]- 3-гидроксиметилпиридин-2-ил}-8- фтор-2Н-изохинолин-1-он	I Ο^,Ν ΗΝ Λ о _Ν-'	•Ν г°НГ γν	Ο Ρ
	6-трет-Бутил-2-{4-[5-(5-	°γΝγ		ΥΊγ
	циклопропилметил-4,5,6,7-	Λ
	тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-	Ο	Γ
1-26	2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-	К
	дигидропиридазин-3-ил]-3- гидроксиметилпиридин-2-ил}-8- фтор-2Н-фталазин-1-он	<7 V
	6-трет-Бутил-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-	°γΝ.Ν		Τ^'ΪΓ'
	дифторазетидин-1-ил )-1,1- диметилэтокси]-пиридин-2-	ΗΝ 1	^Ν Ο	ο Γ
1-27	иламино}-1-метил-6-оксо-1,6-	Π
	дигидропиридазин-3-ил)-3-
	гидроксиметилпиридин-2-ил]-8- фтор-2Н-изохинолин-1-он	θΧ^Ρ Ρ
		1 Ο&^-Νχ.
	4-(6-трет-Бутил-8-фтор-1-оксо-1 Н-			ο
	фталазин-2-ил)-3-гидроксиметил-	ΗΝ	Ίι Д 1Γ N^4 Ο	Γ
1-28	Г-метил-5'-[5-( морфолин-4-	Ι^Ν
	карбонил)-пиридин-2-иламино]-
	1'Н-[2,3']бипиридинил-6'-он	(Αν''!
	4-(б-трет-Бутил-8-фтор-1 -оксо-1 Н-	1 I 1		ΠΡ
	фталазин-2-ил)-3-гидроксиметил-	ΗΝ	γ\Ύ
1-29	5'-(5-метан сульфонилпиридин-2- иламино)-1 ’-метил-1Ή- [2,З’]би пи рид ин и л-б’-он	ί^Ν Υ	Ν^ Ο	Ρ
		0=8=0 1
		1 ΟχΛ	4)Н Ν < ί 1	Νιίί''Υ<ί?''Υ'Ζ^ ' к 0
	6-трет-Бутил-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-	Τ
	дифторазетидин- 1-ил)-1,1 -	ΗΝ 1	ιίπ
	диметилэтокси]-пиридин-2-		Ο Γ
1-30	иламино}-1 -метил-6-оксо-1,6-	Г ιΐ
	дигидропиридазин-3-ил)-3-	ψ1
	гцдроксиметилпиридин-2-ил]-8- фтор-2Н-фталазин-1 -он	τ X	Ν^\
			Γ

- 16 024689

1-31	2-(8-Фтор-2-{3-гидроксиметил-4- [1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7- тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин- 2-иламино)-6-оксо-1,6- дигидропиридазин-3-ил]-пиридин- 2-ил}-1-оксо-1,2-дигид ро- изохи нолин-6-ил )-2- метилпропионитрил	I Г Г N—' ί	-ОН π νΎ О	Γ	Ιχ=Ν
	2-{2-[4-(5-{ 5-[2-(3,3-	I о>. N II	/•н	Αν*
	Дифторазетидин-1-ил)-1,1- диметилэтокси]-пиридин-2-	Ύ Υ	Υ
ΗΝ П А
	иламино}-1-метил-6-оксо-1,6-	о	Ρ
Ι-32	дигидропиридазин-3-ил)-3-	Г ΐί
	гидроксиметилпиридин-2-ил]-8- фтор-1 -оксо-1,2-дигидро-	V
	изохи нолин-6-ил }-2- метилпропионитрил	Χχγ г
		I N к 1	ОН 1
	6-трет-Бутил-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-	ί
	дифторазетид ин- 1-ил)-1,1 -	ΗΝ Т| А	4Ν П
	диметилэтокси]-пиридин-2-	О
Ι-33	иламино}-1-метил-6-оксо-1,6-	Г ιΐ
	дигидропиридазин-3-ил)-3- гидроксиметилпиридим-2-ил]-2Н-	V
	фталазин-1-он	Р
	6-трет-Бут ил-8-фтор-2-{3-	1 НО
	Α
гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5- метил-5-окси-4,5,6,7-	N XX	Α^Ν·4 -ί Ν
Ι-34	тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-
	2- и ла мино)-6-оксо-1,6- дигидропиридазин-3-ил]-пиридин-	V /-Ν
	2-ил}-2Н-фталазин-1-он	о Ν—'
		/'о-

Синтез

Общие схемы синтеза.

В общих схемах, представленных ниже, Υ³ может представлять собой Н или Р, Υ⁴ может представлять собой Υ⁴'¹. Υ⁴\ Υ⁴° или Υ⁴⁴; Υ^4α может представлять собой Н или галоген; Υ⁴⁵ может представлять собой низший алкил, возможно содержащий один или более заместителей, выбранных из группы, включающей низший галогеналкил, галоген, гидроксигруппу, аминогруппу, цианогруппу и низшую алкоксигруппу; Υ⁴° может представлять собой низший циклоалкил, возможно содержащий один или более заместителей, выбранных из группы, включающей низший алкил, низший галогеналкил, галоген, гидроксигруппу, аминогруппу, цианогруппу и низшую алкоксигруппу; и Υ⁴⁴ может представлять собой аминогруппу, возможно содержащую в качестве заместителя одну или более следующих групп: низший алкил, алкокси-низший алкил или гидрокси-низший алкил. Здесь X может представлять собой СН или Ν, К может представлять собой Н, -К , -К -К -К , -К -К или -К -К ; К может представлять собой арил, гетероарил, бициклический гетероарил, циклоалкил или гетероциклоалкил, каждый из которых может содержать в качестве заместителя одну или более следующих групп: низший алкил, гидроксигруппу, гидрокси-низший алкил, низшую алкоксигруппу, галоген, нитрогруппу, аминогруппу, амидогруппу, цианогруппу, оксогруппу или низший галогеналкил; К² может представлять собой -С(=О), -С(=О)О, -С(=О)NК²', -ИНС(=О)О, -С(К²')2, -О, -δ, -С(=НЩЛК²' или -δ(=Ο)2; каждый К² может представлять собой независимо Н или низший алкил; К³ может представлять собой Н или К⁴; К⁴ может представлять собой низший алкил, низший галогеналкил, низшую алкоксигруппу, аминогруппу, низшую алкиламиногруппу,

- 17 024689 циклоалкиламиногруппу, низшую диалкиламиногруппу, арил, арилалкил, алкиларил, гетероарил, алкилгетероарил, низший алкилгетероарил, гетероарилалкил, гетероарил-низший алкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, низший алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, циклоалкил-низший алкил, гетероциклоалкил, алкилгетероциклоалкил, низший алкилгетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероциклоалкилнизший алкил, бициклический циклоалкил, бициклический гетероциклоалкил, спироциклоалкил, спирогетероциклоалкил или бициклический спирогетероциклоалкил, каждый из которых, возможно, содержит в качестве заместителя одну или более следующих групп: низший алкил, галоген, низшую алкиламиногруппу, низшую диалкиламиногруппу, гидроксигруппу, гидрокси-низший алкил, низшую алкоксигруппу, низший алканоил, галоген, нитрогруппу, аминогруппу, амидогруппу, ацил, цианогруппу, оксогруппу, сульфонил, низший алкилсульфонил, гуанидиновую группу, гидроксиаминогруппу, карбоксигруппу, карбамоил, карбамат, низшую галоген алкоксигруппу, гетероциклоалкил или низший галогеналкил, при этом две низшие алкильные группы могут вместе образовывать кольцо; К' может представлять собой Н, низший алкил, циклоалкил, циклоалкил-низший алкил или гетероциклоалкил или низший галогеналкил; К³ может представлять собой Н, низший алкил или может быть объединенным, образуя спироциклоалкил; и К⁴ может представлять собой Н, низший алкил или может быть объединенным, образуя гетероциклоалкил, возможно замещенный галогеном.

Схема 2

Схемы 3а, 3Ь

Схема 4

Схема 5

- 18 024689

- 19 024689

Схема 7

Схема 8

где К может представлять собой Н, низший алкил, циклоалкил, циклоалкил-низший алкил или гетероциклоалкил или низший галогеналкил.

- 20 024689

Фармацевтические композиции и способы введения.

Лекарственные средства на основе соединений по настоящему изобретению можно изготавливать с применением большого разнообразия лекарственных форм для орального введения и носителей. Оральное введение можно осуществлять в форме таблеток, таблеток, покрытых оболочкой, драже, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, эмульсий, сиропов или суспензий. Соединения по настоящему изобретению эффективны при их введении другими способами, включая непрерывное (внутривенное вливание), наружное, парентеральное, внутримышечное, внутривенное, подкожное, трансдермальное

- 21 024689 (возможно, совместно с агентом, повышающим проницаемость), трансбуккальное, назальное, а также ведение путем ингаляции и суппозиториев, наряду с другими способами введения. Предпочтительным способом введения, как правило, является оральный способ с удобным режимом суточного дозирования, который можно подбирать с учетом тяжести заболевания и реакции пациента на действующее вещество.

Соединение или соединения по настоящему изобретению, а также их фармацевтически применимые соли, совместно с одним или более стандартными эксципиентами, носителями или разбавителями, могут быть изготовлены в виде фармацевтических композиций и форм со стандартной дозой. Такие фармацевтические композиции и стандартные лекарственные формы могут включать обычные компоненты в стандартных пропорциях, при наличии или отсутствии дополнительных активных соединений или компонентов, при этом такие лекарственные формы могут содержать любое подходящее эффективное количество действующего вещества, соответствующее диапазону предполагаемых суточных дозировок. Такие фармацевтические композиции можно применять в виде твердых субстанций, например, таких как таблетки или наполненные капсулы, полутвердые субстанции, порошки, лекарственные формы с пролонгированным высвобождением; или жидкостей, таких как растворы, суспензии, эмульсии, эликсиры или наполненные капсулы для орального применения; или в форме суппозиториев для ректального или вагинального введения; или в форме стерильных растворов для инъекций для парентерального применения. Стандартный лекарственный препарат содержит примерно от 5 до 95% действующего вещества или веществ (вес./вес.). Подразумевается, что термин лекарственный препарат или лекарственная форма включает как твердые, так и жидкие лекарственные формы действующего вещества, и специалисту в данной области техники будет понятно, что активный компонент может присутствовать в различных лекарственных средствах, в зависимости от органа-мишени или ткани-мишени, а также желаемой дозы и фармакокинетических параметров.

Термин экспципиент, используемый в данном тексте, обозначает соединение, применяемое при изготовлении фармацевтической композиции, в общем случае безопасное, нетоксичное, а также не являющееся нежелательным с биологической или иной точки зрения, и включает эксципиенты, приемлемые для ветеринарного применения, а также для фармацевтического применения у человека. Соединения по настоящему изобретению можно вводить в чистом виде, но, как правило, их вводят в смеси с одним или более подходящих фармацевтических эксципиентов, разбавителей или носителей, выбранных в соответствии с предполагаемым способом введения и общепринятой фармацевтической практикой.

Термин фармацевтически приемлемый обозначает полезный при изготовлении фармацевтической композиции, которая в общем случае безопасна, нетоксична и не является нежелательной с биологической или иной точки зрения, и которая подходит для фармацевтического применения в ветеринарии, а также у человека.

Форма фармацевтически приемлемой соли активного компонента может изначально обеспечивать желаемые фармакокинетические свойства действующего вещества, не характерные для его несолевой формы, и может даже положительно повлиять на фармакодинамику действующего вещества в плане его терапевтического воздействия на организм. Фраза фармацевтически приемлемая соль соединения обозначает соль, которая является фармацевтически приемлемой и обладает желаемой фармакологической активностью соединения-предшественника. Такие соли включают (1) кислотно-аддитивные соли, полученные с помощью неорганических кислот, таких как хлороводородная кислота, бромоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п.; или полученные с помощью органических кислот, таких как уксусная кислота, пропионовая кислота, гексановая кислота, циклопентанпропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, 3-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 1,2-этандисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, 4-хлорбензолсульфоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, 4-толуолсульфоновая кислота, камфорсульфоновая кислота, 4-метилбицикло[2.2.2]-окт-2-ен-1-карбоновая кислота, глюкогептоновая кислота, 3-фенилпропионовая кислота, триметилуксусная кислота, трет-бутилуксусная кислота, лаурилсерная кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гидроксинафтойная кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота, и т.п.; или (2) соли, полученные за счет того, что кислотный атом водорода, присутствующий в соединении-предшественнике, либо замещается ионом металла, например ионом щелочного металла, ионом щелочноземельного металла или ионом алюминия; либо координируется с органическим основанием, таким как этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, Ν-метилглюкамин, и т.п.

Твердые лекарственные формы включают порошки, таблетки, пилюли, капсулы, саше, суппозитории и измельчаемые гранулы. Твердый носитель может представлять собой одно или более веществ, которые могут выступать также в качестве разбавителей, ароматизаторов, солюбилизаторов, лубрикантов, суспендирующих агентов, связующих веществ, консервантов, веществ, улучшающих распадаемость таблеток или инкапсулирующего материала. В случае порошков носителем обычно является тонкоизмельченное твердое вещество, представляющее собой смесь с тонкоизмельченным активным компонентом. В случае таблеток активный компонент обычно смешивают с носителем, обязательно обладающим связы- 22 024689 вающей способностью, в приемлемом соотношении, и придают желаемые форму и размер. Приемлемые носители включают, без ограничения, карбонат магния, стеарат магния, тальк, сахар, лактозу, пектин, декстрин, крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлозу, натрий-карбоксиметилцеллюлозу, низкоплавкий воск, какао масло и т.п. Твердые лекарственные формы могут содержать, помимо активного компонента, красители, ароматические добавки, стабилизаторы, буферные агенты, искусственные и натуральные подсластители, диспергирующие вещества, загустители, солюбилизаторы и т.п.

Для орального введения подходят также жидкие лекарственные формы, включая жидкие лекарственные формы, в том числе эмульсии, сиропы, эликсиры, водные растворы и водные суспензии. К этим формам относятся твердые лекарственные формы, которые необходимо переводить в жидкие формы непосредственно перед использованием. Эмульсии могут быть приготовлены в растворах, например в водных растворах пропиленгликоля, или они могут содержать эмульгаторы, например лецитин, сорбитан моноолеат или камедь. Водные растворы можно изготавливать растворением активного компонента в воде и добавлением подходящих агентов: красителей, ароматизаторов, стабилизаторов и загустителей. Водные суспензии можно изготавливать диспергированием тонкоизмельченного активного компонента в воде совместно с вязким веществом, таким как натуральные или синтетические каучуки, смолы, метилцеллюлоза, натрий-карбоксиметилцеллюлоза и другие хорошо известные суспендирующие агенты.

Соединения по настоящему изобретению можно включать в лекарственные формы для парентерального введения (например, путем инъекции, например болюсной инъекции или непрерывной инфузии), и они могут быть представлены в виде лекарственных форм со стандартной дозой в ампулах, предварительно заполненных шприцах, контейнерах для малообъемной инфузии или многодозовых контейнерах, с добавлением консерванта. Такие композиции могут быть изготовлены в форме, например, суспензий, растворов или эмульсий на масляной или водной основе, например растворов в водном полиэтиленгликоле. Примеры маслянистых или неводных носителей, разбавителей, растворителей или основ включают пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла (например, оливковое масло), и инъектируемые органические эфиры (например, этилолеат), и могут включать агенты для создания лекарственной формы, такие как консерванты, увлажняющие агенты, эмульгаторы или суспендирующие агенты, стабилизаторы и/или диспергирующие агенты. Как вариант, активный компонент может присутствовать в форме порошка, полученного путем асептического выделения стерильного твердого вещества или путем лиофилизации из раствора для восстановления перед применением с помощью подходящей основы, например, стерильной апирогенной воды.

Соединения по настоящему изобретению можно включать в лекарственные формы для местного применения на коже, такие как мази, крема и лосьоны, или такие как трансдермальный пластырь. Мази или крема могут быть приготовлены, например, на водной или масляной основе с добавлением подходящих загустителей и/или гелеобразующих агентов. Лосьоны можно изготавливать на водной или масляной основе, и в общем случае они содержат один или более эмульгаторов, стабилизаторов, диспергирующих агентов, суспендирующих агентов, загустителей или красителей. Лекарственные формы, которые подходят для местного введения через рот, включают леденцы, содержащие действующее вещество, включенное в ароматизированную основу, обычно сахарозу и камедь или трагакант; пастилки, содержащие действующее вещество, включенное в инертную основу, такую как желатин и глицерин или сахароза и камедь; и ополаскиватели для рта, содержащие действующее вещество в подходящем жидком носителе.

Соединения по настоящему изобретению можно включать в лекарственную форму для введения в виде суппозиториев. Сначала расплавляют низкоплавкий воск, например смесь глицеридов жирной кислоты или какао масло, и гомогенно диспергируют активный компонент, например, путем перемешивания. Затем расплавленную гомогенную смесь разливают в формы подходящего размера и оставляют для охлаждения и отвердевания.

Соединения по настоящему изобретению можно включать в лекарственные формы для вагинального введения: пессарии, тампоны, крема, гели, пасты, пенки или спреи, содержащие помимо, активного компонента, подходящие носители, хорошо известные в данной области техники.

Соединения по настоящему изобретению можно включать в лекарственные формы для интраназального введения. Растворы или суспензии вводят непосредственно в носовую полость удобным способом, например с помощью капельницы, пипетки или спрея. Такие лекарственные формы могут быть реализованы в виде форм с однократной или многократной дозировкой. В последнем случае для капельницы или пипетки этого достигают введением пациенту подходящего, предварительно определенного объема раствора или суспензии. В случае спрея этого достигают, например, с помощью насоса с дозированным распылением.

Соединения по настоящему изобретению можно включать в лекарственные формы для аэрозольного введения, в частности через дыхательные пути, включая интраназальное введение. Такое соединение обычно имеет маленький размер частиц, например порядка 5 мкм или менее. Такой размер частиц можно обеспечить способами, известными в данной области техники, например путем микронизации. Активный компонент помещают в сосуд под давлением с подходящим пропеллентом, таким как хлорфторуглерод (СРС), например дихлордифторметан, трихлорфторметан или дихлортетрафторэтан, или диоксид угле- 23 024689 рода или другой подходящий газ. Такой аэрозоль в целях удобства может также содержать поверхностно-активное вещество, например лецитин. Дозу лекарства можно контролировать с помощью дозирующего клапана. Как вариант, активные компоненты можно изготавливать в форме сухого порошка, например порошковой смеси соединений в подходящей порошковой основе, такой как лактоза, крахмал, производные крахмала, например гидроксипропилметилцеллюлоза или поливинилпирролидин (РУР). Порошковый носитель образует гель в носовой полости. Порошковую композицию можно изготавливать в виде стандартной лекарственной формы, например в капсулах или картриджах, в желатиновой или блистерной упаковке, из которой порошок можно вводить путем ингаляции.

По желанию, можно изготавливать лекарственные формы с кишечно-растворимой оболочкой, адаптированные для введения активного компонента с замедленным или контролируемым высвобождением. Например, соединения по настоящему изобретению можно включать в лекарственную форму в виде систем для трансдермальной или подкожной доставки лекарственного вещества. Такие системы доставки имеют преимущество в случаях, когда необходимо замедленное высвобождение соединения и когда очень важно строгое соблюдение пациентом схемы лечения. Соединения в трансдермальных системах доставки часто наносят на твердую подложку, которую можно приклеивать к коже. Соединение, представляющее интерес, можно также сочетать с агентом, повышающим проницаемость, например, таким как Л/опс (1-додецилаза-циклогептан-2-он). Системы доставки с замедленным высвобождением внедряют подкожно в субдермальный слой хирургическим путем или путем инъекции. В подкожных имплантантах соединение инкапсулировано в липидно-растворимой мембране, например такой, как силиконовый каучук, или биодеградируемом полимере, например, в полилактиде.

Подходящие лекарственные формы, а также фармацевтические эксципиенты, носители, разбавители и эксципиенты описаны в литературе (Кеш1п§1ои: Тйе 8с1еисе и Ртасйсе о£ РЬаттасу 1995, ебйеД Ьу Е.А. МаШи, Маск РиЬИзЫид Сотраиу, 19* ебШои, Еаз1оп, Репизуката). Опытный специалист по лекарственным формам может вносить модификации в лекарственные формы в пределах сущности настоящего изобретения, с получением множества лекарственных форм для конкретного пути введения, без придания композициям по настоящему изобретению нестабильности и без ограничения их терапевтической активности.

Модификацию соединений по настоящему изобретению с целью улучшения их растворимости в воде или других растворителях, например, можно легко осуществлять путем минимальной модификации (солеобразование, этерификация, и т.п.), что доступно среднему специалисту в данной области техники. Средний специалист в данной области техники способен также модифицировать способ введения и режим дозирования конкретного соединения, с тем чтобы привести фармакокинетические характеристики соединения по настоящему изобретению к максимальному благоприятному эффекту у пациентов.

Термин терапевтически эффективное количество, используемое в данном тексте, обозначает количество, которое необходимо для облегчения симптомов заболевания у индивидуума. Дозировку следует подбирать в соответствии с индивидуальными требованиями в каждом конкретном случае. Дозировку можно варьировать в широких пределах, в зависимости от многочисленных факторов, таких как тяжесть заболевания, на которое направлено лечение, возраст и общее состояние здоровья пациента, другие лекарственные средства, которые принимает пациент, способ и форма введения, а также предпочтения и личный опыт лечащего врача. В случае орального введения приемлемой является суточная доза в интервале между примерно 0.01 и примерно 1000 мг/кг массы тела в сутки при монотерапии и/или комбинированной терапии. Предпочтительная суточная доза находится в пределах примерно от 0.1 до 500 мг/кг массы тела, более предпочтительно примерно от 0.1 до 100 мг/кг массы тела и наиболее предпочтительно примерно от 1.0 до 10 мг/кг массы тела в сутки. Таким образом, при введении пациенту массой 70 кг дозировка будет находиться в диапазоне примерно от 7 мг до 0.7 г в сутки. Суточную дозу можно вводить как однократную дозу или разделенными дозами, как правило, от 1 до 5 доз в сутки. В общем случае лечение начинают с меньших доз, находящихся ниже оптимальной дозы соединения. Затем дозировку постепенно повышают до достижения оптимального эффекта для индивидуального пациента. Средний специалист в лечении заболеваний, описанных в данном тексте, сможет, без необходимости нежелательного экспериментирования, основываясь на личных знаниях, опыте и содержании настоящего изобретения, установить терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению для конкретного заболевания и пациента.

Фармацевтические препараты предпочтительно представляют собой формы со стандартной дозировкой. В такой форме данный препарат подразделен на стандартные дозы, содержащие подходящие количества активного компонента. Лекарственная форма со стандартной дозировкой может представлять собой упакованный препарат, упаковку, содержащую дискретные количества препарата, например упакованные таблетки, капсулы и порошки во флаконах или ампулах. Кроме того, стандартная лекарственная форма сама по себе может представлять собой капсулу, таблетку, саше или леденец, или она может представлять подходящее количество любого из этих форм в упакованном виде.

- 24 024689

Назначения и способы лечения.

Раскрытые в настоящем описании производные пиридазинона представляют собой ингибиторы киназ, в частности ингибиторы В1к. Эти ингибиторы могут быть эффективными при лечении одного или более заболеваний, реагирующих на ингибирование киназ, включая заболевания, реагирующих на ингибирование В1к и/или ингибирование пролиферации В-клеток у млекопитающих. Не привязываясь к какой-либо конкретной теории, полагают, что взаимодействие соединений по настоящему изобретению с В1к приводит к ингибированию активности В1к и соответственно к реализации фармацевтической эффективности этих соединений. Таким образом, настоящее изобретение включает способ лечения млекопитающего, например человека, страдающего заболеванием, реагирующим на ингибирование активности В1к и/или ингибирование пролиферации В-клеток, включающий введение такому млекопитающему, страдающему таким заболеванием, эффективного количества по меньшей мере одного химического соединения, предложенного здесь. Эффективную концентрацию можно установить экспериментально, например с помощью анализа концентрации такого соединения в крови, или теоретически, путем расчета биодоступности. К другим киназам, на которые может быть оказано воздействие, помимо В1к, относятся, без ограничения, другие тирозинкиназы и сериновые/треониновые киназы.

Киназы играют существенную роль в сигнальных путях, контролирующих основополагающие клеточные процессы, такие как пролиферация, дифференциация и гибель (апоптоз). С патологической киназной активностью связано множество заболеваний, включая различные формы рака, аутоиммунные и/или воспалительные заболевания, а также острые воспалительные реакции. Многоплановая роль киназ в сигнальных клеточных путях создает благоприятные условия для выявления новых лекарственных средств, нацеленных на киназы и сигнальные пути.

Одно из осуществлений изобретения включает способ лечения пациента с аутоиммунным и/или воспалительным заболеванием или острой воспалительной реакцией, которые чувствительны к ингибированию активности В1к и/или пролиферации В-клеток.

Аутоиммунные и/или воспалительные заболевания, на которые можно повлиять с помощью соединений и композиций по настоящему изобретению, включают, без ограничения: псориаз, аллергию, болезнь Крона, синдром раздраженного кишечника, болезнь Шегрена, реакцию на тканевый трансплантант и сверхострое отторжение трансплантированных органов, астму, системную красную волчанку (и ассоциированный гломерулонефрит), дерматомиозит, множественный склероз, склеродермию, васкулит (ΑNСΑ-ассоциированный и другие формы васкулита), аутоиммунные гемолитические и тромбоцитопенические состояния, синдром Гудпасчера (и ассоциированный гломерулонефрит и легочное кровотечение), атеросклероз, ревматоидный артрит, хроническую идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру (ΙΤΡ), Аддисонову болезнь, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, диабет, септический шок и миастению гравис.

Настоящим изобретением охвачены способы лечения, в которых по меньшей мере одна химическая сущность, предложенная в настоящем изобретении, вводится в комбинации с противовоспалительным агентом. Противовоспалительные агенты включают без ограничения ΝδΑΙΌδ, неспецифичные и СОХ-2 специфичные ингибиторы фермента циклооксигеназы, соединения золота, кортикостероиды, метотрексат, антагонисты рецепторов фактора некроза опухолей (ΤΝΡ), иммунодепрессанты и метотрексат.

Примеры ΝδΑΙΌδ включают, без ограничения, ибупрофен, флурбипрофен, напроксен и напроксен натрий, диклофенак, комбинации диклофенака натрия и мизопростола, сулиндак, оксапрозин, дифлузинал, пироксикам, индометацин, этодолак, фенопрофен кальций, кетопрофен, набуметон натрий, сульфасалазин, толметин натрий и гидроксихлорохин. Примеры ΝδΑΙΌδ включают также СОХ-2-специфичные ингибиторы, такие как целекоксиб, вальдекоксиб, лумиракоксиб и/или эторикоксиб.

В некоторых осуществлениях такой противовоспалительный агент представляет собой салицилат. Салицилаты включают, без ограничения, ацетилсалициловую кислоту или аспирин, салицилат натрия, а также салицилаты холина и магния.

Такой противовоспалительный агент может также представлять собой кортикостероид. Например, указанный кортикостероид может представлять собой кортизон, дексаметазон, метилпреднизолон, преднизолон, преднизолон натрий фосфат или преднизон.

В дополнительных осуществлениях противовоспалительных агент представляет собой соединение золота, такое как ауротиомалат натрия или ауранофин.

Настоящее изобретение включают также осуществления, в которых указанный противовоспалительный агент представляет собой метаболический ингибитор, такой как ингибитор дигидрофолатредуктазы, например метотрексат, или ингибитор дигидрооротатдегидрогеназы, например лефлуномид.

Другие осуществления настоящего изобретения относятся к комбинациям, в которых по меньшей мере одно противовоспалительное соединение представляет собой моноклональное антитело против С5 (например, экулизумаб или пекселизумаб), антагонист ΤΝΡ, например этанерцепт или инфликсимаб, который представляет собой монклональное антитело против ΤΝΡ альфа.

Другие осуществления настоящего изобретения относятся к комбинациям, в которых по меньшей мере одно действующее вещество представляет собой иммунодепрессант, например иммунодепрессант, выбранный из следующих: метотрексат, лефлуномид, циклоспорин, такролимус, азатиоприн и микофе- 25 024689 нолата мофетил.

В-клетки и предшественники В-клеток, экспрессирующие ВТК, вовлечены в патологию В-клеточных опухолей, включая, без ограничения, В-клеточную лимфому, лимфому (включая лимфому Ходжкина и не-ходжкнскую лимфому), волосатоклетчатую лимфому, множественную миелому, холнический и острый миелогенный лейкоз, а также хронический и острый лимфоцитарный лейкоз.

Было показано, что ВТК является ингибитором гибели Еак/АРО-1 (СО-95), включая сигнальный комплекс (О18С) в лимфоидных В-клетках. Судьба лейкемических/лимфоидных клеток может зависеть от равновесия между разнонаправленными проапоптотическими воздействиями каспаз, активируемых под действием О18С, и восходящего анти-апоптозного регулирующего механизма с участием ВТК и/или его субстратов (УаккПеу е! а1., 1. Вю1. СБет. 1998, 274, 1646-1656).

Было также обнаружено, что ингибиторы ВТК полезны в качестве хемо-сенсибилизирующих агентов, и, таким образом, полезны в комбинации с другими химиотерапевтическими лекарственными веществами, в частности, такими лекарственными веществами, которые индуцируют апоптоз. Примеры других химиотерапевтических лекарственных веществ, которые можно применять в комбинации с хемосенсибилизирующими ингибиторами ВТК, включают ингибиторы топоизомеразы I (камптотецин или топотекан), ингибиторы топоизомеразы II (например, дауномицин и этопозид), алкилирующие агенты (например, циклофосфамид, мелфалан и ВСПи), агенты, направленные на тубулин (например, таксол и винбластин) и биологические агенты (например, антитела, такие как анти-СО20 антитело, ГОЕС 8, иммунотоксины и цитокины).

Активность В!к связана также с некоторыми лейкозами, где экспрессируется ген слияния Ьсг-аЫ, возникающий за счет транслокации частей хромосомы 9 и 22. Эта патология часто наблюдается при хроническом миелогенном лейкозе. В!к постоянно фосфорилируется под действием Ьсг-аЬ1 киназы, инициирующей нисходящие сигналы выживания, за счет чего Ьсг-аЬ1 клетки избегают апоптоза. (Ν. РеИБаЬи е! а1. 1. Ехр. Мей. 2005, 201(11):1837-1852).

Одним осуществлением настоящего изобретения является способ лечения воспалительного и/или аутоиммунного состояния, включающий введение нуждающемуся в лечении пациенту терапевтически эффективного количества соединения-ингибитора В!к по настоящему изобретению.

Одним осуществлением настоящего изобретения является способ лечения ревматоидного артрита, включающий введение нуждающемуся в лечении пациенту терапевтически эффективного количества соединения-ингибитора В!к по настоящему изобретению.

Одним осуществлением настоящего изобретения является способ лечения астмы, включающий введение нуждающемуся в лечении пациенту терапевтически эффективного количества любого из соединений-ингибиторов В!к по настоящему изобретению.

Одним осуществлением настоящего изобретения является применение соединения по настоящему изобретению в качестве терапевтически активного вещества.

Одним осуществлением настоящего изобретения является соединение по настоящему изобретению для применения в лечении воспалительного и/или аутоиммунного состояния.

Одним осуществлением настоящего изобретения является соединение по настоящему изобретению для применения в лечении ревматоидного артрита или астмы.

Одним осуществлением настоящего изобретения является применение соединения по настоящему изобретению для лечения воспалительного и/или аутоиммунного состояния.

Одним осуществлением настоящего изобретения является применение соединения по настоящему изобретению для изготовления лекарственного средства для лечения воспалительного и/или аутоиммунного состояния.

Примеры

К широко используемым аббревиатурам относятся следующие: ацетил (Ас), азо-бисизобутирилнитрил (ΛΙΕΝ). атмосферы (атм), 9-борабицикло[3.3.1]нонан (9-ΕΕΝ или ВВП), 2,2'-бис-(дифенилфосфино)-1,1'-бинафтил (ΡΙΝΑΡ), трет-бутоксикарбонил (Вос), ди-трет-бутилпирокарбонат, или Ьос-ангидрид (ВОС₂О), бензил (Вп), бутил (Ви), регистрационный номер в базе данных СБешюа1 АЬ81гас!8 (ΕΑδΡΝ), бензилоксикарбонил (СВ2 или Ζ), карбонилдиимидазол (СО1), 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан (ОАВСО), трифторид диэтиламиносеры (ОА8Т), дибензилиденацетон (йЬа), 1,5-диазабицикло[4.3.0]нон-5-ен (ОВ№), 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (ОВИ), Ν,Ν'-дициклогексилкарбодиимид (ОСС), 1,2-дихлорэтан (ОСЕ), дихлорметан (ОСМ), 2,3-дихлор5,6-дициано-1,4-бензохинон (ООО), диэтилазодикарбоксилат (ОЕАО), диизопропилазодикарбоксилат (ΟΙΑΟ), диизобутилалюминийгидрид (ОГВАЬ или О1ВАЕ-Н), диизопропилэтиламин (О1РЕА), Ν,Ν-диметилацетамид (ОМА), 4-КП-диметиламинопиридин (ОМАР), Ν,Ν-диметилформамид (ОМЕ), диметилсульфоксид (ОМ8О), 1,1'-бис-(дифенилфосфино)этан (йрре), 1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроцен (άρρί), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид (ЕОС1), 2-этокси-1этоксикарбонил-1,2-дигидрохинолин (ЕЕЭО), этил (Е!), этилацетат (Е!ОАс), этанол (Е!ОН), этиловый эфир 2-этокси-2Н-хинолин-1-карбоновой кислоты (ЕЕЭО), диэтиловый эфир (Е!₂О), этилизопропиловый эфир (Е!О1Рг), О-(7-азабензотриазол-1-ил)-КК№№-тетраметилуроний гексафторфосфатуксусная кислота (НАТИ), уксусная кислота (НОАс), 1-П-гидроксибензотриазол (НОВ!), высокоэффективная жидкост- 26 024689 ная хроматография (ВЭЖХ), изопропанол (ΊΡΑ), изопропилмагнийхлорид (|РгМдС1), гексаметил дисилазан (ΗΜΌδ), жидкостная хромато-масс-спектрометрия (ЬСМ§), литий гексаметилдисилазан (ΕίΗΜΌδ), метахлорпероксибензойная кислота (т-СРВА), метанол (МеОН), точка плавления (тр), Ме8О₂- (мезил или Μδ), метил (Ме), ацетонитрил (МеС№), м-хлорпербензойная кислота (МСРВА), масс-спектр (те), метил-трет-бутиловый эфир (МТВЕ), метилтетрагидрофуран (МеТНР), Ν-бромсукцинимид (ΝΒδ), н-бутиллитий (иВцЫ), Ν-карбоксиангидрид (ИСА), Ν-хлорсукцинимид (ΝΟδ), Ν-метилморфолин (ΝΜΜ), Ν-метилпирролидон (ΝΜΡ), пиридиний хлорхромат (РСС), дихлор-((бисдифенилфосфино)ферроценил)палладий(П) (Рб(бррР)С1₂), ацетат палладия(П) (Рб(ОАс)₂), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(О) (Рб₂(бЬа)₃), пиридиний дихромат (РИС), фенил (РЕ), пропил (Рг), изопропил (ΐ-Рг), фунты на дюйм квадратный (ρδί), пиридин (руг), 1,2,3,4,5-пентафенил-1'-(ди-третбутилфосфино)ферроцен (0-Р1ю5), комнатная температура (температура окружающей среды, кт или КТ), втор-бутиллитий СВиЫ), трет-бутилдиметилсилил или трет-ВцМе₂§1 (ΤΒΌΜδ), тетра-н-бутиламмоний фторид (ТВАР), триэтиламин (ТЕА или Εΐ₃Ν), 2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил (ТЕМРО), трифлат, или СР₃8О₂- (Τί), трифторуксусная кислота (ТРА), 1,1'-бис-2,2,6,6-тетраметилгептан-2,6-дион (ΤΜΗΌ), О-бензотриазол-1-ил-Х,^№,№-тетраметилуроний тетрафторборат (ТВТи), тонкослойная хроматография (ТСХ), тетрагидрофуран (ТНР), триметилсилил или Ме₃§1 (ΤΜδ), п-толуолсульфоновая кислота моногидрат (Т8ОН или рТхОН), 4-Ме-С₆Н₄§О₂-, или тозил (Τδ), ^уретан-Ы-карбоксиангидрид (υΝΕΆ) и 2-дициклогексилфосфино-2',4',6'-триизопропилбифенил (ХРНО8). Общепринятая номенклатура, включая префиксы нормальный (н-), изо-, вторичный (втор-), третичный (трет-) и нео-, употребляется в своем обычном значении, если она используется совместно с алкильными группами (1. Шдаибу аиб И.Р. К^иеу, №тепс1аЦ.1ге ίη Огдатс СЬет^δί^у, ЮТАС, 1979, Регдатоп Ρ^еδδ. ОхРогб).

Получение соединения Т-1.

Стадия 1. Получение трет-бутилового эфира 6-нитро-3',6'-дигидро-2'Н-[3,4']бипиридинил-1'-

В круглодонной колбе на 500 мл 5-бром-2-нитропиридин (6.56 г, 32.3 ммоль, экв.: 1) и трет-бутил4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2Н)-карбоксилат (10 г,

- 27 024689

32.3 ммоль, экв.: 1.00) объединяли с диоксаном (160 мл) с получением светло-желтого раствора. Добавляли Сз₂СО₃ (21.1 г, 64.7 ммоль, экв.: 2) и воду (6 мл). Реакционную смесь дегазировали аргоном, после чего добавляли бис-(трифенилфосфин)палладий(П) дихлорид (2.27 г, 3.23 ммоль, экв.: 0.1). Реакционную смесь нагревали до 80°С и перемешивали в течение 15 ч. Реакционную смесь вливали в 500 мл Н₂О и экстрагировали с помощью Е1ОЛс (3x200 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором, высушивали над М§8О₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 220 г, 10-40% Е1ОЛс в гексане) с получением розового твердого вещества. Полученное твердое вещество обрабатывали эфиром с получением целевого продукта в виде твердого вещества (4.8 г). Фильтрат, полученный при обработке эфиром, и смешанные фракции от первой хроматографии объединяли и очищали флэш-хроматографией (силикагель, 220 г, 20-40% Е1ОЛс в гексане) с получением дополнительного количества продукта (2.2 г).

¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.52 (5, 9Н), 2.59 (Д, 1=1.52 Гц, 2Н), 3.72 (1, 1=5.56 Гц, 2Н),

4.19 (Д, 1=3.03 Гц, 2Н), 6.35 (Ьг. 5., 1Н), 7.97 (ДД, 1=8.46, 2.40 Гц, 1Н), 8.27 (Д, 1=8.34 Гц, 1Н), 8.67 (Д, 1=2.27 Гц, 1Н).

Стадия 2. Получение трет-бутилового эфира 6-амино-3',4',5',6'-тетрагидро-2'Н-[3,4']бипиридинил-1'карбоновой кислоты

В круглодонной колбе на 500 мл трет-бутил-4-(6-нитропиридин-3-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2Н)карбоксилат (4.9 г, 16.0 ммоль, экв.: 1.00) в Е1ОН (300 мл) и этилацетат (75 мл) объединяли с палладием на угле (1.32 г, 1.24 ммоль, экв.: 0.0773). Из реакционной смеси дважды вытесняли воздух водородом и затем перемешивали в атмосфере водорода (баллон) в течение ночи. Анализ с помощью БС/М8 показал, что реакция была завершена. Через реакционную смесь продували азот и фильтровали ее через целит. Осадок на целите промывали несколько раз с помощью Е1ОАс. К бесцветным объединенным фильтрату и смывам добавляли СН₂С1₂ и этот раствор выпаривали досуха. Снова добавляли СН₂С1₂ и этот раствор концентрировали в вакууме с получением целевого продукта с количественным выходом.

(М+Н)+ = 278 т/е.

Стадия 3. Получение трет-бутилового эфира 6-(6-хлор-2-метил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4иламино)-3',4',5',6'-тетрагидро-2'Н-[3,4']бипиридинил-1'-карбоновой кислоты.

4-Бром-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2Н)-он (3.59 г, 16.0 ммоль, экв.: 1.00), трет-бутил-4-(6аминопиридин-3-ил)пиперидин-1-карбоксилат (4.45 г, 16.0 ммоль, экв.: 1.00), 4,5-бис-(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен (696 мг, 1.2 ммоль, экв.: 0.075) и карбонат цезия (18.3 г, 56.2 ммоль, экв.: 3.5) суспендировали в диоксане (150 мл) в атмосфере аргона. В конце добавляли трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (551 мг, 602 мкмоль, экв.: 0.0375). Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали через целит и остаток на целите несколько раз промывали диоксаном. Объединенные фильтраты и смывы концентрировали в вакууме и полученное твердое вещество обрабатывали с Е1ОАс, промывали эфиром и высушивали в вакуумном сушильном шкафу в течение ночи при 50°С с получением 4.57 г целевого продукта в виде белого твердого вещества. Объединенные фильтрат и смывы выпаривали досуха и растворяли в СН2С12 (4 мл), и неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель 120 г, колонка Ληαίοφχ. 20-50% Е1ОАс в гексане в течение 20 мин) с получением и дополнительных 582 мг вещества. Общий выход (5.15 г, 12.3 ммоль, выход 76.4%).

(М+Н)+ = 420 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.50 (5, 9Н), 1.54-1.69 (т, 3Н), 1.83 (Д, 1=13.64 Гц, 2Н), 2.67 (11, 1=12.38, 3.66 Гц, 1Н), 2.83 (1, 1=13.14 Гц, 2Н), 3.82 (5, 3Н), 6.89 (Д, 1=8.59 Гц, 1Н), 7.51 (ДД, 1=8.46, 2.40 Гц, 1Н), 8.25 (Д, 1=2.27 Гц, 1Н), 8.27 (Ьг. 5., 1Н), 8.30 (5, 1Н).

- 28 024689

Стадия 4а. Получение 6-хлор-2-метил-4-(1'-метил-1',2',3',4',5',6'-гексагидро-[3,4']бипиридинил-6иламино)-2Н-пиридазин-3 -она.

трет-Бутил-4-(6-(6-хлор-2-метил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино)пиридин-3ил)пиперидин-1-карбоксилат (2.0 г, 4.76 ммоль, экв.: 1.00) растворяли в смеси растворителей: муравьиная кислота (40.0 мл) и формальдегид 37% (80.0 мл). Реакционную смесь перемешивали при 70°С в течение ночи до завершения реакции, что определяли с помощью анализа ЬСМ8, затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду и полученную водную смесь промывали с помощью СН₂С1₂ и слой СН₂С1₂ отбрасывали. Осторожно доводили рН водного слоя до 12 твердым К₂СО₃, в результате чего происходило осаждение твердого вещества. Это твердое вещество собирали фильтрацией, промывали водой и высушивали в вакуумном сушильном шкафу при 50°С в течение 72 ч с получением 1.4 г целевого продукта.

(М+Н)+ = 334 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-ό) δ ррт: 1.84 (ДД, 1=8.31, 3.02 Гц, 4Н), 1.99-2.19 (т, 2Н), 2.35 (5, 3Н), 2.42-2.68 (т, 1Н), 3.02 (Д, 1=12.09 Гц, 2Н), 3.81 (5, 3Н), 6.86 (Д, 1=8.31 Гц, 1Н), 7.52 (ДД, 1=8.50, 2.46 Гц, 1Н), 8.16-8.33 (т, 3Н).

Стадия 4Ь. Получение 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-4-йодпиридин-3карбальдегида.

В круглодонной колбе на 1 л 6-трет-бутил-8-фторфталазин-1(2Н)-он (5.6 г, 25.4 ммоль, экв.: 1.00) объединяли с ТНР (300 мл) с получением бесцветного раствора. Добавляли гидрид натрия (1.12 г, 28.0 ммоль, экв.: 1.1). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Добавляли 2-фтор-4-йодникотинальдегид (7.02 г, 28.0 ммоль, экв.: 1.1) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакция была завершена, что определяли с помощью анализа ЬСМ8. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором Ν4₄Ο. Реакционную смесь вливали в 200 мл Н2О и экстрагировали трижды с помощью СН2С12. Органические слои промывали солевым раствором, затем высушивали над №ь8О.-| и концентрировали в вакууме. Полученное ярко-желтое твердое вещество переносили в воронку с фильтром и колбу промывали дважды небольшим объемом ЕЮЛс, чтобы гарантировать полное перенесение твердого вещества в воронку. Жидкость отфильтровывали. Твердое вещество дважды обрабатывали с помощью ЕьО и высушивали в вакууме с получением целевого продукта в виде твердого вещества кремового цвета (8.09 г, 17.9 ммоль, выход 70.5%).

(М+Н)+ = 452 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.44 (5, 9Н), 7.49-7.54 (т, 1Н), 7.54 (Д, 1=1.77 Гц, 1Н), 8.03 (Д, 1=5.31 Гц, 1Н), 8.30 (Д, 1=2.53 Гц, 1Н), 8.37 (Д, 1=5.31 Гц, 1Н), 9.98 (5, 1Н).

Стадия 5. 2-(6-трет-Бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-4-[1-метил-5-(1'-метил-1',2',3',4',5',6'гексагидро-[3,4']бипиридинил-6-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-3-карбальдегид.

6-Хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он (1.4 г,

4.19 ммоль, экв.: 1.00), бис-(пинаколато)диборон (1.17 г, 4.61 ммоль, экв.: 1.1) и ацетат калия (1.23 г, 12.6 ммоль, экв.: 3) суспендировали в диоксане (60 мл). Реакционную смесь дегазировали в атмосфере аргона. Добавляли Χ-ΡΙ105 (300 мг, 629 мкмоль, экв.: 0.15) и ацетат палладия(11) (47.1 мг, 210 мкмоль, экв.: 0.05) и реакционную смесь перемешивали при 100°С (внешняя температура) в течение 1 ч в атмосфере азота. Ход реакции тщательно отслеживали с помощью ЬСМ8, путем отбора аликвоты и ее растворения в метаноле, наблюдая за исчезновением исходного хлорида и сопутствующим образованием бороновой кислоты (М+1=344), при этом внимательно следили, чтобы количество побочного дехлорированного продукта было минимальным (М+1=300). Реакция была завершена через 1 ч. Температуру нагревающей бани снижали до 80°С и колбу вынимали из нагревающей бани, но продолжали перемешивание. Добавляли 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1Н)-ил)-4-йодникотинальдегид (1.89 г,

4.19 ммоль, экв.: 1.00) и карбонат калия (1.74 г, 12.6ммоль, экв.: 3), а затем воду (6.00 мл). Добавляли трициклогексилфосфин (118 мг, 419 мкмоль, экв.: 0.1) и бис-(дибензилиденацетон)палладий (121 мг, 210 мкмоль, экв.: 0.05). Реакционную смесь нагревали при интенсивном перемешивании при 80°С и перемешивали 2 ч, затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь

- 29 024689 вливали в воду и экстрагировали путем осторожного встряхивания с помощью Е!ОАс (дважды). Объединенные Е!ОАс экстракты промывали солевым раствором. Водную фазу экстрагировали трижды с помощью СН₂С1₂. Объединяли слои СН₂С1₂ и этилацетата и объединенные органические слои высушивали над Ν;·ι₂δΟ₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество суспендировали в 50 мл СН₂С1₂ и добавляли 200 мл Е!₂О. Твердое вещество фильтровали и промывали с помощью Е!₂О. Осаждали вторую партию твердого вещества, собирали фильтрацией и промывали эфиром. Обе партии имели идентичные спектры ЬСМ§ и 'Н-ЯМР, согласующиеся с целевым продуктом, и их объединяли с получением 1.62 г продукта. (М+Н)+ = 623 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.42 (к, 9Н), 1.88 (Ьг. к., 3Н), 2.39 (Ьг. к., 3Н), 2.46-2.64 (т, 1Н), 3.05 (Ьг. к., 2Н), 3.89 (к, 3Н), 6.91 (б, 1=8.31 Гц, 1Н), 7.38-7.66 (т, 3Н), 7.76 (б, 1=5.29 Гц, 1Н), 8.198.38 (т, 3Н), 8.81 (к, 1Н), 8.87 (б, 1=5.29 Гц, 1Н), 10.11 (к, 1Н).

Пример 1.

Стадия 6. 6-трет-Бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(1'-метил-1',2',3',4',5',6'-гексагидро[3,4']бипиридинил-6-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил] пиридин-2-ил}-2Н-фталазин-1-он.

В круглодонной колбе на 250 мл объединяли 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1Н)-ил)-4(1 -метил-5-(5-( 1 -метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 ил)никотинальдегид (1.62 г, 2.6 ммоль, экв.: 1.00) с сухим СН₂С1₂ (45 мл) и сухим МеОН (20 мл) с получением коричневого раствора. Добавляли борогидрид натрия (177 мг, 4.68 ммоль, экв.: 1.8) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего гасили насыщенным раствором ΝΉ₄Ο. Реакционную смесь разбавляли с помощью 50 мл Н₂О и экстрагировали с помощью СН₂С1₂ (3x150 мл). Органические слои высушивали над №-ь8О₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией [силикагель, 80 г, 0-50% (60:10:1

СН₂С1₂:МеОН:ЯН₄ОН) в СН₂С1₂] с получением незначительно загрязненной пены. Эту пену суспендировали в 30 мл Е!₂О и 10 мл Е!ОАс и медленно перемешивали тяжелым магнитным якорем в течение 1 ч с получением белого твердого вещества. Это твердое вещество собирали фильтрацией, высушивали в вакууме при 50°С в течение 48 ч с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества (880 мг).

(М+Н)+ = 625 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.44 (к, 9Н), 1.87 (Ьг. к., 3Н), 2.15 (Ьг. к., 2Н), 2.39 (Ьг. к., 3Н), 2.52 (!, 1=7.74 Гц, 1Н), 3.04 (Ьг. к., 2Н), 3.82-3.91 (т, 1Н), 3.93 (к, 3Н), 4.46-4.63 (т, 2Н), 6.93 (б, 1=8.69 Гц, 1Н), 7.42-7.59 (т, 3Н), 7.64 (б, 1=4.91 Гц, 1Н), 8.15-8.39 (т, 3Н), 8.70 (к, 1Н), 8.73 (б, 1=4.91 Гц, 1Н).

Получение соединения 1-2.

Стадия 1. Получение 2-хлор-5-((§)-1-метилпирролидин-2-ил)пиридина.

С1

Круглодонную колбу на 100 мл помещали в атмосферу аргона и дегазировали аргоном в вакууме. В колбу добавляли растворители (гексан (4 мл) и толуол 12 мл)). Добавляли Ν,Ν-диметилэтаноламин (1.07 г, 1.21 мл, 12.0 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0°С. Добавляли Ν-бутиллитий (8.66 мл 2.5 М в гексане, 21.6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин. Реакционную смесь охлаждали до -20°С. Добавляли (§)-3-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин (650 мг, 0.64 мл, 4.01 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -20°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали

- 30 024689 до -78°С и добавляли гексахлорэтан (3.8 г, 16.0 ммоль) в толуоле (8 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Реакционную смесь гасили в холодном виде насыщенным раствором NаΗСОз (4 мл). Анализ с помощью ЬСМЗ показал, что в результате реакции был получен желаемый региоизомер в соотношении 6:1 над нежелательным продуктом 6-хлорпиридином. Реакционную смесь вливали в 50 мл Н₂О и экстрагировали с помощью СН₂С1₂ (3x125 мл). Органические слои высушивали над Νη₂δΟ₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 40 г, 0-55% ЕЮАс в гексане) с получением целевого продукта (467 мг, 59%).

¹Н ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.56-2.05 (т, 3Н), 2.16-2.40 (т и перекрывающийся δ, 5Н), 3.09 (ΐ, 6=8.31 Гц, 1Н), 3.17-3.29 (т, 1Н), 7.23-7.32 (т, 1Н), 7.68 (бб, 1=8.12, 2.45 Гц, 1Н), 8.30 (б, 1=2.27 Гц, 1Н).

Стадия 2. Получение 5-(^)-1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-иламина.

В запаянной трубке на 75 мл объединяли ^)-2-хлор-5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин (622 мг, 3.16 ммоль) и 2-(дициклогексилфосфино)бифенил (222 мг, 633 мкмоль) с ТНР (15 мл) с получением светло-желтого раствора. Этот раствор дегазировали аргоном. Добавляли трис-(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (290 мг, 316 мкмоль). Добавляли ^^ΗМ^δ (9.49 мл 1 М раствора в ТНР, 9.49 ммоль). Реакционную смесь помещали в атмосферу аргона и запаивали. Реакционную смесь нагревали до 90°С и перемешивали в течение 15 ч. По данным ТСХ, реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли с помощью ЕЮАс. Реакционную смесь вливали в 150 мл насыщенного ИН₄С1 и экстрагировали с помощью ЕЮАс (4x75 мл). Органические слои высушивали над Μ§δΟ₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэшхроматографией со ступенчатым градиентом (силикагель, 40 г, 10-50% (60:10:1

СН₂С1₂:метанол:МН₄ОН)/СН₂С1₂) с получением целевого продукта (560 мг, 99%).

¹Н ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.57-2.03 (т, 3Н), 2.04-2.39 (т и оуебарртд δ, 5Н), 2.92 (1, 1=8.12 Гц, 1Н), 3.14-3.29 (т, 1Н), 4.40 (Ьг. δ., 2Н), 6.51 (б, 1=8.69 Гц, 1Н), 7.47 (бб, 1=8.31, 2.27 Гц, 1Н), 7.95 (б, 1=2.27 Гц, 1Н).

Стадия 3. Получение 6-хлор-2-метил-4-[5-(^)-1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-иламино]-2Нпиридазин-3 -она.

В круглодонной колбе на 50 мл объединяли 5-(^)-1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-иламин (560 мг, 3.16 ммоль), 4-бром-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2Н)-он (847 мг, 3.79 ммоль) и карбонат цезия (3.09 г, 9.48 ммоль) с диоксаном (25 мл) с получением оранжевой суспензии. Добавляли 4,5-бис-(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен (274 мг, 474 мкмоль, экв.: 0.15), а затем трис-(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (145 мг, 158 мкмоль, экв.: 0.05). Реакционную смесь дегазировали аргоном в течение 10 мин и нагревали при 95-105°С в течение 4 ч. При этом исходного анилина не осталось. Реакционную смесь разбавляли с помощью 200 мл СН₂С1₂. Добавляли М^О₄ и эту смесь перемешивали в течение 5 мин. Реакционную смесь фильтровали и остаток на фильтре промывали несколько раз с помощью СН2С12 Объединенные фильтрат и смывы концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 40 г, 1-2% МеОН в СН2С12) с получением целевого продукта (522 мг, 52%).

(М+Н)+ = 320 т/е.

Пример 2.

Стадия 4. Получение 6-трет-бутил-8-фтор-2-(3-гидроксиметил-4-{1-метил-5-[5-(^)-1метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-иламино] -6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил}-пиридин-2-ил)-2Нфталазин-1-она.

- 31 024689

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-2-метил-4-[5-((8)-1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-иламино]-2Н-пиридазин-3она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он на стадии 5, получали 85 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 611 т/е;

Ή ЯМР '11 ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.41-1.46 (т, 9Н), 2.19 (Ьг. 5., 3Н), 2.98-3.34 (т, 1Н), 3.88 (5, 1Н), 3.93 (5, 3Н), 4.46 -4.64 (т, 2Н), 6.97 (Д, 1=8.31 Гц, 1Н), 7.43-7.79 (т, 4Н), 8.21-8.38 (т, 3Н), 8.65-8.84 (т, 2Н).

Получение соединения Ь3

Стадия 1. Получение 6-[лор-2-метил-4-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-2Нпиридазин-3 -она.

(6-Аминопиридин-3-ил)(морфолино)метанон (58 г, 280 ммоль, экв.: 1.00), 4-бром-6-хлор-2метилпиридазин-3(2Н)-он (63.66 г, 285 ммоль, экв.: 1.02) и (9,9-диметил-9Н-ксантен-4,5-диил)-бис(дифенилфосфин) (4.86 г, 8.4 ммоль, экв.: 0.03) растворяли в ЭМР (1.1 I) при нагревании. Добавляли карбонат цезия (274 г, 840 ммоль, экв.: 3). В конце добавляли РД₂(ДЬа)₃ (3.84 г, 4.2 ммоль, экв.: 0.015) в атмосфере аргона. Реакционную смесь нагревали до 93°С (внешняя температура) в течение 3 ч. Теплую реакционную смесь вливали в смесь воды и льда (10 л). Бежевый преципитат собирали фильтрацией и промывали водой (2 л). Полученное твердое вещество разводили в ЭСМ (5 л) и фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали в вакууме с получением твердого вещества, которое обрабатывали изопропанолом (700 мл), фильтровали и высушивали в вакууме с получением целевого продукта (70.24 г) в виде бежевого твердого вещества.

(М+Н)+ = 350 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 3.56-3.79 (т, 8Н), 3.83 (5, 3Н), 6.96 (Д, 1=8.31 Гц, 1Н), 7.77 (ДД, 1=8.31, 2.27 Гц, 1Н), 8.34-8.42 (т, 2Н), 8.47 (Д, 1=2.27 Гц, 1Н).

Пример 3.

Получение 6-трет-бутил-8-фтор-2-(3-гидроксиметил-4-{1-метил-5-[5-(морфолин-4карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил}-пиридин-2-ил)-2Н-фталазин-1-она.

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-2-метил-4-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-2Н-пиридазин-3-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он на стадии 5, получали 165 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 641 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.44 (5, 9Н), 3.54-3.84 (т, 8Н), 3.94 (5, 3Н), 4.57 (5, 2Н), 7.03 (Д, 1=8.69 Гц, 1Н), 7.45-7.59 (т, 2Н), 7.64 (Д, 1=4.91 Гц, 1Н), 7.79 (ДД, 1=8.69, 2.27 Гц, 1Н), 8.33 (Д, 1=2.64 Гц, 1Н), 8.41-8.55 (т, 2Н), 8.74 (Д, 1=4.91 Гц, 1Н), 8.77 (5, 1Н).

Получение соединения Р4.

Стадия 1. Получение 6-хлор-4-(5-метансульфонилпиридин-2-иламино)-2-метил-2Н-пиридазин-3она.

I

0=8=0

В круглодонную колбу в атмосфере аргона помещали 1.14 г 95% гидрида натрия в масляной дисперсии и 90 мл тетрагидрофурана (Л1ДпсН. безводный, без ингибитора). Эту смесь охлаждали на ледяной бане и добавляли к ней одной порцией 3.10 г 5-(метилсульфонил)пиридин-2-амина. Охлаждающую ван- 32 024689 ну убирали и эту смесь перемешивали при комнатной температуре. Через 15 мин эту смесь охлаждали на ледяной бане и добавляли одной порцией 4.103 г 4-бром-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2Н)-она. Охлаждающую ванну убирали и эту смесь перемешивали при комнатной температуре. Через 90 мин смесь охлаждали на ледяной бане и гасили добавлением по каплям 90 мл 0.5 М хлороводородной кислоты (при нескольких первых каплях происходило выделение газа, цвет менялся с красно-коричневого на желтовато-коричневый, добавляли в течение 15 мин). Охлаждающую ванну убирали, смесь перемешивали еще в течение 15 мин и полученное твердое вещество собирали путем фильтрации с отсасыванием, промывали водой, затем эфиром. Полученное твердое вещество высушивали на воздухе в течение ночи с получением целевого продукта (5.05 г) в виде светло-желтого твердого вещества.

¹Н ЯМР (300 МГц, ПМ8О-Д₆) δ ррт: 3.25 (5, 3Н), 3.69 (5, 3Н), 7.73 (Д, 1=8.69 Гц, 1Н), 8.16 (ДД, 1=1.00 Гц, 1Н), 8.42 (5, 1Н), 8.83 (Д, 1=2.27 Гц, 1Н).

Пример 4.

Получение 6-трет-бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[5-(5-метансульфонилпиридин-2-иламино)1 -метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил] пиридин-2-ил} -2Н-фталазин-1 -она.

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-4-(5-метансульфонилпиридин-2-иламино)-2-метил-2Н-пиридазин-3-она на 6-хлор-2метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он на стадии 5, получали 65 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. (М+Н)+ = 606 т/е;

¹Н ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.44 (5, 9Н), 3.11 (5, 3Н), 3.96 (5, 3Н), 4.58 (5, 2Н), 7.09 (Д, 1=9.06 Гц, 1Н), 7.49-7.59 (т, 2Н), 7.64 (Д, 1=4.91 Гц, 1Н), 8.11 (ДД, 1=8.69, 2.27 Гц, 1Н), 8.34 (Д, 1=2.64 Гц, 1Н), 8.64 (5, 1Н), 8.75 (Д, 1=4.91 Гц, 1Н), 8.91 (5, 2Н).

Получение соединения Г5.

Стадия 1. Получение 6-\лорАА-диметилникотинамида.

С1

В круглодонной колбе на 500 мл 6-хлорникотиноилхлорид (8 г, 45.5 ммоль, экв.: 1.00) растворяли в ИСМ (200 мл) в атмосфере аргона и охлаждали до 0°С. К этому раствору добавляли по каплям диметиламин (90.9 мл 2 М раствора в ТНР, 182 ммоль, экв.: 4) в течение 15 мин, выдерживая температуру ниже 10°С. Ледяную баню убирали и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч. Реакционную смесь промывали водой (100 мл), 20% карбонатом калия (200 мл) и водой (100 мл) и высушивали над №₂8О₄. Удаляли растворитель с получением желтого масла, которое отвердевало при стоянии.

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 2.76-3.27 (т, 6Н), 7.38 (Д, 1=8.31 Гц, 1Н), 7.74 (ДД, 1=8.12, 2.46 Гц, 1Н), 8.46 (Д, 1=2.64 Гц, 1Н).

Стадия 2. Получение 6-азидоАА-диметилникотинамида.

В круглодонной колбе на 500 мл 6-хлор-^^диметилникотинамид (8.15 г, 44.1 ммоль) объединяли с ΌΜΓ (50.0 мл) с получением коричневого раствора. Добавляли азид натрия (3.44 г, 53.0 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 120°С и перемешивали в течение 60 ч. Реакционную смесь разбавляли с помощью 100 мл Н₂О и экстрагировали с помощью Е1ОАс (2x200 мл). Органические слои объединяли, промывали с помощью Н₂О (1x50 мл), насыщенного ΝαΟ (1x100 мл), высушивали над №₂8О₄ и концентрировали в вакууме с получением желтого масла. Добавляли МеОН, и вся смесь отвердевала при концентрировании. Неочищенный продукт высушивали в вакууме в течение ночи. Пастообразное твердое вещество перекристаллизовывали из Е1ОАс/Нех. Полученное твердое вещество фильтровали и промывали минимальным количеством гексана. Полученный белый порошок высушивали в вакууме при 45°С в течение 3 ч с получением 2.23 г (26%) указанного в заголовке соединения.

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 8.95 (5, 1Н), 8.09 (Д, 1=9.1 Гц, 1Н), 7.75 (ДД, 1=9.1, 1.5 Гц, 1Н), 3.15 (Ьг. 5., 6Н).

- 33 024689

Стадия 3. Получение 6-амино-N,N-диметилникотинамида.

I

В круглодонной колбе на 250 мл 6-азидо-N,N-диметилникотинамид (2.26 г, 11.8 ммоль) объединяли с этилацетатом (50 мл) и метанолом (30 мл) с получением желтого раствора. Добавляли 10% Рб/С (200 мг, 1.88 ммоль), из реакционной смеси дважды вытесняли воздух и наполняли с помощью Н₂. Реакционную смесь перемешивали при давлении баллона Н₂ при 25°С в течение 17 ч. Реакционную смесь фильтровали через целит и остаток на фильтре промывали с помощью МеОН. Фильтрат концентрировали в вакууме и кремовое твердое вещество высушивали в вакууме при 45°С в течение 3 ч с получением указанного в заголовке соединения с количественным выходом.

(М+Н)+ = 166 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 8.21 (б, 1=2.3 Гц, 1Н), 7.59 (бб, 1=8.3, 2.3 Гц, 1Н), 6.50 (б, 1=8.7 Гц, 1Н), 4.69 (Ьг. δ., 2Н), 3.08 (δ, 6Н).

Пример 5/

Получение 6-{6-[2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3-гидроксиметилпиридин-4-ил]2 -метил-3 -оксо-2,3 -дигидропиридазин-4 -иламино }-Ν,Ν-диметилникотинамида/

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 3, за исключением замены 6-амино-N,N-диметилникотинамида на (6-аминопиридин-3-ил)(морфолино)метанон, получали 163 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 599 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.43 (δ, 9Н), 3.12 (δ, 6Н), 3.94 (δ, 3Н), 4.57 (δ, 2Н), 7.00 (б, 1=8.69 Гц, 1Н), 7.48-7.59 (т, 2Н), 7.64 (б, 1=4.91 Гц, 1Н), 7.80 (бб, 1=8.50, 2.08 Гц, 1Н), 8.32 (б, 1=2.27 Гц, 1Н), 8.42-8.51 (т, 2Н), 8.74 (б, 1=5.29 Гц, 1Н), 8.78 (δ, 1Н).

Получение соединения Г6.

Стадия 1. 2-(6-Циклопропил-8-фтор-1 -оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-4-йодпиридин-3 -карбальдегид

В круглодонной колбе на 50 мл объединяли 6-циклопропил-8-фторизохинолин-1(2Н)-он (364 мг, 1.79 ммоль, экв.: 1.00) с ТНР (13.00 мл) с получением мутноватого бесцветного раствора. Добавляли бис-(триметилсилил)амид лития в ТНР (2.15 мл 1 М, 2.15 ммоль, экв.: 1.2). Перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин. Добавляли 2-фтор-4-йодникотинальдегид (629 мг, 2.51 ммоль, экв.: 1.4) в 5 мл ТНР. Реакционную смесь нагревали до 65°С и перемешивали в течение 3 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором НН₄С1, экстрагировали один раз с помощью Е1ОАс и три раза дихлорметаном. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над №₂8О₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 80 г, 1-2% МеОН в ЭСМ) и затем вспенивали с помощью Е1ОАс с получением целевого продукта (чистота 90%, 423 мг) в виде светло-желтого порошка. Этот продукт использовали в таком виде на следующей стадии.

(М+Н)+ = 435 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 0.74-0.92 (т, 2Н), 1.03-1.20 (т, 2Н), 1.91-2.05 (т, 1Н), 6.56 (бб, 1=7.74, 2.08 Гц, 1Н), 6.78 (бб, 1=12.84, 1.51 Гц, 1Н), 7.02 (б, 1=1.51 Гц, 1Н), 7.51 (б, 1=7.93 Гц, 1Н), 7.89 (б, 1=5.29 Гц, 1Н), 8.25 (б, 1=5.29 Гц, 1Н), 9.91 (δ, 1Н).

- 34 024689

Пример б.

Стадия 2. Получение б-{б-[2-(б-циклопропил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-3гидроксиметилпиридин-4-ил]-2-метил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино}-^^ диметилникотинамида.

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, б), за исключением замены б-(б-хлор-2-метил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино)-^^диметилникотинамида на б-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он и замены 2-(б-циклопропил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегида на 2-(б-третбутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1 Н)-ил)-4-йодникотинальдегид на стадии 5, получали 148 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 582 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-ά) δ ррт: 0.81-0.93 (т, 2Н), 1.00-1.21 (т, 2Н), 1.90-2.14 (т, 1Н), 3.343.5б (т, 1Н), 3.94 (5, 3Н), 4.40-4.бб (т, бН), б.51-б.б2 (т, 1Н), б.82 (ά, 1=12.84 Гц, 1Н), 7.02 (ά, 1=8.б9 Гц, 1Н), 7.07 (5, 1Н), 7.19-7.31 (т, 4Н), 7.б1 (ά, 1=4.91 Гц, 1Н), 7.80 (άά, 1=8.31, 2.27 Гц, 1Н), 8.42-8.52 (т, 2Н), 8.б9 (άά, 1=4.91, 0.7б Гц, 1Н), 8.78 (5, 1Н).

Получение соединения Т-7.

Стадия 1. Получение 2,5-ди-трет-бутил-3-гидрокси-2,3-дигидроизоиндол-1-она.

В трехгорловой колбе на 1 л с дополнительной воронкой с подведенным барботажным устройства и входом азота, через который продували Ν₂, объединяли ^4-ди-трет-бутилбензамид (5 г, 21.4 ммоль, экв.: 1.00) с ТНР (200 мл) с получением светло-желтого раствора. Реакционную смесь охлаждали до -78°С. В токе азота медленно, по каплям, добавляли втор-бутиллитий в циклогексане (31.4 мл 1.4 М раствора, 43.9 ммоль, экв.: 2.05). В результате этого получали желтый раствор. Реакционную смесь нагревали до -15°С в течение 1 ч. Получали бледно-желтую суспензию. Реакционную смесь охлаждали обратно до -78°С. Добавляли по каплям сухой ΌΜΤ (3.13 г, 3.32 мл, 42.9 ммоль, экв.: 2). Реакционную смесь доводили до комнатной температуры. При 0°С медленно добавляли 30 мл насыщенного раствора ΝΉ^Ι. Реакционную смесь вливали в 150 мл Н₂О и экстрагировали с помощью Е1ОЛс (3x250 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, высушивали над Мд§О₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 80 г, 0-40% Е1ОЛс в гексане с получением целевого продукта (4.9 г, выход 88%).

(М+Н)+ = 2б2 т/е.

Стадия 2. Получение б-трет-бутил-2Н-фталазин-1-она.

В круглодонной колбе на 250 мл 2,5-ди-трет-бутил-3-гидроксиизоиндолин-1-он (4.9 г, 18.7 ммоль, экв.: 1.00) объединяли с уксусной кислотой (б0 мл) с получением бесцветного раствора. Реакционную смесь нагревали до 90°С. Добавляли по каплям гидразин моногидрат (1.б1 г, 1.57 мл, 20.б ммоль, экв.:

- 35 024689

1.1). Реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли с помощью 24 мл Н₂О и медленно охлаждали до 25°С в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали, но не досуха. Реакционную смесь разводили в дихлорметане. Реакционную смесь вливали в 75 мл насыщенного раствора №НСО₃ и экстрагировали дихлорметаном (3x50 мл). Органические слои высушивали над №-ь8О₄ и концентрировали в вакууме. Получали чистый продукт в виде белого твердого вещества, которое очищали флэш-хроматографией (силикагель, 80 г, 1-4% МеОН в ОСМ) с получением целевого продукта (3.7 г) в виде белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 203 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-й) δ ррт: 0.32 (5, 9Н), 6.58 (й, 1=1.89 Гц, 1Н), 6.76 (йй, 1=8.31, 1.89 Гц, 1Н), 7.06 (5, 1Н), 7.26 (й, 1=8.31 Гц, 1Н), 9.19 (Ьг. 5., 1Н).

Стадия 3. Получение 2-(6-трет-бутил-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегида.

В круглодонной колбе на 100 мл объединяли 6-трет-бутилфталазин-1(2Н)-он (700 мг, 3.46 ммоль, экв.: 1.00) с ТНЕ (30 мл) с получением бесцветного раствора. Добавляли гидрид натрия (152 мг, 3.81 ммоль, экв.: 1.1). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. К реакционной смеси добавляли раствор 2-фтор-4-йодникотинальдегида (956 мг, 3.81 ммоль, экв.: 1.1) в 10 мл ТНЕ и перемешивали при комнатной температуре в течение 3.5 ч. Реакция не прошла полностью. Вносили еще 50 мг №)Н. Реакционную смесь перемешивали еще в течение 1.5 ч, после чего добавляли насыщенный раствор ΝΉ₄Ο. Реакционную смесь вливали в 100 мл Н₂О и экстрагировали дихлорметаном (5x50 мл). Объединенные органические слои высушивали над №-ь8О₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 80 г, 10-60% Е!ОАс в гексане) с получением почти чистого продукта. Этот продукт обрабатывали с помощью Е!ОАс с получением целевого продукта в виде кремового твердого вещества. Объединенные фильтраты и смывы, полученные при обработке, концентрировали, повторно очищали флэш-хроматографией (силикагель, 80 г, 10-60% Е!ОАс в гексане) и обрабатывали с помощью Е!ОАс с получением дополнительного количества продукта в виде кремового твердого вещества. Обе партии продукта объединяли с получением 320 мг целевого продукта.

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-й) δ ррт: 1.44 (5, 9Н), 7.74 (й, 1=1.89 Гц, 1Н), 7.89 (йй, 1=8.50, 1.70 Гц, 1Н), 8.02 (й, 1=5.29 Гц, 1Н), 8.28-8.44 (т, 3Н), 9.92 (5, 1Н);

(М+Н)+ = 434 т/е.

Пример 7.

Получение 6-трет-бутил-2-(3-гидроксиметил-4-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2иламино] -6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил}-пиридин-2-ил)-2Н-фталазин-1 -она.

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-2-метил-4-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-2Н-пиридазин-3-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он и замены 2-(6-трет-бутил-1-оксо-1 Н-фталазин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегида на 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1оксофталазин-2(1Н)-ил)-4-йодникотинальдегид на стадии 5, получали 115 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

(М-Н)+ = 621 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-й) δ ррт: 1.47 (5, 9Н), 3.58-3.87 (т, 6Н), 3.96 (5, 3Н), 4.57 (Ьг. 5., 2Н), 7.05 (йй, 1=8.53, 0.50 Гц, 1Н), 7.65 (й, 1=5.02 Гц, 1Н), 7.80 (!й, 1=4.27, 2.26 Гц, 2Н), 7.95 (йй, 1=8.41, 1.88 Гц, 1Н), 8.41 (5, 1Н), 8.47 (йй, 1=5.02, 3.26 Гц, 2Н), 8.50 (5, 1Н), 8.77 (й, 1=5.02 Гц, 1Н), 8.81 (5, 1Н).

- 36 024689

Пример 8.

Получение 2'-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3'-гидроксиметил-1-метил-5-[5(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-1Н-[3,4']бипиридинил-6-она.

В круглодонной колбе на 50 мл объединяли 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1Н)-ил)-4йодникотинальдегид (105 мг, 233 мкмоль, экв.: 1.00) и 1-метил-3-(5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он (123 мг, 279 мкмоль, экв.: 1.20) с диоксаном (5 мл) с получением светло-желтого раствора. Добавляли воду (1 мл) и вносили карбонат калия (74.0 мг, 535 мкмоль, экв.: 2.3). Реакционную смесь дегазировали барботированием аргона через этот раствор в течение 5 мин. Добавляли трициклогексилфосфин (6.53 мг, 23.3 мкмоль, экв.: 0.1) и бис-(дибензилиденацетон)палладий (6.69 мг, 11.6 мкмоль, экв.: 0.05). Реакционную смесь нагревали до 75°С и перемешивали в течение 1 ч. Бороновый эфир, расходуемый на реакцию с 2-(6-трет-бутил-8-фтор1-оксофталазин-2(1Н)-ил)-4-йодникотинальдегидом, еще оставался, по результатам анализа ЬСМ§. Добавляли еще 30 мг 1-метил-3-(5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-она и 3 мг лиганда и катализатора и реакционную смесь нагревали до 75°С и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь вливали в 50 мл Н2О и экстрагировали с помощью Е!ОАс (1Х) и ЭСМ с небольшим содержанием МеОН (<5%) (3x50 мл). Объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэшхроматографией (силикагель, 24 г, 0.5-2% МеОН в ЭСМ) с получением 50 мг 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1оксофталазин-2(1Н)-ил)-4-(1-метил-5-(5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6дигидропиридин-3 -ил)никотинальдегида.

В круглодонной колбе на 250 мл 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1Н)-ил)-4-(1-метил-5-(5(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3 -ил)никотинальдегид (50 мг, 78.4 мкмоль, экв.: 1.00) объединяли с дихлорметаном (6 мл) и 2 мл МеОН с получением желтого раствора. Добавляли борогидрид натрия (3.56 мг, 94.1 мкмоль, экв.: 1.2). Полученный бесцветный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли 1 мл насыщенного раствора ИН₄С1; а затем 5 мл Н₂О. Смесь перемешивали в течение 5 мин. Реакционную смесь вливали в 50 мл Н₂О и экстрагировали с помощью Е!ОАс (3x50 мл). Органические слои высушивали над №-ь8О₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 24 г, 1-3% МеОН в ЭСМ) с получением целевого продукта (41 мг) в виде грязно-белого порошка.

(М+Н)+ = 640 т/е;

'Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.46 (к, 9Н), 3.50-3.85 (к и оуейарршд т, 11 Н) 4.51 (Ьг. к., 2Н), 6.90 (б, 1=8.59 Гц, 1Н), 7.51-7.63 (т, 3Н), 7.71 (бб, 1=8.59, 2.53 Гц, 1Н), 7.79 (б, 1=2.53 Гц, 1Н), 8.26 (Ьг. к., 1Н), 8.37 (б, 1=1.52 Гц, 2Н), 8.70 (б, 1=5.05 Гц, 1Н), 8.82 (б, 1=2.02 Гц, 1Н).

Пример 9.

Получение 2'-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3'-гидроксиметил-5-(5метансульфонилпиридин-2-иламино)-1-метил-1Н-[3,4']бипиридинил-6-она.

В круглодонной колбе на 50 мл объединяли 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1Н)-ил)-4йодникотинальдегид (200 мг, 443 мкмоль, экв.: 1.00) и 1-метил-3-(5-(метилсульфонил)пиридин-2иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он¹ (234 мг, 576 мкмоль, экв.: 1.3) в диоксане (5 мл) с получением светло-желтого раствора. Добавляли воду (1 мл) и карбонат калия (141 мг, 1.02 ммоль, экв.: 2.3). Реакционную смесь дегазировали барботированием аргона через этот раствор в течение 5 мин. Добавляли трициклогексилфосфин (12.4 мг, 44.3 мкмоль, экв.: 0.1) и бис-(дибензилиденацетон)палладий (12.7 мг, 22.2 мкмоль, экв.: 0.05). Реакционную смесь нагревали до 70°С и перемешивали в течение 3 ч. Полученная реакционная смесь представляла собой оранжевую суспензию. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли с помощью Е!ОАс и фильтровали. Полученное твердое вещество промывали три раза с помощью Н2О, три раза небольшими объемами Е!ОАс и один раз эфиром с получением 154 мг 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1Н)ил)-4-(1-метил-5-(5-(метилсульфонил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3- 37 024689 ил)никотинальдегида. По данным ЬСМ8, этот продукт был чистым. (М+Н)+ = 603 т/е.

В круглодонной колбе на 250 мл объединяли 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1Н)-ил)-4(1-метил-5-(5-(метилсульфонил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)никотинальдегид (154 мг, 256 мкмоль, экв.: 1.00) с дихлорметаном (24 мл) и 2 мл МеОН. Добавляли борогидрид натрия (14.5 мг, 383 мкмоль, экв.: 1.5) и реакционную суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли 1 мл насыщенного раствора ИН₄С1; а затем 5 мл Н₂О. Эту смесь перемешивали в течение 5 мин. Реакционную смесь вливали в 50 мл Н₂О и экстрагировали дихлорметаном (3x50 мл). Органические слои высушивали над №₂8О₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 12 г, 1-3% МеОН в ЭСМ) с получением целевого продукта (90 мг) в виде белого порошка.

(М+Н)+ = 605 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.46 (5, 9Н), 3.10 (5, 3Н), 3.77 (5, 3Н), 4.51 (Ьг. 5., 2Н), 6.94 (Д, 1=8.59 Гц, 1Н), 7.48-7.65 (т, 3Н), 7.88 (Д, 1=2.53 Гц, 1Н), 8.00 (ДД, 1=8.59, 2.53 Гц, 1Н), 8.33-8.45 (т, 2Н), 8.71 (Д, 1=5.05 Гц, 1Н), 8.82 (Д, 1=2.53 Гц, 1Н), 8.92 (Д, 1=2.53 Гц, 1Н).

Получение соединения 1-10.

Стадия 1. Получение 6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)-^^ диметилникотинамида.

6-(5-Бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)никотиновую кислоту (полученную гидролизом метилового эфира (3.7 г смеси чистой кислоты и эфира 80:20, 9.1 ммоль, 1 экв.), ΌΙΕΆ ( 1.77 г, 13.7ммоль, 1.5 экв.), диметиламин (6.85 мл 2 М раствора, 13.7 ммоль, 1.5 экв.) и (1Н-бензо[Д][1,2,3]триазол-1-илокси)-трис-(диметиламино)фосфоний гексафторфосфат(У) (6.06 г, 13.7 ммоль, 1.5 экв.) объединяли в 200 мл ТНР. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи, затем концентрировали практически досуха. Реакционную смесь разбавляли смесью ИН₄С1/вода (300 мл) и экстрагировали с помощью ЕЮЛс (три раза по 250 мл). Органическую фазу промывали смесью NаНСО₃/вода (три раза по 200 мл) и водой (три раза по 200 мл). Объединенные органические фазы затем концентрировали с получением твердого вещества, которое перекристаллизовывали из смеси Е(ОН/Не\ с получением целевого продукта (1.7 г).

(М+Н)+ = 351, 353 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 3.11 (5, 6Н), 3.61 (5, 3Н), 6.80 (Д, 1=8.31 Гц, 1Н), 7.03 (Д, 1=2.27 Гц, 1Н), 7.69 (ДД, 1=8.69, 2.27 Гц, 1Н), 8.04 (5, 1Н), 8.42 (Д, 1=2.27 Гц, 1Н), 8.74 (Д, 1=2.64 Гц, 1Н).

- 38 024689

Стадия 2. Получение ^^диметил-6-[1-метил-2-оксо-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2ил)-1,2-дигидропиридин-3 -иламино]никотинамида.

В круглодонной колбе на 50 мл объединяли 6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3иламино)-^^диметилникотинамид (1.0 г, 2.85 ммоль, экв.: 1.00), и бис-(пинаколато)диборон (795 мг, 3.13 ммоль, экв.: 1.1) с 1,4-диоксаном (10.0 мл) с получением зеленого раствора. Реакционную смесь перемешивали до полного растворения. Эту смесь помещали в атмосферу аргона и затем добавляли ацетат калия (838 мг, 8.54 ммоль, экв.: 3). В реакционную смесь вносили ацетат палладия(П) (12.8 мг, 56.9 мкмоль, экв.: 0.02) и Κ-ΡΗθ5 (40.7 мг, 85.4 мкмоль, экв.: 0.03). Эту смесь помещали в атмосферу аргона и реакционную смесь нагревали до 75°С и перемешивали в течение 1 ч в атмосфере Ν₂. Реакционную смесь остужали до 65°С и затем фильтровали через целит. Полученное твердое вещество промывали теплым диоксаном (10 мл) и охлаждали до комнатной температуры, после чего вносили гексан (30 мл). Эту смесь отстаивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем собирали полученное твердое вещество фильтрацией, промывали гексаном и высушивали в вакуумном сушильном шкафу при 50°С в течение ночи, с получением целевого продукта (227 мг).

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.36 (5, 12Н), 3.13 (5, 6Н), 3.66 (5, 3Н), 6.81 (Д, 1=8.59 Гц, 1Н), 7.43 (Д, 1=1.52 Гц, 1Н), 7.69 (ДД, 1=8.59, 2.53 Гц, 1Н), 7.96 (Ьг. 5., 1Н), 8.48 (Д, 1=2.02 Гц, 1Н), 8.67 (Д, 1=1.52 Гц, 1Н).

Пример 10.

Получение 6-[2'-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3'-гидроксиметил-1-метил-6-оксо1,6-дигидро-[3,4']бипиридинил-5-иламино]-^^диметилникотинамида

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 8, за исключением замены ^^диметил-6-[1-метил-2-оксо-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1,2-дигидропиридин-3иламино]никотинамида на 1-метил-3-(5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино)-5-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он, получали 54 мг указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 598 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.44 (5, 9Н), 3.11 (5, 6Н), 3.74 (5, 3Н), 4.49 (Ьг. 5., 2Н), 6.86 (Д, 1=8.31 Гц, 1Н), 7.49-7.62 (т, 3Н), 7.70 (ДД, 1=8.50, 2.45 Гц, 1Н), 7.78 (Д, 1=2.27 Гц, 1Н), 8.16 (Ьг. 5., 1Н), 8.36 (ДД, 1=8.88, 2.45 Гц, 2Н), 8.68 (Д, 1=4.91 Гц, 1Н), 8.82 (Д, 1=2.27 Гц, 1Н).

Пример 11.

Получение 2'-(6-циклопропил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-3'-гидроксиметил-1-метил-5-[5(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-1Н-[3,4']бипиридинил-6-она.

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 8, за исключением замены 2-(6-циклопропил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегида на 2-(6-третбутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1Н)-ил)-4-йодникотинальдегид, получали 83 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 623 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 0.78-0.97 (т, 2Н), 1.09-1.23 (т, 2Н), 1.60 (Ьг. 5., 1Н), 1.942.10 (т, 1Н), 3.55-3.88 (т и оуег1аррт§ 1, 11Н), 4.29-4.62 (т, 2Н), 6.61 (ДД, 1=7.55, 1.89 Гц, 1Н), 6.79-6.96

- 39 024689 (т, 2Н), 7.09 (б, 1=1.51 Гц, 1Н), 7.21-7.27 (т, 1Н), 7.53 (б, 1=5.29 Гц, 1Н), 7.68 (бб, 1=8.69, 2.27 Гц, 1Н), 7.96 (б, 1=2.27 Гц, 1Н), 8.26 (Ьг. δ., 1Н), 8.35 (б, 1=2.27 Гц, 1Н), 8.62 (б, 1=4.91 Гц, 1Н), 8.80 (б, 1=2.27 Гц, 1Н).

Пример 12.

Получение 6-трет-бутил-2-(3-гидроксиметил-4-{1-метил-5-[5-((§)-1-метилпирролидин-2ил)пиридин-2-иламино] -6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил} -пиридин-2-ил)-2Н-фталазин-1 -она.

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-2-метил-4-[5-((§)-1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-иламино]-2Н-пиридазин-3она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он и замены 2-(6-трет-бутил-1-оксо-1 Н-фталазин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегида на 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1оксофталазин-2(1Н)-ил)-4-йодникотинальдегид на стадии 5, получали 78 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 593 т/е.

'Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.47 (δ, 9Н), 1.52-2.49 (т и оνе^1аρρ^ηд 1, 6Н), 2.99-3.38 (т, 1Н), 3.95 (δ, 3Н), 4.01 (1, 1=7.03 Гц, 1Н), 4.57 (б, 1=6.02 Гц, 2Н), 7.00 (б, 1=8.53 Гц, 1Н), 7.66 (б, 1=5.02 Гц, 1Н), 7.73 (Ьг. δ, 1Н), 7.79 (б, 1=1.76 Гц, 1Н), 7.94 (бб, 1=8.41, 1.88 Гц, 1Н), 8.26-8.37 (т, 2Н), 8.40 (б, 1=0.50 Гц, 1Н), 8.47 (б, 1=8.53 Гц, 1Н), 8.72-8.81 (т, 2Н).

Пример 13.

Получение 6-трет-бутил-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(1'-метил-1',2',3',4',5',6'-гексагидро[3,4']бипиридинил-6-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил] пиридин-2-ил}-2Н-фталазин-1-она.

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 2-(6-трет-бутил-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегида на 2-(6-третбутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1 Н)-ил)-4-йодникотинальдегид на стадии 5, получали 68 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 607 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.46 (δ, 9Н), 1.75-2.26 (т, 5Н), 2.38 (Ьг. δ., 3Н), 2.44-2.61 (т, 1Н), 3.05 (б, 1=10.20 Гц, 2Н), 3.93 (δ, 3Н), 4.00 (ΐ, 1=6.99 Гц, 1Н), 4.55 (б, 1=6.42 Гц, 2Н), 6.93 (б, 1=8.69 Гц, 1Н), 7.54 (бб, 1=8.50, 2.45 Гц, 1Н), 7.64 (б, 1=4.91 Гц, 1Н), 7.77 (б, 1=1.89 Гц, 1Н), 7.92 (бб, 1=8.50, 1.70 Гц, 1Н), 8.20-8.31 (т, 2Н), 8.39 (δ, 1Н), 8.45 (б, 1=8.31 Гц, 1Н), 8.71 (δ, 1Н), 8.74 (б, 1=4.91 Гц, 1Н).

Получение соединения ^14.

Получение 6-хлор-4-(1'-этил-1',2',3',4',5',6'-гексагидро-[3,4']бипиридинил-6-иламино)-2-метил-2Нпиридазин-3 -она.

В круглодонной колбе на 250 мл объединяли трет-бутил-4-(6-(6-хлор-2-метил-3-оксо-2,3дигидропиридазин-4-иламино)пиридин-3-ил)пиперидин-1-карбоксилат (620 мг, 1.48 ммоль, экв.: 1.00) с дихлорметаном (30 мл) с получением желтого раствора. Добавляли ТРА (3.37 г, 2.28 мл, 29.5 ммоль, экв.: 20). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере Ν2 в течение 24 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, повторно растворяли в дихлорметане и концентрировали в

- 40 024689 вакууме. Остаток суспендировали в эфире и концентрировали в вакууме с получением соли ТРА.

(М+Н)+ = 320 т/е;

В круглодонной колбе на 250 мл полученную соль ТРА объединяли с ИСЕ (5.0 мл) с получением желтой суспензии. Вносили 10 мл дихлорметана, чтобы способствовать переходу большей части твердого вещества в раствор. Добавляли избыток ацетальдегида (652 мг, 836 мкл 14.8 ммоль, экв.: 10.0). Добавляли триацетоксиборогидрид натрия (471 мг, 2.22 ммоль, экв.: 1.5). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли насыщенный раствор NаНСОз и реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин, вливали в 10% раствор NаНСОз, экстрагировали пять раз дихлорметаном. Объединенные органические экстракты высушивали над №₂8О₄. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 24 г, 1% -6% МеОН в ИСМ) с получением целевого продукта (400 мг).

(М+Н)+ = 348 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.18 (Ьг. 5., 3Н), 1.87 (Ьг. 5., 4Н), 2.07 (Ьг. 5., 1Н), 2.54 (Ьг. 5., 3Н), 3.16 (Ьг. 5., 2Н), 3.83 (5, 3Н), 6.88 (Д, 1=8.34 Гц, 1Н), 7.55 (Д, 1=8.34 Гц, 1Н), 8.17-8.38 (т, 3Н).

Пример 14.

Получение 6-трет-бутил-2-{4-[5-(1'-этил-1',2',3',4',5',6'-гексагидро-[3,4']бипиридинил-6-иламино)-1метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил] -3 -гидроксиметилпиридин-2-ил}-8-фтор-2Н-фталазин-1 -она.

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-4-(1'-этил-1',2',3',4',5',6'-гексагидро-[3,4']бипиридинил-6-иламино)-2-метил-2Нпиридазин-3-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)он на стадии 5, получали 61 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. (М+Н)+ = 639 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.03-1.24 (т, 3Н), 1.43 (5, 9Н), 1.69-2.20 (т, 6Н), 2.36-2.68 (т, 3Н), 3.12 (Д, 1=9.82 Гц, 2Н), 3.88 (1, 1=7.18 Гц, 1Н), 3.92 (5, 3Н), 4.49-4.63 (т, 2Н), 6.92 (Д, 1=8.69 Гц, 1Н), 7.46 -7.59 (т, 3Н), 7.64 (Д, 1=5.29 Гц, 1Н), 8.21-8.29 (т, 2Н), 8.32 (Д, 1=2.27 Гц, 1Н), 8.69 (5, 1Н), 8.73 (Д, 1=4.91 Гц, 1Н).

Получение соединения Ы5.

- 41 024689

Стадия 1. Получение этил-2-(6-хлорпиридин-3-илокси)-2-метилпропионата.

К раствору 6-хлорпиридин-3-ола (40 г, 309 ммоль, экв.: 1.00) и этил-2-бром-2-метилпропионата (63.2 г, 48.1 мл, 324 ммоль, экв.: 1.05) в 300 мл СΗзСN добавляли Ск₂СО₃ (216 г, 664 ммоль, 309 ммоль, экв.: 2.15) и полученную реакционную смесь перемешивали в атмосфере аргона в течение 48 ч. Реакционную смесь фильтровали и остаток на фильтре тщательно промывали с помощью ЕЮАс. Объединенные фильтраты и смывы разбавляли водой (300 мл), встряхивали и собирали органическую фазу. Водную фазу повторно экстрагировали с помощью ЕЮАс (2x150 мл). Объединенные органические фазы высушивали (М^О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки пропусканием через слой 200 г силикагеля и элюированием с помощью 30% смеси ЕЮАс/гексан получали целевой продукт (51.1 г) в виде светло-желтого масла.

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.27 (ΐ, 1=7.18 Гц, 3Н), 1.61 (δ, 6Н), 4.24 (ц, 1=7.18 Гц, 2Н), 7.12-7.25 (т, 2Н), 8.01 (б, 1=2.64 Гц, 1Н).

Стадия 2. Получение 2-(6-хлорпиридин-3-илокси)-2-метилпропаналь.

К раствору этил-2-(6-хлорпиридин-3-илокси)-2-метилпропионата (51.15 г, 210 ммоль, экв.: 1.00) в сухом ТНР, охлажденному до -(20-30)°С (СН₃С^СО₂) в атмосфере азота, добавляли по каплям раствор ЫА1Н₄ (294 мл 1 М раствора в ТНР, 294 ммоль, 1.4 экв.) в течение 10 мин. Реакционную смесь перемешивали при -20°С в течение 1 ч. Реакционную смесь гасили, для чего медленно добавляли: Н₂О (6.1 мл), затем перемешивали в течение 10 мин; 5% №ЮН (11.4 мл), затем перемешивали в течение 10 мин; Н₂О (11.4 мл), затем перемешивали в течение 10 мин. Добавляли М^О₄, чтобы абсорбировать воду, и эту смесь фильтровали через слой целита. Остаток на целите тщательно промывали с помощью ТНР (~400 мл).

Твердые соли алюминия, полученные при фильтрации, перемешивали в ТНР (300 мл) в течение 10 мин, фильтровали и тщательно промывали с помощью ТНР. Объединенные фильтраты и смывы концентрировали в вакууме. Полученный остаток растворяли в 150 мл дихлорметана и промывали равным объемом 50% разбавленного солевого раствора. Водную фазу повторно экстрагировали (2x100 мл дихлорметаном). Объединенные органические экстракты высушивали (М^О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 2-(6-хлорпиридин-3-илокси)-2-метилпропан-1-ола (92% чистота, 41.17 г) в виде светло-коричневого масла.

Высушенную в сушильном шкафу колбу с 350 мл сухого СН₂С1₂ охлаждали до -78°С в атмосфере аргона. Добавляли оксалилхлорид (31.0 г, 20.7 мл, 244 ммоль, экв.: 1.30), а затем по каплям вносили ^МδΟ (28 мл, 394 ммоль, 2.1 экв.). Эту смесь перемешивали в течение 10 мин, затем медленно добавляли по каплям раствор 2-(6-хлорпиридин-3-илокси)-2-метилпропан-1-ола (41.17 г вещества с чистотой 92%, 188 ммоль, экв.: 1.00), растворенного в 60 мл СН₂С1₂. Эту смесь перемешивали в течение 30 мин при -78°С. Добавляли триэтиламин (105 мл, 751 ммоль, 4 экв.), убирали охлаждающую ванну и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, позволяя ей нагреться до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли насыщенным NаΗСΟз (275 мл), встряхивали, органическую фазу собирали и промывали равным объемом солевого раствора. Водную фазу повторно экстрагировали с помощью ЭСМ (2x150 мл). Объединенные органические фазы высушивали (М^О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Полученный остаток очищали с помощью Аиа1од1х МРЬС (колонка δΡ40-2400), элюировали гардиентом 2-30% ЕЮАС/Нех в течение 60 мин с получением целевого продукта (37.1 г) в виде светложелтого масла.

(М+Н)+ = 200 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.44 (δ, 6Н), 7.07-7.34 (т, 2Н), 8.05 (б, 1=3.02 Гц, 1Н), 9.79 (δ, 1Н).

- 42 024689

Стадия 3. Получение 5-(2-азетидин-1-ил-1,1-диметилэтокси)-2-хлорпиридина.

В колбе на 100 мл под давлением 2-(б-хлорпиридин-3-илокси)-2-метилпропаналь (10 г, 50.1 ммоль, экв.: 1.00), уксусную кислоту (5.7 мл, 100 ммоль) и триацетоксиборогидрид натрия (22.3 г, 105 ммоль, экв.: 2.1) растворяли в дихлорметане (58 мл) и охлаждали до 0°С. К этому раствору добавляли по каплям азетидин (11.8 мл, 175 ммоль, 3.5 экв.). Реакционную смесь нагревали в течение ночи при 55°С, затем охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли с помощью 120 мл насыщенного раствора NаНСΟз и 80 мл дихлорметана. Смесь встряхивали и собирали слой дихлорметана. Органический слой снова промывали с помощью 100 мл 5% раствора NаНСΟз (водн.) и равного объема разбавленного 50% солевого раствора. Водную фазу повторно экстрагировали с помощью 2x70 мл дихлорметана. Объединенные органические фракции высушивали над №ь8О.-|. фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали с помощью Аиа1од1х МРЬС (колонка 8Р25 - б0 г), элюировали гардиентом 100% ОСМ-5% МеОН/ОСМ с получением смеси 70:30 целевого продукта: 2-(б-хлорпиридин-3-илокси)-2-метилпропан-1-ола (7.5 г) в виде бледно-желтого масла. Использовали в таком виде на следующей стадии.

Стадия 4. Получение 5-(1-(азетидин-1-ил)-2-метилпропан-2-илокси)пиридин-2-амина.

5-(1-(Азетидин-1-ил)-2-метилпропан-2-илокси)-2-хлорпиридин (3.5 г, 14.5 ммоль, экв.: 1.00) растворяли в тетрагидрофуране (78.0 мл). Добавляли 2-(дициклогексилфосфино)бифенил (1.02 г, 2.91 ммоль, экв.: 0.2), а затем трис-(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (1.33 г, 1.45 ммоль, экв.: 0.1) в атмосфере аргона. В конце добавляли по каплям 1 М бис-(триметилсилил)амид лития в ТНР (43.б мл, 43.б ммоль, экв.: 3). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере аргона при 75°С в течение ночи. Реакционную смесь вливали в 100 мл насыщенного раствора NН₄С1 и экстрагировали с помощью ЕЮАс (100 мл). Органическую фазу промывали 50% разбавленным солевым раствором. Водную фазу снова экстрагировали с помощью 2x80 мл ЕЮАс. Объединенные органические фазы высушивали (Мд§О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали с помощью Аиа1од1х МРЬС (колонка 40 г, элюировали с помощью 1-10% МеОН в ИСМ) с получением целевого продукта (1.бб г) в виде коричневого вязкого масла.

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-ά) δ ррт: 1.18 (5, бН), 2.10 (цти, 1=7.08 Гц, 2Н), 2.54 (5, 2Н), 3.33 (1, 1=б.99 Гц, 4Н), 4.25 (Ьг. 5., 2Н), б.43 (ά, 1=8.б9 Гц, 1Н), 7.12 (άά, 1=8.б9, 2.б4 Гц, 1Н), 7.79 (ά, 1=2.б4 Гц, 1Н).

Стадия 5. Получение 4-[5-(2-азетидин-1-ил-1,1-диметилэтокси)пиридин-2-иламино]-б-хлор-2метил-2Н-пиридазин-3 -она.

4-Бром-б-хлор-2-метилпиридазин-3(2Н)-он (2.18 г, 9.75 ммоль, экв.: 1.30), 5-(1-(азетидин-1-ил)-2метилпропан-2-илокси)пиридин-2-амин (1.бб г, 7.5 ммоль, экв.: 1.00), ксантфос (б51 мг, 1.13 ммоль, 0.15 экв.) и С5₂СО₃ (8.55 г, 2б.3 ммоль, 3.5 экв.) объединяли в диоксане и реакционную смесь дегазировали в вакууме путем замещения аргоном. К этому раствору добавляли Рά₂(άЬа)з (515 мг, 5б3 мкМ, 0.075 экв.) и эту смесь снова дегазировали с помощью аргона. Реакционную смесь перемешивали в атмосфере аргона при 90°С в течение 18 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали через слой целита. Остаток на целите промывали с помощью ТНР и дихлорметана. Объединенные фильтраты и смывы концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали с помощью Аиа1од1х МРЬС (колонка б0 г; элюировали с помощью 0.5-15% МеОН/ОСМ) с получением целевого продукта (1.43 г) в виде рыжевато-коричневого твердого вещества.

(М+Н)+ = 3б4 т/е;

- 43 024689

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-й) δ ррт: 1.24 (5, 6Н), 2.12 (дшп, 1=7.08 Гц, 2Н), 2.59 (5, 2Н), 3.35 (!, 1=6.99 Гц, 4Н), 3.81 (5, 3Н), 6.83 (й, 1=8.69 Гц, 1Н), 7.32 (йй, 1=8.88, 2.83 Гц, 1Н), 8.09 (й, 1=3.02 Гц, 1Н), 8.18 (5, 1Н), 8.25 (5, 1Н).

Пример 15.

Получение 2-(4-{5-[5-(2-азетидин-1-ил-1,1-диметилэтокси)пиридин-2-иламино]-1-метил-6-оксо-1,6дигидропиридазин-3-ил}-3-гидроксиметилпиридин-2-ил)-6-трет-бутил-8-фтор-2Н-фталазин-1-она/

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 4-[5-(2-азетидин-1-ил-1,1-диметилэтокси)пиридин-2-иламино]-6-хлор-2-метил-2Нпиридазин-3-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)он на стадии 5, получали 99 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 655 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-й) δ ррт: 1.25 (5, 6Н), 1.43 (5, 9Н), 2.13 (Ьг. 5., 2Н), 2.61 (Ьг. 5., 2Н), 3.37 (Ьг. 5., 4Н), 3.85 (!, 1=6.99 Гц, 1Н), 3.92 (5, 3Н), 4.46-4.63 (т, 2Н), 6.91 (й, 1=8.69 Гц, 1Н), 7.34 (йй, 1=9.06, 2.64 Гц, 1Н), 7.45-7.58 (т, 2Н), 7.64 (й, 1=4.91 Гц, 1Н), 8.09 (й, 1=2.64 Гц, 1Н), 8.24-8.37 (т, 2Н), 8.61 (5, 1Н), 8.73 (й, 1=4.91 Гц, 1Н).

Пример 16.

Получение 2-(4-{5-[5-(2-азетидин-1-ил-1,1-диметилэтокси)пиридин-2-иламино]-1-метил-6-оксо-1,6дигидропиридазин-3 -ил}-3 -гидроксиметилпиридин-2-ил)-6-трет-бутил-2Н-фталазин-1 -она/

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 4-[5-(2-азетидин-1-ил-1,1 -диметилэтокси)пиридин-2-иламино] -6-хлор-2-метил-2Нпиридазин-3-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)он и замены 2-(6-трет-бутил-1-оксо-1 Н-фталазин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегида на 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1Н)-ил)-4-йодникотинальдегид на стадии 5, получали 37 мг указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 637 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-й) δ ррт: 1.27 (Ьг. 5., 6Н), 1.46 (5, 9Н), 2.16 (Ьг. 5., 2Н), 2.64 (Ьг. 5., 2Н), 3.39 (Ьг. 5., 4Н), 3.93 (5, 3Н), 3.97 (!, 1=7.18 Гц, 1Н), 4.54 (й, 1=6.42 Гц, 2 Н) 6.91 (й, 1=8.69 Гц, 1Н), 7.35 (й, 1=7.55 Гц, 1Н), 7.64 (й, 1=4.91 Гц, 1Н), 7.77 (й, 1=1.51 Гц, 1Н), 7.92 (йй, 1=8.50, 1.70 Гц, 1Н), 8.09 (й, 1=2.64 Гц, 1Н), 8.28 (5, 1Н), 8.39 (5, 1Н), 8.45 (й, 1=8.31 Гц, 1Н), 8.63 (5, 1Н), 8.74 (й, 1=4.91 Гц, 1Н).

- 44 024689

К раствору 5-нитро-1Н-пиразол-3-карбоновой кислоты (1.13 г, 7.19 ммоль) в безводном метаноле (20 мл) при 0°С добавляли по каплям тионилхлорид (2.23 г, 1.37 мл, 18.7 ммоль). Полученный раствор нагревали до температуры флегмы в течение 2 ч. Охлажденный раствор выпаривали досуха с получением метилового эфира 5-нитро-2Н-пиразол-3-карбоновой кислоты (1.17 г, 95%) в виде белого твердого вещества.

К раствору метил-5-нитро-1Н-пиразол-3-карбоксилата (1.87 г, 10.9 ммоль) в безводном диметилформамиде (20 мл) добавляли карбонат калия (3.02 г, 21.9 ммоль) и метилиодид (2.02 г, 0.89 мл, 14.2 ммоль), и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Полученную смесь разбавляли водой (1x150 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3x75 мл). Объединенные органические слои высушивали над сульфатом магния. Эту смесь фильтровали и выпаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, 25 г, 20-60% дихлорметан в гексане) с получением смеси метилового эфира 2-метил-5-нитро-2Н-пиразол-3-карбоновой кислоты и метилового эфира 1-метил-5нитро-1Н-пиразол-3-карбоновой кислоты (1.64 г, 81%) в виде белого твердого вещества.

К раствору метилового эфира 2-метил-5-нитро-2Н-пиразол-3-карбоновой кислоты и метилового эфира 1-метил-5-нитро-1Н-пиразол-3-карбоновой кислоты (1.18 г, 6.37 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) при 0°С добавляли по каплям раствор алюмогидрида лития (1.0 М раствор в тетрагидрофуране, 7.65 мл, 7.65 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 20 мин. К этому раствору добавляли этилацетат (1 мл), а затем несколько кристаллов сульфата натрия декагидрата. Полученную смесь перемешивали в течение 30 мин, затем фильтровали, остаток на фильтре промывали этилацетатом и фильтрат выпаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, 80 г, 50-70% этилацетат в гексане) с получением 1-метил-3-нитро-1Н-пиразол-5-ил)метанола (496 мг, 50%) в виде белого твердого вещества.

Ή ЯМР (300 МГц, ИМ8О-Д₆) δ ррт: 3.90 (5, 3Н), 4.53 (Д, 1=5.67 Гц, 2 Н) 5.55 (1, 1=5.48 Гц, 1Н), 6.93 (5, 1Н).

К раствору (1-метил-3-нитро-1Н-пиразол-5-ил)метанола (496 мг, 3.16 ммоль) в хлороформе (10 мл) при 0°С добавляли по каплям с помощью шприца трибромид фосфора (854 мг, 0.30 мл, 3.16 ммоль). Полученный раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Полученный раствор охлаждали до 0°С и разбавляли дихлорметаном (50 мл). Полученный раствор подщелачивали (рН 8.5) насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (20 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали дихлорметаном (3x20 мл).

Объединенные органические слои высушивали над сульфатом магния. Полученную смесь фильтровали и концентрировали в вакууме и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, 40 г, 20-40% этилацетат в гексане) с получением 5-(бромметил)-1-метил-3-нитро-1Н-пиразола (436 мг, 63%) в виде белого твердого вещества.

Ή ЯМР (300 МГц, ИМ8О-Д₆) δ ррт: 3.94 (5, 3Н), 4.85 (5, 2Н), 7.14(5, 1Н).

К раствору 5-(бромметил)-1-метил-3-нитро-1Н-пиразола (436 мг, 1.98 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли азетидин (141 мг, 0.17 мл, 2.48 ммоль) и диизопропилэтиламин (307 мг, 0.42 мл, 2.38 ммоль) по каплям и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Этот раствор концентрировали и остаток растворяли в дихлорметане (50 мл), промывали водой (50 мл). Водный слой экстрагировали метиленхлоридом (2x50 мл) и органические фазы объединяли и высушива- 45 024689 ли над сульфатом магния. Полученную смесь фильтровали и выпаривали и остаток очищали флэшхроматографией (40 г, 1% -5% метанол в дихлорметане) с получением 5-(азетидин-1-илметил)-1-метил-3нитро-1Н-пиразола (349 мг, 90%) в виде бесцветного масла.

Ή ЯМР (300 МГц, ЭМ8О-Д₆) δ ррт: 1.97 (ςυΐη, 1=6.99 Гц, 2Н), 3.15 (ΐ, 1=6.99 Гц, 4Н), 3.59 (5, 2Н), 3.88 (5, 3Н), 6.89 (5, 1Н).

Раствор 5-(азетидин-1-илметил)-1-метил-3-нитро-1Н-пиразола (349 мг, 1.78 ммоль) в этаноле (20 мл) обрабатывали с помощью палладия на угле (10%, 50 мг). Полученную смесь перемешивали в атмосфере водорода (1 атм) в течение 48 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целит и этот слой промывали этанолом. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением 5-(азетидин-1-илметил)-1метил-1Н-пиразол-3-амина (292 мг, 99%) в виде светло-желтого масла.

Ή ЯМР (300 МГц, ЭМ8О-Д₆) δ ррт: 1.93 (ςυΐη, 1=6.89 Гц, 2Н), 3.06 (ΐ, 1=6.99 Гц, 4Н), 3.34 (5, 2Н), 3.46 (5, 3Н), 4.36 (5, 2Н), 5.25 (5, 4Н).

Раствор 5-(азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-амина (292 мг, 1.76 ммоль), 4-бром-6-хлор2-метилпиридазин-3(2Н)-она (393 мг, 1.76 ммоль), карбоната цезия (2.00 г, 6.15 ммоль) и 4,5-бис-(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантена (152 мг, 0.26 ммоль) в диоксане (10 мл) продували струей аргона, после чего добавляли трис-(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (121 мг, 0.13 ммоль) и полученный раствор нагревали при 90°С в течение 18 ч. Эту смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли дихлорметаном (50 мл) и водой. Разделяли слои и водный слой экстрагировали дихлорметаном (2x25 мл). Органические слои объединяли, высушивали над сульфатом магния. Полученную смесь фильтровали и концентрировали в вакууме. Полученный преципитат выделяли фильтрацией, промывали эфиром и высушивали в вакууме с получением 4-(5-(азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3иламино)-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2Н)-она (272 мг, 50%) в виде светло-желтого твердого вещества.

(М+Н)+ = 309 т/е.

Ή ЯМР (300 МГц, ЭМ8О-Д₆) δ ррт: 1.96 (ςυΐη, 1=6.99 Гц, 2Н), 3.11 (ΐ, 1=6.99 Гц, 4Н), 3.31 (5, 2Н), 3.63 (5, 3Н), 3.71 (5, 3Н), 6.07 (5, 1Н), 7.68 (5, 1Н), 9.53 (5, 1Н).

Пример 17.

Получение 2-{4-[5-(5-азетидин-1-илметил-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6дигидропиридазин-3-ил]-3-гидроксиметилпиридин-2-ил}-6-трет-бутил-8-фтор-2Н-фталазин-1-она

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 4-(5-(азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-6-хлор-2-метилпиридазин3(2Н)-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1 -метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он на стадии 5, получали 70 мг указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 600 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.43 (5, 9Н), 2.12 (дши, 1=6.99 Гц, 2Н), 3.27 (ΐ, 1=6.80 Гц, 4Н), 3.55 (5, 2Н), 3.81 (5, 3Н), 3.90 (5, 3Н), 3.99 (ΐ, 1=7.18 Гц, 1Н), 4.54 (Д, 1=6.04 Гц, 2Н), 5.98 (5, 1Н), 7.427.57 (т, 2Н), 7.62 (Д, 1=4.91 Гц, 1Н), 7.90 (5, 1Н), 7.93 (5, 1Н), 8.31 (Д, 1=2.64 Гц, 1Н), 8.71 (Д, 1=5.29 Гц, 1Н).

- 46 024689

Получение соединения ^18.

К раствору метил-5-нитро-1Н-пиразол-3-карбоксилата (5.97 г, 35 ммоль) в ацетоне (100 мл) добавляли карбонат калия (24 г, 174 ммоль) и 1,2-дибромэтан (19.7 г, 9.02 мл, 105 ммоль) и полученный раствор нагревали до температуры флегмы в течение 2 ч. Полученную смесь доводили до комнатной температуры в течение ночи, фильтровали и концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, 400 г, 20-70% этилацетат в гексане) с получением смеси 11:2 метил-1-(2-бромэтил)-3-нитро1Н-пиразол-5-карбоксилата и метилового эфира 2-(2-бром-этил)-5-нитро-2Н-пиразол-3-карбоновой кислоты (4.86 г, 50%) в виде светло-желтого твердого вещества.

Основной изомерный компонент: 'Н ЯМР (300 МГц, ЭМ8О-б₆) δ ррт: 3.77-4.05 (т, 40Н), 5.02 (1, 1=6.04 Гц, 16Н), 7.61 (δ, 5.65Н), 7.70 (δ, 1Н).

К суспензии борогидрида лития (755 мг, 34.7 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл) при 0°С медленно добавляли метил-1-(2-бромэтил)-3-нитро-1Н-пиразол-5-карбоксилат (4.82 г, 17.3 ммоль) в 10 мл ТНР. Полученную смесь доводили до комнатной температуры в течение 2 ч. К полученной смеси добавляли этилацетат (20 мл) и воду (20 мл). Двухфазную смесь разделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (3x20 мл). Объединенные органические слои высушивали над сульфатом магния и полученную смесь фильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенной смеси-(2-бромэтил)-5нитро-2Н-пиразол-3-ил]метанола и (1-(2-бромэтил)-3-нитро-1Н-пиразол-5-ил)метанола (4.24, 97%) в виде светло-желтого масла, которое использовали в таком виде в следующей реакции.

К раствору (1-(2-бромэтил)-3-нитро-1Н-пиразол-5-ил)метанола (4.24 г, 17 ммоль) в хлороформе (100 мл), охлажденному до 0°С, добавляли по каплям трибромид фосфора (4.59 г, 1.6 мл, 17 ммоль). Полученный раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Полученный раствор охлаждали до 0°С и разбавляли дихлорметаном (50 мл). Полученный раствор подщелачивали (рН 8.5) насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (20 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали дихлорметаном (3x50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над сульфатом магния. Полученную смесь фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 8Р40-240 г, 15-40% Е1ОАс в гексане) с получением 1-(2-бромэтил)-5-(бромметил)-3-нитро-1Н-пиразола (3.58 г, 67%) в виде белого твердого вещества.

Ή ЯМР (300 МГц, ОМ§О-б₆) δ ррт: 3.92 (1, 1=6.23 Гц, 2Н), 4.69 (1, 1=6.23 Гц, 2Н), 4.89 (δ, 2Н), 7.19 (δ, 1Н).

В круглодонной колбе на 250 мл 1-(2-бромэтил)-5-(бромметил)-3-нитро-1Н-пиразол (3.58 г, 11.4 ммоль, экв.: 1.00) объединяли с ТНР (120 мл) с получением светло-желтого раствора. К этой смеси добавляли по каплям метиламин, 2.0 М раствор в ТНР (40.0 мл, 80.1 ммоль, экв.: 7.00) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 76 ч. По истечении этого времени реакционную смесь концентрировали и полученное твердое вещество перемешивали со смесью Е1ОАс (50 мл) и 10% водного раствора К₂СО₃ (30 мл). Слои разделяли и водный слой снова экстрагировали с помощью Е1ОАс (2x30 мл). Объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄ и концентрировали в ва- 47 024689 кууме почти досуха. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 240 г, 1-10% МеОН в ЭСМ). Фракции, содержащие продукт, объединяли, концентрировали и перекристаллизовывали из МеОН. Твердое вещество отфильтровывали и промывали эфиром с получением целевого продукта (1.6 г) в виде грязно-белого твердого вещества.

Ή ЯМР (300 МГц, ЭМ8О-Д₆) δ ррт: 2.38 (5, 3Н), 2.89 (1, 1=5.67 Гц, 2Н), 3.61 (5, 2Н), 4.19 (1, 1=5.48 Гц, 2Н), 6.83 (5, 1Н).

Раствор 5-метил-2-нитро-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразина (1.6 г, 8.7 ммоль) в этаноле (20 мл) обрабатывали с помощью палладия на угле (10%, 300 мг) и продували струей аргона. Полученную смесь перемешивали в атмосфере водорода (1 атм) в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и этот слой промывали этанолом. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением 5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-амина (1.35 г, количественный выход) в виде светложелтого твердого вещества.

Ή ЯМР (300 МГц, ЭМ8О-Д₆) δ ррт: 2.30 (5, 3Н), 2.71 (1, 1=5.67 Гц, 2Н), 3.37 (5, 2Н), 3.74 (1, 1=5.67 Гц, 2Н), 4.46 (5, 2Н), 5.14 (5, 1Н).

Раствор 5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-амина (342 мг, 2.25 ммоль), 4-бром-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2Н)-она (527 мг, 2.36 ммоль), карбоната цезия (2.2 г, 6.74 ммоль) и 4,5-бис-(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантена (195 мг, 0.34 ммоль) в диоксане (15 мл) продували струей аргона, после чего добавляли трис-(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (154 мг, 0.17 ммоль) и полученный раствор нагревали в запаянной трубке при 110°С в течение 18 ч. Эту смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит. Остаток на фильтре промывали дихлорметаном. Объединенные фильтраты и смывы разбавляли с помощью 3 М НС1 и разделяли. Слой ЭСМ снова экстрагировали водным раствором НС1 и отбрасывали. Объединенные водные НС1-экстракты подщелачивали с помощью 3М №ЮН. Полученную водную фазу экстрагировали два раза с помощью ЭСМ. Объединенные ОСМ-экстракты концентрировали в вакууме и полученное твердое вещество обрабатывали этиловым эфиром, фильтровали и высушивали с получением 6-хлор-2-метил-4-(5-метил-4,5,6,7тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-она (455 мг, 69%) в виде грязно-белого твердого вещества.

Ή ЯМР (300 МГц, ЭМ8О-Д₆) δ ррт: 2.35 (5, 3Н), 2.81 (1, 1=5.48 Гц, 2Н), 3.51 (5, 2Н), 3.63 (5, 3Н), 4.03 (1, 1=5.48 Гц, 2Н), 5.98 (5, 1Н), 7.71 (5, 1Н), 9.60 (5, 1Н).

Пример 18.

Получение 6-трет-бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Нфталазин-1-она

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-2-метил-4-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридазин3(2Н)-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он на стадии 5, получали 1.02 г указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 586 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.43 (5, 9Н), 2.52 (5, 3Н), 2.94 (1, 1=5.48 Гц, 2Н), 3.66 (5, 2Н), 3.90 (5, 3Н), 3.97 (1, 1=6.99 Гц, 1Н), 4.15 (1, 1=5.48 Гц, 2Н), 4.46-4.61 (т, 2Н), 5.84 (5, 1Н), 7.45-7.58 (т, 2Н), 7.62 (Д, 1=4.91 Гц, 1Н), 7.91 (5, 1Н), 7.97 (5, 1Н), 8.31 (Д, 1=2.64 Гц, 1Н), 8.71 (Д, 1=4.91 Гц, 1Н).

Пример 19.

Получение 6-трет-бутил-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Н-фталазин-1-она

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-2-метил-4-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридазин3(2Н)-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он и замены 2-(6-трет-бутил-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегида на 2-(6-трет-бутил-8фтор-1-оксофталазин-2(1 Н)-ил)-4-йодникотинальдегид на стадии 5, получали 72 мг указанного в заго- 48 024689 ловке соединения в виде белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 568 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.45 (к, 9Н), 2.54 (к, 3Н), 2.97 (Ьг. к., 2Н), 3.68 (к, 2Н), 3.90 (к, 3Н), 4.08 (!, 1=6.99 Гц, 1Н), 4.17 (!, 1=5.48 Гц, 2Н), 4.47-4.56 (т, 2Н), 5.86 (к, 1Н), 7.62 (б, 1=4.91 Гц, 1Н), 7.77 (б, 1=1.89 Гц, 1Н), 7.86-8.01 (т, 3Н), 8.38 (к, 1Н), 8.44 (б, 1=8.31 Гц, 1Н), 8.72 (б, 1=4.91 Гц, 1Н).

Пример 20.

Получение 6-циклопропил-8-фтор-2-{ 3 -гидроксиметил-4-[1 -метил-5 -(5-метил-4,5,6,7 тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Низохинолин-1-она

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-2-метил-4-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридазин3(2Н)-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он и замены 2-(6-циклопропил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегида на 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1Н)-ил)-4-йодникотинальдегид на стадии 5, получали 33 мг указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 569 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 0.81-0.93 (т, 2Н), 1.07-1.22 (т, 2Н), 1.95-2.09 (т, 1Н), 2.54 (к, 3Н), 2.96 (Ьг. к., 2Н), 3.68 (Ьг. к., 2Н), 3.92 (к, 3Н), 4.17 (!, 1=5.43 Гц, 2Н), 4.24 (бб, 1=10.48, 2.91 Гц, 1Н), 4.45-4.64 (т, 2Н), 5.91 (к, 1Н), 6.57 (бб, 1=7.58, 2.02 Гц, 1Н), 6.83 (бб, 1=12.63, 1.52 Гц, 1Н), 7.08 (б, 1=1.52 Гц, 1Н), 7.26 (б, 1=7.33 Гц, 2Н), 7.62 (б, 1=5.05 Гц, 1Н), 7.93 (к, 1Н), 8.01 (к, 1Н), 8.68 (б, 1=5.05 Гц, 1Н).

Получение соединения 1-21.

Стадия 1. Получение 2-нитро-5-оксетан-3-ил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразина.

В круглодонной колбе на 250 мл, 1-(2-бромэтил)-5-(бромметил)-3-нитро-1Н-пиразол (1.54 г, 4.92 ммоль, экв.: 1.00) объединяли с СН₃СК (60 мл) с получением светло-желтого раствора. К этой смеси добавляли оксетан-3-амин (432 мг, 5.91 ммоль, экв.: 1.20) и по каплям Э1РЕЛ (1.14 г, 1.55 мл, 8.86 ммоль, экв.: 1.80) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Смесь концентрировали, остаток разводили в Е!ОАс (50 мл) и промывали водой (50 мл). Органический слой высушивали над Мд§О₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэшхроматографией (силикагель, 8Р25-40 г, 50% Е!ОАс в гексане-100% Е!ОАс) с получением целевого продукта (674 мг).

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 2.94-3.01 (т, 2Н), 3.71 (к, 2Н), 3.87 (дши, 1=6.32 Гц, 1Н), 4.31-4.39 (т, 2Н), 4.67-4.75 (т, 2Н), 4.77-4.84 (т, 2Н), 6.68 (к, 6Н).

Стадия 2. Получение 5-оксетан-3-ил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламина.

В круглодонной колбе на 250 мл 2-нитро-5-оксетан-3-ил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин (674 мг, 2.99 ммоль, экв.: 1.00) объединяли с Е!ОН (50 мл) с получением светло-желтой суспензии. Реакционную смесь трижды продували аргоном с помощью вакуума, затем добавляли 10% Рб/С (159 мг, 1.5 ммоль, экв.: 0.5) и реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода (из баллона) в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали через слой целита. Этот слой целита промывали этанолом. Объединенные фильтраты и смывы концентрировали в вакууме с получением целевого продукта (555 мг).

(М+Н)+ = 195 т/е.

- 49 024689

Стадия 3. Получение 6-хлор-2-метил-4-(5-оксетан-3-ил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2иламино)-2Н-пиридазин-3 -она.

В круглодонной колбе на 250 мл 5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-амин (555 мг, 2.86 ммоль, экв.: 1.00), 4-бром-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2Н)-он (638 мг, 2.86 ммоль, экв.: 1.00), карбонат цезия (3.26 г, 10.0 ммоль, экв.: 3.50) и 4,5-бис-(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен (248 мг, 429 мкмоль, экв.: 0.15) объединяли с диоксаном (40 мл) и реакционную смесь трижды продували аргоном с помощью вакуума. Добавляли бис-(дибензилиденацетон)палладий (123 мг, 214 мкмоль, экв.: 0.075) и реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 18 ч. После охлаждения до комнатной температуры ее разбавляли с помощью 50 мл дихлорметана и воды. Водный слой повторно экстрагировали с помощью ЭСМ (2x25 мл). Объединенные органические слои высушивали над М^О₄ и концентрировали в вакууме почти досуха. Полученное твердое вещество собирали фильтрацией и промывали этиловым эфиром. Вторую партию твердого вещества, которое выпадало в осадок из фильтрата, и смывы собирали фильтрацией и промывали этиловым эфиром. Объединенные партии твердого вещества высушивали в вакууме с получением целевого продукта (669 мг) в виде твердого вещества.

(М+Н)+ = 337 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 3.01 (ΐ, 1=5.18 Гц, 2Н), 3.73 (δ, 2Н), 3.81 (δ, 3Н), 3.92 (ΐ, 1=6.44 Гц, 1Н), 4.26 (ΐ, 1=5.43 Гц, 2Н), 4.79 (б, 1=6.57 Гц, 4Н), 5.77 (δ, 1Н), 7.60 (δ, 1Н), 7.88 (δ, 1Н).

Пример 21.

Получение 6-трет-бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-оксетан-3-ил-4,5,6,7тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Нфталазин-1-она.

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-2-метил-4-(5-оксетан-3-ил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-2Нпиридазин-3-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)он на стадии 5, получали 106 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 628 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.44 (δ, 9Н), 2.91 (ΐ, 1=5.48 Гц, 2Н), 3.65 (δ, 2Н), 3.83 (ΐ, 1=6.23 Гц, 1Н), 3.91 (δ, 3Н), 4.18 (ΐ, 1=5.48 Гц, 2Н), 4.54 (δ, 2Н), 4.75 (ςυΐη, 1=6.52 Гц, 4Н), 5.89 (δ, 1Н), 7.47-7.58 (т, 2Н), 7.62 (б, 1=5.29 Гц, 1Н), 7.91 (δ, 1Н), 7.98 (δ, 1Н), 8.32 (б, 1=2.64 Гц, 1Н), 8.71 (б, 1=4.91 Гц, 1Н).

Получение соединения Ι-22.

Стадия 1. Получение 5-этил-2-нитро-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразина.

Вг

В круглодонной колбе на 100 мл объединяли 1-(2-бромэтил)-5-(бромметил)-3-нитро-1Н-пиразол (0.7 г, 2.24 ммоль, экв.: 1.00) с ТНР (25 мл) с получением светло-желтого раствора. К этой смеси добавляли по каплям этиламин (7.83 мл 2 М раствора в ТНР, 15.7 ммоль, экв.: 7) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь концентрировали и полученное твердое вещество перемешивали со смесью Е1ОАс (250 мл) и 10% водного раствора К₂СО₃ (200 мл). Слои разделяли и водный слой снова экстрагировали с помощью Е1ОАс (2x100 мл). Объединенные органические слои высушивали над М^О₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 40 г, 1-4% МеОН в ЭСМ). Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали с получением целевого продукта (427 мг).

- 50 024689

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-й) δ ррт: 1.20 (!, 1=7.18 Гц, 3Н), 2.68 (φ 1=7.18 Гц, 2Н), 3.01 (!, 1=5.48 Гц, 2Н), 3.72 (5, 2Н), 4.29 (!, 1=5.67 Гц, 2Н), 6.64 (5, 1Н).

Стадия 2. Получение 5-этил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламина.

Ν-Ν

Ν'

В круглодонной колбе на 250 мл объединяли 5-этил-2-нитро-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5а]пиразин (427 мг, 2.17 ммоль, экв.: 1.00) с Е!ОН (50 мл) с получением светло-желтой суспензии. Реакционную смесь трижды продували аргоном с помощью вакуума, затем добавляли 10% Рй/С (115 мг, 1.08 ммоль, экв.: 0.5) и реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода из баллона в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали через слой целита. Этот слой целита промывали этанолом. Объединенные фильтраты и смывы концентрировали в вакууме с получением целевого продукта (350 мг).

(М+Н)+ = 167 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-й) δ ррт: 1.16 (!, 1=7.18 Гц, 3Н), 2.59 (ф 1=7.18 Гц, 2Н), 2.79-3.03 (т, 2Н), 3.57 (оуейарртд 5, 4Н), 3.87-4.12 (т, 2Н), 5.35 (5, 1Н).

Стадия 3. Получение 6-хлор-4-(5-этил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-2метил-2Н-пиридазин-3 -она.

В круглодонной колбе на 250 мл 5-этил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-амин (350 мг, 2.11 ммоль, экв.: 1.00), 4-бром-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2Н)-он (471 мг, 2.11 ммоль, экв.: 1.00), цезия карбонат (2.4 г, 7.37 ммоль, экв.: 3.50) и 4,5-бис-(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен (183 мг, 316 мкмоль, экв.: 0.15) объединяли с диоксаном (40 мл) и реакционную смесь продували струей аргона. Затем добавляли бис-(дибензилиденацетон)палладий (90.8 мг, 158 мкмоль, экв.: 0.075) и реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 18 ч. После охлаждения до комнатной температуры ее разбавляли с помощью 50 мл смеси дихлорметана и воды. Водный слой повторно экстрагировали с помощью ОСМ (2x25 мл). Объединенные органические слои высушивали над М§§О₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 40 г, 0-3% МеОН в ОСМ). Чистые фракции обрабатывали с помощью Е!ОАс. Смешанные фракции и фильтрат очищали хроматографией с получением чистого продукта, который объединяли с обработанным твердым веществом с получением целевого продукта (500 мг).

(М+Н)+ = 309 т/е.

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-й) δ ррт: 1.21 (!, 1=7.18 Гц, 3Н), 2.67 (й, 1=6.80 Гц, 2Н), 2.99 (Ьг. 5., 2Н), 3.69 (Ьг. 5., 2Н), 3.79 (5, 3Н), 4.16 (й, 1=5.29 Гц, 2Н), 5.72 (5, 1Н), 7.56 (5, 1Н), 7.85 (5, 1Н).

Пример 22.

Получение 6-трет-бутил-2-{4-[5-(5-этил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил] -3 -гидроксиметилпиридин-2-ил}-8-фтор-2Н-фталазин-1 -она.

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-4-(5-этил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-2-метил-2Нпиридазин-3-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)он на стадии 5, получали 196 мг указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 600 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-й) δ ррт: 1.21 (!й, 1=6.99, 2.27 Гц, 3Н), 1.43 (5, 9Н), 2.66 (й, 1=6.80 Гц, 2Н), 2.98 (Ьг. 5., 2Н), 3.69 (Ьг. 5, 2Н), 3.90 (5, 3Н), 3.97 (!, 1=6.99 Гц, 1Н), 4.15 (!, 1=4.53 Гц, 2Н), 4.47-4.60 (т, 2Н), 5.85 (5, 1Н), 7.46-7.57 (т, 2Н), 7.62 (й, 1=4.91 Гц, 1Н), 7.89 (5, 1Н), 7.97 (5, 1Н), 8.31 (й, 1=2.64 Гц, 1Н), 8.71 (й, 1=4.91 Гц, 1Н).

- 51 024689

Получение соединения Σ-23.

Схема Н

Стадия 1. Получение 4^-ди-трет-бутил-2-фтор-б-гидроксиметилбензамида.

К раствору 2,5-ди-трет-бутил-7-фтор-3-гидроксиизоиндолин-1-она (4.3 г, 15.4 ммоль, экв.: 1.00) в смеси МеОН (100 мл) и СН₂С1₂ (150 мл) добавляли борогидрид натрия (582 мг, 15.4 ммоль, экв.: 1.00) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при той же температуре. Затем снова добавляли борогидрид натрия (582 мг, 15.4 ммоль, экв.: 1.00) и реакционную смесь дополнительно перемешивали в течение 1 ч. После этого еще раз добавляли борогидрид натрия (582 мг, 15.4 ммоль, экв.: 1.00) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь вливали (осторожно) в водный раствор НС1 (10%, 100 мл). Продукт экстрагировали с помощью СН2С12 (2x100 мл). Органические экстракты объединяли, высушивали (№₂8О₄) и выпаривали в вакууме с получением 4.2 г продукта (выход 97%).

ЬС/М8, т/ζ 282 [М+Н]+;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ ррт: 1.33 (5, 9Н), 1.49 (5, 9Н), 4.59 (5, 2Н), б.02 (Ьг. 5., 2Н), 7.08 (άά, 1=12.03, 1.77 Гц, 1Н), 7.22 (ά, 1=1.77 Гц, 1Н).

Стадия 2. Получение 4^-ди-трет-бутил-2-фтор-б-метилбензамида.

К раствору ^4-ди-трет-бутил-2-фтор-б-(гидроксиметил)бензамида (4.3 г, 15.3 ммоль, экв.: 1.00) в МеОН (100 мл) добавляли Рά-С 10% (50% влажность) (1.19 г) и реакционную смесь перемешивали в атмосфере Н₂ (из баллона) в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и этот слой целита промывали с помощью Е1ОН (3x50 мл). Объединенные фильтраты и смывы выпаривали в вакууме с получением 4.01 г продукта в виде белого твердого вещества (выход 99%).

ЬС/М8, т/ζ 2бб [М+Н]+;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ ррт: 1.30 (5, 9Н), 1.48 (5, 9Н), 2.41 (5, 3Н), 5.б0 (Ьг. 5., 2Н), б.90б.95 (т, 1Н), 7.00 (ά, 1=0.51 Гц, 1Н).

Стадия 3. Получение 4-трет-бутил-2-фтор-б-метилбензамида.

Раствор ^4-ди-трет-бутил-2-фтор-б-метилбензамида (4.01 г, 15.1 ммоль, экв.: 1.00) в ТРА (48 мл) (4x12 мл, во флаконных для микроволнового облучения) перемешивали при 100°С в течение 3 ч в условиях с микроволновым облучением. Содержимое четырех флаконов объединяли, выпаривали в вакууме и остаток вливали (осторожно) в насыщенный водный раствор NаНСΟз (100 мл) и продукт экстрагировали с помощью СН₂С1₂ (2x100 мл). Объединенные органические экстракты высушивали (№₂8О₄) и выпаривали в вакууме. Неочищенное вещество очищали хроматографией (§Ю₂, СН₂С1₂ 100-30% АсОЕ1, за 30 мин) с получением целевого продукта (2.55 г, выход 81%, в виде белого твердого вещества.

ЬС/М8, т/ζ 210 [М+Н]+;

- 52 024689

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.32 (5, 9Н), 2.49 (1, 1=0.63 Гц, 3Н), 5.86 (Ьг. 5., 2Н), 6.947.00 (т, 1Н), 7.05 (ДД, 1=1.26, 0.51 Гц, 1Н).

Стадия 4. Получение 4-трет-бутил-н-[1-диметиламиномет-(е)-илиден]-2-фтор-6-метилбензамида.

К раствору 4-трет-бутил-2-фтор-6-метилбензамида (1.28 г, 6.12 ммоль, экв.: 1.00) в ТНР (49.2 мл) добавляли ^^диметилформамид диметилацеталь (802 мг, 897 мкл 6.73 ммоль, экв.: 1.1) и реакционную смесь нагревали до температуры флегмы температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь выпаривали досуха в вакууме с получением целевого продукта (1.6 г, выход 99%). Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.30 (5, 9Н), 2.42 (5, 3Н), 3.16 (5, 3Н), 3.20 (5, 3Н), 6.93 (ДД, 1=11.75, 1.64 Гц, 1Н), 6.99 (5, 1Н), 8.57 (5, 1Н).

Стадия 5. Получение 6-трет-бутил-8-фтор-2Н-изохинолин-1-она, калиевой соли.

К раствору (Е)-4-трет-бутил-Ы-((диметиламино)метилен)-2-фтор-6-метилбензамида (1.6 г, 6.05 ммоль, экв.: 1.00) в ТНР (38 мл) добавляли трет-бутоксид калия (7.87 мл 1 М раствора, 7.87 ммоль, экв.: 1.30) и реакционную смесь нагревали до температуры флегмы в течение 2 ч (образовался осадок). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли эфир (40 мл). Эту смесь перемешивали в течение 30 мин. Полученное твердое вещество собирали фильтрацией (в вакууме) и промывали эфиром (40 мл), с получением 1.22 г продукта в виде белого твердого вещества (выход 78%).

ЬС/М8, т/ζ 220 [М+Н]+.

Стадия 6. Получение 6-трет-бутил-8-фтор-2Н-изохинолин-1-она.

К суспензии 6-трет-бутил-8-фтор-2Н-изохинолин-1-она, калиевой соли (2.4 г, 9.29 ммоль, экв.: 1.00) в ИСМ (200 мл) добавляли водный раствор НС1 (100 мл), реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при КТ. Органический слой разделяли, высушивали (№₂8О₄) и выпаривали в вакууме с получением продукта в виде белого порошка (1.9 г) с выходом 93%.

ЬС/М8, т/ζ 220 [М+Н]+;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 7.70 (ДД, 1=7.20, 1.14 Гц, 1Н), 8.32 (ДД, 1=7.07, 5.81 Гц, 1Н), 8.42 (ДД, 1=13.89, 1.77 Гц, 1Н), 8.60 (Д, 1=1.77 Гц, 1Н).

Стадия 7. Получение 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-4-йодпиридин-3карбальдегида.

К раствору 6-трет-бутил-8-фторизохинолин-1(2Н)-она (225 мг, 1.03 ммоль, экв.: 1.00) в ТНР (11.1 мл) добавляли бис-(триметилсилил)амид лития в ТНР (1 М) (1.13 мл, 1.13 ммоль, экв.: 1.1) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин при той же температуре. Затем добавляли 2-фтор-4-йодникотинальдегид (335 мг, 1.33 ммоль, экв.: 1.3) в ТНР (5 мл). Реакционную смесь нагревали до 65°С и перемешивали в течение 3 ч. Затем реакционную смесь вливали в насыщенный водный раствор N4^0 (30 мл) и продукт экстрагировали с помощью Е1ОАс (2x50 мл). Объединенные органические экстракты высушивали (Ыа₂8О₄) и выпаривали в вакууме. Неочищенное вещество разбавляли с помощью СН₂С1₂ (2 мл) и очищали хроматографией (8Ю₂, Нех:АсОЕ1, 100-70% за 25 мин) с получением целевого продукта (350 мг) в виде светло-желтого порошка.

ЬС/М8, т/ζ 451 [М+Н]+;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.39 (5, 9Н), 6.65 (ДД, 1=7.58, 2.02 Гц, 1Н), 7.21 (ДД, 1=13.64, 1.77 Гц, 1Н), 7.31 (Д, 1=1.77 Гц, 1Н), 7.55 (Д, 1=7.58 Гц, 1Н), 7.91 (Д, 1=5.05 Гц, 1Н), 8.28 (Д, 1=5.31 Гц, 1Н), 9.94 (5, 1Н).

Пример 23.

Получение 6-трет-бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Низохинолин-1-она

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-2-метил-4-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридазин3(2Н)-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он и замены 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегида на 2-(6-третбутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1 Н)-ил)-4-йодникотинальдегид на стадии 5, получали 60 мг указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 585 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.42 (5, 9Н), 2.55 (5, 3Н), 2.98 (Ьг. 5., 2Н), 3.70 (Ьг. 5., 2Н), 3.92 (5, 3Н), 4.18 (Ьг. 5., 2Н), 4.24 (ДД, 1=10.74, 3.16 Гц, 1Н), 4.44-4.63 (т, 2Н), 5.91 (5, 1Н), 6.64 (ДД, 1=7.58,

- 53 024689

2.02 Гц, 1Н), 7.24 (бб, 1=13.64, 1.77 Гц, 1Н), 7.28 (б, 1=7.58 Гц, 1Н), 7.35 (б, 1=1.77 Гц, 1Н), 7.62 (б, 1=5.05 Гц, 1Н), 7.93 (δ, 1Н), 8.00 (δ, 1Н), 8.68 (б, 1=5.05 Гц, 1Н).

Пример 24.

Получение 6-трет-бутил-8-фтор-2-{3 -гидроксиметил-4-[1 -метил-5 -(5-оксетан-3 -ил-4,5,6,7тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Низохинолин-1-она

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-2-метил-4-(5-оксетан-3-ил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-2Нпиридазин-3-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)он и замены 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегида на 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1 Н)-ил)-4-йодникотинальдегид на стадии 5, получали 100 мг указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 627 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.42 (δ, 9Н), 2.84-2.96 (т, 2Н), 3.60-3.71 (т, 2Н), 3.80-3.87 (т, 1Н), 3.92 (δ, 3Н), 4.19 (1, 1=5.43 Гц, 2Н), 4.46-4.60 (т, 2Н), 4.70-4.75 (т, 2Н), 4.76-4.81 (т, 2Н), 5.96 (δ, 1Н), 6.65 (бб, 1=7.45, 2.15 Гц, 1Н), 7.21-7.27 (т, 2Н), 7.27 (б, 1=7.8 Гц, 1Н), 7.35 (б, 1=1.77 Гц, 1Н), 7.62 (б, 1=5.05 Гц, 1Н), 7.92 (δ, 1Н), 8.02 (δ, 1Н), 8.68 (б, 1=5.05 Гц, 1Н).

Пример 25.

Получение 6-трет-бутил-2-{4-[5-(5-этил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил] -3 -гидроксиметилпиридин-2-ил}-8-фтор-2Н-изохинолин-1 -она

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-4-(5-этил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-2-метил-2Нпиридазин-3-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)он и замены 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегида на 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1 Н)-ил)-4-йодникотинальдегид на стадии 5, получали 65 мг указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества.

(М+Н)+ = 599 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.17-1.27 (т, 3Н), 1.41 (δ, 9Н), 2.68 (Ьг. δ., 2Н), 2.98 (Ьг. δ., 2Н), 3.70 (Ьг. δ., 2Н), 3.92 (δ, 3Н), 4.14 (Ьг. δ., 2Н), 4.24 (бб, 1=10.61, 3.28 Гц, 1Н), 4.43-4.63 (т, 2Н), 5.92 (δ, 1Н), 6.64 (бб, 1=7.58, 2.02 Гц, 1Н), 7.24 (бб, 1=13.39, 1.77 Гц, 1Н), 7.28 (б, 1=7.4 Гц, 1Н), 7.35 (б, 1=1.52 Гц, 1Н), 7.62 (б, 1=5.05 Гц, 1Н), 7.91 (δ, 1Н), 8.00 (δ, 1Н), 8.68 (б, 1=5.05 Гц, 1Н).

Пример 26.

Получение 6-трет-бутил-2-{4-[5-(5-циклопропилметил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]-3-гидроксиметилпиридин-2-ил}-8-фтор-2Нфталазин-1-она.

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 21, за исключением замены циклопропилметанамина на оксетан-3-амин на стадии 1, получали 100 мг указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества.

(М+Н)+ = 626 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 0.01 (б, 1=4.15 Гц, 2Н), 0.42 (б, 1=7.55 Гц, 2Н), 0.77 (Ьг. δ.,

- 54 024689

1Н), 1.22 (5, 9Н), 2.30 (Ьг. 5., 2Н), 2.86 (Ьг. 5., 2Н), 3.58 (Ьг. 5., 2Н), 3.69 (5, 3Н), 3.77 (ΐ, 1=7.18 Гц, 1Н), 3.96 (Ьг. 5., 2Н), 4.32 (Д, 1=7.18 Гц, 2 Н) 5.65 (5, 1Н), 7.26-7.36 (т, 2Н), 7.41 (Д, 1=4.91 Гц, 1Н), 7.68 (5, 1Н), 7.76 (5, 1Н), 8.10 (Д, 1=2.64 Гц, 1Н), 8.50 (Д, 1=5.29 Гц, 1Н).

Получение соединения Ι-27.

Стадия 1. Получение этилового эфира 2-(6-аминопиридин-3-илокси)-2-метилпропионовой кислоты.

В колбу, содержащую 6-аминопиридин-3-ол гидробромид (2 г, 10.5 ммоль) и этил-2-бром-2метилпропионат (2.04 г, 10.5 ммоль) в безводном ацетонитриле (25 мл), добавляли карбонат цезия (10.7 г, 33 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение 16 ч в атмосфере аргона. Добавляли воду (60 мл) и этилацетат (60 мл) и содержимое встряхивали в делительной воронке. Органическую фазу собирали и водную фазу снова экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением золотистокоричневого твердого вещества (1.626 г).

(М+Н)+ = 225 т/е.

Стадия 2. Получение этилового эфира 2-[6-(6-хлор-2-метил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4иламино)пиридин-3 -илокси] -2-метилпропионовой кислоты.

Из колбы, содержащей этиловый эфир 2-(6-аминопиридин-3-илокси)-2-метилпропионовой кислоты (1.365 г, 6.09 ммоль), 4-бром-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2Н)-он (1.77 г, 7.91 ммоль), 4,5-бис-(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен (528 мг, 0.913 ммоль) и карбонат цезия (6.94 г, 21.3 ммоль) в сухом диоксане (60 мл), выкачивали воздух под вакуумом и снова заполняли аргоном (повторяли три раза). Добавляли трис-(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (418 мг, 0.457 ммоль) и из колбы выкачивали воздух под вакуумом и снова заполняли аргоном (повторяли три раза). Колбу помещали на масляную баню, нагретую до 90°С, и перемешивали в течение 16 ч в атмосфере аргона. Колбу охлаждали до комнатной температуры, фильтровали содержимое через слой целита и тщательно промывали диоксаном. Легколетучие вещества концентрировали в вакууме и остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюировали градиентом 5-25% этилацетат/гексан с получением целевого продукта в виде светлого желто-коричневого порошка (2.035 г).

(М+Н)+ = 367 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.30 (ΐ, 1=7.18 Гц, 3Н), 1.59 (5, 6Н), 3.80 (5, 3Н), 4.26 (д, 1=7.18 Гц, 2Н), 6.83 (Д, 1=9.06 Гц, 1Н), 7.26-7.30 (т, 1Н), 8.04 (Д, 1=3.02 Гц, 1Н), 8.18 (5, 1Н), 8.22 (5, 1Н).

- 55 024689

Стадия 3. Получение 6-хлор-4-[5-(2-гидрокси-1,1-диметилэтокси)пиридин-2-иламино]-2-метил-2Нпиридазин-3 -она.

Этиловый эфир 2-[6-(6-хлор-2-метил-3 -оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино)пиридин-3 -илокси] 2-метилпропионовой кислоты (1.23 г, 3.35 ммоль, экв.: 1.00) растворяли в безводном ТНР (25 мл) и охлаждали до -30°С (охлаждающая баня сухой лед/ацетонитрил) в атмосфере азота. Медленно, по каплям, добавляли раствор алюмогидрида лития (4.7 мл, 4.69 ммоль, 1.0 М раствор в ТНР), в течение 10 мин. Эту смесь перемешивали в течение 1 ч, при этом температуру бани выдерживали примерно при -20°С. Реакционную смесь осторожно гасили добавлением воды (0.1 мл) и перемешивали в течение 10 мин при комнатной температуре. Затем добавляли 5% водный раствор гидроксида натрия (0.19 мл) и эту смесь перемешивали в течение 10 мин. Добавляли воду (0.19 мл) и продолжали перемешивать течение 10 мин. В конце добавляли сульфат магния и этот материал фильтровали через слой целита, тщательно промывали тетрагидрофураном. Фильтрат и смывы объединяли и концентрировали на роторном испарителе примерно до половины объема. Добавляли этилацетат (50 мл) и воду (70 мл) и эту смесь встряхивали в делительной воронке. Собирали органическую фазу, а водную фазу снова экстрагировали этилацетатом (2x40 мл). Органические фазы объединяли, высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток кристаллизовали из горячей смеси дихлорметан/гексан с получением целевого продукта в виде светлого желто-коричневого твердого вещества (1.041 г).

(М+Н)+ = 325 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-Д) δ ррт: 1.28 (5, 6Н), 3.81 (5, 3Н), 6.92 (Д, 1=8.69 Гц, 1Н), 7.30 (5, 1Н), 7.36 (ДД, 1=8.69, 2.64 Гц, 1Н), 8.12 (Д, 1=2.64 Гц, 1Н), 8.28 (5, 1Н).

Стадия 4. Получение 2-[6-(6-хлор-2-метил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино)пиридин-3илокси] -2 -метилпропанальдегида.

К суспензии 6-хлор-4-(5-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-илокси)пиридин-2-иламино)-2метилпиридазин-3(2Н)-она (750 мг, 2.31 ммоль, экв.: 1.00) в ЭСМ (100 мл) добавляли реагент ДессМартина (1.27 г, 3.00 ммоль, экв.: 1.30). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 40 мин. Добавляли эфир (100 мл), а затем 50 мл раствора №ЮН (1 М). Эту смесь перемешивали еще в течение 15 мин и переносили в делительную воронку. Органический слой промывали равным объемом №ЮН (1 М) и воды (50 мл), высушивали (№₂8О₄) и выпаривали в вакууме с получением целевого продукта (668 мг) в виде светло-коричневого порошка.

(М+Н)+ = 323 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-Д₆) δ ррт: 1.36 (5, 6Н), 3.68 (5, 3Н), 7.43-7.47 (т, 1Н), 7.51-7.55 (т, 1Н), 8.10 (ДД, 1=3.03, 0.51 Гц, 1Н), 8.27 (5, 1Н), 9.69 (5, 1Н), 9.82 (5, 1Н).

Стадия 5. Получение 6-хлор-4-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1-ил)-1,1-диметилэтокси]пиридин-2иламино } -2-метил-2Н-пиридазин-3 -она.

К раствору 2-(6-(6-хлор-2-метил-3 -оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино)пиридин-3 -илокси)-2метилпропаналя (665 мг, 2.06 ммоль, экв.: 1.00) в ОСЕ (70 мл) добавляли 3,3-дифторазетидин гидрохлорид (347 мг, 2.68 ммоль, экв.: 1.30). Эту смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч, затем добавляли триацетоксиборогидрид натрия (655 мг, 3.09 ммоль, экв.: 1.5) и продолжали перемешивать в течение 18 ч.

- 56 024689

Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NаΗСΟз и экстрагировали с помощью ЭСМ (5x20 мл). Органический слой высушивали (М^О₄) и концентрировали в вакууме. Полученный остаток очищали хроматографией (ЫО₂-50 г, Нех:АсОЕ1, 7:3 за 20 мин, затем 50% за 30 мин) с получением целевого продукта (566 мг) в виде белого порошка.

(М+Н)+ = 400 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.29 (δ, 6Н), 2.79 (Ьг. δ., 2Н), 3.70-3.81 (т, 4Н), 3.83 (δ, 3Н), 6.87 (бб, 1=8.84, 0.51 Гц, 1Н), 7.32 (б, 1=8.59 Гц, 1Н), 8.10 (б, 1=2.78 Гц, 1Н), 8.22 (δ, 1Н), 8.28 (δ, 1Н).

Пример 27.

Получение 6-трет-бутил-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1-ил)-1,1-диметилэтокси]пиридин-2иламино }-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил)-3 -гидроксиметилпиридин-2-ил] -8-фтор-2Низохинолин-1-она

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-4-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1 -ил)-1,1 -диметилэтокси] пиридин-2-иламино}-2метил-2Н-пиридазин-3-она на 6-хлор-2-метил-4-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он и замены 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-4-йодпиридин-3карбальдегида на 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1 Н)-ил)-4-йодникотин-альдегид на стадии 5, получали 95 мг указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 690 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.30 (δ, 6Н), 1.41 (δ, 9Н), 2.80 (Ьг. δ., 1Н), 3.76 (Ьг. δ., 4Н), 3.94 (δ, 3Н), 4.14 (бб, 1=11.12, 3.03 Гц, 1Н), 4.45-4.67 (т, 2Н), 6.65 (бб, 1=7.58, 2.02 Гц, 1Н), 6.96 (б, 1=8.84 Гц, 1Н), 7.24 (бб, 1=13.64, 1.77 Гц, 1Н), 7.30 (б, 1=7.33 Гц, 2Н), 7.31-7.36 (т, 2Н), 7.63 (б, 1=5.05 Гц, 1Н), 8.09 (б, 1=2.78 Гц, 1Н), 8.31 (δ, 1Н), 8.64 (δ, 1Н), 8.71 (б, 1=5.05 Гц, 1Н).

Получение соединения Ι-28.

Стадия 1. 4-(6-трет-Бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-2-хлорпиридин-3-карбальдегид.

В круглодонной колбе на 50 мл 2-хлор-4-йодникотинальдегид (389 мг, 1.45 ммоль, экв.: 1.6), 6-трет-бутил-8-фторфталазин-1(2Н)-он (200 мг, 908 мкмоль, экв.: 1.00) и карбонат калия (251 мг, 1.82 ммоль, экв.: 2) объединяли с ^МδΟ (8 мл) с получением желтого раствора. Этот раствор дегазировали в течение 5 мин аргоном. Добавляли иодид меди(1) (173 мг, 908 мкмоль, экв.: 1.00). Реакционную смесь нагревали до 110°С, перемешивали в течение 2 ч и остужали смесь до комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли смесью 1: 1 Н₂О/ИН₄С1 _нас (80 мл) и полученное твердое вещество собирали фильтрацией. Это твердое вещество промывали несколько раз смесью 1:1 Н₂О/МН₄С1 _нас, затем водой (дважды) и затем смесью ЕЮАс:гексан (3:1, дважды). Органическая фаза имела насыщенный цвет. В остатке получали коричневое твердое вещество. Это твердое вещество промывали несколько раз с помощью Е1ОАс и затем СН₂С1₂. Объединенные органические экстракты промывали водой, высушивали над М^О₄ и концентрировали в вакууме. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, 40 г, 5-30% Е1ОАс в гексане) с получением целевого продукта (170 мг) в виде белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 360 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.42 (δ, 9Н), 7.40-7.65 (т, 3Н), 8.24 (б, 1=2.64 Гц, 1Н), 8.66 (б, 1=5.29 Гц, 1Н), 10.32 (δ, 1Н).

Пример 28.

Получение 4-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3-гидроксиметил-1'-метил-5'-[5(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино] -1 'Н-[2,3']бипиридинил-6'-она.

- 57 024689

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 8, за исключением замены 4-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-2-хлорпиридин-3-карбальдегида на 2-(6-трет-бутил-8фтор-1-оксо-1 Н-фталазин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегид, получали 54 мг указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

'Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.46 (к, 9Н), 3.57-3.86 (к и перекрывающийся т, 11Н), 4.05 (Ьг. к., 1Н), 4.52 (Ьг. к., 2Н), 6.88 (б, 1=8.53 Гц, 1Н), 7.35 (б, 1=5.27 Гц, 1Н), 7.55-7.64 (т, 2Н), 7.69 (бб, 1=8.53, 2.26 Гц, 1Н), 7.91 (б, 1=2.26 Гц, 1Н), 8.11 (к, 1Н), 8.36 (бб, 1=11.29, 2.26 Гц, 2Н), 8.83 (б, 1=5.02 Гц, 1Н), 9.05 (б, 1=2.26 Гц, 1Н).

Пример 29.

Получение 4-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3 -гидроксиметил-5 '-(5метансульфонилпиридин-2-иламино)-1'-метил-1'Н-[2,3']бипиридинил-6'-она

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 9, за исключением замены 4-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-2-хлорпиридин-3-карбальдегида на 2-(6-трет-бутил-8фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-4-йодпиридин-3-карбальдегид, получали 54 мг указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.30 (к, 9Н), 2.92 (к, 3Н), 3.61 (к, 3Н), 3.80-4.02 (т, 1Н), 4.36 (к, 2Н), 6.76 (б, 1=9.06 Гц, 1Н), 7.21 (б, 1=5.29 Гц, 1Н), 7.35-7.52 (т, 2Н), 7.73-7.90 (т, 2Н), 8.15 (к, 2Н), 8.19 (б, 1=2.64 Гц, 1Н), 8.60-8.73 (т, 2Н), 9.01 (б, 1=2.27 Гц, 1Н).

Пример 30.

Получение 6-трет-бутил-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1-ил)-1,1-диметилэтокси]пиридин-2иламино }-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил)-3 -гидроксиметилпиридин-2-ил] -8-фтор-2Нфталазин-1-она

на 6 -хлор-2 -метил-4 -(5-(1 -метилпиперидин-4 -ил)пиридин-2 и замены 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-4на 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1Н)-ил)-4-йодникотинВ результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-4-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1 -ил)-1,1 -диметилэтокси]пиридин-2-иламино}-2метил-2Н-пиридазин-3 -она иламино)пиридазин-3 (2Н)-он йодпиридин-3 -карбальдегида альдегид на стадии 5, получали 110 мг указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 691 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ ррт: 1.28 (к, 6Н), 1.44 (к, 9Н), 2.77 (Ьг. к., 2Н), 3.75 (Ьг. к., 4Н), 3.85 (!, 1=7.07 Гц, 1Н), 3.93 (к, 3Н), 4.55 (Ьг. к., 2Н), 6.92 (б, 1=8.84 Гц, 1Н), 7.31 (б, 1=8.08 Гц, 1Н), 7.467.57 (т, 2Н), 7.64 (б, 1=5.05 Гц, 1Н), 8.08 (б, 1=2.78 Гц, 1Н), 8.23-8.35 (т, 2Н), 8.63 (к, 1Н), 8.74 (б, 1=4.80 Гц, 1Н).

- 58 024689

Получение соединения Ι-31.

Стадия 1. Получение 2-(3-бром-5-фторфенил)-2-метилпропионитрил.

При 2-5°С раствор бис-(триметилсилил)амида лития в ТНЕ (326 мл 1 М раствора, 326 ммоль, 1.05 экв.) добавляли по каплям в раствор 1-бром-3,5-дифторбензола (60 г, 311 ммоль, 1.0 экв.) и изобутиронитрила (25.8 г, 373 ммоль, 1.2 экв.) в 360 мл ТНЕ. После перемешивания в течение 20 ч оставалось 13% исходного реагента, поэтому добавляли еще 0.1 экв. бис-(триметилсилил)амида лития. По истечении дополнительных 6 ч оставалось 10% исходного реагента, поэтому добавляли еще 0.1 экв. бис-(триметилсилил)амида лития и 0.1 экв. изобутиронитрила. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили 1н. раствором НС1, затем концентрировали для удаления некоторого количества ТНЕ. Реакционную смесь экстрагировали метил-трет-бутиловым эфиром (два раза) и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта (75.3 г), которое использовали в таком виде.

Стадия 2. Получение 2-бром-П-трет-бутил-4-(цианодиметилметил)-6-фторбензамида.

К раствору 2-(3-бром-5-фторфенил)-2-метилпропаненитрила (30 г, 124 ммоль, 1.0 экв.) в 180 мл ТНЕ добавляли по каплям диизопропиламид лития (82.6 мл 1.8 М раствора, 149 ммоль, 1.2 экв.) при -75°С. Реакционную смесь перемешивали при -76°С в течение 2 ч. Добавляли по каплям трет-бутилизоцианат (18.4 г, 21.8 мл, 186 ммоль, 1.5 экв.) при -75°С и продолжали перемешивание в течение 2 ч. Вносили еще 0.5 экв. трет-бутилизоцианата и реакционную смесь постепенно доводили до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили с помощью 180 мл воды, и затем удали ТНЕ при пониженном давлении при 60°С. Добавляли 1РА при 60°С и выкристаллизовывали продукт из 180 мл Н₂О и 120 мл 1РА при 60°С. Эту смесь медленно, в течение ночи охлаждали до комнатной температуры. Кристаллы собирали фильтрацией, промывали с помощью Н₂О, Н₂О/1РА (1/1) и гептана и высушивали в течение ночи с получением 2-бром-П-трет-бутил-4-(2-цианопропан-2ил)-6-фторбензамида (34.7 г, 102 ммоль, выход 82.1%) в виде белого кристаллического твердого вещества с чистотой >99% по ВЭЖХ.

Ή ЯМР (300 МГц, ОМ8О-й₆) δ ррт: 1.34 (5, 9Н), 1.70 (5, 6Н), 7.47 (йй, 1=10.01, 1.70 Гц, 1Н), 7.60 (5, 1Н), 8.34 (5, 1Н).

Стадия 3. Получение 2-(8-фтор-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-6-ил)-2-метилпропионитрила.

В круглодонную колбу на 500 мл загружали 2-бром-П-трет-бутил-4-(2-цианопропан-2-ил)-6фторбензамид (34.5 г, 101 ммоль, 1 экв.) и карбонат калия (27.9 г, 202 ммоль, 2 экв.) и затем колбу продували азотом (3 раза). Добавляли 1,4-диоксан (242 мл) и воду (34.5 мл). Затем с помощью шприца добавляли Е-2-(2-этоксивинил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (28.0 г, 142 ммоль, 1.4 экв.). Реакционную смесь нагревали до 40°С. К этой смеси добавляли бис-(дибензилиденацетон)палладий (2.33 г,

- 59 024689

4.04 ммоль, 0.04 экв.) и трициклогексилфосфин (2.27 г, 8.09 ммоль, 0.08 экв.) и полученную смесь нагревали с перемешиванием при 90°С (внутренняя температура)/100°С (баня) в течение 2 ч до завершения реакции. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили 20% раствором NаН§О₃ (150 мл), а затем перемешивали в течение 2 ч. Эту смесь экстрагировали с помощью ЕЮЛс (два раза), высушивали над М§8О₄ и концентрировали при пониженном давлении. Полученный продукт растворяли с помощью ТРА (138 мл) во флаконе под давлением на 350 мл и нагревали до 100°С (температура бани) в течение 3 ч. Реакционную смесь переносили в круглодонную колбу с толуолом и ТРА удаляли при пониженном давлении, затем подщелачивали 20% раствором К₂СО₃. Реакционную смесь экстрагировали с помощью ЕЮАс и затем с помощью ЭСМ. Путем кристаллизации из метил-трет-бутилового эфира получали 2-(8-фтор-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-6-ил)-2-метилпропаннитрил (16.2 г, выход 69.6%) в виде коричневого твердого вещества.

Ή ЯМР (300 МГц, ЭМ8О-Д₆) δ ррт: 1.74 (5, 6Н), 6.60 (ДД, 1=6.99, 1.70 Гц, 1Н), 7.16-7.28 (т, 1Н), 7.36 (ДД, 1=13.03, 1.70 Гц, 1Н), 7.61 (Д, 1=1.89 Гц, 1Н), 11.31 (Ьг. 5., 1Н).

Стадия 4. Получение 2-[8-фтор-2-(3-формил-4-йодпиридин-2-ил)-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-6ил]-2-метилпропионитрила.

В круглодонной колбе на 100 мл 2-(8-фтор-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-6-ил)-2метилпропаннитрил (800 мг, 3.47 ммоль, 1 экв.) объединяли с ТНР (32.0 мл) с получением желтой суспензии. Добавляли раствор бис-(триметилсилил)амида лития в ТНР 1М (4.52 мл, 4.52 ммоль, 1.3 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. К полученному янтарному раствору добавляли 2-фтор-4-йодникотинальдегид (1.31 г, 5.21 ммоль, 1.5 экв.). Реакционную смесь нагревали при 50 °С при перемешивании в течение 15 ч.

Реакционную смесь вливали в 5 мл насыщенного раствора ΝΉ₄Ο и 100 мл Н₂О и экстрагировали с помощью ЭСМ (3x100 мл). Органические слои высушивали над №₂8О₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 80 г, 0%, затем 0-0.5% МеОН в ЭСМ), а затем обрабатывали смесью эфиромтексан (1:8) с получением 2-[8-фтор-2-(3-формил-4йодпиридин-2-ил)-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-6-ил]-2-метилпропионитрила в виде бледно-желтого твердого вещества (830 мг).

(М+Н)+ = 462 т/е.

Стадия 5. Получение 2-(8-фтор-2-{3-формил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин6-ил)-2-метилпропионитрил.

6-хлор-2-метил-4-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он (511 мг, 1.73ммоль, 1 экв.), бис-(пинаколато)диборон (485 мг, 1.91 ммоль, 1.1 экв.) и ацетат калия (511 мг, 5.2 ммоль, экв.: 3) суспендировали в диоксане (25 мл). Реакционную смесь дегазировали в атмосфере аргона. Добавляли Χ-ΡΙ105 (124 мг, 260 мкмоль, экв.: 0.15) и ацетат палладия(11) (19.5 мг, 86.7 мкмоль, 0.05 экв.) и реакционную смесь перемешивали при 100°С (внешняя температура) в течение 40 мин в атмосфере аргона до завершения реакции. Температуру бани снижали до 80°С. Колбу вынимали из нагревающей бани, но продолжали перемешивать. Добавляли 2-(8-фтор-2-(3-формил-4-йодпиридин-2ил)-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-6-ил)-2-метилпропаннитрил (800 мг, 1.73 ммоль, 1.0 экв.) и карбонат калия (719 мг, 5.2 ммоль, 3 экв.), а затем 2.5 мл Н2О. Добавляли трициклогексилфосфин (48.6 мг, 173 мкмоль, 0.1 экв.) и бис-(дибензилиденацетон)палладий (49.9 мг, 86.7 мкмоль, 0.05 экв.). Реакционную смесь нагревали при интенсивном перемешивании при 80°С и перемешивали в течение 1.5 ч. Реакционную смесь вливали в воду. Добавляли немного солевого раствора, чтобы развести эмульсию, и эту смесь экстрагировали с помощью ЭСМ (4 раза). Объединенные органические экстракты высушивали над №₂8О₄ и концентрировали в вакууме. Полученное твердое вещество обрабатывали добавлением 10 мл ЕЮАс, а затем 75 мл эфира. Полученное твердое вещество собирали фильтрацией и промывали несколько раз эфиром с получением бледно-зелено-серого твердого вещества (800 мг).

(М+Н)+ = 594 т/е;

Этот продукт использовали в таком виде на следующей стадии без дополнительной очистки.

Пример 31.

Стадия 6. Получение 2-(8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-1-оксо1,2-дигидроизохинолин-6-ил)-2-метилпропионитрила.

- 60 024689

В круглодонной колбе на 25 мл 2-(8-фтор-2-{3-формил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-1-оксо1.2- дигидроизохинолин-6-ил)-2-метилпропионитрил (800 мг, 1.35 ммоль, 1.0 экв.) объединяли с сухим ЭСМ (25 мл) и сухим метанолом (5 мл) с получением светло-желтого раствора. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли борогидрид натрия (91.8 мг, 2.43 ммоль, экв.: 1.8). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 40 мин, а затем гасили с помощью 2 мл насыщенного раствора ЫН₄С1 при перемешивании в течение 5 мин. Реакционную смесь вливали в 100 мл Н₂О и экстрагировали с помощью ЭСМ (3x150 мл). Объединенные органические слои высушивали над Ыа₂8О₄ и концентрировали в вакууме. Неочищенную пену разводили в 20 мл ЭСМ и 15 мл метанола. К этой смеси смесь добавляли 200 мг 10% Ρά/С (торговая марка Оеди55а). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Полученное твердое вещество отбрасывали фильтрацией и промывали несколько раз с помощью 10% метанола в ЭСМ. Объединенные фильтраты и смывы концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 40 г, 0-4% МеОН, фиксируя гардиент каждый раз, когда выходил пик). Центральные фракции концентрировали с получением стекла, которое обрабатывали эфиром с получением 2-(8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-1-оксо1.2- дигидроизохинолин-6-ил)-2-метилпропионитрила в виде грязно-белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 596 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-ά) δ ррт: 1.81 (5, 6Н), 2.52 (5, 3Н), 2.94 (ΐ, 1=5.67 Гц, 2Н), 3.65 (ά, 1=2.27 Гц, 2Н), 3.90 (5, 3Н), 4.05-4.22 (т, 3Н), 4.42-4.60 (т, 2Н), 5.85 (5, 1Н), 6.66 (άά, 1=7.55, 1.89 Гц, 1Н), 7.22 (άά, 1=12.46, 1.89 Гц, 1Н), 7.35 (ά, 1=7.55 Гц, 1Н), 7.53 (ά, 1=1.89 Гц, 1Н), 7.62 (ά, 1=4.91 Гц, 1Н), 7.92 (5, 1Н), 7.99 (5, 1Н), 8.68 (ά, 1=4.91 Гц, 1Н).

Пример 32.

Получение 6-трет-бутил-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1-ил)-1,1-диметилэтокси]пиридин-2иламино }-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил)-3 -гидроксиметилпиридин-2-ил] -2Н-фталазин-1 она.

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-4-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1 -ил)-1,1 -диметилэтокси] пиридин-2-иламино}-2метил-2Н-пиридазин-3 -она на 6-хлор-2-метил-4-(5-( 1 -метилпиперидин-4-ил)пиридин-2иламино)пиридазин-3(2Н)-он и замены 2-(6-трет-бутил-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-4-йодпиридин-3карбальдегида на 2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1 Н)-ил)-4-йодникотинальдегид на стадии 5, получали 149 мг указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 673 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ ррт: 1.28 (Ьг. 5., 6Н), 1.46 (5, 9Н), 2.77 (Ьг. 5., 2Н), 3.75 (Ьг. 5., 4Н), 3.93 (5, 3Н), 3.98 (ΐ, 1=7.07 Гц, 1Н), 4.54 (Ьг. 5., 2Н), 6.93 (ά, 1=8.84 Гц, 1Н), 7.31 (ά, 1=7.07 Гц, 1Н), 7.64 (ά, 1=5.05 Гц, 1Н), 7.78 (ά, 1=1.52 Гц, 1Н), 7.90-7.95 (т, 1Н), 8.07 (ά, 1=2.53 Гц, 1Н), 8.29 (5, 1Н), 8.39 (ά, 1=0.76 Гц, 1Н), 8.45 (ά, 1=8.34 Гц, 1Н), 8.64 (5, 1Н), 8.75 (ά, 1=5.05 Гц, 1Н).

Пример 33.

Получение 2-{2-[4-(5-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1-ил)-1,1-диметилэтокси]пиридин-2-иламино}-1метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил)-3 -гидроксиметилпиридин-2-ил] -8-фтор-1 -оксо-1,2дигидроизохинолин-6-ил}-2-метилпропионитрила.

В результате синтеза по схеме, которая идентична описанной в примере 1 (стадии 5, 6), за исключением замены 6-хлор-4-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1 -ил)-1,1 -диметилэтокси]пиридин-2-иламино}-2- 61 024689 метил-2Н-пиридазин-3 -она на б-хлор-2-метил-4-(5-( 1 -метилпиперидин-4-ил)пиридин-2иламино)пиридазин-3(2Н)-он на стадии 5, получали 135 мг указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

(М+Н)+ = 701 т/е;

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ ррт: 1.30 (Ьг. 5., бН), 1.81 (5, бН), 2.81 (Ьг. 5., 2Н), 3.81 (Ьг. 5., 4Н), 3.93 (5, 3Н), 4.01 (άά, 1=10.30, 3.28 Гц, 1Н), 4.43-4.б2 (т, 2Н), б.б7 (άά, 1=7.58, 2.02 Гц, 1Н), б.93 (ά, 1=8.84 Гц, 1Н), 7.23 (άά, 1=12.25, 1.89 Гц, 1Н), 7.32 (Ьг. 5., 1Н), 7.37 (ά, 1=7.33 Гц, 1Н), 7.52-7.5б (т, 1Н), 7.б4 (ά, 1=4.80 Гц, 1Н), 8.08 (ά, 1=2.78 Гц, 1Н), 8.31 (5, 1Н), 8.б3 (5, 1Н), 8.71 (ά, 1=5.05 Гц, 1Н).

Пример 34.

Получение 2-(б-(2-(б-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1Н)-ил)-3-(гидроксиметил)пиридин-4ил)-2-метил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино)-5-метил-4,5,б,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин 5-оксида.

К раствору б-трет-бутил-8-фтор-2-(3-(гидроксиметил)-4-(1-метил-5-(5-метил-4,5,б,7тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-б-оксо-1,б-дигидропиридазин-3-ил)пиридин-2ил)фталазин-1(2Н)-она (500 мг, 854 мкмоль, 1 экв.) в ЭСМ (10 мл) добавляли 3-хлорбензопероксовую кислоту (191 мг, 854 мкмоль, 1 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавляли метиленхлоридом и промывали 1.0н. раствором №ЮН (водн.). Слои разделяли и органический слой промывали солевым раствором, высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением жидкости, которая постепенно отвердевала с образованием низкоплавкого желтого твердого вещества в вакууме, в течение ночи. Это твердое вещество растворяли в минимальном количестве метанола, разбавляли метиленхлоридом и наносили на колонку. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (силикагель, 40 г, 50% б0:10:1 ^СΜ:ΜеΟН:NН₄ΟН в ЭСМ) с получением 2-(б-(2-(б-трет-бутил-8-фтор-1-оксофталазин-2(1Н)-ил)-3-(гидроксиметил)пиридин-4-ил)-2-метил-3оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино)-5-метил-4,5,б,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразина 5-оксида (158.5 мг, 2б3 мкмоль, выход 30.9%) в виде желтого твердого вещества.

(М+Н)+ = б02 т/е;

Ή ЯМР (300 МГц, метанол^₄) δ ррт: 1.47 (5, 9Н), 3.45 (5, 3Н), 3.74 (άΐ, 1=12.4б, 2.4б Гц, 1Н), 3.89 (5, 3Н), 4.07 (ΐά, 1=11.80, 4.72 Гц, 1Н), 4.25-4.43 (т, 1Н), 4.45-4.б2 (т, 2Н), 4.01-4.85 (т, 3Н), б.13 (5, 1Н), 7.54-7.79 (т, 2Н), 7.87 (ά, 1=1.51 Гц, 1Н), 8.07 (5, 1Н), 8.50 (ά, 1=2.б4 Гц, 1Н), 8.бб (ά, 1=5.29 Гц, 1Н).

Результаты биологического анализа.

Анализ ингибирования тирозинкиназы Брутона (В1к).

Данный анализ представляет собой захват радиоактивного ³³Р фосфорилированного продукта при фильтрации. Взаимодействия В1к, биотинилированного ЗН₂ пептидного субстрата (гомология Згс) и АТФ приводит к фосфорилированию этого пептидного субстрата. Биотинилированный продукт связывается со стрептавидин-сефарозными гранулами. Все связанные радиоактивно меченые продукты детектируются с помощью сцинцилляционного счетчика.

Планшеты для анализа представляют собой 9б-луночные полипропиленовые (Огешег) и 9б-луночные планшеты с гидрофильным РУЭР-фильтром (1.2 мкм, МПНроге). Указанные далее концентрации представляют собой конечные аналитические концентрации: 10-100 мкМ соединения в ЭМЗО (ВшШск ηπά 1аск5ои), 5-10 нМ фермент В1к (с гистидиновой меткой, полноразмерный), 30 мкМ пептидный субстрат (В^оΐ^и-Аса-АААЕЕIΥОЕI-NН₂), 100 мкМ АТР (Зщта), 8 мМ имидазол (Зщта, рН 7.2), 8 мМ глицерин-2-фосфат (З1дта), 200 мкМ ЕОТА (КосЬе П1адио5Йс5), 1 мМ МиС1₂ (З1дта), 20 мМ М§С1₂ (Зщта), 0.1 мг/мл ВЗА (Зщта), 2 мМ ЭТТ (З1дта), 1 мкКи ³³Р АТР (Атег5Ьат), 20% стрептавилинсефарозные гранулы (Атег5Ьат), 50 мМ ЕЭТА (О1Ьсо), 2 М №С1 (ОЛсо), 2 М №С1/1% (вес.) фосфорная кислота (О1Ьсо), ткго5сш1-20 (Регкт Е1тег).

Значения Κ'₅₀ рассчитывали по 10 точкам на каждое соединение с помощью данных, полученных по стандартному шаблону для анализа на 9б-луночном планшете. На каждом планшете тестировали одно контрольное соединение и семь неизвестных ингибиторов,и каждый планшет прогоняли дважды. Обычно соединения разбавляли полулогарифмически, начиная от 100 мкМ и заканчивая 3 нМ. Контрольное соединение представляло собой стауроспорин. Уровень фона определяли в отсутствие пептидного субстрата. Общую активность определяли в присутствии пептидного субстрата. Для определения ингибирования В1к использовали следующий протокол.

- б2 024689

1) Подготовка образцов: тестовые соединения разбавляли с полулогарифмическим шагом в аналитическом буфере (имидазол, глицерин-2-фосфат, ЕОТА, МиС1₂, МдС1₂, В8А).

2) Подготовка гранул:

a) промыть гранулы центрифугированием при 500 д,

b) восстановить гранулы с помощью РВ§ и ЕОТА с получением 20% кашицы гранул.

3) Преинкубировать реакционный микс без субстрата (аналитический буфер, ИТТ, АТР, ³³Р АТР) и микс с субстратом (аналитический буфер, ИТТ, АТР, ³³Р АТР, пептидный субстрат) при 30°С в течение 15 мин.

4) Для начала анализа преинкубировать 10 мкл В1к в буфере для фермента (имидазол, глицерин-2фосфат, В8А) и 10 мкл тестового соединения в течение 10 мин при КТ.

5) Добавить 30 мкл реакционной смеси, не содержащей или содержащей субстрат, к В1к и соединению.

6) Инкубировать 50 мкл общего аналитического микса в течение 30 мин при 30°С.

7) Перенести 40 мкл аналитической смеси к 150 мкл кашицы гранул на планшет с фильтром для остановки реакции.

8) Промыть планшет с фильтром через 30 мин, используя следующие стадии:

a) 3x250 мкл ИаС1,

b) 3x250 мкл ИаС1, содержащего 1% фосфорной кислоты,

c) 1x250 мкл Н₂О.

9) Сушить планшет в течение 1 ч при 65°С или в течение ночи при КТ.

10) Добавить 50 мкл реагента ιηΕΐΌδαηΙ-20 и считывать число импульсов/мин (срт) от ³³Р на сцинцилляционном счетчике.

Рассчитать процентную долю активности по исходным данным, выраженным в срт:

Процентная доля активности = (образец - фон)/(общая активность - фон) ж 100.

Рассчитать Κ.'₅₀ по процентной доле активности с использованием односайтовой сигмоидальной модели доза-отклик:

где х = конц. соединения, у = % активности,

А = т1и,

В = тах,

50^,

И = 1(коэффициент Хилла).

Ингибирование активации В-клеток в цельной крови, измеренное по экспрессии СИ69.

Методика исследования способности ингибиторов ВРк подавлять опосредованную рецептором В-клеток активацию В-клеток в крови человека описана ниже.

Цельную кровь человека (Н^В) получали от здоровых доноров при следующих ограничениях: 24 ч без приема лекарств, некурящие. Кровь собирали путем венопункции в пробирки Уаси1ашег, с гепарином натрия в качестве антикоагулянта. Тестовые соединения разбавляли до 10-кратной желаемой исходной концентрации лекарственного вещества в РВ§ (20x), а затем готовили трехкратные серийные разведения в 10% ИМ8О в РВ§ для получения девяти точек для построения кривой доза-отклик. Вносили по 5.5 мкл каждого разведения соединения в дупликатах на 96-луночный планшет с лунками объемом 2 мл и У-образным дном (Апа1у11са1 δ;·ιΕδ аиб δе^ν^сеδ, #59623-23); вносили по 5.5 мкл 10% ИМ8О в РВ§ в контрольные лунки и лунки без стимуляции. Вносили Н\УВ (100 мкл) в каждую лунку, перемешивали и инкубировали планшеты при 37°С, 5% СО₂, 100% влажности в течение 30 мин. Вносили козьи Р(аЬ')₂ против ^М человека (8ои1Ееги Вю1есЕ, # 2022-14) (10 мкл раствора 500 мкг/мл, конечная концентрация 50 мкг/мл) в каждую лунку (за исключением лунок без стимуляции) при перемешивании и инкубировали планшеты еще в течение 20 ч.

По окончании 20-часовой инкубации образцы инкубировали с антителами, меченными флуоресцентным зондом (15 мкл РЕ мыши против СИ20 человека, ВИ РЕагтшдеи, # 555623, и/или 20 мкл АРС мыши против СИ69 человека, ВИ РЕаттдеи # 555533) в течение 30 мин, при 37°С, 5% СО₂, 100% влажности. В анализ включали индуцированный контроль, неокрашенный и отдельные красители для установки компенсации и выставления начального напряжения. Затем образцы лизировали с помощью 1 мл 1-кратного буфера РЕагтшдеи ^уδе ВиРРег (ВИ РЬагшшдеи # 555899) и планшеты центрифугировали при 1800 об/мин в течение 5 мин. Супернатанты удаляли отсасыванием и оставшиеся гранулы снова лизировали с помощью 1 мл однократного буфера РЕаттдеи ^уδе ВиРРег и планшеты откручивали, как ранее. Супернатанты отсасывали и оставшиеся гранулы промывали в буфере РΑСδ (РВ§ + 1% РВ§). После окончательного откручивания супернатанты удаляли и гранулы ресуспендировали в 180 мкл буфера РΑСδ. Образцы переносили на 96-луночный планшет, подходящий для прогона на 96-луночной системе НТ§ 96 на проточном цитофлуориметре ВИ Ь§К II.

- 63 024689

При подходящей длине волны возбуждения и испускания для использованного флюорофора были получены данные и рассчитаны процентные доли позитивных клеток с помощью программы Се11 Риск! 5>оП\\аге. Результаты сначала анализировали с помощью программы РЛС8 апа1ук18 (Иоте До). Величину 1С50 для тестового соединения определяли как концентрацию, которая снижает на 50% процентную долю СИ69-позитивных клеток, которые также являются СИ20-позитивными после стимуляции с помощью анти-1дМ (среднее из 8 контрольных лунок, после вычитания среднего из 8 лунок для фонового уровня без стимуляции). Значения 1С₅₀ рассчитывали с помощью программы ХБП1, версия 3, уравнение 201.

Результаты для соединений, приведенных в примерах, полученные в этом анализе, приведены в табл. II.

Таблица II

Ингибирование активации В-клеток - анализ РЫРК В-клеток на клетках Каток.

Ингибирование активации В-клеток соединениями по настоящему изобретению можно продемонстрировать при исследовании воздействия тестовых соединений на I§М-стимулированные отклики В-клеток.

В-клеточный РЫРК-анализ представляет собой клеточный функциональный метод определения эффекта потенциальных ингибиторов повышения внутриклеточного кальция при стимуляции с помощью антител против ЦМ. Клетки Каток (линия человеческих клеток лимфомы Беркитта, номер в АТСС СКЬ- 64 024689

1596) культивировали в ростовой среде (описана ниже). За сутки до анализа клетки Като5 ресуспендировали в свежей ростовой среде (такой же, как и выше) и высеивали в концентрации 0.5х10⁶/мл в колбы для тканевых культур. В день анализа клетки считали и высеивали в концентрации 1х10⁶/мл в ростовой среде, содержащей дополнительно 1 мкМ РЬиО-3АМ (Те£ЬаЬ5 кат. № 0116, приготовленного в безводном ЭМ8О и 10% плюрониловой кислоте) в колбах для тканевой культуры, и инкубировали при 37°С (4% СО₂) в течение 1 ч. Для удаления внеклеточного красителя клетки собирали центрифугированием (5 мин, 1000 об/мин), ресуспендировали в буфере РЫРК (описанном ниже) при концентрации 1х 10⁶ клеток/мл и затем пипетировали на 96-луночные, покрытые поли-О-лизином черно-прозрачные планшеты (ΒΌ кат. № 356692) в количестве 1х 10⁵ клеток/лунку. Добавляли тестовые соединения при различных концентрациях в интервале от 100 до 0.03 мкМ (7 концентраций, подробно указаны ниже) и инкубировали с клетками в течение 30 мин при КТ. Са²+-сигнальный путь в клетках Като5 стимулировали добавлением 10 мкг/мл антител против IдМ (8ои1кегп Вю1есЬ, кат. № 2020-01) и измеряли на РЫРК (Мо1еси1аг Ое\асе5. осуществляет снимки с 96-луночных планшетов с помощью камеры ССЭ с аргоновым лазером, возбуждение при 480 нМ).

Состав сред/буферов.

Ростовая среда: КРМI 1640 среда, содержащая Ь-глутамин Опуйгодеп, кат. № 61870-010), 10% фетальную сыворотку коровы (РВ8, 8иттй Вю1есйпо1оду кат. № РР-100-05); 1 мМ пируват натрия Дпуйгодеп кат. № 11360-070).

Буфер РЫРК: НВ88 (Iη\11^оуеη. кат. № 141175-079), 2 мМ СаС1₂ (81§та кат. № С-4901), НЕРЕЗ (Σηуйтодеп, кат. № 15630-080), 2.5 мМ пробенецид (81дта, кат. № Р-8761), 0.1% В8А (81дта, кат. №А-7906), 11 мМ глюкоза (81дта, кат. № С-7528)

Подробное описание разведения соединений.

Для того чтобы получить наибольшую конечную концентрацию в анализе, равную 100 мкМ, 24 мкл 10 мМ стокового раствора соединения (приготовленного в ЭМ8О) непосредственно вносили в 576 мкл буфера РЫРК. Тестовые соединения разбавляли в буфере РЫРК (с помощью автоматического дозатора Вютек 2000) по следующей схеме разведений: растворитель, 1.00х10^-4, 1.00х10^-5, 3.16х10^-6, 1.00х10^-6, 3.16х10^-7, 1.00х10^-7, 3.16х10^-8 М.

Проведение исследования и анализ данных.

Внутриклеточное возрастание кальция представляли с помощью статистического минимумамаксимума (вычитая полученный фоновый уровень из пика, вызванного добавлением стимулирующего антитела, с использованием контроля (Мо1еси1аг Ьеу1се5 РЫРК) и программного обеспечения с функцией статистической обработки). Значения Κ'₅₀ определяли с помощью нелинейной аппроксимации (программное обеспечение СгарйРаД Рп5т).

Коллаген-индуцированный артрит у мышей (тОА).

В день 0 мышам делали инъекцию в основание хвоста или в несколько точек на спине эмульсией коллагеном II типа внутрикожно (1.Д.) в полном адъюванте Фройнда (СРА). После иммунизации коллагеном у животных развивался артрит примерно за период от 21 до 35 суток. Возникновение артрита синхронизировали (усиливали) систематическим введением коллагена в неполном адъюванте Фройнда (ГРА;

1.Д.) на 21 день. Животных обследовали ежедневно после 20-го дня на предмет любых проявлений легкого артрита (1 или 2 балла; см. описание шкалы ниже), которые являются сигналом для усиления. После усиления мышей оценивали по шкале и вводили им дозу потенциальных терапевтических агентов в течение назначенного периода времени (как правило, 2-3 недели) и с частотой дозирования ежедневно (СО) или дважды в день (ВГО).

Коллаген-индуцированный артрит у крыс (гС!А).

В день 0 крысам делали инъекцию эмульсией бычьего коллагена II типа в неполном адъюванте Фройнда (ЕРА) интрадермально (ЕД.) в нескольких точках на спине. Усиливающую инъекцию эмульсией коллагена делали примерно на 7-й день, (1.Д.) в основание хвоста или в других положениях на спине. Артрит обычно наблюдали через 12-14 дней после первой инъекции коллагеном. Животных можно оценивать на предмет развития артрита, как описано ниже (Оценка артрита) начиная с 14 дня. Животным вводили дозу потенциальных терапевтических агентов в режиме профилактики, начиная с момента повторной иммунизации и в течение предписанного периода времени (как правило, 2-3 недели), и с частотой дозирования ежедневно (СО) или дважды в день (ВГО).

Оценка артрита.

В обеих моделях развитие воспаления конечностей и суставов конечностей оценивали количественно, используя систему баллов, включающую оценивание четырех конечностей по критериям, описанным ниже.

Баллы:

= опухание и/или покраснение конечности или одного пальца, = опухание одного или более суставов, = сильное опухание конечности с вовлечением более чем двух суставов, = тяжелый артрит всей конечности и пальцев.

- 65 024689

Оценку проводили в день 0 для установления базовой линии и начиная снова при первых признаках опухания вплоть до трех раз в неделю до конца эксперимента. Артритический индекс для каждой мыши получали путем сложения баллов по каждой из четырех конечностей, что давало максимальный балл 16 на одно животное.

Крысиная модель астмы т У1уо.

Самцов серой крысы сенсибилизировали интраперитонеально с помощью 100 мкг ОА (овальбумин) в 0.2 мл алюмогеля один раз в неделю в течение 3 недель (дни 0, 7 и 14). На 21-й день (через неделю после последней сенсибилизации) крысам вводили дозу ц.б. в виде композиции либо с инертным веществом, либо с соединением, подкожно, а через 0.5 ч осуществляли провокацию аэрозолем с помощью ОА (1% ОА в течение 45 мин) и умерщвляли через 4 или 24 ч после провокации. Когда животное забивали, собирали сыворотку и плазму у всех животных для серологического анализа и РК соответственно. Вставляли трахеальную канюлю и легкие трижды промывали с помощью РВ8. ВАЬ-жидкость исследовали на общее число лейкоцитов и дифференцированный подсчет лейкоцитов. Общее число лейкоцитов в аликвоте клеток (20-100 мкл) определяли с помощью СоиЙег СоиШсг. Для дифференцированного подсчета лейкоцитов 50-200 мкл образца центрифугировали в Су1окрт и препарат окрашивали с помощью Огй'-Ршк. Соотношение моноцитов, эозинофилов, нейтрофилов и лимфоцитов подсчитывали с помощью световой микроскопии по стандартным морфологическим критериям и выражали в процентах. Выбранные примеры ингибиторов В1к демонстрируют снижение общего числа лейкоцитов в ВАЬ у сенсибилизированных и провоцированных с помощью ОА крыс, по сравнению с контрольным уровнем.

Представленное выше изобретение было детально описано с помощью иллюстраций и примеров в целях ясности и лучшего понимания. Специалисту в данной области техники очевидно, что можно осуществить изменения и модификации в пределах объема приложенной формулы изобретения. Таким образом, следует понимать, что представленное выше описание является иллюстративным, но не ограничивающим. Таким образом, объем настоящего изобретения следует определять не со ссылкой на представленное выше описание, а со ссылкой на прилагаемую формулу изобретения, в совокупности с полным охватом эквивалентов, на которые дают право пункты указанной формулы.

Все патенты, заявки на патент и публикации, процитированные в данном изобретении, включены посредством ссылок полностью во всех смыслах в той же мере, как если бы каждый отдельный патент, заявка на патент или публикация были таким образом индивидуально обозначены.

Claims (21)

1. в которой каждый X представляет собой независимо СН или Ν;

   К представляет собой -К¹, -К'-К^:-К³ или -К^!-К³;

   К¹ представляет собой возможно замещенный одним или двумя заместителями 5-12-членный моноциклический или бициклический гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома Ν, где бициклический гетероарил содержит по меньшей мере одно ароматическое кольцо и где указанный заместитель выбран из С1_-4алкила или оксогруппы;

   К² представляет собой -С(=О), -С(=О^К², -О или -8(=О)2; каждый К² представляет собой С1-4алкил;

   К³ представляет собой С1_-4алкил, циклопропилметил, ди-С1_-4алкиламино, 3-8-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-2 гетероатома, выбранных из N и О, азетидинил-С1_-4алкил, каждый из которых возможно содержит в качестве заместителя одну или две следующие группы: С1_-4алкил, галоген, азетидинил;

   Υ² представляет собой СН или Ν;

   Υ³ представляет собой Н или Р;

   Υ⁴ представляет собой С_3-6циклоалкил или С1_-4алкил, возможно содержащий один заместитель, выбранный из цианогруппы, или его фармацевтически приемлемая соль.
2. 2. Соединение по п.1, в котором X представляет собой Ν.
3. 3. Соединение по п. 1 или 2, в котором Υ² представляет собой Ν.
4. 4. Соединение по любому из пп.1-3, в котором Υ³ представляет собой Н.
5. 5. Соединение по любому из пп.1-3, в котором Υ³ представляет собой Р.
6. 6. Соединение по любому из пп.1-5, в котором Υ⁴ представляет собой циклопропил или трет-бутил.

   - 66 024689
7. 7. Соединение по любому из пп.1-6, в котором К представляет собой -К¹-К²-К³, К¹ представляет собой пиридил, К² представляет собой -С(=О) и К³ представляет собой морфолинил.
8. 8. Соединение по любому из пп.1-6, в котором К представляет собой К¹ и К¹ представляет собой 4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-ил, возможно замещенный С1_-4алкилом.
9. 9. Соединение по любому из пп.1-6, в котором К представляет собой -К?-К³, К¹ представляет собой пиридил и К³ представляет собой азетидинил-С1-4алкил.
10. 10. Соединение по любому из пп.1-6, в котором К представляет собой -К?-К²-К³, К¹ представляет собой пиридил, К² представляет собой -О и К³ представляет собой азетидинил-С_1-4алкил, возможно замещенный одним или двумя атомами галогена.
11. 11. Соединение по любому из пп.1-6, в котором К представляет собой -К¹-К²-К³, К¹ представляет собой пиридил, К² представляет собой -С(=О) и К³ представляет собой диметиламиногруппу.
12. 12. Соединение по любому из пп.1-6, в котором К представляет собой -К¹-К²-К³, К¹ представляет собой пиридил, К² представляет собой ^(=О)₂ и К³ представляет собой метил.
13. 13. Соединение по любому из пп.1-12, представляющее собой:

    6-трет-бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(1'-метил-1',2',3',4',5',6'-гексагидро[3,4']бипиридинил-6-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил] пиридин-2-ил}-2Н-фталазин-1-он;

    6-трет-бутил-8-фтор-2-(3-гидроксиметил-4-{1-метил-5-[5-(^)-1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2иламино] -6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил}пиридин-2-ил)-2Н-фталазин-1 -он;

    6-трет-бутил-8-фтор-2-(3-гидроксиметил-4-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2иламино] -6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил}пиридин-2-ил)-2Н-фталазин-1 -он;

    6-трет-бутил-8-фтор-2-{3 -гидроксиметил-4-[5 -(5-метансульфонилпиридин-2-иламино)-1 -метил-6оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил] пиридин-2 -ил} -2Н-фталазин- 1-он;

    6-{6-[2-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3-гидроксиметилпиридин-4-ил]-2-метил-3оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино}-Ы^-диметилникотинамид;

    6-{6-[2-(6-циклопропил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-3-гидроксиметилпиридин-4-ил]-2метил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино}-Ы^-диметилникотинамид;

    6-трет-бутил-2-(3-гидроксиметил-4-{ 1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил}пиридин-2-ил)-2Н-фталазин-1 -он;

    2'-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3'-гидроксиметил-1-метил-5-[5-(морфолин-4карбонил)пиридин-2-иламино] -1Н-[3,4'] бипиридинил-6 -он;

    2'-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3'-гидроксиметил-5-(5-метансульфонилпиридин2 -иламино)- 1-метил-1Н-[3,4'] бипиридинил-6 -он;

    6-[2'-(6-трет-бутил-8-фтор-1 -оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3 '-гидроксиметил-1 -метил-6-оксо-1,6-дигидро[3,4']бипиридинил-5-иламино]-Ы^-диметилникотинамид;

    2'-(6-циклопропил-8-фтор-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-3'-гидроксиметил-1-метил-5-[5-(морфолин4-карбонил)пиридин-2-иламино]-1Н-[3,4']бипиридинил-6-он;

    6-трет-бутил-2-(3-гидроксиметил-4-{1-метил-5-[5-(^)-1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2иламино] -6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил}-пиридин-2-ил)-2Н-фталазин-1 -он;

    6-трет-бутил-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(1'-метил-1',2',3',4',5',6'-гексагидро[3,4']бипиридинил-6-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил] пиридин-2-ил}-2Н-фталазин-1-он;

    6-трет-бутил-2-{4-[5-(1'-этил-1',2',3',4',5',6'-гексагидро-[3,4']бипиридинил-6-иламино)-1-метил-6оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил] -3 -гидроксиметилпиридин-2-ил} -8-фтор-2Н-фталазин-1-он;

    2-(4-{5-[5-(2-азетидин-1-ил-1,1-диметилэтокси)пиридин-2-иламино]-1-метил-6-оксо-1,6дигидропиридазин-3-ил}-3-гидроксиметилпиридин-2-ил)-6-трет-бутил-8-фтор-2Н-фталазин-1-он;

    2-(4-{5-[5-(2-азетидин-1-ил-1,1-диметилэтокси)пиридин-2-иламино]-1-метил-6-оксо-1,6дигидропиридазин-3 -ил}-3 -гидроксиметилпиридин-2-ил)-6-трет-бутил-2Н-фталазин-1 -он;

    2-{4-[5-(5-азетидин-1-илметил-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6дигидропиридазин-3-ил]-3-гидроксиметилпиридин-2-ил}-6-трет-бутил-8-фтор-2Н-фталазин-1-он;

    6-трет-бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Н-фталазин-1-он;

    6-трет-бутил-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Н-фталазин-1-он;

    6-циклопропил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Н-изохинолин-1-он;

    6-трет-бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-оксетан-3-ил-4,5,6,7тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Нфталазин-1-он;

    6-трет-бутил-2-{4-[5-(5-этил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1-метил-6-оксо1,6-дигидропиридазин-3 -ил] -3 -гидроксиметилпиридин-2 -ил} -8-фтор-2Н-фталазин- 1-он;

    6-трет-бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Н-изохинолин-1-он;

    6-трет-бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-оксетан-3-ил-4,5,6,7- 67 024689 тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Низохинолин- 1-он;

    6-трет-бутил-2-{4-[5-(5-этил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1-метил-6-оксо1,6-дигидропиридазин-3 -ил] -3 -гидроксиметилпиридин-2-ил} -8-фтор-2Н-изохинолин-1 -он;

    6-трет-бутил-2-{4-[5-(5-циклопропилметил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил] -3 -гидроксиметилпиридин-2-ил}-8-фтор-2Н-фталазин-1 -он;

    6-трет-бутил-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1-ил)-1,1-диметилэтокси]пиридин-2-иламино}-1метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил)-3 -гидроксиметилпиридин-2-ил] -8-фтор-2Н-изохинолин-1 -он;

    4-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3-гидроксиметил-1'-метил-5'-[5-(морфолин-4карбонил)пиридин-2-иламино] -1'Н-[2,3'] бипиридинил-6 '-он,

    4-(6-трет-бутил-8-фтор-1-оксо-1Н-фталазин-2-ил)-3-гидроксиметил-5'-(5-метансульфонилпиридин2-иламино)-1 '-метил-1 'Н-[2,3']бипиридинил-6'-он;

    6-трет-бутил-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1-ил)-1,1-диметилэтокси]пиридин-2-иламино}-1метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил)-3 -гидроксиметилпиридин-2-ил] -8-фтор-2Н-фталазин-1 -он;

    2-(8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-1-оксо-1,2-дигидроизохинолин-6-ил)-2метилпропионитрил;

    2-{2-[4-(5-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1-ил)-1,1-диметилэтокси]пиридин-2-иламино}-1-метил-6оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил)-3 -гидроксиметилпиридин-2-ил] -8-фтор-1-оксо-1,2дигидроизохинолин-6-ил}-2-метилпропионитрил;

    6-трет-бутил-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-дифторазетидин-1-ил)-1,1-диметилэтокси]пиридин-2-иламино}-1метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3 -ил)-3 -гидроксиметилпиридин-2-ил] -2Н-фталазин-1-он или

    6-трет-бутил-8-фтор-2-{3-гидроксиметил-4-[1-метил-5-(5-метил-5-окси-4,5,6,7тетрагидропиразол[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]пиридин-2-ил}-2Нфталазин-1-он.
14. 14. Способ лечения воспалительного и/или аутоиммунного состояния, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-13, ингибирующего тирозинкиназу Брутона (В1к).
15. 15. Способ лечения ревматоидного артрита, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-13, ингибирующего В1к.
16. 16. Способ лечения астмы, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-13, ингибирующего В1к.
17. 17. Фармацевтическая композиция для ингибирования В1к, включающая соединение по любому из пп.1-13.
18. 18. Фармацевтическая композиция для ингибирования В1к, включающая соединение по любому из пп.1-13, смешанное по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или разбавителем.
19. 19. Применение соединения по любому из пп.1-13 в качестве ингибитора В1к.
20. 20. Применение соединения по любому из пп.1-13 для лечения воспалительного и/или аутоиммунного состояния.
21. 21. Применение соединения по любому из пп.1-13 для изготовления лекарственного средства для лечения воспалительного и/или аутоиммунного состояния.