KR20140052032A

KR20140052032A - 브루톤 티로신 키나아제의 억제제

Info

Publication number: KR20140052032A
Application number: KR1020147006816A
Authority: KR
Inventors: 크리스틴 브라더톤-플레이스; 솔 제이미-피게로아; 프란시스코 자비어 로페즈-타피아; 얀 로우; 티모시 디 오웬스
Original assignee: 에프. 호프만-라 로슈 아게
Priority date: 2011-08-17
Filing date: 2012-08-14
Publication date: 2014-05-02
Also published as: AR087543A1; BR112014003582A2; TW201311669A; ZA201400739B; EA024689B1; EA201490452A1; CR20140027A; MA35419B1; MX349372B; CN103748088A; CL2014000350A1; MX2014001653A; AU2012296888A1; US8889682B2; WO2013024078A1; EP2744804A1; US20130045965A1; JP2014521734A; EP2744804B1; HK1197060A1

Abstract

본 발명은 Btk를 억제하는 하기 화학식 I의 화합물을 개시한다:
[화학식 I]

상기 식에서, 변수들은 본원에서 정의된 바와 같다.
본원에 개시된 화합물은 Btk의 활성을 조절하고 과도한 Btk 활성과 관련된 질환을 치료하는데 유용하다. 상기 화합물은 또한, B 세포 이상 증식과 관련된 염증성 및 자가면역성 질환, 예컨대 류마티스성 관절염을 치료하는데 유용하다. 본 발명은 또한 화학식 I의 화합물 및 하나 이상의 담체, 희석제 또는 부형제를 함유하는 조성물을 개시한다.

Description

브루톤 티로신 키나아제의 억제제{INHIBITORS OF BRUTON'S TYROSINE KINASE}

본 발명은 Btk를 억제하고 B 세포 이상 증식에 의해 유발되는 자가면역성 및 염증성 질환의 치료에 유용한 신규 유도체의 용도에 관한 것이다. 본원에 기술된 신규 화합물은 류마티스성 관절염 및 천식의 치료에 유용하다.

단백질 키나아제는 인간 효소의 최대 패밀리 중 하나를 구성하고, 포스페이트 기를 단백질에 첨가함으로써 다수의 상이한 신호전달 과정을 조절한다(문헌[Hunter, Cell 1987 50:823-829]). 구체적으로, 티로신 키나아제는 티로신 잔기의 페놀 부분 상의 단백질을 인산화한다. 티로신 키나아제 패밀리는 세포 성장, 이동 및 분화를 조절하는 일원을 포함한다. 비정상적 키나아제 활성은 암, 자가면역성 및 염증성 질환을 포함하는 각종 인간 질환에 관련되어 있다. 단백질 키나아제가 세포 신호전달의 핵심 조절자 중에 있기 때문에, 이는 소분자 키나아제 억제제에 의해 세포 기능이 조절되는 표적을 제공하며, 이로써 양호한 약물 설계 표적이 된다. 키나아제-매개된 질환의 치료 과정에 더하여, 키나아제 활성의 선택적 및 효과적 억제제도 세포 신호전달 과정의 연구 및 치료적 관심 대상이 되는 다른 세포 표적의 식별에 유용하다.

자가면역성 및/또는 염증성 질환의 발병에 있어서 B 세포가 핵심 역할을 한다는 좋은 증거가 있다. 리투잔(Rituxan)과 같은 B 세포를 제거하는 단백질-기재의 치료법은 자가항체-유도된 염증성 질환, 예컨대 류마티스 관절염에 효과적이다(문헌[Rastetter 등, Annu Rev Med 2004 55:477]). 따라서, B 세포 활성화에서 일부 역할을 하는 단백질 키나아제의 억제제는 B 세포-매개된 질환의 병증, 예컨대 자가항체 생산에 대한 유용한 치료제일 수 있다.

B 세포 수용체(BCR)를 통한 신호전달은 증식 및 분화를 비롯한 B 세포 반응의 범위를 성숙한 항체 생산 세포로 제어한다. BCR은 B 세포 활성에 대한 핵심 조절 요소이고, 이상 신호전달은 다수의 자가면역성 및/또는 염증성 질환을 야기하는 병원성 자가항체의 형성 및 비-조절된 B 세포 증식을 야기할 수 있다. 브루톤 티로신 키나아제(Btk)는, 막 근위이고 BCR의 바로 하류인 BCR-비결합 키나아제이다. Btk의 결핍은 BCR 신호전달을 차단하는 것으로 나타났고, 따라서 Btk의 억제는 B 세포 매개 질환 과정을 차단하는데 유용한 치료적 접근일 수 있다.

Btk는 티로신 키나아제의 Tec 패밀리의 일원이고, 초기 B 세포 발달 및 성숙한 B 세포 활성화 및 생존의 결정적인 조절자인 것으로 나타났다(문헌[Khan 등 Immunity 1995 3:283; Ellmeier 등 J. Exp. Med. 2000 192:1611]). 인간의 Btk 돌연변이는 X-연관성 무감마글로불린증(XLA) 증상을 야기한다(문헌[Rosen 등 New Eng. J. Med. 1995 333:431 및 Lindvall 등 Immunol. Rev. 2005 203:200]에서 검토됨). 이러한 환자들은 면역이 손상되었으며, B 세포의 성숙 장애, 감소된 면역글로불린 및 말초 B 세포 수준, 줄어든 T-세포 의존성 면역 반응뿐만 아니라 BCR 자극 후 약화된 칼슘 이동을 나타낸다.

자가면역성 및 염증성 질환에서 Btk의 일부 역할에 대한 증거는 또한 Btk-부족 마우스 모델에 의해 제공되었다. 전신 홍반성 루푸스(SLE)의 임상전 쥐과 모델에서, Btk-부족 마우스는 질환 진행의 현저한 개선을 나타낸다. 또한, Btk-부족 마우스는 콜라겐-유도 관절염에 대해 내성이 있다(문헌[Jansson 및 Holmdahl Clin. Exp. Immunol. 1993 94:459]). 선택적인 Btk 억제제는 마우스 관절염 모델에서 투여량에 의존적인 효력이 있는 것으로 입증되었다(문헌[Pan 등, Chem. Med Chem. 2007 2:58-61]).

Btk는 또한, 질환 과정에 관련될 수 있는 B 세포 이외의 세포에 의해 발현된다. 예를 들어, Btk는 비만 세포에 의해 발현되고, Btk-부족 골수 유래의 비만 세포는 항원-유도된 탈과립화(degranulation) 작용이 손상되었음을 입증한다(문헌[Iwaki 등 J. Biol. Chem. 2005 280:40261]). 이는 Btk가 병적 비만 세포 반응, 예컨대 알레르기 및 천식을 치료하는데 유용할 수 있음을 나타낸다. 또한, Btk 활성이 없는 XLA 환자로부터의 단핵백혈구는 자극 후 TNFα 생산 감소를 나타낸다(문헌[Horwood 등 J Exp Med 197:1603, 2003]). 따라서, TNFα-매개된 염증은 작은 분자의 Btk 억제제에 의해 조절될 수 있다. 또한, Btk는 세포자멸사(apoptosis)에 있어서 일부 역할을 하는 것으로 보고되었고(문헌[Islam and Smith Immunol. Rev. 2000 178:49]), 이로써 Btk 억제제는 특정 B 세포 림프종 및 백혈병의 치료에 유용할 수 있다(문헌[Feldhahn 등 J. Exp. Med. 2005 201:1837]).

본 발명은 하기 화학식 I의 Btk 억제제 화합물 및 본원에 후술되는 바와 같은 그의 사용 방법을 제공한다.

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:

[화학식 I]

상기 식에서,

는 단일 결합 또는 이중 결합이고;

X는 각각 독립적으로 CH, CH₂, CHX' 또는 N이고; X'는 저급 알킬이고;

R은 H, -R¹, -R¹-R²-R³, -R¹-R³ 또는 -R²-R³이고;

R¹은, 각각 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 할로, 나이트로, 아미노, 아미도, 시아노, 옥소 또는 저급 할로알킬로 치환되는, 아릴, 헤테로아릴, 이환형 헤테로아릴, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 또는 이환형 헤테로환이고;

R²는 -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)NR^2', -NHC(=O)O, -C(R^2')₂, -O, -S, -C(=NH)NR^2'또는 -S(=O)₂이고; R^2'는 각각 독립적으로 H 또는 저급 알킬이고;

R³은 H 또는 R⁴이고;

R⁴는, 각각 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 할로, 저급 알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 저급 알칸오일, 할로, 나이트로, 아미노, 아미도, 아실, 시아노, 옥소, 설폰일, 저급 알킬 설폰일, 구아니디노, 하이드록실 아미노, 카복시, 카밤오일, 카바메이트, 할로 저급 알콕시, 헤테로사이클로알킬 또는 할로 저급 알킬로 치환되는, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 저급 알콕시, 아미노, 저급 알킬 아미노, 사이클로알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 아릴, 아릴알킬, 알킬아릴, 헤테로아릴, 저급 알킬 헤테로아릴, 헤테로아릴 저급 알킬, 사이클로알킬, 저급 알킬 사이클로알킬, 사이클로알킬 저급 알킬, 헤테로사이클로알킬, 저급 알킬 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 저급 알킬, 이환형 사이클로알킬, 이환형 헤테로사이클로알킬, 스파이로사이클로알킬, 스파이로헤테로사이클로알킬 또는 이환형 스파이로헤테로사이클로알킬이고, 이때 2개의 저급 알킬 기는 함께 고리를 형성할 수 있고;

A, Y 및 Y¹은 각각 CH 또는 N이되, 단, A, Y 및 Y¹ 중 적어도 하나는 N이어야 하고;

Y²는 CH 또는 N이고;

Y³은 H 또는 F이고;

Y⁴는 Y^4a, Y^4b, Y^4c 또는 Y^4d이고;

Y^4a는 H 또는 할로겐이고;

Y^4b는, 임의적으로 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되는 저급 알킬이고;

Y^4c는, 임의적으로 저급 알킬, 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되는 저급 사이클로알킬이고;

Y^4d는, 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 알콕시 저급 알킬 또는 하이드록시 저급 알킬로 치환되는 아미노이다.

본 발명은, 화학식 I의 Btk 억제제 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 염증성 및/또는 자가면역성 증상 치료 방법을 제공한다.

본 발명은, 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합된 화학식 I의 Btk 억제제 화합물을 포함하는 약학 조성물을 제공한다.

정의

본원에서 "하나"의 개체는 하나 이상의 개체를 지칭한다. 예를 들어, 하나의 화합물은 하나 이상의 화합물 또는 적어도 하나의 화합물을 지칭한다. 마찬가지로, "하나", "하나 이상" 및 "적어도 하나"가 본원에서 상호교환적으로 사용될 수 있다.

본원에서 "상기에 정의된 바와 같은"이라는 어구는, 상기 발명의 내용에 제공된 각각의 그룹에 대한 최광의의 정의 또는 최광의의 청구범위를 지칭한다. 하기 제공되는 모든 다른 실시양태에서, 각각의 실시양태에 존재할 수 있고 명시적으로 정의되지 않은 치환기들은 상기 발명의 내용에 제공된 최광의의 정의를 유지한다.

본원 명세서에서 전이구 또는 청구항의 본문에 사용된 "포함한다" 및 "포함하는"이라는 용어는 개방-종지형 의미를 갖는 것으로 해석되어야 한다. 즉, 상기 용어는 "적어도 ~을 갖는" 또는 "적어도 ~을 포함하는"이라는 표현과 동의어로 해석되어야 한다. 방법의 문맥에 사용되는 경우, "포함하는"이라는 용어는, 이러한 방법이 적어도 언급된 단계를 포함하지만, 부가적인 단계도 포함할 수 있음을 의미한다. 화합물 또는 조성물의 문맥에 사용되는 경우, "포함하는"이라는 용어는, 화합물 또는 조성물이 적어도 언급된 특징 또는 성분을 포함하지만, 부가적인 특징 또는 성분도 포함할 수 있음을 의미한다.

달리 구체적으로 지시되지 않는 한, 본원에서 "또는"이라는 용어는, "및/또는"의 "포괄적" 의미로 사용되고, "~중 하나/또는"의 "독점적" 의미로 사용되지 않는다.

본원에서 "독립적으로"라는 용어는, 동일한 화합물 내에서 동일하거나 상이한 정의를 갖는 변수의 존재 또는 부재와 무관하게 임의의 경우에 변수가 적용됨을 나타내는 것으로 사용된다. 따라서, R"가 2번 나타나고 "독립적으로 탄소 또는 질소"로 정의되는 화합물에서, R"는 둘 다 탄소이거나, R"는 둘 다 질소이거나, 또는 하나의 R"는 탄소이고 나머지는 질소일 수 있다.

본 발명에서 사용되거나 청구되는 화합물을 도시하거나 기술하는 임의의 잔기 또는 화학식에서 임의의 변수가 1회보다 많이 나타나는 경우, 각각의 경우 그의 정의는 모든 다른 경우의 그의 정의와 독립적이다. 또한, 치환기 및/또는 변수의 조합은 그러한 화합물인 안정한 화합물을 제공하는 경우에만 허용된다.

결합의 말단에서의 "*" 또는 결합을 관통하여 도시된 "

" 기호는 각각 하나의 작용기 또는 다른 화학적 잔기가 분자의 나머지(이는 분자의 일부임)에 대해 부착되는 지점을 지칭한다. 따라서, 예컨대 R⁴가

또는

인 MeC(=O)OR⁴는

이다.

고리 시스템 내로 도시된 결합(별개의 정점에서 연결된 결합과는 상반됨)은 결합이 임의의 적합한 고리 원자에 부착될 수 있음을 나타낸다.

본원에서 "임의적" 또는 "임의적으로"라는 용어는, 후속적으로 기술된 사건 또는 상황이 필수적이지는 않지만 발생할 수 있고, 이러한 기재가 사건 또는 상황이 발생한 경우 및 발생하지 않은 경우를 포함함을 의미한다. 예컨대, "임의적으로 치환된"은 임의적으로 치환된 잔기가 수소 또는 치환기를 포함할 수 있음을 의미한다.

본원에서 "임의적 결합"이란, 존재하거나 존재하지 않을 수 있는 결합을 의미하며, 이러한 기술은 단일 결합, 이중 결합 또는 삼중 결합을 포함한다. 치환기가 "결합" 또는 "부재"로 지정되는 경우, 이 치환기에 연결된 원자는 직접 연결된다.

본원에서 "약"이라는 용어는, 대략, 근처의, 개략적으로 또는 대충을 의미하는 것으로 사용된다. "약"이라는 용어가 수치 범위와 함께 사용되는 경우, 이는 개시된 수치 범위 위 및 아래로 경계를 확장함으로써 범위를 변경한다. 일반적으로, "약"이라는 용어는, 본원에서 수치값을 언급한 값의 상하로 20%의 제곱편차로 변경하기 위해 이용된다.

본 발명의 특정 화합물은 호변이성질성을 나타낼 수 있다. 호변이성질성 화합물은 2개 이상의 상호전환가능한 종으로서 존재할 수 있다. 양성자성(prototropic) 호변이성질체는 2개의 원자 사이에 공유 결합된 수소 원자의 이동으로부터 유래한다. 호변이성질체는 일반적으로 평형상태로 존재하고, 개별적인 호변이성질체를 단리하기 위한 시도는 통상적으로 혼합물을 생성하며, 이 혼합물의 화학적 및 물리적 특성은 화합물들의 혼합물과 일치한다. 평형의 위치는 분자 내의 화학적 특징에 의존한다. 예를 들어, 많은 지방족 알데하이드 및 케톤, 예컨대 아세트알데하이드에서는 케토 형태가 우세한 반면, 페놀에서는 에놀 형태가 우세하다. 통상적인 양성자성 호변이성질체는 케토/에놀(

), 아마이드/이미드산(

) 및 아미딘(

) 호변이성질체를 포함한다. 이들 중 2개의 후자는 특히 헤테로아릴 및 헤테로환형 고리에서 통상적이며, 본 발명은 상기 화합물의 모든 호변이성질체 형태를 포괄한다.

본원에 사용된 기술적 및 과학적 용어는 달리 정의되지 않는 한 본 발명이 속하는 분야의 숙련자에 의해 통상적으로 이해되는 의미를 갖는다. 당업자에게 공지된 다양한 방법론 및 물질을 본원에 참고한다. 약리학의 일반적인 원리를 설명하는 표준 참고 문헌은 문헌[Goodman 및 Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th Ed., McGraw Hill Companies Inc., New York (2001)]을 포함한다. 당업자에게 공지된 임의의 적합한 물질 및/또는 방법을 본 발명의 실시에 이용할 수 있다. 그러나, 바람직한 물질 및 방법은 기술된다. 하기 명세서 및 실시예에 참고된 물질, 시약 등은 달리 지시되지 않는 한 상업적인 공급원으로부터 입수가능하다.

본원에 기술된 정의가 더해져 화학적으로 관련된 조합, 예컨대 "헤테로알킬아릴", "할로알킬헤테로아릴", "아릴알킬헤테로사이클일", "알킬카보닐", "알콕시알킬" 등을 형성할 수 있다. "알킬"이라는 용어가 "페닐알킬" 또는 "하이드록시알킬"에서와 같이 다른 용어 뒤에서 접미사로서 사용되는 경우, 이는 다른 구체적으로 명명된 기로부터 선택되는 1 또는 2개의 치환기로 치환된 알킬 기(상기 정의된 바와 같음)를 지칭한다. 따라서, 예컨대, "페닐알킬"은 1 또는 2개의 페닐 치환기를 갖는 알킬 기를 지칭하고, 이에 따라 벤질, 페닐에틸 및 바이페닐을 포함한다. "알킬아미노알킬"은 1 또는 2개의 알킬아미노 치환기를 갖는 알킬 기이다. "하이드록시알킬"은 2-하이드록시에틸, 2-하이드록시프로필, 1-(하이드록시메틸)-2-메틸프로필, 2-하이드록시부틸, 2,3-다이하이드록시부틸, 2-(하이드록시메틸), 3-하이드록시프로필 등을 포함한다. 따라서, 본원에서 "하이드록시알킬"이라는 용어는, 하기 정의된 헤테로알킬 기의 부분 집합을 정의하기 위해 사용된다. "-(아르)알킬"이라는 용어는, 비치환된 알킬 또는 아르알킬 기를 지칭한다. "(헤테로)아릴" 또는 "(헤트)아릴"이라는 용어는 아릴 또는 헤테로아릴 기를 지칭한다.

본원에서 "스파이로사이클로알킬"이라는 용어는, 스파이로환형 사이클로알킬기, 예컨대 스파이로[3.3]헵탄을 의미한다. 본원에서 "스파이로헤테로사이클로알킬"이라는 용어는 스파이로환형 헤테로사이클로알킬, 예컨대 2,6-다이아자 스파이로[3.3]헵탄을 의미한다.

본원에서 "아실"이라는 용어는, 구조식 -C(=O)R의 기(이때, R은 수소 또는 본원에 정의된 바와 같은 저급 알킬임)를 나타낸다. 본원에서 "알킬카보닐"이라는 용어는, 구조식 C(=O)R의 기(이때, R은 본원에 정의된 알킬임)를 나타낸다. "C_1-6 아실"이라는 용어는, 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 기 -C(=O)R을 지칭한다. 본원에서 "아릴카보닐"이라는 용어는, 구조식 C(=O)R의 기(이때, R은 아릴 기임)를 의미하고, 본원에서 "벤조일"이라는 용어는, R이 페닐인 "아릴카보닐" 기이다.

본원에서 "에스터"라는 용어는, 화학식 -C(=O)OR(R은 본원에 정의된 바와 같은 저급 알킬임)의 기를 지칭한다.

본원에서 "알킬"이라는 용어는, 1 내지 10개의 탄소 원자를 함유하는 포화된 1가 비분지쇄 또는 분지쇄 탄화수소 잔기를 나타낸다. "저급 알킬"이라는 용어는, 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 잔기를 나타낸다. 본원에서 "C_1-10 알킬"이라는 용어는, 1 내지 10개의 탄소로 이루어진 알킬을 지칭한다. 알킬 기의 예는, 비제한적으로 저급 알킬 기, 예컨대 메틸, 에틸, 프로필, i-프로필, n-부틸, i-부틸, t-부틸 또는 펜틸, 아이소펜틸, 네오펜틸, 헥실, 헵틸 및 옥틸을 포함한다.

"알킬"이라는 용어가 "페닐알킬" 또는 "하이드록시알킬"에서와 같이 다른 용어에 후행하는 접미사로서 사용되는 경우, 이는 다른 구체적으로-지칭된 기로부터 선택되는 1 또는 2개의 치환기에 의해 치환된 알킬 기(상기 정의된 바와 같음)를 지칭하는 것으로 의도된다. 따라서, 예컨대 "페닐알킬"은 R'R"- 라디칼을 나타내되, 이때 R'는 페닐 라디칼이고, R"는 본원에 정의된 바와 같은 알킬렌 라디칼이며, 이때 상기 페닐알킬 잔기의 부착점은 알킬렌 라디칼 상에 존재하는 것으로 이해된다. 아릴알킬 라디칼의 예는, 비제한적으로 벤질, 페닐에틸, 3-페닐프로필을 포함한다. "아릴알킬" 또는 "아르알킬"이라는 용어는, R'가 아릴 라디칼인 것을 제외하고는 유사하게 해석된다. "(헤트)아릴알킬" 또는 "(헤트)아르알킬"이라는 용어는, R'가 임의적으로 아릴 또는 헤테로아릴 라디칼인 것을 제외하고는 유사하게 해석된다.

본원에서 "할로알킬" 또는 "할로-저급 알킬" 또는 "저급 할로알킬"이라는 용어는, 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 잔기를 지칭하며, 이때 하나 이상의 탄소 원자는 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된다.

본원에서 "알킬렌" 또는 "알킬렌일"이라는 용어는, 달리 지시되지 않는 한, 1 내지 10개의 탄소 원자로 이루어진 포화된 2가 선형 탄화수소 라디칼(예컨대, (CH₂)_n), 또는 2 내지 10개의 탄소 원자로 이루어진 포화된 2가 분지형 탄화수소 라디칼(예컨대, -CHMe- 또는 -CH₂CH(i-Pr)CH₂-)을 나타낸다. 메틸렌인 경우를 제외하고는, 알킬렌 기의 개방 원자가(open valence) 전자는 동일한 원자에 부착되지 않는다. 알킬렌 라디칼의 예는, 비제한적으로 메틸렌, 에틸렌, 프로필렌, 2-메틸-프로필렌, 1,1-다이메틸-에틸렌, 부틸렌, 2-에틸부틸렌을 포함한다.

본원에서 "알콕시"라는 용어는, -O-알킬 기(이때, 알킬은 상기 정의된 바와 같음), 예컨대 메톡시, 에톡시, n-프로필옥시, i-프로필옥시, n-부틸옥시, i-부틸옥시, 3급-부틸옥시, 펜틸옥시, 헥실옥시 및 이들의 이성질체를 의미한다. 본원에 서 "저급 알콕시"는, 상기 정의된 바와 같은 "저급 알킬" 기를 갖는 알콕시 기를 나타낸다. 본원에서 "C₁ _-10 알콕시"는, 알킬이 C₁ _-10인 -O-알킬을 지칭한다.

"PCy₃"이라는 용어는, 3개의 환형 잔기로 삼치환된 포스핀을 지칭한다.

본원에서 "할로알콕시" 또는 "할로-저급 알콕시" 또는 "저급 할로알콕시"라는 용어는 저급 알콕시 기를 지칭하며, 이때 하나 이상의 탄소 원자는 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된다.

본원에서 "하이드록시알킬"이라는 용어는, 상이한 탄소 원자 상의 1 내지 3개의 수소 원자가 하이드록실 기로 대체된 알킬 라디칼을 의미한다.

본원에서 "알킬설폰일" 및 "아릴설폰일"이라는 용어는 화학식 -S(=O)₂R의 기를 지칭하며, 이때 R은 각각 알킬 또는 아릴이고, 알킬 및 아릴은 본원에 정의된 바와 같다. 본원에서 "헤테로알킬설폰일"이라는 용어는 화학식 -S(=O)₂R의 기를 지칭하며, 이때 R은 본원에 정의된 바와 같은 "헤테로알킬"이다.

본원에서 "알킬설폰일아미노" 및 "아릴설폰일아미노"라는 용어는 화학식 -NR'S(=O)₂R의 기를 지칭하며, 이때 R은 각각 알킬 또는 아릴이고, R'는 수소 또는 C₁ _-3 알킬이고, 알킬 및 아릴은 본원에 정의된 바와 같다.

본원에서 "사이클로알킬"이라는 용어는, 3 내지 8개의 탄소 원자를 포함하는 포화된 탄소환형 고리, 즉 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 아다만틸, 사이클로헵틸 또는 사이클로옥틸을 지칭한다. 본원에서 "C₃ _-7 사이클로알킬"이란, 탄소환형 고리 내에 3 내지 7개의 탄소로 이루어진 사이클로알킬을 지칭한다.

본원에서 "카복시-알킬"이라는 용어는, 1개의 수소 원자가 카복실로 치환된 알킬 잔기를 지칭하며, 이때 헤테로알킬 라디칼의 부착 지점은 탄소 원자를 통해서라고 이해된다. "카복시" 또는 "카복실"이라는 용어는, -CO₂H 잔기를 지칭한다.

본원에서 "헤테로아릴" 또는 "헤테로방향족"이라는 용어는, 하나 이상의 N, O 또는 S 헤테로원자가 혼입되고 고리 당 4 내지 8개의 원자를 함유하는 하나 이상의 방향족 또는 부분적 불포화된 고리를 갖는 5 내지 12개의 고리 원자(남은 고리 원자는 탄소임)의 일환형 또는 이환형 라디칼을 의미하며, 헤테로아릴 라디칼의 부착 지점은 방향족 고리 또는 부분적 불포화된 고리 상에 존재한다고 이해된다. 당업자에게 널리 공지된 바와 같이, 헤테로아릴 고리는 이의 모든 탄소 대응자 보다 방향족 특성을 덜 갖는다. 따라서, 본 발명의 목적을 위해, 헤테로아릴기는 어느 정도의 방향족 특성만 가질 필요가 있다. 헤테로아릴 잔기의 예는, 5 또는 6개의 고리 원자 및 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 일환형 방향족 헤테로환을 포함하며, 비제한적으로, 임의적으로 하이드록시, 시아노, 알킬, 알콕시, 티오, 저급 할로알콕시, 알킬티오, 할로, 저급 할로알킬, 알킬설핀일, 알킬설폰일, 할로겐, 아미노, 알킬아미노, 다이알킬아미노, 아미노알킬, 알킬아미노알킬 및 다이알킬아미노알킬, 니트로, 알콕시카보닐 및 카바모일, 알킬카바모일, 다이알킬카바모일, 아릴카바모일, 알킬카보닐아미노 및 아릴카보닐아미노로부터 선택된 하나 이상의, 바람직하게는 1 또는 2개의 치환체로 치환될 수 있는 피리딘일, 피리미딘일, 피라진일, 옥사진일, 피롤일, 피라졸일, 이미다졸일, 옥사졸일, 4,5-다이하이드로-옥사졸일, 5,6-다이하이드로-4H-[1,3]옥사졸일, 이속사졸, 티아졸, 이소티아졸, 트라이아졸린, 티아다이아졸 및 옥사다이아졸린을 포함다. 이환형 잔기의 예는, 비제한적으로, 퀴놀린일, 이소퀴놀린일, 벤조푸릴, 벤조티오페닐, 벤즈옥사졸, 벤즈이속사졸, 벤조티아졸, 나프티리딘일, 5,6,7,8-테트라하이드로-[1,6]나프티리딘일 및 벤즈이소티아졸을 포함한다. 이환형 잔기는 임의적으로 다른 고리 상에 치환될 수 있으나, 부착 지점은 헤테로원자를 함유하는 고리 상에 있다.

본원에서 "헤테로사이클일", "헤테로사이클로알킬" 또는 "헤테로사이클"이라는 용어는, 고리 당 하나 이상의 고리 헤테로원자(N, O 및 S(O)_0-2로부터 선택됨)를 포함하여 3 내지 8개의 원자의 스파이로환형 고리 시스템을 포함하는 하나 이상의 고리, 바람직하게는 1 내지 2개의 고리로 이루어진 1가 포화된 환형 라디칼을 지칭하며, 달리 기재되지 않는 한, 이들은 임의적으로 하이드록시, 옥소, 시아노, 저급 알킬, 저급 알콕시, 저급 할로알콕시, 알킬티오, 할로, 저급 할로알킬, 하이드록시알킬, 니트로, 알콕시카보닐, 아미노, 알킬아미노, 알킬설폰일, 아릴설폰일, 알킬아미노설폰일, 아릴아미노설폰일, 알킬설폰일아미노, 아릴설폰일아미노, 알킬아미노카보닐, 아릴아미노카보닐, 알킬카보닐아미노, 아릴카보닐아미노 및 이들의 이온 형태로부터 선택되는 하나 이상, 바람직하게는 1 또는 2개의 치환기로 독립적으로 치환될 수 있다. 헤테로환형 라디칼의 예는, 비제한적으로 모폴린일, 피페라진일, 피페리딘일, 아제티딘일, 피롤리딘일, 헥사하이드로아제핀일, 옥세탄일, 테트라하이드로푸란일, 테트라하이드로티오페닐, 옥사졸리딘일, 티아졸리딘일, 아이속사졸리딘일, 테트라하이드로피란일, 티오모폴린일, 퀴누클리딘일 및 이미다졸린일 및 이들의 이온 형태를 포함한다. 또한, 예를 들어 3,8-다이아자-바이사이클로[3.2.1]옥탄, 2,5-다이아자-바이사이클로[2.2.2]옥탄 또는 옥타하이드로-피라지노[2,1-c][1,4]옥사진일 수 있다.

Btk 의 억제제

본 발명은, 2009년 6월 24일에 출원된 미국 특허 제 7,902,194 호, 2010년 2월 24일에 출원된 미국 특허 출원 제 12/711,312 호 및 2011년 1월 10일에 출원된 미국 특허 출원 제 12/978,187 호와 관련되며, 이들 특허 전체를 본원에 참고로 인용한다.

연결기(linker) 위치에서 표준 아릴 고리 연결기가 피리딜로 대체된 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I의 화합물은, 명백히 구별되고 예상치 못하게 개선된 특징, 예를 들어 (1) 가용성의 일반적인 증가, (2) 양친매성 벡터가 덜 두드러지는 바와 같이, 골격(scaffold) 전반에 걸쳐 극성 분포의 증가된 균일성, 및 (3) 혈장 단백질 결합의 일반적인 개선(이는 인간 및 래트 혈장에서 약물의 자유 농도의 증가를 제공함)을 제공한다.

[화학식 I]

상기 식에서,

는 단일 결합 또는 이중 결합이고;

R은 H, -R¹, -R¹-R²-R³, -R¹-R³ 또는 -R²-R³이고;

R³은 H 또는 R⁴이고;

Y²는 CH 또는 N이고;

Y³은 H 또는 F이고;

Y⁴는 Y^4a, Y^4b, Y^4c 또는 Y^4d이고;

Y^4a는 H 또는 할로겐이고;

본 발명은 X가 CH인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 X가 N인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 이중 결합인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 단일 결합인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 이중 결합이고 X가 CH인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 단일 결합이고 X가 CH₂인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 단일 결합이고 X가 CHR'인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 이중 결합이고 X가 N인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 단일 결합이고 X가 NH인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 단일 결합이고 X가 NR'인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 A가 CH이고, Y가 CH이고, Y¹이 N인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 A가 N이고, Y가 CH이고, Y¹이 CH인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 A가 CH이고, Y가 N이고, Y¹이 CH인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 이중 결합이고, X가 N이고, A가 CH이고, Y가 CH이고, Y¹이 N인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 X가 CH이고, A가 CH이고, Y가 CH이고, Y¹이 N인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y³이 H이고,

본 발명은 Y³이 F이고,

본 발명은 Y⁴가 3급-부틸이고, Y³이 F이고,

본 발명은 A가 CH이고, Y가 CH이고, Y¹이 N이고, Y²가 N인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y²가 CH인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y²가 N인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y가 N이고 Y¹이 CH인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y²가 CH이고, Y가 N이고, Y¹이 CH인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 이중 결합이고, X가 N이고, Y²가 CH이고, Y가 N이고, Y¹이 CH인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y³이 H인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y³이 F인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 이중 결합이고, X가 N이고, Y³이 F인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y⁴가 사이클로프로필인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 이중 결합이고, X가 N이고, Y⁴가 사이클로프로필인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y³이 F이고, Y⁴가 사이클로프로필인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 이중 결합이고, X가 N이고, Y³이 F이고, Y⁴가 사이클로프로필인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y⁴가 다이메틸아미노인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 이중 결합이고, X가 N이고, Y⁴가 다이메틸아미노인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y³이 F이고, Y⁴가 다이메틸아미노인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 이중 결합이고, X가 N이고, Y³이 F이고, Y⁴가 다이메틸아미노인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 이중 결합이고, X가 N이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 Y³이 F이고 Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 이중 결합이고, X가 N이고, Y³이 F이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -C(=O)이고, R³이 모폴린일인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -C(=O)이고, R³이 모폴린일이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -C(=O)이고, R³이 모폴린일이고,

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -C(=O)이고, R³이 모폴린일이고, Y³이 F이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 R¹이고, R¹이, 임의적으로 저급 알킬, 헤테로사이클로알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬 저급 알킬로 치환되는 4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일인인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R¹이고, R¹이, 임의적으로 저급 알킬, 헤테로사이클로알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬 저급 알킬로 치환되는 4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 R¹이고, R¹이, 임의적으로 저급 알킬, 헤테로사이클로알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬 저급 알킬로 치환되는 4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일이고,

본 발명은 R이 R¹이고, R¹이, 임의적으로 저급 알킬, 헤테로사이클로알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬 저급 알킬로 치환되는 4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일이고, Y³이 F이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R³이고, R¹이 피리딜이고, R³이 저급 알킬 헤테로사이클로알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R³이고, R¹이 피리딜이고, R³이 저급 알킬 헤테로사이클로알킬이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R³이고, R¹이 피리딜이고, R³이 저급 알킬 헤테로사이클로알킬이고,

본 발명은 R이 -R¹-R³이고, R¹이 피리딜이고, R³이 저급 알킬 헤테로사이클로알킬이고, Y³이 F이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -O이고, R³이, 임의적으로 하나 이상의 할로로 치환되는 헤테로사이클로알킬 저급 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³, R¹이 피리딜이고, R²가 -O이고, R³이, 임의적으로 하나 이상의 할로로 치환되는 헤테로사이클로알킬 저급 알킬이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -O이고, R³이, 임의적으로 하나 이상의 할로로 치환되는 헤테로사이클로알킬 저급 알킬이고,

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -O, R³이, 임의적으로 하나 이상의 할로로 치환되는 헤테로사이클로알킬 저급 알킬이고, Y³이 F이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -C(=O)이고, R³이 다이메틸아미노인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -C(=O)이고, R³이 다이메틸아미노이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -C(=O)이고, R³이 다이메틸아미노이고, 가 이중 결합이고, X가 N이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -C(=O)이고, R³이 다이메틸아미노이고, Y³이 F이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -C(=O)이고, R³이 다이메틸아미노이고,

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -S(=O)₂이고, R³이 메틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -S(=O)₂이고, R³이 메틸이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -S(=O)₂이고, R³이 메틸이고,

본 발명은 R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -S(=O)₂이고, R³이 메틸이고, Y³이 F이고, Y⁴가 3급-부틸인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은

가 이중 결합이고, Y²가 N이고, X가 N이고, Y¹이 N이고, Y³이 F이고, Y⁴가 3급-부틸이고, A가 CH이고, Y가 CH인 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 하기 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식 I의 화합물 을 제공한다:

6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온;

6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-하이드록시메틸-4-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-피리딘-2-일)-2H-프탈라진-1-온;

6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-하이드록시메틸-4-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-피리딘-2-일)-2H-프탈라진-1-온;

6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[5-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온;

6-{6-[2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-4-일]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N,N-다이메틸-니코틴아마이드;

6-{6-[2-(6-사이클로프로필-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-4-일]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N,N-다이메틸-니코틴아마이드;

6-3급-부틸-2-(3-하이드록시메틸-4-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-피리딘-2-일)-2H-프탈라진-1-온;

2'-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-1H-[3,4']바이피리딘일-6-온;

2'-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3'-하이드록시메틸-5-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-1H-[3,4']바이피리딘일-6-온;

6-[2'-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-5-일아미노]-N,N-다이메틸-니코틴아마이드;

2'-(6-사이클로프로필-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-1H-[3,4']바이피리딘일-6-온;

6-3급-부틸-2-(3-하이드록시메틸-4-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-피리딘-2-일)-2H-프탈라진-1-온;

6-3급-부틸-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온;

6-3급-부틸-2-{4-[5-(1'-에틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;

2-(4-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일)-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;

2-(4-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일)-6-3급-부틸-2H-프탈라진-1-온;

2-{4-[5-(5-아제티딘-1-일메틸-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;

6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온;

6-3급-부틸-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온;

6-사이클로프로필-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-아이소퀴놀린-1-온;

6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온;

6-3급-부틸-2-{4-[5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;

6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-아이소퀴놀린-1-온;

6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-아이소퀴놀린-1-온;

6-3급-부틸-2-{4-[5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-8-플루오로-2H-아이소퀴놀린-1-온;

6-3급-부틸-2-{4-[5-(5-사이클로프로필메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;

6-3급-부틸-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일]-8-플루오로-2H-아이소퀴놀린-1-온;

4-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3-하이드록시메틸-1'-메틸-5'-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-1'H-[2,3']바이피리딘일-6'-온,

4-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3-하이드록시메틸-5'-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1'-메틸-1'H-[2,3']바이피리딘일-6'-온;

6-3급-부틸-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일]-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;

2-(8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-1-옥소-1,2-다이하이드로-아이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오나이트릴;

2-{2-[4-(5-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일]-8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로-아이소퀴놀린-6-일}-2-메틸-프로피오나이트릴;

6-3급-부틸-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일]-2H-프탈라진-1-온; 및

6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-5-옥시-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온.

본 발명은, 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 염증성 및/또는 자가면역성 증상 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 류마티스성 관절염 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 천식 치료 방법을 제공한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물을 포함하는 약학 조성물을 제공한다.

본 발명은, 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합된 화학식 I의 화합물을 포함하는 약학 조성물을 제공한다.

본 발명은 치료 활성 성분으로 사용하기 위한 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 염증성 장애의 치료용 약제를 제조하는데 있어서 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.

본 발명은 자가면역성 장애의 치료용 약제를 제조하는데 있어서 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.

본 발명은 류마티스성 관절염 치료용 약제를 제조하는데 있어서 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.

본 발명은 천식 치료용 약제를 제조하는데 있어서 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.

본 발명은 염증성 장애의 치료를 위한 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.

본 발명은 자가면역성 장애의 치료를 위한 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.

본 발명은 류마티스성 관절염 치료를 위한 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.

본 발명은 천식 치료를 위한 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.

본 발명은 염증성 장애의 치료에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 자가면역성 장애의 치료에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 류마티스성 관절염 치료에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 천식 치료에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물을 제공한다.

본 발명은 본원에 기술된 바와 같은 화합물, 방법 또는 조성물을 제공한다.

Btk 억제제 화합물

본 발명에 포함되고 본 발명의 범주 이내인 대표적인 화합물의 예를 하기 표에 제시한다. 당업자로 하여금 본 발명을 더욱 명확하게 이해하고 실행할 수 있도록 하기 실시예 및 제조 방법을 제공한다. 이들은 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 간주되어서는 안되며, 단지 본 발명을 예시하고 대표하는 것으로 간주된다.

일반적으로, 본원에 사용된 명명법은 IUPAC 체계화 명명법의 생성을 위한 바일슈타인 인스티튜트(Beilstein Institute) 컴퓨터화된 시스템인 오토놈(AUTONOM, 상표명) v.4.0에 기초한다. 도시된 구조와 그 구조에 제시된 명칭이 불일치하는 경우, 도시된 구조 쪽에 좀더 무게를 두어야 한다. 또한, 구조의 입체화학 또는 구조의 일부가 예를 들어 볼드체로 또는 점선으로 지시되지 않는 경우, 이러한 구조 또는 구조의 일부는 모든 입체 이성질체를 포괄하는 것으로 해석되어야 한다.

하기 표 1은 화학식 I에 따른 피리다진온 화합물의 예를 도시한다.

[표 1]

합성

일반 합성 반응식

하기 일반 반응식에서, Y³은 H 또는 F이고; Y⁴는 Y^4a, Y^4b, Y^4c 또는 Y^4d이고; Y^4a는 H 또는 할로겐이고; Y^4b는, 임의적으로 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되는 저급 알킬이고; Y^4c는, 임의적으로 저급 알킬, 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되는 저급 사이클로알킬이고; Y^4d는, 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 알콕시 저급 알킬 또는 하이드록시 저급 알킬로 치환되는 아미노일 수 있다. 여기서, X는 CH 또는 N이고; R은 H, -R¹, -R¹-R²-R³, -R¹-R³ 또는 -R²-R³이고; R¹은, 각각 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 할로, 나이트로, 아미노, 아미도, 시아노, 옥소 또는 저급 할로알킬로 치환될 수 있는, 아릴, 헤테로아릴, 이환형 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이고; R²는 -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)NR^2' -NHC(=O)O, -C(R^2')₂, -O, -S, -C(=NH)NR^2' 또는 -S(=O)₂이고; R^2'는 각각 독립적으로 H 또는 저급 알킬이고; R³은 H 또는 R⁴이고; R⁴는, 각각 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 할로, 저급 알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 저급 알칸오일, 할로, 나이트로, 아미노, 아미도, 아실, 시아노, 옥소, 설폰일, 저급 알킬 설폰일, 구아니디노, 하이드록실 아미노, 카복시, 카밤오일, 카바메이트, 할로 저급 알콕시, 헤테로사이클로알킬 또는 할로 저급 알킬로 치환될 수 있는, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 저급 알콕시, 아미노, 저급 알킬 아미노, 사이클로알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 아릴, 아릴알킬, 알킬아릴, 헤테로아릴, 알킬 헤테로아릴, 저급 알킬 헤테로아릴, 헤테로아릴 알킬, 헤테로아릴 저급 알킬, 사이클로알킬, 알킬 사이클로알킬, 저급 알킬 사이클로알킬, 사이클로알킬 알킬, 사이클로알킬 저급 알킬, 헤테로사이클로알킬, 알킬 헤테로사이클로알킬, 저급 알킬 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 알킬, 헤테로사이클로알킬 저급 알킬, 이환형 사이클로알킬, 이환형 헤테로사이클로알킬, 스파이로사이클로알킬, 스파이로헤테로사이클로알킬 또는 이환형 스파이로헤테로사이클로알킬이고, 이때 2개의 저급 알킬 기는 함께 고리를 형성할 수 있고; R'는 H, 저급 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬 저급 알킬 또는 헤테로사이클로알킬 또는 저급 할로알킬이고; R^3'는 H 또는 저급 알킬이거나, 함께 스파이로 사이클로알킬을 형성하고; R^4'는 H 또는 저급 알킬이거나, 함께, 임의적으로 할로겐으로 치환된 헤테로사이클로알킬을 형성한다.

[반응식 1-3]

[반응식 2]

[반응식 3a-3b]

[반응식 4]

[반응식 5]

[반응식 6]

[반응식 7]

[반응식 8]

상기 식에서, R은 H, 저급 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬 저급 알킬 또는 헤테로사이클로알킬 또는 저급 할로알킬일 수 있다.

[반응식 9]

[반응식 10]

[반응식 11]

약학 조성물 및 투여

본 발명의 화합물은 광범위한 경구 투여 형태 및 담체에 제형화될 수 있다. 경구 투여는, 정제, 코팅된 정제, 당의정, 경질 및 연질 젤라틴 캡슐, 용액, 에멀션, 시럽 또는 현탁액의 형태일 수 있다. 본 발명의 화합물은, 다른 투여 경로들 중 특히, 연속(정맥내 드립) 국소 비경구, 근육내, 정맥내, 피하, 경피(침투 증강제를 포함할 수 있음), 협측, 비강, 흡입 및 좌제를 포함하는 기타 투여 경로로 투여될 때 효과적이다. 바람직한 투여 방식은 일반적으로, 활성 성분에 대한 환자의 응답성 및 고통의 정도에 따라 조정될 수 있는 편리한 일일 투여량 요법을 이용하는 경구식이다.

본 발명의 화합물 및 그의 약학적으로 이용가능한 염은, 하나 이상의 통상적인 부형제, 담체 또는 희석제와 함께, 약학 조성물 및 단위 투여량의 형태로 할 수 있다. 약학 조성물 및 단위 투여량 형태는, 추가적인 활성 화합물 또는 주성분(principles)의 존재 또는 부재 하에, 통상적인 비율의 통상적인 성분들로 이루어질 수 있고, 단위 투여량 형태는 채용될 의도하는 매일 투여량 범위에 상응하는 임의의 적합한 치료 효과량의 활성 성분을 포함할 수 있다. 약학 조성물은, 정제 또는 충전된 캡슐, 반고형제, 분말, 서방성 제형과 같은 고체로; 용액, 현탁액, 에멀션, 엘릭서 또는 경구용의 충전된 캡슐과 같은 액체로; 직장 내 또는 질내 투여용의 좌제의 형태로; 또는 비경구적 용도를 위한 멸균 주사 용액의 형태로 사용될 수 있다. 전형적인 제제는 약 5 중량% 내지 약 95 중량%의 활성 화합물 또는 화합물들을 포함할 것이다. "제제" 또는 "투여 형태"라는 용어는, 활성 성분의 고체 및 액체 제형 둘 다를 포함하는 것으로 의도되며, 당업자는 활성 성분이 표적 장기 또는 조직에 따라 또한 목적하는 투여량 및 약동학적 파라미터에 따라 상이한 제제로 존재할 수 있음을 인지할 것이다.

본원에서 "부형제"라는 용어는, 일반적으로 안전하고, 무독성이고, 생물학적으로나 또는 이외에도 바람직하지 않은 것이 아닌 화합물을 지칭하고, 수의학적 용도뿐만 아니라 인간의 약학적 용도를 위해 허용가능한 부형제를 포함한다. 본 발명의 화합물은 단독으로 투여될 수 있으나, 일반적으로는 의도하는 투여 경로 및 표준 약학적 실시를 감안하여 선택되는 하나 이상의 적합한 약학적 부형제, 희석제 또는 담체와 혼합되어 투여된다.

"약학적으로 허용가능한"이란, 일반적으로 안전하고, 무독성이고, 생물학적으로나 또는 그외에도 바람직하지 않은 것이 아니며, 약학 조성물 제조에 유용한 것을 의미하고, 수의학적 용도뿐만 아니라 인간의 약학적 용도에도 허용되는 것이 포함된다.

활성 성분의 "약학적으로 허용가능한 염" 형태는 또한, 비-염 형태에서는 부재하는, 활성 성분에 대한 바람직한 약동학적 특성을 초기에 부여할 수 있고, 심지어는 신체에서의 그의 치료 활성과 관련하여 활성 성분의 약력학에 긍정적으로 영향을 줄 수도 있다. 화합물의 "약학적으로 허용가능한 염"이라는 어구는, 약학적으로 허용되고 본 발명의 바람직한 약학적 활성을 보유하는 염을 의미한다. 상기 염은 하기를 포함한다: (1) 염산, 하이드로브롬산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기산으로 형성되거나, 또는 아세트산, 프로피온산, 헥산산, 사이클로펜탄프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 숙신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 3-(4-하이드록시벤조일)벤조산, 신남산, 만델산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 1,2-에탄-다이설폰산, 2-하이드록시에탄설폰산, 벤젠설폰산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캠퍼설폰산, 4-메틸바이사이클로[2.2.2]-옥트-2-엔-1-카복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로피온산, 트라이메틸아세트산, 3급-부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 하이드록시나프토산, 살리실산, 스테아르산, 뮤콘산 등과 같은 유기산으로 형성된 산 부가염; 또는 (2) 모 화합물에 존재하는 산성 양성자가 금속 이온, 예를 들어, 알칼리 금속 이온, 알칼리 토금속 이온 또는 알루미늄 이온에 의해 치환되는 경우 형성되거나, 또는 에탄올아민, 다이에탄올아민, 트라이에탄올아민, 트로메타민, N-메틸글루카민 등과 같은 유기 염기로 배위되는 경우 형성되는 염.

고체 형태 제제는, 분말, 정제, 필, 캡슐, 샤쉐, 좌제 및 분산가능한 과립을 포함한다. 고체 담체는, 희석제, 향미제, 가용화제, 윤활제, 현탁제, 결합제, 보존제, 정제 붕해제 또는 캡슐화 물질로서도 작용할 수 있는 하나 이상의 성분일 수 있다. 분말에서, 담체는 일반적으로, 미분된 활성 성분과 함께 혼합물을 이루는 미분된 고체이다. 정제에서, 활성 성분은 일반적으로 적합한 비율로 필요한 결합 용량을 가진 담체와 혼합되고, 원하는 모양 및 크기로 압착된다. 적합한 담체는, 비제한적으로 마그네슘 카보네이트, 마그네슘 스테아레이트, 활석, 당, 락토오스, 펙틴, 덱스트린, 전분, 젤라틴, 트래거캔트, 메틸셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 저융점 왁스, 코코아 버터 등을 포함한다. 고체 형태 제제는, 활성 성분에 추가하여, 색소, 향미제, 안정화제, 완충제, 인공 및 천연 감미제, 분산제, 증점제, 가용화제 등을 포함할 수 있다.

액체 제형이 또한 경구 투여에 적합하고, 이는 에멀션, 시럽, 엘릭서, 수용액, 수성 현탁액을 포함하는 액체 제형을 포함한다. 이는, 사용 직전에 액체 형태 제제로 변환시키려는 의도의 고체 형태 제제를 포함한다. 에멀션은 용액, 예를 들어 수성 프로필렌 글리콜 용액에서 제조될 수 있거나, 또는 레시틴, 소르비탄 모노올레에이트 또는 아카시아와 같은 에멀션화제를 포함할 수 있다. 수용액은, 활성 성분을 물에 용해시키고, 적합한 색소, 향미제, 안정화제 및 증점제를 첨가하여 제조될 수 있다. 수성 현탁액은 미분된 활성 성분을, 천연 또는 합성 검, 수지, 메틸 셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스 및 기타 널리 공지된 현탁제와 같은 점성질 물질과 함께 물에 분산시켜 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물은 비경구 투여용(예를 들어, 주사, 예를 들어 볼루스 주사 또는 연속 주입에 의한 투여)으로 제형화될 수 있고, 앰플, 사전-충전된 주사기, 소용량 주입물, 또는 보존제가 첨가된 다중-투여 용기에 단위 투여량 형태로 제공될 수 있다. 상기 조성물은, 오일성 또는 수성 비히클 중의 현탁액, 용액, 또는 에멀션의 형태로, 예를 들어 수성 폴리에틸렌 글리콜 중의 용액과 같은 형태를 취할 수 있다. 오일성 또는 비수성 담체, 희석제, 용매 또는 비히클의 예는, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일(예를 들어, 올리브 오일) 및 주사가능한 유기 에스터(예를 들어, 에틸 올레에이트)를 포함하고, 보존제, 습윤제, 에멀션화제 또는 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제와 같은 제형 보조제를 포함할 수 있다. 다르게는, 활성 성분은 멸균 고체의 무균 분리에 의해 또는 적합한 비히클(예컨대, 멸균되고 발열원이 없는 물)을 이용하여 사용하기 전에 구성하기 위한 용액으로부터의 동결건조에 의해 수득되는 분말 형태일 수 있다.

본 발명의 화합물은 피부에 바르는 연고, 크림 또는 로션으로서, 또는 경피 패치로서 국소 투여용으로 제형화 될 수 있다. 연고 및 크림은, 예를 들어 적합한 증점제 및/또는 겔화제를 첨가하여 수성 또는 오일성 염기를 이용하여 제형화될 수 있다. 로션은 수성 또는 오일성 염기를 이용해 제형화될 수 있고, 또한 일반적으로 하나 이상의 에멀션화제, 안정화제, 분산제, 현탁제, 증점제 또는 착색제를 포함할 것이다. 구강에서의 국소 투여에 적합한 제형은, 풍미화된 베이스(일반적으로, 수크로오스 및 아카시아) 또는 트래거캔트 중에 활성 성분을 함유하는 로젠지; 비활성 베이스(젤라틴과 글리세린 또는 수크로스와 아카시아) 중에 활성 성분을 함유하는 향정(pastille); 및 적합한 액체 담체에 활성 성분을 함유하는 구강 세정제를 포함한다.

본 발명의 화합물은 좌제로 투여하기 위해 제형화될 수 있다. 지방산 글리세라이드 또는 코코아 버터의 혼합물과 같은 저융점 왁스를 먼저 용융시키고, 활성 성분을, 예를 들어 교반하면서 균일하게 분산시킨다. 이어서, 용융된 균질 혼합물은 통상적인 크기의 성형 틀에 부어 냉각시키고, 고형화시킨다.

본 발명의 화합물은 질내 투여용으로 제형화될 수 있다. 활성 성분에 추가하여 상기 담체들을 포함하는 페서리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 발포제 또는 스프레이가 당업계에서 적당한 것으로 공지되어 있다.

본 발명의 화합물은 비강 투여용으로 제형화될 수 있다. 용액 또는 현탁액은 통상적인 수단, 예를 들어 점적기, 피펫 또는 스프레이를 이용하는 통상적인 수단에 의해 비강으로 직접 적용된다. 제형은 단일 또는 다중 투여량 형태로 제공될 수 있다. 점적기 또는 피펫의 후자의 경우, 이는 적당한 사전-결정된 부피의 용액 또는 현탁액을 환자에게 투여하여 달성될 수 있다. 스프레이의 경우, 이는 예를 들어 계량 분무 스프레이 펌프(metering atomizing spray pump)를 수단으로 하여 달성될 수 있다.

본 발명의 화합물은 비강내 투여를 비롯한, 특히 호흡기에 대한 에어로졸 투여용으로 제형화될 수 있다. 상기 화합물은 일반적으로, 예를 들어 5 마이크론 이하 정도의 작은 입자 크기를 갖는다. 상기 입자 크기는, 당업계에 공지된 수단, 예를 들어 마이크로화(micronization)에 의해 수득될 수 있다. 활성 성분은 클로로플루오로 탄소(CFC), 예를 들어 다이클로로다이플루오로메탄, 트라이클로로플루오로메탄 또는 다이클로로테트라플루오로에탄, 또는 이산화탄소 또는 기타 적합한 기체와 같은 적합한 추진체를 이용한 압축 팩에 제공된다. 에어로졸은 또한 통상적으로 레시틴과 같은 계면활성제를 포함할 수 있다. 약물의 투여량은 계량된 밸브로 제어될 수 있다. 다르게는, 활성 성분은 드라이 분말, 예를 들어 락토오스, 전분, 전분 유도체, 예컨대 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스 및 폴리비닐피롤리딘(PVP)과 같은 적합한 분말 베이스 중의 화합물의 분말 믹스의 형태로 제공될 수 있다. 분말 담체는 비강에서 겔을 형성할 것이다. 분말 조성물은 예를 들어, 흡입기를 수단으로 분말이 투여될 수 있는, 젤라틴 또는 블리스터 팩의 캡슐 또는 카트리지 내에 단위 투여량 형태로 제시될 수 있다.

필요한 경우, 상기 제형은 활성 성분의 지속 또는 제어 방출 투여를 위해 맞춰진 장용 코팅을 이용해 제조될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 경피 또는 피하 약물 전달 장치 내에 제형화될 수 있다. 상기 전달 시스템은 화합물의 지속 방출이 필요할 때 및 치료 요법에 대한 환자의 준수가 중요할 때 유리하다. 경피 전달 시스템에서의 화합물들은 종종 피부-접착성 고체 지지체에 결합된다. 관심대상의 화합물들은 또한 침투 증강제, 예를 들어, 아존(1-도데실아자-사이클로헵탄-2-온) 과 병용될 수 있다. 지속 방출 전달 시스템은 수술에 의해 또는 주사에 의해 피하층으로 피하삽입된다. 피하 이식물은 지용성 막, 예를 들어 실리콘 고무 또는 생분해성 중합체, 예를 들어 폴리아세트산에 화합물을 봉입시킨다.

약학적 담체, 희석제 및 부형제와 함께 하는 적합한 제형은 문헌[Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, edited by E.W. Martin, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvania]에 기술되어 있다. 숙련된 제형 과학자는 본 발명의 조성물을, 불안정하게 하거나 또는 그의 치료 활성에 지장을 주지 않으면서도, 특별한 투여 경로를 위한 다양한 제형을 제공하기 위해 명세서의 교시에 따라 제형을 개질할 수 있다.

본 발명의 화합물을 물 또는 기타 비히클에 더욱 가용성이 되도록 하기 위한 개질은, 예를 들어 약간의 개질(염 제형화, 에스터화 등)로 쉽게 달성될 수 있고, 이는 당업자에게 널리 공지되어 있다. 본 발명의 화합물의 약동학적 특성을 환자에게 최대한의 이익을 제공하도록 조정하기 위한 특별한 화합물의 투여 경로 및 투여 요법을 개질하는 것도 당업자에게 널리 공지되어 있다.

본원에서 "치료 효과량"이라는 용어는, 개인에서 질환의 증상을 감소시키기 위해 필요한 양을 의미한다. 투여량은 각각의 특별한 경우에서 개인의 필요요건에 맞춰질 것이다. 해당 투여량은, 치료할 질환의 심각성, 환자의 연령 및 일반적인 건강 상태, 환자가 처방받는 중인 기타 의약, 투여 경로 및 형태 및 관련 의료진의 선호성 및 경험과 같은 많은 인자들에 좌우되는 광범위한 한계 내에서 다양할 수 있다. 경구 투여용으로, 1일 당 약 0.01 내지 약 1000 mg/체중 kg의 매일 투여량이 단독 요법 및/또는 병용 요법에서 적당할 수 있다. 바람직한 매일 투여량은, 1일 당 약 0.1 내지 약 500 mg/체중 kg이고, 더욱 바람직하게는 0.1 내지 약 100 mg/체중 kg이고, 가장 바람직하게는 1.0 내지 약 10 mg/체중 kg이다. 따라서, 70 kg 성인에 대한 투여에 대해서는 투여량 범위는 1일 당 약 7 mg 내지 0.7 g이다. 매일 투여량은 단일 투여량으로, 또는 일반적으로 1일 당 1 내지 5회 투여량으로 분할 투여량으로 투여될 수 있다. 일반적으로, 치료는 화합물의 최적 투여량보다는 더 적은, 더 적은 투여량으로 개시된다. 이후, 개별 환자에 대한 최적 효과에 도달할 때까지, 투여량은 조금씩 증가된다. 본원에 기재된 질환 치료에서 당업자는, 지나친 실험과정 없이도, 개인의 지식, 경험 및 본 출원의 개시내용을 바탕으로, 주어진 질환 및 환자를 위한 본 발명의 화합물의 치료 효과량을 가늠할 수 있을 것이다.

약학적 제제는 바람직하게는 단위 투여량 형태이다. 상기 형태에서, 제제는 적당량의 활성 성분을 포함하는 단위 투여량으로 분할되어 있다. 단위 투여량 형태는, 개별적 분량의 제제를 포함하도록 포장된 제제, 예컨대 바이알 또는 앰플에 포장된 정제, 캡슐 분말일 수 있다. 또한, 단위 투여량 형태는 캡슐, 정제, 샤쉐 또는 로젠지 자체일 수 있거나, 또는 적당한 개수의 포장된 형태의 것일 수 있다.

징후 및 치료 방법

본원에 기술된 피리다진온 유도체는 키나아제 억제제, 특히 Btk 억제제이다. 이러한 억제제는 포유동물에 있어서, Btk 억제 및/또는 B 세포 증식의 억제에 반응하는 질환을 비롯한, 키나아제 억제에 반응하는 하나 이상의 질환을 치료하는데 유용할 수 있다. 임의의 특정한 이론에 구속되고자 하지 않으면서, 본 발명의 화합물과 Btk의 상호작용은 Btk 활성의 억제를 일으키고, 이에 따라 상기 화합물의 약학적 효용을 도모하는 것으로 여겨진다. 따라서, 본 발명은 Btk 활성의 억제 및/또는 B 세포 증식의 억제에 반응하는 질환을 가지는 포유동물, 예를 들어 인간을 치료하는 방법으로서, 본원에 제공된 하나 이상의 화학적 물질의 치료 효과량을 상기 질환을 가진 포유동물에 투여하는 것을 포함하는 방법을 포함한다. 유효한 농도는 예를 들어 화합물의 혈중농도를 분석하거나, 또는 이론적으로, 생체유용성(bioavailability)을 계산함으로써, 실험적으로 알아낼 수 있다. Btk에 더하여 영향을 받을 수 있는 다른 키나아제는, 비제한적으로, 다른 티로신 키나아제 및 세린/트레오닌 키나아제를 포함한다.

키나아제는 기본적인 세포 과정, 예컨대 증식, 분화 및 사멸(세포자멸사(apoptosis))을 제어하는 신호전달 경로에 있어서 주목할 만한 역할을 한다. 비정상 키나아제 활성은 다양한 암, 자가면역성 및/또는 염증성 질환 및 급성 염증 반응을 포함하는, 광범위한 질환에 연관된 것으로 나타났다. 주요한 세포 신호전달 경로에서의 키나아제의 광범위한 역할은 신호전달 경로 및 키나아제를 표적화하는 신규한 약물을 확인할 수 있는 의미 있는 기회를 제공한다.

하나의 실시양태는 Btk 활성 및/또는 B 세포 증식의 억제에 반응하는 자가면역성 및/또는 염증성 질환, 또는 급성 염증성 반응을 가지는 환자를 치료하는 방법을 포함한다.

본 발명에 따른 화합물 및 조성물을 사용하여 영향을 받을 수 있는 자가면역성 및/또는 염증성 질환은 비제한적으로 하기를 포함한다: 건선, 알레르기, 크론씨병, 과민성대장 증후군, 쇼그렌 병(Sjogren's disease), 조직 이식 거부(tissue graft rejection) 및 이식한 장기의 초급성 거부 반응, 천식, 전신 홍반성 루푸스(및 관련 사구체신염), 피부근염, 다발성 경화증, 경피증, 혈관염(ANCA-관련 및 기타 맥관염), 자가면역성 용혈성 및 혈소판 감소 상태, 굿패스쳐 증후군(Goodpasture's syndrome)(및 관련된 사구체신염 및 폐출혈), 죽상동맥경화증, 류마티스 관절염, 만성 특발성 혈소판감소성 자반증(ITP), 애디슨병, 파킨슨병, 알츠하이머병, 당뇨병, 패혈성 쇼크(septic shock) 및 중증 근무력증.

본원에 제공된 적어도 하나의 화합물을 항염증제와 병용하여 투여하는 치료 방법이 본원에 포함된다. 항염증제는, 비제한적으로 NSAID, 비-특이적 및 COX-2 특이적 사이클로옥스게나제(cyclooxgenase) 효소 억제제, 금화합물, 코르티코스테로이드, 메토트렉세이트, 종양괴사인자 수용체(TNF) 수용체 길항물질, 면역억제제 및 메토트렉세이트를 포함한다.

NSAID의 예는, 비제한적으로 이부프로펜, 플루르비프로펜, 나프록센 및 나프록센 나트륨, 디클로페낙, 디클로페낙 나트륨 및 미소프로스톨의 조합물, 술린닥, 옥사프로진, 디플루니살, 피록시캄, 인도메타신, 에토돌락, 페노프로펜 칼슘, 케토프로펜, 나트륨 나부메톤, 술파살라진, 톨메틴 나트륨 및 히드록사이클로로퀸을 포함한다. NSAID의 예는 또한 COX-2 특이적 억제제, 예컨대 셀레콕시브, 발데콕시브, 루미라콕시브 및/또는 에토리콕시브를 포함한다.

일부 실시양태에서, 항염증제는 살리실레이트이다. 살리실레이트는, 비제한적으로 아세틸살리실산 또는 아스피린, 나트륨 살리실레이트 및 콜린 및 마그네슘 살리실레이트를 포함한다.

상기 항염증제는 또한 코르티코스테로이드일 수 있다. 예를 들어, 코르티코스테로이드는 코르티손, 덱사메타손, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론, 프레드니솔론 나트륨 포스페이트, 또는 프레드니손일 수 있다.

추가의 실시양태에서 항염증제는 금 화합물, 예컨대 금 나트륨 티오말레이트 또는 오라노핀이다.

본 발명은 또한, 항염증제가 대사 저해제, 예를 들어 디히드로폴레이트 환원효소 억제제, 예를 들면 메토트렉세이트 또는 디히드로오로테이트 탈수소효소 억제제, 예컨대 레플루노미드인 실시양태를 포함한다.

본 발명의 다른 실시양태는 하나 이상의 항염증성 화합물이 항-C5 단일클론 항체(예컨대, 에쿨리주마브 또는 펙셀리주마브), 항-TNFα 단일클론 항체인 TNF 길항물질, 예컨대 엔타네르셉트, 또는 인플릭시마브인 조합물에 관련된다.

본 발명의 또 다른 실시양태는 하나 이상의 활성제가 면역억제제 화합물, 예컨대 메토트렉세이트, 레플루노미드, 사이클로스포린, 타크로리무스, 아자티오프린 및 미코페놀레이트 모페틸로부터 선택되는 면역억제제 화합물인 조합물과 관련된다.

Btk를 발현하는 B 세포 및 B 세포 전구체는, 비제한적으로 B 세포 림프종, 림프종(호지킨(Hodgkin's) 및 비-호지킨 림프종 포함), 모양 세포성 림프종, 다발성 골수종, 만성 및 급성 골수성 백혈병 및 만성 및 급성 림프성 백혈병을 비롯한, B 세포 악성 종양의 병증과 관련된 것으로 나타났다.

Btk는 B-계열 림프구 세포에서 Fas/APO-1(CD-95) 사멸 유도 신호전달 복합체(DISC)의 억제제인 것으로 나타났다. 백혈병/림프종 세포의 운명은, DISC에 의해 활성화된 카스파제(caspase)의 전-세포자멸사 길항(opposing proapoptotic) 효과와, Btk 및/또는 이의 기질과 관련된 그 이전의 항-세포자멸사 조절 메커니즘 사이의 균형에 달려 있다(문헌[Vassilev 등, J. Biol. Chem. 1998, 274, 1646-1656]).

또한, Btk 억제제가 화학요법 감작제(chemosensitizing agent)로서 유용하고, 이로써 다른 화학요법 약물, 특히, 세포자멸사를 유도하는 약물과 병용시 유용한 것으로 밝혀졌다. 화학요법 감작 Btk 억제제와 병용될 수 있는 다른 화학요법 약물의 예는 토포이소메라제 I 억제제(캠토테신 또는 토포테칸), 토포이소메라제 II 억제제(예를 들어, 다우노마이신 및 에토포시드), 알킬화제(예를 들어, 사이클로포스파미드, 멜파란 및 BCNU), 튜불린 유도제(예를 들어, 택솔 및 빈블라스틴) 및 생물 제제(biological agent)(예를 들어, 항체, 예컨대 항 CD20 항체, IDEC 8, 면역독소(immunotoxin) 및 시토킨)를 포함한다.

Btk 활성은 또한, 9번 및 22번 염색체의 일부의 전좌로부터 생성된 bcr-abl 융합 유전자를 발현하는 일부 백혈병과 관련되어 있다. 이러한 비정상성은 만성 골수성 백혈병에서 흔히 관찰된다. Btk는 bcr-abl 세포에서 세포자멸사를 피하는 하류 생존 신호를 개시하는 bcr-abl 키나아제에 의해 구조적으로 인산화된다(Feldhahn 등, J. Exp. Med. 2005 201(11):1837-1852).

본 발명의 하나의 실시양태는, 본 발명의 Btk 억제제 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 염증성 및/또는 자가면역성 증상 치료 방법이다.

본 발명의 하나의 실시양태는, 본 발명의 Btk 억제제 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 류마티스성 관절염 치료 방법이다.

본 발명의 하나의 실시양태는, 본 발명의 Btk 억제제 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 천식 치료 방법이다.

본 발명의 하나의 실시양태는 치료 활성 성분으로서 본 발명의 화합물의 용도이다.

본 발명의 하나의 실시양태는 염증성 및/또는 자가면역성 증상의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 화합물이다.

본 발명의 하나의 실시양태는 류마티스성 관절염 또는 천식 치료에 사용하기 위한 본 발명의 화합물이다.

본 발명의 하나의 실시양태는 염증성 및/또는 자가면역성 증상의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 화합물의 용도이다.

본 발명의 하나의 실시양태는 염증성 및/또는 자가면역성 증상의 치료용 약제의 제조를 위한 본 발명의 화합물의 용도이다.

[실시예]

통상적으로 사용되는 약어는 다음을 포함한다: 아세틸(Ac), 아조-비스-아이소부티릴나이트릴(AIBN), 기압(Atm), 9-보라바이사이클로[3.3.1]노난(9-BBN 또는 BBN), 2,2'-비스(다이페닐포스피노)-1,1'-바이나프틸(BINAP), 3급-부톡시카보닐(Boc), 다이-3급-부틸 파이로카보네이트 또는 boc 무수물(BOC₂O), 벤질(Bn), 부틸(Bu), 화학 초록 등록 번호(CASRN), 벤질옥시카보닐(CBZ 또는 Z), 카보닐 다이이미다졸(CDI), 1,4-다이아자바이사이클로[2.2.2]옥탄(DABCO), 다이에틸아미노황 트라이플루오라이드(DAST), 다이벤질리덴아세톤(dba), 1,5-다이아자바이사이클로[4.3.0]노느-5-엔(DBN), 1,8-다이아자바이사이클로[5.4.0]운데크-7-엔(DBU), N,N'-다이사이클로헥실카보다이이미드(DCC), 1,2-다이클로로에탄(DCE), 다이클로로메탄(DCM), 2,3-다이클로로-5,6-다이시아노-1,4-벤조퀴논(DDQ), 다이에틸 아조다이카복실레이트(DEAD), 다이-아이소-프로필아조다이카복실레이트(DIAD), 다이-아이소-부틸알루미늄하이드라이드(DIBAL 또는 DIBAL-H), 다이-아이소-프로필에틸아민(DIPEA), N,N-다이메틸 아세트아마이드(DMA), 4-N,N-다이메틸아미노피리딘(DMAP), N,N-다이메틸폼아마이드(DMF), 다이메틸 설폭사이드(DMSO), 1,1'-비스-(다이페닐포스피노)에탄(dppe), 1,1'-비스-(다이페닐포스피노)페로센(dppf), 1-(3-다이메틸아미노프로필)-3-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드(EDCI), 2-에톡시-1-에톡시카보닐-1,2-다이하이드로퀴놀린(EEDQ), 에틸(Et), 에틸 아세테이트(EtOAc), 에탄올(EtOH), 2-에톡시-2H-퀴놀린-1-카복실산 에틸 에스터(EEDQ), 다이에틸 에터(Et₂O), 에틸 아이소프로필 에터(EtOiPr), O-(7-아자벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 헥사플루오로포스페이트 아세트산(HATU), 아세트산(HOAc), 1-N-하이드록시벤조트라이아졸(HOBt), 고압 액체 크로마토그래피(HPLC), 아이소-프로판올(IPA), 아이소프로필마그네슘 클로라이드(iPrMgCl), 헥사메틸 다이실라잔(HMDS), 액체 크로마토그래피 질량 분광법(LCMS), 리튬 헥사메틸 다이실라잔(LiHMDS), 메타-클로로퍼옥시벤조산(m-CPBA), 메탄올(MeOH), 융점(mp), MeSO₂-(메실 또는 Ms), 메틸(Me), 아세토나이트릴(MeCN), m-클로로과벤조산(MCPBA), 질량 스펙트럼(ms), 메틸 t-부틸 에터(MTBE), 메틸 테트라하이드로퓨란(MeTHF), N-브로모석신이미드(NBS), n-부틸리튬(nBuLi), N-카복시무수물(NCA), N-클로로석신이미드(NCS), N-메틸모폴린(NMM), N-메틸피롤리돈(NMP), 피리디늄 클로로크로메이트(PCC), 다이클로로-((비스-다이페닐포스피노)페로센일) 팔라듐(II)(Pd(dppf)Cl₂), 팔라듐(II) 아세테이트(Pd(OAc)₂), 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(Pd₂(dba)₃), 피리디늄 다이크로메이트(PDC), 페닐(Ph), 프로필(Pr), 아이소-프로필(i-Pr), 평방 인치 당 파운드(psi), 피리딘(pyr), 1,2,3,4,5-펜타페닐-1'-(다이-3급-부틸포스피노)페로센(Q-Phos), 실온(상온, rt 또는 RT), 2급-부틸리튬(sBuLi), 3급-부틸다이메틸실릴 또는 t-BuMe₂Si(TBDMS), 테트라-n-부틸암모늄 플루오라이드(TBAF), 트라이에틸아민(TEA 또는 Et₃N), 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 1-옥실(TEMPO), 트라이플레이트 또는 CF₃SO₂-(Tf), 트라이플루오로아세트산(TFA), 1,1'-비스-2,2,6,6-테트라메틸헵탄-2,6-다이온(TMHD), O-벤조트라이아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 테트라플루오로보레이트(TBTU), 박막 크로마토그래피(TLC), 테트라하이드로퓨란(THF), 트라이메틸실릴 또는 Me₃Si(TMS), p-톨루엔설폰산 일수화물(TsOH 또는 pTsOH), 4-Me-C₆H₄SO₂- 또는 토실(Ts), N-우레탄-N-카복시무수물(UNCA) 및 2-다이사이클로헥실포스피노-2',4',6'-트라이아이소프로필바이페닐(XPHOS). 접두사 노말(n), 아이소(i-), 2급(s-), 3급(t-) 및 네오를 포함하는 통상적인 명칭은 알킬 잔기와 함께 사용되는 경우 그의 통상적인 의미를 갖는다. 문헌(J. Rigaudy 및 D. P. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford.)을 참고한다.

화합물 I-1의 제조

[반응식 A]

단계 1. 6-나이트로-3',6'-다이하이드로-2'H-[3,4']바이피리딘일-1'-카복실산 3급-부틸 에스터의 제조

500 mL 환저 플라스크 내에서, 5-브로모-2-나이트로피리딘(6.56 g, 32.3 mmol, 당량: 1) 및 3급-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(10 g, 32.3 mmol, 당량: 1.00)를 다이옥산(160 mL)과 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 여기에 Cs₂CO₃(21.1 g, 64.7 mmol, 당량: 2) 및 물(6 mL)을 가했다. 이 반응 혼합물을 아르곤으로 탈기시킨 후, 비스(트라이페닐포스핀)팔라듐(II) 다이클로라이드(2.27 g, 3.23 mmol, 당량: 0.1)를 가했다. 이 반응 혼합물을 80℃로 가열하고, 15시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 500 mL의 H₂O에 붓고, EtOAc(3 x 200 mL)로 추출하였다. 합친 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 220 g, 헥산 중의 10% 내지 40% EtOAc), 분홍색 고체를 수득하였다. 생성 고체를 에터로 마쇄하여, 목적 생성물(4.8 g)을 고체로서 수득하였다. 상기 마쇄로부터의 여액 및 상기 제 1 크로마토그래피로부터의 혼합된 분획을 합치고, 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 220 g, 헥산 중의 20% 내지 40% EtOAc), 추가적인 생성물(2.2 g)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.52 (s, 9 H) 2.59 (d, J=1.52 Hz, 2 H) 3.72 (t, J=5.56 Hz, 2 H) 4.19 (d, J=3.03 Hz, 2 H) 6.35 (br. s., 1 H) 7.97 (dd, J=8.46, 2.40 Hz, 1 H) 8.27 (d, J=8.34 Hz, 1 H) 8.67 (d, J=2.27 Hz, 1 H).

단계 2. 6-아미노-3',4',5',6'-테트라하이드로-2'H-[3,4']바이피리딘일-1'-카복실산 3급-부틸 에스터의 제조

500 mL 환저 플라스크 내에서, EtOH(300 mL) 및 에틸 아세테이트(75 mL) 중의 3급-부틸 4-(6-나이트로피리딘-3-일)-5,6-다이하이드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(4.9 g, 16.0 mmol, 당량: 1.00)를 Pd/C(1.32 g, 1.24 mmol, 당량: 0.0773)과 합쳤다. 이 반응 혼합물을 수소로 2회 배기하고, 이어서 수소-충전된 풍선을 사용하여 밤새도록 교반하였다. LC/MS 분석은 반응이 종결되었음을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 질소로 퍼지하고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 셀라이트 케이크를 EtOAc로 수회 세척하였다. 무색의 합친 여액 및 세척액에 CH₂Cl₂을 가하고, 이 용액을 증발 건조시켰다. CH₂Cl₂을 다시 가하고, 이 용액을 진공 중에 농축하여, 정량적 수율의 목적 생성물을 수득하였다. (M+H)⁺=278 m/e.

단계 3. 6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-3',4',5',6'-테트라하이드로-2'H-[3,4']바이피리딘일-1'-카복실산 3급-부틸 에스터의 제조

아르곤 분위기 하에, 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(3.59 g, 16.0 mmol, 당량: 1.00), 3급-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(4.45 g, 16.0 mmol, 당량: 1.00), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(696 mg, 1.2 mmol, 당량: 0.075) 및 세슘 카보네이트(18.3 g, 56.2 mmol, 당량: 3.5)를 다이옥산(150 mL) 중에 현탁시켰다. 최종적으로, 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(551 mg, 602 μmol, 당량: 0.0375)을 가했다. 이 반응 혼합물을 90℃에서 밤새도록 가열하였다. 이 반응 혼합물을 셀라이트 상에서 여과하고, 셀라이트 케이크를 다이옥산으로 수회 세척하였다. 합친 여액 및 세척액을 진공 중에서 농축하고, 생성 고체를 EtOAc로 마쇄하고, 에터로 세척하고, 50℃의 진공 오븐에서 밤새도록 건조하여, 4.57 g의 목적 생성물을 백색 고체로서 수득하였다. 합친 여액 및 세척액을 증발 건조시키고, CH₂Cl₂(4 mL)에 용해시키고, 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 120 g의 아날로직스(Analogix) 칼럼, 20분에 걸쳐 헥산 중의 20% 내지 50% EtOAc), 추가로 582 mg을 수득하였다. 총 수율 (5.15 g, 12.3 mmol, 76.4 % 수율). (M+H)⁺=420 m/e; ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.50 (s, 9 H) 1.54 - 1.69 (m, 3 H) 1.83 (d, J=13.64 Hz, 2 H) 2.67 (tt, J=12.38, 3.66 Hz, 1 H) 2.83 (t, J=13.14 Hz, 2 H) 3.82 (s, 3 H) 6.89 (d, J=8.59 Hz, 1 H) 7.51 (dd, J=8.46, 2.40 Hz, 1 H) 8.25 (d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.27 (br. s., 1 H) 8.30 (s, 1 H).

단계 4a. 6-클로로-2-메틸-4-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-2H-피리다진-3-온의 제조

3급-부틸 4-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(2.0 g, 4.76 mmol, 당량: 1.00)를 폼산(40.0 mL)과 폼알데하이드(37%, 80.0 mL)의 용매 혼합물에 용해시켰다. LCMS 분석으로 반응이 종결되었다고 결정될 때까지, 이 반응 혼합물을 70℃에서 밤새도록 교반하고, 이어서 상온으로 냉각시켰다. 물을 가하고, 생성 수성 혼합물을 CH₂Cl₂으로 세척하고, CH₂Cl₂ 층을 버렸다. 이 수성 층의 pH를 고체 K₂CO₃으로 조심스럽게 pH 12로 조절하자, 고체가 침전되었다. 이 고체를 여과로 수집하고, 물로 세척하고, 50℃의 진공 오븐에서 72시간 동안 건조하여, 1.4 g의 목적 생성물을 수득하였다. (M+H)⁺ = 334 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.84 (dd, J=8.31, 3.02 Hz, 4 H) 1.99 - 2.19 (m, 2 H) 2.35 (s, 3 H) 2.42 - 2.68 (m, 1 H) 3.02 (d, J=12.09 Hz, 2 H) 3.81 (s, 3 H) 6.86 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.52 (dd, J=8.50, 2.46 Hz, 1 H) 8.16 - 8.33 (m, 3 H).

단계 4b. 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드의 제조

1 L 환저 플라스크 내에서, 6-3급-부틸-8-플루오로프탈라진-1(2H)-온(5.6 g, 25.4 mmol, 당량: 1.00)을 THF(300 mL)와 합쳐, 무색 용액을 수득하였다. 여기에 나트륨 하이드라이드(1.12 g, 28.0 mmol, 당량: 1.1)를 가했다. 이 반응 혼합물을 상온에서 10분 동안 교반하였다. 2-플루오로-4-요오도니코틴알데하이드(7.02 g, 28.0 mmol, 당량: 1.1)를 가하고, 이 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS 분석으로 반응이 종결된 것으로 결정되었다. 이 반응 혼합물을 포화된 NH₄Cl으로 켄칭하였다. 이 반응 혼합물을 200 mL의 H₂O에 붓고, CH₂Cl₂으로 3회 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 이어서 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 생성 연황색 고체를 필터 깔때기로 옮기고, 플라스크를 적은 부피의 EtOAc로 2회 세척하여, 상기 고체가 상기 깔때기로 완전히 옮겨지게 하였다. 이 고체를 Et₂O로 2회 마쇄하고, 진공 하에 건조하여, 크림색 고체로서 목적 생성물(8.09 g, 17.9 mmol, 70.5 % 수율)을 수득하였다. (M+H)⁺ = 452 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.44 (s, 9 H) 7.49 - 7.54 (m, 1 H) 7.54 (d, J=1.77 Hz, 1 H) 8.03 (d, J=5.31 Hz, 1 H) 8.30 (d, J=2.53 Hz, 1 H) 8.37 (d, J=5.31 Hz, 1 H) 9.98 (s, 1 H).

단계 5. 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-4-[1-메틸-5-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-3-카브알데하이드.

6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(1.4 g, 4.19 mmol, 당량: 1.00), 비스(피나콜레이토)이붕소(1.17 g, 4.61 mmol, 당량: 1.1) 및 칼륨 아세테이트(1.23 g, 12.6 mmol, 당량: 3)를 다이옥산(60 mL) 중에 현탁시켰다. 이 반응 혼합물을 아르곤 하에 탈기시켰다. X-PHOS(300 mg, 629 μmol, 당량: 0.15) 및 팔라듐(II) 아세테이트(47.1 mg, 210 μmol, 당량: 0.05)를 가하고, 질소 분위기 하에 이 반응 혼합물을 100℃(외부 온도)에서 1시간 동안 교반하였다. 분취량을 샘플링하고, 이를 메탄올에 용해시켜, 출발 클로라이드의 사라짐 및 보론산(M+1 = 344)의 동시 출현을 찾되, 탈-염소화된 부산물(M+1 = 300)의 양을 조심스럽게 최소화함으로써, LCMS로 반응을 면밀히 모니터링하였다. 반응은 1시간 후에 종결되었다. 가열 욕(bath)의 온도를 80℃로 냉각시키고, 상기 플라스크를 상기 가열 욕에서 꺼냈지만, 계속 교반하였다. 여기에 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드(1.89 g, 4.19 mmol, 당량: 1.00) 및 탄산 칼륨(1.74 g, 12.6 mmol, 당량: 3) 및 이어서 물(6.00 mL)을 가했다. 여기에 트라이사이클로헥실포스핀(118 mg, 419 μmol, 당량: 0.1) 및 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(121 mg, 210 μmol, 당량: 0.05)을 가했다. 이 반응 혼합물을 격렬히 교반하면서 80℃로 가열하고, 2시간 동안 교반하고, 이어서 이 반응 혼합물을 상온으로 냉각시켰다. 이 반응 혼합물을 물에 붓고, 가볍게 진탕하면서 EtOAc(2X) 내로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 염수로 세척하였다. 수성 상을 CH₂Cl₂으로 3회 추출하였다. CH₂Cl₂ 및 에틸 아세테이트 층을 합치고, 합친 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 50 mL의 CH₂Cl₂ 중에 슬러리화하고, 200 mL의 Et₂O를 가했다. 이 고체를 여과하고, Et₂O로 세척하였다. 고체의 두번째 배취를 침전시키고, 여과로 수집하고, 에터로 세척하였다. 상기 배취들은 둘 다 유사한 LCMS 및 ¹H-nmr 스펙트럼을 가졌으며, 이는 목적 생성물과 부합하였고, 이들을 합쳐 1.62 g의 생성물을 수득하였다. (M+H)⁺ = 623 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.42 (s, 9 H) 1.88 (br. s., 3 H) 2.39 (br. s., 3 H) 2.46 - 2.64 (m, 1 H) 3.05 (br. s., 2 H) 3.89 (s, 3 H) 6.91 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.38 - 7.66 (m, 3 H) 7.76 (d, J=5.29 Hz, 1 H) 8.19 - 8.38 (m, 3 H) 8.81 (s, 1 H) 8.87 (d, J=5.29 Hz, 1 H) 10.11 (s, 1 H).

실시예 1

단계 6. 6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온

250 mL 환저 플라스크 내에서, 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)니코틴알데하이드(1.62 g, 2.6 mmol, 당량: 1.00)를 건조 CH₂Cl₂(45 mL) 및 건조 MeOH(20 mL)과 합쳐, 갈색 용액을 수득하였다. 나트륨 보로하이드라이드(177 mg, 4.68 mmol, 당량: 1.8)를 가하고, 이 반응물을 상온에서 1시간 동안 교반한 후, 포화된 NH₄Cl으로 켄칭하였다. 이 반응 혼합물을 50 mL의 H₂O로 희석하고, CH₂Cl₂(3 x 150 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여[실리카 겔, 80g, CH₂Cl₂ 중의 0% 내지 50% CH₂Cl₂:MeOH:NH₄OH(60:10:1)], 약간 불순한 거품을 수득하였다. 이 거품을 30 mL의 Et₂O 및 10 mL의 EtOAc 중에 슬러리화하고, 무거운 교반 막대기로 1시간 동안 천천히 교반하여, 백색 고체를 수득하였다. 이 고체를 여과로 수집하고, 50℃에서 48시간 동안 진공 하에 건조하여, 목적 생성물(880 mg)을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 625 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.44 (s, 9 H) 1.87 (br. s., 3 H) 2.15 (br. s., 2 H) 2.39 (br. s., 3 H) 2.52 (t, J=7.74 Hz, 1 H) 3.04 (br. s., 2 H) 3.82 - 3.91 (m, 1 H) 3.93 (s, 3 H) 4.46 - 4.63 (m, 2 H) 6.93 (d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.42 - 7.59 (m, 3 H) 7.64 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 8.15 - 8.39 (m, 3 H) 8.70 (s, 1 H) 8.73 (d, J=4.91 Hz, 1 H)

화합물 I-2의 제조

[반응식 B]

단계 1. 2-클로로-5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘의 제조

100 mL 환저 플라스크를 아르곤 분위기 하에 두고, 진공을 이용하여 아르곤을 탈기시켰다. 이 플라스크에 용매(헥산(4 mL) 및 톨루엔(12 mL))를 가했다. 여기에 N,N-다이메틸에탄올아민(1.07 g, 1.21 mL, 12.0 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 여기에 N-부틸 리튬(헥산 중의 2.5M, 8.66 mL, 21.6 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 -20℃로 냉각시켰다. 여기에 (S)-3-(1-메틸피롤리딘-2-일)피리딘(650 mg, 0.64 mL, 4.01 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 -20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 -78℃로 냉각시키고, 톨루엔(8 mL) 중의 헥사클로로에탄(3.8 g, 16.0 mmol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 포화된 NaHCO₃(4 mL)으로 냉각 켄칭하였다. LCMS는, 반응이 [목적하는 위치 이성질체]를 [목적하지 않는 6-클로로 피리딘 생성물]에 대해 6:1의 비로 제공했음을 나타냈다. 이 반응 혼합물을 50 mL의 H₂O에 붓고, CH₂Cl₂(3 x 125 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고,진공 중에서 농축하였다.

조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 40g, 헥산 중의 0% 내지 55% EtOAc), 목적 생성물(467 mg, 59%)을 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.56 - 2.05 (m, 3 H) 2.16 - 2.40 (m 및 중첩 s, 5 H) 3.09 (t, J=8.31 Hz, 1 H) 3.17 - 3.29 (m, 1 H) 7.23 - 7.32 (m, 1 H) 7.68 (dd, J=8.12, 2.45 Hz, 1 H) 8.30 (d, J=2.27 Hz, 1 H)

단계 2. 5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아민

75 mL의 밀봉된 튜브 내에서, (S)-2-클로로-5-(1-메틸피롤리딘-2-일)피리딘(622 mg, 3.16 mmol) 및 2-(다이사이클로헥실포스피노)바이페닐(222 mg, 633 μmol)을 THF(15 mL)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 이 용액을 아르곤으로 탈기시켰다. 여기에 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(290 mg, 316 μmol)을 가했다. 여기에 LiHMDS(THF 중의 1M 용액, 9.49 mL, 9.49 mmol)를 가했다. 이 반응물을 아르곤 분위기 하에 두고, 밀봉하였다. 이 반응 혼합물을 90℃로 가열하고, 15시간 동안 교반하였다. TLC로 반응을 종결시켰다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석하였다. 이 반응 혼합물을 150 mL의 포화된 NH₄Cl에 붓고, EtOAc(4 x 75 mL)로 추출하였다. 유기 층을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 순차적 구배를 이용하는 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 40 g, 10% 내지 50% CH₂Cl₂:메탄올:NH₄OH(60:10:1)/CH₂Cl₂), 목적 생성물(560 mg, 99%)을 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.57 - 2.03 (m, 3 H) 2.04 - 2.39 (m 및 중첩 s, 5 H) 2.92 (t, J=8.12 Hz, 1 H) 3.14 - 3.29 (m, 1 H) 4.40 (br. s., 2 H) 6.51 (d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.47 (dd, J=8.31, 2.27 Hz, 1 H) 7.95 (d, J=2.27 Hz, 1 H)

단계 3. 6-클로로-2-메틸-4-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온의 제조

50 mL 환저 플라스크 내에서, 5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아민(560 mg, 3.16 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(847 mg, 3.79 mmol) 및 세슘 카보네이트(3.09 g, 9.48 mmol)를 다이옥산(25 mL)과 합쳐 오렌지색 현탁액을 수득하였다. 여기에 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(274 mg, 474 μmol, 당량: 0.15) 및 이어서 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(145 mg, 158 μmol, 당량: 0.05)을 가했다. 이 반응물을 아르곤으로 10분 동안 탈기시키고, 95 내지 105℃에서 4시간 동안 가열하였다. 아닐린 출발 물질은 남아 있지 않았다. 이 반응 혼합물을 200 mL의 CH₂Cl₂으로 희석하였다. MgSO₄을 가하고, 이 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이 반응물을 여과하고, 필터 케이크를 CH₂Cl₂으로 수회 세척하였다. 합친 여액 및 세척액을 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 40 g, CH₂Cl₂ 중의 1% 내지 2% MeOH), 목적 생성물(522 mg, 52%)을 수득하였다. (M+H)⁺ = 320 m/e.

실시예 2

단계 4. 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-하이드록시메틸-4-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-피리딘-2-일)-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-2-메틸-4-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온으로 대체한 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 85 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 611 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.41 - 1.46 (m, 9 H) 2.19 (br. s., 3 H) 2.98 - 3.34 (m, 1 H) 3.88 (s, 1 H) 3.93 (s, 3 H) 4.46 - 4.64 (m, 2 H) 6.97 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.43 - 7.79 (m, 4 H) 8.21 - 8.38 (m, 3 H) 8.65 - 8.84 (m, 2 H)

(M+H)⁺ = 611 m/e.

화합물 I-3의 제조

단계 1. 6-클로로-2-메틸-4-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온의 제조

가열 하에, (6-아미노피리딘-3-일)(모폴리노)메탄온(58 g, 280 mmol, 당량: 1.00), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(63.66 g, 285 mmol, 당량: 1.02) 및 (9,9-다이메틸-9H-잔텐-4,5-다이일)비스(다이페닐포스핀)(4.86 g, 8.4 mmol, 당량: 0.03)을 DMF(1.1 L)에 용해시켰다. 여기에 세슘 카보네이트(274 g, 840 mmol, 당량: 3)를 가했다. 최종적으로, 아르곤 분위기 하에 Pd₂(dba)₃(3.84 g, 4.2 mmol, 당량: 0.015)를 가했다. 이 반응 혼합물을 93℃(내부 온도)로 3시간 동안 가열하였다. 이 따뜻한 반응 혼합물을 물/얼음(10 L)에 부었다. 여과에 의해 베이지색 침전물을 수집하고, 물(2 L)로 세척하였다. 생성 고체를 DCM(5 L) 중에 취하고, 여과하였다. 여액을 진공 중에 농축하여 고체를 수득하고, 이를 아이소프로판올(700 mL)로 마쇄하고, 여과하고, 진공 하에 건조하여, 목적 생성물(70.24 g)을 베이지색 고체로 수득하였다. (M+H)⁺ = 350 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 3.56 - 3.79 (m, 8 H) 3.83 (s, 3 H) 6.96 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.77 (dd, J=8.31, 2.27 Hz, 1 H) 8.34 - 8.42 (m, 2 H) 8.47 (d, J=2.27 Hz, 1 H).

실시예 3

6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-하이드록시메틸-4-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-피리딘-2-일)-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-2-메틸-4-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온으로 대체한 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 165 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 641 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.44 (s, 9 H) 3.54 - 3.84 (m, 8 H) 3.94 (s, 3 H) 4.57 (s, 2 H) 7.03 (d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.45 - 7.59 (m, 2 H) 7.64 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 7.79 (dd, J=8.69, 2.27 Hz, 1 H) 8.33 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.41 - 8.55 (m, 2 H) 8.74 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 8.77 (s, 1 H).

화합물 I-4의 제조

단계 1. 6-클로로-4-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조

아르곤 하에, 환저 플라스크 내에 오일 분산액 중의 95% 나트륨 하이드라이드 1.14 g 및 90 mL의 테트라하이드로퓨란(알드리치(Aldrich), 무수, 억제제 없음)을 넣었다. 이 혼합물을 빙욕 중에서 냉각시키고, 3.10 g의 5-(메틸설폰일)피리딘-2-아민을 한꺼번에 가했다. 빙욕을 제거하고, 이 혼합물을 실온에서 교반하였다. 15분 후, 이 혼합물을 빙욕 중에서 냉각시키고, 4.103 g의 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온을 한꺼번에 가했다. 빙욕을 제거하고, 이 혼합물을 실온에서 교반하였다. 90분 후, 이 혼합물을 빙욕 중에서 냉각시키고, 90 mL의 0.5 M 염산을 적가하여 켄칭하였다(맨처음 몇방울에서 기체가 발생하였으며, 15분 적가시 적갈색에서 황갈색으로 색이 변함). 빙욕을 제거하고, 이 혼합물을 추가로 15분 동안 교반하고, 흡입 여과에 의해 고체를 수집하고, 물 및 이어서 에터로 세척하였다. 이 고체를 밤새도록 공기 건조하여, 목적 생성물(5.05 g)을 연황색 고체로 수득하였다. H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.25 (s, 3 H) 3.69 (s, 3 H) 7.73 (d, J=8.69 Hz, 1 H) 8.16(dd, J=1.00 Hz, 1 H) 8.42 (s, 1 H) 8.83 (d, J=2.27 Hz, 1 H).

실시예 4

6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[5-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-4-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 65 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 606 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.44 (s, 9 H) 3.11 (s, 3 H) 3.96 (s, 3 H) 4.58 (s, 2 H) 7.09 (d, J=9.06 Hz, 1 H) 7.49 - 7.59 (m, 2 H) 7.64 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 8.11 (dd, J=8.69, 2.27 Hz, 1 H) 8.34 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.64 (s, 1 H) 8.75 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 8.91 (s, 2 H).

화합물 I-5의 제조

단계 1. 6-클로로-N,N-다이메틸-니코틴아마이드의 제조

500 mL 환저 플라스크 내에서, 아르곤 하에 6-클로로니코틴오일 클로라이드(8 g, 45.5 mmol, 당량: 1.00)를 DCM(200 mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. 온도를 10℃ 미만으로 유지하면서, 이 용액에 다이메틸아민(THF 중의 2M, 90.9 mL, 182 mmol, 당량: 4)을 15분에 걸쳐 적가하였다. 빙욕을 제거하고, 이 반응물을 3시간 동안 교반하였다.

이 반응 혼합물을 물(100 mL), 20% 탄산 칼륨(200 mL) 및 물(100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 용매를 제거하여, 황색 오일을 수득하였으며, 이는 정치 시 고화되었다. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 2.76 - 3.27 (m, 6 H) 7.38 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.74 (dd, J=8.12, 2.46 Hz, 1 H) 8.46 (d, J=2.64 Hz, 1 H)

단계 2. 6-아자이도-N,N-다이메틸-니코틴아마이드의 제조

500 mL 환저 플라스크 내에서, 6-클로로-N,N-다이메틸니코틴아마이드(8.15 g, 44.1 mmol)를 DMF(50.0 mL)와 합쳐 갈색 용액을 수득하였다. 나트륨 아자이드(3.44 g, 53.0 mmol)를 가하고, 이 반응 혼합물을 120℃로 가열하고, 60시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 100 mL의 H₂O로 희석하고, EtOAc(2 x 200 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합치고, H₂O(1 x 50 mL) 및 포화된 NaCl(1 x 100 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에 농축하여, 황색 오일을 수득하였다. MeOH을 가하고, 농축 시 전체 혼합물은 고화되었다. 조 생성물을 진공 하에 밤새도록 건조하였다. 페이스트 같은 고체를 EtOAc/Hex으로부터 재결정화하였다. 이 고체를 여과하고, 최소량의 헥산으로 세척하였다. 백색 분말을 진공 하에 45℃에서 3시간 동안 건조하여, 2.23 g(26%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (300MHz, 클로로폼-d) δ: 8.95 (s, 1H), 8.09 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 9.1, 1.5 Hz, 1H), 3.15 (br. s., 6H).

단계 3. 6-아미노-N,N-다이메틸-니코틴아마이드의 제조

250 mL 환저 플라스크 내에서, 6-아자이도-N,N-다이메틸니코틴아마이드(2.26 g, 11.8 mmol)를 에틸 아세테이트(50 mL) 및 메탄올(30 mL)과 합쳐, 황색 용액을 수득하였다. 10% Pd/C(200 mg, 1.88 mmol)을 가하고, 이 반응 혼합물을 배기하고, H₂로 2회 채웠다. 이 반응 혼합물을 H₂의 풍선 압력 하에 25℃에서 17시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 케이크를 MeOH로 세척하였다. 여액을 진공 중에서 농축하고, 크림색 고체를 진공 하에 45℃에서 3시간 동안 건조하여, 표제 화합물을 정량적인 수율로 수득하였다. (M+H)⁺ = 166 m/e. ¹H NMR (300MHz, 클로로폼-d) δ: 8.21 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 8.3, 2.3 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.69 (br. s., 2H), 3.08 (s, 6H).

실시예 5

6-{6-[2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-4-일]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N,N-다이메틸-니코틴아마이드의 제조

(6-아미노피리딘-3-일)(모폴리노)메탄온을 6-아미노-N,N-다이메틸-니코틴아마이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 3과 유사한 절차로 제조하여, 163 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 599 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.43 (s, 9 H) 3.12 (s, 6 H) 3.94 (s, 3 H) 4.57 (s, 2 H) 7.00 (d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.48 - 7.59 (m, 2 H) 7.64 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 7.80 (dd, J=8.50, 2.08 Hz, 1 H) 8.32 (d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.42 - 8.51 (m, 2 H) 8.74 (d, J=5.29 Hz, 1 H) 8.78 (s, 1 H).

화합물 I-6의 제조

단계 1. 2-(6-사이클로프로필-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드

50 mL 환저 플라스크 내에서, 6-사이클로프로필-8-플루오로아이소퀴놀린-1(2H)-온(364 mg, 1.79 mmol, 당량: 1.00)을 THF(13.00 mL)와 합쳐 약간 뿌연 무색 용액을 수득하였다. THF(2.15 mL의 1M, 2.15 mmol, 당량: 1.2) 중의 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드를 가했다. 상온에서 20분 동안 교반하였다. 여기에 5 mL의 THF 중의 2-플루오로-4-요오도니코틴알데하이드(629 mg, 2.51 mmol, 당량: 1.4)를 가했다. 이 반응 혼합물을 65℃로 가열하고, 3시간 동안 교반한 후, RT로 냉각시켰다. 이 반응물을 포화된 NH₄Cl으로 켄칭하고, EtOAc로 1회 및 다이클로로메탄으로 3회 추출하였다. 합친 유기 층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하고(실리카 겔, 80g, DCM 중의 1% 내지 2% MeOH), 이어서 EtOAc로 거품화하여, 목적 생성물(90% 순도, 423 mg)을 연황색 분말로서 수득하였다. 이 생성물을 그대로 다음 단계에 사용하였다. (M+H)⁺ = 435 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 0.74 - 0.92 (m, 2 H) 1.03 - 1.20 (m, 2 H) 1.91 - 2.05 (m, 1 H) 6.56 (dd, J=7.74, 2.08 Hz, 1 H) 6.78 (dd, J=12.84, 1.51 Hz, 1 H) 7.02 (d, J=1.51 Hz, 1 H) 7.51 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.89 (d, J=5.29 Hz, 1 H) 8.25 (d, J=5.29 Hz, 1 H) 9.91 (s, 1 H).

실시예 6

단계 2. 6-{6-[2-(6-사이클로프로필-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-4-일]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N,N-다이메틸-니코틴아마이드의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-N,N-다이메틸-니코틴아마이드로 대체하고 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-사이클로프로필-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 148 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 582 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 0.81 - 0.93 (m, 2 H) 1.06 - 1.21 (m, 2 H) 1.90 - 2.14 (m, 1 H) 3.34 - 3.56 (m, 1 H) 3.94 (s, 3 H) 4.40 - 4.66 (m, 6 H) 6.51 - 6.62 (m, 1 H) 6.82 (d, J=12.84 Hz, 1 H) 7.02 (d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.07 (s, 1 H) 7.19 - 7.31 (m, 4 H) 7.61 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 7.80 (dd, J=8.31, 2.27 Hz, 1 H) 8.42 - 8.52 (m, 2 H) 8.69 (dd, J=4.91, 0.76 Hz, 1 H) 8.78 (s, 1 H).

화합물 I-7의 제조

[반응식 C]

단계 1. 2,5-다이-3급-부틸-3-하이드록시-2,3-다이하이드로-아이소인돌-1-온의 제조

버블러에 라이닝된 첨가 깔때기 및 질소를 퍼징하는 질소 주입구를 장착한 1L 3구 플라스크 내에서, N,4-다이-3급-부틸벤즈아마이드(5 g, 21.4 mmol, 당량: 1.00)를 THF(200 mL)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 이 반응물을 -78℃로 냉각시켰다. N₂ 스트림과 함께, 사이클로헥산 중의 2급-부틸리튬(1.4 M의 31.4 mL, 43.9 mmol, 당량: 2.05)을 천천히 적가하였다. 황색 용액을 수득하였다. 이 반응 혼합물을 -15℃로 1시간 동안 가온하였다. 연황색 현탁액을 수득하였다. 이 반응 혼합물을 -78℃로 다시 냉각시켰다. 여기에 건조 DMF(3.13 g, 3.32 mL, 42.9 mmol, 당량: 2)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 가온하였다. 0℃에서, 30 mL의 포화된 NH₄Cl를 천천히 가했다. 이 반응 혼합물을 150 mL의 H₂O에 붓고, EtOAc(3 x 250 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 헥산 중의 80 g, 0% 내지 40% EtOAc), 목적 생성물(4.9 g, 88% 수율)을 수득하였다. (M+H)⁺ = 262 m/e.

단계 2. 6-3급-부틸-2H-프탈라진-1-온의 제조

250 mL 환저 플라스크 내에서, 2,5-다이-3급-부틸-3-하이드록시아이소인돌린-1-온(4.9 g, 18.7 mmol, 당량: 1.00)을 아세트산(60 mL)과 합쳐 무색 용액을 수득하였다. 이 반응물을 90℃로 가열하였다. 여기에 하이드라진 일수화물(1.61 g, 1.57 mL, 20.6 mmol, 당량: 1.1)을 적가하였다. 이 반응물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 24 mL의 H₂0로 희석하고, 3시간에 걸쳐 25℃로 천천히 냉각시켰다. 이 반응 혼합물을 농축하되, 많이 건조하지는 않았다. 이 반응 혼합물을 다이클로로메탄 중에 취했다. 이 반응 혼합물을 75 mL의 포화된 NaHCO₃에 붓고, 다이클로로메탄(3 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하여, 순수한 생성물을 백색 고체로서 수득하고, 이를 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 80 g, DCM 중의 1% 내지 4% MeOH), 목적 생성물(3.7 g)을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 203 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 0.32 (s, 9 H) 6.58 (d, J=1.89 Hz, 1 H) 6.76 (dd, J=8.31, 1.89 Hz, 1 H) 7.06 (s, 1 H) 7.26 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 9.19 (br. s., 1 H).

단계 3. 2-(6-3급-부틸-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드의 제조

100 mL 환저 플라스크 내에서, 6-3급-부틸프탈라진-1(2H)-온(700 mg, 3.46 mmol, 당량: 1.00)을 THF(30 mL)와 합쳐 무색 용액을 수득하였다. 여기에 나트륨 하이드라이드(152 mg, 3.81 mmol, 당량: 1.1)를 가했다. 이 반응 혼합물을 상온에서 15분 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물에, 10 mL의 THF 중의 2-플루오로-4-요오도니코틴알데하이드(956 mg, 3.81 mmol, 당량: 1.1)의 용액을 가하고, 이를 상온에서 3.5시간 동안 교반하였다. 반응이 종결되지 않았다. 추가로 50 mg의 NaH를 가했다. 이 반응물을 추가로 1.5시간 동안 교반한 후, 포화된 NH₄Cl을 가했다. 이 반응 혼합물을 100 mL의 H₂O에 붓고, 다이클로로메탄(5 x 50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 80 g, 헥산 중의 10% 내지 60% EtOAc), 약간 불순한 생성물을 수득하였다. 이 생성물을 EtOAc로 마쇄하여, 목적 생성물을 크림색 고체로서 수득하였다. 합친 여액 및 상기 마쇄로부터의 세척액을 농축하고, 플래시 크로마토그래피로 재-정제하고(실리카 겔, 80 g, 헥산 중의 10% 내지 60% EtOAc), EtOAc로 마쇄하여, 추가적인 생성물을 크림색 고체로서 수득하였다. 생성물의 상기 2개의 배취를 합쳐, 320 mg의 목적 생성물을 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.44 (s, 9 H) 7.74 (d, J=1.89 Hz, 1 H) 7.89 (dd, J=8.50, 1.70 Hz, 1 H) 8.02 (d, J=5.29 Hz, 1 H) 8.28 - 8.44 (m, 3 H) 9.92 (s, 1 H) (M+H)⁺ = 434 m/e.

실시예 7

6-3급-부틸 -2-(3-하이드록시메틸-4-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-피리딘-2-일)-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-2-메틸-4-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온으로 대체하고 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-3급-부틸-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 115 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M-H)⁺ = 621 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.47 (s, 9 H) 3.58 - 3.87 (m, 6 H) 3.96 (s, 3 H) 4.57 (br. s., 2 H) 7.05 (dd, J=8.53, 0.50 Hz, 1 H) 7.65 (d, J=5.02 Hz, 1 H) 7.80 (td, J=4.27, 2.26 Hz, 2 H) 7.95 (dd, J=8.41, 1.88 Hz, 1 H) 8.41 (s, 1 H) 8.47 (dd, J=5.02, 3.26 Hz, 2 H) 8.50 (s, 1 H) 8.77 (d, J=5.02 Hz, 1 H) 8.81 (s, 1 H).

실시예 8

2'-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-1H-[3,4']바이피리딘일-6-온의 제조

50 mL 환저 플라스크 내에서, 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드(105 mg, 233 μmol, 당량: 1.00) 및 1-메틸-3-(5-(모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온(123 mg, 279 μmol, 당량: 1.20)을 다이옥산(5 mL)과 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 여기에 물(1 mL)을 가하고, 탄산 칼륨(74.0 mg, 535 μmol, 당량: 2.3)을 가했다. 5분 동안 상기 용액을 통해 아르곤을 버블링함으로써 이 반응물을 탈기시켰다. 트라이사이클로헥실포스핀(6.53 mg, 23.3 μmol, 당량: 0.1) 및 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(6.69 mg, 11.6 μmol, 당량: 0.05)을 가했다. 이 반응 혼합물을 75℃로 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 보론산 에스터가 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드에 의해 소비되었으며, LCMS 분석시 여전히 남아있는 것으로 결정되였다. 또다른 30 mg의 1-메틸-3-(5-(모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온 및 3 mg의 리간드 및 촉매를 가하고, 이 반응 혼합물을 75℃로 가열하고, 1시간 동안 교반하였다.

이 반응 혼합물을 50 mL의 H₂O에 붓고, EtOAc(1X) 및 DCM와 약간의 MeOH(5% 미만)(3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 MgSO₄ 상에서 건조하고,진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 24 g, DCM 중의 0.5% 내지 2% MeOH), 50 mg의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-(모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드를 수득하였다.

250 mL 환저 플라스크 내에서, 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-(모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드(50 mg, 78.4 μmol, 당량: 1.00)를 다이클로로메탄(6 mL) 및 2 mL의 MeOH과 합쳐 황색 용액을 수득하였다. 여기에 나트륨 보로하이드라이드(3.56 mg, 94.1 μmol, 당량: 1.2)를 가했다. 이 무색 용액을 상온에서 1시간 동안 교반하였다. 1 mL의 포화된 NH₄Cl 및 이어서 5 mL의 H₂O를 가했다. 이 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 50 mL의 H₂O에 붓고, EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 24g, DCM 중의 1% 내지 3% MeOH), 목적 생성물(41 mg)을 회백색 분말로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 640 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.46 (s, 9 H) 3.50 - 3.85 (s 및 중첩 m, 11 H) 4.51 (br. s., 2 H) 6.90 (d, J=8.59 Hz, 1 H) 7.51 - 7.63 (m, 3 H) 7.71 (dd, J=8.59, 2.53 Hz, 1 H) 7.79 (d, J=2.53 Hz, 1 H) 8.26 (br. s., 1 H) 8.37 (d, J=1.52 Hz, 2 H) 8.70 (d, J=5.05 Hz, 1 H) 8.82 (d, J=2.02 Hz, 1 H).

실시예 9

2'-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3'-하이드록시메틸-5-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-1H-[3,4']바이피리딘일-6-온의 제조

50 mL 환저 플라스크 내에서, 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드(200 mg, 443 μmol, 당량: 1.00) 및 1-메틸-3-(5-(메틸설폰일)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온¹(234 mg, 576 μmol, 당량: 1.3)을 다이옥산(5 mL) 중에서 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 물(1 mL) 및 탄산 칼륨(141 mg, 1.02 mmol, 당량: 2.3)을 가했다. 이 용액을 통해 5분 동안 아르곤을 버블링함으로써 이 반응물을 탈기시켰다. 트라이사이클로헥실포스핀(12.4 mg, 44.3 μmol, 당량: 0.1) 및 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(12.7 mg, 22.2 μmol, 당량: 0.05)을 가했다. 이 반응 혼합물을 70℃로 가열하고, 3시간 동안 교반하였다. 생성 반응 혼합물은 오렌지색 현탁액이었다. 이 반응 혼합물을 상온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석하고, 여과하였다. 생성 고체를 H₂O로 3회, 적은 부피의 EtOAc로 3회 및 에터로 1회 세척하여, 154 mg의 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-(메틸설폰일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드를 수득하였다. LCMS는 이것이 순수한 생성물임을 나타냈다. (M+H)⁺ = 603 m/e.

250 mL 환저 플라스크 내에서, 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-(1-메틸-5-(5-(메틸설폰일)피리딘-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리딘-3-일)니코틴알데하이드(154 mg, 256 μmol, 당량: 1.00)를 다이클로로메탄(24 mL) 및 2 mL의 MeOH과 합쳤다. 여기에 나트륨 보로하이드라이드(14.5 mg, 383 μmol, 당량: 1.5)를 가하고, 이 반응 현탁액을 상온에서 1시간 동안 교반하였다. 1 mL의 포화된 NH₄Cl 및 이어서 5 mL의 H₂O을 가했다. 이 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 50 mL의 H₂O에 붓고, 다이클로로메탄(3 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고,진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 12 g, DCM 중의 1% 내지 3% MeOH), 목적 생성물(90 mg)을 백색 분말로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 605 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.46 (s, 9 H) 3.10 (s, 3 H) 3.77 (s, 3 H) 4.51 (br. s., 2 H) 6.94 (d, J=8.59 Hz, 1 H) 7.48 - 7.65 (m, 3 H) 7.88 (d, J=2.53 Hz, 1 H) 8.00 (dd, J=8.59, 2.53 Hz, 1 H) 8.33 - 8.45 (m, 2 H) 8.71 (d, J=5.05 Hz, 1 H) 8.82 (d, J=2.53 Hz, 1 H) 8.92 (d, J=2.53 Hz, 1 H).

화합물 I-10의 제조

[반응식 D]

단계 1. 6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로-피리딘-3-일아미노)-N,N다이메틸-니코틴아마이드의 제조

6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)니코틴산(메틸 에스터의 가수분해로부터 제조됨)(3.7 g의 순수 산:에스터(80:20), 9.1 mmol, 1 당량), DIEA(1.77 g, 13.7 mmol, 1.5 당량), 다이메틸아민(6.85 mL의 2M, 13.7 mmol, 1.5 당량) 및 (1H-벤조[d][1,2,3]트라이아졸-1-일옥시)트리스(다이메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트(V)(6.06 g, 13.7 mmol, 1.5 당량)를 200 mL의 THF 중에서 합쳤다. 이 반응 혼합물을 밤새도록 교반하고, 이어서 거의 건조되도록 농축하였다. 이 반응 혼합물을 NH₄Cl/물(300mL)로 희석하고, EtOAc(3X250mL)로 추출하였다. 유기 상을 NaHCO₃/물(3X200mL) 및 물(3X200mL)로 세척하였다. 이어서, 합친 유기 상을 농축하여 고체를 수득하고, 이를 EtOH/Hex으로부터 재결정화하여, 목적 생성물(1.7g)을 수득하였다. (M+H)⁺ = 351, 353 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 3.11 (s, 6 H) 3.61 (s, 3 H) 6.80 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.03 (d, J=2.27 Hz, 1 H) 7.69 (dd, J=8.69, 2.27 Hz, 1 H) 8.04 (s, 1 H) 8.42 (d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.74 (d, J=2.64 Hz, 1 H).

단계 2. N,N-다이메틸-6-[1-메틸-2-옥소-5-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보롤란-2-일)-1,2-다이하이드로-피리딘-3-일아미노]-니코틴아마이드의 제조

50 mL 환저 플라스크 내에서, 6-(5-브로모-1-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일아미노)-N,N-다이메틸니코틴아마이드(1.0 g, 2.85 mmol, 당량: 1.00), 및 비스(피나콜레이토)이붕소(795 mg, 3.13 mmol, 당량: 1.1)를 1,4-다이옥산(10.0 mL)과 합쳐 녹색 용액을 수득하였다. 이 반응 혼합물을 용해될 때까지 교반하였다. 이 혼합물을 아르곤 하에 두고, 이어서 칼륨 아세테이트(838 mg, 8.54 mmol, 당량: 3)를 가했다. 이 반응 혼합물에 팔라듐(II) 아세테이트(12.8 mg, 56.9 μmol, 당량: 0.02) 및 X-PHOS(40.7 mg, 85.4 μmol, 당량: 0.03)를 가했다. 이 혼합물을 아르곤 분위기 하에 두고, 이 반응 혼합물을 75℃로 가열하고, N₂ 하에 1시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 65℃로 냉각시키고, 이어서 셀라이트를 통해 여과하였다. 고체를 따뜻한 다이옥산(10 mL)으로 세척하고, 상온으로 냉각시킨 후, 헥산(30 mL)을 가했다. 이 혼합물을 온에서 1시간 동안 정치시키고, 이어서 고체를 여과에 의해 수집하고, 헥산으로 세척하고, 50℃의 진공 오븐에서 밤새도록 건조하여, 목적 생성물(227 mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.36 (s, 12 H) 3.13 (s, 6 H) 3.66 (s, 3 H) 6.81 (d, J=8.59 Hz, 1 H) 7.43 (d, J=1.52 Hz, 1 H) 7.69 (dd, J=8.59, 2.53 Hz, 1 H) 7.96 (br. s., 1 H) 8.48 (d, J=2.02 Hz, 1 H) 8.67 (d, J=1.52 Hz, 1 H).

실시예 10

6-[2'-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-5-일아미노]-N,N-다이메틸-니코틴아마이드의 제조

1-메틸-3-(5-(모폴린-4-카보닐)피리딘-2-일아미노)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온을 N,N-다이메틸-6-[1-메틸-2-옥소-5-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]다이옥사보롤란-2-일)-1,2-다이하이드로-피리딘-3-일아미노]-니코틴아마이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 8과 유사한 절차로 제조하여, 54 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 598 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.44 (s, 9 H) 3.11 (s, 6 H) 3.74 (s, 3 H) 4.49 (br. s., 2 H) 6.86 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.49 - 7.62 (m, 3 H) 7.70 (dd, J=8.50, 2.45 Hz, 1 H) 7.78 (d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.16 (br. s., 1 H) 8.36 (dd, J=8.88, 2.45 Hz, 2 H) 8.68 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 8.82 (d, J=2.27 Hz, 1 H).

실시예 11

2'-(6-사이클로프로필-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-1H-[3,4']바이피리딘일-6-온의 제조

2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-사이클로프로필-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 8과 유사한 절차로 제조하여, 83 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 623 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 0.78 - 0.97 (m, 2 H) 1.09 - 1.23 (m, 2 H) 1.60 (br. s., 1 H) 1.94 - 2.10 (m, 1 H) 3.55 - 3.88 (m 및 중첩 단일항, 11 H) 4.29 - 4.62 (m, 2 H) 6.61 (dd, J=7.55, 1.89 Hz, 1 H) 6.79 - 6.96 (m, 2 H) 7.09 (d, J=1.51 Hz, 1 H) 7.21 - 7.27 (m, 1 H) 7.53 (d, J=5.29 Hz, 1 H) 7.68 (dd, J=8.69, 2.27 Hz, 1 H) 7.96 (d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.26 (br. s., 1 H) 8.35 (d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.62 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 8.80 (d, J=2.27 Hz, 1 H).

실시예 12

6-3급-부틸-2-(3-하이드록시메틸-4-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-피리딘-2-일)-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-2-메틸-4-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-2H-피리다진-3-온으로 대체하고 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-3급-부틸-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 78 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 593 m/e.

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.47 (s, 9 H) 1.52 - 2.49 (m 및 중첩 단일항, 6 H) 2.99 - 3.38 (m, 1 H) 3.95 (s, 3 H) 4.01 (t, J=7.03 Hz, 1 H) 4.57 (d, J=6.02 Hz, 2 H) 7.00 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 7.66 (d, J=5.02 Hz, 1 H) 7.73 (br. s., 1 H) 7.79 (d, J=1.76 Hz, 1 H) 7.94 (dd, J=8.41, 1.88 Hz, 1 H) 8.26 - 8.37 (m, 2 H) 8.40 (d, J=0.50 Hz, 1 H) 8.47 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 8.72 - 8.81 (m, 2 H)

실시예 13

6-3급-부틸-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-3급-부틸-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 68 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 607 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.46 (s, 9 H) 1.75 - 2.26 (m, 5 H) 2.38 (br. s., 3 H) 2.44 - 2.61 (m, 1 H) 3.05 (d, J=10.20 Hz, 2 H) 3.93 (s, 3 H) 4.00 (t, J=6.99 Hz, 1 H) 4.55 (d, J=6.42 Hz, 2 H) 6.93 (d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.54 (dd, J=8.50, 2.45 Hz, 1 H) 7.64 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 7.77 (d, J=1.89 Hz, 1 H) 7.92 (dd, J=8.50, 1.70 Hz, 1 H) 8.20 - 8.31 (m, 2 H) 8.39 (s, 1 H) 8.45 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 8.71 (s, 1 H) 8.74 (d, J=4.91 Hz, 1 H).

화합물 I-14의 제조

6-클로로-4-(1'-에틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조

250 mL 환저 플라스크 내에서, 3급-부틸 4-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트(620 mg, 1.48 mmol, 당량: 1.00)를 다이클로로메탄(30 mL)과 합쳐 황색 용액을 수득하였다. 여기에 TFA(3.37 g, 2.28 mL, 29.5 mmol, 당량: 20)를 가했다. 이 반응물을 상온에서 N₂ 하에 24시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 진공 중에서 농축하고, 다이클로로메탄에 재용해시키고, 진공 중에서 농축하였다. 잔사를 에터 중에 슬러리화하고, 진공 중에 농축하여, TFA 염을 수득하였다. (M+H)⁺ = 320 m/e. 250 mL 환저 플라스크 내에서, 생성 TFA 염을 DCE(5.0 mL)과 합쳐 황색 현탁액을 수득하였다. 10 mL의 다이클로로메탄을 가하여, 대부분의 고체가 용액이 되게 하였다. 여기에 과량의 아세트알데하이드(652 mg, 836 μL, 14.8 mmol, 당량: 10.0)를 가했다. 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(471 mg, 2.22 mmol, 당량: 1.5)를 가했다. 이 반응 혼합물을 상온에서 3시간 동안 교반하였다. 포화된 NaHCO₃를 가하고, 이 반응 혼합물을 5분 동안 교반하고, 10 % NaHCO₃에 붓고, 다이클로로메탄으로 5회 추출하였다. 합친 유기 추출물을 Na₂SO₄ 상에서 건조하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 24 g, DCM 중의 1% 내지 6% MeOH), 목적 생성물(400 mg)을 수득하였다. (M+H)⁺ = 348 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.18 (br. s., 3 H) 1.87 (br. s., 4 H) 2.07 (br. s., 1 H) 2.54 (br. s., 3 H) 3.16 (br. s., 2 H) 3.83 (s, 3 H) 6.88 (d, J=8.34 Hz, 1 H) 7.55 (d, J=8.34 Hz, 1 H) 8.17 - 8.38 (m, 3 H).

실시예 14

6-3급-부틸-2-{4-[5-(1'-에틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-4-(1'-에틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 61 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 639 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.03 - 1.24 (m, 3 H) 1.43 (s, 9 H) 1.69 - 2.20 (m, 6 H) 2.36 - 2.68 (m, 3 H) 3.12 (d, J=9.82 Hz, 2 H) 3.88 (t, J=7.18 Hz, 1 H) 3.92 (s, 3 H) 4.49 - 4.63 (m, 2 H) 6.92 (d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.46 - 7.59 (m, 3 H) 7.64 (d, J=5.29 Hz, 1 H) 8.21 - 8.29 (m, 2 H) 8.32 (d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.69 (s, 1 H) 8.73 (d, J=4.91 Hz, 1 H).

[반응식 E]

화합물 I-15의 제조

단계 1. 에틸 2-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-2-메틸프로판오에이트

300 mL의 CH₃CN 중의 6-클로로피리딘-3-올(40 g, 309 mmol, 당량: 1.00) 및 에틸 2-브로모-2-메틸프로판오에이트(63.2 g, 48.1 mL, 324 mmol, 당량: 1.05)의 용액에 Cs₂CO₃(216 g, 664 mmol, 309 mmol, 당량: 2.15)을 가하고, 생성 반응 혼합물을 아르곤 분위기 하에 48시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc로 잘 세척하였다. 합친 여액 및 세척액을 물(300 mL)로 세척하고 진탕하여, 유기 상을 수집하였다. 수성 상을 EtOAc(2 X 150 mL)로 역-추출하였다. 합친 유기물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 진공 중에서 농축하였다. 이를 200 g의 실리카의 플러그를 통과시켜 정제하고, 30% EtOAc/헥산으로 용리하여, 목적 생성물(51.1 g)을 연황색 오일로서 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.27 (t, J=7.18 Hz, 3 H) 1.61 (s, 6 H) 4.24 (q, J=7.18 Hz, 2 H) 7.12 - 7.25 (m, 2 H) 8.01 (d, J=2.64 Hz, 1 H).

단계 2. 2-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-2-메틸프로판알의 제조

질소 하에 -20℃ 내지 -30℃(CH₃CN/CO₂)로 냉각된 건조 THF 중의 에틸 2-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-2-메틸프로판오에이트(51.15 g, 210 mmol, 당량: 1.00)의 용액에, LiAlH₄(294 mL, THF 중의 1M, 294 mmol, 1.4 당량)의 용액을 10분에 걸쳐 적가하였다. 이 반응물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. H₂O(6.1 mL)을 천천히 가하고 이어서 10분 동안 교반하고, 5% NaOH(11.4 mL)를 가하고 이어서 10분 동안 교반하고, H₂O(11.4 mL)을 가하고 이어서 10분 동안 교반하여, 이 반응물을 켄칭하였다. MgSO₄을 가하여 물을 흡수하고, 이 혼합물을 셀라이트의 플러그를 통한 필터로 여과하였다. 셀라이트 케이크를 THF(약 400 mL)로 잘 세척하였다.

여과에 의한 고체 알루미늄 염을 THF(300 mL) 중에서 10분 동안 교반하고, 여과하고, THF로 잘 세척하였다. 합친 여액 및 세척액을 진공 중에서 농축하였다. 생성 잔사를 150 mL의 다이클로로메탄에 용해시키고, 동일 부피의 50% 희석된 염수로 세척하였다. 수성 상을 역-추출하였다(2 x 100 mL의 다이클로로메탄). 합친 유기 추출물을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 진공 중에 농축하여, 2-(6-클로로-피리딘-3-일옥시)-2-메틸-프로판-1-올(92% 순도, 41.17)을 연갈색 오일로서 수득하였다.

350 mL의 건조 CH₂Cl₂을 함유하는 오븐-건조된 플라스크를 아르곤 하에 -78℃로 냉각시켰다. 옥살일 클로라이드(31.0 g, 20.7 mL, 244 mmol, 당량: 1.30)를 가하고, 이어서 DMSO(28 mL, 394 mmol, 2.1 당량)를 적가하였다. 이 혼합물을 10분 동안 교반하고, 이어서 60 mL의 CH₂Cl₂에 용해된 2-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-2-메틸프로판-1-올(41.17 g의 92% 순수 물질, 188 mmol, 당량: 1.00)의 용액을 천천히 적가하였다. 이 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. 트라이에틸아민(105 mL, 751 mmol, 4 당량)을 가하고, 빙욕을 제거하고, 이 반응 혼합물을 상온으로 가온하면서 1시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 포화된 NaHCO₃(275 mL)으로 희석하고, 진탕하고, 유기 상을 수집하고, 동일 부피의 염수로 세척하였다. 수성 상을 DCM(2 X 150 mL)으로 역-추출하였다. 합친 유기 상을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 진공 중에서 농축하였다. 생성 잔사를, 60분에 걸쳐 2% 내지 30% EtOAC/Hex 구배로 용리하는 아날로직스 MPLC(SF40-240G 칼럼)으로 정제하여, 목적 생성물(37.1 g)을 연황색 오일로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 200 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.44 (s, 6 H) 7.07 - 7.34 (m, 2 H) 8.05 (d, J=3.02 Hz, 1 H) 9.79 (s, 1 H).

단계 3. 5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-2-클로로-피리딘의 제조

100 mL 압력 플라스크 내에서, 2-(6-클로로피리딘-3-일옥시)-2-메틸프로판알(10 g, 50.1 mmol, 당량: 1.00), 아세트산(5.7 mL, 100 mmol) 및 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(22.3 g, 105 mmol, 당량: 2.1)를 다이클로로메탄(58 mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. 이 용액에, 아제티딘(11.8 mL, 175 mmol, 3.5 당량)을 적가하였다. 이 반응물을 밤새도록 55℃에서 가열하고, 이어서 상온으로 냉각시켰다. 이 반응 혼합물을 120 mL의 포화된 NaHCO₃ 및 80 mL의 다이클로로메탄으로 희석하였다. 이 혼합물을 진탕하고, 다이클로로메탄 층을 수집하였다. 유기 층을 100 mL의 5% NaHCO₃(수성) 용액 및 동일 부피의 50% 희석된 염수로 다시 세척하였다. 수성 상을 2 x 70 mL의 다이클로로메탄으로 역-추출하였다. 합친 유기물을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 생성물을, 100% DCM 내지 5% MeOH/DCM 구배로 용리하는 아날로직스 MPLC(SF25-60 g 칼럼)으로 정제하여, 70:30 혼합물의 목적 생성물:2-(6-클로로-피리딘-3-일옥시)-2-메틸-프로판-1-올(7.5 g)을 연황색 오일로서 수득하였다. 이를 그대로 다음 단계에 사용하였다.

단계 4. 5-(1-(아제티딘-1-일)-2-메틸프로판-2-일옥시)피리딘-2-아민의 제조

5-(1-(아제티딘-1-일)-2-메틸프로판-2-일옥시)-2-클로로피리딘(3.5 g, 14.5 mmol, 당량: 1.00)을 테트라하이드로퓨란(78.0 mL)에 용해시켰다. 아르곤 분위기 하에 2-(다이사이클로헥실포스피노)바이페닐(1.02 g, 2.91 mmol, 당량: 0.2) 및 이어서 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(1.33 g, 1.45 mmol, 당량: 0.1)을 가했다. 최종적으로, THF 중의 1M 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드(43.6 mL, 43.6 mmol, 당량: 3)를 적가하였다. 이 반응 혼합물을 아르곤 분위기 하에 75℃에서 밤새도록 교반하였다. 이 반응 혼합물을 100 mL의 포화된 NH₄Cl에 붓고, EtOAc(100 mL)로 추출하였다. 유기 상을 50% 희석된 염수로 세척하였다. 수성 상을 2 X 80 mL의 EtOAc로 역-추출하였다. 합친 유기 상을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 아날로직스 MPLC(40 g 칼럼, DCM 중의 1% 내지 10% MeOH로 용리)로 정제하여, 목적 생성물(1.66 g)을 갈색 점성 오일로 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.18 (s, 6 H) 2.10 (오중선, J=7.08 Hz, 2 H) 2.54 (s, 2 H) 3.33 (t, J=6.99 Hz, 4 H) 4.25 (br. s., 2 H) 6.43 (d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.12 (dd, J=8.69, 2.64 Hz, 1 H) 7.79 (d, J=2.64 Hz, 1 H).

단계 5. 4-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-6-클로로-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조

4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(2.18 g, 9.75 mmol, 당량: 1.30), 5-(1-(아제티딘-1-일)-2-메틸프로판-2-일옥시)피리딘-2-아민(1.66 g, 7.5 mmol, 당량: 1.00), 잔트포스(Xantphos)(651 mg, 1.13 mmol, 0.15 당량) 및 Cs₂CO₃(8.55 g, 26.3 mmol, 3.5 당량)을 다이옥산 중에서 합치고, 아르다곤 치환을 사용하여 이 반응 혼합물을 진공 하에 탈기시켰다. 이 용액에 Pd₂(dba)₃(515 mg, 563 mM, 0.075 당량)을 가하고, 이 혼합물을 아르곤으로 다시 탈기시켰다. 이 반응 혼합물을 아르곤 하에 90℃에서 18시간 동안 교반한 후, 상온으로 냉각시켰다. 이 반응 혼합물을 셀라이트의 플러그를 통해 여과시켰다. 셀라이트 케이크를 THF 및 다이클로로메탄으로 세척하였다. 합친 여액 및 세척액을 진공 중에서 농축하였다. 조 생성물을 아날로직스 MPLC(60 g 칼럼; 0.5% 내지 15% MeOH/DCM으로 용리)로 정제하여, 목적 생성물(1.43 g)을 황갈색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 364 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.24 (s, 6 H) 2.12 (오중선, J=7.08 Hz, 2 H) 2.59 (s, 2 H) 3.35 (t, J=6.99 Hz, 4 H) 3.81 (s, 3 H) 6.83 (d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.32 (dd, J=8.88, 2.83 Hz, 1 H) 8.09 (d, J=3.02 Hz, 1 H) 8.18 (s, 1 H) 8.25 (s, 1 H).

실시예 15

2-(4-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일)-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 4-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-6-클로로-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 99 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 655 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.25 (s, 6 H) 1.43 (s, 9 H) 2.13 (br. s., 2 H) 2.61 (br. s., 2 H) 3.37 (br. s., 4 H) 3.85 (t, J=6.99 Hz, 1 H) 3.92 (s, 3 H) 4.46 - 4.63 (m, 2 H) 6.91 (d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.34 (dd, J=9.06, 2.64 Hz, 1 H) 7.45 - 7.58 (m, 2 H) 7.64 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 8.09 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.24 - 8.37 (m, 2 H) 8.61 (s, 1 H) 8.73 (d, J=4.91 Hz, 1 H).

실시예 16

2-(4-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일)-6-3급-부틸-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 4-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-6-클로로-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하고 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-3급-부틸-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 37 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 637 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.27 (br. s., 6 H) 1.46 (s, 9 H) 2.16 (br. s., 2 H) 2.64 (br. s., 2 H) 3.39 (br. s., 4 H) 3.93 (s, 3 H) 3.97 (t, J=7.18 Hz, 1 H) 4.54 (d, J=6.42 Hz, 2 H) 6.91 (d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.35 (d, J=7.55 Hz, 1 H) 7.64 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 7.77 (d, J=1.51 Hz, 1 H) 7.92 (dd, J=8.50, 1.70 Hz, 1 H) 8.09 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.28 (s, 1 H) 8.39 (s, 1 H) 8.45 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 8.63 (s, 1 H) 8.74 (d, J=4.91 Hz, 1 H).

화합물 I-17의 제조

[반응식 F]

0℃에서, 무수 메탄올(20 mL) 중의 5-나이트로-1H-피라졸-3-카복실산(1.13 g, 7.19 mmol)의 용액에 티오닐 클로라이드(2.23 g, 1.37 mL, 18.7 mmol)를 적가하였다. 생성 용액을 2시간 동안 가열환류시켰다. 냉각된 용액을 증발 건조시켜, 5-나이트로-2H-피라졸-3-카복실산 메틸 에스터(1.17 g, 95%)를 백색 고체로서 수득하였다.

무수 다이메틸 폼아마이드(20 mL) 중의 메틸 5-나이트로-1H-피라졸-3-카복실레이트(1.87 g, 10.9 mmol)의 용액에 탄산 칼륨(3.02 g, 21.9 mmol) 및 메틸 요오다이드(2.02 g, 0.89 mL, 14.2 mmol)를 가하고, 생성 용액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 생성 혼합물을 물(1 x 150 mL)로 희석하고, 다이클로로메탄(3 x 75 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조하였다. 이 혼합물을 여과하고, 증발시키고, 잔사를 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 25g, 헥산 중의 20% 내지 60% 다이클로로메탄), 2-메틸-5-나이트로-2H-피라졸-3-카복실산 메틸 에스터와 1-메틸-5-나이트로-1H-피라졸-3-카복실산 메틸 에스터의 혼합물(1.64 g, 81 %)을 백색 고체로서 수득하였다.

0℃에서, 테트라하이드로퓨란(20 mL) 중의 2-메틸-5-나이트로-2H-피라졸-3-카복실산 메틸 에스터 및 1-메틸-5-나이트로-1H-피라졸-3-카복실산 메틸 에스터(1.18 g, 6.37 mmol)의 용액에 리튬 알루미늄 하이드라이드 용액(테트라하이드로퓨란 중의 1.0M, 7.65 mL, 7.65 mmol)을 적가하였다. 생성 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반하였다. 이 용액에, 에틸 아세테이트(1 mL) 및 이어서 나트륨 설페이트 십수화물의 결정을 약간 가했다. 생성 혼합물을 30분 동안 교반하고, 이어서 여과하고, 필터 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하고, 여액을 증발시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 80 g, 헥산 중의 50% 내지 70% 에틸 아세테이트), 1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올(496 mg, 50%)을 백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.90 (s, 3 H) 4.53 (d, J=5.67 Hz, 2 H) 5.55 (t, J=5.48 Hz, 1 H) 6.93 (s, 1 H).

0℃에서, 클로로폼(10 mL) 중의 (1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올(496 mg, 3.16 mmol)의 용액에 인 트라이브로마이드(854 mg, 0.30 mL, 3.16 mmol)를 시린지를 통해 적가하였다. 생성 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 0℃로 냉각시키고, 다이클로로메탄(50 mL)으로 희석하였다. 생성 용액을 포화된 수성 중탄산 나트륨(20 mL)으로 염기성(pH 8.5)으로 만들었다. 층들을 분리하고, 수성 층을 다이클로로메탄(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조하였다. 생성 혼합물을 여과하고, 진공 중에서 농축하고, 잔사를 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 40 g, 헥산 중의 20% 내지 40% 에틸 아세테이트), 5-(브로모메틸)-1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸(436 mg, 63%)을 백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.94 (s, 3 H) 4.85 (s, 2 H) 7.14 (s, 1 H).

테트라하이드로퓨란(10 mL) 중의 5-(브로모메틸)-1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸(436 mg, 1.98 mmol)의 용액에 아제티딘(141 mg, 0.17 mL, 2.48 mmol) 및 다이아이소프로필에틸 아민(307 mg, 0.42 mL, 2.38 mmol)을 적가하고, 생성 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 이 용액을 농축하고, 잔사를 다이클로로메탄(50 mL)에 용해시키고, 물(50 mL)로 세척하였다. 수성 층을 메틸렌 클로라이드(2 x 50 mL)로 추출하고, 유기 상들을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조하였다. 생성 혼합물을 여과하고, 증발시키고, 잔사를 플래시 크로마토그래피로 정제하여(40 g, 다이클로로메탄 중의 1% 내지 5% 메탄올), 5-(아제티딘-1-일메틸)-1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸(349 mg, 90%)을 무색 오일로서 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.97 (오중선, J=6.99 Hz, 2 H) 3.15 (t, J=6.99 Hz, 4 H) 3.59 (s, 2 H) 3.88 (s, 3 H) 6.89 (s, 1 H).

에탄올(20 mL) 중의 5-(아제티딘-1-일메틸)-1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸(349 mg, 1.78 mmol)의 용액을 Pd/C(10%, 50 mg)으로 처리하였다. 생성 혼합물을 수소(1 atm) 하에 48시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 상기 패드를 에탄올로 세척하였다. 여액을 진공 중에 농축하여, 5-(아제티딘-1-일메틸)-1-메틸-1H-피라졸-3-아민(292 mg, 99%)을 연황색 오일로서 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.93 (오중선, J=6.89 Hz, 2 H) 3.06 (t, J=6.99 Hz, 4 H) 3.34 (s, 2 H) 3.46 (s, 3 H) 4.36 (s, 2 H) 5.25 (s, 4 H).

다이옥산(10 mL) 중의 5-(아제티딘-1-일메틸)-1-메틸-1H-피라졸-3-아민(292 mg, 1.76 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(393 mg, 1.76 mmol), 세슘 카보네이트(2.00 g, 6.15 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(152 mg, 0.26 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러쉬시킨 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(121 mg, 0.13 mmol)을 가하고, 생성 용액을 90℃에서 18시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 다이클로로메탄(50 mL) 및 물로 희석하였다. 층들을 분리하고, 수성 층을 다이클로로메탄(2 x 25 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합치고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조하였다. 생성 혼합물을 여과하고, 진공 중에서 농축하였다. 형성된 침전물을 여과로 단리하고, 에터로 세척하고, 진공 하에 건조하여, 4-(5-(아제티딘-1-일메틸)-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(272 mg, 50%)을 연황색 고체로 수득하였다. (M+H)⁺ = 309 m/e.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.96 (오중선, J=6.99 Hz, 2 H) 3.11 (t, J=6.99 Hz, 4 H) 3.31 (s, 2 H) 3.63 (s, 3 H) 3.71 (s, 3 H) 6.07 (s, 1 H) 7.68 (s, 1 H) 9.53 (s, 1 H).

실시예 17

2-{4-[5-(5-아제티딘-1-일메틸-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 4-(5-(아제티딘-1-일메틸)-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온으로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 70 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 600 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.43 (s, 9 H) 2.12 (오중선, J=6.99 Hz, 2 H) 3.27 (t, J=6.80 Hz, 4 H) 3.55 (s, 2 H) 3.81 (s, 3 H) 3.90 (s, 3 H) 3.99 (t, J=7.18 Hz, 1 H) 4.54 (d, J=6.04 Hz, 2 H) 5.98 (s, 1 H) 7.42 - 7.57 (m, 2 H) 7.62 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 7.90 (s, 1 H) 7.93 (s, 1 H) 8.31 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.71 (d, J=5.29 Hz, 1 H).

화합물 I-18의 제조

[반응식 G]

아세톤(100 mL) 중의 메틸 5-나이트로-1H-피라졸-3-카복실레이트(5.97 g, 35 mmol)의 용액에 탄산 칼륨(24 g, 174 mmol) 및 1,2-다이브로모에탄(19.7 g, 9.02 mL, 105 mmol)을 가하고, 생성 용액 2시간 동안 가열환류시켰다. 생성 혼합물을 실온으로 밤새도록 가온하고, 여과하고, 농축하고, 잔사를 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 400g, 헥산 중의 20% 내지 70% 에틸 아세테이트), 메틸 1-(2-브로모에틸)-3-나이트로-1H-피라졸-5-카복실레이트와 2-(2-브로모-에틸)-5-나이트로-2H-피라졸-3-카복실산 메틸 에스터(4.86 g, 50%)의 11:2 혼합물을 연황색 고체로 수득하였다. 주요 이성질체 성분의 ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.77 - 4.05 (m, 40 H) 5.02 (t, J=6.04 Hz, 16 H) 7.61 (s, 5.65 H) 7.70 (s, 1 H).

0℃에서, 테트라하이드로퓨란(100 mL) 중의 리튬 보로하이드라이드(755 mg, 34.7 mmol)의 현탁액에 10 mL의 THF 중의 메틸 1-(2-브로모에틸)-3-나이트로-1H-피라졸-5-카복실레이트(4.82 g, 17.3 mmol)를 천천히 가했다. 생성 혼합물을 실온으로 2시간 동안 가온하였다. 생성 혼합물에 에틸 아세테이트(20 mL) 및 물(20 mL)을 가했다. 2상 혼합물을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기 층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조하고, 생성 혼합물을 여과하고, 진공 중에서 농축하여, 2-(2-브로모-에틸)-5-나이트로-2H-피라졸-3-일]-메탄올과 (1-(2-브로모에틸)-3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올의 조 혼합물(4.24, 97%)을 연황색 오일로서 수득하고, 이를 그대로 다음 반응에 사용하였다.

0℃로 냉각된 클로로폼(100 mL) 중의 (1-(2-브로모에틸)-3-나이트로-1H-피라졸-5-일)메탄올(4.24 g, 17 mmol)의 용액에, 인 트라이브로마이드(4.59 g, 1.6 mL, 17 mmol)를 적가하였다. 생성 용액을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 생성 용액을 0℃로 냉각시키고, 다이클로로메탄(50 mL)으로 희석하였다. 생성 용액을 포화된 수성 중탄산 나트륨(20 mL)으로 염기성(pH 8.5)으로 만들었다. 층들을 분리하고, 수성 층을 다이클로로메탄(3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 염수(30 mL)로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조하였다. 생성 혼합물을 여과하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, SF40-240 g, 헥산 중의 15% 내지 40% EtOAc), 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-나이트로-1H-피라졸(3.58 g, 67%)을 백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 3.92 (t, J=6.23 Hz, 2 H) 4.69 (t, J=6.23 Hz, 2 H) 4.89 (s, 2 H) 7.19 (s, 1 H).

250 mL 환저 플라스크 내에서, 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-나이트로-1H-피라졸(3.58 g, 11.4 mmol, 당량: 1.00)을 THF(120 mL)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 여기에, THF 중의 2.0M 메틸아민(40.0 mL, 80.1 mmol, 당량: 7.00)을 적가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 76시간 동안 교반하였다. 이후, 이 반응물을 농축하고, 생성 고체를 EtOAc(50mL)와 10% 수성 K₂CO₃(30mL)의 혼합물과 함께 교반하였다. 층들을 분리하고, 수성 상을 EtOAc(2x30mL)로 역-추출하였다. 합친 유기 층을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에 농축하여, 거의 건조시켰다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하였다(실리카 겔, 240g, DCM 중의 1% 내지 10% MeOH). 생성물을 함유하는 분획들을 합치고, 농축하고, MeOH로부터 재결정화하였다. 고체를 여과하고, 에터로 세척하여, 목적 생성물(1.6 g)을 회백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.38 (s, 3 H) 2.89 (t, J=5.67 Hz, 2 H) 3.61 (s, 2 H) 4.19 (t, J=5.48 Hz, 2 H) 6.83 (s, 1 H).

에탄올(20 mL) 중의 5-메틸-2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진(1.6 g, 8.7 mmol)의 용액을 Pd/C(10%, 300 mg)으로 처리하고, 아르곤으로 플러쉬시켰다. 생성 혼합물을 수소(1 atm) 하에 밤새도록 교반하였다. 이 반응 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 이 패드를 에탄올로 세척하였다. 여액을 진공 중에 농축하여, 5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민(1.35 g, 정량적)을 연황색 고체로 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.30 (s, 3 H) 2.71 (t, J=5.67 Hz, 2 H) 3.37 (s, 2 H) 3.74 (t, J=5.67 Hz, 2 H) 4.46 (s, 2 H) 5.14 (s, 1 H).

다이옥산(15 mL) 중의 5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민(342 mg, 2.25 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(527 mg, 2.36 mmol), 세슘 카보네이트(2.2 g, 6.74 mmol) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(195 mg, 0.34 mmol)의 용액을 아르곤으로 플러쉬시킨 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(154 mg, 0.17 mmol)을 가하고, 생성 용액을 110℃의 밀봉된 튜브 내에서 18시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 케이크를 다이클로로메탄으로 세척하였다. 합친 여액 및 세척액을 3M HCl로 희석하고, 분리하였다. DCM 층을 수성 HCl으로 역-추출하고, 버렸다. 합친 수성 HCl 추출물을 3M NaOH로 염기성으로 만들었다. 생성 수성 상을 DCM으로 2회 추출하였다. 합친 DCM 추출물을 진공 중에서 농축하고, 생성 고체를 에틸 에터로 마쇄하고, 여과하고, 건조하여, 6-클로로-2-메틸-4-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(455 mg, 69%)을 회백색 고체로서 수득하였다.¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 2.35 (s, 3 H) 2.81 (t, J=5.48 Hz, 2 H) 3.51 (s, 2 H) 3.63 (s, 3 H) 4.03 (t, J=5.48 Hz, 2 H) 5.98 (s, 1 H) 7.71 (s, 1 H) 9.60 (s, 1 H).

실시예 18

6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-2-메틸-4-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온으로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 1.02 g의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 586 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.43 (s, 9 H) 2.52 (s, 3 H) 2.94 (t, J=5.48 Hz, 2 H) 3.66 (s, 2 H) 3.90 (s, 3 H) 3.97 (t, J=6.99 Hz, 1 H) 4.15 (t, J=5.48 Hz, 2 H) 4.46 - 4.61 (m, 2 H) 5.84 (s, 1 H) 7.45 - 7.58 (m, 2 H) 7.62 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 7.91 (s, 1 H) 7.97 (s, 1 H) 8.31 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.71 (d, J=4.91 Hz, 1 H).

실시예 19

6-3급-부틸-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-2-메틸-4-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온으로 대체하고 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-3급-부틸-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 72 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 568 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.45 (s, 9 H) 2.54 (s, 3 H) 2.97 (br. s., 2 H) 3.68 (s, 2 H) 3.90 (s, 3 H) 4.08 (t, J=6.99 Hz, 1 H) 4.17 (t, J=5.48 Hz, 2 H) 4.47 - 4.56 (m, 2 H) 5.86 (s, 1 H) 7.62 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 7.77 (d, J=1.89 Hz, 1 H) 7.86 - 8.01 (m, 3 H) 8.38 (s, 1 H) 8.44 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 8.72 (d, J=4.91 Hz, 1 H).

실시예 20

6-사이클로프로필-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-아이소퀴놀린-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-2-메틸-4-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온으로 대체하고 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-사이클로프로필-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 33 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 569 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 0.81 - 0.93 (m, 2 H) 1.07 - 1.22 (m, 2 H) 1.95 - 2.09 (m, 1 H) 2.54 (s, 3 H) 2.96 (br. s., 2 H) 3.68 (br. s., 2 H) 3.92 (s, 3 H) 4.17 (t, J=5.43 Hz, 2 H) 4.24 (dd, J=10.48, 2.91 Hz, 1 H) 4.45 - 4.64 (m, 2 H) 5.91 (s, 1 H) 6.57 (dd, J=7.58, 2.02 Hz, 1 H) 6.83 (dd, J=12.63, 1.52 Hz, 1 H) 7.08 (d, J=1.52 Hz, 1 H) 7.26 (d, J=7.33 Hz, 2 H) 7.62 (d, J=5.05 Hz, 1 H) 7.93 (s, 1 H) 8.01 (s, 1 H) 8.68 (d, J=5.05 Hz, 1 H).

화합물 I-21의 제조

단계 1. 2-나이트로-5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진의 제조

250 mL 환저 플라스크 내에서, 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-나이트로-1H-피라졸(1.54 g, 4.92 mmol, 당량: 1.00)을 CH₃CN(60 mL)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 여기에 옥세탄-3-아민(432 mg, 5.91 mmol, 당량: 1.20) 및 DIPEA(1.14 g, 1.55 mL, 8.86 mmol, 당량: 1.80)을 적가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다.

이 혼합물을 농축하고, 잔사를 EtOAc(50mL) 중에 취하고, 물(50mL)로 세척하였다. 유기 층을 MgSO₄ 상에서 건조하고,진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, SF25-40 g, 헥산 중의 50% EtOAc 내지 100% EtOAc), 목적 생성물(674 mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 2.94 - 3.01 (m, 2 H) 3.71 (s, 2 H) 3.87 (오중선, J=6.32 Hz, 1 H) 4.31 - 4.39 (m, 2 H) 4.67 - 4.75 (m, 2 H) 4.77 - 4.84 (m, 2 H) 6.68 (s, 6 H).

단계 2. 5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아민의 제조

250 mL 환저 플라스크 내에서, 2-나이트로-5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진(674 mg, 2.99 mmol, 당량: 1.00)을 EtOH(50 mL)과 합쳐, 연황색 현탁액을 수득하였다. 이 반응 혼합물을 아르곤으로 3회 진공 플러쉬시키고, 이어서 10% Pd/C(159 mg, 1.5 mmol, 당량: 0.5)을 가하고, 이 반응 혼합물을 수소 풍선 하에 밤새도록 교반하였다. 이 반응물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하였다. 이 셀라이트의 패드를 에탄올로 세척하였다. 합친 여액 및 세척액을 진공 중에 농축하여, 목적 생성물(555 mg)을 수득하였다. (M+H)⁺ = 195 m/e.

단계 3. 6-클로로-2-메틸-4-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]-피라진-2-일아미노)-2H-피리다진-3-온의 제조

250 mL 환저 플라스크 내에서, 5-(옥세탄-3-일)-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민(555 mg, 2.86 mmol, 당량: 1.00), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(638 mg, 2.86 mmol, 당량: 1.00), 세슘 카보네이트(3.26 g, 10.0 mmol, 당량: 3.50) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(248 mg, 429 μmol, 당량: 0.15)을 다이옥산(40 mL)과 합치고, 이 반응 혼합물을 아르곤으로 3회 진공 플러쉬시켰다. 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(123 mg, 214 μmol, 당량: 0.075)을 가하고, 이 반응물을 90℃에서 18시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 50 mL의 다이클로로메탄 및 물로 희석하였다. 수성 층을 DCM(2 x 25 mL)으로 역-추출하였다. 합친 유기 층을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에 농축하여, 거의 건조시켰다. 생성 고체를 여과에 의해 수집하고, 에틸 에터로 세척하였다. 여액 및 세척액 중에 형성된 고체의 제 2 수득물(crop)을 여과에 의해 수집하고, 에틸 에터로 세척하였다. 합친 고체를 진공 하에 건조하여, 목적 생성물(669 mg)을 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 337 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 3.01 (t, J=5.18 Hz, 2 H) 3.73 (s, 2 H) 3.81 (s, 3 H) 3.92 (t, J=6.44 Hz, 1 H) 4.26 (t, J=5.43 Hz, 2 H) 4.79 (d, J=6.57 Hz, 4 H) 5.77 (s, 1 H) 7.60 (s, 1 H) 7.88 (s, 1 H).

실시예 21

6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-2-메틸-4-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]-피라진-2-일아미노)-2H-피리다진-3-온으로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 106 mg의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 628 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.44 (s, 9 H) 2.91 (t, J=5.48 Hz, 2 H) 3.65 (s, 2 H) 3.83 (t, J=6.23 Hz, 1 H) 3.91 (s, 3 H) 4.18 (t, J=5.48 Hz, 2 H) 4.54 (s, 2 H) 4.75 (오중선, J=6.52 Hz, 4 H) 5.89 (s, 1 H) 7.47 - 7.58 (m, 2 H) 7.62 (d, J=5.29 Hz, 1 H) 7.91 (s, 1 H) 7.98 (s, 1 H) 8.32 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.71 (d, J=4.91 Hz, 1 H).

화합물 I-22의 제조

단계 1. 5-에틸-2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진의 제조

100 mL 환저 플라스크 내에서, 1-(2-브로모에틸)-5-(브로모메틸)-3-나이트로-1H-피라졸(0.7 g, 2.24 mmol, 당량: 1.00)을 THF(25 mL)와 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 여기에 에틸아민(7.83 mL, THF 중의 2M, 15.7 mmol, 당량: 7)을 적가하고, 이 반응 혼합물을 상온에서 12시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 농축하고, 생성 고체를 EtOAc(250mL)와 10% 수성 K₂CO₃(200mL)의 혼합물과 함께 교반하였다. 층들을 분리하고, 수성 층을 EtOAc(2x100mL)로 역-추출하였다. 합친 유기 층을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하였다(실리카 겔, 40g, DCM 중의 1% 내지 4% MeOH). 생성물을 함유하는 분획들을 합치고, 농축하여, 목적 생성물(427 mg)을 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.20 (t, J=7.18 Hz, 3 H) 2.68 (q, J=7.18 Hz, 2 H) 3.01 (t, J=5.48 Hz, 2 H) 3.72 (s, 2 H) 4.29 (t, J=5.67 Hz, 2 H) 6.64 (s, 1 H).

단계 2. 5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아민의 제조

250 mL 환저 플라스크 내에서, 5-에틸-2-나이트로-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진(427 mg, 2.17 mmol, 당량: 1.00)을 EtOH(50 mL)과 합쳐 연황색 현탁액을 수득하였다. 이 반응 혼합물을 아르곤으로 3회 진공 플러쉬시키고, 이어서 10% Pd/C(115 mg, 1.08 mmol, 당량: 0.5)을 가하고, 이 반응 혼합물을 수소 풍선 하에 밤새도록 교반하였다. 이 반응물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하였다. 이 셀라이트의 패드를 에탄올로 세척하였다. 합친 여액 및 세척액을 진공 중에 농축하여, 목적 생성물(350 mg)을 수득하였다. (M+H)⁺ = 167 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.16 (t, J=7.18 Hz, 3 H) 2.59 (q, J=7.18 Hz, 2 H) 2.79 - 3.03 (m, 2 H) 3.57 (중첩 s, 4 H) 3.87 - 4.12 (m, 2 H) 5.35 (s, 1 H).

단계 3. 6-클로로-4-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조

250 mL 환저 플라스크 내에서, 5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-아민(350 mg, 2.11 mmol, 당량: 1.00), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(471 mg, 2.11 mmol, 당량: 1.00), 세슘 카보네이트(2.4 g, 7.37 mmol, 당량: 3.50) 및 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(183 mg, 316 μmol, 당량: 0.15)을 다이옥산(40 mL)과 합치고, 이 반응 혼합물을 아르곤으로 플러쉬시켰다. 이어서, 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(90.8 mg, 158 μmol, 당량: 0.075)을 가하고, 이 반응 혼합물을 90℃에서 18시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 50 mL의 다이클로로메탄 및 물로 희석하였다. 수성 층을 DCM(2 x 25 mL)으로 역-추출하였다. 합친 유기 층을 MgSO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하였다(실리카 겔, 40 g, DCM 중의 0% 내지 3% MeOH). 순수한 분획들을 EtOAc로 마쇄하였다. 혼합된 분획 및 여액을 크로마토그래피로 정제하여 순수한 생성물을 수득하고, 이를 마쇄된 고체와 합쳐, 목적 생성물(500 mg)을 수득하였다. (M+H)⁺ = 309 m/e.

¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.21 (t, J=7.18 Hz, 3 H) 2.67 (d, J=6.80 Hz, 2 H) 2.99 (br. s., 2 H) 3.69 (br. s., 2 H) 3.79 (s, 3 H) 4.16 (d, J=5.29 Hz, 2 H) 5.72 (s, 1 H) 7.56 (s, 1 H) 7.85 (s, 1 H).

실시예 22

6-3급-부틸-2-{4-[5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-4-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 196 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 600 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.21 (td, J=6.99, 2.27 Hz, 3 H) 1.43 (s, 9 H) 2.66 (d, J=6.80 Hz, 2 H) 2.98 (br. s., 2 H) 3.69 (br. s., 2 H) 3.90 (s, 3 H) 3.97 (t, J=6.99 Hz, 1 H) 4.15 (t, J=4.53 Hz, 2 H) 4.47 - 4.60 (m, 2 H) 5.85 (s, 1 H) 7.46 - 7.57 (m, 2 H) 7.62 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 7.89 (s, 1 H) 7.97 (s, 1 H) 8.31 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.71 (d, J=4.91 Hz, 1 H).

화합물 I-23의 제조

[반응식 H]

단계 1. 4,N-다이-3급-부틸-2-플루오로-6-하이드록시메틸-벤즈아마이드의 제조

실온에서 MeOH(100 mL) 및 CH₂Cl₂(150 mL)의 혼합물 중의 2,5-다이-3급-부틸-7-플루오로-3-하이드록시아이소인돌린-1-온(4.3 g, 15.4 mmol, 당량: 1.00)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(582 mg, 15.4 mmol, 당량: 1.00)를 가했다. 이 반응 혼합물을 동일한 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 나트륨 보로하이드라이드(582 mg, 15.4 mmol, 당량: 1.00)를 다시 가하고, 이 반응 혼합물을 추가로 1시간 동안 교반하였다. 이후, 나트륨 보로하이드라이드(582 mg, 15.4 mmol, 당량: 1.00)를 한번 더 가하고, 이 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 (조심스럽게) HCl 수용액(10%, 100 mL)에 부었다. 생성물을 CH₂Cl₂(2x100 mL)으로 추출하였다. 유기 추출물들을 합치고, 건조하고(Na₂SO₄), 진공 하에 증발시켜, 4.2 g의 생성물(97% 수율)을 수득하였다: LC/MS, m/z 282[M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.33 (s, 9 H) 1.49 (s, 9 H) 4.59 (s, 2 H) 6.02 (br. s., 2 H) 7.08 (dd, J=12.63, 1.77 Hz, 1 H) 7.22 (d, J=1.77 Hz, 1 H).

단계 2. 4,N-다이-3급-부틸-2-플루오로-6-메틸-벤즈아마이드의 제조

MeOH(100 mL) 중의 N,4-다이-3급-부틸-2-플루오로-6-(하이드록시메틸)벤즈아마이드(4.3 g, 15.3 mmol, 당량: 1.00)의 용액에 10% Pd/C(50% 습윤)(1.19 g)을 가하고, 이 반응 혼합물을 H₂ 분위기(풍선) 하에 3시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 셀라이트 패드 상에서 여과하고, 이 셀라이트의 패드를 EtOH(3x50 mL)로 세척하였다. 합친 여액 및 세척액을 진공 하에 증발시켜, 4.01 g의 생성물(99% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다: LC/MS, m/z 266[M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.30 (s, 9 H) 1.48 (s, 9 H) 2.41 (s, 3 H) 5.60 (br. s., 2 H) 6.90 - 6.95 (m, 1 H) 7.00 (d, J=0.51 Hz, 1 H).

단계 3. 4-3급-부틸-2-플루오로-6-메틸-벤즈아마이드의 제조

마이크로파-보조된 조건 하에, TFA(48 mL) 중의 N,4-다이-3급-부틸-2-플루오로-6-메틸벤즈아마이드(4.01 g, 15.1 mmol, 당량: 1.00)의 용액(4x12 mL, 마이크로파 바이알)을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 4개의 마이크로파 바이알의 내용물을 합치고, 진공 하에 증발시키고, 잔사를 (조심스럽게) NaHCO₃의 포화된 수용액(100 mL)에 붓고, 이 생성물을 CH₂Cl₂(2x100 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 건조하고(Na₂SO₄), 진공 하에 증발시켰다. 조 물질을 크로마토그래피로 정제하여(SiO₂, CH₂Cl₂ 100% 내지 30% AcOEt, 30분 내에), 목적 생성물(2.55 g, 81% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LC/MS, m/z 210[M+H]⁺ . ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.32 (s, 9 H) 2.49 (t, J=0.63 Hz, 3 H) 5.86 (br. s., 2 H) 6.94 - 7.00 (m, 1 H) 7.05 (dd, J=1.26, 0.51 Hz, 1 H).

단계 4. 4-3급-부틸-n-[1-다이메틸아미노-메트-(e)-일리덴]-2-플루오로-6-메틸-벤즈아마이드의 제조

THF(49.2 mL) 중의 4-3급-부틸-2-플루오로-6-메틸벤즈아마이드(1.28 g, 6.12 mmol, 당량: 1.00)의 용액에 N,N-다이메틸폼아마이드 다이메틸 아세탈(802 mg, 897 μL, 6.73 mmol, 당량: 1.1)을 가하고, 이 반응 혼합물을 3시간 동안 가열환류시켰다. 이 반응 혼합물을 진공 하에 증발 건조시켜, 목적 생성물(1.6 g, 99% 수율)을 수득하였다. 조 생성물을 임의의 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.30 (s, 9 H) 2.42 (s, 3 H) 3.16 (s, 3 H) 3.20 (s, 3 H) 6.93 (dd, J=11.75, 1.64 Hz, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 8.57 (s, 1 H).

단계 5. 6-3급-부틸-8-플루오로-2H-아이소퀴놀린-1-온, 칼륨 염의 제조

THF(38 mL) 중의 (E)-4-3급-부틸-N-((다이메틸아미노) 메틸렌)-2-플루오로-6-메틸벤즈아마이드(1.6 g, 6.05 mmol, 당량: 1.00)의 용액에 칼륨 3급-부톡사이드(7.87 mL의 1M, 7.87 mmol, 당량: 1.30)를 가하고, 이 반응 혼합물을 2시간 동안 가열환류시켰다(침전물이 형성됨). 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에터(40 mL)를 가했다. 이 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고(진공 하에), 에터(40 mL)로 세척하여, 1.22 g의 생성물(78% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다; LC/MS, m/z 220[M+H]⁺.

단계 6. 6-3급-부틸-8-플루오로-2H-아이소퀴놀린-1-온의 제조

DCM(200 mL) 중의 6-3급-부틸-8-플루오로-2H-아이소퀴놀린-1-온, 칼륨 염(2.4 g, 9.29 mmol, 당량: 1.00)의 현탁액에 수성 HCl(100 mL)을 가하고, 이 반응 혼합물을 RT에서 30분 동안 교반하였다. 유기 층을 분리하고, 건조하고(Na₂SO₄), 진공 하에 증발시켜, 생성물(1.9 g)을 백색 분말로서 93% 수율로 수득하였다: LC/MS, m/z 220[M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 7.70 (dd, J=7.20, 1.14 Hz, 1 H) 8.32 (dd, J=7.07, 5.81 Hz, 1 H) 8.42 (dd, J=13.89, 1.77 Hz, 1 H) 8.60 (d, J=1.77 Hz, 1 H).

단계 7. 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드의 제조

실온에서 THF(11.1 mL) 중의 6-3급-부틸-8-플루오로아이소퀴놀린-1(2H)-온(225 mg, 1.03 mmol, 당량: 1.00)의 용액에 THF(1 M)(1.13 mL, 1.13 mmol, 당량: 1.1) 중의 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드를 가했다. 이 반응 혼합물을 동일한 온도에서 20분 동안 교반하였다. 이어서, THF(5 mL) 중의 2-플루오로-4-요오도니코틴알데하이드(335 mg, 1.33 mmol, 당량: 1.3)를 가했다. 이 반응 혼합물을 65℃로 가열하고, 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 이 반응물을 NH₄Cl의 포화된 수용액(30 mL)에 붓고, 생성물을 EtOAc(2x50 mL)로 추출하였다. 합친 유기 추출물을 건조하고(Na₂SO₄), 진공 하에 증발시켰다. 조 물질을 CH₂Cl₂(2 mL)으로 희석하고, 크로마토그래피로 정제하여(SiO₂, Hex:AcOEt, 100% 내지 70%, 25분 내에), 목적 생성물(350 mg)을 연황색 분말로서 수득하였다. LC/MS, m/z 451[M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.39 (s, 9 H) 6.65 (dd, J=7.58, 2.02 Hz, 1 H) 7.21 (dd, J=13.64, 1.77 Hz, 1 H) 7.31 (d, J=1.77 Hz, 1 H) 7.55 (d, J=7.58 Hz, 1 H) 7.91 (d, J=5.05 Hz, 1 H) 8.28 (d, J=5.31 Hz, 1 H) 9.94 (s, 1 H).

실시예 23

6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-아이소퀴놀린-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-2-메틸-4-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온으로 대체하고 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 60 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 585 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.42 (s, 9 H) 2.55 (s, 3 H) 2.98 (br. s., 2 H) 3.70 (br. s., 2 H) 3.92 (s, 3 H) 4.18 (br. s., 2 H) 4.24 (dd, J=10.74, 3.16 Hz, 1 H) 4.44 - 4.63 (m, 2 H) 5.91 (s, 1 H) 6.64 (dd, J=7.58, 2.02 Hz, 1 H) 7.24 (dd, J=13.64, 1.77 Hz, 1 H) 7.28 (d, J=7.58 Hz, 1 H) 7.35 (d, J=1.77 Hz, 1 H) 7.62 (d, J=5.05 Hz, 1 H) 7.93 (s, 1 H) 8.00 (s, 1 H) 8.68 (d, J=5.05 Hz, 1 H).

실시예 24

6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-아이소퀴놀린-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-2-메틸-4-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]-피라진-2-일아미노)-2H-피리다진-3-온으로 대체하고 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 100 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 627 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.42 (s, 9 H) 2.84 - 2.96 (m, 2 H) 3.60 - 3.71 (m, 2 H) 3.80 - 3.87 (m, 1 H) 3.92 (s, 3 H) 4.19 (t, J=5.43 Hz, 2 H) 4.46 - 4.60 (m, 2 H) 4.70 - 4.75 (m, 2 H) 4.76 - 4.81 (m, 2 H) 5.96 (s, 1 H) 6.65 (dd, J=7.45, 2.15 Hz, 1 H) 7.21 - 7.27 (m, 2 H) 7.27 (d, J=7.8 Hz, 1 H) 7.35 (d, J=1.77 Hz, 1 H) 7.62 (d, J=5.05 Hz, 1 H) 7.92 (s, 1 H) 8.02 (s, 1 H) 8.68 (d, J=5.05 Hz, 1 H).

실시예 25

6-3급-부틸-2-{4-[5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-8-플루오로-2H-아이소퀴놀린-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-4-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하고 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 65 mg의 표제 화합물을 연황색 고체로 수득하였다. (M+H)⁺ = 599 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.17 - 1.27 (m, 3 H) 1.41 (s, 9 H) 2.68 (br. s., 2 H) 2.98 (br. s., 2 H) 3.70 (br. s., 2 H) 3.92 (s, 3 H) 4.14 (br. s., 2 H) 4.24 (dd, J=10.61, 3.28 Hz, 1 H) 4.43 - 4.63 (m, 2 H) 5.92 (s, 1 H) 6.64 (dd, J=7.58, 2.02 Hz, 1 H) 7.24 (dd, J=13.39, 1.77 Hz, 1 H) 7.28 (d, J=7.4 Hz, 1 H) 7.35 (d, J=1.52 Hz, 1 H) 7.62 (d, J=5.05 Hz, 1 H) 7.91 (s, 1 H) 8.00 (s, 1 H) 8.68 (d, J=5.05 Hz, 1 H).

실시예 26

6-3급-부틸-2-{4-[5-(5-사이클로프로필메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 1에서 옥세탄-3-아민을 사이클로프로필메탄아민으로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 21과 유사한 절차로 제조하여, 100 mg의 표제 화합물을 연황색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 626 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 0.01 (d, J=4.15 Hz, 2 H) 0.42 (d, J=7.55 Hz, 2 H) 0.77 (br. s., 1 H) 1.22 (s, 9 H) 2.30 (br. s., 2 H) 2.86 (br. s., 2 H) 3.58 (br. s., 2 H) 3.69 (s, 3 H) 3.77 (t, J=7.18 Hz, 1 H) 3.96 (br. s., 2 H) 4.32 (d, J=7.18 Hz, 2 H) 5.65 (s, 1 H) 7.26 - 7.36 (m, 2 H) 7.41 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 7.68 (s, 1 H) 7.76 (s, 1 H) 8.10 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.50 (d, J=5.29 Hz, 1 H).

[반응식 I]

화합물 I-27의 제조

단계 1. 2-(6-아미노-피리딘-3-일옥시)-2-메틸-프로피온산 에틸 에스터의 제조

무수 아세토나이트릴(25 mL) 중의 6-아미노피리딘-3-올 하이드로브로마이드(2 g, 10.5 mmol) 및 에틸-2-브로모-2-메틸프로파네이트(2.04 g, 10.5 mmol)를 함유하는 플라스크에 세슘 카보네이트(10.7 g, 33 mmol)를 가하고, 이 물질을 아르곤 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 물(60 mL) 및 에틸 아세테이트(60 mL)를 가하고, 이 물질을 분별 깔때기 내에서 진탕하였다. 유기 상을 수집하고, 수성 상을 에틸 아세테이트(2 x 50 mL)로 역-추출하였다. 합친 유기 상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 중에서 농축하여, 황금 갈색 고체(1.626 g)를 수득하였다. (M+H)⁺= 225 m/e.

단계 2. 2-[6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-피리딘-3-일옥시]-2-메틸-프로피온산 에틸 에스터의 제조

건조 다이옥산(60 mL) 중의 2-(6-아미노-피리딘-3-일옥시)-2-메틸-프로피온산 에틸 에스터(1.365 g, 6.09 mmol), 4-브로모-6-클로로-2-메틸피리다진-3(2H)-온(1.77 g, 7.91 mmol), 4,5-비스(다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐(528 mg, 0.913 mmol) 및 세슘 카보네이트(6.94 g, 21.3 mmol)를 함유하는 플라스크를 진공 하에 배기하고, 아르곤으로 재-충전하였다(3회 반복). 트리스(다이벤질리덴아세톤)이팔라듐(0)(418 mg, 0.457 mmol)을 가하고, 이 플라스크를 진공 하에 배기하고, 아르곤으로 재-충전하였다(3회 반복). 이 플라스크를 오일 욕 중에 두고, 90℃로 가열하고, 아르곤 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 이 플라스크를 상온으로 냉각시키고, 이 물질을 셀라이트의 플러그를 통해 여과하고, 다이옥산으로 잘 세척하였다. 휘발성 물질을 진공 중에서 농축하고, 잔사를, 5% 내지 25% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여, 목적 생성물(2.035 g)을 연한 황갈색 분말로 수득하였다. (M+H)⁺=367 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.30 (t, J=7.18 Hz, 3 H) 1.59 (s, 6 H) 3.80 (s, 3 H) 4.26 (q, J=7.18 Hz, 2 H) 6.83 (d, J=9.06 Hz, 1 H) 7.26 - 7.30 (m, 1 H) 8.04 (d, J=3.02 Hz, 1 H) 8.18 (s, 1 H) 8.22 (s, 1 H).

단계 3. 6-클로로-4-[5-(2-하이드록시-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조

2-[6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-피리딘-3-일옥시]-2-메틸-프로피온산 에틸 에스터(1.23 g, 3.35 mmol, 당량: 1.00)를 무수 THF(25 mL)에 용해시키고, 질소 분위기 하에 -30℃로 냉각시켰다(드라이 아이스/아세토나이트릴 냉각 욕). 여기에 리튬 알루미늄 하이드라이드의 용액(4.7 mL, 4.69 mmol, THF 중의 1.0 M)을 10분에 걸쳐 천천히 적가했다. 상기 욕의 온도를 약 -20℃로 유지하면서, 이 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 물(0.1 mL)을 가하여, 이 반응물을 조심스럽게 켄칭하고, 10분 동안 주위 온도에서 교반하였다. 이어서, 5% 수산화 나트륨 수용액(0.19 mL)을 가하고, 이 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 물(0.19 mL)을 가하고, 10분 동안 계속 교반하였다. 최종적으로, 마그네슘 설페이트를 가하고, 이 물질을 셀라이트의 플러그를 통해 여과하고, 테트라하이드로퓨란으로 잘 세척하였다. 합친 여액 및 세척액을 회전식 증발기 상에서 약 절반의 부피로 농축하였다. 에틸 아세테이트(50 mL) 및 물(70 mL)을 가하고, 이 물질을 분별 깔때기 내에서 진탕하였다. 유기 상을 수집하고, 수성 상을 에틸 아세테이트(2 x 40 mL)로 역-추출하였다. 유기 물질들을 합치고, 마그네슘 설페이트로 건조하고, 여과하고, 진공 중에서 농축하였다. 잔사를 뜨거운 다이클로로메탄/헥산으로부터 마쇄하여, 목적 생성물(1.041 g)을 연한 황갈색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺= 325 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.28 (s, 6 H) 3.81 (s, 3 H) 6.92 (d, J=8.69 Hz, 1 H) 7.30 (s, 1 H) 7.36 (dd, J=8.69, 2.64 Hz, 1 H) 8.12 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.28 (s, 1 H).

단계 4. 2-[6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노)-피리딘-3-일옥시]-2-메틸-프로피온알데하이드의 제조

DCM(100 mL) 중의 6-클로로-4-(5-(1-하이드록시-2-메틸프로판-2-일옥시)피리딘-2-일아미노)-2-메틸피리다진-3(2H)-온(750 mg, 2.31 mmol, 당량: 1.00)의 현탁액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(1.27 g, 3.00 mmol, 당량: 1.30)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 약 40분 동안 교반하였다. 여기에 에터(100 mL) 및 이어서 50 mL의 NaOH 용액(1 M)을 가했다. 이 혼합물을 추가로 15분 동안 교반하고, 분별 깔때기로 옮겼다. 유기 층을 동일 부피의 NaOH(1M) 및 물(50 mL)로 세척하고, 건조하고(Na₂SO₄), 진공 하에 증발시켜, 목적 생성물(668 mg)을 연갈색 분말로 수득하였다. (M+H)⁺= 323 m/e. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.36 (s, 6 H) 3.68 (s, 3 H) 7.43 - 7.47 (m, 1 H) 7.51 - 7.55 (m, 1 H) 8.10 (dd, J=3.03, 0.51 Hz, 1 H) 8.27 (s, 1 H) 9.69 (s, 1 H) 9.82 (s, 1 H).

단계 5. 6-클로로-4-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-2-메틸-2H-피리다진-3-온의 제조

DCE(70 mL) 중의 2-(6-(6-클로로-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)피리딘-3-일옥시)-2-메틸프로판알(665 mg, 2.06 mmol, 당량: 1.00)의 용액에 3,3-다이플루오로아제티딘 하이드로클로라이드(347 mg, 2.68 mmol, 당량: 1.30)를 가했다. 이 혼합물을 RT에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(655 mg, 3.09 mmol, 당량: 1.5)를 가하고, 18시간 동안 계속 교반하였다. 이 반응 혼합물을 포화된 NaHCO₃ 용액으로 희석하고, DCM(5x20 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 건조하고(MgSO₄), 진공 중에서 농축하였다. 생성 잔사를 크로마토그래피로 정제하여(SiO₂-50 g, Hex:AcOEt, 20분 내에 7:3, 이어서 30분 내에 50%), 목적 생성물(566 mg)을 백색 분말로서 수득하였다. (M+H)⁺= 400 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.29 (s, 6 H) 2.79 (br. s., 2 H) 3.70 - 3.81 (m, 4 H) 3.83 (s, 3 H) 6.87 (dd, J=8.84, 0.51 Hz, 1 H) 7.32 (d, J=8.59 Hz, 1 H) 8.10 (d, J=2.78 Hz, 1 H) 8.22 (s, 1 H) 8.28 (s, 1 H).

실시예 27

6-3급-부틸-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일]-8-플루오로-2H-아이소퀴놀린-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-4-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하고 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 95 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 690 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.30 (s, 6 H) 1.41 (s, 9 H) 2.80 (br. s., 1 H) 3.76 (br. s., 4 H) 3.94 (s, 3 H) 4.14 (dd, J=11.12, 3.03 Hz, 1 H) 4.45 - 4.67 (m, 2 H) 6.65 (dd, J=7.58, 2.02 Hz, 1 H) 6.96 (d, J=8.84 Hz, 1 H) 7.24 (dd, J=13.64, 1.77 Hz, 1 H) 7.30 (d, J=7.33 Hz, 2 H) 7.31 - 7.36 (m, 2 H) 7.63 (d, J=5.05 Hz, 1 H) 8.09 (d, J=2.78 Hz, 1 H) 8.31 (s, 1 H) 8.64 (s, 1 H) 8.71 (d, J=5.05 Hz, 1 H).

화합물 I-28의 제조

단계 1. 4-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-클로로-피리딘-3-카브알데하이드

50 mL 환저 플라스크 내에서, 2-클로로-4-요오도니코틴알데하이드(389 mg, 1.45 mmol, 당량: 1.6), 6-3급-부틸-8-플루오로프탈라진-1(2H)-온(200 mg, 908 μmol, 당량: 1.00) 및 탄산 칼륨(251 mg, 1.82 mmol, 당량: 2)을 DMSO(8 mL)와 합쳐 황색 용액을 수득하였다. 이 용액을 아르곤으로 5분 동안 탈기시켰다. 여기에 구리(I) 요오다이드(173 mg, 908 μmol, 당량: 1.00)를 가했다. 이 반응 혼합물을 110℃로 가열하고, 2시간 동안 교반하고, 이 반응물을 실온으로 냉각시켰다. 이 반응물을 H₂0/포화된 NH₄Cl(1:1, 80 mL)으로 희석하고, 생성 고체를 여과에 의해 수집하였다. 이 고체를 H₂0/ 포화된 NH₄Cl(1:1)으로 수회 세척하고, 이어서 물(2X) 및 이어서 EtOAc: 헥산(3:1, 2X)으로 세척하였다. 유기 상 내에 많은 색깔이 있었다. 갈색 고체가 남아 있었다. 이 고체를 EtOAc로 세척하고, 이어서 CH₂Cl₂으로 수회 세척하였다. 합친 유기 추출물을 물로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 생성 잔사를 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 40 g, 헥산 중의 5% 내지 30% EtOAc), 목적 생성물(170 mg)을 백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 360 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.42 (s, 9 H) 7.40 - 7.65 (m, 3 H) 8.24 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.66 (d, J=5.29 Hz, 1 H) 10.32 (s, 1 H).

실시예 28

4-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3-하이드록시메틸-1'-메틸-5'-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-1'H-[2,3']바이피리딘일-6'-온의 제조

2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드를 4-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-클로로-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 8과 유사한 절차로 제조하여, 54 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.46 (s, 9 H) 3.57 - 3.86 (s 및 중첩 m, 11 H) 4.05 (br. s., 1 H) 4.52 (br. s., 2 H) 6.88 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 7.35 (d, J=5.27 Hz, 1 H) 7.55 - 7.64 (m, 2 H) 7.69 (dd, J=8.53, 2.26 Hz, 1 H) 7.91 (d, J=2.26 Hz, 1 H) 8.11 (s, 1 H) 8.36 (dd, J=11.29, 2.26 Hz, 2 H) 8.83 (d, J=5.02 Hz, 1 H) 9.05 (d, J=2.26 Hz, 1 H).

실시예 29

4-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3-하이드록시메틸-5'-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1'-메틸-1'H-[2,3']바이피리딘일-6'-온의 제조

2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드를 4-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-2-클로로-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 9와 유사한 절차로 제조하여, 54 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.30 (s, 9 H) 2.92 (s, 3 H) 3.61 (s, 3 H) 3.80 - 4.02 (m, 1 H) 4.36 (s, 2 H) 6.76 (d, J=9.06 Hz, 1 H) 7.21 (d, J=5.29 Hz, 1 H) 7.35 - 7.52 (m, 2 H) 7.73 - 7.90 (m, 2 H) 8.15 (s, 2 H) 8.19 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.60 - 8.73 (m, 2 H) 9.01 (d, J=2.27 Hz, 1 H).

실시예 30

6-3급-부틸-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일]-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-4-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하고 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 110 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 691 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.28 (s, 6 H) 1.44 (s, 9 H) 2.77 (br. s., 2 H) 3.75 (br. s., 4 H) 3.85 (t, J=7.07 Hz, 1 H) 3.93 (s, 3 H) 4.55 (br. s., 2 H) 6.92 (d, J=8.84 Hz, 1 H) 7.31 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 7.46 - 7.57 (m, 2 H) 7.64 (d, J=5.05 Hz, 1 H) 8.08 (d, J=2.78 Hz, 1 H) 8.23 - 8.35 (m, 2 H) 8.63 (s, 1 H) 8.74 (d, J=4.80 Hz, 1 H).

화합물 I-31의 제조

[반응식 H]

단계 1. 2-(3-브로모-5-플루오로-페닐)-2-메틸-프로피오나이트릴의 제조

2 내지 5℃에서, THF(326 mL의 1 M, 326 mmol, 1.05 당량) 중의 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드의 용액을 360 mL의 THF 중의 1-브로모-3,5-다이플루오로벤젠(60 g, 311 mmol, 1.0 당량) 및 아이소부티로나이트릴(25.8 g, 373 mmol, 1.2 당량)의 용액에 적가하였다. 20시간 동안 교반한 후, 13%의 출발 시약이 남아 있어서, 추가로 0.1 당량의 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드를 가했다. 6시간 후, 10%의 출발 시약이 남아 있어서, 또다시 0.1 당량의 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드 및 0.1 당량의 아이소부티로나이트릴을 가했다. 이 반응 혼합물을 밤새도록 교반하였다. 이 반응 혼합물을 1 N HCl 용액으로 켄칭하고, 이어서 농축하여 THF의 일부를 제거하였다. 이 반응 혼합물을 메틸-3급-부틸 에터로 추출하고(2회), 감압 하에 농축하여, 조 생성물(75.3 g)을 수득하고, 이를 그대로 사용하였다.

단계 2. 2-브로모-N-3급-부틸-4-(시아노-다이메틸-메틸)-6-플루오로벤즈아마이드의 제조

-75℃에서, 180 mL의 THF 중의 2-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-메틸프로판나이트릴(30 g, 124 mmol, 1.0 당량)의 용액에 리튬 다이아이소프로필아마이드(82.6 mL의 1.8 M, 149 mmol, 1.2 당량)를 적가했다. 이 반응 혼합물을 -76℃에서 2시간 동안 교반하였다. -75℃에서 3급-부틸아이소시아네이트(18.4 g, 21.8 mL, 186 mmol, 1.5 당량)를 적가하고, 2시간 동안 계속 교반하였다. 추가로 0.5 당량의 3급-부틸아이소시아네이트를 가하고, 이 반응 혼합물을 실온으로 점진적으로 가온하고, 밤새도록 교반하였다. 이 반응 혼합물을 180 mL의 물로 켄칭하고, 이어서 감압 하에 60℃에서 THF를 제거하였다. 60℃에서 IPA를 가하고, 60℃에서 생성물을 180 mL의 H₂O 및 120 mL의 IPA로부터 결정화시켰다. 이 혼합물을 밤새도록 실온으로 천천히 냉각시켰다. 결정을 여과로 수집하고, H₂O, H₂O/IPA(1/1) 및 헵탄으로 세척하고, 밤새도록 건조하여, 2-브로모-N-3급-부틸-4-(2-시아노프로판-2-일)-6-플루오로벤즈아마이드(34.7 g, 102 mmol, 82.1 % 수율)를 99% 초과의 HPLC 순도를 갖는 백색 결정질 고체로 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.34 (s, 9 H) 1.70 (s, 6 H) 7.47 (dd, J=10.01, 1.70 Hz, 1 H) 7.60 (s, 1 H) 8.34 (s, 1 H).

단계 3. 2-(8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로-아이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오나이트릴의 제조

500 mL 환저 플라스크에 2-브로모-N-3급-부틸-4-(2-시아노프로판-2-일)-6-플루오로벤즈아마이드(34.5 g, 101 mmol, 1 당량) 및 탄산 칼륨(27.9 g, 202 mmol, 2 당량)을 채우고, 후속적으로 이 플라스크를 질소로 퍼지하였다(3회). 여기에 1,4-다이옥산(242 mL) 및 물(34.5 mL)을 가했다. 이어서, E-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란(28.0 g, 142 mmol, 1.4 당량)을 시린지로 가했다. 이 반응 혼합물을 40℃로 가열하였다. 이 혼합물에 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(2.33 g, 4.04 mmol, 0.04 당량) 및 트라이사이클로헥실포스핀(2.27 g, 8.09 mmol, 0.08 당량)을 가하고, 반응이 종결될 때까지 90℃에서(내부 온도)/100℃(욕) 2시간 동안 교반하면서 생성 혼합물을 가열하였다. 이 반응 혼합물을 상온으로 냉각시키고, 20% NaHSO₃ 용액(150 mL)으로 켄칭하고, 이어서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 EtOAc로 추출하고(2회), MgSO₄ 상에서 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 결과적인 생성물을 TFA(138 mL)와 함께 350 mL 압력 병 내에서 용해시키고, 100℃(욕 온도)로 3시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 톨루엔이 든 환저 플라스크로 옮기고, 감압 하에 TFA를 제거하고, 이어서 20% K₂CO₃ 용액으로 염기성화시켰다. 이 반응 혼합물을 EtOAc 및 이어서 DCM으로 추출하였다. 메틸-3급-부틸에터로부터 결정화하여, 2-(8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-6-일)-2-메틸프로판나이트릴(16.2 g, 69.6 % 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.74 (s, 6 H) 6.60 (dd, J=6.99, 1.70 Hz, 1 H) 7.16 - 7.28 (m, 1 H) 7.36 (dd, J=13.03, 1.70 Hz, 1 H) 7.61 (d, J=1.89 Hz, 1 H) 11.31 (br. s., 1 H).

단계 4. 2-[8-플루오로-2-(3-폼일-4-요오도-피리딘-2-일)-1-옥소-1,2-다이하이드로-아이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오나이트릴의 제조

100 mL 환저 플라스크 내에서 2-(8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-6-일)-2-메틸프로판나이트릴(800 mg, 3.47 mmol, 1 당량)을 THF(32.0 mL)와 합쳐 황색 현탁액을 수득하였다. 여기에 THF 중의 1M 리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드(4.52 mL, 4.52 mmol, 1.3 당량)의 용액을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 생성 호박색 용액에 2-플루오로-4-요오도니코틴알데하이드(1.31 g, 5.21 mmol, 1.5 당량)를 가했다. 이 반응 혼합물을 15시간 동안 교반하면서 50℃에서 가열하였다. 이 반응 혼합물을 5 mL의 포화된 NH₄Cl 및 100 mL의 H₂O에 붓고, DCM(3 x 100 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하고(실리카 겔, 80 g, DCM 중의 0%, 이어서 0% 내지 0.5% MeOH), 이어서 에터:헥산(1:8)으로 마쇄하여, 2-[8-플루오로-2-(3-폼일-4-요오도-피리딘-2-일)-1-옥소-1,2-다이하이드로-아이소퀴놀린-6-일]-2-메틸-프로피오나이트릴(830 mg)을 연황색 고체로 수득하였다. (M+H)⁺ = 462 m/e.

단계 5. 2-(8-플루오로-2-{3-폼일-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-1-옥소-1,2다이하이드로-아이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오나이트릴의 제조

6-클로로-2-메틸-4-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온(511 mg, 1.73 mmol, 1 당량), 비스(피나콜레이토)이붕소(485 mg, 1.91 mmol, 1.1 당량) 및 칼륨 아세테이트(511 mg, 5.2 mmol, 당량: 3)를 다이옥산(25 mL) 중에 현탁시켰다. 이 반응 혼합물을 아르곤 하에 탈기시켰다. X-PHOS(124 mg, 260 μmol, 당량: 0.15) 및 팔라듐(II) 아세테이트(19.5 mg, 86.7 μmol, 0.05 당량)를 가하고, 반응이 종결될 때까지 이 반응 혼합물을 아르곤 분위기 하에 100℃(외부 온도)에서 40분 동안 교반하였다. 욕 온도를 80℃로 낮췄다. 플라스크를 가열 욕에서 꺼냈지만, 계속 교반하였다. 2-(8-플루오로-2-(3-폼일-4-요오도피리딘-2-일)-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-6-일)-2-메틸프로판나이트릴(800 mg, 1.73 mmol, 1.0 당량), 탄산 칼륨(719 mg, 5.2 mmol, 3 당량) 및 이어서 2.5 mL의 H₂O을 가했다. 여기에 트라이사이클로헥실포스핀(48.6 mg, 173 μmol, 0.1 당량) 및 비스(다이벤질리덴아세톤)팔라듐(49.9 mg, 86.7 μmol, 0.05 당량)을 가했다. 이 반응 혼합물을 격렬히 교반하면서 80℃에서 가열하고, 1.5시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물에 부었다. 약간의 염수를 가하여 에멀젼을 깨뜨리고, 이 혼합물을 DCM으로 추출하였다(4회). 합친 유기 추출물을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고,진공 중에서 농축하였다. 10 mL의 EtOAc 및 이어서 75 mL의 에터를 가하여, 생성 고체를 마쇄하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 에터로 수회 세척하여, 연한 녹색/회색 고체(800 mg)를 수득하였다. (M+H)⁺ = 594 m/e. 이 생성물을 추가의 정제 없이 그대로 다음 단계에 사용하였다.

실시예 31

단계 6. 2-(8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-1-옥소-1,2-다이하이드로-아이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오나이트릴의 제조

25 mL 환저 플라스크 내에서, 2-(8-플루오로-2-{3-폼일-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-1-옥소-1,2다이하이드로-아이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오나이트릴(800 mg, 1.35 mmol, 1.0 당량)을 건조 DCM(25 mL) 및 건조 메탄올(5 mL)과 합쳐 연황색 용액을 수득하였다. 이 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 나트륨 보로하이드라이드(91.8 mg, 2.43 mmol, 당량: 1.8)를 가했다. 이 반응 혼합물을 0℃에서 40분 동안 교반하고, 이어서 5분 동안 교반하면서 2 mL의 포화된 NH₄Cl으로 켄칭하였다. 이 반응 혼합물을 100 mL의 H₂O에 붓고, DCM(3 x 150 mL)으로 추출하였다. 합친 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고, 진공 중에서 농축하였다. 조질 거품을 20 mL의 DCM 및 15 mL의 메탄올 중에 취했다. 이 혼합물에 200 mg의 10 % Pd/C(데구사(Degussa) 브랜드)을 가했다. 이 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 여과에 의해 고체를 제거하고, DCM 중의 10% 메탄올로 수회 세척하였다. 합친 여액 및 세척액을 진공 중에서 농축하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하였다(실리카 겔, 40g, 각각의 피크가 분리되어 나옴에 따라 0% 내지 4% MeOH 유지 구배). 센터 컷(Center cut) 분획들을 농축하여, 유리를 수득하고, 이를 에터로 마쇄하여, 2-(8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-1-옥소-1,2-다이하이드로-아이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오나이트릴을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 596 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.81 (s, 6 H) 2.52 (s, 3 H) 2.94 (t, J=5.67 Hz, 2 H) 3.65 (d, J=2.27 Hz, 2 H) 3.90 (s, 3 H) 4.05 - 4.22 (m, 3 H) 4.42 - 4.60 (m, 2 H) 5.85 (s, 1 H) 6.66 (dd, J=7.55, 1.89 Hz, 1 H) 7.22 (dd, J=12.46, 1.89 Hz, 1 H) 7.35 (d, J=7.55 Hz, 1 H) 7.53 (d, J=1.89 Hz, 1 H) 7.62 (d, J=4.91 Hz, 1 H) 7.92 (s, 1 H) 7.99 (s, 1 H) 8.68 (d, J=4.91 Hz, 1 H).

실시예 32

6-3급-부틸-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일]-2H-프탈라진-1-온의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-4-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하고 2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-4-요오도니코틴알데하이드를 2-(6-3급-부틸-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-4-요오도-피리딘-3-카브알데하이드로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 149 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 673 m/e. ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.28 (br. s., 6 H) 1.46 (s, 9 H) 2.77 (br. s., 2 H) 3.75 (br. s., 4 H) 3.93 (s, 3 H) 3.98 (t, J=7.07 Hz, 1 H) 4.54 (br. s., 2 H) 6.93 (d, J=8.84 Hz, 1 H) 7.31 (d, J=7.07 Hz, 1 H) 7.64 (d, J=5.05 Hz, 1 H) 7.78 (d, J=1.52 Hz, 1 H) 7.90 - 7.95 (m, 1 H) 8.07 (d, J=2.53 Hz, 1 H) 8.29 (s, 1 H) 8.39 (d, J=0.76 Hz, 1 H) 8.45 (d, J=8.34 Hz, 1 H) 8.64 (s, 1 H) 8.75 (d, J=5.05 Hz, 1 H).

실시예 33

2-{2-[4-(5-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일]-8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로-아이소퀴놀린-6-일}-2-메틸-프로피오나이트릴의 제조

단계 5에서 6-클로로-2-메틸-4-(5-(1-메틸피페리딘-4-일)피리딘-2-일아미노)피리다진-3(2H)-온을 6-클로로-4-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-2-메틸-2H-피리다진-3-온으로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1(단계 5 및 6)과 유사한 절차로 제조하여, 135 mg의 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺ = 701 m/e ¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 1.30 (br. s., 6 H) 1.81 (s, 6 H) 2.81 (br. s., 2 H) 3.81 (br. s., 4 H) 3.93 (s, 3 H) 4.01 (dd, J=10.36, 3.28 Hz, 1 H) 4.43 - 4.62 (m, 2 H) 6.67 (dd, J=7.58, 2.02 Hz, 1 H) 6.93 (d, J=8.84 Hz, 1 H) 7.23 (dd, J=12.25, 1.89 Hz, 1 H) 7.32 (br. s., 1 H) 7.37 (d, J=7.33 Hz, 1 H) 7.52 - 7.56 (m, 1 H) 7.64 (d, J=4.80 Hz, 1 H) 8.08 (d, J=2.78 Hz, 1 H) 8.31 (s, 1 H) 8.63 (s, 1 H) 8.71 (d, J=5.05 Hz, 1 H).

실시예 34

2-(6-(2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-4-일)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)-5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 5-옥사이드의 제조

DCM(10 mL) 중의 6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-(하이드록시메틸)-4-(1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로피리다진-3-일)피리딘-2-일)프탈라진-1(2H)-온(500 mg, 854 μmol, 1 당량)의 용액에 3-클로로벤조퍼옥소산(191 mg, 854 μmol, 1 당량)을 가했다. 이 반응 혼합물을 18시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 메틸렌 클로라이드로 희석하고, 1.0 N NaOH(수성)으로 세척하였다. 층들을 분리하고, 유기 층을 염수로 세척하고, 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 액체를 수득하였으며, 이를 진공 하에 밤새도록 점진적으로 경화시켜 낮은 비점의 황색 고체를 수득하였다. 이 고체를 최소량의 메탄올에 용해시키고, 메틸렌 클로라이드로 희석하고, 칼럼 상에 담지하였다. 조 물질을 플래시 크로마토그래피로 정제하여(실리카 겔, 40 g, DCM 중의 50% DCM:MeOH:NH₄OH(60:10:1)), 2-(6-(2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)-3-(하이드록시메틸)피리딘-4-일)-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로피리다진-4-일아미노)-5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[1,5-a]피라진 5-옥사이드(158.5 mg, 263 μmol, 30.9 % 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. (M+H)⁺=602 m/e. ¹H NMR (300 MHz, 메탄올-d₄) δ ppm 1.47 (s, 9 H) 3.45 (s, 3 H) 3.74 (dt, J=12.46, 2.46 Hz, 1 H) 3.89 (s, 3 H) 4.07 (td, J=11.80, 4.72 Hz, 1 H) 4.25 - 4.43 (m, 1 H) 4.45 - 4.62 (m, 2 H) 4.61 - 4.85 (m, 3 H) 6.13 (s, 1 H) 7.54 - 7.79 (m, 2 H) 7.87 (d, J=1.51 Hz, 1 H) 8.07 (s, 1 H) 8.50 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.66 (d, J=5.29 Hz, 1 H).

생물학적 분석 데이터

브루톤 티로신 키나아제 ( Btk ) 억제 분석

본 분석은, 여과를 통해 방사성 ³³P 인산화된 생성물을 포착하는 것이다. Btk, 비오틴화된(biotinylated) SH₂ 펩타이드 기질(Src 상동) 및 ATP의 상호작용은 펩타이드 기질의 인산화를 일으킨다. 비오틴화된 생성물은 결합된 스트렙타비딘 세파로스 비드(streptavidin sepharose bead)이다. 결합되고 방사표지된 모든 생성물을 섬광 계수기에 의해 검출한다.

분석되는 플레이트는 96-웰 폴리프로필렌(그레이너(Greiner)) 및 96-웰 1.2 ㎛ 친수성 PVDF 필터 플레이트(밀리포어(Millipore))이다. 본원에 기록된 농도는 최종 분석 농도이다: DMSO 중의 10 내지 100 μM 화합물(버딕 앤드 잭슨(Burdick and Jackson)), 5 내지 10 nM Btk 효소(His-태깅됨, 전장(full-length)), 30 μM 펩타이드 기질(Biotin-Aca-AAAEEIYGEI-NH₂), 100 μM ATP(시그마(Sigma)), 8 mM 이미다졸(시그마, pH 7.2), 8 mM 글리세롤-2-포스페이트(시그마), 200 μM EGTA(로슈 다이아그노스틱스(Roche Diagnostics)), 1 mM MnCl₂(시그마), 20 mM MgCl₂(시그마), 0.1 mg/mL BSA(시그마), 2 mM DTT(시그마), 1 μCi ³³P ATP(애머샴(Amersham)), 20% 스트렙타비딘 세파로스 비드(애머샴), 50 mM EDTA(깁코(Gibco)), 2 M NaCl(깁코), 2 M NaCl w/1% 인산(깁코), 마이크로신트-20(퍼킨 엘머(Perkin Elmer)).

IC₅₀ 측정은, 표준 96-웰 플레이트 분석 템플레이트로부터 생성된 데이터를 활용하여 화합물 당 10개의 데이터 포인트로부터 계산하였다. 하나의 대조군 화합물 및 7개의 미공지된 억제제를 각각의 플레이트 상에서 시험하고, 각각의 플레이트를 2회 시험하였다. 전형적으로, 화합물을 100 μM에서 출발하여 3 nM에서 종결되는 반-로그(half-log)로 희석하였다. 대조군 화합물은 스타우로스포린이었다. 펩타이드 기질의 부재 하에 백그라운드를 계수하였다. 총 활성을 펩타이드 기질의 존재 하에 측정하였다. 하기 프로토콜을 사용하여 Btk 억제를 측정하였다:

1) 샘플 제조: 시험 화합물을 분석 완충액(이미다졸, 글리세롤-2-포스페이트, EGTA, MnCl₂, MgCl₂, BSA) 중의 단계 희석 증가량으로 희석함.

2) 비드 제조

a) 500 g 에서 원심분리하여 비드를 세척함,

b) PBS 및 EDTA로 비드를 재구성하여, 20% 비드 슬러리를 제조함.

3) 기질(분석 완충액, DTT, ATP, ³³P ATP)을 함유하지 않은 반응 혼합물 및 기질(분석 완충액, DTT, ATP, ³³P ATP, 펩타이드 기질)을 함유한 혼합물을 30℃에서 15분 동안 예비 배양함.

4) 분석을 시작하기 위해, 효소 완충액(이미다졸, 글리세롤-2-포스페이트, BSA) 중의 10 μL Btk 및 10μL의 시험 화합물을 10분 동안 실온에서 예비 배양함.

5) 기질을 함유하지 않거나 또는 함유한 30 μL 반응 혼합물을 Btk 및 화합물에 첨가함.

6) 50 μL 총 분석 혼합물을 30분 동안 30℃에서 배양함.

7) 40 μL의 분석물을 필터 플레이트에서의 150 μL 비드 슬러리로 이동시켜 반응을 중지시킴.

8) 30분 후 필터 플레이트를 하기 단계로 세정함

a) 3 x 250 μL의 NaCl,

b) 1% 인산을 함유한 3 x 250 μL의 NaCl,

c) 1 x 250 μL의 물.

9) 플레이트를 1시간 동안 65℃에서 또는 밤새 실온에서 건조시킴.

10) 50 μL 마이크로신트-20 을 첨가하고, 섬광 계수기로 ³³P cpm 을 계수함.

cpm의 원 데이터(raw data)로부터 %활성을 계산함.

%활성 = (샘플 - bkg)/(총 활성 - bkg) x 100

단일부위 용량 반응 S자형 모델을 이용하여, %활성으로부터 IC₅₀을 계산함.

y = A + ((B - A)/(1 + ((x / C)^D))))

이때, x = 화합물의 농도, y = %활성, A = 최소, B = 최대, C = IC₅₀, D = 1(경사 기울기).

CD69 발현에 의해 측정되는 전혈 중의 B 세포 활성 억제

혈액 중에서 B 세포의 B 세포 수용체-매개된 활성을 억제하는 Btk 억제제의 능력을 시험하는 절차는 하기와 같다:

인간 전혈(HWB)을 다음과 같은 제한조건을 가진 건강한 자원자로부터 얻었다: 24 시간 약물 복용하지 않는 비흡연자. 혈액을 나트륨 헤파린으로 응고방지된 배큐테이너(Vacutainer) 튜브로 정맥 천자에 의해 채혈하였다. 시험 화합물을 목적하는 출발 약물 농도의 10배까지 PBS(20x)로 희석한 다음, PBS 중의 10% DMSO로 3번 연속 희석하여 투여량-반응 곡선의 9개의 포인트를 생성하였다. 5.5 μL의 각각의 화합물의 희석액을 2회씩 2 mL의 96-웰 V 바닥 플레이트(어넬리티컬 세일즈 앤 서비시스(Analytical Sales and Services), #59623-23)에 첨가하고, 5.5 μL의 PBS 중의 10% DMSO를 대조군 및 비자극 웰에 첨가하였다. HWB(100 μL)을 각 웰에 첨가하고 혼합한 후, 플레이트를 37℃, 5% CO₂, 100% 습도에서 30분 동안 배양하였다. 염소 F(ab')2 항-인간 IgM(써던 바이오테크(Southern Biotech), #2022-14)(10 μL의 500 μg/mL 용액, 50 μg/mL 최종 농도)를 각 웰(비자극 웰 제외)에 혼합하면서 첨가하고, 그 플레이트를 추가로 20시간 동안 배양하였다.

20시간의 배양이 끝날 무렵에, 샘플을 형광-프로브-표지된 항체(15 μL의 PE 쥐 항-인간 CD20, BD 파민겐(Pharmingen), #555623 및/또는 20 μL의 APC 쥐 항-인간 CD69, BD 파민겐 #555533)와 함께 30분 동안, 37℃, 5% CO₂, 100% 습도에서 배양하였다. 보상 조정 및 초기 전압 설정을 위한 단일 염색물, 비염색물 및 유도된 대조군이 포함되어 있다. 이어서, 샘플을 1 mL의 1X 파민겐 용해 완충액(BD 파민겐 # 555899)에 용해시키고, 플레이트를 1800 rpm에서 5분 동안 원심분리하였다. 상청액을 흡입에 의해 제거하고, 잔여 펠릿을 또 다른 1 mL의 1X 파민겐 용해 완충액에 다시 용해시키고, 플레이트를 상기와 같이 회전시켰다. 상청액을 흡인하고, 잔여 펠릿을 FACs 완충액(PBS + 1% FBS)으로 세척하였다. 최종 회전 후, 상청액을 제거하고, 펠릿을 180 μL의 FACs 완충액에 재현탁시켰다. 샘플을 BD LSR II 유세포분석기(flow cytometer)의 HTS 96 웰 시스템 상에서 실시되기에 적합한 96 웰 플레이트로 옮겼다.

사용된 형광단(fluorophore)의 적절한 여기 및 방출 파장을 사용하여, 데이터를 획득하고, %양성 세포 값을 셀 퀘스트 소프트웨어(Cell Quest Software)를 사용하여 얻었다. 결과를 먼저 FACS 분석 소프트웨어(Flow Jo)를 사용하여 분석하였다. 시험 화합물의 IC₅₀은, 항-IgM에 의한 자극 이후에도 CD20-양성인 CD69-양성 세포의 %(비자극 백그라운드용 8개의 웰의 평균치를 뺀 후의 8개의 대조군 웰의 평균치)를 50% 만큼 감소시키는 농도로서 정의된다. IC₅₀ 값을 XLfit 소프트웨어 버전 3, 방정식 201 을 사용하여 계산하였다.

상기 분석의 대표적인 화합물의 데이터를 하기 표 2에 열거한다.

[표 2]

B 세포 활성 억제 - Ramos 세포 중의 B 세포의 FLIPR 분석

본 발명의 화합물에 의한 B 세포 활성의 억제를, 항-IgM 자극 B 세포 반응에 대한 시험 화합물의 효과를 측정함으로써 증명한다.

B 세포의 FLIPR 분석은, 항-IgM 항체에 의한 자극으로부터 세포내 칼슘이 증가하는 것에 대한 가능한 억제제 효과를 측정하는 세포 기재의 기능적 방법이다. Ramos 세포(인간 버킷(Burkitt) 림프종 세포주. ATCC-No. CRL-1596)를 증식용 배지(하기 기재됨)에서 배양하였다. 분석 하루 전, Ramos 세포를 새로운 증식용 배지(상기와 동일함)에 재현탁시키고, 조직 배양 플라스크 내에 0.5 x 10⁶/mL의 농도로 설정하였다. 분석 당일, 세포를 계수하고, 조직 배양 플라스크 내에 1 μM FLUO-3AM(테프랩스(TefLabs) 카탈로그 번호 0116, 무수 DMSO 및 10% 플루론산 중에서 제조됨)으로 보충된 증식용 배지에서 1 x 10⁶/mL의 농도로 설정하고, 37℃(4% CO₂)에서 1시간 동안 배양하였다. 세포외 염료를 제거하기 위해, 세포를 원심분리(5분, 1000 rpm)에 의해 수집하고, 1 x 10⁶세포/mL로 FLIPR 완충액(하기 기재됨)에 재현탁시킨 후, 웰 당 1 x 10⁵ 세포로 96-웰 폴리-D-리신 코팅된 흑색/투명 플레이트(BD 카탈로그 번호 356692)에 분배하였다. 시험 화합물을 100 μM 내지 0.03 μM(7개의 농도, 하기 세부사항) 범위의 다양한 농도로 첨가하고, 30분 동안 실온에서 세포와 함께 배양하였다. Ramos 세포의 Ca² ⁺ 신호전달을 10 μg/mL 항-IgM(싸우던 바이오테크(Southern Biotech), 카탈로그 번호 2020-01)의 첨가에 의해 자극하고, FLIPR(분자 장치, 480 nM 여기의 아르곤 레이저를 사용하는 CCD 카메라를 사용하여 96 웰 플레이트의 이미지를 포착함)에서 측정하였다.

배지/완충액:

성장 배지: L-글루타민(인비트로겐(Invitrogen), 카탈로그 번호 61870-010), 10% 우태아혈청(FBS, 서밋 바이오테크놀로지(Summit Biotechnology) 카탈로그 번호 FP-100-05); 1 mM 나트륨 피루베이트(인비트로겐 카탈로그 번호 11360-070)을 함유한 RPMI 1640 배지.

FLIPR 완충제: HBSS(인비트로겐, 카탈로그 번호 141175-079), 2 mM CaCl₂(시그마 카탈로그 번호 C-4901), HEPES(인비트로겐, 카탈로그 번호 15630-080), 2.5 mM 프로베네시드(시그마, 카탈로그 번호 P-8761), 0.1% BSA(시그마, 카탈로그 번호 A-7906), 11 mM 글루코오스(시그마, 카탈로그 번호 G-7528)

화합물 희석 세부사항:

100 μM의 최고의 최종 분석 농도를 달성하기 위해, 24 μL의 10 mM 화합물 저장 용액(DMSO 중에 제조됨)을 직접 576 μL의 FLIPR 완충제에 첨가하였다. 시험 화합물을 FLIPR 완충제(바이오멕(Biomek) 2000 로봇 피펫터(robotic pipettor)를 사용함)로 희석하고, 이는 하기 희석식을 생성하였다: 비히클, 1.00 x 10^-4 M, 1.00 x 10^-5, 3.16 x 10^-6, 1.00 x 10^-6, 3.16 x 10^-7, 1.00 x 10^-7, 3.16 x 10^-8.

검정 및 분석:

칼슘의 세포내 증가는, 최대 - 최소 통계자료(분자 장치 FLIPR 조절 및 통계자료 익스포팅(exporting) 소프트웨어를 사용하여 자극성 항체의 첨가에 의해 야기된 피크에서 정지된 기준치(resting baseline)를 빼는 것)를 사용하여 기록하였다. 비선형 곡선 피팅(그래프패드 프리즘(GraphPad Prism) 소프트웨어)을 사용하여 IC₅₀을 측정하였다.

마우스 콜라겐 유도성 관절염( mCIA )

0일째, 마우스의 꼬리 기부 또는 등의 여러 지점에 완전 프로인트 보조물질(Complete Freund's Adjuvant; CFA) 중 제 2형 콜라겐의 에멀젼을(i.d.) 주사하였다. 콜라겐 면역 조치 이후, 동물은 21 내지 35 일째 쯤에 관절염을 나타낼 것이다. 관절염의 발병은 21일째에 불완전 프로인트 보조물질(IFA; i.d.) 중 콜라겐의 전신 투여에 의해 동기화되었다(증강(boost)되었다). 증강된 신호인 경미한 관절염(점수 1 또는 2; 하기 기재된 점수 참조)의 임의의 발병에 대해 20일째 이후로 매일 동물을 조사하였다. 증강된 후에, 마우스의 점수를 매기고, 처방 시간(전형적으로, 2주 내지 3주) 및 투약 빈도, 매일(QD) 또는 매일 2회(BID)로 후보 치료제를 투여하였다.

래트 콜라겐 유도성 관절염(rCIA)

0일째, 래트의 등의 여러 위치에 불완전 프로인트 보조물질(IFA) 중 소과 제 2 형 콜라겐의 에멀젼을 피내(i.d.) 주사하였다. 콜라겐 에멀젼의 증강 주사를 7일째 쯤에 꼬리 또는 등의 대체 부위에 제공하였다(i.d.). 관절염은 일반적으로 초기 콜라겐 주사 후 12 내지 14일째에 관찰되었다. 14일째 이후로 하기 기재된 바와 같은 관절염의 발생에 대해 동물을 평가할 수 있다(관절염 평가). 2차 도전 시점에서 출발하는 예방 방식으로 처방 시간(전형적으로, 2 내지 3주) 및 투약 빈도(매일(QD) 또는 1일 2회(BID))로 동물에 후보 치료제를 투여하였다.

관절염 평가:

양쪽 모델에서, 발 및 사지 관절에 발생된 염증을, 하기 기재된 기준을 따라 4개의 발의 평가를 포함하는 점수 시스템을 사용하여 수량화하였다:

점수:

1 = 발 또는 하나의 발가락의 부종 및/또는 발적,

2 = 2개 이상의 관절의 부종,

3 = 2개 초과의 관절을 포함한 발의 심한 부종,

4 = 전체 발 및 발가락의 중증의 관절염.

기준치 측정을 위해 평가를 0일째에 하였고, 첫 징후 또는 부종에서 다시 시작하여, 실험이 끝날때까지 1주 당 3회 이하로 평가하였다. 각 마우스의 관절염 지수는 개별 발의 4개의 점수를 더하고, 동물 당 최대 점수를 16점으로 부여함으로써 수득하였다.

래트의 생체내 천식 모델

수컷 갈색-노르웨이 래트를 0.2 mL의 명반 중의 100 μg의 OA(오브알부민)로 매주 1회 3주 동안(0일째, 7일째 및 14일째) 복강내 감작시켰다. 21일째(최종 감작한 후 1주째), 그 래트에 OA 에어로졸 도전(45분 동안 1% OA)하기 0.5시간 전에 비히클 또는 화합물 제형을 피하(q.d.)에 투여하고, 시도한 지 4 또는 24시간 후에 종료하였다. 희생 시점에, 혈청 및 혈장을 각각 혈청 테스트 및 PK를 위해 모든 동물로부터 채혈하였다. 기관 캐뉼라를 삽입하고, 폐를 PBS로 세척하였다(3X). BAL 유체를 총 백혈구 수 및 백혈구 차동(differential) 계수에 대해 분석하였다. 세포 중 일부(20 내지 100 μL)의 총 백혈구 수를 콜터 계수기(Coulter Counter)로 측정하였다. 백혈구 감별 계수를 위해, 50 내지 200 μL의 샘플을 시토스핀(Cytospin)에서 원심분리하고, 슬라이드를 디프-퀵(Diff-Quik)으로 염색하였다. 단핵 백혈구, 호산구, 호중구 및 림프구의 비율을 표준 형태학적 기준을 사용하여 광현미경 하에 계수하고, %로 표현하였다. 대표적인 Btk 억제제는 대조군의 수준과 비교시 OA 감작 및 도전된 래트의 BAL에서 총 백혈구 수의 감소를 나타냈다.

전술된 발명은 명쾌함 및 이해를 목적으로 예시 및 실시예를 수단으로 하여 상세하게 기술되었다. 당업자에게는 첨부된 청구의 범위의 범위 내에서 변경 및 변형이 가능하다는 것이 자명할 것이다. 따라서, 상기 명세서는 설명을 의도로 한 것이며, 한정을 의도한 것이 아님을 이해해야 한다. 따라서, 본 발명의 범위는 상기 명세서를 참조로 결정될 것이 아니라, 첨부된 특허청구범위가 목적하고자 하는 것의 등가물의 전체 범위와 함께, 첨부된 특허청구범위를 참조하여 결정되어야 할 것이다.

본 출원에 인용된 모든 특허, 특허 출원 및 공보는, 각각의 개별 특허, 특허 출원 또는 공보가 개별적으로 언급된 것과 같은 정도로 임의의 목적을 위해 그 전체가 본원에 참고로 인용된다.

Claims

하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
[화학식 I]

상기 식에서,

는 단일 결합 또는 이중 결합이고;
X는 각각 독립적으로 CH, CH₂, CHX' 또는 N이고; X'는 저급 알킬이고;
R은 H, -R¹, -R¹-R²-R³, -R¹-R³ 또는 -R²-R³이고;
R¹은, 각각 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 할로, 나이트로, 아미노, 아미도, 시아노, 옥소 또는 저급 할로알킬로 치환되는, 아릴, 헤테로아릴, 이환형 헤테로아릴, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 또는 이환형 헤테로환이고;
R²는 -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)NR^2', -NHC(=O)O, -C(R^2')₂, -O, -S, -C(=NH)NR^2'또는 -S(=O)₂이고; R^2'는 각각 독립적으로 H 또는 저급 알킬이고;
R³은 H 또는 R⁴이고;
R⁴는, 각각 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 할로, 저급 알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 하이드록시, 하이드록시 저급 알킬, 저급 알콕시, 저급 알칸오일, 할로, 나이트로, 아미노, 아미도, 아실, 시아노, 옥소, 설폰일, 저급 알킬 설폰일, 구아니디노, 하이드록실 아미노, 카복시, 카밤오일, 카바메이트, 할로 저급 알콕시, 헤테로사이클로알킬 또는 할로 저급 알킬로 치환되는, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 저급 알콕시, 아미노, 저급 알킬 아미노, 사이클로알킬 아미노, 저급 다이알킬 아미노, 아릴, 아릴알킬, 알킬아릴, 헤테로아릴, 저급 알킬 헤테로아릴, 헤테로아릴 저급 알킬, 사이클로알킬, 저급 알킬 사이클로알킬, 사이클로알킬 저급 알킬, 헤테로사이클로알킬, 저급 알킬 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 저급 알킬, 이환형 사이클로알킬, 이환형 헤테로사이클로알킬, 스파이로사이클로알킬, 스파이로헤테로사이클로알킬 또는 이환형 스파이로헤테로사이클로알킬이고, 이때 2개의 저급 알킬 기는 함께 고리를 형성할 수 있고;
A, Y 및 Y¹은 각각 CH 또는 N이되, 단, A, Y 및 Y¹ 중 적어도 하나는 N이어야 하고;
Y²는 CH 또는 N이고;
Y³은 H 또는 F이고;
Y⁴는 Y^4a, Y^4b, Y^4c 또는 Y^4d이고;
Y^4a는 H 또는 할로겐이고;
Y^4b는, 임의적으로 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되는 저급 알킬이고;
Y^4c는, 임의적으로 저급 알킬, 저급 할로알킬, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노 및 저급 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되는 저급 사이클로알킬이고;
Y^4d는, 임의적으로 하나 이상의 저급 알킬, 알콕시 저급 알킬 또는 하이드록시 저급 알킬로 치환되는 아미노이다.
제 1 항에 있어서,

이 이중 결합이고, X가 N인, 화합물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
A가 CH이고, Y가 CH이고, Y¹이 N이고, Y²가 N인, 화합물.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
Y³이 H인, 화합물.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
Y³이 F인, 화합물.
제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,
Y⁴가 사이클로프로필, 다이메틸아미노 또는 3급-부틸인, 화합물.
제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서,
R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -C(=O)이고, R³이 모폴린일인, 화합물.
제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서,
R이 R¹이고,
R¹이, 임의적으로 저급 알킬, 헤테로사이클로알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬 저급 알킬로 치환되는 4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일인, 화합물.
제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서,
R이 -R¹-R³이고, R¹이 피리딜이고, R³이 저급 알킬 헤테로사이클로알킬인, 화합물.
제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서,
R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -O이고, R³이, 임의적으로 하나 이상의 할로로 치환되는 헤테로사이클로알킬 저급 알킬인, 화합물.
제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서,
R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -C(=O)이고, R³이 다이메틸아미노인, 화합물.
제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서,
R이 -R¹-R²-R³이고, R¹이 피리딜이고, R²가 -S(=O)₂이고, R³이 메틸인, 화합물.
제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서,
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-하이드록시메틸-4-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-피리딘-2-일)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-(3-하이드록시메틸-4-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-피리딘-2-일)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[5-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온;
6-{6-[2-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-4-일]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N,N-다이메틸-니코틴아마이드;
6-{6-[2-(6-사이클로프로필-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-4-일]-2-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-피리다진-4-일아미노}-N,N-다이메틸-니코틴아마이드;
6-3급-부틸-2-(3-하이드록시메틸-4-{1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-피리딘-2-일)-2H-프탈라진-1-온;
2'-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-1H-[3,4']바이피리딘일-6-온;
2'-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3'-하이드록시메틸-5-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1-메틸-1H-[3,4']바이피리딘일-6-온;
6-[2'-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3'-하이드록시메틸-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-[3,4']바이피리딘일-5-일아미노]-N,N-다이메틸-니코틴아마이드;
2'-(6-사이클로프로필-8-플루오로-1-옥소-1H-아이소퀴놀린-2-일)-3'-하이드록시메틸-1-메틸-5-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-1H-[3,4']바이피리딘일-6-온;
6-3급-부틸-2-(3-하이드록시메틸-4-{1-메틸-5-[5-((S)-1-메틸-피롤리딘-2-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-피리딘-2-일)-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(1'-메틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-{4-[5-(1'-에틸-1',2',3',4',5',6'-헥사하이드로-[3,4']바이피리딘일-6-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
2-(4-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일)-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
2-(4-{5-[5-(2-아제티딘-1-일-1,1-다이메틸-에톡시)-피리딘-2-일아미노]-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일}-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일)-6-3급-부틸-2H-프탈라진-1-온;
2-{4-[5-(5-아제티딘-1-일메틸-1-메틸-1H-피라졸-3-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-6-3급-부틸-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온;
6-사이클로프로필-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-아이소퀴놀린-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-{4-[5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-아이소퀴놀린-1-온;
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-옥세탄-3-일-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-아이소퀴놀린-1-온;
6-3급-부틸-2-{4-[5-(5-에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-8-플루오로-2H-아이소퀴놀린-1-온;
6-3급-부틸-2-{4-[5-(5-사이클로프로필메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일}-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
6-3급-부틸-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일]-8-플루오로-2H-아이소퀴놀린-1-온;
4-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3-하이드록시메틸-1'-메틸-5'-[5-(모폴린-4-카보닐)-피리딘-2-일아미노]-1'H-[2,3']바이피리딘일-6'-온,
4-(6-3급-부틸-8-플루오로-1-옥소-1H-프탈라진-2-일)-3-하이드록시메틸-5'-(5-메탄설폰일-피리딘-2-일아미노)-1'-메틸-1'H-[2,3']바이피리딘일-6'-온;
6-3급-부틸-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일]-8-플루오로-2H-프탈라진-1-온;
2-(8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-1-옥소-1,2-다이하이드로-아이소퀴놀린-6-일)-2-메틸-프로피오나이트릴;
2-{2-[4-(5-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일]-8-플루오로-1-옥소-1,2-다이하이드로-아이소퀴놀린-6-일}-2-메틸-프로피오나이트릴;
6-3급-부틸-2-[4-(5-{5-[2-(3,3-다이플루오로-아제티딘-1-일)-1,1-다이메틸-에톡시]-피리딘-2-일아미노}-1-메틸-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일)-3-하이드록시메틸-피리딘-2-일]-2H-프탈라진-1-온; 및
6-3급-부틸-8-플루오로-2-{3-하이드록시메틸-4-[1-메틸-5-(5-메틸-5-옥시-4,5,6,7-테트라하이드로-피라졸로[1,5-a]피라진-2-일아미노)-6-옥소-1,6-다이하이드로-피리다진-3-일]-피리딘-2-일}-2H-프탈라진-1-온
으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물.
제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 따른 Btk 억제제 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 염증성 및/또는 자가면역성 증상 치료 방법.
제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 따른 Btk 억제제 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 류마티스성 관절염 치료 방법.
제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 따른 Btk 억제제 화합물의 치료 효과량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 천식 치료 방법.
제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 따른 Btk 억제제 화합물을 포함하는 약학 조성물.
하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 혼합된, 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 따른 Btk 억제제 화합물을 포함하는 약학 조성물.
치료 활성 성분으로서의 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,
염증성 및/또는 자가면역성 증상의 치료에 사용하기 위한 화합물.
염증성 및/또는 자가면역성 증상을 치료하기 위한 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
염증성 및/또는 자가면역성 증상의 치료용 약제의 제조를 위한 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
본원에 기술된 바와 같은 발명.