EA022196B1 - СОЕДИНЕНИЯ 4-ЗАМЕЩЕННОГО-3-БЕНЗИЛОКСИБИЦИКЛО[3.1.0]ГЕКСАНА В КАЧЕСТВЕ АНТАГОНИСТОВ mGluR 2/3 - Google Patents

СОЕДИНЕНИЯ 4-ЗАМЕЩЕННОГО-3-БЕНЗИЛОКСИБИЦИКЛО[3.1.0]ГЕКСАНА В КАЧЕСТВЕ АНТАГОНИСТОВ mGluR 2/3 Download PDF

Info

Publication number
EA022196B1
EA022196B1 EA201390568A EA201390568A EA022196B1 EA 022196 B1 EA022196 B1 EA 022196B1 EA 201390568 A EA201390568 A EA 201390568A EA 201390568 A EA201390568 A EA 201390568A EA 022196 B1 EA022196 B1 EA 022196B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
tert
hexane
mmol
amino
compound
Prior art date
Application number
EA201390568A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201390568A1 (ru
Inventor
Брюс Энтони Дрессман
Марк Дональд Чаппелл
Адам Майкл Фивуш
Чарльз Ховард Митч
Пол Лесли Орнштейн
Эрик Джордж Тромикзак
Татьяна Натали Ветман
Original Assignee
Эли Лилли Энд Компани
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эли Лилли Энд Компани filed Critical Эли Лилли Энд Компани
Publication of EA201390568A1 publication Critical patent/EA201390568A1/ru
Publication of EA022196B1 publication Critical patent/EA022196B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/36—Sulfur atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/138—Aryloxyalkylamines, e.g. propranolol, tamoxifen, phenoxybenzamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/196—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino group being directly attached to a ring, e.g. anthranilic acid, mefenamic acid, diclofenac, chlorambucil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/216—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acids having aromatic rings, e.g. benactizyne, clofibrate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/265—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carbonic, thiocarbonic, or thiocarboxylic acids, e.g. thioacetic acid, xanthogenic acid, trithiocarbonic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/27—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carbamic or thiocarbamic acids, meprobamate, carbachol, neostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4196—1,2,4-Triazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/426—1,3-Thiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/46—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino or carboxyl groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C07C229/50—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino or carboxyl groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups and carboxyl groups bound to carbon atoms being part of the same condensed ring system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/45—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C07C233/52—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C235/14—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/24—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atom of at least one of the carbamate groups bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C62/00—Compounds having carboxyl groups bound to carbon atoms of rings other than six—membered aromatic rings and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C62/30—Unsaturated compounds
    • C07C62/34—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/74—Esters of carboxylic acids having an esterified carboxyl group bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring
    • C07C69/757—Esters of carboxylic acids having an esterified carboxyl group bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/96—Esters of carbonic or haloformic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/08—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles
    • C07D249/10—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D249/12—Oxygen or sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/02—Systems containing only non-condensed rings with a three-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/14—All rings being cycloaliphatic
    • C07C2602/18—All rings being cycloaliphatic the ring system containing six carbon atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)

Abstract

Предложен антагонист рецептора mGlu 2/3 формулыего применение и способы его получения.

Description

Глутамат представляет собой основной возбуждающий нейромедиатор в головном мозге и вовлечен в большое количество физиологических процессов, опосредованных по меньшей мере 11 различными рецепторами, каждый со своей фармакологией. Подтипы 2 и 3 метаботропного глутаматного рецептора (также известные как шС1и2 и шС1и3) часто объединяют как шС1и рецепторы II группы на основании гомологии их последовательностей, сходного связывания вторичного мессенджера и сходных фармакологических характеристик. Антагонисты шС1и2/3 рецепторов обладали значительным фармакологическим действием на животных моделях в отношении депрессивных расстройств и расстройств чрезмерной сонливости. В связи с этим полагают, что антагонисты шС1и2/3 могут подходить для лечения депрессивных расстройств, таких как большое депрессивное расстройство (БДР), монополярная депрессия, дистимия и/или циклотимия, и/или подходить для лечения расстройств чрезмерной сонливости, таких как чрезмерная дневная сонливость (ΕΌδ), гиперсомния, связанная с синдромом обструктивного апноэ во сне или нарколепсией, расстройства циркадного ритма сна (включая, но не ограничиваясь ими, расстройство сна, вызванное сменным режимом работы, расстройство сна, вызванное сменой часового пояса (расстройство джетлаг), расстройство сна, вызванное задержкой фазы сна, расстройство сна, вызванное ранним наступлением фазы сна и синдром не-24-часового цикла сон-бодрствование), идиопатическая гиперсомния и/или чрезмерная сонливость, связанная с невосстанавливающим сном (ΝΚδ).
В патенте США 5916920 описаны некоторые соединения 3-монозамещенногобицикло[3.1.0]гексана в качестве модуляторов метаботропного рецептора глутамата, подходящие для лечения различных расстройств, в том числе в качестве антидепрессивных агентов. В патенте США 7157594 описаны различные соединения 3-монозамещенного-бицикло[3.1.0]гексана в качестве антагонистов шС1и рецептора II группы для применения для лечения различных расстройств, включающих депрессивные симптомы. В заявке на патент США 2007/0021394 А1 описаны различные соединения 3монозамещенного-бицикло[3.1.0]гексана в качестве антагонистов шС1и рецептора II группы и их пролекарства для применения для лечения различных расстройств, включая депрессию.
В настоящем изобретении предложено семейство соединений 4-замещенного-3фенилсульфанилметилбицикло[3.1.0]гексана, обладающих высокой антагонистической активностью в отношении шС1и2 и шС1и3 рецепторов. Соединения согласно настоящему изобретению также являются селективными по отношению к указанным шС1и2 и шС1и3 рецепторам, в частности, по сравнению с другими шС1и рецепторами. Также посредством изучения некоторых соединений на животных моделях было показано, что соединения согласно настоящему изобретению могут подходить для лечения депрессивных расстройств (которые могут включать большое депрессивное расстройство (БДР), монополярную депрессию, дистимию и/или циклотимию) и расстройств чрезмерной сонливости (которые могут включать чрезмерную дневную сонливость (ΕΌδ), гиперсомнию, связанную с синдромом обструктивного апноэ во сне или нарколепсией, расстройства циркадного ритма сна (включая, но не ограничиваясь ими, расстройство сна, вызванное сменным режимом работы, расстройство сна, вызванное сменой часового пояса (расстройство джетлаг), расстройство сна, вызванное задержкой фазы сна, расстройство сна, вызванное ранним наступлением фазы сна и синдром не-24-часового цикла сон-бодрствование), идиопатическую гиперсомнию и/или чрезмерную сонливость, связанную с невосстанавливающим сном (ΝΚδ). Антидепрессивный и стимулирующие эффекты указанного механизма также позволяют предположить воздействие на симптомы депрессивных расстройств, таких как усталость, которые иначе трудно поддаются лечению существующими антидепрессантами.
В настоящем изобретении предложены соединения формулы I
где каждый из К1 и К2 независимо представляет собой водород, С1-С3 алкоксикарбонилоксиметил, С1-С3 алкилкарбонилоксиметил или С3-6 циклоалкилкарбонилоксиметил;
К3, независимо в каждом случае, представляет собой метил, фтор или хлор;
К4 представляет собой гидроксил, метилкарбониламино, гидроксиметилкарбониламино, метоксикарбониламино, имидазол-2-илсульфанил, тиазол-2-илсульфанил, 1,2,4-триазол-3-илсульфанил, 1-метил1,2,4-триазол-3-илсульфанил или 1-метил-1,2,4-триазол-5-илсульфанил; и η представляет собой 1 или 2;
или их фармацевтически приемлемые соли.
Особенностью настоящего изобретения является то, что соединения формулы I, где оба К1 и К2 представляют собой водород (дикислотные соединения), являются терапевтически активными соединениями ίη νινο, тогда как соединения, в которых К1, или К2, или оба отличны от водорода, представляют
- 1 022196 собой пролекарства их терапевтически активных дикислотных аналогов. Соединения, в которых К1 или К2 или оба отличны от водорода гидролизуются ίη νίνο с получением терапевтически активного дикислотного аналога. При пероральном введении указанные пролекарственные соединения, в частности дисложноэфирные пролекарства, обеспечивают повышенную биодоступность указанного дикислотного метаболита по сравнению с пероральным введением дикислотных соединений (оба К1 и К2 представляют собой водород), но указанные дикислотные соединения обеспечивают лучшую активность при внутривенном, внутримышечном или подкожном введении.
В другом аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или наполнителем. Кроме того, в указанном аспекте изобретения предложена фармацевтическая композиция, подходящая для лечения депрессивных расстройств, например большого депрессивного расстройства, монополярной депрессии, дистимии и/или циклотимии, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми наполнителями, носителями или разбавителями.
Согласно другому варианту реализации указанного аспекта изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, наполнителем или разбавителями, и возможно другие терапевтические ингредиенты. Согласно еще одному варианту реализации указанного аспекта изобретения указанная фармацевтическая композиция дополнительно содержит второй терапевтический агент, представляющий собой лекарственное средство, подходящее для лечения депрессивных расстройств, например ингибитор обратного захвата серотонина, например флуоксетин и/или циталопрам.
Согласно еще одному варианту реализации указанного аспекта изобретения предложена фармацевтическая композиция, подходящая для лечения расстройств чрезмерной сонливости, например чрезмерной дневной сонливости (ΕΌδ), гиперсомнии, связанной с синдромом обструктивного апноэ во сне или нарколепсией, расстройства циркадного ритма сна (включая, но не ограничиваясь ими, расстройство сна, вызванное сменным режимом работы, расстройство сна, вызванное сменой часового пояса (расстройство джетлаг), расстройство сна, вызванное задержкой фазы сна, расстройство сна, вызванное ранним наступлением фазы сна и синдром не-24-часового цикла сон-бодрствование), идиопатической гиперсомнии и/или чрезмерной сонливости, связанной с невосстанавливающим сном (ΝΚδ), содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми наполнителями, носителями или разбавителями.
В настоящем изобретении также предложен способ лечения депрессивных расстройств, например большого депрессивного расстройства, монополярной депрессии, дистимии и/или циклотимии, у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, которое нуждается в подобном лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. Согласно другому варианту реализации указанного аспекта изобретения указанный способ дополнительно включает введение второго терапевтического агента в совместной, раздельной или последовательной комбинации, который представляет собой лекарственное средство, подходящее для лечения депрессивных расстройств, например ингибитор обратного захвата серотонина, например флуоксетин и/или циталопрам.
Согласно другим вариантам реализации изобретения предложены способы лечения расстройств чрезмерной сонливости, включающие введение млекопитающему, которое нуждается в подобном лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. Согласно другим вариантам реализации указанного аспекта изобретения указанная чрезмерная сонливость возникает вследствие любого одного или более следующих расстройств: чрезмерная дневная сонливость (ΕΌδ), гиперсомния, связанная с синдромом обструктивного апноэ во сне или нарколепсией, расстройства циркадного ритма сна (включая, но не ограничиваясь ими, расстройство сна, вызванное сменным режимом работы, расстройство сна, вызванное сменой часового пояса (расстройство джетлаг), расстройство сна, вызванное задержкой фазы сна, расстройство сна, вызванное ранним наступлением фазы сна и синдром не-24-часового цикла сон-бодрствование), идиопатическая гиперсомния и/или чрезмерная сонливость, связанная с невосстанавливающим сном (ΝΚδ).
Согласно одному конкретному варианту реализации указанных способов лечения указанное млекопитающее представляет собой человека.
В настоящем изобретении также предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии. В данном аспекте изобретения предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения депрессивных расстройств. Согласно дополнительным вариантам реализации указанное депрессивное расстройство представляет собой любое из большого депрессивного расстройства (БДР), монополярной депрессии, дистимии и/или циклотимии. Согласно другим вариантам реализации аспекта настоящего изобретения предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в совместной, раздельной или последовательной комбинации с ингибитором обратного захвата серотонина, например флуок- 2 022196 сетином и/или циталопрамом, для лечения депрессивных расстройств.
Кроме того, указанный аспект изобретения включает соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль для применения для лечения расстройств чрезмерной сонливости. Согласно конкретным вариантам реализации аспекта изобретения чрезмерная сонливость возникает вследствие любого одного или более следующих расстройств: чрезмерная дневная сонливость (ΕΌδ), гиперсомния, связанная с синдромом обструктивного апноэ во сне или нарколепсией, расстройства циркадного ритма сна (включая, но не ограничиваясь ими, расстройство сна, вызванное сменным режимом работы, расстройство сна, вызванное сменой часового пояса (расстройство джетлаг), расстройство сна, вызванное задержкой фазы сна, расстройство сна, вызванное ранним наступлением фазы сна и синдром не-24-часового цикла сон-бодрствование), идиопатическая гиперсомния и/или чрезмерная сонливость, связанная с невосстанавливающим сном (ΝΡ.8).
Согласно одному конкретному варианту реализации указанного аспекта изобретения указанные применения осуществляют у млекопитающих, в частности человека.
Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения депрессивных расстройств, например большого депрессивного расстройства, монополярной депрессии, дистимии и/или циклотимии. Согласно другому варианту реализации указанного аспекта изобретения предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли и второго терапевтического агента, подходящего для лечения депрессивных расстройств, например ингибитора обратного захвата серотонина, например флуоксетина и/или циталопрама, для получения лекарственного средства для лечения депрессивных расстройств. Согласно другому варианту реализации изобретения предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения расстройств чрезмерной сонливости. Согласно конкретным вариантам реализации указанного аспекта изобретения указанное лекарственное средство подходит для лечения любого одного или более следующих расстройств: чрезмерная дневная сонливость (ΕΌδ), гиперсомния, связанная с синдромом обструктивного апноэ во сне или нарколепсией, расстройства циркадного ритма сна (включая, но не ограничиваясь ими, расстройство сна, вызванное сменным режимом работы, расстройство сна, вызванное сменой часового пояса (расстройство джетлаг), расстройство сна, вызванное задержкой фазы сна, расстройство сна, вызванное ранним наступлением фазы сна и синдром не-24-часового цикла сон-бодрствование), идиопатическая гиперсомния и/или чрезмерная сонливость, связанная с невосстанавливающим сном (ΝΚδ).
Соединения согласно настоящему изобретению содержат основные и кислотные фрагменты и соответственно взаимодействуют с множеством органических и неорганических кислот и оснований с получением фармацевтически приемлемых солей. Фармацевтически приемлемые соли каждого из соединений согласно настоящему изобретению включены в объем настоящей заявки. В настоящей заявке термин фармацевтически приемлемая соль относится к любой соли соединения согласно изобретению, которая, по существу, нетоксична для живых организмов. Такие соли включают перечисленные в 1оигиа1 οί Рйагшасеийса1 8аепсе, 66, 2-19 (1977), известные специалистам в данной области.
Предпочтительные классы соединений согласно настоящему изобретению представляют собой соединения, в которых:
1) оба К1 и К2 представляют собой водород;
2) К1 или К2 или оба отличны от водорода;
3) оба К1 и К2 отличны от водорода;
4) К1 и К2 одинаковы и отличны от водорода;
5) каждый из К1 и К2 представляет собой изопропоксикарбонилоксиметил;
6) п представляет собой 2;
7) п представляет собой 2, обе группы К3 представляют собой хлор, и группы хлора находятся в 3 и 4 положениях фенила;
8) К4 представляет собой гидроксил.
Следует понимать, что следующие предпочтительные соединения представляют собой комбинацию указанных выше предпочтительных выборок для заданных заместителей с предпочтительными выборками для других заместителей. Примеры таких комбинаций включают, но не ограничиваются ими, следующие предпочтительные классы соединений:
9) предпочтительные соединения согласно любому из абзацев 1-5 (предпочтительные выборки для К1 и К2), в которых п представляет собой 2, обе группы К3 представляют собой хлор и указанные группы хлора находятся в 3 и 4 положениях фенила (абзац 7);
10) предпочтительные соединения согласно любому из абзацев 1-5 (предпочтительные выборки для К1 и К2), в которых К4 представляет собой гидроксил (абзац 8);
11) предпочтительные соединения согласно любому из абзацев 1-5 ((предпочтительные выборки для К1 и К2), в которых п представляет собой 2, обе группы К3 представляют собой хлор и указанные группы хлора находятся в 3 и 4 положениях фенила (абзац 7), и в которых К4 представляет собой гидроксил (абзац 8).
- 3 022196
Конкретные предпочтительные соединения согласно изобретению представляют собой соединения, описанные в примерах, включая их свободные основания и фармацевтически приемлемые соли.
Некоторыми предпочтительными соединениями являются (18,2К,38,48,5К,6К)-2-амино-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6дикарбоновая кислота или ее фармацевтически приемлемая соль и бис(изопропоксикарбонилоксиметил)(1К,28,38,4К,58,6К)-4-амино-3-[(3,4-дихлорфенил)метокси]-2гидроксибицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоксилат или или его фармацевтически приемлемая соль (т.е. соединения примеров 1, 10 и 15 и их различные фармацевтически приемлемые соли).
В настоящей заявке сокращения определяются следующим образом:
БСА означает бычий сывороточный альбумин.
Όί'Όΐν означает (28,2'К,3'К)-2-(2',3'-дикарбоксициклопропил)глицин.
ΌΜΕΜ означает минимальную среду Игла, модифицированную по способу Дульбекко.
ДМСО означает диметилсульфоксид.
ΌΡΒ8 означает фосфатно-солевой буфер Дульбекко.
ЭДТА означает этилендиаминтетрауксусную кислоту.
ΟΤΡ означает гуанозинтрифосфат.
ΗΒ88 означает сбалансированный солевой раствор Хенкса.
ΗΕΡΕ8 означает 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоноваую кислоту.
НРЬС означает жидкостную хроматографию высокого давления.
ΙΒΜΧ означает 3-изобутил-1-метилксантин.
1С50 означает концентрацию, при которой достигается 50% от максимального ингибирования.
в.в. означает внутривенный или внутривенно.
и.п. означает интраперитонеально.
Ь-АР-4 означает Ь-(+)-2-амино-4-фосфономасляную кислоту.
БС/М8 означает жидкостную хроматографию с последующей масс-спектроскопией.
щР8Т означает тест принудительного плавания на мышах; животная модель для антидепрессивной активности.
М8 означает масс-спектроскопию.
М8 (Ε8+) означает масс-спектроскопию с применением электроспрея.
ЯМР означает ядерный магнитный резонанс.
п. о. означает рег 08, т.е. через рот.
1Ви означает фрагмент третичного-бутила.
Общая химия
Соединения согласно настоящему изобретению можно получать согласно следующим схемам синтеза посредством способов, хорошо известных и применяемых в данной области техники. Подходящие условия реакций для стадий указанных схем хорошо известны в данной области техники и подходящие заменители для растворителей и сореагентов известны в рамках данной области техники. Кроме того, специалистам в данной области техники будет понятно, что синтетические промежуточные вещества можно выделять и/или очищать с помощью различных хорошо известных способов при необходимости или желании и настолько часто, чтобы было возможно применять различные промежуточные вещества непосредственно на последующих стадиях синтеза с небольшой очисткой или без очистки. Кроме того, специалисту в данной области техники будет понятно, что в некоторых случаях порядок включения фрагментов не важен. Конкретный порядок стадий, требуемый для получения соединений формулы ΐ, зависит от конкретного синтезируемого соединения, исходного соединения и относительной реакционной способности замещенных фрагментов, как хорошо известно квалифицированному химику. Все заместители, если не указано иное, такие как определено выше, и все реагенты хорошо известны и применяемы в данной области техники.
Соединения 1, представляющие собой пролекарство, можно получать как показано на схеме I, где К1, К2, К3, К4 и η такие, как определено ранее, оба К1 и К2 не являются водородом в соединении 1.
- 4 022196
Соединения 1 можно получать с применением химии, приведенной на схеме I.
Соединение 4 подвергают взаимодействию с реагентом, защищающим аминогруппу, таким как дитрет-бутилдикарбонат, в условиях, хорошо известных специалистам в данной области техники, с получением соединения 3. Если указанные группы К1 и К2 в соединении 2 одинаковы, соединение 3 подвергают взаимодействию с достаточным количеством подходящего хлор- или йодметилалкилкарбоната и подходящими реагентами, такими как йодид натрия и карбонат цезия, в подходящем растворителе, таком как диметилформамид, с получением целевого дисложноэфирного соединения 2, в котором К1 и К2 одинаковы. Если К1 и К2 в соединении 2 различны, путем регулирования количества первого хлорметилалкилкарбоната до примерно 1 экв. карбоновую кислоту на 5-членном кольце можно сначала превращать в К2 моносложный эфир. Указанное соединение К2 моносложного эфира можно дополнительно подвергать взаимодействию с 1 экв. другого хлорметилалкилкарбоната. Группу свободной карбоновой кислоты на 3членном кольце можно затем превращать в К1 сложный эфир с получением целевого дисложного эфира с различными К1 и К2. Для получения К2 моносложного эфира на 5-членном кольце соединения 2 соединение 3 подвергают взаимодействию с примерно 1 экв. подходящего хлорметилалкилкарбоната и подходящими реагентами, такими как йодид натрия и карбонат цезия, в подходящем растворителе, таком как диметилформамид, с получением целевого К2 моносложного эфира соединения 2, в котором К1 представляет собой водород. Для получения К1 моносложного эфира на 3-членном кольце группу карбоновой кислоты на 5-членном кольце следует сначала защитить, поскольку она более реакционноспособна. Более конкретно, группа карбоновой кислоты на 5-членном кольце в соединении 3 может взаимодействовать с а-хлор-4-метокситолуолом, йодидом натрия и бикарбонатом натрия в подходящем растворителе, таком как диметилформамид, с получением 4-метоксилбензил моносложного эфира. Затем указанную группу карбоновой кислоты на 3-членном кольце защищенного соединения 4-метоксилбензил моносложного эфира подвергают взаимодействию с подходящим хлорметилалкилкарбонатом с получением целевого К1 сложного эфира на указанном 3-членном кольце. Дисложный эфир обрабатывают подходящей кислотой, такой как трифторуксусная кислота, со снятием защиты с 4-метоксилбензиловой и Ν-третбутоксикарбониловой групп, с получением целевого К1 моносложного эфира соединения 1. Затем с соединения 2, включая К2 моносложный эфир и дисложный эфир с одинаковыми или различными К1 и К2, снимают защиту с помощью подходящей кислоты, такой как соляная кислота в диоксане, с получением целевого соединения 1 или фармацевтически приемлемой соли.
- 5 022196
Активное исходное соединение 4 можно получать, как показано на схеме II.
Соединение 9 подвергают взаимодействию метансульфонилхлоридом и подходящим основанием, таким как триэтиламин в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран, с получением мезилата соединения 6. Соединение 6 может взаимодействовать с тиоловыми гетероциклами, такими как 1Н-1,2,4триазол-3-тиол, и подходящим основанием, таким как карбонат калия, в растворителе, таком как диметилформамид, с получением целевого соединения 5, в котором К4 представляет собой целевой гетероцикл, связанный через тио. Соединение 6 может также взаимодействовать с азидом натрия с получением азида промежуточного соединения, которое затем восстанавливают триметилфосфином в тетрагидрофуране и воде, с получением амина. Кроме того, полученный амин можно превращать в целевой амид или карбамат с помощью способов, хорошо известных специалистам в данной области техники, с получением соединения 5, в котором К4 представляет собой целевой амид или карбаматную группу. Затем с соединения 5 снимают защиту с помощью подходящей кислоты, такой как соляная кислота или уксусная кислота, с получением соединения 4.
Если К4 предсталяет собой гидроксильную группу в соединении 4, целевое активное исходное соединение 4 может быть получено непосредственно из соединения 7 путем удаления всех защитных групп с помощью соответствующей кислоты, такой как НС1, в подходящем растворителе, таком как диоксан.
- 6 022196
Два ключевых промежуточных соединения 7 и 9 можно получать, как показано на схеме III. Соединение 14 (см. подробности синтеза в νθ 03/104217 А2) восстанавливают до соединения 13 с помощью подходящего восстанавливающего реагента, такого как три(втор-бутил)борогидрид лития в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран. Соединение 13 подвергают взаимодействию с метансульфохлоридом и основанием, таким как триэтиламин в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран, с получением мезилата соединеия 12, которое далее подвергают взаимодействию с фторидом тетрабутиламмония или трет-бутоксидом калия в тетрагидрофуране, с получением соединеия 11. Соединение 11 подвергают взаимодействию с ΟδΟ4, Ы-метилморфолин-Ы-оксидом в ацетоне и воде с получением диолового соединения 10. Затем соединение 10 подвергают взаимодействию с соответствующим замещенным бензилгалогенидом, таким как бромид 3,4-дихлорбензила, с применением йодида тетра-н-тетрабутиламмония и оксида серебра в подходящем растворителе, таком как диметилформамид, с получением соединения 9. В условиях реакции Мицунобу соединение 9 подвергают взаимодействию с 4-нитробензойной кислотой, трифенилфосфином и диизопропилазодикарбоксилатом в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран, с получением соединена 8. Затем соединение 8 подвергают взаимодействию с карбонатом калия в подходящем растворителе, таком как метанол, с получением соединения 7.
Пример получения 1. ди-трет-Бутил-(18,28,48,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-4гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
К ди-трет-бутил-(18,28,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-оксобицикло[3.1.0]гексан-2,6дикарбоксилату (7,10 г, 17,25 ммоль, см. подробности синтеза в νΟ 03/104217 А2) в тетрагидрофуране (431,35 мл) добавляли по каплям при 0°С 1М три(втор-бутил)борогидрид лития в тетрагидрофуране (42,27 мл, 42,27 ммоль) и перемешивали. Через 90 мин осторожно добавляли 1М водный бикарбонат натрия (60,07 мл, 62,11 ммоль), с последующим добавлением перекиси водорода (30 мас.%, 2,64 мл, 86,27 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Через 40 мин реакционную смесь экстрагировали этилацетатом, промывали 10% водной лимонной кислотой с последующим промыванием солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии, элюируя 550% этилацетатом в гексанах, с получением титульного соединения (6,70 г, 16,20 ммоль, 94%).
Пример получения 2. ди-трет-Бутил-(18,28,48,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-4- 7 022196 [(метилсульфонил)окси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
Метансульфохлорид (224,61 мкл, 2,90 ммоль) добавляли к ди-трет-бутил-(18,2§,4§,5К,6К)-2-[(третбутоксикарбонил)амино]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилату (400 мг, 967 мкмоль) и триэтиламину (472 мкл, 3,39 ммоль) в тетрагидрофуране (4,84 мл) при 0°С и перемешивали. Охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Разбавляли водой и насыщенным водным бикарбонатом натрия, затем экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические вещества промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением титульного соединения (600 мг, 1,22 ммоль, 100%).
Пример получения 3. ди-трет-Бутил-(18,2§,5К,6§)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]бицикло[3.1.0] гекс-3 -ен-2,6-дикарбоксилат
К ди-трет-бутил-(18,2§,4§,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-[(метилсульфонил)окси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилату (600,00 мг, 1,22 ммоль) в тетрагидрофуране (2,03 мл) добавляли 1М фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (3,84 мл, 3,84 ммоль) и нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии, элюируя 5-75% этилацетатом в гексанах, с получением титульного соединения (0,23 г, 0,58 ммоль, 48%).
Пример получения 4. ди-трет-Бутил-(18,2К,3§,4К,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3,4дигидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
ΟδΟ4 (2,5%) в 2-метил-2-пропаноле добавляли (5,48 г, 0,54 ммоль) к Ν-метилморфолин-М-оксиду (2,43 г, 17,97 ммоль), ди-трет-бутил-(18,2§,5К,6§)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]бицикло[3.1.0]гекс-3ен-2,6-дикарбоксилату (3,23 г, 8,17 ммоль), ацетону (80,66 г, 102,09 мл, 1,39 моль) и воде (40,83 мл, 40,83 г, 2,27 моль). Перемешивали при комнатной температуре. Через 5 ч к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор тиосульфата натрия (10 мл). Концентрировали до половинного объема при пониженном давлении. Разбавляли концентрат водой, экстрагировали этилацетатом (3x50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии, элюируя 5-50% этилацетатом в гексанах, с получением титульного соединения (2,7 г, 6,3 ммоль, 77%).
Пример получения 5. ди-трет-Бутил-(18,2К,3§,4К,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4- 8 022196 дихлорбензил)окси] -4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
3,4-Дихлорбензилбромид (1,02 мл, 1,02 г, 4,26 ммоль) добавляли к ди-трет-бутил(18,2К,3§,4К,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3,4-дигидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6дикарбоксилату (1,22 г, 2,84 ммоль), иодиду тетра-н-бутиламмония (1,07 г, 2,84 ммоль) и оксиду серебра (987,35 мг, 4,26 ммоль) в диметилформамиде (17 мл) при комнатной температуре. Перемешивали в течение ночи. Разбавляли диэтиловым эфиром и гексанами (1:1), фильтровали черех целит и затем промывали эфиром и гексанами (1:1). Фильтрат промывали водой, солевым раствором, сушили над сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии, элюируя смесью 0-30% этилацетат:гексаны, с получением титульного соединения (1,7 г, 2,84 ммоль, 78%): Μδ (т/ζ): 610/612 (М+Ыа).
Пример получения 6. ди-трет-Бутил-(Ш,2К^^,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4дихлорбензил)окси]-4-{[(4-нитрофенил)карбонил]окси}бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
Трифенилфосфин (12,66 г, 48,26 ммоль) и 4-нитробензойную кислоту (8,19 г, 48,26 ммоль) добавляли к ди-трет-бутил-(1Б,2К,3Б,4К,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилату (14,20 г, 24,13 ммоль) и тетрагидрофурану (241,28 мл, 2,97 моль) при комнатной температуре. Смесь охлаждали на ледяной бане. Добавляли диизопропилазодикарбоксилат (9,57 мл, 9,76 г, 48,26 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) и реакционную смесь постепенно нагревали до комнатной температуры в течение ночи. Разбавляли диэтиловым эфиром и затем промывали водным карбонатом натрия. Снова экстрагировали водный слой диэтиловым эфиром. Объединяли все эфирные экстракты, промывали водой, солевым раствором, сушили над сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали с помощью флэшхроматографии, элюируя 10-100% этилацетатом в гексанах, с получением титульного соединения (9 г, 12,2 ммоль, 51%): Μδ (т/ζ): 759 (М+1).
Пример получения 7. ди-трет-Бутил-(Ш,2К^^,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4дихлорбензил)окси] -4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
К раствору ди-трет-бутил-(Ш,2К^^,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4дихлорбензил)окси]-4-{[(4-нитрофенил)карбонил]окси}бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата (9,00 г, 12,20 ммоль) и метанола (122,01 мл, 3,01 моль) добавляли карбонат калия (5,11 г, 36,60 ммоль) и затем перемешивали при комнатной температуре. Через 1 ч реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали водой (75 мл), солевым раствором (75 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии, элюируя смесью 10-60% этилацетат:гексаны, с получением титульного соединения (5,3 г, 9,01 ммоль, 74%).
- 9 022196
Μδ (т/ζ): 610/612 (М+1).
Пример получения 8. ди-трет-Бутил-(18,2К,3§,4К,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4дихлорбензил)окси]-4-[(метилсульфонил)окси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
К ди-трет-бутил-(18,2К,38,4К,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилату (2,00 г, 3,40 ммоль), триэтиламину (1,66 мл, 1,20 г, 11,89 ммоль) и тетрагидрофурану (33,98 мл, 30,11 г, 417,61 ммоль) добавляли при 0°С метансульфохлорид (0,841 мл, 1,25 г, 10,87 ммоль) и перемешивали. Реакционную смесь постепенно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли насыщенным водным бикарбонатом натрия, затем экстрагировали этилацетатом (3x100 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над сульфатом магния, фильтровали и затем концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали с помощью флэшхроматографии, применяя элюирование 5-60% этилацетатом в гексанах, с получением титульного соединения (1,40 г, 2,10 ммоль, 62%).
Пример получения 9. ди-трет-Бутил-(1К,2К,38,4§,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4дихлорбензил)окси] -4-(1Н- 1,2,4-триазол-3 -илсульфанил)бицикло [3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
К 1Н-1,2,4-триазол-3-тиолу (424,79 мг, 4,20 ммоль) и диметилформамиду (10,50 мл, 9,93 г, 135,80 ммоль) при комнатной температуре добавляли карбонат калия (1,45 г, 10,50 ммоль) и перемешивали. Через 5 мин к реакционной смеси добавляли ди-трет-бутил-(18,2К,38,4К,5К,6К)-2-[(третбутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-[(метилсульфонил)окси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6дикарбоксилат (1,40 г, 2,10 ммоль) и перемешивали при 85°С. Через 2 дня реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли насыщенным водным бикарбонатом натрия, затем экстрагировали этилацетатом (3Х). Объединенные органические вещества промывали водой, солевым раствором, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии, элюируя 5-75% этилацетатом в гексанах, с получением титульного соединения (978,0 мг, 1,46 ммоль, 69%). Μδ (т/ζ): 671/669 (М-1).
Пример получения 10. ди-трет-Бутил-(1К,2К,38,48,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4дихлорбензил)окси] -4-( 1,3-тиазол-2-илсульфанил)бицикло [3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
Указанное соединение получали, по существу, как описано в примере получения 9 путем применения 2-меркаптотиазола. Остаток очищали с помощью нормально-фазовой хроматографии с получением 29% титульного соединения. Μδ (т/ζ): 465 (М+1).
Пример получения 11. ди-трет-Бутил-(1К,2К^^,5К,6К.)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4дихлорбензил)окси]-4-[(1-метил-1,2,4-триазол-3-ил)сульфанил]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
- 10 022196
ди-трет-Бутил-(1К,2К,38,48,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4(1Н-1,2,4-триазол-3-илсульфанил)бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат (0,60 г, 0,893 ммоль) растворяли в безводном тетрагидрофуране (3,6 мл) в колбе, высушенной на огне, и охлаждали до -78°С. Добавляли трет-бутоксид калия (0,80 г, 0,893 ммоль) и перемешивали в течение 15 мин. Добавляли метилиодид (0,127 г, 0,893 ммоль, предварительно обработанный посредством фильтрации через щелочной оксид алюминия) и оставляли перемешиваться при -78 °С в течение 15 мин. Смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и затем перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Выливали неочищенную реакционную смесь в воду и доводили рН до 6 с помощью 1Ν водной НС1 и экстрагировали в этилацетат. Органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Очищали с помощью обращенно-фазовой флэш-хроматографии (100 г С18 колонка, элюируя смесью 45-95% ацетонитрил/вода (с 0,1% трифторуксусной кислотой в обоих), соединение элюировали при 89% ацетонитрила). Желаемые фракции объединяли и нейтрализовали водным бикарбонатом. Экстрагировали этилацетатом, органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением титульного соединения в виде белой пены (0,16 г, 0,23 ммоль, 26%). М8 (т/ζ) 473/475/477 (М+1).
Пример получения 12. ди-трет-Бутил-(18,2К,3К,48,5К,68)-4-азидо-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино] -3-[(3,4-дихлорбензил)окси]бицикло [3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
Азид натрия (8,29 г, 127,45 ммоль) добавляли к ди-трет-бутил-(18,2К,38,4К,5К,6К)-2-[(третбутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-[(метилсульфонил)окси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6дикарбоксилату (16,99 г, 25,49 ммоль) и 15-краун-5 (508,57 мкл, 561,46 мг, 2,55 ммоль) в диметилформамиде (254,90 мл, 240,96 г, 3,30 моль) при 85°С и перемешивали. Через 7 дней реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (3Х). Объединенные органические вещества промывали водой, солевым раствором, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии, элюируя 2-60% этилацетатом в гексанах, с получением титульного соединения (11,2 г, 18,3 ммоль, 72%). М8 (т/ζ) 635/637 (М+1).
Пример получения 13. ди-трет-Бутил-(18,2К,3К,48,5К,68)-4-амино-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино] -3-[(3,4-дихлорбензил)окси]бицикло [3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
К ди-трет-бутил-(18,2К,3К,48,5К,68)-4-азидо-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилату (8,00 г, 13,04 ммоль) в тетрагидрофуране (43,46 мл) и воде (130,39 мл) при комнатной температуре добавляли 1М раствор триметилфосфина в тетрагид- 11 022196 рофуране (19,56 мл, 19,56 ммоль) и перемешивали в течение ночи. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный бикарбонат натрия, затем экстрагировали этилацетатом (3Х). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением титульного соединения (7,42 г, 12,63 ммоль, 97%). Μδ (т/ζ): 609/611 (М+Ыа).
Пример получения 14. ди-трет-Бутил-(Ш,2К,3К^,5К^)-4-(ацетиламино)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино] -3-[(3,4-дихлорбензил)окси] бицикло [3.1.0] гексан-2,6-дикарбоксилат
К перемешиваемому охлажденному раствору ди-трет-бутил-(1Б,2К,3К,4Б,5К,6Б)-4-амино-2-[(третбутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата (2,30 г, 3,91 ммоль) и триэтиламина (709,32 мкл, 514,97 мг, 5,09 ммоль) в дихлорметане (19,57 мл) при 0°С добавляли ацетилхлорид (334,31 мкл, 368,75 мг, 4,70 ммоль) в дихлорметане (5 мл), затем перемешивали. Через 90 мин разбавляли водой и экстрагировали дихлорметаном (3x25 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением титульного соединения (2,40 г, 3,81 ммоль, 97%). Μδ (т/ζ): 653 (М+1).
Пример получения 15. ди-трет-Бутил-(Ш,2К,3К^,5К^)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4дихлорбензил)окси]-4-[(метоксикарбонил)амино]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
Указанное соединение получали, по существу, как описано в примере получения 14 путем применения метилхлорформиата, с получением 88% титульного соединения.
Пример получения 16. ди-трет-Бутил-(1К,2К^^,5К,6К)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[(3,4дихлорфенил)метокси]-4-[(2-метил-1,2,4-триазол-3-ил)сульфанил]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
К раствору ди-трет-бутил-(Ш,2К^,4К,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4дихлорбензил)окси]-4-[(метилсульфонил)окси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата (0,80 г, 0,84 ммоль) в диметилформамиде (1,68 мл) добавляли 2-метил-1Н-1,2,4-триазол-3-тион (0,126 г, 1,09 ммоль) и карбонат калия (0,35 г, 2,52 ммоль). После нагревания в течение 2 дней при 80°С раствор выливали в солевой раствор и экстрагировали этилацетатом три раза, объединенные органические фазы сушили сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Очищали с помощью флэш-хроматографии, элюируя 10% этилацетатом/СН2С12, с получением титульного соединения в виде масла (0,576 г, 0,84 ммоль, 100%). Μδ (т/ζ): 685/687/689 (М+1).
Пример получения 17. ди-трет-Бутил-(1К,2К^^,5К,6К)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[(3,4дихлорфенил)метокси]-4-(1Н-имидазол-2-илсульфанил)бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
- 12 022196
Указанное соединение получали, по существу, как описано в примере получения 20 путем применения ди-трет-бутил-( 1δ,2Κ,3 §,4К,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино] -3-[(3,4-дихлорбензил)окси] 4-[(метилсульфонил)окси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата. Очищали с помощью флэшхроматографии, элюируя 30-50% этилацетат:гексаны, с получением титульного соединения с 38% выходом. Μδ (т/ζ): 671/673/675 (М+1).
Пример получения 18. Диэтил-(Ш,2К,3К^,5К^)-4-[(2-ацетоксиацетил)амино]-2-(третбутоксикарбониламино)-3-[(3,4-дихлорфенил)метокси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
К раствору диэтил-(Ш,2К,3К^,5К^)-4-амино-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[(3,4дихлорфенил)метокси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата (0,47 г, 0,89 ммоль) и диизопропилэтиламина (0,32 мл, 1,83 ммоль) в дихлорметане (9 мл) при комнатной температуре добавляли ацетоксиацетилхлорид (0,116 мл, 1,08 ммоль). Через 2,5 ч раствор промывали насыщенным ΝαΗί'.Ό3, (2х), солевым раствором (1х), сушили над Μ§δΟ4, фильтровали и конц. при пониженном давлении. Очищали с помощью флэш-хроматографии, элюируя градиентом от 0 до 100% этилацетата в гексанах в течение 30 мин, с получением титульного соединения в виде белого твердого вещества (0,43 г, 0,68 ммоль, 76%). Μδ (т/ζ): 531 (М+Н-ВОС).
Пример получения 19. (Ш,2К,3К^,5К^)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[(3,4-дихлорфенил) метокси]-4-[(2-гидроксиацетил)амино]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновая кислота
К раствору диэтил-(Ш,2К,3К^,5К^)-4-[(2-ацетоксиацетил)амино]-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3 -[(3,4-дихлорфенил)метокси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата (0,42 г, 0,67 ммоль) в тетрагидрофуране (7,0 мл) при комнатной температуре добавляли 1М водный гидроксид лития (4,0 мл, 4,0 ммоль) и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь подкисляли до приблизительно рН 1 с помощью 5Ν водной НС1. Экстрагировали этилацетатом (3х25 мл). Объединенные органические слои сушили, фильтровали и конц. при пониженном давлении. НРЬС анализ неочищенной реакционной смеси показал присутствие исходного вещества. Добавляли 1М водный гидроксид лития (4,0 мл, 4,0 ммоль) к
- 13 022196 раствору неочищенной реакционной смеси в тетрагидрофуране (7,0 мл) и нагревали при 50°С. Через 17 ч реакционную смесь подкисляли до приблизительно рН 1 с помощью 5Ν водной НС1. Экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные экстракты сушили, фильтровали и конц. при пониженном давлении. Очищали с помощью препаративной обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии, с применением градиента от 95% вода (с 0,03% НС1)/5% ацетонитрил до 5% вода (с 0,03% НС1)/95% ацетонитрил в течение 40 мин, с получением (18,2К,3К,48,5К,68)-2-(третбутоксикарбониламино)-3-[(3,4-дихлорфенил)метокси]-4-[(2-гидроксиацетил)амино]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновой кислоты (0,181 г, 0,34 ммоль, 51%) в виде белого твердого вещества. М8 (т/ζ): 531 (М-Н).
Пример получения 20. (18,2К,38,48,5К,6К)-2-[(трет-бутоксиксарбонил)амино]-3-[(3,4дихлорбензил)окси] -4-гидроксибицикло [3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновая кислота
(18,2К,38,48,5К,6К)-2-амино-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6дикарбоновую кислоту (2 г, 5,32 ммоль) растворяли в диоксане (10,63 мл), затем обрабатывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (10,63 мл, 6,90 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонатом (5,80 г, 26,58 ммоль). Двухфазную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 дней, затем концентрировали для удаления растворителя. Полученный остаток растворяли в ацетонитриле (с применением 1Ν НС1) и экстрагировали дважды для удаления ди-трет-бутилдикарбоната. Слой ацетонитрила концентрировали. Полученный остаток растворяли в этилацетате, затем дважды промывали 1Ν НС1, однократно промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали досуха, с получением титульного соединения (2,1 г, 4,41 ммоль, 83%). М8 (т/ζ): 474 (М-1).
Пример получения 21. (18,2К,3К,48,5К,68)-4-(ацетиламино)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3[(3,4-дихлорбензил)окси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновая кислота
Указанное соединение получали, по существу, как описано в примере получения 20 путем применения (18,2К,3К,48,5К,68)-4-(ацетиламино)-2-амино-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6дикарбоновой кислоты, с получением титульного соединения с 74% увыходом. М8 (т/ζ): 515/517 (М-1).
Пример получения 22. бис({[(1-Метилэтокси)карбонил]окси}метил)(18,2К,38,48,5К,6К)-2-[(третбутоксикарбонил)амино] -3 -[(3,4-дихлорбензил)окси] -4-гидроксибицикло [3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
К раствору (18,2К,38,48,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновой кислоты (1,89 г, 3,96 ммоль) в диметилформамиде (23,3 мл) добавляли хлорметилизопропилкарбонат (1,27 г, 8,33 ммоль), иодид натрия (59,4 мг, 0,396 ммоль) и
- 14 022196 карбонат цезия (2,84 г, 8,72 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и водой. Слои разделяли. Водный слой дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои экстрагировали солевым раствором, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Очищали остаток с помощью флэш-хроматографии, элюируя от 0 до 75% этилацетатом в гексане, с получением титульного соединения в виде пены (940 мг, 1,33 ммоль, 33%). М8 (т/ζ): 732 (М+Ыа).
Соединения согласно примерам получения 23-26 можно получить, по существу, как описано в примере получения 22.
При м пол Νο Химическое название Структура Вых од (%) Физиче ские данные М8(т/ г)
23 Бис{ [(этоксикарбонил )окси]мети л } -(18,2К,3 8,48,5К,6К)-2-[(трет- бутоксикарбонил)амино]-3 -[(3,4- дихлорбензил)окси]-4- гидроксибицикло[3.1,0]гексан- 2,6-дикарбоксилат ΑΡίΰΙίΐΜ ОН И У ν-. . -ζΎ о ,·—0 У'-< .° %О о ΝΗι У % у у / х О ... 58 702(М +Να)
24 Бис{[(циклопропилкарбонил)окс и] метил [ -(18,2К,3 8,4 8,5К,6К)-2- [(трет-бутоксикарбонил)амино]- 3 -[(3,4-дихлорбензил)окси]-4- гидроксибицикло[3.1,0]гексан- 2,6-дикарбоксилат Он н _ С| /У) 1-У’'С1 О ,—О Н**° У О N У / Оь/ О-._, ' λ. 55 694/69 6 (М+Ка )
25 Бис{[(2- метилпропаноил)окси] метил} (13,2В,3 8,4 δ, 5В, 6В)-2-[(трег- бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4- дихлорбензил)окси]-4- гидроксибицикло[3.1,0]гексан- 2,6-дикарбоксилат о н Г у г С1 у— о О Ν Λ -ч У % У 49 698/70 0 (Μ+Ν3 )
26 Бис[(ацетилокси)метил] (18,2В,ЗВ,48,5В,68)-4- (ацетиламино)-2-[(трет- бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4- дихлорбензил)окси]бицикло[3.1. 0]гексан-2,6-дикарбоксилат о °Г с| г-° УУУ УУ Г У0'! У °У
Пример 1. (18,2К,38,48,5К,6К)-2-амино-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновая кислота
ди-трет-Бутил-(18,2К,38,48,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат (5,30 г, 9,01 ммоль) добавляли к воде (30,02 мл) и уксусной кислоте (30,02 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником до завершения
- 15 022196 расходования исходного вещества. Охлаждали и концентрировали на роторном испарителе. Концентрат растирали с диэтиловым эфиром, осадок собирали, затем сушили в вакуумной печи с получением титульного соединения (3,30 г, 8,77 ммоль, 97%). М8 (т/ζ): 376/378 (М+1).
Соединения согласно примерам 2-3 можно получить, по существу, как описано в примере 1.
Пр им Νο. Химическое название Структура Выхо Д(%) Физические данные Μ8(ηι/ζ)
2 (1К,2К,38,48,5К,6К.)-2-амнно-3- [(3,4-дихлорбензил)окси]-4- (1Н-1,2,4-триазол-З - илсульфанил)бицикло[3.1,0]гек сан-2,6-дикарбоновая кислота ν^ν о Н / С1 Ηοίν*0 Η ί \,он η2ν д о 81 М3 (πι/ζ): 459/461 (М+1)
3 (1К,2К,3 3,48,5К,6К)-2-амино-3- [(3,4-дихлорбензил)окси]-4- (1,3-тиазол-2- илсульфанил)бицикло[3.1 0]гек сан-2,6-дикарбоновая кислота О ° н / нсА'ч/гх·-0 с| нХ η; о 73 М8 (т/ζ): 475/477 (М+1)
Пример 4. (18,2К,3К,48,5К,68)-4-(ацетиламино)-2-амино-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]бицикло[3.1.0] гексан-2,6-дикарбоновая кислота
ди-трет-Бутил-(18,2К,3К,48,5К,68)-4-(ацетиламино)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4дихлорбензил)окси]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат (2,40 г, 3,81 ммоль) добавляли к уксусной кислоте (7,99 г, 7,62 мл, 133,05 ммоль) и воде (3,81 мл, 3,81 г, 211,60 ммоль) и нагревали в микроволновом реакторе до 140°С. Через 15 мин охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и фильтровали для сбора твердых веществ. Твердые вещества последовательно промывали водой (2x50 мл) и диэтиловым эфиром (2x50 мл) и затем сушили в вакуумной печи с получением титульного соединения (1,23 г, 2,95 ммоль, 77%). М8 (т/ζ): 417/419 (М+1).
Пример 5. (18,2К,3К,48,5К,68)-2-амино-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-[(метоксикарбонил)амино] бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновая кислота
Указанное соединение получали, по существу, как описано в примере 4 путем применения (18,2К,3К,48,5К,68)-2-амино-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-[(метоксикарбонил)амино]бицикло[3.1.0] гексан-2,6-дикарбоновой кислоты. 81% выход. М8 (т/ζ): 433/435 (М+1).
Пример 6. Гидрохлорид (1К,2К,38,48,5К,6К)-2-амино-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-[(1-метил-1Н1,2,4-триазол-5-ил)сульфанил]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновой кислоты
- 16 022196
Уксусную кислоту (2,0 мл) и воду (2,0 мл) добавляли к ди-трет-бутил-(1К,2К,38,48,5К,6К.)-2-(третбутоксикарбониламино)-3 -[(3,4-дихлорфенил)метокси] -4-[(2-метил-1,2,4-триазол-3 -ил)сульфанил] бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилату (0,305 г, 0,445 ммоль) в сосуде для микроволнового реактора и герметизировали и смесь нагревали до 140°С в течение 25 мин. Смесь охлаждали и концентрировали досуха и затем добавляли 5Ν соляную кислоту (2 мл), ацетонитрил (2 мл) и переносили в виалу. Лиофилизировали в течение ночи с получением титульного соединения в виде белого твердого вещества (0,227 г, 0,445 ммоль; 95%). М8 (т/ζ): 473/475/477 (М+1).
Соединения согласно примерам 7-8 можно получить, по существу, как описано в примере 6.
Пр ИМ. Νο. Химическое название Структура Выхо д(%) Физические данные Μ3(ιη/ζ)
7 гидрохлорид (1К,2К,38,48,5К,6К)-2-амино- 3- [(3,4-дихлорфенил)метокси]- 4- [( 1 -метил-1,2,4-триазол-З- ил)сульфанил]бнцикло[3.1 0]ге ксан-2,6-дикарбоновой кислоты. и X1, о о К?* о'^о 91 473/475/477( М+1).
8 гидрохлорид (1 К,2К, 38,48,5К,6К)-2 -амино- 3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4- (1 Н-имидазол-2- илсульфанил)бицикло[3.1.0]ге ксан-2,6-дикарбоновой кислоты о - М'-'Ч _/ учА-' Ои н ц/\_О и НС1 0 88 458/460/462 (М+1)
Пример 9. Гидрохлорид (18,2К,3К,48,5К,68)-2-амино-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-[(гидроксиацетил)амино]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновой кислоты
К смеси (18,2К,3К,48,5К,68)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[(3,4-дихлорфенил)метокси]-4-[(2гидроксиацетил)амино]бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновая кислота (0,032 г, 0,06 ммоль) в воде (0,3 мл) добавляли 4Ν хлороводород (3,0 мл, 12,0 ммоль) в 1,4-диоксане. Твердое вещество промывали ацетонитрилом и диэтиловым эфиром на пористой фильтровальной воронке. Последовательно промывали твердое вещество ацетонитрилом и диэтиловым эфиром и затем дополнительно сушили в вакуумной печи в течение ночи при 50°С с получением титульного соединения в виде белого твердого вещества (0,018 г, 0,04 ммоль, 65%). М8 (т/ζ): 433 (М+Н).
Пример 10. Гидрохлорид бис({[(1-метилэтокси)карбонил]окси}метил)(18,2К,38,48,5К,6К)-2-амино- 17 022196
3-[(3,4-дихлорбензил)окси] -4-гидроксибицикло [3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата
Добавляли бис({[(1-метилэтокси)карбонил]окси}метил)(18,2К,3§,4§,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат в 4,0 М растворе хлороводорода в диоксане (14,47 мл, 57,87 ммоль) и перемешивали в течение 45 мин. Добавляли этилацетат и концентрировали реакционную смесь до образования пены. Пену растирали с этилацетатом с получением твёрдого вещества. Концентрировали и сушили в вакууме при 40°С в течение ночи с получением титульного соединения в виде беловатого твердого вещества (1,77 г, 2,75 ммоль, 95%). Μδ (т/ζ): 608 (М+Н).
Соединения пример 11-14 можно получить, по существу, как описано в примере 10.
Прим, Νο. Химическое название Структура Выход (%) Физические данные Μ8(ηι/ζ)
11 Гидрохлорид бис{ [(этоксикарбонил )окси]м$тил }- (15,2К,38,4£,5К.,бК)-2-амино-3-[(3,4- дихлорбензил)окси]-4- гидроксибицикло[3.1 0]гексан-2,6- дикарбоксилата АА % 97 608(М+1)
12 Г идрохлорид бис{ [(2- метилпропаноил)окси]метил} - (15,2К.38,48, 5К,6К)-2-амино-3-[{3, 4- дихлОрбензил)окси]-4- гидроксибицикло[3 1,0]гексан-2,6- дикарбоксилата ЛА 73 575/577(М+1)
13 Гидрохлорид бис{ [(циклопропилкарбонил)окси]метил} - (18,2К,38,45,5К,6К)-2-амино-3-[(3,4- дихлорбензил)окси]-4- гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6- дикарбоксилата 97 572/574(М+1)
14 Г идрохлорид бис[(ацетилокси)метил]- (18,2К,ЗК,48,5К,68)-4-(ацетиламино)-2- амино-3-[(3,4- дихлорбензил)окси]бицикло[3.10]гексан- 2,6-дикарбоксилата °т” 82 561/563(М+1)
Пример 15. Гидрохлорид бис({[(1-метилэтокси)карбонил]окси}метил)-(Ш,2К^^,5К,6К)-2амино-3-[(3,4-дихлорбензил)окси] -4-гидроксибицикло [3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
Стадия 1. ди-трет-Бутил-(Ш^^,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-гидроксибицикло
- 18 022196 [3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
К раствору ди-трет-бутил-(18,2§,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-оксобицикло [3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата (1000 г, 2,43 моль) в сухом тетрагидрофуране (10 л) по каплям при 0°С в атмосфере азота добавляли 1М три-(втор-бутил)борогидрида лития в тетрагидрофуране (2,67 л, 2,67 моль). Через 2 ч при 0°С добавляли 2М №-ьСО3 в воде (850 г, 8,02 моль) при 0°С в течение 2 ч с последующим добавлением 35% водной перекиси водорода (740 мл, 8,99 моль) в воде (3,3 л). Через 40 мин смесь нагревали до комнатной температуры, после чего органическую фазу отделяли. Органическую фазу разбавляли метил-трет-бутиловым эфиром (3,5 л) и слои разделяли снова. Водную фазу экстрагировали метил-трет-бутиловым эфиром (3,5 л). Все объединенные органические фазы последовательно промывали 1М водным Να38Ο3 (2,67 л), водой (2,67 л) и солевым раствором (2,67 л), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали до объема 3 л. Осажденное твердое вещество фильтровали и промывали гептаном (1,3 л) с получением титульного соединения (864,76 г). Маточные растворы концентрировали досуха и остаток растирали гептаном (500 мл) и фильтровали с получением дополнительного титульного соединения (130,64 г, всего 995,4 г, выход 99%). М§ (т/ζ): 436 (М+23).
Стадия 2. ди-трет-Бутил-(18,2§,5К,6§)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]бицикло[3.1.0]гекс-3-ен2,6 -дикарбо ксилат
К раствору ди-трет-бутил-(2§,4§)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-гидроксибицикло [3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата (995,4 г, 2,41 моль) в сухом тетрагидрофуране (8,4 л) добавляли триэтиламин (735 мл, 5,30 моль) по каплям при 0°С в атмосфере Ν2 в течение 40 мин. Метансульфохлорид (373 мл, 4,82 моль) добавляли при 0°С в течение 50 мин. Реакционную смесь нагревали до 23°С. Через 3 ч реакционную смесь фильтровали для удаления гидрохлоридной соли триэтиламина. Фильтрационный осадок промывали сухим тетрагидрофураном (2x2 л). Фильтрат (13 л) разделяли на две равные части. К одной половине фильтрата добавляли по каплям 1М трет-бутоксид калия в тетрагидрофуране (3,6 л, 3,6 моль), к раствору, полученному на предыдущей стадии (неочищенный ν=6,5 л, 1,2 моль) при 15°С в течение 2 ч 15 мин, затем оставляли нагреваться до 23°С. Через 2 ч 30 мин реакционную смесь гасили путем выливания в 10% водную уксусную кислоту (950 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (1,7 л). Органические слои объединяли и концентрировали в вакууме с получением твердого вещества, которое растворяли в ацетоне (1,45 л) и добавляли к воде (7,3 л). Полученную суспензию перемешивали в течение ночи при 23°С. Отфильтровывали осадок, промывали водой (2x1 л) и сушили в вакуумной печи при 40°С с получением титульного соединения (450,67 г, выход 95%). М§ (т/ζ): 418 (М+23).
Стадия 3. ди-трет-Бутил-(18,2К,3§,4К,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3,4-дигидроксибицикло [3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
- 19 022196
Оксид осмия (4% мас./мас. в воде, 231,78 мл, 241,05 г, 37,93 ммоль,) добавляли при 23°С к раствору гидрата Ν-метилморфолин-Ы-оксида (101,62 мл; 114,83 г, 424,78 ммоль), гидрата Ν-метилморфолин-Ыоксида (116,88 г, 864,74 ммоль), 4-метилморфолин-4-оксида (198,88 мл; 195,50 г, 1,67 моль) и ди-третбутил-(18,28,5К,68)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]бицикло[3.1.0]гекс-3-ен-2,6-дикарбоксилата (600,00 г, 1,52 моль) в ацетоне (12,00 л) и воде (1,80 л). Смесь перемешивали при 23°С в течение ночи. Анализ тонкослойной хроматографии (гексан/этилацетат 3:2; пятно: РМА) реакционной смеси показал завершение расходования ди-трет-бутил-(18,28,5К,68)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]бицикло [3.1.0]гекс-3-ен-2,6-дикарбоксилата. Реакционную смесь гасили насыщенным водным Ыа282О3 (1 л) и экстрагировали метил-трет-бутиловым эфиром (15 л). Органическую фазу промывали водным раствором (1,5 л), полученным из 37% водной НС1 (300 мл) и солевого раствора (1,2 л), сушили с безводным М§8О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в гептане (1,5 л), фильтровали, промывали гептаном (2x500 мл) и получали твердое вещество. Твердое вещество сушили в вакууме с получением титульного соединения (450 г, 69% выход).
Стадия 4. ди-трет-Бутил-(18,2К,38,4К,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
К раствору ди-трет-бутил-(18,2К,38,4К,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3,4-дигидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата (450 г, 1,05 моль) в дихлорметане (4,50 л) при комнатной температуре последовательно добавляли 3,4-дихлорбензилбромид (144,73 мл, 238,80 г, 995,32 ммоль), хлорид тетра-н-бутиламмония (58,24 г, 209,54 ммоль) и 50% мас./мас. водный раствор гидроксида натрия (829,80 мл, 15,72 моль). Через 7 ч реакционную смесь разбавляли водой (1 л) и разделяли фазы. Органическую фазу экстрагировали солевым раствором (500 мл), сушили над безводным М§8О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью хроматографии (2,5 кг 8ίΟ2; элюент: гексан/этилацетат от 12:1 до 0:1) с получением титульного соединения (539 г, 72% выход).
Стадия 5. ди-трет-Бутил-(18,2К,38,48,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-{[(4-нитрофенил)карбонил]окси}бицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
К раствору ди-трет-бутил-(18,2К,38,4К,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата (539,00 г, 751,00 ммоль) в тетрагидрофуране (6,76 л) добавляли трифенилфосфин (393,96 г, 1,50 моль) и 4-нитробензойную кислоту (251,02 г, 1,50 моль). Смесь охлаждали до 10°С, после чего по каплям добавляли диизопропилазодикарбоксилат
- 20 022196 (40% об/об в толуоле, 744,41 мл, 759,30 г, 1,50 моль) в течение 15 мин и оставляли нагреваться до 23°С. Через 18 ч смесь разбавляли метил-трет-бутиловым эфиром (2 л), последовательно промывали вод. нас. ЫаНСО3 (2x2 л) и солевым раствором (1 л) и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в гептане (5 л) при 40°С в течение 30 мин, затем охлаждали до 23°С. Полученное твердое вещество фильтровали и промывали последовательно гептаном (2x500 мл), гептан/метил-трет-бутиловый эфир (3x1 л).
Объединенные фильтраты концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью хроматографии (2,5 кг δίθ2; элюент: гексан/этилацетат от 95:5 до 75:25), с последующей перекристаллизацией в гептане (10 л/кг), с получением титульного соединения в виде белого твердого вещества (273 г, 49% выход).
Стадия 6. ди-трет-Бутил-(Ш,2К^^,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
Карбонат калия (153,45 г, 1,11 моль) добавляли к суспензии ди-трет-бутил-(Ш,2К^^,5К,6К)-2[(трет-бутоксикарбонил)амино] -3-[(3,4-дихлорбензил)окси] -4-{ [(4-нитрофенил)карбонил]окси}бицикло [3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата (273,00 г, 370,11 ммоль) в метаноле (3,28 л) при комнатной температуре. Через 16 ч реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в метил-третбутиловом эфире (2 л) и затем промывали водой (0,8 л), солевым раствором (0,8 л), сушили над Μ§δΟ4 и концентрировали в вакууме, с получением титульного соединения в виде белого твердого вещества (215 г, 98% выход).
Стадия 7. Гидрохлорид (Ш,2К^^,5К,6К)-2-амино-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновой кислоты
Смесь воды (430 мл) и 37% НС1 в воде (299.9 мл, 3.65 моль) добавляли к суспензии ди-трет-бутил(Ш,2К^^,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата (215 г, 365,3 ммоль) в 1,4-диоксане (73,1 мл). Полученную суспензию перемешивали при 100°С в течение 4,5 ч, охлаждали до 25°С и концентрировали в вакууме с получением белого твердого вещества. Последовательно растирали с метил-трет-бутиловым эфиром (2 л) и гексанами (2 л) и затем фильтровали для сбора твердых веществ. Сушили в вакууме в течение 16 ч. Твердое вещество снова промывали метил-трет-бутиловым эфиром (2x1 л) и гексаном (1 л), затем сушили в вакууме при 50°С в течение ночи с получением титульного соединения в виде белого твердого вещества (140,4 г, 93% выход). Μδ (т/ζ): 376/378 (М+1).
Стадия 8. (Ш,2К^^,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновая кислота
Триэтиламин (212,80 мл, 154,49 г, фенилацетонитрил (125,33 г, 508,90 ммоль)
1,53 моль) и 2-(трет-бутоксикарбонилоксиимино)-2последовательно добавляли к суспензии гидрохлорида (Ш,2К^^,5К,6К)-2-амино-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновой кислоты (140 г, 339 ммоль) в 1,4-диоксане (203,56 мл) и воды (0,6 мл/моль-чист.-ЬК, 203,56 мл), при комнатной температуре. Через 4,5 ч к реакционной смеси добавляли дополнительные 2-(трет- 21 022196 бутоксикарбонилоксиимино)-2-фенилацетонитрил (25,07 г, 101,78 ммоль) и триэтиламин (23,64 мл, 17,17 г, 169,63 ммоль) и перемешивали при 50°С в течение ночи. Охлаждали до 23°С, разбавляли водой (500 мл) и промывали метил-трет-бутиловым эфиром (6x500 мл). Водную фазу разбавляли 10% вод. НС1 (300 мл; конеч. рН 2) и экстрагировали этилацетатом (2x500 мл). Этилацетатные экстракты сушили над Μ§δΟ4 и концентрировали в вакууме с получением титульного соединения (148,3 г, 92% выход).
Стадия 9. бис-({[(1-Метилэтокси)карбонил]окси}метил)-(18,2К,3§,4§,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
К раствору бис-({[(1-метилэтокси)карбонил]окси}метил)(18,2К,3§,4§,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилата (148,30 г, 311,35 ммоль) в диметилформамиде (2,49 л) при 23°С последовательно добавляли карбонат калия (172,12 г, 1,25 моль), хлорметил изопропил карбонат (118,03 мл; 135,73 г, 871,79 ммоль) и иодид натрия (9,33 г, 62,27 ммоль). Перемешивали в течение 18 ч. Разбавляли метил-трет-бутиловым эфиром (2 л) и водой (2 л). Разделяли слои и последовательно промывали органическую фазу водой (200 мл) и солевым раствором (200 мл). Сушили над безводным Μ§δΟ4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью хроматографии (2,5 кг δίΟ2; элюент: гексан/этилацетат от 3:1 до 1:1), с получением титульного соединения (167 г, 76% выход). Μδ (т/ζ): 608/610 (М-100 (-ί.’Ο2ΐΒιι)).
Стадия 10. бис-({[(1-Метилэтокси)карбонил]окси}метил)-(Ш,2К^^,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат
бис-({[(1-Метилэтокси)карбонил]окси}метил)-(Ш,2К^^,5К,6К)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоксилат (165,50 г, 233,58 ммоль) обрабатывали 4М НС1 в 1,4-диоксане (1,16 л, 4,63 моль) при 23°С и перемешивали в течение 2 ч. Летучие вещества удаляли в вакууме. Полученный остаток суспендировали в метил-трет-бутиловом эфире (1200 мл) в течение ночи. Полученное твердое вещество фильтровали, промывали метил-третбутиловым эфиром (2x100 мл) и сушили в вакууме при 1 мбар/45°С в течение 6 часов с получением титульного соединения в виде белого твердого вещества (134 г, 89% выход). Μδ (т/ζ): 608/610 (Μ+1).
Литературные данные (ЛУНкт, ЛсГГгсу Μ., и ЕПсг, ХУПЬат ТА. (2006), Айадотзт οί ΜοΙαόοίΓορίο О1и1ата1с Огоир II КесерЮгз ίη Не ΡοΙοηΙίαΙ ТгеаИпеШ οί №иго1одюа1 и №игор5ус1йа1пс ΌίδΟΓάβΓδ. Эгид Осус1ортсп1 КезеагсЬ, т. 67, с. 757-769; и УазиЬага, ΑΚίΙο и СЬаку δЬ^дсуик^, (2010) ΜсίаЬοί^ορ^с О1и1ата1с КесерЮгз: Ро1спЬа1 Эгид Тагдс15 Гог РзусЫаЬгс О^огИт, ТЬе Οραι Μсά^с^ηа1 СЬст151гу 1оита1, т. 4, с. 20-36) и данные, полученные в неклинических исследованиях на животных, подтверждают роль антагонистов тО1и2/3 в лечении депрессивных расстройств и расстройств чрезмерной сонливости. В частности, с помощью грызунов, контролируемых ЭЭГ, было обнаружено, что антагонисты рецепторов тО1и 2/3 эффективны на моделях депрессивных расстройств у грызунов и стимулируют бодрствование без проявления непропорциональной или клинически значимой гиперактивности или чрезмерной компенсационной гиперсомнии. Повышенная концентрация внимания свидетельствует о повышенной внимательности, улучшенной когнитивной функции и вероятно уменьшенной усталости. Поскольку описанные ранее расстройства представляют собой распространённые сопутствующие клинические состояния, антагонисты тО1и2/3 рецептора могут быть особенно эффективны у конкретных групп пациентов, таких как пациенты с большим депрессивным расстройством, монополярной депрессией, дистимией и/или циклотимией или любым расстройством чрезмерной сонливости. Расстройства чрезмерной сонливости могут включать, но не ограничиваются ими, чрезмерную дневную сонливость (ΕΌδ), гиперсомнию, связанную с синдромом обструктивного апноэ во сне или нарколепсией, расстройства циркадного ритма сна (включая, но не ограничиваясь ими, расстройство сна, вызванное сменным режимом работы, расстройство сна,
- 22 022196 вызванное сменой часового пояса (расстройство джетлаг), расстройство сна, вызванное задержкой фазы сна, расстройство сна, вызванное ранним наступлением фазы сна и синдром не-24-часового цикла сонбодрствование), идиопатическую гиперсомнию и/или чрезмерную сонливость, связанную с невосстанавливающим сном (ΝΒδ).
Для демонстрации характеристик настоящих соединений, типичные соединения могут быть протестированы в следующих ίη νίίτο и ίη νίνο анализах.
Анализы цАМФ антагонистов тО1и2 и тО1и3 рецепторов.
Антагонистическую активность анализировали на рекомбинантных клетках АУ12, стабильно экспрессирующих человеческие тО1и2 или тО1и3 рецепторы и крысиный глутаматный транспортер ЕААТ1 (транспортер возбуждающих аминокислот 1 типа). Клеточную линию выдерживали путем культивирования в ΌΜΕΜ с высоким уровнем глюкозы и гидрохлорида пиридоксина, с добавлением 5% диализированной фетальной бычьей сыворотки (РВ§), 1 мМ пирувата натрия, 1 мМ ΗΕΡΕδ и 1 мМ Ь-глутамина; генетицин и гигромицин В применяли в качестве антибиотиков. Сливные культуры выращивали при 37°С в атмосфере, содержащей 6,5% СО2, и пассажировали дважды в неделю. Клетки собирали с помощью 0,25% трипсина, суспендировали в замораживающей среде (РВ§ с 10% ДМСО) в концентрации 107 клеткок/мл и аликвоты хранили в жидком азоте. За 24 ч до анализа клетки высеивали с плотностью 8,000-10,000 клеток на лунку в 96-луночные черные планшеты для культуры тканей с половинным объемом лунок (Со81аг 3875) в 50 мкл ΌΜΕΜ с высоким уровнем глюкозы и гидрохлорид пиридоксина, с добавлением 5% диализированой РВ§, 1 мМ пирувата натрия, 1 мМ ΗΕΡΕδ, 100 мкг/мл ампициллина и 250 мкМ (тО1и2) или 125 мкМ (тО1и3) Ь-глутамина.
Обращение ингибирования выработки цАМФ, стимулированной форсколином, с помощью исследуемых соединений измеряли с применением технологии гомогенных исследований флуоресценции с разрешением по времени (ΗΤΡΕ; СйЬю са1 # 62АМ4РЕВ). Среду удаляли и клетки инкубировали со 100 мкл цАМФ стимулирующего буфера (δΉΜ) в течение 30 мин при 37°С. (δΉΜ буфер содержал 500 мл ΗΒδδ (сбалансированный солевой раствор Хенкса), 1000 мл ΌΡΒδ (фосфатно-солевой буфер Дульбекко), 0,034% БСА, 1,67 мМ ΗΕΡΕδ и 500 мкМ ΚΜΧ (изобутилметилксантин) (δίβΐηη ^879)). Соединения исследовали с помощью 10-точечной кривой концентрация-эффект с применением 3х последовательных разведений, с последующим 40-кратным разбавлением в δΉΜ буфере. ОСО IV (Тосгш 0975) служит в качестве контрольного агониста. Конечная реакционная смесь содержала 1 мкМ (для тО1и2) или 3 мкМ (для тО1и3) форсколина (δίβΐηη Р6886), ОСО IV при его ЕС90 и до 25 мкМ исследуемого соединения. Клетки инкубировали при 37°С в течение 20 мин. Для измерения уровня цАМФ конъюгат цАМФ-62 и конъюгат анти-цАМФ-криптата в лизисном буфере инкубировали с обработанными клетками при комнатной температуре в течение 1 ч (тО1и2) или 1,5 ч (тО1и3). Сигнал ΗΤΡΕ детектировали с применением планшет-ридера Εηνίδίοη (Регк1п-Н1тег). с вычислением отношения флуоресценции при 665-620 нМ. Необработанные данные преобразовывали в количество цАМФ (пикомоль/лунка) с применением стандартной кривой цАМФ, полученной для каждого эксперимента. Относительные значения Κ\0 вычисляли сверху вниз кривой концентрация-эффект с применением программного обеспечения для четырехпараметрического логистического построения кривой (АсДуйуВаке ν5.3.1.22).
ЕЫРК и цАМФ анализы на селективность к тО1и рецептору.
Относительную антагонистическую активность соединений согласно изобретению в отношении других человеческих тО1и рецепторов можно оценить с помощью либо цАМФ анализа, либо флуорометрического аназиза кальциевого ответа (см., например, Ее11 е1 а1., ΙΡΕΤ (в печати)). Вкратце, в указанных исследованиях применяли индивидуальные Αν12 клеточные линии, содержащие крысиный глутаматный транспортер ЕААТ1 и стабильно экспрессирующие человеческие тО1и1, 2, 3, 4, 5 и 8 рецепторы. Рецепторы тО1и1 и 5 являются Оц-сопряженными, поэтому они естественно передают сигнал на фосфолипазу С, приводя к выработке ответа в виде кальциевого потока, который можно применять для измерения активации рецептора с использованием флюориметрического планшетного ридера (ЕЫРК, Μο1еси1аг Ое\зсе5). Клеточные линии, экспрессирующие тО1и2, 3, 4 и 8 рецепторы, разработаны для экспрессирования субъединицы Оа15, чтобы указанные Οί-сопряженные рецепторы вырабатывали ответ в виде потока кальция, аналогично клеточным линиям, экспрессирующим рецепторы тО1и1 и 5. тО1и6 рецептор тестировали в цАМФ формате с использованием способов, аналогичных способам, разработанным для тО1и2 и тО1и3, приведенным выше. Указанные клеточные линии выдерживали так же, как описано выше, за исключением того, что количества Ь-глутамина и подборки агентов (генетицин, гигромицин В, зеоцин и бластицидин) могут зависеть от клеточной линии. Сливные культуры пассажировали дважды в неделю.
Уровни внутриклеточного кальция контролировали с помощью ЕЫРК до и после добавления тестируемых соединений и красителей Ρ1ι.ιο-3 ΑΜ Дпуйгодеп) или Са1сшт 4 (ΜοΕαιΡίΓ Эеу1се5) в зависимости от клеточной линии. Клетки высеивали в планшет за 24 ч до анализа в различных концентрациях глутамина и при различной плотности клеток на лунку в зависимости от клеточной линии. Среду удаляли и клетки инкубировали с 8 мкМ красителя (50 мкл на лунку) в течение 90 или 120 мин (в зависимости от клеточной линии) при 25 °С. ЕЫРК анализ с двумя добавлениями, генерирующий 11-точечную кри- 23 022196 вую концентрация-эффект для агониста глутамата, проводили перед каждым экспериментом для подтверждения соответствующей восприимчивости клеток. Результаты анализировали с применением ОгарЬРаб Рпып ν4.03 для расчета концентраций глутамата, необходимых для получения ЕС90 (анализ антагониста) и ЕС!0 (анализ потенциирующего фактора) ответов.
Соединения исследовали на каждом т01и рецепторе в ЕЫРК анализе с двумя добавлениями с применением 10-точечного профиля концентрация-эффект, начиная с конечной концентрации 25 мкМ для анализа агониста и 12,5 мкМ для анализов потенциирующего фактора и антагониста. В первом добавлении выявляли какую-либо агонистическую активность и во втором добавлении, состоящем из 100 мкл выбранных концентраций (в зависимости от клеточной линии) глутамата в буфере для анализа, получали ЕС|0 или ЕС90 глутаматный ответ. Агонистические эффекты агониста количественно определяли как процентное отношение стимуляции, вызванной только соединением к максимальному глутаматному ответу. Антагонистические эффекты количественно определяли путем расчета процентного отношения ингибирования ЕС90 глутаматного ответа, вызванного соединением. Потенциирующие эффекты количественно определяли как процентное отношение увеличения при наличии ЕСю ответа в глутамате и ЕСтах ответа. Все данные рассчитывали в виде относительных значений 1С50 или ЕС50 с применением программного обеспечения для четырехпараметрического логистического построения кривой (ЛсФ'ПуВахс ν5.3.1.22).
Антагонистическую активность в т01и6 клетках измеряли с использованием цАМФ согласно способу, аналогичному описанному выше для т01и2 и т01и3 активности, за исключением того, что контрольным агонистом был Ь-ЛР4 (Тоспк). Для измерения т01и6 агонистической активности рассчитывают степень, в которой соединение ингибирует выработку цАМФ, стимулированную форсколином. Относительные значения 1С50 и ЕС50 вычисляли сверху вниз кривой концентрация-эффект с применением программного обеспечения для четырехпараметрического логистического построения кривой (АсФ'ПуВахс ν5.3.1.22).
Соединения, приведенные в примерах, в которых оба К1 и К2 представляют собой водород, тестировали, по существу, как описано выше, и обнаружили, что они обладают высокой антагонистической активностью в отношении т01и2 и т01и3 рецепторов. Также обнаружили, что соединения, приведенные в примерах, в которых оба К1 и К2 представляют собой водород, являются селективными антагонистами т01и2 и т01и3 рецепторов в отличие от других подтипов т01и рецепторов и обладают значенями 1С50 в отношении т01и2 и т01и3 рецепторов менее 70 нМ и 50 нМ соответственно, в то время как значения 1С50 в отношении других тестируемых т01и рецепторов были значительно выше (см. табл. 1).
- 24 022196
Таблица 1
Данные по селективности
При м. т01ц! % ингиб. ,@12.5мкМ т01и2 1С50 нМ тО1иЗ 1С50нпМ т01и4 % ингиб. @12.5мкМ т01ц5 % ингиб. @12.5мк М т01цб 1С50 ηΜ т01и8 % ингиб. @12.5мкМ
1 -0.47% 43.3+5.8 27.2+4.2 28.5% 4.8% 3300 78.4% (1С;о 1900 нМ)
2 8.6% 13.1+1.9 7.8 69.0% -12.9% 1290 + 162 92.3% (1С50 507 нМ)
3 ΝΟ 25.4+4.8 10.8 ΝΟ ΝΟ 2480 +295 N0
4 -2% 25.5+2.8 8.2+03 13.3% 22.6% 2640 +424 23.4%
5 ΝΟ 16.8+1.6 9.5+46 ΝΟ ΝΟ 1580 + 141 N0
6 ΝΟ 18.6+3.9 13.9+2.4 ΝΟ ΝΟ 1360 +433 N0
7 11.2% 52+17.9 34.8+6.9 322¾. 22.7% 3690 46.7%
8 ΝΟ 42.9+1.8 26.0+0.5 ΝΟ N0 2580 ΝΟ
9 5% 22±3.0 4.4+0.5 46.9% 13.8% 2820 13.3%
ΝΏ = не определено
Кроме того, некоторые соединения по настоящему изобретению показали отсутствие существенной активности в отношении других физиологически значимых рецепторов, таких как, но не ограничиваясь ими, НЕКС канал, серотониновые рецепторы (особенно 5-НТ2а и 5-НТ2В), мускариновые рецепторы (особенно М2) и 1С1иК рецепторы (особенно 1С1иК5). Соединение согласно примеру 1 тестировали с использованием известных способов анализа и обнаружили, что оно не обладает заметной активностью в отношении указанных рецепторов.
Следовательно, полагают, что физиологически значимые дозы соединений согласно изобретению обеспечивают существенное ингибирование тС1и2 и тС1и3 рецепторов ίη νίνο, при этом, по существу, не взаимодействуя с другими тС1и рецепторами или другими физиологически значимыми рецепторами, и, таким образом, обеспечивают требуемую фармакологию, предотвращая возникновение нежелательных побочных эффектов, связанных с нецелевой активностью.
Тест вынужденного плавания у мышей (ιηΕδΤ).
ιηΕδΤ является доказанным ίη νίνο анализом на антидепрессивную активность (Ы с1 а1., ί. РНагтасо1. Ехр. ТНег. 319(1):254-9, 2006). Мыши, обработанные известными клинически эффективными антидепрессантами (селективными ингибиторами обратного захвата серотонина и/или трициклическими антидепрессантами), демонстрировали поведение, выраженное в уменьшении времени неподвижности после помещения в сосуд с водой, поведение, связанное с отчаяньем. тΕδΤ применяли для определения потенциальной антидепрессивной активности новых тС1и2/3 антагонистов, в частности так, как описано в ранее опубликованных способах (см., например, Ы е1 а1., ί. РНагтасо1. Ехр. ТНег. 319(1):254-9, 2006). Вкратце, применяли мышей ΝΙΗ-δ\νί55 мужского пола (Наг1ап δριπ^-Όα^γ, Ιηάίαηαρο1ί5. ΙΝ), весящих 25-30 г. Животных, размещенных в одной группе, изымали из вивария в исследовательскую зону в отдельные клетки и позволяли адаптироваться к новой среде в течение по меньшей мере 1 ч перед тестированием. Соединения, в которых оба К1 и К2 представляют собой водород, растворяли в воде с минимальным количеством ΝηΘΗ, добавленным для растворения, и вводили и.п. Соединения, в которых К1 и/или К2 отличны от водорода, получали в день использования в 2,0-2,5% Ν-метилпирролидиноне и затем суспендировали в 1% НЕС, 0,25% Т\\ееп 80 и 0,05% Эо\у апНЕоат и вводили перорально. Мышей помещали в цилиндр (диаметр 10 см; высота 25 см), наполненный 6 см воды (22-25°С), на 6 мин. Подсчитывали продолжительность неподвижности в течение последних 4 мин из 6 мин периода исследования. Мышь
- 25 022196 записывали как неподвижную, если отсутствовали плавательные движения или совершались только те движения, которые необходимы для поддержания головы над водой.
Типичные соединения тестировали, по существу, как описано выше, и обнаружили, что они значительно уменьшают время неподвижности у мышей дикого типа (см. табл. 2). Следовательно, полагают, что соединения согласно настоящему изобретению обладают антидепрессивной активностью ίη νίνο.
Таблица 2 шР8Т
Согласно другим исследованиям изучали мышей с делециями рецепторов (т01и2 нокаутные мыши); указанных мышей разводили путем применения скрещивания гетерозигота х гетерозигота и применяли в качестве однопомётников для -/- и +/+ мышиных контрольных групп (Тасотс Рагтк). Обнаружили, что соединение согласно примеру 12 (10 мг/кг и.п., за 30 мин) значительно уменьшает время неподвижности у тО1и2+/+ мышей, но не у тО1и2-/- мышей. Также обнаружили, что соединение согласно примеру 10/15 (30 мг/кг п.о., за 120 мин) уменьшает время неподвижности у тО1и2+/+ мышей, но не у тО1и2-/- мышей. Данные результаты также демонстрируют, что тО1и2 рецепторы участвуют в антидепрессивном действии соединений согласно изобретению.
Соединения согласно изобретению могут также быть протестированы с другими соединениями, подходящими для лечения депрессивных расстройств, например СИОЗС, на их способность усиливать антидепрессивное действие по сравнению с каждым соединением в отдельности. Соединение согласно примеру 10 (17 мг/кг п.о.) исследовали в тесте вынужденного плавания у мышей в отдельности и в комбинации с флуоксетином (10 мг/кг и.п), и обнаружили значительное увеличение антидепрессивного действия относительно действия любого соединения по отдельности, как показано в табл. 3, приведенной ниже. Кроме того, исследование уровня активного дикислотного фрагмента соединения согласно примеру 10 (т.е. того же соединения, что и свободное основание согласно примеру 1) в мозгу и плазме, показало отсутствие увеличения степени воздействия, что подтверждает обнаружение того, что повышенная антидепрессивная активность обеспечивается не только благодаря увеличению воздействия соединения в центральной нервной системе.
- 26 022196
Таблица 3 тРЪТ с СИОЗС
Соединение(я) Время неподвижности (зес.) средняя квадратическая ошибка среднего Максимальное уменьшение (1- соединение/контроль)* 100%
Носитель 174 10
Пример 10 105 12 24.5%
Флуоксетин 161 8 7.6%
Прим. 10 + Флуоксетин 66 19 62.1%
Контроль бодрствования и поведения у крыс.
Типичные соединения согласно настоящему изобретению тестировали на крысах на способность увеличивать количество времени в состоянии бодрствования без нежелательных побочных эффектов, таких как БДГ-фаза, двигательная недостаточность в состоянии бодрствования (непропорциональная гипер- или гиполокомоция) и/или рикошетная гиперсомния. Тестируемых животных постоянно контролировали с помощью электроэнцефалограмм (ЭЭГ), электромиограмм (ЭМГ) и измерения общего времени бодрствования, рикошетной гиперсомнии и интенсивности двигательной активности в течение бодрствования. Способы проведения подобных исследований хорошо известны в данной области техники (см., например, способы, описанные в Ейдаг Ό.Μ., δοίόοΙ ЭД'.Р. ΜοάαΠηίΙ шйисек \\аксГи1пс55 \νί11ιοιιΙ ίηΙοηδίΓνίηβ то(ог асйуйу ог киЬкедией геЬоипб Ьурег8отпо1епсе ίη (Нс га(. ί. РНагтасо1оду & Е.\рсптсп(а1 ТНегареиИск 1997; 283: 757-769; уаи Ое1йег Κ.Ν., Ейдаг Ό.Μ., ОетегК ^.С. КеаЫгте аи(ота(ей к1еер ксог1ид: уаИйаНог! оГ а т1сгосотри1ег-Ьа8ей 8ук1ет Гог тке. δ^ρ 1991, 14: 48-55; и Огокк В.А., \Уа1кН ΟΜ., ТигакЫа А.А., Воо(Н V., Μа8Нοи^ О.А., Рое О.К. Орем-коигсе 1од1с-Ьакей аи(ота(ей к1еер ксогшд коГдуаге икшд е1ес1горЬу8к1одка1 гесогйшдк ίη га(к. ί. №иго8с1 ΜеΐЬοЙ8. 2009; 184(1): 10-8). Исследования проводили следующим образом.
Подготовка животного. Взрослых крыс \У15(аг мужского пола (приблизительно 270-300 г на момент операции) хирургически подготавливали для постоянной регистрации ЭЭГ, ЭМГ, температуры тела и проводили следующие действия. Крыс хирургически снабжали черепным имплантатом, состоящим из четырех ввинчивающийся электродов из нержавеющей стали, для регистрации ЭЭГ (два фронтальных [3,9 мм перед теменем и ±2,0 мм медиолатерально] и два затылочных [6,4 мм за теменем, ±5,5 мм медиолатерально]) и двух проводов из нержавеющей стали, покрытых тефлоном, для регистрации ЭМГ (расположенных под затылочной трапециевидной мышцей). Перед операцией вся проводка была припаяна к миниатюрному разъему (Μ^с^ο(есН. Воо(Н\ууп. РА). Устройство имплантата фиксировали к черепу с помощью комбинации ввинчивающийся электродов из нержавеющей стали для ЭЭГ, цианакрилата, нанесенного между разъемом имплантата и черепом, и стоматологического акрила. Температуру тела и двигательную активность контролировали посредством миниатюрного передатчика (ΜίηίιηΠΚΓ ΡΌΤ4000 г, РЬШрк Кекрйотск, Вспй или) хирургически помещенного брюшную полость. На восстановление отводили по меньшей мере 3 недели.
Условия при регистрации. Каждую крысу размещали отдельно внутри микроизолирующей клетки, модифицированной вставленной поликарбонатной крышкой-фильтром, позволяющей увеличить вертикальный габарит. Гибкий кабель, минимально затрудняющий движения, подсоединяли одним концом к коммутатору, размещенному вверху клетки и другим концом к черепному имплантату животного. Каждая клетка размещена в отдельном вентилируемом отсеке камеры для регистрации сна-бодрствования из нержавеющей стали. Еда и вода были доступны ай ПЬПит и комнатную температуру поддерживали примерно 23±1°С. В ходе исследования поддерживали 24-часовой цикл свет-темнота (ЬЦ 12:12) с помощью люминесцентного света. Относительная влажность составляла приблизительно 50%. Животных не тревожили в течение по меньшей мере 30 ч до и после каждой обработки.
Дизайн клинического исследования и дозировки. Соединения, в которых оба К1 и К2 представляют собой водород, растворяли в воде с минимальным количеством №ЮН, добавленного для растворения, и вводили и.п. в объеме 1,0 мл на 1 кг массы тела. Соединения, в которых К1 и/или К2 отличны от водорода, вводили п.о. в объеме 2 мл на 1 кг массы тела в одном из двух возможных носителях: ί) 2,5% Νметил-2-пирролидинона в гидроксиэтилцеллюлозе или ίί) 10% камедь с 0,05% Эо\у Соги1觮 АйГоат в воде. Носитель или одну из доз соединения вводили псевдослучайно, чтобы ни одна из крыс не получила одинаковую обработку дважды, и ни одна из крыс не получила более двух из 8 обработок в каком-либо исследовании. Каждую крысу забирали из ее клетки на примерно минуту для взвешивания и обработки. По меньшей мере 6-дневный промывочный период предшествовал и следовал после каждой обработки.
Сбор данных. Распознавание сна и бодрствования может быть автоматизировано (например, νπη
- 27 022196
ОеМег е! а1., 1991; Ебдаг е! а1., 1997, \νίηΐΌ\γ е! а1., 2010; Ого88 е! а1., 2009). ЭЭГ усиливали и фильтровали (Х10,000, полоса пропускания 1-30 Гц), ЭМГ усиливали и интегрировали (полоса пропускания 110-100 Гц, ΚΜδ интегрирование) и одновременно контролировали неспецифическую двигательную активность (ЬМЛ). Состояния возбуждения разделяли на 10-секундные периоды не-ΚΕΜ сна, ΚΕΜ сна, бодрствования или тета-доминирующего бодрствования. Двигательную активность (ΕΜΆ) регистрировали в виде числа отсчётов в минуту и определяли с помощью коммерчески доступных телеметрических приёмников (ЕК4000, Μίη^ίΐΌΓ, Вепй. ОК).
Статистический анализ. Возраст и массу тела суммировали по среднему, минимуму и максимуму относительно экспериментальных групп. Все животные, обладающие по меньшей мере одним выходным данным, включали в обобщающие результаты (например, мы включали подходящие данные из экспериментальных групп животных, для которых были применимы телеметрические данные, но не применимы ЭЭГ данные). Период наблюдений после обработки разделяли на 2 постдозировочных интервала (первые 7 ч и первые 19 ч), при этом время дозирования определяли как начальное время = 0. Выходные данные объединяли по каждому периоду путем вычисления либо среднечасовых, либо суммарных значений за каждый период. Каждое выходное значение за каждый период анализировали посредством анализа ковариации с использованием экспериментальных групп и даты обработки в качестве факторов и соответствующий интервал перед обработкой, ранее 24 ч, в качестве ковариаты. Скорректированное среднее и изменение относительно среднего носителя, а также соответствующие среднеквадратические ошибки суммировали для каждой экспериментальной группы. Скорректированные Р-значения множественного сравнения Даннета показаны для каждого выходного значения за каждый период. Не все выходные значения анализировали за все периоды, как показано в табл. 1, что, таким образом, влияет на коэффициент ошибок первого рода с поправкой на эффект множественных сравнений. По сущетсву, для множественного тестирования не применяли дополнительных корректировок.
Определение эффективности. Пороговую эффективную дозу оценивали как наименьшую дозу, при которой общее время бодрствования превышало на 50 мин контроль носителем за первые 7 ч после обработки. Более точное определение можно выполнить путем проведения последовательного изучения доз с меньшим шагом в районе эффективной дозы.
Определение нежелательных эффектов. Оценивали два потенциальных нежелательных эффекта: рикошетную гиперсомнию и повышенную моторную активность (ЕДдаг Ό.Μ., δе^άе1 №.Р., 1997).
(ί) Рикошетную гиперсомнию можно измерить как уменьшение степени бодрствования в течение 819 ч после обработки эффективной дозой. Биологически значимое понижение определяют как более чем 50%-ное общее снижение в течение первых 7 ч. Таким образом, если бодрость увеличилась на 100 мин в течение первых 7 ч, тогда уменьшение общей бодрости на 50 мин или более относительно контроля носителем в течение 8-19 ч после обработки будет рассматриваться как биологически значимое. Средние групповые изменения, показанные в табл. 2, подтверждают отсутствие рикошетной гиперсомнии.
(ίί) Повышенную моторную активность определяли как среднее увеличение относительно контроля носителем, превышающее 5 ΕΜΆ отсчётов в минуту ЭЭГ-определенного бодрствования при эффетивной пороговой дозе, для которой эффект является дозозависимым. Все средние групповые увеличенния в табл. 2 были до 5 отсчётов в минуту бодрствования и не зависят от дозы.
Соединения, приведенные в примерах, тестировали, по существу, как описано, и обнаружили, что они улучшают бодрствование без получения значительной рикошетной гиперсомнии или повышенной моторной активности. Соединения, приведенные в примерах, в которых оба К1 и К2 представляют собой водород (введенные и.п.), тестировали, по существу, как описано, и обнаружили, что они являются эффективными при дозировках 10 мг/кг или менее. Соединение примера 10 тестировали, по существу, как описано, и обнаружили, что оно обладает профилем общего времени бодрствования и интенсивностью двигательной активности, приведенными в табл. 4.
Таблица 4
Общее время бодрствования в течение первых 7 ч
Доза (мг/кг РО) N Среднее СО Р
60 9 64.7 13 9 <0.0001
30 8 48.8 144 0.0019
10 10 20.4 13.4 0.1387
- 28 022196
Общее время бодрствования в течение 8-19 ч
Доза (мг/кг РО) N Среднее СО Р
60 9 34.7 12.4 0.0087
30 8 25.6 13.6 0.0696
10 10 15 2 12.3 0.2257
Интенсивность двигательной активности (ηοΐβ 1)
Доза (мг/кг РО) N Среднее СО Р
60 6 4.2 2.0 0.0427
30 5 0.5 2.1 0.8199
10 6 2.7 2.0 0.1999
Статистика выходных значений: средние значения определяют разницу относительно контроля носителем. СО = средняя квадратическая ошибка среднего; Р = Р-значение, скорректированное для множественного сравнения для переменной эффективности. Нескорректированные Р-значения показаны для измерений нежелательного действия (общее время бодрствования в течение 8-19 ч и интенсивность двигательной активности). Общее время бодрствования дано в минутах. Прим. 1. Интенсивность двигательной активности (ЬМЛ) = отсчёт ЬМЛ в минуту ЭЭГ-определенного бодрствования, усредненного за 7 первых часов после обработки.
Хотя соединения, используемые в способах согласно настоящему изобретению, можно вводить непосредственно без какого-либо состава, соединения, как правило, вводят в форме фармацевтических композиций, содержащих по меньшей мере одно соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель и/или наполнитель. Указанные композиции можно вводить различными способами, в том числе пероральным, подкожным, внутривенным и внутримышечным способами. Указанные фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области техники. См, например, РспипдЮп: ТЬе 8с1спес и Ргасйсе οί РЬагтасу (υηίνοΓδίΙν οί 1Ье 8с1спес5 ίη РЫ1айе1рЫа, ей., 2Г’1 ей., ΕίρρίικοΙΙ ^ЬЬатк & ХУПкиь 2005). Соединения формулы I, где К1 и/или К2 отличны от водорода, предпочтительны для перорального введения с целью повышения биодоступности, тогда как соединения формулы I, где оба К1 и К2 представляют собой водород, предпочтительны для в.в. или и.п. введения.
Композиции предпочтительно получают в единичной лекарственной форме, дозировка которой содержит от примерно 1 до примерно 600 мг, чаще от примерно 30 до примерно 300 мг, например между примерно 50 и примерно 250 мг активного ингредиента. Термин единичная лекарственная форма относится к физически дискретным единицам, походящим в качестве единичных доз для человеческих субъектов и других млекопитающих, причем каждая единица содержит заданное количество активного вещества, вычисленного для получения желаемого терапевтического эффекта, в комбинации по меньшей мере с одним подходящим фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем и/или наполнителем. Соединения формулы I, в целом, эффективны в широком диапазоне дозировок. Например, суточные дозы, как правило, подпадают в диапазон от примерно 0,01 до примерно 10 мг/кг, чаще от примерно 0,3 до 5,0 мг/кг и, например, между 0,5 и 3,0 мг/кг от массы тела. В некоторых случаях уровни дозы ниже границы указанного диапазона могут быть более чем адекватными, в то время как в других случаях можно применять большие дозы без получения каких-либо неблагоприятных побочных эффектов, и, следовательно, приведенный выше диапазон доз не следует понимать как ограничивающий каким-либо образом объем изобретения. Следует понимать, что количество конкретного вводимого соединения должно быть определено врачом с учетом значимых обстоятельств, включая состояние, подлежащее лечению, выбранный способ введения, конкретное вводимое соединение или соединения, возраст, вес и ответ отдельного пациента, и тяжести симптомов пациента.

Claims (14)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы
    - 29 022196 где каждый из К1 и К2 независимо представляет собой водород, С1-С3 алкоксикарбонилоксиметил, С1-С3 алкилкарбонилоксиметил или С3-6 циклоалкилкарбонилоксиметил;
    К3, независимо в каждом случае, представляет собой метил, фтор или хлор;
    К4 представляет собой гидроксил, метилкарбониламино, гидроксиметилкарбониламино, метоксикарбониламино, имидазол-2-илсульфанил, тиазол-2-илсульфанил, 1,2,4-триазол-3-илсульфанил, 1-метил1,2,4-триазол-3-илсульфанил или 1-метил-1,2,4-триазол-5-илсульфанил; и η представляет собой 1 или 2;
    или его фармацевтически приемлемая соль.
  2. 2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что η представляет собой 2, обе группы К3 представляют собой хлор и указанные хлоргруппы находятся в 3 и 4 положениях фенила, или его фармацевтически приемлемая соль.
  3. 3. Соединение по любому из пп.1 или 2, отличающееся тем, что каждый из К1 и К2 представляет собой водород, или его фармацевтически приемлемая соль.
  4. 4. Соединение по любому из пп.1 или 2, отличающееся тем, что оба К1 и К2 отличны от водорода, или его фармацевтически приемлемая соль.
  5. 5. Соединение по любому из пп.1 или 2, отличающееся тем, что К1 и К2 одинаковы и отличны от водорода, или его фармацевтически приемлемая соль.
  6. 6. Соединение по п.5, отличающееся тем, что каждый из К1 и К2 представляет собой изопропилоксикарбонилоксиметил.
  7. 7. Соединение по п.1, представляющее собой (18,2К,38,48,5К,6К)-2-амино-3-[(3,4-дихлорбензил)окси]-4-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновую кислоту, или его фармацевтически приемлемая соль.
  8. 8. Соединение по п.1, представляющее собой бис-(изопропоксикарбонилоксиметил) (1К,28,38,4К,58,6К)-4-амино-3-[(3,4-дихлорфенил)метокси]-2-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-4,6дикарбоксилат, или его фармацевтически приемлемая соль.
  9. 9. Применение соединения по любому из пп.1-8 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения депрессивных расстройств у млекопитающего.
  10. 10. Применение соединения по любому из пп.1-8 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения чрезмерной сонливости у млекопитающего.
  11. 11. Применение по любому из пп.9 или 10, где млекопитающее представляет собой человека.
  12. 12. Применение соединения по любому из пп.1-8 или его фармацевтически приемлемой соли в совместной, раздельной или последовательной комбинации с ингибитором обратного захвата серотонина для лечения депрессивных расстройств у млекопитающего.
  13. 13. Применение по п.12, отличающееся тем, что указанный ингибитор обратного захвата серотонина представляет собой флуоксетин.
  14. 14. Применение по п.12 или 13, где млекопитающее представляет собой человека.
EA201390568A 2010-11-18 2011-11-15 СОЕДИНЕНИЯ 4-ЗАМЕЩЕННОГО-3-БЕНЗИЛОКСИБИЦИКЛО[3.1.0]ГЕКСАНА В КАЧЕСТВЕ АНТАГОНИСТОВ mGluR 2/3 EA022196B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US41511310P 2010-11-18 2010-11-18
PCT/US2011/060686 WO2012068041A1 (en) 2010-11-18 2011-11-15 4-SUBSTITUTED-3-BENZYLOXY-BICYCLO[3.1.0]HEXANE COMPOUNDS AS mGluR 2/3 ANTAGONISTS

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201390568A1 EA201390568A1 (ru) 2013-09-30
EA022196B1 true EA022196B1 (ru) 2015-11-30

Family

ID=45217666

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201390568A EA022196B1 (ru) 2010-11-18 2011-11-15 СОЕДИНЕНИЯ 4-ЗАМЕЩЕННОГО-3-БЕНЗИЛОКСИБИЦИКЛО[3.1.0]ГЕКСАНА В КАЧЕСТВЕ АНТАГОНИСТОВ mGluR 2/3

Country Status (12)

Country Link
US (1) US9056844B2 (ru)
EP (1) EP2640687B1 (ru)
JP (1) JP5870111B2 (ru)
KR (1) KR101554793B1 (ru)
CN (1) CN103209954B (ru)
AU (1) AU2011329136B2 (ru)
BR (1) BR112013012384A2 (ru)
CA (1) CA2818118C (ru)
EA (1) EA022196B1 (ru)
ES (1) ES2682959T3 (ru)
MX (1) MX2013005623A (ru)
WO (1) WO2012068041A1 (ru)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JO2978B1 (en) * 2009-12-21 2016-03-15 ايلي ليلي اند كومباني MGLU2 aids
EP3000814A1 (en) 2014-09-26 2016-03-30 Domain Therapeutics Substituted pyrazoloquinazolinones and pyrroloquinazolinones as allosteric modulators of group II metabotropic glutamate receptors
JP7045321B2 (ja) 2016-04-18 2022-03-31 大正製薬株式会社 アミノ酸誘導体のプロドラッグ
KR102549584B1 (ko) * 2018-03-27 2023-06-30 삼성전자주식회사 메모리 모듈을 포함하는 메모리 시스템, 메모리 모듈, 그리고 메모리 모듈의 동작 방법

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070021394A1 (en) * 2003-06-26 2007-01-25 Akito Yasuhara 2-Aminobicyclo[3.1.0]hexane-2,6-dicarboxylic ester derivative
EP1897550A2 (en) * 2002-06-11 2008-03-12 Eli Lilly &amp; Company Prodrugs of Excitatory Amino Acids

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0669928B2 (ja) 1987-10-06 1994-09-07 宇部興産株式会社 光重合性歯科材料
JP2589812B2 (ja) 1989-07-05 1997-03-12 松下電器産業株式会社 スチームアイロン
ZA969485B (en) 1995-11-16 1998-05-12 Lilly Co Eli Excitatory amino acid receptor antagonists.
CA2237598A1 (en) * 1995-11-16 1997-05-22 David Reed Helton Excitatory amino acid receptor antagonists
ZA983930B (en) * 1997-05-14 1999-11-08 Lilly Co Eli Excitatory amino acid receptor modulators.
JP3665567B2 (ja) 1998-03-17 2005-06-29 ファイザー・プロダクツ・インク ビシクロ［２．２．１］ヘプタンおよび関連化合物
GB9815542D0 (en) * 1998-07-17 1998-09-16 Lilly Co Eli Bicyclohexane derivatives
CH694053A5 (de) 1998-09-03 2004-06-30 Hoffmann La Roche Verfahren zur Herstellung von 2-Amino-bicyclo[3.1.0]hexan-2,6-dicarbonsäure-Derivaten.
WO2002068380A1 (en) * 2001-02-22 2002-09-06 Eli Lilly And Company Synthetic excitatory amino acids
CA2471642C (en) 2001-12-27 2011-05-24 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. 6-fluorobicyclo[3.1.0]hexane derivatives
ES2355144T3 (es) * 2003-06-26 2011-03-23 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. Derivado de éster 2-aminobiciclo 3.1.0 hexano-2,6-dicarboxílico.
JP4984529B2 (ja) 2003-06-26 2012-07-25 大正製薬株式会社 ２−アミノビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，６−ジカルボン酸誘導体
JP2007063129A (ja) * 2003-06-26 2007-03-15 Taisho Pharmaceut Co Ltd ２−アミノ−３−アルコキシビシクロ［３．１．０］ヘキサン誘導体
JP5485492B2 (ja) * 2004-12-15 2014-05-07 大正製薬株式会社 うつ病の予防・治療薬
JO2978B1 (en) * 2009-12-21 2016-03-15 ايلي ليلي اند كومباني MGLU2 aids

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1897550A2 (en) * 2002-06-11 2008-03-12 Eli Lilly &amp; Company Prodrugs of Excitatory Amino Acids
US20070021394A1 (en) * 2003-06-26 2007-01-25 Akito Yasuhara 2-Aminobicyclo[3.1.0]hexane-2,6-dicarboxylic ester derivative

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
YASUHARA A. ET AL.: "Prodrugs of 3-(3,4-dichlorobenzyloxy)-2-amino-6-fluorobicyclo [3.1.0]hexane-2,6-dicarboxylic acid (MGS0039): A potent and orally active group II mGluR antagonist with antidepressant-like potential", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY, PERGAMON, GB, vol. 14, no. 12, 15 June 2006 (2006-06-15), pages 4193-4207, XP025133319, ISSN: 0968-0896, DOI: 10. 1016/J. BMC.2006.01.060 [retrieved on 2006-06-15] the whole document *
YASUHARA A. ET AL.: "Synthesis, in vitro pharmacology, and structure-activity relationships of 2-aminobicyclo[3.1.0]hexane-2,6-dicarboxylic acid derivatives as mGluR2 antagonists", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY, PERGAMON, GB, vol. 14, no. 10, 15 May 2006 (2006-05-15), pages 3405-3420, XP025133235, ISSN: 0968-0896, DOI: 10. 1016/J. BMC.2005.12.061 [retrieved on 2006-05-15] the whole document *

Also Published As

Publication number Publication date
BR112013012384A2 (pt) 2019-09-24
US20130237573A1 (en) 2013-09-12
CA2818118A1 (en) 2012-05-24
US9056844B2 (en) 2015-06-16
AU2011329136A1 (en) 2013-05-02
WO2012068041A1 (en) 2012-05-24
AU2011329136B2 (en) 2014-11-06
JP5870111B2 (ja) 2016-02-24
CA2818118C (en) 2016-03-29
KR20130080858A (ko) 2013-07-15
CN103209954A (zh) 2013-07-17
MX2013005623A (es) 2013-07-05
KR101554793B1 (ko) 2015-09-21
EP2640687A1 (en) 2013-09-25
EP2640687B1 (en) 2018-06-27
CN103209954B (zh) 2015-09-02
EA201390568A1 (ru) 2013-09-30
JP2014505663A (ja) 2014-03-06
ES2682959T3 (es) 2018-09-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2013292046C1 (en) Novel 5-aminotetrahydroquinoline-2-carboxylic acids and use thereof
CN103443098B (zh) 作为溶血磷脂酸受体的拮抗剂的化合物、组合物及其应用
EP3055299B1 (en) Pyrimidine hydroxy amide compounds as histone deacetylase inhibitors
CN110088105B (zh) Jak家族激酶的小分子抑制剂
KR101396606B1 (ko) 신규 갑상선 호르몬 β 수용체 작동약
RU2132327C1 (ru) Замещенные карбоксамиды и фармацевтическая композиция на их основе
CN102985402A (zh) 反苯环丙胺衍生物作为组蛋白去甲基酶lsd1和/或lsd2的抑制剂
CN111499580A (zh) 取代的二氨基甲酰胺和二氨基甲腈嘧啶，其组合物，和用其治疗的方法
CA3119912A1 (en) A crystalline spirocyclic compound inhibitor of tryptophan hydroxylase 1 (tph1) for treating diseases or disorders associated with peripheral serotonin
TW202003472A (zh) 鈣蛋白酶(calpain)調節劑及其醫療用途
EA022196B1 (ru) СОЕДИНЕНИЯ 4-ЗАМЕЩЕННОГО-3-БЕНЗИЛОКСИБИЦИКЛО[3.1.0]ГЕКСАНА В КАЧЕСТВЕ АНТАГОНИСТОВ mGluR 2/3
JP5138589B2 (ja) 神経因性疼痛を抑制するピロリジン類縁体及びその製造方法
JP5877847B2 (ja) ｍＧｌｕＲ２／３アンタゴニストとしての４−置換−３−フェニルスルファニルメチル−ビシクロ［３．１．０］ヘキサン化合物
KR20120041070A (ko) Ｈｉｆ-1 활성을 저해하는 아릴옥시페녹시아크릴계 화합물, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물
JP3122161B2 (ja) γ−ラクトン免疫抑制剤
EP2867215B1 (en) Tetrazole derivatives and their use as potassium channel modulators
TWI537245B (zh) 用於治療自體免疫發炎疾病之化合物
EA023460B1 (ru) СОЕДИНЕНИЯ (ТИЕНО[2,3-b][1,5]БЕНЗОКСАЗЕПИН-4-ИЛ)ПИПЕРАЗИН-1-ИЛА В КАЧЕСТВЕ СОЕДИНЕНИЙ, ОБЛАДАЮЩИХ ДВОЙНОЙ АКТИВНОСТЬЮ ОБРАТНЫХ АГОНИСТОВ H1/АНТАГОНИСТОВ 5-HT
KR20130087504A (ko) 예를 들어 자가면역 장애, 알레르기 및 만성 통증 상태의 치료에 유용한 신규한 카텝신 ｓ 프로테아제 억제제
WO2024124000A1 (en) Treatment of myeloproliferative diseases and disorders with inhibitors of bet family bdii bromodomain
EA045414B1 (ru) Замещенные алкиниленовые соединения в качестве противораковых агентов
TW201302194A (zh) 半胱胺酸蛋白酶抑制劑
JP2013213010A (ja) ヘテロ環含有環状アミン化合物

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU