EA021220B1

EA021220B1 - ПРОТИВОГРИБКОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ 5,6-ДИГИДРО-4-[(ДИФТОРЭТИЛ)ФЕНИЛ]-4H-ПИРРОЛО[1,2-а][1,4]БЕНЗОДИАЗЕПИНА И 4-(ДИФТОРЭТИЛ)ФЕНИЛ-6H-ПИРРОЛО[1,2-а][1,4]БЕНЗОДИАЗЕПИНА

Info

Publication number: EA021220B1
Application number: EA201291401A
Authority: EA
Inventors: Ливен Мерпул; Луи Жюль Роже Мари Мас; Келли Де Вит
Original assignee: Янссен Фармацевтика Нв
Priority date: 2010-06-07
Filing date: 2011-06-01
Publication date: 2015-04-30
Also published as: JP6208263B2; JP2016128450A; AP2012006502A0; CN102947307B; JP2019112460A; ZA201209246B; JP6505176B2; MY156731A; ES2489191T3; TWI500619B; UA107963C2; EP2576557A1; WO2011154298A1; US20130085136A1; JP2013528192A; BR112012030895A2; KR101886136B1; NZ602981A; TW201211045A; MX2012014271A

Abstract

Настоящее изобретение относится к новым соединениям формулы (I)где R, R, R, R, Rи Rимеют значения, определенные в пунктах формулы изобретения. Соединения по настоящему изобретению активны, главным образом, в отношении дерматофитов и системных грибковых инфекций. Кроме того, изобретение относится к способам получения таких новых соединений, фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения в качестве активного ингредиента, а также применению указанных соединений в качестве лекарственного средства.

Description

Настоящее изобретение относится к новым соединениям формулы (I)

где К¹, К², К³, К⁴, К⁵ и К⁶ имеют значения, определенные в пунктах формулы изобретения. Соединения по настоящему изобретению активны, главным образом, в отношении дерматофитов и системных грибковых инфекций. Кроме того, изобретение относится к способам получения таких новых соединений, фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения в качестве активного ингредиента, а также применению указанных соединений в качестве лекарственного средства.

Область техники

Настоящее изобретение относится к новым противогрибковым производным 5,6-дигидро-4[(дифторэтил)фенил]-4Н-пирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепина и 4-(дифторэтил)фенил-6Н-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепина, главным образом активным в отношении дерматофитов и системных грибковых инфекций. Кроме того, изобретение относится к способам получения таких новых соединений, фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения в качестве активного ингредиента, а также к применению указанных соединений в качестве лекарственного средства.

Уровень техники

Дерматофит является общим названием для группы из 3 видов грибов, обычно вызывающих кожные заболевания у животных и человека. Это анаморфные грибы (бесполые или несовершенные грибы) родов: М1сгозрогит, Ер1йегторНу1оп и ТпсНорНуЮп. Существует около 40 видов этих 3 родов.

Дерматофиты вызывают кожные инфекции, инфекции волос и ногтей ввиду их способности получать питательные вещества из ороговевшего материала. Организмы колонизируют кератиновые ткани, и воспаление вызывается ответом хозяина на метаболические побочные продукты. Они, как правило, ограничены роговым слоем эпидермиса из-за их неспособности проникать в жизнеспособные ткани иммунокомпетентного хозяина. Однако, иногда организмы проникают в подкожные ткани, приводя к развитию кериона. Инвазия вызывает ответную реакцию хозяина, в диапазоне от легкой до сильной. По имеющимся данным кислотные протеиназы, эластаза, кератиназы и другие протеиназы, выступают в качестве факторов вирулентности.

Системные грибковые инфекции (8ΡΙ) являются опасными для жизни заболеваниями, которые чаще всего поражают пациентов с ослабленным иммунитетом, обычно в результате терапевтического вмешательства при лечении злокачественных заболеваний. Количество 8ΡΙ в современных больницах продолжает расти, а количество различных грибов, вовлеченных в 8ΡΙ, является значительным и продолжает расти. Несмотря на множество случаев инвазивного кандидоза и аспергиллеза наблюдается повышенная частота инфекций, вызванных другими плесневыми грибами, такими как §сейозрогшт арюзрегтит, Ризалит зрр. и 2удотусеЮ5. Ип/ориз и Мисог зрр. Эффективность терапевтических средств для лечения всех этих инфекций очень высока, соответственно, необходимо иметь очень широкий спектр активности. В последние несколько десятилетий для лечения 8ΡΙ использовали итраконазол, флуконазол, кетоконазол и внутривенный или липосомальный амфотерицин В, и все эти средства имеют свои ограничения в отношении спектра, безопасности и простоты введения. Совсем недавно было испытано и представлено на рынке третье поколение азолов, улучшающих лечение в отделениях интенсивной терапии. Вориконазол (УГепй™) и позаконазол (ЫохаШ™) показали значительное улучшение при лечении угрожающей жизни инвазивной 8ΡΙ, такой как кандидоз, аспергиллез и инфекций, вызванных видами Ризалит, в клинических соответствующих дозах. Кроме того, позаконазол показал эффективность в отношении инфекций, вызванных развивающимся 2удотусеЮз зрр. Эхинокандины, такие как анидулафунгин, каспофунгин и микафунгин, которые не являются конкурентными ингибиторами синтеза 1,3-в-глюкана в клеточных стенках грибов, проявляют высокую эффективность в отношении СаиФйа зрр. и АзрегдШиз зрр., но не активны в отношении СгурЮсоссиз, Ризалит или 2удотусе1ез зрр. Из всех противогрибковых средств, азолы по-прежнему представляют собой уникальный класс соединений, демонстрирующих широкий противогрибковый спектр, путем ингибирования 14-а-деметилазы, фермента, имеющего существенное значение для биосинтеза эргостерина в грибах.

Онихомикоз является наиболее распространенным заболеванием ногтей и составляет около половины всех заболеваний ногтей. Распространенность онихомикоза составляет около 6-8% у взрослого населения. Возбудители онихомикоза включают дерматофиты, СапШйа и плесневые грибы, не относящиеся к дерматофитам. Дерматофиты являются грибами, чаще всего вызывающими онихомикоз в западных странах с умеренным климатом, тогда как СапШйа и не относящиеся к дерматофитам плесневые грибы чаще вызывают заболевание в тропиках и субтропиках. ТпсНорНуЮп гиЬгит является наиболее распространенным дерматофитом, вызывающим онихомикоз. Другими дерматофитами, которые могут вызвать заболевание, являются ТпсНорНуЮп ш(егШдйа1е, ЕрШегторНуЮп йоссозит, ТпсНорНуЮп ую1асеит, Μίсгозрогит дурзеит, ТпсНорНуЮп Юпзпгапз, ТпсНорНуЮп зоийапепзе и ТпсНорНуЮп уеггисозит. Другие возбудители включают СапШйа и не относящиеся к дерматофитам плесневые грибы, в частности, поколение плесневых грибов 8су1аЛйшт (также ЫеозсуйНШит), 8сори1агюрз1з и АзрегдШиз.

5,6-Дигидро-4Н-пирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепины были описаны в 1. СНет. §ос.(С), 2732-2734 (1971); 1. НеЮгосусНс СНет., 13, 711-716 (1976) и 1. НеЮгосусНс СНет., 16, 241-244 (1979). Соединения, описанные в этих ссылках, все имеют различные замещения в фенильной группе в 4-м положении и, кроме того, ни в одной из этих ссылок не сообщалось о биологических активностях.

В \νϋ 02/34752 описаны 4-замещенные 5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепины в качестве нового класса противогрибковых соединений. Тем не менее, в νθ 02/34752 конкретно не описан настоящий пример замещения в фенильной группе в 4-м положении.

Многие лекарственные соединения, обладая при этом желаемыми терапевтическими свойствами, используются неэффективно вследствие их плохой растворимости в воде. Так, например, в случае, когда

- 1 021220 такие соединения вводят перорально, лишь небольшая часть препарата попадает в кровь во время прохождения через желудочно-кишечный тракт. Как результат, для достижения требуемого поглощения лекарственного препарата может потребоваться введение высоких доз лекарственного соединения, чтобы продлить период приема препарата, или осуществление частых введений лекарственного соединения. Действительно, плохая растворимость и, соответственно, низкая биодоступность лекарственного препарата могут стать причиной использования альтернативного лекарственного препарата, возможно препарата с нежелательными побочными эффектами или препарата, требующего инвазивного введения (например, путем инъекции или инфузии), которые будут использоваться вместо плохо растворимого препарата.

Поэтому целью настоящего изобретения является получение более биодоступных соединений с широким противогрибковым спектром или получение пригодных альтернативных соединений с достаточно высокой терапевтической эффективностью и достаточно низкими токсичностью или другими побочными эффектами.

Неожиданно обнаружено, что противогрибковые соединения по настоящему изобретению или часть соединений по настоящему изобретению могут обладать улучшенными свойствами метаболической стабильности, улучшенными РК (фармакокинетическими) свойствами, повышенной растворимостью, уменьшенной потребностью в цитохроме Р450 или повышенной биодоступностью по сравнению с соединениями, описанными в известном уровне техники.

Соединения по настоящему изобретению могут быть использованы в качестве ингибиторов скваленэпоксидазы.

Соответственно, объектом настоящего изобретения являются новые соединения с противогрибковым действием для преодоления или улучшения, по крайней мере, одного из недостатков предшествующего уровня техники, или их пригодная альтернатива.

Сущность изобретения

Было обнаружено, что соединения по настоящему изобретению могут быть использованы в качестве противогрибковых соединений.

и их стереоизомерным формам, где К¹ представляет собой водород, хлор или фтор;

К² представляет собой водород, хлор, фтор или метил;

К³ и К⁴ представляют собой водород; или К³ и К⁴, взятые вместе, образуют связь;

К⁵ представляет собой 1,1-дифторэтил и К⁶ представляет собой водород или фтор; или К⁵ представляет собой водород или фтор и К⁶ представляет собой 1,1-дифторэтил; и их фармацевтически приемлемым солям и сольватам.

Настоящее изобретение также относится к способам получения соединений формулы (I) и фармацевтических композиций, содержащих эти соединения.

Настоящие соединения являются эффективными средствами для борьбы с грибками ίη νίνο.

Новые соединения, описанные в настоящем изобретении, могут быть использованы при лечении и профилактике инфекций, вызванных дерматофитами, системными грибковыми инфекциями и онихомикозом.

Новые соединения, описанные в настоящем изобретении, могут быть активны в отношении широкого спектра грибов, таких как

СапсНЭа эрр., например, СапсИс1а а1Ысапз, Сап<Ис1а д!аЬгака,

СапсИда ктсе1, СапсИс1а рагарзИоз15, СапсИс1а ке£уг, СапсИс1а кгор1са.Из; АзрегдШиз ερρ., например, АзрегдШиз £ит1дакиз, АзрегдШиз п!дег, АзрегдШиз £2ауиз; Сгуркососсиз пео^огтапз;

5рогоСБг1х зс'ПепскИ! Ερίάθηηορίινίοη £1оссозит; Млсгозрогит зрр., например, Мгсгозрогит сап!з, Мз.сгозрогит дурзеит; ТгасЬорАукоп ερρ., например, ГгтсЛорйуЕоп тепкадгорЛукез, Тг1скорЬукоп гикгит, ТгаскорЪукоп ди1пскеапит, ТгасАоркукоп копзигапз, ТгаскорЬукоп геггисозшп, ТгисЛорАукоп уао1асеит,

- 2 021220

ТгасЬорЬуРоп 1п£егсИдИ:а1е, Тг1сЛорЬу£оп зоидапепзе; РизаЛит зрр., например, Ризатнит зо^апг, Ризагашп охузрогшп, РизаЛит ргоИ£ега£ит, Ризагашп уегЛсИИо1с1ез( КЫгошисог зрр., ризШиз; Мисог КЫгориз огугае, Асгетопаит зрр.;

например, РЫготисог таепез., КЫготисог С1гс1пе11о1<3ез; РЫзориз зрр., например,

КЫгориз тасгозрогез; Ма1аззег1а £иг£иг;

РаесИотусез; Зсори1аг1орз1з; АгРРгодгарЫз зрр.; ЗсуРаИсИит; Зседозрогаит зрр., например, ЗсесЗозроЛит ар1озретпит, Зсес!о$рог1 ит ргоЛЛсапз; Тг1с1юс1епаа зрр.; РегисНИит зрр.;

РепасИЛит тагпеРРеЛ, В1аз£озсЫ2отусез.

Принимая во внимание вышеуказанную фармакологию соединений по настоящему изобретению, следует, что они пригодны для применения в качестве лекарственного средства.

Кроме того, изобретение относится к соединению, соответствующему общей формуле (I), его стереоизомерным формам и фармацевтически приемлемым аддитивным солям и сольватам, для использования при лечении и профилактике грибковых инфекций.

Одним из преимуществ соединений или части соединений по настоящему изобретению может быть их повышенная биодоступность, улучшенные свойства метаболической стабильности, улучшенные фармакокинетические свойства, пониженное ингибирование канала НЕК.0 или сниженная потребность в цитохроме Р450 по сравнению с соединениями, описанными в предшествующем уровне техники.

Настоящее изобретение описано далее. В последующих разделах изобретения различные аспекты изобретения определены более подробно. Каждый определенный таким образом аспект может быть объединен с любым другим аспектом или аспектами, если конкретно не указано иное. В частности, любой признак, указанный как предпочтительный или выгодный, может быть объединен с любым другим признаком или признаками, обозначенными как предпочтительные или выгодные.

Подробное описание

Химические названия соединений по настоящему изобретению были даны в соответствии с правилами номенклатуры, согласованными с Сйст1са1 АЬк1гас1к 8егуюе (Химическая реферативная служба), используя номенклатурное программное обеспечение (Λί'Ό/Ναιικ ргобис! уегкюп 10,01; Βιιίΐύ 15494, 1 Эес 2 006) компании Лйеапсей Сйет1са1 Оеуе1ортеШ. 1пс.

В случае таутомерных форм должно быть понятно, что другие, не описанные таутомерные формы, также включены в объем настоящего изобретения.

Атомы в трициклических системах пронумерованы, как показано на следующей формуле (XX):

Следует иметь в виду, что некоторые из соединений формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты могут иметь один или несколько центров хиральности и существуют в виде стереоизомерных форм.

Выше и далее термин соединения формулы (I) подразумевает включение аддитивных солей, сольватов и стереоизомеров.

Термин стереоизомеры, стереоизомерные формы или стереохимически изомерные формы, выше или далее в настоящем документе, используются взаимозаменяемо.

Изобретение включает все стереоизомеры соединения формулы (I), либо в виде чистых стереоизомеров, либо в виде смеси двух или более стереоизомеров.

Энантиомеры представляют собой стереоизомеры, которые являются неналагающимися зеркальными отображениями друг друга. Смесь 1: 1 пары энантиомеров представляет собой рацемат или рацемическую смесь.

Диастереомеры (или диастереоизомеры) являются стереоизомерами, которые не являются энантиомерами, т.е. они не являются зеркальными отображениями друг друга. Если соединение содержит двойную связь, то заместители могут быть в Е или Ζ конфигурации. Если соединение содержит дизамещенную циклоалкильную группу, заместители могут находиться в цис- или транс-конфигурации. Таким образом, изобретение включает энантиомеры, диастереомеры, рацематы, Е-изомеры, Ζ-изомеры, цисизомеры, транс-изомеры и их смеси, когда это химически возможно. Абсолютная конфигурация определяется в соответствии с системой Кана-Ингольда-Прелога. Конфигурацию асимметричного атома обо- 3 021220 значают как К или 8. Индивидуальные соединения, абсолютная конфигурация которых неизвестна, могут быть обозначены как (+) или (-), в зависимости от направления, в котором они вращают плоскость поляризованного света.

Когда конкретный стереоизомер определен, это означает, что указанный стереоизомер, по существу, свободен, т.е. имеет отношение к менее чем 50%, предпочтительно менее 20%, более предпочтительно менее чем 10%, еще более предпочтительно менее чем 5%, в частности, менее чем 2%, и наиболее предпочтительно менее чем 1% другим изомерам. Таким образом, когда соединение формулы (I), например, указано как (К), это означает, что соединение, в основном, не содержит (8)-изомер; когда соединение формулы (I), например, указано как Е, это означает, что соединение, в основном, не содержит Ζизомер, когда соединение формулы (I), например, указано как цис, это означает, что соединение, в основном, не содержит транс-изомер.

Соли соединений формулы (I) для терапевтического применения представляют собой соли, в которых противоион является фармацевтически приемлемым. Однако соли кислот и оснований, которые не являются фармацевтически приемлемыми, также могут найти применение, например, при получении или очистке фармацевтически приемлемого соединения. Все соли, независимо от того, являются ли фармацевтически приемлемыми или нет, включены в объем настоящего изобретения.

Аддитивные соли фармацевтически приемлемых кислот и оснований, как указывалось выше или далее в настоящем документе, включают терапевтически активные формы аддитивных солей нетоксичной кислоты и основания, которые способны образовывать соединения формулы (I). Аддитивные соли фармацевтически приемлемой кислоты могут быть получены общепринятым способом обработки соединения в форме основания такой подходящей кислотой. Подходящие кислоты включают, например, неорганические кислоты, такие как галогенводородные кислоты, например, хлористо-водородную или бромисто-водородную кислоту, серную, азотную, фосфорную и подобные кислоты, или органические кислоты, такие как, например, уксусную, пропионовую, гидроксиуксусную, молочную, пировиноградную, щавелевую (т.е. этандиовую), малоновую, янтарную (т.е. бутандиовую кислоту), малеиновую, фумаровую, яблочную, винную, лимонную, метансульфоновую, этансульфоновую, бензолсульфоновую, птолуолсульфоновую, цикламовую, салициловую, п-аминосалициловую, памовую и тому подобные кислоты. С другой стороны, указанные солевые формы можно преобразовать в форму свободного основания обработкой подходящим основанием.

Соединения формулы (I), содержащие кислотный протон, также можно преобразовать в их нетоксичные формы аддитивных солей металла или амина обработкой подходящими органическими и неорганическими основаниями. Подходящие солевые формы основания включают, например, соли аммония, соли щелочных или щелочно-земельных металлов, например соли лития, натрия, калия, магния, кальция и тому подобные; соли с органическими основаниями, например, соли первичных, вторичных и третичных алифатических и ароматических аминов, таких как метиламин, этиламин, пропиламин, изопропиламин, четыре бутиламиновых изомера, диметиламин, диэтиламин, диэтаноламин, дипропиламин, диизопропиламин, ди-н-бутиламин, пирролидин, пиперидин, морфолин, триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, хинуклидин, пиридин, хинолин и изохинолин; бензатина, Ν-метил-Э-глюкамина, гидрабамина, и соли с аминокислотами, такими как, например, аргинин, лизин и тому подобное. И, наоборот, солевая форма может быть преобразована путем обработки кислотой в форму свободной кислоты.

Термин сольват включает гидраты и формы добавления растворителя, которые способны образовывать соединения формулы (I), а также их соли. Примерами таких форм являются, например, гидраты, алкоголяты и тому подобное.

Соединения формулы (I), полученные способами, описанными ниже, могут быть синтезированы в виде смесей энантиомеров, в частности рацемических смесей энантиомеров, которые могут быть отделены друг от друга в соответствии с известными способами разделения. Способ разделения энантиомерных форм соединений формулы (I) включает в себя жидкостную хроматографию с использованием хиральной неподвижной фазы. Указанные стереохимически чистые изомерные формы также могут быть получены из соответствующих стереохимически чистых изомерных форм подходящих исходных веществ, при условии, что реакция протекает стереоспецифически. Предпочтительно, если требуется определенный стереоизомер, указанное соединение может быть синтезировано стереоспецифическими способами получения. В данных способах предпочтительно используют энантиомерно чистые исходные вещества.

В рамках настоящей заявки соединение по настоящему изобретению, по существу, включает все изотопные сочетания его химических элементов. В рамках настоящей заявки, химический элемент, в частности, когда он указан в связи с соединением формулы (I), включает все изотопы и изотопные смеси этого элемента. Например, когда указан водород, должно быть понятно, что он относится к ¹Н, ²Н, ³Н и их смесям.

Соответственно, соединение по настоящему изобретению, по существу, включает соединение с одним или несколькими изотопами одного или нескольких элементов и их смеси, включая радиоактивное соединение, также называемое соединением, меченным радиоактивным изотопом, в котором один или несколько нерадиоактивных атомов были заменены одним из их радиоактивных изотопов. Под термином соединение, меченное радиоактивным изотопом, понимается любое соединение формулы (I) или его

- 4 021220 фармацевтически приемлемая соль, которая содержит по меньшей мере один радиоактивный атом. Например, соединение может быть мечено позитроном или гаммаизлучающими радиоактивными изотопами. Для способов связывания с радиолигандом, ³Н-атом или ¹²⁵Т-атом представляет собой атом, выбранный для замены. Для получения изображения наиболее широко используют позитронно-эмитирующие (РТЕ) радиоактивные изотопы, представляющие собой С, Р, О и Ν, каждый из которых получен при помощи ускорителя и имеет период полураспада 20, 100, 2 и 10 мин соответственно. Поскольку периоды полураспада этих радиоактивных изотопов очень короткие, то их использование практически возможно только в институтах, которые имеют ускоритель для их получения, и это обстоятельство, соответственно, ограничивает их применение. Наиболее широко используемыми из этих изотопов являются ¹⁸Р, ^99тТс, ²⁰¹Т1 и ¹²³1. Обращение с такими радиоактивными изотопами, их получение, выделение и введение в молекулу хорошо известны специалистам в данной области техники.

В частности, радиоактивный атом выбран из группы, включающей водород, углерод, азот, серу, ки3 11 18 122 слород и галоген. В частности, радиоактивный изотоп выбран из группы, включающей Н, С, Р, I, ¹²³1, ¹²⁵1, ¹³¹1, ⁷⁵Вг, ⁷⁶Вг, ⁷⁷Вг и ⁸²Вг.

Как используется в описании и прилагаемой формуле изобретения, формы единственного числа существительных также включают множественное число, если в контексте явно не указано иное. К примеру, соединение означает одно соединение или несколько соединений.

Термины, описанные выше, и другие, используемые в описании, хорошо известны специалистам в данной области.

Предпочтительные свойства соединений по настоящему изобретению описаны в настоящей заявке.

и его стереоизомерным формам, где К¹ представляет собой водород, хлор или фтор;

В одном из вариантов осуществления изобретение относится к соединениям формулы (I) и его стереоизомерным формам, где

К¹ представляет собой хлор или фтор;

К³ и К⁴ представляют собой водород;

или К³ и К⁴, взятые вместе, образуют связь;

К⁵ представляет собой 1,1-дифторэтил, и К⁶ представляет собой водород или фтор; или К⁵ представляет собой водород или фтор, и К⁶ представляет собой 1,1-дифторэтил; и их фармацевтически приемлемым солям и сольватам.

В одном из вариантов осуществления, изобретение относится к соединениям формулы (I) и его стереоизомерным формам, где

К¹ представляет собой хлор или фтор;

К² представляет собой хлор, фтор или метил;

К¹ представляет собой хлор или фтор;

К³ и К⁴, взятые вместе, образуют связь;

В другом варианте осуществления, изобретение относится к соединениям формулы (I) и его стерео- 5 021220 изомерным формам, где

К¹ представляет собой хлор или фтор;

К² представляет собой водород;

К³ и К⁴, взятые вместе, образуют связь;

К⁵ представляет собой 1,1-дифторэтил;

К⁶ представляет собой водород;

и их фармацевтически приемлемым солям и сольватам.

В следующем варианте осуществления изобретение относится к любому из других вариантов осуществления или любому сочетанию из других вариантов осуществления, где К⁵ представляет собой 1,1дифторэтил и К⁶ представляет собой водород или фтор.

В еще одном варианте осуществления изобретение относится к любому из других вариантов осуществления или любому сочетанию из других вариантов осуществления, где К⁵ представляет собой водород или фтор и К⁶ представляет собой 1,1-дифторэтил.

В следующем варианте осуществления изобретение относится к любому из других вариантов осуществления или любому сочетанию из других вариантов осуществления, где по меньшей мере один из К¹и К² является иным, чем водород.

В конкретном варианте осуществления изобретение относится к любому из других вариантов осуществления или любому сочетанию из других вариантов осуществления, где К² представляет собой водород, хлор или фтор.

В другом варианте осуществления изобретение относится к любому из других вариантов осуществления или любому сочетанию из других вариантов осуществления, где К³ и К⁴ представляют собой водород.

В другом варианте осуществления изобретение относится к любому из других вариантов осуществления или любому сочетанию из других вариантов осуществления, где К¹ или К² находится в 7положении и является иным, чем водород.

В другом варианте осуществления изобретение относится к любому из других вариантов осуществления или любому сочетанию из других вариантов осуществления, где К¹ находится в 7-положении и представляет собой хлор или фтор, в частности, К находится в 7-положении и представляет собой хлор.

В другом варианте осуществления изобретение относится к любому из других вариантов осуществления или любому сочетанию из других вариантов осуществления, где

К¹ находится в 7-положении и представляет собой хлор или фтор, в частности, К¹ находится в 7положении и представляет собой хлор, и

К² находится в любом другом положении и представляет собой водород, хлор, фтор или метил, в частности хлор, фтор или метил; более конкретно хлор или фтор, и, даже более конкретно, хлор.

В другом варианте осуществления изобретение относится к любому из других вариантов осуществления или любому сочетанию из других вариантов осуществления, где К² находится в 7-положении и представляет собой хлор, фтор или метил.

К² находится в 7-положении и представляет собой хлор, фтор или метил и

К¹ находится в любых других положениях и представляет собой водород, хлор или фтор, в частности хлор или фтор, более конкретно, хлор.

В еще одном варианте осуществления изобретение относится к любому из других вариантов осуществления или любому сочетанию из других вариантов осуществления, где К³ и К⁴, взятые вместе, образуют связь.

В следующем варианте осуществления изобретения соединение формулы (I) выбрано из группы, включающей

7-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-5,б-дигидро-4Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин,

7-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-5,б-дигидро-4Нпирроло[1,2 -а] [1,4]бензодиазепин·НС1, (45}-7-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-5,б-дигидро-4Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин,

- 6 021220 (45)-7-хлор-4-[4^_(1/1-дифторэтил)фенил]-5, 6-дигидро-4Нпирроло[1,2-а] [1,4]бензодиазепин·НС1, (4В.) ~7-хлор-4- [4- (1, 1-дифторэтил) фенил] -5, б-дигидро-4Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин, (4В)-7-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-5,б-дигидро-4Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин·НС1,

8,10-дихлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-5,6-дигидро-4Нпирроло [1,2-а] [1,4]бензодиазепин,

8.10- дихлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-5,6-дигидро-4Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин·НС1,

8.10- дихлор-4-[4 - (1,1-дифторэтил)фенил]-бН-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепин,

7.8- дихлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-5,б-дигидро-4Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин,

7.8- дихлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил)-5,6-дигидро-4Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин·НС1,

7.10- дихлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-бН-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепин,

7.9- дихлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-бН-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепин,

7.8- дихлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-бН-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепин,

7.10- дихлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-5,б-дигидро-4Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин,

7.10- дихлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-5, б-дигидро-4Н· пирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин-НС1,

7.9- дихлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-5,6-дигидро-4Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин,

7.9- дихлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-5,6-дигидро-4 ίίпирроло [ 1,2-а3 [1,4]бензодиазепин-НС1,

7-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-бН-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепин,

7-хлор-4-[3-(1,1-дифторэтил)фенил]-бН-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепин,

4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-7-фтор-бН-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепин,

- 7 021220

9-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-7-метил-бН-пирроло[1,2 а][1,4]бензодиазепин,

9- хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил]фенил]-бН-пирроло[1,2— а][1,4}бензодиазепин,

4-(4-(1,1-дифторэтил]фенил]-7,9-дифтор-бН-пирроло[1, 2а][1,4]бензодиазепин,

10- хлор-4-[4 - (1,1-дифторэтил)фенил]-бН-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепин,

4-[3-(1,1-дифторэтил)-4-фторфенил]-7-фтор-бН-пирроло[1,2а] [1,4]бензодиазепин,

7-хлор-4-[3 - (1,1-дифторэтил)-4-фторфенил]-бН-пирроло[1,2а] [1,4]бензодиазепин,

9,10-дихлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-бН-пирроло[1,2— а][1,4]бензодиазепин,

4-[3-(1,1-дифторэтил)-4-фторфенил]-7,9-дифтор-6Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин,

7-хлор-4-[4- (1,1-дифторэтил)фенил]-9-фтор-5,б-дигидро-4Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин,

7-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-9-фтор-5,6-дигидро-4Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин НС1,

7,9-дихлор-4-[3-(1,1-дифторэтил)-4-фторфенил]-6Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин,

7-хлор-4-[3-(1,1-дифторэтил)-4-фторфенил]-9-фтор-6Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин,

7-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-9-фтор-бН-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепин,

10-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-7-метил-бНпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин,

7-хлор-4-[3-(1,1-дифторэтил)фенил]-5,б-дигидро-4Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин,

7-хлор-4- [3- (1,1-дифторэтил)фенил]-5,6-дигидро-4Нпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин'НС1,

7-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)-3-фторфенил]-бН-пирроло [1,2а][1,4]бензодиазепин,

4-[4-(1,1-дифторэтил)-3-фторфенил]-7-фтор-бН-пирроло[1,2а] [1,4]бензодиазепин,

7-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)-3-фторфенил]-9-фтор-6Нпирроло[1,2-а][1,4]-ензодиазепин,

9-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-7-фтор-бН-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепин,

4-[4-(1,1-дифторэтил)-3-фторфенил]-7,9-дифтор-бНпирроло[1,2-а][1,4]бензодиазепин,

9- хлор-4-[3-(1,1-дифторэтил)-4-фторфенил]-бН-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепин,

10- хлор-4-[3-(1,1-дифторэтил)-4-фторфенил]-бН-пирроло[1,2— а][1,4]бензодиазепин.

- 8 021220 включая любую стереохимически изомерную форму, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

В еще другом варианте осуществления изобретения, соединение формулы (I) представляет собой 7хлор-4-[4-( 1,1 -дифторэтил)фенил] -6Н-пирроло [1,2-а][1,4]бензодиазепин.

Все возможные сочетания выше указанных интересующих вариантов считаются включенными в объем данного изобретения.

Настоящее изобретение охватывает также способы получения соединений формулы (I) и их подгрупп.

Соединения формулы (I) и их подгруппы могут быть получены последовательностью стадий, как описано ниже. Соединения, как правило, получают из исходных продуктов, которые являются либо коммерчески доступными, либо полученными стандартными средствами, очевидными для специалистов в данной области. Соединения по настоящему изобретению также могут быть получены с использованием стандартных способов синтеза, обычно используемых специалистами в области органической химии.

Соединения по настоящему изобретению могут быть получены согласно схеме 1.

Соединения формулы (I), где К³ и К⁴, взятые вместе, образуют дополнительную связь, то есть соединения, представленные формулой ^-Ъ), могут быть получены из соединений, представленных формулой ^-а), в соответствии с известными реакциями окисления амина до имина. Эти реакции окисления могут быть проведены путем осуществления взаимодействия соединения формулы Π-а) с окислителем, таким как, например, тетраацетат свинца или диоксид марганца, в реакционно инертном растворителе, таком как галогенированные углеводороды, например, дихлорметан (ЭСМ) или трихлорметан. Скорость реакции может быть повышена путем перемешивания и, возможно, нагревания реакционной смеси.

Альтернативно, соединения формулы Н-Ъ) могут быть получены путем внутримолекулярной циклизации промежуточного соединения формулы (II). В присутствии кислоты, такой как, например, РОС1₃, амид промежуточного соединения формулы (II) может действовать как С-электрофил, приводя к замыканию кольца. Реакция может быть проведена в подходящем растворителе, таком как, например, ЭСМ. Перемешивание и нагревание могут повысить скорость реакции.

Соединение формулы Π-а) может быть получено исходя из промежуточного соединения формулы (IV) путем преобразования его в соль (III) путем взаимодействия с кислотой Н+Х^- формулы (XI), и взаи- 9 021220 модействием указанной соли формулы (III) с альдегидом формулы (XII) в подходящем растворителе, таком как спирт, например, метанол (МеОН), этанол (ΕΐΟΗ), изопропанол, при повышенной температуре, предпочтительно, при температуре кипения.

Альтернативно, промежуточное соединение формулы (IV) сначала может быть подвергнуто взаимодействию с альдегидом формулы (XII), и полученный таким образом имин может быть циклизован в присутствии кислоты Η+Χ^- формулы (XI) до соединения формулы ^-а).

Альтернативно, соединение формулы 0-а) может быть получено путем восстановления соединения формулы ^-Ъ), используя способы, хорошо известные специалистам в данной области.

Промежуточное соединение формулы (II) может быть получено с помощью реакции конденсации промежуточного соединения формулы (III) и (XIII). Указанная реакция может быть осуществлена в присутствии конденсирующих агентов, таких как общеизвестные 1-гидрокси-1Н-бензотриазол (ΗΟΒΙ) и моногидрохлорид №-(этилкарбонимидоил)-Н,Ы-диметил-1,3 -пропандиамина (ΕΌ (Л).

Реакция может быть проведена в присутствии основания, такого как триэтиламин (Εΐ₃Ν), и подходящего растворителя, такого как, например, Ό0Μ. Альтернативно, производное хлорангидрида кислоты (XIII) или его реакционноспособное сложноэфирное производное (XIII) также могут быть использованы в реакции этого типа для получения промежуточного соединения формулы (II).

Промежуточное соединение формулы (XIII) или его хлорангидрид кислоты или сложноэфирное производное легко могут быть получены специалистами в данной области.

Промежуточные соединения формулы (III) и (IV) получают путем восстановления 1-(2цианофенил)пиррольного производного формулы (V). Для восстановления нитрильной функциональной группы могут быть использованы некоторые способы, хорошо известные специалистам в данной области, такие как, например:

1. ЫА1Н₄/ТГФ [8. Кашек, 8.Υ. СЬш апб Р.Р. Ра1орой, I. Не!егосусйс Сйет., 13, 711-716 (1976)].

2. ί. бис(2-метоксиэтокси)алюминат натрия (Кеб-А1®) 70% мас./мас. толуол, комнатная температура: ίί. ΝαΟΗ 10%, комнатная температура [О.^.Н. Сйеекетап аиб 8.0. ОгееиЪегд; I. Не!егосусйс Сйет.,

16, 241-244 (1979)]

3а. ί. КВН₄/СР₃СООН, ТГФ, ίί. Η₂Ο, ίίί. НС1 [Р. Тппка, Р. 81еде1 апб I. Кейег; I. Ргакй Сйет., 338, 675-678 (1996)]

3Ъ. Боран-диметилсульфид (1:1), ТГФ

4а. Ка№ (никель Ренея)/Н₂

4Ъ. Ка№/раствор тиофена/(ΜеΟΗ/NΗ₃)

Также могут быть использованы даже другие известные способы восстановления нитрильной функциональной группы.

Промежуточное соединение формулы (V), в свою очередь, является коммерчески доступным или, альтернативно, может быть легко получено, например, обработкой 2-аминобензонитрильного производного формулы (VI) тетрагидро-2,5-диметоксифураном в инертном растворителе, таком как диоксан или тетрагидрофуран (ТГФ), в присутствии кислоты, такой как гидрохлорид 4-хлорпиридина, или в кислотном растворителе, таком как ледяная уксусная кислота, при повышенной температуре, предпочтительно при температуре кипения. Альтернативно, промежуточное соединение формулы (V) также может быть получено исходя из промежуточного соединения формулы (X). Как правило, промежуточное соединение формулы (X), где На1о определяется как Вг, I, С1 или Р, подвергают взаимодействию с пирролом в присутствии основания, такого как, например, С5₂СΟ₃ или ΝπΗ. в подходящем растворителе, таком как обычно ДМФ.

Альтернативно, промежуточное соединение формулы (IV) может быть получено путем обработки промежуточного соединения формулы (VII) боран-диметилсульфидом (1:1) в подходящем растворителе, таком как, например, ТГФ. Обычно реакция может быть осуществлена в присутствии кислоты, такой как НС1. После того, как реакция завершалась, реакционная смесь может быть подщелачена подходящим основанием, таким как ΝπΟΗ. Реакция может быть осуществлена при повышенной температуре, предпочтительно, при температуре кипения.

Промежуточное соединение формулы (VII) может быть получено исходя из промежуточного соединения формулы (VIII). Промежуточное соединение формулы (VIII) может быть подвергнуто взаимодействию с источником азота, таким как ΝΗ₃·Η₂Ο в присутствии ΗΟΒΙ и ЕЭСТ Этот тип реакции обычно может быть осуществлен в подходящем растворителе, подобном ДМФ. Перемешивание реакционной смеси может повысить скорость реакции.

Промежуточное соединение формулы (VIII) может быть легко получено путем обработки промежуточного соединения формулы (IX) тетрагидро-2,5-диметоксифураном в инертном растворителе, таком как диоксан, в присутствии кислоты, такой как гидрохлорид 4-хлорпиридина, при повышенной температуре, предпочтительно, при температуре кипения. Кроме того, в реакции этого типа для получения промежуточного соединения формулы (VIII) также может быть использовано реакционноспособное производное эфира (IX).

Все исходные материалы являются коммерчески доступными или могут быть легко получены спе- 10 021220 циалистами в данной области.

Во всех этих получениях продукты реакции могут быть выделены из реакционной среды и, при необходимости, дополнительно очищены в соответствии с методиками, которые широко известны в данной области, такими как, например, экстракция, кристаллизация, растирание и хроматография. В частности, стереоизомеры могут быть выделены хроматографически с использованием стационарной хиральной фазы, такой как, например, СЫта1рак® ΛΌ (3,5-диметилфенилкарбамат амилозы) или СЫта1рак® Άδ, обе от фирмы Э;псе1 Сйеш1са1 Шбивйтев, Пб. Япония.

Чистые стереоизомерные формы соединений и промежуточных соединений по данному изобретению могут быть получены путем использования известных способов. Энантиомеры могут быть отделены друг от друга путем селективной кристаллизации их диастереомерных солей с помощью оптически активных кислот. Альтернативно, энантиомеры могут быть разделены хроматографическими методами с использованием хиральных стационарных фаз. Указанные чистые стереоизомерные формы могут быть также получены из соответствующих чистых форм стереоизомерных форм соответствующих исходных продуктов, при условии, что реакция протекает стереоселективно или стереоспецифически.

Предпочтительно, если желателен конкретный стереоизомер, указанное соединение синтезировали путем стереоселективного или стереоспецифического способов получения. В этих способах целесообразно использовать хирально чистые исходные продукты. Стереоизомерные формы соединений формулы (I), что очевидно, предназначены для включения в объем изобретения.

Хирально чистые формы соединений формулы (I) образуют предпочтительную группу соединений. В связи с этим хирально чистые формы промежуточных соединений и их солевые формы особенно могут быть использованы при получении хирально чистых соединений формулы (I). Также энантиомерные смеси промежуточных соединений могут быть использованы при получении соединений формулы (I) с соответствующей конфигурацией.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты, могут быть активными в отношении диморфных патогенных микроорганизмов, дерматофитов, зигомицетов, гиалиновых гифомицетов, демациевых гифомицетов, дрожжей и дрожжеподобных организмов.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы и фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны в отношении диморфных патогенных микроорганизмов, дрожжей и дрожжеподобных организмов.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты, могут быть активны в отношении плесневых грибов.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и фармацевтически приемлемые соли и сольваты, могут быть активны в отношении широкого спектра грибов, таких как

СапсПда зрр., например, СапЭзЭа аНаасапз, СапсИда д1аЪга1а, СапсИда кгисеа.,

СапсИда · рагарзИоз23, СапсИсЗа кеГуг, СапсИ(За ЬгорасаИз; АзрегдШиз зрр., например, АзрегдШиз Гиппда^из, АзрегдШиз гпдег, АзрегдШиз £1ауиз; Сгур£ососсиз пео/огтапз; 5рого£Аг1Х зсЬепскИ; Ερίάβπηορηγίοη Поссозипц Мйсгозрогит зрр., например, Мгсгозрогит сап!з, М/сгозрогит дурзеипд Тг1сЪорЪу£оп зрр., например, ТгтсЛорЛуСои теп^адгоркуЁез, ТгасЪорЪуЬоп гиЬгит, Тг1скор1гу£оп диапскеапилч, ТгасЬорЬукоп Ъопзигапз, ТгаскорЕу^оп νθΣπιαοεϋηι, ТгасЬорАукоп \Оо1асеит, Тгаскоркукоп 1П{:егсИд2£,а1е, Тг1скорк1у£оп зоидапепзе; Ризаг2иш зрр., например, Ризаг1ит зо1ап2, ГизагЛит охузрогиш, Ризаг2шп рго11£ега£ит, Еизагли/п уегИсИЛой-дез; Рк12гошисог зрр., например, РЫготисог Леке/, КЫготисог ризШиз; Мисог С2гс2пе11о20ез; КЫгориз зрр., например, КЫгориз огугае,

КЫгориз ппсгозрогез; Ма1аззег1а ЕигЕиг; АсгетопЛитп зрр.; РаесИотусез! Зсори1аг2орз2з; АЛАгодгарЫз зрр.; ЗсуСаИсНшп; 5се0озрог1ит зрр., например, ЗседозроЛит ар2озрегпиш>, Зсе0озрог2ит ргоИПсапз; Тг1сЪос1егп1а зрр.; РепасИИит зрр.;

РептслЛЛлшп тагпеЛеа; В1аз1озсЬ22отусез.

- 11 021220

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты, могут быть активны в отношении широкого спектра грибов, таких как

Сап^а^а рагарзааозаз; АзрегдаНиз зрр., например, АзрегдаНиз /ипидаСиз, АзрегдаНиз падег, АзрегдаЛиз £1ауиз{ Сгур£ососсиз лео/огзпалз; ЗрогоИгпх зскепскаа; ЕраАегторкукоп Поссозит; Масгозрогит зрр., например, Масгозрогит сапаз, Масгозрогит дурвеит; Тгаскорку1оп зрр-, например, ГпсЛорЛуСоп тепЁадгоркукез, Тгаскорку£оп гиЬгит, ТпскоркуСоп дишскеапит, Тгаскоркукоп копзигапв, Тгаскоркукоп ^еаагисовиш, Тгаскоркукоп ую1асеи2п, Тгаскорку^оп ап1ег<5адака1е, Тпскоркукоп зоиЗапепзе;

Гизаглшп зрр., например, Ризапит зо1аш, Ризапит охузрогит,

Ризапит ргоЛРегакит, Ризапит уегС1С1111О1с1ез: Ккпотисог зрр., например, К/ыголшсог тлеЬел, Ккаготисог ризаЛиз; Мисог сагсапеЛоаРез; Ккагориз зрр., например, Ркагориз огугае,

Ккагориз тасгозрогез; Асгетопаит зрр.; Раеса1отусез; Зсори1апорзаз; Агккгодгарказ зрр.; 5суСа22Э2шп; ЗсеРозрогаит зрр., например, ЗсеРозроааит арюзрегтит, ЗсеРозропит ргоЛЛсапз; ТгаскоРегта зрр.; РепасЛЛит зрр.; РвпасаНаит таапеНеа; Шазкозскаготусез.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны против широкого спектра грибков, таких как

СапРаРа рагарза1озаз; АзрегдаЛиз зрр.

например,

АзрегдаЛиз £итада£из, АзрегдаЛиз падег, АзрегдаЛиз ΡΙβνυΒ; Сгуркососсиз пеоРогтапз; ΕριΡοηιορηγίοη Р1оссозит; Масгозрогит зрр., например, Мюгозрогит сапаз, Масгозрогит дурзеит; Тпскоркукоп зрр., например, Тпскоркукоп тепкадгоркукез, ТгаскоркуЬоп гиЬгит, Тгаскоркукоп дна пеке а пит, Тгаскоркукоп копвигапз, Тпскорку£.оп уеггисозигп, Тгаскоркукоп уао1асеит, Тгаскоркукоп апкегРад1ка1е, Тгаскоркукоп зоиРапепзе; Ризапит зрр., например, Ризагаит зо!апа, Ризагаит охузрогит, Ризагаит ргоЛТегакит, Ризагаит уегк1са11аоаРез; Ркаготисог зрр., например, Ркаготисог таекеа, Ркаготисог ризаЛиз; Мисог сагсапеЛоаРез; Ркагориз зрр., например, Ккааориз огугае,

- 12 021220

Вплгориз тлсгозрогез; Асгетоплит зрр.; Раесл1отусез; Зсори1аглорзлз; АгРНгодгарПлз зрр.; ЗсуЪаПсИлит; Зседозропит зрр., например, 5се<$озроп цт арлозрепвит, Зсе^озропит рго1лРлсапз; ТпсАосЛеллпа зрр.; РетслПлит зрр.; РетслПлит тагпеРРел; В1аз£озсЬлготусез; т раг£лси1аг АзрегдлПиз зрр., например, АзрегдлПиз Ршплда£из, АзрегдлПиз плдег, АзрегдлПиз Р1ауиз; Сгур£ососсиз пеоРогтапз; ЕрлдегторАу£оп РЗоссозипд Млсгозрогит зрр., например, Млсгозрогит саплз, Млсгозрогит дурзеит; ТглсАорАуСоп зрр., например, ТглсАорАу£оп теп'СадгорЪуСез, ТглсАорЬу1оп гаЬгит, ТглсАорАу£оп дилпскеапшп, ТпсАорАуРоп копзигапз, Тглскорку£оп уеггисозиш, ТглсЪорЬуЬоп \гло!асешп, ТглсАорАуЁоп лп£егс1лд1£а1е, Тг а сборку £оп зоиАапепзе;

Ризаглша зрр., например, Еизаглиш зо1апл, Еизаглиш охузрогит,

Еизаглиш ргоЛРегаРит, Еизаглиш уегРлслПюлдез; ВАлготисог зрр., например, ВАлготисог тлеАел, КАлготисог ризлПиз; Мисог слгслпеПолАез; ВАлгорив зрр., например, ВАлгориз огугае,

КАлгориз шлсгозрогез; Асгетоплит зрр.; Раесл1отусез; ЗсориЛглорзлз; АгСАгодгарАлз зрр.; ЗсуЪаЛсЗлит; ЗсеАозроглиш зрр., например, Зседозроглит арлозрегтит, ЗсеАозроглит ргоПРлсапз; ТхлсЪснЗеппа зрр.; РеплслЛлит зрр.; РетслПлит тагпеРРел; В1аз£озсАлготусе5.

Соединения формулы (I) и стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты, могут быть активны в отношении

СапсААа рагарзл1озлз В66126, АзрегдлПиз Ришлда£из В42928, СгурЬососсиз пеоРогтапз В6&663, ЗрогоРАглх зсЬепск.11 В62482, Млсгозрогит саплз В68128, ТглсАорАукоп теп£адгорАу£ез В70554, ТглсАорАу£оп си&гит В68183, Зсе<4озрол:лит арлозрегшиш ΙΗΕΜ3817 и Зседозроглшп ргоПРлсапз ΙΗΕΜ2Π57.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты, могут быть активны в отношении

Сапдлда рарарзлЗозлз В66126, АзрегдлПиз РшплдаСиз В42928, Сгур£ососсиз пеоРогтапз В66663, Зрого£Аглх зсАепсклл В62482, Млсгозрогит саплз В68128, ТглсАорАуСоп шеп£адгорАу£ез В70554, ТхлсАорАу1;оп гиЪгит В68183, Зседозроглиш арлозрелгшиш ΙΗΕΜ3817, Зседозроглит ргоРлРлсапз

ΙΗΕΜ21157, ВАлгориз огугае ΙΗΕΜ5223, РАлзошисог шлеАел ΙΗΕΜ13391 и Мисог слгслпеПолдез ΙΕΕΜ21105.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны в отношении

Сапдлда рагарзл!озлз, АзрегдлПиз Ришлда£из, Сгур£ососсиз пеоРогтапз, 5рого£Аглх зсАепсклл, Млсгозрогит саплз, ТглсАорАуСоп шеп!;адгорАу£ез, ТпсАорАуСоп гиЬлит, Зседозроглшп арлозрегтит, $ седо зроглит ргоПРлсапз,

ВАлгориз огугае, ВАаготисог тлеАел и Мисог слгслпеПолдез,

Соединения формулы (I) и стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитив- 13 021220 ные соли и сольваты могут быть активны в отношении

СапдкЗа рагарзЛозтз, АзрегдтНиз

Утптдакиз, Сгуркососсиз пеоРоттапз, ЗрогоЛггтх зсЬепскн, Мтсгозрогит сатз, ТпсЬорЪукоп тепкадгорЪукез, ТгтсЬорЪукоп гиЬгит, Зсескозроп им артозрегптит и Зсескозрогтит ргоЛЛсапз; в частности АзрегдтЛиз Ьиттдакиз, Мтсгозрогит саптз, ТгтсЬорЬукоп тепкадгорПукез, ТгтсЪорЬукоп гиЬгит, Зседозрогтит артозрегтит и Зседозропит рго!1Ьтсапз.

Соединения формулы (I) и стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны против широкого спектра грибков, таких как рагарзт1озтз;

АзрегдтНиз зрр.

ЗрогокЬгтх зсЬепсктт;

Мтсгозрогит

Сапскс/а СгурЁососсиз пеоЬогтапз;

зрр.

Еизагт ит зрр.

Зсесктзрогт ит зрр. АзрегдтНиз зрр.;

частности,

Сапс/тс!а рагарзтЬозтз;

Сгуркососсиз пео/огтапз; Мтсгозрогит зрр;

Ризалит зрр; ЗсеЫозропит зрр.; более конкретно зрр.; Сгуркососсиз пеоЬогтапз; Мтсгозрогит зрр

АзрегдтЛиз

Ризалит зрр.

Зсес1озрогтит зрр.

Соединения формулы (I) и стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны против широкого спектра грибков, таких как рагарзЛозтз;

АзрегдтНиз зрр.

Сапс1тс1а

Сгуркососсиз пеоРолтапз;

ТгтсЬорЬукоп зрр.

ЗрогокЬгтх зсЬепсктт; Мтсгозрогит зрр.

Ризагтит зрр.

Зсесктзропит зрр.

в частности, АзрегдтЛиз зрр.; Мтсгозрогит зрр.; ТпсЬорЬуЬоп зрр.

Соединения формулы (I) и стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны в отношении грибов, таких как

СапсЬЛа рагарзЛозтз; АзрегдтЛиз зрр., например, АзрегдтНиз /илидакиз, АзрегдтЛиз птдег, АзрегдтЛиз Лауиз; Сгуркососсиз пеоРогтапз; ЗротокЬгтх зспепсктт; ЕркЗегшорЬукоп Лоссозит; Мтсгозрогит саптз; ТпсЬоркукоп зрр., например, ТлтсЪорЬукоп тепкадгорЬукез, ТпспорЬукоп гиЬгит, ТпсЬорЬукоп дитпскеапит; в частности, СапсМОа рагарзЛозтз; АзрегдтЛиз зрр., например, АзрегдтНиз Риттдакиз, АзрегдтНиз птдег, АзрегдтЛиз Лауиз; Сгуркососсиз пеоРогтапз; ЕртЫегторкукоп Лоссозит} Мтсгозрогит саптз; ТтгтсЬорЬукоп зрр., например, ТгтсЪорЬукоп тепкадгорЬукез, ТпсЬорЬукоп гиЬгит, ТпсЬорЬукоп дитпскеапит; более конкретно АзрегдтНиз зрр., например, АзрегдЛТиз Риттдакиз, АзрегдтЛиз птдег, АзрегдтЛиз Лзупз; Сгуркососсиз пеоРогшапз; ЕртдегторЪукоп Лоссозит; Мтсгозрогит саптз; ТгтсЬорЬукоп зрр., например, ТгтсЬорЬукоп тепкадгорЬукез, ТгтсЬорЬукоп гиЬгит, ТгтсЬорЬукоп дитпскеапит.

Соединения формулы (I) и стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны в отношении грибов, таких как СаиШйа рагаркйок1к; ЛкрегдШик крр.; Сгур1ососсик иеоГогтаик; М1сгокрогит крр.; ТпсНорНуЮп крр.; 8сейокрогшт крр.

- 14 021220

СапШс/а рагарз11ов18, Азрегд111из Еиттда^из, Сгурбососсиз пео£огтапз, ЗрогобЬпх зсЪепски, Мюгозрогит сатв, ТпсЪорЪубоп тепСадгорйуСез, ТпсЬорЬубоп гиЬгит, Зсес/озрогшт арюзрепаит и Зседозропит рго11£1сапз; в частности, СапсЕс/а рагарзт1оз13, АзрегдтНиз Ешшдабиз, Сгурбососсиз пеоЕогтапз, Масгозрогит сатз, ТтсЪорЬубоп тепбадгорку без, ТпсЪорЪубоп гиЪгшп, ЗсеВозропит арюзрегтит и ЗсеВозропит рго11£1Сапз; более конкретно АзретдтНиз Еиттдабиз, Сгурбососсиз пео£огтапз, Мгсгозрогит сатз, ТпсбюрЬубоп тепбадгоркубез, ТпсЪорЬубоп гиЪгшп, Зсес/озропшп аргозреппшп и Зсебозропшп рго11£тсапз.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны против различных грибков, которые поражают кожу, волосы и ногти, а также против подкожных и системных грибковых возбудителей.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны в отношении 3 родов дерматофитов: ТпеНорНуЮп, Μίοτοкрогит и ЕрЮетторНуЁои, в частности, в отношении ТпеНорНуЮп и Мютокрогиш.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны в отношении дерматофитов и ЛкретдШик крр.; в частности Мютокротит еашк, ТпеНорНуЮп тепЮдгорНуЮк, ТпеНорНуЮп тиНтит и ЛкретдШик Гит1да1ик; более конкретно Мютокротит сатк, ТпеНорНуЮп теп1адгорНу!ек и ТпеНорНуЮп тиНтит.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны в отношении ТпеНорпуЮп тейадторНуЮк, ТпеНорНуЮп гиНгит и ЛкретдШик крр.; в частности ТпеНорНуЮп тейадторНуЮк, ТпеНорНуЮп тиНтит и ЛкретдШик Γιιιηίда!ик.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты, могут быть активны в отношении ТпеНорпуЮп тейадторНуЮк; ТпеНорНуЮп тиНтит; ЛкретдШок крр., например ЛкретдШик ГииидаЮк; Рикатшт крр.; Миеог крр.; 2удотуееЮк крр.; 8ееНокротшт крр.; М1егокрогит еашк; 8рото1Нт1х кеНепекп; СгурЮеоеенк пеоГогтапк и СапФНа ратаркйоык.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны в отношении дерматофитов.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны в отношении ЛкретдШик ГииидаЮк.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты могут быть активны в отношении широкого спектра грибов, например одного или нескольких указанных выше грибов.

Соединения формулы (I) и их стереоизомерные формы, и фармацевтически приемлемые аддитивные соли и сольваты являются эффективными противогрибковыми препаратами при пероральном или местном введении.

Соединения по настоящему изобретению могут быть использованы в качестве ингибиторов синтеза эргостерола.

Учитывая полезность соединения формулы (I), предложен способ лечения теплокровных животных, включая человека, страдающих от, или способ профилактики теплокровных животных, включая человека, страдающих от любых заболеваний, указанных выше. Таким образом, соединения формулы (I) предназначены для применения в качестве лекарственного средства. Также предложено применение соединения формулы (I) при получении лекарственного средства, используемого в лечении грибковых инфекций. Другие соединения формулы (I) предложены для применения при лечении грибковых инфекций.

Используемый в настоящем документе термин лечение обозначает все процессы, в которых может быть замедление, нарушение, подавление или остановка развития инфекции, но не обязательно означает полное устранение всех симптомов.

Изобретение относится к соединению, соответствующему общей формуле (I), его стереоизомерным формам и аддитивным солям фармацевтически приемлемой кислоты или основания, и сольватам, для применения в качестве лекарственного средства.

Кроме того, изобретение относится к соединению, соответствующему общей формуле (I), его стереоизомерным формам и аддитивным солям фармацевтически приемлемой кислоты или основания, и сольватам, для лечения или профилактики грибковых инфекций, в частности, грибковых инфекций, вызванных одним или несколькими из вышеуказанных грибов.

Кроме того, изобретение относится к соединению, соответствующему общей формуле (I), его сте- 15 021220 реоизомерным формам и аддитивным солям фармацевтически приемлемой кислоты или основания, и сольватам, для лечения грибковых инфекций, в частности грибковых инфекций, вызванных одним или несколькими из вышеуказанных грибов.

Кроме того, изобретение относится к соединению, соответствующему общей формуле (I), его стереоизомерным формам и аддитивным солям фармацевтически приемлемой кислоты или основания, и сольватам, для применения при лечении и профилактике грибковых инфекций, в частности грибковых инфекций, вызванных одним или несколькими из вышеуказанных грибов.

Кроме того, изобретение относится к соединению, соответствующему общей формуле (I), его стереоизомерным формам и аддитивным солям фармацевтически приемлемой кислоты или основания, и сольватам, для применения при лечении или профилактике, в частности, лечения грибковых инфекций; в частности грибковых инфекций, вызванных одним или несколькими из грибов, выбранных из группы, состоящей из вышеуказанных грибов.

Кроме того, изобретение относится к соединению, соответствующему общей формуле (I), его стереоизомерным формам и аддитивным солям фармацевтически приемлемой кислоты или основания, и сольватам, для применения при лечении грибковых инфекций, в частности грибковых инфекций, вызванных одним или несколькими из вышеуказанных грибов.

Кроме того, изобретение относится к соединению, соответствующему общей формуле (I), его стереоизомерным формам и аддитивным солям фармацевтически приемлемой кислоты или основания, и сольватам, для применения при лечении и профилактике грибковых инфекций, в частности, грибковых инфекций,- вызванных одним или несколькими из вышеуказанных грибов.

Кроме того, изобретение относится к соединению, соответствующему общей формуле (I), его стереоизомерным формам и аддитивным солям фармацевтически приемлемой кислоты или основания и сольватам, для применения при лечении и профилактике грибковых инфекций, в которой грибковая инфекция вызвана одним или несколькими из грибов, выбранных из группы, состоящей из

СапХаВа зрр.; Азрегд111из зрр.; Сгур£ососсиз пео£огтапз; ЗрогоОапх зсАепски; Ера<£егторЬу£оп £1оссозит; Масгозрогит зрр.; ТгасАорАуЪоп зрр; Еизапит зрр.; КЛлготисог зрр.; Мисог агсапеИокЗез; РХисориз зрр.; Маказзезаа £иг£иг; Асгетопаит зрр.; РаесаРотчусез; Зсора1агаорзаз; АхХАгодгарАаз зрр.; ЗсуАа1ас11ит; 3се<3озрогаит зрр.; ТгасАодегта зрр.; РепасаНаит зрр.; РепасаНаит тагпе££еа; и ВРазАозсАаготусез;

в частности, в котором грибковая инфекция вызвана одним или несколькими из грибов, выбранных из группы, состоящей из

СапЗаЗа рагарзаРозаз; АзрегдаНиз зрр.; Сгур£ососсиз пео£огтапз; 5рого(1тх зсАепскаа; Ерас1егторЪу£оп £1оссозит; Мюгозрогит зрр.; ТпсАорАу£оп зрр.; Еизапит зрр.; ЯАаготисог зрр.; Мисог сагсапеИоаВез; КАагориз зрр.; Асгешоп ι ит зрр.; РаесаРотусез; ЗсориРагаорзаз; АгОагодгарАаз зрр. 5су£аРа&аит; ЗсесИозрогаит зрр.; ТпсАоВеппа зрр.; РепасаРРаит зрр.; РепасаНаит тагпе££еа; и ВРазЁозсАаготусез.

еще более конкретно, где грибковая инфекция вызвана одним или несколькими из грибов, выбранных из группы, состоящей из

Масгозрогит Сапаз, ТгасАорАу^оп шеп^адгорАу^ез, ТгасАорАуСоп гиЬгит и АзрегдаРРиз £ипидаРив.

Новые соединения, описанные в настоящем изобретении, могут быть использованы при лечении или профилактике заболеваний или состояний, выбранных из группы, состоящей из инфекций, вызванных дерматофитами, системными грибковыми инфекциями и онихомикозом.

Новые соединения, описанные в настоящем изобретении, могут быть использованы при лечении или профилактике заболеваний или состояний, таких как, например, инфекции, вызванные дерматофитами, системными грибковыми инфекциями или онихомикозом.

Изобретение также относится к применению соединения в соответствии с общей формулой (I), его стереоизомерных форм и аддитивных солей фармацевтически приемлемой кислоты или основания, и сольватов при получении лекарственного средства.

Изобретение также относится к применению соединения в соответствии с общей формулой (I), его

- 16 021220 стереоизомерных форм и аддитивных солей фармацевтически приемлемой кислоты или основания, и сольватов, при получении лекарственного средства для лечения или профилактики, в частности лечения, грибковых инфекций, в частности грибковых инфекций, вызванных одним или несколькими из вышеуказанных грибов.

Соединения по настоящему изобретению могут быть введены млекопитающим, предпочтительно человеку, для лечения или профилактики, в частности лечения, грибковых инфекций, в частности грибковых инфекций, вызванных одним или несколькими из вышеуказанных грибов.

Учитывая полезность соединения формулы (I), предложен способ лечения больных теплокровных животных, включая человека, или способ профилактики теплокровных животных, включая человека, страдающих от грибковых инфекций, в частности грибковых инфекций, вызванных одним или несколькими из вышеуказанных грибов.

Указанные методы включают введение, то есть системное или местное введение, предпочтительно, пероральное введение, эффективного количества соединения формулы (I), его стереоизомерной формы и его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, теплокровным животным, включая человека.

Специалисты по лечению таких заболеваний могут определить эффективное терапевтическое суточное количество из результатов исследований, приведенных ниже. Эффективное терапевтическое суточное количество будет составлять примерно от 0,005 до 50 мг/кг, в частности от 0,01 до 50 мг/кг массы тела, более предпочтительно от 0,01 до 25 мг/кг массы тела, предпочтительно от около 0,01 до около 15 мг/кг, более предпочтительно от около 0,01 до около 10 мг/кг, еще более предпочтительно от около 0,01 до 1 мг/кг, наиболее предпочтительно от около 0,05 до 1 мг/кг массы тела. Количество соединения в соответствии с настоящим изобретением, также называемого в настоящем документе как активный ингредиент, которое необходимо для достижения терапевтического эффекта, будет, конечно, изменяться в каждом конкретном случае, например, в зависимости от конкретного соединения, способа введения, возраста и состояния реципиента, и конкретного расстройства или заболевания, которое подвергают лечению.

Способ лечения может также включать введение активного ингредиента по схеме от одного до четырех приемов в день. В этих методах лечения соединения в соответствии с изобретением предпочтительно получают перед введением. Как описано ниже, подходящие фармацевтические препараты получают известными способами с использованием хорошо известных и легко доступных ингредиентов.

Хотя вполне возможно введение только активного ингредиента, предпочтительно получать его в виде фармацевтической композиции.

Настоящее изобретение также относится к композициям для лечения или профилактики грибковых инфекций, включающим терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

Носитель или разбавитель должен быть приемлемым в смысле совместимости с другими ингредиентами композиции и не оказывать вредного воздействия на его получателей.

Соединения по настоящему изобретению, которые являются подходящими для лечения или профилактики грибковых инфекций, можно вводить отдельно или в сочетании с одним или несколькими другими терапевтическими средствами. Комбинированная терапия включает в себя введение отдельной фармацевтической дозированной композиции, которая содержит соединение формулы (I) и одно или несколько дополнительных терапевтических средств, а также введение соединения формулы (I) и любых дополнительных терапевтических средств в виде отдельной фармацевтической дозированной композиции. Например, соединение формулы (I) и терапевтическое средство могут быть введены пациенту вместе в виде одной дозированной композиции для перорального введения, такой как таблетки или капсулы, или каждое средство может быть введено в виде отдельных дозированных композиций для перорального введения.

С учетом полезных фармакологических свойств для обеспечения целей введения рассматриваемые соединения могут быть получены в виде различных фармацевтических форм. Соединения в соответствии с изобретением, в частности соединения формулы (I), его аддитивная соль фармацевтически приемлемой кислоты или основания, его стереохимически изомерная форма или любая подгруппа или их сочетание, могут быть получены в виде различных фармацевтических форм для обеспечения целей введения. В качестве подходящих композиций могут быть приведены всевозможные композиции, обычно используемые для системно вводимых лекарственных средств.

Для получения фармацевтических композиций по настоящему изобретению, эффективное количество конкретного соединения, необязательно в форме аддитивной соли, в качестве активного ингредиента, объединяют в однородной смеси с фармацевтически приемлемым носителем, который может иметь самые разнообразные формы в зависимости от формы препарата, требуемой для введения. Такие фармацевтические композиции желательны в лекарственной форме для однократного введения, подходящей, в частности, для перорального, ректального, подкожного, парентерального введения или введения путем ингаляции. Например, при получении композиций в лекарственной форме для перорального введения, можно использовать любую обычную фармацевтическую среду, такую как, например, вода, гликоли, масла, спирты и т.п., в случае жидких препаратов для перорального введения, таких как суспензии, сиро- 17 021220 пы, эликсиры, эмульсии и растворы; или твердые носители, такие как крахмалы, сахара, каолин, разбавители, смазывающие вещества, связующие вещества, разрыхляющие вещества и тому подобное, в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Ввиду легкости введения таблетки и капсулы представляют собой наиболее предпочтительные стандартные лекарственные формы для перорального введения, при этом, что очевидно, используют твердые фармацевтические носители. Для парентеральных композиций носитель обычно включает стерильную воду, по крайней мере, в значительной степени, хотя могут быть включены и другие ингредиенты, например, вещества для повышения растворимости. Например, могут быть получены растворы для инъекций, в которых носитель содержит физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь физиологического раствора и раствора глюкозы. Например, могут быть получены растворы для инъекций, в которых носитель содержит физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь физиологического раствора и раствора глюкозы. Растворы для инъекций, содержащие соединения формулы (I), могут быть получены в масле, для пролонгированного действия.

Соответствующими маслами для этой цели являются, например, арахисовое масло, кунжутное масло, хлопковое масло, кукурузное масло, соевое масло, синтетические эфиры глицерина и длинноцепочечных жирных кислот и смеси этих и других масел. Также могут быть получены суспензии для инъекций, и в этом случае могут быть использованы подходящие жидкие носители, суспендирующие агенты и тому подобное. Также включены твердые формы препаратов, которые предназначены для преобразования в жидкие формы непосредственно перед применением. В композициях, подходящих для подкожного введения, носитель необязательно включает в себя средство для усиления проницаемости и/или подходящий увлажняющий агент, необязательно, в сочетании с подходящими добавками любой природы в незначительных количественных соотношениях, которые не оказывают существенного вредного воздействия на кожу. Такие добавки могут способствовать введению в кожу и/или могут быть использованы для получения желаемой композиции. Эти композиции могут быть введены различными способами, например, в виде трансдермального пластыря, в виде нанесения пятен, в виде мази. Соли присоединения кислоты или основания соединений формулы (I) в связи с их повышенной растворимостью в воде по сравнению с их соответствующей формой основания или кислоты, являются более подходящими для получения водных композиций.

Композиции для введения через ноготь существуют в виде раствора, и носитель необязательно включает вещество, усиливающее проницаемость, который способствует проникновению противогрибкового средства в и через ороговевший слой ногтя. Среда растворителя включает воду, смешанную со вспомогательным растворителем, таким как спирт, имеющий от 2 до 6 атомов углерода, например этанол.

Для повышения растворимости и/или стабильности соединений формулы (I) в фармацевтических композициях могут быть предпочтительно использованы α-, β- и γ-циклодекстрины или их производные, в частности, гидроксиалкилзамещенные циклодекстрины, например, 2-гидроксипропил-в-циклодекстрин или сульфобутил-в-циклодекстрин. Также вспомогательные растворители, такие как спирты, могут улучшить растворимость и/или стабильность соединений по изобретению в фармацевтических композициях.

Отношение активного ингредиента к циклодекстрину может изменяться в широких пределах. Например, может быть применено соотношение 1/100-100/1. Предпочтительное соотношение активного ингредиента к циклодекстрину находится в интервале от около 1/10 до 10/1. Более предпочтительное соотношение активного ингредиента к циклодекстрину находится в интервале от около 1/5 до 5/1.

В зависимости от способа введения фармацевтическая композиция будет предпочтительно содержать от 0,05 до 99 мас.%, более предпочтительно от 0,1 до 70 мас.%, еще более предпочтительно от 0,1 до 50 мас.% соединения формулы (I) и от 1 до 99, 95 мас.%, более предпочтительно от 30 до 99,9 мас.%, еще более предпочтительно от 50 до 99,9 мас.% фармацевтически приемлемого носителя, где все проценты приведены от общей массы композиции.

В случае парентеральных композиций, могут быть включены также другие ингредиенты, способствующие растворению, например, циклодекстрины. Соответствующими циклодекстринами являются α-, β-, γциклодекстрины или простые эфиры и смешанные простые эфиры, в которых одна или несколько гидроксильных групп ангидроглюкозных единиц циклодекстрина замещены С1_-6алкилом, в частности, метилом, этилом или изопропилом, например, случайным образом метилированным β-СЭ; гидроксиС1_-6алкилом, в частности гидроксиэтилом, гидроксипропилом или гидроксибутилом; карбоксиС1_-6алкилом, в частности карбоксиметилом или карбоксиэтилом; С1_-6алкилкарбонилом, в частности ацетилом. В особенности следует отметить, что комплексообразователями и/или солюбилизаторами являются β-СЭ. случайным образом метилированный β-СЭ, 2,6-диметил-в-СО, 2-гидроксиэтил-в-СЭ, 2-гидроксиэтил^-СВ, 2гидроксипропил^-СЭ и (2-карбоксиметокси)пропил-β-С^, и, в частности, 2-гидроксипропил-β-С^ (2ΗΡ-β-СО).

Термин смешанный эфир обозначает производные циклодекстрина, где по крайней мере две циклодекстрин гидроксигруппы преобразованы в простой эфир с помощью различных групп, таких как, например, гидроксипропил и гидроксиэтил.

- 18 021220

Среднее молярное замещение (М.8.) используют как меру среднего числа молей алкоксильных групп на моль ангидроглюкозы. Средняя степень замещения (Ό.8.) относится к среднему числу замещенных гидроксильных групп на единицу ангидроглюкозы. Значение М.8. и Ό.8. может быть определено различными аналитическими методами, такими как ядерный магнитный резонанс (ЯМР), массспектрометрия (М8) и инфракрасная спектроскопия (ИК). В зависимости от используемого метода, могут быть получены слегка различные значения для одного данного производного циклодекстрина. Предпочтительно, как определено с помощью масс-спектрометрии, М.8. находится в диапазоне от 0,125 до 10 и Ό.8. находится в диапазоне от 0,125 до 3.

Другие подходящие композиции для перорального или ректального введения включают частицы, состоящие из твердой дисперсии, содержащей соединение формулы (I) и одного или более соответствующих фармацевтически приемлемых водорастворимых полимеров.

Используемый в дальнейшем термин твердая дисперсия обозначает систему в твердом состоянии (в отличие от жидкого или газообразного состояния), содержащую по крайней мере два компонента, в данном случае, соединение формулы (I) и водорастворимый полимер, в которой один компонент диспергирован практически равномерно в другом компоненте или компонентах (в случае дополнительных фармацевтически приемлемых веществ для получения лекарственного препарата, как правило, известных в данной области, включающих, например, пластификаторы, консерванты и тому подобное). Когда указанная дисперсия компонентов такова, что система является химически и физически полностью однородной или гомогенной, либо состоит из одной фазы, как это определяется в термодинамике, такая твердая дисперсия будет называться твердый раствор. Твердые растворы являются предпочтительными физическими системами, так как компоненты в них, как правило, являются биологически легко доступными для организмов, которым они вводятся. Этот эффект, вероятно, можно объяснить легкостью, с которой указанные твердые растворы могут образовывать жидкие растворы при контакте с жидкой средой, такой как желудочно-кишечные соки. Легкость растворения может быть связана с тем, по крайней мере отчасти, что энергия, необходимая для растворения компонентов из твердого раствора, меньше, чем требуется для растворения компонентов из кристаллической или микрокристаллической твердой фазы.

Термин твердая дисперсия также включает дисперсии, которые являются менее гомогенными, чем твердые растворы. Такие дисперсии не являются химически и физически гомогенными или содержат более одной фазы. Например, термин твердая дисперсия также относится к системе, имеющей зоны или небольшие области, где аморфное микрокристаллическое или кристаллическое соединение формулы (I), или аморфный микрокристаллический или кристаллический водорастворимый полимер, или оба, диспергированы практически равномерно в другой фазе, содержащей водорастворимый полимер или соединение формулы (I), или твердый раствор, содержащий соединение формулы (I) и водорастворимый полимер. Вышеуказанные зоны являются областями в твердой дисперсии, отчетливо заметными по некоторому физическому признаку (свойству), небольшими по размеру и равномерно и в случайном порядке распределенными по твердой дисперсии.

Кроме того, может быть пригодным получение противогрибковых соединений по настоящему изобретению в форме наночастиц, которые имеют модификатор поверхности, адсорбированный на их поверхности, в количестве, достаточном для поддержания эффективного среднего размера частиц менее 1000 нм. Используемые модификаторы поверхности, как полагают, включают такие модификаторы поверхности, которые физически адгезируются на поверхности противогрибкового средства, но химически не связываются с противогрибковым средством.

Подходящие модификаторы поверхности, предпочтительно, могут быть выбраны из известных органических и неорганических фармацевтических наполнителей. Такие наполнители включают различные полимеры, низкомолекулярные олигомеры, природные вещества и поверхностно-активные вещества. Предпочтительные модификаторы поверхности включают неионные и анионные поверхностно-активные вещества.

Еще один представляющий интерес способ получения соединений по настоящему изобретению включает в себя фармацевтическую композицию, в которой противогрибковые средства по настоящему изобретению включены в гидрофильные полимеры, и нанесение этой смеси в качестве пленочного покрытия на множество небольших гранул, с получением, таким образом, композиции, которая может быть легко обработана, и которая является подходящей для получения фармацевтических лекарственных форм для перорального введения.

Указанные гранулы содержат расположенное в середине ядро круглой или сферической формы, пленочное покрытие из гидрофильного полимера, противогрибковое средство и слой защитного покрытия.

Множество веществ является пригодным для применения в качестве ядра в гранулах, при условии, что указанные вещества являются фармацевтически приемлемыми и имеют соответствующие размеры и плотность.

Примерами таких веществ являются полимеры, неорганические вещества, органические вещества и сахариды, и их производные.

Для простоты введения и единообразия доз, в частности, особенно предпочтительно готовить вы- 19 021220 шеуказанные фармацевтические композиции в виде стандартной лекарственной формы. Лекарственная форма, используемая в описании и формуле изобретения, относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных доз, каждая единица содержит определенное количество активного ингредиента, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Примерами таких стандартных лекарственных форм являются таблетки (включая таблетки с насечкой или таблетки, покрытые оболочкой), капсулы, пилюли, суппозитории, пакетированные порошки, облатки, инъецируемые растворы или суспензии, чайные ложки, столовые ложки и тому подобное, и их отдельное кратное количество.

Поскольку соединения в соответствии с изобретением являются эффективными соединениями для перорального введения, фармацевтические композиции, содержащие указанные соединения для перорального введения, являются особенно предпочтительными.

Следующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение.

Экспериментальная часть

Здесь и далее, термин ΌΟΜ обозначает дихлорметан; МеОН обозначает метанол; ЬСМ§ обозначает жидкостную хроматографию/масс-спектрометрию; ВЭЖХ обозначает высокоэффективную жидкостную хроматографию; к.т. обозначает комнатную температуру; т.пл. обозначает точку плавления; мин обозначает минуту(ы); час обозначает час(ы); вн.д. обозначает внутренний диаметр; ЕЮАс обозначает этилацетат; Εΐ₃Ν обозначает триэтиламин; ЕЮН обозначает этанол; экв. обозначает эквивалент; р.с. обозначает реакционную(ые) смесь(и); ς.δ. сколько нужно; СФХ обозначает сверхкритическую флюидную хроматографию; ТГФ обозначает тетрагидрофуран; НОАс обозначает уксусную кислоту; ΌΕΑ обозначает диэтиламин, НОВ) обозначает 1-гидрокси-1Н-бензотриазол; Ме₂8 обозначает диметилсульфид; Рб(РРй₃)₂С1₂ обозначает дихлорбис(трифенилфосфин)палладий; и ΕΌί'.Ί обозначает моногидрохлорид №-(этилкарбонимидоил)ТС^диметил-1,3-пропандиамина.

А. Получение промежуточных соединений

Пример А1.

а-1) Получение промежуточного соединения 1

2-Хлор-6-(1Н-пиррол-1-ил)бензонитрил (50 г, 0,2467 моль) растворяли в ТГФ (500 мл). В этот раствор при комнатной температуре добавляли по каплям 10,0М раствор ВН₃ в Ме₂8 (27,1 мл, 0,2714 моль). Реакционную смесь далее перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 12 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли по каплям раствор 6н НС1 (47 мл). Реакционную смесь нагревали при температуре кипения в течение 30 мин. Прозрачный раствор охлаждали до температуры 0°С и добавляли ΝαΟΗ (55,5 г). Смесь экстрагировали с помощью Е)ОАс и насыщенного солевого раствора. Органический слой сушили (М§§О₄), фильтровали, и растворитель упаривали, получая 46,5 г продукта в виде свободного основания. Затем продукт подкисляли с помощью смеси НС1/диоксан (ц.8.) с получением 55 г промежуточного соединения 1 (97%-ный выход; НС1).

а-2) Альтернативный способ получения промежуточного соединения 1

Смесь 2-хлор-6-(1Н-пиррол-1-ил)бензонитрила (0,08 моль) в МеОН/Ν^ (250 мл) гидрировали при температуре 14°С с помощью никеля Ренея (2 г) в качестве катализатора, в присутствии 4%-ного раствора тиофена в МеОН (2 мл). После обработки Н₂ (2 экв.), катализатор отфильтровывали и фильтрат упаривали. Далее добавляли 6н раствор 2-пропанол/НС1 (14 мл). Затем растворитель упаривали, получая смесь 2-(1Н-пиррол-1-ил)бензолметанамина и промежуточного соединения 1 в виде НС1-соли (-НС1). Данную смесь использовали на следующей стадии реакции как таковую без дополнительной очистки.

Пример А2. Получение промежуточного соединения 2

4-(1,1-Дифторэтил)бензойную кислоту (5,05 г, 27,1 ммоль) растворяли в ОСМ (100 мл). В этот раствор добавляли Ε)₃Ν (10 мл, 60,9 ммоль), НОВ) (3,6 г, 27,1 ммоль), ΕΌΟ (5,18 г, 27,1 ммоль) и промежуточное соединение 1 (6,0 г, 2 4,7 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Затем добавляли воду (ц.8.) и смесь экстрагировали с помощью ЭСМ. Отделенный органический слой сушили (№₂8О₄), фильтровали, и растворитель упаривали. Остаток очищали путем хроматографии на колонке (петролейный эфир/Е)ОАс, градиентное элюирование от 15/1 до 10/1). Фракции продукта собирали, и растворитель упаривали в вакууме, получая 8,2 г промежуточного соединения 2 (88,6%-ный выход).

- 20 021220

Пример А3.

а) Получение промежуточного соединения 3

Смесь 2-амино-4,6-дифторбензойной кислоты (60 г, 346 ммоль), тетрагидро-2,5-диметоксифурана (45,7 г, 346 ммоль) и гидрохлорида пиридина (1:1) (40 г, 346 ммоль) в диоксане (500 мл) нагревали при кипении с обратным холодильником в течение ночи. Затем растворитель упаривали, и остаток растворяли в ЕЮАс (100 мл). Данный раствор промывали насыщенным солевым раствором и водой. Органический слой отделяли, сушили (М§§0₄), фильтровали, и растворитель упаривали. Выход: 70 г сырого промежуточного соединения 3, которое использовали как таковое на следующей стадии реакции.

Ь) Получение промежуточного соединения 4

К раствору промежуточного соединения 3, ΗΟΒΐ (47 г, 346 ммоль) и ЕЭС1 (70 г, 34 6 ммоль) в ДМФ (300 мл) добавляли ΝΗ₃·Η₂Ο (100 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Потом растворитель упаривали и остаток растворяли в ЕЮАс. Этот органический раствор сначала промывали насыщенным солевым раствором и водой, затем сушили (М§§0₄) и фильтровали, и в конце растворитель упаривали. Выход: 55 г сырого промежуточного соединения 4, которое использовали как таковое на следующей стадии реакции.

с) Получение промежуточного соединения 5

К смеси промежуточного соединения 4 (45 г, 202,5 ммоль) в ТГФ (500 мл) добавляли ΒΗ₃·Μβ₂δ (10 М раствор; 40,5 мл, 405 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере Ν₂. Далее смесь охлаждали на бане лед-вода и добавляли 6н раствор НС1 (10 мл). Смесь опять кипятили с обратным холодильником в течение 30 мин. Смесь охлаждали на бане лед-вода и добавляли твердый ΝαΟΗ до рН>9. Смесь экстрагировали с помощью ЭСМ (2 раза по 30 0 мл) . Органические слои отделяли, объединяли, сушили (М§§0₄), фильтровали, и растворитель упаривали. Остаток коричневого цвета преобразовывали в НС1 солевую форму (1:1) с помощью смеси НС1/2-пропанол, получая 35 г промежуточного соединения 5 (71%-ный выход).

б) Получение промежуточного соединения 6

4-(1,1-Дифторэтил)бензойную кислоту (1,17 г, 6,13 ммоль) растворяли в ЭСМ (50 мл). К раствору добавляли Εΐ₃Ν (7,3 мл), ΗΟΒΐ (0,828 г, 6,13 ммоль), ЕЭС1 (1,17 г, 6,13 ммоль) и промежуточное соединение 5 (1,5 г, 6,13 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем растворитель упаривали и к остатку добавляли воду. Водную смесь экстрагировали с помощью ЭСМ. Органический слой отделяли, сушили (Να₂δΟ₄). фильтровали и растворитель упаривали. Выход: 1,4 г промежуточного соединения 6 (60%-ный выход).

Пример А4.

а) Получение промежуточного соединения 7

3-Ацетил-4-фторбензонитрил (11,0 г, 67,4 ммоль) растворяли в трифториде (диэтиламино) серы (25

- 21 021220 мл) в токе Ν₂. Раствор нагревали при температуре 50°С в течение 16 ч и затем выливали в раствор ЫаНСО₃ (срз.). Полученную смесь экстрагировали с помощью ЕЮАс. Органический слой отделяли, сушили (Ыа₂8О₄), фильтровали и растворитель упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии на колонке с силикагелем (элюент: петролейный эфир/ЕЮАс от 30/1 до 20/1). Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали в вакууме. Выход: 10,5 г промежуточного соединения 7 (84%-ный выход).

Ь) Получение промежуточного соединения 8

Смесь промежуточного соединения 7 (8,2 г, 5,7 ммоль) в 20%-ном растворе ЫаОН (50,0 мл) и ЕЮН (20,0 мл) кипятили с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. Затем смесь концентрировали в вакууме. НС1 добавляли до рН 2, и образовывался осадок. Осадок отфильтровывали и сушили в вакууме. Твердый продукт использовали как таковой на следующей стадии реакции. Выход: 9,2 г промежуточного соединения 8.

с) Получение промежуточного соединения 9

Смесь промежуточного соединения 1 (1,0 г, 4,2 ммоль), промежуточного соединения 8 (1,0 г, 5,0 ммоль), Εΐ₃Ν (5,0 мл, 36 ммоль), НОВ! (0,62 г) и ΕΌΟΊ (0,96 г) в ОСМ (40 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Полученную смесь промывали водой (3 раза по 100 мл), сушили (Мд§О₄), фильтровали, и растворитель упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии на колонке с силикагелем (элюент: петролейный эфир/ЕЮАс от 20/1 до 10/1). Желаемые фракции собирали, и растворитель упаривали в вакууме. Выход: 0,9 г промежуточного соединения 9 (59,6%-ный выход).

Пример А5.

а) Получение промежуточного соединения

В суспензию СиСЫ (21,5 г, 242 ммоль) в СН₃СЫ (500 мл) добавляли трет-бутил нитрит (25 г, 242 ммоль). Смесь нагревали при температуре 70°С и перемешивали в течение 15 мин. Затем добавляли смесь 2-хлор-4-фтор-6-нитробензоламина (23 г, 121 ммоль) и СН₃СЫ (ц.з.), и полученный раствор коричневого цвета нагревали в течение ночи при температуре 70°С. Растворитель удаляли в вакууме. К остатку добавляли воду (срз.) и водную смесь экстрагировали с помощью ЕЮАс. Отделенный органический слой сушили (Мд§О₄), фильтровали и растворитель упаривали. Остаток очищали путем хроматографии на колонке с силикагелем (элюент: ЕЮ Ас/петролейный эфир 1/4). Желаемые фракции собирали, и растворитель упаривали. Выход: 10 г промежуточного соединения 10 (41%-ный выход; твердый продукт желтого цвета).

Ь) Получение промежуточного соединения 11

К раствору промежуточного соединения 10 (10 г, 50 ммоль) в НОАс (250 мл) по частям добавляли Ре (11,6 г, 200 ммоль). Реакционную смесь нагревали при температуре 70°С в течение 1 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Твердый продукт отфильтровывали, и растворитель упаривали. Остаток растворяли в ЕЮАс, промывали водным раствором ЫаНСО₃ и водой. Органический слой сушили (Мд§О₄), фильтровали и растворитель упаривали. Выход: 6,2 г промежуточного соединения 11, которое использовали как таковое на следующей стадии реакции.

- 22 021220

с) Получение промежуточного соединения 12

Раствор промежуточного соединения 11 (6 г, 35 ммоль) и тетрагидро-2,5-диметоксифурана (4,66 г, 35 ммоль) в НОАс (50 мл) нагревали при температуре кипения в течение 6 ч. Затем растворитель упаривали и остаток очищали путем хроматографии на колонке с силикагелем (элюент: ЭСМ). Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали. Выход: 4,6 г промежуточного соединения 12 (90%-ный выход).

ά) Получение промежуточного соединения 13

К смеси промежуточного соединения 12 (4,4 г, 20 ммоль) в ТГФ (50 мл) добавляли 10М раствор ВН₃-Ме₂8 (2 мл; 20 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере Ν₂. Далее смесь охлаждали на бане лед-вода, и к смеси осторожно добавляли 6н раствор НС1 (10 мл). Раствор затем вновь кипятили с обратным холодильником в течение 30 мин и затем опять охлаждали на бане лед-вода. Добавляли твердый ΝαΟΗ до рН>9. Смесь экстрагировали с помощью ЭСМ (2 раза по 300 мл). Отделенный органический слой сушили (М§§0₄), фильтровали, и растворитель упаривали. Остаток коричневого цвета преобразовывали в НС1 соль (1:1) с помощью смеси НС1/2-пропанол. Выход: 5 г промежуточного соединения 13 (96%-ный выход).

Пример А6.

а) Получение промежуточного соединения 14

Р

Реакцию проводили в атмосфере Ν₂: Смесь 4-бром-3-фторбензонитрила (6,0 г, 30,00 ммоль) и (1этоксиэтенил)трибутилолова (11,2 мл, 33,00 ммоль) в толуоле (100 мл) перемешивали при комнатной температуре. К смеси добавляли РД(РРЬ₃)₂С1₂ (0,72 г, 1,03 ммоль) и реакционную смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали, и к смеси при перемешивании добавляли 2н раствор КГ (50 мл). Спустя 30 мин к смеси добавляли 6н раствор НС1 (100 мл) и смесь нагревали при температуре 70°С и перемешивали в течение 2 ч. Нерастворимые вещества отфильтровывали и фильтрат экстрагировали с помощью ЕЮАс (3 раза по 80 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили (М§§0₄), фильтровали и растворитель упаривали в вакууме. Выход: 4,3 г промежуточного соединения 14 (88%-ный выход).

Промежуточное соединение 14 может быть далее подвергнуто взаимодействию аналогично методике реакции, описанной в примере А4, с получением соединения 29.

Пример А7.

а) Получение промежуточного соединения 15

Смесь 4-хлор-2,6-дифторбензонитрила (1,66 г, 9,56 ммоль), пиррола (0,67 г, 10 ммоль) и С§₂С0₃ (3,7 г, 12 ммоль) в ДМФ (20 мл) перемешивали в течение ночи. Далее твердый продукт отфильтровывали, и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии на колонке с силикагелем (элюент: смесь ЕЮАс/петролейный эфир 10/1). Желаемые фракции собирали, и растворитель упаривали. Выход: 1,1 г промежуточного соединения 15 (15%-ный выход; твердый продукт белого цвета).

Промежуточное соединение 15 может быть далее подвергнуто взаимодействию аналогично методике реакции, описанной в примере А1, с получением соединение 32.

В. Получение соединений

Пример В1.

- 23 021220

а) Получение соединения 1

Смесь промежуточного соединения 1 (9,5 г, 39,2 ммоль) и 4-(1,1-дифторэтил)бензальдегида (8,0 г, 47,0 ммоль) в ΕΐΟΗ (15 мл) перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч. Затем смесь охлаждали и кристаллизовали в течение ночи. Осадок отфильтровывали, промывали изопропиловым эфиром и сушили в вакууме. Выход: 8,0 г соединения 1 (52,2%-ный выход).

Ъ) Получение соединения 2 и соединение 3

Соединение 2: 8 энантиомер;

Соединение 3: К энантиомер

Соединение 1 выделяли в виде его энантиомеров с помощью хиральной СФХ (Колонка АО 300 мм*50 мм, 20 мкМ; Подвижная фаза: СО₂/МеОН(0,2% ΌΕΆ) 60/40; Поток: 200 мл/мин). Две различные фракции собирали, и обе фракции преобразовывали в форму НС1 соли с помощью смеси НС.'1/ΕΐΟΗ 1/1.

Выход: 3,2 г соединения 2 (20,8%-ный выход; 8 конфигурация).

Выход: 3,0 г соединения 3 (19,6%-ный выход; К конфигурация).

Пример В2.

а) Получение соединения 4

Смесь соединения 1 (0,334 г, 0,0009 моль) и МпО₂ (2,6 г, 0,0299 моль) в ОСМ (15 мл) перемешивали в течение 96 ч при комнатной температуре. Далее осадок отфильтровывали через диатомовую землю и фильтрат упаривали. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ, получая 0,19 г соединения 4 (59%).

Ъ) Альтернативное получение соединения 4

Промежуточное соединение 2 (4,0 г, 10,67 ммоль) растворяли в РΟС1з (12 мл). Смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение ночи. Далее смесь охлаждали и выливали в воду. Водную смесь нейтрализовали с помощью №ЮН до рН 7 и затем экстрагировали с помощью ОСМ. Отделенный органический слой сушили (Nа₂8Ο₄)/фильтровали и растворитель упаривали. Остаток кристаллизовали из ΕΐΟΗ, получая соединение 4 (56,3%-ный выход).

Пример В3.

а) Получение соединения 18

Промежуточное соединение 6 (1,4 г, 3,71 ммоль) растворяли в РΟС1з (10 мл). Смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение ночи. Затем смесь охлаждали и выливали в воду. Водную смесь нейтрализовали с помощью №ЮН до рН 7, и затем экстрагировали ОСМ. Органический слой отделяли, сушили (Μ§8Ο₄), фильтровали и концентрировали. Остаток очищали путем колоночной флэш хроматографии на силикагеле (элюент: смесь петролейный эфирЖЮАс 4/1). Фракции продукта собирали и растворитель упаривали с выходом 150 мг соединения 118 (21,6%-ный выход).

Пример В4.

а) Получение соединения 21

Промежуточное соединение 9 (0,80 г, 2,0 ммоль) растворяли в РΟС1з (3 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при температуре 100°С. Затем реакционную смесь выливали в ледяную воду. Добавляли

- 24 021220

ΝαΟΗ до рН 8-9. Смесь затем экстрагировали с помощью ЭСМ. Органические слои отделяли, сушили (Νη₂8Ο₄), фильтровали и растворитель упаривали в вакууме. Остаток очищали путем хроматографии на колонке с силикагелем (элюент: смесь петролейный эфир/ЕЮАс от 10/1 до 5/1). Желаемые фракции собирали, и растворитель упаривали в вакууме. Выход: 0,510 г соединения 21 (выход 68 %).

Пример В5.

а) Получение соединения 24

Раствор промежуточного соединения 13 (0,52 г, 2 ммоль) и 4-(1,1-дифторэтил)бензальдегида (0,374 г, 2 ммоль) в ΕΐΟΗ (5 мл) нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 4 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и твердый продукт собирали и сушили. Выход: 0,6 г соединения 24 (80%-ный выход; ·ΗΟ).

Используя аналогичные методики реакции, описанные в следующих примерах, были получены следующие соединения. Соед. № обозначает номер соединения. Сп. относится к номеру примера, в соответствии с которым осуществляли способ получения соединения. В случае, когда солевая форма не указана, соединение было получено в форме свободного основания. Соединения, где К³ и К⁴ представляют собой водород, и для которых в табл. 1 не указана конкретная стереохимия, были получены в виде смесей энантиомеров.

В случае, когда целевое соединение, полученное с использованием аналогичных методик, как описано в В1 или В5, не преобразуются полностью в форму ΗΟ соли, соединение преобразовывали в форму ΗΟ соли, используя способы, известные специалисту в данной области. Согласно типичному способу, соединение растворяли в растворителе, таком как, например, 2-пропанол, и затем постепенно по каплям добавляли раствор ΗΟ в растворителе, таком как, например, 2-пропанол. Перемешивание в течение определенного периода времени, обычно около 10 мин, может повысить скорость реакции.

Таблица 1.

- 25 021220

Соед. №	Сп.	К¹	К²	В¹	к⁴	к⁵	К⁴	Солевая форма/ оптическое вращение (08)/ стереохимия
1	В1.а	7-С1	н	н	н	СР’СН₃	н	.НС!
2	В1.ь	7-С1	н	н	н	ср₂сн₃	н	.НС1 ОВ:-172.64° (589 нм; 20 °С; 0.3684 масс7об.%; МеОН) конфигурация
3	В1.Ь	7-С1	н	н	н	СР1СНЗ	н	.НС!
								ОВ:+168.90° (589 нм ; 20 °С; 0.3434 масс./об.%: МеОН) Я- конфигурация
4	В2.а/ В2.Ь	7-С1	н	связь	СР₂СН,	н
5	В1.а	8-С1	10-С1	н	н	СР-СН-,	н	.НС1
6	В2.а	8-С1	10-С1	связь	СР,СН,	н
7	В1.а	7-С1	8-С1	н	н	СР₂СН₃	н	НС1
8	В2.а	7-С1	10-С1	связь	СР2СН3	н
9	В2.а	7-С1	9-С1	связь	СРзСНз	н
10	В2.а	7-С1	8-С1	связь	СР2СН5	н
11	В5	7-С1	10-С1	н	н	СР₂СН₃	н	нс1
12	В1.а	7-С1	н	н	н	н	СР₂СН,	нс1
13	В5	7-С1	9-С1	н	н	СР₂СН₃	н	НС1

- 26 021220

14	В2.а	7-С1	Н	связь	н	СР₂СН₃
15	В2.а	7-Р	н	связь	СР₂СН;	н
16	ВЗ	9-С1	7-СН,	связь	СР-СН;	н
17	ВЗ	9-С1	Н	связь	СР₂СН₃	н
18	ВЗ	7-Р	9-Р	связь	СРгСН,	н
19	ВЗ	10-С1	Н	связь	СР₃СН;	н
20	В4	7-Р	Н	связь	Р	СР₂СН,
21	В4	7-С1	Н	связь	Р	СРзСН,
22	В4	9-С1	10-С1	связь	СР₂СН,	н
23	В4	7-Р	9-Р	связь	Р	СР,СН,
24	В5	7-С1	9-Р	н н	СР₂СН,	н	• НС1

25	В4	7-С1	9-С1	связь	Р	СР₂СН;
26	В4	7-С1	9-Р	связь	Р	СР₂СНз
27	В2.а	7-С1	9-Р	связь	СР₂СН,	н
28	В4	10-С1	7-СНз	связь	СРзСНз	н
29	В4	7-С1	Н	связь	СР₃СНз	Р
30	В4	7-Р	н	связь	СР,СН,	Р
31	В4	7-С1	9-Р	связь	СР₂СН,	Р
32	В4	7-Р	9-С1	связь	СР₂СН,	н
33	В4	7-Р	9-Р	связь	СР₂СН₂	Р
34	В4	9-С1	Н	связь	Р	СР₂СН,
35	В4	Н	10-С1	связь	Р	СРзСН,

С. Результаты анализов

ЬСМ8

Измерения ВЭЖХ осуществляли с использованием модуля ЛдПеШ 1100, содержащего насос, диодно-матричный детектор (ΌΛΌ) (используемая длина волны 220 нм), колоночный нагреватель и колонку, как указано в соответствующих методиках ниже. Поток из колонки разделяли на ЛдПеШ ΜδΌ Зепек 0194 6С и О1956Л. Μδ детектор был настроен с ЛИ-ЕЗ (ионизация электрораспылением при атмосферном давлении). Масс-спектры были получены путем сканирования от 100 до 1000. Напряжение капиллярной иглы было 2500 В для положительного и 3000 В для отрицательного режима ионизации. Напряжение фрагментации было 50 В. Температуру осушающего газа поддерживали при 350°С при потоке 10 л/мин. Обращенно фазовую ВЭЖХ проводили на УМС-Раск ΘΌδ-Άρ, 50 х 2,0 мм 5 мкм колонка со скоростью потока 0,8 мл/мин. Использовали 2 подвижные фазы (подвижная фаза А: вода с 0,1% ТФУ; подвижная фаза В: ΟΗ₃ΟΝ с 0,05% ТФУ). Сначала, 90% А и 10% В проводили в течение 0,8 мин. Затем применяли градиент 20% А и 80% В в 3,7 мир и проводили в течение 3 мин. Использовали типичные объемы инъекций в 2 мкл. Температура печи была 50°С. (полярность Μδ: положительная).

Точки плавления

Для ряда соединений точки плавления (т.пл.) определяли с помощью прибора для определения точек плавления \νΚ.δ-2Λ от фирмы δΐιαηβΐιαί Ргес18юи аий Заеиййс йМгишеп! Со. ЬШ. Точки плавления определяли при линейном нагревании со скоростью 0,2-5,0°С/мин. Представленные значения являются интервалами плавления. Максимальная температура была 300°С.

Результаты аналитических определений показаны в табл. 2.

- 27 021220

Таблица 2

Соед. №		[М+Н]⁺	т „ ПЛ* (°С)	Соед. №		[М+Н]*	Т.ПЛ. (°С)
1	3, 57	359	н.о.	19	3, 52	357	247, 5 разл.
2	3, 38	359	206,7207, 6	20	3,46	359	н.о.
3	3, 33	359	206,3206, 8	21	3, 56	375	н.о.
4	3, 59	357	215,2217,6	22	3,84	391	140,9142, 1

5	4, 00	393	Н.О.
6	4, 03	391	132,1134,2
7	3, 95	393	253,5254,2
8	3, 99	391	162,3163, 5
9	4,03	391	Н.О .
10	4, 03	391	н.о.
11	4, 04	393	188,5191, 1
12	Н.О .	Н.О.	н.о.
13	4,11	393	233,9235, 0
14	3,51	357	106,9109, 7
15	3, 27	341	н.о.
16	3, 97	371	89, 691, 2
17	3, 53	357	115, 3 разл.
18	3, 31	359	н.о.

23	3, 48	377	143,2- 144,3
24	3, 53	377	240,0240, 7
25	3, 77	409	124,2125, 4
26	3, 53	393	84,985, 9
27	3, 84	375	н.о.
28	3,71	371	139,3- 141,2
29	3, 44	375	186,3186, 6
30	3, 25	359	170,8171, 5
31	3, 44	393	162,5164, 8
32	3, 31	375	145,ΒΙΕ?, 4
33	3,23	377	158,2161, 3
34	3, 95	375	Н.О.
35	3, 97	375	н.о.

Время удерживания (К₎) в мин, пик [М+Н]⁴ (протонированная молекула) и т.пл. (точка плавления в °С). (н.о. обозначает не определялось; разл. обозначает разлагалось).

^!Н ЯМР

Для ряда соединений спектр 'Н ЯМР определяли на спектрометре Вгикег ΌΡΧ-300 или Вгикег ΌΡΧ400 со стандартной последовательностью импульсов, работающих при 300 МГц и 400 МГц, соответственно, используя в качестве растворителей хлороформ-ά (дейтерированный хлороформ, СЭС1₃) или ДМСО-б₆ (дейтерированный ДМСО, диметил-б₆ сульфоксид). Химические сдвиги (δ) представлены в миллионных долях (м.д.) относительно тетраметилсилана (ТМС), который использовали в качестве

- 28 021220 внутреннего стандарта.

Соединение № 1:(300 МГц, ДМСО-άε) δ м.д. 2,01 (т, >18,9

Гц, 3 Н) 3,87 (д, >14,3 Гц, 1Н) 4,57 (д, >13,9 Гц, 1Н) 5,35 (ушир. с, 1Н) 5,84 (ушир. с, 1Н) 6,30 (т, >3,2 Гц, 1Н) 7,43 (ушир. С, 1Н) 7,57-7,77 (м, 5 Н) 7,90 (д, >8,1 Гц, 2Н) 10,45 (ушир. с, 2Н) .

Соединение № 2: (300 МГц, ДМСО-сА) δ м.д. 2,01 (т, >18,93

Гц, 3 Н) 3,88 (д, >14,32 Гц, 1Н) 4,58 (д, >13,94 Гц, 1Н) 5,35 (ушир. с, 1Н) 5,84 (ушир. с, 1Н) 6,31 (т, >3,20 Гц, 1Н) 7,44 (ушир. с, 1Н) 7,57-7, 78 (м, 5 Н) 7,90 (д, >8,10 Гц, 2Н) 10,45 (ушир. с, 2Н).

Соединение № 3:(300 МГц, ДМСО-άβ) δ м.д. 2,01 (т, >18,93

Гц, ЗН) 3,88 (д, >14,13 Гц, 1Н) 4,58 (д, >13,94 Гц, 1Н) 5,35 (ушир. с, 1Н) 5,84 (д, >2,64 Гц, 1Н) 6,31 (т, >3,20 Гц, 1Н) 7,43 (дд, >2,64, 1,51 Гц, 1Н) 7,56-7, 79 (м, 5Н) 7,90 (д, >7,91 Гц, 2Н) 10,40 (ушир. с, 2Н) .

Соединение № 4: (300 МГц, СРСЩ δ м.д. 1,84 (т, >18,08 Гц, ЗН) 4,13 (ушир. с, 1Н) 5,44 (ушир. с, 1Н) 6,25-6,54 (м, 2Н) 7,19-7,24 (м, 2Н) 7,25-7, 35 (м, 2Н) 7,42 (м, >8,29 Гц, 2Н)

7, 69 (м, >8, 10 Гц, 2Н) .

Соединение № 5: (400 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 2,01 (т, >18,97

Гц, ЗН) 3,62 (д, >13,32 Гц, 1Н) 4,39 (д, >13,32 Гц, 1Н) 5,41

(ушир. с, 1Н) 5,88	(д, >2,83 Гц, 1Н)	6,30 (т, >3,23	Гц,	1Н)
7,40 (дд, >3,03, 1,	41 Гц, 1Н) 7,70 (м,	0=8,07 Гц, 2Н)	7, 80	(д,
>2,42 Гц, 1Н) 7,91	(м, >8,07 Гц, 2Н)	8,07 (д, >2,42	Гц,	1Н)
10,26 (ушир. с, 1Н)	10,66 (ушир. с, 1Н)	•
Соединение № 6	: (400 МГц, СОС1₃)	δ м.д. 1,93 (т	, о =	18,1

Гц, ЗН) 4,28 (д, >11,0 Гц, 1Н) 4,87 (д, >11,0 Гц, 1Н) 6,47 (ушир. с, 1Н) 6,57 (ушир. с, 1Н) 7,41-7,66 (м, 5Н) 7,88 (д, >7, 8 Гц, 2Н) .

Соединение № 8: (400 МГц, 0ϋ01₃) δ м.д. 1,92 (т, >18,2

Гц, ЗН) 4,08 (д, >11,3 Гц, 1Н) 5,46 (д, >11,3 Гц, 1Н) 6,386,46 (м, 1Н) 6,51 (д, >2,5 Гц, 1Н) 7,34 (ц, >8,5 Гц, 1Н) 7,39 (д, >8,5 Гц, 1Н) 7,46-7, 58 (м, ЗН) 7,87 (д, >8,3 Гц, 2Н) .

Соединение № 9: (400 МГц, СЕ>С1з) δ м.д. 1,92 (т, >18,2 Гц, ЗН) 4,16 (ушир. с, 1Н) 5,49 (ушир. с, 1Н) 6,38-6,57 (м, 2Н)

- 29 021220

7,30 (д, 7=2,0 Гц, ΙΗ) 7,34 (ушир. с, 1Н) 7,41 (д, 7=1,8 Гц,

1Н) 7,51 (м, Л=8,3 Гц, 2Н) 7,36 (м, 7=8,3 Гц, 2Н>.

Соединение № 10: (400 МГц, С0С1з) δ м.д. 1,95 (т, 6=18,3 Гц, ЗН) 4,46 (ушир. с, 1Н) 5,82 (ушир. с, 1Н) 6,80 (дд, 7=4,3, 2,8 Гц, 1Н) 7,04 (дд, 7=4,3, 1,5 Гц, 1Н) 7,29 (д, 7=8,8 Гц, 1Н) 7,66 (д, σ=8,5 Гц, 1Н) 7,69 (д, 7=8,3 Гц, 2Н) 7,79-7,85 (м, 1Н) 7,90 (д, 7=8,3 Гц, 2Н).

Соединение № 11:(300 МГц, ДМСО-бб) δ м.д. 2,01 (т, 7=18,8

Гц, ЗН) 3	г 59	(д, 7=14,3 Гц, 1Н) 4,57 (д, Д=14,3	ГЦ,	1Н) 5,44
(ушир. с,	1Н)	5,91 (ушир. с, 1Н) 6,32 (т, 7=3,2	ГЦ,	1Н) 7,42
(ушир. с,	1Н)	7,65-7,79 (м, ЗН) 7,83 (д, Л=7,9 Гц,	2Н)	7,89 (д,
7=8,7 Гц/	1Н) .

Соединение Соединение № 13: (300 МГц, ДМСО-бб) δ м.д. 2,01 (Т, Д=19,0 Гц, ЗН) 3,83 (д, 7=14,3 Гц, 1Н) 4,53 (д, 7=13,9 Гц, 1Н) 5,42 (ушир. с, 1Н) 5,83 (ушир. с, 1Н) 6,30 (т, Л=3, 0 Гц,

1Н)	7,49 (ушир.	с, 1Н)	7,70	(Д,	7=7,9 Гц,	2Н)	7,77-7,94	(м,	4Н)
ю,	42 (ушир. с,	2Н> .
	Соединение	№ 14:	(300	МГц,	СРС1₃) δ	м.д	. 1,90 (Т,	з=	18, 1
ГЦ,	ЗН) 4,17 (ушир. с,	1Н)	5, 50	(ушир. С,	1Н)	6,43-6,55	(м,	2Н)

7,22-7,30 (м, 2Н) 7,30-7,45 (м, ЗН) 7,56 (д, 7=7,5 Гц, 1Н) 7,76 (Д, Д=7,9 Гц, 1Н) 7,84 (с, 1Н).

Соединение № 15:(400 МГц, СОС1Ц δ м.д. 1,92 (т, 7=18,2

Гц,	ЗН) 4,74 (с, 2Н)	б,43-6,51	(м.	1Н)	6, 53 (дд,	σ=3,	8,	1,5	Гц,
1Н)	7,09 (т, 7=3,3	Гц, 1Н) 7,	18	(Д,	7=3,3 Гц,	1Н)	7,	35	(ТД,
σ=8.	1, 5,9 Гц, 1Н)	7,39-7,43	(м,	1Н)	7,52 (м,	7=8,	3	ГЦ,	2Н)

7,78 (м, Л=8,3 Гц, 2Н).

Соединение № 16: (300 МГц, СОС1₃) δ м.д. 1,93 (т, 7-18,18

Гц, ЗН) 2,60 (с, ЗН) 4,13 (ушир. с, 1Н) 5,17 (ушир. с, 1Н)

6,42-6,53 (м, 2Н) 7,20 (д, 7=1,88 Гц, 1Н) 7,24 (д, 7=1,88 Гц,

1Н) 7,33-7,40 (м, 1Н> 7,52 (м, 7-8,29 Гц, 2Н) 7,75 (м, 7=8,29

Гц, 2Н).

Соединение № 18: <400 МГц, СБС1₃) δ м.д. 1,92 (т, Д=18,1 Гц, ЗН) 4,69 (ушир. с, 2Н) 6,45-6,49 (м, 1Н) 6,49-6,53 (м, 1Н)

6,84 (тд, Л=9,0, 2,4 Гц, 1Н) 6,95 (дт, 7=9,0, 1,9 Гц, 1Н) 7,33 (ДД, σ=2,8, 1,5 Гц, 1Н) 7,51 (м, 7=8,3 Гц, 2Н) 7,75 (м, 7=8,3

Гц, 2Н).

Соединение № 20: (400 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 2,00 (т, 6=18,6 Гц, 3Н) 4,77 (ушир. с, 2Н) 6,53 (ушир. с, 1Н) 6,59 (ушир. с, 1Н) 7,06-7,26 (м, 3Н) 7,33-7,44 (м, 1Н) 7,47 (ушир. с, 1Н) 7,90 (ушир. с, 1Н) 7,95 (д, 1=6,5 Гц, 1Н).

Соединение № 21: (300 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 2,01 (т, 6=18,6 Гц, 3Н) 4,24 (ушир. с, 1Н) 5,62 (ушир. с, 1Н) 6,50-6,79 (м, 2Н) 7,16-7,33 (м, 2Н) 7,38 (т, 1=7,9 Гц, 1Н) 7,43-7,62 (м, 2Н) 7,85-8,15 (м, 2Н).

Соединение № 22: (400 МГц, СИСЮ δ м.д. 1,92 (т, 1=18,1 Гц, 3Н) 4,24 (д, 1=11,3 Гц, 1Н) 4,82 (д, 1=11,3 Гц, 1Н) 6,39-6,46 (м, 1Н) 6,49 (дд, 1=3,9, 1,4 Гц, 1Н) 7,37 (д, 1=8,0 Гц, 1Н) 7,44 (д, 1=8,3 Гц, 1Н) 7,51 (м, 1=8,3 Гц, 2Н) 7,55 (дд, 1=2,8, 1,5 Гц, 1Н) 7,83 (м, 1=8,5 Гц, 2Н).

Соединение № 23: (400 МГц, СИСЮ δ м.д. 2,00 (т, 1=18, 6 Гц, 3Н) 5,03 (ушир. с, 2Н) 6,45-6,52 (м, 2Н) 6,85 (тд, 1=9,0, 2,4 Гц, 1Н) 6,95 (д, 1=9,3 Гц, 1Н) 7,07-7,18 (м, 1Н) 7,33 (т, 1=2,1 Гц, 1Н) 7,69-7,81 (м,

- 30 021220

1Н) 7,92 (дд, 1=7,3, 2,0 Гц, 1Н).

Соединение № 24: (400 МГц, ДМСО-ά..) δ м.д. 2,01 (т, 1=18,97 Гц, 3Н) 3,83 (д, 1=14,13 Гц, 1Н) 4,54 (д, 1=14,13 Гц, 1Н) 5,41 (ушир. с, 1Н) 5,85 (ушир. с, 1Н) 6,32 (т, 1=3,43 Гц, 1Н) 7,46 (ушир. с, 1Н) 7,65 (дд, 1=9,28, 2,42 Гц, 1Н) 7,67-7,74 (м, 3Н) 7,85 (д, 1=807,00 Гц, 2Н) 10,15 (ушир. с, 1Н) 10,44 (ушир. с, 1Н).

Соединение № 25: (400 МГц, СИС1₃) δ м.д. 1,99 (т, 1=18,4 Гц, 3Н) 4,14 (ушир. с, 1Н) 5,45 (ушир. с, 1Н) 6,44-6,55 (м, 2Н) 7,05-7,17 (м, 1Н) 7,30 (д, 1=2,0 Гц, 1Н) 7,34 (т, 1=2,3 Гц, 1Н) 7,41 (д, 1=2,0 Гц, 1Н) 7,71-7,83 (м, 1Н) 7,91 (дд, 1=7,3, 2,3 Гц, 1Н).

Соединение № 26: (400 МГц, СИС1₃) δ м.д. 1,99 (т, 1=18,3 Гц, 3Н) 4,12 (ушир. с, 1Н) 5,44 (ушир. с, 1Н) 6,42-6,55 (м, 2Н) 7.05 (дд, 1=8,9, 2,4 Гц, 1Н) 7,09-7,20 (м, 2Н) 7,33 (т, 1=2,1 Гц, 1Н) 7,72-7,83 (м, 1Н) 7,92 (дд, 1=7,3, 2,3 Гц, 1Н).

Соединение № 27: (400 МГц, СИС1₃) δ м.д. 1,92 (т, 1=18,2 Гц, 3Н) 4,16 (ушир. с, 1Н) 5,47 (ушир. с, 1Н) 6,42-6,55 (м, 2Н) 7,04 (дд, 1=8,9, 2,4 Гц, 1Н) 7,16 (дд, 1=8,3, 2,5 Гц, 1Н) 7,29-7,36 (м, 1Н) 7,51 (м, 1=8,3 Гц, 2Н) 7,76 (м, 1=8,0 Гц, 2Н).

Соединение № 28: (300 МГц, СОС1₃) δ м.д. 1,91 (т, >18,2 Гц, ЗН) 2,59 (с, ЗН) 4,04 (д, 0=11,1 Гц, 1Н) 5,11 (д, >11,1 Гц, 1Н) 6,33-6, 44 (м, 1Н) 6, 44-6,53 (м, 1Н) 7,12 (д, >8,3 Гц,

1Н) 7,33 (д, >8,1 Гц, 1Н) 7,45-7,58 (м, ЗН) 7,84 (д, >8,1 Гц,

2Н) .

Соединение № 29: (300 МГц, СОС» δ м.д. 2,00 (т, >18,9 Гц, ЗН) 4,20 (ушир, с, 1Н) 5,53 (ушир. с, 1Н) 6,42-6, 50 (м, 1Н)

6, 50-6, 56 (м, 1Н) 7,28-7, 35 (м, 2Н) 7,37 (дд, >2,8, 1,7 Гц,

1Н) 7,38-7, 43 (ω, 1Н) 7,46-7, 63 (м, ЗН) .

	Соединение № 30:	(400	МГц, СОС1₃) δ	м.д	. 2,00 (т.	>18, 6
гц,	ЗН) 4,73 (ушир. с,	2Н)	6,42-6, 49 (м,	1Н)	6, 50-6, 57	(м, 1Н)
7,09	(т, >8,5 Гц, 1Н)	7, 18	(д, >8,0 Гц,	1Н>	7, 31-7,41	(м, 2Н)
7,47	-7, 61 (м, ЗН) . Соединение № 31:	(400	МГц, СОС» δ	м.д	. 2,00 (т,	>18,4
ГЦ,	ЗН) 4, 14 (ушир. с,	1Н)	5,48 (ушир. с,	1Н)	6,44-6, 51	(м, 1Н)
6, 51	-6,59 (м, 1Н) 7,04	(дд,	>8,9, 2,4 Гц,	, 1Н)	7,17 (ДД,	>8,3,
2,3	Гц, 1Н) 7,34 (дд,	>2	,8, 1,5 Гц, 1Н) 7,	54 (д, >:	3,3 Гц,
ЗН) .	Соединение № 32:	(300	МГц, СГС>) δ	м.д	. 1,92 (т,	>18,1
Гц,	ЗН) 4,7 0 (ушир. с,	2Н)	6, 43-6, 55 (м.	2Н)	7,11 (дд,	>8, 6,
1,8	Гц, 1Н) 7,18-7,23	(м, :	1Н) 7,31-7,39 1	(м, 1Н) 7,51 (м	, >8,3
ГЦ,	2Н) 7,74 (м, >8,1 Соединение № 33:	Гц, 2Н) . (4 00 МГц, ДМСО	с!«)	δ м.д. 2,	02 (т,

>18,	,97 Гц, ЗН) 4,57 (ушир. с, 2Н) 6,55 (т, >3,23	Гц,	1Н)	6, 59
(ДД,	>3,84, 1,41 Гц, 1Н) 7,36 (тд, >9,49, 2,42	Гц,	1Н>	7, 40-
7, 48	(м, 1Н) 7,51-7,58 (м, 2Н) 7,62 (т, >7,87	Гц,	1Н)	7,81
(ДД,	>2, 62, 1, 41 Гц, 1Н) .

Соединение № 34: (400 МГц, С0С1₃) δ м.д. 1,88-2,10 (м, ЗН)

4,42 (ушир. с, 1Н) 4,78 (ушир. с, 1Н) 6, 45-6, 50 (м, 2Н) 7,12 (ДД, >10,0, 8,8 Гц, 1Н1 7,29 (дд, >8,0, 2,0 Гц, 1Н) 7,36 (т, >2,3 Гц, 1Н) 7,40 (д, >2,0 Гц, 1Н) 7,42 (д, >8,0 Гц, 1Н)

7, 69-7,79 (м, 1Н) 7,93 (дд, >7,4, 2,1 Гц, 1Н) .

Соединение № 35: (400 МГц, СГС1₃) δ м.д. 1,93-2, 06 (м, ЗН)

4,27 (д, >11,3 Гц, 1Н) 4,86 (д, >11,0 Гц, 1Н) 6,39-6,45 (м, 1Н) 6,49 (дд, >3,6, 1,4 Гц, 1Н) 7,13 (дд, >10,2, 8,9 Гц, 1Н) 7,24 (т, 0=8,0 Гц, 1Н) 7,41-7,46 (м, 1Н) 7,48 (дд, >8,2, 1,4 Гц, 1Н) 7,59 (дд, >2,6, 1,4 Гц, 1Н) 7, 79-7, 89 (м, 1Н) 8,03 (дд, >7,3, 2,3 Гц, 1Н) .

И. Фармакологические примеры

Пример Ό.1: Измерение противогрибковой активности ίη νίΐτο

- 31 021220

Стандартное исследование восприимчивости проводили на 96-луночных планшетах (И-образное дно, Огешег ВюЮпе). Серийные разведения (2-кратное или 4-кратное) 20 мМ исходных растворов соединения выполняли в 100% ДМСО, затем промежуточную стадию разведения в воде. Далее эти серийные разведения (10 мкл) наносили на тест-пластины, которые могут храниться в темноте при 4°С в течение не более 2 недель. Подходящий широкий диапазон доз был включен с 64 мкМ в качестве самой высокой концентрации в тесте. К культуральной среде КРМЕ1640 добавляли Ь-глютамин, 2% глюкозу и буферировали 3-^-морфолино)пропансульфоновой кислотой (ΜΟР8) при рН 7,0 ±0,1.

Различные виды грибов/изолятов (таблица 3а) криоконсервировали и разбавляли 1/1000 в среде непосредственно перед использованием. Затем в каждую лунку добавляли 200 мкл стандартного инокулума, содержащего 10³ колониеобразующих единиц (КОЕ). Положительный контроль (100%-ный рост = грибковые культуры без противогрибковой) и отрицательный контроль (0% роста = среда КРΜI-ΜΟР8) включали в каждый планшет. Оптимальное время инкубации и температура зависили от вида грибов и изменялись от 24 ч для дрожжей (37°С) до одной недели или больше для дерматофитов (27°С). Ингибирования роста грибов измеряли после добавления 10 мкл 0,005% (мас./об.) Кека/ипп (8щта А1бпсй) в каждую лунку, основываясь на принципе, что живые клетки преобразуют нефлуоресцентный синий резазурин в розовый и флуоресцентный резофурин, что позволяет осуществить флуориметрическое считывание (λ„ 550 нм и Х_ем 590 нм) после дополнительного инкубационного периода (время Кека, приведенное в табл. 3 а). Результаты представлены в таблице 3Ъ в виде значений ρΚ±₀.

Таблица 3а. Условия инкубации для различных видов грибов. Кека Рте соответствует дополнительному времени инкубации после добавления резазурина к тест-системе

Виды	Температура (°С)	Время	Время инкубации после добавления резазурина
Масгозрогит сапаз	27	9 дней	24 час
ТгасЪорЪуЁоп шеп^адгорку^ез	27	7 дней	24 час
ТгасАорлу^оп гиЬгигп	27	7 дней	24 час
ЗсеРозрогз. ин: араозрегтит	37	48 час	17 час
5сеЗозрог1 ит ргоНЕасапз	37	48 час	17 час
5рого{Вг1х зсИепкП	27	4 дней	24 час
АзрегдШиз /итадаСиз	27	48 час	17 час
СапсПРа рагарзПоваз	37	24 час	4 час
СгурЁососсиз леоЕогтапз	37	24 час	4 час
КЫгориз огугае	37	24 час	6 час
КЫготисог тепел	37	4 8 час	17 час
Мисог С1гсапе11о1<3ез	27	4 8 час	17 час

1п£. 'С': Тг1 сЪорЕуЬоп теп^адгорЪу^ез В70554

Ιη£. ’Ή' : 5се<3озрог1шп араозрегтит ΙΗΕΜ3817

Ιη£. '1': ЗсеРозропит ргоИЕасапз ΙΗΕΜ2115 7

1п£. 'Л': КЫгориз огугае

ΙΗΕΜ5223

1п£. 'К': ВЫготисог ппебеа

ΙΗΕΜ13391

1п£. ’Ь’ : Мисог с2ГС1пе11о1<Зез

ΙΗΕΜ21105

Таблица 3Ъ

Ιηί. Ά В62482	1 .	ΒροΓοίίιιΡχ велел кН
1п£. В68128	•В' :	Масгозрогиш Сапёз
Ιηί. В68183	’С':	Тг!сборкуίоη гиЬгим
1п£.	Ό' :	СалкИаа рагарзНозав
В66126
1п£. ’ В42928	Έ':	АзрегдШиз ЕшгРдакиз
Ιηί.		Τ': СгурЬососсив
пеоЛогтапв	В66663

- 32 021220

Соед. №	1п£А	Ιηί В	ΙηΓ. С	ΙηΓ. П	ΙηΓ. Ε	ΙηΓ. Ρ	Ιηί. С	ΙηΓ. Η	ΙηΓ. I	ΙηΓ. ά	ΙηΓ. К
1	4.68	6.45	6.91	5.70	6.72	5.30	6.89	<4.19	η,ά.	<4.19	<4.19
5	<4.19	<4.19	4.22	<4.19	<4.19	4.46	<4.19	η.ά.	ιι.ά.	η.ά.	η.ά.
6	5.58	4.76	5.23	<4.19	6.03	5.85	5.61	<4.19	η,ά.	<4.19	<4.19
7	<4.19	5.40	5.40	<4.19	<4.19	<4.19	<4.19	η.ά.	η,ά.	η.ά.	η,ά.
8	<4.19	5.40	5.52	<4.19	<4.19	<4.19	4.22	η.ά.	η.ά.	η.ά.	η.ά.
9	4.96	5.40	6.00	<4.19	5.10	6.06	4.89	5.02	5.22	<4.19	<4.19
10	<4.19	<4.19	<4.19	<4,19	<4.19	<4.19	<4.19	η.ά.	η.ά.	η.ά.	η,ά.
11	<4.19	<4.19	4.86	<4.19	<4.19	<4.19	<4.19	η.ά.	η.ά.	η.ά.	η.ά.
13	<4.19	4.23	5.70	<4.19	4.81	<4.19	5.14	η.ά.	η.ά.	η.ά.	η.ά.
4	4.92	6.32	6.63	5.51	5.65	4.67	6.05	<4.19	6.83	<4.19	<4.19
14	4.36	6.28	6.43	5.52	5.70	4.43	6.22	5.76	5.88	<4.19	4.34
15	<4.19	6.31	7.37	6.20	6.65	<4.19	6.60	<4.19	5.60	4.47	<4.19
2	<4.19	5.09	5.82	<4.19	<4.19	<4.19	5.43	η.ά.	η.ά.	η.ά.	η.ά.
3	<4.19	6.30	6.96	5.58	5.70	5.26	6.36	5.13	6.15	<4.19	4.59
16	5.42	5.70	6.21	4.97	5.77	6.14	5.78	4.99	5.92	<4.19	<4.19
17	5.25	5.58	6.34	5.61	6.26	6.49	5.79	<4.19	6.12	5.08	<4.19
18	5.09	5.67	6.83	5.63	6.30	5.79	5.96	<4.19	6.10	<4.19	4.30
19	5.55	5.69	6.67	4,88	5.69	5.79	6.19	5.63	6.29	5.01	4.84
20	<4.19	6.29	6.84	4.89	6.95	<4.19	6.10	6.24	6.80	<4.19	4.57
21	5.43	6.32	6.71	5.61	6.90	5.80	6.16	7.05	7.30	<4.19	5.18
22	<4.19	5.11	5.11	<4.19	<4.19	<4.19	<4.19	η.ά.	η.ά.	η,ά.	η.ά.
23	5.02	6.38	6.89	5.44	6.27	<4.19	6.10	6.74	7.00	<4.19	<4.19
24	<4,19	5.11	6.21	5.58	4.94	<4.19	5.77	η.ά.	η,ά.	η.ά.	η.ά.
25	4.85	5.80	5.90	<4.19	5.99	<4.19	5.66	6.39	6.30	<4.19	<4.19
26	4.99	6.33	6.33	5.42	6.23	<4.19	5.92	6.80	6.72	<4.19	4.87
27	5.61	6.29	6.54	5.74	6.30	5.99	5.82	6.36	7,00	<4.19	5.08
28	4.55	4.85	5.13	4.34	4.19	4.78	4.57	6.15	5.64	<4.19	4.38
29	<4.19	6.96	7.07	<4.19	6.30	<4.19	6.72	<4.19	<4.19	<4.19	<4.19
30	<4,19	6.33	6.79	5.11	6.30	5.85	6.44	5.05	5.34	<4.19	4.91
31	5.63	6.36	6.33	5.46	6.30	6.53	5.90	4.98	5.06	<4.19	<4.19
32	5.21	5.78	5.78	5.56	5.70	5.89	5.78	<4.19	<4.19	<4.19	<4.19
33	5.03	5.71	6.14	4,87	5.72	5.58	5.67	6.19	4.98	<4.19	<4.19
34	5.10	5.09	5.10	5.53	5.10	5.24	5.09	η,ά.	η.ά.	η,ά.	η.ά.
35	5.37	6.28	6.52	4,83	5.84	6.28	5.80	η.ά.	η,ά.	η.ά.	η.ά.
12	η.ά.	η.ά.	η.ά.	η.1±	η.ά.	η.ά.	η.ά.	η.ά.	η.ά.	η.ά.	η.ά.

Активности исследуемых соединений ίη νίίτο (η.ά. означает не определены; 'ΊηΤ. означает инфекцию; значения соответствуют значениям ρΚ.'₅₀)

Значения рКА, для кТ 'Ь' определяли для соединений 1, 3, 4, 6, 9, 14-21, 23, 25-33, и составляли <4,19.

Пример Ό.2: Растворимость

ИРЬС означает сверхпроизводительную жидкостную хроматографию; НРВСЭ означает 2гидроксипропил-β -циклодекстрин.

Количество исследуемого соединения, обычно составляющее от 2 до 4 мг, точно отвешивали с помощью микровесов и добавляли к 0,5 мл одной из приведенных буферных систем в 20 мл прозрачном стеклянном сосуде:

A) 0,01 н НС1

B) буфер рН 4: (0,1 н) смесь фосфата (0,2 М) - цитрата в соответствии с буферными растворами Мс Шаке)

C) буфер рН 4, содержащий 10% (мас./об.) НРВСЭ

Ό) буфер рН 4, содержащий 20% (мас./об.) НРВСЭ

Е) буфер рН 7,4: фосфат (0,2 М) - смесь цитрата (0,1 н) в соответствии с буферными растворами Мс Шаке)

Р) буфер рН 7,4, содержащий 10% (мас./об.) НРВСЭ

О) буфер рН 7,4, содержащий 20% (мас./об.) НРВСЭ

В смесь помещали магнитную мешалку. Смеси перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем контролировали визуально.

Если соединение растворялось, результат записывали (дважды взвешенное количество соединения/мл).

Если соединение не растворялось, к суспензии дополнительно добавляли 0,5 мл растворителя. Смеси перемешивали при комнатной температуре в течение по крайней мере еще 2 ч, с последующим кон- 33 021220 трольным осмотром.

Если соединение растворялось, результат записывали (взвешенное количество соединения/мл).

Если соединение не растворялось, в суспензию дополнительно с помощью пипетки добавляли 1 мл растворителя. Смеси встряхивали (Ебтииб ВиЫет 8М25 175 8РМ) при комнатной температуре в течение ночи и затем осуществляли контрольный осмотр.

Если соединение растворялось, результат записывали (половина взвешенного количества соединения/мл).

Если соединение не растворялось, суспензию фильтровали через фильтровальный диск. Аликвоту фильтрата разбавляли подходящим растворителем (0,1н НС1/ацетонитрил 1/1) и измеряли концентрации (мг/мл) с помощью универсального метода ИРЬС (сверхпроизводительная жидкостная хроматография).

Таблица 4

		\ ИА
	/=Рх

	С1 Соединение 23 №002/34752	Соединение 17 по настоящему
		изобретению
Буферная	Сверхпроизводительная	Сверхпроизводительная
система	жидкостная	жидкостная
	хроматография (мг/мл)	хроматография (мг/мл)
А	1,878	7,10>Х>3,55
В	<0,001	0,087
С	0, 048	1,229
σ	1,49	н. О .
Е	<0,001	<0,001
г	0, 035	0,191
сз	0, 11	0, 603

Пример Ό.3: Фармакокинетические исследования ίη νίνο (биодоступность)

В соответствии со способом введения дозы, моментом времени и композицией использовали трех животных (средняя масса 2 0±7 г для мышей и 275±20 для морских свинок).

Для приготовления раствора препарата для перорального введения (РО) соединение растворяли в 20% растворе гидроксипропил-3-циклодекстрина (ΗΡ-β-СЭ) при конечной концентрации 1 мг/мл. Для облегчения растворения добавляли НС1. После растворения рН раствора доводили до 3,7 с помощью ΝαΟΗ. Для того чтобы сделать раствор изотоническим, добавляли маннит. Для приготовления суспензионного препарата для перорального введения соединение суспендировали в 0,5% метилцеллюлозе при конечной концентрации 1 мг/мл. Препараты хранили при комнатной температуре, в защищенном от света месте и выполняли количественный анализ с помощью ЖХ-МС/МС в день получения. Стабильность композиций проверяли в день введения доз.

Животным посредством желудочного зонда перорально вводили дозы 10 мл/кг для получения конечной дозы 10 мг/кг. Трех животных, которым вводили дозы, умерщвляли для забора образцов крови на 15 и 30 мин, 1, 2, 3, 4, 6, 8 и 24 ч после РО введения дозы в виде раствора, и через 30 мин, 1, 2, 4, 6, 8 и 24 ч после РО введения дозы в виде суспензии.

Кровь собирали путем многократной выборки из хвостовой вены в пробирки МиШуеИе® 600 КЗЕ (Зат81еб1). Образцы сразу помещали при приблизительно 4°С, и плазму получали после центрифугирования при 4°С в течение 10 мин при примерно 1900/д. До проведения анализа все образцы были защищены от дневногосвета и хранились при < -18°С.

Образцы плазмы анализировали для вводимого дозами соединения с использованием подходящего метода исследования ЖХ-МС/МС. Основные аналитические показатели (линейность, верхний и нижний предел количественного анализа, точность и погрешность) метода предоставлялись вместе с концентрациями в плазме.

Ограниченный фармакокинетический анализ проводили с использованием \νίηΝοη1ίη™ Рго1с55юпа1 (версия 5.2.1). Для всех данных использовали неблочный анализ, применяя 1ίη/1ο§ правило трапеций с

- 34 021220

1ίη/1ο§ интерполяцией.

Таблица 5

Соединение 22 №002/34752

С1

Биодоступность у мышей: 11% (перорально 10 мг/кг; IV 2,5 мг/кг)

Биодоступность у морских свинок: 2,7% (перорально 40 мг/кг; IV 2,5 мг/кг) заявке

Биодоступность у мышей: 20% (перорально 10 мг/кг; IV 2,5 мг/кг)

Биодоступность у морских свинок: 35% (перорально 10 мг/кг; IV 1,25 мг/кг)

цт

Соединение 9 по настоящей заявке

Биодоступность у мышей: 100% (перорально 20 мг/кг; IV 2,5 мг/кг)

Биодоступность у морских свинок: не достаточно расворимое

Биодоступность у мышей: 19% (перорально 10 мг/кг; IV 2,5 мг/кг)

Биодоступность у морских свинок: 14% (перорально 10 мг/кг; IV 2,5 мг/кг)

Соединение 23 ИО02/34752

Соединение 17 по настоящей заявке

Биодоступность у морских свинок: 70% (перорально 10 мг/кг; IV 2,5 мг/кг)

Биодоступность у морских свинок: 7% (перорально 40 мг/кг; IV 2,5 мг/кг)

Пример Ό.4: Измерение противогрибковой активности ίη νίνο

Общий метод

Животными, используемыми в описанных ниже исследованиях, были самки морских свинок (Эипсап-НагЙеу, СНаг1ез Кксг. 200 г). Этих животных разделяли на группы по 2 или 3 животных в клетках 56x33x20 см³. Корм в виде гранул (Сагй1 ОиаП(у) и вода были доступны без ограничений в дополнение к небольшому суточному количеству сухой травы. Были установлены стандартные условия содержания животных: температура в помещении: 22°С, влажность: 60%, и 12-часовой цикл день-ночь.

Для подготовки инокулума, Мюгозрогит Сашз (штамм В68128) выращивали на планшетах 8аЬоигаиб Эе.Чгозе Адаг (8ΌΑ) по крайней мере за одну неделю (7-10 дней) до инфицирования (27°С). В день инфицирования споры собирали путем добавления 4-5 мл стерильной воды в планшет и суспендированием инфекционного материала с помощью изогнутой пипетки Пастера. Из вновь собранной жидкости 10 мкл добавляли в счетную камеру КОУА для определения количества спор в 1 квадрате (в среднем несколько квадратов). При необходимости получали дополнительные разведения (10х или 100х). Среднее число спор в одном квадрате х разбавления х 90,000 = КОЕ/мл. Инокулум 1х 10⁷ КОЕ/мл получали в смеси мед-вода (50-50%).

В описанных ниже исследованиях, полуколичественная оценка патологических изменений приведена на основе различных клинических параметров. Результаты, в диапазоне от 0 до 3,5, определяли в

- 35 021220 зависимости от тяжести и размера патологических изменений. Критерии подробно перечислены в табл.6. Таблица 6. Критерии полуколичественной оценки кожных патологических изменений

Тип патологического изменения	<0, 5 см	0, 51,5 см	1,53 см	>3 см
только патологические изменения в виде мелких насечек или отсутствие патологических изменений	0	0	0	о
эритема	0	0, 5	1	1,5
пилоэрекция	0	0,5	1	1,5
тонкие чешуйки белого цвета	0, 5	1,5	2	2, 5
плотные струпы белого цвета (1 большой струп)	1	2	2,5	3
эрозия/струпы красного цвета	1,5	2,5	3	3,5
уже отсутствие струпов, алопеция, аномальная кожа	0, 5	0, 5	1	1,5

аномальная кожа, без алопеци и	0, 5	0, 5	0, 5	1
гладкая кожа (алопеция или отсутствие алопеции)	0	0	0	0

Тест Ό.4.1: Активность соединения 4 и соединения 14 в отношении М. Сатк у морских свинок после перорального введения при различных дозах в течение последующих 7 дней.

Процедуры искусственной инфекции

Спинку морских свинок брили и дополнительно депилировали с помощью крема Уее(® в течение 3 мин перед скарификацией стальной щеткой. Инокулум 10⁶ КОЕ в 150 мкл (75 мкл милли О. + 75 мкл меда) наносили на рану с помощью микропипетки с одноразовым наконечником. Животное лишали подвижности до тех пор, пока инокулум не был полностью высушен.

Композиции

Носитель: метилцеллюлоза 0,5%, Т\уееп 80® (полисорбат 80), деминерализованная вода

Контрольное соединение: итраконазол при концентрации 6,25 мг/мл

Исследуемое соединение: получали при концентрации 25 мг/мл, затем дополнительно разбавляли

Дозирование и экспериментальные группы

Пероральное введение (с помощью желудочного зонда 0,16 мл/100 г один раз в день) начинали примерно за 2 ч до инфицирования и продолжали один раз в день в течение последующих 7 дней. Для корректировки дозы животных взвешивали после 3 дней введения.

01: Обработанная носителем контрольная инфициров анна я группа (νΐΟ

62: Тербинафин (10 мг/кг)

03: Итраконазол (10 мг/кг) 04: Соединение 4 (40 мг/кг) С5: Соединение 4 (10 мг/кг) 06: Соединение 4 (5 мг/кг) (2 животных) (среднее значение большого числа экспериментов) (2 животных) (2 животных) (3 животных) (3 животных)

С7: соединение 14 (40 мг/кг) (3 животных) 08: соединение 14 (20 мг/кг) (3 животных) С9: соединение 14 (10 мг/кг) (3 животных)

Мониторинг инфекций

Проявления патологических изменений оценивали в соответствии с полуколичественной выраженной в баллах системой оценки патологических изменений (см. табл. 6) на 3, 5, 7, 10, 12, 14, 17 и 20 день. Результаты показаны в табл. 7 (ОИ означает дней после инфицирования). Приведенные значения в таблице 7 представляют собой средние значения.

- 36 021220

Таблица 7

ϋΡΙ	61	52	сз	64	65	56	57	68	59
3	0	0	0	0	0	0	0	0	0, 33
5	1, 00	0	0	0,17	0	0, 67	0, 17	0, 33	1, 17
7	2, 00	0, 08	0	0,17	0,33	1,50	0, 67	0, 83	2, 00
10	2,25	0, 33	0	0, 17	1,00	2, 00	1,17	1,67	2, 17
12	2,75	0, 80	0	0,17	1,50	2, 17	0, 83	2, 00	2, 33
14	1,75	0, 75	0	0	1,50	1, 83	0,50	1, 67	2,17
17	1,00	0, 50	0	0,17	0, 50	1,33	0, 17	1,50	1,67
20	0, 75	0, 42	0	0, 17	0,33	1,17	0, 17	0, 67	1,17

Из табл. 7, можно сделать вывод о том, что обработанные носителем инфицированные контрольные группы (С1) показывали нормальное развитие инфекции, т.е. первые патологические изменения появились примерно через 5 дней с максимальной тяжестью примерно на 12-й день. Тем не менее, в конце эксперимента (день 20) у обеих морских свинок наблюдали некоторое количество чешуек белого цвета.

У животных, обработанных итраконазолом (10 мг/кг) (03), никогда не наблюдали развитие никаких патологических изменений. В отношении исследуемых соединений, ясно наблюдали зависимость дозаэффект. Соединение 4, в дозе 40 мг/кг (04), заметно более активно, чем в группе, обработанной тербинафином (02). Активность в группах 05 и 07 сопоставима с группой 02.

Для сравнения, 2 соединения, не имеющие 1,1-дифторэтильную группу в К³ или К⁶ положении, были исследованы в соответствии с аналогичным протоколом:

Спинку морских свинок брили и дополнительно депилировали с помощью крема Усс1® в течение 7 мин перед скарификацией стальной щеткой. Инокулум 10⁶ КОЕ в 200 мкл (100 мкл милли О + 100 мкл меда) наносили на рану с помощью микропипетки с одноразовым наконечником. Животное лишали подвижности до тех пор, пока инокулум не был полностью высушен.

Композиции

Носитель: метилцеллюлоза Р4М Ргешшт ЕР, Т\уссп 80® (полисорбат 80), деминерализованная вода

Исследуемое соединение: получали при концентрации 30 мг/мл, затем дополнительно разбавляли 6 мг/мл

Дозирование и экспериментальные группы

Пероральное введение (принудительное кормление один раз в день, 0,4 мл/морская свинка) начинали примерно за 2 ч до инфицирования и продолжали один раз в день в течение последующих 7 дней.

Мониторинг инфекции

Проявления патологических изменений оценивали в соответствии с полуколичественной выраженной в баллах системой оценки патологических изменений (см. табл. 6) на 3, 5, 7, 10, 12, 14, 18 и 21 день. Результаты показаны в табл. 8. Приведенные значения в табл. 8 представляют собой средние значения.

Таблица 8

- 37 021220

ΟΡΙ	СЮ	СИ
18	1	0,5
21	А5	0,5

Соединения, используемые в С10 и 011, показали частичную активность. Однако даже при более высоких дозах (50 мг/кг) соединения, используемые в 010 и 011, оказались менее активными, чем настоящие соединения 14 и 4, используемые в 07 и 04 (оба в дозе 40 мг/кг).

Пример И.5: Ингибирование сквален-эпоксидазы

Используя субклеточные фракции СапйМа а1Ысап8, был разработан метод, позволяющий дать количественную оценку эффектов химических соединений на различных этапах биосинтеза эргостерола.

С. а1Ысап8, штам В2630, выращивали в течение 24 ч (ч) в 500 мл-й колбе Эрленмейера, содержащей 100 мл среды СУ0 (0,5% гидролизата казеина, 0,5% дрожжевого экстракта и 0,5% глюкозы), при 37°С аэробно в ротационном шейкере. После этого инкубационного периода использовали 1 мл аликвоты для инокуляции еще 100 мл среды СУ0. Клетки выращивали указанным выше способом в течение 8 ч. 5 мл этой выращенной в течение 8 ч культуры использовали для инокуляции 200 мл среды ΡΥ0 (1% полипептона, 1% дрожжевого экстракта и 4% глюкозы) в 500 мл-овой колбе Эрленмейера. Клетки выращивали при 30°С в течение 8 ч в качестве постоянной культуры и в течение еще 8 ч в ротационном шейкере при 100 об./мин.

После инкубации дрожжевые клетки собирали центрифугированием (5 мин при 1500/д) и дважды промывали ледяным физиологическим раствором. Клетки повторно суспендировали в 15 мл буфера для гомогенизации (30 мМ никотинамида, 5 мМ МдС1₂ и 5 мМ восстановленного глутатиона в 100 мМ калий-фосфатном буфере рН 7,4) и помещали в ледяной 80 мл Веай-Веа)ег реципиент, содержащий 40 мл стеклянные шарики. Внешняя оболочка Веай-Веа)ег была наполнена ледяной водой.

Клетки гомогенизировали 3 раза в течение 1 мин с охлаждением в интермиттирующем режиме. Гомогенат центрифугировали при 4°С в течение 20 мин при 8000/д. Измеряли концентрацию белка в 8000/д супернатанте методом Вю-Кай. Вю-Кай метод представляет собой метод быстрого определения концентрации белка. Этот анализ связывания с использованием красителя, основанный на дифференциальном изменении цвета красителя в зависимости от различных концентраций белка, основан на методе Брэдфорда. В типичном анализе 0,1 мл образца, разбавленного соответствующим образом, смешивают с 5,0 мл красящего реагента. Оптическую плотность полученного раствора сине-зеленого цвета считывают на спектрофотометре при длине волны 595 нм. Строят стандартную кривую с использованием 10-150 мкг гамма-глобулина.

Включение ¹⁴С мевалоната измеряли в реакционной смеси, содержащей в конечном объеме 1 мл: 900 мкл фракции §8000 (белок 4 мг/мл), 3 мМ МдС12, 2 мМ МдС12, 5,4 мМ АТФ, КАЭН 1,38 мм, 1,51 мМ ΝΑΌΡ^ 0,3 мкСк¹⁴С-мевалоната и 10 мкл лекарственного средства и/или растворителя. После инкубации в течение 2 ч при 30°С в шейкере с возвратно-поступательным движением при 120 8рт (сцинтилляций в минуту), реакцию останавливали добавлением 1 мл 15% КОН в 90% этаноле. После омыления в течение 1 ч при 80°С и охлаждения неомыляемые липиды экстрагировали 3 мл н-гептана и экстракты сушили в струе азота. Липиды разделяли с помощью ТСХ (силикагель 6ОР254/ Мегск) с использованием системы растворителей, состоящей из 75 объемов Н1А (н-гептан/диизопропиловый эфир/уксусная кислота, 60/40/4, об./об./об.) и 25 объемов этилацетата. Липидную фракцию визуализировали посредством люминесцентного изображения, отсканированного с помощью прибора Турйооп 9200 УапаЪе1 Мойе 1тадег, и количественно оценивали, используя ПпадеОиаШ 5.0. Используя описанный выше метод, могут быть обнаружены ингибиторы 14а-деметилазы, а также сквален-эпоксидазы, как Д14-редуктазы- и Δ7-Δ8 изомеразы.

Следуя методике, описанной здесь выше, было установлено, что соединения формулы (I) являются ингибиторами сквален-эпоксидазы.

Е. Пример композиции

Активный ингредиент, используемый в этих примерах, относится к соединению формулы (I), включая любую его стереохимически изомерную форму, фармацевтически приемлемую соль или сольват, в частности, к любому из приведенных в качестве примера соединений.

Пример Е1: Раствор для инъекций.

1,8 г метил-4-гидроксибензоата и 0,2 г гидроксида натрия растворяли примерно в 0,5 л кипящей воды для инъекций. После охлаждения до температуры около 50°С добавляли при перемешивании 0,05 г пропиленгликоля и 4 г активного ингредиента. Полученный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду для инъекций ς.δ. около 1 л, получая раствор, содержащий 4 мг/мл активного ингредиента. Раствор стерилизовали фильтрацией и заливали в стерильные контейнеры.

Пример Е2: Композиция для доставки через ноготь.

0,144 г КН₂РО₄, 9 г №С1, 0,528 г №₂НРО₄-2Н₂О добавляли к 800 мл Н₂О и смесь перемешивали. рН доводили до 7,4 с помощью №ЮН и добавляли 500 мг №Ν₃. Добавляли этанол (42 об./об.%) и рН доводили до 2,3 с помощью НС1. Добавляли 15 мг активного ингредиента в 2,25 мл РВ§ (забуференный фос- 38 021220 фатом солевой раствор) /этанол (42%, рН 2,3) и смесь перемешивали и обрабатывали ультразвуком. Добавляли 0,25 мл смеси РВ§/этанол (42%, рН 2,3) и смесь перемешивали и обрабатывали ультразвуком, пока все активные ингредиенты не растворялись, получая желаемую композицию для доставки через ноготь.

Пример Е3: Капли для перорального введения

500 г Ά.Ι. растворяли в 0,5 л раствора гидроксида натрия и 1,5 л полиэтиленгликоля при 60-80°С. После охлаждения до 30-40°С добавляли 35 л полиэтиленгликоля и смесь тщательно перемешивали. Затем добавляли раствор 1750 г сахарина натрия в 2,5 л очищенной воды и при перемешивании добавляли 2,5 л ароматизатора какао и полиэтиленгликоль до объема, равного 50 л, получая раствор для пероральных капель, содержащий 10 мг/мл Ай. Полученный раствор заливали в соответствующие контейнеры.

Пример Е4: Капсулы г А.Г, 6 г лаурилсульфата натрия, 56 г крахмала, 56 г лактозы, 0,8 г коллоидного диоксида кремния и 1,2 г стеарата магния вместе энергично перемешивали. Затем полученную смесь заливали в 1000 подходящих твердых желатиновых капсул, содержащие по 20 мг активного ингредиента.

Пример Е5: Таблетки, покрытые оболочкой

Получение таблеточного ядра

Смесь 100 г А.Г, 570 г лактозы и 200 г крахмала тщательно перемешивали и затем увлажняли раствором 5 г додецилсульфата натрия и 10 г поливинилпирролидона примерно в 200 мл воды. Влажную порошкообразную смесь просеивали, сушили и вновь просеивали. Затем добавляли 100 г микрокристаллической целлюлозы и 15 г гидрогенизированного растительного масла. Всю смесь тщательно перемешивали и прессовали в таблетки, получая 10000 таблеток, каждая из которых содержит 10 мг активного ингредиента.

Покрытие

К раствору 10 г метилцеллюлозы в 75 мл денатурированного этанола добавляли раствор 5 г этилцеллюлозы в 150 мл дихлорметана. Затем добавляли 75 мл дихлорметана и 2,5 мл 1,2,3-пропантриола. 10 г полиэтиленгликоля расплавляли и растворяли в 75 мл дихлорметана. Последний раствор добавляли к первому и затем добавляли 2,5 г октадеканоата магния, 5 г поливинилпирролидона и 30 мл концентрированной суспензии красителя, и всю смесь гомогенизировали. Ядра таблеток покрывали полученной таким образом смесью в аппарате для нанесения покрытия.

Пример Е6: 2% мазь

Стеариловый спирт (75 мг), цетиловый спирт (20 мг), сорбитанмоностеарат (20 мг) и изопропилмиристат (10 мг) вводили в сосуд с рубашкой и нагревали до тех пор, пока смесь полностью не расплавилась. Эту смесь добавляли в отдельно полученную смесь очищенной воды, пропиленгликоля (200 мг) и полисорбата 60 (15 мг), имеющего температуру от 70 до 75°С при использовании гомогенизатора для жидкостей. Полученную смесь охлаждали до температуры ниже 25°С при непрерывном перемешивании. Далее при постоянном перемешивании к эмульсии добавляли раствор А.Г (20 мг), полисорбат 80 (1 мг) и очищенную воду с|.з. ай 1 г и безводный раствор сульфата натрия (2 мг) в очищенной воде. Мазь гомогенизировали и наполняли в подходящие тюбики.

Пример Е7: 2% мазь

Смесь Ай. (2 г), фосфатидилхолина (20 г), холестерина (5 г) и этилового спирта (10 г) перемешивали и нагревали при 55-60°С до полного растворения и добавляли к раствору метилпарабена (0,2 г), пропилпарабена (0,02 г), эдетата динатрия (0,15 г) и хлорида натрия (0,3 г) в очищенной воде (около 100 г) при гомогенизации. Добавляли гидроксипропилметилцеллюлозу (1,5 г) в очищенной воде и продолжали перемешивание до тех пор, пока набухание не завершалось.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы (Ι)

К¹ представляет собой водород, хлор или фтор;

К² представляет собой водород, хлор, фтор или метил;

К³ и К⁴ представляют собой водород;

или К³ и К⁴, взятые вместе, образуют связь;

К⁵ представляет собой 1,1-дифторэтил и

К⁶ представляет собой водород или фтор;

или К⁵ представляет собой водород или фтор и К⁶ представляет собой 1,1-дифторэтил;

- 39 021220 или его фармацевтически приемлемая соль или сольват.
2. Соединение по п.1, где К¹ представляет собой хлор или фтор.
3. Соединение по п.1, где К¹ представляет собой хлор или фтор и где К² представляет собой хлор, фтор или метил.
4. Соединение по п.1, где

К¹ представляет собой хлор или фтор;

К² представляет собой водород, хлор, фтор или метил;

К³ и К⁴, взятые вместе, образуют связь;

К⁵ представляет собой 1,1-дифторэтил и К⁶ представляет собой водород или фтор; или К⁵ представляет собой водород или фтор и К⁶ представляет собой 1,1-дифторэтил.
5. Соединение по п.1, где

К¹ представляет собой хлор или фтор;

К² представляет собой водород;

К³ и К⁴, взятые вместе, образуют связь;

К⁵ представляет собой 1,1-дифторэтил;

К⁶ представляет собой водород.
6. Соединение по п.1, где

К¹ находится в 7 положении и представляет собой хлор или фтор и

К² находится в любых других положениях и представляет собой водород, хлор, фтор или метил.
7. Соединение по п.1, представляющее собой 7-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-6Н-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепин.
8. Соединение по п.1, представляющее собой 7-хлор-4-[4-(1,1-дифторэтил)фенил]-6Н-пирроло[1,2а][1,4]бензодиазепин или его фармацевтически приемлемую соль присоединения или сольват.
9. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики грибковой инфекции, содержащая терапевтически эффективное количество соединения, указанного в любом из пп.1-8 и фармацевтически приемлемый носитель.
10. Применение соединения, указанного в любом из пп.1-8, в качестве лекарственного средства для лечения или профилактики грибковой инфекции.
11. Применение соединения, указанного в любом из пп.1-8, при лечении или профилактике грибковой инфекции.
12. Применение по п.11, где грибковая инфекция вызвана одним или несколькими грибами, выбранными из группы, состоящей из

СапсНЛа зрр.; АзрегдШиз зрр.; Сгуркососсиз пеоЬогтапз; Зрого£Ьг1х зсЬепскИ; Ер1с1егторЛуЬоп Ыоссозит; М^сгозрогит зрр.; Тг1с1юрЬукоп зрр; Гизаг1шп зрр.; РЫготисог зрр.; Мисог С1гс1пе11о1<3ез; РЫгориз зрр.; Ма1аззег1а £иг£иг; АсгетоЛит зрр.; РаесИотусез; Зсори1аг1орз1з; АгСй годгарЫз зрр.; ЗсукаЛсИшп; ЗседозроЛит зрр,; ГглсЛоЭегша зрр.; РепасИЛит зрр.; РепЛЛЛит тагпе££еЛ и ВЛзЬозсЫготусез.
13. Применение по п.11, где грибковая инфекция вызвана одним или несколькими грибами, выбранными из группы, состоящей из

СалсПЭа рагарзИоз^з; АзрегдШиз зрр.; СгурЬососсиз пео£огтапз; ЗрогоиЬЛх зсЬепскИ; ЕрЛ1егторЬу£оп £1оссозит; МЛгозрогит зрр.; ТЛсЬорЪуЬоп зрр.; Гизагтигп зрр.; РЫготисог зрр.; Мисог С1гс1пе11о1с1е5; РЫгориз зрр.; АсгетоЫит зрр.; РаесИотусез; Зсори1аг1орз1з; АЛЬ годгарЫз зрр.; ЗсуЫЛсИит;

3се<3озрог1ит зрр.; Тг1сЬос1егта зрр.; Реп1сИИит зрр.;

РепасИЛит тагпе££е1; и В1аз£озсЫготусез.
14. Применение по п.11, где грибковая инфекция вызвана одним или несколькими грибами, выбранными из группы, состоящей из

Мгсгозрогит сапгз, ТЫсЬорЬуЬол телЬадгорЬуЬез, ТЫсЬорЬуЬоп гиЬгит и АзрегдШиз £ит!даЬиз.