TWI500619B

TWI500619B - 新穎抗真菌性５，６－二氫－４－［（二氟乙基）苯基］－４Ｈ－吡咯并［１，２－ａ］［１，４］苯并二氮呯及４－（二氟乙基）苯基－６Ｈ－吡咯并［１，２－ａ］［１，４］苯并二氮呯衍生物

Info

Publication number: TWI500619B
Application number: TW100119491A
Authority: TW
Inventors: Lieven Meerpoel; Louis Jules Roger Marie Maes; Wit Kelly De
Original assignee: Janssen Pharmaceutica Nv
Priority date: 2010-06-07
Filing date: 2011-06-03
Publication date: 2015-09-21
Also published as: JP6208263B2; JP2016128450A; AP2012006502A0; CN102947307B; JP2019112460A; EA021220B1; ZA201209246B; JP6505176B2; MY156731A; ES2489191T3; UA107963C2; EP2576557A1; WO2011154298A1; US20130085136A1; JP2013528192A; BR112012030895A2; KR101886136B1; NZ602981A; TW201211045A; MX2012014271A

Description

新穎抗真菌性5,6-二氫-4-[(二氟乙基)苯基]-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯及4-(二氟乙基)苯基-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯衍生物

本發明係關於主要對抗癬菌及全身性真菌感染活性之新穎抗真菌性5,6-二氫-4-[(二氟乙基)苯基]-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯及4-(二氟乙基)苯基-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯衍生物。本發明還關於製備此新穎化合物之方法、含有該化合物作為活性成份之醫藥組成物以及該化合物作為藥劑之用途。

癬菌是在動物及人類上經常造成皮膚病的三種真菌類型之俗稱。這些變形(無性或不完美的真菌)屬是：小孢子菌屬(Microsporum )、表皮癬菌屬(Epidermophyton )及毛癬菌屬(Trichophyton )。在這3種菌屬中約有40菌種。

癬菌因為其可以從角化物質得到營養之能力而造成皮膚、頭髮及指甲的感染。生物體拓殖於角蛋白組織且發炎是經由宿主對於代謝副產物的反應而造成。因為其無法穿透免疫活性宿主的存活組織，通常只限制在表皮的角質層。但是，該生物體偶而會侵入皮下組織，導致發生膿癬。侵入引起從溫和至嚴重的宿主反應。報導指出酸性蛋白酶、彈性蛋白酶、角化蛋白酶及其他蛋白酶作用為致病因子。

全身性真菌感染(SFI)是危害生命的情形其最常影響病人免疫力下降而經常導致治療惡性疾病之醫療干預。在現代醫院中的SFI數量持續增加，且牽涉SFI的不同真菌之數量是很大且仍在增加。除了許多情形之侵入性念珠菌及曲黴菌外，持續增加發生因為其他模式例如尖端賽多孢子菌(Scedosporium apiospermum )、鐮刀菌屬(Fusarium spp .)及接合菌(Zygomycetes )、根黴菌(Rhizopus )及毛黴菌屬(Mucor spp .)之感染。治療全部這些感染的有效醫療劑因此必須具有非常寬廣的活性。過去數十年來，伊曲康唑(itraconazole)、氟康唑(fluconazole)、酮康唑(ketoconazole)及靜脈或脂質體兩性黴素B曾經用在SFI，且全部這些藥劑關於範圍、安全或用藥容易性有其限制。最近有第三代的唑類經研發並導入市場，改善在加護病房的治療方案。伏立康唑(Voriconazole(Vfend^TM ))及泊沙康唑(posaconazole(Noxafil^TM ))對於危害生命的侵入性SFI例如念珠菌、曲黴菌、及因為鐮刀菌屬的感染在臨床相關劑量中顯現很大的治療改善。而且泊沙康唑對於新興接合菌屬造成的感染顯現功效。伊奇諾卡丁類(Echinocandins)例如阿尼芬淨(anidulafungin)、卡泊芬淨(caspofungin)及米卡芬淨(micafungin)，其係在真菌細胞壁內的1,3-β-葡聚醣合成之非競爭性抑制劑，對抗念珠菌屬及曲黴菌屬顯現高功效，但是對抗隱球菌(Cryptococcus )、鐮刀菌或接合菌屬沒有活性。全部的抗真菌劑中，唑類仍然代表經由抑制在真菌中麥角固醇生物合成所必需的酶之14-α-脫甲基酶而顯現廣泛殺黴功效之獨特類型化合物。

指甲真菌病是指甲最常見的疾病且構成大約一半的指甲異常。指甲真菌病在成年人口中的盛行率是約6-8%。指甲真菌病的致病病原體包括癬菌、念珠菌及非皮膚癬菌性絲狀真菌。在溫帶西方國家中，癬菌是最常造成指甲真菌病的真菌；而念珠菌及非皮膚癬菌性絲狀真菌則最常牽涉於熱帶及亞熱帶。紅色毛癬菌(Trichophyton rubrum )是牽涉指甲真菌病的最常見皮黴癬菌。可能牽涉的其他癬菌是指間芽孢癬菌(Trichophyton interdigitale )、絮狀表皮癬菌(Epidermophyton floccosum )、紫色毛癬菌(Trichophyton violaceum )、石膏樣小孢子菌(Microsporum gypseum )、斷髮癬菌(Trichophyton tonsurans )、蘇丹毛癬菌(Trichophyton soudanense )及疣狀毛癬菌(Trichophyton verrucosum )。其他致病病原體包括念珠菌及非皮膚癬菌性絲狀真菌，特別是絲狀真菌屬透明柱黴(Scytalidium )(也稱為(Neoscytalidium )、短帚黴(Scopulariopsis )及曲黴菌(Aspergillus )之成員。

5,6-二氫-4H -吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯類經揭示在J. Chem. Soc.(C),2732-2734(1971);J. Heterocyclic Chem.,13 ,711-716(1976)；及J. Heterocyclic Chem.,16 ,241-244(1979)。在這些參考文獻中揭示的化合物在苯基部份的4-位置全都有不同的取代基，且在任何這些參考文獻中都沒有報導生物活性。

WO02/34752揭示4-經取代的5,6-二氫-4H -吡咯并[1,2-a ][1,4]苯并二氮呯類作為一種新的抗真菌化合物。而且，WO02/34752沒有具體地揭示本發明在苯基部份的4-位置上之取代模式。

許多藥劑化合物雖然具有所要的醫療性質，因為其不良的水溶性而使用效率不足。因此例如當此化合物是口服投藥時，通過胃腸道時只有少部份的藥劑溶解在血液中。因此，為了達到足夠的藥劑吸收可能需要投藥更高劑量的藥劑化合物、延長藥劑投藥的期間或經常投藥藥劑化合物。實際上，藥劑之不良溶解性及因此的不良生物利用度可能造成替代藥劑，可能一種具有不要的副作用或一種其需要侵入性投藥(例如經由注射或輸注)，代替不良溶解性的藥劑使用。

因此本發明之目的是生產具有廣泛殺真菌功效的更大生物利用性之化合物或提供有價值的替代化合物，維持適當的高醫療功效及適當的低毒性或其他副作用。

意外地，與先前技藝揭示的化合物比較，本發明之抗真菌性化合物或部份本發明之化合物可具有改良的代謝安定性質、改良的PK(藥物動力學)性質、改良的溶解性、下降的細胞色素P450易患性(liabilities)、或改良的生物利用度。

本發明之化合物可以作為角鯊烯環氧化酶抑制劑使用。

據此本發明之一個目的是提供克服或改善至少其中一個先前技藝的缺點並具有抗真菌活性之新穎化合物，或提供有價值的替代物。

發明概述

經發現本發明之化合物可作為抗真菌性化合物使用。

本發明係關於式(I)之新穎化合物：

及其立體異構物形式，其中R¹ 是氫、氯或氟；R² 是氫、氯、氟或甲基；R³ 及R⁴ 是氫；或R³ 及R⁴ 一起形成一個鍵；R⁵ 是1,1-二氟乙基，且R⁶ 是氫或氟；或R⁵ 是氫或氟，且R⁶ 是1,1-二氟乙基；及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物。

本發明也關於製備式(I)化合物之方法及含彼之醫藥組成物。

本發明之化合物是可以在活體內對抗真菌之有價值藥劑。

本發明揭示之新穎化合物可以用於治療或預防經由癬菌造成的感染、全身性真菌感染及指甲真菌病。

本發明揭示之新穎化合物可以活性對抗多種真菌，例如念珠菌屬例如白色念珠菌(Candida albicans )、光滑念珠菌(Candida glabrata )、克魯司念珠菌(Candida kruce )、近平滑念珠菌(Candida parapsilosis )、乳酒念珠菌(Candida kefyr )、熱帶念珠菌(Candida tropicalis )；曲黴菌屬例如烟曲黴菌(Aspergillus fumigatus )、黑曲黴菌(Aspergillus niger )、黃曲黴菌(Aspergillus flavus )；新型隱球菌(Cryptococcus neoformans )；申克孢子絲菌(Sporothrix schenckii )；絮狀表皮癬菌(Epidermophyton floccosum )；小孢黴菌屬例如犬小孢子菌(Microsporum canis )、石膏樣小孢子菌(Microsporum gypseum )；毛癬菌屬例如鬚毛癬菌(Trichophyton mentagrophytes )、紅毛癬菌(Trichophyton rubrum )、昆克魯毛癬菌(Trichophyton quinckeanum )、斷髮毛癬菌(Trichophyton tonsurans )、疣狀毛癬菌(Trichophyton verrucosum )、紫毛癬菌(Trichophyton violaceum )、間芽孢癬菌(Trichophyton interdigitale )、蘇丹毛癬菌(Trichophyton soudanense )；鐮刀菌屬例如茄鐮刀菌(Fusarium solani )、尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum )、再育鐮刀菌(Fusarium proliferatum )、串珠鐮刀菌(Fusarium verticillioides)；毛黴菌屬例如米黑根毛黴菌(Rhizomucor miehei )、微小根毛黴菌(Rhizomucor pusillus )；卷枝毛黴菌(Mucor circinelloides )；根黴菌屬例如米根黴菌(Rhizopus oryzae )、小孢根黴菌(Rhizopus microspores )；糠秕馬拉色菌(Malassezia furfur )；頂孢黴菌屬(Acremonium spp.)；擬青黴屬(Paecilomyces )；短帚黴(Scopulariopsis )；爪甲白癬菌屬；柱黴屬(Scytalidium )；足放線菌屬例如尖端賽多孢子菌(Scedosporium apiospermum )、多育賽多孢子菌(Scedosporium prolificans )；木黴菌屬(Trichoderma spp.)；青黴菌屬(Penicillium spp .)；馬耳尼菲青黴菌(Penicillium marneffei )；芽生裂殖菌屬(Blastoschizomyces )。

鑑於上述本發明化合物之藥理，其合適作為藥劑使用。

本發明也關於根據式(I)之化合物、其立體異構物形式及藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，用於治療或預防真菌感染。

與先前技藝揭示的化合物比較，本發明化合物或一部份的化合物之一個優點是在其增強的生物利用度、改良的代謝安定性、改良的PK性質、下降的hERG通道抑制性、或下降的細胞色素P450易患性。

現在將進一步揭示本發明。在下面的段落中，更詳細定義本發明的不同方面。除非明確地表示相反，如此定義的各方面可以結合任何其他方面或方面群。具體地說，表示為較佳或有利的任何特性可以與表示為較佳或有利的任何其他特性或特性群結合。

詳細說明

本發明化合物之化學命名是根據Chemical Abstracts Service同意的命名規則使用Advanced Chemical Development,Inc.命名軟體(ACD/Name product version 10.01;Build 15494,1 Dec 2006)產生。

在互變異構物形式之情形中，必須理解其他沒有描述的互變異構物形式也包括在本發明之範圍內。

在三環系統中的原子是如下式(XX)所示而編號：

將可理解部份的式(I)之化合物及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物可以含有一或多個對掌中心且存在為立體異構物形式。

上下文中，「式(I)化合物」係指包括其加成鹽類、溶劑化物及立體異構物。

「立體異構物」、「立體異構物形式」或「立體化學異構物形式」一詞在上下文中交換使用。

本發明包括式(I)化合物之全部立體異構物，不論是純的立體異構物或是二或多種立體異構物之混合物。

對掌異構物是彼此不能重疊的鏡像之立體異構物。一對對掌異構物之1:1混合物是外消旋物或外消旋性混合物。非對掌異構物(或diastereoisomers)為不是對掌異構物之立體異構物，也就是其與鏡像無關。如果一個化合物含有雙鍵，取代基可以是在E或Z組態。如果一個化合物含有經二取代的環烷基，取代基可以是在順或反組態。因此，當化學上可能時，本發明包括對掌異構物、非對掌異構物、外消旋物、E異構物、Z異構物、順異構物、反異構物及其混合物。絕對組態是根據Cahn-Ingold-Prelog系統指定。在不對稱原子之組態是經由R或S指定。其絕對組態還未知的解離化合物，取決於其旋轉平面偏極光的方向，可以用(+)或(-)指定。當一個特定的立體異構物經鑑定時，此係指該立體異構物是實質上沒有，也就是伴有低於50%，較宜低於20%，更宜低於10%，再更宜低於5%，特別是低於2%且最宜低於1%的其他異構物。據此，當式(I)化合物是例如指定為E時，此係指該化合物是實質上沒有Z異構物；當式(I)化合物是例如指定為順時，此係指該化合物是實質上沒有反異構物用於醫療用途時，式(I)化合物之鹽類是彼等其中抗衡離子是藥學上可接受。但是，不是藥學上可接受的酸及鹼之鹽類也可發現用途，例如在製備或純化藥學上可接受的化合物。不論是否為藥學上可接受的全部鹽類，都包括在本發明之範圍內。

在上下文中提到的藥學上可接受的酸及鹼之加成鹽類係指包括式(I)化合物可以形成的醫療活性無毒的酸及鹼之加成鹽形式。藥學上可接受的酸加成鹽可以方便地得自經由將鹼形式用此合適的酸處理。合適的酸包括例如無機酸例如氫鹵酸例如氫氯酸或氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等酸類；或有機酸例如醋酸、丙酸、羥基醋酸、乳酸、丙酮酸、草酸(乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(也就是丁二酸)、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、環己胺基磺酸、水楊酸、對胺基水楊酸、巴莫酸等酸類。相反地，該鹽形式可以經由用合適的鹼處理而轉化成游離鹼形式。

含有酸性質子的式(I)化合物經由用適當的有機及無機鹼處理，也可以轉化成其無毒的金屬或胺加成鹽形式。適當的鹼鹽形式包括例如銨鹽、鹼金屬及鹼土金屬鹽例如鋰、鈉、鉀、鎂、鈣鹽等，與有機鹼例如一級、二級及三級脂族與芳族胺類例如甲胺、乙胺、丙胺、異丙胺、四種丁胺異構物、二甲胺、二乙胺、二乙醇胺、二丙胺、二異丙胺、二正丁胺、吡咯啶、六氫吡啶、嗎福啉、三甲胺、三乙胺、三丙胺、奎寧環、吡啶、喹啉及異喹啉之鹽類；乙二苄胺、N -甲基-D-葡萄糖胺、海巴胺鹽、及與胺基酸例如精胺酸、賴胺酸之鹽類等。相反地，該鹽形式可以經由用合適的酸處理而轉化成游離酸形式。

溶劑化物一詞包括式(I)化合物可以形成的水合物及溶劑加成形式，以及其鹽類。此形式之實例是例如水合物、醇鹽等。

在下面揭示的方法中製備的式(I)化合物可以合成為對掌異構物的混合物形式，特別是掌異構物的外消旋性混合物，其可以根據此項技藝中已知的解離方法彼此分離。一種分離式(I)化合物的對掌異構物形式之方法涉及使用對掌性固相的液體層析法。該純的立體化學異構物形式也可以從適當起始物質之對應純的立體化學異構物形式衍生，先決條件是該反應是以立體專一性發生。較宜如果需要一種專一性立體異構物時，該化合物是經由立體專一性的方法製備。這些方法較宜使用對掌異構性純的起始物質。

在此申請案的架構中，根據本發明之化合物固有地是要包括其化學元素之全部同位素組合。在此申請案的架構中，一個化學元素，特別是當提到關於根據式(I)之化合物時，包括此元素之全部同位素及同位素混合物。例如，當提到氫時，其係指¹ H、² H、³ H及其混合物。

根據本發明之化合物因此固有地包括含有一或多種元素之一或多種同位素，及其混合物，包括放射活性的化合物，也稱為放射標示的化合物，其中一或多個非放射性的原子經其中一種其放射活性的同位素取代。「放射標示的化合物」一詞係指根據式(I)之任何化合物，或其藥學上可接受的鹽，其含有至少一個放射活性的原子。例如，化合物可以用正電子或用發射γ的放射活性同位素標示。對於結合放射性配體之技藝，³ H-原子或¹²⁵ I-原子是要取代的原子之選擇。對於成像，最普遍使用的正電子發射(PET)放射活性同位素是¹¹ C、¹⁸ F、¹⁵ O及¹³ N，其全都是加速器產生且分別具有20、100、2及10分鐘的半衰期。因為這些放射活性同位素的半衰期是此短暫，唯一可行使用他們的機構是當場有加速器可以產生，因此限制期用途。這些最廣泛使用的是¹⁸ F、^99m Tc、²⁰¹ Tl及¹²³ I。這些放射活性同位素的處理，其製造、分離及摻混在分子中，是從事此項技藝者所已知。

具體地說，放射活性的原子是從氫、碳、氮、硫、氧及鹵素選擇。具體地說，該放射活性同位素是選自包括³ H、¹¹ C、¹⁸ F、¹²² I、¹²³ I、¹²⁵ I、¹³¹ I、⁷⁵ Br、⁷⁶ Br、⁷⁷ Br及⁸² Br。

在發明說明書及後續的申請專利範圍中使用時，單數形式的「一」、「一種」及「該」也包括複數參照物，除非文意另有清楚表示。例如「一種化合物」係指一種化合物或一種以上的化合物。

上文所述的用詞及在發明說明書中使用的其他用詞是從事此項技藝者所熟知。

現在將陳述本發明化合物之較佳特性。

本發明係關於式(I)之化合物：

在一個具體實施例中，本發明係關於式(I)化合物及其立體異構物形式，其中R¹ 是氯或氟；R² 是氫、氯、氟或甲基；R³ 及R⁴ 是氫；或R³ 及R⁴ 一起形成一個鍵；R⁵ 是1,1-二氟乙基，且R⁶ 是氫或氟；或R⁵ 是氫或氟，且R⁶ 是1,1-二氟乙基；及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物。

在一個具體實施例中，本發明係關於式(I)化合物及其立體異構物形式，其中R¹ 是氯或氟；R² 是氯、氟或甲基；R³ 及R⁴ 是氫；或R³ 及R⁴ 一起形成一個鍵；R⁵ 是1,1-二氟乙基，且R⁶ 是氫或氟；或R⁵ 是氫或氟，且R⁶ 是1,1-二氟乙基；及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物。

在一個具體實施例中，本發明係關於式(I)化合物及其立體異構物形式，其中R¹ 是氯或氟；R² 是氫、氯、氟或甲基；R³ 及R⁴ 一起形成一個鍵；R⁵ 是1,1-二氟乙基，且R⁶ 是氫或氟；或R⁵ 是氫或氟，且R⁶ 是1,1-二氟乙基；及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物。

在另一個具體實施例中，本發明係關於式(I)化合物及其立體異構物形式，其中R¹ 是氯或氟；R² 是氫；R³ 及R⁴ 一起形成一個鍵；R⁵ 是1,1-二氟乙基；R⁶ 是氫；及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物。

在另一個具體實施例中，本發明係關於任何其他具體實施例或其他具體實施例之任何組合，其中R⁵ 是1,1-二氟乙基且R⁶ 是氫或氟。

在另一個具體實施例中，本發明係關於任何其他具體實施例或其他具體實施例之任何組合，其中R⁵ 是氫或氟且R⁶ 是1,1-二氟乙基。

在另一個具體實施例中，本發明係關於任何其他具體實施例或其他具體實施例之任何組合，其中至少其中一個R¹ 及R² 不是氫。

在一個特定的具體實施例中，本發明係關於任何其他具體實施例或其他具體實施例之任何組合，其中R² 是氫、氯或氟。

在另一個具體實施例中，本發明係關於任何其他具體實施例或其他具體實施例之任何組合，其中R³ 及R⁴ 是氫。

在另一個具體實施例中，本發明係關於任何其他具體實施例或其他具體實施例之任何組合，其中R¹ 或R² 是在7-位置且不是氫。

在另一個具體實施例中，本發明係關於任何其他具體實施例或其他具體實施例之任何組合，其中R¹ 是在7-位置且是氯或氟；特別是R¹ 是在7-位置且是氯。

在另一個具體實施例中，本發明係關於任何其他具體實施例或其他具體實施例之任何組合，其中R¹ 是在7-位置且是氯或氟；特別是R¹ 是在7-位置且是氯；且R² 是在任何其他位置且是氫、氯、氟或甲基；特別是氯、氟或甲基；更特別是氯或氟；再更特別是氯。

在另一個具體實施例中，本發明係關於任何其他具體實施例或其他具體實施例之任何組合，其中R² 是在7-位置且是氯、氟或甲基。

在另一個具體實施例中，本發明係關於任何其他具體實施例或其他具體實施例之任何組合，其中R² 是在7-位置且是氯、氟或甲基；且R¹ 是在任何其他位置且是氫、氯或氟；特別是氯或氟；更特別是氯。

在另一個具體實施例中，本發明係關於任何其他具體實施例或其他具體實施例之任何組合，其中R³ 及R⁴ 一起形成一個鍵。

在另一個具體實施例中，式(I)化合物是選自包括：7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯.HCl，(4S)-7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，(4S)-7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯.HCl，(4R)-7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1，4]-苯并二氮呯，(4R)-7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯.HCl，8,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，8,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯.HCl,8,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，7,8-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，7,8-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯.HCl，7,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，7,9-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，7,8-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，7,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，7,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯.HCl，7,9-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，7,9-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯.HCl，7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，7-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-7-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，9-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-7-甲基-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，9-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-7,9-di氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，10-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-7-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，7-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，9,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-7,9-di氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-9-氟-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-9-氟-5,6-二氫-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯.HCl，7,9-二氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，7-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-9-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-9-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，10-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-7-甲基-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，7-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H -吡咯并[1,2-a ][1,4]-苯并二氮呯，7-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氫-4H -吡咯并[1,2-a ][1,4]-苯并二氮呯.HCl，7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)-3-氟苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，4-[4-(1,1-二氟乙基)-3-氟苯基]-7-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)-3-氟苯基]-9-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，9-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-7-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，4-[4-(1,1-二氟乙基)-3-氟苯基]-7,9-di氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，9-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯，10-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮呯，包括其任何立體化學異構物形式，及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物。

在另一個具體實施例中，式(I)化合物是7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯。

上述有價值的具體實施例之全部可能的組合，視為包含在本發明之範圍內。

本發明也包括製備式(I)化合物及其亞族之方法。

式(I)化合物及其亞族可以經由下面揭示的一系列步驟製備。其通常從可得自商業化供應或經由從事此項技藝者已知的標準方法製備之起始物質製備。本發明之化合物也可以使用從事有機化學技藝者常用的標準合成方法製備。

本發明之化合物可以根據圖示1製備：

圖示1

式(I)化合物其中R³ 及R⁴ 一起形成一個鍵，該化合物是經由式(I-b)代表，可以根據下面在此項技藝中已知的胺成為亞胺的氧化反應從式(I-a)代表的化合物製備。進行這些氧化反應可以經由使式(I-a)化合物與氧化物例如四醋酸鉛或二氧化錳在反應惰性溶劑中反應，例如於鹵化烴類，如二氯甲烷DCM)或三氯甲烷。經由攪拌及隨意地加熱反應混合物，可以增加反應速率。

或者是，式(I-b)化合物可以經由式(II)中間物之分子內環化而製備。在酸例如POCl₃ 存在下，在式(II)中間物中的醯胺可以作為C-親電子劑，導致環閉合。此反應可以在合適的溶劑中進行，例如於DCM。攪拌及加熱可以增加反應速率。

式(I-a)化合物可以從式(IV)中間物製備，經由與式(XI)之酸H⁺ X^- 反應將其轉化成鹽(III)，並使式(III)之鹽與式(XI)之醛在合適的溶劑中，例如醇，如甲醇(MeOH)、乙醇(EtOH)、異丙醇，在升溫下反應，較宜在迴流溫度。

或者是，式(IV)中間物可以先與式(XII)之醛反應且如此形成的亞胺可以在式(XI)之酸H⁺ X^- 存在下環化成式(I-a)化合物。

或者是，式(I-a)化合物可以使用從事此項技藝者熟知的方法經由還原式(I-b)化合物而獲得。

式(II)中間物可以經由式(III)及(XIII)中間物之間的偶合反應而製備。該反應可以在偶合劑存在下進行，例如通常是1-羥基-1H -苯并三唑(HOBT)及N '-(乙基羰基亞胺基)-N,N -二甲基-1,3-丙二胺單鹽酸鹽(EDCI)。該反應可以在鹼例如三乙胺(Et₃ N)及合適的溶劑例如DCM存在下進行。或者是，(XIII)之醯基氯衍生物或(XIII)之反應性酯衍生物也可以在此型反應中使用以製備式(II)中間物。

式(XIII)中間物或其醯基氯或酯衍生物，可以經由從事此項技藝者輕易地製備。

式(III)及(IV)中間物是經由還原式(V)之1-(2-氰基-苯基)吡咯衍生物而製備。可以使用從事此項技藝者熟知的數種方法還原腈官能基，例如：

1. LiAlH₄ /THF[S. Raines,S.Y. Chai and F.P. Palopoli;J. Heterocyclic Chem.,13 ,711-716(1976)]

2. i.雙(2-甲氧基乙氧基)鋁酸鈉(Red-)70% w/w Toluene,RT:ii. NaOH 10%,RT[G.W.H. Cheeseman and S.G. Greenberg;J. Heterocyclic Chem.,16,241-244(1979)]

3a. i. KBH₄ /CF₃ COOH,THF;ii. H₂ O;iii. HCl[P. Trinka,P. Slgel and J. Reiter;J. Prakt. Chem.,338,675-678(1996)]

3b.硼烷-二甲基硫(1:1),THF

4a. RaNi(Raney Nickel)/H₂

4b. RaNi/噻吩溶液/(MeOH/NH₃ )

甚至也可以使用還原腈官能基的其他熟知方法。

式(V)中間物是可得自商業化供應或者是可以輕易地製備，經由例如將式(VI)之2-胺基苄腈衍生物在惰性溶劑例如二烷或四氫呋喃(THF)中，在酸例如4-氯吡啶鹽酸鹽存在下，或在酸性溶劑例如冰醋酸中，在升溫較宜在迴流溫度下，用四氫-2,5-二甲氧基呋喃處理。或者是，式(V)中間物也可以從式(X)中間物製備。通常，式(X)中間物其中鹵基是定義為Br、I、Cl或F，是在鹼例如Cs₂ CO₃ 或NaH存在下，在合適的溶劑例如通常是DMF中，與吡咯反應。

或者是，式(IV)中間物可以經由在合適的溶劑中，例如於THF，用硼烷-二甲基硫(1:1)處理式(VII)中間物而製備。此反應通常可以在例如HCl之酸存在下進行。反應進行後，可以用例如NaOH之合適的鹼將反應混合物鹼化。此反應可以在升溫下進行，較宜在迴流溫度。

式(VII)中間物可以從式(VIII)中間物製備。式(VIII)中間物可以在HOBT及EDCI存在下與氮源反應，例如NH₃ .H₂ O。此種反應通常可以在合適的溶劑中進行，例如於DMF。攪拌反應混合物可以增加反應速率。

式(VIII)中間物可以經由在惰性溶劑中，例如於二烷，在例如4-氯吡啶鹽酸鹽之酸存在下，在升溫較宜在迴流溫度下，用四氫-2,5-二甲氧基呋喃處理式(IX)中間物而輕易地製備。或者是，(IX)之反應性酯衍生物也可以在此種反應中使用以製備式(VIII)中間物。

全部的起始物質是可得自商業化供應或可經由從事此項技藝者輕易地製備。

在全部這些製備中，反應產物可以從反應介質分離，且如果需要時，根據此項技藝中普遍已知的方法進一步純化，例如萃取、結晶、研製及層析。具體地說，立體異構物可以使用對掌性固相例如ChiralpakAD(直鏈澱粉胺基甲酸3,5-二甲基苯酯)或ChiralpakAS層析分離，兩者都購自在日本的Daice1 Chemical Industries,Ltd。

本發明化合物及中間物之純的立體異構物形式可以經由施行此項技藝中已知的方法而獲得。對掌異構物可以用光學活性酸經由選擇性結晶其非對掌異構性鹽而將其彼此分離。或者是，對掌異構物可以使用對掌性固相經由層析技術而分離。該純的對掌異構物形式也可以衍生自合適的起始物質之對應純的利益異構物形式，先決條件是反應是以立體選擇性或立體專一性發生。較宜如果需要特定的立體異構物時，該化合物是經由立體選擇性或立體專一性的製備方法合成。使用對掌性純的起始物質有利於這些方法。式(I)化合物之立體異構物形式明顯是包括在本發明之範圍內。

式(I)化合物之對掌性純的形式形成較佳族群之化合物。因此中間物及其鹽類形式之對掌性純的形式形特別用於製備對掌性純的式(I)化合物。中間物之對掌異構性混合物也可以用於製備具有對應組態之式(I)化合物。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗二形性病原體、癬菌、接合菌、透明絲孢菌、暗色絲孢菌、酵母菌及類酵母菌生物體。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗二形性病原體、酵母菌及類酵母菌生物體。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗黴菌。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗多種真菌，例如念珠菌屬例如白色念珠菌、光滑念珠菌、克魯司念珠菌、近平滑念珠菌、乳酒念珠菌、熱帶念珠菌；曲黴菌屬例如烟曲黴菌、黑曲黴菌、黃曲黴菌；新型隱球菌；申克孢子絲菌；絮狀表皮癬菌；小孢黴菌屬例如犬小孢子菌、石膏樣小孢子菌；毛癬菌屬例如鬚毛癬菌、紅毛癬菌、昆克魯毛癬菌、斷髮毛癬菌、疣狀毛癬菌、紫毛癬菌、間芽孢癬菌、蘇丹毛癬菌；鐮刀菌屬例如茄鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、再育鐮刀菌、串珠鐮刀菌；毛黴菌屬例如米黑根毛黴菌、微小根毛黴菌；卷枝毛黴菌；根黴菌屬例如米根黴菌、小孢根黴菌；糠秕馬拉色菌；頂孢黴菌屬；擬青黴屬；短帚黴；爪甲白癬菌屬；柱黴屬；足放線菌屬例如尖端賽多孢子菌、多育賽多孢子菌；木黴菌屬；青黴菌屬；馬耳尼菲青黴菌；芽生裂殖菌屬。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗多種真菌，例如近平滑念珠菌；曲黴菌屬例如烟曲黴菌、黑曲黴菌、黃曲黴菌；新型隱球菌；申克孢子絲菌；絮狀表皮癬菌；小孢黴菌屬例如犬小孢子菌、石膏樣小孢子菌；毛癬菌屬例如鬚毛癬菌、紅毛癬菌、昆克魯毛癬菌、斷髮毛癬菌、疣狀毛癬菌、紫毛癬菌、間芽孢癬菌、蘇丹毛癬菌；鐮刀菌屬例如茄鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、再育鐮刀菌、串珠鐮刀菌；毛黴菌屬例如米黑根毛黴菌、微小根毛黴菌；卷枝毛黴菌；根黴菌屬例如米根黴菌、小孢根黴菌；頂孢黴菌屬擬青黴屬；短帚黴；爪甲白癬菌屬；柱黴屬；足放線菌屬例如尖端賽多孢子菌、多育賽多孢子菌；木黴菌屬；青黴菌屬；馬耳尼菲青黴菌；芽生裂殖菌屬。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗多種真菌，例如近平滑念珠菌；曲黴菌屬例如烟曲黴菌、黑曲黴菌、黃曲黴菌；新型隱球菌；絮狀表皮癬菌；小孢黴菌屬例如犬小孢子菌、石膏樣小孢子菌；毛癬菌屬例如鬚毛癬菌、紅毛癬菌、昆克魯毛癬菌、斷髮毛癬菌、疣狀毛癬菌、紫毛癬菌、間芽孢癬菌、蘇丹毛癬菌；鐮刀菌屬例如茄鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、再育鐮刀菌、串珠鐮刀菌；毛黴菌屬例如米黑根毛黴菌、微小根毛黴菌；卷枝毛黴菌；根黴菌屬例如米根黴菌、小孢根黴菌；頂孢黴菌屬；擬青黴屬；短帚黴；爪甲白癬菌屬；柱黴屬；足放線菌屬例如尖端賽多孢子菌、多育賽多孢子菌；木黴菌屬；青黴菌屬；馬耳尼菲青黴菌；芽生裂殖菌屬；特別是曲黴菌屬例如烟曲黴菌、黑曲黴菌、黃曲黴菌；新型隱球菌；絮狀表皮癬菌；小孢黴菌屬例如犬小孢子菌、石膏樣小孢子菌；毛癬菌屬例如鬚毛癬菌、紅毛癬菌、昆克魯毛癬菌、斷髮毛癬菌、疣狀毛癬菌、紫毛癬菌、間芽孢癬菌、蘇丹毛癬菌；鐮刀菌屬例如茄鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、再育鐮刀菌、串珠鐮刀菌；毛黴菌屬例如米黑根毛黴菌、微小根毛黴菌；卷枝毛黴菌；根黴菌屬例如米根黴菌、小孢根黴菌；頂孢黴菌屬；擬青黴屬；短帚黴；爪甲白癬菌屬；柱黴屬；足放線菌屬例如尖端賽多孢子菌、多育賽多孢子菌；木黴菌屬；青黴菌屬；馬耳尼菲青黴菌；芽生裂殖菌屬。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗近平滑念珠菌B66126 、烟曲黴菌B42928 、新型隱球菌B66663 、申克孢子絲菌B62482 、犬小孢子菌B68128 、鬚毛癬菌B70554 、紅毛癬菌B68183 、尖端賽多孢子菌IHEM381 7及多育賽多孢子菌IHEM21157 。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗近平滑念珠菌B66126 、烟曲黴菌B42928 、新型隱球菌B6666 3、申克孢子絲菌B62482 、犬小孢子菌B68128 、鬚毛癬菌B70554 、紅毛癬菌B68183 、尖端賽多孢子菌IHEM3817 及多育賽多孢子菌IHEM21157 、米根黴菌IHEM5223 、米黑根毛黴菌IHEM13391 及卷枝毛黴菌IHEM21105 。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗近平滑念珠菌、烟曲黴菌、新型隱球菌、申克孢子絲菌、犬小孢子菌、鬚毛癬菌、紅毛癬菌、尖端賽多孢子菌、多育賽多孢子菌、米根黴菌、米黑根毛黴菌及卷枝毛黴菌。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗近平滑念珠菌、烟曲黴菌、新型隱球菌、申克孢子絲菌、犬小孢子菌、鬚毛癬菌、紅毛癬菌、尖端賽多孢子菌及多育賽多孢子菌；特別是烟曲黴菌、犬小孢子菌、鬚毛癬菌、紅毛癬菌、尖端賽多孢子菌及多育賽多孢子菌。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗多種真菌，例如近平滑念珠菌、曲黴菌屬、新型隱球菌、申克孢子絲菌、小孢子菌屬、鐮刀菌屬、足分枝菌屬；特別是近平滑念珠菌、曲黴菌屬、新型隱球菌、小孢子菌屬、鐮刀菌屬、足分枝菌屬；更特別是曲黴菌屬、新型隱球菌、小孢子菌屬、鐮刀菌屬、足分枝菌屬。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗多種真菌，例如近平滑念珠菌、曲黴菌屬、新型隱球菌、髮癬菌屬、申克孢子絲菌；孢子菌屬、鐮刀菌屬、足分枝菌屬；特別是曲黴菌屬、小孢黴菌屬、髮癬菌屬。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗真菌，例如近平滑念珠菌；曲黴菌屬例如烟曲黴菌、黑曲黴菌、黃曲黴菌；新型隱球菌；申克孢子絲菌；絮狀表皮癬菌；犬小孢子菌；髮癬菌屬例如鬚毛癬菌、紅毛癬菌、昆克魯毛癬菌；特別是近平滑念珠菌；曲黴菌屬例如烟曲黴菌，黑曲黴菌、黃曲黴菌；新型隱球菌；絮狀表皮癬菌；犬小孢子菌；髮癬菌屬例如鬚毛癬菌、紅毛癬菌、昆克魯毛癬菌；更特別是曲黴菌屬例如烟曲黴菌、黑曲黴菌、黃曲黴菌；新型隱球菌；絮狀表皮癬菌；犬小孢子菌；髮癬菌屬例如鬚毛癬菌、紅毛癬菌、昆克魯毛癬菌。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗真菌，例如近平滑念珠菌；曲黴菌屬；新型隱球菌；小孢子菌屬；髮癬菌屬；足分枝菌屬。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗近平滑念珠菌、烟曲黴菌、新型隱球菌、申克孢子絲菌、犬小孢子菌、鬚毛癬菌、紅毛癬菌、尖端賽多孢子菌及多育賽多孢子菌；特別是近平滑念珠菌、烟曲黴菌、新型隱球菌、犬小孢子菌、鬚毛癬菌、紅毛癬菌、尖端賽多孢子菌及多育賽多孢子菌；更特別是烟曲黴菌、新型隱球菌、犬小孢子菌、鬚毛癬菌、紅毛癬菌、尖端賽多孢子菌及多育賽多孢子菌。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗多種感染皮膚、頭髮及指甲之真菌，以及皮下與全身性真菌病原體。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗3種癬菌：毛癬菌屬、小孢子菌屬及皮癬菌屬；特別是對抗毛癬菌屬及小孢子菌屬。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗癬菌及曲黴菌屬；特別是犬小孢子菌、鬚毛癬菌、紅毛癬菌及烟曲黴菌；更特別是犬小孢子菌、鬚毛癬菌及紅毛癬菌。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗鬚毛癬菌、紅毛癬菌及曲黴菌屬；特別是鬚毛癬菌、紅毛癬菌及烟曲黴菌。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗鬚毛癬菌；紅毛癬菌；曲黴菌屬例如烟曲黴菌；鐮刀菌屬；毛癬菌屬；接合菌屬；足分枝菌屬；犬小孢子菌；申克孢子絲菌；新型隱球菌及近平滑念珠菌。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗癬菌。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗烟曲黴菌。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，可以活性對抗多種真菌，例如一或多種上面提到的真菌。

式(I)化合物及其立體異構物形式，以及其藥學上可接受的加成鹽類與溶劑化物，當口服或局部投藥時，是有價值的抗真菌劑。

本發明之化合物可以作為麥角固醇合成抑制劑使用。

基於式(I)化合物之用途，提供一種治療包括人類之溫血動物罹患或預防包括人類之溫血動物罹患任何一種本文提到的疾病之方法。因此，提供式(I)化合物作為藥劑使用。也提供式(I)化合物生產藥劑用於治療真菌感染之用途。也提供式(I)化合物用於治療真菌感染。

在本文使用時，「治療」一詞係指全部的過程，其中可以是減緩、中斷、阻止或停止感染的進展，但是不一定表示完全消除全部的症狀。

本發明係關於根據式(I)之化合物、其立體異構物形式、其藥學上可接受的酸或鹼加成鹽及溶劑化物作為藥劑使用。

本發明也關於根據式(I)之化合物、其立體異構物形式、其藥學上可接受的酸或鹼加成鹽及溶劑化物用於治療或預防真菌感染，特別是經由一或多種本文提到的真菌造成的真菌感染。

本發明也關於根據式(I)之化合物、其立體異構物形式、其藥學上可接受的酸或鹼加成鹽及溶劑化物用於治療真菌感染，特別是經由一或多種本文提到的真菌造成的真菌感染。

本發明也關於根據式(I)之化合物、其立體異構物形式、其藥學上可接受的酸或鹼加成鹽及溶劑化物用於治療或預防特別是治療真菌感染，特別是經由一或多種選自包括本文提到的真菌造成的真菌感染。

本發明也關於根據式(I)之化合物、其立體異構物形式、其藥學上可接受的酸或鹼加成鹽及溶劑化物用於治療或預防真菌感染，其中該真菌感染是經由一或多種選自包括下列的真菌所造成：念珠菌屬；曲黴菌屬；新型隱球菌屬；申克孢子絲菌屬；絮狀表皮癬菌屬；小孢子菌屬；毛癬菌屬；鐮刀菌屬；多變根毛黴菌屬；卷枝毛黴菌；根黴菌屬；糠秕馬拉色菌；頂孢黴菌屬；擬青黴屬；短帚黴；爪甲白癬菌屬；透明柱黴；足分枝菌屬；木黴菌屬；青黴菌屬；馬尼爾菲青黴菌；及芽生裂殖菌屬；特別是其中真菌感染是經由一或多種選自包括下列的真菌所造成：近平滑念珠菌；曲黴菌屬；新型隱球菌；申克孢子絲菌；絮狀表皮癬菌；小孢子菌屬；髮癬菌屬；鐮刀菌屬；根毛黴菌屬；卷枝毛黴菌；根黴菌屬；頂孢黴菌屬；擬青黴屬；短帚黴；爪甲白癬菌屬；透明柱黴；足分枝菌屬；木黴菌屬；青黴菌屬；馬尼爾菲青黴菌；及芽生裂殖菌屬；再更特別是其中真菌感染是經由一或多種選自包括下列的真菌所造成：犬小孢子菌、鬚毛癬菌、紅毛癬菌及烟曲黴菌。

在本發明中揭示的新穎化合物可以用於治療或預防選自包括經由癬菌造成的感染、全身性真菌感染及灰指甲之疾病或情形。

在本發明中揭示的新穎化合物可以用於治療或預防例如經由癬菌造成的感染、全身性真菌感染或灰指甲之疾病或情形。

本發明也關於據式(I)之化合物、其立體異構物形式及其藥學上可接受的酸或鹼加成鹽類與溶劑化物用於製造藥劑之用途。

本發明也關於據式(I)之化合物、其立體異構物形式及其藥學上可接受的酸或鹼加成鹽類與溶劑化物用於製造藥劑供治療或預防特別是治療真菌感染之用途，特別是經由一或多種上述真菌造成的真菌感染。

本發明之化合物可以投藥至哺乳動物，特別是人類用於治療或預防特別是治療真菌感染之用途，特別是經由一或多種上述真菌造成的真菌感染。

基於式(I)之化合物之用途，提供一種治療包括人類的溫血動物罹患或預防包括人類的溫血動物罹患真菌感染之方法，特別是經由一或多種上述真菌造成的真菌感染。

該方法包括投藥，也就是全身或局部投藥，較宜是口服投藥，有效量的式(I)之化合物、其立體異構物形式及其藥學上可接受的酸或鹼加成鹽類與溶劑化物至包括人類的溫血動物。

從事治療此疾病之技藝人士從下面呈現的結果，可以決定每日有效醫療量。每日有效醫療量是從約0.005毫克/公斤至50毫克/公斤，特別是0.01毫克/公斤至50毫克/公斤體重，更特別是從0.01毫克/公斤至25毫克/公斤體重，較宜從約0.01毫克/公斤至約15毫克/公斤，更宜從約0.01毫克/公斤至約10毫克/公斤，再更宜從約0.01毫克/公斤至約1毫克/公斤，最宜從約0.05毫克/公斤至約1毫克/公斤體重。根據本發明化合物在此也指活性成份達到醫療效應所需的量，根據個別情形而變化，當然取決於例如特定的化合物、投藥途徑、病人的年齡及情形、及被治療的特定障礙或疾病。

一種治療方法也包括在每天一及四次攝取之間的方案投藥活性成份。在這些治療方法中，較宜在投藥之前調製根據本發明之化合物。根據本文下面的說明，合適的醫藥調製物是經由已知方法使用熟知且容易取得的成份製備。

雖然活性成份可以單獨投藥，其較宜以醫藥組成物呈現。

本發明也提供組成物用於治療或預防真菌感染，其含有醫療有效量的式(I)化合物及藥學上可接受的載劑或稀釋劑。

載劑或稀釋劑必須是「可接受」，係指與組成物之其他成份相容且不會傷害其接受者。

本發明化合物，其合適治療或預防真菌感染，可以單獨或結合一或多種其他醫療劑投藥。組合醫療包括投藥單一藥學劑量的調製物其含有式(I)化合物及一或多種其他醫療劑，以及在其各自分開之藥學劑量的調製物投藥式(I)化合物及各其他醫療劑。例如，式(I)化合物及醫療劑可以在單一口服劑量調製物例如錠劑或膠囊劑中一起投藥至病人，或各藥劑可以在分開的口服劑量調製物中投藥。

基於其有價值的藥理性質，本發明化合物可以調製成多種醫藥形式供投藥目的使用。根據本發明之化合物，特別是根據式(I)之化合物、其藥學上可接受的酸或鹼加成鹽類、其立體化學異構物形式、或其任何次族群或組合，可以調製成多種醫藥形式供投藥目的使用。合適的組成物可以是經常用於全身性投藥的藥劑之全部組成物。

為了製備本發明之醫藥組成物，將有效量作為活性成份的特定化合物，隨意地在加成鹽的形式，與藥學上可接受的載劑緊密結合，取決於所要製劑的形式，該載劑有多種不同的形式。這些醫藥組成物合宜是單一劑型，特別是供口服、直腸、經皮、不經腸道注射或經由吸入投藥使用。例如在製備口服劑型的組成物時，在口服液體製劑例如懸浮劑、將劑、酏劑、乳劑及溶液之情形下，可以使用任何常用的醫藥介質，例如水、二醇類、由類、醇類等；或在粉劑、丸劑、膠囊劑及錠劑之情形下，可以使用固體載劑例如澱粉、糖類、高嶺土、稀釋劑、潤滑劑、黏著劑、分解劑等。因為其投藥方便，錠劑及膠囊劑代表最有利的口服劑型，在此情形下，明顯是使用固體醫藥載劑。對於不經腸道的組成物，載劑通常包括無菌的水，至少是大部分，雖然可以包括其他成份以幫助溶解度。例如可以製備注射用的溶液，其中載劑包括鹽水溶液、葡萄糖溶液或鹽水與葡萄糖溶液之混合物。含有式(I)化合物之注射用的溶液可以在油中調製以延長作用。合適於此目的之合適的油是例如花生油、芝麻油、棉籽油、玉米油、大豆油、長鏈脂肪酸之合成的甘油酯類及這些與其他油類之混合物。也可以製備注射用的懸浮液，在此情形是使用合適的液體載劑、懸浮劑等。也包括固體形式的製劑，其是要在使用後很快底轉化成液體形式的製劑。在合適經皮投藥之組成物中，載劑隨意地含有穿透助劑及/或合適的溼化劑，隨意地結合少量比例合適的任何天然添加劑，該添加劑對於皮膚不會引起明顯的害作用。該添加劑可以促進投藥至皮膚及/或幫助製備所要的組成物。這些組成物可以在任何方式投藥，例如作為經皮的貼劑、作為點劑、作為軟膏。式(I)化合物之酸或鹼加成鹽，因為其增加的水溶性優於對應的鹼或酸形式，更合適於製備水性組成物。

透指組成物是溶液之形式且載劑隨意地含有穿透助劑其有利於抗真菌劑穿透進入及透過指甲之角質化指層。含水的溶劑介質與輔助溶劑例如含有2至6個碳原子的醇例如乙醇混合。

為了增加醫藥組成物中的式(I)化合物之溶解度及/或安定性，有利於使用α-、β-或γ-環糊精或其衍生物，特別是羥基烷基取代之環糊精，例如2-羥基丙基-β-環糊精或磺醯丁基-β-環糊精。而且輔助溶劑例如醇類可以增加醫藥組成物中根據本發明的化合物之溶解度及/或安定性。

活性成份對於環糊精之比例可以變化很大。例如可以使用1/100至100/1之比例。活性成份對於環糊精之有價值比例是從約1/10至10/1。活性成份對於環糊精之更有價值比例是從約1/5至5/1。

取決於投藥之模式，醫藥組成物含有較宜從0.05至99重量%，更宜從0.1至70重量%，再更宜從0.1至50重量%的式(I)化合物，及從1至99.95重量%，更宜從30至99.9重量%，再更宜從50至99.9重量%的藥學上可接受的載劑，全部的百分比是以組成物之總重量為基準。

對於不經腸道的組成物，也可以包含其他成份以幫助溶解度，例如環糊精。合適的環糊精是α-、β-、γ-環糊精或醚類及其混合的醚類，其中環糊精的無水葡萄糖單元之一或多個羥基經C_1-6 烷基特別是甲基、乙基或異丙基例如隨意甲基化的β-CD；羥基C_1-6 烷基特別是羥基乙基、羥基-丙基或羥基丁基；羧基C_1-6 烷基特別是羧基甲基或羧基-乙基；C_1-6 醯基特別是乙醯基取代。尤其值得註記的是複合劑及/或溶解劑是β-CD，隨意甲基化的β-CD、2,6-二甲基-β-CD、2-羥基乙基-β-CD、2-羥基乙基-γ-CD、2-羥基丙基-γ-CD及(2-羧基甲氧基)丙基-β-CD，且特別是2-羥基丙基-β-CD(2-HP-β-CD)。

混合的醚一詞係指環糊精衍生物其中至少兩個環糊精羥基是經不同的基團醚化例如羥基-丙基及羥基乙基。

使用平均莫耳取代度(M.S .)作為每莫耳無水葡萄糖的烷氧基單元平均莫耳數之測量。平均取代度(D.S .)係指每無水葡萄糖單元經取代的羥基之平均數。M.S .及D.S .值可以經由多種分析技術測定例如核磁共振法(NMR)、質譜法(MS)及紅外光譜法(IR)。取決於使用的技術，對於特定的環糊精衍生物可以得到稍微不同的值。較宜經由質譜法測量，M.S .範圍從0.125至10且D.S .範圍從0.125至3。

口服或直腸投藥的其他合適組成物含有式(I)化合物及一或多種合適的藥學上可接受的水溶性聚合物組成的固體懸浮液之顆粒。

下文中使用的「固體懸浮液」一詞是定義含有至少兩種成份在此也就是式(I)化合物及水溶性聚合物在固態(不同於液態或氣態)之系統，其中一種成份是或多或少平均分散在其他成份或成份群(在含有此項劑中普遍已知的其他藥學上可接受的調製劑之情形，例如塑化劑、防腐劑等)。當各成份之該分散液是在化學或物理上整個一致或均勻或含有在熱動力學上定義為一個相的系統時，此種固態分散液將稱為「固體溶液」。固體溶液較宜是物理系統，因為其中的成份通常容易生物利用至投藥的生物體。此優點可以經由當該固體與液體介質例如胃腸液接觸時容易形成液體溶液而適當地解釋。溶解的容易性可以至少一部份歸因於從固體溶液將成份溶解所需的能量低於從晶體或微晶體固相將成份溶解所需的能量之事實。

「固體分散液」一詞也包括整個均勻性低於固體溶液的分散液。此種分散液不是化學或物理上整個一致或含有一個以上的相。例如，「固體分散液」一詞也係指含有區域或小部份的系統其中無定形、微結晶或結晶的式(I)化合物、或無定形、微結晶或結晶的水溶性聚合物或兩者是或多或少均勻分散在含有水溶性聚合物或式(I)化合物的另一個相中或含有式(I)化合物及水溶性聚合物的固體溶液中。該區域是在經由某些物理特性標示的固體分散液內的部份，體積小，一致且隨意地分佈在整個固體分散液中。

還可以方便地將本發明之抗真菌化合物調製成奈米顆粒之形式，在其表面吸附有足夠量維持有效平均粒子大小低於1000奈米之表面調節劑。有用的表面調節劑咸信包括彼等其物理上黏附至抗真菌劑的表面但是不會化學上鍵結至抗真菌劑。

合適的表面調節劑較宜選自已知的有機及無機藥學賦形劑。此種賦形劑包括多種聚合物、低分子量寡聚物、天然產品及表面活性劑。較佳的表面調節劑包括非離子型及陰離子型表面活性劑。

調製本發明化合物之另一種有價值的方式是涉及醫藥組成物，其中本發明的抗真菌劑是摻混至親水性聚合物並使用此混合物在許多小球粒上作為塗膜，因此得到組成物其可以方便地生產且其合適用於製備醫藥劑型供口服投藥。

該球粒含有中心圓形或球形的核心，親水性聚合物之塗膜、及抗真菌劑與密封塗層。

合適在球粒中作為核心使用的物質有多種，先決條件是該物質是藥學上可接受且具有適當的尺寸及牢固性。此種物質之實例是聚合物、無機物質、有機物質、醣類及其衍生物。

尤其有利的是將上述醫藥組成物調製成單位劑型供投藥方便及劑量一致。在本說明書及申請專利範圍中使用的單位劑型係指合適作為單元劑量之物理上分開的單元，各單元含有經計算使產生所要的醫療效應之預定量的活性成份及所需的藥學載劑。此種單位劑型之實例是錠劑(包括畫線或包衣的錠劑)、膠囊劑、丸劑、栓劑、粉包、糯米劑、注射用的溶液或懸浮液、茶匙劑、湯匙劑等，及其分開的多重劑。

因為根據本發明之化合物是有價值的口服投藥性化合物，含有該化合物之醫藥組成物特別有利於口服投藥。

下面的實例說明本發明。

以下“DCM”係指二氯甲烷；“MeOH”係指甲醇；“LCMS”係指液體層析/質譜法；“HPLC”係指高效能液相層析法；“r.t.”係指室溫；“m.p.”係指熔點；“min”係指分鐘；“h”係指小時；“I.D.”係指內徑；“EtOAc”係指醋酸乙酯；“Et₃ N”係指三乙胺；“EtOH”係指乙醇；“eq.”係指當量；“r.m.”係指反應混合物；“q.s.”足量；“SFC”係指超臨界流體層析法；“THF”係指四氫呋喃；“HOAc”係指醋酸；“DEA”係指二乙胺；“HOBt”係指1-羥基-1H-苯并三唑；“Me₂ S”係指二甲基硫；“Pd(PPh₃ )₂ Cl₂ ”係指二氯雙(三苯基膦)鈀且“EDCI”係指N '-(乙基羰基亞胺基)-N,N -二甲基-1,3-丙二胺單鹽酸鹽。

A.製備中間物實例A1 a-1)製備中間物1

將2-氯-6-(1H -吡咯-1-基)-苄腈(50克，0.2467莫耳)溶解在THF(500毫升)中。將BH₃ 在Me₂ S(27.1毫升，0.2714莫耳)中的10.0 M溶液在室溫逐滴添加至此溶液中。然後將反應混合物攪拌並迴流12小時。隨後，使混合物冷卻至室溫並逐滴加入6 N HCl溶液(47毫升)。將反應混合物在迴流溫度加熱30分鐘。將透明溶液冷卻至0℃並加入NaOH(55.5克)。將混合物用EtOAc及飽和的鹽水萃取。將有機層乾燥(MgSO₄ )，過濾並將溶劑蒸發，得到46.5克產物之游離鹼。隨後，將產物經由HCl/二烷(足量)酸化而得到55克中間物1(97%產量；.HCl)。

a-2)製備中間物1之替代方法

將2-氯-6-(1H -吡咯-1-基)-苄腈(0.08莫耳)在MeOH/NH₃ (250毫升)中的混合物，在MeOH中的4%噻吩溶液(2毫升)存在下，在14℃用Raney Nickel(2克)作為觸媒進行氫化。消耗H₂ (2當量)後，將觸媒過濾並將過濾液蒸發。隨後，加入6 N 2-丙醇/HCl溶液(14毫升)。然後，將溶劑蒸發，得到2-(1H -吡咯-1-基)-苯甲胺及中間物1在HCl-鹽形式(.HCl)之混合物。將此混合物如此不再純化而用在下一個反應步驟。

實例A2 製備中間物2

將4-(1,1-二氟乙基)-苯甲酸(5.05克，27.1毫莫耳)溶解在DCM(100毫升)中。將Et₃ N(10毫升，60.9毫莫耳)、HOBt(3.6克，27.1毫莫耳)、EDCI(5.18克，27.1毫莫耳)及中間物1(6.0克，24.7毫莫耳)加入此溶液中並將反應混合物攪拌過夜。隨後，加入水(足量)並將混合物用DCM萃取。將分離的有機層乾燥(Na₂ SO₄ )，過濾，並將溶劑蒸發。將殘留物經由管柱層析法(石油醚/EtOAc梯度洗提從15/1至10/1)純化。收集產物部份並在真空將溶劑蒸發後得到8.2克中間物2(88.6%產量)。

實例A3 a)製備中間物3

將2-胺基-4,6-二氟苯甲酸(60克，346毫莫耳)、四氫-2,5-二甲氧基呋喃(45.7克，346毫莫耳)及吡啶鹽酸鹽(1:1)(40克，346毫莫耳)在二烷(500毫升)中的混合物加熱至迴流過夜。隨後，將溶劑蒸發並將殘留物溶解在EtOAc(100毫升)中。將此溶液用鹽水及水清洗。將有機層分離，乾燥(MgSO₄ )，過濾並將溶劑蒸發。產量：70克粗中間物3，其如此用在下一個反應步驟。

b)製備中間物4

將NH₃ .H₂ O(100毫升)添加至中間物3、HOBt(47克，346毫莫耳)及EDCI(70克，346毫莫耳)在DMF(300毫升)的溶液中。將反應混合物攪拌過夜。隨後將溶劑蒸發，並將殘留物溶解在EtOAc中。將此有機溶液煙用鹽水及水清洗，然後乾燥(MgSO₄ )並過濾，最後將溶劑蒸發。產量：55克中間物4，其如此用在下一個反應步驟。

c)製備中間物5

將BH₃ .Me₂ S(10 M溶液；40.5毫升，405毫莫耳)添加至中間物4(45克，202.5毫莫耳)在THF(500毫升)的混合物中。將反應混合物在N₂ 氣壓下迴流過夜。隨後將混合物在冰浴上冷卻並加入6 N HCl溶液(10毫升)。將混合物再度迴流30分鐘。將混合物在冰浴上冷卻並加入固體NaOH直到pH>9。將混合物用DCM(2次300毫升)萃取。將有機層分離，合併，乾燥(MgSO₄ )，過濾並將溶劑蒸發。用HCl/2-丙醇將棕色殘留物轉化成其HC1鹽形式(1:1)，得到35克中間物5(71%產量)。

d)製備中間物6

將4-(1,1-二氟乙基)苯甲酸(1.17克，6.13毫莫耳)溶解在DCM(50毫升)中。將Et₃ N(7.3毫升)、HOBt(0.828克，6.13毫莫耳)、EDCI(1.17克，6.13毫莫耳)及中間物5(1.5克，6.13毫莫耳)加入此溶液中，並將反應混合物在室溫攪拌過夜。隨後，將溶劑蒸發並將水加入殘留物中。將水性混合物用DCM萃取。將有機層分離，乾燥(Na₂ SO₄ )，過濾並將溶劑蒸發。產量；1.4克中間物6(60%產量)。

實例4A a)製備中間物7

將3-乙醯基-4-氟苄腈(11.0克，67.4毫莫耳)溶解在N₂ 流動下的(二乙胺基)硫三氟化物(25毫升)中。將溶液加熱至50℃經16小時後倒入NaHCO₃ 溶液(足量)中。將此混合物用EtOAc萃取。將有機層分離，乾燥(Na₂ SO₄ )，過濾並在減壓下將溶劑蒸發。將殘留物在矽膠上經由管柱層析法純化(洗提液：石油醚/EtOAc從30/1至20/1)。收集所要的部份並在真空將溶劑蒸發。產量：10.5克中間物7(84%產量)。

b)製備中間物8

將中間物7(8.2克，5.7毫莫耳)在20% NaOH溶液(50.0毫升)及EtOH(20.0毫升)中的混合物迴流並攪拌過夜。隨後，在真空將混合物濃縮。加入HCl直到pH 2並形成沈澱。將沈澱物過濾並在真空乾燥。將固體如此用在下一個反應步驟。產量：9.2克中間物8。

c)製備中間物9

將中間物1(1.0克，4.2毫莫耳)、中間物8(1.0克，5.0毫莫耳)、Et₃ N(5.0毫升，36毫莫耳)、HOBt(0.62克)及EDCI(0.96克)在DCM(40毫升)中的混合物在室溫攪拌過夜。將所得的混合物用水(3次100毫升)清洗，乾燥(MgSO₄ )，過濾並在減壓下將溶劑蒸發。將殘留物在矽膠上經由管柱層析法純化(洗提液：石油醚/EtOAc從20/1至10/1)。收集所要的部份並在真空將溶劑蒸發。產量：0.9克中間物9(59.6%產量)。

實例A5 a)製備中間物10

將亞硝酸第三丁酯(25克，242毫莫耳)添加至CuCN(21.5克，242毫莫耳)在CH₃ CN(500毫升)的懸浮液中。將混合物加熱至70℃並攪拌15分鐘。隨後，加入2-氯-4-氟-6-硝基-苯胺(23克，121毫莫耳)及CH₃ CN(足量)之混合物，並將所得的棕色溶液在70℃加熱過夜。在真空將溶劑移除。將水(足量)添加至殘留物中並將水性混合物用EtOAc萃取。將分離的有機層乾燥(MgSO₄ )，過濾，並將溶劑蒸發。將殘留物在矽膠上經由管柱層析法純化(洗提液：EtOAc/石油醚1/4)。收集所要的部份並在真空將溶劑蒸發。產量：10克中間物10(41%產量；黃色固體)。

b)製備中間物11

將Fe(11.6克，200毫莫耳)逐份添加至中間物10(10克，50毫莫耳)在HOAc(250毫升)的溶液中。將反應混合物加熱至70℃經1小時，隨後冷卻至室溫。將固體過濾並將溶劑蒸發。將殘留物溶解在EtOAc中，用水性NaHCO₃ 及水清洗。將有機層乾燥(MgSO₄ )，過濾並將溶劑蒸發。產量：6.2克中間物11其如此用在下一個反應步驟。

c)製備中間物12

將中間物11(6克，35毫莫耳)及四氫-2,5-二甲氧基-呋喃(4.66克，35毫莫耳)在HOAc(50毫升)中的溶液在迴流溫度加熱6小時。隨後將溶劑蒸發並將殘留物在矽膠上經由管柱層析法純化(洗提液：DCM)。收集所要的部份並在真空將溶劑蒸發。產量：4.6克中間物12(90%產量)。

d)製備中間物13

將BH₃ .Me₂ S的10M溶液(2毫升；20毫莫耳)添加至中間物12(4.4克，20毫莫耳)在THF(50毫升)的混合物中。將反應混合物在N₂ 氣壓下迴流過夜。隨後，將混合物在冰浴上冷卻並將6 N HCl溶液(10毫升)小心添加至混合物中。然後將溶液再度迴流30分鐘，然後再度在冰浴上冷卻。加入固體NaOH直到pH>9。將混合物用DCM(2次300毫升)萃取。將分離的有機層乾燥(MgSO₄ )，過濾並將溶劑蒸發。用HCl/2-丙醇將棕色殘留物轉化成HCl鹽(1:1)。產量：5克中間物13(96%產量)。

實例A6 a)製備中間物14

在N₂ 氣壓下反應：將4-溴-3-氟苄腈(6.0克，30.00毫莫耳)及(1-乙氧基乙烯基)三丁錫(11.2毫升，33.00毫莫耳)在甲苯(100毫升)中的混合物在室溫攪拌。將Pd(PPh₃ )₂ Cl₂ (0.72克，1.03毫莫耳)加入混合物中，並將反應混合物在迴流溫度下加熱並攪拌過夜。使混合物冷卻並將2 N KF溶液(50毫升)在攪拌下加入混合物中。經30分鐘後，將6 N HCl溶液(100毫升)添加至混合物中，將混合物加熱至70℃並攪拌2小時。將不溶解的物質過濾，並將過濾液用EtOAc(3次80毫升)萃取。將合併的有機層用鹽水清洗，乾燥(MgSO₄ )，過濾，並在真空將溶劑蒸發。產量：4.3克中間物14(88%產量)。

中間物14可以類似於在實例A4中說明的反應方案進一步反應而得到化合物29。

實例A7 a)製備中間物15

將4-氯-2,6-二氟苄腈(1.66克，9.56毫莫耳)、吡咯(0.67克，10毫莫耳)及Cs₂ CO₃ (3.7克，12毫莫耳)在DMF(20毫升)中的混合物攪拌過夜。然後將固體過濾並在減壓下將溶劑移除。將殘留物在矽膠上經由管柱層析法純化(洗提液：EtOAc/石油醚10/1)。收集所要的部份並在真空將溶劑蒸發。產量：1.1克中間物15(15%產量；白色固體)。

中間物15可以類似於在實例A1中說明的反應方案進一步反應而得到化合物32。

B.製備化合物實例B1 a)製備化合物1

將中間物1(9.5克，39.2毫莫耳)及4-(1,1-二氟乙基)-苯甲醛(8.0克，47.0毫莫耳)在EtOH(15毫升)中的混合物攪拌並迴流4小時。隨後，使混合物冷卻並結晶過夜。將沈澱物過濾，用異丙醚清洗並在真空乾燥。產量：8.0克化合物1(52.2%產量)。

b)製備化合物2及化合物3

化合物2 : S對掌異構物；化合物3 : R對掌異構物

經由對掌性SFC(管柱AD 300毫米*50毫米，20微米；移動相：CO₂ /MeOH(0.2% DEA) 60/40；流速；200毫升/分鐘)將化合物1分離成其對掌異構物。收集兩種不同的部份，並用HCl/EtOH 1/1將兩個部份轉化成HCl鹽形式。

產量：3.2克化合物2(20.8%產量；S組態)。

產量：3.0克化合物3(19.6%產量；R組態)。

實例B2 a)製備化合物4

將化合物1(0.334克，0.0009莫耳)及MnO₂ (2.6克，0.0299莫耳)在DCM(15毫升)中的混合物在室溫攪拌96小時。隨後，將沈澱物經由矽藻土過濾並將過濾液蒸發。T將殘留物經由製備級HPLC純化，得到0.19克化合物4(59%)。

b)　替代製備化合物4

將中間物2(4.0克，10.67毫莫耳)溶解在POCl₃ (12毫升)中。將混合物攪拌並迴流過夜。隨後，使混合物冷卻並倒入水中。用NaOH將水性混合物中和至pH 7，然後用DCM萃取。將分離的有機層乾燥(Na₂ SO₄ )，過濾並將溶劑蒸發。將殘留物從EtOH結晶，得到化合物4(56.3%產量)。

實例B3 a)製備化合物18

將中間物6(1.4克，3.71毫莫耳)溶解在POCl₃ (10毫升)中。將混合物攪拌並迴流過夜。隨後，使混合物冷卻並倒入水中。用NaOH將水性混合物中和至pH 7，然後用DCM萃取。將有機層分離，乾燥(MgSO₄ )，過濾並濃縮。將殘留物在矽膠上經由快速管柱層析法純化(洗提液：石油醚/EtOAc 4/1)。收集產物部份並將溶劑蒸發後得到150毫克化合物118(21.6%產量)。

實例B4 a)製備化合物21

將中間物9(0.80克，2.0毫莫耳)溶解在POCl₃ (3毫升)中。將混合物在100℃攪拌過夜。隨後，將反應混合物倒入冰水中。加入NaOH直到pH 8-9。然後將混合物用DCM萃取。將有機層分離，乾燥(Na₂ SO₄ )，過濾並在真空將溶劑蒸發。將殘留物在矽膠上經由管柱層析法純化(洗提液：石油醚/EtOAc從10/1至5/1)。收集所要的部份並在真空將溶劑蒸發。產量：0.510克化合物21(產量68%)。

實例B5 a)製備化合物24

將中間物13(0.52克，2毫莫耳)及4-(1,1-二氟乙基)苯甲醛(0.374克，2毫莫耳)在EtOH(5毫升)中的溶液加熱至迴流經4小時。隨後，使混合物冷卻至室溫，收集固體並乾燥。產量：0.6克化合物24(80%產量；.HCl)。

經由使用在上面實例中揭示的類似反應方案，B製備下面的化合物。‘Co. No.’係指化合物編號。‘Pr.’係指根據化合物合成的方案之實例編號。如果沒有指出鹽形式，該化合物是得到為游離鹼。化合物其中R³ 及R⁴ 是氫，且其在表1中沒有指出特定的立體化學性，是得到為對掌異構物之混合物。

如果經由使用在B1或B5揭示的方案所得的最終化合物沒有完全轉化成HCl鹽形式，經由使用從事此項技藝者已知的方法將化合物轉化成HCl鹽。在典型的方法中，將化合物溶解在溶劑例如2-丙醇中，且隨後逐滴加入在溶劑例如2-丙醇中的HCL溶液。攪拌一段時間通常10分鐘，可以增進反應速率。

表1

C.分析結果 LCMS

HPLC測量是使用Agilent 1100組件含有泵、二極管陣列偵測器(DAD)(使用波長220毫微米)、管柱加熱器及在下面各方法中指出的管柱進行。從管柱的流動是分流至Agilent MSD Series G1946C及G1956A。MS偵測器是配置API-ES(大氣壓力電子噴霧游離法)。經由從100掃描至1000而擷取質譜。毛細管針電壓是2500 V用於正極且3000 V用於負極游離模式。破碎電壓是50 V。乾燥氣體溫度是維持在350℃且流速是10升/分鐘。逆相HPLC是在YMC-Pack ODS-AQ,50x2.0毫米5微米管柱且流速是0.8毫升/分鐘進行。使用2種移動相(移動相A：水含0.1% TFA；移動相B：CH₃ CN含0.05% TFA)。首先，90% A及10% B保持0.8分鐘。然後應用梯度至20% A及80% B在3.7分鐘並保持3分鐘。使用2微升之典型注射體積。爐溫是50℃。(MS極性：正)。

熔點

對於多種化合物，使用購自Shanghai Precision and Scientific Instrument Co. Ltd.的WRS-2A熔點裝置測定熔點(m.p.)。使用線性加熱速率0.2-5.0℃/分鐘測量熔點。報導的值是熔化範圍。最高溫度是300℃。

分析測量的結果是列在表2。

表2：滯留時間(R_t )以分鐘為單位；[M+H]⁺ 波(質子化的分子)，及熔點(熔點在℃).(“n.d.”係指沒有測定；“dec”係指分解)。

¹ H NMR

對於多種化合物，使用氯FORM-d (氘化氯仿CDCl₃ )或DMSO-d ₆ (氘化DMSO，二甲基-d₆ 亞碸)作為溶劑，使用配置標準脈衝序列並分別300 MHz及400 MHz操作之Bruker DPX-300或Bruker DPX-400光譜儀上記錄¹ H NMR光譜。化學位移(δ)是相對於作為內標之四甲基矽烷(TMS)以每百萬組份(ppm)表示。

化合物編號1:(300 MHz,DMSO-d ₆ )δppm 2.01(t,J =18.9 Hz,3 H) 3.87(d,J =14.3 Hz,1 H) 4.57(d,J =13.9 Hz,1 H) 5.35(br. s.,1 H) 5.84(br. s.,1 H) 6.30(t,J =3.2 Hz,1 H) 7.43(br. s.,1 H) 7.57-7.77(m,5 H) 7.90(d,J =8.1 Hz,2 H) 10.45(br. s.,2 H).

化合物編號2:(300 MHz,DMSO-d ₆ )δppm 2.01(t,J =18.93 Hz,3 H) 3.88(d,J =14.32 Hz,1 H) 4.58(d,J =13.94 Hz,1 H) 5.35(br. s.,1 H) 5.84(br. s.,1 H) 6.31(t,J =3.20 Hz,1 H) 7.44(br. s.,1 H) 7.57-7.78(m,5 H) 7.90(d,J =8.10 Hz,2 H) 10.45(br. s.,2 H).

化合物編號3:(300 MHz,DMSO-d ₆ )δppm 2.01(t,J =18.93 Hz,3 H) 3.88(d,J =14.13 Hz,1 H) 4.58(d,J =13.94 Hz,1 H) 5.35(br. s.,1 H) 5.84(d,J =2.64 Hz,1 H) 6.31(t,J =3.20 Hz,1 H) 7.43(dd,J =2.64,1.51 Hz,1 H) 7.56-7.79(m,5 H) 7.90(d,J =7.91 Hz,2 H) 10.40(br. s.,2 H).

化合物編號4:(300 MHz,CDCl₃ )δppm 1.84(t,J =18.08 Hz,3 H) 4.13(br. s.,1 H) 5.44(br. s.,1 H) 6.25-6.54(m,2 H) 7.19-7.24(m,2 H) 7.25-7.35(m,2 H) 7.42(m,J =8.29 Hz,2 H) 7.69(m,J =8.10 Hz,2 H).

化合物編號5:(400 MHz,DMSO-d ₆ )δppm 2.01(t,J =18.97 Hz,3 H) 3.62(d,J =13.32 Hz,1 H) 4.39(d,J =13.32 Hz,1 H) 5.41(br. s.,1 H) 5.88(d,J =2.83 Hz,1 H) 6.30(t,J =3.23 Hz,1 H) 7.40(dd,J =3.03,1.41 Hz,1 H) 7.70(m,J =8.07 Hz,2 H) 7.80(d,J =2.42 Hz,1 H) 7.91(m,J =8.07 Hz,2 H) 8.07(d,J =2.42 Hz,1 H) 10.26(br. s.,1 H) 10.66(br. s.,1 H).

化合物編號6:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 1.93(t,J =18.1 Hz,3 H) 4.28(d,J =11.0 Hz,1 H) 4.87(d,J =11.0 Hz,1 H) 6.47(br. s.,1 H) 6.57(br. s.,1 H) 7.41-7.66(m,5 H) 7.88(d,J =7.8 Hz,2 H).

化合物編號8:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 1.92(t,J =18.2 Hz,3 H) 4.08(d,J =11.3 Hz,1 H) 5.46(d,J =11.3 Hz,1 H) 6.38-6.46(m,1 H) 6.51(d,J =2.5 Hz,1 H) 7.34(d,J =8.5 Hz,1 H) 7.39(d,J =8.5 Hz,1 H) 7.46-7.58(m,3 H) 7.87(d,J =8.3 Hz,2 H).

化合物編號9:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 1.92(t,J =18.2 Hz,3 H) 4.16(br. s.,1 H) 5.49(br. s.,1 H) 6.38-6.57(m,2 H) 7.30(d,J =2.0 Hz,1 H) 7.34(br. s.,1 H) 7.41(d,J =1.8 Hz,1 H) 7.51(m,J =8.3 Hz,2 H) 7.76(m,J =8.3 Hz,2 H).

化合物編號10:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 1.95(t,J =18.3 Hz,3 H) 4.46(br. s.,1 H) 5.82(br. s.,1 H) 6.80(dd,J =4.3,2.8 Hz,1 H) 7.04(dd,J =4.3,1.5 Hz,1 H) 7.29(d,J =8.8 Hz,1 H) 7.66(d,J =8.5 Hz,1 H) 7.69(d,J =8.3 Hz,2 H) 7.79-7.85(m,1 H) 7.90(d,J =8.3 Hz,2 H).

化合物編號11:(300 MHz,DMSO-d ₆ )δppm 2.01(t,J =18.8 Hz,3 H) 3.59(d,J =14.3 Hz,1 H) 4.57(d,J =14.3 Hz,1 H) 5.44(br. s.,1 H) 5.91(br. s.,1 H) 6.32(t,J =3.2 Hz,1 H) 7.42(br. s.,1 H) 7.65-7.79(m,3 H) 7.83(d,J =7.9 Hz,2 H) 7.89(d,J =8.7 Hz,1 H).

化合物編號13:(300 MHz,DMSO-d ₆ )δppm 2.01(t,J =19.0 Hz,3 H) 3.83(d,J =14.3 Hz,1 H) 4.53(d,J =13.9 Hz,1 H) 5.42(br. s.,1 H) 5.83(br. s.,1 H) 6.30(t,J =3.0 Hz,1 H) 7.49(br. s.,1 H) 7.70(d,J =7.9 Hz,2 H) 7.77-7.94(m,4 H) 10.42(br. s.,2 H).

化合物編號14:(300 MHz,CDCl₃ )δppm 1.90(t,J =18.1 Hz,3 H) 4.17(br. s.,1 H) 5.50(br. s.,1 H) 6.43-6.55(m,2 H) 7.22-7.30(m,2 H) 7.30-7.45(m,3 H) 7.56(d,J =7.5 Hz,1 H) 7.76(d,J =7.9 Hz,1 H) 7.84(s,1 H).

化合物編號15:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 1.92(t,J =18.2 Hz,3 H) 4.74(s,2 H) 6.43-6.51(m,1 H) 6.53(dd,J =3.8,1.5 Hz,1 H) 7.09(t,J =8.3 Hz,1 H) 7.18(d,J =8.3 Hz,1 H) 7.35(td,J =8.1,5.9 Hz,1 H) 7.39-7.43(m,1 H) 7.52(m,J =8.3 Hz,2 H) 7.78(m,J =8.3 Hz,2 H).

化合物編號16:(300 MHz,CDCl₃ )δppm 1.93(t,J =18.18 Hz,3 H) 2.60(s,3 H) 4.13(br. s.,1 H) 5.17(br. s.,1 H) 6.42-6.53(m,2 H) 7.20(d,J =1.88 Hz,1 H) 7.24(d,J =1.88 Hz,1 H) 7.33-7.40(m,1 H) 7.52(m,J =8.29 Hz,2 H) 7.75(m,J =8.29 Hz,2 H).

化合物編號18:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 1.92(t,J =18.1 Hz,3 H) 4.69(br. s.,2 H) 6.45-6.49(m,1 H) 6.49-6.53(m,1 H) 6.84(td,J =9.0,2.4 Hz,1 H) 6.95(dt,J =9.0,1.9 Hz,1 H) 7.33(dd,J =2.8,1.5 Hz,1 H) 7.51(m,J =8.3 Hz,2 H) 7.75(m,J =8.3 Hz,2 H).

化合物編號20:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 2.00(t,J =18.6 Hz,3 H) 4.77(br. s.,2 H) 6.53(br. s.,1 H) 6.59(br. s.,1 H) 7.06-7.26(m,3 H) 7.33-7.44(m,1 H) 7.47(br. s.,1 H) 7.90(br. s.,1 H) 7.95(d,J =6.5 Hz,1 H).

化合物編號21:(300 MHz,CDCl₃ )δppm 2.01(t,J =18.6 Hz,3 H) 4.24(br. s.,1 H) 5.62(br. s.,1 H) 6.50-6.79(m,2 H) 7.16-7.33(m,2 H) 7.38(t,J =7.9 Hz,1 H) 7.43-7.62(m,2 H) 7.85-8.15(m,2 H).

化合物編號22:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 1.92(t,J =18.1 Hz,3 H) 4.24(d,J =11.3 Hz,1 H) 4.82(d,J =11.3 Hz,1 H) 6.39-6.46(m,1 H) 6.49(dd,J =3.9,1.4 Hz,1 H) 7.37(d,J =8.0 Hz,1 H) 7.44(d,J =8.3 Hz,1 H) 7.51(m,J =8.3 Hz,2 H) 7.55(dd,J =2.8,1.5 Hz,1 H) 7.83(m,J =8.5 Hz,2 H).

化合物編號23:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 2.00(t,J =18.6 Hz,3 H) 5.03(br. s.,2 H) 6.45-6.52(m,2 H) 6.85(td,J =9.0,2.4 Hz,1 H) 6.95(d,J =9.3 Hz,1 H) 7.07-7.18(m,1 H) 7.33(t,J =2.1 Hz,1 H) 7.69-7.81(m,1 H) 7.92(dd,J =7.3,2.0 Hz,1 H).

化合物編號24:(400 MHz,DMSO-d ₆ )δppm 2.01(t,J =18.97 Hz,3 H) 3.83(d,J =14.13 Hz,1 H) 4.54(d,J =14.13 Hz,1 H) 5.41(br. s.,1 H) 5.85(br. s.,1 H) 6.32(t,J =3.43 Hz,1 H) 7.46(br. s.,1 H) 7.65(dd,J =9.28,2.42 Hz,1 H) 7.67-7.74(m,3 H) 7.85(d,J =807.00 Hz,2 H) 10.15(br. s.,1 H) 10.44(br. s.,1 H).

化合物編號25:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 1.99(t,J =18.4 Hz,3 H) 4.14(br. s.,1 H) 5.45(br. s.,1 H) 6.44-6.55(m,2 H) 7.05-7.17(m,1 H) 7.30(d,J =2.0 Hz,1 H) 7.34(t,J =2.3 Hz,1 H) 7.41(d,J =2.0 Hz,1 H) 7.71-7.83(m,1 H) 7.91(dd,J =7.3,2.3 Hz,1 H).

化合物編號26:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 1.99(t,J =18.3 Hz,3 H) 4.12(br. s.,1 H) 5.44(br. s.,1 H) 6.42-6.55(m,2 H) 7.05(dd,J =8.9,2.4 Hz,1 H) 7.09-7.20(m,2 H) 7.33(t,J =2.1 Hz,1 H) 7.72-7.83(m,1 H) 7.92(dd,J =7.3,2.3 Hz,1 H).

化合物編號27:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 1.92(t,J =18.2 Hz,3 H) 4.16(br. s.,1 H) 5.47(br. s.,1 H) 6.42-6.55(m,2 H) 7.04(dd,J =8.9,2.4 Hz,1 H) 7.16(dd,J =8.3,2.5 Hz,1 H) 7.29-7.36(m,1 H) 7.51(m,J =8.3 Hz,2 H) 7.76(m,J =8.0 Hz,2 H).

化合物編號28:(300 MHz,CDCl₃ )δppm 1.91(t,J =18.2 Hz,3 H) 2.59(s,3 H) 4.04(d,J =11.1 Hz,1 H) 5.11(d,J =11.1 Hz,1 H) 6.33-6.44(m,1 H) 6.44-6.53(m,1 H) 7.12(d,J =8.3 Hz,1 H) 7.33(d,J =8.1 Hz,1 H) 7.45-7.58(m,3 H) 7.84(d,J =8.1 Hz,2 H).

化合物編號29:(300 MHz,CDCl₃ )δppm 2.00(t,J =18.9 Hz,3 H) 4.20(br. s.,1 H) 5.53(br. s.,1 H) 6.42-6.50(m,1 H) 6.50-6.56(m,1 H) 7.28-7.35(m,2 H) 7.37(dd,J =2.8,1.7 Hz,1 H) 7.38-7.43(m,1 H) 7.46-7.63(m,3 H).

化合物編號30:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 2.00(t,J =18.6 Hz,3 H) 4.73(br. s.,2 H) 6.42-6.49(m,1 H) 6.50-6.57(m,1 H) 7.09(t,J =8.5 Hz,1 H) 7.18(d,J =8.0 Hz,1 H) 7.31-7.41(m,2 H) 7.47-7.61(m,3 H).

化合物編號31:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 2.00(t,J =18.4 Hz,3 H) 4.14(br. s.,1 H) 5.48(br. s.,1 H) 6.44-6.51(m,1 H) 6.51-6.59(m,1 H) 7.04(dd,J =8.9,2.4 Hz,1 H) 7.17(dd,J =8.3,2.3 Hz,1 H) 7.34(dd,J =2.8,1.5 Hz,1 H) 7.54(d,J =3.3 Hz,3 H).

化合物編號32:(300 MHz,CDCl₃ )δppm 1.92(t,J =18.1 Hz,3 H) 4.70(br. s.,2 H) 6.43-6.55(m,2 H) 7.11(dd,J =8.6,1.8 Hz,1 H) 7.18-7.23(m,1 H) 7.31-7.39(m,1 H) 7.51(m,J =8.3 Hz,2 H) 7.74(m,J =8.1 Hz,2 H).

化合物編號33:(400 MHz,DMSO-d ₆ )δppm 2.02(t,J =18.97 Hz,3 H) 4.57(br. s.,2 H) 6.55(t,J =3.23 Hz,1 H) 6.59(dd,J =3.84,1.41 Hz,1 H) 7.36(td,J =9.49,2.42 Hz,1 H) 7.40-7.48(m,1 H) 7.51-7.58(m,2 H) 7.62(t,J =7.87 Hz,1 H) 7.81(dd,J =2.62,1.41 Hz,1 H).

化合物編號34:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 1.88-2.10(m,3 H) 4.42(br. s.,1 H) 4.78(br. s.,1 H) 6.45-6.50(m,2 H) 7.12(dd,J =10.0,8.8 Hz,1 H) 7.29(dd,J =8.0,2.0 Hz,1 H) 7.36(t,J =2.3 Hz,1 H) 7.40(d,J =2.0 Hz,1 H) 7.42(d,J =8.0 Hz,1 H) 7.69-7.79(m,1 H) 7.93(dd,J =7.4,2.1 Hz,1 H).

化合物編號35:(400 MHz,CDCl₃ )δppm 1.93-2.06(m,3 H) 4.27(d,J =11.3 Hz,1 H) 4.86(d,J =11.0 Hz,1 H) 6.39-6.45(m,1 H) 6.49(dd,J =3.6,1.4 Hz,1 H) 7.13(dd,J =10.2,8.9 Hz,1 H) 7.24(t,J =8.0 Hz,1 H) 7.41-7.46(m,1 H) 7.48(dd,J =8.2,1.4 Hz,1 H) 7.59(dd,J =2.6,1.4 Hz,1 H) 7.79-7.89(m,1 H) 8.03(dd,J =7.3,2.3 Hz,1 H).

D.　藥理實例實例D.1：活體外測量抗真菌活性

在96-槽平板(U-底，Greiner Bio-One)上進行標準易感性檢測。20毫莫耳濃度化合物儲備溶液之序列稀釋(2-倍或4-倍)是在100% DMSO中進行，隨後在水中進行中間物稀釋步驟。然後將這些序列稀釋液(10微升)點滴在測試平板上，在4℃的黑暗中儲存最長達2週。包含足夠寬的劑量範圍且64微莫耳濃度是最高的測試濃度。將培養基RPMI-1640輔以L-谷氨醯胺、2%葡萄糖並用pH 7.0±0.1之3-(N-嗎福啉基)-丙磺酸(MOPS)緩衝化。

將不同的真菌菌種/分離物(表3a)凍存並在剛要使用前在介質中稀釋1/1000倍。然後將200微升含有10³ 菌落形成單位(cfu)之標準接種添加至各槽內。將正對照組(100%生長=真菌培養基無抗真菌劑)及負對照組(0%生長=RPMI-MOPS介質)包含在各平板上。最適培養時間及溫度是取決於真菌菌種且變化從24小時對於酵母菌(37℃)至一週或更長對於癬菌(27℃)。加入10微升0.005%(w/v)刃天青(resazurin)(Sigma Aldrich)至各槽後，根據存活的細胞將非螢光藍刃天青轉化成粉紅且螢光的刃天青，經額外的培養時間(在表3a中提到的‘resa’時間)容許螢光讀取(λ_ex 550毫微米及λ_em 590毫微米)之原理，測量真菌生長之抑制作用。結果以pIC₅₀ 值列在表3b。

表3a ：不同真菌菌種之培養條件。‘Resa time’代表添加刃天青至測試系統後，額外的培養時間。

表3b ：測試化合物在活體外的活性

對於化合物1、3、4、6、9、14-21、23、25-33，測定感染‘L’之pIC₅₀ 值，且是<4.19。

實例D.2：溶解度

‘UPLC’係指超高效能液體層析法；‘HPBCD’係指2-羥基丙基-β-環糊精。

使用微量天平正確秤重通常在2毫克及4毫克之間的化合物量並添加至0.5毫升在20毫升透明玻璃小瓶內的下面其中一種緩衝液中：

A) 0.01 N HCl

B)緩衝液pH 4：磷酸鹽(0.2 M)-檸檬酸鹽混合物(0.1 N)根據Mc Ilvaine’s緩衝液)

C)緩衝液pH 4，含有10%(w/v) of HPBCD

D)緩衝液pH 4，含有20%(w/v) of HPBCD

E)緩衝液pH 7.4：磷酸鹽(0.2 M)-檸檬酸鹽混合物(0.1

N)根據Mc Ilvaine’s緩衝液)

F)緩衝液pH 7.4，含有10%(w/v) of HPBCD

G)緩衝液pH 7.4，含有20%(w/v) of HPBCD

將一個磁鐵攪拌棒添加至混合物中。將混合物在環境溫度攪拌至少2小時且隨後目視檢查。

如果化合物溶解，報導結果(兩倍化合物秤重量/毫升)。

如果化合物不溶解，將0.5毫升額外溶劑添加至懸浮液中。將混合物在環境溫度再攪拌至少2小時，隨後檢查。

如果化合物溶解，報導結果(化合物秤重量/毫升)。

如果化合物不溶解，將1毫升額外溶劑吸取至懸浮液中。在環境溫度搖動混合物(Edmund Buhler SM25 175 SPM)過夜且隨後檢查。

如果化合物溶解，報導結果(一半化合物秤重量/毫升)。

如果化合物不溶解，將懸浮液經由濾紙盤過濾。將等份量的過濾液用適當的溶劑(0.1 N HCl/乙腈1/1)稀釋並使用通用的UPLC方法進行濃縮測量(毫克/毫升)。

表4：

實例D.3：活體內藥物動力學測定(生物利用度)

每個劑量途徑、時間點及調製物使用三隻動物(平均重量20±7克對於小鼠且275±20克對於天竺鼠)。

對於口服(PO)溶液調製物，在最終濃度是1毫克/毫升將化合物溶解在20%羥基丙基-β-環糊精(HP-β-CD)溶液。加入HCl促進溶解。溶解後，用NaOH使pH上升至3.7。加入甘露醇使溶液等滲性。對於PO懸浮液調製物，在最終濃度是1毫克/毫升將化合物懸浮在0.5%美多秀。將調製物在室溫儲存，避光並在製備當天用LC-MS/MS定量分析。在給藥當天檢查逃至物之安定性。

經由胃插管在10毫升/公斤口服給藥至動物而得到最終劑量10毫克/公斤。在以溶液PO劑量投藥後15及30分鐘、1、2、3、4、6、8及24小時及以懸浮液PO劑量投藥後30分鐘、1、2、4、6、8及24小時，將三隻給藥動物犧牲以分別採血。

從尾靜脈經由多次取樣將血液收集至600 K3E試管(Sarstedt)內。將樣本立即放在約4℃並在4℃在約1900 x g離心10分鐘而得到血漿。分析前將全部樣本免受日光並儲存在-18℃。

使用合格的研究用LC-MS/MS方法分析血漿樣本之給藥的化合物。方法之關鍵分析表現(線性、定量的上下限、精確度及準確度)是與血漿濃度一起報導。

使用WinNonlin^TM Professional(Version 5.2.1)進行限制性藥物動力學分析。

非房事模型分析使用lin/log梯形規則且lin/log插入法用於全部的數據。

表5：

實例D.4：活體內測量抗真菌活性通則

在下述測試中使用的動物是雌性天竺鼠(Duncan-Hartley,Charles River,200克)。將這些動物2或3隻一組關在56x33x20公分³ 的籠子內。除了每天少量乾草之外，食物丸粒(Carfil Quality)及水無限制供應。採用標準的畜牧條件：室溫：22℃，濕度：60%且日照週期是12小時。

對於接種液之製備，接種前將犬小孢子菌(菌株B68128)在Sabouraud Dextrose Agar(SDA)平板上生長至少一週(7-10天)(27℃)。感染當天，經由在平板上加入4-5毫升無菌的水而收取孢子並用彎曲的巴司德吸管懸浮感染物質。在再度收集的液體，將10微升添加至KOVA計數腔內供測定在1平方(平均數個平方)中的孢子數量。如果需要時，製備額外的稀釋液(10 x或100 x)。在1平方中的孢子數量x稀釋液x 90.000=cfu/毫升。在蜂蜜-水混合物(50%-50%)中製備1 x 10⁷ cfu/毫升之接種液。

在下述的測試中，根據不同的臨床參數，提供半定量損傷評分。根據損傷之嚴重度及面積，指定0及3.5之間的評分。評定標準詳細列在表6。

表6 ：半定量皮膚損傷評分之標準

測試D.4.1：在不同的劑量下在天竺鼠口服處理連續7天後，化合物4及化合物14對抗犬小孢子菌之活性。 人工感染方法

將天竺鼠之背刮毛並在用鋼刷刺之前用乳液再脫毛3分鐘。使用配置丟棄式尖端的微量吸管將在150微升(75微升mQ+75微升蜂蜜)中的10⁶ cfu接種液施加至傷口。使動物保持不動直到接種液完全乾燥。

調製物

媒劑：美多秀(methocel) 0.5%、Tween 80(聚山梨醇酯80)、去離子水

參考化合物：伊曲康唑在6.25毫克/毫升

測試化合物：在25毫克/毫升製備，隨後再稀釋劑量及實驗族群

感染前約2小時開始口服處理(每天灌胃0.16毫升/100克)且每天一次經7個連續天。處理後3天秤重動物以調整劑量。

G1：媒劑處理的感染對照組(VIC)　(2隻動物)

G2：特比萘芬(10毫克/公斤)　(大量實驗之平均值)

G3：伊曲康唑(10毫克/公斤)　(2隻動物)

G4：化合物4(40毫克/公斤)　(2隻動物)

G5：化合物4(10毫克/公斤)　(3隻動物)

G6：化合物4(5毫克/公斤)　(3隻動物)

G7：化合物14(40毫克/公斤)　(3隻動物)

G8：化合物14(20毫克/公斤)　(3隻動物)

G9：化合物14(10毫克/公斤)　(3隻動物)

感染之監測

在3、5、7、10、12、14、17及20天根據半定量傷害評分系統(見表6)評定傷害之發展。結果列在表7(“DPI”係指感染後的天數)。在表7中的報導值是平均值。

表7

從表7，得到的結論是用媒劑處理的受感染對照組(G1)發展感染的正常歷程，也就是約5天後第一次損傷，最大嚴重度約在第12天。天竺鼠在實驗結束(第20天)都顯現部份白色指標。

用伊曲康唑(10毫克/公斤)處理的動物(G3)沒有發生任何損傷。

對於測試化合物，可看出明顯的劑量反應。化合物4在40毫克/公斤(G4)明顯比特比萘芬組(G2)更有活性。G5及G7組之活性是相當於G2。

為了比較起見，在R⁵ 或R⁶ 位置沒有1,1-二氟乙基部份的2種化合物，在類似的方案中比較：

人工感染方法

將天竺鼠之背刮毛並在用鋼刷刺之前用乳液再脫毛3分鐘。使用配置丟棄式尖端的微量吸管將在200微升(100微升mQ+100微升蜂蜜)中的10⁶ cfu接種液施加至傷口。使動物保持不動直到接種液完全乾燥。

調製物

媒劑：美多秀F4M Premium EP、Tween 80(聚山梨醇酯80)、去離子水。

測試化合物：在30毫克/毫升製備，隨後進一步稀釋至6毫克/毫升。

給藥及實驗族群

感染前約2小時開始口服處理(每天一次灌胃0.40毫升/天竺鼠)且每天一次經7個連續天。

感染之監測

在3、5、7、10、12、14、18及21天根據半定量傷害評分系統(見表6)評定傷害之發展。結果列在表8。在表8中的報導值是平均值。

表8

在G10及G11使用的化合物顯現部份活性。但是及在在更高的劑量(50毫克/公斤)，在G10及G11使用的化合物顯現活性低於在G7及G4使用的本發明化合物14及4(兩者都在40毫克/公斤)。

實例D.5：角鯊烯-環氧化酶抑制作用

使用白色念珠菌之亞細胞組份，發展出一種方法可以定量化學化合物在麥角固醇生物合成不同階段之效應。

將菌株B2630之白色念珠菌在含有100毫升CYG介質(0.5%酪蛋白水解物、0.5%酵母菌萃取物及0.5%葡萄糖)在旋轉搖動器上的500毫升Erlenmeyer燒瓶中在37℃有氧生長24小時。此培養階段後，使用1毫升的等份試樣接種另100毫升CYG介質。如上述使細胞生長8小時。使用5毫升此8小時-培養液接種在500毫升Erlenmeyer燒瓶中的200毫升PYG介質(1%聚蛋白腖、1%酵母菌萃取物及4%葡萄糖)。使細胞在30℃及固定培養基生長8小時並在100 rpm的旋轉搖動器中再培養8小時。

培養後，經由離心(5分鐘在1500 g)收集酵母菌細胞並用冰冷的生理食鹽水清洗兩次。將細胞再度懸浮在15毫升均勻緩衝液(在100毫莫耳濃度磷酸鉀緩衝液pH 7.4中的30毫莫耳濃度菸鹼醯胺、5毫莫耳濃度MgCl₂ 及5毫莫耳濃度還原的穀胱甘肽)中並倒入冰冷含40毫升玻璃珠之80毫升Bead-Beater接受液中。將Bead-Beater的外套層填滿冰冷的水。在間歇冷卻下將細胞均勻化3次經1分鐘。將均勻液在4℃及8000g 離心20分鐘。經由Bio-Rad方法測量8000g 上清液之蛋白質濃度。Bio-rad方法是一種快速的蛋白質測量。其係一種根據Bradford之方法，基於染料反應不同蛋白質濃度而有不同顏色變化之染料-結合測試法。在典型的測試法中，將0.1毫升經適當稀釋的樣本與5.0毫升染料試劑混合。產生的藍綠色經由光度計在595奈米讀取。使用10-150微克γ球蛋白製備標準曲線。

¹⁴ C甲羥戊酸摻混是在含有最終體積是1毫升：900微升S8000部份(蛋白質4毫克/毫升)、3毫莫耳濃度MgCl₂ 、2毫莫耳濃度MnCl₂ 、5.4毫莫耳濃度ATP、1.38毫莫耳濃度NADH、1.5毫莫耳濃度NADPH、0.3 μCi¹⁴ C-甲羥戊酸及10微升藥劑及/或溶劑之反應混合物中測量。在120 spm(每分鐘閃爍)的往復式搖動器中在30℃培養2小時，經由加入1毫升在90%乙醇中的15%KOH將反應停止。在80℃皂化1小時並冷卻，用3毫升正庚烷萃取不能皂化的油脂並將萃取液在氮氣流動下乾燥。使用75體積HIA(正庚烷/二異丙醚/醋酸，60/40/4，v/v/v)及25體積醋酸乙酯組成的溶劑系統經由TLC(Silicagel 60F₂₅₄ ,Merck)將油脂分離。經由磷-成像，用Typhoon 9200 Variabel Mode Imager掃描將油脂部份顯形並使用ImageQuant 5.0軟體定量。使用上述方法，可以偵測作為Δ14還原酶之14α-去甲基酶及角鯊烯-環氧化酶-及Δ7-Δ8異構物酶抑制劑。

根據上面陳述的方案，測定根據式(I)之化合物是角鯊烯-環氧化酶抑制劑。

E.　組成物實例

在這些實例中使用的「活性成份」係指式(I)化合物，包括其任何立體化學異構物形式、其藥學上可接受的鹽或其溶劑化物，特別是任何一個舉例的化合物。

實例E1：注射用的溶液

1.8克4-羥基苯甲酸甲酯及0.2克氫氧化鈉溶解在約0.5毫升用於注射的沸水中。冷卻至約50℃後在攪拌下加入0.05克聚乙二醇及4克活性成份。使溶液冷卻至室溫並輔以足量約1升用於注射的水，得到含有4毫克/毫升活性成份的溶液。將此溶液經由過濾而殺菌並填入無菌容器內。

實例E2：透指組成物

將0.1444克KH₂ PO₄ 、9克NaCl、0.528克Na₂ HPO₄ .2H₂ O添加至800毫升H₂ O中並攪拌混合物。用NaOH將pH調整至7.4並加入500毫克NaN₃ 。加入乙醇(42 v/v %)並用HCl將pH調整至2.3。

將15毫克活性成份添加至2.25毫升PBS(磷酸鹽緩衝化的鹽水)/乙醇(42%;pH 2.3)中並將混合物攪拌並超音波處理。加入0.25毫升PBS/乙醇(42%;pH 2.3)並將混合物再攪拌並超音波處理直到全部活性成份溶解，得到所要的透指組成物。

實例E3：口服滴劑

將500克活性成份溶解在60~80℃的0.5升氫氧化鈉溶液及1.5升聚乙二醇中。冷卻至30~40℃後加入35升聚乙二醇並將混合物充分攪拌。然後加入1750克糖精鈉在2.5升純水中的溶液並在攪拌下加入2.5升可可口味及足量的聚乙二醇至體積是50升，得到含有10毫克/毫升活性成份之口服滴劑溶液。將所得的溶液填入合適的容器內。

實例E4：膠囊劑

將20克活性成份、6克硫酸月桂酯鈉、56克澱粉、56克乳糖、0.8克膠質二氧化矽及1.2克硬脂酸鎂一起激烈攪拌。隨後將所得的混合物填入1000個合適的硬質明膠膠囊內，各含有20毫克活性成份。

實例E5：塗膜錠劑製備錠劑核心

將100克活性成份、570克乳糖及200克澱粉之混合物充分混合且隨後用5克硫酸十二烷基鈉及10克聚乙烯基吡咯酮在約200毫升水中的溶液濕化。將濕的粉末混合物過篩，乾燥並再度過篩。然後加入100克微晶纖維素及15克氫化植物油。將整個充分混合並壓成錠劑，得到10.000個錠劑，各含有10毫克活性成份。

塗膜

在10克甲基纖維素於75毫升變性乙醇的溶液中加入5克乙基纖維素在150毫升二氯甲烷的溶液中。然後加入75毫升二氯甲烷及2.5毫升1,2,3-丙三醇。將10克聚乙二醇熔化並溶解在75毫升二氯甲烷中。將後者溶液添加至前者並加入2.5克十八酸鎂、5克聚乙烯基吡咯酮及30毫升濃縮的顏色懸浮液並將整個均勻化。在塗覆裝置上將錠劑核心塗覆如此所得的混合物。

實例E6：2%乳液

將硬脂醇(75毫克)、十六醇(20毫克)、脫水山梨醇單硬脂酸酯(20毫克)及肉豆蔻酸異丙酯(10毫克)加入雙壁夾套容器內並加入直到混合物完全熔化。將此混合物添加至純水、聚乙二醇(200毫克)及聚山梨醇酯60(15毫克)分開製備且溫度是70至75℃的混合物中並使用均勻器使成為液體。使所得的混合物冷卻至低於25℃並持續混合。其次將活性成份(20毫克)、聚山梨醇酯80(1毫克)及足量約1克的純水之溶液及無水亞硫酸鈉(2毫克)在純水中的溶液添加至乳液中並持續混合。將乳液均勻化並填入合適的試管內。

實例E7：2%乳液

將活性成份(2克)、磷脂醯膽鹼(20克)、膽固醇(5克)及乙醇(10克)之混合物攪拌並在55-60℃加熱直到完全溶液並添加至對羥基苯甲酸甲酯(0.2克)、對羥基苯甲酸丙酯(0.02克)、依地酸鈉(0.15克)及氯化鈉(0.3克)在純水(約100克)中的溶液並均勻化。加入在純水中的羥基丙基甲基纖維素(1.5克)並將混合物持續混合直到完全膨脹。

Claims

一種式(I)之化合物，及其立體異構物形式，其中R¹ 是氫、氯或氟；R² 是氫、氯、氟或甲基；R³ 及R⁴ 是氫；或R³ 及R⁴ 一起形成一個鍵；R⁵ 是1,1-二氟乙基，且R⁶ 是氫或氟；或R⁵ 是氫或氟，且R⁶ 是1,1-二氟乙基；或其藥學上可接受的加成鹽類或溶劑化物。
根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R¹ 是氯或氟。
根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R¹ 是氯或氟；且其中R² 是氯、氟或甲基。
根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R¹ 是氯或氟；R² 是氫、氯、氟或甲基； R³ 及R⁴ 一起形成一個鍵；R⁵ 是1,1-二氟乙基，且R⁶ 是氫或氟；或R⁵ 是氫或氟，且R⁶ 是1,1-二氟乙基。
根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R¹ 是氯或氟；R² 是氫；R³ 及R⁴ 一起形成一個鍵；R⁵ 是1,1-二氟乙基；R⁶ 是氫。
根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R¹ 是在7-位置且是氯或氟；且R² 是在任何其他位置且是氫、氯、氟或甲基。
根據申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物是7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮呯。
一種醫藥組成物，其含有藥學上可接受的載劑及作為活性成份之醫療有效量根據申請專利範圍第1至7項中任一項定義之化合物。
一種使用作為藥劑之根據申請專利範圍第1至7項中任一項定義之化合物。
一種根據申請專利範圍第1至7項中任一項定義之化合物用於製備治療或預防真菌感染之醫藥品的用途。
根據申請專利範圍第10項之用途，其中該真菌感染是經由一或多種選自包括下列的真菌所造成：念珠菌屬；曲黴菌屬；新型隱球菌屬；申克孢子絲菌屬；絮狀表皮癬菌屬；小孢子菌屬；毛癬菌屬；鐮刀菌屬；多變根毛黴菌屬；卷枝毛黴菌；根黴菌屬；糠秕馬拉色菌；頂孢黴菌屬；擬青黴屬；短帚黴；爪甲白癬菌屬；透明柱黴；足分枝菌屬；木黴菌屬；青黴菌屬；馬尼爾菲青黴菌；及芽生裂殖菌屬。
根據申請專利範圍第10項之用途，其中該真菌感染是經由一或多種選自包括下列的真菌所造成：近平滑念珠菌。
根據申請專利範圍第10項之用途，其中該真菌感染是經由一或多種選自包括下列的真菌所造成：犬小孢子菌、鬚毛癬菌、紅毛癬菌及烟曲黴菌。