CN102947307A

CN102947307A - 新型抗真菌性5,6-二氢-4-[(二氟乙基)苯基]-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮和4-(二氟乙基)苯基-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮衍生物

Info

Publication number: CN102947307A
Application number: CN201180028301XA
Authority: CN
Inventors: L.米尔波尔; L.J.R.M.梅斯; K.德维特
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2010-06-07
Filing date: 2011-06-01
Publication date: 2013-02-27
Anticipated expiration: 2031-06-01
Also published as: US20130085136A1; US9637490B2; KR101886136B1; CN102947307B; BR112012030895A2; MY156731A; ES2489191T3; AP2012006502A0; TW201211045A; JP6653036B2; HK1178152A1; JP6208263B2; CA2799634A1; EA021220B1; AU2011263946B2; AU2011263946A1; KR20130113922A; JP6505176B2; EP2576557A1; MX2012014271A

Abstract

本发明涉及新型的式(I)化合物：

Figure 201180028301X100004DEST_PATH_IMAGE002

其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵及R⁶具有在权利要求中定义的含义。本发明化合物主要对皮肤真菌及全身性真菌感染具有活性。本发明还涉及制备所述新型化合物的方法、含有所述化合物作为活性成分的药物组合物以及所述化合物作为药物的用途。

Description

新型抗真菌性5,6-二氢-4-[(二氟乙基)苯基]-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮*和4-(二氟乙基)苯基-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮*衍生物

发明领域

本发明涉及主要针对皮肤真菌及全身性真菌感染具有活性的新型抗真菌性5,6-二氢-4-[(二氟乙基)苯基]-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?和4-(二氟乙基)苯基-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?衍生物。本发明还涉及制备此新型化合物的方法、含有所述化合物作为活性成分的药物组合物以及所述化合物作为药物的用途。

发明背景

皮肤真菌是在动物及人中通常导致皮肤病的三种类型真菌组的统称。这些变形(无性或半知菌)属是：小孢子菌属(Microsporum)、表皮癣菌属(Epidermophyton)及发癣菌属(Trichophyton)。在这3种菌属中约有40个菌种。

皮肤真菌因为其可以从角质化物质得到营养物的能力而造成皮肤、毛发及指甲的感染。皮肤真菌定居于角蛋白组织且炎症通过宿主对于代谢副产物的反应而造成。因为其无法穿透具有免疫活性的宿主的活组织，所以其通常仅限于表皮的角质层。但是，这些生物体偶而会侵入皮下组织，导致发生脓癣。侵入确实引起从轻微至严重的宿主反应。报导指出酸性蛋白酶、弹性蛋白酶、角蛋白酶及其它蛋白酶作为毒力因子起作用。

全身性真菌感染(SFI)为危及生命的病况，其最常感染免疫力下降的患者，免疫力下降往往起因于治疗噁性病的治疗干预。在现代医院中的SFI数量持续增加，且已与SFI关联的不同真菌的数量大且仍在增加。尽管有许多侵入性假丝酵母病及曲霉病的病例，但由于其它霉菌例如尖端赛多孢子菌(Scedosporium apiospermum)、镰孢属(Fusarium spp.)及接合菌(Zygomycetes)、根霉(Rhizopus)及毛霉属(Mucor spp.)的感染所致的感染发病率增加。因此完全治疗全部这些感染的有效治疗剂需要具有非常广谱的活性。过去数十年来，伊曲康唑(itraconazole)、氟康唑(fluconazole)、酮康唑(ketoconazole)及静脉或脂质体两性霉素B已用于SFI，且全部这些药剂在范围、安全或用药便利性方面有其限制。最近已研发第三代的唑类并进入市场，这改善了在重病监护病房中的治疗选择。对于诸如假丝酵母病、曲霉病、及由于镰孢属所致的感染等危及生命的侵入性SFI，临床相关剂量的伏立康唑(Voriconazole (Vfend^TM))及泊沙康唑(posaconazole (Noxafil^TM))显示出极大治疗改进。此外泊沙康唑对于新出现接合菌属造成的感染具有功效。棘球白素(Echinocandins)例如阿尼芬净(anidulafungin)、卡泊芬净(caspofungin)及米卡芬净(micafungin)，其为在真菌细胞壁内的1,3-β-葡聚糖合成的非竞争性抑制剂，对假丝酵母属及曲霉属表现出高功效，但是对隐球菌(Cryptococcus)、镰孢或接合菌属没有活性。在全部的抗真菌剂中，唑类仍然为通过抑制在真菌中麦角固醇生物合成所必需的酶(14-α-脱甲基酶)而表现出最广泛抗真菌范围的独特化合物类别。

甲癣是指甲最常见的疾病且构成全部指甲异常中的大约一半。甲癣在成年人口中的流行率是约6-8％。甲癣的致病病原体包括皮肤真菌、假丝酵母及非皮肤真菌性霉菌。在温带西方国家中，皮肤真菌是最常造成甲癣的真菌；而假丝酵母及非皮肤真菌性霉菌则最常存在于热带及亚热带。红色发癣菌(Trichophyton rubrum)是与甲癣关联的最常见皮肤真菌。其它可能涉及的皮肤真菌为趾间发癣菌(Trichophyton interdigitale)、絮状表皮癣菌(Epidermophyton floccosum)、堇色发癣菌(Trichophyton violaceum)、石膏样小孢子菌(Microsporum gypseum)、断发癣菌(Trichophyton tonsurans)、苏丹发癣菌(Trichophyton soudanense)及疣状发癣菌(Trichophyton verrucosum)。其它致病病原体包括假丝酵母及非皮肤真菌性霉菌，特别是霉菌世代(mould generation)透明柱霉(Scytalidium) (也称为(Neoscytalidium)、帚霉属(Scopulariopsis)及曲霉(Aspergillus)的成员。

5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?类公开已描述在J. Chem. Soc.(C), 2732-2734 (1971); J. Heterocyclic Chem., 13, 711-716 (1976);及J. Heterocyclic Chem., 16, 241-244 (1979)。在这些参考文献中公开的化合物在苯基部分的4-位置全都具有不同的取代，且在任何这些参考文献中都没有报导生物活性。

WO02/34752公开4-取代的5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?类作为一种新的抗真菌化合物。然而，WO02/34752并没有具体公开在苯基部分的4-位置上的本发明取代模式。

许多药物化合物虽然具有期需的治疗特性，但由于其低水溶性而被无效率地使用。因此例如当此化合物是口服给药时，通过胃肠道时只有少部分的药物被吸收到血液中。因此，为了达到足够的药物吸收，可能需要给予高剂量的药物化合物、延长给药的周期或频繁给予药物化合物。实际上，药物的低溶解性及所致的低生物利用度可导致使用替代药物以代替低溶解性的药物，该替代药物可能为具有不期需的副作用或需要侵入性给药(例如通过注射或输注)的药物。

因此本发明的目的是生产具有广泛抗真菌范围的更高生物利用度的化合物或提供有用的替代化合物，维持适当高治疗功效及适当低毒性或其它副作用。

意外地，与现有技术公开的化合物比较，本发明的抗真菌性化合物或部分本发明的化合物可具有改良的代谢稳定性、改良的PK (药物动力学)性质、改良的溶解性、下降的细胞色素P450易患性(liabilities)、或改良的生物利用度。

本发明的化合物可用作角鲨烯环氧化酶抑制剂。

因此本发明的目的是提供具有抗真菌活性的新型化合物，以克服或改善至少一个现有技术的缺点，或提供有用的替代物。

发明概述

已发现本发明的化合物可用作抗真菌化合物。

本发明涉及式(I)的新型化合物：

及其立体异构体形式，其中

R¹是氢、氯或氟；

R²是氢、氯、氟或甲基；

R³及R⁴是氢；

或R³及R⁴一起形成键；

R⁵是1,1-二氟乙基，且R⁶是氢或氟；

或R⁵是氢或氟，且R⁶是1,1-二氟乙基；

及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物。

本发明还涉及制备式(I)化合物的方法及包含所述化合物的药物组合物。

本发明化合物是用于在体内对抗真菌的有用药剂。

本发明描述的新型化合物可以用于治疗或预防由皮肤真菌造成的感染、全身性真菌感染及甲癣。

本发明描述的新型化合物可对各种各样的真菌具有活性，所述真菌例如假丝酵母属例如白假丝酵母(Candida albicans)、光滑假丝酵母(Candida glabrata)、克鲁斯假丝酵母(Candida kruce?)、近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)、乳酒假丝酵母(Candida kefyr)、热带假丝酵母(Candida tropicalis)；曲霉属例如烟曲霉(Aspergillus fumigatus)、黑曲霉(Aspergillus niger)、黄曲霉(Aspergillus flavus)；新型隐球菌(Cryptococcus neoformans)；申克孢子丝菌(Sporothrix schenckii)；絮状表皮癣菌(Epidermophyton floccosum)；小孢子菌属例如犬小孢子菌(Microsporum canis)、石膏样小孢子菌(Microsporum gypseum)；发癣菌属例如须发癣菌(Trichophyton mentagrophytes)、红色发癣菌(Trichophyton rubrum)、昆克鲁发癣菌(Trichophyton quinckeanum)、断发癣菌(Trichophyton tonsurans)、疣状发癣菌(Trichophyton verrucosum)、堇色发癣菌(Trichophyton violaceum)、趾间发癣菌(Trichophyton interdigitale)、苏丹发癣菌(Trichophyton soudanense)；镰孢属例如菜豆腐皮镰孢(Fusarium solani)、尖镰孢(Fusarium oxysporum)、再育镰孢(Fusarium proliferatum)、串珠镰孢(Fusarium verticillioides)；根毛霉属例如米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)、微小根毛霉(Rhizomucor pusillus)；卷枝毛霉(Mucor circinelloides)；根霉属例如米根霉(Rhizopus oryzae)、小孢子根霉(Rhizopus microspores)；糠秕马拉色菌(Malassezia furfur)；小枝顶孢属(Acremonium spp.)；拟青霉属(Paecilomyces)；帚霉属(Scopulariopsis)；爪甲白癣菌属；柱霉属(Scytalidium)；丝孢菌属(Scedosporium)例如尖端赛多孢子菌(Scedosporium apiospermum)、多育赛多孢子菌(Scedosporium prolificans)；木霉属(Trichoderma spp.)；青霉属(Penicillium spp.)；马耳尼菲青霉(Penicillium marneffei)；芽生裂殖菌属(Blastoschizomyces)。

鉴于本发明化合物的上述药理学，可得出其适合用作药物。

本发明还涉及通式(I)的化合物、其立体异构体形式及药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，其用于治疗或预防真菌感染。

与现有技术公开的化合物比较，本发明化合物或部分化合物的一个优点可为其提高的生物利用度、改良的代谢稳定性、改良的PK性质、下降的hERG通道抑制、或下降的细胞色素P450易患性。

现在将进一步描述本发明。在下面的段落中，更详细定义本发明的不同方面。除非明确地表示相反，否则如此定义的各方面可以结合任一或多个其它方面。具体地说，表示为优选或有利的任何特征可以与表示为优选或有利的任一或多个其它特征结合。

发明详述

本发明化合物的化学名称是根据Chemical Abstracts Service认可的命名规则使用Advanced Chemical Development, Inc.命名软件(ACD/Name product version 10.01; Build 15494, 1 Dec 2006)产生的。

在互变异构体形式的情况下，应明确其它未描述的互变异构体形式也包括在本发明的范围内。

在三环系统中的原子如下式(XX)所示而编号：

应理解，式(I)的化合物及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物中的一些可包含一或多个手性中心且以立体异构体形式存在。

上下文中，术语“式(I)化合物”指包括其加成盐类、溶剂化物及立体异构体。

术语“立体异构体”、“立体异构体形式”或“立体化学异构体形式”在上下文中互换使用。

本发明包括式(I)化合物的全部立体异构体，不论是纯的立体异构体或是两种或多种立体异构体的混合物。

对映体是这样的立体异构体，其为彼此不可重迭的镜像。一对对映体的1:1混合物是外消旋物或外消旋混合物。非对映体(或非对映异构体)为不是对映体的立体异构体，即其不作为镜像而相关。如果化合物含有双键，那么取代基可呈E或Z构型。如果化合物含有双取代的环烷基，那么取代基可呈顺或反式构型。因此，本发明包括对映体、非对映体、外消旋物、E异构体、Z异构体、顺式异构体、反式异构体及其混合物，只要化学上可能即可。绝对构型根据Cahn-Ingold-Prelog系统表示。不对称原子的构型以R或S表示。其绝对构型未知的经解析(Resolved)化合物可依据其旋转平面偏光的方向而用(+)或(-)表示。当特定的立体异构体经鉴定时，此指所述立体异构体基本上无其它异构体，即伴有低于50％，优选低于20％，更优选低于10％，再更优选低于5％，特别低于2％且最优选低于1％的其它异构体。因此，当式(I)化合物例如标明为(R)时，此指该化合物基本上没有(S)异构体；当式(I)化合物例如标明为E时，此指该化合物基本上没有Z异构体；当式(I)化合物例如标明为顺式时，此指该化合物基本上没有反式异构体。

用于治疗用途时，式(I)化合物的盐类是其中抗衡离子是药学上可接受的那些盐类。但是，非药学上可接受的酸及碱的盐类也可用于例如制备或纯化药学上可接受的化合物。不论是否为药学上可接受的，全部盐类都包括在本发明的范围内。

在上下文中提到的药学上可接受的酸及碱的加成盐类是指包括式(I)化合物可以形成的具有治疗活性的无毒酸及碱的加成盐形式。药学上可接受的酸加成盐可以方便地通过将碱形式用合适的酸处理来获得。合适的酸包括例如无机酸例如氢卤酸例如氢氯酸或氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等酸类；或有机酸例如乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(即乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环己氨基磺酸、水杨酸、对氨基水杨酸、巴莫酸等酸类。相反地，所述盐形式可以通过用合适的碱处理而转化成游离碱形式。

含有酸性质子的式(I)化合物通过用适当的有机及无机碱处理，也可以转化成其无毒的金属或胺加成盐形式。适当的碱盐形式包括例如铵盐、碱金属及碱土金属盐例如锂、钠、钾、镁、钙盐等，具有以下有机碱的盐类：例如一级、二级及三级脂族与芳族胺类例如甲胺、乙胺、丙胺、异丙胺、四种丁胺异构体、二甲胺、二乙胺、二乙醇胺、二丙胺、二异丙胺、二正丁胺、吡咯烷、哌啶、吗啉、三甲胺、三乙胺、三丙胺、奎宁环、吡啶、喹啉及异喹啉；苄星青霉素 (benzathine)、N-甲基-D-葡萄糖胺、海巴胺盐(hydrabamine salt)、及具有以下氨基酸的盐类：例如精氨酸、赖氨酸等。相反地，该盐形式可以通过用合适的酸处理而转化成游离酸形式。

术语溶剂化物包括式(I)化合物能够形成的水合物及溶剂加成形式，以及其盐类。此形式的实例是例如水合物、醇化物(alcoholate)等。

在下面描述的方法中制备的式(I)化合物可以合成为对映体的混合物形式，特别是对映体的外消旋混合物，其可以根据本领域中已知的解析方法相互分离。一种分离式(I)化合物的对映体形式的方法涉及使用手性固定相的液体色谱法。所述纯的立体化学异构体形式也可以从适当起始物质的对应纯的立体化学异构体形式衍生，条件是该反应以立体专一性发生。优选如果需要专一性立体异构体时，那么所述化合物可通过立体专一性的制备方法合成。这些方法将优选使用对映异构体纯的起始物质。

在此申请的框架中，本发明的化合物固有地意欲包括其化学元素的全部同位素组合。在此申请的框架中，化学元素，特别是当相对于式(I)化合物提及时，包括此元素的全部同位素及同位素混合物。例如，当提到氢时，应理解为是指¹H、²H、³H及其混合物。

本发明的化合物因此固有地包括含有一种或多种元素的一种或多种同位素的化合物，及其混合物，包括放射性化合物，也称为放射标记的化合物，其中一或多个非放射性原子已被其放射性同位素之一取代。术语“放射标记的化合物”指任何的式(I)化合物，或其药学上可接受的盐，其含有至少一个放射性原子。例如，化合物可以用正电子或用发射γ的放射性同位素标记。对于放射性配体结合的技术，³H-原子或¹²⁵I-原子是要被取代的原子的选择。对于成像，最普遍使用的正电子发射(PET)放射性同位素是¹¹C、¹⁸F、¹⁵O及¹³N，其全都是加速器产生且分别具有20、100、2及10分钟的半衰期。因为这些放射性同位素的半衰期很短，唯一可行的是在就地(on site)拥有制造他们的加速器的研究机构使用，因此限制其用途。这些最广泛使用的是¹⁸F、^99mTc、²⁰¹Tl及¹²³I。这些放射性同位素的处理，其制造、分离及结合在分子中为技术人员所已知。

具体地说，放射性原子选自氢、碳、氮、硫、氧及卤素。具体地说，放射性同位素选自包括³H、¹¹C、¹⁸F、¹²²I、¹²³I、¹²⁵I、¹³¹I、⁷⁵Br、⁷⁶Br、⁷⁷Br及⁸²Br。

如说明书及所附权利要求书所使用的，单数形式的“一个”、“一种”及“该”也包括复数对象，除非上下文另外明确说明。例如“一种化合物”指一种化合物或一种以上的化合物。

本领域技术人员完全理解上文所述的术语及在说明书中使用的其它术语。

现在将陈述本发明化合物的优选特征。

本发明涉及式(I)的新型化合物：

及其立体异构体形式，其中

R¹是氢、氯或氟；

R²是氢、氯、氟或甲基；

R³及R⁴是氢；

或R³及R⁴一起形成键；

R⁵是1,1-二氟乙基，且R⁶是氢或氟；

或R⁵是氢或氟，且R⁶是1,1-二氟乙基；

及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物。

在一个实施方案中，本发明涉及式(I)化合物及其立体异构体形式，其中

R¹是氯或氟；

R²是氢、氯、氟或甲基；

R³及R⁴是氢；

或R³及R⁴一起形成键；

R⁵是1,1-二氟乙基，且R⁶是氢或氟；

或R⁵是氢或氟，且R⁶是1,1-二氟乙基；

及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物。

R¹是氯或氟；

R²是氯、氟或甲基；

R³及R⁴是氢；

或R³及R⁴一起形成键；

R⁵是1,1-二氟乙基，且R⁶是氢或氟；

或R⁵是氢或氟，且R⁶是1,1-二氟乙基；

及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物。

R¹是氯或氟；

R²是氢、氯、氟或甲基；

R³及R⁴一起形成键；

R⁵是1,1-二氟乙基，且R⁶是氢或氟；

或R⁵是氢或氟，且R⁶是1,1-二氟乙基；

及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物。

在另一个实施方案中，本发明涉及式(I)化合物及其立体异构体形式，其中

R¹是氯或氟；

R²是氢；

R³及R⁴一起形成键；

R⁵是1,1-二氟乙基；

R⁶是氢；

及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物。

在另一个实施方案中，本发明涉及任何其它实施方案或其它实施方案的任何组合，其中R⁵是1,1-二氟乙基且R⁶是氢或氟。

在又一个实施方案中，本发明涉及任何其它实施方案或其它实施方案的任何组合，其中R⁵是氢或氟且R⁶是1,1-二氟乙基。

在另一个实施方案中，本发明涉及任何其它实施方案或其它实施方案的任何组合，其中R¹及R²中的至少一个不是氢。

在一个特定的实施方案中，本发明涉及任何其它实施方案或其它实施方案的任何组合，其中R²是氢、氯或氟。

在另一个实施方案中，本发明涉及任何其它实施方案或其它实施方案的任何组合，其中R³及R⁴是氢。

在另一个实施方案中，本发明涉及任何其它实施方案或其它实施方案的任何组合，其中R¹或R²在7-位置上且不是氢。

在另一个实施方案中，本发明涉及任何其它实施方案或其它实施方案的任何组合，其中R¹在7-位置上且是氯或氟；特别地R¹在7-位置上且是氯。

在另一个实施方案中，本发明涉及任何其它实施方案或其它实施方案的任何组合，其中R¹在7-位置上且是氯或氟；特别地R¹在7-位置上且是氯；且

R²在任何其它位置且是氢、氯、氟或甲基；特别是氯、氟或甲基；更特别是氯或氟；甚至更特别是氯。

在另一个实施方案中，本发明涉及任何其它实施方案或其它实施方案的任何组合，其中R²在7-位置上且是氯、氟或甲基。

在另一个实施方案中，本发明涉及任何其它实施方案或其它实施方案的任何组合，其中

R²在7-位置上且是氯、氟或甲基；且

R¹在任何其它位置且是氢、氯或氟；特别是氯或氟；更特别是氯。

在又一个实施方案中，本发明涉及任何其它实施方案或其它实施方案的任何组合，其中R³及R⁴一起形成键。

在另一个实施方案中，式(I)化合物选自：

7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?.HCl，

(4S)-7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

(4S)-7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?.HCl，

(4R)-7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

(4R)-7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?.HCl，

8,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

8,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?.HCl，

8,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

7,8-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

7,8-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?.HCl，

7,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

7,9-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

7,8-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

7,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

7,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?.HCl，

7,9-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

7,9-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?.HCl，

7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

7-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-7-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

9-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-7-甲基-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

9-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-7,9-二氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

10-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-7-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

7-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

9,10-二氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-7,9-二氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-9-氟-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-9-氟-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?.HCl，

7,9-二氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

7-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-9-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-9-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

10-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-7-甲基-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

7-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

7-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)苯基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?.HCl，

7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)-3-氟苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

4-[4-(1,1-二氟乙基)-3-氟苯基]-7-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)-3-氟苯基]-9-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

9-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-7-氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

4-[4-(1,1-二氟乙基)-3-氟苯基]-7,9-二氟-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

9-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?，

10-氯-4-[3-(1,1-二氟乙基)-4-氟苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]-苯并二氮?，

包括其任何立体化学异构体形式，

及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物。

在还另一个实施方案中，式(I)化合物是7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?。

上述引人关注的实施方案的全部可能的组合，视为包含在本发明的范围内。

本发明也包括制备式(I)化合物及其亚组的方法。

式(I)化合物及其亚组可以通过下面描述的一系列步骤制备。其通常从可市购获得的或通过本领域技术人员所知标准方法制备的起始物质来制备。本发明的化合物也可以使用有机化学领域技术人员常用的标准合成方法制备。

本发明的化合物可以根据方案1制备：

方案1

式(I)化合物(其中R³及R⁴一起形成额外的键，所述化合物由式(I-b)表示)，可以根据本领域中已知的胺成为亚胺的氧化反应从式(I-a)表示的化合物制备。这些氧化反应可以如下进行：让式(I-a)化合物与氧化物例如四乙酸铅或二氧化锰在反应惰性溶剂中反应，所述溶剂例如卤化烃，例如二氯甲烷(DCM)或三氯甲烷。反应速率可通过搅拌及任选加热反应混合物来提高。

或者是，式(I-b)化合物可以通过式(II)中间体的分子内环化来制备。在酸例如POCl₃存在下，在式(II)中间体中的酰胺可以作为C-亲电子剂起作用，导致环闭合。此反应可以在合适的溶剂例如DCM中进行。搅拌及加热可以提高反应速率。

式(I-a)化合物可如下从式(IV)中间体制备：与式(XI)的酸H⁺X^-反应将其转化成盐(III)，并使所述的式(III)的盐与式(XI)的醛在合适的溶剂例如醇，例如甲醇(MeOH)、乙醇(EtOH)、异丙醇中，在高温优选在回流温度下反应。

或者是，式(IV)中间体可以先与式(XII)的醛反应且如此形成的亚胺可以在式(XI)的酸H⁺X^-存在下环化成式(I-a)化合物。

或者是，式(I-a)化合物可以使用本领域技术人员熟知的方法通过还原式(I-b)化合物而获得。

式(II)中间体可以通过式(III)及(XIII)中间体之间的偶联反应来制备。所述反应可以在偶联剂存在下进行，例如通常是1-羟基-1H-苯并三唑(HOBt)及N'-(乙基羰基亚氨基(carbonimidoyl))-N,N-二甲基-1,3-丙烷二胺单盐酸盐(EDCI)。该反应可以在碱例如三乙胺(Et₃N)及合适的溶剂例如DCM存在下进行。或者是，(XIII)的酰基氯衍生物或(XIII)的反应性酯衍生物也可以在此类型反应中使用以制备式(II)中间体。

式(XIII)中间体或其酰基氯或酯衍生物，可由本领域技术人员容易地制备。

式(III)及(IV)中间体通过还原式(V)的1-(2-氰基-苯基)吡咯衍生物而制备。可以使用本领域技术人员熟知的多种方法还原腈官能团(function)，例如：

1. LiAlH₄/THF [S. Raines, S.Y. Chai和F.P. Palopoli; J. Heterocyclic Chem., 13, 711-716 (1976)]

2. i.双(2-甲氧基乙氧基)铝酸钠 (Red-Al^?) 70% w/w甲苯, RT :

ii. NaOH 10%, RT [G.W.H. Cheeseman和S.G. Greenberg; J. Heterocyclic Chem., 16, 241-244 (1979)]

3a. i. KBH₄/CF₃COOH, THF; ii. H₂O; iii. HCl [P. Trinka, P. Slégel和J. Reiter; J. Prakt. Chem., 338, 675-678(1996)]

3b.硼烷-二甲硫(1:1), THF

4a. RaNi (阮内镍) / H₂

4b. RaNi /噻吩溶液/ (MeOH/NH₃)

甚至也可以使用其它熟知方法来还原腈官能团。

式(V)中间体继而可市购得到或者可如下容易地制备：例如将式(VI)的2-氨基苯腈衍生物在惰性溶剂例如二噁烷或四氢呋喃(THF)中，在酸例如4-氯吡啶盐酸盐存在下，或在酸性溶剂例如冰乙酸中，在高温优选在回流温度下，用四氢-2,5-二甲氧基呋喃处理。或者是，式(V)中间体也可以从式(X)中间体制备。通常，式(X)中间体(其中卤基被定义为Br、I、Cl或F)在碱例如Cs₂CO₃或NaH存在下，在合适的溶剂例如通常是DMF中，与吡咯反应。

或者是，式(IV)中间体可以通过在合适的溶剂例如THF中，用硼烷-二甲硫(1:1)处理式(VII)中间体而制备。此反应通常可以在诸如HCl等酸存在下进行。反应进行后，可以用诸如NaOH等合适的碱将反应混合物碱化。此反应可在高温优选在回流温度下进行。

式(VII)中间体可以从式(VIII)中间体制备。式(VIII)中间体可以在HOBt及EDCI存在下与氮源例如NH₃.H₂O反应。此种反应通常可以在合适的溶剂例如DMF中进行。搅拌反应混合物可以提高反应速率。

式(VIII)中间体可以通过在惰性溶剂例如二噁烷中，在诸如4-氯吡啶盐酸盐等酸存在下，在高温优选在回流温度下，用四氢-2,5-二甲氧基呋喃处理式(IX)中间体而容易地制备。或者是，(IX)的反应性酯衍生物也可以在此种反应中使用以制备式(VIII)中间体。

全部的起始物质可市购得到或可由本领域技术人员容易地制备。

在全部这些制备中，反应产物可以从反应介质分离，且如果需要时，根据本领域中普遍已知的方法进一步纯化，例如萃取、结晶、研制及色谱。具体地说，立体异构体可以使用手性固定相例如Chiralpak? AD (直链淀粉3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)或Chiralpak? AS色谱分离，两者都购自在日本的Daicel Chemical Industries, Ltd。

本发明化合物及中间体的纯的立体异构体形式可以通过应用本领域中已知的方法而获得。对映体可以用光学活性酸通过选择性结晶其非对映体盐而将其彼此分离。或者是，对映体可以使用手性固定相通过色谱技术而分离。所述纯的立体异构体形式也可以衍生自合适起始物质的对应纯的立体异构体形式，条件是反应以立体选择性或立体专一性发生。优选如果需要特定的立体异构体时，所述化合物可通过立体选择性或立体专一性制备方法合成。这些方法可有利地使用手性上纯的起始物质。式(I)化合物的立体异构体形式明显意欲包括在本发明的范围内。

式(I)化合物的手性上纯的形式形成化合物的优选组。因此中间体及其盐类形式的手性上纯的形式特别可用于制备手性上纯的式(I)化合物。中间体的对映体混合物也可以用于制备具有相应构型的式(I)化合物。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对二形性病原体、皮肤真菌、接合菌、透明丝孢菌、暗色丝孢菌、酵母及类酵母生物体具有活性。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对二形性病原体、酵母及类酵母生物体具有活性。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对霉菌具有活性。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对各种各样的真菌具有活性，所述真菌例如假丝酵母属例如白假丝酵母、光滑假丝酵母、克鲁斯假丝酵母、近平滑假丝酵母、乳酒假丝酵母、热带假丝酵母；曲霉属例如烟曲霉、黑曲霉、黄曲霉；新型隐球菌；申克孢子丝菌；絮状表皮癣菌；小孢子菌属例如犬小孢子菌、石膏样小孢子菌；发癣菌属例如须发癣菌、红色发癣菌、昆克鲁发癣菌、断发癣菌、疣状发癣菌、堇色发癣菌、趾间发癣菌、苏丹发癣菌；镰孢属例如菜豆腐皮镰孢、尖镰孢、再育镰孢、串珠镰孢；根毛霉属例如米黑根毛霉、微小根毛霉; 卷枝毛霉；根霉属例如米根霉、小孢子根霉；糠秕马拉色菌；小枝顶孢属；拟青霉属；帚霉属；爪甲白癣菌属；柱霉属；丝孢菌属例如尖端赛多孢子菌、多育赛多孢子菌；木霉属；青霉属；马耳尼菲青霉；芽生裂殖菌属。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可以对各种各样的真菌具有活性，所述真菌例如近平滑假丝酵母；曲霉属例如烟曲霉、黑曲霉、黄曲霉；新型隐球菌；申克孢子丝菌；絮状表皮癣菌；小孢子菌属例如犬小孢子菌、石膏样小孢子菌；发癣菌属例如须发癣菌、红色发癣菌、昆克鲁发癣菌、断发癣菌、疣状发癣菌、堇色发癣菌、趾间发癣菌、苏丹发癣菌；镰孢属例如菜豆腐皮镰孢、尖镰孢、再育镰孢、串珠镰孢；根毛霉属例如米黑根毛霉、微小根毛霉; 卷枝毛霉；根霉属例如米根霉、小孢子根霉；小枝顶孢属；拟青霉属；帚霉属；爪甲白癣菌属；柱霉属；丝孢菌属例如尖端赛多孢子菌、多育赛多孢子菌；木霉属；青霉属；马耳尼菲青霉；芽生裂殖菌属。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对各种各样的真菌具有活性，所述真菌例如近平滑假丝酵母；曲霉属例如烟曲霉、黑曲霉、黄曲霉；新型隐球菌；絮状表皮癣菌；小孢子菌属例如犬小孢子菌、石膏样小孢子菌；发癣菌属例如须发癣菌、红色发癣菌、昆克鲁发癣菌、断发癣菌、疣状发癣菌、堇色发癣菌、趾间发癣菌、苏丹发癣菌；镰孢属例如菜豆腐皮镰孢、尖镰孢、再育镰孢、串珠镰孢；根毛霉属例如米黑根毛霉、微小根毛霉；卷枝毛霉；根霉属例如米根霉、小孢子根霉；小枝顶孢属；拟青霉属；帚霉属；爪甲白癣菌属；柱霉属；丝孢菌属例如尖端赛多孢子菌、多育赛多孢子菌；木霉属；青霉属；马耳尼菲青霉；芽生裂殖菌属；特别是曲霉属例如烟曲霉、黑曲霉、黄曲霉；新型隐球菌；絮状表皮癣菌；小孢子菌属例如犬小孢子菌、石膏样小孢子菌；发癣菌属例如须发癣菌、红色发癣菌、昆克鲁发癣菌、断发癣菌、疣状发癣菌、堇色发癣菌、趾间发癣菌、苏丹发癣菌；镰孢属例如菜豆腐皮镰孢、尖镰孢、再育镰孢、串珠镰孢；根毛霉属例如米黑根毛霉、微小根毛霉；卷枝毛霉；根霉属例如米根霉、小孢子根霉；小枝顶孢属；拟青霉属；帚霉属；爪甲白癣菌属；柱霉属；丝孢菌属例如尖端赛多孢子菌、多育赛多孢子菌；木霉属；青霉属；马耳尼菲青霉；芽生裂殖菌属。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对以下具有活性：近平滑假丝酵母B66126、烟曲霉B42928、新型隐球菌B66663、申克孢子丝菌B62482、犬小孢子菌B68128、须发癣菌B70554、红色发癣菌B68183、尖端赛多孢子菌IHEM3817及多育赛多孢子菌IHEM21157。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对以下具有活性：近平滑假丝酵母B66126、烟曲霉B42928、新型隐球菌B66663、申克孢子丝菌B62482、犬小孢子菌B68128、须发癣菌B70554、红色发癣菌B68183、尖端赛多孢子菌IHEM3817及多育赛多孢子菌IHEM21157、米根霉IHEM5223、米黑根毛霉IHEM13391及卷枝毛霉IHEM21105。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对以下具有活性：近平滑假丝酵母、烟曲霉、新型隐球菌、申克孢子丝菌、犬小孢子菌、须发癣菌、红色发癣菌、尖端赛多孢子菌、多育赛多孢子菌、米根霉、米黑根毛霉及卷枝毛霉。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对以下具有活性：近平滑假丝酵母、烟曲霉、新型隐球菌、申克孢子丝菌、犬小孢子菌、须发癣菌、红色发癣菌、尖端赛多孢子菌及多育赛多孢子菌；特别是烟曲霉、犬小孢子菌、须发癣菌、红色发癣菌、尖端赛多孢子菌及多育赛多孢子菌。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对各种各样的真菌具有活性，所述真菌例如近平滑假丝酵母、曲霉属、新型隐球菌、申克孢子丝菌、小孢子菌属、镰孢属、丝孢菌属；

特别是近平滑假丝酵母、曲霉属、新型隐球菌、小孢子菌属、镰孢属、丝孢菌属；更特别是曲霉属、新型隐球菌、小孢子菌属、镰孢属、丝孢菌属。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对各种各样的真菌具有活性，所述真菌例如近平滑假丝酵母、曲霉属、新型隐球菌、发癣菌属、申克孢子丝菌; 小孢子菌属、镰孢属、丝孢菌属；特别是曲霉属、小孢子菌属、发癣菌属。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对真菌具有活性，所述真菌例如近平滑假丝酵母；曲霉属例如烟曲霉、黑曲霉、黄曲霉；新型隐球菌；申克孢子丝菌；絮状表皮癣菌；犬小孢子菌；发癣菌属例如须发癣菌、红色发癣菌、昆克鲁发癣菌；

特别是近平滑假丝酵母；曲霉属例如烟曲霉, 黑曲霉、黄曲霉；新型隐球菌；絮状表皮癣菌；犬小孢子菌；发癣菌属例如须发癣菌、红色发癣菌、昆克鲁发癣菌；

更特别是曲霉属例如烟曲霉、黑曲霉、黄曲霉；新型隐球菌；絮状表皮癣菌；犬小孢子菌；发癣菌属例如须发癣菌、红色发癣菌、昆克鲁发癣菌。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对真菌具有活性，所述真菌例如近平滑假丝酵母；曲霉属；新型隐球菌；小孢子菌属;发癣菌属; 丝孢菌属。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对以下具有活性：近平滑假丝酵母、烟曲霉、新型隐球菌、申克孢子丝菌、犬小孢子菌、须发癣菌、红色发癣菌、尖端赛多孢子菌及多育赛多孢子菌；

特别是近平滑假丝酵母、烟曲霉、新型隐球菌、犬小孢子菌、须发癣菌、红色发癣菌、尖端赛多孢子菌及多育赛多孢子菌；

更特别是烟曲霉、新型隐球菌、犬小孢子菌、须发癣菌、红色发癣菌、尖端赛多孢子菌及多育赛多孢子菌。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对各种各样的感染皮肤、毛发及指甲的真菌，以及皮下与全身性真菌病原体具有活性。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对以下3种皮肤真菌：发癣菌属、小孢子菌属及表皮癣菌属；特别是对发癣菌属及小孢子菌属具有活性。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对以下具有活性：皮肤真菌及曲霉属; 特别是犬小孢子菌、须发癣菌、红色发癣菌及烟曲霉；更特别是犬小孢子菌、须发癣菌及红色发癣菌。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对以下具有活性：须发癣菌、红色发癣菌及曲霉属; 特别是须发癣菌、红色发癣菌及烟曲霉。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对以下具有活性：须发癣菌；红色发癣菌；曲霉属例如烟曲霉；镰孢属；毛霉属；接合菌属；丝孢菌属；犬小孢子菌；申克孢子丝菌；新型隐球菌及近平滑假丝酵母。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对皮肤真菌具有活性。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对烟曲霉具有活性。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，可对各种各样的真菌，例如一种或多种上面提到的真菌具有活性。

式(I)化合物及其立体异构体形式，以及其药学上可接受的加成盐类与溶剂化物，当口服或局部给药时，是有效的抗真菌剂。

本发明的化合物可用作麦角固醇合成抑制剂。

基于式(I)化合物的用途，提供了治疗罹患任何一种上述疾病的温血动物(包括人)的方法，或预防温血动物(包括人)免于罹患任何一种上述疾病的方法。因此，提供式(I)化合物用作药物。也提供式(I)化合物在制造可用于治疗真菌感染的药物中的用途。还提供式(I)化合物，用于治疗真菌感染。

本文使用的术语“治疗”意欲指所有过程，其中可存在感染进展的减缓、中断、阻止或停止，但是不一定表示完全消除所有症状。

本发明涉及用作药物的式(I)的化合物、其立体异构体形式、以及其药学上可接受的酸或碱加成盐及溶剂化物。

本发明还涉及通式(I)的化合物、其立体异构体形式、以及其药学上可接受的酸或碱加成盐及溶剂化物，这些用于治疗或预防真菌感染，特别是由一种或多种上述真菌引起的真菌感染。

本发明还涉及通式(I)的化合物、其立体异构体形式、以及其药学上可接受的酸或碱加成盐及溶剂化物，这些用于治疗真菌感染，特别是由一种或多种上述真菌引起的真菌感染。

本发明还涉及通式(I)的化合物、其立体异构体形式、以及其药学上可接受的酸或碱加成盐及溶剂化物，这些用于治疗或预防，特别是治疗真菌感染，特别是由一种或多种选自上述真菌引起的真菌感染。

本发明还涉及通式(I)的化合物、其立体异构体形式、以及其药学上可接受的酸或碱加成盐及溶剂化物，这些用于治疗或预防特别是治疗真菌感染，特别是由一种或多种上述真菌引起的真菌感染。

本发明还涉及通式(I)的化合物、其立体异构体形式、以及其药学上可接受的酸或碱加成盐及溶剂化物，这些用于治疗或预防真菌感染，其中所述真菌感染由一种或多种选自下列的真菌引起：假丝酵母属；曲霉属；新型隐球菌属；申克孢子丝菌属；絮状表皮癣菌属；小孢子菌属；发癣菌属;镰孢属；根毛霉属；卷枝毛霉；根霉属；糠秕马拉色菌；小枝顶孢属；拟青霉属；帚霉属；爪甲白癣菌属；透明柱霉；丝孢菌属；木霉属；青霉属；马尼尔菲青霉；及芽生裂殖菌属；

特别是其中真菌感染由一种或多种选自下列的真菌引起：近平滑假丝酵母；曲霉属；新型隐球菌；申克孢子丝菌；絮状表皮癣菌；小孢子菌属；发癣菌属；镰孢属；根毛霉属；卷枝毛霉; 根霉属；小枝顶孢属;拟青霉属；帚霉属；爪甲白癣菌属；透明柱霉；丝孢菌属；木霉属；青霉属；马尼尔菲青霉；及芽生裂殖菌属；

甚至更特别是其中真菌感染由一种或多种选自下列的真菌引起：犬小孢子菌、须发癣菌、红色发癣菌及烟曲霉。

在本发明中描述的新型化合物可以用于治疗或预防选自皮肤真菌引起的感染、全身性真菌感染及甲癣的疾病或病况。

在本发明中描述的新型化合物可以用于治疗或预防例如皮肤真菌引起的感染、全身性真菌感染或甲癣的疾病或病况。

本发明还涉及通式(I)的化合物、其立体异构体形式及其药学上可接受的酸或碱加成盐类与溶剂化物用于制造药物的用途。

本发明还涉及通式(I)的化合物、其立体异构体形式及其药学上可接受的酸或碱加成盐类与溶剂化物用于制造用于治疗或预防，特别是治疗真菌感染(特别是由一种或多种上述真菌引起的真菌感染)的药物的用途。

可将本发明的化合物给予哺乳动物，特别是人，用于治疗或预防，特别是治疗真菌感染，特别是由一种或多种上述真菌引起的真菌感染。

基于式(I)化合物的用途，提供了治疗罹患真菌感染(特别由一种或多种上述真菌引起的真菌感染)的温血动物(包括人)的方法，或预防温血动物(包括人)免于罹患真菌感染(特别由一种或多种上述真菌引起的真菌感染)的方法。。

所述方法包括将有效量的式(I)的化合物、其立体异构体形式及其药学上可接受的酸加成盐或溶剂化物给予(即全身或局部给予，优选经口给予)温血动物(包括人)。

治疗所述疾病的技术人员可根据下文呈现的结果确定每日有效的治疗量。每日有效的治疗量可为约0.005mg/kg至50mg/kg，特别是0.01mg/kg至50mg/kg体重，更特别是0.01mg/kg至25mg/kg体重，优选约0.01mg/kg至约15mg/kg，更优选约0.01mg/kg至约10mg/kg，甚至更优选约0.01mg/kg至约1mg/kg，最优选约0.05mg/kg至约1mg/kg体重。达到治疗有效所需的本发明化合物(在此也称为活性成分)的量当然可根据情况不同而变化，例如特定的化合物、给药途径、受者的年龄及状况、及被治疗的特定病症或疾病。

一种治疗方法还可包括以每天一至四次摄取的方案给予活性成分。在这些治疗方法中，优选在给药之前配制本发明的化合物。如下文所描述的，合适的药物制剂通过已知方法使用熟知且容易取得的成分制备。

虽然活性成分可以单独给药，但优选以药物组合物呈递。

本发明也提供用于治疗或预防真菌感染的组合物，其包含治疗有效量的式(I)化合物及药学上可接受的载体或稀释剂。

载体或稀释剂在与组合物的其它成分相容且对其受者无害的意义上必须“可接受”。

适于治疗或预防真菌感染的本发明化合物可单独给予或与一种或多种另外的治疗剂联合给予。联合治疗包括给予含有式(I)化合物及一种或多种另外的治疗剂的单一药物剂型，以及给予呈其自身单独药物剂型的式(I)化合物及各另外的治疗剂。例如，式(I)化合物及治疗剂可在单一口服剂量组合物例如片剂或胶囊剂中一起给予患者，或各药剂可以在分开的口服剂型中给予。

基于其有用的药理性质，本发明化合物可以配制成多种药物形式用于给予目的。本发明化合物，特别是式(I)化合物、其药学上可接受的酸或碱加成盐、其立体化学异构体形式、或其任何亚组或组合，可以配制成多种药物形式用于给予目的。作为合适的组合物，可引用通常用于全身性给予药物的全部组合物。

为了制备本发明的药物组合物，有效量的作为活性成分的特定化合物，任选呈加成盐形式，与药学上可接受的载体在均质混合物中混合，所述载体可依据所期需给予的制剂形式而呈各种各样的形式。期需这些药物组合物呈合适的单一剂型，特别是用于经口、直肠、经皮、经肠胃外注射或经吸入。例如在制备口服剂型的组合物时，可以使用任何常用的药物介质，在口服液体制剂例如混悬剂、糖浆、酏剂、乳剂及溶液剂的情况下可使用例如水、二醇类、油类、醇类等；或在散剂、丸剂、胶囊剂及片剂的情况下可使用固体载体例如淀粉、糖类、高岭土、稀释剂、润滑剂、结合剂、崩解剂等。因为其给予方便，片剂及胶囊剂是最有利的口服剂量单位形式，在此情形下，明显是使用固体药物载体。对于肠胃外的组合物，载体可通常包括无菌水，至少是大部分，但可以包括其它成分例如以帮助溶解。例如可制备注射溶液剂，其中载体包括盐水溶液、葡萄糖溶液或盐水与葡萄糖溶液的混合物。含有式(I)化合物的注射溶液剂可以在油中配制以延长作用。适合于此目的的合适油是例如花生油、芝麻油、棉籽油、玉米油、大豆油、长链脂肪酸的合成甘油酯类及这些与其它油类的混合物。也可制备注射混悬剂，在此情形下，可使用合适的液体载体、助悬剂等。还包括固体形式的制剂，其意欲在临用前转化为液体形式的制剂。在适于经皮给予的组合物中，载体任选地含有穿透增强剂及/或合适的湿润剂，任选联合少量比例的任何种类的合适添加剂，该添加剂对于皮肤不会引起明显的有害作用。所述添加剂可以促进给予至皮肤及/或可有助于制备所期需的组合物。这些组合物可以以各种方式给予，例如作为透皮贴剂、作为点剂(spot-on)、作为软膏。式(I)化合物的酸或碱加成盐更适合于制备水性组合物，因为相对于相应碱或酸形式其水溶性增加。

透指甲组合物(Transungual composition)呈溶液的形式且载体任选含有穿透增强剂，其有利于抗真菌剂穿透进入及透过指甲的角质化指甲层。含水的溶剂介质与助溶剂例如含有2至6个碳原子的醇例如乙醇混合。

为了增加药物组合物中的式(I)化合物的溶解度及/或稳定性，可为有利的是，使用α-、β-或γ-环糊精或其衍生物，特别是羟基烷基取代的环糊精，例如2-羟基丙基-β-环糊精或磺基丁基-β-环糊精。而且助溶剂例如醇类可提高药物组合物中本发明化合物的溶解度及/或稳定性。

活性成分与环糊精的比率可变化很大。例如可使用1/100至100/1的比率。活性成分与环糊精的值得关注的比率范围为约1/10至10/1。活性成分与环糊精的更值得关注的比例范围为约1/5至5/1。

依据给药模式，药物组合物可优选含有以重量计0.05至99％，更优选以重量计0.1至70％，甚至更优选以重量计0.1至50％的式(I)化合物，及以重量计1至99.95％，更优选以重量计30至99.9％，甚至更优选以重量计50至99.9％的药学上可接受的载体，全部的百分比基于组合物的总重量。

对于肠胃外的组合物，还可以包含其它成分以帮助溶解，例如环糊精。合适的环糊精是α-、β-、γ-环糊精或醚类及其混合醚类，其中环糊精的无水葡萄糖单元的一或多个羟基用以下取代：C1-6烷基特别是甲基、乙基或异丙基例如随机甲基化的β-CD；羟基C1-6烷基特别是羟基乙基、羟基-丙基或羟基丁基；羧基C1-6烷基特别是羧基甲基或羧基-乙基；C1-6烷基羰基特别是乙酰基。作为络合剂及/或溶解剂，尤其值得注意的是β-CD，随机甲基化的β-CD、2,6-二甲基-β-CD、2-羟基乙基-β-CD、2-羟基乙基-γ-CD、2-羟基丙基-γ-CD及(2-羧基甲氧基)丙基-β-CD，且特别是2-羟基丙基-β-CD (2-HP-β-CD)。

术语混合醚指环糊精衍生物，其中至少两个环糊精羟基被不同的基团例如羟基-丙基及羟基乙基醚化。

使用平均摩尔取代(M.S.)作为每摩尔无水葡萄糖中烷氧基单位的平均摩尔数的量度。平均取代度(D.S.)指每一无水葡萄糖单位中，被取代的羟基的平均数。M.S.及D.S.值可以通过多种分析技术例如核磁共振法(NMR)、质谱法(MS)及红外光谱法(IR)测定。依据使用的技术，对于一种特定的环糊精衍生物可能得到稍微不同的值。优选，如通过质谱法测量的，M.S.范围为0.125至10且D.S.范围为0.125至3。

用于口服或直肠给予的其它合适组合物包含颗粒，其由含式(I)化合物的固体分散体及一种或多种合适的药学上可接受的水溶性聚合物组成。

下文中使用的术语“固体分散体”定义固态(不同于液态或气态)系统，其含有至少两种组分，在此情况下为式(I)化合物及水溶性聚合物，其中一种组分或多或少平均分散在其它一种组分或多种组分(在包括普遍为本领域所知的其它药学上可接受的配制剂，例如增塑剂、防腐剂等的情况下)中。当所述各组分的分散体使得该系统各处在化学和物理上均一或均匀时或者该系统由热力学限定的一个相组成时，这样的固态分散体将称为“固体溶液”。固体溶液是优选物理系统，因为其中的组分通常对于被给予的生物体有较好的生物利用度。此优点可能由以下解释：当与液体介质例如胃肠液接触时，固体溶液可容易地形成液体溶液。易于溶解可以至少一部分归因于以下事实：将组分从固体溶液溶解所需的能量低于将组分从晶体或微晶体固相溶解所需的能量。

术语“固体分散体”也包括整个均匀性低于固体溶液的分散体。此种分散体并非各处化学和物理上均一或含有一个以上的相。例如，术语“固体分散体”还涉及含有域(domain)或小区域的系统，其中无定形、微结晶或结晶的式(I)化合物、或无定形、微结晶或结晶的水溶性聚合物或两者是或多或少均匀分散在包含水溶性聚合物或式(I)化合物或含有式(I)化合物和水溶性聚合物的固体溶液的另一相中。所述域是固固体分散体内具有某些显著独特的物理特征(尺寸小，均匀且随机地分布在整个固体分散体中)的区域。

还可更加便利的是，将本发明的抗真菌化合物配制成纳米颗粒的形式，在其表面吸附有表面调节剂，其量足够维持有效平均粒度低于1000纳米。认为有用的表面调节剂包括这样的表面调节剂，其物理粘附于抗真菌剂的表面但不与抗真菌剂化学上键合。

合适的表面调节剂可优选选自已知的有机及无机药学赋形剂。此种赋形剂包括多种聚合物、低分子量寡聚物、天然产品及表面活性剂。优选的表面调节剂包括非离子型及阴离子型表面活性剂。

配制本发明化合物的另一种值得关注的方式涉及药物组合物，其中将本发明的抗真菌剂加入至亲水性聚合物中并将此混合物作为涂膜施用到许多小珠上，因此得到可方便地生产且适于制备药物物型供口服给予的组合物。

所述珠含有中心圆形或球形的核，亲水性聚合物的涂膜及抗真菌剂与密封涂层。

适合在珠中作为核使用的物质有多种，条件是所述物质是药学上可接受且具有适当的维度及牢固性。此类物质的实例是聚合物、无机物质、有机物质、糖类及其衍生物。

尤其有利的是将上述药物组合物配制成单位剂型供给予方便及剂量一致。在本说明书及权利要求书中使用的单位剂型指合适作为单一剂量的物理上分开的单位，各单位含有经计算产生期需的治疗效果的预定量的活性成分及所需的药物载体。此种单位剂型的实例是片剂(包括刻痕片剂或包衣片剂)、胶囊剂、丸剂、栓剂、粉包、糯米纸囊剂(wafer)、注射溶液剂或混悬剂、茶匙剂(teaspoonful)、汤匙剂(tablespoonful)等，及其分开的多个。

因为本发明化合物是可有效口服给予的化合物，所以含有所述化合物的药物组合物特别有利于口服给予。

下面的实施例说明本发明。

实验部分

以下术语“DCM”指二氯甲烷；“MeOH”指甲醇；“LCMS”指液相色谱/质谱法；“HPLC”指高效液相色谱法；“r.t.”指室温；“m.p.”指熔点；“min”指分钟；“h”指小时；“I.D.”指内径；“EtOAc”指乙酸乙酯；“Et₃N”指三乙胺；“EtOH”指乙醇；“eq.”指当量；“r.m.”指反应混合物；“q.s.”足量; “SFC”指超临界流体色谱；“THF”指四氢呋喃；“HOAc”指乙酸；“DEA”指二乙胺；“HOBt”指1-羟基-1H-苯并三唑；“Me₂S”指二甲硫；“Pd(PPh₃)₂Cl₂”指二氯双(三苯基膦)钯且“EDCI”指N'-(乙基羰基亚氨基)-N,N-二甲基-1,3-丙烷二胺单盐酸盐。

A.制备中间体

实施例A1

a-1)制备中间体1

将2-氯-6-(1H-吡咯-1-基)-苄腈(50克，0.2467摩尔)溶解在THF(500毫升)中。将BH₃在Me₂S (27.1毫升，0.2714摩尔)中的10.0 M溶液在室温逐滴添加至此溶液中。然后将反应混合物搅拌并回流12小时。随后，使混合物冷却至室温并逐滴加入6 N HCl溶液(47毫升)。将反应混合物在回流温度加热30分钟。将澄清的溶液冷却至0 ℃并加入NaOH (55.5克)。用EtOAc及饱和的盐水萃取混合物。将有机层干燥(MgSO₄)，过滤并将溶剂蒸发，得到46.5克作为游离碱的产物。随后，产物被HCl/二噁烷(足量)酸化，得到55克中间体1 (97%产率；.HCl)。

a-2)制备中间体1的备选方法

将2-氯-6-(1H-吡咯-1-基)-苄腈(0.08摩尔)在MeOH/NH₃ (250毫升)中的混合物，在MeOH中的4％噻吩溶液(2毫升)存在下，在14℃用阮内镍(2克)作为催化剂进行氢化。摄取H₂ (2当量)后，将催化剂过滤并将过滤液蒸发。随后，加入6 N 2-丙醇/HCl溶液(14毫升)。然后，将溶剂蒸发，得到2-(1H-吡咯-1-基)-苯甲胺及作为HCl-盐形式(.HCl)的中间体1的混合物。此混合物不再进一步纯化而照原样用于下一个反应步骤。

实施例A2

制备中间体2

将4-(1,1-二氟乙基)-苯甲酸(5.05克，27.1毫摩尔)溶解在DCM (100毫升)中。将Et₃N (10毫升，60.9毫摩尔)、HOBt (3.6克，27.1毫摩尔)、EDCI (5.18克，27.1毫摩尔)及中间体1 (6.0克，24.7毫摩尔)加入此溶液中并将反应混合物搅拌过夜。随后，加入水(足量)并将混合物用DCM萃取。将分离的有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤，并将溶剂蒸发。将残留物通过柱色谱法(石油醚/EtOAc梯度洗脱从15/1至10/1)纯化。收集产物级分并在真空下将溶剂蒸发，得到8.2克中间体2 (88.6 %产率)。

实施例A3

a)制备中间体3

将2-氨基-4,6-二氟苯甲酸(60克，346毫摩尔)、四氢-2,5-二甲氧基呋喃(45.7克，346毫摩尔)及吡啶盐酸盐(1:1) (40克，346毫摩尔)在二噁烷(500毫升)中的混合物加热至回流过夜。随后，将溶剂蒸发并将残留物溶解在EtOAc (100毫升)中。将此溶液用盐水及水洗涤。将有机层分离，干燥(MgSO₄)，过滤并将溶剂蒸发。产率：70克粗中间体3，其照原样用于下一个反应步骤中。

b)制备中间体4

将NH₃.H₂O (100毫升)添加至中间体3、HOBt (47克，346毫摩尔)及EDCI (70克，346毫摩尔)在DMF (300毫升)的溶液中。将反应混合物搅拌过夜。随后将溶剂蒸发，并将残留物溶解在EtOAc中。首先将此有机溶液盐用盐水及水洗涤，然后干燥(MgSO₄)并过滤，最后将溶剂蒸发。产率：55克粗中间体4，其照原样用于下一个反应步骤。

c)制备中间体5

将BH₃.Me₂S (10 M溶液；40.5毫升，405毫摩尔)添加至中间体4 (45克，202.5毫摩尔)在THF (500毫升)的混合物中。将反应混合物在N₂气氛下回流过夜。随后将混合物在冰水浴上冷却并加入6 N HCl溶液(10毫升)。将混合物再度回流30分钟。将混合物在冰水浴上冷却并加入固体NaOH直到pH > 9。将混合物用DCM (2次300毫升)萃取。将有机层分离，合并，干燥(MgSO₄)，过滤并将溶剂蒸发。用HCl/2-丙醇将棕色残留物转化成其HCl盐形式(1:1)，得到35克中间体5 (71 %产率)。

d)制备中间体6

将4-(1,1-二氟乙基)苯甲酸(1.17克，6.13毫摩尔)溶解在DCM (50毫升)中。将Et₃N (7.3毫升)、HOBt (0.828克，6.13毫摩尔)、EDCI (1.17克，6.13毫摩尔)及中间体5 (1.5克，6.13毫摩尔)加入此溶液中，并将反应混合物在室温搅拌过夜。随后，将溶剂蒸发并将水加入残留物中。将水性混合物用DCM萃取。将有机层分离，干燥(Na₂SO₄)，过滤并将溶剂蒸发。产率；1.4克中间体6 (60 %产率)。

实施例4A

a)制备中间体7

将3-乙酰基-4-氟苄腈(11.0克，67.4毫摩尔)溶解在N₂流动下的(二乙氨基)硫三氟化物(25毫升)中。将溶液加热至50℃达16小时，然后倒入NaHCO₃溶液(足量)中。将此混合物用EtOAc萃取。将有机层分离，干燥(Na₂SO₄)，过滤并在减压下将溶剂蒸发。将残留物在硅胶上通过柱色谱法纯化(洗脱液：石油醚/EtOAc从30/1至20/1)。收集所要的级分并在真空下将溶剂蒸发。产率：10.5克中间体7 (84 %产率)。

b)制备中间体8

将中间体7 (8.2克，5.7毫摩尔)在20 % NaOH溶液(50.0毫升)及EtOH (20.0毫升)中的混合物回流并搅拌过夜。随后，在真空下将混合物浓缩。加入HCl直到pH 2 并形成沉淀物。将沉淀物过滤并在真空下干燥。将固体照原样用于下一个反应步骤。产率：9.2克中间体8。

c)制备中间体9

将中间体1 (1.0克，4.2毫摩尔)、中间体8 (1.0克，5.0毫摩尔)、Et₃N (5.0毫升，36毫摩尔)、HOBt (0.62 克)及EDCI (0.96 克)在DCM (40毫升)中的混合物在室温搅拌过夜。将所得的混合物用水(3次100毫升)洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤并在减压下将溶剂蒸发。将残留物在硅胶上通过柱色谱法纯化(洗脱液：石油醚/EtOAc从20/1至10/1)。收集所要的级分并在真空下将溶剂蒸发。产率：0.9克中间体9 (59.6 %产率)。

实施例A5

a)制备中间体10

将亚硝酸叔丁酯(25克，242毫摩尔)添加至CuCN (21.5克，242毫摩尔)在CH₃CN (500毫升)的悬浮液中。将混合物加热至70 ℃并搅拌15分钟。随后，加入2-氯-4-氟-6-硝基-苯胺(23克，121毫摩尔)及CH₃CN(足量)的混合物，并将所得的棕色溶液在70℃加热过夜。在真空下将溶剂去除。将水(足量)添加至残留物中并将水性混合物用EtOAc萃取。将分离的有机层干燥(MgSO₄)，过滤，并将溶剂蒸发。将残留物在硅胶上通过柱色谱法纯化(洗脱液：EtOAc/石油醚 1/4)。收集所要的级分并在真空下将溶剂蒸发。产率：10克中间体10 (41%产率；黄色固体)。

b)制备中间体11

将Fe (11.6克，200毫摩尔)逐份添加至中间体10 (10克，50毫摩尔)在HOAc (250毫升)的溶液中。将反应混合物加热至70 ℃达1小时，随后冷却至室温。将固体过滤并将溶剂蒸发。将残留物溶解在EtOAc中，用水性NaHCO₃及水洗涤。将有机层干燥(MgSO₄)，过滤并将溶剂蒸发。产率：6.2克中间体11其照原样用于下一个反应步骤。

c)制备中间体12

将中间体11 (6克，35毫摩尔)及四氢-2,5-二甲氧基-呋喃(4.66克，35毫摩尔)在HOAc (50毫升)中的溶液在回流温度加热6小时。随后将溶剂蒸发并将残留物在硅胶上通过柱色谱法纯化(洗脱液：DCM)。收集所要的级分并将溶剂蒸发。产率：4.6克中间体12 (90 %产率)。

d)制备中间体13

将BH₃.Me₂S的10M溶液(2毫升；20毫摩尔)添加至中间体12 (4.4克，20毫摩尔)在THF(50毫升)的混合物中。将反应混合物在N₂气氛下回流过夜。随后，将混合物在冰水浴上冷却并将6 N HCl溶液(10毫升)小心添加至混合物中。然后将溶液再度回流30分钟，然后再次在冰水浴上冷却。加入固体NaOH直到pH > 9。将混合物用DCM (2次300毫升)萃取。将分离的有机层干燥(MgSO₄)，过滤并将溶剂蒸发。用HCl/2-丙醇将棕色残留物转化成HCl盐(1:1)。产率：5克中间体13 (96 %产率)。

实施例A6

a)制备中间体14

在N₂气氛下反应：将4-溴-3-氟苄腈(6.0克，30.00毫摩尔)及(1-乙氧基乙烯基)三丁锡(11.2毫升，33.00毫摩尔)在甲苯(100毫升)中的混合物在室温下搅拌。将Pd(PPh₃)₂Cl₂ (0.72克，1.03毫摩尔)加入混合物中，并将反应混合物在回流温度下加热并搅拌过夜。使混合物冷却并将2 N KF溶液(50毫升)在搅拌下加入混合物中。30分钟后，将6 N HCl 溶液(100毫升)添加至混合物中，将混合物加热至70 ℃并搅拌2小时。将不溶解的物质过滤，并将过滤液用EtOAc (3次80毫升)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，并在真空下将溶剂蒸发。产率：4.3克中间体14 (88 %产率)。

中间体14可通过实施例A4中描述的相似的反应方案进一步反应而得到化合物29。

实施例A7

a）制备中间体15

将4-氯-2,6-二氟苄腈(1.66克，9.56毫摩尔)、吡咯(0.67克，10毫摩尔)及Cs₂CO₃ (3.7克，12毫摩尔)在DMF (20毫升)中的混合物搅拌过夜。然后将固体过滤并在减压下将溶剂去除。将残留物在硅胶上通过柱色谱法纯化(洗脱液：EtOAc/石油醚10/1)。收集所要的级分并将溶剂蒸发。产率：1.1克中间体15 (15 %产率; 白色固体)。

中间体15可通过实施例A1中描述的相似的反应方案进一步反应而得到化合物32。

B.制备化合物

实施例B1

a)制备化合物1

将中间体1 (9.5克，39.2毫摩尔)及4-(1,1-二氟乙基)-苯甲醛(8.0克，47.0毫摩尔)在EtOH (15毫升)中的混合物搅拌并回流4小时。随后，使混合物冷却并结晶过夜。将沉淀物过滤，用异丙醚洗涤并在真空下干燥。产率：8.0克化合物1 (52.2 %产率)。

b) 制备化合物2及化合物3

化合物2: S 对映体；化合物3: R对映体

通过手性SFC (柱AD 300毫米*50毫米，20微米；流动相：CO₂/MeOH(0.2 % DEA) 60/40；流速；200毫升/分钟)将化合物1分离出其对映体。收集两种不同的级分，并用HCl/EtOH 1/1将两个级分转化成HCl盐形式。

产率：3.2 克化合物2 (20.8 %产率；S构型)。

产率：3.0 克化合物3 (19.6 %产率; R 构型)。

实施例B2

a)制备化合物4

将化合物1 (0.334克，0.0009摩尔)及MnO₂ (2.6克，0.0299摩尔)在DCM (15毫升)中的混合物在室温搅拌96小时。随后，将沉淀物通过硅藻土过滤并将过滤液蒸发。将残留物通过制备型HPLC纯化，得到0.19 克化合物4 (59 %)。

b)制备化合物4的备选方法

将中间体2 (4.0克，10.67毫摩尔)溶解在POCl₃ (12毫升)中。将混合物搅拌并回流过夜。随后，使混合物冷却并倒入水中。用NaOH将水性混合物中和至pH 7，然后用DCM萃取。将分离的有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤并将溶剂蒸发。将残留物从EtOH结晶，得到化合物4 (56.3 %产率)。

实施例B3

a)制备化合物18

将中间体6 (1.4克，3.71毫摩尔)溶解在POCl₃ (10毫升)中。将混合物搅拌并回流过夜。随后，使混合物冷却并倒入水中。用NaOH将水性混合物中和至pH 7，然后用DCM萃取。将有机层分离，干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。将残留物在硅胶上通过快速柱色谱法纯化(洗脱液：石油醚/EtOAc 4/1)。收集产物级分并将溶剂蒸发，得到150毫克化合物118 (21.6 %产率)。

实施例B4

a)制备化合物21

将中间体9 (0.80克，2.0毫摩尔)溶解在POCl₃ (3毫升)中。将混合物在100 ℃搅拌过夜。随后，将反应混合物倒入冰水中。加入NaOH直到pH 8-9。然后将混合物用DCM萃取。将有机层分离，干燥(Na₂SO₄)，过滤并在真空下将溶剂蒸发。将残留物在硅胶上通过柱色谱法纯化(洗脱液：石油醚/EtOAc 从10/1至5/1)。收集所要的级分并在真空下将溶剂蒸发。产率：0.510克化合物21 (产率68 %)。

实施例B5

a)制备化合物24

将中间体13 (0.52克，2毫摩尔)及4-(1,1-二氟乙基)苯甲醛(0.374克，2毫摩尔)在EtOH (5毫升)中的溶液加热至回流，达4小时。随后，使混合物冷却至室温，收集固体并干燥。产率：0.6克化合物24 (80 %产率；.HCl)。

通过使用在上面实施例中描述的类似反应方案来制备下面的化合物。‘Co. No.’指化合物编号。‘Pr.’指根据合成化合物的方案的实施例编号。如果没有指出盐形式，该化合物是作为游离碱而得到的。化合物(其中R³及R⁴是氢，且表1中没有指出其特定的立体化学)是以对映体的混合物而得到的。

如果通过使用与B1或B5中描述的方案类似的方案获得的最终化合物没有完全转化成HCl盐形式，则通过使用本领域技术人员已知的方法将化合物转化成HCl盐形式。在典型的方法中，将化合物溶解在溶剂例如2-丙醇中，且随后逐滴加入在溶剂例如2-丙醇中的HCl溶液。搅拌一段时间，通常为约10分钟，可以提高反应速率。

表1

C.分析结果

LCMS

使用含有在下面各方法中指出的泵、二极管阵列检测器(DAD) (使用波长220 nm)、柱加热器及柱的Agilent 1100模块来进行HPLC测量。来自柱的液流分流至Agilent MSD Series G1946C及G1956A。MS检测器配置有API-ES (大气压电喷雾电离)。通过从100扫描至1000而获取质谱。毛细管针电压对于正极离子化模式为2500 V且对于负极离子化模式为3000 V。片段化电压是50 V。干燥气体温度维持在350℃且流速是10升/分钟。反相HPLC使用YMC-Pack ODS-AQ, 50x2.0毫米5微米柱且在流速为0.8毫升/分钟下进行。使用2种流动相(流动相A：含0.1 % TFA的水；流动相B：含0.05 % TFA的CH₃CN)。首先，90 % A及10 % B保持0.8分钟。然后在3.7分钟时将梯度施用于20 % A及80 % B并保持3分钟。使用2微升的典型注射体积。炉温是50℃。(MS极性：正)。

熔点

对于多种化合物，使用购自Shanghai Precision and Scientific Instrument Co. Ltd.的WRS-2A 熔点装置测定熔点(m.p.)。使用线性加热速率0.2-5.0 ℃/分钟来测量熔点。报告的值是熔化范围。最高温度是300 ℃。

分析测量的结果示于表2。

表2：滞留时间(R_t)用分钟表示；[M+H]⁺峰(质子化分子)，及m.p.(熔点用℃表示). (“n.d.”指未测定；“dec”指已分解)。

¹ H NMR

对于多种化合物，使用氯仿-d (氘化氯仿CDCl₃)或DMSO-d ₆ (氘化DMSO，二甲基-d₆亚砜)作为溶剂，使用标准脉冲序列并分别在300 MHz及400 MHz操作的Bruker DPX-300或Bruker DPX-400谱仪上记录¹H NMR谱。化学位移(δ)以相对于用作内标的四甲基硅烷(TMS)的百万分之一(ppm)报告；

D. 药理实施例

实施例D.1: 体外测量抗真菌活性

在96孔培养板(U-底，Greiner Bio-One)上进行标准易感性筛选。在100 % DMSO中配制20 nM化合物储备溶液的系列稀释(2-倍或4-倍)，随后在水中进行中间体稀释步骤。然后将这些系列稀释液(10微升)点滴在测试平板上，在4℃的黑暗中最长可储存2周。包含足够宽的剂量范围且64μM是最高的测试期间(in-test)浓度。培养基RPMI-1640补充有L-谷氨酰胺、2%葡萄糖并用pH 7.0 ± 0.1的3-(N-吗啉基)-丙磺酸(MOPS)缓冲。

将不同的真菌菌种/分离物(表3a)冻存并在临用前在培养基中稀释1/1000。然后将200微升含有10³菌落形成单位(cfu)的标准接种物添加至各孔内。将阳性对照(100 %生长=无抗真菌剂的真菌培养物)及阴性对照(0 %生长= RPMI-MOPS培养基)包含于各平板上。最适培养时间及温度根据真菌菌种而变化，对于酵母(37 ℃)为24小时而对于皮肤真菌(27 ℃)为一周或更长。加入10微升0.005% (w/v)刃天青(resazurin) (Sigma Aldrich)至各孔后，根据以下原理：活细胞将非荧光蓝色刃天青转化成粉红色荧光的试卤灵，经额外的培养时间(在表3a中提到的‘resa’时间)后在荧光下读取(λ_ex550 nm及λ_em 590 nm)，来测量真菌生长的抑制作用。结果以pIC₅₀值示于表3b。

表3a: 不同真菌菌种的培养条件。‘Resa时间’代表添加刃天青至测试系统后，额外的培养时间。

表3b: 测试化合物在体外的活性

(‘n.d.’指未测定；‘Inf.’指感染；值是pIC₅₀值)

对于化合物1、3、4、6、9、14-21、23、25-33，测定Inf.‘L’的pIC₅₀值，且是<4.19。

实施例D.2：溶解度

‘UPLC’指超高效液相色谱法；‘HPBCD’指2-羟基丙基-β-环糊精。

使用微量天平精确称量通常在2毫克-4毫克之间的待测试化合物的量并添加至在20毫升透明玻璃小瓶内的0.5毫升以下缓冲液系统之一中：

A) 0.01 N HCl

B)缓冲液pH 4: 磷酸盐(0.2 M) –柠檬酸盐混合物(0.1 N)（根据Mc Ilvaine’s缓冲液)

C)缓冲液pH 4，含有10 % (w/v)的HPBCD

D)缓冲液pH 4，含有20 % (w/v)的HPBCD

E)缓冲液pH 7.4: 磷酸盐(0.2 M) –柠檬酸盐混合物(0.1 N)根据Mc Ilvaine’s缓冲液)

F)缓冲液pH 7.4，含有10 % (w/v)的HPBCD

G)缓冲液pH 7.4，含有20 % (w/v)的HPBCD

将磁搅拌棒添加至混合物中。将混合物在环境温度下搅拌至少2小时且随后目视检查。

如果化合物溶解，则报告结果(化合物称重量的两倍/毫升)。

如果化合物不溶解，则将0.5毫升额外溶剂添加至悬浮液中。将混合物在环境温度再搅拌至少2小时，随后检查。

如果化合物溶解，则报告结果(化合物称重量/毫升)。

如果化合物不溶解，则将1毫升额外溶剂吸取至悬浮液中。在环境温度振摇(Edmund Buhler SM25 175 SPM)混合物过夜且随后检查。

如果化合物溶解，则报告结果(化合物称重量的一半/毫升)。

如果化合物不溶解，则将悬浮液通过滤盘过滤。将等份量的过滤液用适当的溶剂(0.1 N HCl/乙腈1/1)稀释并使用通用的UPLC方法进行浓度测定(mg/ml)。

表4：

实施例D.3：体内药物动力学测定(生物利用度)

每个给药途径、时间点及制剂使用三只动物(平均重量20 ± 7克对于小鼠且275 ± 20克对于豚鼠)。

对于口服(PO)溶液制剂，将化合物溶解在20 %羟基丙基-β-环糊精(HP-β-CD)溶液至最终浓度1mg/ml。加入HCl促进溶解。溶解后，用NaOH使pH上升至3.7。加入甘露醇使溶液等渗。对于PO悬浮液制剂，将化合物悬浮在0.5 %美多秀(methocei)至最终浓度1mg/ml。将制剂在室温储存，避光并在制备当天用LC-MS/MS定量分析。在给予当天检查制剂的稳定性。

通过胃插管以ml/kg经口给予动物至最终剂量10mg/kg。在以溶液PO给药后15及30分钟、1、2、3、4、6、8及24小时及以悬浮液PO给药后30分钟、1、2、4、6、8及24小时，将三只已给药的动物处死以便采血。

从尾静脉通过多次取样将血液收集至Multivette^? 600 K3E管(Sarstedt)内。将样品立即放在约4 ℃并在4℃以约1900 x g离心10分钟而得到血浆。分析前将全部样品避光并储存在≤-18 ℃。

使用合格的研究LC-MS/MS方法分析血浆样品中给予的化合物。方法的关键分析表现(线性、定量的上下限、精确度及准确度)与血浆浓度一起报告。

使用WinNonlin^TM Professional (Version 5.2.1)进行限制性药物动力学分析。非房室模型分析使用lin/log梯形规则且lin/log内插法用于全部的数据。

表5：

实施例D.4: 体内测量抗真菌活性

通用方法

在下述测试中使用的动物是雌性豚鼠(Duncan-Hartley, Charles River, 200克)。将这些动物2或3只一组喂养在56x33x20cm3的笼子内。除了每天少量干草之外，可随意获取食物小丸(pellet) (Carfil Quality)及水。采用标准的饲养条件：室温：22 ℃，湿度：60 %且光-暗周期是12小时。

对于接种物的制备，感染前将犬小孢子菌(菌株B68128)在Sabouraud Dextrose Agar (SDA)平板上生长至少一周(7-10天) (27 ℃)。感染当天，通过用弯曲的巴氏吸管在平板上加入4-5毫升无菌水并使感染物质悬浮而收获孢子。将再度收集的流体10微升添加至KOVA计数室内，以测定在1平方中的孢子数量(数个平方的平均)。如果需要，制备额外的稀释液(10 x或100 x)。1平方中孢子的平均数量x稀释度x 90.000 = cfu/毫升。在蜂蜜-水混合物(50 %-50 %)中制备1 x 10⁷ cfu/毫升的接种物。

在下述的测试中，根据不同的临床参数，给出半定量损伤评分。根据损伤的严重度及大小，指定0-3.5之间的评分。标准详情列在表6。

表6：半定量皮肤损伤评分的标准

测试D.4.1：在不同剂量的口服处理达连续7天后，豚鼠中化合物4及化合物14对犬小孢子菌的活性。

人工感染方法

将豚鼠的背刮毛并用Veet^?乳液再脱毛3分钟，然后用钢刷划痕。使用一次性枪头(tips)的微量吸管将在150微升(75微升mQ + 75微升蜂蜜)中的10⁶ cfu接种物施加至伤口。使动物保持不动直到接种物完全干燥。

制剂

溶媒：美多秀(methocel) 0.5 %、Tween 80? (聚山梨醇酯80)、去除矿物质的水

参考化合物：6.25mg/ml的伊曲康唑

测试化合物：以25mg/ml制备，随后再稀释

给药及实验组

感染前约2小时开始口服处理(0.16毫升/100克，每天强饲(gavage)一次)且在连续的7天内，继续每天一次。处理后3天给动物称重以调整剂量。

感染的监测

在3、5、7、10、12、14、17及20天根据半定量损伤评分系统(见表6)评定损伤的发展。结果示于表7 (“DPI”指感染后的天数)。在表7中的报告值是平均值。

表7

从表7，可得到的结论是用溶媒处理的受感染对照组(G1)表现出现了感染的正常历程，也就是约5天后第一次损伤，且最大严重度约在第12天。豚鼠在实验结束(第20天)豚鼠都均显现一些部分白色指标鳞屑。

用伊曲康唑(10mg/kg)处理的动物(G3)一直未出现任何损伤。

对于测试化合物，可观察到明显的剂量反应。化合物4在40mg/kg(G4)明显比特比萘芬组(G2)更有活性。G5及G7组的活性相当于G2。

为了比较起见，在R⁵或R⁶位置没有1,1-二氟乙基部分的2种化合物，以类似的方案测试：

人工感染方法

将豚鼠的背刮毛并用Veet^? 乳液再脱毛7分钟，然后用钢刷划痕。使用一次性枪头的微量吸管将在200微升(100微升mQ + 100微升蜂蜜)中的10⁶ cfu接种物施加至伤口。使动物保持不动直到接种物完全干燥。

制剂

溶媒：美多秀F4M Premium EP、Tween 80? (聚山梨醇酯80)、去除矿物质的水。

测试化合物：以30mg/ml制备，随后进一步稀释至6mg/ml。

给药及实验组

感染前约2小时开始口服处理(每天强饲一次，0.40毫升/豚鼠)且在连续的7天内，继续每天一次。

感染的监测

在3、5、7、10、12、14、18及21天根据半定量损伤评分系统(见表6)评定损伤的发展。结果示于表8。在表8中的报告值是平均值。

表8

在G10及G11使用的化合物显现部分活性。但是即使在更高的剂量(50mg/kg)，在G10及G11使用的化合物显现活性低于在G7及G4使用的本发明化合物14及4 (两者均为40mg/kg)。

实施例D.5：角鲨烯-环氧化酶抑制作用

使用白假丝酵母的亚细胞级分，开发一种方法，使得能够定量化合物对麦角固醇生物合成不同阶段的作用。

将菌株B2630的白假丝酵母在500毫升含有100毫升CYG培养基(0.5 %酪蛋白水解物、0.5 %酵母提取物及0.5 %葡萄糖)的Erlenmeyer烧瓶中在旋转摇动器中在37℃下有氧地生长24小时。此培养阶段后，使用1毫升的等份样接种另一100毫升CYG培养基。如上述使细胞生长8小时。使用5毫升此8小时-培养物接种在500毫升Erlenmeyer烧瓶中的200毫升PYG培养基(1 %多蛋白胨、1 %酵母提取物及4 %葡萄糖)。使细胞在30℃作为静止培养物生长8小时并在100 rpm的旋转摇动器中再生长8小时。

培养后，通过离心(5分钟在1500 g)收集酵母细胞并用冰冷的生理盐水洗涤两次。将细胞再悬浮在15毫升均匀缓冲液(在100mM磷酸钾缓冲液pH 7.4中含有30mM烟酰胺、5mM MgCl₂及5mM还原谷胱甘肽)中并倒入含40ml玻璃珠的冰冷80毫升Bead-Beater接受液(recipient)中。将Bead-Beater的外层填满冰冷的水。在间歇冷却下将细胞均质化3次1分钟。将匀浆液在4℃及8000g下离心20分钟。用Bio-Rad方法测量8000g上清液的蛋白质浓度。Bio-rad方法是一种快速的蛋白质测量法。其为基于Bradford方法的染料-结合测定法，其基于染料对不同蛋白质浓度而出现不同的颜色变化。在典型的测定中，将0.1毫升经适当稀释的样品与5.0毫升染料试剂混合。产生的蓝绿色通过分光光度计在595nm下读取。使用10-150微克γ球蛋白制备标准曲线。

¹⁴C甲羟戊酸盐(mevalonate)结合在含有最终体积1毫升：900微升S8000级分(蛋白质4mg/ml)、3mM MgCl₂、2mM MnCl₂、5.4mM ATP、1.38mM NADH、1.5mM NADPH、0.3 μCi ¹⁴C-甲羟戊酸盐及10微升药物及/或溶剂的反应混合物中测量。在120 spm (每分钟闪烁)的往复式摇动器中在30℃培养2小时后，通过加入1毫升在90 %乙醇中的15 % KOH 将反应终止。在80℃皂化1小时并冷却后，用3毫升正庚烷萃取不能皂化的脂质并将萃取液在氮气流下干燥。使用75体积HIA (正庚烷/二异丙醚/乙酸，60/40/4，v/v/v)及25体积乙酸乙酯组成的溶剂系统通过TLC (Silicagel 60F₂₅₄, Merck)将脂质分离。通过磷-成像，用Typhoon 9200 Variabel Mode Imager扫描将脂质级分显现并使用ImageQuant 5.0软件定量。使用上述方法，可以检测作为Δ14还原酶和Δ7-Δ8异构酶抑制剂的14α-去甲基酶和角鲨烯-环氧化酶。

根据上面描述的方案，确定了式(I)化合物是角鲨烯-环氧化酶抑制剂。

E. 组合物实施例

在这些实施例中各处使用的“活性成分”涉及式(I)化合物，包括其任何立体化学异构体形式、其药学上可接受的盐或其溶剂化物，特别是任何一个示例性的化合物。

实施例E1：注射溶液剂

1.8克4-羟基苯甲酸甲酯及0.2克氢氧化钠溶解在约0.5 l用于注射的沸水中。冷却至约50℃后在搅拌下加入0.05克聚乙二醇及4克活性成分。使溶液冷却至室温并补充足量注射用水至1升，得到含有4mg/ml活性成分的溶液。将此溶液通过过滤而杀菌并装入无菌容器内。

实施例E2：透指甲组合物

将0.1444克KH₂PO₄、9克NaCl、0.528克Na₂HPO₄.2H₂O 添加至800毫升H₂O中并搅拌混合物。用NaOH将pH调整至7.4并加入500毫克NaN₃。加入乙醇(42 v/v %)并用HCl将pH调整至2.3。

将15毫克活性成分添加至2.25毫升PBS (磷酸盐缓冲盐水)/乙醇(42 %; pH 2.3)中并将混合物搅拌并用超声波处理。加入0.25毫升PBS/乙醇(42 %; pH 2.3)并将混合物再搅拌并用超声波处理直到全部活性成分溶解，得到所要的透指甲组合物。

实施例E3：口服滴剂

在60~80 ℃将500克A.I.溶解在0.5升氢氧化钠溶液及1.5升聚乙二醇中。冷却至30~40℃后加入35升聚乙二醇并将混合物充分搅拌。然后加入1750克糖精钠在2.5升纯水中的溶液并在搅拌下加入2.5 升可可调味剂(cocoa flavor)及足量的聚乙二醇至50升体积，得到含有10mg/ml A.I.的口服滴剂溶液。将所得的溶液装入合适的容器内。

实施例E4：胶囊剂

将20克A.I.、6 克月桂基硫酸钠、56克淀粉、56克乳糖、0.8克胶态二氧化硅及1.2克硬脂酸镁一起剧烈搅拌。随后将所得的混合物填入1000个合适的硬质明胶胶囊内，每个含有20mg活性成分。

实施例E5：涂膜(film-coated)片剂

制备片剂核

将100克A.I.、570克乳糖及200克淀粉的混合物充分混合且随后用含有5克十二烷基硫酸钠及10克聚乙烯吡咯烷酮的约200毫升水溶液中湿化。将湿的粉末混合物过筛，干燥并再度过筛。然后加入100克微晶纤维素及15克氢化植物油。将整体充分混合并压成片剂，得到10.000个片剂，每个含有10mg活性成分。

涂覆

向10克甲基纤维素于75ml变性乙醇的溶液中加入5克乙基纤维素在150ml二氯甲烷的溶液中。然后加入75ml二氯甲烷及2.5ml 1,2,3-丙三醇。将10克聚乙二醇熔化并溶解在75ml二氯甲烷中。将后者溶液添加至前者，然后加入2.5克十八酸镁、5克聚乙烯吡咯烷酮及30ml浓缩的颜色悬浮液并将整体均质化。在涂覆装置中将片剂核涂覆如此得到的混合物。

实施例E6：2 %乳液

将硬脂醇(75mg)、鲸蜡醇(20mg)、脱水山梨醇单硬脂酸酯(20mg)及肉豆蔻酸异丙酯(10mg)加入双壁套容器内并加热直到混合物完全熔化。将此混合物添加至纯水、聚乙二醇(200mg)及聚山梨醇酯60 (15mg)分开制备且温度是70至75℃的混合物中并使用液体匀浆器。在持续混合下，使所得的混合物冷却至低于25℃。然后在持续混合下，将A.I. (20mg)、聚山梨醇酯80 (1mg)及纯水(q.s. ad 1g)的溶液及无水亚硫酸钠(2mg)在纯水中的溶液添加至乳剂中。将乳液均质化并装入合适的管内。

实施例E7：2 %乳液

将活A.I. (2 g)、磷脂酰胆碱(20 g)、胆固醇(5 g)及乙醇(10 g)的混合物搅拌，并在55-60 ℃加热直到完全溶液并添加至羟苯甲酯(0.2克)、羟苯丙酯(0.02 g)、依地酸二钠(0.15 g)及氯化钠(0.3 g)在纯水(ad 100 g)中的溶液并且同时均质化。加入在纯水中的羟丙基甲基纤维素(1.5 g)并持续混合直到完全膨胀。

Claims

1. 式(I)的化合物，

或其立体异构体形式，其中

R¹是氢、氯或氟；

R²是氢、氯、氟或甲基；

R³及R⁴是氢；

或R³及R⁴一起形成键；

R⁵是1,1-二氟乙基，且R⁶是氢或氟；

或R⁵是氢或氟，且R⁶ 是1,1-二氟乙基；

或其药学上可接受的加成盐类或溶剂化物。

2. 权利要求1的化合物，其中R¹是氯或氟。

3. 权利要求1的化合物，其中R¹是氯或氟；且其中R²是氯、氟或甲基。

4. 权利要求1的化合物，其中

R¹是氯或氟；

R²是氢、氯、氟或甲基；

R³及R⁴一起形成键；

R⁵是1,1-二氟乙基，且R⁶是氢或氟；

或R⁵是氢或氟，且R⁶是1,1-二氟乙基。

5. 权利要求1的化合物，其中

R¹是氯或氟；

R²是氢；

R³及R⁴一起形成键；

R⁵是1,1-二氟乙基；

R⁶ 是氢。

6. 权利要求1的化合物，其中

R¹在7-位且是氯或氟；且

R²在任何其它位置且是氢、氯、氟或甲基。

7. 权利要求1的化合物，其中所述化合物是7-氯-4-[4-(1,1-二氟乙基)苯基]-6H-吡咯并[1,2-a][1,4]苯并二氮?。

8. 药物组合物，其包含药学上可接受的载体和作为活性成分的，治疗有效量的在权利要求1-7中任一项定义的化合物。

9. 权利要求1-7项中任一项定义的化合物，其用作药物。

10. 权利要求1-7项中任一项定义的化合物，其用于治疗或预防真菌感染。

11. 权利要求10的化合物，其中所述真菌感染由一种或多种选自以下的真菌引起：假丝酵母属；曲霉属；新型隐球菌属；申克孢子丝菌属；絮状表皮癣菌；小孢子菌属；发癣菌属；镰孢属；根毛霉属；卷枝毛霉；根霉属；糠秕马拉色菌；小枝顶孢属；拟青霉属；帚霉属；爪甲白癣菌属；柱霉属；丝孢菌属；木霉属；青霉属；马尔菲尼青霉；及芽生裂殖菌属。

12. 权利要求10的化合物，其中所述真菌感染由一种或多种选自以下的真菌引起：近平滑假丝酵母; 曲霉属；新型隐球菌；申克孢子丝菌；絮状表皮癣菌；小孢子菌属；发癣菌属；镰孢属；根毛霉属；卷枝毛霉；根霉属；小枝顶孢属；拟青霉属；帚霉属；爪甲白癣菌属；柱霉属；丝孢菌属；木霉属；青霉属；马尔菲尼青霉；及芽生裂殖菌属。

13. 权利要求10的化合物，其中所述真菌感染由一种或多种选自以下的真菌引起：犬小孢子菌、须发癣菌、红色发癣菌及烟曲霉。