EA019200B1 - Способ прогнозирования предрасположенности к развитию аддиктивного заболевания или расстройства (варианты) - Google Patents

Abstract

В изобретении представлен ген, отвечающий за кодирование SERT, имеет функциональный полиморфизм в 5-регуляторной промоторной области, что приводит в результате к двум формам, длинной (L) и короткой (S). Предполагается, что LL-генотип имеет важнейшее значение для раннего употребления алкоголя. Изобретение раскрывает различия в лечении и диагностике с учётом L- или S-генотипов, а также с учётом единичного нуклеотидного полиморфизма гена SERT, 3'-UTR SNP rs1042173. Изобретение демонстрирует эффективность применения лекарства ондансетрона и аналогичных лекарств для лечения с учётом вариантов в полиморфизме гена SERT, а также способы диагностики восприимчивости к алкоголемании (неудержимому стремлению к пьянству) и других аддиктивных заболеваний и расстройств.

Description

Данное изобретение относится в целом к области диагностики восприимчивости к (подверженности) заболеваниям и расстройствам, вызванным физической зависимостью (привыканием), и к расстройством контроля над побуждениями (импульсивного контроля), в частности заболеваниям и расстройствам, связанным с алкоголем, а также к мониторингу и лечению этих заболеваний и расстройств.

Предпосылки создания изобретения

Восприимчивость к алкогольной зависимости является наследственной с коэффициентом наследуемости в интервале 0.52-0.64 (Кепб1ег, 2001). Несмотря на такой высокий коэффициент наследуемости, был идентифицирован только один маркерный аллель (метаболизирующие алкоголь гены альдегиддегидрогеназы), систематически ассоциирующийся с алкоголизмом (Кгап/1ег е! а1., 2002). Было показано, что среди множества нейромедиаторных систем, с помощью которых алкоголь опосредует свое действие, серотонинергическая система играет важную роль в алкогольном предпочтении и в потреблении алкоголя (1ОЙИ5ОИ, 2004). Синаптическая серотонинергическая нейропередача заканчивается, когда серотонин (5-НТ) переносится обратно в пресинаптические нейроны 5-НТ переносчиками (5-НТТ) (Та1уепйе1то апб Кибшск, 1980). Следовательно, основная часть функциональной способности серотонинергической системы регулируется с помощью 5-НТТ. Тяжелое эпизодическое (запойное) пьянство ассоциируется со множеством психиатрических и общемедицинских состояний, являющихся причиной основных затрат на здравоохранение (Сагдш1о, 2007). Сообщалось о ряде исследований, в которых изучалась зависимость доза-эффект между степенью алкоголизма (запойного, тяжелого, злостного пьянства) и риском связанной с алкоголем заболеваемости и смертности среди алкоголиков (Маке1а апб Ми51опеп, 2007; ОаШпепб е! а1., 2007). Поэтому уменьшение алкоголизма (запойного пьянства) применяют в качестве показателя эффекта лечения в клинических испытаниях, направленных на лечение алкогольной зависимости.

Было показано, что среди множества нейромедиаторных систем, с помощью которых алкоголь опосредует свое действие, серотонинергическая система играет важную роль в алкогольном предпочтении и в потреблении алкоголя (1ойп5оп, 2004). Синаптическая серотонинергическая нейропередача заканчивается, когда серотонин (5-НТ) переносится обратно в пресинаптические нейроны 5-НТ переносчиками (5НТТ) (Та1уепйе1шо апб Кибшск, 1980), а степень обратного захвата 5-НТ зависит от плотности 5-НТТ на поверхности пресинаптической мембраны. Показано, что селективные ингибиторы обратного захвата 5НТ, которые непосредственно действуют на 5-НТТ, снижают потребление алкоголя у крыс (ОШ апб Лшй, 1989). Однако у людей 88К1 эффективно уменьшали алкоголизм (запойное пьянство) только у некоторых подтипов алкоголиков, более конкретно у алкоголиков типа А, но не типа В (Эипбоп е! а1., 2004; Рейшай е! а1., 2000), которые считаются биологически более предрасположенными к развитию алкогольной зависимости. Следовательно, логично предположить, что можно ожидать, что аллельные варианты, которые меняют уровни экспрессии гена 8ЬС6А4, оказывают большое влияние на интенсивность пьянства.

Человеческий 5-НТТ кодируется единственным геном (8ЬС6А4), картированным на хромосоме 17η11.1-η12 (Кататооййу е! а1., 1993). Протяженность гена 8ЬС6А4 составляет ~35 т.н.о., и он имеет 14 экзонов. Кодированный этим геном белок 5-НТТ является трансмембранным белком, содержащим 630 аминокислот (НеШ е! а1., 1996). Уровень экспрессии 8ЬС6А4 регулируется по меньшей мере с помощью трех механизмов: транскрипция регуляторных элементов в промоторе (КататоогШу е! а1., 1993), дифференциальный сплайсинг (Вгаб1еу апб В1аке1у, 1997) и использование различных 3'-сайтов полиаденилирования (Вайегайу е! а1., 1999). Кроме того, было показано, что на функцию обратного захвата 5-НТ в клеточных культурах влияют некоторые другие полиморфизмы, которые изменяют аминокислотную последовательность 5-НТТ (Тйг4А1а, О1у56А1а, О1и215Ьу8, Ьу8605А8п и Рго6128ег) (Ргакаб е! а1., 2003).

Хотя длинный (Ь) и короткий (8) аллельные варианты (полиморфизм) на 5-НТТ связанном полиморфном участке (5-НТТЬРК) гена 8ЬС6А4 изучались в литературе очень тщательно, результаты не позволяют сделать окончательный вывод. Например, в метаанализе 17 исследований Бешп е! а1. (2005) показали, что 8-аллель в значительной степени связан с алкогольной зависимостью у людей с одновременными аномалиями серотонинергического звена, тогда как в некоторых других работах сообщалось о связи алкогольной зависимости с Ь-аллелем (К\\еоп е! а1., 2005, Ни е! а1., 2005). С другой стороны, в ряде исследований, включая сообщение, сделанное нашей группой, выявлена дифференциальная ассоциация между хронической проблемой-пьянством и плотностью и функцией переносчика серотонина у алкоголиков, несущих Ь- и 8-варианты 8ЬС6А4 (ЬйНе е! а1., 1998, 1ауог§ е! а1., 2005, 1ойп§оп е! а1., 2008). Локализованный на участке регуляции транскрипции гена 5-НТТЬРК содержит 16 тандемных повторов протяженностью 20-23 н.о. (О + С) - богатой последовательности между н.о. -1376 и н.о. -1027. Найдены две общие формы этой области регуляции транскрипции: длинный 528 н.о. аллель (Ь) с 16 повторами и короткий 484 н.о. аллель (8) с делецией 44 н.о. длиной от н.о. -1255 до н.о. -1212.

Функция серотонина (5-НТ) принимает участие в регуляции настроения, импульсивности и употреблении алкоголя, что включает колебания возраста, в котором начинается пьянство (алкоголизм), в котором начинаются расстройства, вызванные алкоголем. Полагают, что 5-НТ система, начинающаяся в ядрах шва (головного мозга) и выходящая к коре, гиппокампу и подкожным отделам головного мозга, непосредственно влияет на характер употребления алкоголя и его последствия у людей с расстройства- 1 019200 ми, вызванными употреблением алкоголя, модулируя подкрепляющий эффект алкоголя, и опосредованно, с помощью процессов, регулирующих импульсивность и аффект. В исследованиях на животных было показано, что фармакологическое усиление 5-НТ активности ингибирует всасывание алкоголя. Исследования на людях показали, что низкий 5-НТ метаболизм ассоциируется с импульсивностью, а также с тягой к спиртному и алкоголизмом. Сообщалось о пониженном 5-НТ метаболизме в центральной нервной системе (например, 5-гидроксииндолуксусная кислота в цереброспинальной жидкости) у взрослых с ранней алкогольной зависимостью (ЕОА) по сравнению с взрослыми с поздней алкогольной зависимостью (ЬОА), и наиболее низкий центральный 5-НТ метаболизм встречается у ЕОА взрослых, у которых оба родителя имели алкогольную зависимость. Все вместе эти факты подтверждают гипотезу, что 5-НТ доступность и функция регулируют характер пьянства и историю пьянства.

Разочарование ученых вызвали данные о неудачных попытках продемонстрировать клиническую эффективность селективных ингибиторов обратного захвата серотонина (ЗЗШ) при лечении алкоголизма. Исследования на животных постоянно показывают, что ЗЗК1 снижают потребление алкоголя на различных моделях и разных видах (обзор см. 1ойпкоп апб Ай-Эаоиб, 2000). ЗЗШ усиливают центральную серотонинергическую функцию и за счет ингибирования тонизирующей функции снижают высвобождение дофамина (ИА) мезокортиколимбической системы. ΌΑ активация опосредует эффект, подкрепляющий действие алкоголя; следовательно, его уменьшение должно ассоциироваться с пониженной предрасположенностью к алкоголемании (неудержимым стремлением к пьянству). Кроме того, имеются надежные доказательства, что у людей с наивысшей биологической предрасположенностью к алкоголизму, обычно вследствие раннего заболевания, семейного анамнеза или и того, и другого, наблюдается пониженная серотонинергическая функция (Виубепк-Вгапсйеу с1 а1., 1989; Ейк-А1ше с1 а1., 1996; ЕеМащиапб с1 а1., 1994а; ЬеМагдиапб е! а1., 1994Ь; З\\'апп е! а1., 1999). Поэтому было заманчиво предсказать, что лечение алкоголиков с помощью ЗЗК1 принесет пользу и что наибольшую пользу это лечение принесет алкоголикам с ранним заболеванием, потому что ЗЗШ предположительно улучшает имеющийся дисбаланс функции серотонинергической системы.

Несмотря на обнадеживающие результаты ранних исследований, в более строгих, лучше контролируемых новейших испытаниях в целом не удалось обнаружить терапевтического эффекта 88ΚΙ при лечении алкоголизма (Сотейск апб Рагебек, 1992; 1<гапх1ег е! а1., 1996).

У людей функциональный контроль серотонинергической системы, по-видимому, также регулируется генетическими различиями при экспрессии ЗЕК.Т (МеНхег апб Агога, 1988). ЗЕК.Т имеет единственный известный функциональный полиморфизм, регулирующий серотониновую систему (Небк е! а1., 1997; Небк е! а1., 1996; Ьексй е! а1., 1997). В сущности, полиморфизм 5' регуляторного промоторного участка ЗЕК.Т (5'-НТТЬРК.) на хромосоме 17р12 состоит из двух типов (Нейк е! а1., 1997; Нейк е! а1., 1996; Ьексй е! а1., 1997). Длинный (ЬЬ) вариант, по сравнению с короткой (88) или гетерозиготной (ЗЬ) формой, ассоциируется с втрое более высоким поглощением 5-НТ из эритроцитов (СтеепЬетд е! а1., 1999) и в лимфобластах (Ьексй е! а1., 1996). Поэтому следует ожидать, что индивидуумы с ЬЬ вариантом 5'НТТЬРК. будут иметь повышенное число и усиленную функцию ЗЕК.Т и пониженные уровни 5-НТ в интрасинаптическом пространстве.

Последние научные результаты как будто подтверждают гипотезу о преимуществе ЬЬ варианта 5'НТТЬРК. среди ЕОА (1кЫдито е! а1., 1999; Зсйискй е! а1., 1999). Тигкег е! а1. (1998) предположил, что высокая устойчивость к алкоголю может быть связана с ЗЗ/ЗЬ формой 5'-НТТЬРК, но их скорее неформальные критерии и использование контроля из банка крови с ненадежными историями алкоголизма могут затруднить подтверждение их выводов. Помимо этого, в исследовании Запбег е! а1. (1998) не найдено соотношения (р=0.09) между ЗЗ/ЗЬ генотипом и алкоголиками с асоциальным личностным расстройством. Наконец, существуют противоречивые данные о связи между ЗЗ/ЗЬ формой 5'-НТТЬРК. и алкоголизмом в целом (ЕбепЬетд е! а1., 1998; Натшоит1 е! а1., 1999; 1отш е! а1., 1998; Запбег е! а1., 1997); однако эти работы не содержат информации о субтипировании. Кроме того, трудно сравнивать эти эпидемиологические исследования генотипирования вследствие различия диагностических критериев в этих исследованиях и различной частоты популяции аллельных форм в этнических группах. Возможно, наиболее важно, что ни в одном из этих исследований не принимается во внимание, что возможна взаимосвязь между этими субтипами и потреблением алкоголя, что является важным. То есть, даже если сами по себе эти аллельные формы ЗЕК.Т не могут определять восприимчивость к алкоголизму, взаимосвязь между аллельными формами и потреблением алкоголя может определять реакцию на лечение, в частности на селективный серотонинергический агент.

Сообщалось о пониженной 5-НТ трансмиссии у людей с повышенной склонностью к пьянству и у алкоголиков с антисоциальным поведением (а именно ЕОА) (ЬеМатдиапб е! а1., 1994а; ЬеМащиапб е! а1., 1994Ь). Эти результаты согласуются с 1) демонстрацией повышенного поглощения 5-НТ пресинаптическими серотонинергическими нейронами в мозгу, в лимфоцитах и в тромбоцитах алкоголиков и их потомков (Вощшате е! а1., 1987; ЕгпопГ е! а1., 1993; Еата.) е! а1., 1997) и 2) исследованиями ЗРЕСТ на нечеловеческих приматах, перенесших ранний стресс в связи с неблагоприятными условиями среды, которые показывают, что повышенное связывание переносчика серотонина ассоциируется с повышенной агрессивностью и пониженной чувствительностью к интоксикации этанолом (Нет/ е! а1., 1998). Поэтому бы

- 2 019200 ло бы заманчиво предположить, что это гипосеротонинергическое состояние может сделать индивидуума более восприимчивым к раннему приему алкоголя.

Хотя быстрый прием алкоголя может сначала вызывать некоторое временное облегчение, утешение, приятное разнообразие за счет повышения уровня 5-НТ в мозгу, остаточным эффектом является снижение функции серотонина, тем самым запуск патологического цикла (обзор см. ЬеМащиаиб с1 а1., (ЬеМагдиаиб е1 а1., 1994а; ЬеМагдиаиб е1 а1., 1994Ь)). Хроническое неумеренное пьянство не приводит к продолжительному повышению нейротрансмиссии 5-НТ (Вгаисйсу е1 а1., 1981; ЬеФд е1 а1., 1982; Ройогеску е1 а1., 1978). Пониженная плотность 8ЕК.Т в ядрах шва ассоциируется с ранним алкоголизмом у правонарушителей (лиц, совершивших насильственные преступления) (Тпйоиеи е1 а1., 1997) и с сочетанием наличия ЬЬ варианта 5'-НТТЕРЕ и хронического пьянства, обнаруженным как в мозгу при вскрытии умерших (Ый1е е1 а1., 1998), так и у живых индивидуумов (Нет/ е1 а1., 2000). Исследование Нет/ и сотрудников (Нет/ е1 а1., 2000) показало, что индивидуумы с ЬЬ формой 5'-НТТЬРК. более восприимчивы к хроническому вызванному алкоголем снижению плотности 8ЕК.Т, но их исследование требует подтверждения корректности в будущем исследовании с адекватной эффективностью, которое включает равное количество индивидуумов с ЬЬ и 88/8Ь вариантами 5'-НТТЕРЕ. Это позволит подтвердить дифференциальную фенотипическую экспрессию этих аллельных форм. Хотя с первого взгляда это кажется парадоксальным (а именно для индивидуумов с ЬЬ вариантом 5'-НТТЕРК, у которых наблюдается пониженная плотность 8ЕК.Т и пониженная серотонинергическая функция), примечательно, что 8ЕК.Т в ядрах шва ассоциируется с регуляцией скорости активации (включения) клеток.

В уровне техники давно существует ощутимая потребность в композициях и способах, применимых для диагностики, лечения и мониторинга алкогольных расстройств и восприимчивости к алкогольным расстройствам. Настоящее изобретение удовлетворяет эту потребность.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение включает некоторые способы и анализы, применимые для определения предрасположенности субъекта к развитию аддиктивного заболевания или расстройства, определения восприимчивости субъекта к конкретному лечению и конкретным композициям и методам, применимым для лечения субъекта, нуждающегося в таком лечении. Например, настоящее изобретение охватывает композиции и методы, их комбинации, применимые для того, чтобы предсказывать восприимчивость к повышенной интенсивности пьянства и предсказать подходящее лечение.

Настоящее изобретение охватывает композиции и методы, применимые для лечения субъектов, злоупотребляющих алкоголем, на основании идентификации генетических маркеров, свидетельствующих о том, что субъект предрасположен к тяжелому пьянству или более восприимчив к алкоголизму и проблемному пьянству. Анализы сосредоточены на серотониновой системе, в частности на гене переносчика серотонина 8ЬС6А4, его экспрессии и различных полиморфизмах этого гена. В одном аспекте маркер основан на количественном определении нуклеотидных полиморфизмов. В одном аспекте полиморфизм представляет собой полиморфизм единичных нуклеотидов (8ИР). Помимо этого, изобретение включает применение комбинаций анализов, чтобы способствовать прогнозированию предрасположенности к развитию аддиктивного заболевания или расстройства и содействовать прогнозированию лечения на основе результатов анализов. В одном аспекте субъекту вводят по меньшей мере одно лекарство, которое регулирует часть системы серотонина. В одном аспекте можно использовать комбинированную терапию, вводя дополнительные лекарства.

В данном изобретении обнаружено, что субъекты, имеющие С-аллель 8ИР полиморфизма Г81042173 гена переносчика серотонина 8ЬС6А4, ассоциируются со значительно более низкой интенсивностью пьянства по сравнению с субъектами, гомозиготными по Т-аллелю. Это оказалось верным для белых людей, но не для латиноамериканцев. Кроме того, в настоящей заявке раскрывается, что клетки, трансфецированные с помощью С-аллеля 8ИР полиморфизма г§1042173 гена переносчика серотонина 8ЬС6А4, содержали значительно более высокие уровни как мРНК, так и белка-переносчика серотонина по сравнению с клетками, трансфецированными с помощью Т-аллеля. Даже среди зависимых от алкоголя носителей С-аллеля для г§1042173 наблюдалась меньшая интенсивность пьянства по сравнению с субъектами с алкогольной зависимостью, гомозиготными по Т-аллелю. Кроме того, настоящая заявка раскрывает, что субъекты с алкогольной зависимостью с ТТ-генотипом лучше реагируют на лечение ондансетроном, чем аналогичные субъекты с ТС/СС-генотипом. Следовательно, настоящее изобретение включает композиции и методы, применимые для прогнозирования предрасположенности к аддиктивному заболеванию или расстройству и тяжести этого расстройства, а также композиции и методы, применимые для прогнозирования соответствующего лечения и лекарственных схем для этих субъектов. Настоящее изобретение показывает, что для субъектов, гомозиготных по Т-аллелю, можно разработать лечение, чтобы повысить экспрессию 8ЬС6А4 гена или его белка или их уровни либо активность, что лечение дополнительно включает композиции и методы, применимые для снижения уровня и активности серотонина.

В настоящей заявке раскрывается, что молодые люди с ЬЬ-генотипом функционального полиморфизма для 5'-регуляторной промоторной области гена 8ЕК.Т (5-НТТЕРК.) имеют повышенные уровни 8ЕК.Т в соответствии с измерениями связывания ³Н-пароксетина и значительно более раннее начало

- 3 019200 пьянства. Следовательно, настоящее изобретение охватывает метод предсказания (прогнозирования), кто из субъектов имеет предрасположенность к раннему пьянству, а также методы лечения этих субъектов, включая лечение с целью снижения экспрессии 8ЕК.Т и его активности.

Помимо этого, настоящая заявка раскрывает, что взаимосвязь лечения (ондансетроном) и генотипа (Ь8 У8. Ь8/88) в высшей степени (высоко) значима и что значительную роль играет возраст, в котором началось пьянство. Заявка раскрывает значительно более высокое связывание пароксетина (плотность 8ЕК.Т) у носителей ЬЬ-генотипа по сравнению с 8-носителями (88- или 8Ь-генотипы). Помимо этого, настоящая заявка раскрывает, что у представителей ЬЬ-группы наблюдается пьянство в более раннем возрасте и более продолжительное пьянство. Эти обнадеживающие результаты предоставляют первое доказательство того, что у алкоголиков с ЬЬ-генотипом, по сравнению с алкоголиками с Ь8/88генотипом, наблюдается значительно большее облегчение тяжести пьянства после лечения ондансетроном.

В одном варианте настоящее изобретение включает лечение алкоголиков, а также людей с другими аддиктивными заболеваниями и расстройствами с помощью по меньшей мере одного лекарства. В одном аспекте субъект имеет генотип ЬЬ. В одном аспекте по меньшей мере одно лекарство представляет собой ондансетрон. В одном аспекте при лечении снижают ΌΌΌ. Помимо этого, настоящее изобретение охватывает применение нескольких лекарств и комбинации лекарств для лечения субъектов по данному описанию.

Помимо этого, настоящее изобретение включает применение комбинаций анализов с целью точнее диагностировать и прогнозировать восприимчивость к развитию аддиктивного заболевания или расстройства, а также методы прогнозирования персонального лечения на основе применения одного или более предсказуемостных анализов. На основании результатов одного или более анализов можно спланировать лечение конкретно для данного субъекта.

Настоящее изобретение охватывает метод, в котором комбинируются лекарства для лечения или предупреждения аддиктивных расстройств, таких как алкогольная зависимость. Поскольку усиливающие эффекты большинства наркотиков опосредуются также СМОЛ нейронами, настоящее изобретение включает комбинированную терапию такими лекарствами, как топирамат, ондансетрон и налтрексон в качестве эффективных лекарственных средств для аддиктивных расстройств, включая (но без ограничения) злоупотребление алкоголем, едой, кокаином, метамфетамином, марихуаной, табаком и зависимость от них и другие формы аддиктивного поведения, включая, например, игровую и сексуальную зависимости. Основываясь на неожиданных открытиях по данному описанию, рядовой специалист в данной области техники увидит теперь, что соединения по изобретению, применимые для комбинированной лекарственной терапии, в некоторых случаях можно применять индивидуально, а не как часть комбинации. Кроме того, основываясь на настоящей публикации, рядовой специалист в данной области техники примет во внимание, что соединения по изобретению, применимые для комбинированной лекарственной терапии, можно в некоторых случаях применять в любой комбинации.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы лечения или предупреждения обусловленного злоупотреблением алкоголем заболевания или расстройства, включающие введение субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере двух антиалкогольных агентов или соединений и, необязательно, других терапевтических агентов. Предпочтительно по меньшей мере три антиалкогольных агента или соединения применяют в комбинированной терапии. Помимо этого, настоящее изобретение охватывает дополнительное применение методов психосоциальной терапии. В одном аспекте только лекарственная комбинированная терапия является более эффективной, чем эта терапия в сочетании с методами психосоциальной терапии. В другом аспекте лекарственная комбинированная терапия в сочетании с методами психосоциальной терапии является более эффективной, чем одна лекарственная комбинированная терапия. В одном аспекте настоящее изобретение включает методы лечения или предупреждения обусловленного злоупотреблением алкоголем заболевания или расстройства у субъекта, включающие введение субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере двух соединений или предпочтительно по меньшей мере трех соединений либо их аналогов, гомологов, производных, модификаций и фармацевтически приемлемых солей, выбранных из группы, состоящей из серотонинергических агентов, антагонистов серотонина, селективных ингибиторов обратного захвата серотонина, антагонистов серотониновых рецепторов, опиоидных антагонистов, дофаминергических агентов, ингибиторов высвобождения дофамина, антагонистов дофамина, антагонистов норэпинефрина, агонистов САВЛ (γ-аминомасляной кислоты), ингибиторов САБА, антагонистов рецепторов САБА, антагонистов САВА каналов, агонистов глутамата, антагонистов глутамата, агонистов глутамина, антагонистов глутамина, противосудорожных агентов, ММПА-блокирующих агентов, антагонистов кальциевых каналов, ингибиторов карбонатдегидрогеназы, нейрокининов, низкомолекулярных соединений, пептидов, витаминов, кофакторов, агенты против орексинов, регуляторов каннабиоидного рецептора-1 и антагонистов кортикостероид-рилизинг фактора. В одном варианте изобретения нейрокинин представляет собой ΝΡΥ. Кроме того, настоящее изобретение охватывает введение других низкомолекулярных соединений и пептидов.

В одном варианте изобретения подлежащее лечению обусловленное злоупотреблением алкоголем

- 4 019200 заболевание или расстройство включает, но без ограничения, ранний алкоголизм, поздний алкоголизм, вызванное злоупотреблением алкоголем психотическое расстройство, алкогольную зависимость, чрезмерное пьянство, тяжелый запой, проблемное пьянство, алкогольную интоксикацию, алкогольную абстиненцию, обморок (синкопе), вызванный алкогольным отравлением (интоксикацией), алкогольную персистирующую деменцию, алкогольное персистирующее амнестическое расстройство, алкогольную зависимость, алкогольное психотическое расстройство с галлюцинациями, алкогольную депрессию, вызванное или ассоциированное с алкоголем биполярное расстройство, вызванный или ассоциированный с алкоголем посттравматический стресс, тревожное расстройство алкогольного генеза, сексуальную дисфункцию алкогольного генеза, вызванное или ассоциированное с алкоголем расстройство сна, вызванную или ассоциированную с алкоголем игроманию, вызванное или ассоциированное с алкоголем сексуальное расстройство и алкогольное расстройство без дополнительных уточнений. В одном аспекте обусловленное злоупотреблением алкоголем заболевание или расстройство представляет собой ранний алкоголизм. В другом аспекте обусловленное злоупотреблением алкоголем заболевание или расстройство представляет собой поздний алкоголизм.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы для снижения частоты употребления алкоголя по сравнению с частотой употребления алкоголя до лечения. Рядовой специалист в данной области техники понимает, что частоту можно сравнивать с предыдущей частотой употребления субъектом или с употреблением контрольным субъектом, не получавшим лечения. В одном аспекте характер употребления алкоголя представляет собой тяжелое пьянство. В другом аспекте характер употребления алкоголя представляет собой избыточное пьянство.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы снижения количества алкоголя, потребляемого субъектом, по сравнению с количеством алкоголя, потреблявшимся до лечения, или с потреблением контрольным субъектом, не получавшим лечения.

Рядовой специалист в данной области техники понимает, что в некоторых случаях субъект, у которого лечат аддиктивное расстройство, необязательно является зависимым. Такие субъекты включают, например, субъектов, злоупотребляющих алкоголем, которые тяжело пьют, избыточно пьют, являются проблемными пьяницами или заядлыми наркоманами. Настоящее изобретение включает композиции и методы лечения или предупреждения такого поведения у субъектов без зависимости.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы улучшения физических или психологических последствий, ассоциированных с употреблением алкоголя, по сравнению с контрольным субъектом, не получающим лечения.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы для повышения скорости воздержания (абстиненции) субъекта по сравнению с контрольным субъектом, не получающим лечения.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы для снижения среднего уровня употребления алкоголя субъектом по сравнению с уровнем употребления алкоголя до лечения или с потреблением алкоголя контрольным субъектом, не получавшим лечения.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы для снижения употребления алкоголя и повышения воздержания (абстиненции) по сравнению с уровнем употребления алкоголя до лечения или с потреблением алкоголя контрольным субъектом, не получавшим лечения.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы для лечения субъекта с предрасположенностью к раннему алкоголизму.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы для лечения субъекта с предрасположенностью к позднему алкоголизму.

Рядовой специалист в данной области техники понимает, что существует множество показателей или характеристик употребления алкоголя, которые могут характеризовать субъекта, подверженного обусловленному алкоголем заболеванию или расстройству. Понятно также, что комбинированная терапия может быть эффективна при лечении более одного показателя и что существует много способов анализа эффективности лечения. Показатели (параметры), анализируемые при количественном определении потребления алкоголя или частоты употребления алкоголя, включают, но без ограничения, дни тяжелого запоя, число дней тяжелого запоя, среднее число дней запоя, число выпивок в день, дни абстиненции (воздержания), число людей, не пьющих тяжело или воздерживающихся от выпивки в течение данного периода времени, и пристрастие, тягу. Как объективные, так и субъективные показатели можно использовать для анализа эффективности лечения. Например, субъект может составлять самоотчет в соответствии с указаниями и методиками, установленными для такого сообщения. Методики могут даваться в различное время до, во время и после лечения. Кроме того, имеются анализы для количественного определения потребления алкоголя. Эти анализы включают измерение содержания алкоголя в выдыхаемом воздухе с помощью спиртометра, измерение сывороточных уровней СЭТ и СОТ (глутаминтрансферазы) и измерение уровней 5-НТОЬ в моче.

Кроме того, настоящее изобретение включает дополнительные лечебные мероприятия, применяемые в сочетании с комбинированной лекарственной терапией. Помимо этого, настоящее изобретение включает дополнительную терапию или лечение, если субъект также участвует в программе психосоциальной терапии. Программы психосоциальной терапии известны в уровне техники и включают, но без

- 5 019200 ограничения, терапию, повышающую приверженность лечению (комплаенс), когнитивно-поведенческую терапию, копирование навыков, терапию, повышающую мотивацию (МЕТ), терапию 12 шагов (Анонимные алкоголики), комбинированное поведенческое вмешательство, медицинскую коррекцию, психоанализ, психодинамическое лечение и биопсихосоциальный подход, отчет, эмпатию (сопереживание), требования, рекомендации, непосредственную помощь и оценку. Помимо этого, настоящее изобретение охватывает дополнительную терапию и лечение, включая гипноз и акупунктуру.

Помимо этого, настоящее изобретение включает рекомендации (консультации), которые даются субъектам с комбинированной лекарственной терапией. Рекомендации состоят из набора инструкций, относящихся к возможным последствиям избыточного пьянства, календаря или другого метода мониторинга выпивки, и инструкций или пожеланий, как снизить или прекратить выпивку (пьянство). Любой из этих планов действия, индивидуально или в любой комбинации, неважно, короткий или длинный, может составлять рекомендации. Формат рекомендаций (консультаций) может быть письменный, электронный или в виде межличностных отношений. В одном варианте изобретения комбинированная лекарственная терапия обеспечивает более эффективное лечение и предупреждение, чем простое введение плацебо и рекомендации, отсутствие лекарств и рекомендации или отсутствие лекарств или рекомендации (консультации). В одном аспекте изобретения комбинированная лекарственная терапия обеспечивает более эффективное лечение и предупреждение, чем лекарственная терапия в сочетании с программой психологической поддержки (терапии).

В одном варианте изобретения по меньшей мере одно из вводимых соединений вводят по меньшей мере один раз в день. В одном аспекте изобретения его вводят по меньшей мере два раза в день. В другом варианте изобретения его вводят по меньшей мере один раз в неделю. Еще в одном варианте изобретения его вводят по меньшей мере один раз в месяц.

В одном варианте изобретения по меньшей мере одно из соединений представляет собой антагонист серотонинового рецептора. В одном аспекте серотониновый рецептор представляет собой рецептор серотонина-3. В одном аспекте соединение представляет собой ондансетрон.

Различные аспекты и варианты изобретения более подробно описаны ниже.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1 - полученные с помощью программы Ηαρ1ονίο\ν диаграммы ΣΌ (Никаде ШвециШЬтшт, неравновесное сцепление в наследовании) для пяти 8ΝΡ (полиморфизмов единичных нуклеотидов), изучавшихся в данном исследовании, и 5-ΗΤΤΣΡΒ аллелей гена 8БС6А4. Суммарная выборка состоит из представителей белой европеоидной расы и латиноамериканцев. Цифра в каждом квадрате представляет величину Ό' для каждой 8ΝΡ пары.

Фиг. 2 - количество выпитого у 165 мужчин- и женщин-алкоголиков, относящихся к европеоидной расе. Фиг. 2А) - количество выпитого как функция ТТ-, ТС- и СС-генотипов Т81042173 (Ν субъектов в каждой группе: 47 ТТ, 77 ТС и 41 СС). Среднее количество спиртного в день запоя (± 8ЕМ) для ТТ, ТС и СС субъектов составляет 11.17±0.98 νδ. 8.05±0.47 и 9.58±0.67 соответственно (Е=5.63; р=0.004). Фиг. 2В) - разброс (колебание, дисперсия) количества выпитого на день запоя как функция ТТ- и С-носителей (Ν субъектов каждого генотипа: 47 ТТ, 118 С-носителей). Среднее количество спиртного в день запоя (± 8ЕМ) для гомозиготных по Т- и С-носителей составляет 11.17±0.98 νδ. 8.58±0.39 соответственно (1=2.97; р=0.003).

Фиг. 3А) - уровни экспрессии мРНК переносчика серотонина (5-НТТ) в культурах клеток НеБа, определенные с помощью количественного анализа ПЦР в реальном времени. Приведенные здесь данные представляют собой среднее значение ± 8ЕМ из четырех реплик мРНК для 5-НТТ, экспрессированных при использовании Т- и С-аллелей в трех отдельных экспериментах (Ехр.), проведенных в разное время. САРПН=глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа. Фиг. 3В) - средняя разница оптической плотности полос, наблюдаемых на иммуноблотах в случае экспрессии белка переносчика серотонина (5-НТТ) в культурах клеток НеЬа для Т- и С-аллель-специфической экспрессии в трех клеточных культурах (С: 1.23+0.07; Т: 0.28+0.05; N=4).

На фиг. 4 представлено графическое изображение связывания пароксетина тромбоцитами (Втах) для носителей ЬЬ- и 8-генотипов (5-ΗΤΤΣΡΒ генотип). Значения по оси ординат показывают связывание тромбоцитом (Втах), а на оси абсцисс показан генотип.

Подробное описание изобретения

Сокращения, родовые названия и акронимы:

5-НТ - серотонин,

5-НТ₃ - подтип серотонинового рецептора, рецептор серотонина-3,

5-ΗΤΘΣ - 5-гидрокситриптофол,

5-НТТ - переносчик серотонина (также обозначаемый 8ΕΡΤ, 5ΗΤΤ, НТТ и ОСЭ1),

5-ΗΤΤΣΡΒ - полиморфный участок гена переносчика серотонина,

АЭЕ - эффект алкогольной депривации,

ΑΌΙ - диагностический опросник для подростков,

Α8ΡΌ - антисоциальное расстройство личности,

ΑυΌ - нарушение, связанное со злоупотреблением алкоголем,

- 6 019200

ВВСЕТ - терапия, повышающая приверженность лечению (комплаенс),

ΒΕΌ - компульсивное переедание,

Ьл.б. - два раза (дважды) в день,

Втах - максимальная плотность специфического связывания пароксетина,

ΒΚΕΝΏΑ - биопсихосоциальный подход, отчет, эмпатия (сопереживание), требования, непосредственная помощь и оценка,

СВ1 - комбинированное поведенческое вмешательство,

СВТ - когнитивно-поведенческая терапия копирования навыков, также называемая когнитивноповеденческой терапией,

СОТ - углевод-дефицитный трансферрин,

СЫР8 - психиатрический опросник для детей,

СМЭА - кортико-мезолимбический дофамин,

ΌΑ - дофамин,

ΌΌΌ - запой/день пьянства,

Ό8Μ - диагностическое и статистическое руководство по психическим расстройствам,

ЕОА - алкоголик(и) с ранним началом заболевания (ранним алкоголизмом),

О2651Т - сайт в предполагаемом сигнале полиаденилирования для обычно используемого сайта 3' полиаденилирования гена 8ЬС6А4; также имеет регистрационный номер Т81042173 на веб-сайте ОепВапк Национального Информационного Центра Биотехнологий,

ΟΑΒΑ - γ-аминомасляная кислота,

СОТ - γ-глутамилтрансфераза,

1СЭ - расстройство контроля над побуждениями,

1Р - интраперитонеальный (внутрибрюшинный),

Κ,ι - константа аффинности,

К_т - константа равновесия,

Ь - длинный,

БОА - алкоголик(и) с поздним началом заболевания (поздний алкоголизм),

МЕТ - терапия, повышающая мотивацию, ιηίΡΝΑ - микроРНК,

ММ - терапевтические меры,

ΝΑε - центр удовольствия, налтрексон - антагонист μ-опиоидного рецептора, ποΡΝΑ - некодирующая РНК,

ΝΜΌΑ - Ν-метил-О-аспартат,

N08 - иначе не указанный, без дополнительных уточнений (БДУ), неуточненное, ондансетрон (Зофран®) - антагонист серотонинового рецептора,

Р - крысы, предпочитающие алкоголь,

- короткий,

8ΕΡΤ - переносчик серотонина (также обозначаемый 5-НТТ),

8Ε·ί.'6Α4 - человеческий ген переносчика 5-НТ,

8ΝΡ - единичный нуклеотидный полиморфизм,

88Ш - селективный ингибитор обратного захвата серотонина, топирамат (Топамакс®) - противосудорожный препарат, антиконвульсант,

Т8Е - терапия 12 шагов (например, анонимные алкоголики),

У_тах - максимальная скорость захвата серотонина,

VΤΑ - вентральная тегментальная область.

Определения.

При написании изобретения и формулы изобретения применяют терминологию в соответствии с представленньми ниже определениями. Если не указано иначе, все технические и научные термины в данном описании имеют такое же значение, которое обычно известно рядовому специалисту в области техники, к которой относится данное изобретение. Хотя при практическом применении и при проверке настоящего изобретения могут использоваться любые методы и материалы, аналогичные или эквивалентные методам и материалам по данному описанию, предпочтительные методы и материалы представлены в данном описании. В данном описании каждый из приведенных ниже терминов имеет значение, указанное в данном разделе. Специфические и предпочтительные значения, представленные ниже для радикалов, заместителей и интервалов, даны только для иллюстрации; они не исключают других заданных (определенных) значений или других значений в заданных (определенных) интервалах для радикалов и заместителей.

В данном описании утверждение в отношении объекта в единственном числе относится к одному или более чем одному объекту. Например, элемент означает один элемент или более чем один элемент.

Термин около по данному описанию означает примерно, в области, грубо говоря и приблизитель

- 7 019200 но. Когда термин около применяется в сочетании с числовым интервалом, он модифицирует этот интервал, расширяя границы выше и ниже представленных чисел. Как правило, термин около применяется в данном описании для модификации числового значения выше и ниже установленного значения с расхождением 20%.

Аддиктивные заболевания включают, но без ограничения, расстройства пищевого поведения, расстройства, обусловленные ожирением, расстройства контроля над побуждениями, расстройства, связанные с употреблением алкоголя, расстройства, связанные с употреблением никотина, расстройства, вызванные употреблением амфетаминов, расстройства, вызванные употреблением метамфетамина, расстройства, вызванные употреблением марихуаны, расстройства, вызванные употреблением кокаина, сексуальные расстройства, расстройства, вызванные употреблением галлюциногенов, расстройства, вызванные употреблением летучих растворителей, расстройства, вызванные злоупотреблением или зависимостью от бензодиазепина, и расстройства, вызванные злоупотреблением опиоидами.

Рядовой специалист в данной области техники понимает, что аддиктивные расстройства, такие, которые вызваны алкоголем или лекарствами, не означают, что субъект является зависимым, если это конкретно не установлено.

Выражение дополнительное терапевтически активное соединение в контексте настоящего изобретения относится к применению или введению соединения для дополнительного терапевтического применения, отличного от терапии конкретного подлежащего лечению заболевания. Такое соединение, например, может включать соединение, применяемое для лечения несвязанного заболевания или расстройства или заболевания или расстройства, которое может быть вызвано первичным лечением аддиктивного заболевания или расстройства. Заболевания и расстройства, которые лечат с помощью дополнительного терапевтически активного агента, включают, например, гипертонию и диабет.

Термин аэрозоль по данному описанию относится к суспензии в воздухе. В частности, аэрозоль относится к измельченным или к атомизированным частицам препарата по изобретению и их суспензии в воздухе.

Термин пораженная клетка по данному описанию относится к клетке субъекта, страдающего заболеванием или расстройством, причем пораженная клетка имеет измененный фенотип по сравнению с клеткой субъекта, не страдающего заболеванием, патологическим состоянием или расстройством.

Клетки или ткань поражены заболеванием или расстройством, если клетки или ткань имеют измененный фенотип по сравнению с теми же клетками или тканью субъекта, не страдающего заболеванием, патологическим состоянием или расстройством.

Термин агонист по данному изобретению представляет собой композицию предмета изобретения, которая при введении млекопитающему, такому как человек, усиливает или продлевает целевую биологическую активность.

Термин злоупотребляющий алкоголем по данному описанию относится к субъекту, который соответствует критерию IV Ό8Μ злоупотребления алкоголем (т.е.неоднократное употребление, несмотря на регулярные отрицательные последствия), но не является зависимым от алкоголя.

Выражение расстройства, обусловленные употреблением алкоголя по данному описанию относится к заболеваниям и расстройствам, связанным с употреблением алкоголя, и включают, но без ограничения, вызванное алкоголем психотическое расстройство, с бредом; злоупотребление алкоголем; чрезмерное пьянство; тяжелое пьянство (тяжелый запой); проблемное пьянство; алкогольную интоксикацию; алкогольную абстиненцию; бред, вызванный алкогольным отравлением (интоксикацией) (белая горячка); бред, вызванный алкогольной абстиненцией; алкогольную персистирующую деменцию; алкогольное персистирующее амнестическое расстройство; алкогольную зависимость; алкогольное психотическое расстройство с галлюцинациями; алкогольную депрессию; вызванное или ассоциированное с алкоголем биполярное расстройство; вызванный или ассоциированный с алкоголем посттравматический стресс; тревожное расстройство алкогольного генеза; сексуальную дисфункцию алкогольного генеза; вызванное или ассоциированное с алкоголем расстройство сна и алкогольное расстройство неуточненное (N08).

Аминокислоты в данном описании представлены своим полным названием, соответствующим им трехбуквенным кодом или соответствующим им однобуквенным кодом, представленными в нижеприведенной таблице

- 8 019200

Полное название

Аспарагиновая кислота

Глутаминовая кислота

Лизин

Трёхбуквенный код

Авр

Οΐυ

Йу5

Аргинин

Аг§

Г истидин

ΗΪ3

Тирозин

Цистеин

Туг

Суз

Аспарагин

Азп

Глутамин

О1п

Серин

8ег

Треонин

ТЬг

Глицин

О1у

Аланин

А1а

Валин

Уа1

Лейцин

Ьеи

Изолейцин

Не

Метионин

Мс1

Пролин

Рго

Фенилаланин

РЬе

Однобуквенный код ϋ

Триптофан

Тгр

Предполагается, что термин аминокислота по данному описанию включает как природные, так и синтетические аминокислоты и как Ό-, так и Ь-аминокислоты. Термин стандартная аминокислота означает любую из двадцати стандартных Ь-аминокислот, имеющихся в природных пептидах. Выражение остаток нестандартной аминокислоты обозначает любую аминокислоту, отличную от стандартных аминокислот, вне зависимости от того, получены они синтетически или из природного источника. Выражение синтетическая аминокислота по данному описанию охватывает также химически модифицированные аминокислоты, включая, но без ограничения, соли, производные аминокислот (такие как амиды) и замещенные аминокислоты. Аминокислоты в пептидах по настоящему изобретению и в особенности на карбокси- и аминоконце можно модифицировать метилированием, амидированием, ацетилированием или заменой на другие химические группы, которые могут изменить период полужизни пептида в кровотоке, не оказывая вредного влияния на их активность. Кроме того, в пептидах по изобретению может присутствовать или отсутствовать дисульфидная связь.

Термин аминокислота применяется взаимозаменяемо с термином аминокислотный остаток и может относиться к свободной аминокислоте и к аминокислотному остатку пептида. Из контекста ясно, относится ли этот термин к свободной аминокислоте или к остатку пептида.

Аминокислоты имеют следующую общую структуру:

Аминокислоты можно разделить на семь групп в зависимости от боковой цепи К: (1) алифатические боковые цепи; (2) боковые цепи, содержащие гидроксильную (ОН) группу; (3) боковые цепи, содержащие атомы серы; (4) боковые цепи, содержащие кислотную или амидную группу; (5) боковые цепи, содержащие основную группу; (6) боковые цепи, содержащие ароматическое кольцо; и (7) пролин, иминокислота, в которой боковая цепь конденсирована с аминогруппой.

- 9 019200

Выражение консервативная аминокислотная замена по данному описанию определяется как замена на аминокислоту из следующих пяти групп:

I) малые (низкомолекулярные) алифатические неполярные или слабополярные остатки: А1а, 8ег, ТЬг, Рго, О1у;

II) полярные отрицательно заряженные остатки и их амиды: Акр, Аки, С1и. С1и;

III) полярные положительно заряженные остатки: Ηίκ, Агд, Бук;

IV) большие алифатические неполярные остатки: Ме1, Беи, Не, Уа1, Сук;

V) большие ароматические остатки: РЬе, Туг, Тгр.

Номенклатура, применяемая для описания пептидных соединений по настоящему изобретению, следует обычной практике, когда аминогруппа находится слева, а карбоксигруппа расположена справа каждого аминокислотного остатка. В формулах, представляющих выбранные конкретные варианты настоящего изобретения, если не указано иначе (без дополнительных уточнений), концевые амино- и карбоксигруппы, хотя и не показанные специально, находятся в форме, которую они имеют при физиологических значениях рН.

Выражение основная или положительно заряженная аминокислота по данному описанию относится к аминокислотам, у которых группы В имеют результирующий положительный заряд при рН 7.0 и включают, но без ограничения, стандартные аминокислоты - лизин, аргинин и гистидин.

Термин аналог химического соединения по настоящему изобретению означает соединение, которое, например, похоже на другое по структуре, но не обязательно является изомером (например, 5флуорурацил представляет собой аналог тимина).

Термин антагонист означает вещество, которое при введении млекопитающему, такому как человек, ингибирует или затрудняет биологическую активность, обусловленную уровнем или присутствием эндогенного соединения в организме млекопитающего, такой эффект может быть прямым (непосредственным) или косвенным.

Термин антиалкогольный агент по данному описанию относится к любому активному лекарству, препарату или методу, который проявляет активность, лечащую или предупреждающую один или более симптомов хронического алкоголизма, злоупотребления алкоголем, алкогольной интоксикации и/или алкогольной абстиненции, включая лекарства, препараты и методы, которые значительно снижают, ограничивают или предупреждают употребление алкоголя у млекопитающих.

Выражение подавление аппетита (потребности) по данному описанию означает снижение, уменьшение или, в случае переедания, уменьшение аппетита (потребности). Подавление аппетита может привести к потере в весе или, при желании, к регуляции веса.

Выражение среднее количество спиртного (алкоголя) по данному описанию относится к среднему количеству спиртного в течение одной недели. Термин среднее количество спиртного в данном описании применяется взаимозаменяемо с выражением средний уровень потребления спиртного.

Биомаркер обозначает специфический биохимический показатель в организме, который имеет конкретный молекулярный признак, делающий его пригодным для количественного определения прогрессирования заболевания или эффекта лечения или для количественного измерения целевого процесса.

Термин соединение по данному описанию относится к типу вещества или агента, которое обычно рассматривается как лекарство или как кандидат на использование в качестве лекарства, а также к комбинациям и смесям вышеуказанного.

Контрольный субъект означает субъекта, имеющего такие же характеристики, что и тестируемый субъект, например сходный тип зависимости и т.д. Наблюдение за контрольным субъектом можно проводить точно или примерно в то же время, когда проводят лечение тестируемого субъекта или исследование на нем. Изучение контрольного субъекта можно также, например, проводить во время, отдаленное от времени, в которое проводят исследование на тестируемом субъекте, а результаты изучения контрольного субъекта можно регистрировать таким образом, чтобы полученные результаты можно было сравнивать с результатами исследования на тестируемом субъекте.

Тестируемый субъект обозначает субъекта, проходящего лечение.

Термин производное соединения по данному описанию относится к химическому соединению, которое можно получать из другого соединения аналогичной структуры в одну или более стадий замещением Н на алкильную, ацильную или аминогруппу.

Термин диагностика относится к определению риска или склонности к аддиктивному заболеванию или расстройству. В любом методе диагностики имеются ложноположительные и ложноотрицательные результаты. Ни один диагностический метод не обеспечивает точность 100%.

Заболевание означает состояние здоровья субъекта, при котором субъект не может поддерживать гомеостаз и при котором в случае отсутствия ослабления заболевания здоровье субъекта продолжает ухудшаться. Напротив, расстройство у субъекта означает состояние здоровья, при котором субъект способен поддерживать гомеостаз, но при этом состояние здоровья субъекта менее благоприятно, чем оно было бы в отсутствие расстройства. Однако не предполагается, что вышеприведенные определения заболевание и расстройство заменяют определения или обычное употребления слов, связанные с аддиктивными заболеваниями или расстройствами.

- 10 019200

Заболевание, состояние или расстройство облегчается, если снижается тяжесть симптома заболевания или расстройства, частота, с которой пациент испытывает такой симптом, или и то, и другое.

Выражение эффективное количество по данному описанию означает количество, достаточное для достижения выбранного эффекта, такого как ослабление симптомов заболевания или расстройства. В случае введения двух или более соединений количество каждого соединения, вводимого в комбинации с другим(и) соединением (соединениями), может отличаться от количества этого соединения, вводимого индивидуально. Выражение более эффективный означает, что выбранный эффект усиливается в большей степени с помощью одной терапии по сравнению со второй терапией, с которой первая терапия сравнивается.

Термин эликсир по данному описанию относится в целом к прозрачной подслащенной спиртосодержащей, обычно водно-спиртовой, жидкости, содержащей корригенты и иногда активные лекарственные агенты.

Этнические и расовые категории определяются в данном описании в соответствии с указаниями ΝΙΗ (1997 год ОМВ Директива 15).

Этнические категории.

Латиноамериканец: уроженец Кубы, Мексики, Пуэрто-Рико, Южной или Центральной Америки или другой страны испаноязычной культуры или испаноязычного происхождения, вне зависимости от расы. Выражение человек испаноязычного происхождения также может применяться помимо термина латиноамериканец.

Не латиноамериканец.

Расовые категории.

Американец индейского происхождения или коренной житель Аляски: человек, происходящий от коренных народов Северной, Центральной или Южной Америки и сохраняющий наследственные болезни (физические недостатки) и общественное поведение.

Азиат: человек, происходящий от коренных жителей Дальнего Востока, Юго-Восточной Азии или Индийского субконтинента, включая, например, Камбоджу, Китай, Индию, Японию, Корею, Малайзию, Пакистан, Филиппины, Таиланд и Вьетнам (примечание: уроженцы (выходцы с) Филиппин (Филиппинских островов) в более ранних методиках сбора данных зарегистрированы как жители тихоокеанских островов).

Черный американец или афроамериканец: человек, корни которого уходят к любой из групп черной расы Африки. Помимо названий черный американец или афроамериканец, может употребляться название гаитянин, выходец с Гаити или Негр.

Уроженец Гавайских или других островов Тихого океана: человек, происходящий от коренных жителей Гавайев, Гуама, Самоа или других островов Тихого океана.

Белый: человек, происходящий от коренных жителей Европы, Среднего Востока или Северной Африки.

Термин чрезмерно пьющий (неумеренно пьющий) по данному описанию относится к мужчинам, которые пьют более 21 дозы (единицы) алкоголя в неделю, и к женщинам, которые пьют более 14 доз (единиц) алкоголя в неделю. Одна стандартная доза (единица) алкоголя составляет 0.5 унций (~14.8 мл) абсолютного спирта, что эквивалентно 10 унциям (~295 мл) пива, 4 унциям (~118 мл) вина или 1 унции (~29.5 мл) стандартного ликера. Эти индивидуумы не зависят от алкоголя, но могут соответствовать или могут не соответствовать критерию IV Ό8Μ для злоупотребления алкоголем.

Термин функциональная молекула по данному описанию означает молекулу в той форме (в том виде), в которой она проявляет свойство активности, которой она характеризуется. Например, функциональный фермент означает фермент, который проявляет характеристическую каталитическую активность, характеризующую этот фермент.

Термин запойный (злостный пьяница) по данному описанию относится к мужчинам, которые выпивают более 14 единиц (доз, порций) алкоголя в неделю, и к женщинам, которые потребляют более 7 единиц алкоголя в неделю. Одна стандартная доза (единица) алкоголя составляет 0.5 унций (~14.8 мл) абсолютного спирта, что эквивалентно 10 унциям (~295 мл) пива, 4 унциям (~118 мл) вина или 1 унции (~29.5 мл) стандартного ликера. Эти индивидуумы не зависят от алкоголя, но могут соответствовать или могут не соответствовать критерию IV Ό8Μ для злоупотребления алкоголем.

Выражение запойное (злостное, тяжелое) пьянство по отношению к зависимой от алкоголя популяции в примере 1 означает потребление по меньшей мере 21 стандартной дозы/неделя для женщин и по меньшей мере 30 доз/неделя для мужчин в течение 90 дней перед включением в исследование и более подробно представлено в этом примере.

День запоя (тяжелого, сильного пьянства) по данному описанию относится к употреблению мужчиной или женщиной более пяти или четырех стандартных доз на день запоя соответственно.

Выражение злостное употребление лекарств по данному описанию относится к употреблению лекарств, допускающих злоупотребление, включая, но без ограничения, кокаин, метамфетамин, другие стимуляторы, фенилциклидин, другие галлюциногены, марихуану, седативные препараты, транквилизаторы, гипнотические вещества, опиаты, с интервалами или в количестве, превышающем норму. Интер

- 11 019200 валы употребления включают интервалы, такие как по меньшей мере один раз в месяц, по меньшей мере один раз в неделю и по меньшей мере один раз в день. Злостное употребление лекарств определяют при тестировании как положительное при употреблении этого лекарства по меньшей мере в 2 случаях на любой данной неделе при интервале между тестированиями по меньшей мере 2 дня.

Термин ингалятор относится к устройствам как для назального, так и легочного введения лекарства, например, в виде раствора, порошка и т.п. Например, предполагается, что термин ингалятор охватывает ингалятор, приводимый в действие газом-вытеснителем, такой как применяемый для введения антигистаминного препарата при остром приступе астмы, и пластиковые флаконы для спрея, такие как используются для введения противоотечных препаратов.

Термин ингибировать по данному описанию относится к способности соединения или любого агента снижать или затруднять описанные функцию, уровень, активность, синтез, высвобождение, связывание и т.д. с учетом контекста, в котором употребляется термин ингибировать. Предпочтительно ингибирование осуществляется по меньшей мере на 10%, более предпочтительно по меньшей мере на 25%, еще более предпочтительно по меньшей мере на 50% и наиболее предпочтительно по меньшей мере на 75%. Термин ингибировать употребляется взаимозаменяемо с терминами снижать (уменьшать) и блокировать.

Выражение ингибировать комплекс по данному описанию относится к ингибированию образования комплекса или взаимодействия двух или более белков, а также к ингибированию функции или активности комплекса. Выражение также охватывает разрыв образованного комплекса. Однако термин не подразумевает, что все эти функции без исключения должны ингибироваться одновременно.

Выражение ингибировать белок по данному описанию относится к любому методу или к приему, который ингибирует синтез, уровни, активность или функцию, а также методам ингибирования индукции или стимулирования синтеза, уровней, активности или функции целевого белка. Выражение также относится к любому метаболическому или регуляторному пути, который может регулировать синтез, уровни, активность или функцию целевого белка. Выражение включает связывание с другими молекулами и комплексообразование. Следовательно, термин ингибитор белка относится к любому агенту или соединению, применение которого приводит к ингибированию белковой функции или метаболической функции белка. Однако термин не подразумевает, что все эти функции без исключения должны ингибироваться одновременно.

Выражение инструктивный материал по данному описанию включает публикацию, запись информации, диаграмму или любой другой способ выражения, который можно использовать, чтобы сообщить о полезности соединения по изобретению в наборе для облегчения различных заболеваний или расстройств, перечисленных в данном описании. Необязательно, или попеременно, в инструктивном материале может быть описан один или более методов облегчения заболеваний или расстройств у субъекта. Инструктивный материал в наборе по изобретению может, например, быть приклеен (прикреплен) к контейнеру, который содержит идентифицированное соединение по изобретению или может поставляться вместе с контейнером, который содержит идентифицированное соединение. Или же, инструктивный материал может поставляться отдельно от контейнера с намерением, что инструктивный материал и соединение будут использоваться реципиентом совместно.

Интенсивность пьянства относится к числу доз (стаканов, порций), которое оценивается такими величинами, как количество стаканов (порций, доз)/день, количество стаканов (порций, доз)/день запоя и т.д. Следовательно, более высокая интенсивность пьянства означает большее количество стаканов (порций, доз)/день, количество стаканов (порций, доз)/день запоя и т.д.

Термин лиганд по данному описанию означает соединение, которое специфически связывается с соединением- или с молекулой-мишенью. Лиганд специфически связывается с соединением или специфически реактивен по отношению к соединению, если лиганд реагирует в реакции связывания, которая определяет присутствие соединения в образце из различных соединений.

Термин рецептор определяет соединение или молекулу, которое специфически связывается с лигандом.

Термин связь по данному описанию относится к связи между двумя группами. Связь может быть либо ковалентной, либо нековалентной, включая, но без ограничения, ионные связи, водородную связь и гидрофобные/гидрофильные взаимодействия.

Термин линкер по данному описанию относится к молекуле, которая соединяет две другие молекулы либо ковалентной, либо нековалентной связью, например ионной или водородной связью или за счет сил Ван-дер-Ваальса.

Выражение измерение уровня экспрессии или определение уровня экспрессии по данному описанию относится к любому количественному определению (измерению) или анализу, которые можно использовать для корреляции результатов анализа с уровнем экспрессии целевого гена или белка. Такие анализы включают количественное определение уровня мРНК, уровней белка и т.д. и могут осуществляться с помощью таких анализов как нозерн- или вестерн-блоттинг, анализы связывания, иммуноблоттинг и т.д. Уровень экспрессии может включать скорости экспрессии и может измеряться как действительное количество имеющейся мРНК или присутствующего белка.

- 12 019200

Выражение назальное введение во всех грамматических формах относится к введению по меньшей мере одного соединения через слизистую оболочку носа в кровоток для системной доставки по меньшей мере одного соединения по изобретению. Преимущество назального введения для доставки заключается в том, что оно не требует инъекции шприцом и иглой, оно позволяет избежать некроза, который может сопутствовать внутримышечному введению лекарств, и чресслизистое введение лекарства может осуществлять сам пациент.

Термин нуклеиновая кислота по данному описанию охватывает РНК, а также одно- и двухцепочечную ДНК и кДНК. Помимо этого, термины нуклеиновая кислота, ДНК, РНК и аналогичные термины включают также аналоги нуклеиновых кислот, т.е. аналоги, имеющие отличный фосфодиэфирный каркас. Например, так называемые пептидные нуклеиновые кислоты, известные в уровне техники и имеющие пептидные связи вместо фосфодиэфирных связей в каркасе, рассматриваются в объеме настоящего изобретения. Под нуклеиновой кислотой понимают также любую нуклеиновую кислоту, состоящую либо из дезоксирибонуклеозидов или рибонуклеозидов и содержащую либо фосфодиэфирные связи, либо модифицированные связи, такие как фосфотриэфирные, фосфорамидатные, силоксановые, карбонатные, карбоксиметилэфирные, ацетамидатные, карбаматные, тиоэфирные, мостиковые фосфорамидатные, мостиковые метиленфосфонатные, мостиковые фосфорамидатные, фосфоротиоатные, метилфосфонатные, фосфородитиоатные, мостиковые фосфоротиоатные или сульфоновые связи и комбинации таких связей. Термин нуклеиновая кислота конкретно включает нуклеиновые кислоты, состоящие из оснований, отличных от пяти природных оснований (аденин, гуанин, тимин, цитозин и урацил). Для изображения полинуклеотидных последовательностей в данном описании используется обычное изображение: левый конец одноцепочечной полинуклеотидной последовательности представляет собой 5'-конец; левое направление двухцепочечной полинуклеотидной последовательности обозначают как 5'направление. Направление от 5' к 3' добавления нуклеотидов к образующимся РНК транскриптам называется направлением транскрипции. Нить ДНК, имеющая ту же последовательность, что и мРНК, называется кодирующей нитью (тяжем); последовательности на нити ДНК, расположенные 5' к стандартной точке на ДНК, называются последовательностями в обратном направлении (апстрим); последовательности на нити ДНК, расположенные 3' к стандартной точке на ДНК, называются последовательностями в прямом направлении (даунстрим).

Если не указано иначе (дополнительно не поясняется), нуклеотидная последовательность, кодирующая аминокислотную последовательность включает все нуклеотидные последовательности, которые являются вырожденными вариантами друг друга и которые кодируют одну и ту же аминокислотную последовательность. Нуклеотидные последовательности, которые кодируют белки и РНК, могут включать интроны.

Ожирение обычно относится к состоянию повышенной массы тела вследствие избыточного жира. Лекарства для лечения ожирения обычно делятся на три группы: (1) которые снижают всасывание пищи, такие как лекарства, которые оказывают противодействие рецепторам моноаминов, таким как норадренергические рецепторы, серотониновые рецепторы, дофаминовые рецепторы и гистаминовые рецепторы; (2) которые повышают метаболизм и (3) которые повышают термогенез и снижают всасывание жира с помощью ингибирующей панкреатической липазы (Вгау, 2000, Νυίπΐίοη, 16: 953-960 и ЬеопЬагк) е) а1., 1999, Еиг. 1. Νπίτ., 38: 1-13). Ожирение определяют индексом массы тела (ВМ1). ВМ1 рассчитывают как масса (кг)/[рост (м)]², в соответствии с указаниями Центра по контролю и предупреждению заболеваний США (СЭС) и Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ, \УНО). Рйу81еа1 йаШк: Тйе ике апк т)етрте)а)юп οί апШторотеку. Сепеуа, 8\\-Цхег1апк: \Уог1к Неайй ОгдашхаОоп. 1995. \УНО Тее11шеа1 Верой 8епе5). для взрослых старше 20 лет ВМ1 попадает в одну из трех категорий: ниже 18.5 рассматривается как вес ниже нормы, 18.5-24.9 считается нормальным, 25.0-29.9 считается выше нормы и 30.0 и выше считается ожирением.

Термин олигонуклеотид обычно относится к коротким полинуклеотидам, обычно не более примерно 50 нуклеотидов. Следует понимать, что если нуклеотидная последовательность представлена последовательностью ДНК (т.е. А, Т, С, С), она также включает РНК последовательность (т.е. А, и, С, С), в которой и заменяет Т.

Термин пептид обычно относится к коротким полипептидам.

Полипептид относится к полимеру, состоящему из аминокислотных остатков, родственным природным структурным вариантам и их синтетическим неприродным аналогам, связанным пептидными связями, родственным природным структурным вариантам и их синтетическим неприродным аналогам. Синтетические полипептиды можно синтезировать, например, на автоматическом синтезаторе полипептидов.

Термин белок обычно относится к большим полипептидам.

Рекомбинантный полипептид означает полипептид, который продуцируется при экспрессии рекомбинантного полинуклеотида.

Пептид охватывает последовательность двух или более аминокислот, причем аминокислоты являются природными или синтетическими (не-природными) аминокислотами. Пептиды-миметики включают пептиды, имеющие одну или более следующих модификаций:

- 13 019200

1) пептиды, в которых одна или более пептидильных -С(О)МЯ-связей (групп) заменены на непептидильную связь, такую как -СН₂-карбаматная связь (группа) (-СН₂ОС(О)ИК-), фосфонатная связь, -СН₂-сульфонамидная (-СН₂-8(О)₂ИК-) связь, карбамидная (мочевинная) (-ИНС(О)ИН-) связь, связь -СН₂- вторичный амин или алкилированной пептидильной связью (-С(О)ИК-), где Я обозначает С₁-С₄ алкил;

2) пептиды, в которых Ν-конец дериватизирован в -ΝΚΚ¹ группу, в -ИКС(О)Я группу, в -ИКС(О)ОЯ группу, в -NЯ8(О)2Я группу, в -NНС(О)NНЯ группу, где Я и Я¹ обозначают водород или С1С₄ алкил при условии, что как Я, так и Я¹ не обозначают водород;

3) пептиды, в которых С-конец дериватизирован в -С(О)Я², где Я² выбирают из группы, состоящей из С1 -С4-алкокси, и -ΝΚ4⁴. где Я³ и Я⁴ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и С1 -С₄алкила.

Выражение на один прием по данному описанию относится к введению лекарства или соединения субъекту.

Термин фармацевтически приемлемый носитель по данному описанию включает любые стандартные фармацевтические носители, такие как фосфатно-солевой буферный раствор, вода, эмульсии, такие как эмульсия масло-в-воде, водомасляная эмульсия (эмульсия воды в масле) и различные типы смачивающих реагентов (увлажняющих средств). Термин охватывает также любые агенты, одобренные регулирующим органом Федерального Правительства США или перечисленные в И8 Рйагтасоре1а для применения на животных, включая человека.

Выражение по данному описанию физиологически приемлемый (или приемлемая) сложный эфир или соль означает активный ингредиент в форме сложного эфира или соли, совместимые с любыми другими ингредиентами фармацевтической композиции и не являющиеся вредными для субъекта, которому должна вводиться композиция.

Термин предрасположенность к аддитивному заболеванию или расстройству относится к ситуациям, когда существует повышенная вероятность злоупотребления субъектом таким веществом, как алкоголь или лекарство, или привыкания к алкоголю либо лекарству или других аддиктивных заболеваний или расстройств.

Термин предупреждать по данному описанию означает предотвращать наступление чего-либо или применять опережающие меры против того, чтобы случилось что-либо возможное или вероятное. В медицинском контексте предупреждение обычно относится к действию, направленному на уменьшение возможности появления заболевания или состояния.

Термин проблемный пьяница по данному описанию охватывает людей, которые пьют неумеренно (избыточно) и сообщают, что употребление алкоголя вызывает у них проблемы. Такие проблемы включают, например, возбуждение при интоксикации, проблемы на работе, вызванные неумеренным пьянством, и проблемы во взаимоотношениях, вызванные неумеренным пьянством субъекта.

Термин защитная группа по данному описанию в применении к концевой аминогруппе относится к концевой группе пептида, которая конденсируется с любой защитной группой для аминоконцевой группы, применяемой обычно в пептидном синтезе. Такие защитные группы включают, например, ацильные защитные группы, такие как формильная, ацетильная, бензоильная, трифторацетильная, сукцинильная и метоксисукцинильная; ароматические уретановые защитные группы, такие как бензилоксикарбонильная; и алифатические уретановые защитные группы, например трет-бутоксикарбонильная или адамантилоксикарбонильная; см. Отоев апб МешйоГег, ебе., Тйе Рерйбее, νοί. 3, р. 3-88 (Асабеплс Ргеее, Νον Уотк, 1981) о применяемых защитных группах.

Защитная группа по данному описанию в применении к концевой карбоксигруппе относится к концевой карбоксильной группе пептида, которая конденсируется с любой из защитных групп для концевой карбоксильной группы. Такие защитные группы включают, например, трет-бутильную, бензильную или другие приемлемые группы, связывающиеся с концевой карбоксильной группой сложноэфирной или простой эфирной связью.

Термин программа психологической помощи (поддержки) по данному описанию относится к использованию различных методов психологического консультирования и руководства, применяемых с целью дополнить комбинированную фармакотерапию, для лечения аддиктивных и связанных с употреблением алкоголя заболеваний и расстройств.

Термин очищенный по данному описанию и подобные термины относятся к обогащению молекулы или соединения по сравнению с другими компонентами, обычно ассоциирующимися с молекулой или соединением в естественной среде. Термин очищенный необязательно показывает, что в ходе процесса достигается абсолютная чистота конкретной молекулы. Высокочистое соединение по данному описанию относится к соединению с чистотой выше 90%.

Снижать - см. ингибировать.

Выражение уменьшение количества выпитого (пьянства) по данному описанию относится к уменьшению количества выпитого (пьянства) в соответствии с одним или более количественных определений количества потребляемого алкоголя, таких как запойное (тяжкое) пьянство, число порций алкоголя (выпивок)/день, число порций алкоголя (выпивок)/день запоя и т.д.

- 14 019200

Термин регулировать относится либо к стимулирующей, либо к ингибирующей функции или целевой активности.

Термин образец по данному описанию относится к биологическому образцу, взятому у субъекта, включая, но без ограничения, образцы нормальной ткани, образцы больной ткани, биоптат, кровь, слюну, стул, сперму, слезы и мочу. Образцом может также являться другой источник материала, полученного от субъекта, который содержит целевые клетки, ткани или жидкость, в зависимости от требований и типа анализа, проводимого на этом образце.

Под малыми интерферирующими РНК (δί-РНК) понимают, среди прочего, молекулу выделенной дцРНК, содержащую как смысловую, так и антисмысловую цепь. В одном аспекте длина ее составляет более 10 нуклеотидов. δί-РНК также относится к единичному транскрипту, который имеет как смысловую, так и комплементарную антисмысловую последовательности из гена-мишени, например шпильку. Кроме того, δί-РНК включает любую форму дцРНК (продукты протеолитического расщепления большей дцРНК, частично очищенной РНК, практически чистой РНК, синтетической РНК, РНК, полученной методами рекомбинантной ДНК), а также измененную РНК, отличие которой от природной РНК заключается в добавлении, делеции, замене и/или изменении одного или более нуклеотидов.

Под выражением специфически связывается по данному описанию понимают молекулу, которая узнает и связывает специфическую молекулу, но практически не узнает или не связывает другие молекулы в образце, или это выражение означает связывание между двумя или более молекулами, как в процессе регуляции в клетке, когда указанные молекулы практически не узнают или не связывают другие молекулы в образце.

Термин стандартный (эталонный) по данному описанию относится к чему-либо, используемому для сравнения. Например, это может быть известный стандартный агент или известное стандартное соединение, который(ое) вводят или добавляют и используют для сравнения с результатами, полученными при добавлении тестируемого соединения, или это может быть стандартный показатель (параметр) или стандартная функция, которые измеряют, чтобы получить контрольное значение при измерении эффекта, или агента, или соединения, или параметра, или функции. Стандарт может относиться к внутреннему стандарту, такому как агент или соединение, который(ое) в известных количествах добавляют к образцу и который(ое) применяют для определения таких характеристик, как скорость очистки или выделения, когда образец обрабатывают или подвергают очистке или экстракции перед количественным определением целевого маркера. Внутренние стандарты часто представляют собой очищенные целевые маркеры, в которые введены метки, такие как радиоактивный изотоп, позволяющий отличить его от эндогенного маркера.

Выражение одна стандартная порция (единица, доза) алкоголя по данному описанию означает 0.5 унций (~14.8 мл) абсолютного спирта, что эквивалентно 10 унциям (~295 мл) пива, 4 унциям (~118 мл) вина или 1 унции (~29.5 мл) стандартного ликера.

Субъект диагностики или лечения означает млекопитающее, включая человека.

Выражение субъект имеет предрасположенность к раннему алкоголизму по данному описанию относится к субъекту, который имеет предрасположенность или характеризуется предрасположенностью к раннему алкоголизму.

Термин симптом по данному описанию относится к любому вызванному болезнью явлению или отступлению от нормальной структуры, нормальной функции или нормального ощущения, испытываемого пациентом, и являющемуся показателем заболевания. Напротив, признак является объективным свидетельством заболевания. Например, кровотечение из носа является признаком. Он очевиден для пациента, врача, сестры и других наблюдателей.

Термин лечение по данному описанию может включать профилактику конкретного заболевания, расстройства или состояния или облегчение симптомов, обусловленных конкретным заболеванием, расстройством или состоянием, и/или предупреждение или устранение указанных симптомов. Профилактическое лечение означает лечение субъекта, который не проявляет признаков заболевания или проявляет только ранние признаки заболевания, с целью снижения риска развития патологии, обусловленной заболеванием. Термин лечение употребляется в данном описании взаимозаменяемо с термином терапия.

Терапевтическое лечение означает лечение субъекта, который проявляет признаки патологии, с целью ослабления или устранения этих признаков.

Терапевтически эффективное количество соединения означает такое количество соединения, которого достаточно для обеспечения благотворного эффекта для субъекта, которому вводят соединение.

Определение химических терминов.

Термин галоген или галоид по данному описанию включает бром, хлор, фтор и йод.

Термин галогеналкил (галоидалкил) по данному описанию относится к алкильному радикалу, несущему по меньшей мере один галоидный заместитель, например хлорметил, фторэтил или трифторметил и т.п.

Термин в данном описании С1-С_п-алкил, в котором η обозначает целое число, означает разветвленную или линейную алкильную группу, содержащую от одного до указанного числа атомов углерода.

- 15 019200

Обычно С₁-С₆-алкильные группы включают, но без ограничения, метил, этил, н-пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, гексил и т.п.

Термин в данном описании С₂-С_п-алкенил, в котором η обозначает целое число, означает олефиновую ненасыщенную разветвленную или линейную группу, содержащую от двух до указанного числа атомов углерода и по меньшей мере одну двойную связь. Примеры таких групп включают, но без ограничения, 1-пропенил, 2-пропенил, 1,3-бутадиенил, 1-бутенил, гексенил, пентенил и т.п.

Термин в данном описании С₂-С_п-алкинил, в котором η обозначает целое число, означает ненасыщенную разветвленную или линейную алкильную группу, содержащую от двух до указанного числа атомов углерода и по меньшей мере одну тройную связь. Примеры таких групп включают, но без ограничения, 1-пропинил, 2-пропинил, 1-бутинил, 2-бутинил, 1-пентинил и т.п.

Термин в данном описании С₃-С_п-циклоалкил, в котором п=8, означает циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил.

Выражение в данном описании необязательно замещенный относится к заместителям числом от ноля до четырех, причем каждый из этих заместителей выбирается независимо. Каждый из независимо выбранных заместителей может быть таким же, как другие заместители, или отличным от других заместителей.

Термин арил по данному описанию относится к необязательно замещенной моно- или бициклической карбоциклической системе, имеющей одно или два ароматических кольца, включая, но без ограничения, фенил, бензил, нафтил, тетрагидронафтил, инданил, инденил и т.п. Необязательно замещенный арил включает арильные соединения, содержащие от ноля до четырех заместителей, а замещенный арил включает арильные соединения, имеющие один или более заместителей. Термин (С₅-С₈-алкил)арил относится к любой арильной группе, которая связана с основным фрагментом через алкильную группу.

Термин гетероциклическая группа относится к необязательно замещенной моно- или бициклической карбоциклической системе, содержащей от одного до трех гетероатомов, причем гетероатомы выбирают из группы, состоящей из атомов кислорода, серы и азота. Термин гетероарил по данному описанию относится к необязательно замещенной моно- или бициклической системе, имеющей одно или два ароматических кольца, содержащих от одного до трех гетероатомов, и включает, но без ограничения, фурил, тиенил, пиридил и т.п.

Термин бициклический означает либо ненасыщенную, либо насыщенную устойчивую 7-12членную связанную мостиком или конденсированную бициклическую углеродную систему. Бициклическая система может быть связана с любым углеродным атомом, который делает структуру устойчивой. Термин включает, но без ограничения, нафтил, дициклогексил, дициклогексенил и т.п.

В молекуле соединений по настоящему изобретению имеется один или более асимметрический центр. В соответствии с настоящим изобретением структуру, в которой не показана стереохимия, следует понимать как структуру, охватывающую все возможные оптические изомеры, а также их рацемические смеси.

Соединения по настоящему изобретению могут существовать в таутомерных формах и изобретение включает как смеси таутомеров, так и отдельные таутомеры. Например, следует понимать, что нижеприведенная структура

представляет собой смесь структур

Термин фармацевтически приемлемая соль относится к солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства соединений по настоящему изобретению и которые не являются нежелательными с биологической или иной точки зрения. Во многих случаях соединения по настоящему изобретению способны образовывать соли кислот и/или оснований за счет имеющихся амино- и/или карбоксигрупп или сходных с ними групп.

Варианты изобретения

На количество молекул белка-переносчика серотонина в клетках влияет количество молекул зрелой (вторичной) мРНК переносчика серотонина, экспрессированной в клетке. Уровни экспрессии мРНК контролируются с помощью 5'-НТТЬРК и 3'-ИТК гена 8ЬС6Л4 по двум различным механизмам. Область 5'НТТЬРК контролирует скорость транскрипции 8ЬС6Л4 (Нейк е! а1. (1996) 1. Ыеигосйет., 66: 2621-2624), тогда как гк1042173 8ΝΡ в З'-ИТК гена 8ЬС6Л4 влияет на уровни зрелой мРНК с помощью посттранскрипционных механизмов (Ва!!егкЬу е! а1. (1999) 1. №игосйет., 72: 1384-1388; Веаиботд е! а1. (2000) Сепоте Кек, 10: 1001-1010; С1еп е! а1. (2006) №!. Сепе!., 38: 1452-145).

Найдено, что 5'-НТТЬРК содержит несколько сайтов связывания для молекул различных факторов транскрипции, необходимых для регуляции инициации транскрипции (Ни е! а1. (2005) Л1со1ю1 СИп. Ехр. Кек., 29: 8-16). Следовательно, на число копий образующейся (первичной) мРНК, транскрибированной с

- 16 019200 гена 8ЬС6Л4, и на число копий последующей зрелой мРНК влияют 5'-НТТЬРК полиморфизмы. Сообщалось, что Г81042173 аллельные различия регулируются связыванием микроРНК (Ш1-РНК) с сайтом в/рядом с Г81042173 (например, связывание ш1К-15а и т1К-16), разрушающим молекулы первичной мРНК, и дифференциальным аденилированием, приводящим к измененным уровням зрелой мРНК. Следовательно, совместные эффекты 5'-НТТЬРК и г§1042173 полиморфизмов могут модулировать индивидуальное влияние друг друга на общую доступность зрелой мРНК для трансляции в белок-переносчик серотонина.

Без связи с чем-то конкретным в данном описании высказывается гипотеза, что учитывая эти факторы, совместный генетический эффект 5'-НТТЬРК и г§1042173 полиморфизмов может привести к различиям в серотонинергической функции и регуляции. Так как употребление алкоголя влияет на серотонинергическую функцию, это ген-генное взаимодействие (5'-НТТЬРК и г§1042173) может привести к дисрегуляции серотонинергической функции, которая либо провоцирует, усиливает, либо сохраняет характер пьянства и алкоголизм и его последствия в дальнейшем. Это состояние дисрегуляции серотонинергической системы или изменений функции можно стабилизировать или улучшить в популяциях пьющих людей или алкоголиков с помощью композиций и методов по настоящему изобретению, например, введением серотонинергических лекарственных средств, включая антагонист серотонина-3 (5-НТ₃), ондансетрон.

В одном варианте изобретения 5-НТ₃ рецепторные антагонисты (включая ондансетрон) могут улучшать долгосрочные результаты у пьющих людей с определенными полиморфизмами в 5'-НТТЬРК и/или Г81042173 либо самостоятельно, либо в сочетании. Так как ожидается, что наркотики действуют по тем же механизмам, поэтому настоящее изобретение охватывает применение 5-НТ3 антагонистов (включая ондансетрон) для улучшения или стабилизации этих серотонинергических состояний и достижения терапевтического эффекта, который улучшит клинические результаты при этих расстройствах и заболеваниях. Аддиктивные заболевания и расстройства, охватываемые настоящими композициями и методами, включают, но без ограничения, расстройства, связанные с употреблением алкоголя, расстройства, обусловленные ожирением, расстройства пищевого поведения, расстройства контроля над побуждениями, расстройства, связанные с употреблением никотина, расстройства, вызванные употреблением амфетаминов, расстройства, вызванные употреблением метамфетамина, расстройства, вызванные употреблением марихуаны, расстройства, вызванные употреблением кокаина, расстройства, вызванные употреблением галлюциногенов, расстройства, вызванные употреблением летучих растворителей, расстройства, вызванные злоупотреблением бензодиазепином или зависимостью от бензодиазепина, расстройства, вызванные злоупотреблением опиоидами, игроманию, компьютерную и электронную зависимость.

Поскольку система серотонина имеет непосредственные связи с другими нейромедиаторами и модулируется другими нейромедиаторами в мозге, в частности дофамином, САВА, глутаматом, опиоидами и каннабиоидом, настоящее изобретение охватывает применение лекарственных средств, которые влияют на структуру и функцию этих других нейромедиаторов при совместном применении с любым серотонинергическим агентом (включая ондансетрон). В одном аспекте комбинация является эффективной для людей с полиморфизмами в 5'-НТТЬРВ и г§1042173 по данному описанию или где-либо еще в серотонинергической системе. В одном аспекте настоящее изобретение включает композиции, соединения и методы, которые ассоциируются с этими совместно модулирующими нейромедиаторами (т.е. дофамином, САВА, глутаматом, опиоидами и каннабиоидом), включая, но без ограничения, топирамат, баклофен, габапентин, налтрексон, налфемен и римонабат - в комбинации с любым серотонинергическим агентом (включая, но без ограничения, ондансетрон, селективные блокаторы обратного захвата серотонина и другие агонисты или антагонисты других серотониновых рецепторов или частиц), способные вызывать терапевтический эффект, улучшая клинические результаты у людей, употребляющих алкоголь, злоупотребляющих алкоголем, неправильно употребляющих алкоголь или зависимых от алкоголя. Так как прогнозируется, что наркотики действуют по аналогичным механизмам, то настоящее изобретение дополнительно включает комбинации этих совместно модулирующих лекарств с любым другим серотонинергическим агентом с целью применения для лечения людей, применяющих любое психоактивное вещество, злоупотребляющих любым психоактивным веществом, неправильно употребляющих любое психоактивное вещество, с зависимостью от любого психоактивного вещества или с привыканием к любому психоактивному веществу, с полиморфизмами в 5'-НТТЬРВ и г§1042173 или где-либо еще в серотонинергической или совместно модулирующей нейромедиаторных системах (т.е. дофамина, САВА, глутамата, опиоидов и каннабиоида) либо индивидуально, либо в комбинации.

Настоящее изобретение охватывает композиции и методы лечения или предупреждения, в которых 5'-НТТЬРВ полиморфизмы ассоциируются с восприимчивостью к употреблению алкоголя или могут пролонгировать, провоцировать или оказывать влияние на употребление алкоголя. Полиморфизмы в 5'НТТЬРВ или связанные с ними экспрессия, уровни или характеристики функции связанных с ними т1РНК, мРНК или белков или другие биохимические продукты или химические ассоциации сами по себе могут служить в качестве биомаркера употребления алкоголя. Такой биомаркер (т.е. анализ крови) можно использовать для создания способа или теста, позволяющего определить, употреблял ли человек алкоголь и в каком количестве. Полиморфизмы в 5'-НТТЬРВ или экспрессия, уровни или характеристики

- 17 019200 функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК или белков или другие биохимические продукты или химические ассоциации сами по себе могут служить в качестве биомаркера употребления, злоупотребления, неправильного употребления алкоголя или зависимости от алкоголя. Такой биомаркер (т.е. анализ крови) можно использовать для создания способа или теста, позволяющего определить, оценить или подтвердить диагноз употребление, злоупотребление, неправильное употребление алкоголя или зависимость от алкоголя.

Настоящее изобретение охватывает композиции и методы для лечения или предупреждения состояний, в которых Г81042173 полиморфизмы ассоциируются с восприимчивостью к употреблению алкоголя или могут пролонгировать, провоцировать или оказывать влияние на употребление алкоголя. Полиморфизмы в Г81042173 или экспрессия, уровни или характеристики функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК или белков или другие биохимические продукты или химические ассоциации сами по себе могут служить в качестве биомаркера употребления алкоголя. Такой биомаркер (т.е. анализ крови) можно использовать для создания способа или теста, позволяющего определить, употреблял ли человек алкоголь и в каком количестве. Полиморфизмы в г§1042173 или экспрессия, уровни или характеристики функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК или белков или другие биохимические продукты или химические ассоциации сами по себе могут служить в качестве биомаркера употребления, злоупотребления, неправильного употребления алкоголя или зависимости от алкоголя. Такой биомаркер (т.е. анализ крови) можно использовать для создания способа или теста, позволяющего определить, оценить или подтвердить диагноз употребление, злоупотребление, неправильное употребление алкоголя или зависимость от алкоголя.

Настоящее изобретение охватывает композиции и методы для лечения или предупреждения состояний, в которых комбинация 5'-НТТЬРК и г§1042173 полиморфизмов ассоциируется с восприимчивостью к употреблению алкоголя или может пролонгировать, провоцировать или оказывать влияние на употребление алкоголя. Комбинация 5'-НТТЬРК и г§1042173 полиморфизмов или экспрессия, уровни или характеристики функции связанных с ними (полиморфизмами) т-РНК, мРНК или белков или другие биохимические продукты или химические ассоциации сами по себе могут служить в качестве биомаркера употребления алкоголя. Такой биомаркер (т.е. анализ крови) можно использовать для создания способа или теста, позволяющего определить, употреблял ли человек алкоголь и в каком количестве. Комбинация 5'-НТТЬРК и г§1042173 полиморфизмов или экспрессия, уровни или характеристики функции связанных с ними (полиморфизмами) т-РНК, мРНК или белков или другие биохимические продукты или химические ассоциации сами по себе могут служить в качестве биомаркера употребления, злоупотребления, неправильного употребления алкоголя или зависимости от алкоголя. Такой биомаркер можно использовать для создания способа или теста, позволяющего определить, оценить или подтвердить диагноз употребление, злоупотребление, неправильное употребление алкоголя или зависимость от алкоголя.

Помимо этого, настоящее изобретение включает предоставление любого 5-НТ₃ антагониста (включая ондансетрон) в любой дозе или лекарственной форме индивидуумам (людям) с 5'-НТТЬРК полиморфизмами, что позволит уменьшить интенсивность, улучшить, лечить или помочь избавлению от употребления алкоголя, злоупотребления алкоголем или от алкогольной зависимости, от употребления (психоактивного) вещества, злоупотребления (психоактивным) веществом или от зависимости от (психоактивного) вещества.

Настоящее изобретение включает предоставление любого агента или лекарства, который(ое) оказывает действие на систему серотонина, в любой дозе или лекарственной форме либо прямо, либо косвенно, индивидуумов (людей) с 5'-НТТЬРК полиморфизмами, и может уменьшить интенсивность, улучшить, лечить или помочь избавлению от употребления алкоголя, злоупотребления алкоголем или от алкогольной зависимости.

Настоящее изобретение включает предоставление любого 5-НТ3 антагониста (включая ондансетрон) в любой дозе или лекарственной форме индивидуумам (людям) с г§1042173 полиморфизмами, что позволит уменьшить интенсивность, улучшить, лечить или помочь избавлению от употребления алкоголя, злоупотребления алкоголем или от алкогольной зависимости, от употребления (психоактивного) вещества, злоупотребления (психоактивным) веществом или от зависимости от (психоактивного) вещества.

Настоящее изобретение включает предоставление любого агента или лекарства, который(ое) оказывает действие на систему серотонина, в любой дозе или лекарственной форме, либо прямо, либо косвенно, индивидуумов (людей) с г§1042173 полиморфизмами, и может уменьшить интенсивность, улучшить, лечить или помочь избавлению от употребления алкоголя, неправильного употребления алкоголя, злоупотребления алкоголем или от алкогольной зависимости или любого поведения, вызывающего привыкание к (психоактивному) веществу.

Настоящее изобретение включает предоставление любого 5-НТ3 антагониста (включая ондансетрон) в любой дозе или лекарственной форме индивидуумам (людям) с г§1042173 и 5'-НТТЬРК полиморфизмами, что позволит уменьшить интенсивность, улучшить, лечить или помочь избавлению от употребления алкоголя, злоупотребления алкоголем или от алкогольной зависимости.

Настоящее изобретение предусматривает создание любого агента или лекарства, который(ое) ока

- 18 019200 зывает действие на серотониновую систему, в любой дозе или лекарственной форме, либо прямо, либо косвенно, индивидуумов с г§1042173 и 5'-НТТЬРК полиморфизмами, и может уменьшить интенсивность, улучшать, лечить или помочь избавлению от употребления (психоактивного) вещества, злоупотребления (психоактивным) веществом или от зависимости от (психоактивного) вещества или поведения, вызывающего привыкание к (психоактивному) веществу.

Настоящее изобретение включает предоставление любого агента или лекарства либо химического соединения, который(ое) оказывает действие, в любой дозе или лекарственной форме, либо прямо, либо косвенно, заключающееся в модуляции, регуляции или изменении структурных, функциональных, молекулярных или биохимических эффектов г§1042173 и 5'-НТТЬРК полиморфизмов, либо индивидуально, либо в комбинации, и может уменьшить интенсивность, улучшить, лечить или помочь избавлению от употребления алкоголя, злоупотребления алкоголем или от алкогольной зависимости.

Настоящее изобретение включает предоставление любого агента или лекарства либо химического соединения, который(ое) оказывает действие, в любой дозе или лекарственной форме, либо прямо, либо косвенно, заключающееся в модуляции, регуляции или изменении структурных, функциональных, молекулярных или биохимических эффектов г§1042173 и 5'-НТТЬРК полиморфизмов, либо индивидуально, либо в комбинации, и может уменьшить интенсивность, улучшить, лечить или помочь избавлению от употребления алкоголя, злоупотребления алкоголем или от алкогольной зависимости либо от поведения, вызывающего привыкание к алкоголю.

5'-НТТЬРК и Г81042173 полиморфизмы, либо индивидуально, либо в комбинации, или в сочетании с другими полиморфизмами в серотониновой системе, или экспрессия, уровни или характеристики связанных с ними т1-РНК, мРНК, пс-РНК (некодирующих РНК) или белков или другие биохимические продукты или химические ассоциации сами по себе могут служить в качестве биомаркера употребления алкоголя. В одном аспекте изобретения применение 5'-НТТЬРК и г§1042173 в качестве биомаркеров можно использовать для создания способа или теста, позволяющего определить, употреблял ли человек алкоголь и в каком количестве.

5'-НТТЬРК и Г81042173 полиморфизмы, либо индивидуально, либо в комбинации, или в сочетании с другими полиморфизмами в серотониновой системе, или экспрессия, уровни или характеристики связанных с ними т1-РНК, мРНК, пс-РНК (некодирующих РНК) или белков или другие биохимические продукты или химические ассоциации сами по себе могут служить в качестве биомаркера употребления алкоголя, злоупотребления алкоголем, неправильного употребления алкоголя или алкогольной зависимости. В одном аспекте изобретения применение 5'-НТТЬРК и г§1042173 в качестве биомаркеров можно использовать для создания способа или теста, позволяющего определить, оценить или подтвердить диагноз употребление, злоупотребление, неправильное употребление алкоголя или зависимость от алкоголя.

5'-НТТЬРК и Г81042173 полиморфизмы, либо индивидуально, либо в комбинации, или в сочетании с другими полиморфизмами в серотониновой системе, или экспрессия, уровни или характеристики функции связанных с ними т1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или другие биохимические продукты или химические ассоциации сами по себе могут служить в качестве биомаркера употребления (психоактивного) вещества или поведения, вызывающего привыкание к (психоактивному) веществу. В одном аспекте изобретения применение 5'-НТТЬРК и г§1042173 в качестве биомаркеров можно использовать для создания способа или теста, позволяющего определить, употреблял ли человек (психоактивное) вещество и в каком количестве и наблюдается ли у него привыкание к (психоактивному) веществу.

5'-НТТЬРК и Г81042173 полиморфизмы, либо индивидуально, либо в комбинации, или в сочетании с другими полиморфизмами в серотониновой системе, или экспрессия, уровни или характеристики функции связанных с ними т1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или другие биохимические продукты или химические ассоциации сами по себе могут служить в качестве биомаркера употребления (психоактивного) вещества, неправильного употребления (психоактивного) вещества, злоупотребления (психоактивным) веществом, зависимости от (психоактивного) вещества или привыкание к (психоактивному) веществу. В одном аспекте изобретения применение 5'-НТТЬРК и г§1042173 в качестве биомаркеров можно использовать для создания способа или теста, позволяющего определить, употреблял ли человек (психоактивное) вещество и в каком количестве и наблюдается ли у него привыкание к (психоактивному) веществу.

В одном аспекте изобретения предоставление любого агента или лекарства либо химического вещества, в любой дозе или лекарственной форме, либо прямо, либо косвенно, для модулирования, регуляции или изменения структурных, функциональных, молекулярных или биохимических эффектов серотониновой системы можно использовать для прогнозирования отклика на эффект лечения любого генетического полиморфизма, либо индивидуально, либо в комбинации, для того, чтобы уменьшить интенсивность, улучшить, лечить или помочь избавлению от употребления алкоголя, злоупотребления алкоголем или от алкогольной зависимости, от употребления (психоактивного) вещества, злоупотребления (психоактивным) веществом или от зависимости от (психоактивного) вещества или от любого поведения, вызывающего привыкание.

В другом аспекте изобретения предоставление любого 5-НТ₃ антагониста (включая ондансетрон) в

- 19 019200 любой дозе или лекарственной форме, либо прямо, либо косвенно, для модулирования, регуляции или изменения структурных, функциональных, молекулярных или биохимических эффектов любого полиморфизма, либо индивидуально, либо в комбинации, в серотониновой системе может уменьшить интенсивность, улучшить, лечить или помочь избавлению от употребления алкоголя, злоупотребления алкоголем или от алкогольной зависимости, от употребления (психоактивного) вещества, злоупотребления (психоактивным) веществом или от зависимости от (психоактивного) вещества.

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации полиморфизмов в серотониновой системе, или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или других биохимических продуктов или химических ассоциаций, которые сами по себе могут служить в качестве биомаркера употребления алкоголя. Такой биомаркер (включая анализ крови) можно использовать для создания метода или теста, позволяющего определить, употреблял ли человек алкоголь и в каком количестве.

Кроме того, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации полиморфизмов в серотониновой системе, или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или других биохимических продуктов или химических ассоциаций, которые сами по себе могут служить в качестве биомаркера для определения, оценки или подтверждения диагноза употребление, неправильное употребление алкоголя, злоупотребление алкоголем или зависимость от алкоголя.

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации полиморфизмов в серотониновой системе, или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или других биохимических продуктов или химических ассоциаций, которые сами по себе могут служить в качестве биомаркера употребления любого (психоактивного) вещества или любого вещества, способного приводить к абузусу или привыканию. Такой биомаркер (включая анализ крови) можно использовать для создания метода или теста, позволяющего определить, употреблял ли человек какое-либо вещество (включая аддиктивные вещества) и в каком количестве или наблюдается ли у человека поведение, ведущее к привыканию к веществу (привыкание к (психоактивному) веществу).

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации полиморфизмов в серотониновой системе, или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или других биохимических продуктов или химических ассоциаций, которые могут служить в качестве биомаркера для определения, оценки или подтверждения диагноза: употребление, неправильное употребление (психоактивного) вещества, злоупотребление (психоактивным) веществом или зависимость от (психоактивного) вещества или привыкание к (психоактивному) веществу.

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации полиморфизмов в серотониновой системе, или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или других биохимических продуктов или химических ассоциаций, чтобы идентифицировать тех, кто употребляет алкоголь или любое другое (психоактивное) вещество, злоупотребляют алкоголем или любым другим (психоактивным) веществом, неправильно употребляют алкоголь или любое другое (психоактивное) вещество или зависимы от алкоголя или любого другого (психоактивного) вещества либо у них наблюдается привыкание к алкоголю или любому другому (психоактивному) веществу, и который может быть основой для определения лечения. Можно ожидать, что такой тест (включая анализ крови) определит индивидуумов, которые восприимчивы к любому лечению (а именно фармакологическому, поведенческому, генетическому, биохимическому или любым их комбинациям).

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации любых полиморфизмов в серотониновой системе, или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или других биохимических продуктов или химических ассоциаций, чтобы идентифицировать индивидуумов, которые употребляют любое (психоактивное) вещество, злоупотребляют любым (психоактивным) веществом, неправильно употребляют любое (психоактивное) вещество или зависимы от любого (психоактивного) вещества либо у них наблюдается привыкание к любому (психоактивному) веществу, и который может быть основой для определения осложнений и побочных явлений или для оптимизации любого лечения (а именно фармакологического, поведенческого, генетического, биохимического или любых их комбинаций).

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации любых полиморфизмов в серотониновой системе, или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или других биохимических продуктов или химических ассоциаций, чтобы идентифицировать индивидуумов, которые употребляют алкоголь или любое другое (психоактивное) вещество, злоупотребляют алкоголем или любым другим (психоактивным) веществом, неправильно употребляют алкоголь или любое другое (пси

- 20 019200 хоактивное) вещество или зависимы от алкоголя или любого другого (психоактивного) вещества либо у них создается устойчивая привычка, вырабатывается привыкание к чему-либо (включая ожирение, игроманию, компьютерную и электронную зависимость), и этот способ может быть основой для определения осложнений и побочных явлений или для оптимизации лечения любым 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон) в любой дозе или лекарственной форме. Можно ожидать, что такой тест позволит определить индивидуумов, которые восприимчивы к лечению любым 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон).

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации 5'-НТТЬРК и Г51042173 полиморфизмов или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или других биохимических продуктов или химических ассоциаций, либо индивидуально, либо в любой комбинации, чтобы идентифицировать индивидуумов, которые употребляют алкоголь или любое другое (психоактивное) вещество, злоупотребляют алкоголем или любым другим (психоактивным) веществом, неправильно употребляют алкоголь или любое другое (психоактивное) вещество или зависимы от алкоголя или любого другого (психоактивного) вещества либо у них вырабатывается устойчивая привычка, привыкание к чему-либо, и этот способ может быть основой для определения осложнений и побочных явлений или для оптимизации лечения любым 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон) в любой дозе или лекарственной форме. Можно ожидать, что такой тест (включающий анализ крови) позволит определить индивидуумов, которые не восприимчивы к лечению 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон), или индивидуумов, которым необходимы дополнительные меры для оптимизации благоприятного исхода лечения любым 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон).

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации 5'-НТТЬРК и Г51042173 полиморфизмов или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или других биохимических продуктов или химических ассоциаций, либо индивидуально, либо в любой комбинации, чтобы идентифицировать индивидуумов, которые употребляют алкоголь или любое другое (психоактивное) вещество, злоупотребляют алкоголем или любым другим (психоактивным) веществом, неправильно употребляют алкоголь или любое другое (психоактивное) вещество или зависимы от алкоголя или любого другого (психоактивного) вещества либо у них вырабатывается устойчивая привычка, привыкание к чему-либо (включая, но без ограничения, ожирение, игроманию или компьютерную либо электронную зависимость), и который (способ) может быть основой для определения тех, кто восприимчив к лечению любым 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон) в любой дозе или лекарственной форме. Можно ожидать, что такой тест (включающий анализ крови) позволит определить индивидуумов, которые восприимчивы к лечению 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон). Таких больных можно идентифицировать с помощью генетического скрининга, а затем лечить ондансетроном.

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации 5'-НТТЬРК и Г51042173 полиморфизмов или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков либо других биохимических продуктов или химических ассоциаций, либо индивидуально, либо в любой комбинации, чтобы идентифицировать индивидуумов, которые употребляют алкоголь, злоупотребляют алкоголем, неправильно употребляют алкоголь или зависимы от алкоголя, и который (способ) может быть основой для определения тех, кто восприимчив к лечению любым 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон) в любой дозе или лекарственной форме. Можно ожидать, что такой тест (включающий анализ крови) позволит определить индивидуумов, употребляющих алкоголь, злоупотребляющих алкоголем, зависимых от алкоголя, которые восприимчивы к лечению 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон). Таких больных можно идентифицировать с помощью генетического скрининга, а затем лечить ондансетроном.

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации любых полиморфизмов в серотониновой системе или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков либо других биохимических продуктов или химических ассоциаций, либо индивидуально, либо в любой комбинации, чтобы идентифицировать индивидуумов, которые употребляют алкоголь или любое другое (психоактивное) вещество, злоупотребляют алкоголем или любым другим (психоактивным) веществом, неправильно употребляют алкоголь или любое другое (психоактивное) вещество или зависимы от алкоголя или любого другого (психоактивного) вещества, или у них вырабатывается устойчивая привычка, привыкание к чему-либо (включая, но без ограничения, ожирение, игроманию или компьютерную либо электронную зависимость), и который (способ) может быть основой для определения тех, кто восприимчив к лечению любым серотонинергическим агентом, соединением или лекарством в любой дозе или лекарственной форме. Можно ожидать, что такой тест (включающий анализ крови) позволит определить индивидуумов, которые отвечают на лечение любого аддиктивного поведения любым серотонинергическим агентом, соединением или лекарством.

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации 5'-НТТЬРК и Г51042173 полиморфизмов или экспрессии, уровней

- 21 019200 или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или других биохимических продуктов или химических ассоциаций, либо индивидуально, либо в любой комбинации, чтобы идентифицировать индивидуумов, которые употребляют алкоголь или любое другое (психоактивное) вещество, злоупотребляют алкоголем или любым другим (психоактивным) веществом, неправильно употребляют алкоголь или любое другое (психоактивное) вещество или зависимы от алкоголя или любого другого (психоактивного) вещества либо у них вырабатывается устойчивая привычка, привыкание к чему-либо (включая, но без ограничения, ожирение, игроманию или компьютерную либо электронную зависимость), и который (способ) может быть основой для определения тех, кто восприимчив к осложнениям или побочным эффектам либо оптимизации лечения каким-либо серотонинергическим агентом, соединением или лекарством в любой дозе или лекарственной форме. Можно ожидать, что такой тест (включающий анализ крови) позволит определить индивидуумов, которые не восприимчивы к лечению серотонинергическим агентом, соединением или лекарством, или индивидуумов, которые нуждаются в дополнительных мерах по оптимизации положительных результатов лечения серотонинергическим агентом, соединением или лекарством.

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации полиморфизмов генов 5'-НТТЬРК и г§1042173 или любых других полиморфизмов в совместно модулирующих нейромедиаторных системах (т.е. системах дофамина, САВЛ, глутамата, опиоидов и каннабиоидов) или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков либо других биохимических продуктов или химических ассоциаций, либо индивидуально, либо в любой комбинации, чтобы идентифицировать индивидуумов, которые употребляют алкоголь, злоупотребляют алкоголем, неправильно употребляют алкоголь или зависимы от алкоголя, и который (способ) может быть основой для определения тех, кто отвечает на лечение 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон) в комбинации с любым лекарством, которое действует на эти совместно модулирующие системы (включая, но без ограничения, топирамат, баклофен, габапентин, налтрексон, налмефен и римонабант) в любой дозе или лекарственной форме. Можно ожидать, что такой тест (включающий анализ крови) позволит определить индивидуумов, которые употребляют алкоголь, злоупотребляют алкоголем или зависимы от алкоголя, восприимчивых к лечению 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон) плюс любой из этих совместно модулирующих агентов или лекарств. Индивидуумам, которые употребляют алкоголь, злоупотребляют алкоголем или зависимы от алкоголя, у которых генетическим скринингом идентифицированы эти полиморфизмы, можно затем вводить ондансетрон плюс совместно модулирующее терапевтическое средство или лекарство, с учетом прогноза, что эти комбинации могут быть эффективными.

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации полиморфизмов генов 5'-НТТЬРВ и г§1042173 или любых других полиморфизмов в совместно модулирующих нейромедиаторных системах (т.е. системах дофамина, САВА, глутамата, опиоидов и каннабиоидов) или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или других биохимических продуктов или химических ассоциаций, либо индивидуально, либо в любой комбинации, чтобы идентифицировать индивидуумов, которые употребляют алкоголь, злоупотребляют алкоголем, неправильно употребляют алкоголь или зависимы от алкоголя, и который (способ) может быть основой для определения тех, кто восприимчив к побочным явлениям (осложнениям) или не отвечает на лечение 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон) в комбинации с любым лекарством, которое действует на эти совместно модулирующие системы (включая, но без ограничения, топирамат, баклофен, габапентин, налтрексон, налмефен и римонабант) в любой дозе или лекарственной форме. Можно ожидать, что такой тест (включающий анализ крови) позволит определить индивидуумов, которые не восприимчивы к лечению 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон) плюс любой из этих совместно модулирующих агентов или лекарств или которым требуются дополнительные меры, чтобы оптимизировать лечение этими соединениями. Индивидуумам, которые употребляют алкоголь, злоупотребляют алкоголем или зависимы от алкоголя или у которых вырабатывается привыкание (устойчивая привычка) к чему-либо, у которых генетическим скринингом идентифицированы эти полиморфизмы, можно либо не проводить комбинированное лечение, либо по отношению к ним надо принимать дополнительные меры, чтобы оптимизировать это лечение.

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации полиморфизмов генов 5'-НТТЬРВ и г§1042173 или любых других полиморфизмов в совместно модулирующих нейромедиаторных системах (т.е. системах дофамина, САВА, глутамата, опиоидов и каннабиоидов) или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними Ш1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков либо других биохимических продуктов или химических ассоциаций, либо индивидуально, либо в любой комбинации, чтобы получить биомаркер (включающий анализ крови) для определения, подтверждения или оценки уровня употребления алкоголя или диагноза употребление алкоголя, злоупотребление алкоголем, неправильное употребление алкоголя или алкогольная зависимость.

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации полиморфизмов генов 5'-НТТЬРВ и г§1042173 или любых других

- 22 019200 полиморфизмов в совместно модулирующих нейромедиаторных системах (т.е. системах дофамина, САВА, глутамата, опиоидов и каннабиоидов) или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними т1-РНК, мРНК, пс-РНК или белков либо других биохимических продуктов или химических ассоциаций, либо индивидуально, либо в любой комбинации, чтобы получить биомаркер (включающий анализ крови) для определения, подтверждения или оценки уровня употребления алкоголя или диагноза употребление (психоактивного) вещества, злоупотребление (психоактивным) веществом, неправильное употребление (психоактивного) вещества или зависимость от (психоактивного) вещества или вырабатывается привыкание (устойчивая привычка) к чему-либо.

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации полиморфизмов генов 5'-ΗΤΤΣΡΚ и Г81042173 или любых других полиморфизмов в совместно модулирующих нейромедиаторных системах (т.е. системах дофамина, САВА, глутамата, опиоидов и каннабиоидов) или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними ιηί-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или других биохимических продуктов либо химических ассоциаций, либо индивидуально, либо в любой комбинации, чтобы идентифицировать индивидуумов, которые употребляют какое-либо (психоактивное) вещество, злоупотребляют (психоактивным) веществом, неправильно употребляют (психоактивное) вещество или зависимы от (психоактивного) вещества либо проявляют привыкание (устойчивую привычку) к чему-либо, и который (способ) может быть основой для определения тех, кто отвечает на лечение любым 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон) в комбинации с любым лекарством, которое действует на эти совместно модулирующие системы (включая, но без ограничения, топирамат, баклофен, габапентин, налтрексон, налмефен и римонабант) в любой дозе или лекарственной форме. Можно ожидать, что такой тест (включающий анализ крови) позволит определить индивидуумов, которые употребляют или неправильно употребляют (психоактивное) вещество, злоупотребляют (психоактивным) веществом или зависимы от (психоактивного) вещества или проявляют привыкание (устойчивую привычку) к чему-либо, восприимчивых к лечению 5-НТ3 антагонистом (включая ондансетрон) плюс любой из этих совместно модулирующих агентов или лекарств. Индивидуумам, которые употребляют какое-либо (психоактивное) вещество, злоупотребляют (психоактивным) веществом, неправильно употребляют (психоактивное) вещество или зависимы от (психоактивного) вещества или проявляют привыкание (устойчивую привычку) к чему-либо, у которых генетическим скринингом идентифицированы эти полиморфизмы, можно затем вводить ондансетрон плюс совместно модулирующее терапевтическое средство или лекарство с учетом прогноза, что эти комбинации могут быть эффективными.

Помимо этого, настоящее изобретение включает способ, посредством которого генетический скрининг используется для идентификации полиморфизмов генов 5'-ΗΤΤΣΡΚ и Г81042173 или любых других полиморфизмов в совместно модулирующих нейромедиаторных системах (т.е. системах дофамина, САВА, глутамата, опиоидов и каннабиоидов) или экспрессии, уровней или характеристик функции связанных с ними ιηί-РНК, мРНК, пс-РНК или белков или других биохимических продуктов либо химических ассоциаций, либо индивидуально, либо в любой комбинации, чтобы идентифицировать индивидуумов, которые употребляют какое-либо (психоактивное) вещество, злоупотребляют (психоактивным) веществом, неправильно употребляют (психоактивное) вещество или зависимы от (психоактивного) вещества либо проявляют привыкание (устойчивую привычку) к чему-либо, и который (способ) может быть основой для определения тех, кто восприимчив к осложнениям или побочным эффектам, или тех, кто не отвечает на лечение любым 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон) в комбинации с любым лекарством, которое действует на эти совместно модулирующие системы (включая, но без ограничения, топирамат, баклофен, габапентин, налтрексон, налмефен и римонабант) в любой дозе или лекарственной форме. Можно ожидать, что такой тест (включающий анализ крови) позволит определить индивидуумов, которые употребляют или неправильно употребляют (психоактивное) вещество, злоупотребляют (психоактивным) веществом или зависимы от (психоактивного) вещества или проявляют привыкание (устойчивую привычку) к чему-либо, не восприимчивых к лечению 5-НТ₃ антагонистом (включая ондансетрон) плюс любой из этих совместно модулирующих агентов или лекарств, или по отношению к которым требуются дополнительные меры, чтобы оптимизировать лечение. Индивидуумам, которые употребляют какое-либо (психоактивное) вещество, злоупотребляют (психоактивным) веществом, неправильно употребляют (психоактивное) вещество или зависимы от (психоактивного) вещества или проявляют привыкание (устойчивую привычку) к чему-либо, у которых генетическим скринингом идентифицированы эти полиморфизмы, можно либо не проводить комбинированное лечение, либо принимать дополнительные меры для оптимизации их лечения.

Настоящее изобретение включает применение ондансетрона, а также других лекарств. В одном аспекте применяют комбинации лекарств. Настоящее изобретение включает применение комбинаций лекарств или соединений для лечения аддиктивных или компульсивных заболеваний и расстройств. Кроме того, настоящее изобретение охватывает применение дополнительных процедур (лечебных мероприятий) и дополнительной терапии, например психологического лечения, гипноза и акупунктуры.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы лечения заболеваний и расстройств, связанных с употреблением алкоголя, с применением фармацевтических композиций, со

- 23 019200 держащих эффективное количество ондансетрона, топирамата и/или налтрексона.

Доза активного вводимого(ых) соединения (активных соединений) зависит от состояния, подлежащего лечению, конкретного соединения и других клинических факторов, таких как возраст, пол, масса и состояние здоровья пролечиваемого субъекта, способа введения соединения(ий) и типа вводимой композиции (таблетка, желатиновая капсула (де1 сар), капсула, раствор, суспензия, ингалятор, аэрозоль, эликсир, лепешка, инъекция, пэтч (пластырь), мазь, крем и т.д.). Следует понимать, что настоящее изобретение находит применение как в лечении людей, так и в ветеринарии.

Например, в одном варианте изобретения, относящемся к пероральному введению человеку, доза, составляющая примерно 0.1-300 мг/кг/день, или примерно 0.5-50 мг/кг/день, или примерно 1-10 мг/кг/день, обычно является достаточной, но она меняется в зависимости от таких факторов, как расстройство, подлежащее лечению, продолжительность лечения, возраст, пол, масса и/или состояние здоровья субъекта и т.д. Лекарства можно вводить в виде составов (препаратов), которые содержат все применяемые лекарства, или лекарства можно вводить раздельно. В некоторых случаях предполагается, что необходимо или применяется введение в виде многократных доз/несколько раз. Кроме того, настоящее изобретение включает переменную продолжительность лечения.

Топирамат раскрывается в данном описании как лекарство, применимое в комбинированной лекарственной терапии. В одном варианте изобретения топирамат дают в примерном интервале дозировок 152500 мг/день. В одном аспекте изобретения топирамат вводят в примерном интервале дозировок 25-1000 мг/день. Еще в одном аспекте изобретения топирамат вводят в примерном интервале дозировок 50-500 мг/день. В одном аспекте изобретения топирамат вводят в примерной дозировке 400 мг/день. В другом аспекте изобретения топирамат вводят в дозировке 400 мг/день. В другом аспекте изобретения топирамат вводят в примерной дозировке 300 мг/день. Еще в одном аспекте изобретения топирамат вводят в примерной дозировке 275 мг/день. В одном аспекте изобретения топирамат вводят в примерной дозировке 1 мг/день. В одном аспекте изобретения топирамат вводят в примерной дозировке до 300 мг/день.

В одном варианте изобретения топирамат вводят в примерной дозе 1 мг/кг. В одном аспекте изобретения топирамат вводят в примерной дозе 10 мг/кг. В одном аспекте изобретения топирамат вводят в примерной дозе 100 мг/кг. В одном аспекте изобретения топирамат вводят в примерном интервале дозировок 0.1-100 мг/кг/день.

Топирамат (^₂Η₂₁ΝΟ₈8; название по номенклатуре ШАС: 2,3:4,5-бис-О-(1-метилэтилиден)-бета-Эфруктопиранозы сульфамат; регистрационный №. СА8 97240-79-4) имеет следующую структуру:

Важным аспектом психотропных лекарств является то, что они вызывают увеличение веса. Это увеличение веса может вызвать ряд метаболических проблем, включая не соответствующий норме метаболизм сахара, жира и углеводов. Так как топирамат может вызывать потерю веса и улучшать функцию эндокринной системы, в данном описании предполагается, что топирамат можно использовать для того, чтобы избежать увеличения веса, вызываемого другими психотропными лекарствами, с которыми его комбинируют, а также алкоголем или какими-либо другими наркотиками.

Важным побочным явлением, которое вызывает топирамат, является нарушение когнитивных функций. В общей популяции об этом сообщают 2.4% пациентов, принимающих топирамат (1оЬпзоп & 1ойп8оп РЬаттасеийса1 ВекеатсБ & Эеуе1ортеп1. 1пуе§кда1ог'8 ВтосБиге: Торйата1е (К^.Т-17021-000), 10(Н ек.; ЭесетЬег 2005). У людей, злоупотребляющих различными (психоактивными) веществами, частота случаев нарушения когнитивной функции составляет около 18.7% ОоБпюп В.А., ΛίΙ-Эаоик Ν., Во\ткеп С.Ь. е1 а1. Ога1 1орБата1е £от 1геа1теп1 о£ а1со1ю1 керепкепсе: а гапкоилхек соп1го11ек 1г1а1. Бапсе1, 2003, 361: 1677-1685). Обусловленные топираматом когнитивные эффекты вызваны его антиглутаминергическими свойствами. Следовательно, не является очевидным, что ондансетрон, антагонист рецептора серотонина3 (третьего типа), будет уменьшать эти жалобы на нарушение когнитивных функций. По-видимому, ондансетрон оказывает холинергическое действие, возможно, путем взаимодействия с САВА системой, что, вероятно, уменьшает нарушение когнитивных функций. Поэтому следует ожидать, что частота нарушения когнитивных функций при использовании такой тройной комбинации будет меньше, чем в случает одного топирамата.

Ондансетрон раскрывается в данном описании как лекарство, применимое индивидуально или как часть комбинированной лекарственной терапии. Ондансетрон представляет собой 5-НТ₃ рецепторный антагонист и вызывает действие, функционально противоположное 88К1, и блокирует агонизм 5-НТ₃ рецептора к серотонину. Дозировка и схема лечения ондансетроном при его применении в комбинированной терапии могут меняться с учетом другого лекарства или других лекарств, с которыми он применяется, или с учетом других критериев, таких как возраст, пол, состояние здоровья и масса (вес) субъек

- 24 019200 та. Поэтому настоящее изобретение включает применение ондансетрона в различных дозах, таких как примерно 0,01, примерно 0,1, примерно 1,0, примерно 5,0, примерно 10,0 мкг/кг, примерно 0,1, примерно 1,0, примерно 5,0 и примерно 10,0 мг/кг. В другом варианте изобретения ондансетрон вводят в примерном интервале доз 0,01-100 мкг/кг на прием. В одном аспекте изобретения ондансетрон вводят в примерном интервале доз 1,0-10 мкг/кг на прием. Еще в одном аспекте изобретения ондансетрон вводят в примерном интервале доз 1,0-5 мкг/кг на прием. В другом аспекте изобретения ондансетрон вводят в дозировке примерно 4,0 мкг/кг на прием. В другом аспекте изобретения ондансетрон вводят в дозировке примерно 3,0 мкг/кг на прием. В другом аспекте изобретения ондансетрон вводят в дозе примерно 4,0 мкг/кг дважды в день (примерно 0,25-0,6 мг дважды в день пациенту с массой тела в примерном интервале 50150 кг).

Ондансетрон (С^Н^ЫзО; регистрационный Ыо. СА8 99614-02-5; название по номенклатуре ГОРАС: 9-метил-3-[(2-метил-1Н-имидазол-1 -ил)метил]-1,2,3,9-тетрагидрокарбазол-4-он) имеет следующую структуру:

Помимо этого, настоящее изобретение включает применение других лекарств, таких как налтрексон, как компонента комбинированной лекарственной терапии по данному описанию. В одном варианте изобретения налтрексон вводят в дозе примерно 10 мг/день. В одном аспекте изобретения налтрексон вводят в дозировке примерно 50 мг/день. В одном аспекте изобретения налтрексон вводят в дозировке примерно 100 мг/день. В одном аспекте изобретения налтрексон вводят в примерном интервале дозировок 1-300 мг на прием. В другом аспекте изобретения налтрексон вводят в примерном интервале дозировок 10-50 мг на прием. В другом аспекте изобретения налтрексон вводят в примерной дозировке 25 мг на прием. В одном варианте изобретения налтрексон вводят по меньшей мере один раз в месяц. В другом варианте изобретения налтрексон вводят один раз в месяц. В одном варианте изобретения налтрексон вводят по меньшей мере один раз в неделю. В другом варианте изобретения налтрексон вводят по меньшей мере один раз в день. В другом варианте изобретения налтрексон вводят по меньшей мере два раза в день. В одном аспекте изобретения налтрексон вводят дважды в день.

Налтрексон (С₂₀Н₂₃ЫО₄; 17-(циклопропилметил)-4,5а-эпокси-3,14-дигидроксиморфинан-6-он гидрохлорид; регистрационный Ыо. СА8 16590-41-3) имеет следующую структуру:

но

и.

Налтрексон также вызывает серьезные побочные явления - тошноту и рвоту - которые снижают приверженность к лечению им, податливость к нему. На самом деле около 15% индивидуумов, участвующих в испытаниях, не могут переносить налтрексон в дозе 50 мг/день. Этот факт стал причиной разработки депо-препаратов, которые медленно высвобождают налтрексон, что снижает число случаев тошноты и рвоты. При этом, по-видимому, эти депо-препараты имеют степень податливости, сходную со степенью податливости пероральной формы. Что не менее важно, ондансетрон уменьшает тошноту и рвоту, замедляя сократительную способность (подвижность) кишечника. Следовательно, комбинация, в которой ондансетрон добавлен к налтрексону, уменьшает тошноту и рвоту, вызванные налтрексоном. Это является важным успехом в терапии, так как намного больше людей станет толерантными к лечению вследствие повышенной податливости, а для улучшения терапевтического ответа (реакции на терапию) можно давать более высокие дозы налтрексона, чем вводимая обычно доза налтрексона 50 мг/день.

В одном варианте изобретения подлежащее лечению заболевание или расстройство, связанное с употреблением алкоголя, включает, но без ограничения, ранний алкоголизм, поздний алкоголизм, вызванное злоупотреблением алкоголем психотическое расстройство и алкогольный бред, пьянство, чрезмерное пьянство, запойное (тяжелое) пьянство, проблемное пьянство, алкогольную интоксикацию, алкогольную абстиненцию, делирий, вызванный алкогольным отравлением (интоксикацией), делирий, вызванный алкогольной абстиненцией, алкогольную персистирующую деменцию, алкогольное персистирующее амнестическое расстройство, алкогольную зависимость, алкогольное психотическое расстройство с галлюцинациями, алкогольную депрессию, вызванное или ассоциированное с алкоголем биполяр

- 25 019200 ное расстройство, вызванный или ассоциированный с алкоголем посттравматический стресс, тревожное расстройство алкогольного генеза, сексуальную дисфункцию алкогольного генеза, вызванное или ассоциированное с алкоголем расстройство сна, вызванную или ассоциированную с алкоголем игроманию, вызванное или ассоциированное с алкоголем сексуальное расстройство и алкогольное расстройство без дополнительных уточнений. В одном аспекте заболевание или расстройство, связанное с употреблением алкоголя, представляет собой ранний алкоголизм. В другом аспекте заболевание или расстройство, связанное с употреблением алкоголя, представляет собой поздний алкоголизм.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы снижения частоты употребления алкоголя по сравнению с частотой употребления алкоголя до лечения. Рядовой специалист в данной области техники понимает, что частоту можно сравнивать с предыдущей частотой употребления субъектом или с употреблением контрольным субъектом, не получавшим лечения. В одном аспекте изобретения характер употребления алкоголя представляет собой тяжелое пьянство (запойное пьянство). В другом аспекте изобретения характер употребления алкоголя представляет собой избыточное пьянство.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы снижения количества алкоголя, потребляемого субъектом, по сравнению с количеством алкоголя, потреблявшимся до лечения, или по сравнению с потреблением контрольным субъектом, не получавшим лечения.

Рядовой специалист в данной области техники понимает, что в некоторых случаях субъект, у которого лечат аддиктивное расстройство, необязательно является зависимым. Такие субъекты включают, например, субъектов, злоупотребляющих алкоголем, тяжело пьют, избыточно пьют, являются проблемными пьяницами или заядлыми наркоманами. Настоящее изобретение включает композиции и методы лечения или предупреждения такого поведения у субъектов без зависимости.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы улучшения физических или психологических последствий, ассоциированных с употреблением алкоголя, по сравнению с контрольным субъектом, не получающим лечения.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы для повышения скорости воздержания (абстиненции) субъекта по сравнению с контрольным субъектом, не получающим лечения.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы для снижения среднего уровня употребления алкоголя субъектом по сравнению с уровнем употребления алкоголя до лечения или с потреблением алкоголя контрольным субъектом, не получающим лечения.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы для снижения употребления алкоголя и повышения воздержания (абстиненции) по сравнению с уровнем употребления алкоголя до лечения или с потреблением алкоголя контрольным субъектом, не получающим лечения.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы для лечения субъекта с предрасположенностью к раннему алкоголизму.

В одном варианте настоящее изобретение включает композиции и методы для лечения субъекта с предрасположенностью к позднему алкоголизму.

Рядовой специалист в данной области техники понимает, что существует множество показателей или характеристик потребления алкоголя, которые могут характеризовать субъекта, подверженного обусловленному алкоголем заболеванию или расстройству. Понятно также, что комбинированная терапия может быть эффективна при лечении более одного показателя и что существует много способов анализа эффективности лечения. Показатели (параметры), анализируемые при количественном определении потребления алкоголя или частоты употребления алкоголя, включают, но без ограничения, дни тяжелого запоя (запойные дни), число дней тяжелого запоя, среднее число дней запоя, число доз (порций, выпивок) в день, дни абстиненции (воздержания), число людей, не пьющих тяжело или воздерживающихся от выпивки в течение данного периода времени, и пристрастие, тягу. Как объективные, так и субъективные показатели можно использовать для анализа эффективности лечения. Например, субъект может составлять самоотчет в соответствии с указаниями и методиками, установленными для такого отчета (сообщения). Процедуры (методики) могут осуществляться (даваться) в различное время до, во время и после лечения. Кроме того, имеются анализы для количественного определения потребления алкоголя. Эти анализы включают измерение содержания алкоголя в выдыхаемом воздухе с помощью спиртометра, измерение сывороточных уровней СОТ и ССТ (глутаминтрансферазы) и измерение уровней 5-НТОЬ в моче.

В некоторых вариантах изобретения первое соединение и второе соединение вводят почти одновременно. В других вариантах изобретения первое соединение вводят до введения второго соединения. В других вариантах изобретения первое соединение вводят после введения второго соединения. Если вводят три или более соединений, то рядовой специалист в данной области техники понимает, что три или более соединений можно вводить одновременно или в различном порядке.

В некоторых вариантах изобретения, раскрываемых в данном описании, человеку дают фармацевтическую композицию, содержащую комбинацию двух или более соединений, для лечения или предупреждения аддиктивного заболевания или расстройства или заболевания или расстройства контроля над побуждениями. В некоторых таких вариантах изобретения каждое соединение представляет собой отдельную химическую структуру. Однако в других вариантах изобретения по меньшей мере два соедине

- 26 019200 ния могут связываться друг с другом химической связью, такой как ковалентная связь, таким образом, чтобы по меньшей мере два различных соединения образовывали отдельные части одной и той же молекулы. В одном аспекте изобретения химическую связь выбирают таким образом, чтобы после попадания в организм связь разрушалась, например, под действием ферментов, гидролизом кислотой, гидролизом основанием и т.п., а затем образовывались два отдельных соединения.

Результаты предыдущих исследований зависимости структура-свойство (8АК) в уровне техники можно использовать в качестве руководства для определения, какие соединения следует применять и каково оптимальное положение (или оптимальные положения) в молекулах для связывания с фалом, чтобы активность и селективность соединений оставались высокими. Фал или линкерную частицу выбирают из линкеров, которые продемонстрировали пригодность для связывания биоактивных молекул между собой. В данном описании раскрываются типичные соединения, которые можно связывать друг с другом в различных комбинациях с образованием гетеробивалентных терапевтических молекул.

Примеры линкеров, описанных в научной литературе, включают метиленовые (СН₂)_п линкеры (Никкеу е1 а1., 1. Ат. Скет. 8ос., 2003, 125: 3692-3693; Таин/ е1 а1., 1. Мей. Скет., 2001, 44: 1615-1622), олигоэтиленокси О(-СН₂СН₂О-)_п звенья, используемые для связывания налтрексамина с другими опиоидами, олигомеры глицина формулы -№Н-(С0СН₂МН)_пС0СН₂СН₂С0-(МНСН₂С0)_пКН-, применяемые для связывания между собой опиоидных антагонистов и агонистов ((а) Ройодкеке е1 а1., Ы£е 8с1, 1982, 31: 1283-1286, (Ь) Ройодкеке е1 а1., 1. Мей. Скет., 1986, 29: 1855-1861), гидрофильные диамины, используемые для связывания между собой опиоидных пептидов (81ершкк1 е1 а1., И'Иегпак 1. о£ Рерййе & Рго1ет Кек., 1991, 38: 588-92), жесткие двухцепочечные ДНК спейсеры (Рааг е1 а1., 1. 1ттипо1., 2002, 169: 856864) и биорасщепляемый линкер поли(Ь-молочная кислота) (К1ок е1 а1., Масгото1еси1ек, 2002, 35: 746759). Связывание линкера с соединением может дать соединение в предпочтительной для связывания ориентации. Сам по себе линкер может быть или может не быть биорасщепляемым. Линкер может придавать форму пролекарства и может настраиваться на оптимальную кинетику высвобождения связанных лекарств. Линкер может иметь гибкую конформацию либо по всей длине, либо можно сделать (создать) еще сегмент линкера (фала) с заторможенной конформацией (Ройодкеке е1 а1., 1. Мей. Скет., 1986, 29: 1650-1653).

Что касается алкогольных расстройств (расстройств алкогольного генеза), включая, но без ограничения, пьянство (злоупотребление алкоголем) и алкогольную зависимость, по меньшей мере два соединения, выбранных из группы, состоящей из топирамата, ондансетрона и налтрексона, и их аналоги, производные и модификации, и их фармацевтически приемлемые соли можно использовать для снижения потребления этанола, ассоциированное с такими алкогольными расстройствами. В одном аспекте изобретения используют топирамат и ондансетрон. Соответственно настоящее изобретение включает метод лечения или предупреждения алкогольных расстройств (расстройств алкогольного генеза) с учетом потребления алкоголя, заключающийся во введении субъекту, нуждающемуся в таком лечении или предупреждении, эффективного количества по меньшей мере двух соединений, выбранных из группы, состоящей из топирамата, ондансетрона и налтрексона, и их аналогов, производных и модификаций или их фармацевтически приемлемой соли. В другом аспекте комбинированную фармакотерапию применяют в сочетании с поведенческой модификацией или терапией.

Для дальнейшего лечения аддиктивных заболеваний и расстройств или для лечения других заболеваний и расстройств можно вводить другие типы соединений. Дополнительные типы соединений включают, но без ограничения, адренергетики, адренокортикостероиды, адренокортикоидные супрессоры, антагонисты альдостерона, аминокислоты, аналептики, анальгетики, аноректики, седативные агенты, антидепрессанты, гипотензивные средства, противовоспалительные агенты, противорвотные средства, средства против нейтропении, антиобсессивные препараты (против навязчивых состояний), средства против паркинсонизма, антипсихотики, супрессоры аппетита, регуляторы содержания глюкозы в крови, ингибиторы карбонатдегидрогеназы, кардиотонические средства, сердечно-сосудистые средства, желчегонные средства, холинергетики, агонисты холинергиков, дезактиваторы холинэстеразы, адъюванты и усилители когнитивной функции, гормоны, адъюванты памяти, усилители ментальной деятельности, регуляторы настроения, нейролептики, нейропротективные средства, психотропные препараты, миорелаксанты, седативно-гипнотические вещества, стимуляторы, тиреоидные гормоны, ингибиторы тиреоидных гормонов, миметики тиреоидных гормонов, агенты против церебральной ишемии, сосудосуживающие и сосудорасширяющие средства.

В одном варианте настоящее изобретение включает методы и композиции, применимые для снижения активности мезокортиколимбической дофаминовой системы.

В одном варианте настоящее изобретение включает методы и композиции, применимые для регуляции активности мезокортиколимбической дофаминовой системы.

В одном варианте настоящее изобретение включает методы и композиции, применимые для ингибирования функции глутамата.

В одном варианте настоящее изобретение включает методы и композиции, применимые для содействия активности γ-аминомасляной кислоты.

В одном варианте настоящее изобретение включает методы и композиции, применимые для регу

- 27 019200 ляции активности γ-аминомасляной кислоты.

Настоящее изобретение включает несколько методов доставки соединений по изобретению. Соединения могут предоставляться, например, в виде фармацевтических композиций в различных форматах, включая, но без ограничения, таблетки, капсулы, пилюли, лепешки, сиропы, мази, кремы, эликсиры, суппозитории, суспензии, ингаляторы, инъекции (включая депо-препараты) и жидкости.

Помимо этого, настоящее изобретение включает биологически активные аналоги, гомологи, производные и модификации соединений по изобретению. Методы получения таких соединений известны в уровне техники. В одном аспекте изобретения соединения представляют собой топирамат, налтрексон и ондансетрон.

Композиции и методы по данному описанию для лечения или предупреждения заболеваний и расстройств алкогольного генеза применимы также для лечения и предупреждения других аддиктивных заболеваний и расстройств и расстройств контроля над побуждениями. В одном аспекте изобретения композиции и методы выявляют косвенное действие на СМОЛ нейроны. Такие эффекты можно выявлять, например, регуляцией серотонинергических (серотониновых), опиатных, глутаматных рецепторов и рецепторов γ-аминомасляной кислоты. В одном аспекте изобретения аддиктивные заболевания и расстройства включают расстройства пищевого поведения, расстройства контроля над побуждениями, расстройства, связанные с употреблением никотина, расстройства, вызванные употреблением метамфетамина, расстройства, вызванные употреблением амфетаминов, расстройства, вызванные употреблением марихуаны, расстройства, вызванные употреблением кокаина, расстройства, вызванные употреблением галлюциногенов, расстройства, вызванные употреблением летучих растворителей, расстройства, вызванные злоупотреблением бензодиазепином или зависимостью от бензодиазепина, и расстройства, вызванные злоупотреблением опиоидами.

Список типов лекарств и специфических лекарств в группах, которые охватываются изобретением, представлен ниже.

Адренергические агенты: адреналон; амидефрина мезилат; апраклонидина гидрохлорид; бримонидина тартрат; дапипразола гидрохлорид; детеренола гидрохлорид; дипивефрин; дофамина гидрохлорид; эфедрина сульфат; эпинефрин; эпинефрина битартрат; эпинефрилборат; Екргоцшп (эспроквина) гидрохлорид; этафедрина гидрохлорид; гидроксиамфетамина гидробромид; левонордефрин; мефентермина сульфат; метараминола битартрат; метизолина гидрохлорид; нафазолина гидрохлорид; норэпинефрина битартрат; оксидофамин; оксиметазолина гидрохлорид; фенилэфрина гидрохлорид; фенилпропаноламин полистирекс; преналтерола гидрохлорид; пропилгекседрин; псевдоэфедрина гидрохлорид; тетрагидрозолина гидрохлорид; трамазолина гидрохлорид; ксилометазолина гидрохлорид.

Адренокортикостероиды: ципроцинонид; дезоксикортикостерона ацетат; дезоксикортикостерона пивалат; дексаметазона ацетат; флудокортизона ацетат; флумоксонид; гидрокортизона гемисукцинат; метилпреднизолона гемисукцинат; нафлокорт; процинонид; тимобезона ацетат; типредан.

Адренокортикоидные супрессоры: аминоглутетимид; трилостан.

Детеррент (ингибитор) алкоголя: дисульфирам.

Антагонисты альдостерона: канреноат калия; канренон; дициренон; мексреноат калия; прореноат калия; спиронолактон.

Аминокислоты: аланин; аспарагиновая кислота; цистеина гидрохлорид; цистин; гистидин; изолейцин; лейцин; лизин; лизина ацетат; лизина гидрохлорид; метионин; фенилаланин; пролин; серин; треонин; триптофан; тирозин; валин.

Аналептик: модафинил.

Анальгетики: ацетаминофен; альфентанила гидрохлорид; аминобензоат калия; анидоксим; анилеридин; анилеридина гидрохлорид; анилопама гидрохлорид; аниролак; антипирин; аспирин; беноксапрофен; бензидамина гидрохлорид; бицифидина гидрохлорид; брифентанила гидрохлорид; бромадолина малеат; бромфенак натрия; бупренорфина гидрохлорид; бутацетин; бутиксират; буторфанол; буторфанола тартрат; карбамазепин; карбаспирин кальция; карбифена гидрохлорид; кафентанила цитрат; ципрефадола сукцинат; цирамадол; цирамадола гидрохлорид; клониксерил; клониксин; кодеин; кодеина фосфат; кодеина сульфат; конорфона гидрохлорид; циклазоцин; дексоксадрола гидрохлорид; декспемедолак; дезоцин; дифлунизал; дигидрокодеина битартрат; димефадан; дипирон; докспикомина гидрохлорид; дриниден; энадолина гидрохлорид; эпиризол; эрготамина тартрат; этоксазена гидрохлорид; этофенамат; эвгенол; фенопрофен; фенопрофен кальция; фентанила цитрат; флоктафенин; флуфенизал; флуниксин; флуниксин меглумина; флупиртина малеат; флупроквазон; флурадолина гидрохлорид; флурбипрофен; гидроморфона гидрохлорид; ибуфенак; индопрофен; кетазоцин; кеторфанол; кеторолак трометамина; летимида гидрохлорид; левометадила ацетат гидрохлорид; левонантрадола гидрохлорид; леворфанола тартрат; лофемизола гидрохлорид; лофентанила оксалат; лорцинадол; ломоксикам; салицилат магния; мефенаминовая кислота; менабитана гидрохлорид; меперидина гидрохлорид; мептазинола гидрохлорид; метадона гидрохлорид; метадила ацетат; метофолин; метотримепразин; меткефамида ацетат; мимбана гидрохлорид; мирфентанила гидрохлорид; молиназон; морфина сульфат; моксазоцин; набитана гидрохлорид; налбуфина гидрохлорид; налмексона гидрохлорид; намоксират; нантрадола гидрохлорид; на

- 28 019200 проксен; напроксен натрия; напроксол; нефопама гидрохлорид; нексеридина гидрохлорид; норацимедола гидрохлорид; окфентанила гидрохлорид; октазамид; олванил; оксеторона фумарат; оксикодон; оксикодона гидрохлорид; оксикодона терефталат; оксиморфона гидрохлорид; пемедолак; пентаморфон; пентазоцин; пентазоцина гидрохлорид; пентазоцина лактат; феназопиридина гидрохлорид; фенирамидола гидрохлорид; пиценадола гидрохлорид; пинадолин; пирфенидон; пироксикам оламин; правадолина малеат; продилидина гидрохлорид; профадола гидрохлорид; пропирама фумарат; пропоксифена гидрохлорид; пропоксифена напсилат; проксазол; проксазола цитрат; проксорфана тартрат; пирролифена гидрохлорид; ремифентанила гидрохлорид; салколекс; салетамида малеат; салициламид; салицилат меглумина; салсалат; салицилат натрия; спирадолина мезилат; суфентанил; суфентанила цитрат; талметацин; талнифлумат; талосалат; тазадолена сукцинат; тебуфелон; тетридамин; тифурак натрия; тилидина гидрохлорид; тиопинак; тоназоцина мезилат; трамадола гидрохлорид; трефентанила гидрохлорид; троламин; верадолина гидрохлорид; верилопама гидрохлорид; волазоцин; ксорфанола мезилат; ксилазина гидрохлорид; зеназоцина мезилат; зомепирак натрия; зукапсаицин.

Аноректики, включающие дексфенфлурамин.

Анорексики: аминорекс; амфеклорал; хлорфентермина гидрохлорид; кломинорекс; клортеннина гидрохлорид; диэтилпропиона гидрохлорид; фенфлурамина гидрохлорид; фенизорекс; флудорекс; флуминорекс; левамфетамина сукцинат; мазиндол; мефенорекса гидрохлорид; фенметразина гидрохлорид; фентермин; сибутрамина гидрохлорид.

Седативные агенты: адансерина гидрохлорид; алпидем; биноспирона мезилат; бретазенил; глемансерин; ипсаспирона гидрохлорид; мирисетрона малеат; оцинаплон; ондасетрона гидрохлорид; панадиплон; панкоприд; пазинаклон; серазапина гидрохлорид; тандоспирона цитрат; залоспирона гидрохлорид.

Агенты против марихуаны: римонабат и другие подходящие лекарства, включая лекарства, регулирующие каннабиоидные рецепторы.

Антидепрессанты: адатансерина гидрохлорид; адиназолам; адиназолама мезилат; алапроклат; алетамина гидрохлорид; амедалина гидрохлорид; амитриптилина гидрохлорид; амоксапин; аптазапина малеат; азалоксана фумарат; азепиндол; азипрамина гидрохлорид; бипенарнола гидрохлорид; бупропиона гидрохлорид; бутацетин; бутриптилина гидрохлорид; кароксазон; картазолат; циклазиндол; цидоксепина гидрохлорид; цилобамина мезилат; клодазона гидрохлорид; кломипрамина гидрохлорид; котинина фумарат; циклиндол; ципенамина гидрохлорид; ципролидола гидрохлорид; ципроксимид; даледалина тозилат; дапоксентина гидрохлорид; дазадрола малеат; дазефинила гидрохлорид; дезипрамина гидрохлорид; дексамизол; дексимафен; дибензепина гидрохлорид; диоксадрола гидрохлорид; дотиепина гидрохлорид; доксепина гидрохлорид; дулоксетина гидрохлорид; экланамина малеат; энципрат; этоперидона гидрохлорид; фантридона гидрохлорид; феметозола (Гейте1охо1е) гидрохлорид; фенметрамид; фезоламина фумарат; флуотрацена гидрохлорид; флуоксетин; флуоксетина гидрохлорид; флупароксана гидрохлорид; гамфексин; гуаноксифена сульфат; имафена гидрохлорид; имилоксана гидрохлорид; имипрамина гидрохлорид; инделоксазина гидрохлорид; интриптилина гидрохлорид; иприндол; изокарбоксазид; кетипрамина фумарат; лофепрамина гидрохлорид; лорталамин; мапротилин; мапротилина гидрохлорид; мелитрацена гидрохлорид; милацемида гидрохлорид; минаприна гидрохлорид; миртазапин; моклобемид; модалина сульфат; напактадина гидрохлорид; напамезола гидрохлорид; нефазодона гидрохлорид; низоксетин; нитрафудама гидрохлорид; номифензина малеат; нортриптилина гидрохлорид; октриптилина фосфат; опипрамола гидрохлорид; оксапротилина гидрохлорид; оксипертин; пароксетин; фенелзина сульфат; пирандамина гидрохлорид; пизотилин; придефина гидрохлорид; пролинтана гидрохлорид; протриптилина гидрохлорид; квипазина малеат; ролициприн; сепроксетина гидрохлорид; сибутрамина гидрохлорид; сулпирид; суритрозол; таметралина гидрохлорид; тампрамина фумарат; тандамина гидрохлорид; тиазезима гидрохлорид; тозалинон; томоксетина гидрохлорид; тразодона гидрохлорид; требензомина гидрохлорид; тримипрамин; тримипрамина малеат; венлафаксина гидрохлорид; вилоксазина гидрохлорид; зимелдина гидрохлорид; зометапин.

Гипотензивные агенты: афлузозина гидрохлорид; алипамид; алтиазид; амиквинзина гидрохлорид; амлодипина безилат; амлодипина малеат; анаритида ацетат; атипрозина малеат; белфосдил; бемитрадин; бендакалола мезилат; бендрофлуметиазид; бензтиазид; бетаксолола гидрохлорид; бетанидина сульфат; бевантолола гидрохлорид; биклодила гидрохлорид; бисопролол; бисопролола фумарат; буциндолола гидрохлорид; бупикомид; бутиазид; кандоксатрил; кандоксатрилат; каптоприл; цераноприл; хлортиазид натрия; циклетанин; клонидин; клонидина гидрохлорид; клопамид; циклопентиазид; циклотиазид; дародипин; дебризоквина сульфат; делаприла гидрохлорид; диапамид; диазоксид; дилевалола гидрохлорид; дилтиазема малеат; дитекирен; доксазоцина мезилат; экадотрил; эналаприла малеат; эналаприлат; эналкирен; эндралазина мезилат; эпитиазид; эпросартан; эпросартана мезилат; фенолдопама мезилат; флаводилола малеат; флордипин; флозеквинан; фозиноприл натрия; фозиноприлат; гуанабенз; гуанабенза ацетат; гуанаклина сульфат; гуанадрела сульфат; гуанфацина гидрохлорид; гуаноксабенз; гуаноксана сульфат; гуаноксифена сульфат; гидралазина гидрохлорид; гидралазина полистирекс; гидрофлуметиазид; индакринон; индапамид; индолаприфа гидрохлорид; индорамин; индорамина гидрохлорид; лацидипин; лениквинзин; леверомакалим; лизиноприл; лофексидина гидрохлорид; лозартан калия; лозулазина гидрохлорид; мебутамат; мекамиламина гидрохлорид; медроксалол; медроксалола гидрохлорид; металтиа

- 29 019200 зид; метилклотиазид; метилдопата гидрохлорид; метипранолол; метолазон; метопролола фумарат; метопролола сукцинат; метирозин; миноксидил; монатепила малеат; музолимин; небиволол; нитрендипин; офорнин; паргилина гидрохлорид; пазоксид; пелансерина гидрохлорид; периндоприла эрбумин; феноксибензамина гидрохлорид; пинацидил; пивоприл; политиазид; празозина гидрохлорид; примидолол; призидилола гидрохлорид; квинаприла гидрохлорид; квинаприлат; квиназозина гидрохлорид; квинпирола гидрохлорид; квинуклиум бромид; рамиприл; раувольфия змеиная (серпентина); резерпин; саприсартан калия; саралазина ацетат; нитропруссид натрия; сульфиналола гидрохлорид; тазосартан; телупидина гидрохлорид; темокаприла гидрохлорид; теразозина гидрохлорид; терлакирен; тиаменидин; тиаменидина гидрохлорид; тикринафен; тинамибол; тиодазозин; типентозина гидрохлорид; трихлорметиазид; тримазозина гидрохлорид; триметафана камзилат; тримоксамина гидрохлорид; трипамид; ксипамид; занкирена гидрохлорид; зофеноприлат аргинин.

Противовоспалительные агенты: алклофенак; алклометазона дипропионат; алгестона ацетонид; альфа-амилаза; амцинафал; амцинафид; амфенак нитрия; амиприлозы гидрохлорид; анакинра; аниролак; анитразафен; апазон; динатрий-балсалазид; бендазак; беноксапрофен; бензидамина гидрохлорид; бромелаины; броперамол; будезонид; карпрофен; цинтазон; клипрофен; клобетазола пропионат; клобетазона бутират; клопирак; клотиказона пропионат; корметазона ацетат; кортодоксон; дефлазакорт; дезонид; дезоксиметазон; дексаметазона дипропионат; диклофенак калия; диклофенак натрия; дифлоразона диацетат; дифлумидон натрий; дифлунизал; дифлупреднат; дифталон; диметилсульфоксид; дроцинонид; ендризон (Епбгукопе); енлимомаб; еноликам натрия; эпиризол; этодолак; этофенамат; фелбинак; фенамол; фенбуфен; фенклофенак; фенклорак; фендозал; фенпипалон; фентиазак; флазалон; флуазакорт; флуфенаминовая кислота; флумизол; флунизолида ацетат; флуниксин; флуниксин меглумин; бутилфлуокортин; флуорометолона ацетат; флуквазон; флурбипрофен; флуретофен; флутиказона пропионат; фурапрофен; фуробуфен; галцинонид; галобетазола пропионат; галопредона ацетат; ибуфенак; ибупрофен; ибупрофен алюминий; ибупрофен пиконол; илонидап; индометацин; индометацин натрия; индопрофен; индоксол; интразол; изофлупредона ацетат; изоксепак; изоксикам; кетопрофен; лофемизола гидрохлорид; лорниксикам; лотепреднола этобанат; меклофенамат натрия; меклофенаминовая кислота; меклоризона дибутират; мефенаминовая кислота; мезаламин; мезеклазон; метилпреднизолона сулептанат; момифлумат; набуметон; напроксен; напроксен натрий; напроксол; нимазон; олсалазин натрия; орготеин; орпаноксин; оксапрозин; оксифенбутазон; паранилина гидрохлорид; пентозана полисульфат натрия; фенбутазон натрия глицерат; пирфенидон; пироксикам; пироксикама циннамат; пироксикам оламин; пирпрофен; предназат; прифелон; продоловая кислота; проквазон; проксазол; проксазола цитрат; римексолон; ромазарит; салколекс; салнацедин; салсалат; сангвинария хлорид; секлазон; серметацин; судоксикам; сулиндак; талметацин; талнифлумат; талосалат; тебуфелон; тенидап; тенидап натрия; теноксикам; тезикам; тезимид; тетридамид; тиопинак; тиксокортола пивалат; толметин; толметин натрия; триклонид; трифлумидат; зидометацин; зомепирак натрия.

Противорвотные агенты: биклузина гидрохлорид; циклизина лактат; набоктата гидрохлорид.

Агенты против нейтропении: филграстим; ленограстим; молграмостим; реграмостим; сарграмостим.

Агент против навязчивых состояний: флувоксамина малеат.

Агенты против паркинсонизма: бензтропина мезилат; бипериден; биперидена гидрохлорид; биперидена лактат; кармантадин; циладопа гидрохлорид; допамантин; этопропазина гидрохлорид; лазабемид; леводопа; лометралина гидрохлорид; мофегилина гидрохлорид; наксаголида гидрохлорид; парептида сульфат; проциклидина гидрохлорид; квинеторана гидрохлорид; ропинирола гидрохлорид; селегилина гидрохлорид; толкапон; тригексифенидила гидрохлорид.

Агенты антиперистальтического действия: дефеноксимида гидрохлорид; дефеноксин; дифеноксилата гидрохлорид; флуперамид; лидамидина гидрохлорид; лоперамида гидрохлорид; малетамер; нуфеноксол; парегорик.

Антипсихотические агенты: ацетофеназина малеат; алентемола гидробромид; алпертин; азаперон; бателапина малеат; бенперидол; бензиндопирина гидрохлорид; брофоксин; бромперидол; бромперидола деканоат; бутакламола гидрохлорид; бутаперазин; бутаперазина малеат; карфеназина малеат; карвотролина гидрохлорид; хлорпромазин; хлорпромазина гидрохлорид; хлорпротиксен; цинперен; цинтриамид; кломакрана фосфат; клопентиксол; клопимозид; клопипазана мезилат; клороперона гидрохлорид; клотиапин; клотиксамида малеат; клозапин; циклофеназина гидрохлорид; дроперидол; этазолата гидрохлорид; фенимид; флуциндол; флумезапин; флуфеназина деканоат; флуфеназина фенантат; флуфеназина гидрохлорид; флуспиперон; флуспирилен; флутролин; гевотролина гидрохлорид; галопемид; галоперидол; галоперидола деканоат; илоперидон; имидолина гидрохлорид; ленперон; мазапертина сукцинат; мезоридазин; мезоридазина безилат; метиапин; миленперон; милипертин; молиндона гидрохлорид; наранола гидрохлорид; нефлумозида гидрохлорид; окаперидон; оланзапин; оксиперомид; пенфлуридол; пентиапина малеат; перфеназин; пимозид; пиноксепина гидрохлорид; пипамперон; пиперацетазин; пипотиазина пальмитат; пиквиндона гидрохлорид; прохлорперазина эдисилат; прохлорперазина малеат; промазина гидрохлорид; ремоксиприд; ремоксиприда гидрохлорид; римказола гидрохлорид; сеперидола гидрохлорид; сертиндол; сетоперон; спиперон; тиоридазин; тиоридазина гидрохлорид; тиотиксен; тиотиксе

- 30 019200 на гидрохлорид; тиоперидона гидрохлорид; тиоспирона гидрохлорид; трифлуоперазина гидрохлорид; трифлуперидол; трифлупромазин; трифлупромазина гидрохлорид; зипразидона гидрохлорид.

Супрессоры аппетита: дексфенфлурамина гидрохлорид; фендиметразина тартрат; фентармина гидрохлорид.

Регуляторы содержания глюкозы в крови: человеческий инсулин; глюкагон; толазамид; толбутамид; хлорпропамид; ацетогексамид и глипизид.

Ингибиторы карбонатдегидрогеназы: ацетазоламид; ацетазоламида натрий, дихлорфенамид; дорзоламида гидрохлорид; метазоламид; сезоламида гидрохлорид.

Кардиосупрессоры (агенты, успокаивающе действующие на сердце): ацекаинида гидрохлорид; ацетилхолин хлорид; актизомид; аденозин; амиодарон; априндин; априндина гидрохлорид; артилида фумарат; азимилида дигидрохлорид; бидизомид; букаинида малеат; букромарон; бутопрозина гидрохлорид; капобенат натрия; капобеновая кислота; цифенлин; цифенлина сукцинат; клофилия фосфат; дизобутамид; дизопирамид; дизопирамида фосфат; дофетилид; дробулин; эдофолона ацетат; эмилия тозилат; энкаинида гидрохлорид; флекаинида ацетат; ибутилида фумарат; индекаинида гидрохлорид; ипазилида фумарат; лоражмина гидрохлорид; лоркаинида гидрохлорид; меобентина сульфат; мексилетина гидрохлорид; модекаинид; морицизин; оксирамид; пирменола гидрохлорид; пиролазамид; пранолиния хлорид; прокаинамида гидрохлорид; пропафенона гидрохлорид; пиронилон; квиндония бромид; квинидина глюконат; квинидина сульфат; рекаинама гидрохлорид; рекаинама сульфат; ризотилида гидрохлорид; ропитоина гидрохлорид; сематилида гидрохлорид; сурикаинида малеат; токаинид; токаинида гидрохлорид; транскаинид.

Кардиотонические средства: актодигин; амринон; беморадан; бутопамин; карбазеран; карсатрина сукцинат; десланозид; дигиталис; дигитоксин; дигоксин; добутамин; добутамина гидрохлорид; добутамина лактобионат; добутамина тартрат; эноксимон; имазодана гидрохлорид; индолидан; изомазола гидрохлорид; левдобутамина лактобионат; ликсазинона сульфат; медоринон; милринон; пелринона гидрохлорид; пимобендан; пироксимон; приноксодан; просцилларидин; квазинон; тазолола гидрохлорид; веснаринон.

Сердечно-сосудистые агенты: допексамин; допексамина гидрохлорид.

Желчегонные средства: дегидрохолевая кислота; фенцибутирол; гимекромон; пипрозолин; синкалид; токамфил.

Холинергические агенты (холинергетики): ацеклидин; бетанехола хлорид; карбахол; демекария бромид; декспантенол; эхотиофата йодид; изофлурофат; метахолина хлорид; неостигмина бромид; неостигмина метилсульфат; физостигмин; физостигмина салицилат; физостигмина сульфат; пилокарпин; пилокарпина гидрохлорид; пилокарпина нитрат; пиридостигмина бромид.

Агонисты холинергетиков: ксаномелин; ксаномелина тартрат.

Дезактиватор холинэстеразы: обидоксима хлорид; пралидоксима хлорид; пралидоксима йодид; пралидоксима мезилат.

Кокцидиостатики: априноцид; наразин; семдурамицин; семдурамицин натрия.

Адъюванты когнитивной функции: эрголоида мезилат; пирацетам; прамирацетама гидрохлорид; прамирацетама сульфат; такрина гидрохлорид.

Усилители (энхансеры) когнитивной функции: безипирдина гидрохлорид; линопирдин; сибопирдин.

Агонист дофаминовых рецепторов: каберголин (достинекс).

Гормоны: диэтилстильбестрол; прогестерон; 17-гидроксипрогестерон; медроксипрогестерон; норгестрел; норэтинодрел; эстрадиол; мегестрол (мегас); норэтиндрон; левоноргестрел; этиндиол; этинилэстрадиол; местранол; эстрон; эквилин; 17-альфа-дигидроэквилин; эквиленин; 17-альфадигидроэквиленин; 17-альфа-эстрадиол; 17-бета-эстрадиол; лейпролид (лупрон); глюкагон; тестолактон; кломифен; человеческий менопаузальный гонадотропин; человеческий хорионный гонадотропин; урофоллитропин; бромкриптин; гонадорелин; рилизинг-фактор лютеинизирующего гормона и аналоги; гонадотропины; даназол; тестостерон; дегидроэпиандростерон; андростендион; дигидроэстостерон; релаксин; окситоцин; вазопрессин; фолликулостатин; регуляторный белок фолликулов; гонадоктринины (допабос!пшп5); ингибитор созревания ооцитов; инсулиновый фактор роста; фолликул-стимулирующий гормон; лютеинизирующий гормон; тамоксифен; кортикорелина овечьего трифлутат; козинтропин; метогест; нейрогипофиз; серактида ацетат; самополар; соматрем; соматропин; соменопор; сомидобов.

Адъюванты памяти: димоксамина гидрохлорид; рибаминол.

Усилитель ментальной деятельности: анирацетам.

Регулятор настроения: фенгабин.

Нейролептик: дуоперона фумарат; рисперидон.

Нейропротективные средства: дизоцильпина малеат.

Психотропный препарат: минаприн.

Миорелаксанты: адифенина гидрохлорид; алкурония хлорид; аминофиллин; азумолен натрия; баклофен; бензоктамина гидрохлорид; карисопродол; хлорфенезин карбамат; хлорзоксазон; цинфлумид; циннамедрин; клоданелон; циклобензаприна гидрохлорид; дантролен; дантролен натрий; феналанид;

- 31 019200 фенирипола гидрохлорид; флавоксата гидрохлорид; флетазепам; флуметрамид; флуразепама гидрохлорид; гексафлуорения бромид; изомиламина гидрохлорид; лорбамат; мебеверина гидрохлорид; мезуприна гидрохлорид; метаксалон; метокарбамол; метиксена гидрохлорид; нафомина малат; нелезаприна малеат; папаверина гидрохлорид; пипоксолана гидрохлорид; квинктолат; ритодрин; ритодрина гидрохлорид; ролодин; теофиллина натрия глицинат; тифенамила гидрохлорид; ксилобам.

Седативно-гипнотические вещества: аллобарбитал; алонамид; алпрозолам; амобарбитал натрия; бентазепам; бротизолам; бутабарбитал; бутабарбитал натрия; буталбитал; капурид; карбоклорал; хлорал бетаин (бетаин хлорала); хлоралгидрат; хлордиазэпоксида гидрохлорид; клоперидона гидрохлорид; клоретат; ципрозепам; декскламола гидрохлорид; диазепам; дихлоралфеназон; эстазолам; этхлорвинол; этомидат; фенобам; флунитразепам; фосазепам; глутетимид; галазепам; лорметазепам; меклоквалон; мепробамат; метаквалон; мидафлур; паральдегид; пентобарбитал; пентобарбитал натрия; перлапин; празепам; квазепам; реклазепам; ролетамид; секобарбитал; секобарбитал-натрий; супроклон; талидомид; траказолат; трепипама малеат; триазолам; трицетамид; триклофос-натрий; триметозин; улдазепам; залеплон; золепазама гидрохлорид; золпидема тартрат.

Антагонисты серотонина: алтрансерина тартрат; амесергид; кетансерин; ритансерин.

Ингибиторы серотонина: цинансерина гидрохлорид; фенклонин; фоназина мезилат; ксиламидина тозилат.

Антагонист серотониновых рецепторов: тропансерина гидрохлорид.

Стимуляторы: амфонеловая кислота; амфетамина сульфат; ампизина сульфат; арбутамина гидрохлорид; азабон; кофеин; церулетид; церулетид диэтиламин; цизаприд; дазоприда фумарат; декстроамфетамин; декстроамфетамина сульфат; дифлуанина гидрохлорид; димефлина гидрохлорид; доксапрама гидрохлорид; этриптамина ацетат; этамиван; фенетиллина гидрохлорид; флубиналата гидрохлорид; флуротил; гистамина фосфат; индрилина гидрохлорид; мефексамид; метамфетамина гидрохлорид; метилфенидата гидрохлорид; пемолин; пировалерона гидрохлорид; ксамотерол; ксамотерола фумарат.

Синергист: проадифена гидрохлорид.

Тиреоидные гормоны: левотироксин натрия; левотиронин натрий; лиотрикс.

Ингибиторы тиреоидных гормонов: метимазол; пропилтиоурацил.

Миметик тиреоидных гормонов: тиромедана гидрохлорид.

Агент против церебральной ишемии: декстрорфана гидрохлорид.

Сосудосуживающие средства: ангиотензин амид; фелипрессин; метисергид; метисергида малеат.

Сосудорасширяющие средства: алпростадил; азаклорзина гидрохлорид; беметана сульфат; бепридила гидрохлорид; бутеризин; цетиедила цитрат; хромонара гидрохлорид; клонитрат; дилтиазема гидрохлорид; дипирамидол; дропрениламин; эритритила татранитрат; фелодипин; флуниризина гидрохлорид; фостедил; гексобендин; инозитола (инозита) ниацинат; ипроксамина гидрохлорид; изосорбида динитрат; изосорбида монононитрат; изоксуприна гидрохлорид; лидофлазин; мефендил; мефендила фумарат; мибефрадила дигидрохлорид; миофлазина гидрохлорид; миксидин; нафронила оксалат; никардипина гидрохлорид; ницерголин; никорандил; никотиниловый спирт; нифедипин; нимодипин; низолдипин; оксфеницин; окспрендола гидрохлорид; пентаэритрита тетранитрат; пентоксифиллин; пентринитрол; пергексилина малеат; пиндолол; пирсимонид; прениламин; пропатил нитрат; сулоктидил; теродилина гидрохлорид; типропидила гидрохлорид; толазолина гидрохлорид; ксантинола ниацинат.

Анализы и методы тестирования соединений по изобретению представлены в данном описании или известны в уровне техники. Например, см. Ырра е1 а1., патентную заявку США 2006/0173064, опубликованную 3 августа 2006 года.

Помимо этого, изобретение включает лечение и предупреждение ожирения, а именно влияние на потерю массы (веса) тела и предупреждение увеличения массы (веса) тела. Ожирение представляет собой расстройство, характеризующееся накоплением избыточного жира в организме. Ожирение считается одной из ведущих причин заболевания и является глобальной проблемой. Увеличивающееся число осложнений, таких как гипертония (гипертензия), инсулиннезависимый сахарный диабет, артериосклероз, дислипидемия, некоторые формы рака, апноэ во сне и остеоартрит, связано с увеличивающимся числом случаев ожирения в общей популяции. В одном аспекте изобретение охватывает комбинированное терапевтическое лечение нуждающегося в этом субъекта с целью вызвать снижение веса. Например, предполагается, что лечению подлежат субъекты (люди, пациенты), имеющие ΒМI (индекс массы тела) более примерно 25 (25.0-29.9 считают избыточным весом, весом больше нормы). В одном аспекте изобретения индивидуумы имеют ΒМI выше 30 (30 и выше полагают как ожирение). В другом аспекте изобретения субъект может быть направлен на лечение для предупреждения увеличения массы тела. В одном варианте изобретения индивидууму (человека) дают указание принимать по меньшей мере одно соединение по изобретению по меньшей мере один раз в день и по меньшей мере второе соединение по изобретению по меньшей мере один раз в день. Соединение может быть, например, в форме таблетки, лепешки, жидкости и т.д. В одном аспекте изобретения третье соединение также дают ежедневно. В одном варианте изобретения соединения могут приниматься чаще одного раза в день. В другом варианте изобретения соединения принимают реже одного раза в день. Дозировки можно определять на основании того, что известно в уровне техники, или того, что определено как лучшее для субъекта данного возраста, пола, состояния

- 32 019200 здоровья, массы и т.д. Соединения, применимые для лечения ожирения в соответствии с методами по изобретению, включают, но без ограничения, топирамат, налтрексон и ондансетрон; см. в ХУсЬсг (опубликованная патентная заявка США Νο. 20070275970) и МсЕ1гоу (патент США Νο. 6323236) дополнительную информацию и методы введения лекарств, применимых для лечения ожирения, аддиктивных расстройств и расстройств контроля над поведением и определения лекарственных схем.

Фармацевтически приемлемые соли присоединения оснований можно получать из неорганических и органических оснований. Соли присоединения неорганических оснований включают (только в качестве примера) соли натрия, калия, лития, аммония, кальция и магния. Соли, полученные с применением органических оснований, включают, но без ограничения, соли первичных, вторичных и третичных аминов, таких как алкиламины, диалкиламины, триалкиламины, замещенные алкиламины, ди(замещенные алкил)амины, три(замещенные алкил)амины, алкениламины, диалкениламины, триалкениламины, замещенные алкениламины, ди(замещенные алкенил)амины, три(замещенные алкенил)амины, циклоалкиламины, ди(циклоалкил)амины, три(циклоалкил)амины, замещенные циклоалкиламины, дизамещенные циклоалкиламины, тризамещенные циклоалкиламины, циклоалкениламины, ди(циклоалкенил)амины, три(циклоалкенил)амины, замещенные циклоалкениламины, дизамещенные циклоалкениламины, тризамещенные циклоалкениламины, ариламины, диариламины, триариламины, гетероариламины, дигетероариламины, тригетероариламины, гетероциклические амины, дигетероциклические амины, тригетероциклические амины, смешанные ди- и триамины, в которых по меньшей мере два заместителя в амине различны и выбираются из группы, состоящей из алкила, замещенного алкила, алкенила, замещенного алкенила, циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, арила, гетероарила, гетероциклического радикала и т.п. Также охватываются амины, в которых два или три заместителя вместе с атомом азота образуют гетероциклическую или гетероарильную группу. Примеры подходящих аминов включают, но только в качестве примера, изопропиламин, триметиламин, диэтиламин, триизопропиламин, три(н-пропил)амин, этаноламин, 2-диметиламиноэтанол, трометамин, лизин, аргинин, гистидин, кофеин, прокаин, гидрабамин, холин, бетаин, этилендиамин, глюкозамин, Νалкилглюкамины, теобромин, пурины, пиперазин, пиперидин, морфолин, Ν-этилпиперидин и т.п. Следует понимать, что при практическом применении данного изобретения используются другие производные карбоновых кислот, например амиды карбоновых кислот, включая карбоксамиды, низшие алкилкарбоксамиды, диалкилкарбоксамиды и т.п.

Фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот можно получать из неорганических и органических кислот. Соли, полученные из неорганических кислот, включают соляную (хлористоводородную) кислоту, бромисто-водородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, фосфорную кислоту и т.п. Соли, полученные из органических кислот, включают уксусную кислоту, пропионовую кислоту, гликолевую кислоту, пировиноградную кислоту, щавелевую кислоту, яблочную кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, малеиновую кислоту, фумаровую кислоту, винную кислоту, лимонную кислоту, бензойную кислоту, коричную кислоту, миндальную кислоту, метансульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, п-толуолсульфоновую кислоту, салициловую кислоту и т.п.

Психосоциальное вмешательство и лечение (терапия).

Комбинированное лекарственное лечение по настоящему изобретению может, кроме того, быть дополнено предоставлением субъекту формы психосоциального вмешательства и/или психосоциальной терапии, такой как краткая процедура поведенческой терапии, повышающей комплаенс (приверженность лечению) (ВВСЕТ) ВВСЕТ, стандартизированная, в соответствии с руководством (справочником), краткая (т.е. проводится в течение примерно 15 мин) психофизическая процедура по повышению приверженности (лечению) делает упор на то, что комплаенс-терапия является решающей для изменения характера употребления алкоголя и его последствий (ΙοΗηκοη с1 а1., ВпеГ Вейауюга1 СотрЕаисе Еп11апсстсп1 Тгеа!тсп1 (ВВСЕТ) тапиа1. В: ΙοΗηκοη В.А., Κυίζ Р., Са1ап1ег М., ебх ^ηά^οΕ οΓ с11П1са1 αΕοΙιοΙίδΐη 1геа1теп1. Βα1ί™οΐ€, Μ.Ό.: ΕίρρίικοΙΙ ^1Шат§ & \νί1Είη5; 2003, 282-301). Было показано, что краткие вмешательства (Ебтагбк е1 а1., I. 8!иб. Л1сοкο1.. 1977, 38: 1004-1031), такие как ВВСЕТ, оказывают благоприятное воздействие на лечение алкогольной зависимости. ВВСЕТ была смоделирована для условий применения в клинике в Национальном институте психического здоровья в совместном исследовании депрессии, она была использована как дополнение к лекарственному лечению в этом исследовании (Еатее!! е1 а1. Ркус1юρ11аπηасο1 Ви11., 1987, 23: 309-324). ВВСЕТ успешно использовали в качестве платформы для психосоциального лечения в одноцентровых и многоцентровых испытаниях эффективности топирамата для лечения алкогольной зависимости (ΙοΗηκοη е! а1., БаисеР 2003, 361: 1677-1685; ΙοΗηκοη е! а1., .ГАМА, 2007, 298: 1641-1651). Они проводятся опытными работниками клиник, включая практикующих медсестер высшей квалификации и других не-специалистов. Единообразие и согласованность проведения ВВСЕТ гарантируется постоянным обучением и контролем. ВВСЕТ представляет собой охраняемый авторским правом материал (ΙοΗηκοη е! а1., ВпеГ Вейауюга1 Сοтρ1^аηсс Емк-тсетей Тгеа!тей (ВВСЕТ) таша1. Ιη: Ιοίιηδοη В.А., Κυίζ Р., Са1айег М., ебх НаηάЬοοк οΓ с11шса1 πΕο1ιο1ί5ΐη 1геа!тей. Βа1!^тο^с, Μ.Ό.: Ырршοο!ί МШатз & Г'Пктх 2003, 282-301).

Помимо этого, настоящее изобретение включает применение других схем психосоциальной терапии, отличных от ВВСЕТ, включая, но без ограничения, когнитивно-поведенческую терапию копирова- 33 019200 ния навыков, также называемую когнитивно-поведенческой терапией (СВТ) (Рго]сс1 МАТСН Векеагсй Стоир. Ма!сЫид А1сойо11кт Ттеа1теп1к ю С11еп! Не!етодепейу: Рго)ес1 МАТСН рокйгеа!шеп1 йппкшд он1сотек. I. 81ий. А1сойо1. 1997; 58: 7-29), терапию, повышающую мотивацию (МЕТ) (Рго)ес1 МАТСН Векеагсй Сгоир, Ма!сЫпд А1сойо11кт Ттеа!теп1к Ю Сйеп! Не!етодепейу: Рго)ес1 МАТСН рокйтеа!шеп1 йппк1пд оШсотек. I. 81ий. А1сойо1. 1997, 58: 7-29), Т8Е-терапию 12 шагов (Т8Е) (Рго|ес1 МАТСН Векеагсй Сгоир. Ма!сЫпд А1сойо11кт Тгеа1теп1к !о СНеп1 Не!егодепейу: Рго)ес1 МАТСН рок11геа1теп1 йппкшд ои!сотек. I. 81ий. А1сойо1. 1997, 58: 7-29), комбинированное поведенческое вмешательство (СВ1), (Ап1оп е! а1., 1АМА, 2006, 295: 2003-2017), терапевтические меры (ММ) (Ап!оп е! а1., 1АМА, 2006, 295: 2003-2017), или Вюркусйокоаа! Верой, Ешра!йу, Ыеейк, Эйес! айтюе апй Аккекктеп! (ΒΒΕΝΌΛ) (биопсихосоциальный подход, отчет, эмпатия (сопереживание), требования, непосредственная помощь и оценка) (СагЬий е! а1., 1АМА, 2005, 293: 1617-1625). Помимо этого, настоящее изобретение включает использование альтернативных вмешательств, таких как гипноз или акупунктура, для содействия лечению аддиктивного заболевания или расстройства.

Программы психосоциальной терапии можно применять до, во время и после лечения субъекта с помощью комбинированной лекарственной терапии по изобретению.

Рядовой специалист в данной области техники поймет, что процедуры (методики) психосоциальной терапии, а также альтернативные вмешательства, такие как гипноз или акупунктура, также можно использовать в сочетании с комбинированной лекарственной терапией для лечения аддиктивных расстройств и расстройств импульсивного контроля (контроля над побуждениями), отличных от алкогольных заболеваний и расстройств.

Помимо этого, изобретение включает применение комбинированной фармакотерапии и поведенческого (психосоциального) вмешательства или тренинга (обучения) для лечения других аддиктивных расстройств и/или расстройств импульсивного контроля.

Например, компульсивное переедание (ΒΕΌ) характеризуется отдельными периодами переедания, во время которых большие количества пищи потребляются в отдельный период времени и чувство контроля над приемом пищи отсутствует. Сообщалось, что у людей, страдающих нейрогенной булимией, наблюдаются электроэнцефалографические аномалии и переедание уменьшается в ответ на антиэпилептическое лекарство фенитоин. Кроме того, в контролируемых испытаниях на больных эпилепсией топирамат ассоциировался с подавлением аппетита и потерей массы, не связанной с перееданием. Показано, что ондансетрон уменьшает переедание.

ΒΕΌ представляет собой подгруппу из более широкой классификационной группы психических расстройств, определяемой как расстройства импульсивного контроля (контроля над побуждениями) (100), характеризующиеся причиняющим вред поведением в ответ на непреодолимый импульс. Было высказано предположение, что 1СО могут быть связаны с обсессивно-компульсивным расстройством или, аналогично, могут являться формами обсессивно-компульсивных расстройств. Было также высказано предположение, что ГОС могут быть связаны с аффективным расстройством или могут быть формами группы аффективных расстройств, гипотетического семейства расстройств, имеющих по меньшей мере одну физиологическую патологию, общую с большой депрессией. Как указано в Руководстве по диагностике и статистике психических расстройств (О8М-1У), основным признаком 1СО является неспособность сопротивляться импульсу, побуждению или соблазну осуществить действие, вредное для самого человека или для других. При многих 1СО человек чувствует состояние возрастающего напряжения или возбуждения перед тем, как совершить это действие, а затем испытывает удовольствие, благодарность или облегчение во время совершения этого действия. После совершения этого акта (действия) может появиться или не появиться сожаление или чувство вины. 1СО перечислены в последней категории, ГОС без дополнительных уточнений, которые включают периодическое эксплозивное расстройство (ΙΕΌ), клептоманию, патологическую любовь к азартной игре, пироманию, трихотилломанию и ГО8 без дополнительных уточнений, неуточненные (N08). Примерами 1СО N08 являются компульсивные покупки или шопинг, нанесение повреждений самому себе, непарафилические сексуальные привыкания, устойчивая привычка грызть ногти (онихофагия), дерматилломания, импульсивное расстройство личности, синдром нарушения внимания с гиперактивностью, расстройства пищевого поведения, характеризующиеся перееданием (бинго), и расстройства, вызванные употреблением психоактивных веществ.

Многие лекарства могут вызвать физическую и/или психологическую аддикцию. Наиболее известные наркотики включают опиаты, такие как героин, опиум и морфин; симпатомиметики, включая кокаин и амфетамины; седативно-гипнотические вещества, включая алкоголь, бензодиазепины и барбитураты; и никотин, который оказывает действие, аналогичное действию опиоидов и симпатомиметиков. Лекарственная аддикция характеризуется пристрастием или компульсивным побуждением к приему лекарства и неспособностью ограничить его прием. Кроме того, лекарственная зависимость ассоциируется с толерантностью к лекарственному средству, ослаблению действия лекарства после многократного приема и абстиненции (синдрому отмены), появлению физических и поведенческих симптомов при отсутствии употребления лекарства. Сенсибилизация происходит, если многократное введение лекарства приводит к усиленной (повышенной) реакции на каждую дозу. Толерантность, сенсибилизация и абстиненция представляют собой явления, свидетельствующие об изменении в центральной нервной системе в результате

- 34 019200 непрерывного приема лекарства. Это изменение побуждает пристрастившегося (к лекарству) человека (индивидуума) продолжать принимать лекарство, несмотря на серьезные социальные, правовые, физические и/или профессиональные последствия.

Синдром дефицита внимания включает, но без ограничения, синдром дефицита внимания с гиперактивностью преимущественно невнимательного типа; синдром дефицита внимания с гиперактивностью преимущественно гиперактивного импульсного типа; дефицита внимания с гиперактивностью смешанного типа; дефицита внимания с гиперактивностью без дополнительных уточнений (N08); кондуктивное расстройство; вызывающее оппозиционное расстройство и дизраптивное (дезорганизованное) расстройство поведения неуточненное (без дополнительного уточнения) (N08).

Депрессивные расстройства включают, но без ограничения, большое депрессивное расстройство, рекуррентное; дистимическое расстройство; депрессивное расстройство неуточненное (N08) и большое депрессивное расстройство, один депрессивный эпизод.

Болезнь Паркинсона включает, но без ограничения, нейролептический паркинсонизм.

Аддиктивные расстройства включают, но без ограничения, расстройства пищевого поведения, расстройства, обусловленные ожирением, расстройства импульсного контроля (контроля над побуждениями), расстройства, связанные с употреблением алкоголя (алкогольные расстройства), расстройства, связанные с употреблением никотина, расстройства, вызванные употреблением амфетаминов, расстройства, вызванные употреблением марихуаны, расстройства, вызванные употреблением кокаина, игроманию (приверженность к азартной игре), сексуальные расстройства, расстройства, вызванные употреблением галлюциногенов, расстройства, вызванные употреблением летучих растворителей, и расстройства, вызванные злоупотреблением опиоидами.

Расстройства пищевого поведения включают, но без ограничения, нейрогенную булимию неочистительного типа; нейрогенную булимию очистительного типа и расстройство пищевого поведения без дополнительных уточнений (N08).

Расстройства импульсного контроля включают, но без ограничения, периодическое эксплозивное расстройство, клептоманию, пироманию, патологическую любовь к азартной игре (игроманию), трихотилломанию и расстройство импульсного контроля без дополнительных уточнений (N08).

Расстройства, связанные с употреблением никотина, включают, но без ограничения, никотиновую зависимость, никотиновую абстиненцию и расстройство, связанное с употреблением никотина, без дополнительных уточнений (N08).

Расстройства, вызванные употреблением амфетаминов, включают, но без ограничения, амфетаминовую зависимость, злоупотребление амфетаминами, интоксикацию амфетаминами, абстиненцию при амфетаминовой наркомании, делирий при интоксикации амфетаминами, вызванное приемом амфетаминов психотическое расстройство с бредом, вызванное приемом амфетаминов психотическое расстройство с галлюцинациями, вызванное приемом амфетаминов аффективное расстройство, вызванное приемом амфетаминов тревожное расстройство, вызванную приемом амфетаминов половую дисфункцию, вызванное приемом амфетаминов расстройство сна, вызванное приемом амфетаминов расстройство без дополнительных уточнений (N08), интоксикацию амфетаминами и абстиненцию при амфетаминовой наркомании.

Расстройства, вызванные употреблением марихуаны, включают, но без ограничения, зависимость от марихуаны; злоупотребление марихуаной; интоксикацию марихуаной; делирий при интоксикации марихуаной; вызванное приемом марихуаны психотическое расстройство с бредом; вызванное приемом марихуаны психотическое расстройство с галлюцинациями; вызванное приемом марихуаны тревожное расстройство; вызванное приемом марихуаны расстройство без дополнительных уточнений (N08); интоксикацию марихуаной.

Расстройства, вызванные употреблением кокаина, включают, но без ограничения, кокаиновую зависимость, злоупотребление кокаином, интоксикацию кокаином, абстиненцию при кокаиновой наркомании, делирий при интоксикации кокаином, вызванное приемом кокаина психотическое расстройство с бредом, вызванное приемом кокаина психотическое расстройство с галлюцинациями, вызванное приемом кокаина аффективное расстройство, вызванное приемом кокаина тревожное расстройство, вызванную приемом кокаина половую дисфункцию, вызванное приемом кокаина расстройство сна, вызванное приемом кокаина расстройство без дополнительных уточнений (N08), интоксикацию кокаином и абстиненцию при кокаиновой наркомании.

Расстройства, вызванные употреблением галлюциногенов, включают, но без ограничения, зависимость от галлюциногенов, злоупотребление галлюциногенами, интоксикацию галлюциногенами, абстиненцию при галлюциногеновой наркомании, делирий при интоксикации галлюциногенами, вызванное приемом галлюциногенов психотическое расстройство с бредом, вызванное приемом галлюциногенов психотическое расстройство с галлюцинациями, вызванное приемом галлюциногенов аффективное расстройство, вызванное приемом галлюциногенов тревожное расстройство, вызванную приемом галлюциногенов половую дисфункцию, вызванное приемом галлюциногенов расстройство сна, вызванное приемом галлюциногенов расстройство без дополнительных уточнений (N08), интоксикацию галлюциногенами и вызванное галлюциногенами стойкое нарушение восприятия (флэшбэк).

- 35 019200

Расстройства, вызванные употреблением ингалянтов (летучих препаратов), включают, но без ограничения, зависимость от ингалянтов; злоупотребление ингалянтами; интоксикацию ингалянтами, делирий при интоксикации ингалянтами; вызванное приемом ингалянтов психотическое расстройство с бредом; вызванное приемом ингалянтов психотическое расстройство с галлюцинациями; вызванное приемом ингалянтов тревожное расстройство, вызванную приемом галлюциногенов половую дисфункцию, вызванное приемом ингалянтов расстройство без дополнительных уточнений (Ν08) и интоксикацию ингалянтами.

Расстройства, вызванные употреблением опиоидов, включают, но без ограничения, зависимость от опиоидов, злоупотребление опиоидами, интоксикацию опиоидами, делирий при интоксикации опиоидами, вызванное приемом опиоидов психотическое расстройство с бредом, вызванное приемом опиоидов психотическое расстройство с галлюцинациями, вызванное приемом опиоидов тревожное расстройство, вызванное приемом опиоидов расстройство без дополнительных уточнений (Ν08), интоксикацию опиоидами и опиоидную абстиненцию.

Тикозные (тиковые) расстройства включают, но без ограничения, синдром Туретта, хроническое моторное (двигательное) или голосовое двигательное расстройство, тикозное расстройство неуточненное (Ν08), заикание, артистическое расстройство и соматоформное нарушение.

Помимо этого, настоящее изобретение включает терапию по меньшей мере двух аддиктивных заболеваний или расстройств или расстройств импульсного контроля одновременно. Например, настоящее изобретение включает одновременную терапию алкогольных расстройств и регуляцию веса (массы) (см. примеры).

Помимо этого настоящее изобретение включает применение соединений и комбинированной терапии по изобретению в обстоятельствах, когда может применяться принудительное лечение. Например, суд может потребовать от субъекта, чтобы он прошел лечение или принял участие в программе лечения с применением соединений или комбинированной терапии по изобретению как части принудительной терапии, связанной со злоупотреблением алкоголем, пьянством, употреблением наркотиков и т.д. Более конкретно, изобретение включает применение по судебному решению, когда суд требует, чтобы субъект, признанный виновным за вождение в нетрезвом виде, подвергся лечению методами по изобретению в качестве частичного условия залога, испытательного срока, лечения и т.д.

Изобретение также включает применение фармацевтических композиций, содержащих соединения по изобретению, в практике использования методов по изобретению, композиций, содержащих по меньшей мере одно подходящее соединение и фармацевтически приемлемый носитель.

Другие методы, применимые при практическом использовании изобретения, можно найти, например, в опубликованной патентной заявке США Νο. 2006/0173064 (Ырра е! а1.), патенте США Νο. 6323236 (МсЕ1гоу), опубликованной патентной заявке США Νο. 2007/0275970, патентной заявке РСТ Νο. РСТ/И8/2008/052628 (^οйη8οη е! а1.), поданной 31 января 2008 года, и патентной заявке РСТ Νο. РСТ/И8/2007/088100 (ίο1ιι·ΐ5οι·ι апй Тюигшпе), поданной 19 декабря 2007 года.

В одном варианте изобретения композиция по изобретению может содержать одно соединение по изобретению. В другом варианте изобретения композиция по изобретению может содержать более одного соединения по изобретению. В одном варианте изобретения дополнительные лекарства или соединения, применимые для лечения других расстройств, могут составлять часть композиции. В одном варианте изобретения композицию, содержащую только одно соединение по изобретению, можно вводить одновременно с другой композицией, содержащей по меньшей мере одно другое соединение по изобретению. В другом варианте изобретения различные композиции можно вводить в разное время. Если композиция по изобретению содержит только одно соединение по изобретению, нужно также использовать дополнительную композицию, содержащую по меньшей мере одно дополнительное соединение по изобретению.

Фармацевтические композиции, применимые для практического использования изобретения, можно вводить, например, чтобы доставить дозу 1 нг/кг/день-100 мг/кг/день.

Фармацевтические композиции, применимые в методах по изобретению, можно вводить, например, системно в виде пероральных твердых препаратов или в виде глазных препаратов, аэрозолей, наружных (локальных) или других аналогичных препаратов. Помимо соответствующих соединений такие фармацевтические композиции могут содержать фармацевтически приемлемые носители и другие ингредиенты, заведомо усиливающие действие и облегчающие введение лекарства. Другие возможные формы препаратов, такие как наночастицы, липосомы, уплотненные эритроциты и иммунологические системы, также могут применяться для введения соответствующего соединения или его аналога, модификации или производного методами по изобретению.

Соединения, которые идентифицируют любыми методами по данному описанию, можно приготовить и вводить человеку для лечения заболеваний по данному описанию. Рядовой специалист в данной области техники понимает, что эти методы применимы также для других заболеваний, расстройств и состояний.

Термин пролекарство относится к агенту, который превращается в исходное лекарство ш νίνο. Пролекарства часто применяют потому, что в некоторых ситуациях их легче вводить, чем исходное ле

- 36 019200 карство. Они могут быть биодоступными при пероральном применении, тогда как исходное лекарство не является биодоступным в этом случае. Пролекарства могут также иметь повышенную солюбильность в фармацевтических композициях по сравнению с исходным лекарством или могут демонстрировать лучшие вкусовые качества либо из них бывает легче приготовить препарат. Примером, без ограничения, пролекарства является соединение по настоящему изобретению, которое вводят в виде сложного эфира (пролекарства) с целью способствовать переносу через мембрану клетки, где растворимость является вредной, но которое затем, внутри клетки, где растворимость в воде является преимуществом, в процессе обмена веществ (метаболически) гидролизуется до карбоновой кислоты активного соединения. Другим примером пролекарства может служить короткий пептид (полиаминокислота), связанный с кислотной группой, причем пептид метаболизируется, давая активное соединение.

Изобретение охватывает приготовление и применение фармацевтических композиций, содержащих соединение, применимое для лечения заболеваний по данному описанию в качестве активного ингредиента. Такая фармацевтическая композиция может состоять из одного активного ингредиента в виде, пригодном для введения субъекту, или фармацевтическая композиция может содержать активный ингредиент и один или более фармацевтически приемлемых носителей, один или более дополнительных ингредиентов или какую-либо их комбинацию. Активный ингредиент может находиться в фармацевтической композиции в виде физиологически приемлемого сложного эфира или в виде физиологически приемлемой соли, например, в комбинации с физиологически приемлемым катионом или анионом, как хорошо известно в уровне техники.

Препараты фармацевтических композиций по данному описанию можно приготовить любым методом, известным или позднее разработанным в фармакологии. Обычно такие методы приготовления включают стадию контактирования (смешивания) активного ингредиента с носителем или одним или более других дополнительных ингредиентов, а затем, при необходимости или по желанию, формование или упаковку продукта в виде заданного изделия для одно- или многократного применения.

Хотя описание фармацевтических композиций по данному описанию преимущественно относится к фармацевтическим композициям, которые пригодны для отпуска по рецепту людям, специалисту в данной области техники понятно, что такие композиции обычно пригодны для введения животным любого вида. Модификация фармацевтических композиций, пригодных для введения людям, с целью сделать их пригодными для введения различным животным, широко известна, и рядовой ветеринарный фармаколог может разработать и осуществить такую модификацию с помощью обычных экспериментов (если только они потребуются). Субъекты, введение которым фармацевтических композиций по изобретению рассматривается, включают, но без ограничения, человека и других приматов, млекопитающих, включая млекопитающих, имеющих коммерческое значение, таких как крупный рогатый скот, свиньи, лошади, овцы, кошки и собаки, и птиц, включая имеющих коммерческое значение птиц, таких как куры, утки, гуси и индейки.

Один тип введения, охватываемый методами по изобретению, представляет собой парентеральное введение, которое включает, но без ограничения, введение фармацевтической композиции инъекцией, наложение композиции с помощью хирургического разреза, наложение композиции через проникающий через ткань нехирургический надрез и т.п. В частности, рассматривается, что парентеральное введение включает, но без ограничения, подкожную, интраперитонеальную (внутрибрюшинную), внутримышечную и интрастернальную (внутригрудинную) инъекцию и методы почечного диализа.

Фармацевтические композиции, применимые в методах по изобретению, можно приготовить, упаковать или продавать в виде препаратов, пригодных для перорального, ректального, вагинального, парентерального, топического, легочного, интраназального, ингаляционного, трансбуккального, глазного, интратекального или другого пути введения. Другие рассматриваемые препараты включают перспективные наночастицы, липосомные препараты, уплотненные эритроциты, содержащие активный ингредиент, и иммунологические препараты.

Фармацевтическую композицию по изобретению можно приготовить, упаковать и продавать нерасфасованной в виде стандартной дозы или в виде нескольких однократных доз. Термин стандартная (разовая, однократная) доза означает дискретное количество фармацевтической композиции, содержащей заданное количество активного ингредиента. Количество активного ингредиента обычно равно дозе активного ингредиента, которую следует вводить субъекту, или соответствующей доле такой дозы, например половине или трети такой дозы.

Относительные количества активного ингредиента, фармацевтически приемлемого носителя и любых дополнительных ингредиентов в фармацевтической композиции по изобретению меняются в зависимости от природы, габаритов и состояния пролечиваемого субъекта и, помимо этого, в зависимости от пути введения композиции. Например, композиция может содержать 0.1-100% (вес./вес.) активного ингредиента.

Помимо активного ингредиента фармацевтическая композиция по изобретению может содержать один или более дополнительных фармацевтически активных ингредиентов. В частности, рассматриваемые дополнительные агенты включают противорвотные вещества и секвестранты цианидов и цианатов.

Препараты с контролируемым или пролонгированным высвобождением фармацевтической компо

- 37 019200 зиции по изобретению можно приготовить, используя обычную технологию.

Препарат фармацевтической композиции по изобретению, пригодный для перорального введения, можно приготовить, упаковать или продавать в виде отдельной дозы твердого вещества, включая, но без ограничения, таблетку, твердую или мягкую капсулу, крахмальную облатку, пастилку или лепешку, каждая из которых содержит заданное количество активного ингредиента. Другие препараты, пригодные для перорального введения, включают, но без ограничения, препарат в виде порошка или гранул, суспензию в воде или в масле, раствор или эмульсию в воде или масле.

Термин масло означает углеродсодержащую жидкость, которая является менее полярной, чем вода.

Таблетку, содержащую активный ингредиент, можно приготовить, например, прессованием или формованием активного ингредиента, необязательно, с одним или более активных ингредиентов. Прессованные таблетки можно приготовить прессованием на соответствующем устройстве активного ингредиента в виде сыпучего вещества, такого как порошок или гранулы препарата, необязательно, смешанного с одним или более агентов, выбранных из связующего, смазки, эксципиента, поверхностно-активного агента и диспергирующего агента. Формованные таблетки можно формовать на соответствующей установке (агрегате), смеси активного ингредиента, фармацевтически активного носителя и, по меньшей мере, достаточного количества жидкости для увлажнения смеси. Фармацевтически приемлемые эксципиенты, применяемые в производстве таблеток, включают, но без ограничения, инертные разбавители, гранулирующие и дезинтегрирующие агенты, связующие и смазки. Известные диспергирующие агенты включают, но без ограничения, картофельный крахмал и натрий крахмал-гликолят. Известные поверхностноактивные агенты включают, но без ограничения, лаурилсульфат натрия.

Известные разбавители включают, но без ограничения, карбонат кальция, карбонат натрия, лактозу, микрокристаллическую целлюлозу, фосфат кальция, гидрофосфат кальция и фосфат натрия. Известные гранулирующие и дезинтегрирующие агенты включают, но без ограничения, кукурузный крахмал и альгиновую кислоту. Известные связующие включают, но без ограничения, желатин, аравийскую камедь, прежелатинизированный маисовый крахмал, поливинилпирролидон и гидроксипропилметилцеллюлозу. Известные смазки включают, но без ограничения, стеарат магния, стеариновую кислоту, диоксид кремния и тальк.

Таблетки могут быть не покрытыми оболочкой или могут покрываться оболочкой известными методами для того, чтобы замедлить дезинтеграцию (разрушение) в желудочно-кишечном тракте субъекта, тем самым обеспечивается пролонгированное высвобождение и всасывание активного ингредиента. Например, для покрытия таблеток можно использовать такой материал, как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат. Далее, например, таблетки можно покрывать оболочкой, используя методы, описанные в патентах США Νο. 4256108; 4160452 и 4265874, для получения таблеток осмотического действия с контролируемым высвобождением. Помимо этого, таблетки могут содержать подсластитель, корригент (придающий запах и вкус), краситель, консервант или какую-либо их комбинацию, для получения фармацевтически элегантного и привлекательного препарата.

Твердые капсулы, содержащие активный ингредиент, можно получать, используя физиологически расщепляемое соединение, такое как желатин. Такие твердые капсулы содержат активный ингредиент и, помимо этого, могут содержать дополнительные ингредиенты, включая, например, инертный твердый разбавитель, такой как карбонат кальция, фосфат кальция или каолин.

Мягкие желатиновые капсулы, содержащие активный ингредиент, можно получать, используя физиологически расщепляемое соединение, такое как желатин. Такие твердые капсулы содержат активный ингредиент, который может быть смешан с водной или масляной средой, такой как арахисовое масло, жидкий парафин или оливковое масло.

Лактулозу также можно использовать в качестве легко разрушающегося наполнителя, он применяется, когда соединения по изобретению получают в виде капсул.

Жидкие препараты фармацевтических композиций по изобретению, пригодные для перорального введения, можно приготовить, упаковать и продавать либо в виде жидкости, либо в виде сухого продукта, предполагаемого для реконституции (восстановления) водой или другим подходящим носителем перед употреблением.

Жидкие суспензии можно приготовить обычными методами, получая суспензию активного ингредиента в водном или масляном носителе. Водные носители включают, например, воду и изотонический солевой раствор. Масляные носители включают, например, миндальное масло, маслообразные сложные эфиры, этиловый спирт, растительные масла, такие как арахисовое, оливковое, кунжутное или кокосовое масло, фракционированные растительные масла и минеральные масла, такие как жидкий парафин. Суспензии в жидкостях могут далее содержать один или более дополнительных ингредиентов, включая, но без ограничения, суспендирующие агенты, диспергирующие или увлажняющие агенты, эмульгаторы, смягчающие агенты, консерванты, буферы, соли, корригенты, красители и подсластители. Суспензии в масле могут, помимо этого, содержать загуститель. Известные суспендирующие агенты включают, но без ограничения, сироп сорбита, гидрогенизированные пищевые жиры, альгинат натрия, поливинилпирролидон, камедь трагаканта, аравийскую камедь и производные целлюлозы, такие как натрий карбокси

- 38 019200 метилцеллюлоза, метилцеллюлоза и гидроксипропилметилцеллюлоза. Известные диспергирующие или увлажняющие агенты включают, но без ограничения, природные фосфатиды, такие как лецитин, продукты конденсации алкиленоксида с жирной кислотой, с длинноцепным алифатическим спиртом, с неполным сложным эфиром жирной кислоты и гексита или с неполным сложным эфиром жирной кислоты и гекситол ангидридов (11ех11о1 апкубпбек) (например, полиоксиэтиленстеарат, гептадекаэтиленоксицетанол, полиоксиэтилен сорбита моноолеат и полиоксиэтилен сорбитана моноолеат соответственно). Известные эмульгаторы включают, но без ограничения, лецитин и аравийскую камедь. Известные консерванты включают, но без ограничения, метил-, этил- и н-пропил-п-гидроксибензоаты, аскорбиновую кислоту и сорбиновую кислоту. Известные подсластители включают, например, глицерин, пропиленгликоль, сорбит, сахарозу и сахарин. Известные загустители для суспензий в масле включают, например, пчелиный воск, твердый парафин и цетиловый спирт.

В одном аспекте изобретения препарат в виде сиропа или эликсира для введения в каплях может содержать активные ингредиенты вместе с подсластителем, который предпочтительно не содержит калорий и который может дополнительно включать метилпарабен или пропилпарабен в качестве антисептика, корригент или подходящий краситель.

Жидкие растворы активного ингредиента в водных или масляных растворителях можно приготовить практически так же, как суспензии в жидкостях, основное отличие заключается в том, что основной ингредиент находится в растворе, а не суспендирован в растворителе. Жидкие растворы фармацевтической композиции по изобретению могут содержать каждый из компонентов, описанных для суспензий в жидкостях. Понятно, что суспендирующие агенты необязательно способствуют растворению активного ингредиента в растворителе. Водные растворители включают, например, воду и изотонический солевой раствор. Масляные растворители включают, например, миндальное масло, маслообразные сложные эфиры, этиловый спирт, растительные масла, такие как арахисовое, оливковое, кунжутное или кокосовое масло, фракционированные растительные масла и минеральные масла, такие как жидкий парафин.

Порошкообразные и гранулированные формы фармацевтического препарата по изобретению можно приготовить известными методами. Такие препараты можно вводить непосредственно субъекту, применять для приготовления таблеток, капсул или для приготовления водной или масляной суспензии или раствора добавлением к порошкам или гранулам водного или масляного носителя. Каждый из этих препаратов может, помимо этого, содержать один или более диспергирующих или увлажняющих агентов, суспендирующий агент и консервант. В эти препараты можно также включать другие эксципиенты, такие как наполнители и подсластители, корригенты или красители.

Фармацевтическую композицию по изобретению можно также приготовить, упаковать или продавать в виде эмульсии масло-в-воде или вода-в-масле (водомасляной). Масляная фаза может представлять собой растительное масло, такое как оливковое или арахисовое масло, минеральное масло, такое как жидкий парафин, или их комбинацию. Такие композиции могут далее содержать один или более эмульгирующих агентов, включающих природные камеди, такие как аравийская камедь или камедь трагаканта, природные фосфатиды, такие как соевый или лецитиновый фосфатид, сложные эфиры или неполные сложные эфиры, полученные из комбинаций жирных кислот и гекситол ангидридов (Пех11о1 апкубпбек), таких как моноолеат сорбитана. Такие эмульсии могут также содержать дополнительные ингредиенты, включая, например, подсластители или корригенты.

Фармацевтическую композицию по изобретению можно приготовить, упаковать или продавать в виде препарата, пригодного для ректального введения. Такая композиция может быть, например, в виде суппозитория, удерживающей клизмы и раствора для ректального орошения или орошения толстой кишки.

Суппозитории можно приготовить, смешивая активный ингредиент с нераздражающим фармацевтически приемлемым эксципиентом, находящимся в твердом состоянии при комнатной температуре (т.е. около 20°С) и становящимися жидкими при ректальной температуре (т.е. около 37°С у здорового человека). Подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты включают, но без ограничения, масло какао, полиэтиленгликоли и различные глицериды. Помимо этого, суппозитории могут содержать различные ингредиенты, включая, но без ограничения, антиоксиданты и консерванты.

Удерживающие клизмы или растворы для ректального орошения или орошения толстой кишки можно приготовить смешением активного ингредиента с фармацевтически приемлемым жидким носителем. Как хорошо известно в уровне техники, препараты удерживающих клизм можно вводить, применять и упаковывать в устройство для доставки, адаптированное к анатомии прямой кишки субъекта. Помимо этого, клизмы могут содержать различные дополнительные ингредиенты, включая, но без ограничения, антиоксиданты и консерванты.

Фармацевтическую композицию по изобретению можно приготовить, упаковать или продавать в виде препарата, применимого для вагинального введения. Такая композиция может быть, например, в виде суппозитория, пропитанного или покрытого оболочкой вводимого во влагалище материала, такого как тампон, спринцовка, или гель, или крем, или раствор для вагинального орошения.

Методы пропитки или покрытия материала химической композицией известны в уровне техники и включают, но без ограничения, методы отложения химической композиции на поверхности или связыва

- 39 019200 ния ее с поверхностью, методы включения химической композиции в структуру материала в процессе синтеза материала (т.е. такого, как физиологически разрушающийся материал) и методы адсорбции водного или масляного раствора на материале адсорбента, с последующей сушкой или без нее.

Препараты для спринцевания или растворы для вагинального орошения можно приготовить, смешивая активный ингредиент с фармацевтически приемлемым жидким носителем. Как хорошо известно в уровне техники, препараты для спринцевания можно вводить, используя, и упаковывать в устройство для доставки, адаптированное для анатомии влагалища субъекта. Помимо этого, препараты для спринцевания могут содержать различные дополнительные ингредиенты, включая, но без ограничения, антиоксиданты, антибиотики, противогрибковые агенты и консерванты.

Выражение по данному описанию парентеральное введение фармацевтической композиции включает любой путь введения, характеризующийся физическим нарушением целостности ткани субъекта и введением фармацевтической композиции через отверстие в ткани. Таким образом, парентеральное введение включает, но без ограничения, введение фармацевтической композиции инъекцией композиции, наложением (аппликацией) композиции через хирургический разрез, наложением композиции через проникающую через ткань нехирургический надрез и т.п. В частности, рассматривается, что парентеральное введение включает, но без ограничения, подкожную, интраперитонеальную, внутримышечную и внутригрудинную инъекцию и методы почечного диализа.

Препараты фармацевтической композиции, пригодные для парентерального введения, включают активный ингредиент в смеси с фармацевтически приемлемым носителем, таким как стерильная вода или стерильный изотонический физиологический солевой раствор. Такие препараты можно приготовить, упаковать или продавать в форме, пригодной для болюсного введения или для непрерывного введения. Препараты для инъекций можно приготовить, упаковать или продавать в виде стандартной лекарственной формы, такой как ампулы или контейнеры для многократного использования, содержащие консервант. Препараты для парентерального введения включают, но без ограничения, суспензии, растворы, эмульсии в масляных или водных носителях, пасты и имплантируемые препараты с пролонгированным высвобождением или биоразрушающиеся препараты. Помимо этого, такие препараты могут содержать один или более дополнительных ингредиентов, включая, но без ограничения, суспендирующие, стабилизирующие или диспергирующие агенты. В одном варианте препарата для парентерального введения активный ингредиент предоставляется в сухом (т.е. порошкообразном или гранулярном) виде для реконституции (восстановления) подходящим носителем (например, стерильной апирогенной водой) перед парентеральным введением восстановленной композиции.

Фармацевтические композиции можно приготовить, упаковать или продавать в виде стерильных водных или масляных суспензий или растворов для инъекций. Такие суспензии или растворы можно приготовить в соответствии с известным уровнем техники, и они могут содержать, помимо активного ингредиента, дополнительные ингредиенты, такие как диспергирующие агенты, увлажняющие агенты или суспендирующие агенты по данному описанию. Такие стерильные препараты для инъекций можно приготовить, используя нетоксический парентерально приемлемый разбавитель или растворитель, например, такой как вода или 1,3-бутандиол. Другие приемлемые разбавители или растворители включают, но без ограничения, раствор Рингера, изотонический раствор хлорида натрия и нелетучие масла, такие как синтетические моно- или диглицериды. Другие применимые препараты для парентерального введения включают такие препараты, которые содержат активный ингредиент в микрокристаллической форме, в липосомном препарате или в виде компонента биоразрушающихся полимерных систем. Композиции для пролонгированного высвобождения или имплантации могут содержать фармацевтически приемлемые полимерные или гидрофобные материалы, такие как эмульсия, ионообменная смола, слаборастворимый полимер или слаборастворимая соль.

Препараты, пригодные для топического (локального, наружного) применения, включают, но без ограничения, жидкие или полужидкие препараты, такие как линименты, лосьоны, эмульсии масло-в-воде или вода-в-масле, такие как кремы, мази или пасты, и растворы или суспензии. Препараты для топического применения могут содержать, например, около 1-10% (вес./вес.) активного ингредиента, хотя концентрация активного ингредиента может быть настолько высокой, насколько позволяет растворимость активного ингредиента в растворителе. Помимо этого, препараты для топического применения могут содержать один или более дополнительных ингредиентов по данному описанию.

Фармацевтическую композицию по изобретению можно приготовить, упаковать и продавать в виде препарата, пригодного для легочного введения через рот (щечный карман). Такой препарат может содержать твердые частицы, которые включают активный ингредиент и имеют диаметр в примерном диапазоне 0.5-7 нм и предпочтительно около 1-6 нм. Такие композиции обычно бывают в виде сухих порошков для введения с применением прибора, содержащего резервуар для сухого порошка, на который может быть направлена струя газа-носителя для дисперсии порошка, или с применением дозирующего контейнера с самораспыляющимся растворителем/порошком, такого как прибор, содержащий активный ингредиент, растворенный или суспендированный в низкокипящем газе-вытеснителе в герметичном контейнере. Предпочтительно такие порошки содержат частицы, из которых по меньшей мере 98 вес.% имеют диаметр более 0.5 нм и по меньшей мере 95% от числа всех частиц имеют диаметр менее 7 нм.

- 40 019200

Более предпочтительно по меньшей мере 95 вес.% имеют диаметр более 1 нм и по меньшей мере 90% от числа всех частиц имеют диаметр менее 6 нм. Сухие порошкообразные композиции предпочтительно включают твердый разбавитель в виде тонкого порошка, такой как сахар, и обычно предоставляется в виде стандартной (разовой) дозы.

Низкокипящие газы-вытеснители обычно включают жидкие вытеснители, имеющие температуру кипения ниже 65°С при атмосферном давлении. Обычно газ-вытеснитель может составлять около 5099.9% (вес./вес.) композиции, а активный ингредиент - около 0.1-20% (вес./вес.) композиции. Помимо этого, газ-вытеснитель может содержать дополнительные ингредиенты, такие как жидкое неионное или твердое анионное поверхностно-активное вещество или твердый разбавитель (предпочтительно имеющий размер частиц того же порядка, что и частицы, содержащие активный ингредиент).

Фармацевтические композиции по изобретению, приготовленные для доставки в легкие, могут также предоставлять активный ингредиент в виде капелек раствора или суспензии. Такие препараты можно приготовить, упаковать или продавать в виде водных или разбавленных спиртовых растворов или суспензий, необязательно стерильных, содержащих активный ингредиент, и можно удобно вводить используя небулайзер или атомайзер. Помимо этого, такие препараты могут содержать один или более дополнительных ингредиентов, включая, но без ограничения, корригент, такой как сахаринат натрия, летучее масло или буферный агент, поверхностно-активный агент или консервант, такой как метилгидроксибензоат. Капельки (дроплеты), получаемые при таком способе введения, предпочтительно имеют средний диаметр в примерном интервале 0.1-200 нм.

Препараты по данному описанию применимы для доставки в легкие, применимы также для назальной доставки фармацевтической композиции по изобретению.

Другим препаратом, пригодным для интраназального введения, является крупнозернистый порошок, содержащий активный ингредиент и имеющий средний размер частиц около 0.2-500 мкм. Такой препарат вводят при вдыхании, т.е. быстрой ингаляцией порошка через носовые проходы из контейнера, поднесенного к ноздрям.

Препараты, пригодные для назального введения, могут содержать, например, всего около 0.1 вес.% и вплоть до примерно 100 вес.% активного ингредиента и, помимо этого, могут содержать один или более ингредиентов по данному описанию.

Фармацевтическую композицию по изобретению можно приготовить, упаковать или продавать в виде препарата, пригодного для трансбуккального введения. Такие препараты могут быть, например, в виде таблеток или лепешек, приготовленных обычными методами, и могут, например, содержать около 0.1-20 вес.% активного ингредиента, остальное составляет растворимая или расщепляющаяся композиция и, необязательно, один или более дополнительных ингредиентов по данному описанию. Или же препараты, пригодные для трансбуккального введения, могут содержать порошок или аэрозолизированные или атомизированные растворы или суспензии, содержащие активный ингредиент. Такие порошкообразные, аэрозолизированные или атомизированные препараты при диспергировании имеют средний размер капелек в примерном интервале 0.1-200 нм и могут содержать один или более дополнительных ингредиентов по данному описанию.

Фармацевтическую композицию по изобретению можно приготовить, упаковать или продавать в виде препарата, пригодного для глазного применения. Такие препараты могут, например, быть в виде глазных капель, включая, например, 0.1-1.0 вес.% раствор или суспензию активного ингредиента в водном или масляном жидком носителе. Такие капли могут также содержать буферные агенты, соли или один или более других дополнительных ингредиентов по данному описанию. Другие применимые препараты для введения в глаза включают препараты, которые содержат активное соединение в микрокристаллической форме или в липосомном препарате.

Фармацевтическую композицию по изобретению можно приготовить, упаковать или продавать в виде препарата, пригодного для чресслизистого введения. Настоящее изобретение включает чресслизистое введение соединений для содействия переносу или адсорбции соединений через слизистую оболочку. Такой тип введения применим для адсорбции через слизистую полости рта (гингивально, подъязычно (сублингвально), трансбуккально и т.д.), прямой кишки, влагалища, легких, носа и т.д.

В некоторых аспектах изобретения сублингвальное (подъязычное) введение имеет преимущество для активных ингредиентов, которые иногда при пероральном приеме подвергаются заметному пресистемному метаболизму и ферментативному расщеплению в печени, что приводит к быстрой метаболизации и потере терапевтической активности, связанной с активностью печеночных ферментов, которые превращают молекулу в неактивные метаболиты, или их активность падает вследствие этой биоконверсии.

В некоторых случаях сублингвальный способ введения способствует быстрому началу действия вследствие заметной проницаемости и васкуляризации слизистой ротовой полости. Помимо этого, сублингвальное введение может также содействовать введению активных ингредиентов, которые обычно не всасываются через слизистую желудка или слизистую пищеварительного тракта после перорального введения или же которые частично или полностью расщепляются в кислой среде после приема внутрь, например таблетки.

- 41 019200

Методы приготовления сублингвальных таблеток известны в уровне техники, их готовят прямым прессованием смеси порошков, содержащих активный ингредиент и эксципиенты для прессования, такие как разбавители, связующие, дезинтегрирующие агенты и адъюванты. В альтернативном методе приготовления можно предварительно осуществить процесс сухой или влажной грануляции активного ингредиента и эксципиентов для прессования. В одном варианте изобретения активный ингредиент распределяют по всей массе таблетки. В международной патентной заявке \¥О 00/16750 описывается сублингвальная таблетка, которая быстро расщепляется и содержит упорядоченную смесь, в которой активный ингредиент находится в виде микрочастиц, прикрепленных за счет адгезии к поверхности водорастворимых частиц, значительно больших по размеру, составляющих подложку для активных микрочастиц, причем композиция содержит также мукоадгезивный агент. В международной патентной заявке \¥О 00/57858 описывается сублингвальная таблетка, содержащая активный ингредиент, смешанный с шипучей (бурно выделяющей газ) системой, предположительно промотирующей всасывание, а также рНмодификатор.

Соединения по изобретению можно приготовить в виде фармацевтической композиции, пригодной для введения, которая способствует адсорбции через слизистую или усиливает эту адсорбцию. Усилители (энхансеры) адсорбции через слизистую включают, но без ограничения, желчную соль, жирную кислоту, поверхностно-активное вещество или спирт. В конкретных вариантах изобретения энхансер проницаемости может представлять собой холат натрия, додецилсульфат натрия, дезоксихолат натрия, тауродезоксихолат, гликохолат натрия, диметилсульфоксид или этанол. В другом варианте изобретения соединение по изобретению можно приготовить с энхансером, облегчающим проникновения через слизистую, чтобы содействовать доставке соединения. Препарат можно также приготовить с рН, оптимизированным по растворимости, устойчивости лекарства и адсорбции через слизистую, такую как слизистая носа, слизистая полости рта, слизистая влагалища, слизистая дыхательных путей и желудочнокишечного тракта.

Для того чтобы еще повысить доставку фармацевтических агентов по изобретению через слизистую, препараты, содержащие активный агент, могут также содержать гидрофильное низкомолекулярное соединение в качестве основы или эксципиента. Такие гидрофильные низкомолекулярные соединения включают среду для переноса, с помощью которой водорастворимый активный агент, такой как физиологически активный пептид или белок, может диффундировать через основу к поверхности тела, где происходит всасывание активного агента. Гидрофильное низкомолекулярное соединение необязательно адсорбирует влагу из слизистой или окружающей среды и растворяет водорастворимый активный пептид. Молекулярная масса гидрофильного низкомолекулярного соединения обычно не превышает 10000 и предпочтительно не превышает 3000. Примеры гидрофильных низкомолекулярных соединений включают полиолы, такие как олиго-, ди- и моносахариды, такие как сахароза, маннит, лактоза, Ь-арабиноза, Όэритроза, Ό-рибоза, Ό-ксилоза, Ό-галактоза, лактулоза, целлобиоза, гентибиоза, глицерин и полиэтиленгликоль. Другие примеры гидрофильных низкомолекулярных соединений, применимых в изобретении в качестве носителей, включают Ν-метилпирролидон и спирты (например, олиговиниловый спирт, этанол, этиленгликоль, пропиленгликоль и т.д.). Эти гидрофильные низкомолекулярные соединения можно применять индивидуально или в комбинации с другим или с другими активными или неактивными компонентами интраназального препарата.

Если фармацевтический препарат с контролируемым высвобождением по данному изобретению дополнительно содержит гидрофильную основу, для включения имеется большой выбор. Гидрофильные полимеры, такие как полиэтиленгликоль и поливинилпирролидон, сахарные спирты, такие как Ό-сорбит и ксилит, сахариды, такие как сахароза, мальтоза, лактулоза, Ό-фруктоза, декстран и глюкоза, поверхностно-активные вещества, такие как полиоксиэтилен-гидрогенизированное касторовое масло, полиоксиэтилен-полиоксипропиленгликоль и сложные эфиры полиоксиэтиленсорбитана и высших жирных кислот, соли, такие как хлорид натрия и хлорид магния, органические кислоты, такие как лимонная кислота и винная кислота, аминокислоты, такие как глицин, бета-аланин и лизина гидрохлорид, и аминосахариды, такие как меглумин, являются примерами гидрофильной основы.

Предпочтительными являются полиэтиленгликоль, сахароза и поливинилпирролидон, а более предпочтителен полиэтиленгликоль. В настоящем изобретении могут применяться две или более гидрофильных основы.

Настоящее изобретение рассматривает легочное, назальное или пероральное введение с помощью ингалятора. В одном варианте изобретения доставка с помощью ингалятора может являться дозированной.

Ингалятор является устройством (прибором) для самостоятельного введения пациентом по меньшей мере одного соединения по изобретению, представляющим собой спрей-ингалятор (например, назальный, пероральный или легочный спрей-ингалятор), содержащий препарат в виде аэрозольного спрея по меньшей мере одного соединения по изобретению и фармацевтически приемлемый диспергирующий агент. В одном аспекте изобретения прибор дозирует количество препарата аэрозоля, образуя спрей, который содержит дозу по меньшей мере одного соединения по изобретению, эффективную для лечения заболевания или расстройства, охватываемого изобретением. Диспергирующий агент может

- 42 019200 представлять собой поверхностно-активное вещество, такое, но без ограничения, как сложные эфиры полиоксиэтилена и жирных кислот, спирты полиоксиэтилен-жирных кислот и сложные эфиры полиоксиэтиленсорбитана и жирных кислот. Также можно использовать поверхностно-активные вещества на основе фосфолипидов.

В других вариантах изобретения аэрозольный препарат предоставляется в виде порошкообразного аэрозольного препарата, в котором соединение по изобретению находится в виде сухого порошка. Препарат в виде сухого порошка может, помимо этого, содержать наполнитель, такой, но без ограничения, как лактоза, сорбит, сахароза и маннит.

В другом конкретном варианте изобретения аэрозольный препарат представляет собой жидкий аэрозольный препарат, дополнительно содержащий фармацевтически приемлемый разбавитель, такой, но без ограничения, как стерильная вода, физиологический раствор, забуференный физиологический раствор и раствор декстрозы.

В других вариантах изобретения аэрозольный препарат содержит также по меньшей мере одно дополнительное соединение по изобретению в такой концентрации, чтобы дозированное количество аэрозольного препарата, диспергируемого с помощью устройства, содержало дозу дополнительного соединения в дозированном количестве, эффективно ослабляющем симптомы заболевания или состояния по данному описанию при применении его в комбинации, по меньшей мере, с первым или вторым соединением по изобретению.

Так изобретение включает самостоятельное введение (прием) препарата при амбулаторном лечении аддиктивного заболевания или расстройства (заболевания или расстройства, связанного с привыканием), такого как алкогольное заболевание или расстройство. Такое введение может применяться в больнице, в медицинском учреждении или вне больницы или медицинского учреждения не-медицинским работником.

Соединения по изобретению готовят в виде препарата или фармацевтической композиции, применимых для назального введения. В другом варианте изобретения соединения по изобретению можно приготовить с энхансером проникновения через слизистую с целью способствовать доставке лекарства. Препарат можно также приготовить с рН, оптимизированным по растворимости, устойчивости лекарства, всасыванию через слизистую носа и другим соображениям.

Капсулы, блистеры и картриджи для применения в ингаляторе или порошковдувателе (инсуфляторе) можно приготовить таким образом, чтобы они содержали смесь фармацевтических композиций по данному описанию: подходящую порошковую основу, такую как лактоза или крахмал; и модификатор характеристик, такой как Ь-лейцин, маннит или стеарат магния. Лактоза может быть безводной или в виде моногидрата. Другие подходящие эксципиенты включают декстран, глюкозу, мальтозу, сорбит, ксилит, фруктозу, сахарозу и трегалозу. Фармацевтические композиции по данному описанию для введения с помощью ингалятора/интраназального введения могут, помимо этого, содержать подходящий ароматизатор, такой как ментол или левоментол, или подсластители, такие как сахарин или сахаринат натрия.

Для введения с помощью ингаляции соединения для применения методами по изобретению обычно доставляют в виде аэрозоля (спрея) из контейнера или небулайзера под давлением с помощью газавытеснителя, такого как дихлордифторметан, трихлорфторметан, дихлортетрафторэтан, диоксид углерода или другой подходящий газ. Для находящегося под давлением аэрозоля лекарственную дозу можно определять с помощью клапана для доставки дозированного количества. Для применения в ингаляторе или порошковдувателе (инсуфляторе) можно приготовить капсулы и картриджи, например, из желатина, содержащие порошковую смесь лекарств и подходящую основу порошка, такую как лактоза или крахмал.

Выражение по данному описанию дополнительные ингредиенты включает, но без ограничения, один или более следующих эксципиентов: поверхностно-активные агенты; диспергирующие агенты; инертные разбавители; гранулирующие и дезинтегрирующие агенты; связующие; смазки; подсластители; корригенты (запаха и вкуса); красители; консерванты; физиологически расщепляющиеся композиции, такие как желатин; водные носители и растворители; масляные носители и растворители; суспендирующие агенты; диспергирующие или увлажняющие (смачивающие) агенты; эмульгаторы, деэмульгаторы; буферы; соли; наполнители; антиоксиданты; антибиотики; противогрибковые агенты; стабилизаторы и фармацевтически приемлемые полимерные или гидрофобные материалы. Другие дополнительные ингредиенты, которые могут входить в состав фармацевтической композиции по изобретению, известны в уровне техники и описаны, например, в справочнике Сепаго, еб., 1985, Кеш1пд1оп'к РЬагтасеи!1са1 Зс1епсек, Маск РиЬНкЫпд Со., Еак!оп, РЫ, вводимом в данное описание в качестве ссылки.

Обычно примерный интервал доз соединений по изобретению, которые можно вводить животному, предпочтительно человеку, составляет 1.0 мкг-100 г на 1 кг массы тела животного. Точная вводимая доза меняется в зависимости от целого ряда факторов, включая, но без ограничения, виды животного и типы болезненного состояния, которые следует лечить, возраста животного и способа введения. Предпочтительно доза соединения колеблется примерно от 1 мг примерно до 10 г на 1 кг массы тела животного. Более предпочтительно доза соединения колеблется примерно от 10 мг примерно до 1 г на 1 кг массы

- 43 019200 тела животного.

Соединения можно вводить субъекту с частотой несколько раз в день ежедневно или их можно вводить реже, например один раз в день, один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в месяц или даже еще реже, например один раз в несколько месяцев или даже один раз в год или реже. Частота введения дозы совершенно понятна опытному специалисту и зависит от ряда факторов, таких, но без ограничения, как тип и тяжесть пролечиваемого заболевания, вида и возраста животного и т.п.

Изобретение включает также набор, содержащий соединения по изобретению и инструкционный материал, в котором описывается применение соединения. В другом варианте изобретения набор содержит (предпочтительно стерильный) растворитель, пригодный для растворения или суспендирования композиции по изобретению перед введением соединения млекопитающему.

Выражение инструкционный материал по данному описанию включает печатное издание, показание, диаграмму или любой другой способ изображения, которые можно использовать для того, чтобы сообщить о полезности соединений по изобретению в наборе для того, чтобы эффективно уменьшить, ослабить заболевания или расстройства, перечисленные в данном описании. Необязательно, или иначе говоря, в инструкционном материале могут быть описаны один или более методов ослабления заболеваний или расстройств. Инструкционный материал набора по изобретению может быть, например, прикреплен к контейнеру, который содержит соединение по изобретению, или может поставляться вместе с контейнером, который содержит соединения. Или же, инструкционный материал может поставляться отдельно от контейнера в расчете на то, что инструкционный материал и соединение будут использоваться реципиентом совместно.

Релевантные нуклеотидные и аминокислотные последовательности, охватываемые настоящим изобретением, включают, но без ограничения

8ЕЦ ΙΌ NО: 1 - человеческий переносчик серотонина ( 8ЬС6А4), нуклеотидная последовательность (Регистрационный Νο. в ОепВапк ΝΜ_001045- 2775 п.о. мРНК)аса§сса£с§сс8сс8§в1§сс1саа8££с§сдаё§сса£ссс8сс1§ссса§ссс§д£а ссадсс1ссссдсдсадсс1ддсад£1с1сс1дда££саа§ёсдасс(1§с11дссс!с! с11§садаа!аасааддддсиадссаса@дад11§с18§саад!§Ёааа§аадаасааа 1д^1саа(ссс£ас|Ц£1саа(сссйасдд1аоа£ад,с1сооае£(оагссасааа1сс аа§сассса8а8а1сааП§88а(ссП§8са8а188аса(са81д1саШас(аасса 8садда1@дадасдас@ссс11дааНс(са§аа§садс1а1садсд1д!@аада1дда8 аадаКдкаддаааасддадИсШсадааддйдйсссассссаддддасааа^дд адсссдддсаааШссаа^ди^ЛсадсаЁЦссаа^сс^^дсддйада^аса сас£§сас1с1а1сссадсдассассассассс1а£188с1£адс1и;а1саад££§аас

Вё8аеасс(88§§сааёаав0йдай1ссйс1с1сае18аП8ёс1а!8С1ё188асс (8§§саа1§(с188С8Сйсссс1аса1а(8Йасса§аа18§а§888888саПссСсс 1сссс1асасса1са188ссашцд8888аа1ссс8с1сииаса188а8с1с8сас 1888аса81ассасс8ааа(8§а!§сайГсаа1а18§а@8аааа1с18ссс8айЦса аа888ай88на!8сса1с12са1саи§ссййасай8сйсс1ас[асаасасса 1са188сс18§§с8с1а1ас1асс1са1с1сс1ссйсас82асса8с(8ссс18§асса

- 44 019200 §с1дсаа2аас1сс1ддаасас1ддсаас£§сассаайасйс1ссдаддасааса1са ссЦдассйссаЙссас^ссссЦс^аадааШгасасдсдссасЕбссгёсада 1ссасс§§1с1аа8£ддс1сса£ёасс1§е£д£дса(са£с(££садс1££ссс(с(£са 1са£§с1§а1сйсас1дйа£с1ас(1садса£с1ддааад§сд1саа§асс£с1ддса а§£1881£1888(8аса§ссассМсссйа1а1са1ссШс1§1сс1дс1§£1§а£8§ д1§ссассс1ссс(дда8сс1ддадд£81дйс1сйс1асй8ааасссаайд§са2а аас(сс1£§а£асае§£§1§1££а1а£а1§саЕ.сс§ска§а(сйсйс1с1сЩдДс сддцсШддддксс^с^дсййдскадсисаасаадйсаасаасааскдскасс аада^ссс^д^ассацсд^д^аас^сакдасдадсйсдШсдддакЙдЮа {сйсаса^дйсд^йаса^дс^ада^аддайдаада^Цбйдад^дсса аадасдсадц1сссадсс!сс1сйса1сасд1а1дса§аадсда1а8ссааса1дссад с£1ссасшс111§сса1са1спс1йс1да18«аа1сас§с1£8ёсй£8аса(тса сктгса^сй^^дд^даюасддс^с^еа^авйсссасасёХс^д ссаадс§ссдддадс§дйсд1дс!сдссд1дд1са1сасс1дсйс1й£§а(ссс(дд [сассс^асйиддаддддссШс^ез^аадс^с^дадЕа^а^ссасеедес сс@саа1дс1сасА1сдсас1§а1сцаадсад1с^с1§1ц1:си)’дйс1а1^§са1са сгсаёйссдсадддасёгдааддааа^сгсддсйеадсссддд^йс^дадда 1с£дс1ддд1ддсса1садссс1с1дй(с£сс(8Йса1са£ПдсадйПс£да1§а 8ссс2ссасаас1ас2ас£1££ссаа£а£аапа£сспас£ддад£а£са1сйддд£1 ас(§са1১аасс1са!сШсай1:§са!ссссаса!а1а1:а!’сйа1с£дЙ!’а1са 1сас£сса§д§асай£ааададсд1айайаааад1айасссса§ааасассааса§

дсйс£ссасаасо1сс£сс£ссад1£с£да£даддсасдсс1дсс1£сГсссс1ссаад

1даа1§а£й1ссаёс!аа8сс1£а1£а£££аа£8£ссйс1ссаса§£§асаса§£с{§ д£дсссадас£са৫сс£ссаессасйай{сса£о§айсссс£§ааса£айссса 1§§1а£ас1£!§асаса§с1£адс1££сс1айй££ас£1£1£а££а1£1££а1ё£а£2 (8а18аааассассс1а1са1садйа§8а((১й1а8аа{саа21с1д!дааа5£с( сс1д1а1саШсйд;Ла1цагсаг(цд1а£сАа(а(с(ййесйсгааа8еп1с асг§йсафаа1асд(ааас(2с§1ао2а§а§ааса§доа1ес1ак;1:с£с£а£сса1а (ацйс1цай(ау.са1а1а1аа11йа11§с1Едаа1с1ас1а2аассйс1аагсса(. £Г£С(дс1§1£§са1са§£ааацЕаада1а1аадаа2с1аааа1£аааааГа£1:еД£Гсс а£§сааааааааааа

8Е0 ΙΌ N0: 2 - человеческий переносчик серотонина (8ЬС6А4), аминокислотная последовательность (Регистрационный Νο. в ОепВапк ΝΡ001036; 630 остатков)тейр1п5дкд15асед£ейс₄еп8у1₄куур1р£<1к¥е8£Я18П£у5аур8р£а£с1с11г 1151раПй1уае1к₉ес1сйудккуО111ку1ауауШ£псхл{ру1суяп£2даД1р уПп1а1£881р1Гуте1а18цукт8с151«гк1срйк818уа1сйаРу1а5ууп11т а\уа1уу1|35Мц]рху1зскп8\уп(8пс(пуГзс<1п11уЛ]Ь5(зраееГу1г11у1ч1й гзкДцсН ар,18УЯ| 1а1с1 т I ί ίϊνί у Γπί \ук« ук (з^ктуν(βί Гру ί ί 18 νί I ν ге,а (1р§а\Угцу1£у1крп\у^к!1е1§у\У1с1аааяИЫ§р§£еу11а£а8упк{пппсу4<1 а|у1зуупст15ГУ5§£у1£1у1§у1паеттес1У8еуак<1а§рз11Г11уаеа1ашпра8 Й£апШт1111(б051£а£1е8У!(ау1бе£ркуууакиег(у1ауу11сЙ£8|у1 !1£ё§ау\ук11ееуа1§рау|1уа!1еауаУ8УуГу811ц&гс1укет18Йр8\УЙУГ1с уууа1зр1Л1й1сз£1т8рр₉1г1£дупуру\Узй1§ус1§1ззГ1С1р1у1ауг1!11 р£Йкегйк8Йре1р1е1рс£с11г1пау

- 45 019200

8РР) ΙΌ N0: 3 - 8ХР гк25531 прямой праймер - 5'-ТССТСС6СТТТ66С6ССТСТТСС-3' (прямой), 8РР) ΙΌ N0: 4 - 8ХР гк25531 обратный праймер - 5'-Т66666ТТ6СА6666А6АТССТ6-3' (обратный),

8РР) ΙΌ N0: 5 - гк2891483 прямой праймер - 6СА6АА6С6АТА6ССААСАТ6,

8РР) ΙΌ N0: 6 - гк2891483 обратный праймер - САА6СССА6С6Т6АТТААСАТС,

8РР) ΙΌ N0: 7 - гк2891483 зонд - СТТТСТТТ6СС[С/А]ТСАТСТ (представленный как СтттстТТСССКГСАТСТ в перечне последовательностей),

8ЕЦ ΙΌ N0: 8 - первый праймер для амплификации 5’-НТТЬРК 44 п.о. полиморфизма повтора промоторной области - 5'-С6ТТ6СС6СТСТ 6ААТ6С САО-3',

8ЕЦ ΙΌ N0: 9 - второй праймер для амплификации 5'-НТТЬРК 44 п.о. полиморфизма повтора промоторной области - 5'-66АТТСТ66Т6ССАССТА6АС6СС-3',

8РР) ΙΌ N0: 10 - 8ХР сайт полиморфизма 8ЬС6А4 гк1042173 - 6ССАТАТАТТТТСТ6А6ТА6САТАТА[6/Т]ААТТТТАТТ6СТ66ААТСТАСТА6А (представлен как 6ССАТАТАТТТТСТ6А6ТА6САΤАΤАNААΤΤΤΤАΤΤ6СΤ66ААΤСΤАСΤА6А в перечне последовательностей).

Другие неописанные способы и методики, используемые в практике применения изобретения, известны в уровне техники, см., например, международную опубликованную патентную заявку №. РСТ/И8 2008/064232.

Полагают, что рядовой специалист в данной области техники может, используя вышеприведенное описание и нижеприведенные примеры, получать и использовать соединения по настоящему изобретению и применять на практике заявляемые способы. Нижеприведенные демонстрационные примеры, следовательно, конкретно указывают на варианты по настоящему изобретению, и их никоим образом не следует рассматривать как ограничивающие остальное раскрытие.

Примеры.

Пример 1. Корреляция функционального полиморфизма в 3'ИТК (нетранслируемой области) гена переносчика серотонина 8ЬС6А4 и его связь с активностью пьянства.

Определяют, ассоциируется ли аллельный вариант в единичном нуклеотидном полиморфизме (8ИР) с возможным сигналом аденилирования для обычно используемого 3'-сайта полиаденилирования 6265 ΙΤ 8ИР (Национальный Информационный Центр по Биотехнологии ΙΌ # гк1042173) 8БС6А4, гена переносчика серотонина, с различиями в тяжести пьянства среди обратившихся за лечением алкоголиков. Для определения функциональной значимости 62651Т/гк1042173 8ИР мы изучаем, действительно ли аллельный вариант в этом сайте ассоциируется с поддающимся количественному измерению изменениям уровней экспрессии мРНК и экспрессии 5-НТТ белка. Человеческий ген переносчика серотонина (8БС6А4) находится в положении 17с|11.1-с|12 хромосомы 17. 62651Т/гк1042173 представляет собой положение 25,549,137 в экзоне 15. Кроме того, 5-НТТЬРК представляет собой промотор в положении на хромосоме ~25,588,500. Последовательность 5'-фланкирующей области гена соответствует последовательности бепВапк, регистрационный №. Х76753 (см. Нейк е1 а1., 1. №игосйет., 66: 2621, 1996).

Материалы и методы.

Субъекты.

В данном исследовании участвует всего двести семьдесят пять алкогользависимых человек (78.5% мужчин) в возрасте от 18 до 66, из них 198 участвовали в нашем предыдущем исследовании Цойпкоп е1 е1., 2008). Все субъекты считаются алкогользависимыми (подробнее см. ниже) и зарегистрированы как участники фармакотерапевтических испытаний для лечения алкогольной зависимости как в Научном Центре Здоровья Университета Техаса в Сан Антонио, так и в Университете Виргинии. Участников набирают по объявлению в газете и по радио, и от всех участников получают информированное (осознанное) согласие, одобренное наблюдательными советами всех участвующих организаций.

Алкогольную зависимость диагностирует опытный психолог, используя Структурированное клиническое интервью для Диагностического и Статистического руководства по психическим болезням, И1адпокйс апй 81айкйса1 Мапиа1 о£ Меп1а1 И1когйегк, 4‘^ь еййюп (Ό8Μ-Ιν, Атепсап РкусЫайтс Аккоаайоп, 1994), расстройства Ι оси. Все субъекты имеют оценку > 8 в тесте на выявление нарушений, связанных с употреблением алкоголя (АИШТ) (ВаЬог е1 е1., 1992), который предназначен для выявления людей, употребляющих алкоголь и имеющих аналогичные проблемы: алкоголизм определяется как прием > 21 стандартных порций (доз)/в неделю для женщин и > 30 стандартных порций (доз)/в неделю для мужчин в течение 90 дней перед зачислением на испытание. Отсутствие употребления других лекарств подтверждают отрицательной реакцией при токсикологическим скрининге мочи на наркотики, амфетамины или седативные гипнотические вещества при зачислении на испытание. Субъекты, которые соответствуют нижеприведенным критериям, исключаются из исследования: настоящий диагноз психическое расстройство оси Ι, отличное от алкогольной или никотиновой зависимости; заметные симптомы алкогольной абстиненции на основе исправленной клинической оценки абстиненции по алкогольной шкале [8иШуап е1 а1., 1989) оценка > 15 баллов]; клинически значимые физические отклонения на основании врачебного осмотра, электрокардиограммы, анализа крови, биохимии, включая концентрацию сывороточного билирубина, и анализа мочи; беременные или кормящие матери; лечение алкогольной зависимости за < 30

- 46 019200 дней до включения в исследование и санкционированное лишение свободы или потеря работы из-за того, что человек не лечится от алкоголизма.

Количественное определение употребления алкоголя.

Сообщение участников исследования о количестве употребления алкоголя (в стандартных порциях (единицах)) в течение 90 дней до внесения в списки количественно определяют, используя метод ретроспективной хронологической шкалы (ТнпеПпе Го11о\\-Ьаск теШобк, ТЬЕВ). Одну стандартную дозу (порцию) алкоголя определяют как 0.35 л пива, 0.15 л вина или 0.04 л ликера 80-ргооГ. Интенсивность употребления алкоголя оценивают, определяя среднее количество доз на день запоя и среднее число доз в день. Число порций в день запоя определяют как частное от деления общего числа доз на число дней запоя в течение 90 дней; число порций в день определяют как частное от деления общего числа доз на 90 дней.

Экстракция ДНК и генотипирование.

Десять миллилитров крови берут у каждого субъекта на этапе включения (первичное обследование), чтобы получить лейкоциты для определения 5-НТТ-генотипов. ДНК экстрагируют, используя набор Сеп1га Ригедепе® (0!ΛΟΕΝ Шс., ναΕπα;·!, СА). 8ΝΡ (единичные нуклеотидные полиморфизмы) для анализов ассоциации отбирают, используя базу данных Национального Центра Информации по Биотехнологии ЩСВЦ άϋδΝΡ (Шр://^тете.псЬгп1т.шй.доу/8№/), на основе их функционального потенциала и частоты минорного аллеля (МАЕ) > 0.05. Средняя плотность 8ΝΡ составляет ~7 кбаз (т.н.). Подробные сведения о локализации 8ΝΡ, положениях на хромосоме, аллельных вариантах, МАЕ (частоте минорного аллеля) и последовательностях праймера/зонда кнттапхеб представлены в табл. 1. Четыре из пяти 8ΝΡ (гк6354, гк6355, гк28914832 и гк1042173) генотипируют с помощью анализов ТацМап® 8ΝΡ генотипирования (Аррйеб ВюкуДетк, Еок1ег Сйу, СА). Условия полимеразной цепной реакции (ПЦР, РСВ): 50°С в течение 2 мин, 95°С в течение 10 мин, 30 циклов при 95°С в течение 25 с и при 60°С в течение 1 мин. Аллели каждого полиморфизма 8№ определяют на приборе ΛВI РК18М® 7900НТ (Аррйеб ВюкуДетк) и анализируют, используя программу 8ес.|иепсе Эе1ес1юп 8ук1ет (8Ό8).

Образцы ДНК 77 человек, которые не были включены в наше предыдущее исследование, генотипируют на предмет 5'-НТТЬРВ Ь/8-аллелей, как описано ранее (боНпкоп е1 а1., 2008).

Анализы на 8№ гк25531 проводят, как описано \Уепб1апб е1 а1. (2006). В каждом анализе общий объем составляет 20 мкл, условия ПЦР (РСВ): 15 мин при 95°С, 35 циклов при 94°С в течение 30 с, 65.5°С в течение 90 с и 72°С в течение 60 с, за исключением последней стадии 10 мин при 72°С. Затем 10 мкл продукта ПЦР подвергают двойному расщеплению с помощью НраП и ВсЛ (5 и каждой рестриктазы; №\ν Епд1апб Вю1аЬк, !рк^1сН, МА) в 20-мкл реакционной аналитической смеси, содержащей сопЦнп1пд МЕВиГГег 1 и альбумин бычьей сыворотки, при 37°С в течение 5 ч. Наконец, 10 мкл остального продукта ПЦР и 20 мкл раствора рестриктаз для анализа подвергают электрофорезу на 3.5% ийгаРиге™ агарозном геле Цпуйгодеп™, Саг1кЬаб, СА) в течение 1.5-2 ч при 100 В в буфере Тпк/Борат/этилендиаминтетрауксусная кислота и визуализируют окрашиванием этидия бромидом (81дтаА1бпсЬ, 8ΐ Ьошк, МО). Неразрезанный ПЦР-продукт в нанесенных полосах с расщепленными ферментами ПЦР-продуктами детектируют как А аллель 8№ гк25531, а разрезанный продукт в 402 н.о. детектируют как 6 аллель 8№ гк25531.

Анализы ассоциации с интенсивностью употребления алкоголя.

Ассоциации индивидуальных 8№ с интенсивностью употребления алкоголя (т.е. число доз (порций, единиц) на день запоя и число доз в день) анализируют, используя дисперсионный анализстатистический тест в 8А8 версии 9.1 (8А8 !пк11(и(е Шс., Сагу, ΝΟ). Три генетические модели (аддитивная, доминантная и рецессивная) проверяют, используя в качестве ковариантов пол и возраст. Двухточечное неравновесное сцепление в наследовании (Цикаде б1кес.|шКЬгц.нп (ЬЭ)) среди всех 6 полиморфизмов оценивают, используя программу Нар1о\зе\у (Ваггеб е1 а1., 2005). Все ассоциации, найденные значимыми, внося поправку Бонферрони (уровень значимости, деленный на число изученных полиморфизмов) на множественность сравнений.

Клонирование, культура клеток и трансфекция.

Различия в экспрессии аллелей 8№ (гк1042173), которые показали заметную ассоциацию с интенсивностью употребления алкоголя, изучают, используя ш νίΙΐΌ систему. Человеческий 5-НТТ, содержащий 6-аллель гк1042173 в векторе рВ1иексг1р( II К8 (-), любезно подарен РгоГ. Вапбу Ό. В1аке1у (ХапбегЫ11 Ишуегкйу 8с1юо1 оГ Мебюте, №1к11уП1е, ΈΝ). Эта конструкция 5-НТТ кДНК/В1некспр1 содержит кодирующую область, а также как 5'-, так и 3'-нетранслируемые области гена общей протяженностью 2508 н.о. Конструкцию человеческого 5-НТТ расщепляют с помощью НтбШ/ХЬа! и субклонируют в вектор рсДНК3.1(-) Цпуйгодеп™), предварительно расщепленный с помощью НтбШ/ХЬаф как описано 61ап е1 а1. (О1ап е1 а1., 1997). Для получения плазмиды с Т-аллелем полиморфизма гк1042173 проводят мутацию ДНК плазмиды, несущей 6-аллель, с применением бепеТайог™ системы сайт-направленного мутагенеза Цпуйгодеп™). Обе конструкции проверены на ДНК последовательность.

Клетки НеЬа культивируют в полной среде [среда Игла, модифицированная по методу Дульбекко (НуС1опе, Ьодап, ИТ), 10% 6ШС0® фетальная бычья сыворотка Цпуйгодеп™), 100 Ед./мл пенициллина

- 47 019200 и 100 мкг/мл стрептомицина (МсШаЮсЬ. 1пс., Мапаккак, УА)] в 6-луночных планшетах и выдерживают в увлажненном термостате при 37°С и 5% СО₂. После того как клетки достигнут примерно 80% монослоя, их трансфецируют с помощью одного из двух аллелей (4 мкг плазмиды на лунку) в 6-луночных культуральных планшетах, используя ЫроГсс1ат1псТМ 2000 (1пуйгодеп™) согласно указаниям производителя. РНК и белки экстрагируют из НеЬа клеток через 24 ч после трансфекции.

Выделение, обратная транскрипция РНК и количественная полимеразная цепная реакция (с.|КТРСК).

Тотальную РНК экстрагируют из НеЬа клеток с помощью реагента ТК120Ь® (1пуйгодеп™). Возможные примеси ДНК удаляют, обрабатывая образцы РНК не содержащей РНК-азы ДНК-азой I при 37°С в течение 30 мин. Каждый образец РНК подвергают обратной транскрипции ш νίΙΐΌ, используя 8ирегкспр!® II КТ (1пуйгодеп™), получают кДНК. Эти образцы кДНК транскрибируют с помощью ТацМап® Сепе Ехргеккюп Аккаук (Аррйеб ВюкуДетк), специфических к 5-НТТ мРНК, и полученную 5НТТ мРНК количественно определяют с помощью АВ1 РК18М® 7900НТ системы обнаружения последовательности. Наборы ТацМап® праймер/зонд для глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (С3РЭН) используют в качестве внутреннего контроля для нормализации экспрессии 5-НТТ. Для каждого цКТ-РСК эксперимента используют четыре образца с С-аллелем, четыре образца с Т-аллелем и четыре контрольных образца только с вектором рсОНА3.1 (-) в клеточных культурах после трансфекций, проводимых в различных дни.

Вестерн-блоттинг.

Радиоиммунопреципитационный аналитический буфер |Тпк-НС1 (рН 7.4), 1% №-40, 150 мМ №С1, 0.25% №-дезоксихолат и 1 мМ ЕЭТА| добавляют к НеЬа клеткам после отмывания клеток в охлажденном льдом фосфатно-солевом буферном растворе. Концентрацию белка в клеточных лизатах определяют, используя Вю-Каб анализ (Вю-Каб ЬаЬогаЮпек, Негси1ек, СА). Пятнадцать микрограмм образца наносят на 10% додецилсульфат натрия-полиакриламидный гель (30% акриламид) в буфере Тпк-глицин, содержащем додецилсульфат натрия. Отделенные белки затем с помощью электрофореза переносят на нитроцеллюлозные мембраны (Регк1пЕ1тег, \Уа1111ат, МА) в течение ночи при силе тока 25 мА. Мембраны блокируют в течение 1 ч при комнатной температуре с помощью 2% обезжиренного сухого молока, разведенного в Тпк-забуференном солевом растворе с Т\тееп® 20 (ТВ8Т) буфером, и отмывают три раза по 10 мин каждый в ТВ8Т буфере; затем их инкубируют в течение ночи с первичным антителом (1:200) при 4°С [кроличий поликлональный иммуноглобулин С (1дС), соответствующий С-концу натрийзависимого 5-НТТ человека (200 мкг/мл исходный раствор) (8айа Сгих Вю1есйпо1оду, 1пс., 8ап1а Сгих, СА)]. Затем мембраны отмывают три раза по 10 мин каждый в ТВ8Т буфере и инкубируют со вторичным антителом (1: 5000) [антитело козы против кроличьего 1дС, меченное пероксидазой хрена (Регк1пЕ1тег)] в течение 1.5 ч при комнатной температуре. Гибридизованные мембраны отмывают с помощью ТВ8Т буфера четыре раза по 10 мин каждый и иммунореактивность белков детектируют, используя реагент \Уек1егп ЫдЫшпд® СйетПиттексепсе Кеадей Р1ик (Регк1пЕ1тег) и экспозицию с рентгеновской пленкой. В качестве внутреннего контроля берут белок тубулин для контроля за отклонениями при нанесении белков на каждой дорожке. Моноклональное антитело (мышиное моноклональное антитело к αтубулину) берут в качестве первичного антитела (1:2000), а антитело против мышиного 1дС используют в качестве вторичного антитела в вестерн-блоттинге для тубулина.

Денситометрический и статистический анализ.

Пленки после вестерн-блоттинга сканируют на сканере ИМАХ (ТесйуШе, 1пс., ЭаНак, ТХ), используя программу АбоЬе РйоЮкйор (ν. 6.0; АбоЬе 8ук1етк 1пс., 8ап 1оке, СА), и оптические плотности С- и Таллелей и тубулина определяют, используя программу N14 1таде (ν. 1.61). Оптические плотности полос С- и Т-аллелей и тубулина количественно определяют денситометрией. Величины фоновой (область вокруг каждой полосы) оптической плотности количественно определяют таким же образом, как и для полос белков, и эти значения вычитают из определенных величин оптической плотности для полос белка. Соотношение величин оптической плотности С- и Т-аллелей к величине оптической плотности тубулина в соответствующих образцах рассчитывают, чтобы нормализовать экспрессию С- и Т-аллелей 5-НТТ. Для анализа результатов для белков используют ΐ-критерий Стьюдента, чтобы определить значение различия между экспрессией С- и Т-аллелей.

Результаты.

Генотипирование и анализ ЬЭ (йпкаде ШкециШЬг1ит, неравновесное сцепление в наследовании).

В данном исследовании генотипируют образцы ДНК 275 алкогользависимых субъектов. Из них 165 человек являются представителями белой европеоидной расы (43 женщины и 122 мужчины) и 110 являются латиноамериканцами (16 женщин и 94 мужчины). Генотипическое распределение всех 5 8ИР и 5НТТЬРК Ь/8-аллелей, подтвержденное подчиняется уравнению Харди-Вейнберга (табл. 1). Далее, ЕО анализы с применением программы Нар1о\'1е\у не выявило блоков гаплотипов среди 5 8ИР и 5'-НТТЬРК Ь/8-полиморфизма, согласно критерию СаЬпе1 е1 а1. (2002), в популяциях европейцев, латиноамериканцев или в объединенных популяциях соответственно (фиг. 1).

- 48 019200

Ассоциации с определением количества выпитого алкоголя в самоотчетах.

Для исключения возможных колебаний в интенсивности употребления алкоголя, вызванных этническими различиями, этнические подгруппы субъектов анализируют отдельно на все изучаемые в данном изобретении полиморфизмы. Среди полиморфизмов, анализируемых индивидуально с применением программы БАБ (версия 9.1) на ассоциации с интенсивностью употребления алкоголя, только в случае 8ΝΓ Г81042173 в 3' ИТК БЬС6А4 наблюдается заметная ассоциация с интенсивностью употребления алкоголя. В табл. 2 показаны демографические показатели и показатели употребления алкоголя в группе, анализируемой в исследованиях на гь1042173 ассоциации. Никакой заметной ассоциации других генетических полиморфизмов с интенсивностью употребления алкоголя европейцами, латиноамериканцами или объединенными популяциями не обнаружено (данные не приводятся).

Среди представителей европейской белой расы среднее число доз (порций, единиц) на день запоя значительно различается среди ТТ-, ТС- и СС-генотипов (Р=5.625; р=0.004). При использовании апостериорного теста множественных сравнений (критерия Тьюки) получают статистически значимую разницу между ТС-гетерозиготами и ТТ-гомозиготами (б=4.721; р=0.002); однако разница между ТСгетерозиготами и СС-гомозиготами не является статистически значимой (б=2.175; р=0.20). Когда ТТ и ТС объединяют и сравнивают с СС, используя ΐ-критерий Стьюдента, средние значения не сильно различаются (1=0.32; р=0.75). Совокупные средние ТС и СС (фиг. 2А) значительно ниже, чем среднее для ТТ (1=2.97; р=0.003). Это говорит о доминантном эффекте С-аллеля по сравнению с Т-аллелем. Разница между средними значениями доз алкоголя на день запоя между С-носителями и ТТ-генотипической группой составляет 2.59+0.87 (95% С1 - 0.879 к 4.297).

Было показано, что эстроген модулирует синтез, высвобождение и метаболизм 5-НТ (Ве1йеа е1 а1., 2002; Бгаск1е\\'1сх е1 а1., 2000; Р1уас е1 а1., 2004). Поэтому для изучения влияния пола на эти ассоциации мы повторили анализ только на мужчинах. У мужчин европеоидной расы средняя разница в стандартном числе доз (порций, единиц) на день запоя между С-носителями и ТТ-генотипической группой составляет 2.89+1.07 (95% С1-0.771 к 5.009), что аналогично средней разнице совместно у мужчин и женщин европеоидной расы. Следовательно, мы не обнаружили заметного влияния пола на ассоциации между Г81042173 генотипами и числом доз алкоголя на день запоя.

Однако среди латиноамериканцев мы не обнаружили заметного влияния г>1042173 генотипов на интенсивность употребления алкоголя, выражающуюся в числе доз алкоголя на день запоя (Р=0.935; р=0.397), так и числе доз в день (Р=0.299; р=0.74).

Учитывая, что 5'-НТТЬРК Ь/Б-полиморфизм участвует как функциональный во многих описанных исследованиях, мы изучали возможное интерактивное действие 5'-НТТЬРК Ь/Б и Ш1042173 аллелей на интенсивность употребления алкоголя, используя недавно разработанный алгоритм для обнаружения ген-генного взаимодействия, названный методом депегаК/еб шнЫГасЮг бшепкюпаШу гебисйоп (СМОК) (Бои е1 а1. 2007). Наши анализы СМОК не выявили никакого заметного взаимодействия между этими двумя функциональными Б№ (Р=0.623).

Экспрессия 5-НТТ мРНК в клетках, трансфецированных плазмидой, несущей либо Т-, либо Саллели.

Для того чтобы изучить, приводят ли Т- и С-аллели г>1042173 к различным уровням экспрессии 5НТТ, мы трансфецируем плазмиды, несущие Т- и С-аллели Ш1042173 в клетки НеЬа и количественно определяем уровни мРНК методом цКТ-РСК (количественная ПЦР в реальном времени). Результаты анализируют на аллельные различия методом ДДС1, описанным \¥шег е1 а1. (1999). На фиг. 3А показаны средние уровни экспрессии мРНК 5-НТТ для Т- и С-аллелей из трех независимых экспериментов по трансфекции. С-аллель дает значительно более высокий уровень экспрессии мРНК по сравнению с Таллелем. В трех независимых экспериментах уровень экспрессии мРНК 5-НТТ в клетках НеЬа, трансфецированных при использовании С-аллеля, всегда >50% выше уровня экспрессии мРНК 5-НТТ в клетках НеЬа, трансфецированных при использовании Т-аллеля, этот эффект является статистически значимым (р<0.0001).

Экспрессия 5-НТТ белка при использовании Т- и С-аллелей г>1042173 Б№.

Чтобы определить, можно ли аллель-обусловленное различие РНК транслировать в белок, мы измеряем аллель-специфические различия уровней 5-НТТ белка между двумя аллелями. После нормализации по тубулину на разницу в нагрузке (нанесении) мы нашли, что уровень белка 5-НТТ в случае С-аллеля (0.137±0.006) значительно выше, чем в случае Т-аллеля (0.104±0.002) (1=5.53; р=0.005; см. фиг. 3В). Эти результаты воспроизводятся при изучении методом вестерн-блоттинга нескольких независимых репликаций. А именно экспрессия как мРНК, так и белков 5-НТТ аналогична - С-аллель ассоциируется с более высокими уровнями экспрессии мРНК и белков, чем Т-аллель.

Обсуждение.

Результаты являются доказательством того, что Ш1042173, Б№ в 3' ИТК гена БЬС6А4 ассоциируется с интенсивностью употребления алкоголя среди представителей европеоидной расы, страдающих алкогольной зависимостью. Методом сайт-направленного мутагенеза показано, что г>1042173 представляет собой функциональный полиморфизм, который обеспечивает разницу уровней экспрессии 5-НТТ в куль

- 49 019200 турах клеток НеЬа, причем С-аллель ассоциируется с более высокими уровнями экспрессии мРНК и белка 5-НТТ, чем Т-аллель. Из множества методов, применяемых для того, чтобы определить, является ли полиморфизм функциональным, прямое сравнение уровней экспрессии между двумя аллелями с помощью 1п νίΐΓΟ системы экспрессии, используемое в данном исследовании, представляет собой один из наиболее подходящих, удобных молекулярных методов в области техники, к которой относится изобретение.

У лиц, страдающих алкогольной зависимостью, являющихся носителями С-аллеля Г51042173, наблюдается меньшая интенсивность употребления алкоголя по сравнению с теми, кто является гомозиготным по Т-аллелю. Важно отметить, что средняя интенсивность употребления алкоголя для обеих этих аллельных групп превышает порог алкоголизма (а именно >5 и >4 стандартных дозы/день для мужчин и женщин соответственно) и все они являются зависимыми от алкоголя. В момент включения в исследование между субъектами из обеих аллельных групп отсутствует статистически значимая разница в среднем хронологическом возрасте и в продолжительности алкогольной зависимости. Поэтому логично предположить, что алкогользависимые индивидуумы с ТТ-генотипом могли бы составлять подтип людей, более интенсивно употребляющих алкоголь среди сильно пьющих алкоголиков европейского происхождения.

Это первое исследование функции Г51042173 8ΝΓ в популяции лиц с алкогольной зависимостью. Г51042173 полиморфизм расположен не только в возможном сайте полиаденилирования в 3' ИТК гена 5НТТ, но также близ возможного сайта связывания микроРНК т1-РНК-135 в соответствии с прогнозированием с помощью биоинформатики, сделанным с применением программы РюТаг (Сйеп е1 а1., 2006). Была высказана гипотеза, что вариант по этому местоположению может изменять уровни экспрессии за счет влияния на устойчивость мРНК (ВайегкЬу е1 а1., 1999; Веаийотд е1 а1., 2000; Сйеп е1 а1., 2006). Наши результаты дополнительно подтверждаются двумя последними сообщениями. В первой работе, опубликованной Vа11епάе^ е1 а1. (2008), найдено, что функциональный гаплотип, содержащий Т-аллель полиморфизма Г51042173, ассоциируется с повышенной экспрессией мРНК в клетках НЕК293 по сравнению с гаплотипом, состоящим из С-аллеля. В другой работе, опубликованной Ыт е1 а1. (2006), показано, что Саллель имеет повышенный дисбаланс аллельной экспрессии (ΑΕΙ) в лимфобластных клетках, трансформированных вирусом Эпштейн-Барра, тогда как ткань варолиева моста человека показывает пониженный ΑΕΙ для С-аллеля. Хотя уровни экспрессии, ассоциированные с каждым аллелем 8ΝΓ Г51042173, не согласуются с данными в этих исследованиях (по-видимому, вследствие различных репортерных генов и/или линий клеток), все они показывают, что Г51042173 является функциональным полиморфизмом.

Тот результат, что между Г51042173 генотипом и интенсивностью употребления алкоголя у латиноамериканцев отсутствует ассоциация, который (результат) отличается от наличия такой ассоциации у европейцев, тогда как аллельная частота для Т- и С-аллелей у европейцев и латиноамериканцев отличается незначительно, говорит о возможности различной регуляции экспрессии генов этнической группой. Из-за относительно малого размера выборки это предположение следует рассматривать как предварительное и требующее подтверждения более масштабными исследованиями.

Данные показывают, что ассоциация между интенсивностью употребления алкоголя и генотипом остается такой же значительной, даже если мы изменяем период употребления алкоголя перед включением в исследование в диапазоне от 14 до 90 дней (данные не показаны). Стабильность этих результатов подтверждает наши данные.

Результаты наводят на мысль о том, что, возможно, две различные подгруппы обратившихся за лечением алкоголиков с аллельными различиями в 3' ИТВ 8ΝΓ Г51042173 могут отличаться по интенсивности употребления алкоголя, эффекту, который может ассоциироваться с соответствующими (базовыми) различиями в экспрессии 5-НТТ.

- 50 019200

Таблица 1

Биологическая информация о 5 8ΝΡ, изучаемых в данном исследовании

	р- значения
МАР	для отклонения от ΗΜΊ.·
ΝΟΒ1 465ΝΡ10	Физическое положение	Положение хромосоме	Аллели	СЕи*		Латиноамериканцы	пейиы	Латнно· каниы	Последовательности праймеров н зонда/контекстная последовательность Ю ΑΒΙ праймеров и зондов
5- НТТЪК	Промотор	-25.588,500	1 (ДЛИННЫЙ) 5 (короткий)		0451	0 430	0814	0 624	Прямой ТССТ ССССТТГОССО сстсттсс Обратный ТОООООТТОСАООСС АОАТССТО
Г52553 1	Промотор	25.588,472	А/О	0 100	0 065	0 079	0 999	1000	Прямой тсст ссостттассо ССТСТТСС Обратный ТОООООТТОСАОООО АОАТССТО Два аллеля определяют, используя рестрнктазы ИРАН и Ьсс!
«6354	Экзон 2 (5 ΙΙΤΚ)	25,574,024	ТАЗ	0 295	0202	0 158	0319	1 000	С_1841707_10
«6355	Экзон 3	25.572,936	с/о	0/025 (А1а/С1у)	0 022	0 026	1 000	1000	С_11414113_20
«28914832	Экзон 10	25,562,500	А/С	0 008 (Ьеч/Не)	0 003	0 009	1 000	1 000	(Собственное ΤβςΜβηΙΚ) 5ΝΡ генотипирование Прямой ССАОААССОАТАСССААСАТО Обратный СААОСССАОСОТОАТТААСАТС Зонд СТТТСТТТОСС1С/А1ТСАТСТ
«1042173	Экзон 15(3' НТК)	25,549,137	О/Т	0433	0419	0 455	0 138	1 000	С_7473190_10

МАР - минорная аллельная частота,

11\УЕ - уравнение Харди-Вейнберга,

АВ1 - АррНек Вю8у8)еш8 (Ро8)ег С1)у, СА), ^а образец представителя европеоидной расы из проекта НарМар, ^Ь данные настоящего исследования.

Т аблица 2

Демографические показатели и показатели употребления алкоголя в группе, анализируемой на Г81042173

	Европейцы	Латиноамериканцы
ТТ	ТС	СС	Р величина	ТТ	ТС	СС	Р
Число	47	77	41	-	26	56	28	-
субъектов Пол (%	8297	64 93	80 49		88 46	85 71	82 14
мужчин) Возраст (годы)	41 6± 1 66	4236± 1 23	40 98 ± 1 52	0 62	37 08 ±2 01	40 05 ± 1 22	38 82 * 1 76	0 33
Возраст начала	29 74 ± | 72	3061 ± 1 25	28 37 ± 1 87	0 69	26 44 ± 1 67	26 82 ± 1 23	26 36± 1 87	091
проблем с алкоголем Исходное	II 17 ±008	8 05 ± 0 47	9 58 ± 0 67	0.00«	9 99 ±0 71	10 66 ±0 67	9 76 ± 0 58	0 65
число доз на день залоя Исходное	8 99 ± 0 96	6 48 ± 0 44	7 72 ±0 58	0ю02	8 23 *0 75	7 52±О 59	7 92 ±0 55	0 74
число доз в день Годы	11 96 * 1 32	11 75 ± 1 04	12 6* 14	0 56	10 63 ± Е 2	13 23 ± 1 2	12 64 ±1 51	0 35

употребления алкоголя

Даны средние значения ± 8ЕМ

Значительные р-величины после поправки на множественность тестирования даны жирным шрифтом. Годы употребления алкоголя рассчитывают, вычитая возраст, в котором субъект начал испытывать симптомы алкогольной зависимости, из их возраста включения в исследование. Корректированная р-величина при уровне значимости 0.05 составляет 0.10.

Библиография для примера 1.

^а8Ыпд)оп, О.С. Атепсап РзусЫаШс А88ос1а)юп (1994) В1адпо8)1с апк 8)а)18)1са1 тапиа1 о£ теп)а1 к18огкег8, 4)1 ек. Атепсап Р8усЫа)лс А88ос1акоп.

ВаЬог Т.Р., ке 1а Риеп)е 1.В., 8аипкег8 1., Сгап) М. (1992) АиО1Т: ТЬе а1соЬо1 и8е к18огкег8 1кеп)11!сакоп )е8), Шог1к Ьеа1)Ь отдат/акоп, Сепеуа, 8\\йхег1апк.

Ваггек е) а1., Вют£огтакс8, 2005, 21: 263-265.

ВакегаЬу е) а1., 1. №игосЬет, 1999, 72: 1384-1388.

Веаикотд е) а1., (2000), Сепоте Ве8, 10: 1001-1010.

Ве)Ьеа е) а1. (2002), Ггоп) №игоепкосппо1, 23: 41-100.

Вгак1еу е) а1. (1997), 1. №игосЬет, 69: 1356-1367.

С’агдш1о Т. (2007) Ат 1. Неа1)Ь 8у8) РЬагт, 64 (5 8ирр1 3): 85-11.

СЬеп е) а1. (2006) Нит Сепе), 120: 1-21.

СЬеп е) а1. (2006) №(иге Сепекс8, 38: 1452-1456.

Эипкоп е) а1. (2004) А1соЬо1 С1т Ехр Ве8, 28(7): 1065-73.

Реши е) а1., (2005), Ат 1. Мек Сепе) В №игор8усЫа)г Сепе), 133В(1):79-84.

Ргаск|е\с1с/ е) а1., (2000), Апп РЬагтасо)Ьег, 34: 80-88.

Са8)£пепк е) а1., (2007), 1. 8иЬ8) АЬи8е Тгеа), 33(1): 71-80.

Со1ктап е) а1. (2005) №(иге Веу1е^8/Сепекс8, 6:521-532.

6Ϊ11 К., Ат1) Ζ. (1989) Весеп) 1)е\ А1соЬо1, 7: 225-48.

Нек8 е) а1. (1996) 1. №игосЬет, 66: 2621-2624.

Ни е) а1. (2005) А1соЬо1 С1т Ехр Ве8, 29(1): 8-16.

Ни е) а1. (2006) Ат 1. Нит Сепе), 78(5): 815-26.

1оЬп8оп е) а1. (2004) А1соЬо1 С1т Ехр Ве8, 28(2): 295-301.

1ауог8 е) а1. (2005) Ргод №игор8усЬорЬагтасо1 Вю1 Р8усЫаку, 29(1): 7-13.

1оЬп8оп е) а1. (2008) Сап 8его)опт 1гап8рог1ег депо1уре ргекю) 8его)опегдю £ипскоп, сЬгошс11у, апк 8е

- 51 019200 уегйу οΓ йппкшд? Ргад №ιιΐΌρ5\Ό1ιορ1ι;·ιπη;·κο1 Βίο1 РзусЫайу, 32(1): 209-16.

Κ\\όοι·ι Υ.8., Бее Н.К., Бее С.Т., Бее К.и., Рае С.и. (2005) Α88οс^а!^οη οΓ !йе зегоЮшп !^аπ8ρο^ίе^ депе ρο1\τηοη31ιί5ΐη \νί11ι ^геал та1е ηΕο1ιο1ία. .^игшй οΓ РкусЫайтс Кезеагсй, 39:371-376.

БеМащиапй е! а1. (1994) Βίο1 РкусЫайу, 36: 326-337.

Б1т е! а1. (2006) ЛИеЬс ехргезкюп οΓ зегоЮпт ΡΉ^οΡεί (8ЕКТ) тΚNΑ т йитап ροιίδ: 1аск οΓ ^γιό1а!юп \νί11ι !йе ρο1νιηοΓρ1ιί5ΐη 8ЕКТБРК Μο1 РкусЫаРу, 11(7): 649-662.

Б1!11е е! а1. (1998) Αт 1. РкусЫаРу, 155: 207-213.

Εοπ е! а1. (2007) Αт 1. Нит Оепе!, 80(6): 1125-1137.

Маке1а Р., МизЮпепН. (2007) ΑΚοΡο1 Α1οοΚο1, 42(6): 610-7. Μупе!!-^οйπ8οп е! а1. (2000) Αт 1. Мей Оепе!, 96(6): 845-9.

Охак1 е! а1. (2003) Μο1 РзусЫаРу, 8(11): 933-6.

Ркас е! а1. (2004) Б1£е 8а, 76: 521-531.

Ргазай е! а1. (2005) Нитап зегоЮпш ^^ροΠΌ!· хапапр й1§р1ау а1!егей зепкйтуйу !ο рго!ет ките О апй р38 т^де^ас^а^ рго!еш кшазе, РNΑ8, 102(32): 11545-11550.

ф1ап е! а1. (1997) Рго!ет кшазе С асйха1юп геди1а!е§ йитап зегоЮшп ι^аπ5ρο^ιе^5 ш НЕК-293 се11з νίη айегей се11 зигГасе ехргеккюп, 1. №иго8а, 17: 45-57.

ΡηιηηιηοοΠίιν е! а1. (1993) Αпί^йеρ^е88ап!- апй сοса^пе-8еп8^!^νе йитап зегоЮшп Шц·!^^!': тο1еси1а^ скшпд, ехрге^юп, апй №ΐΌΐηο5οιηη1 ^сай/а^п, Ргас №111 Αсай 8α υ8Α, 90: 2542-2546.

8и11гуап е! а1. (1989) Βγ 1. Αйй^с!, 84: 1353-1357.

Τа1νепйе^тο е! а1. (1980) 1. Βίο1 Сйет, 255: 8606-8611.

Уайепйег е! а1. (2008) Рипс!юпа1 νа^^а!^οп т !йе 3' ип!гап81а!ей гедюп οΓ !йе зегоЮшп ш йитап апй гйезик тасацие, Сепез, Βγιητ Βейаν., 2008 Αι.^, 7(6): 690-7.

\Уепй1апй е! а1. (2006) 8^ти1!аπеοи8 депοίуρ^пд οΓ Γοιπ Гипс!юпа1 Юс1 οΓ йитап 8^С6Λ4. \νί11ι а геарргаща1 οΓ 5-НТТБРК апй гз25531, Μο1 Рзусй., 11: 224-226.

\Утег е! а1. (1999) Αпа1 Β^οсйет, 270: 41-49.

^газе е! а1. (2006) Содп ΑΠοα Βейаν №иго8а, 6: 53-61.

Пример 2. Анамнез употребления алкоголя с расстройствами в юности, вызванными употреблением алкоголя: связь экспрессии переносчика серотонина в тромбоцитах с генотипами переносчика серотонина.

Было высказано предположение, что функциональный контроль серотониновой системы регулируется различиями в экспрессии 8ЕКТ (5-НТТ) [15]. Ген, отвечающий за кодирование экспрессии 8ЕКТ, имеет функциональный полиморфизм в 5'-регуляторной промоторной области [16, 17]. Полиморфизм содержит мутацию инсерция/делеция с длинным (Б) вариантом, имеющим 44 пары оснований, которые отсутствуют в коротком (8) варианте. У нормальных контрольных индивидуумов ББ-генотипа, по сравнению с 8-носителями (т.е. 88- и 8Б-генотипами), наблюдается повышенный захват 5-НТ тромбоцитами [18], лимфобластными клетками [19] и большее число (например, отражающее более высокую экспрессию или менее интенсивный метаболизм) 8ЕКТ в ядрах шва в мозге человека [20]. Если принять, что у индивидуумов с ББ-генотипом более высокие скорости экспрессии 8ЕКТ, то можно предположить, что у них больше захват 5-НТ, ниже уровни 5-НТ в синапсе и, следовательно, пониженная 5НТ нейротрансмиссия в синапсе ш νίνο и ш νίίτο [16, 19].

Различная экспрессия переносчика серотонина, в сочетании с постоянным употреблением алкоголя, может играть важную роль в этиологии и патогенезе алкоголизма [15, 21], особенно в случае раннего алкоголизма. Например, подростки с ББ-генотипом могут иметь специфическую восприимчивость, которая повышает риск развития алкоголизма [1, 22]. Наследственный риск (риск из-за семейного неблагополучия) и исследования популяций подтверждают это предположение. В выборке мужчин с повышенным риском алкогольной зависимости среди тех, у кого появилась алкогольная зависимость, превалирует ББгенотип [23]. Етго^ с сотрудниками [24] показали, что захват серотонина (5-НТ) тромбоцитами у зависимых от алкоголя родителей и детей выше по сравнению с контрольными индивидуумами соответствующего возраста. Каизсй е! а1. [25] показали, что у взрослых мужчин, у которых отцы являются алкогользависимыми, среднее значение Утах захвата 5-НТ тромбоцитами выше по сравнению с ΡΉконтрольными. В выборке японцев у алкоголиков с Б-аллелем (например, с ББ- и Б8-генотипами) наблюдается значительно более раннее начало алкогольной зависимости по сравнению с 88-генотипом [26]. В выборке корейских мужчин частота Б-аллеля значительно выше у алкогользависимых индивидуумов по сравнению с контрольными [27]. Однако у европейцев и мексикано-американцев 88-генотип, не ББ-генотип, был ассоциирован с антисоциального типа алкоголизмом [28, 29], так что ясно, что генетический риск не просто единственный аллельный вариант, повышающий риск алкогольной зависимости. Наша группа ранее сообщала, захват 5-НТ тромбоцитами более высок среди ЕОА мужчин по сравнению с Ε0Α мужчинами и здоровыми контрольными мужчинами [30]. Хотя в выборках взрослых здоровых индивидуумов захват 5-НТ тромбоцитами выше среди Б-носителей по сравнению с индивидуумами 88-генотипа [18], мы недавно обнаружили, что среди взрослых с хронической алкогольной зависимостью как захват 5-НТ, так и связывание 3Н-пакроксентина с 8ЕКТ понижены среди Б-носителей (например, ББ и Б8) по сравнению с 88-гомозиготами [31], и это снижение 5-НТ в тромбоцитах мы связали с

- 52 019200 годами (длительностью) употребления алкоголя. Все вместе, вышеуказанные данные повышенного риска на основании семейного анамнеза и изучения популяции подтверждают предположение, что постоянное (хроническое) употребление алкоголя может быть токсическим для 8ЕКГ и снижать активность 8ЕКГ, проявляющуюся у индивидуумов, являющихся Ь-носителями [15, 20, 22].

Целью является определение, действительно ли 8ЕКГ генотип (ЬЬ- по сравнению с 8-носителями) отличает подростков с ранним АиЭ в том, что касается их паттернов употребления алкоголя или их серотонинергической активности, количественно определяемой плотностью и функцией 8ЕКГ в тромбоцитах. Также изучают связь количественных показателей 8ЕКГ с употреблением алкоголя в настоящее время и в течение жизни. Высказывалось предположение, что количественные показатели связывания и функции 8ЕКГ связаны с 8ЕКГ генотипом, частично вследствие короткого времени употребления алкоголя в анамнезе. Конкретно, прогнозировалось, что у молодых людей с АиЭ будет наблюдаться повышенная функция 8ЕКГ и плотность 8ЕКГ у ЬЬ-генотипа по сравнению 8-генотипами (Ь8, 88). Также проверяют, действительно ли употребление алкоголя в анамнезе, количество употребляемого алкоголя в настоящее время или и то, и другое определяют то, как 8ЕКГ генотип изменяет 8ЕКГ функцию у молодых людей с нарушением (расстройством), связанным со злоупотреблением алкоголем.

Материалы и методы.

Участники.

Участниками являются молодые люди в возрасте 18-20 лет с нарушением, связанным со злоупотреблением алкоголем, в настоящее время, которые не обращались за лечением. Проводят диагностику участников на злоупотребление алкоголем или алкогольную зависимость по критериям П1адпо811с апб 81а11511са1 Мапиа1 оГ Меп1а1 П18огбег8, 41П ебШоп (Ό8Μ-1Υ; Атепсап Ρ8усЫаΐ^^с АккоааНоп, 1994). Все добровольцы находятся в хорошем физическом состоянии (что определяется при полном клиническом обследовании, электрокардиограмма (ЭКГ, ЕКС) в пределах нормы, лабораторные анализы в пределах приемлемых показателей); употребление алкоголя по меньшей мере 3 стандартные дозы/день запоя; содержание алкоголя в выдыхаемых парах на момент обследование ноль и умеющие читать и писать поанглийски. Исключающими критериями является расстройство Оси I Ό8Μ-ΐν, вызванное употреблением психоактивных веществ, отличных от алкоголя или марихуаны в настоящее время или в течение жизни. Исключаются индивидуумы, употреблявшие незаконные вещества, кроме марихуаны, в последние 30 дней. Исключающими критериями со стороны психиатрии являются большое депрессивное расстройство, биполярное депрессивное расстройство, пост-травматический стресс, психоз или дефицит внимания и гиперактивность (Α^Η^), который лечили в последние 30 дней. Медицинские критерии для исключения из исследования включают повышенное содержание печеночных ферментов, превышающее нормальный уровень более чем в 4 раза, и/или повышенный уровень билирубина (>110% по сравнению с нормой); серьезное сопутствующее заболевание, требующее медицинского вмешательство или более пристального наблюдения; клинически значимую алкогольную абстиненцию; лечение от злоупотребления алкоголем или алкогольной зависимости в последние 30 дней или беременность у женщин. Все участники дали письменное информированное согласие. Исследование одобрено Институциональным наблюдательным советом Научного Центра Здоровья Университета Техаса.

Диагностические количественные показатели.

Опытные терапевты используют интервью детей для диагностики психиатрических синдромов (СШбгеп'к 1п1егие\\· Гог ΡδνΟιίηΐΓΚ 8упбготе§, СЫΡ8), которые относятся непосредственно к критериям Ό8Μ-ΐν для психиатрических синдромов и, как было показано, являются точными и дают истинный (разумный) диагноз психиатрических расстройств у подростков и молодых людей в возрасте до 20 лет [32]. Расстройства, связанные с употреблением психоактивных веществ в настоящее время и в течение жизни, диагностируют в структурированном клиническом интервью, используя Диагностическое Интервью для подростков (Або1е8сеп1 Э|адпо511с 1п1егу1е\\·, АЭ1) [33, 34]. Главный исполнитель исследования проясняет несоответствия и устанавливает надежность интервью, используя диагностическую методику для лучшей оценки (Ве§1 Е811та1е Э|адпо511с Ρ^осеάи^е) [35, 36], и проверяет соответствие самоотчета участника в течение всего исследования. Сообщение участников исследования о количестве употребления алкоголя в последнее время и в течение жизни определяют из интервью пациента, используя метод ретроспективной хронологической шкалы (ГниеНне Го11о\\-Ьаск теШобк, ΤΣΕΕ) [37].

Общий дизайн и методики.

Экспериментальный дизайн представляет собой одномоментное ретроспективное исследование (сго88-8ес1юиа1 геПохресНуе 81ибу). После начального отбора удовлетворяющие требованиям участники сдают кровь для анализа функции 5НТ в тромбоцитах и генотипирования. У каждого участника берут пятьдесят миллилитров крови для количественного определения захвата 5-НТ интактными тромбоцитами и связывания пароксентина с мембранами тромбоцитов. Кроме того, образец крови объемом 10 мл отбирают для определения 8ЕКГ генотипа.

Тромбоцитарная суспензия тромбоцитов и приготовление тромбоцитарных мембран.

мл крови отбирают полипропиленовыми шприцами на 60 мл, содержащими 10 мл буфера кислота-цитрат-декстроза (Ас1б-С11га1е-Пех1го8е, АСЭ). Затем кровь центрифугируют при 150 д при 23°С в течение 20 мин на центрифуге Весктап Τ1-6, получают плазму, обогащенную тромбоцитами (ΡΚΡ). Чис

- 53 019200 ло тромбоцитов в РЕР определяют счетчиком Коултера модели 8-р1из VI и доводят до 3х10⁸ тромбоцитов/мл, добавляя буфер для тромбоцитов (137 мМ КС1, 1 мМ МдС1₂, 5.5 мМ глюкозы, 5 мМ НЕРЕ8, рН 7.4), чтобы приготовить скорректированную РЕР только для экспериментов по захвату серотонина. 3 мл скорректированной РЕР используют для экспериментов по захвату серотонина тромбоцитами, которые проводят в день взятия крови. Для приготовления тромбоцитарных мембран для экспериментов по связыванию пароксентина используют остаток РЕР. Добавляют 1 мл раствора простагландина 12 (300 нг/мл) на 1 мл РЕР для предотвращения потери тромбоцитов в процессе центрифугирования, а затем образец центрифугируют при 550 д Полученный осадок тромбоцитов (пеллеты) ресуспендируют в буфере для тромбоцитов и центрифугируют при 35000 д Осадок тромбоцитарных мембран ресуспендируют в 1 мл буфера для тромбоцитов, а затем хранят при -80°С до того дня, когда проводят анализ по определению связывания пароксентина.

Захват серотонина интактными тромбоцитами.

Эксперименты по захвату 5-НТ тромбоцитами проводят на 21 участнике. Суспензию скорректированной РЕР применяют для определения захвата 5-НТ тромбоцитами. Пробирки для анализа готовят в тройном повторе, они содержат ³[Н] 5-НТ в шести различных концентрациях (от 62.5 до 2000 нМ) и 100 мкМ паргилина с добавлением или без добавления 50 мкМ флуоксетина. Эти пробирки инкубируют при 37°С в течение 5 мин; затем инициируют реакцию, добавляя 100 мкл скорректированной РЕР, которая содержит 10⁷ тромбоцитов. Аналитические пробирки инкубируют при 37°С еще в течение 5 мин; затем реакцию прекращают, быстро фильтруя через фильтры \У11а1тап СР/В, используя харвестер клеток Вгапбе1 Се11 Нагуе^ег. Фильтры три раза отмывают в 5 мл охлаждаемого льдом буфера для отмывки (50 мМ Тпз НС1, 150 мМ ЫаС1 и 20 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЕЭТА)). Фильтры помещают в сцинтилляционные виалы, содержащие 5 мл жидкости (коктейля) для подсчета сцинтилляций (Весктап Ееабу Рго1ет+) и сразу же проводят подсчет. Специфический захват рассчитывают, вычитая неспецифический захват (пробирки с флуоксетином) из общего захвата. Максимальную скорость захвата 5-НТ (νιηηχ) тромбоцитами выражают в фмолях 5-НТ/мин-10⁷ тромбоцитов, а константу равновесия (Кт) в нМ. Кт и Vтаx рассчитывают, используя оие-Ше гиперболическую функцию в программе Ргып 4 Сгарй Раб™.

Связывание пароксетина с тромбоцитарными мембранами.

Тромбоцитарные мембраны используют для определения связывания пароксетина. Готовят аналитические пробирки в двойном повторе, содержащие буфер для инкубации (50 мМ Тп8 НС1, 5 мМ КС1 и 120 мМ №1С1) и ³[Н]-пароксетин в 6 различных концентрациях (от 0 до 2 нМ) с добавлением или без добавления 150 мМ флуоксетина. Истинную концентрацию пароксетина в каждой пробирке определяют, используя аликвоту 40 мл, отобранную из каждой пробирки перед добавлением тромбоцитарных мембран. Эксперимент начинают, добавляя 80 мг белка из тромбоцитарной мембраны, затем аналитические пробирки инкубируют 1 ч при 23°С. Реакцию прекращают, добавляя охлажденный льдом отмывочный буфер (50 мМ Тп8 НС1, 150 мМ ЫаС1, 20 мМ ЕЭТА) и быстро фильтруя через фильтры ^йа1таи СР/В, обработанные 0.3% раствором полиэтиленимина, используя харвестер клеток Вгапбе1 Се11 Нагуе81ег. Фильтры 3 раза отмывают охлажденным льдом буфером, сушат в течение ночи, помещают в сцинтилляционные виалы, содержащие 5 мл жидкости (коктейля) для подсчета сцинтилляций (Весктап Ееабу Рго1еш+) и считают с помощью жидкостного счетчика сцинтилляций Весктап Д8-6500. Число распадов в 1 мин (ОРМ) из алкивот по 40 мл превращают в нМ пароксетина, чтобы получить истинные концентрации в каждой пробирке. Строят график общее и неспецифическое связывание пароксетина в зависимости от истинной концентрации. Специфическое связывание рассчитывают, вычитая неспецифическое связывание из общего связывания. Значения Кб и Втах связывания пароксетина рассчитывают с помощью программы Рп8ш4 (Сгарйраб). Связывание пароксетина (Втах) выражают в фмоль/мг белка тромбоцитарной мембраны, а Кб в нМ. Концентрации белка определяют, используя метод ВюЕаб и микропланшетный спектрофотометр 8РЕСТЕАтах РЬИ8384.

Генотипирование.

Пробу крови для определения 8ЕЕТ генотипа берут при включении (зачислении) в исследование. Лейкоциты отделяют от плазмы крови и ресуспендируют, а ДНК выделяют, используя РИЕЕСЕМЕ, Сеп1га системы в соответствии с протоколом производителя. Полиморфизм повтора промоторного участка 5'-НТТЬРЕ протяженностью 44 п.о. амплифицируют полимеразной цепной реакцией (ПЦР, РСЕ) из ~50 нг ДНК, используя два праймера: 5'-ССТТСССССТСТСААТСССАС-3' и 5'ССАТТСТССТСССАССТАСАСССС-3', и в конечном объеме 25 мкл, содержащем 0.5 и (Ед.) ТД ДНК полимеразы (ЕрюепЧе), 1Х ПЦР буфера, 1.5 мл МдС1₂, 200 мкМ дНТФ (бЫТР), 1Х энхансера и 0.6 мкМ каждого праймера. Условия ПЦР следующие: 94° в течение 30 с; 70°С в течение 30 с и 72°С в течение 30 с); конечная пролонгация 72°С в течение 7 мин и выдерживание в конце при 4°С. Разделение с помощью гель-электрофореза на 4% Ме1аРйог агарозе (СатЬгех, Еоск1апб, МЕ) позволяет детекцией с помощью этидия бромида/УФ визуализировать два варианта (длинный (Ь) и короткий (8): размеры фрагментов=464 п.о. и 420 п.о. соответственно) промоторной области гена 8СЬ4А (с -1415 до -951) [16].

- 54 019200

Статистические анализы.

Определяют средние значения и стандартные отклонения для выходных переменных и переменных для тромбоцитов (Кт и Утах захвата 5НТ интактными тромбоцитами на плазматической мембране тромбоцитов). Отличные от нормальных распределения выходных переменных преобразовывают. Предполагаемый анализ включает корреляцию Пирсона для изучения соотношений переменных для тромбоцитов. Т-тесты используют для того, чтобы определить, имеются ли различия между группами носителей ЬЬ-генотипов по сравнению с носителями δ-генотипов, в психиатрических расстройствах, употреблении алкоголя в настоящее время и в течение всей жизни, в том, что касается зависимых переменных для 5НТ функции тромбоцитов (Втах, Кб, Утах и КМ).

Результаты.

Распределение генотипов следующее: ЬЬ, п=8, Ь8, п=9, δδ, п=4. Так как δ-носители (Ь8 и δδ) являются преобладающими генотипами в выборке, Ь-δ и δδ объединяют для анализа групповых различий (например, ЬЬ- по сравнению с δ-носителями).

Наблюдаются статистически значимые различия в возрасте и этнической принадлежности между ЬЬ- и δ-носителями (см. табл. 1). Однако в ЬЬ-группе наблюдается значительно более раннее начало и большая продолжительность употребления алкоголя, но отсутствует заметная разница в количественных показателях употребления алкоголя в настоящее время. Субъекты из ЬЬ-группы также имеют значительно более высокие компоненты признака импульсивности - отсутствие внимания и моторный (двигательный), также наблюдается тенденция к значительным различиям оценок по общему признаку импульсивности по Шкале Импульсивности Вагга! (ΒΙδ-11). У всех участников в настоящее время наблюдается расстройство, вызванное употреблением алкоголя, по критериям ΌδΜ-ΐν. Отсутствуют заметные различия между группами генотипов по другим ΌδΜ-ΐν психиатрическим группам.

В табл. 2 и на фиг. 4 представлены результаты исследования на тромбоцитах. Участники с ЬЬгенотипом имеют значительно более высокие значения Втах и Кб, чем δ-носители, что указывает на повышенные количества δΕ^Γ с пониженной аффинностью к связыванию пароксентина. Отсутствуют различия между группами в том, что касается функциональных измерений захвата 5НТ тромбоцитами.

Обсуждение.

Основным открытием (результатом) является то, что δΕ^ генотип позволяет предсказывать различия в возрасте начала и длительность так же, как профиль связывания тромбоцитами δΕ^ у подростков с расстройством, вызванным употреблением алкоголя. Конкретно, подростки (молодые люди) с ЬЬгенотипом начинают употреблять алкоголь в более раннем возрасте и у них наблюдается повышенное связывание с 3Н-пароксетином с более низкой аффинностью, чем у δ-носителей.

Хотя у участников в обеих группах расстройство, вызванное употреблением алкоголя, начинается в подростковом возрасте, и в обеих группах участники имеют в настоящее время одинаковый возраст (а именно средний возраст=18.7 лет), участники с ЬЬ-генотипом начинают употреблять алкоголь значительно раньше (а именно в возрасте 13.5 лет по сравнению с 15.2 годами) по сравнению с δ-носителями. Этот результат согласуется с гипотезой, высказанной .Тойпкоп [22], который предсказывал, что ЬЬгенотип может быть связан с более ранним началом проблемного пьянства. Также с гипотезой .Тойпкоп согласуется то, что у участников ЬЬ-группы также наблюдаются более высокие уровни поведенческой восприимчивости (т.е. признака импульсивности), чем у δ-носителей [1, 15, 22]. Это последнее открытие интересно тем, что литературные данные наводят на мысль, что ЬЬ-генотипы могут иметь пониженный 5-НТ в синаптической щели и пониженный центральный метаболизм 5-НТ, ассоциированный с повышенными уровнями импульсивности [1, 15, 22]. Примечательно, что отсутствуют заметные групповые различия в уровне употребления алкоголя на момент исследования, которые противоречат сообщениям о студентах университета, показывающим, что у δ-носителей более тяжелый характер запойного пьянства [38].

Результаты предыдущих исследований на взрослой популяции в целом показали, что δδ-генотип ассоциируется с антисоциальным типом алкоголизма в популяциях европейцев и мексиканоамериканцев [28], тогда как среди азиатских популяций ЬЬ-генотип ассоциируется с повышенным риском алкоголизма [26, 29]. В настоящем исследовании популяция молодых людей (подростков) включает европейцев, белых - латиноамериканцев, представителей смешанных рас и участников, происходящих от американских индейцев. Результаты говорят о том, что ЬЬ-генотип может ассоциироваться с повышенной импульсивностью, тем самым повышается риск начала проблемного пьянства в более раннем (подростковом) возрасте. Если принять во внимание ассоциацию δδ-генотипа с расстройствами, вызванными беспокойством и стрессами [15, 39], то возникает альтернативное предположение, что к тому времени, когда европейцы подросткового возраста превратятся в молодых людей в возрасте студентов колледжа (университета), другие внешние факторы, такие как стресс, влияют на носителей δ-генотипов, вызывая беспокойство или аффективный дистресс, что приводит к усиленному употреблению алкоголя и повышенному риску алкоголизма.

В предыдущих исследованиях на взрослых показано, что по сравнению с δ-носителями ЬЬ-генотип ассоциируется с повышенным центральным δΕКТ связыванием [20] и повышенным захватом 5-НТ (но не связыванием) тромбоцитами здоровых людей [18]. Однако, по-видимому, это не является верным в

- 55 019200 случае взрослых алкоголиков. Известно, что у взрослых алкоголиков, имеющих Ь-аллель, на самом деле наблюдается пониженное связывание 3Н-пароксетина и пониженный захват 5-НТ тромбоцитами по сравнению с 88-гомозиготами и было высказано предположение, что этот эффект связан с годами проблемного пьянства [31]. Данные настоящего исследования говорят о том, что проблемные пьяницы подросткового возраста, имеющие ЬЬ-генотип, обычно имеют нормальные паттерны повышенного 8ЕКТ связывания, но что у 8-носителей не наблюдается нормального 8ЕКТ связывания. Следовательно, логично предположить, что в случае продолжительного запойного (тяжелого) пьянства у подростков, рано начавших употреблять алкоголь и более длительное время употребляющих алкоголь, отрицательная модуляция (даунрегуляция) 8ЕКТ начинается раньше, чем у взрослых алкоголиков.

Пример 2.

Таблица 1

Демографические показатели, анамнез употребления алкоголя и психиатрические расстройства в настоящее время

Генотип

	ЕЬ <«=8)	Ь8/88 (В=13)
Переменная	Среднее	(50)	Среднее	(ЗЕ>)	Р значе-
Возраст (годы)	18.9	0.6	18.5	0.5	ние 0.20
Признак импульсивности (В18- 1 1) Отсутствие	26 0	47	24 4	69	0 57
планирования Невнимание	20 5	3 4	165	3 8	0 03
Моторное	27 8	32	23 9	3 2	0 02
расстройство Обшее	74 3	74	64 9	11 3	0 05
Употребление алкоголя за время жизни Возраст начала	13 5	1 2	152	1 9	0 03
употребления алкоголя (лег) Продолжительность	5 4	09	3 3	1 8	<001*
употребления алкоголя (лет) Употребление алкоголя в последнее время υυ	30	1 7	39	53	0 98
ϋΏΟ	99	57	78	78	0 27
РЭА	67 6	16 1	52 7	25 7	0 16

	Количество	(% ьь участников)	Количество	(% Ь8/85 участников)
Пол					0 97
Мужчины	5	62 5	8	61 5
Женщины	3	375	5	38 5
Этничность					038
Европейцы	2	25 0	3	23 1
Латиноамериканцы	3	37 5	9	69 2
Смешанные	3	37 5	0	00
Американские	0	0	1	77
индейцы
ΑΟΗϋ	3	37 5	3	25 0	0 48
Οϋβ	1	125	3	25 0	0 45
	6	75 0	9	75 0	0 92
Психические	2	25 0	3	23 0	0 85
расстройства
Тревожные	0	00	4	44 0	081
расстройства
Расстройство,	8	1000	13	100 0	+
связанное с
употреблением
алкоголя
Алкогольная	8	100 0	10	83 3	0 14
зависимость
Алкоголемания	0	00	3	167	**
Зависимость от	1	125	6	50	0 и

марихуаны * Продолжительность употребления алкоголя остается значительной после включения в качестве коварианта общей оценки по Шкале Импульсивности ВаггеИ (В18).

1)1) - среднее число доз в день в последние 90 дней.

1)1)1) - среднее число доз в день запоя в последние 90 дней.

РОА - процент дней отказа от алкоголя (абстиненции) за последние 90 дней.

+ Все участники соответствуют критериям расстройства, вызванного употреблением алкоголя в настоящее время.

** Три участника отвечают критериям П8М-1У-ТК для алкоголемании (неудержимого стремления к алкоголю), синдром дефицита внимания с гиперактивностью (.)1)111)), оппозиционно-вызывающее расстройство (ΟΠΌ), расстройство поведения (СО).

- 56 019200

Пример 2.

Таблица 2

Групповые различия показателей захвата 5НТ и связывания пароксетина. Генотип ЁЪ (л=8) (п=13)

Переменная	Среднее	(50)	Среднее	(5Р)	Р значение
Связывание пароксетина Втг/фмоль/мг	802.0	254.2	504.3	199.8	0.02
белка) КДнМ)	0.7	0.5	0.4	.3	0.03
Втпах/Κά	1293.2	508.6	1861.4	1318.0	0.18
Захват 5НТ Утах	181.6	128.4	200.1	113.5	0.46
(фмоль/мин-107 тромбоцитов) Кт(мкМ)	445.9	409.3	323.2	136.4	0,40
	0.6	0.4	0.7	0.4	0.53

Примечание: данные преобразованы по шкале натуральных логарифмов для анализов с применением !-критерия Стьюдента.

Заключение.

Результаты настоящего эксперимента дают частичное подтверждение гипотезы, что среди подростков, употребляющих в настоящее время алкоголь, страдающих расстройством, вызванным употреблением алкоголя, у подростков, имеющих ЬЬ-генотип, проявляется повышенная импульсивность, они начали пить в более раннем возрасте и у них наблюдается повышенное связывание ³Н-пароксетина с ЗЕКТ тромбоцитов. Эти результаты расширяют современное понимание роли 5'-промотора гена ЗЕКТ в регуляции ЗЕКТ у подростков с АЬЬ. Помимо этого, данное исследование дает предварительные результаты, которые демонстрируют, что тромбоцитарные и генетические количественные показатели функции ЗЕКТ могут быть полезными для того, чтобы следить за сложным взаимодействием биологических и внешних факторов в этиологии восприимчивости и повышенного риска либо начала алкоголизма, либо токсичности.

Библиография к примеру 2.

1. ЫИпкоп, В.А. апб N. Ай-Оаоиб, Ркусйорйагтасо1оду, 2000, 149: р. 327-344.

2. ЬеМащиапб е! а1., В1о1ощса1 РкусЫа!гу, 1994, 36: р. 326-337.

3. ЬеМащиапб е! а1., Атепсап 1оигпа1 о£ РкусЫа1гу, 1999, 156: р. 1771-1779.

4. З!о1!епЬегд, З.Р., А1соЫо11кт: С1т. Ехр. Кек., 2003, 27: р. 1853-1859.

5. Ыппойа е! а1., Ы£е Заепсек, 1983, 33: р. 2609-2614.

6. Р11к-А1те, М.Ь., е! а1., АгсЫуек о£ Сепега1 РкусЫа!гу, 1996, 53(3): р. 211-216.

7. С1ошпдег, С., Зс1епсе, 1987, 236: р. 410-416.

8. Уйккипеп е! а1., АгсЫуек о£ Сепега1 РкусЫа!гу, 1987, 44: р. 241-247.

9. Уйккипеп е! а1., АгсЫуек о£ Сепега1 РкусЫа!гу, 1996, 53: р. 523-529.

10. З\уапп е! а1., РкусЬорЬагтасо1оду, 1999, 143: р. 380-384.

11. СгапЬаит, ЬА., е! а1., МогЬ. Мой. ^к1у Кр!, Зшуей. Зит., 2002, 51(4): р. 1-62.

12. МсВпбе, е! а1., Сп!1са1 Кеу1еук т №игоЬю1оду, 1998, 12: р. 339-369.

Уйккипеп. е! а1., 1оигпа1 о£ РкусЫайу апб Ыеигокаепсе, 1995, 20: р. 271-275.

14. Уйккипеп, е! а1., ЕрзбеттЫду, ЫеигоЬ1о1оду, РкусЫо1оду, Ратйу 1ккиек., М. Са1ап!ег, Ебйог, 1997, Р1епит Ргекк: Ые\у Уогк, р. 173-189.

15. Нет/ е! а1., Ркусйорйагтасо1оду, 2004, 174: р. 561-570.

16. Ней е! а1., 1оигпа1 о£ ЫеигосЫетИйу, 1996, 66: р. 2621-2624.

17. Нейк е! а1., 1оигпа1 о£ Ыеига1 Тгапкт1кк1оп, 1997, 104: р. 1005-1014.

18. СгеепЬегд е! а1., Атепсап 1оита1 о£ Меб1са1 Сепейск, 1999, 88: р. 83-87.

19. Ьексй, е! а1., Заепсе, 1996, 274: р. 1527-1531.

20. Нет/, е! а1., В1о1од1са1 РкусЫа!гу, 2000, 47: р. 643-649.

21. Ме1!/ег, е! а1., РкусЫа!гу КекеагсЫ, 1998, 24: р. 263-269.

22. ЫИпкоц В.А., е! а1., А1соЫо11кт: С1т. Ехр. Кек., 2000, 24(10): р. 1597-1601.

23. Зсйискй, е! а1.. В1о1од1са1 РкусЫа!гу, 1999, 45: р. 647-651.

24. Етои£, е! а1., Ьйе Заепсек, 1993, 52: р. 989-995.

25. КаиксЫ, ЬЬ., е! а1., ЫеигоркусЫорЫагтасо1оду, 1991, 4(2): р. 83-6.

26. 1кЫдиго, е! а1., А1соЫо11кт: С1т. Ехр. Кек., 1999, 23: р. 1281-1284.

27. Клуеоп, е! а1., 1оигпа1 о£ РкусЫа!пс КекеагсЫ, 2005, 39: р. 371-376.

28. Реши, е! а1., Атепсап 1оигпа1 о£ Меб1са1 Сепейск Рай В (ЫеигоркусЫайтс Сепейск), 2005, 133В: р. 79-84.

29. КоЫкЫ, е! а1., А1соЫо1, 2004, 32: р. 45-52.

30. Ыуогк, е! а1., А1соЫо1 апб А1соЫо11кт, 2000, 35: р. 390-393.

31. ЫЫчкоп, е! а1., Nеи^оркусЫорЫа^шасо1оду апб Вю1офса1 РкусЫайу, ίη ргекк.

- 57 019200

32. Коопеу, е1 а1., Абтйпз1га1юп тапиа1 оГ 1йе СЫР8, 1999, ХУазйтдЮп, Э.С.. Атепсап Рзусй1а1гу Ргезз.

33. ХУйНегз, е1 а1., Або1ез. П1адпозйс Ιπ^ηΚ\ν 8сйеби1е апб Мапиа1, 1993, Ьоз Апде1ез: \Уез1егп Рзусйо1о§1са1 8етсез.

34. ХУйНегз, К.С., е1 а1., Рзусйо1оду оГ Аббю1Ке О1зогбегз, 1993, 7: р. 185-196.

35. Ьесктап е1 а1., АгсйКез оГ Сепега1 РзусЫайу, 1982, 39: р. 879-883.

36. Коз1еп, е1 а1., Атепсап 1оигпа1 оГ Рзусй1а1гу, 1992, 149: р. 1225-1227.

37. 8оЬе11, Ь.С., 8оЬе11, М.В., Т1те1ше Го11о\\-Ьаск: А 1есйпк|ие Гог аззеззтд зе1Г-герог(еб а1сойо1 сопзитрйоп., т Меазиппд А1сойо1 Сопзитриоп: Рзусйозос1а1 апб Ьюсйетка1 те1йобз, Е.К. Ыйеп, А11еп, ί., Ебйог, 1992, Нитапа Ргезз 1пс., То1\\ц, Ν.Ι, р. 41-72.

38. СоνаиЙ е1 а1., Вю1одюа1 РзусЫайу, 2007, 61(5), р. 609-16.

39. Ьезсй, К.Р., Еигореап 1оигпа1 оГ Рйагтасо1оду, 2005, 526: р. 113-124.

40. Оа\\'ез, е1 а1., А1сойо1 апб А1сойойзт, 2004, 39(3), р. 166-177.

41. Рте, е1 а1., АгсйКез оГ Сепега1 РзусЫайу, 1997, 54: р. 839-846.

42. 8о1о1Т е1 а1., А1сойойзт: Сйп. Ехр. Кез., 2000, 24(11), р. 1609-1619.

43. Т^йсйей е1 а1., А1сойойзт: Сйп. Ехр. Кез., 2000, 24(7), р. 972-979.

44. Т^йсйей, е1 а1., А1сойойзт: Сйп. Ехр. Кез., 2001, 25(7), р. 953-959.

Пример 3. У ЬЬ алкоголиков наблюдается самое значительное снижение интенсивности употребления алкоголя после лечения ондансетроном.

Активация 5-НТ₃ повышает функцию ЛА (В1апбша е1 а1. 1989; В1апб1па е1 а1. 1988; Эе Эеипгаегбеге е1 а1. 1998), основного нейромедиатора, опосредующего положительное подкрепляющее действие алкоголя. Эта активация может быть повышена запоями, так как степень, до которой потенцируется 5-НТ3 рецептор, находится в обратной зависимости с уровнем базальной 5-НТ нейротрансмиссии (Ьоутдег 1991; йоттдег 1999; ^оν^пде^ апб 2йои 1994; ^оν^пде^ апб 2йои 1998; 2йои апб ^оν^пде^ 1996; 2йои е1 а1. 1998). Следовательно, ондансетрон может иметь отличающуюся эффективность у ЕОА с предположительным преобладанием ЬЬ варианта в случае блокады активированных 5-НТ₃ рецепторов, тем самым уменьшается интенсивность дисфункции серотонинергических структур и снижаются положительные подкрепляющие свойства алкоголя.

Полиморфический вариант 8ЕКТ в 5'-НТТЬРК также может объяснить ответ на лечение с помощью 88ΚΙ у алкоголиков типа А (аналогичных ЬОА) с предполагаемым преобладанием 88/8Ь (РеШиай е1 а1. 2000). Однако эта ассоциация (связь), по-видимому, не опосредуется 5-НТ₃ механизмами. В данном описании предполагается, что у алкоголиков типа А, описанных Ре111па11 е1 а1., преимущественно с 88/8Ьформой, базальная функция серотонинергической системы нормальна. Следовательно, длительное лечение с помощью 88ΚΙ незначительно способствует 5-НТ нейротрансмиссии и продолжительному ингибированию дофаминергической активности, тем самым противодействует (уравновешивает) положительным поддерживающим свойствам алкоголя при постоянном употреблении алкоголя. Можно ожидать, что у индивидуумов с 88/8Ь-формой 5'-НТТЬРК будет наблюдаться аналогичный незначительный эффект, противоположный положительному поддерживающему действию, при кратковременном употреблении алкоголя во время длительного лечения с помощью 88ΚΙ. Напротив, постоянное лечение с помощью 88ΚΙ, по-видимому, неэффективно для снижения продолжительного употребления алкоголя у алкоголиков типа В (Кгап/1ег е1 а1. 1996) с предположительным преобладанием ЬЬ, так как активность серотонинергической системы предположительно повышалась бы значительно (так как в этом состоянии сравнительно меньше переносчиков 8ЕКТ), и наступающее заметное гиподофаминергическое состояние, по-видимому, включает понижение употребления алкоголя, чтобы нормализовать это нейрохимическое состояние. Длительное лечение с помощью 88ΚΙ, вероятно, оказывает слабое действие на 5-НТ нейротрансмиссию у кратковременно пьющих индивидуумов с ЬЬ вариантом, так как базальный (фоновый) обратный захват серотонина значительно повышается.

Настоящее исследование предпринято с целью определить, может ли эффект лечения ондансетроном коррелировать с экспрессией ЬЬ варианта 5'-НТТЬРК употреблением алкоголя.

Материалы и методы.

В заранее запланированном промежуточном исследовании было изучено 226-алкогользависимых индивидуумов (в возрасте от 18 до 65 лет), включенных в 12-недельное рандомизированное контролируемое фармакотерапевтическое исследование, для определения воздействия ондансетрона на употребление алкоголя индивидуумами, имеющими аллельное различие в 5-НТТ гене и начавшими употреблять алкоголь в разном возрасте. Все эти индивидуумы зарегистрированы как участники исследования в Научном Центре Здоровья Университета штата Техас в Сан Антонио. Коротко говоря, дизайн исследования следующий: 2 (ЬЬ ν3. Ь8/88)х2 (ранний алкоголизм ν3. поздний алкоголизм)х2 (ондансетрон 4 мкг/кг дважды в день (Ьл.б.) ν3. плацебо). Ниже представлены инференциальные (прогнозные) результаты для интенсивности употребления алкоголя - дозы (единицы)/день запоя (ΌΌΌ).

Демографические данные.

Среди участников 74% мужчин и 26% женщин; 48% индивидуумы с ранним алкоголизмом и 52% с поздним алкоголизмом и 20% латиноамериканцев и 80% белых (европейцев). Между эксперименталь

- 58 019200 ными группами нет значительной разницы (Р>0.05) по демографическим характеристикам. Базовое (на момент включения в обследование) среднее (8Ю) ΌΌΌ (последние 90 дней) также аналогичны для групп, получающих ондансетрон 4 мкг/кг дважды в день и плацебо -9.83 (4.63) νκ. 9.85 (4.49) соответственно. Инференциальные (прогнозные) исследования (анализы) проводят для всех рандомизированных субъектов в зависимости от назначенного лечения (т!еп!-!о-!геа! ргтар1е). План действий в процессе анализа: сначала рассчитать ΌΌΌ на каждой неделе. Затем мы используем разницу между еженедельной величиной ΌΌΌ и исходной величиной ΌΌΌ (за последние 90 дней) в качестве повторных измерений (гереа! теакигек). Метод смешанной модели (8А8 РВ0С М1ХЕЭ) используют для изучения эффекта лечения, генотипа (ЬЬ νδ. Ь8/88), взаимосвязи лечения и генотипа, возраста, возраста начала употребления алкоголя (раннее νδ. позднее), пола, возраста начала проблемного пьянства, корректировки исходного уровня ΌΌΌ. Также включается случайный наклон (угол наклона) во времени для изучения варианта тенденции (тренда) еженедельной ΌΌΌ во времени.

Результаты.

Пример 3.

Наблюдается, что ΌΌΌ как в группе ондансетрона, так и в группе плацебо приблизительно линейно снижается во времени; таким образом, во всех группах улучшаются показатели употребления алкоголя во времени (Р=32.96; Р<0.0001). В приведенной ниже таблице (табл. 1 - пример 3) показаны различия (между ячейками) для различных генотипов по ΌΌΌ для группы плацебо и группы лекарства (т.е. ондансетрона).

Также наблюдается основной эффект лечения (Р=5.64; Р=0.02). Взаимное влияние лечения и генотипа является в высшей степени значительным (Р=6.99; Р=0.0083). Также наблюдается слабозаметное влияние возраста начала (Р=3.68; Р=0.06). В ЬЬ-группе наблюдается общий заметный эффект снижения ΌΌΌ (Р=5.64; Р=0.02) и временной эффект (эффект времени) (Р=12.69; Р=0.0007). Различия между клетками (ячейками) показывают, что снижение ΌΌΌ в ЬЬ-группе вызывается тем, что в ЬЬ-группе, получавшей ондансетрон, снижение ΌΌΌ значительно больше по сравнению с другими аллельными типами. Действительно, величина эффекта (Сойеп'к й) у ЬЬ индивидуумов, снижающего ΌΌΌ, велика (а именно 0.08). Среднее (8ЕМ) снижение ΌΌΌ по сравнению с базовым (исходным) значением время лечения для различных генотипов и условий лечения равно 5.70 (0.64) для группы ондансетрон ЬЬ, 3.45 (0.44) для группы ондансетрон Ь8/88, 3.54 (0.67) для группы плацебо ЬЬ и 4.25 (0.45) для группы плацебо Ь8/88. Около 70% тех, кто принял участие в двойной слепой фазе исследования, выдержали испытание до конца.

Эти обнадеживающие результаты предоставляют первое свидетельство того, что у алкоголиков с ЬЬ-генотипом, по сравнению с их коллегами с Ь8/88-генотипами, наблюдается значительно большее снижение интенсивности употребления алкоголя после лечения ондансетроном.

Пример 3.

Таблица 1

Лечение	Генотип	Оценка	Нижний €1	Верхний С1	Р- велнчнна	СоИепЧ <1
Плацебо	Ь5/5$ ν5 ГЕ	-0.71	-2.29	0.87	0.379	0.03
Лекарство	Ь5/55 νδ. ЬЬ	2.25	0.73	3.78	0.004	0.10
Плацебо νκ. лекарство	Г8/88	-0.80	-2.03	0.43	0.203	0.04
Плацебо νχ. лекарство	ЬЬ	2.16	0.35	3.98	0.020	0.08

Немаловажно, что эти новые данные о серотонинергических лекарственных препаратах возрождают концепцию, что алкоголизм представляет собой гетерогенное расстройство, ассоциированное с различными нейрохимическими нарушениями. Предполагается, следовательно, что медицинские средства, нацеленные на одно или более таких базовых нарушений, должны быть мощными терапевтическими средствами и что из испытания обещают прогресс в научном понимании заболевания.

Пример 4. Методы прогнозирования ответа на лечения на основании различных генотипов 5'НТТЬРВ и 3'-ИТВ гена переносчика серотонина 8ЬС6А4 и методы лечения с учетом различий.

На основании результатов экспериментов, описанных в примерах 1-3, проводят ряд исследований, чтобы определить, применим ли фармакогенетический эффект ондансетрона для различного лечения индивидуумов с ЬЬ-генотипом 5'-НТТЬРВ, ТТ-генотипом 3'-ИТВ гк1042173 или с комбинацией этих генотипов.

Материалы и методы.

Субъекты.

289 алкогользависимых мужчин и женщин включены в 12-недельное терапевтическое испытание, в котором они получают либо ондансетрон (4 мкг/кг), либо плацебо. Все участники также ежедневно получают когнитивно-поведенческую терапию в качестве стандартизованного психосоциального лечения. Г енотипирование проводят для всех субъектов.

Статистические методы.

Метод смешанной модели используют для изучения эффекта лечения и генотипа и их взаимосвязи

- 59 019200 для каждого из основных результатов употребления алкоголя. Модели включают случайный интерсепт и случайный наклон (траектории) и корректируются по ковариантам, таким как средние уровни употребления алкоголя участниками в течение 90 дней перед исследованием, возраст, пол, этническая принадлежность (этничность) (европейцы и латиноамериканцы) и центр. Ковариационную матрицу компонентов дисперсии используют для моделирования различных колебаний для интерсепта и наклона и ковариации между ними. Сначала в модели включают взаимодействие (взаимное влияние) лечения, генотипа, возраста и центра. Если оно не является значимым, его исключают из конечной модели.

Результаты.

Для показателя числа доз в день запоя (ΌΌΌ) найдено, что значимыми в ΌΌΌ являются основные эффекты гк1042173 (р=0.003), а также эффект взаимодействия в гк1042173 посредством 5'-НТТЬРК Ь/8аллелях (ЬЬ, Ь8/88) (р=0.021) и эффект взаимодействия 5'-НТТЬРК Ь/8-аллели под влиянием лечения (р=0.028). У пациентов с ТТ-генотипом наблюдается более чем 1-ΌΌΌ снижение по сравнению с пациентами с ТС/СС (стандартное отклонение=-1.16; 95% СЕ -1.93 - -0.39; р=0.003). Неожиданно у пациентов как с ЬЬ-, так и с ТТ-генотипами (ЬТ) снижение ΌΌΌ значительно больше, чем у пациентов с другими комбинациями генотипов гк1042173 и 5'-НТТЬРК Ь/8-аллелей (р <0.05), и снижение более высокое, чем 2-ΌΌΌ, у ЬТ-индивидуумов по сравнению с теми, кто имеет ЬЬ- и ТС/СС-генотипы (ЬС; стандартное отклонение=-2.06; 95% СЕ -3.27 - -0.85; р=0.001). При лечении ондансетроном пациенты с ТТ-генотипом, по-видимому, отвечают на лечение более эффективно, чем пациенты с генотипами ТС/СС (стандартное отклонение=-1.31; 95% СЕ -2.36 - -0.25; р=0.016). Аналогичный эффект лечения наблюдается, когда мы сравниваем пациентов с ЬЬ-генотипом с пациентами с Ь8/88-генотипами (стандартное отклонение= -1.41; 95% СЕ -2.46 - -0.36; р=0.009), и среди пациентов с ЬЬ-генотипом, у этих пациентов в группе, получавшей лекарство, наблюдается 1.5-ΌΌΌ снижение по сравнению с пациентами в группе плацебо (стандартное отклонение=-1.50; 95% СЕ -2.70 - -0.31; р=0.013). Аналогичные эффекты наблюдаются для других показателей употребления алкоголя.

Заключение.

Ондансетрон проявляет предпочтительный эффект лечения, снижая интенсивное употребление алкоголя у алкогользависимых индивидуумов с ЬЬ-генотипом в 5'-НТТЬРК, эффект, который повышается у тех индивидуумов, кто также имеет ТТ-аллель в 3'-ИТК полиморфизма гк1042173. Эти данные демонстрируют важный фармакогенетический эффект ондансетрона у алкогользависимых индивидуумов. Данное исследование обосновывает метод, с помощью которого можно эффективно лечить ондансетроном алкогользависимых индивидуумов, у которых идентифицированы эти аллели или их комбинация.

Результаты, представленные в примерах 1 и 4, демонстрируют, что существует связь (ассоциация) между очень интенсивным употреблением алкоголя и восприимчивостью к лечению ондансетроном у алкогользависимых пациентов, гомозиготных по Т, по сравнению с алкогользависимыми субъектами с С-аллелем.

Раскрытие всех без исключения патентов, патентных заявок и публикаций, цитируемых в данном описании, вводится в данное описание ссылкой во всей полноте.

Заголовки включены в данное описания для ссылки и для более простого нахождения местоположения некоторых разделов. Не предполагается, что эти заголовки ограничивают объем концепций (общих представлений) по данному описанию, и эти концепции (общие представления) могут находить применение в других разделах описания в целом.

Хотя данное изобретение раскрывается со ссылкой на конкретный варианты изобретения, очевидно, что специалисты в данной области техники могут разработать другие способы воплощения и варианты данного изобретения, не отступая от истинной сущности и объема изобретения.

Claims (74)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Способ прогнозирования предрасположенности тестируемого субъекта к развитию аддиктивного заболевания или расстройства, включающий получение биологического образца от тестируемого субъекта;

   определение, имеет ли субъект С-аллель или является ли он гомозиготным по Т-аллелю единичного нуклеотидного полиморфизма гк1042173 гена переносчика серотонина 8ЬС6А4;

   причем присутствие С-аллеля является показателем того, что тестируемый субъект имеет пониженную предрасположенность к развитию аддиктивного заболевания или расстройства по сравнению с субъектом, гомозиготным по Т-аллелю, а гомозиготность по Т-аллелю у тестируемого субъекта является показателем того, что тестируемый субъект имеет повышенную предрасположенность к развитию аддиктивного заболевания или расстройства по сравнению с субъектом с С-аллелем.
2. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанное аддиктивное заболевание или расстройство выбирают из группы, состоящей из заболеваний и расстройств, связанных с употреблением алкоголя, заболеваний и расстройств, обусловленных ожирением, расстройств пищевого поведения, расстройств контроля над побуждениями, расстройств, связанных с употреблением никотина, расстройств, вызванных употреблением амфетаминов, расстройств, вызванных употреблением метамфетамина, расстройств, вы

   - 60 019200 званных употреблением марихуаны, расстройств, вызванных употреблением кокаина, расстройств, вызванных употреблением галлюциногенов, расстройств, вызванных употреблением ингалянтов, расстройств, вызванных злоупотреблением бензодиазепином или зависимостью от бензодиазепина, расстройств, вызванных злоупотреблением опиоидами, игромании, компьютерной и электронной зависимости.
3. 3. Способ по п.2, отличающийся тем, что указанное заболевание или расстройство, связанное с употреблением алкоголя, выбирают из группы, состоящей из раннего алкоголизма, позднего алкоголизма, вызванного злоупотреблением алкоголем психотического расстройства с бредом, алкоголемании (неудержимого стремления к пьянству), пьянства в тяжелой форме, чрезмерного употребления алкоголя, алкогольной интоксикации, алкогольной абстиненции, белой горячки вследствие алкогольной интоксикации (алкогольного делирия), белой горячки вследствие алкогольной абстиненции, алкогольной персистирующей деменции, алкогольного персистирующего амнестического расстройства, алкогольной зависимости, алкогольного психотического расстройства с галлюцинациями, вызванного употреблением алкоголя аффективного расстройства, вызванного или ассоциированного с алкоголем биполярного расстройства, вызванного или ассоциированного с алкоголем посттравматического стресса, тревожного расстройства алкогольного генеза, сексуальной дисфункции алкогольного генеза, вызванного или ассоциированного с алкоголем расстройства сна, вызванной или ассоциированной с алкоголем игромании, вызванного или ассоциированного с алкоголем сексуального расстройства, алкогольного расстройства без дополнительных уточнений, алкогольной интоксикации и алкогольной абстиненции.
4. 4. Способ прогнозирования ответа тестируемого субъекта на лечение аддиктивного заболевания или расстройства, включающий получение биологического образца от тестируемого субъекта;

   определение, имеет ли субъект С-аллель или он является гомозиготным по Т-аллелю единичного нуклеотидного полиморфизма ге1042173 гена переносчика серотонина 8ЬС6А4;

   причем присутствие С-аллеля является показателем того, что тестируемый субъект имеет пониженную реакцию на лечение аддиктивного заболевания или расстройства по сравнению с субъектом, гомозиготным по Т-аллелю;

   при этом гомозиготность по Т-аллелю у тестируемого субъекта является показателем того, что тестируемый субъект имеет повышенную предрасположенность к лечению аддиктивного заболевания или расстройства по сравнению с субъектом с С-аллелем, и показателем того, что у субъекта наблюдаются пониженные уровни экспрессии гена переносчика серотонина 8ЬС6А4.
5. 5. Способ по п.4, отличающийся тем, что указанное аддиктивное заболевание или расстройство выбирают из группы, состоящей из заболеваний и расстройств, связанных с употреблением алкоголя, заболеваний и расстройств, обусловленных ожирением, расстройств пищевого поведения, расстройств контроля над побуждениями, расстройств, связанных с употреблением никотина, расстройств, вызванных употреблением амфетаминов, расстройств, вызванных употреблением метамфетамина, расстройств, вызванных употреблением марихуаны, расстройств, вызванных употреблением кокаина, расстройств, вызванных употреблением галлюциногенов, расстройств, вызванных употреблением ингалянтов, расстройств, вызванных злоупотреблением бензодиазепином или зависимостью от бензодиазепина, расстройств, вызванных злоупотреблением опиоидами, игромании, компьютерной и электронной зависимости.
6. 6. Способ по п.5, отличающийся тем, что указанное заболевание или расстройство, связанное с употреблением алкоголя, выбирают из группы, состоящей из раннего алкоголизма, позднего алкоголизма, вызванного злоупотреблением алкоголем психотического расстройства с бредом, алкоголемании (неудержимого стремления к пьянству), пьянства в тяжелой форме, чрезмерного употребления алкоголя, алкогольной интоксикации, алкогольной абстиненции, белой горячки вследствие алкогольной интоксикации (алкогольного делирия), белой горячки вследствие алкогольной абстиненции, алкогольной персистирующей деменции, алкогольного персистирующего амнестического расстройства, алкогольной зависимости, алкогольного психотического расстройства с галлюцинациями, вызванного употреблением алкоголя аффективного расстройства, вызванного или ассоциированного с алкоголем биполярного расстройства, вызванного или ассоциированного с алкоголем посттравматического стресса, тревожного расстройства алкогольного генеза, сексуальной дисфункции алкогольного генеза, вызванного или ассоциированного с алкоголем расстройства сна, вызванной или ассоциированной с алкоголем игромании, вызванного или ассоциированного с алкоголем сексуального расстройства, алкогольного расстройства без дополнительных уточнений, алкогольной интоксикации и алкогольной абстиненции.
7. 7. Способ по п.4, отличающийся тем, что в соответствии с прогнозом субъект с Т-аллелем должен быть более восприимчив к лечению.
8. 8. Способ по п.7, отличающийся тем, что указанное лечение повышает экспрессию 8ЬС6А4 гена или белка, уровни 8ЬС6А4 гена или белка или активность 8ЬС6А4 гена или белка.
9. 9. Способ по п.7, отличающийся тем, что указанное лечение понижает уровни или активность серотонина.
10. 10. Способ по п.4, отличающийся тем, что указанный ответ представляет собой уменьшение упот

    - 61 019200 ребления алкоголя.
11. 11. Способ по п.10, отличающийся тем, что указанное уменьшение употребления алкоголя выбирают из группы, состоящей из уменьшения пьянства в тяжелой форме, количества доз/день и количества доз/день запоя.
12. 12. Способ по п.4, отличающийся тем, что указанный способ позволяет прогнозировать ответ на лечение по меньшей мере одним лекарством, которое регулирует серотониновую систему.
13. 13. Способ по п.12, отличающийся тем, что указанное по меньшей мере одно лекарство представляет собой антагонист серотонинового рецептора 5-НТ₃, в частности ондансетрон.
14. 14. Способ по п.4, отличающийся тем, что указанный образец выбирают из группы, состоящей из тканевых образцов, биопсийного материала (биоптата), крови, слюны, кала, спинно-мозговой жидкости (ликвора), спермы, слез и мочи.
15. 15. Способ прогнозирования предрасположенности тестируемого субъекта к развитию аддиктивного заболевания или расстройства, заключающийся в получении биологического образца от тестируемого субъекта и анализе образца методами, включающими:

    a) определение, имеет ли субъект С-аллель или он является гомозиготным по Т-аллелю единичного нуклеотидного полиморфизма г>1042173 гена переносчика серотонина БЬС6А4;

    причем присутствие С-аллеля является показателем того, что тестируемый субъект имеет пониженную предрасположенность к развитию аддиктивного заболевания или расстройства по сравнению с субъектом, гомозиготным по Т-аллелю, а гомозиготность по Т-аллелю у тестируемого субъекта является показателем того, что тестируемый субъект имеет повышенную предрасположенность к развитию аддиктивного заболевания или расстройства по сравнению с субъектом с С-аллелем;

    b) определение, имеет ли ген переносчика серотонина БЬС6А4 тестируемого субъекта ЬЬ-генотип связанной с переносчиком серотонина полиморфной области 5-НТТЬРК;

    при этом присутствие ЬЬ-генотипа является показателем того, что тестируемый субъект имеет предрасположенность к развитию аддиктивного заболевания или расстройства;

    корреляцию результатов двух методов анализа, по которым прогнозируется предрасположенность субъекта к развитию аддиктивного заболевания или расстройства.
16. 16. Способ по п.15, отличающийся тем, что указанное аддиктивное заболевание или расстройство выбирают из группы, состоящей из заболеваний и расстройств, связанных с употреблением алкоголя, заболеваний и расстройств, обусловленных ожирением, расстройств пищевого поведения, расстройств контроля над побуждениями, расстройств, связанных с употреблением никотина, расстройств, вызванных употреблением амфетаминов, расстройств, вызванных употреблением метамфетамина, расстройств, вызванных употреблением марихуаны, расстройств, вызванных употреблением кокаина, расстройств, вызванных употреблением галлюциногенов, расстройств, вызванных употреблением ингалянтов, расстройств, вызванных злоупотреблением бензодиазепином или зависимостью от бензодиазепина, расстройств, вызванных злоупотреблением опиоидами, игромании, компьютерной и электронной зависимости.
17. 17. Способ по п.16, отличающийся тем, что указанное заболевание или расстройство, связанное с употреблением алкоголя, выбирают из группы, состоящей из раннего алкоголизма, позднего алкоголизма, вызванного злоупотреблением алкоголем психотического расстройства с бредом, алкоголемании (неудержимого стремления к пьянству), пьянства в тяжелой форме, чрезмерного употребления алкоголя, алкогольной интоксикации, алкогольной абстиненции, белой горячки вследствие алкогольной интоксикации (алкогольного делирия), белой горячки вследствие алкогольной абстиненции, алкогольной персистирующей деменции, алкогольного персистирующего амнестического расстройства, алкогольной зависимости, алкогольного психотического расстройства с галлюцинациями, вызванного употреблением алкоголя аффективного расстройства, вызванного или ассоциированного с алкоголем биполярного расстройства, вызванного или ассоциированного с алкоголем посттравматического стресса, тревожного расстройства алкогольного генеза, сексуальной дисфункции алкогольного генеза, вызванного или ассоциированного с алкоголем расстройства сна, вызванной или ассоциированной с алкоголем игромании, вызванного или ассоциированного с алкоголем сексуального расстройства, алкогольного расстройства без дополнительных уточнений, алкогольной интоксикации и алкогольной абстиненции.
18. 18. Способ прогнозирования ответа тестируемого субъекта на лечение аддиктивного заболевания или расстройства, заключающийся в получении биологического образца от тестируемого субъекта и анализе образца двумя методами анализа, включающими:

    a) определение, имеет ли ген переносчика серотонина БЬС6А4 тестируемого субъекта ЬЬ-генотип функционального полиморфизма связанной с переносчиком серотонина полиморфной области 5НТТЬРК;

    причем присутствие ЬЬ-генотипа является показателем того, что ответ тестируемого субъекта на лечение будет отличаться от ответа на лечение субъекта с Ь/Б- или ББ-генотипом;

    b) определение, имеет ли субъект С-аллель или он является гомозиготным по Т-аллелю единичного нуклеотидного полиморфизма г>1042173 гена переносчика серотонина БЬС6А4;

    причем присутствие С-аллеля является показателем того, что тестируемый субъект имеет понижен

    - 62 019200 ную предрасположенность к лечению (реакцию на лечение) аддиктивного заболевания или расстройства по сравнению с субъектом с Т-аллелем;

    при этом присутствие Т-аллеля у тестируемого субъекта является показателем того, что тестируемый субъект имеет повышенную предрасположенность к лечению аддиктивного заболевания или расстройства по сравнению с субъектом с С-аллелем, и показателем того, что у субъекта пониженные уровни экспрессии гена переносчика серотонина δΕί.'6Λ4;

    корреляцию результатов двух методов анализа, по которым прогнозируют ответ субъекта на лечение аддиктивного заболевания или расстройства.
19. 19. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанное аддиктивное заболевание или расстройство выбирают из группы, состоящей из заболеваний и расстройств, связанных с употреблением алкоголя, заболеваний и расстройств, обусловленных ожирением, расстройств пищевого поведения, расстройств контроля над побуждениями, расстройств, связанных с употреблением никотина, расстройств, вызванных употреблением амфетаминов, расстройств, вызванных употреблением метамфетамина, расстройств, вызванных употреблением марихуаны, расстройств, вызванных употреблением кокаина, расстройств, вызванных употреблением галлюциногенов, расстройств, вызванных употреблением ингалянтов, расстройств, вызванных злоупотреблением бензодиазепином или зависимостью от бензодиазепина, расстройств, вызванных злоупотреблением опиоидами, игромании, компьютерной и электронной зависимости.
20. 20. Способ по п.19, отличающийся тем, что указанное заболевание или расстройство, связанное с употреблением алкоголя, выбирают из группы, состоящей из раннего алкоголизма, позднего алкоголизма, вызванного злоупотреблением алкоголем психотического расстройства с бредом, алкоголемании (неудержимого стремления к пьянству), пьянства в тяжелой форме, чрезмерного употребления алкоголя, алкогольной интоксикации, алкогольной абстиненции, белой горячки вследствие алкогольной интоксикации (алкогольного делирия), белой горячки вследствие алкогольной абстиненции, алкогольной персистирующей деменции, алкогольного персистирующего амнестического расстройства, алкогольной зависимости, алкогольного психотического расстройства с галлюцинациями, вызванного употреблением алкоголя аффективного расстройства, вызванного или ассоциированного с алкоголем биполярного расстройства, вызванного или ассоциированного с алкоголем посттравматического стресса, тревожного расстройства алкогольного генеза, сексуальной дисфункции алкогольного генеза, вызванного или ассоциированного с алкоголем расстройства сна, вызванной или ассоциированной с алкоголем игромании, вызванного или ассоциированного с алкоголем сексуального расстройства, алкогольного расстройства без дополнительных уточнений, алкогольной интоксикации и алкогольной абстиненции.
21. 21. Способ по п.20, отличающийся тем, что указанное лечение понижает уровни или активность серотонина.
22. 22. Способ по п.19, отличающийся тем, что указанный ответ представляет собой уменьшение употребления алкоголя.
23. 23. Способ по п.22, отличающийся тем, что указанное уменьшение употребления алкоголя выбирают из группы, состоящей из уменьшения пьянства в тяжелой форме, количества доз/день и количества доз/день запоя.
24. 24. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанный способ позволяет прогнозировать ответ на лечение по меньшей мере одним лекарством, которое регулирует серотониновую систему.
25. 25. Способ по п.24, отличающийся тем, что указанное по меньшей мере одно лекарство представляет собой антагонист серотонинового рецептора 5-НТ₃, в частности ондансетрон.
26. 26. Способ лечения субъекта, страдающего аддиктивным заболеванием или расстройством, включающий получение биологического образца от субъекта;

    проведение двух анализов образца, причем анализы выбраны из группы анализов, состоящей из количественного определения уровня экспрессии гена переносчика серотонина δΕί.'6Λ4 в образце, полученном от тестируемого субъекта, и сравнения уровня экспрессии в образце, полученном от тестируемого субъекта, с уровнем экспрессии в образце, полученном от контрольного субъекта, или со стандартным образцом с известным уровнем экспрессии гена переносчика серотонина δΕί.'6Λ4, определения, имеет ли ген переносчика серотонина δΕί.'6Λ4 тестируемого субъекта ЬЬ-генотип функционального полиморфизма связанной с переносчиком серотонина полиморфной области 5-НТТЬРК, и определения, имеет ли субъект С-аллель или он является гомозиготным по Т-аллелю единичного нуклеотидного полиморфизма гк1042173 гена переносчика серотонина δΕί.’6Λ4;

    планирование схемы лечения на основе результатов двух анализов;

    лечение субъекта в соответствии со схемой лечения.
27. 27. Способ по п.26, отличающийся тем, что указанное аддиктивное заболевание или расстройство выбирают из группы, состоящей из заболеваний и расстройств, связанных с употреблением алкоголя, заболеваний и расстройств, обусловленных ожирением, расстройств пищевого поведения, расстройств контроля над побуждениями, расстройств, связанных с употреблением никотина, расстройств, вызванных употреблением амфетаминов, расстройств, вызванных употреблением метамфетамина, расстройств,

    - 63 019200 вызванных употреблением марихуаны, расстройств, вызванных употреблением кокаина, расстройств, вызванных употреблением галлюциногенов, расстройств, вызванных употреблением ингалянтов, расстройств, вызванных злоупотреблением бензодиазепином или зависимостью от бензодиазепина, расстройств, вызванных злоупотреблением опиоидами, игромании, компьютерной и электронной зависимости.
28. 28. Способ по п.27, отличающийся тем, что указанное заболевание или расстройство, связанное с употреблением алкоголя, выбирают из группы, состоящей из раннего алкоголизма, позднего алкоголизма, вызванного злоупотреблением алкоголем психотического расстройства с бредом, алкоголемании (неудержимого стремления к пьянству), пьянства в тяжелой форме, чрезмерного употребления алкоголя, алкогольной интоксикации, алкогольной абстиненции, белой горячки вследствие алкогольной интоксикации (алкогольного делирия), белой горячки вследствие алкогольной абстиненции, алкогольной персистирующей деменции, алкогольного персистирующего амнестического расстройства, алкогольной зависимости, алкогольного психотического расстройства с галлюцинациями, вызванного употреблением алкоголя аффективного расстройства, вызванного или ассоциированного с алкоголем биполярного расстройства, вызванного или ассоциированного с алкоголем посттравматического стресса, тревожного расстройства алкогольного генеза, сексуальной дисфункции алкогольного генеза, вызванного или ассоциированного с алкоголем расстройства сна, вызванной или ассоциированной с алкоголем игромании, вызванного или ассоциированного с алкоголем сексуального расстройства, алкогольного расстройства без дополнительных уточнений, алкогольной интоксикации и алкогольной абстиненции.
29. 29. Способ по п.26, отличающийся тем, что количественно определяют уровни мРНК 8ЬС6А4.
30. 30. Способ по п.26, отличающийся тем, что количественно определяют уровни или активность белка 8БС6А4.
31. 31. Способ по п.29, отличающийся тем, что уровень экспрессии в образце, полученном от тестируемого субъекта, является повышенным уровнем.
32. 32. Способ по п.30, отличающийся тем, что уровень экспрессии или активности в образце, полученном от тестируемого субъекта, является повышенным уровнем.
33. 33. Способ по п.26, отличающийся тем, что повышенный уровень экспрессии гена переносчика серотонина 8ЬС6А4 ассоциируется с ЬЬ-генотипом связанной с переносчиком серотонина полиморфной области 5-НТТЬРК.
34. 34. Способ по п.33, отличающийся тем, что ЬЬ-генотип является прогностическим фактором употребления алкоголя в раннем возрасте, или длительности употребления алкоголя, или поведенческой восприимчивости, повышенной чувствительности к лечению по меньшей мере одним лекарством, которое регулирует серотониновую систему, по сравнению с Ь8- или 88-генотипами.
35. 35. Способ по п.34, отличающийся тем, что указанное по меньшей мере одно лекарство представляет собой антагонист серотонинового рецептора 5-НТ₃, в частности ондансетрон.
36. 36. Способ по п.26, отличающийся тем, что схема лечения субъекта, страдающего аддиктивным заболеванием или расстройством, включает введение фармацевтической композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и эффективное количество по меньшей мере одного соединения, применимого для лечения аддиктивного заболевания или расстройства.
37. 37. Способ по п.36, отличающийся тем, что указанная схема лечения снижает частоту или количество употребления алкоголя по сравнению с частотой или количеством до указанного лечения или по сравнению с контрольным субъектом, не получающим указанного лечения.
38. 38. Способ по п.37, отличающийся тем, что указанное употребление алкоголя представляет собой пьянство в тяжелой форме или чрезмерное употребление алкоголя.
39. 39. Способ по п.36, отличающийся тем, что указанное лечение улучшает физические или психологические последствия (осложнения), ассоциированные с употреблением алкоголя, по сравнению с контрольным субъектом, не получающим указанного лечения.
40. 40. Способ по п.36, отличающийся тем, что указанное лечение повышает уровень абстиненции (периода воздержания) у указанного субъекта по сравнению с контрольным субъектом, не получающим указанного лечения.
41. 41. Способ по п.36, отличающийся тем, что у указанного субъекта имеется предрасположенность к раннему алкоголизму или позднему алкоголизму.
42. 42. Способ по п.36, отличающийся тем, что указанный субъект дополнительно получает лечение с применением методов психосоциальной терапии.
43. 43. Способ по п.42, отличающийся тем, что указанные методы психосоциальной терапии выбирают из группы, состоящей из кратких процедур поведенческой терапии, повышающей комплаенс (приверженность лечению), когнитивно-поведенческой терапии, копирования навыков, терапии, повышающей мотивацию, терапии 12 шагов, комбинированного поведенческого вмешательства, медицинской коррекции, психоанализа, психодинамического лечения и биопсихосоциального подхода, отчета, эмпатии (сопереживания), требований, рекомендаций, непосредственной помощи и оценки (Вюркусйокоаак Керой, Етра1йу, №е6к, Эйес! а6у1се апб Аккекктей (ВКЕИБА)).
44. 44. Способ по п.36, отличающийся тем, что указанный субъект получает дополнительное лечение,

    - 64 019200 включающее гипноз и акупунктуру.
45. 45. Способ по п.36, отличающийся тем, что по меньшей мере одно из соединений вводят по меньшей мере один раз в неделю предпочтительно по меньшей мере один раз в сутки.
46. 46. Способ по п.45, отличающийся тем, что по меньшей мере одно из соединений представляет собой антагонист серотонинового рецептора (рецептора серотонина), в частности серотониновый 3рецептор.
47. 47. Способ по п.26, отличающийся тем, что схема лечения включает введение субъекту эффективного количества по меньшей мере одного соединения или его биологически активных аналогов, производных, модификаций или фармацевтически приемлемых солей, причем по меньшей мере одно из указанных соединений выбирают из группы, состоящей из серотонинергических агентов, антагонистов серотонина, селективных ингибиторов обратного захвата серотонина, антагонистов серотониновых рецепторов, опиоидных антагонистов, дофаминергических агентов, ингибиторов высвобождения дофамина, антагонистов дофамина, антагонистов норэпинефрина, агонистов γ-аминомасляной кислоты, ингибиторов γ-аминомасляной кислоты, антагонистов рецепторов γ-аминомасляной кислоты, антагонистов каналов γ-аминомасляной кислоты, агонистов глутамата, антагонистов глутамата, агонистов глутамина, антагонистов глутамина, противосудорожных агентов, Ν-метил-Э-аспартат-блокирующих агентов, антагонистов кальциевых каналов, ингибиторов карбонатдегидрогеназы, нейрокининов, низкомолекулярных соединений, пептидов, витаминов, кофакторов и антагонистов кортикостероид-рилизинг фактора, и, необязательно, введение по меньшей мере одного дополнительного терапевтически активного соединения, тем самым лечение или предупреждение аддиктивного заболевания или расстройства у субъекта.
48. 48. Способ по п.47, отличающийся тем, что по меньшей мере одно соединение вводят путем, выбранным из группы, состоящей из перорального, топического (наружного), ректального, внутримышечного, интрамукозного и внутривенного путей введения.
49. 49. Способ по п.36, отличающийся тем, что вводят эффективные количества по меньшей мере двух соединений.
50. 50. Способ по п.36, отличающийся тем, что указанная схема лечения включает введение ондансетрона.
51. 51. Способ по п.50, отличающийся тем, что ондансетрон вводят в интервалах доз примерно от 0,01 примерно до 100 мкг/кг на прием, предпочтительно от 0,1 примерно до 10,0 мкг/кг на прием, более предпочтительно от 1,0 примерно до 5,0 мкг/кг на прием, наиболее предпочтительно 4,0 или примерно 3,0 мкг/кг на прием.
52. 52. Способ по п.50, отличающийся тем, что ондансетрон вводят по меньшей мере один раз в неделю, предпочтительно один раз в сутки.
53. 53. Способ по п.47, отличающийся тем, что указанному субъекту дополнительно вводят по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из адренергетиков, адренокортикоидных стероидов, супрессоров коры надпочечников, антагонистов альдостерона, аминокислот, аналептиков, анальгетиков, аноректиков, анорексиков, седативных агентов, антидепрессантов, гипотензивных агентов, противовоспалительных агентов, противорвотных агентов, агентов против нейтропении, агентов против навязчивых состояний (антиобсессионных агентов), агентов против паркинсонизма, антипсихотических агентов, супрессоров аппетита, регуляторов уровня глюкозы в крови, ингибиторов карбонатдегидрогеназы, кардиотонических агентов, сердечно-сосудистых агентов, желчегонных агентов, холинергических агентов, агонистов холинергических агентов, дезактиваторов холинэстеразы, адъювантов для когнитивной функции, когнитивных энхансеров, гормонов, адъювантов памяти, энхансеров (усилителей) умственной деятельности, регуляторов настроения, нейролептиков, нейропротекторов, психотропных агентов, миелорелаксантов, седативно-гипнотических агентов, стимуляторов, тиреоидных гормонов, ингибиторов тиреоидных гормонов, тиреомиметиков, агентов против церебральной ишемии, сосудосуживающих и сосудорасширяющих агентов.
54. 54. Способ по п.47, отличающийся тем, что, если вводят по меньшей мере два соединения, эффект указанных по меньшей мере двух соединений является аддитивным или синергетическим.
55. 55. Способ по п.47, отличающийся тем, что указанное лечение снижает активность дофамина в мезокортиколимбической системе.
56. 56. Способ по п.47, отличающийся тем, что указанное лечение ингибирует функцию глутамата.
57. 57. Способ по п.47, отличающийся тем, что указанное лечение содействует активности γаминомасляной кислоты.
58. 58. Способ по п.47, отличающийся тем, что дополнительное по меньшей мере одно соединение, вводимое указанному субъекту, выбирают из группы, состоящей из налтрексона, топирамата, дисульфирама, акампросата, сертралина, галантамина, налмефена, налоксона, дезоксипеганина, бензодиазепинов, нейролептиков, рисперидона, римонабата, тразодона и арипипразола.
59. 59. Способ по п.26, отличающийся тем, что определение ЬЬ- и ТТ-генотипов у субъекта является прогностическим фактором повышенной восприимчивости к ондансетрону.
60. 60. Применение антагониста серотонинового рецептора 5-НТ3 для лечения субъекта с аддиктивным

    - 65 019200 заболеванием или расстройством, где о пациенте известно, что он является гомозиготным по Т-аллелю единичного нуклеотидного полиморфизма гк1042173 гена переносчика серотонина 8БС6А4.
61. 61. Применение по п.60, где о пациенте дополнительно известно, что он имеет ЬЬ-генотип функционального полиморфизма связанной с переносчиком серотонина полиморфной области 5-НТТЬРВ гена переносчика серотонина 8БС6А4.
62. 62. Применение по п.60 или 61, где указанное аддиктивное заболевание или расстройство выбирают из группы, состоящей из заболеваний и расстройств, связанных с употреблением алкоголя, заболеваний и расстройств, обусловленных ожирением, расстройств пищевого поведения, расстройств контроля над побуждениями, расстройств, связанных с употреблением никотина, расстройств, вызванных употреблением амфетаминов, расстройств, вызванных употреблением метамфетамина, расстройств, вызванных употреблением марихуаны, расстройств, вызванных употреблением кокаина, расстройств, вызванных употреблением галлюциногенов, расстройств, вызванных употреблением ингалянтов, расстройств, вызванных злоупотреблением бензодиазепином или зависимостью от бензодиазепина, расстройств, вызванных злоупотреблением опиоидами, игромании, компьютерной и электронной зависимости.
63. 63. Применение по п.62, где указанное аддиктивное заболевание или расстройство представляет собой заболевание или расстройство, связанное с употреблением алкоголя.
64. 64. Применение по п.63, где указанное заболевание или расстройство, связанное с употреблением алкоголя, выбирают из группы, состоящей из раннего алкоголизма, позднего алкоголизма, вызванного злоупотреблением алкоголем психотического расстройства с бредом, алкоголемании (неудержимого стремления к пьянству), пьянства в тяжелой форме, чрезмерного употребления алкоголя, алкогольной интоксикации, алкогольной абстиненции, белой горячки вследствие алкогольной интоксикации (алкогольного делирия), белой горячки вследствие алкогольной абстиненции, алкогольной персистирующей деменции, алкогольного персистирующего амнестического расстройства, алкогольной зависимости, алкогольного психотического расстройства с галлюцинациями, вызванного употреблением алкоголя аффективного расстройства, вызванного или ассоциированного с алкоголем биполярного расстройства, вызванного или ассоциированного с алкоголем посттравматического стресса, тревожного расстройства алкогольного генеза, сексуальной дисфункции алкогольного генеза, вызванного или ассоциированного с алкоголем расстройства сна, вызванной или ассоциированной с алкоголем игромании, вызванного или ассоциированного с алкоголем сексуального расстройства, алкогольного расстройства без дополнительных уточнений, алкогольной интоксикации и алкогольной абстиненции.
65. 65. Применение по п.60 или 61, где антагонист снижает частоту употребления алкоголя по сравнению с частотой до получения антагониста или по сравнению с контрольным субъектом, не получавшим антагонист.
66. 66. Применение по п.65, где указанное употребление алкоголя включает пьянство в тяжелой форме или чрезмерное употребление алкоголя.
67. 67. Применение по п.60 или 61, где антагонист снижает количество употребляемого алкоголя по сравнению с количеством алкоголя, употребляемым до указанного лечения, или по сравнению с контрольным субъектом, не получавшим указанноое лечение.
68. 68. Применение по п.67, где указанное употребление алкоголя включает пьянство в тяжелой форме или чрезмерное употребление алкоголя.
69. 69. Применение по п.60 или 61, где антагонист повышает уровень абстиненции (периода воздержания) у указанного субъекта по сравнению с контрольным субъектом, не получавшим антагонист.
70. 70. Применение по п.60 или 61, где антагонист снижает употребление алкоголя и повышает абстиненцию (период воздержания) по сравнению с употреблением алкоголя и абстиненцией до получения антагониста или по сравнению с контрольным субъектом, не получавшим антагонист.
71. 71. Применение по п.60 или 61, где антагонист 5-НТ₃ представляет собой ондансетрон.
72. 72. Применение по п.71, где ондансетрон вводят в дозе от примерно 0,1 до примерно 10,0 мкг/кг на прием.
73. 73. Применение по п.72, где ондансетрон вводят в дозе от примерно 1,0 до примерно 5,0 мкг/кг на прием.
74. 74. Применение по п.73, где ондансетрон вводят в дозе примерно 4,0 или примерно 3,0 мкг/кг на прием.