EA018782B1 - Ингибиторы вируса гепатита с - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к композициям (4-4'-диимидазолил)бифенилов и способам лечения инфекции, вызванной вирусом гепатита С. Также раскрываются фармацевтические композиции, содержащие такие соединения и применение таких соединений для лечения инфекции, вызванной вирусом гепатита С.

Description

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение в целом направлено на антивирусные соединения, а именно - на соединения, которые могут подавлять функцию протеина Ν85Α, кодируемого вирусом гепатита С (ВГС (ИСУ)), композиции, содержащие такие соединения, а также методы подавления функции протеина Ν85Α.

Сведения о предшествующем уровне техники

ВГС (вирус гепатита С) является главным патогенным фактором для человека, вызывающим инфекцию у приблизительно 170 миллионов человек по всему миру - приблизительно в пять раз больше, чем число людей, инфицированных вирусом иммунодефицита человека 1 типа. У значительной доли данных ВГС-инфицированных людей развивается серьезное прогрессирующее заболевание печени, включая цирроз и гепатоцеллюлярный рак.

В настоящее время наиболее эффективный метод лечения ВГС заключается в применении комбинации интерферона альфа и рибаварина, что приводит к длительному эффекту у 40% пациентов. Последние клинические исследования показывают, что пегилированный интерферон альфа более эффективен, чем немодифицированный интерферон альфа при использовании в качестве монотерапии. Однако даже при использовании экспериментальных режимов лечения с применением комбинаций пегилированного интерферона альфа и рибаварина у существенной доли пациентов не наблюдается длительно сохраняющегося уменьшения вирусной нагрузки. Таким образом, в течение многих лет существует очевидная необходимость в создании эффективных терапевтических средств для лечения инфекции ВГС.

ВГС - это РНК-содержащий вирус с положительной цепью. На основании выведенной последовательности аминокислот и значительного подобия 5' нетранслируемой области ВГС был выделен в отдельный класс, принадлежащий семейству Флавивирусов (Е1ау1ушбае). Все вирусы данного семейства имеют заключенные в оболочку вирионы, которые содержат геном на основе положительной цепи РНК, кодирующий все известные вирус-специфические протеины путем трансляции одиночной, непрерывной, открытой рамки считывания.

Была обнаружена значительная гетерогенность внутри нуклеотида, а также кодированная последовательность аминокислот по всему геному ВГС. Было охарактеризовано как минимум шесть основных генотипов, а также описано более 50 подтипов. Распространенность основных генотипов ВГС по всему миру различна, поэтому клиническая значимость генетической гетерогенности ВГС все еще с трудом поддается определению несмотря на многочисленные исследования возможного влияния генотипов на патогенез и лечение.

Одиночная нить РНК генома ВГС составляет около 9500 нуклеотидов в длину, а также имеет одиночную открытую рамку считывания (ОРС), кодирующую одиночный крупный протеин, состоящий из приблизительно 3000 аминокислот. В инфицированных клетках данный протеин разделяется во многих областях клеточными и вирусными протеазами для продуцирования структурных и неструктурных (НС) протеинов. В случае с ВГС генерирование зрелых неструктурных протеинов (N82. N83, Ν84Α, Ν84Β, Ν85Α и Ν85Β) осуществляется при помощи двух вирусных протеаз. Первая протеаза, скорее всего, является металлопротеазой и разделяет соединение Ν82-Ν83, вторая является сериновой протеазой, которая содержится в области Ν-терминала Ν83 (также упоминается как Ν83 протеаза) и является посредником во всех последующих расщеплениях после Ν83, как цис (в месте разрыва Ν83-Ν84Α), так и транс (для оставшихся областей Ν84Α-Ν84Β, Ν84Β-Ν85Α, Ν85Α-Ν85Β). Ν84Α протеин выполняет множественные функции, действуя как кофактор для. Ν83 протеазы и, возможно, способствуя мембранной локализации Ν83 и других вирусных соединений, участвующих в репликации. Комплексная структура Ν83 протеина и Ν84Α кажется необходимой для осуществления данных процессов, поскольку усиливает протеолитическую активность для всех областей Ν83 протеин также проявляет активность как нуклеозидтрифосфатаза и РНК-хеликаза. Ν85Β (также упоминается как ВГС полимераза) является РНК-зависимой РНК полимеразой, которая вовлечена в процесс репликации ВГС.

Желательно, чтобы соединения, полезные при лечении ВГС-инфицированных пациентов, избирательно подавляли репликацию вируса ВГС. В частности, предпочтительно применение соединений, эффективных в отношении подавления функции Ν85Α протеина. Описание Ν85Α протеин ВГС содержится, например, в Тап, 8.-Ь., Каке! М С - У1то1оду 2001, 284, 1-12 и в Рагк, К.-Т, Сйо1, 8.-Н.-Г Вю1ощса1 Сйетщйу, 2003.

Сущность изобретения

В первом аспекте настоящее изобретение относится к соединению, выбранному из диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((18)-2-метил-1,1-пропандиил)имино((28)-1оксо-1,2-пропандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((18)-2-метил-1,1-пропандиил)имино((28,3В)3-метокси-1-оксо-1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((18)-2-метил-1,1 -пропандиил)имино((28)-3 метил-1-оксо-1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((18)-2-метил-1,1-пропандиил)имино((28)-4метокси-1 -оксо - 1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((1В)-2-метил-1,1-пропандиил)имино((28)-3

- 1 018782 метил-1-оксо-1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((1В)-2-метил-1,1 -пропандиил)имино((28)-1оксо-1,2-пропандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((1В)-2-метил-1,1-пропандиил)имино((28)-4метокси-1 -оксо - 1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((1В)-2-метил-1,1-пропандиил)имино((28,3В)3 -метокси-1 -оксо-1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((1В)-2-метил-1,1 -пропандиил)имино((2К)-3 метил-1 -оксо-1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((18)-2-метил-1,1-пропандиил)имино((2В)-3метил-1 -оксо-1,2-бутандиил)))бискарбамата,

М²-(метоксикарбонил)-Ы-((18)-1-(4-(4'-(2-((28)-1-(М-(метоксикарбонил)-Ь-валил)-2-пирролидинил)1Н-имидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-2-метилпропил)-Ь-валинамида;

метил ((18,2К)-2-метокси-1-(((28)-2-(4-(4'-(2-((18)-1-((Ы-(метоксикарбонил)-О-метил-Ь-треонил) амино)-2-метилпропил)-1Н-имидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-1-пирролидинил)карбонил)пропил)карбамата;

метил ((18)-3-метокси-1-(((28)-2-(4-(4'-(2-((18)-1-((М-(метоксикарбонил)-О-метил-Ь-гомосерил)амино)-2-метилпропил)-1Н-имидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-1-пирролидинил)карбонил) пропил)карбамата;

метил ((18)-2-((28)-2-(4-(4'-(2-((18)-1-((М-(метоксикарбонил)-Ь-аланил)амино)-2-метилпропил)-1Нимидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-1-пирролидинил)-1-метил-2-оксоэтил)карбамата;

М²-(метоксикарбонил)-Ы-((1К)-1-(4-(4'-(2-((28)-1-(М-(метоксикарбонил)-Ь-валил)-2-пирролидинил)1Н-имидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-2-метилпропил)-Ь-валинамида;

метил ((18,2К)-2-метокси-1-(((28)-2-(4-(4'-(2-((1К)-1-((Ы-(метоксикарбонил)-О-метил-Ь-треонил) амино)-2-метилпропил)-1Н-имидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-1-пирролидинил)карбонил)пропил)карбамата, метил ((18)-3-метокси-1-(((28)-2-(4-(4'-(2-((1В)-1-((Ы-(метоксикарбонил)-О-метил-Ь-гомосерил) амино)-2-метилпропил)-1Н-имидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-1-пирролидинил)карбонил)пропил)карбамата, метил ((18)-2-((28)-2-(4-(4'-(2-((1К)-1-((Ы-(метоксикарбонил)-Ь-аланил)амино)-2-метилпропил)-1Нимидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-1-пирролидинил)-1-метил-2-оксоэтил)карбамата, или фармацевтически приемлемой соли этих соединений.

Во втором аспекте настоящее изобретение относится к соединению, выбранному из

или фармацевтически приемлемой соли этих соединений.

- 2 018782

В третьем аспекте настоящее изобретение относится к фармацетвической композиции, содержащей соединение, относящееся к первому или второму аспекту настоящего изобретения, или фармацевтически приемлемую соль данного соединения, а также фармацевтически приемлемый носитель. В первом варианте осуществления третьего аспекта соединение содержит одно или два дополнительных соединения, обладающих противовирусной активностью в отношении ВГС. Во втором варианте осуществления третьего аспекта как минимум одно из дополнительных соединений является интерфероном или рибавирином. В третьем варианте осуществления третьего аспекта интерферон выбран из группы, состоящей из интерферона альфа 2В, пегилированного интерферона альфа, консенсусного интерферона, интерферона альфа 2А и лимфобластоидного интерферона тау.

В четвертом варианте осуществления третьего аспекта настоящего изобретения как минимум одно из дополнительных соединений выбрано из группы, состоящей из интерлейкина 2, интерлейкина 6, интерлейкина 12, соединения, которое стимулирует развитие ответа Т-хелперов I типа, интерферирующей РНК, антисмысловой РНК, имиквимода, рибавирина и ингибитора инозин-5'-монофосфат-дегидрогеназы, амантадина и ремантадина.

В пятом варианте осуществления третьего аспекта настоящего изобретения как минимум одно из дополнительных соединений эффективно подавляет функцию мишени, выбранной из группы, состоящей из металлопротеазы, сериновых протеаз, полимераз и хеликаз ВГС, протеина Ν84Β, а также посадки ВГС, сборки ВГС, выхода ВГС, протеина Ν85Α ВГС, а также инозин-монофосфат-дегидрогеназы (ИМФДГ) для лечения гепатита С.

В четвертом аспекте осуществления настоящего изобретения представлен способ лечения инфекции, вызванной ВГС, у пациентов, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения, относящегося к первому и второму аспектам настоящего изобретения, или его фармацевтически приемлемой соли. В первом варианте осуществления четвертого аспекта способ включает введение одного или двух дополнительных соединений, обладающих противовирусной активностью в отношении ВГС до, после или одновременно с соединением, относящимся к первому и второму аспектам настоящего изобретения, или его фармацевтически приемлемой солью. Во втором варианте осуществления четвертого аспекта по меньшей мере одно из дополнительных соединений является интерфероном или рибавирином. В третьем варианте осуществления четвертого аспекта интерферон выбран из группы, состоящей из интерферона альфа 2В, пегилированного интерферона альфа, консенсусного интерферона, интерферона альфа 2А и лимфобластоидного интерферона тау.

В четвертом варианте осуществления четвертого аспекта настоящего изобретения представлен способ лечения ВГС у пациентов, в котором как минимум одно из дополнительных соединений выбрано из группы, состоящей из интерлейкина 2, интерлейкина 6, интерлейкина 12, соединения, которое стимулирует развитие ответа Т-хелперов I типа, интерферирующей РНК, антисмысловой РНК, имиквимода, рибавирина, а также ингибитора инозин-5'-монофосфат-дегидрогеназы, амантадина и римантадина.

В пятом варианте осуществления четвертого аспекта настоящего изобретения представлен способ лечения ВГС у пациентов в котором как минимум одно из дополнительных соединений эффективно подавляет функцию мишени, выбранной из группы, состоящей из металлопротеаз, сериновых протеаз, полимераз и хеликаз ВГС, протеина Ν84Β, а также посадки ВГС, сборки ВГС, выхода ВГС, протеина Ν85Α ВГС, а также ИМФДГ для лечения гепатита С.

Другие варианты осуществления настоящего изобретения могут включать приемлемые сочетания двух или более вариантов и(или) аспектов, описанных выше.

Тем не менее, как будет показано далее, возможны и другие варианты и аспекты приведенного изобретения.

Соединения настоящего изобретения могут существовать и в форме таутомеров, поэтому данное описание охватывает также все таутомерные формы.

Необходимо понимать, что соединения, охватываемые настоящим описанием, относятся к обладающим стабильностью, приемлемой для использования в качестве фармацевтических агентов.

Все патенты, заявки на получение патента, а также литературные источники, упоминаемые в описании, включены в настоящее описание посредствм отсылки. В случае возникновения противоречий следует руководствоваться настоящим описанием, включая определения терминов.

Термины, используемые в данном описании, имеют следующие значения.

Термины Структура и структура в данном описании относятся к группе, которая помещается на атом азота терминального азотсодержащего кольца, например пирролидиновых колец соединения настоящего изобретения. Необходимо понимать, что Структура и структура могут относиться к реагенту, используемому для присоединения группы к терминальному азотсодержащему кольцу или фрагменту в готовом продукте, например Структура-51 или Фрагмент структуры-51, описанный в примере 5.

В соединениях настоящего описания существуют асимметричные центры. Данные центры обозначены символом В или 8, в зависимости от конфигурации заместителей вокруг хирального атома углерода. Необходимо понимать, что описание охватывает все стереохимические изомерные формы или их комбинации, обладающие способностью ингибировать Ν85Α. Отдельные стереоизомеры соединений могут быть изготовлены синтетически из коммерчески доступных исходных материалов, содержащих

- 3 018782 хиральные центры, или путем приготовления смесей энантиомерных продуктов с последующим их разделением путем преобразования в комбинацию диастереомеров с последующим разделением или вторичной кристаллизацией, хроматографическими методами или путем прямого разделения энантиомеров на хиральных хроматографических колонках Исходные соединения конкретной стереохимии либо являются коммерчески доступными на рынке, либо могут быть изготовлены и получены с помощью общеизвестных методов.

Некоторые соединения, охватываемые настоящим описанием, могут также существовать в различных стабильных конформационных формах, которые могут быть разделены. Асимметрия поворота связей, связанная с ограниченным вращением вокруг асимметричной одинарной связи, например, вследствие пространственного затруднения или напряжения кольца, позволяет осуществлять разделение различных конформеров. В настоящее описание включены все конформационные изомеры данных соединений и их комбинаций.

Термин соединения, охватываемые настоящим описанием и эквивалентные выражения, охватывает соединения настоящего изобретения, фармацевтически приемлемые энантиомеры, диастереомеры и их соли. Подобным образом, в тех случаях, когда исходя из контекста, это является приемлемым, ссылки на промежуточные химические соединения охватывают все их соли.

Соединения, охватываемые настоящим описанием, могут существовать в виде фармацевтически приемлемых солей. Термин фармацевтически приемлемая соль в данном описании относится к солям или цвиттер-ионным формам соединений, охватываемых настоящим описанием, которые растворимы в воде или масле или диспергируемы, и которые, на основании общепринятой медицинской оценки, пригодны для применения при контакте с тканями пациентов, т.е. не имеют значительного токсического воздействия, не вызывают раздражения, аллергических реакций, других проблем или осложнений, соразмерно целесообразному соотношению ожидаемой пользы/риска, и являются эффективными при их использовании по назначению. Соли могут быть приготовлены на этапе окончательного выделения в чистом виде и очистки соединения или же отдельно, путем вступления в реакцию с подходящим атомом азота с использованием соответствующей кислоты. Кислотно-аддитивные соли включают ацетат, адипат, альгинат, цитрат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, диглюконат, дигидробромид, дигидрохлорид, дигидроиодид, глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, формиат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактат, малеат, мезитиленсульфонат, метансульфонат, нафтиленсульфонат, никотинат, 2-нафталинсульфонат, оксалат, пальмоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпроприонат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, тартрат, трихлороацетат, трифтороацетат, фосфат, глютамат, двууглекислая соль, пара-толуолсульфонат и ундеканоат. Примеры кислот, которые могут использоваться для формирования фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей, включают неорганические кислоты, такие как соляная, бромистоводородная, серная и фосфорная, и органические кислоты, такие как щавелевая, малеиновая, янтарная и лимонная.

Основные кислотно-аддитивные соли могут быть приготовлены во время этапа окончательного выделения в чистом виде и очистки соединения путем вступления в реакцию карбоксильной группы с соответствующим основанием, таким как гидроксид, карбонат или бикарбонат катиона металла, или с аммиаком, или органическим первичным, вторичным или третичным амином. Катионы фармацевтически приемлемых солей включают в себя литий, натрий, калий, кальций, магний и алюминий, а также катионы нетоксичных четвертичных аминов, таких как аммоний, тетраметиламмоний, тетраэтиламмоний, метиламин, диметиламин, триметиламин, триэтиламин, диэтиламин, этиламин, трибутиламин, пиридин, И,И-диметиланилин, И-метилпиперидин, И-метилморфолин, дициклогексиламин, прокаин, дибензиламин, И,И-дибензилфенетиламин и Ν,Ν'-дибензилэтилендиамин. Другие органические амины, которые могут использоваться для формирования основы кислотно-аддитивных солей, включают в себя этилендиамин, этаноламин, диэтаноламин, пиперидин и пиперазин.

При использовании в терапевтических целях в тех случаях, когда это возможно, терапевтически эффективные дозы соединения настоящего изобретения, а также их фармацевтически приемлемые соли могут назначаться для применения в виде исходного химического вещества; при этом активный ингредиент может рассматриваться в качестве лекарственного препарата. В соответствии с этим, в дальнейшем в описании охватываются лекарственные препараты, которые включают терапевтически эффективные дозы соединения настоящего изобретения или их фармацевтически приемлемые соли, а также один или более фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или наполнителей. Термин терапевтически эффективная доза в данном описании относится к общему количеству каждого активного компонента, которое достаточно для выявления значимой пользы, приносимой пациенту, например снижения вирусной нагрузки. В отношении отдельного активного ингредиента, назначаемого отдельно, термин относится только к данному ингредиенту. Применительно к комбинации веществ, термин относится к общему количеству активных ингредиентов, которые приводят к возникновению терапевтического эффекта, вне зависимости от комбинированного, последовательного или одновременного способа их назначения. Описание соединений настоящего изобретения и их фармацевтически приемлемых солей приведено выше. Носитель(-и), разбавитель(-и) или наполнитель(-и) должны быть приемлемыми с точки зре

- 4 018782 ния совместимости с другими ингредиентами препарата и не должны оказывать вредного действия на лица, их принимающие. В соответствии с другим аспектом настоящего описания также приводится описание процесса для приготовления лекарственного препарата, включая введение добавок в соединение настоящего изобретения или их фармацевтически приемлемых солей, посредством одного или более фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или наполнителей. Термин фармацевтически приемлемые в данном описании относится к таким соединениям, материалам, композициям препаратов и(или) формам дозировки, которые, на основании общепринятой медицинской оценки, пригодны для применения при контакте с тканями пациентов и не вызывают чрезмерного токсического действия, раздражения, аллергических реакций, других проблем или осложнений, соразмерно целесообразному соотношению ожидаемой пользы/риска, и являются эффективными при их использовании по назначению.

Описание фармацевтического состава может быть представлено в форме однократной дозы, содержащей предварительно установленное количество активного ингредиента на единицу дозы. Уровни дозировки соединений настоящего описания от примерно 0,01 и до примерно 250 миллиграмм на килограмм массы тела (мг/кг) в сутки, предпочтительно от примерно 0,05 и до примерно 100 мг/кг массы тела в сутки, являются стандартными при проведении монотерапии с целью профилактики и лечения опосредованных ВГС заболеваний. Как правило, лекарственные препараты, охватываемые настоящим описанием, назначаются для приема от примерно 1 до примерно 5 раз в сутки или, в качестве альтернативы, в форме непрерывного вливания. Такое назначение может применяться при проведении лечения острых и хронических заболеваний. Количество активного ингредиента, которое может применяться в сочетании с материалами носителя с целью получения однократной лекарственной формы, может меняться в зависимости от состояния заболевания, степени тяжести заболевания, времени назначения препарата, способа введения, скорости вывода используемого соединения, длительности лечения, а также возраста, пола, веса и состояния здоровья пациента. Предпочтительными единицами дозировки препаратов являются дозировки, содержащие ежедневную дозу или субдозу активных ингредиентов, как приведено выше в настоящем документе, или их соответствующих долей. Проведение лечения может быть начато с невысоких уровней дозировки, значительно меньших, чем оптимальная доза соединения. Впоследствии, дозировка постепенно повышается с незначительным увеличением дозы до достижения оптимального эффекта в данных условиях. В целом, наиболее желательным способом назначения соединения является его введение с уровнем концентрации, который в целом позволяет достигнуть эффективного противовирусного результата, не причиняя при этом вреда или не вызывая вредных нежелательных явлений.

В случаях, когда композиции препаратов в настоящем описании содержат комбинацию соединений, охватываемых настоящим описанием, а также одно или более дополнительных терапевтических или профилактических веществ, как само соединение, так и дополнительные вещества обычно присутствуют с уровнями дозировки в диапазоне от примерно 10 до 150%, однако, более предпочтительный уровень составляет от примерно 10 до 80% от уровня дозировки, обычно назначаемой при проведении монотерапии.

Фармацевтические составы могут адаптироваться для введения одним из подходящих способов, например, в виде перорального приема (включая буккальный или подъязычный прием), ректального, назального, местного (включая буккальный или подъязычный прием, а также трансдермальное применение), вагинального или парентерального введения (включая подкожное, внутрикожное, внутримышечное, интраартикулярное, внутрисуставное, интрастернальное, интратекальное, введение внутрь поражённых тканей, внутривенные или внутрикожные инъекции или инфузии). Такие препараты могут изготавливаться любым известным в области фармакологии методом, например путем вступления в связь активного ингредиента с носителем(-ями) или наполнителем(-ями). Пероральное введение или инъекционное введение являются наиболее предпочтительными способами.

Фармацевтические составы, адаптированные для перорального введения, могут создаваться в форме дискретных компонентов в виде капсул или таблеток; порошков или гранул; растворов или суспензий в водных и неводных жидкостях; съедобных пен или взбитых масс; или жидких эмульсий типа масло-вводе или эмульсий типа вода-в-масле.

Например, для перорального введения в виде таблетки или капсулы, активное лекарственное вещество может быть скомбинировано с принимаемым перорально нетоксичным, фармацевтически приемлемым инертным носителем типа этанола, глицерина, воды и им подобным веществам. Приготовление порошков производится путем измельчения соединения в порошок до частиц подходящего размера и перемешивания со сходным образом измельченным фармацевтическим носителем типа съедобного углевода, например крахмала или маннитола. Также допускается присутствие ароматизаторов, консервантов, регуляторов сыпучести и окрашивающих веществ.

Капсулы изготавливаются путем приготовления порошковой смеси, как описано выше, и заполнения сформированных желатиновых оболочек. Перед началом выполнения операции заполнения в порошковые смеси могут добавляться регуляторы сыпучести и смазывающие вещества типа коллоидной окиси кремния, талька, магния стеарата, кальция стеарата или твердого полиэтиленгликоля. Для улучшения доступности медикамента при проглатывании капсулы, в состав могут также добавляться вещества,

- 5 018782 способствующие распаду или солюбилизирующие компоненты типа агар-агара, карбоната кальция или карбоната натрия.

Более того, при желании или в случае необходимости, в состав смесей также могут включаться необходимые связующие вещества, смазывающие вещества, вещества, способствующие расщеплению и окрашивающие вещества. Приемлемые связующие вещества включают в себя крахмал, желатин, природные виды сахара типа глюкозы или бета-лактозы, сахаристые вещества из кукурузы, природные и синтетические смолы типа камеди, траганта или натриевого альгината, карбоксиметилцеллюлозы, полиэтиленгликоля и им подобные вещества. Смазывающие вещества, используемые в данных лекарственных формах, включают в себя олеиновокислый натрий, натрий хлорид и им подобные вещества. Вещества, способствующие распаду, включают, без ограничений, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бетонит, ксантановую камедь и им подобные вещества. Например, таблетки могут изготавливаться путем приготовления смеси порошка, гранулирования или агрегирования, добавления смазывающего вещества и вещества, способствующего распадению, и прессования в таблетки. Порошкообразная смесь приготовляется путем смешивания соединения, соответствующим образом измельченным, с разбавителем или основой, как указано выше, и при желании, со связующими веществами типа карбоксиметилцеллюлозы, альгината, желирующими веществами или поливинилпирролидоном, замедлителями для растворов типа парафина, ускорителями всасывания типа четвертичной соли и(или) поглощающими веществами типа бетонита, каолина или дифосфата кальция. Порошкообразная смесь может быть гранулирована путем смачивания связующими веществами, такими как сироп, крахмальная паста, акадийский растительный клей, или растворами из целлюлозных или полимерных материалов и пропускания под давлением через сетку-фильтр. В качестве альтернативы методу гранулирования, порошкообразная смесь может быть пропущена через машину для таблетирования, в результате чего будут получены не полностью сформированные заготовки, раздробленные на гранулы. К гранулам добавляются смазывающие вещества типа стеариновой кислоты, соли стеарата, талька или минерального масла, предотвращающие прилипание смеси к поверхностям пуассонов пресса, формирующих таблетки. Затем смесь с добавленными смазывающими веществами прессуется в таблетки. Соединения, охватываемые настоящим описанием, могут также применяться совместно с сыпучими инертными носителями и прессоваться в таблетки непосредственно, без прохождения через этапы гранулирования или агрегирования. На препараты может наноситься прозрачное или матовое защитное покрытие, состоящее из защитного покрытия шеллаком, покрытия из сахара или полимерного материала и полирующего покрытия из воска. Для различения разных дозировок к данным покрытиям могут добавляться красящие вещества.

Принимаемые перорально жидкости типа растворов, сиропов и эликсиров приготавливаются в таких единицах дозирования, которое обеспечивает содержание необходимого количества предварительно установленного количества соединения. Сиропы могут быть приготовлены путем растворения соединения в соответствующем ароматизированном водном растворе, в то время как эликсиры приготовляются посредством использования нетоксичной среды для лекарства. К ним могут добавляться солюбилизаторы и эмульгаторы типа этоксилированных изостеариловых спиртов и полиоксиэтиленовых сорбитоловых эфиров, консерванты, ароматизирующие добавки типа мятного масла или натуральных подсластителей, сахарина или других искусственных подсластителей и им подобных веществ.

При необходимости, дозировка препаратов для перорального введения может быть микроинкапсулирована. Препарат может быть также приготовлен для замедленного или пролонгированного высвобождения, например, путем нанесения покрытия или включения зернистого материала в полимеры, воск или им подобные вещества.

Соединения настоящего изобретения и их фармацевтически приемлемых солей могут также вводиться в виде липосомных систем доставки, таких как малые моноламеллярные везикулы, большие моноламеллярные везикулы и мультиламеллярные (многослойные) везикулы. Липосомы могут быть образованы из множества фосфолипидов, таких как холестерол, стеариламин или фосфадилхолины.

Соединения настоящего изобретения и их фармацевтически приемлемые соли могут также доставляться путем использования моноклональных антител в качестве индивидуальных носителей, с которыми соединены молекулы соединения. Соединения также могут комбинироваться с растворимыми полимерами в качестве нацеленных носителей лекарственного средства. Такие полимеры могут включать в себя поливинилпирролидон, сополимер пирана, полигидроксипропилметакриламидфенол, полигидроксиэтил аспартамидфенол, или полиэтиленоксидполилизин, замещенный остатками пальмитоила. Кроме того, соединения могут быть соединены с классом биоразлагаемых полимеров, используемых в достижении контролируемого высвобождения лекарственного средства, например, полимолочной кислотой, полиэпсилонкапролактоном, полигидроксимасляной кислотой, полиортоэфирами, полиацеталями, полидигидропиранами, полицианоакрилатами и сшитыми или амфипатическими блок-сополимерами гидрогелей.

Фармацевтические составы, приспособленные для трансдермального применения, могут быть приготовлены в виде отдельных пластырей, предназначенных для применения в плотном контакте с эпидермисом пациента в течение продолжительного периода времени. Например, активный ингредиент может быть доставлен из пластыря путем применения электрофореза, как это в целом описано в Фармацевти

- 6 018782 ческом Исследовании 1986, 3(6), 318.

Фармацевтические составы, приспособленные для местного применения, могут быть приготовлены в виде мазей, кремов, суспензий, лосьонов, присыпок, растворов, паст, гелей, спреев, аэрозолей или масел.

Фармацевтические составы, приспособленные для ректального введения, могут быть доставлены с помощью суппозитариев или клизм.

Фармацевтические составы, приспособленные для назального введения, где носителем является твердое вещество, включают в себя крупный порошок, с размером частиц в диапазоне от 20 до 500 мкм, который вводится путем вдыхания через нос, например быстрым вдыханием порошка через носовой ход из контейнера, поднесенного близко к носу. Подходящие препараты для введения в виде назального спрея или назальных капель, где носителем является жидкость, включают в себя водные или масляные растворы активного ингредиента.

Фармацевтические составы, приспособленные для введения путем вдыхания, включают в себя присыпки из мельчайших частиц порошка или аэрозоли различных типов, с точной дозировкой препарата (аэрозоли под давлением, распылители или инсуффляторы).

Фармацевтические составы, приспособленные для вагинального введения, могут быть приготовлены в виде пессариев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или спреев.

Фармацевтические составы, приспособленные для парентерального введения, включают в себя водные и неводные стерильные растворы для инъекций, которые содержат антиоксиданты, буферные растворы, бактериостатические средства и добавки, которые доводят препарат до изотонического состояния для введения в кровь предполагаемого пациента, водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать в себя суспендирующие вещества и загустители. Препараты могут быть приготовлены и расфасованы в однодозовые или многодозовые контейнеры, например герметично запаянные ампулы и флаконы, и могут храниться в высушенном сублимацией (лиофилизированном) состоянии, требующим только добавления стерильного жидкого носителя, например, воды для инъекций, непосредственно перед их применением. Приготовленные для немедленного приема растворы для инъекций и суспензии могут быть приготовлены из стерильных порошков, гранул и таблеток.

Необходимо понимать, что дополнительно к ингредиентам, конкретно упомянутым выше, состав препаратов может включать в себя другие вещества, традиционно используемые в фармацевтике с учетом типа обсуждаемого препарата, например, для перорального введения такими подходящими веществами могут служить ароматизирующие вещества.

Термин пациент включает в себя человека и других млекопитающих.

Термин лечение относится к (ί) предупреждению возникновения заболевания, нарушения или состояния у пациента, который может быть предрасположен к возникновению заболевания, нарушения и(или) состояния, но еще не был диагностирован как имеющий таковые, (ίί) приостановление развития заболевания, нарушения или состояния, например, посредством купирования их развития, и (ш) купирование заболевания, нарушения или состояния, например, добиваясь у пациента возникновения состояния ремиссии заболевания, нарушения или состояния.

Соединения настоящего описания могут также вводиться с циклоспорином, например циклоспорином А. В. ходе клинических исследований была подтверждена активность циклоспорина при лечении ВГС (Нера1о1о§у 2003, 38, 1282, Вюсйет. Вюрйув. Век. Соттип 2004, 313, 42, 1 Са81гоеп1его1 2003, 38, 567).

В табл. 1 ниже приведены некоторые пояснительные примеры соединений, которые могут вводиться с соединениями настоящего описания. Соединения, охватываемые настоящим описанием, могут вводиться совместно с иными анти-ВГС активными соединениями при проведении комбинированной терапии, либо совместно или по отдельности, либо путем объединения соединений в композицию.

Таблица 1

Зарегистрированное патентованное название	Физиологический класс	Тип ингибитора или мишени	Компания-источник препарата
ΝΊΜ811		Ингибитор циклофилина	1ХоуаП|й
Задаксин		Иммуномодулятор	8с1с1опе
Сувус		Метиленовый голубой краситель	Βιοβηνίδίοη
Актилон (СРСИ 0101)		Агонист ТЬК.9	Со1еу
Батабулин (Т67)	Противораковый	Ингибитор β-тубулина	Ти1апк 1пс, Южный Сан-Франциско, Калифорния
1818 14803	Антивирусный	Антисенсовый	1818 РЬагтасеийса1$ 1пс, Карлсбад, штат Калифорния /Е1ап РЬатасеийсак 1пс, Нью-Йорк, шт Нью-Йорк
8иттегге1/Самметрел	Антивирусный	Антивирусный	Епйо РЬатасеийсак

- 7 018782

			НоШ1П§5 1пс, Чадз Форд, штат Пенсильвания
С8-9132(АСН-806)	Антивирусный	Ингибитор ВГС	АсЫ11юп/С11еа<1
Соединения и соли пиразолопиримидина из ШО-2005047288 26 мая 2005	Антивирусный	Ингибитор ВГС	Апо» ТЬегареийсз на
Левовирин	Антивирусный	Ингибитор инозинмонофосфатдег идрогеназы	К1ЬарЬапп 1пс, Коста Меса, Калифорния
Меримеподиб (УХ-497)	Антивирусный	Ингибитор инозинмонофосфатдег идрогеназы	УегТех Р11атасеийса1ь 1пс, Кембридж, штат Массачусетс
ХТЪ-6865 (ХТЬ-002)	Антивирусный	Моноклональное антитело	ХТЬ ВюрЬагтасеийсаИ 1(<1, Реховот, Израиль
Телапревир (УХ-950, ЬУ-570310)	Антивирусный	Ингибитор сериновой протеазы N53	УеПех РЬатасеШ1са1$ 1пс Кембридж, штат Массачусетс/ЕН ЬИ1у ап01пс, Индианаполис, штат Индиана
ВГС-796	Антивирусный	Ингибитор репликазы Ν85Β	Шу еЙ1/У1 горЬагта
ΝΜ-283	Антивирусный	Ингибитор репликазы Ν55Β	Ηβηίχ/ΝοναΠίί
ОЬ-59728	Антивирусный	Ингибитор репликазы Ν85Β	беле ЬаЬз/Ыоуаг118
ОЬ-60667	Антивирусный	Ингибитор репликазы Ν85Β	Оепе ЬаЬз/Ыоуагйз
2'С МеА	Антивирусный	Ингибитор репликазы Ν85Β	бйеад
Ρ8Ι6130	Антивирусный	Ингибитор репликазы Ν85Β	КосЬе
К1626	Антивирусный	Ингибитор репликазы Ν85Β	КосИе
2'С метил аденозин	Антивирусный	Ингибитор репликазы Ν85Β	Метек
ЛК-003	Антивирусный	Ингибитор МКр	1арап ТоЬассо 1пс, Токио, Япония
Левовирин	Антивирусный	рибавирин	Ιί'Ν РЬашасеиисаЕ, Коста Меса, Калифорния
Рибавирин	Антивирусный	рибавирин	8сЬеппд-Р1ои8Ь Согрогайоп,

- 8 018782

			Кенилворт, шт Нью-Джерси
Вирам идин	Антивирусный	Рибавирин продраг	ЮЬарЬапп 1нс, Коста Меса, Калифорния
Гептазим	Антивирусный	рибозим	МЬогуше Ркатасашсак 1вс, Боулдер, Колорадо
В1ЬЫ-2061	Антивирусный	Ингибитор сериновой протеазы	ВоеЬпп§ег 1п§е1йе1 т РЬагта КО, Ингельхайм, Германия
5СН 503034	Антивирусный	Ингибитор сериновой протеазы	8сЬепп§ Р1ои§11
Задазим	Иммунный модулятор	Иммунный модулятор	8с1С1опе РЬатасеийса1з 1пс, Сан Матео, Калифорния
Цеплян	Иммуномодулятор	иммунный модулятор	Мах1гн РЬатасеиПсаЦ 1пс, Сан Диего, Калифорния
СеллСепт	Иммунодепрессант	Иммунодепрессант 1§ОВГС	р НоГГташ1-1.а КосЬе КТО, Базель, Швейцария
Сивасир	Имму нодепрессант	Иммунодепрессант 1§СВГС	!\аЫ ВюрЬагтасеий са1з 1пс, Бока Ратон, штат Флорида
Альбуферон - а	Интерферон	альбумин ПТ4-а2Ь	Нигпап Оелогпе 8с1елсе& 1пс, Роквил, штат Мэриленд
Инферген А	Интерферон	ΙΡΝ альфакон-1	ЫегМипе РЬатасеийсаЦ 1пс, Брисбен, Калифорния
Омега ΤΕΝ	Интерферон	ΙΡΝ-ω	Ьйагаа ТЬегареийсз
Ц-'Ν-β ΠΕΜΖ701	Интерферон	ΙΡΝ-β и ΕΜΖ701	Тгапзйюп Тйегареийсз 1пс, Онтарио, Канада
Ребиф	Интерферон	ΙΡΝ-βΙβ	Зегопо, Женева, Швейцария
Роферон А	Интерферон	1Е\-о2а	Р НоГйпапп-Еа КосЬе 1ЛТ>, Базель, Швейцария
Интрон А	Интерферон	ΙΡΝ-α26	8сЬепп§-Р1ои£11 Согрогайоп, Кенилворт, шт Нью-Джерси

- 9 018782

Интрон А и задаксин	Интерферон	ΙΓΝ-а2Ъ/а 1 -ти мози н	Ке^епеКх ВюрЬагппсеиПсак 1пс, Бетесда, штат Мэриленд/ $С1С1опе Рйатасеийса181пс, Сан Матео, Калифорния
Ребетрон	Интерферон	1Р1М-а2Ь/рибавирин	8сЬепп2-Р1оиеЬ Согрогайоп, Кенилворт, шт Нью-Джерси
Актиммьюн	Интерферон	ΙΝΡ-γ	1п1егМипе 1пс, Брисбен, Калифорния
Интерферон-β	Интерферон	Интерферон-Р-1а	Зегопо
Мультиферон	Интерферон	ΓΓΝ длительного действия	У1га£еп/Уа1епЙ5
Велферон	Интерферон	имфобластоидный ΙΓΝ-αηΙ	61ахо 8гшгЬК1те р1с, Аксбридж, Великобритания
Омниферон	Интерферон	природный ΙΓΝ-α	У1га§еп 1пс., Плантсйшен. штат Флорида
Пегасис	Интерферон	Пегилированный ΙΓΝ- а2а	Р. НоЙтапп-Ьа КосЬе 1_Τϋ. Базель, Швейцария
Пегасис и цеплян	Интерферон	Пегилированный ΙΓΝа2а/ иммунный модулятор	Махни РйатасеийсаЕ 1пс., Сан Диего, Калифорния
Пегасис и рибавирин	Интерферон	Пегилированный ΙΓΝа2а/ рибавирин	Г. Нойтапп-Ьа КосЬе ЬТП, Базель, Швейцария
РЕ<3-Интрон	Интерферон	Пегилированный ΙΕΝ- а2Ъ	8скепп£-Р1ои§Ь Согрогайоп, Кенилворт, штат Нью-Джерси
РЕСг-Интрон/ Рибавирин	Интерферон	Пегилированный ΙΡΝа2Ь/рибавирин	5сЬепп§-Р1ои§Ь Согрогайоп, Кенилворт, штат Нью-Джерси
ΙΡ-501	препарат для защиты печени	противофиброзное	1пс1еуи5 Рйагтасеийса151пс.» Лексингтон, Массачусетс
ΙΟΝ-6556	препарат для защиты печени	ингибитор каспазы	Ιάιιη РЬагтасеийсаЬ 1пс,, Сан-Диего,
			Калифорния
ΙΤΜΝ-191 (К-7227)	противовирусное средство	ингибитор серинпротеазы	1п1егМипе РБагтасеийсак 1пс, Брисбейн, Калифорния
СЬ-59728	противовирусное средство	ингибитор репликации Ν85Β	6епе1аЬз
ΑΝΑ-971	противовирусное средство	агонист ТЬК-7	Апайуз

Соединения, упоминаемые в данном описании, также могут быть использованы в качестве лабораторных реагентов, для проведения исследований, в частности анализа вирусной репликации, валидации системы испытаний на животных, а также исследований в сфере структурной биологии для дальнейшего изучения механизмов действия ВГС. Кроме того, упомянутые соединения будут полезны при установлении или определении центров связывания других противовирусных соединений, например, путем конкурентного ингибирования.

Соединения данного описания могут быть использованы для уничтожения вирусов, попавших на материалы, или профилактики их попадания и, следовательно, уменьшить риск инфицирования вирусами сотрудников лаборатории и медперсонала, а также пациентов, контактирующих с такими материалами, например, кровью, тканями, хирургическими и лабораторными инструментами и медицинской спецодеждой, аппаратами и материалами для забора и переливания крови.

Настоящее описание охватывает соединения настоящего изобретения, образованные в результате процесса синтеза или метаболических процессов, включая процессы, характерные для организма человека или животного ίη νίνο или процессов, происходящих ίη νίίτο.

Аббревиатуры, используемые в настоящем приложении, в частности нижеследующих иллюстративных схемах и примерах, являются широко употребляемыми среди специалистов в данной области.

Далее приводятся некоторые из них:

Η-ΑΤΥ - (азабензогриазол-1-ил)-Ц^№,№-тетраметилурония гексафторфосфат, БОК - трет-бутоксикарбонил, Ν-БС - Ν-бромсукцинимид, трет-Ви - трет-бутил, СЭМ - (триметилсилил)этоксиметил, ДМСО диметилсульфоксид, МеОН - метанол, ТФУК - трифторуксусная кислота, КТ - комнатная температура, ВУ

- 10 018782 время удерживания, ЭДКИ - 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид, ДМАП - 4-диметиламинопиридин, ТГФ - тетрагидрофуран, ДБУ - 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен, ΐ-Ви, ДЭА - диэтиламин, ГМДС - гексаметилдисилазид, ДМФ - Ν,Ν-диметилформамид, Бзл - бензил, ЕЮН - этанол, изо-РгОН изопропанол, Ме₂8 - диметилсульфид, Εΐ₃Ν или ТЭА - триэтиламин, РЕ - фенил, ОАс - ацетат, ЕЮАс - этилацетат, дффф - 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен, и-ю-РцЕ^ или ДИПЭА - диизопропилэтиламин, Кбз карбобензилокси, и-ВиЫ-и-бутиллитий, АЦН - ацетонитрил, ч - час или часы, мин - минуты, с - секунды, Ь1ГМДС - лития гексаметилдисилазид, ДИБ-А1 - диизобутилалюминия гидрид, ТБДМС-С1 - трет-бутилдиметилсилилхлорид, Ме - метил, ОАс - ацетат, изо-Рг - изопропил, Εΐ - этил, Ви - бензил, и ГОАТ - 1-гидрокси7-азабензотриазол.

Для лучшего понимания соединений и процессов, о которых идет речь в данном изобретении, ниже приведены схемы синтеза. На них наглядно проиллюстрированы методы, при помощи которых могут быть получены соединения настоящего описания. Исходные материалы могут быть получены из коммерческих источников или подготовлены с использованием известных методов, описанных в узкоспециальной литературе. Для специалистов в данной сфере будет очевидным, что вышеупомянутые соединения могут быть синтезированы и путем замены соответствующих реагентов и агентов в указанных схемах синтеза, представленных ниже. Очевидным является и то, что этапы по селективной защите и снятию защиты, а также порядок этих этапов носят вариативный характер (в зависимости от особенностей переменных), который не влияет на успешность завершения процесса синтеза. Переменные соответствуют определениям, приведенным выше, если только прямо не указано иное.

Схема 1. Симметричные или асимметричные бифенилы

Арилгалогенид 1 и эфир бориновой кислоты 2 могут вступать в реакцию сочетания в стандартных условиях реакции сочетания Судзуки-Мияура |8ιιζιι1<ί-Μί;·ινιιπι| (Аидете СЕет Ιηΐ Еб Еид1 2001, 40, 4544), что приводит к образованию биарила 3. Следует также отметить, что вместо эфира 2 возможно применение его аналога - бориновой кислоты. Если Я¹² и Я¹³ - это различные заместители, то возможно удаление защитной группы с одной пирролидиновой группы. Если Я¹² = бензил, а Я¹³ = трет-бутил, то обработка полученного соединения в гидрогенолитических условиях приводит к получению соединения 4. Например, может использоваться катализатор Рб/С в присутствии основания, такого как калия карбонат. Ацилирование соединения 4 может проводиться в стандартных условиях реакции ацилирования. В этом смысле может использоваться сочетающий реагент, такой как Н-АТУ, в комбинации с аминовым основанием, таким как основание Хунига. Кроме того, соединение 4 может реагировать с изоцианатом или карбамиолхлоридом, в результате получится соединение 5, где Я⁹ - это амин. Удаление защитной группы из соединения 5 может осуществляться путём обработки сильной кислотой, такой как НС1 или трифторуксусная кислота. Условия, аналогичные условиям превращения соединения 4 в 5, могут применяться и для получения соединения 7 из 6. В другом варианте осуществления изобретения, когда Я¹² = Я¹³ = третВи, можно сразу получить соединение 8, обработав соединение 3 сильной кислотой, такой как НС1 или трифторуксусная кислота. Превращение соединения 8 в 7 проводится аналогично превращению соединения 4 в 5 или соединения 6 в 7. В данном случае защитные группы (крышки) в соединении 7 будут одинаковыми.

- 11 018782

Схема 2. Асимметричные молекулы бифенилов

Превращение соединения 6 (из схемы 1) в 10 может проводиться в стандартных условиях реакции сочетания амида, таких как присутствие Н-АТУ и аминового основания, такого как основание Хунига. Удаление защитной группы может проводиться с помощью сильной кислоты, такой как НС1 или трифторуксусная кислота, в результате чего получается соединение 11. Соединение 11 затем может быть превращено в соединения 12, 13 или 14; для этого применяется хлорангидрид, изоцианат или карбамоилхлорид, а также хлороформат (соответственно).

Схема 3. Молекулы сложных симметричных бифенилов

Соединение 15 (15 = 7 из схемы 1, где каждый из К⁹ - это -СН(ИН-БОК)К¹⁸), может превращаться в соединение 16 путём обработки сильной кислотой, такой как НС1 или трифторуксусная кислота. Из соединения 16 можно получить соединения 17, 18 и 19 путём обработки соединения 16, соответственно, хлороформиатом, изоцианатом или карбамоилхлоридом, а также хлорангидридом.

Симметричные аналоги бифенилов (соединения с формулой 7, где обе половины молекулы одинаковы) могут синтезироваться из бромкетона 20. Аминирование путем замещения нуклеофилом, таким как азид, фталимид или (предпочтительно) натрия диформиламид (Υίη^ΐίη апб Нопд\гсп. 8уп111С5к 1990, 122), с последующим удалением защитной группы приводит к образованию соединения 21. Конденсация в стандартных условиях реакции аминирования, таких как присутствие Н-АТУ и основания Хунига, с надлежащим образом защищенной аминокислотой приводит к образованию соединения 22. Нагревание с аммония ацетатом в тепловом или микроволновом режиме приводит к образованию соединения 3, защитная группа которого может быть удалена сильной кислотой, такой как НС1 или трифторуксусная ки

- 12 018782 слота (Я¹² = Я¹³ = трет-Ви), или путем гидрогенолиза в присутствии газообразного водорода и катализатора на основе металла, такого как Рй/С (Я¹² = Я¹³ = бензил). Ацилирование может проводиться с карбоновой кислотой (Я⁹СО₂Н), таким же образом, как превращение соединения 21 в 22. Обработка соответствующим изоцианатом (Я = Я Я Ν, Я = Н) или карбамоилхлоридом (Я = Я Я Ν, Я - любой радикал, за исключением атома Н) приводит к образованию мочевины

Схема 5. Исходные соединения 25 и 2

Схема 5 описывает получение некоторых исходных соединений требуемых для цепочек синтеза, приведенных в схемах 1-4. Основное промежуточное соединение 25 (аналог 1 в схеме 1) получается из кетоамида 24 или кетоэфира 27 путем нагревания с аммония ацетатом в тепловом или микроволновом режиме. Кетоамид 24 может получаться из соединения 23 путем конденсации с соответствующей циклической или ациклической аминокислотой в стандартных условиях реакции образования амидов. Бромид 26 может использоваться для получения соединения 23 путем обработки нуклеофилом, таким как азид, фталимид или натрия диформиламид (ЪуШйсЧх 1990, 122), с последующим удалением защитной группы. Бромид 26 может также превращаться в соединение 27, вступая в реакцию с соответствующей циклической или ациклической Ν-защищенной аминокислотой в присутствии основания, такого как калия карбонат или натрия бикарбонат. Бромирование соединения 28 источником иона бромония, таким как бром, Ν-БС или СВг₄, приводит к образованию соединения 26 Бромид 25 может превращаться в эфир бориновой кислоты 2 путем обработки бис-пинаколатодибором в присутствии палладиевого катализатора, в соответствии с методикой, описанной в научной литературе (1оигиа1 οί Огдашс Сйет151ту 1995, 60, 7508), или по другим методикам.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения исходное соединение, такое как 31а (аналог соединения 25 в схеме 5 и соединения 1 в схеме 1), может получаться в результате реакции производных бромимидазола 31 в условиях реакции сочетания Судзуки с различными хлорзамещенными арилбориновыми кислотами, которые могут быть получены по стандартным методикам (см., например, Огдашс Ьейега 2006, 8, 305, и литературные источники, указанные в этой статье) или приобретены у поставщиков химических реактивов. Бромимидазол 31 может получаться путем бромирования имидазола 30 источником иона бромония, таким как бром, СВг₄ или Ν-бромсукцинимид. Имидазол 30 может полу- 13 018782 чаться из Ν-защищенных аминокислот, соответствующим образом замещенных в реакции с глиоксалом в метаноловом растворе аммония гидроксида

30

Схема 7. Гетероарилы.

В ещё одном варианте осуществления этого изобретения арилгалогенид 32 может вступать в реакцию сочетания в условиях реакции Судзуки-Мияуры (διιζιι1<ί-Μίναιιπι) и в присутствии палладиевого катализатора. В результате получается гетероарильное производное 34. Соединение 34 может быть превращено в соединение 35 путём обработки в гидрогенолитических условиях водородом в присутствии катализатора переноса на основе металла, такого как палладиево-угольный катализатор (В¹³ = бензил). Ацилирование соединения 35 может проводиться путём обработки соответствующим хлорангидридом (В9СОС1) в присутствии основания, такого как триэтиламин, соответствующим образом замещённой карбоновой кислотой (В⁹СО2Н) в присутствии стандартного реагента реакции сочетания, такого как НАТУ, изоцианатом (В²АС'О, где В⁹ = Β²⁷Β²⁸Ν-; В²⁸ =Н) или карбамоилхлоридом (В²⁷В²^СОС1, где В =В В Ν-). Соединение 37 может синтезироваться из соединения 36 (В=трет-Ви) путём обработки сильной кислотой, такой как НС1 или трифторуксусная кислота. Ацилирование получившегося в результате амина 37 с образованием соединения 38 может проводиться таким же образом, как превращение соединения 35 в 36. В случаях, когда В¹² = В¹³, соединение 34 может сразу же превращаться в соединение 39 путём обработки сильной кислотой, такой как НС1 или трифторуксусная кислота (В¹² = В¹³ = трет-Ви), или В условиях реакции гидрогенолиза в присутствии водорода и катализатора на основе металла, такого как палладиево-угольный катализатор (В₁₂=В¹³= бензил). Ацилирование соединения 39 может проводиться по такой же методике, что и превращение соединения 35 в 36.

Схема 8

Гетероарилхлорид 29 может превращаться в симметричный аналог 40 путём обработки источником палладия, таким как дихлорбис(бензонитрил)палладий, в присутствии тетракис(диметиламино)этилена при повышенной температуре. Удаление эфира СЭМ и карбамата БОК, которые входят в состав соединения 40, может проводиться в один этап путём обработки сильной кислотой, такой как НС1 или трифто- 14 018782 руксусная кислота, что приведёт к получению соединения 41. Превращение в соединение 42 может проводиться в условиях, аналогичных тем, что используются для превращения соединения 38 в 39 в схеме 7.

Ρ^ίη - апкоксииегип или атом Н

VI.', X, Υ”, Ζ = С или Ν, причем сак минимум один заместитель «νν,Χ, Г и Ζ-это С К* может быть алкином или

Схема 9. Молекулы асимметрично замещенных гетероакрилов

Соединение 43 (аналог соединения 42, где В₂₃ = -СН(МНВос)Я₂₄) может превращаться в соединения 45, 46 и 47 по таким же методикам, которые описаны в схеме 3 В случаях, когда К.₂₀ = алкоксиметил (например, СЭМ), удаление защитной группы может проводиться одновременно с удалением карбамата БОК (превращение соединения 43 в 44) путем обработки сильной кислотой, такой как НС1 или трифторуксусная кислота

Схема 10. Исходное соединение 29

Гетероарилбромид 54 может вступать в реакцию с винилстаннаном, таким как трибутил(1-этоксивинил)тин, в присутствии источника палладия, такого как дихлорбис(трифенилфосфин)палладий (II), что приведет к получению соединения 55, которое далее может превращаться в бромкетон 51 путем обработки источником ионов бромония, таким как Ν-бромсукцинимид, СВг₄ или бром. С другой стороны, кето-замещенные гетероарильные бромиды 53 могут непосредственно превращаться в соединение 51 путем обработки источником иона бромония, таким как бром, СВг₄ или Ν-бромсукцинимид. Бромид 57 может превращаться в аминокетон 48 путем обработки натрия азидом, калия фталимидом или натрия диформиламидом (8уп111С515 1990, 122) с последующим удалением защитной группы Аминокетон 48 может затем сочетаться с соответствующим образом замещенной аминокислотой в стандартных условиях реакции образования амидов (т.е. присутствие реагента реакции сочетания, такого как Н-АТУ, и мягкого основания, такого как основание Хунига), что приведет к получению соединения 49. Соединение 49 может затем превращаться в имидазол 50, вступая в реакцию с аммония ацетатом при нагревании в тепловом или микроволновом режиме. С другой стороны, соединение 57 может вступать в реакцию непосредственно с соответствующим образом замещенной аминокислотой в присутствии основания, такого как натрия бикарбонат или калия карбонат, что приведет к получению соединения 52 Это соединение, в свою очередь, может вступать в реакцию с ацетатом аммония при нагревании в тепловом или микроволновом режиме, что приведёт к получению соединения 50. Имидазол 50 может приобретать защитную алкоксиметиловую группу путём обработки соответствующим алкоксиметилгалогенидом, таким как 2(триметилсилил)этоксиметилхлорид, после депротонирования сильным основанием, таким как натрия гидрид.

- 15 018782

Схема 11. Замещенные фенилглициновые производные соединения

Замещенные фенилглициновые производные соединения можно получить с помощью ряда методов, иллюстрируемых ниже. Фенилглициновый 1-бутил эфир может быть подвергнут восстановительному алкилированию (реакционный путь А) соответствующим альдегидом и восстановителем, как, например, натрий цианоборогидрид в кислотной среде. Гидролиз 1-бутил эфира может выполняться сильной кислотой, например, НС1 или трифторуксусной кислотой. Альтернативно, фенилглицин может алкилироваться галоидалкилом, например, йодистым этилом, и таким основанием, как бикарбонат натрия или карбонат калия (реакционный путь В). Реакционный путь С иллюстрирует восстановительное алкилирование фенилглицина, как в реакционном пути А, с последующим вторичным восстановительным алкилированием дополнительным=альтернативным альдегидом, например формальдегидом, при наличии восстановителя и кислоты. Реакционный путь Ό иллюстрирует синтез замещенных фенилглицинов с помощью соответствующих аналогов миндальной кислоты. Преобразование вторичного спирта в компетентную уходящую группу может выполняться с помощью р-толуолсульфонил хлорида. Смещение тозилатной группы соответствующим амином с последующим восстановительным удалением бензилового эфира может дать замещенные фенилглициновые производные соединения. В реакционном пути Е рацемическое замещенное фенилглициновое производное соединение растворяется путем эстерификации энантиомерно чистым хиральным вспомогательным ингредиентом, как например, но не ограничиваясь этим, (+)-1-фенилэтанол, (-)-1-фенилэтанол, оксазолидинон Эвана, или энантиомерно чистым пантолактоном. Разделение диастереомеров выполняется с помощью хроматографии (силикагель, НРЬС- высокоэффективная жидкостная хроматография, кристаллизация, и т.д.) с последующим удалением хирального вспомогательного ингредиента с получением энантиомерно чистых фенилглициновых производных. Реакционный путь Н иллюстрирует синтетическую последовательность, которая пересекается с реакционным путем Е, в котором вышеупомянутый хиральный вспомогательный ингредиент вводится до добавления амина. Альтернативно, эфир арилуксусной кислоты может бромироваться источником иона бромониума, например, бром, Ν-бромосукцинимид или СВг₄. Получающийся бензиновый бромид может быть заменен рядом моно- или ди-замещенных аминов при наличии основания третичного амина, как например триэтиламин или основание Хунига. Гидролиз метилового эфира с помощью обработки гидроокисью лития при низкой температуре или 6Ν НС1 при повышенной температуре дает замещенные фенилглициновые производные. Другой метод демонстрируется маршрутом реакции С. Аналоги глицина могут быть дериватизированы рядом арилгалогенидов при наличии источника палладия (0), например палладий бис(трибутилфосфин), и такого основания, как например фосфорнокислый калий. Получающийся эфир может быть затем гидролизован путем обработки основанием или кислотой. Следует знать, что существуют другие известные методы получения фенилглициновых производных соединений, которые можно корректировать для получения нужных соединений в соответствии с данным описанием. Следует также понимать, что конечные фенилглициновые производные соединения можно очистить до энантиомерной чистоты свыше 98% энантиомерного избытка с помощью препаративной НРЬС.

- 16 018782

Схема 12. Ацилированные аминокислотные производные

В другом примере осуществления настоящего изобретения ацилированные фенилглициновые производные можно получить, как показано ниже. Фенилглициновые производные, в которых карбоновая кислота защищена как легко удаляемый эфир, можно ацилировать хлорангидридом при наличии основания, как, например, триэтиламин, для получения соответствующих амидов (реакционный путь А). Реакционный путь В иллюстрирует ацилирование исходного фенилглицинового производного соответствующим хлороформатом, тогда как реакционный путь. С показывает реакцию с соответствующим изоцианатом или карбамоил хлоридом. Каждый из трех интермедиатов, показанных в реакционных путях А - С, может быть лишен защиты методами, известными специалистам в данной области (то есть, обработка трет-бутилового эфира сильной кислотой, как, например, НС1 или трифторуксусная кислота).

Схема 13. Аминозамещенные фенилуксусные кислоты можно получить путем обработки хлорометилфенилуксусной кислотой с избытком амина.

к³⁸ I

Условия анализа соединения

Оценка чистоты и массовый анализ с низким разрешением выполнены на системе жидкостной хроматографии δΐιίιηαάζιι, соединенной с масс-спектрометрической системой \Уа1сгк Мкготакк Ζ0 М8. Следует отметить, что время отстаивания может немного отличаться в зависимости от приборов. Условия ЖХ, используемые для определения времени удерживания (ВУ), были следующие.

Дополнительные условия ЖХ применимы и к настоящему разделу, если прямо не указано иное.

- 17 018782

Колонка =

Начало %В =

Конец %В =

Градиентное время = Время остановки = Скорость потока = Длина волны Растворитель А = Растворитель В =

Условие 1

Рйепотепех-Ьипа З.ОХ 50 мм 810

100 мин мин мл/мин

220 нм

0,1% раствор ТФУК в 10% метанол/90% Н?О

0,1% раствор ТФУК в 90% метанол/10% Н₂О

Колонка =

Начало %В =

Конец %В = Градиентное время =

Время остановки = Скорость потока = Длина волны Растворитель А = Растворитель В =

Условие 2

Ркепотепех-Ьипа 4.6Х 50 мм 810

100 мин мин мл/мин

220 нм

0,1% раствор ТФУК в 10% метанол/90% Н₂О

0,1% раствор ТФУК в 90% метанол/10% Н₂О

Колонка =

Начало %В =

Конец %В =

Градиентное время = Время остановки = Скорость потока = Длина волны Растворитель А = Растворитель В =

Условие 3

ВЭЖХХТЕККА С.183 0Х 50 мм 87

100 мин мин мл/мин

220 нм

0,1% раствор ТФУК в 10% метанол/90% Н₂О

0,1% раствор ТФУК в 90% метанол/10% Н₂О

Колонка =

Начало %В =

Конец %В =

Градиентное время =

Время остановки =

Скорость потока =

Длина волны

Растворитель А =

Растворитель В =

Условие М1

Ьцпа 4.6Х 50 мм 810

100 мин мин мл/мин

220 нм

95% Н₂О 5% СНзСН 10 мм ацетата аллюминия

5% Н₂О 95% СЦСН 10 мм ацетата аллюминия

- 18 018782

Синтез общих структур

Суспензия 10% Рй/С (2,0 г) в метаноле (10 мл) была добавлена к смеси (Я)-2-фенилглицина (10 г, 66,2 ммоль), формальдегида (33 мл из 37 мас.% в воде), 1Ν НС1 (30 мл) и метанола (30 мл) и подвергнута воздействию Н₂ (60 фунт/дюйм²) в течение 3 ч. Реакционную смесь отфильтровали через диатомитовый фильтр (С.'е1йе®). фильтрат подвергли концентрированию в вакууме. Полученное сырье перекристаллизовали из изопропанола для получения НС1-соли структуры-1 в виде белых игл (4,0 г). Оптическое вращение -117,1° [с = 9,95 мг/мл в Н2О, λ = 589 нм], ¹Н спектрометрия ЯМР -30 (ДМСО-й6, δ= 2,5 м.д., 500 МГц) δ 7,43-7,34 (т, 5Н), 4,14 (5, 1Н), 2,43 (5, 6Н), ЖХ (условие 1) ВУ=0,25, жидкостная хроматография/масс-спектрометрия (ЖХ/МС) аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С10Н^О2 180,10, обнаружено 180,17, масс-спектрометрия высокого разрешения аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ СюН1^О2 180,1025, обнаружено 180,1017.

Структура 2

№1ВН₃СХ (6,22 г, 94 ммоль) порциями, с интервалами в нескольких минут, добавляют в охлажденную (лед/вода) смесь (Я)-2-фенилглицина (6,02 г, 39,8 ммоль) и метанола (100 мл) и перемешивают в течение 5 мин. Ацетальдегид (10 мл) добавляют по каплям в течение 10 мин и продолжают перемешивать при той же пониженной температуре в течение 45 мин и затем при комнатной температуре в течение ~6,5 ч. Реакционную смесь охлаждают в ванне с водой и льдом, обрабатывают водой (3 мл) и затем гасят с использованием концентрированной НС1, вводимой по каплям, в течение ~45 мин, пока рН смеси не достигнет ~1,5-2,0. Охлаждающую ванну убирают и продолжают перемешивание, добавляя концентрированную НС1 для поддержания рН смеси на уровне 1,5-2,0. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи, фильтруют, чтобы удалить белую суспензию, полученный фильтрат концентрируют в вакууме. Сырой материал перекристаллизовывают из этанола для получения НС1-соли структуры-2 в виде блестящего белого твердого тела в двух порциях (порция 1 4,16 г, порция 2 2,19 г). ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-й6, δ= 2,5 м.д., 400 МГц) 10,44 (1,00, Вг 5, 1Н), 7,66 (т, 2Н), 7,51 (т, 3Н), 5,30 (5, 1Н), 3,15 (Ьг т, 2Н), 2,98 (Ьг т, 2Н), 1,20 (арр Ьг 5, 6Н). Порция 1 [α]²⁵ -102,21° (с = 0,357, Н2О), порция 2 [α]²⁵ 99,7° (с = 0,357, Н2О). ЖХ (условие 1) ВУ = 0,43 мин, ЖХ/МС аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С12Н!^О₂ 208,13, обнаружено 208,26.

Структура 3

Ацетальдегид (5,0 мл, 89,1 ммоль) и суспензию 10% Рй/С (720 мг) в метаноле/Н₂О (4 мл/1 мл) последовательно добавляют в охлажденную (~15°С) смесь (Я)-2-фенилглицина (3,096 г, 20,48 ммоль), 1Ν НС1 (30 мл) и метанола (40 мл). Охлаждающую ванну убирают, а реакционную смесь перемешивают в присутствии Н₂ в течение 17 ч. Затем опять добавляют ацетальдегид (10 мл, 178,2 ммоль) и продолжают перемешивание в присутствии Н₂ в течение 24 ч. [Примечание: объемы Н₂ восполняют по мере необходимости, пока идет реакция]. Реакционную смесь фильтруют через диатомитовый фильтр (Се1йе®), фильтрат подвергают концентрированию в вакууме полученное сырье перекристаллизовывают из изопропанола для получения НС1-соли (Я)-2-(этиламино)-2-фенилуксусной кислоты в виде блестящего белый твердого тела (2,846 г). ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-й6, δ= 2,5 м д, 400 МГц) δ 14,15 (Ьг 5, 1Н), 9,55 (Ьг 5, 2Н), 7,55-7,48 (т, 5Н), 2,88 (Ьг т, 1Н), 2,73 (Ьг т, 1Н), 1,20 (арр ΐ, 1=7,2, 3Н) ЖХ (условие 1) ВУ=0,39 мин, индекс гомогенности >95 %, ЖХ/МС аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С10Н^О₂ 180,10, обнаружено 180,18.

Суспензию 10% Рй/С (536 мг) в метаноле/ Н₂О (3 мл/1 мл) добавляют к смеси (Я)-2-(этиламино)-2фенилуксусной кислоты/ НС1 (1,492 г, 6,918 ммоль), формальдегида (20 мл 37% массы в воде), 1Ν НС1 (20 мл) и метанола (23 мл) Реакционную смесь перемешивают в присутствии Н₂ в течение ~72 ч, запасы Н₂ восполняют по мере необходимости. Реакционную смесь отфильтровывают через диатомитовый фильтр (Се111е®), фильтрат подвергают концентрированию в вакууме. Полученное сырье перекристаллизовывают из изопропанола (50 мл) для получения НС1-соли структуры-3 в виде белого твердого тела (985 мг). ^!Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-й₆, δ= 2,5 м.д., 400 МГц) δ 10,48 (Ьг 5, 1Н), 7,59-7,51 (т, 5Н), 5,26 (5, 1Н), 3,08 (арр Ьг 5, 2Н), 2,65 (Ьг 5, 3Н), 1,24 (Ьг т, 3Н). ЖХ (условие 1) ВУ=0,39 мин, индекс гомогенности

- 19 018782 > 95%, ЖХ/МС аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ СцН1^02 194,12, обнаружено 194,18, МСВР аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ СцН1^02 194,1180, обнаружено 194,1181.

Структура 4

С1С0₂Ме (3,2 мл, 41,4 ммоль) добавляют по каплям к охлажденному (лед/вода) тетрагидрофурану (410 мл), полураствору (К)-трет-бутил 2-амино-2-фенилацетату/НС1 (9,877 г, 40,52 ммоль) и диизопропилэтиламину (14,2 мл, 81,52 ммоль) в течение 6 мин и перемешивают при аналогичной температуре в течение 5,5 ч. Летучие компоненты удаляют в вакууме, остаток распределяют между водой (100 мл) и этилацетатом (200 мл). Органический слой промывают при помощи 1Ν НС1 (25 мл) и насыщенного раствора NаНС0з (30 мл), сушат (Мд80₄), фильтруют и подвергают концентрированию в вакууме. Полученное бесцветное масло тритурируют от гексанов, фильтруют и промывают гексанами (100 мл), получая таким образом (К)-трет-бутил 2-(метоксикарбониламино)-2-фенилацетат в виде белого твердого вещества (7,7 г). ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-б₆, δ=2,5 м. д., 400 МГц) 7,98 (б, 1 = 8,0, 1Н), 7,37-7,29 (т, 5Н), 5,09 (б, 1 = 8, 1Н), 3,56 (§, 3Н), 1,33 (8, 9Н). ЖХ (условие 1) ВУ = 1,53 мин, индекс гомогенности ~90%, ЖХ/МС аналогично рассчитанному для |М+№1|' С1₄Н1₉М№0₄ 288,12, обнаружено 288,15.

Трифторуксусную кислоту, ТФУК (16 мл) добавляют по каплям в охлажденный (лед/вода) раствор СН₂С1₂ (160 мл) вышеописанного продукта в течение 7 мин. Затем охлаждающую ванну удаляют, а реакционную смесь перемешивают в течение 20 ч. Поскольку снятие защиты еще не завершено, вводят дополнительное количество ТФУК (1,0 мл) и продолжают перемешивание еще в течение 2 ч. Летучие компоненты удаляют в вакууме, а полученный в результате масляный остаток обрабатывают диэтиловым эфиром (15 мл) и гексанами (12 мл), до выпадения осадка. Полученный осадок фильтруют и промывают в диэтиловом эфире и гексане (в соотношении ~13,30 мл), затем высушивают в вакууме. Таким образом, получают структуру-4 в виде вспененного белого твердого тела (5,57 г). Оптическое вращение -176,9° [с = 3,7 мг/мл в Н₂0, λ= 589 нм], ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-б6, δ= 2,5 м.д., 400 МГц) δ 12,84 (Ьг 8, 1Н), 7,96 (б, I = 8,3, 1Н), 7,41-7,29 (т, 5Н), 5,14 (б, I = 8,3, 1Н), 3,55 (8, 3Н). ЖХ (условие 1) ВУ = 1,01 мин, индекс гомогенности > 95%, ЖХ/МС аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С10Н^0₄ 210,08, обнаружено 210,17, МСВР аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С₁₀Н^0₄ 210,0766, обнаружено 210,0756.

Структура 5

Смесь (К)-2-фенилглицина (1,0 г, 6,62 ммоль), 1,4-дибромбутана (1,57 г, 7,27 ммоль) и №ьС0₃, (2,10 г, 19,8 ммоль) в этаноле (40 мл) нагревают при температуре 100°С в течение 21 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и фильтруют, фильтрат подвергают концентрированию в вакууме. Остаток растворяют в этаноле и подкисляют в 1Ν НС1 до рН 3-4, летучие компоненты удаляют в вакууме. Полученное сырье очищают с использованием обращенно-фазовой ВЭЖХ (вода/метанол/ТФУК), получая таким образом ТФУК-соль структуры-5 в виде полувязкой белой пены (1,0 г). ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-б6, δ= 2,5 м д , 500 МГц) δ 10,68 (Ьг 8, 1Н), 7,51 (т, 5Н), 5,23 (8, 1Н), 3,34 (арр Ьг 8, 2Н), 3,05 (арр Ьг 8, 2Н), 1,95 (арр Ьг 8, 4Н), ВУ=0,30 мин (условие 1), индекс гомогенности >98%, ЖХ/МС аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С!2Н!^0₂ 206,12, обнаружено 206,25

Структура 6

ТФУК-соль структуры-6 был синтезирован из (К)-2-фенилглицина и 1-бром-2-(2-бромэтокси)этана с помощью метода, использованного для получения структуры-5. ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-б6, δ= 2,5 м.д., 500 МГц) δ 12,20 (Ьг 8, 1Н), 7,50 (т, 5Н), 4,92 (8, 1Н), 3,78 (арр Ьг 8, 4Н), 3,08 (арр Ьг 8, 2Н), 2,81 (арр Ьг 8, 2Н), ВУ = 0,32 мин (условие 1), >98%, ЖХ/МС аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ 0^4^03 222,11, обнаружено 222,20, МСВР аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С12Н!^0₃ 222,1130, обнаружено 222,1121

Струкгура-7а энантиомер-1

Структура-7Ь энантиомер-2

Структура 7

- 20 018782

СН₂С1₂ (200 мл) раствор р-толуолсульфонилхлорида (8,65 г, 45,4 ммоль) добавляют по каплям к охлажденному (-5°С) СН₂С1₂ (200 мл) раствору (8)-бензил 2-гидрокси-2-фенилацетата (10,0 г, 41,3 ммоль), триэтиламина (5,75 мл, 41,3 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (0,504 г, 4,13 ммоль), поддерживая температуру в диапазоне от -5°С до 0°С. Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 9 ч, а затем помещают в морозильную камеру (-25°С) на 14 ч. Затем смеси дают оттаять при комнатной температуре и промывают ее водой (200 мл), 1И НС1 (100 мл) и солевым раствором (100 мл), высушивают (Мд8О₄), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая таким образом бензил 2-фенил-2-(тосилкоси)ацетат в виде вязкого масла, которое через некоторое время затвердевает (16,5 г). Хиральная целостность продукта не проверялась, продукт был использован в дальнейшей цепи превращений без дальнейшей очистки. ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-б6, δ= 2,5 м.д., 500 МГц) δ 7,78 (б, 1 = 8,6, 2Н), 7,43-7,29 (т, 10Н), 7,20 (т, 2Н), 6,12 (8, 1Н), 5,16 (б, 1 = 12,5, 1Н), 5,10 (б, 1 = 12,5, 1Н), 2,39 (8, 3Н) ВУ = 3,00 (условие 21), индекс гомогенности >90%, ЖХ/МС аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С22Н₂₀ИаО₅8 419,09, обнаружено 419,04.

Тетрагидрофуран (75 мл) раствор бензил 2-фенил-2-(тосилокси)ацетата (6,0 г, 15,1 ммоль), 1метилпиперазина (3,36 мл, 30,3 ммоль) и И, И-диизопропилэтиламина (13,2 мл, 75,8 ммоль) нагревают при температуре 65°С в течение 7 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, летучие компоненты удаляют в вакууме. Остаток распределяют между этилацетатом и водой, органический слой промывают водой и солевым раствором, высушивают (Мд8О₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Полученный сырьевой материал очищают с помощью флэш-хроматографии (силикагель, этил ацетат), в результате чего образуется бензил 2-(4-метилпиперазин-1-ил)-2-фенилацетат в виде оранжевокоричневого вязкого масла (4,56 г). Хиральный ВЭЖХ-анализ (на аппарате СШга1се1 ΟΌ-Н) показал, что образец представляет собой смесь энантиомеров в соотношении 38,2 к 58,7. Разделение энантиомеров производится следующим образом продукт растворяют в 120 мл этанола/гептана (1 1) и вводят (5 мл/ ввод) в хиральную колонку ВЭЖХ (аппарат СШгасе1 О1, 5 см ГО х 50 см Ь, 20 цмоль), элюируя с 85 15 гептаном/этанолом при скорости потока 75 мл/мин и длине волны 220 нм. В результате получают энантиомер-1 (1,474 г) и энантиомер-2 (2,2149 г), оба в виде вязкого масла. 'Н спектрометрия ЯМР (дейтерированный хлороформ δ = 7,26, 500 МГц) 7,44-7,40 (т, 2Н), 7,33-7,24 (т, 6Н), 7,21-7,16 (т, 2Н),

5,13 (б, 1 = 12,5, 1Н), 5,08 (б, 1 = 12,5, 1Н), 4,02 (8, 1Н), 2,65-2,38 (арр Ьг 8, 8Н), 2,25 (8, 3Н) ВУ=2,10 (Условие 21), индекс гомогенности >98%, ЖХ/МС аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С₂₀Н₂₅И₂О₂ 325,19, обнаружено 325,20.

Метанол (10 мл) раствор любого из двух энантиомеров бензил 2-(4-метилпиперазин-1-ил)-2фенилацетат (1,0 г, 3,1 ммоль) добавляют к суспензии 10% Рб/С (120 мг) в метаноле (5,0 мл). Реакционную смесь подвергают воздействию водорода, под тщательным наблюдением, на <50 мин. Сразу после завершения реакции, катализатор фильтруют через диатомитовый фильтр (Се1бе®) и фильтрат концентрируют в вакууме, в результате получают структуру-7, контаминированную с фенилуксусной кислотой, в виде желто-коричневой пены (867,6 мг, масса выше теоретического выхода). Продукт был использован для следующего этапа без дополнительной очистки ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-б6, δ=2,5 м.д., 500 МГц) δ 7,44-7,37 (т, 2Н), 7,37-7,24 (т, 3Н), 3,92 (8, 1Н), 2,63-2,48 (арр Ьг 8, 2Н), 2,48-2,32 (т, 6Н), 2,19 (8, 3Н), ВУ=0,31 (условие 2), индекс гомогенности >90%, ЖХ/МС аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С13Н₁₉И₂О₂ 235,14, обнаружено 235,15, МСВР аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С1₃Н₁₉И₂О₂ 235,1447, обнаружено 235,1440.

Синтез структуры-8 и структуры-9 проводится по аналогии с синтезом 15 структуры-7 при помощи соответствующих аминов для смещения 8И2 (например, 4-гидроксипиперидин для структуры-8 и (8)-3фторопирролидин для структуры-9), однако при измененных условиях разделения соответствующих сте реоизомерных интермедиатов, которые описаны ниже.

Структура 8

8а энантиомер-1

8Ь энантиомер-2

Разделение энантиомеров интермедиата бензил 2-(4-гидроксипиперидин-1-ил)-2-фенилацетата осуществляется при следующих условиях: соединение (500 мг) растворяют в этаноле/гептане (5 мл/45 мл) Полученный раствор вводят (5 мл/ввод) в хиральную колонку ВЭЖХ (СШгасе1 О1, 2 см ГО х 25 см Ь, 10 цмоль), элюируя с 80 20 гептаном/этанолом при скорости 10 мл/мин, длине волны 220 нм В результате получают 186,3 мг энантиомера-1 и 209,1 мг энантиомера-2 в виде светло-желтого вязкого масла. Эти бензиловые эфиры подвергают гидрогенолизу, подобно приготовлению структуры-7, получая таким образом структуру-8. ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-б6, δ= 2,5 м.д., 500 МГц) 7,40 (б, 1 =7, 2Н), 7,28-7,20 (т, 3Н), 3,78 (8 1Н), 3,46 (т, 1Н), 2,93 (т, 1Н), 2,62 (т, 1Н), 2,20 (т, 2Н), 1,70 (т, 2Н), 1,42 (т, 2Н) ВУ = 0,28 (условие 2), индекс гомогенности > 98%, ЖХ/МС аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С13Н1₈ИО 236,13, обнаружено 236,07, МСВР рассчитано для [М+Н]⁺ С1₃Н1₈ИО₃ 236,1287, обнаружено 236,1283

- 21 018782

Структура 9

-Ν. 9а диастереомер-1

V 7 9Ь диастереомер-2

Разделение диастереомеров интермедиата бензил 2-((8)-3-фторопирролидин-1-ил)-2-фенилацетата осуществляется при следующих условиях: эфир (220 мг) разделяют в хиральной колонке ВЭЖХ (СЫгасе1 О1-Н. 0,46 см ГО х 25 см Ь, 5 цмоль), элюируя с 95% СО₂/5% метанола с 0,1% ТФУК, при давлении 10 бар, скорости потока 70 мл/мин и температуре 35°С. Элюат ВЭЖХ для соответствующих стереоизомеров концентрируют, остаток растворяют в СН₂С1₂ (20 мл) и промывают в водной среде (10 мл воды + 1 мл насыщенного раствора ЫаНСО₃). Органическую фазу сушат (Мд8О₄), отфильтровывают и концентрируют в вакууме. В результате получают 92,5 мг фракции-1 и 59,6 мг фракции-2. Эти бензиловые эфиры подвергают гидрогенолизу способом, аналогичным использованному для получения структуры-7, таким образом, образуются структуры 9а и 9Ь структура-9а (диастереомер-1, образец представляет собой соль ТФУК, полученной в результате очистки на обратной фазовой ВЭЖХ с использованием растворителя Н₂О/метанол/ТРЛ). ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-й6, δ= 2,5 м.д., 400 МГц) 7,55-7,48 (т, 5Н), 5,38 (й от т, I =53,7, 1Н), 5,09 (Ьг 8, 1Н), 3,84-2,82 (Ьг т, 4Н), 2,31-2,09 (т, 2Н) ВУ = 0,42 (условие 1), индекс гомогенности >95%, ЖХ/МС аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С12Н₁₅ЕМО₂ 224,11, обнаружено 224,14. Структура-9Ь (диастереомер-2): ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-й6, δ= 2,5 м д, 400 МГц) 7,43-7,21 (т, 5Н), 5,19 (й от т, I =55,9, 1Н), 3,97 (8, 1Н), 2,95-2,43 (т, 4Н), 2,19-1,78 (т, 2Н) ВУ=0,44 (условие 1), ЖХ/МС аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С12Н₁₅ЕМО₂ 224,11, обнаружено 224,14.

Структура 10

К раствору Ό-пролина (2,0 г, 17 ммоль) и формальдегида (2,0 мл 37% массы в Н₂О) в метаноле (15 мл) добавить суспензию 10% Рй/С (500 мг) в метаноле (5 мл). Смесь перемешивают в присутствии водорода в течение 23 ч. Реакционную смесь фильтруют через диатомитовый фильтр (СеШе®) и концентрируют в вакууме. В результате получают структуру-10 в виде белого твердого вещества (2,15 г). ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-й6, δ= 2,5 м.д., 500 МГц): 3,42 (т, 1Н), 3,37 (йй, ί = 9,4, 6,1, 1Н), 2,85-2,78 (т, 1Н), 2,66 (8, 3Н), 2,21-2,13 (т, 1Н), 1,93-1,84 (т, 2Н), 1,75-1,66 (т, 1Н). ВУ = 0,28 (Условие 2); индекс гомогенности >98%; ЖХ/МС: аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С6Н₁₂ЫО₂: 130,09; обнаружено 129,96.

Структура 11

Κι

Смесь (28,4В)-4-фторопирролидин-2-карбоновой кислоты (0,50 г, 3,8 ммоль), формальдегида (0,5 мл 37 мас.% в Н₂О), 12 N НС1 (0,25 мл) и 10% Рй/С (50 мг) в метаноле (20 мл) перемешивают в присутствии водорода в течение 19 ч. Реакционную смесь фильтруют через диатомитовый фильтр (Се1йе®); фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток рекристаллизируют из изопропанола, в результате получают НС1-соль структуры-11 в виде белого твердого вещества (337,7 мг). ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСОй6, δ= 2,5 м.д., 500 МГц): 5,39 (й т, I =53,7, 1Н), 4,30 (т, 1Н), 3,90 (ййй, ί =31,5, 13,5, 4,5, 1Н), 3,33 (йй, ί =25,6, 13,4, 1Н), 2,85 (8, 3Н), 2,60-2,51 (т, 1Н), 2,39-2,26 (т, 1Н). ВУ=0,28 (условие 2); индекс гомогенности > 98%; ЖХ/МС: аналогично рассчитанному для [М+Н]⁺ С6Η11ΕNΟ₂: 148,08; обнаружено 148,06.

Структура 12

о =

Ь-аланин (2,0 г, 22,5 ммоль) растворяют в 10%-ном водном растворе карбоната натрия (50 мл), к нему добавляют тетрагидрофуран (50 мл) раствор метил хлорформиата (4,0 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4,5 ч и концентрируют в вакууме. Полученное белое твердое вещество растворяют в воде и подкисляют при помощи 1Ν НС1 до рН ~2-3. Полученный раствор экстрагируют с помощью этилацетата (3х100 мл); объединенную органическую фазу сушат (№₂8О₄), фильтруют и концентрируют в вакууме, получают бесцветное масло (2,58 г). 500 мг этого материала очищают посредством обращенно-фазовой ВЭЖХ (Н₂О/метанол/ТФУК), в результате образуется 150 мг структуры-12 в виде бесцветного масла. ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-й₆, δ= 2,5 м.д., 500 МГц): 7,44 (й, ί =7,3, 0,8Н), 7,10 (Ьг 8, 0,2Н), 3,97 (т, 1Н), 3,53 (8, 3Н), 1,25 (й,=7,3, 3Н).

Структура 13

- 22 018782

Смесь Ь-аланина (2,5 г, 28 ммоль), формальдегида (8,4 г, 37 мас.%), 1Ν НС1 (30 мл) и 10% Рб/С (500 мг) в метаноле (30 мл) перемешивают в присутствии водорода (50 фунт/дюйм²) в течение 5 ч. Реакционную смесь фильтруют через диатомитовый фильтр (Се1бе®), фильтрат концентрируют в вакууме. В результате образуется НС1 соль структуры-13 в виде масла, которое затвердевает в вакууме (4,4 г; масса выше теоретического выхода). Продукт был использован без дополнительной очистки. ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-б₆, δ= 2,5 м.д., 500 МГц): δ 12,1 (Ьг 8, 1Н), 4,06 (ц, I =7,4, 1Н), 2,76 (8, 6Н), 1,46 (б,б =7,3, 3Н).

Структура 14

Структура 14

Этап 1. Смесь (К)-(-)-Э-фенилглицин трет-бутилового эфира (3,00 г, 12,3 ммоль), NаΒНзСN (0,773 г, 12,3 ммоль), КОН (0,690 г, 12,3 ммоль) и уксусной кислоты (0,352 мл, 6,15 ммоль) перемешивают в метаноле при 0°С. К этой смеси добавляют глутаровый диальдегид (2,23 мл, 12,3 ммоль) по каплям в течение 5 мин. Реакционную смесь перемешивают и дают нагреться до комнатной температуры; затем продолжают перемешивание при той же температуре в течение 16 ч. Растворитель впоследствии удаляют, а остаток разводят 10% водным раствором №ЮН и этилацетата. Органическую фазу отделяют, сушат (Мд8О₄), фильтруют и концентрируют досуха, чтобы получилось прозрачное масло. Этот материал очищают обращенно-фазовой ВЭЖХ (РпшехрНеге С-18, 30x100 мм; СН₃С№Н₂О-0,1% ТФУК), получая таким образом промежуточный эфир (2,70 г, 56%) в виде прозрачного масла. ¹Н спектрометрия ЯМР (400 МГц, СЭСЬз) δ 7,53-7,44 (т, 3Н), 7,40-7,37 (т, 2Н), 3,87 (б, I =10,9 Гц, 1Н), 3,59 (б, I =10,9 Гц, 10 1Н), 2,99 (ΐ, I =11,2 Гц, 1Н), 2,59 (ΐ, I =11,4 Гц, 1Н), 2,07-2,02 (т, 2Н), 1,82 (б, I =1,82 Гц, 3Н), 1,40 (8, 9Н). ЖХ/МС: аналогично рассчитанному для С17Н₂5NО₂: 275; обнаружено: 276 (М+Н)⁺.

Этап 2. К размешанному раствору промежуточного эфира (1,12 г, 2,88 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляют ТФУК (3 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч, а затем ее концентрируют до сухости, чтобы получилось светло-желтое масло. Масло очищают с использованием обратно-фазовой ВЭЖХ (Рпте8рНеге С-18, 30x100 мм; СН₃С№Н₂О-0,1% ТРА). Соответствующие фракции объединяют и концентрируют в вакууме до сухости. Остаток растворяют в минимальном количестве метанола и наносят на МСХ ЬР экстракционные патроны (картриджи) (2x6 г). Патроны промывают метанолом (40 мл), а затем желаемое соединение элюируют с использованием 2М аммиака в метаноле (50 мл). Фракции, содержащие продукт, объединяют и концентрируют, остаток растворяют в воде. Лиофилизация этого раствора позволяет получить целевое соединение (0,492 г, 78%) в виде светло-желтого твердого вещества. ¹Н спектрометрия ЯМР (ДМСО-б₆) δ 7,50 (8, 5Н), 5,13 (8, 1Н), 3,09 (Ьг 8, 2Н), 2,92-2,89 (т, 2Н), 1,74 (т, 4Н), 1,48 (Ьг 8, 2Н). ЖХ/МС: аналогично рассчитанному для С1₃Н^О₂: 219; обнаружено: 220 (М+Н)⁺.

Структура 15

(Я/ Структура 15

Этап 1. (8)-1-Фенилэтил 2-бром-2-фенилацетат.

К смеси-а-бромфенилуксусной кислоты (10,75 г, 0,050 моль), (8)-(-)-1-фенилэтанола (7,94 г, 0,065 моль) и ЭМАР (0,61 г, 5,0 ммоль) в сухом дихлорметане (100 мл) добавляют твердый ЕЭС1 (12,46 г, 0,065 моль) в один прием. Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в присутствии аргона в течение 18 ч, затем его разбавляют этилацетатом, промывают (Н₂Ох2, солевой раствор), сушат (№₂8О₄), фильтруют и концентрируют до получения бледно-желтого масла. Флэш-хроматография (81О₂/гексан-этилацетат, 4:1) этого масла позволяет получить целевое соединение (11,64 г, 73%) в виде белого твердого вещества. ¹Н спектрометрия ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 7,53-7,17 (т, 10Н), 5,95 (с.|, 1 =6,6 Нг, 0,5Н), 5,94 (ц, I =6,6 Нг, 0,5Н), 5,41 (8, 0,5Н), 5,39 (8, 0,5Н), 1,58 (б, I =6,6 Нг, 1,5Н), 1,51 (б, I =6,6 Нг, 1,5Н).

Этап 2. (8)-1-Фенилэтил (К)-2-(4-гидрокси-4-метилпиперидин-1-ил)-2-фенилацетат.

К раствору (8)-1-фенилэтил 2-бром-2-фенилацетата (0,464 г, 1,45 ммоль) в ТГФ (8 мл) добавляют триэтиламин (0,61 мл, 4,35 ммоль), вслед за ним - тетрабутиламмония йодид (0,215 г, 0,58 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 мин, а затем добавляют раствор 4-метил-4-гидроксипиперидина (0,251 г, 2,18 ммоль) в ТГФ (2 мл). Смесь перемешивают в течение 1 ч

- 23 018782 при комнатной температуре, а затем нагревают при 55-60°С (температура масляной бани) в течение 4 ч. Охлажденную реакционную смесь разбавляют этилацетатом (30 мл), промывают (Н₂Ох2, солевой раствор), сушат (Мд8О₄), фильтруют и концентрируют. Остаток очищают с помощью хроматографии на силикагеле (0-60% этилацетат-гексан) для получения первого (8, Я)-изомера целевого соединения (0,306 г, 60%) в виде белого твердого вещества, а затем соответствующего (8, 8)-изомера (0,120 г, 23%), также в виде белого твердого вещества (8, К)-изомер. ¹Н спектрометрия ЯМР (СЭ3ОЭ) δ 7,51-7,45 (т, 2Н), 7,417,25 (т, 8Н), 5,85 (μ, I =6,6 Н, 1Н), 4,05 (8, 1Н), 2,56-2,45 (т, 2Н), 2,41-2,29 (т, 2Н), 1,71-1,49 (т, 4Н), 1,38 (ά, Ь =6,6 Нх, 3Н), 1,18 (8, 3Н) ЖХ/МС аналогично рассчитанному для С22Н27ХО3 353, обнаружено 354 (М+Н)⁺. (8,8)-изомер ^!Н спектрометрия ЯМР (СЭ3ОЭ) δ 7,41-7,30 (т, 5Н), 7,20-7,14 (т, 3Н), 7,067,00 (т, 2Н), 5,85 (μ, I =6,6 Н, 1Н), 4,06 (8, 1Н), 2,70-2,60 (т, 1Н), 2,51 (άΐ, I =6,6, 3,3 Гц, 1Н), 2,44-2,31 (т, 2Н), 1,75-1,65 (т, 1Н), 1,65-1,54 (т, 3Н), 1,50 (ά, I =6,8 Н, 3Н), 1,20 (8, 3Н). ЖХ/МС аналогично рассчитанному для С₂₂Н₂₇ХО₃ 353, обнаружено 354 (М+Н)⁺.

Этап 3. (К)-2-(4-гидрокси-4-метилпиперидин-1-ил)-2-фенилуксусная кислота.

К раствору (8)-1-фенилэтил (К)-2-(4-гидрокси-4-метилпиперидин-1-ил)-2-фенилацетата (0,185 г, 0,52 ммоль) в дихлорметане (3 мл) добавляют трифторуксусную кислоту (1 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Летучие вещества впоследствии удаляют в вакууме. Остаток очищают с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ (Рптс8р11сгс С-18, 20x100 мм, СН₃СЫ-Н₂О-0,1% ТРА), в результате получают целевое соединение (как соль ТФУК) в виде бледно-голубоватого твердого тела (0,128 г, 98%) ЖХ/МС аналогично рассчитанному для С1₄Н1₉ЫО₃ 249, обнаружено 250 (М+Н)⁺.

Структура 16

(К) Структура 16

Этап 1. (8)-1-Фенилэтил 2-(2-фторфенил)ацетата.

Смесь 2-фторфенилуксусной кислоты (5,45 г, 35,4 ммоль), (8)-1-фенилэтанола (5,62 г, 46,0 ммоль), ЕЭС1 (8,82 г, 46,0 ммоль) и ЭМАР (0,561 г, 4,60 ммоль) в СН₂С1₂ (100 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч. Затем растворитель концентрируют и остаток разделяют с Н₂Оэтилацетатом. Фазы разделяют и водный слой снова экстрагируют этилацетатом (2х). Объединенные органические фазы промывают (Н₂О, солевой раствор), сушат (Яа₂8О₄) фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают с помощью хроматографии на силикагеле (Вю!аде/0-20% этилацетат-гексан), в результате получают целевое соединение в виде бесцветного масла (8,38 г, 92%). ¹Н спектрометрия ЯМР (СЭ₃ОЭ) δ 7,32-7,23 (т, 7Н), 7,10-7,04 (т, 2), 5,85 (μ, I =6,5 Гц, 1Н), 3,71 (8, 2Н), 1,48 (ά, I =6,5 Гц, 3Н).

Этап 2. (В)-((8)-1-Фенилэтил) 2-(2-фторфенил)-2-(пиперидин-1-ил)-ацетат.

К раствору (8)-1-фенилэтил 2-(2-фторфенил)ацетата (5,00 г, 19,4 ммоль) в ТГФ (1200 мл) при 0°С добавляют ЭВИ (6,19 г, 40,7 ммоль) и дают раствору нагреться до комнатной температуры, перемешивая в течение 30 мин. Затем раствор охлаждают до -78°С, добавляют раствор СВг₄ (13,5 г, 40,7 ммоль) в ТГФ (100 мл), полученную смесь нагревают до -10°С и перемешивают при этой температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь гасят насыщенным водным раствором ИН₄С1, слои сепарируют. Водный слой снова экстрагируют этилацетатом (2х). Объединенные органические фазы промывают (Н₂О, солевой р-р), сушат (Ха₂8О₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. К остатку добавляют пиперидин (5,73 мл, 58,1 ммоль) и перемешивают раствор при комнатной температуре в течение 24 ч. Летучие вещества затем концентрируют в вакууме и остаток очищают с помощью хроматографии на силикагеле (Вю!аде / 0-30% диэтиловый эфир-гексан). В результате получают чистую смесь диастереомеров (в соотношении 2:1 по ¹Н спектрометрии ЯМР) в виде желтого масла (2,07 г, 31%), а также непрореагировавший исходный материал (2,53 г, 51%). Последующая хроматография смеси диастереомеров (Вю!аде / 0-10% диэтиловый эфира-толуол) позволяет получить целевое соединение в виде бесцветного масла (0,737 г, 11%). ¹Н спектрометрия ЯМР (400 МГц, СЭ₃ОЭ) δ 7,52 (άάά, I =9,4, 7,6, 1,8 Гц, 1Н), 7,33-7,40 (т, 1), 7,23-7,23 (т, 4Н), 7,02 - 7,23 (т, 4Н), 5,86 (μ, I =6,6 Нг, 1Н), 4,45 (8, 1Н), 2,39 -2,45 (т, 4Н), 1,52 - 1,58 (т, 4Н), 1,40 - 1,42 (т, 1Н), 1,38 (ά, I =6,6 Нг, 3Н). ЖХ/МС: Аналогично рассчитанному для С₂1Н₂₄ЕЫО₂:341; обнаружено: 342 (М+Н).

Этап 3. (В)-2-(2-Фторфенил)-2-(пиперидин-1-ил)-уксусная кислота. Смесь (В)-((8)-1-фенилэтил)-2(2-фторфенил)-2-(пиперидин-1-ил)ацетата (0,737 г, 2,16 ммоль) и 20% Рй(ОН)₂/С (0,070 г) в этаноле (30 мл) подвергают гидрогенированию при комнатной температуре и атмосферном давлении (баллон Н₂) в течение 2 ч. Затем раствор продувают Аг, фильтруют через диатомитовый фильтр (СеШе®) и концентрируют в вакууме. В результате получают целевое соединение в виде бесцветного твердого вещества (0,503 г, 98%). Ή спектрометрия ЯМР (400 МГц, СЭ₃ОЭ) δ 7,65 (άάά, I =9,1, 7,6, 1,5 Гц, 1Н), 7,47-7,53 (т, 1Н), 7,21-7,30 (т, 2Н), 3,07-3,13 (т, 4Н), 1,84 (Ьг 8, 4Н), 1,62 (Ьг 8, 2Н) ЖХ/МС Аналогично рассчитанному для

- 24 018782

С;1 ΙΕΝΟ- 237, обнаружено 238 (М+Н)⁺.

Структура 17

(Н) Структура 17

Этап 1. (8)-1-Фенилэтил (В)-2-(4-гидрокси-4-фенилпиперидин-1-ил)-2-фенилацетат.

К раствору (8)-1-фенилэтил 2-бром-2-фенилацетата (1,50 г, 4,70 ммоль) в ТГФ (25 мл) добавляют триэтиламин (1,31 мл, 9,42 ммоль), после чего тетрабутиламмония йодида (0,347 г, 0,94 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 мин, а затем добавляют раствор 4фенил-4-гидроксипиперидина (1,00 г, 5,64 ммоль) в ТГФ (5 мл). Смесь перемешивают в течение 16 ч, а затем разбавляют ее этилацетатом (100 мл), промывают (Н₂Ох2, солевой раствор), сушат (Мд8О₄, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают в колонке с силикагелем (0-60% этилацетат-гексан), в результате получают смесь диастереомеров в соотношении примерно 2:1 согласно данным 'Н спектрометрии ЯМР. Разделение этих изомеров выполняют с использованием сверхкритической флюидной хроматографии (СЫта1се1 О1-Н, 30x250 мм, 20% этанола в СО₂ при 35°С), получая таким образом первый (В)-изомер целевого соединения (0,534 г, 27%) в виде желтого масла, а затем соответствующей (8)-изомер (0,271 г, 14%), также в виде желтого масла (8, В)-изомер. ¹Н ЯМР (400 МГц, СО3ОЭ) δ 7,55-7,47 (т, 4Н), 7,44-7,25 (т, 10Н), 7,25-7,17 (т, 1Н), 5,88 (д, 1 =6,6 Нг, 1Н), 4,12 (к, 1Н), 2,82-2,72 (т, 1Н), 2,64 (Л, 1=11,1, 2,5 Гц, 1Н), 2,58-2,52 (т, 1Н), 2,40 (Л, 1=11,1, 2,5 Гц, 1Н), 2,20 (Л, 1=12,1, 4,6 Гц, 1Н), 2,10 (Л, 1=12,1, 4,6 Гц, 1Н), 1,72-1,57 (т, 2Н), 1,53 (Л, 1=6,5 Гц, 3Н) ЖХ/МС анал. вычисл. для С27Н2^О3 415, найденное значение 416 (М+Н)⁺, (8,8)-изомер. ^!Н ЯМР (400 МГц, С1);О1)) δ 7,55-7,48 (т, 2Н), 7,45-7,39 (т, 2Н), 7,38-7,30 (т, 5Н), 7,25-7,13 (т, 4Н), 7,08-7,00 (т, 2Н), 5,88 (д, 1 =6,6 Гц, 1Н), 4,12 (к, 1Н), 2,95-2,85 (т, 1Н), 2,68 (Л, 1 =11,1, 2,5 Гц, 1Н), 2,57-2,52 (т, 1Н), 2,42 (Л, 1 =11,1, 2,5 Гц, 1Н), 2,25 (Л, 1 =12,1, 4,6 Гц, 1Н), 2,12 (Л, 1 = 12,1, 4,6 Гц, 1Н), 1,73 (άά, 1 =13,6, 3,0 Гц, 1Н), 1,64 (άά, 1 =13,6, 3,0 Гц, 1Н), 1,40 (Л, 1 =6,6 Гц, 3Н) ЖХ/МС анал. вычисл. для С₂7Н₂9NО₃ 415, найденное значение 416(М+Н)⁺.

Эфиры, перечисленные ниже, получают аналогичным способом с использованием этапа 1 синтеза Сар-17:

Химический		Диастереомер 1
полупродукт-17а	' Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-ά;,) δ 1,36 м д (ά, I = 6,41 Гц, ЗН) 2,23-2,51 (т,
	С	Э N	4Н) 3,35(5, 4Н) 4,25 ($, 1Н) 5,05 (5, 2Н) 5,82 (ά,
			1 = 6,71 Гц, 1Н) 7,15-7,52 (т, 15Н)
	о		ЖХ/МС анал вычисл для
		° А	458,22, Обнар 459,44
			(М+Н)+
			Диастереомер 2 ‘н ЯМР (500 МГц, ДМСО-Йб) δ 1,45 м д, (ά, 1 =6,71 Гц, ЗН) 2,272,44 (т, 4Н) 3,39 (з, 4Н) 4,23 (з, 1Н) 5,06 (5, 2Н) 5,83 (ά, 1 = 6,71 Гц, 1Н) 7,12 (άά, ά = 6,41, 3,05 Гц, 2Н) 7,19-7,27 (т, ЗН) 7,27- 7,44 (т, ЮН) ЖХ/МС анал вычисл для
			С28НМЫ2О4 458,55, Обнар 459,44 (М+Н)+
Химический		N о	Диастереомер 1
полупродукт-17Ъ	(		ВУ=11,76 мин (Условие 2), ЖХ/МС анал вычисл для Ο20Η22Ν2Ο3 338,4
	п		Обнар 339,39 (М+Н)\
		Диастереомер 2
		υό	ВУ=10,05 мин (Условие 2), ЖХ/МС анал вычисл для
			СгоНггМзОз 338,4, Обнар 339,39 (М+НГ
Химический		1	Диастереомер 1
полупродукт-17с	(	Тц = 4,55 мин (Условие 1), ЖХ/МС анал вычисл для С21Н26Ы2О2 338,44 Обнар 339,45 (М+Н)+,
	Ιί^Τ	* 11	Диастереомер 2
		0 (’ί	Тй= 6,00 мин (Условие 1),
			ЖХ/МС анал вычисл для
			Ο2ιΗ26Ν2Ο2 338,44 Обнар 339,45 (М+Н)+

- 25 018782

Химический полупродукт-17ά

Диастереомер 1

ВУ = 7,19 мин (Условие 1), ЖХ/МС анал вычисл для С₂7Н₂₉ЫО2 399,52

Обнар 400,48 (М+Н)⁺,

Диастереомер 2

ВУ = 9,76 мин (Условие 1), ЖХ/МС анал вычисл для 0₂₇Η₂₉Ν0₂ 399,52

Обнар 400,48 (М+Н)⁺

Условия проведения сверхкритической флюидной хроматографии хиральных элементов для определения времени удерживания (ВУ).

Условие 1.

Колонка	СЫгафак ΑΌ-Η Со1итп, 4,62x50 мм, 5 μ моль
Растворители Температура	90% СО2 - 10% метанол с 0,1% ЦЕА 35°С
Давление	150 бар
Скорость потока	2,0 мл/мин
УФ волна	220 нм

Введение

Условие 2.

Колонка Растворители Температура Давление Скорость потока УФ волна

Введение

1,0 мг/3 мл метанола

СЫга1се1 Οϋ-Н Со1итп, 4,62x50 мм, 5 цмоль

90% СО₂ -10% метанол с 0,1% ПЕА

35°С

150 бар

2,0 мл/мин

220 нм

1,0 мг/ мл метанола

Структура 17, этап 2. (Я)-2-(4-Гидрокси-4-фенилпиперидин-1-ил)-2-фенилуксусная кислота.

К раствору (8)-1-фенилэтил (Я)-2-(4-гидрокси-4-фенилпиперидин-1-ил)-2-фенилацетата (0,350 г, 0,84 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляют трифторуксусную кислоту (1 мл), смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Летучие вещества впоследствии удаляют в вакуумных условиях, остаток очищают с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ (РптебрЕеге С-18, 20 х 100 мм, СН₃С№Н₂О - 0,1% ТЕА), в результате получают целевое соединение (как соль ТФУК) в виде белого твердого вещества (0,230 г, 88%). ЖХ/МС: анал. вычисл. для С1₉Н₂^О₃: 311; найденное значение: 312 (М+Н)⁺.

Карбоновые кислоты, перечисленные ниже, получают аналогичным способом в оптически чистой форме:

Структура-17а	О сЛг	ВУ = 2,21 (Условие 2) [Н ЯМР (500 МГц, ДМСОчк) б м.д. 2,20-2,35 (т, 2Н) 2,34-2,47 (т, 2Н) 3,37 (5,4Н) 3,71 (5, 1Н) 5,06 (δ, 2Н) 7,06-7,53 (т, ЮН). ЖХ/МС: анал. вычисл. для: 02οΗ22Ν204 354,40; Обнар : 355,38 (М+Н)+
Структура 17Ь	сУ сЛ“	ВУ = 0,27 (Условие 21) ЖХ/МС: анал. вычисл. для: С12Н|4Ш>3 234,25; Обнар.: 235,22 (М+Н)+.
Структура 17с	ό сА”	ВУ = 0,48 (Условие 2) ЖХ/МС: анал. вычисл. для: 013ΗΙ8Ν202 234,29; Обнар : 235,31 (М+Н)+
Структура 17с1		ВУ = 2,21 (Условие 1) ЖХ/МС: анал. вычисл. для: 019Η21ΝΟ2 295,38; Обнар.: 296,33 (М+Н)+.

- 26 018782

Условия проведения ЖХ/МС для определения времени удерживания. Условие 1.

Колонка: РИепотепех-Ьипа 4,6Х 50 мм 810

Начало %В =

Конец %В = Градиентное время =

Скорость потока = Длина волны = Растворитель А = Растворитель В =

Условие 2.

Колонка:

Начало %В =

О

100 мин мл/мин

220

10% метанол - 90% Н₂О - 0,1% ТФУК

90% метанол - 10% Н₂О - 0,1% ТФУК \Уа1егз-8ипйге 4,6 X 50 мм 35

Конец %В =

100

Градиентное время = Скорость потока = Длина волны = Растворитель А = Растворитель В =

Условие 3

Колонка:

Начало %В =

Конец %В = Градиентное время = Скорость потока = Длина волны Растворитель А =

Растворитель В = мин мл/мин

220

10% метанол - 90% Н₂О - 0,1% ТФУК

90% метанол -10% Н₂О - 0,1% ТФУК

РИепотепех 10 μ 3,0 X 50 мм

100 мин мл/мин

220

10% метанол - 90% Н₂О - 0,1% ТФУК

90% метанол - 10% Н₂О - 0,1% ТФУК

Структура 18

А: Х = Н

В: Х = Вг

Структура 18

Этап 1. (К,8)-этил-2-(4-пиридил)-2-бромацетат.

К раствору этил 4-пиридилацетата (1,00 г, 6,05 ммоль) в сухом ТГФ (150 мл) при 0°С в присутствии аргона добавляют ΌΒϋ (0,99 мл, 6,66 ммоль). Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение 30 мин, а затем охлаждают до -78°С. К этой смеси добавляют СВг₄ (2,21 г, 6,66 ммоль) и продолжают перемешивание при температуре -78°С в течение 2 ч. Затем реакционную смесь гасят насыщенным водным р-ром ΝΉ₄Ο, после чего разделяют фазы. Органическую фазу промывают (солевой р-р), сушат Ща₂8О₄), фильтруют и концентрируют в вакуумных условиях. Полученное желтое масло сразу очищают при помощи флэш-хроматографии (8ίΘ₂ / гексан-этилацетат, 1 1), в результате получается целевое соединение (1,40 г, 95%) в виде несколько неустойчивого желтого масла. 'Н ЯМР (400 МГц, С1)С1_;) δ 8,62 (бб, 1 = 4,6, 1,8 Гц, 2Н), 7,45 (бб, 1 = 4,6, 1,8 Гц, 2Н), 5,24 (8, 1Н), 4,21-4,29 (т, 2Н), 1,28 (1, 1 = 7,1 Гц, 3Н) ЖХ/МС анал вычисл для С₉Н1оВ^О₂ 242,244, найденное значение 243,245 (М+Н)⁺.

Этап 2. (К,8)-этил-2-(4-пиридил)-2-(^№диметиламино)ацетат.

К раствору (К,8)-этил 2-(4-пиридил)-2-бромацетата (1,40 г, 8,48 ммоль) в ΌΜΤ (10 мл) при комнатной температуре добавляли диметиламин (2М в ТГФ, 8,5 мл, 17,0 ммоль). После завершения реакции (по данным тонкослойной хроматографии) летучие вещества удаляют в вакуумных условиях, остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (Вю1аде, колонка 40+М 81О₂, 50-100% этилацетат-гексан), таким образом получая целевое соединение (0,539 г, 31%) в виде светло-желтого масла ¹Н ЯМР (400 МГц, СИСГ) δ 8,58 (б, 1 = 6,0 Гц, 2Н), 7,36 (б, 1 = 6,0 Гц, 2Н), 4,17 (т, 2Н), 3,92 (8, 1Н), 2,27 (8, 6Н), 1,22 (1, 1 = 7,0 Гц). ЖХ/МС анал. вычисл. для СцН₁₆^О₂ 208, найденное значение 209 (М+Н)⁺.

- 27 018782

Этап 3. (К, 8)-2-(4-пиридил)-2-(^№диметиламино) уксусная кислота.

К раствору (К,8)-этил-2-(4-пиридил)-2-(^№диметиламино) ацетата (0,200 г, 0,960 ммоль) в смеси ТГФ-метанол-Н₂О (1 1 1, 6 мл) добавляют порошкообразный ЫОН (0,120 г, 4,99 ммоль) при комнатной температуре. Раствор перемешивают в течение 3 ч, а затем подкисляют до рН 6, используя 1Ν НС1. Водную фазу промывают этилацетатом, а затем лиофилизируют, в результате чего образуется дигидрохлорид целевого соединения в виде желтого твердого вещества (содержащего ЫС1). В таком виде продукт был использован в преобразованиях, описанных в последующих этапах. 'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ 8,49 (б, 1 =5,7 Гц, 2Н), 7,34 (б, 1 =5,7 Гц, 2Н), 3,56 (8, 1Н), 2,21 (8, 6Н).

Следующие вещества получают способом, аналогичным вышеописанному

Структура-19	ЫМе2 N	ЖХ/МС анал вычисл для ΟΗ12Ν202 180, Обнар 181 (М+Н)+
Структура-20	ИМе2 СЛ-	ЖХ/МС; ионизация отсутствует. Ή ЯМР (400 МГц, СЩОО) δ 8,55 (4, 1 = 4,3 Гц, 1Н), 7,84 (арр 1,1 = 5,3 Гц, 1Н), 7,61 (4,1 =7,8 Гц, 1Н), 7,37 (арр1,1=5,3 Гц, 1Н), 4,35 (з, 1Н), 2,60 (з, 1Н)
Структура-21	ΝΜθ2 |Г^Л-СО2Н СГ-|Г	ЖХ/МС: анал вычисл для: СЩпСМгОг: 214,216 Обнар : 215,217 (М+Н)+.
Структура-22	ММе2 Ж4-	ЖХ/МС: анал вычисл. для: СщНнЬйОт 224; Обнар.: 225 (М+Н)+.
Структура-23	ЫМег	ЖХ/МС: анал. вычисл для: 0ι4Η15ΝΟ4: 247; Обнар.: 248(М+Н)+.
Структура-24	ΝΜβ2	ЖХ/МС: анал вычисл. для: ΟιιΗ12Γ3ΝΟ2: 247; Обнар: 248 (М+Н)+
Структура-25	ΝΜβΗ	ЖХ/МС: анал. вычисл. для: ΟιιΗιιΕίΝΟι 247; Обнар.: 248 (М+Н)+.
Структура-26	ММе2 Счсогн	ЖХ/МС: анал. вычисл для: ΟιοΗι2ΓΝ02: 247; Обнар: 248 (М+Н)+.
Структура-2 7	ЫМе2 ЧУ1'00*	ЖХ/МС: анал. вычисл. для: СюНпГИОг· 247; Обнар : 248 (М+Н)*.
Структура-28	ΝΜβ2	ЖХ/МС: анал. вычисл. для: СюН12С1Ш2: 213, 215; Обнар.: 214, 217 (М+Н)+.
Структура-29		ЖХ/МС: анал. вычисл для: ΟιοΗιϊ01Ν02: 213, 215; Обнар : 214, 217 (М+Н)+.

- 28 018782

Структура-30	НМе2	ЖХ/МС: анал. вычисл. для: СюН12СШО2:213,215, Обнар.: 214, 217 (М+Н)*
Структура-31	ЫМе2 УУ^*СОгН	ЖХ/МС: анал. вычисл. для: С8Н12№028: 200; Обнар.: 201 (М+Н)*
Структура-32	ИМе2 АуМн νΐ	ЖХ/МС: анал. вычисл. для: СзНцЯОзК: 185; Обнар.: 186 (М+Н)*.
Структура-33	Шег зфАсОгН	ЖХ/МС: анал вычисл. для: СЩцИОгЗ: 185; Обнар.: 186 (М+Н)*.
Структура-34	ЫМег ο-Ν	ЯСХ/МС: анал вычисл для: СцН^Оз: 220; Обнар.: 221 (М+Н)*.
Структура-35	/¾. 1ММе2 Куу'-сОгН	ЖХ/МС: анал вычисл для: 0ι2ΗβΝΟ28: 235; Обнар.: 236(М+Н)*.
Структура-3 6	ММе2	ЖХ/МС: анал. вычисл. для: 0ηΗι4Ν2Ο28: 250; Обнар.: 251 (М+Н)*.

Структура 37

Μβ₂Ν''Ύ°^ΕΙ

О

А

⁰ НС1 ⁰ в

Структура 37

Этап 1. (К,§)-этил-2-(хинолин-3-ил)-2-(Ы,М-диметиламино)ацетат.

Смесь этил Ν,Ν-диметиламиноацетата (0,462 г, 3,54 ммоль), К₃РО₄ (1,90 г, 8,95 ммоль), Ρά ((-Ви₃Р)₂ (0,090 г, 0,176 ммоль) и толуола (10 мл) дегазируют в потоке пузырьков аргона в течение 15 мин. Затем реакционную смесь нагревают при температуре 100°С в течение 12 ч, после чего ее охлаждают до комнатной температуры и заливают в Н₂О. Смесь экстрагируют этилацетатом (2х). Объединенные органические фазы промывают (Н₂О, солевой раствор), сушат (№₂8О₄), фильтруют и концентрируют в вакуумных условиях. Остаток очищают сначала при помощи обращенно-фазовой ВЭЖХ (Рптекрйете С-18, 30х 100 мм; СН₃С№Н₂О-5 мМ ΝΗ^Α^, а затем флэш-хроматографии (§1О₂/гексан-этилацетат, 1:1), в результате получают целевое соединение (0,128 г, 17%), в виде оранжевого масла. 'Н ЯМР (400 МГц, С1ЯТ) δ 8,90 (ά, 1 =2,0 Гц, 1Н), 8,32 (ά, 1 =2,0 Гц, 1Н), 8,03-8,01 (т, 2Н), 7,77 (άάά, 1 =8,3, 6,8, 1,5 Гц, 1Н), 7,62 (άάά, 1 =8,3, 6,8, 1,5 Гц, 1Н), 4,35 (к, 1Н), 4,13 (т, 2Н), 2,22 (к, 6Н), 1,15 (ΐ, 1 =7,0 Гц, 3Н). ЖХ/МС: анал. вычисл. для С1₅Н₁₈^О₂: 258; найденное значение: 259 (М+Н)⁺.

Этап 2. (Я,8) 2-(хинолин-3-ил)-2-(^№диметиламино)уксусная кислота.

Смесь (К,8)-этил-2-(хинолин-3-ил)-2-(^№диметиламино) ацетата (0,122 г, 0,472 ммоль) и 6М НС1 (3 мл) нагревают при температуре 100°С в течение 12 ч. Растворитель удаляют в вакуумных условиях, в результате получают дигидрохлорид целевого соединения (0,169 г, >100%) в виде светло-желтой пены. В последующих этапах был использован неочищенный материал, без дополнительной очистки. ЖХ/МС: анал. вычисл. для С1₃Н1^₂О₂: 230; найденное значение: 231 (М+Н)⁺.

- 29 018782

Этап 1. (В)-((8)-1-Фенилэтил) 2-(диметиламино)-2-(2-фторфенил)ацетат и (8)-((8)-1-фенилэтил) 2(диметиламино)-2-(2-фторфенил)ацетат.

К смеси (В8)-2-(диметиламино)-2-(2-фторфенил)уксусной кислоты (2,60 г, 13,19 ммоль), ΌΜΛΡ (0,209 г, 1,71 ммоль) и (8)-1-фенилэтанола (2,09 г, 17,15 ммоль) в СН₂С1₂ (40 мл) добавляют ЕЭСЧ (3,29 г, 17,15 ммоль), смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч. Растворитель удаляют в вакуумных условиях и остаток разбавляют этилацетатом-Н₂О. Слои разделяют, водный слой снова экстрагируют этилацетатом (2х). Объединенные органические фазы промывают (Н₂О, солевой раствор), сушат (№ь8О₄). фильтруют и концентрируют в вакуумных условиях. Остаток очищают с помощью хроматографии на силикагеле (Вю(аде / 0-50% диэтиловый эфир-гексан). Полученную в результате смесь чистых диастереомеров сепарируют с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ (Рптекрйеге С-18, 30x100 мм; СН₃СК-Н₂О-0,1% ТФУК), таким образом получают сначала (8)-1-фенэтил (В)-2-(диметиламино)-2-(2торфенил)ацетат (0,501 г, 13%), а затем (8)-1-фенэтил (8)-2-(диметиламино)-2-(2-фторфенил)ацетат (0,727 г, 18%), оба вещества как их соли ТФУК. (8,В)-изомер: 'Н ЯМР (400 МГц, СО₃ОЭ) δ 7,65-7,70 (т, 1Н), 7,55-7,60 (ййй, 1=9,4, 8,1, 1,5 Ите, 1Н), 7,36-7,41 (т, 2Н), 7,28-7,34 (т, 5Н), 6,04 (ц, 1=6,5 Гц, 1Н), 5,60 (5, 1Н), 2,84 (5, 6Н), 1,43 (й, 1=6,5 Гц, 3Н). ЖХ/МС: анал. вычисл. для С^НгоЕЛОг: 301; найденное значение: 302 (М+Н)⁺; (8,8)-изомер: '11 ЯМР (400 МГц, СЭ₃ОЭ) δ 7,58-7,63 (т, 1Н), 7,18-7,31 (т, 6Н), 7,00 (йй, 1=8,5, 1,5 Гц, 2Н), 6,02 (ц, 1 =6,5 Гц, 1Н), 5,60 (5, 1Н), 2,88 (5, 6Н), 1,54 (й, 1=6,5 Гц, 3Н). ЖХ/МС: анал. вычисл. для С1₈Н₂₀ЕNО₂: 301; найденное значение: 302 (М+Н)⁺.

Этап 2. (В)-2-(диметиламино)-2-(2-фторфенил) уксусная кислота: смесь (В)-((8)-1-фенилэтил) 2(диметиламино)-2-(2-фторфенил)ацетат ТФУК соль (1,25 г, 3,01 ммоль) и 20% Рй (ОН)₂/С (0,125 г) в этаноле (30 мл) гидрогенизируют при комнатной температуре и атмосферном давлении (баллон Н₂) в течение 4 ч. Затем раствор продувают аргоном, фильтруют через диатомитовый фильтр (Се1йе®) и концентрируют в вакуумных условиях. Таким образом получают целевое соединение в виде бесцветного твердого вещества (0,503 г, 98%). '11 ЯМР (400 МГц, СЭ₃ОЭ) δ 7,53-7,63 (т, 2Н), 7,33-7,38 (т, 2Н), 5,36 (5, 1Н), 2,86 (5, 6Н). ЖХ/МС: анал. вычисл. для С1₀Н₁₂ЕNО₂: 197; найденное значение: 198(М+Н)⁺.

Аналогичным образом получают 8-изомеры из (8)-((8)-1-фенилэтил) 2-(диметиламино)-2-(2фторфенил) ацетат соли ТФУК.

Структура 39

Структура 39

Смесь (В)-(2-хлорфенил) глицина (0,300 г, 1,62 ммоль), формальдегида (35% водный раствор, 0,80 мл, 3,23 ммоль) и 20% Рй (ОН)₂/С (0,050 г) гидрогенизируют при комнатной температуре и атмосферном давлении (баллон Н₂) в течение 4 ч. Затем раствор продувают Аг, фильтруют через диатомитовый фильтр (Се1йе®) и концентрируют в вакуумных условиях. Остаток очищают с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ (Рпте5р11еге С-18, 30x100 мм; СН₃СN-Н₂О-0,1% ТФУК), чтобы получить ТФУК соль целевого соединения (В)-2-(диметиламино)-2-(2-хлорфенил) уксусной кислоты в виде бесцветного масла (0,290 г, 55%). '11 ЯМР (400 МГц, СЭ₃ОЭ) δ 7,59-7,65 (т, 2Н), 7,45-7,53 (т, 2Н), 5,40 (5, 1Н), 2,87 (5, 6Н). ЖХ/МС: анал. вычисл. для С^^СШО^ 213, 215; найденное значение: 214, 216 (М+Н)⁺.

Структура 40 о

Структура 40

В ледяной раствор (В)-(2-хлорфенил) глицина (1,00 г, 5,38 ммоль) и №1ОН (0,862 г, 21,6 ммоль) в Н₂О (5,5 мл) добавляют метил хлорформиат (1,00 мл, 13,5 ммоль) по капле. Смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч, а затем он его подкисляют путем добавления концентрированной НС1 (2,5 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом (2х). Объединенную органическую фазу промывают (Н₂О, солевой р-р), сушат ^а^ОД фильтруют и концентрируют в вакуумных условиях, получают целевое соединение (В)-2(метоксикарбониламино)-2-(2-хлорфенил) уксусную кислоту в виде желто-оранжевый пены (1,31 г, 96%). '11 ЯМР (400 МГц, СЭ₃ОЭ) δ 7,39-7,43 (т, 2Н), 7,29-7,31 (т, 2Н), 5,69 (5, 1Н), 3,65 (5, 3Н). ЖХ/МС: анал. вычисл. для С₁₀Н₁₀СЖО4: 243, 215; найденное значение: 244, 246 (М+Н)⁺.

Структура 41

Структура 41

- 30 018782

В суспензию 2-(2-(хлорметил) фенил) уксусной кислоты (2,00 г, 10,8 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляют морфолин (1,89 г, 21,7 ммоль) и перемешивают раствор при комнатной температуре в течение 3 ч. Затем реакционную смесь разбавляют этилацетатом и экстрагируют при помощи Н₂О (2х). Водную фазу лиофилизируют и остаток очищают с помощью хроматографии на силикагеле (Вю1аде/0-10% метанолСН₂С1₂), в результате получают целевое соединение 2-(2-(морфолинометил)фенил) уксусной кислоты в виде бесцветного твердого вещества (2,22 г, 87%). ¹Н ЯМР (400 МГц, СП₃ОЭ) δ 7,37-7,44 (т, 3Н), 7,297,33 (т, 1Н), 4,24 (§, 2Н), 3,83 (Ъг 8, 4Н), 3,68 (8, 2Н), 3,14 (Ъг 8, 4Н). ЖХ/МС: анал. вычисл. для С1₃Н₁₇ЫО₃: 235; найденное значение: 236 (М+Н)⁺.

Следующие вещества получают способом, аналогичным описанному для структуры-41:

Структура-42	Ро	ЖХ/МС: анал. вычисл. для: ί μΗιυΝΟ?: 233; Обнар.: 234 (М+Н)+,
Структура-43	п	ЖХ/МС: анал. вычисл. для: С,,НРХЮ.: 219; Обнар.: 220 (М+Н)+
Структура-44	Мв Λ	ЖХ/МС: анал. вычисл. для: €πΗ15ΝΟ2: 193; Обнар.: 194(М+Н)+.
Структура-45	Ζ-ΝΜβ Ν-Ρ	ЖХ/МС: анал. вычисл. для: СцН.,.Ч2О2 248, Обнар.: 249 (М+Н)+

Структура 45а

νη₂

Соль рТзОН

Структура 45-а

НМО8 (1,85 мл, 8,77 ммоль) добавляют к суспензии (Я)-2-амино-2-5 фенилуксусной кислоты ртолуолсульфоната (2,83 г, 8,77 ммоль) в СН₂С1₂ (10 мл) и перемешивают смесь при комнатной температуре в течение 30 мин. Метил изоцианат (0,5 г, 8,77 ммоль) добавляют одной порцией, продолжая перемешивать в течение 30 мин. Реакцию гасили путем добавления Н₂О (5 мл); полученную выпавшую фазу фильтруют, промывают в Н₂О и η-гексанах и высушивают в вакуумных условиях. (Я)-2-(3-метилуреидо)2-фенилуксусная кислота (1,5 г, 82%) была восстановлена в виде белого твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки 'Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 2,54 (б, 1=4,88 Гц, 3Н), 5,17 (б, 1 =7,93 Гц, 1Н), 5,95 (ф 1=4,48 Гц, 1Н), 6,66 (б, 1 =7,93 Нг, 1Н), 7,26-7,38 (т, 5Н), 12,67 (8, 1Н). ЖХ/МС анал вычисл для С1₀Н₁₂Ы₂О₃ 208,08, найденное значение 209,121 (М+Н)⁺, ВЭЖХ Рйепотепех С18 3,0х46 мм, от 0 до 100% В в течение 2 мин, время удерживания 1 мин, А=90% вода, 10% метанол, 0,1% ТФУК, В=10% вода, 90% метанол, 0,1% ТФУК, ВУ=1,38 мин, индекс гомогенности 90%.

Структура 46

Желаемый продукт был получен согласно методу, описанному для структуры-45а. ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 0,96 (ΐ, 1 =7,17 Гц, 3Н), 2,94-3,05 (т, 2Н), 5,17 (б, 1 =7,93 Гц, 1Н), 6,05 (ΐ, 1 =5,19 Гц, 1Н) 6,60 (б, 1 =7,63 Гц, 1Н), 7,26-7,38 (т, 5Н), 12,68 (8, 1Н) ЖХ/МС анал. вычисл. для СПН14Ы2О3 222,10 найденное значение 223,15 (М+Н)⁺, ВЭЖХ ХТЕККА. С-18 3,0x506 мм, от 0 до 100% В в течение 2 мин, время удерживания 1 мин, А= 90% вода, 10% метанол, 0,2% Н3РО₄, В=10% вода, 90% метанол, 0,2% Н3РО4, ВУ=0,87 мин, индекс гомогенности 90%.

- 31 018782

Структура 47

Этап 1. (К)-трет-Бутил-2-(3,3-диметилуреидо)-2-фенилацетат.

К раствору (К)-трет-бутил-2-амино-2-фенилацетата (1,0 г, 4,10 ммоль) и основания Хунига (1,79 мл, 10,25 ммоль) в ΌΜΕ (40 мл) добавляют диметилкарбамоил хлорид (0,38 мл, 4,18 ммоль) по капле в течение 10 мин. После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 ч, реакция была сконцентрирована при пониженном давлении, полученный остаток растворяли в этилацетате. Органический слой промывают в Н₂О, на 1Ν водном р-ре НС1 и солевом р-ре, сушат (Мд§О₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении (К)-трет-бутил-2-(3,3- диметилуреидо)-2-фенилацетат получают в виде белого твердого в-ва (0,86 г, 75%) и используют без дополнительной очистки ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-ώ,) δ м.д. 1,33 (8, 9Н), 2,82 (8, 6Н), 5,17 (ά, ί =7,63 Гц, 1Н), 6,55 (ά, ί =7,32 Гц, 1Н), 7,24-7,41 (т, 5Н), ЖХ/МС анал вычисл для С₄₅Н₂А₂О₃ 278,16 найденное значение 279 23 (М+Н)⁺, ВЭЖХ Рйеиотеиех ΓυΝΆ С-18 4,6x50 мм, от 0 до 100% В в течение 4 мин, время удерживания 1 мин, А= 90% вода, 10% метанол, 0,1 % ТФУК, В=10% вода, 90% метанол, 0,1% ТФУК, ВУ=2,26 мин, индекс гомогенности 97%.

Этап 2. (К)-2-(3,3-диметилуреидо)-2-фенилуксусная кислота.

К раствору (К)-трет-бутил-2-(3,3-диметилуреидо)-2-фенилацетата (0,86 г, 3,10 ммоль) в СН₂С1₂ (250 мл) добавляют ТФУК (15 мл) по капле, полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. Затем желаемое соединение выделили из раствора в виде осадка при помощи смеси этилацетата и гексана (5:20), профильтровали и высушили при сниженном давлении. В результате была получена (К)-2-(3,3-диметилуреидо)-2-фенилуксусная кислота в виде твердого вещества белого цвета (0,59 г, 86%). Это вещество использовалось без дальнейшей очистки. ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-й₆) δ м. д. 2,82 (8, 6Н), 5,22 (ά, 1= 7,32 Гц, 1Н), 6,58 (ά, 1= 7,32 Гц, 1Н), 7,28 (ΐ, 1= 7,17 Гц, 1Н), 7,33 (ΐ, 1= 7,32 Гц, 2Н), 7,38-7,43 (т, 2Н), 12,65 (8, 1Н). ЖХМС: анал. вычисл. для СцН₁₄^О₃ - 222,24, найденное значение 223,21 (М+Н)* ВЭЖХ колонка ХТЕККА С18, 3,0x50 мм, градиент фазы В 0-100% в течение 2 мин, время удерживания 1 мин, компонент А - 90% воды, 10% метанола, 0,2% Н₃РО₄, компонент В - 10% воды, 90% метанола, 0,2% Н₃РО₄, время удерживания 0,75 мин, индекс однородности 93%.

Структура-48

Структура 48

Этап 1. (К)-трет-бутил 2-(3-циклопентилуреидо)-2-фенилацетат.

К размешанному раствору гидрохлорида (К)2-амино-2-фенилуксусной кислоты (1,0 г, 4,10 ммоль) и основания Хунига (1,0 мл, 6,15 ммоль) в ДМФ (15 мл) в течение 10 мин по капле добавляли циклопентила изоцианат (0,46 мл, 4,10 ммоль). После размешивания при комнатной температуре в течение 3 ч, продукт реакции концентрировался при сниженном давлении. Полученный осадок разводился в бутилацетате. Органический слой промывался водой и солевым раствором, высушивался (Мд§О₄), фильтровался и концентрировался при пониженном давлении. В результате был получен (К)-трет-бутил 2-(3циклопентилуреидо)-2-фенилацетат в виде непрозрачного масла (1,32 г; 100%), который использовался без дальнейшей очистки. Ή ЯМР (500 МГц, СЭ₃С-Э) δ м.д. 1,50-1,57 (т, 2Н), 1,58-1,66 (т, 2Н), 1,87-1,97 (т, 2Н), 3,89-3,98 (т, 1Н), 5,37 (8, 1Н), 7,26-7,38 (т, 5Н). ЖХМС: анал. вычисл. для СУН-АО;: 318,19; найденное значение: 319,21 (М+Н)⁺. ВЭЖХ: колонка ХТЕККА С-18, 3,0x50 мм, градиент фазы В 0-100% - свыше 4 мин, время удерживания - 1 мин; компонент А - 90% воды, 10% метанола, 0,1% ТФУК; компонент В - 10% воды, 90% метанола, 0,1% ТФУК, время удерживания 2,82 мин, индекс однородности 96%.

Этап 2. (К)-2-(3-Циклопентилуреидо)-2-фенилуксусная кислота. В размешанный раствор (К)-третбутил-2-(3-циклопентилурейдо)-2-фенилацетата (1,31 г, 4,10 ммоль) в СН₂С1₂ (25 мл) по капле добавляли ТФУК (4 мл) и триэтилсилан (1, 64 мл; 10,3 ммоль). Полученный раствор размешивался при комнатной температуре в течение 6 ч. Летучие компоненты удалялись за счет разрежения, и полученный сырьевой продукт рекристаллизовывался в смеси этилацетата и пентана, в результате чего образовывалась (К)-2(3-циклопентилуреидо)-2-фенилуксусная кислота в виде твердого белого вещества (0,69 г, 64%). ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-ά,;) δ м.д. 1,17-1,35 (т, 2 Н), 1,42- 1,52 (т, 2Н), 1,53-1,64 (т, 2Н), 1,67-1,80 (т, 2Н), 3,75-3,89 (т, 1Н), 5,17 (ά, 1=7,93 Гц, 1Н), 6,12 (ά, 1= 7,32 Гц, 1Н), 6,48 (ά, 1=7,93 Гц, 1Н), 7,24-7,40 (т, 5Н), 12,73 (8, 1Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С1₄Н1^₂О₃ - 262,31; найденное значение - 263,15 (М+Н)⁺.

- 32 018782

ВЭЖХ: колонка ХТЕЯКА С-18, 3.0x50 мм, градиент фазы В 0-100% в течение 2 мин, время удерживания 1 мин; компонент А - 90% воды, 10% метанола, 0,2 % Н₃РО₄; компонент В - 10% воды, 90 % метанола, 0,2% Н₃РО₄, время удерживания 1,24 мин, индекс однородности 100%.

Структура-49 н 5

Структура-49

К размешанному раствору 2-(бензиламино) уксусной кислоты (2,0 г, 12,1 ммоль) в муравьиной кислоте (91 мл) был добавлен формальдегид (6,94 мл, 93,2 ммоль). После 5-часовой выдержки при температуре 70°С, реакционная смесь концентрировалась в условиях разрежения до 20 мл, в результате чего образовывался белый твердый осадок. После фильтрации исходные растворы собирались и концентрировались далее в условиях разрежения для получения неочищенного продукта. После проведения очистки методом подготовительной ВЭЖХ с обратимой фазой (хроматограф ХТЕЯКА 30x100 мм, обнаружение при 220 нм, скорость потока 35 мл/мин, градиент фазы В 0-35% в течение 8 мин; компонент А - 90% воды, 10% метанола, 0,1% ТФУК), было получено соединение, указанное в заголовке - 2-(бензил(метил)амино) уксусная кислота в виде соли ТФУК (723 мг, 33 %), представляющее собой бесцветную воскообразную массу. ^!Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 2,75 (5, 3Н), 4,04 (5, 2Н) 4,34 (5, 2Н), 7,29-7,68 (т, 5Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₁₀Н^О₂ -179,22; найденное значение - 180,20 (М+Н)⁺.

Структура-50

Структура-50

К размешанному раствору 3-метил-2-(метиламино) бутановой кислоты (0,50 г; 3,81 ммоль) в воде (30 мл) добавлялись реагенты, К₂СО₃ (2,63 г, 19,1 ммоль) и бензилхлорид (1,32 г, 11,4 ммоль). Реакционная смесь размешивалась при комнатной температуре в течение 18 ч и экстрагировалась с этилацетатом (30 мл х 2). Путем концентрации водного раствора в вакуумных условиях, был получен неочищенный продукт. Затем была выполнена его очистка методом подготовительной ВЭЖХ с обратимой фазой (хроматограф ХТЕЯЯЛ 30x100 мм, обнаружение при 220 нм, скорость потока 40 мл/мин, градиент фазы В 20-80% в течение 6 мин; компонент А - 90% воды, 10% метанола, 0,1% ТФУК; компонент В = 10% воды, 90% метанола, 0,1% ТФУК). В результате была получена 2-(бензил(метил)амино)-3-метилбутановая уксусная кислота, соль ТФУК (126 мг, 19%) в виде бесцветной воскообразной массы. ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 0,98 (й, 3Н), 1,07 (й, 3Н), 2,33-2,48 (т, 1Н) 2,54-2,78 (т, 3Н), 3,69 (5, 1Н) 4,24 (5, 2Н), 7,29-7,65 (т, 5Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С1₃Н^О₂ - 221,30; найденное значение - 222,28 (М+Н)⁺.

Структура-51

№ьСО₃ (1,83г, 17,2 ммоль) добавлялся к раствору Ь-валина (3,9 г, 33,29 моль) в №1ОН (33 мл 1М/Н₂О, 33 ммоль). Полученный раствор помещался в охлаждающую ванну с ледяной водой. Метилхлороформат (2,8 мл, 36,1 ммоль) добавлялся по капле в течение 15 мин. Затем охлаждающая ванна была убрана, и реакционная смесь размешивалась при комнатной температуре в течение 3,25 ч, после чего промывалась эфиром (50 мл, 3 раза). Водная фаза охлаждалась в ванне с ледяной водой и подкислялась путем добавления концентрированной соляной кислоты НС1, до достижения уровня рН примерно 1-2. После этого проводилась экстракция с СН₂С1₂ (50 мл, 3 раза). Органическая фаза высушивалась (Мд§О₄) и выпаривалась в вакуумных условиях, для получения структуры-51 в виде белого твердого вещества (6 г.) ¹Н ЯМР для доминантного ротамера (ДМСО-й6, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): 12,54 (5, 1Н), 7,33 (й, 1 = 8,6, 1Н), 3,84 (йй, 1= 8,4, 6,0, 1Н), 3,54 (5, 3Н), 2,03 (т, 1Н), 0,87 (т, 6Н). МСВР: анал. вычисл. для [М+Н]⁺ С7Н^О₄ - 176,0923; найденное значение - 176,0922.

Структура-52

Структура-52 синтезировался из Ь-аланина, аналогично процедуре, описанной для синтеза структуры-51. С целью характеризации, часть неочищенного материала была очищена методом ВЭЖХ с обратимой фазой (Н₂О/МеОН/ТРЛ), в результате чего была получена структура-52 в виде бесцветной вязкой массы. ^!Н ЯМР (ДМСО-й₆, δ =2,5 м.д., 500 МГц): 12,49 (Ьг 5, 1Н), 7,43 (й, 1 = 7,3, 0,88Н), 7,09 (арр Ьг 5, 0,12Н), 3,97 (т, 1Н), 3,53 (5, 3Н), 1,25 (й, 1 = 7,3, 3Н).

Структура-53. Структура-64 приготовлялись из подходящих исходных материалов, в соответствии с

- 33 018782 процедурой синтеза, описанной для структуры-51; при наличии каких-либо изменений, эти изменения указывались.

Структура	Формула	Данные
Структура-53а: Ж) Структура-5 ЗЬ: (8)		‘нЯМР (ДМСО-46, 5 = 2,5 м.д., 500 МГц): 5 12,51 (Ьг 5, 1Н), 7,4 (4,7=7,9, 0,9Н), 7,06 (арр 5, 0,1Н), 3,86-3,82 (т, 1Н), 3,53 (з, ЗН), 1,75-1,67 (т, 1Н), 1,62-1,54 (т, ΙΗ), 0,88 (4,7 = 7,3, ЗН). Время удерживания - 0,77 мин (Условие 2), ЖХ/МС: анал. вычисл. для [М+Ма]~СбНпМЧаО4: 184,06; найденное значение: 184.07; МСВР: анал. вычисл. для [М+На]+СбНпЫ1ЧаО4 - 184,0586; найденное значение - 184,0592

Структура-54а: Ж) Структура-5 4Ь: (3)		Ή ЯМР (ДМСО-йб, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): δ 12,48 (в, 1Н), 7,58 (4, 7= 7,6, 0,9Н), 7,25 (арр 5, 0,1Н), 3,52(з, ЗН), 3,36-3,33 (т, 1Н), 1,10-1,01 (т, 1Н), 0,54-0,49 (т, 1Н), 0,46-0,40 (т, 1Н), 0,39-0,35 (т, 1Н), 0,31-0,21 (т, 1Н). МСВР: анал. вычисл. для [М+Н]+ СУН^МСБ -174,0766; найденное значение -174,0771.
Структура-55	я 9 -ΟγΝ.^ΛΟΗ	’НЯМР (ДМСО-бб, 6 = 2,5 м.д., 500 МГц); 6 12,62 (з, 1Н), 7,42 (4, ./ = 8,2, 0,9Н), 7,07 (арр з, 0,1Н), 5,80-5,72 (т, ΙΗ), 5,10(4,7 = 17,1, 1Н), 5,04(4,7=10,4, 1Н), 4,01 -3,96 (т, 1Н), 3,53 (&, ЗН), 2,47-2,42 (т, 1Н), 2,35-2,29 (т, 1Н).
Структура-56	'•'θγ^-Ά-οΗ 0 Ч 1	Ή ЯМР (ДМСО-46, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): δ 12,75 ($, 1Н), 7,38 (4,7= 8,3, 0,9Н), 6,96 (арр з, 0,1Н), 4,20-4,16 (т, 1Н), 3,60-3,55 (т, 2Н), 3,54 (з, ЗН), 3,24 (з, ЗН)
Структура-5 7	н и	'Н ЯМР (ДМСО-4«, δ = 2,5 м.д, 500 МГц): й 12,50 (з, 1Н), 8,02 (4,7 = 7,7, 0,08Н), 7,40 (4,7= 7,9, 0,76Н), 7,19 (4,7 = 8,2, 0,07Н), 7,07 (4,7= 6,7, 0,09Н), 4,21-4,12 (т, 0.08Н), 4,06-3,97 (т, 0,07Н), 3,96-3,80 (т, 0.85Н), 3,53 (з, ЗН), 1,691,51 (т, 2Н), 1,39-1,26 (т,2Н), 0,85 (1,7 = 7,4, ЗН). ЖХ (Условие 2): время удерживания = 1,39 ЖХ/МС: аналогично. Анал. вычисл. для [М+Н]+ €?Ηΐ4Ν04 -176,09; найденное значение - 176,06.
Структура-58	-°тйАон о	Ή ЯМР (ДМСО-46, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): δ 12,63 (Ьгз, 1Н), 7,35 (з, 1Н), 7,31 (ά,1= 8,2, 1Н), 6,92 (в, 1Н), 4,33-4,29 (т, 1Н), 3,54 (з, ЗН), 2,54(44,7 = 15,5, 5,4, 1Н), 2,43 (44,7 = 15,6, 8,0, 1Н). Отн. время удерживания - 0,16 мин (Условие 2); ЖХ/МС: аналогично. Анал. вычисл. для [М+Н]+СбНцМ2О$ - 191,07, найденное значение -191,14.
Структура-59а: Ж) Структура-596: (8)	н 0	Ή ЯМР (ДМСО-46, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): δ 12,49 (Ьг з, 1Н), 7,40 (4, 7 = 7,3, 0,89Н), 7,04 (Ьг а, 0,1 1Н), 4,00-3,95 (т, ЗН), 1,24 (4, 7 = 7,3, ЗН), 1,15(1,7=7,2, ЗН). МСВР: аналогично. Анал. вычисл. для [М+Н]СбН12ЫО4 162 0766; найденное значение - 162,0771.
Структура-60	н 8 ЧХ* о	Неочищенный материал был очищен нри помощи ВЭЖХ с обратимой фазой (НзО/МеОН/ТГА), в результате чего было получено бесцветное вязкое масло. После кристаллизации в условиях высокого разрежения, масло кристаллизовалось в белое твердое вещество. ‘НЯМР (ДМСО-46, 8 = 2,5 м.д., 400 МГц): 6 12,38 (Ьг з, 1Н), 7,74 (з, 0,82Н), 7,48 (з, 0,18Н),

- 34 018782

		3,54/3,51 (два 5, ЗН), 1,30 (ш, 2Н), 0,98 (т, 2Н). МСВР: анал. вычисл. для [М+Н]+ Γ,-,Η,/,ΝΟ, 160,0610; найденное значение - 160,0604,
Структура-61	н 9	Ή ЯМР (ДМСО-46, 6 = 2,5 мд., 400 МГц): δ 12,27 (Ьг 5, 1Н), 7,40 (Ьг 8, 1Н), 3,50 (5, ЗН), 1,32 (в, 6Н). МСВР: анал. вычисл. для [Μ+Η]+Γ,;Η|2ΝΟ4 162,0766; найденное значение - 162,0765.
Структура-62	о	*Н ЯМР (ДМСО-ф, δ = 2,5 м.д,, 400 МГц): 8 12,74 (Ьг а, 1Н), 4,21 (4,7 = 10,3, 0,6Н), 4,05 (4, 7= 10,0, 0,4Н), 3,62/3,60 (два 5, ЗН), 3,0 (з, ЗН), 2,14-2,05 (т, 1Н), 0,95 (4,7= 6,3, ЗН), 0,81 (4,7 = 6,6, ЗН). ЖХ/МС: анал. вычисл. для [М-Н] 08Ηι4Νθ4 - 188,09; найденное значение 188,05.
Структура-63	н ? Ж™	[Примечание: реакции позволили протекать дольше, чем было указано для общей процедуры ] ‘Н ЯМР (ДМСО-4б, δ = 2,5 мд, 400 МГц): 12,21 (Ьг 8, 1Н), 7,42 (Ьг 8, 1Н), 3,50 (5, ЗН), 2,02-1,85 (ш, 4Н), 1,66-1,58 (т,4Н). ЖХ/МС: анал вычисл. для [М+Н]+ СвНнИОд 188,09, найденное значение -188,19.
Структура-64	н 9	[Примечание: реакции позволили протекать дольше, чем было указано для общей процедуры ] 11 ЯМР (ДМСО-4б, б = 2,5 м.д., 400 МГц): 12,35 (Ьг з, 1Н), 7,77 (з, 0,82Н), 7,56/7,52 (арр Ьг 8, 0,18Н), 3,50 (8, ЗН), 2,47 2,40 (ш, 2Н), 2,14-2,07 (ш, 2Н), 1,93 - 1,82 (ш, 2Н).

Структура-65

Метилхлорформиат (0,65 мл, 8,39 ммоль) добавлялся по капле в течение 5 мин к охлажденной (в ванне с ледяной водой) смеси (0,449 г, 4,23 ммоль), №ЮН (8,2 мл 1М/Н₂О, 8,2 ммоль) и (8)-3-гидрокси-2(метоксикарбониламино)-3-метилбутановой кислоты (1,04 г, 7,81 ммоль). Реакционная смесь размешивалась в течение 45 мин, после чего охлаждающая ванна удалялась, а размешивание продолжалось еще в течение 3,75 ч. Реакционная смесь промывалась СН₂С1₂; водная фаза охлаждалась в ледяной ванне и подкислялась концентрированной соляной кислотой НС1 до достижения уровня рН примерно 1-2. Летучие компоненты удалялись при помощи вакуума. Оставшаяся часть разводилась в смеси МеОН/СН₂СЬ₂ (15 мл) в соотношении 2:1 и фильтровалась. В результате последующей экстракции фильтрата была получена структура-65 в виде полувязкой пены белого цвета (1,236 г) ¹Н-ЯМР (ДМСО-й₆, δ = 2,5 м.д., 400 МН/): δ 6,94 (й, I = 8,5, 0,9 Н), 6,53 (Ьг 8, 0,1Н), 3,89 (й, 1= 8,8, 1Н), 2,94 (8, 3Н), 1,15 (8, 3Н), 1,13 (8,3Н).

Структуры-66 и -67 приготовлялись из подходящих, коммерчески доступных исходных материалов, путем выполнения процедуры, описанной для синтеза структуры-65.

Структура-66

Ή ЯМР (ДМСО-й₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): δ 12,58 (Ьг 8, 1 Н), 7,07 (й, I = 8,3, 0,13Н), 6,81 (й, I = 8,8, 0,67Н), 4,10- 4,02 (т, 1,15 Н), 3,91 (йй, I = 9,1, 3,5, 0,85Н), 3,56 (8, 3Н), 1,09 (й, I = 6,2, 3Н).

[Примечание: записывались только доминантные сигналы ΝΠ].

Структура-67

Ή ЯМР (ДМСО-й₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 12,51 (Ьг 8, 1 Н), 7,25 (й, I = 8,4, 0,75Н), 7,12 (Ьг й, I = 0,4, 0,05 Н), 6,86 (Ьг 8 0,08 Н),3,95- 3,85 (т, 2 Н), 3,54 (8,3 Н), 1,08 (й, I = 6,3, 3 Н). [Примечание: записывались только доминантные сигналы Ν^.

Структура-68

Метилхлороформиат (0,38 мл, 4,9 ммоль) по капле добавлялся к смеси 1 Н №ЮН (вод) (9,0 мл, 9,0

- 35 018782 ммоль), 1 М NаНСО₃ (вод) (9,0 мл, 9,0 моль), β-бензилового эстера Ь-аспарагиновой кислоты (1,0 г, 4,5 ммоль) и диоксана (9 мл). Реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре в течении 3 ч, а потом промывалась этилацетатом (50 мл, 3х). Водный слой окислялся с помощью 12 N НС1 до уровня рН~1-2 и экстрагировался с помощью этилацетата (3x50 мл). Комбинированные органические слои промывались соляным раствором, высушивались (№₂8О₄), фильтровались и концентрировались в вакуумных условиях до превращения структуры-68 в светло-желтое масло (1,37 г, выход массы выше теоретического, продукт использовался без дальнейшей очистки) ¹Н ЯМР (ДМСО-б₆, δ = 2,5 м.д., 500 МГц) δ 12,88 (Ьг 8, 1 Н), 7,55 (б, 1 = 8,5, 1Н), 7,40 - 7,32 (т, 5Н), 5,13 (б, 1 = 12,8, 1Н), 5,10 (б, 1 = 12,9, 1Н), 4,424,38 (т, 1Н), 3,55 (8, 3Н), 2,87 (бб, 1 = 16,2, 5,5, 1 Н), 2,71 (бб, 1 = 16,2, 8,3, 1Н), ЖХ (Усл 2) ВУ = 1,90 мин, ЖХ/МС анал. вычисл. для [М+Н] СвН^ЦО,·, 282,10, найденное значение 282,12.

Структура-69а и -69Ь

Структура-69а (И) - энантиомер θΒ Структура-69Ь (8) - энантиомер

NаСNΒН₃ (2,416 г, 36,5 ммоль) додавался отдельными порциями к охлажденному (~15°С) водному (17 мл)/МеОН (10 мл) раствору аланина (1,338 г, 15,0 ммоль) Несколько минут спустя ацетальдегид (4,0 мл, 71,3 ммоль) по капле добавлялся на протяжении 4 мин, охлаждающая баня извлекалась, и реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре на протяжении 6 ч. Дополнительно вводился ацетальдегид (4,0 мл), и реакционная смесь перемешивалась на протяжении 2 ч. Концентрированная НС1 медленно добавлялась до реакционной смеси до достижения уровня рН ~1,5, и полученная смесь нагревалась до 40°С на протяжении 1 ч. Большинство летучих компонентов были вакуумно удалены, а очищение от остатков проводилось с помощью ионно-обменной смолы Оо\гех®50\УХ8-100 (колба промывалась водой, а смесь была извлечена с помощью разведенного ΝΉ^Ό^ приготовленного путем смешивания 18 мл NН₄ОН и 282 мл воды) до превращения структуры-69 в практически белое мягкое гигроскопическое вещество. Ή ЯМР (ДМСО-б₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц) δ 3,44 (ц, 1 = 7,1, 1Н), 2,99-2,90 (т, 2 Н), 2,892,80 (т, 2Н), 1,23 (б, 1 = 7,1, 3Н), 1/13 (ΐ, 1 = 7,3, 6Н).

Структуры с 70 по 74 были приготовлены в соответствии с процедурой, описанной для синтеза структуры-69 с использованием необходимых исходных материалов

Структура- 7 0а: (V Структура 70Ь: (5)	Ц о	1 Н ЯМР (ДМСО-άΐ, δ = 2,5 м д, 400 МГц) δ 3,42 (Ч,1 = 7,1, 1 Н),2,68- 2,60 (т, 4 Н), 1,53 - 1,44 (т, 4Н), 1,19 (ά, 1 =7,3, ЗН), 0,85 (1, .1 =7,5, 6 Я), ЖХ/МС анал вычисл для [Μ + Н] С9 Н2о ΝΟ2 174,15, найденное значение 174,13
Структура-71а: (К) Структура 71Ь: (8)	Ал»	1 Н ЯМР (ДМСО-бб, δ = 2,5 м д, 500 МГц) δ 3,18-3,14 (т, 1 Н), 2,84-2,77 (т, 2Н),2,762,68 (т, 2 Н), 1,69-1,54 (т, 2 Н), 1,05 (1,1 =7,2, 6Н), 0,91 (1,1 =7,3, 3 Н), ЖХ/МС анал вычисл для [Μ + Н] С8 Ηι8 ΝΟ2 160,13, найденное значение 160,06
Структура -72		1 Н ЯМР (ДМСО-4, в - 2,5 мд, 400 МГц) δ 2,77-2,66 (т, 3 Н), 2,39-2,31 (т, 2Н),1,94 1,85 (т, 1 Н), 0,98 (1,1 =7,1, 6Н), 0,91 (4,1 =6,5, 3 Н), 0,85 ( 4,1 =6,5, 3 Н) ЖХ/МС анал вычисл для [Μ + Н] С9 Н2о ΝΟ2 174,15, найденное значение 174,15
Структура -73	'А о 'З^Аон чо 1	’ Н ЯМР (ДМСО-46, δ = 2,5 м д, 500 МГц) δ 9,5 (ро з,1Н), 3,77 (44,1 =10,8,4,1, 1Н), 3,69-3,61 (т, 2Н), 3,26 <6,3 Н),2,99-2,88 (т, 4Н), 1,13 (1,1=7,2, 6 Н)
Структура -74	—1 О νη2	1Н ЯМР (ДМСО-4б, δ = 2,5 м д, 500 МГц) δ 7,54 (я, 1 Н),6,89 (ε, 1Н), 3,81 (¢,1 = 6,6, к, 1Н), 2,82-2,71 (т, 4Н), 2,63 (44,1 =15,6, 7,0, 1Н), 2,36 (44,1 =15,4, 6,3, 1Н), 1,09 (ί, 1 -7,2, 6 II) ВУ - 0,125 минут (Усл 2), ЖХ/МС анал вычисл для [М + Н] СвНгМОз 189,12, найденное значение 189,13
Структура -74х	-=1 О	ЖХ/МС анал вычисл для [М + Н] Сю Н22 ΝΟ2 188,17, найденное значение 188,21

- 36 018782

Структура - 75, этап а

ИаВН₃СИ (1,6 г, 25,5 ммоль) добавлялся к охлажденному (лед/ванна с водой) водному (25 мл)/метанол (15 мл) раствору Н-Э-Сер-ОВх1 НС1 (2,0 г, 8,6 ммоль). Ацетальдегид (1,5 мл, 12,5 ммоль) по капле добавлялся на протяжении 5 мин, охлаждающая ванна удалялась, и реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре на протяжении 2 ч. Реакционная смесь осторожно погашалась с помощью 12 Н НС1 и концентрировалась в вакууме Остаток растворялись в воде очищался с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ (МеОН/Н₂О/ТРЛ) до превращения (К)-бензил-2-диэтиламино-3-гидроксипропановой соли ТФУК в бесцветное вязкое масло (1,9 г). ¹Н ЯМР (ДМСО-б₆, δ = 2,5 м.д., 500 МГц) δ 9,73 (Ьг 8, 1 Н),7,52-7,36 (т, 5Н), 5,32 (б, I =12,2, 1Н), 5,27 (б, I =12,5, 1Н), 4,54-4,32 (т, 1Н), 4,05-3,97 (т, 2Н), 3,43-3,21 (т, 4Н), 1,23 (ΐ, I =7,2, 6 Н) ЖХ/МС (Усл. 2) ВУ = 1,38 мин, ЖХ/МС анал вычисл для [М+Н] С1₄Н₂₂ИО₃ 252,16, найденное значение 252,19.

Структура - 75. ИаН (0,0727г, 1,82 ммоль, 60%) добавлялся к охлажденному (лед-вода) ТГФ (3,0 мл) раствору (К)-бензил2-(диэтиламино)-3-гидроксипропановой соли ТФУК (0,3019 г, 0,8264 ммоль), приготовление которой описано выше, и смесь перемешивалась на протяжении 15 мин. Добавлялся иодид метила (56 мкг/л, 0,90 ммоль), и перемешивание продолжалось 18 ч, пока вода в ванне не потеплеет до комнатной температуры. Реакционная смесь погашалась водой и загружалась в картридж, с предварительно обработанным МСХ МеОН (6 г), затем промывалась метанолом после извлечения смеси с помощью 2Н ИН₃/метанола. После вакуумного извлечения летучих компонентов, структура-75, контаминированная (К)-бензил 2-(диэтиламино)-3-гидроксипропаноловой кислотой, превращается в желтое полутвердое вещество (100мг). Вещество используется как есть, без дальнейшей очистки.

Структура- 76

ИаСИВНз (1,60 г, 24,2 ммоль) добавлялся отдельными порциями к охлажденному (~15°С) водно/МеОН (по 12 мл) раствору (8)-4-амино-2-(трет-бутоксикарбониламино)бутановой кислоте (2,17 г, 9,94 ммоль). Через несколько минут добавлялся по капле ацетальдегид (2,7 мл, 48,1 ммоль) на протяжении 2 мин, охлаждающая ванна удалялась, и реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре на протяжении 3,5 ч. Снова добавлялся ацетальдегид (2,7 мл, 48,1 ммоль) и реакционная смесь перемешивалась на протяжении 20,5 ч. Большинство компонентов МеОН удалялось вакуумно, и оставшаяся смесь обрабатывалась концентрированной НС1 до достижения уровня рН ~1,0, а потом нагревалась на протяжении 2 ч при 40°С. Летучие компоненты удалялись вакуумно, а остаток обрабатывался с помощью 4 М НС1/диоксана (20 мл) и перемешивался при комнатной температуре на протяжении 7,5 ч Летучие компоненты удалялись в вакуумных условиях, а остаток очищался с помощью ионно-обменной смолы Эо\\'ех®50\νΧ8-100 (колба промывалась водой, а смесь была извлечена с помощью разведенного ИН₄ОН, приготовленного путем смешивания 18 мл ИН₄ОН и 282 мл воды) до превращения промежуточной (8)-2-амино-4-(диэтиламино) бутановой кислоты в практически белое твердое вещество (1,73 г).

Метила хлороформиат (0,36 мл, 4,65 ммоль) добавлялся по капле на протяжении 11 мин к охлажденной (лед-вода) смеси Иа₂СО₃ (0,243 г, 2,29 ммоль), ИаОН (4,6 мл 1М/Н₂О, 4,6 ммоль) и вещества, описанного выше (802,4 мг). Реакционная смесь перемешивалась на протяжении 55 мин, потом охлаждающая ванна удалялась и перемешивание продолжалось на протяжении еще 5,25 ч. Реакционная смесь разбавлялась таким же объемом воды и промывалась с помощью СН₂С1₂ (30 мл, 2х), и водная фракция охлаждалась с помощью ледяно-водной ванны и окислялась с помощью концентрированной НС1 до уровня рН 2. После этого вакуумно удалялись летучие компоненты, и сырьевой материал свободно размещался в смолу МСХ (6,0 г, колонка была промыта водой и образец был элюирован 2,0 М ИН3/МеОН) до превращения неочищенной структуры-75 в практически белое твердое вещество (704 мг) ¹Н ЯМР (МеОН-б₄, δ = 3,29 м.д., 400 МГц) δ 3,99 (бб, I = 7,5, 4,7, 1Н), 3,62 (8, 3Н), 3,25-3,06 (т, 6Н),2,18-2,09 (т, 1 Н), 2,04-1,96 (т, 1Н), 1,28 (ΐ, I =7,3, 6Н). ЖХ/МС анал. вычисл. для [М+Н] СюН₂₁И₂О₄ 233,15, найденное значение 233,24.

- 37 018782

Структура - 77а и -77Ь

N Структура-77а (Н) - энантиомер

Синтез структуры-77 проводится в соответствии с процедурой, описанной для структуры-7, с использованием 7-азадицикло[2.2.1]гептана для перемещения 8Ν₂ и для энантиометрического отделения промежуточного продукта бензил-2-(7-азадицикло [2.2.1]гептан-7-ил)-2-фенилацетата, которое проводиться с использованием следующих условий промежуточный продукт (303,7 мг) растворяется в этиловом спирте и полученный раствор вводится в камеру ручной ВЭЖХ (камера СЫтасе1 ΛΌ-Н, 30x250 мм, 5 мкм), извлекается с помощью 90% СО₂-10% Е1ОН при скорости 70 мл/мин и температуре 35°С для получения 124,5 мг энантиомера-1 и 133,8 мг энантиомера-2. Эти бензиловые эстеры подвергаются гидрогенолизу в соответствии с подготовкой структуры-7 к приготовлению структуры-77. ¹Н ЯМР (ДМСО-б₆, δ= 2,5 м.д., 400 МГц) δ 7,55 (т, 2Н), 7,38-7,30 (т, 3Н),4,16 (8, 1Н), 3,54 (арр Ьг 8, 2Н), 2,08-1,88 (т, 4 Н), 1,571,46 (т, 4Н). ЖХ (усл 1) ВУ = 0,67 мин, ЖХ/МС анал вычисл для [М+Н] С₁₄Н^О₂ 232,13, найденное значение 232,18. Н-РМС анал. вычисл. для [М+Н] С₁₄Н^О₂ 232,1338, найденное значение 232,1340.

Структура-78 'он

УОВН₃ (0,5828 г, 9,27 ммоль) добавлялся к смеси НС1-соли (К)-2-(этиламино)-2-фенилацетовой кислоты (промежуточный продукт синтеза структуры-3, 0,9923 мг, 4,60 ммоль) и (1-этоксициклопропокси)-триметилсилана (1,640 г, 9,40 ммоль) в МеОН (10 мл), и наполовину однородная смесь нагревалась при 50°С на масляной бане на протяжении 20. Дополнительно вводился (1-этоксициклопропокси)триметилсилан (150 мг, 0,86 ммоль) и NаСNΒНз (52 мг, 0,827 ммоль), и реакционная смесь нагревалась на протяжении еще 3,5 ч. Затем смесь охладили до температуры окружающей среды и подкислили до ~рН 2 с помощью концентрированной НС1, смесь фильтровали, фильтрат выпарили. Полученный продукт растворили в ί-РгОН (6 мл) и нагрели до растворения, нерастворившуюся часть фильтровали, фильтрат концентрировали в вакуумных условиях. Около 1/3 полученного продукта очистили при помощи обращенно-фазовой ВЭЖХ (Н₂О/МеОН/ТГЛ) и в результате получили соль трифторацетата (ТФУК). Структуры-1% в виде бесцветного вязкого масла (353 мг). ¹Н ЯМР (ДМСО-б₆, δ = 2,5 м. д., 400 МГц, способный к обмену с И₂О) δ 7,56-7,49 (т, 5Н), 5,35 (8, 1Н), 3,35 (т, 1Н), 3,06 (арр Ьг 8, 1Н), 2,66 (т, 1Н), 1,26 (1, I = 7,3, 3Н), 0,92 (т, 1Н), 0,83-0,44 (т, 3Н) ЖХ (условие 1) ВУ (время удерживания) = 0,64 мин, ЖХ/МС анал вычисл для [М+Н]⁺ СвН^Оз 220,13, найденное значение 220,21. МСВР (массспектрометрия высокого разрешения) анал. вычисл. для [М+Н]⁺ С^Н^Оз 220,1338, найденное значение 220,1343.

Структура- 79

Озон пропустили через охлажденный (-78°С) СН2С12 (5,0 мл) раствор структуры-55 (369 мг, 2,13 ммоль) в течение 50 мин, пока реакционная смесь не стала светло-синего цвета. Добавили Ме₂8 (10 капель пипеткой), реакционную смесь перемешивали в течение 35 мин. Ванну -78°С заменили на ванну при -10°С и продолжили перемешивать еще 30 мин, затем удалили летучие компоненты в вакуумных условиях до получения бесцветного вязкого масла.

К NаΒНзСN (149 мг, 2,25 ммоль) добавили раствор МеОН (5,0 мл) указанного выше продукта и морфолин (500 мкл, 5,72 ммоль), смесь перемешивали в условиях окружающей среды в течение 4 ч. Ей дали остыть до температуры ледяной воды и добавили концентрированную НС1, чтобы уровень рН достиг ~2,0, затем перемешивали в течение 2,5 ч. Летучие компоненты удалили в вакуумных условиях, остаток очистили комбинацией смолы МСХ (промывка МеОН; 2,0 N NНз/ΜеОН вымывание) и обращеннофазовой ВЭЖХ (Н₂О/МеОН/ТГЛ), получив структуру-79, который содержит неизвестное количество морфолина.

С целью удалить морфолин, вышеуказанный продукт растворили в СН₂С1₂ (1,5 мл) и добавили Ε1₃Ν (0,27 мл, 1,94 ммоль), за которым последовал ангидрид уксусной кислоты (0,10 мл, 1,06 ммоль); смесь перемешивали в условиях окружающей среды в течение 18 ч. Добавили тетрагидрофуран (ТНГ) (1,0 мл) и Н2О (0,5 мл), продолжали перемешивать еще 1,5 ч. Летучие компоненты удалили в вакуумных условиях, а полученное вещество очистили смолой МСХ (промывка МеОН; 2,0 N NН₃/МеОН вымывание), что позволило получить неочищенную структура-79 в виде коричневого вязкого масла, которое использова- 38 018782 ли на следующем этапе без дальнейшего очищения. Структура-80а и -80Ь

Структура-80а: 8/5-диастереомер,

Структура-80в: $/Н- диастереомер

К 80С1₂ (6,60 мл, 90,5 ммоль) в течение 15 мин по капле добавляли охлажденную (ί° ледяной воды) смесь (8)-3-амино-4-(бензилокси)-4-оксобутановой кислоты (10,04 г, 44,98 ммоль) и МеОН (300 мл), охлаждающую ванну убрали и реакционную смесь перемешивали в условиях окружающей среды на протяжении 29 ч. Большую часть летучих компонентов удалили в вакуумных условиях, остаток осторожно распределили между ЕЮАс (150 мл) и насыщенным раствором Ν;·ιΗί'Ό₃ Водную фазу экстрагировали ЕЮАс (150 мл, 2х), собранную органическую фазу сушили (Мд80₄), фильтровали и концентрировали в вакуумных условиях до получения (8)-1-бензил 4-метил 2-аминосукцината в виде бесцветного масла (9,706 г). Ί1 ЯМР (ДМСО-й₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц,) δ 7,40-7,32 (м, 5Н), 5,11 (δ, 2Η), 3,72 (арр ί, = 6,6, 1Η), 3,55 (δ, 3Η), 2,68 (йй, I = 15,9, 6,3, 1Η), 2,58 (йй, I = 15,9, 6,8, 1Η), 1,96 (δ, 2Η). ЖХ (условие 1) ВУ (время удерживания) = 0,90 мин, ЖХ/МС анал. вычисл. для [Μ+Η]⁺^₂Η₁₆Ν0₄ 238,11, найденное значение 238,22.

Ρ^Ν0₃)₂ (6,06 г, 18,3 ммоль) добавляли в течение 1 мин в СИ₂С1₂ (80 мл) раствор (8)-1-бензил 4метил 2-аминосукцинат (4,50 г, 19,0 ммоль), 9-бром-9-фенил-9Шфлуорен (6,44 г, 20,0 ммоль) и Εί₃Ν (3,0 мл, 21,5 ммоль) и гетерогенную смесь перемешивали в условиях окружающей среды на протяжении 48 ч. Смесь фильтровали, к фильтрату добавляли Мд80₄ и снова фильтровали, конечный фильтрат концентрировали. Полученный продукт очистили Вю1аде (350 г силикагеля, СИ₂С1₂ промывка) до получения (8)-1-бензил 4-метил 2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)сукцината в виде бесцветного высоковязкого масла (7,93 г) ^!Н ЯМР (ДМСО-й6, δ = 2,5 м д, 400 МГц,) δ 7,82 (т, 2Н), 7,39-7,13 (т, 16Н), 4,71 (й, I = 12,4, 1Н), 4,51 (й, I = 12,6, 1Η), 3,78 (й, I = 9,1, ΝΗ), 3,50 (δ, 3Η), 2,99 (т, 1Η), 2,50-2,41 (т, 2Η, частично перекрывается растворителем) ЖХ (условие 1) ВУ (время удерживания) = 2,16 мин, ЖХ/МС анал вычисл для [М+Н]⁺ ^Η28Ν0₄ 478,20, найденное значение 478,19.

К ЬШМОЗ (гексаметилдисилазид лития) (9,2 мл, 1,0 М в ТГФУ, 9,2 ммоль) в течение 10 мин по капле добавляли охлажденный (-78°С) ТГФУ (50 мл) раствор (8)-1-бензил 4-метил 2-(9-фенил-9Н-флуорен9-иламино)сукцинат (3,907 г, 8,18 ммоль) и перемешивали ~1 ч. К смеси в течение 8 мин добавляли по капле Ме1 (0,57 мл, 9,2 ммоль) и продолжали перемешивать еще 16,5 ч, пока охлаждающая ванна не достигнет комнатной температуры. После охлаждения насыщенным раствором ΝΗ₄Ο (5 мл), большинство органических компонентов удаляли в вакуумных условиях, а остаток распределили между СИ₂С1₂ (100 мл) и водой (40 мл). Органический слой сушили (Мд80₄), фильтровали и концентрировали в вакуумных условиях, полученное вещество очищали при помощи Вю1аде (350 г силикагеля, 25% гексан-ЕЮАс), в результате чего получили 3,65 г 28/38 и 28/3К диастереомерических смесей 1-бензил 4-метил 3-метил-2(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)сукцинат в соотношении ~1,0 0,65 (1Н ЯМР). Стереохимия доминирующего изомера не была определена на данном этапе, смесь использовалась на следующем этапе без предварительного разделения. Данные ¹Н ЯМР (ДМСО-й6, δ = 2,5 м.д., 400 МГц,) основной диастереомер, δ 4,39 (й, I = 12,3, 1Н СН2), 3,33 (δ, 3Η, перекрывается с сигналом Η20), 3,50 (й, I = 10,9, ΝΗ), 1,13 (й, I = 7,1, 3Η), минорный диастереомер δ 4,27 (й, I = 12,3, 1Η СН2), 3,76 (й, I = 10,9, ΝΗ), 3,64 (δ, 3Η), 0,77 (й, I = 7,0, 3Н) ЖХ (условие 1) ВУ (время удерживания) = 2,19 мин, ЖХ/МС анал. вычисл. для [М+Н]⁺ ^2Η₃₀Ν0₄ 492,22, найденное значение 492,15.

К гидриду диизобутилалюминия (20,57 мл 1,0 М в гексанах, 20,57 ммоль) в течение 10 мин по капле добавляли охлажденный (-78°С) ТГФ (120 мл) раствор (28)-1-бензил 4-метил 3-метил-2-(9-фенил-9Нфлуорен-9-иламино)сукцинат (3,37 г, 6,86 ммоль), приготовленный выше, и перемешивали при -78°С в течение 20 ч. Реакционную смесь убрали с охлаждающей ванны и, перемешивая, быстро вылили в ~1М Н₃РО₄/Н₂О (250 мл), смесь экстрагировали эфиром (100 мл, 2х). Собранную органическую фазу промывали соляным раствором, сушили (Мд80₄), фильтровали, концентрировали в вакуумных условиях. Полученное вещество очищали методом хроматографии на колонке с силикагелем (25% гексан-ЕЮАс), что давало 1,1 г (28,38)-бензил 4-гидрокси-3-метил-2-(9-фенил-9Η-флуорен-9-иламино)бутан, контаминировали бензиловым спиртом, в результате чего получили в виде бесцветного вязкого масла (28,3К)-бензил 4-гидрокси-3-метил-2-(9-фенил-9Η-флуорен-9-иламино)бутан, содержащий (28,3К) стереоизомер - примесь. Последующий образец еще раз очистили методом хроматографии на колонке в тех же условиях, в результате чего получили 750 мг очищенного продукта в виде белой пены. [Примечание (28, 38) изомер элюируют раньше, чем (28, 3К) изомер в вышеуказанных условиях]. (28, 38) изомер ¹Н ЯМР (ДМСО-й6, δ= 2,5 м.д., 400 МГц,) δ 7,81(т, 2Н), 7,39-7,08 (т, 16Н), 4,67 (й, I = 12,3, 1Н), 4,43 (й, I = 12,4, 1Η), 4,21 (арр ί, I = 5,2, 0Η), 3,22 (й, I = 10,1, ΝΗ), 3,17 (т, 1Η), 3,08 (т, 1Η), ~2,5 (т, 1Η, перекрывается с сигналом растворителя), 1,58 (т, 1Η), 0,88 (й, 1 = 6,8, 3Н) ЖХ (условие 1) ВУ (время удерживания) = 2,00 мин, ЖХ/МС анал вычисл для [М+Н]⁺ ^ιΗ30Ν0₃ 464,45, найденное значение 464,22. (28, 3К) изомер ¹Н ЯМР

- 39 018782 (ДМСО-й₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц,) δ 7,81 (й, 1 = 7,5, 2Н), 7,39-7,10 (т, 16Н), 4,63 (й, 1 = 12,1, 1Н), 4,50 (арр ΐ, 1 = 4,9, 1Н), 4,32 (й, 1 = 12,1, 1Н), 3,59-3,53 (т, 2Н), 3,23 (т, 1Н), 2,44 (йй, 1 = 9,0, 8,3, 1Н), 1,70 (т, 1Н), 0,57 (й, 1 = 6,8, 3Н). ЖХ (условие 1) ВУ (время удерживания) = 1,92 мин, ЖХ/МС анал. вычисл. для [М+Н]⁺Сз1Н₃^Оз 464,45, найденное значение 464,52.

Соответственные стереохимические представления о О1ВЛЬ (гидрид диизобутилалюминия)редуцированных продуктах были основаны на исследованиях ядерного эффекта Оверхаузера о производных лактонов из каждого изомера согласно следующему протоколу к Ь1НМО§ (гексаметилдисилазид лития) (50 мкл, 1,0 М в ТГФУ, 0,05 ммоль) добавили охлажденный (ΐ° ледяной воды) ТГФ (2,0 мл) раствор (28, 38)-бензил 4-гидрокси-3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)бутана (62,7 мг, 0,135 ммоль), реакционную смесь перемешивали при той же температуре в течение ~2 ч. Летучие компоненты удалили в вакуумных условиях, остаток распределили между СН₂С1₂ (30 мл), водой (20 мл) и насыщенным водным раствором ΝΉ₄Ο (1 мл). Органический слой сушили (Мд8О₄), фильтровали и концентрировали в вакуумных условиях, полученный продукт очистили при помощи Вю1аде (40 г силикагеля, 1015% гексан-ЕЮЛс), и получили (38, 48)-4-метил-3-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламно)дигидрофуран-2(3Н)он в виде бесцветного твердого вещества (28,1 мг) (28, 3Я)-бензил 4-гидрокси-3-метил-2-(9-фенил-9Нфлуорен-9-иламино)бутан создан подобно (38, 48)-4-метил-3-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламно)дигидрофуран-2(3Н)-он (38, 48)-лактон изомер. ^!Н ЯМР (ДМСО-й6, δ = 2,5 м д , 400 МГц,), 7,83 (й, 1 = 7,5, 2Н), 7,46-7,17 (т, 11Н), 4,14 (арр ΐ, 1 = 8,3, 1Н), 3,60 (й, 1 = 5,8, ΝΉ), 3,45 (арр ΐ, 1 = 9,2, 1Н), ~2,47 (т, 1Н, частично перекрывается с сигналом растворителя), 2,16 (т, 1Н), 0,27 (й, 1 = 6,6, 3Н) ЖХ (Условие 1) ВУ (время удерживания) = 1,98 мин, ЖХ/МС анал вычисл для [М+№]⁺С24Н21МЫаО2 378,15, найденное значение 378,42 (38, 4Я)-лактон изомер ^!Н ЯМР (ДМСО-й6, δ = 2,5 м. д., 400 МГц,), 7,89 (й, 1 = 7,6, 1Н), 7,85 (й, 1 = 7,3, 1Н), 7,46-7,20 (т, 11Н), 3,95 (йй, 1 = 9,1, 4,8, 1Н), 3,76 (й, 1 = 8,8, 1Н), 2,96 (й, 1 = 3,0, ΝΉ), 2,92 (йй, 1 = 6,8, 3, ХСН). 1,55 (т, 1Н), 0,97 (й, 1 = 7,0, 3Н), ЖХ (условие 1) ВУ (время удерживания) = 2,03 мин, ЖХ/МС анал. вычисл. для |М+№1|' С₂₄Н₂₁МЫаО₂ 378,15, найденное значение 378,49.

ТВЭМ8-С1 (трет-бутилхлорид диметилсилан) (48 мг, 0,312 ммоль) и имидазол (28,8 мг, 0,423 ммоль) добавили в СН2С12 (3 мл) раствор (28,38)-бензил 4-гидрокси-3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9иламино)бутана (119,5 мг, 0,258 ммоль), смесь перемешивали в условиях окружающей среды в течение 14,25 ч. Затем реакционную смесь разбавили СН₂С1₂ (30 мл) и промыли водой (15 мл), органический слой сушили (Мд8О4), фильтровали и концентрировали в вакуумных условиях Полученный продукт очистили при помощи оборудования В1о!аде (40 г силикагеля, 5% гексан-ЕЮЛс), и получили (28, 38)-бензил 4(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)бутан, контаминировали ТВОМ8-основными примесями в виде бесцветного вязкого масла (124,4 мг) (28, 3Я)-бензил 4-гидрокси3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)бутан создан подобно (28, 3Я)-бензил 4-(третбутилдиметилсилилокси)-3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)бутану (28, 38)-силил эфир изомер ^!Н ЯМР (ДМСО-й6, δ = 2,5 м д , 400 МГц,), 7,82 (й, 1 = 4,1, 1Н), 7,80 (й, 1 = 4,0, 1Н), 7,38-7,07 (т, 16Н), 4,70, (й, 1 = 12,4, 1Н), 4,42 (й, 1 = 12,3, 1Н), 3,28-3,19 (т, 3Н), 2,56 (йй, 1 = 10,1, 5,5, 1Н), 1,61 (т, 1Н), 0,90 (й, 1 = 6,8, 3Н), 0,70 (5, 9Н), -0,13 (5, 3Н), -0,16 (5, 3Н)) ЖХ (условие 1, при котором время выполнения увеличено на 4 минуты) ВУ (время удерживания) = 3,26 мин, ЖХ/МС анал вычисл для [М+Н]⁺ С37Н₄^О₃81 578,31, найденное значение 578,40 (28, 3Я)-силил эфир изомер ¹Н ЯМР (ДМСО-й₆, δ = 2,5 м д , 400 МГц,), 7,82 (й, 1 = 3,0, 1Н), 7,80 (й, 1 = 3,1, 1Н), 7,39-7,10 (т, 16Н), 4,66 (й, 1 = 12,4, 1Н), 4,39 (й, 1 = 12,4, 1Н), 3,61 (йй, 1 = 9,9, 5,6, 1Н), 3,45 (й, 1 = 9,5, 1Н), 3,41 (йй, 1 = 10, 6,2, 1Н), 2,55 (йй, 1 = 9,5, 7,3, 1Н), 1,74 (т, 1Н), 0,77 (5, 9Н), 0,61 (й, 1 = 7,1, 3Н), -0,06 (5,3Н), -0,08 (5,3Н).

Смесь (28, 38)-бензил 4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)бутаноата (836 мг, 1,447 ммоль) и 10% Рй/С (213 мг) в этилацетате (16 мл) обрабатывалась водородом из баллона. Полученная смесь размешивалась при комнатной температуре в течение примерно 21 ч, по мере необходимости, баллон перезаряжался водородом. Реакционная смесь разбавлялась СН2С12 и пропускалась через диатомитовый фильтр (Се1йе-545®). Затем фильтр промывался поочередно чистым этилацетатом (200 мл), смесью этилацетата и метанола (1:1, 200 мл) и чистым метанолом (750 мл). Комбинированная органическая фаза концентрировалась, и из полученного неочищенного материала формировалась силикогелевая сетка, передававшаяся на флэш-хроматографию (смесь ЕЮЛс/1-РЮН/Н₂О в пропорции 8:2:1). В результате, была получена (28, 38)-2-амино-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3метилбутановая кислота в виде белого твердого вещества, состоящего из хлопьев (325 мг) (28, 3Я)бензил-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-метил-2-(9-фенил-9Н-фторен-9-иламино)бутаноат был тем же способом переработан в (28, 3Я)-2-амино-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-метилбутановую кислоту (28, 38)-изомер аминокислоты ¹Н ЯМР (Метанол-й4, δ = 3,29 м.д., 400 МГц), 3,76 (йй, 1 = 10,5, 5,2, 1Н), 3,73 (й, 1 = 3,0, 1Н), 3,67 (йй, 1 = 10,5, 7,0, 1Н), 2,37 (т, 1Н), 0,97 (й, 1 = 7,0, 3Н), 0,92 (5, 9Н), 0,10 (5, 6Н) ЖХ/МС анал вычисл для [М+Н]⁺ СцН2&ЫО₃81 - 248,17, найденное значение - 248,44, (28,3Я) - изомер аминокислоты ¹Н ЯМР (Метанол-й4, δ = 3,29 м.д., 400 МГц), 3,76-3,75 (т, 2Н), 3,60 (й, 1 = 4,1, 1Н), 2,16 (т, 1Н), 1,06 (й, 1 - 7,3, 3Н), 0,91 (5, 9Н), 0,09 (5, 6Н) Анал. вычисл. для [М+Н]⁺ СцН2&ЫО₃81 - 248,17, найденное значение - 248,44.

Н₂О (1 мл) и №1ОН (0,18 мл 1,0 М/Н₂О, 0,18 ммоль) добавлялись к смеси (28,38)-2-амино-4-(трет

- 40 018782 бутилдиметилсилилокси)-3-метилбутановой кислоты (41,9 мг, 0,169 ммоль) и №ьСО₃ (11,9 мг, 0,112 ммоль), после чего размешивались в ультразвуковой ванне в течение 1 мин, чтобы добиться растворения реагентов. Полученная смесь охлаждалась в ледяной ванне. В течение 30 с добавлялся метилхлорформат (0,02 мл, 0,259 ммоль) и производилось энергичное размешивание при той же температуре в течение 40 мин, а затем при комнатной температуре в течение 2,7 ч Реакционная смесь разбавлялась 5 мл воды, охлаждалась в ледяной ванне, после чего в смесь по капле добавлялся водный раствор 1,0 Ν НС1 (примерно 0,23 мл). Полученная смесь вновь разводилась водой (10 мл) и производилась ее экстракция при помощи СН₂С1₂ (15 мл, 2 раза). Комбинированная органическая фаза высушивалась (Мд§О₄), фильтровалась и концентрировалась в вакуумных условиях. В результате была получена структура-80а. в виде твердого вещества почти белого цвета. Тем же способом (28,3Я)-2-амино-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3метилбутановая кислота была переработана в структуру-80Ь структура-80а. ¹Н ЯМР (ДМСО-б6, δ = 2,5 м.д, 400 МГц), 12,57 (Ьг 8, 1Н), 7,64 (ά, 1= 8,3, 0,3Н), 7,19 (ά, 1= 8,8, 0,7Н), 4,44 (άά, I = 8,1, 4,6, 0,3Н), 4,23 (άά, I = 8,7, 4,4, 0,7Н), 3,56/3,53 (два синглета, 3Н), 3,48-3,40 (т, 2Н), 2,22-2,10 (т, 1Н), 0,85 (8, 9Н), ~0,84 (ά, 0,9Н, перекрытие с сигналом ΐ-Ви), 0,79 (ά, ΐ = 7, 2,1Н), 0,02/0,01/0,00 (три перекрывающихся синглета, 6Н) ЖХ/МС анал вычисл для |М+№1|' СвН3^№1О38| - 328,16, найденное значение - 328,46. Структура-80Ь ^!Н ЯМР (СОС13, δ = 7,24 м.д., 400 МГц), 6,00 (Ьг ά, 1= 6,8, 1Н), 4,36 (άά, I = 7,1, 3,1, 1Н), 3,87 (άά, I = 10,5, 3,0, 1Н), 3,67 (8, 3Н), 3,58 (άά, 1= 10,6, 4,8, 1Н), 2,35 (т, 1Н), 1,03 (ά, 1= 7,1, 3Н), 0,90 (8, 9Н), 0,08 (8, 6Н) ЖХ/МС анал. вычисл. для |М+№1|' СвН₃^№1О₃8| - 328,16, найденное значение - 328,53.

Неочищенные продукты утилизировались без дальнейшей очистки

Структура-81

Приготовлена согласно протоколу, описанному Фальбом и др 8уп1е11с Соттишсайои8 1993, 23,

2839.

Структура 82-85

Структуры 82-85 были синтезированы из подходящих исходных материалов, в соответствии с процедурой, описанной для структуры-51 Спектральные профили образцов были сходны с профилями их энантиомеров (т е структуры-4, структуры -13, структуры -51 и структуры -52, соответственно) 'ОН

О Р6

Структура-82

Структура-86

МвОгСНЫ

Структура-85 'ОН „а

К смеси О-метил-Ь-треонина (3,0 г, 22,55 ммоль) и №1ОН (0,902 г, 22,55 ммоль) в Н₂О (15 мл) по капле добавлялся С1СО₂Ме (1,74 мл, 22,55 ммоль) при температуре 0°С. Смесь размешивалась в течение 12 ч и подкислялась до достижения уровня рН=1, путем добавления 1Ν НС1. Водная фаза экстрагировалась при помощи смеси этилацетата (2х250 мл) и 10% метанола в СН₂С1₂ (250 мл), а комбинированные органические фазы концентрировались в вакуумных условиях. В результате было получено бесцветное масло (4,18 г, (97%) с чистотой, достаточной для использования на дальнейших стадиях. ^!Н-ЯМР (400 МГц, СОС1_;) δ 4,19 (8, 1Н), 3,92-3,97 (т, 1Н), 3,66 (8, 3Н), 1,17 (ά, 1= 1,1 Гц, 3Н). ЖХ/МС: анал. вычисл. для С 1ΙΆΌ, - 191; найденное значение - 190 (М-Н).

Структура-87

МеОгСНИ

Н<

ОН

К смеси Ь-гомосерина (2,0 г, 9,79 ммоль), №ьСО₃ (2,08 г, 19,59 ммоль) в Н₂О (15 мл) по капле добавлялся С1СО2Ме (0,76 мл, 9,79 ммоль) при температуре 0°С. Смесь размешивалась в течение 48 ч и подкислялась до уровня рН 1, путем добавления 1Ν НС1. Водная фаза экстрагировалась при помощи этилацетата (2х250 мл), а комбинированные органические фазы концентрировались в вакуумных условиях. В результате было получено твердое бесцветное вещество (0,719 г, 28%) с чистотой, достаточной для использования на дальнейших стадиях. ¹Н-ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 4,23 (άά, I = 4,5, 9,1 Гц, 1Н), 3,66 (8, 3Н), 3,43-3,49 (т, 2Н), 2,08-2,14 (т, 1Н), 1,82-1,89 (т, 1Н). ЖХМС: анал. вычисл. для (ΊΙ-.ΝΌ.. - 191; найденное значение - 192 (М+Н)⁺.

Структура-88

- 41 018782

Смесь Ь-валина (1,0 г, 8,54 ммоль), 3-бромпиридина (1,8 мл, 18,7 ммоль), К₂СО₃ (2,45 г, 17,7 ммоль) и Си1 (169 мг, 0,887 ммоль) в ДМСО (10 мл) была нагрета до температуры 100°С и выдержана при этой температуре 12 ч. Полученная реакционная смесь была охлаждена до комнатной температуры, влита в Н₂О (около 150 мл) и дважды промыта этилацетатом (х2). Органические слои экстрагировались с небольшим количеством Н₂О, а комбинированные водные фазы были подкислены до достижения уровня рН примерно 2, путем добавления 6Ν НС1. Далее, объем сократили примерно на треть и добавили 20 г катионообменной смолы (8!га!а). Полученной суспензии позволили отстояться в течение 20 мин, после чего она была помещена на подушечку из катионообменной смолы (8!га!а) (примерно 25 г). Подушечка поочередно была промыта водой (200 мл), метанолом (200 мл), и ΝΉ₃ (3М в МеОН, 2x200 мл). Необходимые фракции концентрировались в вакуумных условиях, а осадок (около 1,1 г) был растворен в воде, заморожен и лиофилизирован. Соединение, указанное в заготовке, было получено в виде пены (1,02 г, 62 %). Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСОД₆) δ 8,00 (8, Ьг, 1Н), 7,68 - 7,71 (т, 1Н), 7,01 (8, Ьг, 1Н), 6,88 (ά, 1= 7,5 Гц, 1Н), 5,75 (8, Ьг, 1Н), 3,54 (8, 1Н), 2,04 - 2,06 (т, 1Н), 0,95 (ά, I = 6,0 Гц, 3Н), 0,91 (ά, 1= 6,6 Гц, 3Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₁₀Н₁₄^О2 - 194; найденное значение - 195 (М+Н)⁺.

Структура-89

Смесь Ь-валина (1,0 г, 8,54 ммоль), 5-бромопиридина (4,03 г, 17,0 ммоль), К₂СО₃ (2,40 г, 17,4 ммоль) и Си1 (179 мг, 0,94 ммоль) в ДМСО (10 мл) была нагрета до температуры 100°С, и выдержана 12 ч при этой температуре. Реакционная смесь была охлаждена до комнатной температуры, влита в воду (около 150 мл) и дважды промыта этилацетатом (х2). Органические слои экстрагировались с небольшим количеством воды, а комбинированные водные фазы подкислялись до достижения уровня рН примерно 2, путем добавления 6Ν НС1. Далее, объем был сокращен примерно на треть, и было добавлено 20 г катионообменной смолы (8!га!а). Полученной суспензии позволили отстояться в течение 20 мин, после чего она была помещена на подушечку из катионообменной смолы (8!га!а) (примерно 25 г). Подушечка поочередно была промыта водой (200 мл), метанолом (200 мл), и ΝΉ₃ (3М в МеОН, 2x200 мл). Необходимые фракции концентрировались в вакуумных условиях. Остаток (около 1,1 г) был растворен в воде, заморожен и лиофилизирован. Соединение, указанное в заготовке, было получено в виде пены (1,02 г, 62 %) ¹Н-ЯМР (400 МГц, СО₃ОЬ) показало, что смесь содержит валин, и степень его чистоты невозможно оценить. Для проведения дальнейших реакций материал использовался при степени чистоты как для основного вещества. ЖХМС: анал. вычисл. для С₉Н₁₄^О₂ - 194, найденное значение - 196 (М+Н)⁺.

Структура-90

Приготовление осуществлялось в соответствии с методом, описанным для структуры-1. Неочищенный материал на последующих стадиях использовался со степенью чистоты как для основного вещества. ЖХМС: анал. вычисл. для СцН^О₂ - 193, найденное - 192 (М-Н)^-.

Все структуры, указанные ниже, были приготовлены в соответствии с методикой, использовавшейся для приготовления структуры -51

Структура	Формула	ЖХМС
Структура-91	МНСО^Ме с/·-'™'·	ЖХМС анал вычисл дляСпН1зМ>4223, найденное значение - 222 (М-Н)'
Структура-92	ЫНСО2Ме О	ЖХМС анал вычисл для СцНвМ^ 223, найденное значение - 222 (М-Н)
Структура-93	ΗΝγΛ0Η кьЛ	ЖХМС анал вычисл для СюН12^О4 224, найденное значение - 225 (М+Н)+
Структура-94	V ΗΝ Οχ Н Т о	ЖХМС анал вычисл для СбНп^РОц213, найденное значение - 214 (М+Н)+
Структура-95	о ч А Ό ΝΗ О	ЖХМС анал вычисл для СнНпЫСЬ - 251, найденное значение - 250 (М-Н)

- 42 018782

Структура-96	0 'ΎΓ'^νη о	ЖХМС анал вычисл. для СпНиИОб - 237, найденное значение - 236 (М-Н)*
Структура-9 7	оц’-О О /	ЖХМС. анал вычисл для - 201, найденное значение - 200 (М-Н)
Структура-98	о Л О ΝΗ 0 СГ“	ЖХМС: анал. вычисл. для - 201; найденное значение - 202 (М+Н)+.
Структура-99	0 'Ό'^'νη СО2Н	Ή-ЯМР (400 МГц, СОзОО) 0 3,88-3,94 (т, 1Н), 3,60, 3,61 (8, ЗН), 2,80 (т, 1Н), 2,20 (т 1Н), 1,82 - 1,94 (т, ЗН), 1,45 1,71(т, 2Н).
Структура-99а	0 ό 'СО2Н	Ή-ЯМР (400 МГц, СО-ОП) 5 3,88-3,94 (т, 1Н), 3,60, 3,61 (з, ЗН), 2,80 (т, 1Н), 2,20 (т 1Н), 1,82 -1,94 (т, ЗН), 1,45 -1,71 (т, 2Н)
Структура-100	0 Ρυς. Ά	ЖХМС: анал. вычисл. для Ο^ΗκΝΟαΡ 255; найденное значение - 256 (М+Н)+.
Структура-101	0 >Ανη <хо2н ό	ЖХМС: анал вычисл. для СпНвЫСМ - 223; найденное значение - 222 (М-Н)*
Структура-102	0 ΧΟ^ΝΗ 0	ЖХМС: анал. вычисл. для СпНвЫСМ 223; найденное значение - 222 (М-Н)*

- 43 018782

Структура-103	О хсАун Υόο2η О	ЖХМС: анал. вычисл. для СюНцЦОа - 224; найденное значение 225 (М+Н)+
Структура-104	/°	Ή-ЯМР (400 МГц, С ϋ,ΟΟ) δ 3,60 (5, ЗН), 3,50-3,53 (т, 1Н), 2,66 - 2,69 и 2,44 - 2,49 (т, 1Н), 1,91-2,01 (т, 2Н), 1,62 - 1,74 (т, 4Н), 1,51-1,62 (т, 2Н)
Структура*] 05	^..0-ср.н	Ή-ЯМР (400 МГц, СЦОЦ δ 3,60 (в, ЗН), 3,33- 3,35 (т, 1Н, частично затенен растворителем), 2,37-2,41 и 2,16-2,23 (т, 1Н), 1,94 -2,01 (т, 4Н), 1,43-1,53 (т, 2Н), 1,17-1,29 (т, 2Н).
Структура-106 (процедура получения аналогична уже описанной)	ζ ^-СОгН	Ή-ЯМР (400 МГц, СОчОГ) δ 3,16 (ς, У = 7,3 Гц, 4Н), 2,38-2,41 (т, 1Н), 2,28 -2,31 (т, 2Н), 1,79 - 1,89 (т, 2Н), 1,74 (арр, <кк! .1 3,5, 12,5, 15,9 Гц, 2Н), 1,46 (арр <117 = 4,0, 12,9 Гц, 2Н), 1,26 (1, .7=7,3 Гц, 6Н)
Структура-107	О V* ΗΝ^Ο^ О	ЖХМС: анал. вычисл. для СяНнЦСЦЗ 230; найденное значение ; 231(М+Н)+.
Структура-108	0 рь-7 Т	ЖХМС: анал. вычисл. для СиНрЦСЕ 303; найденное значение - 304 (М+Н)+.
Структура-109	О Л|	ЖХМС: анал. вычисл. для СюН^ЦОд: 224 найденное значение 225 (М+Н) +.
Структура-110	'с<%н Υόο2η О N	ЖХМС: анал. вычисл. для СщН^ЦСЦ: 224 найденное значение 225 (М+Н) +.

- 44 018782

Структура-!11	с> г^сс^н ф МеоАн	ЖХМС: анад+ вычисл. для ί-Γ.Ήκ,ΝΟ^Ρ: 332 найденное значение 334 (М+Н) +.
Структура-112	О уА'ЫН	ЖХМС: анал. вычисл. для СвНыИгОт 262 найденное значение 263 (М+Н) +.
Структура-113	О Г^СОгН ф ОВп	ЖХМС: анал вычисл. для СуН^ЧОт 329; найденное значение 330 (М+Н) +.
Структура-! 14	ЛОгМе ~N ''СО-Н	Ή-ЯМР (400 МГц, СОС13) 6 4,82 - 4,84 (т, 1Н), 4,00 - 4,05 (т, 2Н), 3,77 (», ЗН), 2,56 (ί Ьг, 2Н).
Структура-! 15	''у^СОгН Е1НСО2Ме	Ή-ЯМР (400 МГц, СОС13) δ 5,13 (з, Ьг, 1Н) 4,13 (в, Ьг, 1Н), 3,69 (в, ЗН), 2,61 (6,1 = 5,0 Гц, 2Н), 1,28(ά, 1 = 9,1 Гц, ЗН).
Структура-116	ЫНСО2Ме	Ή-ЯМР (400 МГц, СЭСБ) δ 5,10 (ά, ) = 8,6 Гц, 1Н), 3,74 - 3,83 (т, 1Н), 3,69 (з,ЗН), 2,5 2,61 (т, 2Н), 1, 88 (зер1, 3 = 7,0 Гц,1Н), 0,95 (ά, 3=7,0 Гц, 6Н).

Структура 117-123

Для приготовления структур 117-123 были использованы трет-бутоксикарбонил аминокислоты, полученные из большого количества вещества и была осуществлена депротекция 25% ТФУК в СН2С12. После завершенной реакции, как показала ЖХМС (жидкостная хромато-масс-спектрометрия), растворители были удалены в вакуумных условиях и соответствующая соль ТФУК была карбамоилирована метилхлорформиатом согласно процедуре, описанной для структуры-51.

- 45 018782

Структура	Формула	ЖХМС
Структура-117	О гоАмн о сГ	ЖХМС: анал. вычисл. для С^НцЫС 237; найденное значение 238 (М+Н)
Структура-118	о гоАнн о ГО	ЖХМС: анал. вычисл. для СюН1зЫО48: 243; найденное значеш 244 (М+Н)+.
Структура-! 19	О ''сАын О	ЖХМС: анал вычисл. для С1оН1зЬЮ48: 243; найденное значен: 244 (М+Н)+.
Структура-120	О ^сАмН О Г	ЖХМС: анал. вычисл. для €ιοΗβΝ048: 243; найденное значенз 244 (М+Н)+.
Структура-121	О гоАнн ^2уСОгН	Ή-ЯМР (400 МГц, СЭС13) б 4,06 4,16 (т, 1Н), 3,63 (з, ЗН), 3,43 (з, 1Н 2,82 и 2,66 (з, Ьг, 1Н), 1,86-2,10 (т, ЗН), 1,64 - 1, 76 (т, 2Н), 1,44 - 1, 53 (т, 1Н).
Структура-122	о 'χΑνη ^у..со2н	Ή-ЯМР (400 МГц, СОСЬ) б 5,28 и 5,12 (8, Ьг, 1Н), 3,66 (8, ЗН), 2.64-2.7 (т, 1Н), 1,86-2,12 (т, ЗН), 1,67-1,74 (т, 2Н), 1,39-1,54 (т, 1Н).
Структура-123	СК Т ) он	ЖХМС анал вычисл для С^НгШгОб 474, найденное значенг 475 (М+Н) +

Получение структуры-124. (48,5К)-5-метил-2-оксооксазолидин-4-карбоновая кислота

Хлористо-водородная соль Ь-треонин трет-бутилового эфира была карбамоилирована согласно процедуре, описанной для структуры-51. Сырая реакционная смесь была окислена 1И НС1 до уровня рН~1 и экстрагирована этилацетатом (2х50 мл). Комбинированные органические фазы были сконцентрированы в вакуумных условиях, в результате образовалось бесцветное масло, которое затвердело в состоянии покоя. Водный слой концентрировался в вакуумных условиях, после чего конечная смесь продукта и неорганических солей была измельчена в порошок ЕЮАс- СН₂С1₂-МеОН (1:1:0,1), а затем органическая фаза концентрировалась в вакуумных условиях в бесцветное масло, которое как показала ЖХМС, является требуемым продуктом. При комбинации этих двух веществ было получено 0,52 г твердого тела. ¹Н-ЯМР (400 МГц, С1)_;О1)) δ 4,60 (т, 1Н), 4,04 (б, I = 5,0 Гц, 1Н), 1,49 (б, I = 6,3 Гц, 3Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₅Н₇ИО₄ 145, найденное значение 146 (М+Н)⁺.

Получение структуры 125. (8)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-4-(диметиламино)бутановая кислота /

—N О

ВосНИ ^ОН

Структура -125

Структура-125 получена в соответствии с процедурой получения структуры-1. Неочищенный продукт использовался так же, как и в последующих реакциях. ЖХМС: анал. вычисл. для С₁₁Н₂₂И₂О₄ 246,

- 46 018782 найденное значение 247 (М+Н)⁺.

Получение (8)-2-(метокиларбониламино)-3 -(1 -метил-1Н-имидазол-2-ил)пропановой (структура-126) кислоты

Структура-! 26

Этот процесс является модификацией процесса, использованного для приготовления структуры-51. К суспензии (8)-2-амино-3-(1-метил-1Н-имидазол-2-ил)пропановой кислоты (0,80 гр, 4,70 ммоль) в тетрагидрофуран (10 мл) и Н₂О (10 мл) при 0°С было добавлено №1НСО₃ (0,88 г, 10,5 ммоль). Полученная смесь была обработана С1СО₂Ме (0,40 мл, 5,20 ммоль) и эту смесь можно было помешать при 0°С. После двухчасового помешивания ЖХМС не выявила исходных материалов. Уровень кислотности был повышен до рН 2 при помощи 6Ν НС1.

Растворители были удалены в вакуумных условиях, а остатки были суспендированы в 20 мл 20% МеОН в СН2С12. Смесь была профильтрована и сконцентрирована до образования светло-желтой пены (1,21 г), ЖХМС и ¹Н-ЯМР показали, что этот материал является смесью сложного метилового эфира и требуемого вещества в пропорции 9:1. Этот материал был поглощен тетрагидрофураном (10 мл) и Н₂О (10 мл), охлажден до 0°С и к нему был добавлен ЫОН (249,1 мг, 10,4 ммоль). После часового (прибл.) перемешивания ЖХМС не выявила остатков эфира. Таким образом, смесь была окислена 6Ν НС1, а растворители удалены в вакуумных условиях ЖХМС и ¹Н-ЯМР подтвердили отсутствие эфира. Основное соединение было получено в результате контаминации соли НС1 неорганическими солями (1,91 мг > 100%). Соединение было использовано впоследствии без дополнительного очищения. ¹Н-ЯМР (400 МГц,

СИзОИ) δ 8,84, (8, 1Н), 7,35 (8, 1Н), 4,52 (бб, 1 = 5,0, 9,1 Гц, 1Н), 3,89 (8, 3Н), 3,62 (8, 3Н), 3,35 (бб, 1 = 4,5, 15,6 Гц, 1Н, частично помутнен растворителем), 3,12 (бб, 1 = 9,0, 15,6Гц, 1Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С1ΙΛΟ· 392, найденное значение 393 (М+Н)⁺

Получение (8)-2-(метоксикарбониламино)-3-(1-метил-14-имидазол-4-ил)пропановой кислоты (структура-127)

су-26

С1СО₂Ме, МаНССь

ТНР/Н₂О/0^аС

Структура-127

Структура-127 была приготовлена по схеме описанной для структуры-126, исходным веществом является (8)-2-амино-3-(1-метил-1Н-имидазол-4-ил)пропановая кислота (1,11 г, 6,56 ммоль), NаНСО₃ (1,21 г, 14, 4 ммоль) и С1СО2Ме (0,56 мл, 7,28 ммоль). Указанное в заголовке соединение было получено в результате контаминации соли НС1 (1,79 мг > 100%) с неорганическими солями. ЖХМС и ¹Н-ЯМР выявили наличие приблизительно 5% сложного метилового эфира. Сырая смесь была использована как таковая без дополнительного очищения. ¹Н-ЯМР (400 МГц, С'ЩОЭ) δ 8,90 (8, 1Н), 7,35 (8, 1Н), 4,48 (бб, 1 = 5,0, 8,6 Гц, 1Н), 3,89 (8, 3Н), 3,62 (8, 3Н), 3,35 (т, 1Н), 3,08 (т, 1Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С1Р ,\О< 392; найденное значение 393 (М+Н)⁺.

Получение (8)-2-(метоксикарбониламино)-3-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пропановой кислоты (структура-128)

МеОгСНН

Структура-128

Этап 1. Получение (8)-бензил 2-(трет-бутоксикарбониламино)пент-4-иноата (с|-27Ь).

ВосНИ СО₂Вп

С/-276

К раствору с|-27а (1,01 гр, 4,74 ммоль), диметиламинопиридина (58 мг, 0,475 ммоль) и ιΡγ₂ΝΕ1 (1,7 мл, 9,8 ммоль) в СН₂С1₂ (100 мл) при 0°С было добавлено СЬх-С1 (0,68 мл, 4,83 ммоль). Раствор помеши

- 47 018782 вался в течение 4 ч при 0°С, промыт (1Ν КН8О₄, солевым раствором), высушен №ь8О₄. отфильтрован и выпарен в вакуумных условиях. Остаток был очищен методом колоночной хроматографии для отгона лёгких фракций (тонкослойная хроматография (ТСХ) 6:1 гексаметафосфат натрия : этилацетат), при этом образовалось небольшое количество соединения (1,30 г, 91%) в виде бесцветного масла. ¹Н-ЯМР (400

МГц, СЭС.®) δ 7, 35 (к, 5Н), 5,35 (ά, Ьг, 1 = 8,1 Гц, 1Н), 5, 23 (ά, 1 = 12,2 Гц, 1Н), 5, 17 (ά, 1 = 12,2 Гц, 1Н), 4,48 - 4, 53 (т, 1Н), 2,68 - 2,81 (т, 2Н), 2, 00 (ΐ, 1 = 2,5 Гц, 1Н), 1, 44 (к, 9Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С_ПН₂^О₄: 303; найденное значение 304 (М+Н)⁺.

Этап 2. Получение (8)-бензил 3-(1-бензил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-(трет-бутоксикарбониламино) пропаноата (с|-28).

с>2в

К смеси (8)-бензил 2-(трет-бутоксикарбониламино)пент-4-иноата (0,50 г, 1,65 ммоль), аскорбата натрия (0,036 г, 0,18 ммоль), Си8О₄-5Н₂О (0,022 г, 0,09 ммоль) и ΝαΝ₃ (0,13 г, 2,1 ммоль) в диметилформамид-Н₂О (5 мл, 4:1) при комнатной температуре был добавлен ВпВг (0,24 мл, 2,02 ммоль), затем смесь была нагрета до 65°С. Через 5 ч ЖХМС выявила незначительную конверсию. Еще одна порция ΝαΝ₃ (100 мг) была добавлена и смесь подогревалась в течение 12 ч. Смесь химических веществ вливалась в этилацетат и Н₂О и была перемешана. Слои были разделены, и водный слой был трижды отделен при помощи этилацетата, комбинированные органические фазы промыты (Н₂Ох3, солевым раствором), высушены (Ыа₂8О₄), отфильтрованы и сконцентрированы. Остаток был сразу же очищен (Ью1аде, 40+М 05% МеОН в СН₂С1₂; ТСХ (тонкослойная хроматография) 3% МеОН в СН₂С1₂, в результате образовалось светло-желтое масло, которое затвердело в состоянии покоя (748,3 мг, 104%). ЯМР по-прежнему подтвердил наличие требуемого продукта, но также выявил диметилформамид. Вещество было использовано как таковое без дополнительного очищения. ¹Н-ЯМР (400 МГц, ΟΜί.Ό-ά₆) δ 7,84 (к, 1Н), 7,27 - 7,32 (т, 10Н), 5,54 (к,2Н), 5,07 (к,2Н), 4,25 (т, 1Н), 3,16 (άά, 1 = 1,0, 5,3 Гц, 1Н), 3,06 (άά, 1 = 5,3, 14,7 Гц), 2,96 (άά, 1 = 9,1, 14,7 Гц, 1Н), 1,31 (к, 9Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₂₄Н₂^₄О₄: 436; найденное значение 437 (М+Н)⁺.

Этап 3. Получение (8)-бензил 3-(1-бензил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-(метоксикарбониламино)пропаноата (с]-29).

Раствор (8)-бензил 3-(1-бензил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)пропаноата (0,52 г, 1,15 ммоль) в СН₂С1₂ была добавлена ТФУК (4 мл). Смесь помешивалась в течение двух часов при комнатной температуре. Смесь была сконцентрирована в вакуумных условиях, в результате образовалось бесцветное масло, которое затвердело в состоянии покоя. Это вещество было расплавлено в тетрагидрофуране-Н₂О и охлаждено до 0°С. Было добавлено твердое NаΗСО₃ (0,25 г, 3,00 ммоль), затем С1СО2Ме (0,25 мл, 3,25 ммоль). После полуторачасового помешивания смесь была окислена до уровня рН~2 при помощи 6Ν НС1, а затем влита в Н₂О-этилацетат. Слои были разделены и водная фаза была выделена дважды при помощи этилацетата. Комбинированные органические фазы были промыты (Н2О, солевым раствором), высушены (№₂8О₄), отфильтрованы и сконцентрированы в вакуумных условиях, в результате образовалось бесцветное масло (505,8 мг, 111%, ЯМР показал наличие неустановленных примесей), которое затвердело находясь под давлением (йа^шд оп 1йе ритр). Вещество было использовано как таковое без дополнительного очищения. ¹Н-ЯМР (400 МГц, ОМСО-ά® δ 7, 87 (к, 1Н), 7,70 (άά, ί = 8,1 Гц, 1Н), 7,27 - 7,32 (т, 10Н), 5,54 (к, 2Н), 5,10 (ά, 1 = 12,7 Гц, 1Н), 5,06 (ά, 1 = 12,7 Гц, 1Н), 4,32 - 4,37 (т, 1Н), 3,49 (к, 3Н), 3,09 (άά, 1 = 5,6, 14,7 Гц, 1Н), 2,98 (άά, 1 = 9,6, 14,7 Гц, 1Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₂1Н₂^₄О₄: 394; найденное значение 395 (М+Н)⁺.

Этап 4. Получение (8)-2-(метоксикарбониламино)-3-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил) пропановой кислоты (структура-128).

Структура 128. (8)-бензил 3-(1-бензил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-(метоксикарбониламино)пропаноат (502 мг, 1,11 ммоль) был гидрогенизирован с добавлением Ρά-С (82 мг) в МеОН (5 мл) при атмосферном давлении в течение 12 ч. Смесь была профильтрована через диатомитовый фильтр (Се1йе®) и сконцентрирована в вакуумных условиях (8)-2-(метоксикарбониламино)-3-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пропановая

- 48 018782 кислота была получена в виде резиновой смеси (266 мг, 111%) и была контаминирована 10% метиловым эфиром. Вещество было использовано как таковое без дополнительного очищения. ¹Н-ЯМР (400 МГц, ОМСО-б₆) δ 12,78 (8, Ьг, 1Н), 7,59 (8, 1Н), 7, 50 (б, 1 = 8,0 Гц, 1Н), 4,19 - 4,24 (т, 1Н), 3,49 (8, 3Н), 3,12 (бб, 1 = 4,8 Гц, 14,9 1Н) 2,96 (бб=9,9, 15,0 Гц, 1Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₇Нц^₄О₄ 214, найденное значение 215 (М+Н)⁺.

Получение (8)-2-(метоксикарбониламино)пропановой кислоты (структура-129)

СЬгНЫ ^ХО СН₃СЫ/50’С 2) С1СО₂Ме МеО₂СН1У^СО₂Н

Ч-³⁰ ЫаНСОз / ТНР-НуО Структура Г 29

31).

Этап 1. Получение (8)-2-(бензилоксикарбониламино)-3-(1Н-пиразол-1-ил)пропановой кислоты (с]сьгнм со₂н д-31

Суспензия (8)-бензил 2-оксооксетан-3-илкарбамата (0,67 г, 3,03 ммоль) и пиразола (0,22 г, 3,29 ммоль) в Ο4^Ν (12 мл) подогревалась в течение 12 ч при 50°С. Затем смесь была охлаждена до комнатной температуры, частицы в суспензии были отфильтрованы и получена (8)-2-(бензилоксикарбониламино)-3-(1Н-пиразол-1-ил)пропановая кислота (330,1 мг). Фильтрат был сконцентрирован в вакуумных условиях, затем измельчен в порошок с добавлением небольшого количества Ο4^Ν (около 4 мл) для получения еще одной порции (43,5 мг). Общий выход 370,4 мг (44%). Точка плавления 165,5-168°С. Точка плавления, указанная в справочной литературе, - 168,5-169,5°С [Уебега8 а! а1. Американское химическое общество, 1985, 107, 7105].

Ή-ЯМР (400 МГц, СО₃ОЭ) δ 7,51 (б, 1 = 2,0 Гц, 1Н), 7,48 (8, 1 = 1,5 Гц, 1Н), 7,24-7,34 (т, 5Н), 6,23 (т, 1Н), 5,05 (б, 12,7 Гц, 1Н), 5,03 (б, 1 = 12,7 Гц, 1Н), 4,59-4,66 (т, 2Н), 4,42-4,49 (т, 1Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₁₄Н₁₅^О₄ 289, найденное значение 290 (М+Н)⁺.

Этап 2. Получение (8)-2-(метоксикарбониламино)-3-(1Н-пиразол-1-ил)пропановой кислоты (структура-129).

ΜβΟ₂ΟΗΝ со_гн

Структура-! 29 (8)-2-(бензилоксикарбониламино)-3-(1Н-пиразол-1-ил)пропановая кислота (0,20 г, 0,70 ммоль) была гидрогенизирована с добавлением Рб-С (45 г) в МеОН (5 мл) при атмосферном давлении в течение 2 ч. Полученное вещество оказалось нерастворимым в МеОН, поэтому реакционную смесь растворили при помощи 5 мл Н₂О и нескольких капель 6Ν НС1. Однородный раствор был профильтрован через диатомитовый фильтр (Се111е®), а МеОН удален в вакуумных условиях. Оставшийся раствор был заморожен и просушен при температуре ниже нуля градусов с образованием желтой пены (188,9 мг). Это вещество было суспендировано в тетрагидрофуране- Н2О (11, 10 мл), а затем охлаждено до 0°С. В холодную смесь был аккуратно добавлен №1НС’О₃ (146 мг, 1,74 ммоль) (выделение СО₂). Когда выделение газа прекратилось (около 15 мин). С1СО₂Ме (0,06 мл, 0,78 ммоль) был добавлен капля за каплей. После двухчасового помешивания смесь была окислена до уровня рН~2 при помощи 6Ν НС1, а затем влита в этилацетат. Слои были разделены и водная фаза была выделена при помощи этилацетата (пятикратно). Комбинированные органические фазы были промыты (солевым раствором), высушены (Ыа₂8О₄), отфильтрованы и сконцентрированы, в результате образовалось бесцветное маслянистое вещество (117,8 мг, 79%). ¹НЯМР (400 МГц, ОМСО-б₆) δ 13,04 (8, 1Н), 7,63 (б, 1 = 2,6 Гц, 1Н), 7,48 (б, 1 = 8,1 Гц, 1Н), 7,44 (б, 1 = 1,5 Гц, 1Н), 6,19 (арр !, 1 = 2,0 Гц, 1Н), 4,47 (бб, 1 = 3,0, 12,9 Гц, 1Н), 4,29-4,41 (т, 2Н), 3,48 (8, 3Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₈Н_П^О₄ 213, найденное значение 214 (М+Н)⁺.

Структура-130. Т-Ацетил-(К)-Фенилглицин

Струкутра-130 была получена при ацилировании (К)-фенилглицина, имеющегося в продаже, аналогично процессу, приведенному в: Са1те8, М.; Оаиш8, 1.; 1асс.|шег. К.; Уегбиссц 1. Те1гаНебгоп. 1987, 43(10), 2285.

Образцы

Данные, предоставленные в текущем разделе, будут описаны в связи с определенными вариантами, не направленными на ограничение сферы их применения. Напротив, данное описание покрывает все ва- 49 018782 рианты, модификации и эквиваленты, которые могут входить в объем притязаний. Так, следующие образцы, которые содержат специфические варианты осуществления, покажут практическую часть данного описания, при том понимании, что образцы используются с целью иллюстрации некоторых вариантов осуществления и представляют собой эффективное и вполне доступное описание приемов и концептуальных аспектов.

Процентное соотношение растворов выражает соотношение веса к объему, а содержание раствора выражает соотношение объема к объему, если не установлено иначе. Спектры ядерного магнитного резонанса (ЯМР) были сняты на спектрометрах Вгикег 300, 400 и 500 МГц; единицей химических сдвигов (δ) является миллионная доля. Флеш-хроматография проводилась на силикагеле (81О₂) согласно технике флеш-хроматографии Стилла (1. Огд. СЕет. 1978, 43, 2923).

Анализы определения отсутствия примесей и масс-спектрометрии низкого разрешения проводились на системе 81ιίιηηάζιι ЬС в сочетании с системой \Уа1ег8 М1сгота88 ΖΟ М8. Следует отметить, что время удержания может немного варьировать, в зависимости от применения той или другой системы.

Время удержания (ВУ) определялось согласно следующим ЖХ/МС условиям:

Условие 1.

Колонка: РИепотепех-Ьипа 3,0 х 50 мм 810

Начальный % В = О

Конечный % В = 100

Градиент времени = 2 мин

Время останова = 3 мин

Объемная скорость потока = 4 мл/мин

Длина волны — 220 нм

Растворитель А = 0,1% ТФУК в 10% метаноле/90%Н₂О

Растворитель В = 0,1% ТФУК в 90% метаноле/10%Н2О

Условие 2.

Колонка: РЬепотепех-Ьипа 4,6 х 50 мм 810

Начальный % В = 0

Конечный % В = 100

Градиент времени = 2 мин

Время останова = 3 мин

Объемная скорость потока = 5 мл/мин

Длина волны = 220 нм

Растворитель А = 0,1% ТФУК в 10% меганоле/90%Н₂О

Растворитель В = 0,1% ТФУК в 90% меганоле/Ю%Н₂О

Условие 3.

Колонка: ЖХМС. ΧΤΈΚΚΑ С-18 3,0 х 50 мм 87

Начальный % В = 0

Конечный % В = 100

Градиент времени = 3 мин

Время останова = 4 мин

Объемная скорость потока = 4 мл/мин

Длина волны = 220 нм

Растворитель А = 0,1% Т4Н4ОАс в 10% ацетонитриле/90%Н₂О

Растворитель В = 0,1% ΝΗ4ΟΑο в 90% ацетонитриле/10%Н₂О

Растворитель В = 0,1% трифторуксусная кислота (ТФУК) в 90% метанола/10% Н₂О

Метод А. ЖХМС (жидкостная хроматография / масс-спектрометрия) - Х1егга М8 С-18 3,0 х 50 мм, градиент 0-100% В за 30,0 мин, время задержки 1 мин, А = 5% ацетонитрила, 95% воды, 10 мм аммония ацетата, В = 95% ацетонитрила, 5% воды, 10 мм аммония ацетата.

Метод В. ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) - Х-Тегга С-18 4,6 х 50 мм, градиент 0-100% В за 10,0 мин, время задержки 1 мин, А = 10% метанола, 90% воды, 0,1% ТФУК, В = 90% метанола, 10% воды, 0,1% ТФУК.

Метод С. ВЭЖХ - УМС С-18 4,6 х 50 мм, градиент 0-100% В за 10,0 мин, время задержки 1 мин, А = 10% метанола, 90% воды, 0,2% Н3РО4, В = 90% метанола, 10% воды, 0,2% Н3РО4.

- 50 018782

Метод Ό. ВЭЖХ - Рйепотепех С-18 4,6 х 150 мм, градиент 0-100% В за 10,0 мин, время задержки 1 мин, А - 10% метанола, 90% воды, 0,2% Н₃РО₄, В = 90% метанола, 10% воды, 0,2% Н₃РО₄.

Метод Е. ЖХМС - 6етш1 С-18 4,6 х 50 мм, градиент 0-100% В за 10,0 мин, время задержки 1 мин, А = 5% ацетонитрила, 95% воды, 10 мм аммония ацетата, В = 95% ацетонитрила, 5% воды, 10 мм аммония ацетата.

Метод Е. ЖХМС - Ьипа С-18 3,0 х 50 мм, градиент 0-100% В за 7,0 мин, время задержки 1 мин, А = 5% ацетонитрила, 95% воды, 10 мм аммония ацетата, В = 95% ацетонитрила, 5% воды, 10 мм аммония ацетата.

Раздел К

Схема 1

“С^он ВосНЬГо

ΟΗ₅€Ν / и№Рг₃НЕ1

Пример К1. трет-Бутил-(18,1'8)-1,1'-(5,5'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(2метилпропан-1,1 -диил)дикарбамат) (3)

Раствор 1,1'-(бифенил-4,4'-диил)бис(2-бромэтанона) (1) (5,14 г, 18,4 ммоль) и Ν-БОК-Ь-валина (8,00 г, 36,8 ммоль) в безводном Ο^ΟΝ (40 мл) обрабатывался изо-Рг₂№1 (7,05 мл, 40,5 ммоль), раствор перемешивался при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удалялся под вакуумом, получившаяся суспензия разделялась между ЕЮАс и водой. После разделения слоев водная фаза экстрагировалась ЕЮАс. Комбинированная органическая фаза высушивалась (Мд8О₄), отфильтровывалась и концентрировалась под вакуумом. Остаток суспендировался в толуоле (100 мл), к суспензии добавлялся NΗ₄ΟАс (14,2 г, 184,2 ммоль). Смесь нагревалась с обратным холодильником в течение 16 ч, образующаяся вода удалялась в виде азеотропной смеси с помощью насадки Дина-Старка. Смесь охлаждалась до комнатной температуры и концентрировалась в вакууме с образованием сухого остатка. Остаток очищался методом колоночной хроматографии (Вю1аде. элюирование 0-40% СΗ₃СN в СН₂С1₂, а затем 10% МеОН в СН₂С1₂), в результате получалось основное соединение (5,77 г, выход 50%), имеющее вид желтой пены. Ή ЯМР (500 МГц, ДМСО-й₆) δ 11,77-11,93 (т, 2Н), 7,80 (Ьг 8, 4Н), 7,66-7,68 (т, 4Н), 7,53 (Ьг 8, 2Н), 6,89 (й, I = 7,7 Гц, 2Н), 4,43 (арр ΐ, I = 8,2 Гц, 2Н), 2,05-2,11 (т, 2Н), 1,38 (8, 18Н), 0,90 (й, I = 6,6 Гц, 6Н), 0,78 (й, I = 6,6 Гц, 6Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₃₆Н₄₈НЮ₄ 628, найденное значение 629 (М+Н)⁺.

Пример К2. трет-Бутил-(1К,1'К)-1,1'-(5,5'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(2метилпропан-1,1-диил)дикарбамат

Основное соединение получалось по методике синтеза примера К1 из 1,1'-(бифенил-4,4'диил)бис(2-бромэтанона) (1) и Ν-БОК-Э-валина. ЖХМС: анал. вычисл. для С₃₆Н₄₈НЮ₄ 628, найденное значение 629 (М+Н)⁺.

Пример К3. (18,1'8)-1,1'-(5,5'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(2-метилпропан-1амин)

К раствору трет-бутил-(1К,1'К)-1,1'-(5,5'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(2 метилпропан-1,1-диил)дикарбамата (1,00 г, 1,59 ммоль) в СН₂С1₂ (30 мл) добавлялась ТФУК (20 мл), и полученный раствор перемешивался при комнатной температуре в течение 5 ч. Растворители удалялись под вакуумом, остаток растворялся в СН₂С1₂ МеОН (1 1) (около 10 мл) и абсорбировался на катионнообменном картридже с МСХ (Оа818). Смола промывалась МеОН, а продукт реакции выделялся путем элюирования 2М раствором Ν^ в МеОН. Растворители удалялись под вакуумом, в результате получалось основное соединение (0,622 г, выход 91%), имеющее вид желтой пены, которая была достаточна

- 51 018782 чиста для использования на последующих этапах. ¹Н ЯМР (300 МГц, СО₃ОЭ) δ 7,76 (арр Л, 1 = 8,4 Гц, 4Н), 7,68 (арр Л, 1 = 8,4 Гц, 4Н), 7,38 (к, 2Н), 3,77 (Л, 1 = 7,3 Гц, 2Н), 2,07 (септет, 1 = 7,0 Гц, 2Н), 1,03 (Л, 1 = 7,0 Гц, 6Н), 0,88 (Л, 1 = 7,0 Гц, 6Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₂₆Н₃₂Н5 428, найденное значение 429 (М+Н)⁺.

Пример В4. (1В,1'В)-1,1'-(5,5'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(2-метилпропан-1амин).

Основное соединение получалось по методике, приведенной для синтеза примера В3, из третбутил-(1В, 1'В)-1,1'-(5,5'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(2-метилпропане-1,1 -диил) дикарбамата. ЖХМС: анал. вычисл. для С₂₆Н₃₂Н5 428, найденное значение 429 (М+Н)⁺.

Пример В5. Диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((18)-2-метил-1,1-пропандиил) имино((28)-1 -оксо-1,2-пропандиил)))бискарбамат

Раствор (18,1'8)-1,1'-(5,5'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(2-метилпропан-1амина) (120 мг, 0,280 ммоль), (8)-2-(метоксикарбониламино)пропановой кислоты (124 мг, 0,840 ммоль) и ΗΌ-Ρι^ΝΕί (0,489 мл, 2,80 ммоль) в ДМФ (5 мл) обрабатывался Н-АТУ (426 мг, 1,12 ммоль), реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционная смесь разделялась между водой и ЕЮЛс, после разделения слоев водная фаза экстрагировалась ЕЮЛс. Комбинированные органические слои концентрировались под вакуумом и очищались методом колоночной хроматографии (В1о1аде 25 8, элюирование 0-40% СН₃С№ в Сн₂С1₂, а затем 10% МеОН в СН₂С1). Соответствующие фракции концентрировались под вакуумом, а остаток очищался методом препаративной ВЭЖХ (СН₃С№ Н₂О-ТЕЛ) Двойная последовательная очистка методом ВЭЖХ (СН₃С№Н₂О-Ж₄ОЛс) с последующей окончательной препаративной ВЭЖХ (СН₃С№Н₂О-ТЕЛ) приводили к образованию соли ТФУК основного соединения (4,9 мг, выход 2%), имеющей вид бесцветного твердого вещества. ¹Н ЯМР (300 МГц, С1)_;О1)) δ 7,89 (к, 2Н), 7,86 (к, 8Н), 4,87 (Л, 1 = 8,5 Гц, 2Н), 4,19 (квартет, 1 = 7,0 Гц, 2Н), 3,65 (к, 6Н), 1,33 (Л, 1 = 7,0 Гц, 6Н), 1,14 (Л, 1 = 7,0 Гц, 6Н), 0,96 (Л, 1 = 7,0 Гц, 6Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₃₆Н₄₍МО₆ 686, найденное значение 687 (М+Н)⁺.

Таблица 1А. Указанные ниже соединения были получены аналогичным образом из соответствующего амина и аминокислоты

Пример	Соединение	Структура	Аналитические данные
Пример Кб	диметил-(4,4^ бифенилдиилбис(1Нимидазол-4,2диил((18)-2-метил-1,1пропандиил)имнно((28 ,ЗК)-3-метокси-1-оксо1,2бутандиил)))бискарбам ат	МеО^МЦ ΝΗΟΟ,Μβ	ЖХМС Анал вычисл для СдоНяЛвОя 774, найденное значение 775 (М+Н)+
Пример К7	диметил-(4,4'бифенилдиилбис( 1Нимидазол-4,2диил((18)-2-метил-1,1пропандиил)имино(( 28)-3-метил-1 -оксо-1,2бутандиил)))бискарбам ат	МвОгОу МНСОгМе	ЖХМС Анал вычисл для СдоНмНА 742, найденное значение 743 (М+Н)+
Пример К8	диметил-(4,4’бифенилдиилбис(1Нимид азол-4,2диил(( 18)-2-метил-1,1пропандиил)имино((28 )-4-метокси-1-оксо-1,2бутанедиил)))бискарба мат	М*О,Сну КНСОзМ»	ЖХМС Анал вычисл для СдоНздМ^Оа 774, найденное значение 775 (М+Н)+
Пример К9	диметил-(4,4’бифенилдиилбис(1Нимид азол-4,2диил((1К)-2-метил-1,1пропандиил)имино((2 8)-3 -метил-1 -оксо-1,2бутанедиил)))бискарба мат	МеО/ΜΝ МНССуЛе	ЖХМС Анал вычисл для СдоНздМ^Об 742, найденное значение 743 (М+Н)+
Пример К10	диметил (4,4бифенилдиилбис(1Нимидазол-4,2диил(( 1 К)-2-метил-1,1 -	МеОгСНН ынссуие	ЖХМС Анал вычисл для СзбНдбМ&Об 686, найденное

- 52 018782

	пропандиил)имино(( 28)-1-оксо-1,2пропанд ии л)) )б искарба мат		значение: 687 (М+Н)+.
Пример Р.11	диметил (4,4'- бифенилдиилбис(1Нимидазол-4,2- дии л((1 Р.)-2-метил-1,1пропандиил)имино((25 )-4-метокси-1-оксо-1,2бутанедиил)))бискарба мат	ЫНСОгМё	ЖХМС: Анал. вычисл. для 774,найденное значение:775 (М+Н)+.
Пример Р.12	диметил (4,4Гбифениддиилбис( 1Нимид азол-4,2диил((1К)-2-метил-1,1пропанд иил )и м ино((2 8 , 3 К) -3 -метокси-1 -оксо1,2бутандиил)))биекарбам ат	МеОгСНЦ ИНСОгМ·	ЖХМС: Анал. вычисл. для С4оН54И808: 774; найденное значение: 775 (М+Н)*,
Пример Р.13	диметил (4,4’бифенилдиилбис( 1Нимид азол-4,2диил((1К)-2-метил-1,1пропандиил)имиыо(2К) -З-метил-1 -ОкСО-1,2бутандиил)))бискарбам ат	МлОгСНМ ЦНСО^Ме	Анал. вычисл. ДЛЯ ί’ΐ(.Η5|ΝκΟ(,' 742; найденное значение: 743 Гм+нГ.
Пример К.14	диметил (4,4*бифенилдиилбис( 1Нимид азол-4,2дии л(( 18)- 2-метил -1,1пропандиил)имино(( 2К)-3-метил-1 -оксо1,2бутандиил)))бискарбам ат	МвОгСМН ЫНСОгМ»	Анал. вычисл. для СтоНмЫцОв: 742; найденное значение: 743 (М+Н)+.

Схема 2

Пример К15. (Б)-трет-бутил-1-(5-(4-бромфенил)-1Н-имидазол-2-ил)-2-метилпропилкарбамат

Раствор 2-бром-1-(4-бромфенил)этанона (6,23 г, 22,3 ммоль) и Ν-БОК-Ь-валина (5,00 г, 23,0 ммоль) в безводном СНзСN (30 мл) обрабатывался изо-Рг₂№1 (4,40 мл, 25,3 ммоль), раствор перемешивался при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удалялся под вакуумом, получившаяся суспензия разделялась между ЕЮАс и водой. После разделения слоев водная фаза экстрагировалась ЕЮАс. Комбинированный органический слой высушивался (Мд§О₄), отфильтровывался и концентрировался под вакуумом, в результате получалось желтое масло. ЖХМС: анал. вычисл. для С1₈Н₂₄В^О₅ 413, 415, найденное значение 412, 414 (М-Н). Остаток суспендировался в толуоле (60 мл), к суспензии добавлялся NН₄ОАС (8,61 г, 111,7 ммоль). Смесь нагревалась с обратным холодильником в течение 16 ч, образующаяся вода удалялась в виде азеотропной смеси с помощью насадки Дина-Старка. Смесь охлаждалась до комнатной температуры и концентрировалась в вакууме с образованием сухого остатка. Остаток очищался методом колоночной хроматографии (Вю1аде. элюирование 10% МеОН в СН₂С1₂), в результате получалось основное соединение (8,55 г, выход 94%), имеющее вид желтой пены. ¹Н ЯМР (500 МГц, СО₃ОЭ) δ 7,84 (8, 1Н), 7,66 (арр б, 1 = 8,9 Гц, 2Н), 7,64 (арр б, 1 = 8,9 Гц, 2Н), 4,65 (б, 1 = 7,7 Гц, 1Н), 2,23 2,27 (т, 1Н), 1,42 (8, 9Н), 1,07 (б, 1 = 6,5 Гц, 3Н), 0,93 (б, 1 = 6,5 Гц, 3Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С1₈Н₂₄В^₃О₂ 393, 395, найденное значение 394, 396 (М+Н)⁺.

Пример К16. (К)-трет-Бутил-1-(5-(4-бромфенил)-1Н-имидазол-2-ил)-2-метилпропилкарбамат.

- 53 018782

Основное соединение получалось из 2-бром-1-(4-бромфенил)этанона и Ν-БОК-Э-валина по методике, описанной в примере 15. ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭ₃ОО) δ 7,83 (к, 1Н), 7,68 (арр ά, 1 = 8,7 Гц, 2Н), 7,64 (арр ά, 1 = 8,7 Гц, 2Н), 4,65 (ά, 1 = 7,3 Гц, 1Н), 2,22 - 2,26 (т, 1Н), 1,42 (к, 9Н), 1,08 (ά, 1 = 6,7 Гц, 3Н), 0,93 (ά, 1 = 6,7 Гц, 3Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С_!8Н₂₄Вг^О₂ 393, 395, найденное значение 394, 396 (М+Н)⁺.

Пример В17. (8)-трет-Бутил-2-(5-(4'-(2-((8)-1-(трет-бутоксикарбониламино)-2-метилпропил)-1Нимидазол-5-ил)бифенил-4-ил)-1Н-имидазол-2-ил)пирролидин-1-карбоксилат.

Раствор (8)-трет-бутил-1-(5-(4-бромфенил)-1Н-имидазол-2-ил)-2-метилпропилкарбамата (2,00 г, 5,07 ммоль), (8)-трет-бутил-2-(5-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-имидазол-2ил)пирролидин-1-карбоксилата (2,23 г, 5,07 ммоль) и NаΗСО₃ (1,49 г, 17,8 ммоль) в ДМЭ (50 мл) и воде (15 мл) дегазировался путем эвакуации и заполнения сосуда Ν2.

К реакционной смеси добавлялся тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (0,293 г, 0,254 ммоль) и смесь нагревалась в течение ночи до 100°С Смесь охлаждалась до комнатной температуры ДМЭ удалялся под вакуумом Остаток разделялся между Н₂О и ЕЮАс. Водная фаза экстрагировалась ЕЮА, и комби нированные органические слои концентрировались под вакуумом до сухого остатка и очищались методом колоночной хроматографии (ВЮаде. градиентное элюирование 0-40% СН₃СК в СН₂С1₂, а затем 010% МеОН в СН₂С1₂). В результате получалось основное соединении (2,05 г, выход 65%), имеющее вид коричневой пены. Этот материал использовался на последующих этапах в таком виде. ЖХМС: анал. вычисл. для С₃₆Н₄₆Е₃^О₄ 626, найденное значение 627 (М+Н)⁺.

Пример В17А. (8)-2-Метил-1-(5-(4'-(2-((8)-пирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-5-ил)бифенил-4-ил)-1Нимидазол-2-ил)пропан-1-амин

К раствору (8)-трет-бутил-2-(5-(4'-(2-((8)-1-(трет-бутоксикарбониламино)-2-метилпропил)-1Нимидазол-5-ил)бифенил-4-ил)-1Н-имидазол-2-ил)пирролидин-1-карбоксилата (2,05 г, 3,27 ммоль) в СН₂С1₂ (20 мл) добавлялась ТФУК (5 мл, 64,9 ммоль), и полученный раствор перемешивался в течение 2 ч. Растворители удалялись под вакуумом, остаток растворялся в СН₂С1₂ МеОН (1:1) (около 10 мл) и абсорбировался на катионно-обменном картридже с МСХ (Оак1к). Смола промывалась МеОН, а продукт реакции выделялся путем элюирования 2М раствором ИН₃ в МеОН. Растворители удалялись под вакуумом в результате получалось основное соединение (0,622 г, выход 91%), имеющее вид желтой пены, которая была достаточна чиста для использования на последующих этапах. ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭ₃ОО) δ 7,85-7,88 (т, 4Н), 7,75 (т, арр ά, 1 = 8,2 Гц, 4Н), 7,70 (арр ά, 1 = 5,8 Гц, 2Н), 4,96 (ΐ, 1 = 8,2 Гц, 1Н), 4,30 (ά, 1 = 8,5 Гц, 1Н), 3,54-3,57 (т, 1Н), 3,47-3,52 (т, 1Н), 2,55-2,62 (т, 1Н), 2,38-2,46 (т, 1Н), 2,28-2,36 (т, 1Н), 2,15-2,24 (т, 1Н), 1,17 (ά, 1 = 6,7 Гц, 3Н), 0,94 (ά, 1 = 6,7 Гц, 3Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₂₆Н₃₍Ц₆ 426, найденное значение 427 (М+Н)⁺.

Пример В18. Н^:-(метоксикарбонил)-Н-((18)-1-(4-(4'-(2-((28)-1-(Н-(метоксикарбонил)-Ь-валил)-2пирролидинил)-1Н-имидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-2-метилпропил)-1-валинамид

В колбу на 50 мл с одним горлом, в которой находилась магнитная мешалка, помещались (8)-2метил-1-(5-(4'-(2-((8)-пирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-5-ил)бифенил-4-ил)-1Н-имидазол-2-ил)пропан-1амин (80 мг, 0,188 ммоль) и (8)-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутановая кислота (99 мг, 0,563 ммоль) в ДМФ (5 мл), к смеси добавлялся ДИЭА (0,328 мл, 1,875 ммоль). К раствору добавлялся Н-АТУ (285 мг, 0,750 ммоль), и реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционная смесь разделялась между водой и ЕЮАс, после разделения слоев водная фаза экстрагировалась ЕЮАс. Комбинированные органические слои концентрировались под вакуумом и очищались методом колоночной хроматографии (ВЮаде 258, элюирование 0-40% СН₃СИ в СН₂С1₂, а затем 10% МеОН в СН₂С1₂). Соответствующие фракции концентрировались под вакуумом, остаток очищался методом препаративной ВЭЖХ (СН₃С№Н₂О-ТЕА), а затем еще раз очищался методом препаративной ВЭЖХ (СН₃С№Н₂О-МН₄ОАС), в результате получалось основное соединение в виде твердого бесцветного вещества (31,8 мг, выход 23%). Ή ЯМР (500 МГц, С1)_;О1)) δ 7,71 (т, 4Н), 7,64 - 7,67 (т, 4Н), 7,35 (к, 1Н), 7,32 (к, 1Н), 5,33 -5,34 (т, 0,2Н), 5,17 (άά, 1 = 7,6, 5,5 Гц, 0,8Н), 4,77 (ά, 1 = 9,2 Гц, 1Н), 4,22 и 4,10 (ά, 1 =

- 54 018782

7,6 Гц, 1Н, соотношение ротамеров 4:1), 3,97 - 4,01 (т, 1Н), 3,94 (б, 1 = 7,0 Гц, 1Н), 3,84 - 3,89 (т, 1Н), 3,64 (8, 6Н), 2,28-2,35 (т, 1Н), 2,18-2,27 (т, 3Н), 1,98 - 2,08 (т, 3Н), 1,05 (б, 1 = 6,7 Гц, 3Н), 0,98 и 0,94 (б, 1 = 6,7 Гц, 3Н), 0,90 (б, 1 = 6,7 Гц, 6Н), 0,88 (б, 1 = 6,7 Гц, 3Н), 0,86 (б, 1 = 6,7 Гц, 3Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₄₀Н₅₂^О₈ 740, найденное значение 741 (М+Н)⁺.

Таблица 2А. Указанные ниже соединения были получены аналогичным образом из соответствующего амина и аминокислоты

Пример	Соединение	Структура	Аналитические данные
Пример К.19	метил((15,2К)-2метокси-1 -(((28)-2-(4(4'-(2-((18)-1-((Ν(метоксикарбонил)-0метил-Ьтреонил)амино)-2метилпропил)-1Нимидазол-4-ил)-4бифенилил)-1Нимидазол-2-ил)-1пирролидинил)карбон ил)пропил)карбамат	м.0 ом.	ЖХМС Анал вычисл для СдоНззМЛ 772 найденное значение 773 (М+Н)+
Пример К20	метил((18)-3-метокси1-(((28)-2-(4-(4^(2((18)-1-((14(метоксикарбонил)-Ометил-Ьгомосерил)амино)-2метилпропил)-1Нимидазол-4-ил)-4бифенилил)-1Нимидазол-2-ил)-1пирролидинил)карбон ил)пропил)карбамат		ЖХМС Анал вычисл для ϋ4οΗ52Ν80& 772 найденное значение 773 (М+Н)+
Пример К21	метил((18)-2-((28)-2(4-(4'-(2-(( 18)-1 -((Ν(метоксикарбонил)-Ьаланил)амино)-2метилпропил)-1Нимидазол-4-ил)-4бифенилил)-1Нимидазол-2-ил)-1пирролидинил)-1метил-2оксоэтил)карбамат	ν- н НА	ЖХМС Анал вычисл для СмНиМзОб 684, найденное значение 685 (М+Н)+
Пример К22	1М2-(метоксикарбонил)- Ν-((1Κ)-1-(4-(4-(2((28)- 1-(Ν- (метоксикарбонил)-Ьвалил)-2пирролидинил)-1Нимидазол-4-ил)-4-		ЖХМС Анал вычисл для СзиНзккОб 740, найденное значение 741 (М+Н)+

- 55 018782

	бифенилил)-1Нимидазол-2-ил)-2метилпропил)-Ьвалинамид
Пример К23	метил((18,2К)-2метокси-1 -(((28)-2-(4(4'-(2-((1Κ)-1-((Ν(метоксикарбонил)-Ометил-Ьтреонил)амино)-2метилпропил)- 1Нимидазол-4-ил)-4бифенилил)-1Нимидазол-2-нл)-1пирролидинил)карбон ил)пропил)карбамат	ΚΜΟ,ΓΗΝ о	ЖХМС Анал вычисл для СдоН^Ок 772 найденное значение 773 (М+Н)+
Пример К24	метил ((18)-3-метокси1-(((28)-2-(4-(4'-(2((ΙΚ)-Η(Ν(метоксикарбонил)-Ометил-Ьгомосерил)амино)-2метилпропил)-1Нимидазол-4-ил)-4бифенилил)-1Нимидазол-2-нл)-1пирролидинил)карбон ил)пропил)карбамат	№Ο,ΟΗΝ „ „ ϊ4»* а-с п-о-о-се МеСА	ЖХМС Анал вычисл для С4ОН52Ш)а 772, найденное значение 773 (Μι II)1
Пример К25	метил(( 18)-2-((28)-2(4-(4'-(2-((1Κ)-1-((Ν(метоксикарбонил)-Еаланил)амино)-2меггилпропил)-1Нимидазол-4-ил)-4бифенилип)-1Нимидазол-2-ил)-1 пирролидинил)-1 метил-2-оксоэтил) карбамат	МеО .СНЫ 0 м 0 <Ν ; Η Η . ΝΜ	ЖХМС Анал вычисл для СзбЩ^кОб 684, найденное значение 685 (М+Н)+

мн^оас /топуоп

й/д-уэ

ДМЭ /Н]О

Н-АТУ7*о-₽г/« ДМФ

- 56 018782

Пример	Структура	Аналитические данные
Пример А	О ^^МНЭдс	ЖХМС: Анал. вычисл. для С|,-,Н2[ВгК2О1. 385; найденное значение: 386 (М+Н)+.
Пример В	ν__V Ы^Х^МНВос н г	ЖХМС: Анал. вычисл. для СдбРЬтВгКзСЕ: 366; найденное значение: 367 (М+Н)+.
Пример С		ЖХМС: Анал. вычисл для ΡρΗτιΒΝτ,Ο,. 413; найденное значение: 414 (М+Н)+.
Пример ϋ	Ο-/°Ύ° ГУ/УСИа ' Χ-ϊ Ν^γ-ΝΗΒαί	ЖХМС: Анал. вычисл. для СгНюКпО.! 632; найденное значение: 633 (М+Н)+.
Пример Е	Ν~Α ΛΛ ^~Ν \=/ V-? 4νΆ^,ΝΗΒοο	ЖХМС: Анал. вычисл. для С.-ЛмГЕОу 498; найденное значение: 499 (М+Н)+.
Пример Р	Ν“Α /Ο\ /=\ /~Ν Η Λ / \ / А # \ Л \=/ ΐ—Ν-Ά^_ΝΗ2	ЖХМС: Анал. вычисл. для 398, найденное Значение: 399 (М+Н)+.
Пример К26	_ Λ . ΝΗΟΟΛΛβ ΜβΟ20ΗΝ _ О Л Υ-τ-7 “	ЖХМС: Анал. вычисл. для СззЕЦбПзОб: 712; найденное значение: 713 (М+Н)+.

Пример В27	МеОаСнн 0 о -нЭо-о-очих МеО Η Η ·	ЖХМС Анал вычисл для ΟϊβΗίβΝβΟ» 744, найденное значение 745 (М+Н)+
Пример К28	Λ Г4НСОгМе ΜβΟίΟΗΝ Л η Ϊ /-Сдг-О-ОЧСК4 <.> н н ί	ЖХМС Анал вычисл для СмНдоМцОб 756, найденное значение 757 (М+Н)+

Пример К29.

- 57 018782

В колбу на 50 мл с одним горлом, в которой находилась магнитная мешалка, помещалось соединение из примера Е (150 мг, 180 ммоль) в метаноле (5 мл). К этому раствору добавлялась суспензия палладия на угле (10%, 100 мг) в метаноле (2 мл). Смесь продувалась водородом под давлением 60 фунт на кв дюйм (~4 бар). Смесь встряхивалась при комнатной температуре в течение ночи. Содержимое реактора анализировалось методом ЖХМС, выход реакции составил 20%. К смеси добавлялась суспензия гидрокиси палладия на угле (20%, 100 мг) в уксусной кислоте (2 мл). Смесь продувалась водородом и встряхивалась на качалке Парра под давлением 60 фунт на кв дюйм в течение выходных дней. Смесь реагентов отфильтровывалась через диатомитовый фильтр (Се111е), фильтрат выпаривался под вакуумом. Остаток очищался методом ВЭЖХ (СΗзСN-Η₂0-ТФУК), в результате получался пример 29 (32 мг, выход 23%), имеющее вид белого твёрдого вещества. ЖХМС: анал. вычисл. для СадИз^С,: 742; найденное значение: 743 (М+Н)⁺.

Пример	Структура	Аналитические данные
Пример 6	О Вг -ΝΗΒΰύ	ЖХМС: Анал. вычисл. для СгцНгвВгЪЮб: 506, найденное значение: ионизация отсуствовала (М+Н)+
Пример Н	н X ВпО^Х	ЖХМС: Анал. вычисл. для СззНзяВгКзОз: 486; найденное значение: 487 (М+Н)’.
Пример I	ΝΆ. /=\ Ζ~'Ν Вос II \ У—< II ν Ν-ΧλΝΗΒοο О	ЖХМС: Анал. вычисл. для (Α,ΙΤ,όΒΝΑ 718, найденное значение: 719 (М+Н)1.
Пример I	К V-	ЖХМС: Анал. вычисл. для СщЕЬвМяО-: 832; найденное значение: 833 (М+Н)+
Пример К29		ЖХМС: Анал вычисл. для ίΥΗί,-,ΝχΟ-,: 742, найденное значение: 743 (М+Н)+.

Схема 3

Пример К30. №(5-(4-бромфенил)-Ш-имидазол-2-ил)ацетамид

Смесь 2-бром-1-(4-бромфенил)этанона (2,00 г, 7,20 ммоль) и ацетилгуанидина (2,18 г, 21,6 ммоль) в ДМФ (40 мл) перемешивалась при комнатной температуре в течение 48 ч. Раствор концентрировался под вакуумом до сухого остатка. Оставшееся коричневое твердое вещество было достаточно чистым, чтобы использовать его на следующем этапе. ЖХМС: анал. вычисл. для ^ιΗ₁₀ΒγΝ₃0 279, 281, найденное значение 280, 282 (М+Н)⁺.

Пример К31. (8)-трет-Бутил2-(5-(4'-(2-ацетамидо-1Η-имидазол-5-ил)бифенил-4-ил)-1Н-имидазол-2ил)пирролидин-1-карбоксилат.

- 58 018782

Раствор №(5-(4-бромфенил)-1Н-имидазол-2-ил)ацетамида (0,604 г, 2,16 ммоль), (8)-трет-бутил-2(5-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-имидазол-2-ил)пирролидин-1-карбоксилата (0,950 г, 2,16 ммоль) и NаНСО₃ (0,636 г, 7,57 ммоль) в ДМЭ (20 мл) и воде (5 мл) дегазировался путем эвакуации и заполнения сосуда Ν₂ (троекратно). К раствору добавлялся Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (0,125 г, 0,11 ммоль), и суспензия нагревалась до 125°С в течение 24 ч. Смесь выпаривалась под вакуумом досуха, остаток очищался методом колоночной хроматографии (система Вю!аде, градиентное элюирование 0-10% МеОН в СН₂С1₂). Затем материал очищался методом препаративной ВЭЖХ (СН₃С№Н₂О^Н₄ОАС), что приводило к образованию основного соединения, имеющего вид бесцветного твердого вещества 7,76 (арр Ьг ά, I = 8,4, 2,2 Гц, 4Н), 7,69 (аррг ά, I = 8,4 Гц, 2Н), 7,66 (арр ά, I = 8,4 Гц, 2Н), 7,45 (8, 1Н), 7,23 (8, 1Н), 3,66 - 3,72 (т, 1Н), 3,48-3,53 (8, 1Н), 2,34 - 2,46 (т, 1Н), 2,18 (8, 3Н), 1,96-2,10 (т, 3Н), 1,46, 1,25 (8, 9Н, соотношение ротамеров 1:2). ЖХМС: анал. вычисл для 512, найденное значение 513, 282 (М+Н)⁺.

Пример К32. (8)-5-(4'-(2-(пирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-5-ил)бифенил-4-ил)-1Н-имидазол-2-амин.

Этап 1. Раствор (8)-трет-бутил 2-(5-(4'-(2-ацетамидо-1Н-имидазол-5-ил)бифенил-4-ил)-1Н-имидазол-2-ил)пирролидин-1-карбоксилаат (55,0 мг, 0,11 ммоль) в СН₂С1₂ (5 мл) и ТФУК (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционная смесь концентрировалась в вакууме, в результате получалась соль ТФУК и основного соединения (55,0 мг), которая в таком виде использовалась на следующем этапе. ЖХМС: анал. вычисл. для С₂₄Н₂₄Ц5О 412, найденное значение 413 (М+Н)⁺.

Этап 2. Коричневое масло из этапа 1 суспендировалось в 25% НС1 в МеОН (10 мл) и нагревалось под обратным холодильником в течение 3 ч. Летучие компоненты удалялись в разреженной атмосфере, а остаток очищался методом препаративной ВЭЖХ (СН₃С№Н₂О-ТЕА). Так получалась соль ТФУК и основного соединения (20 мг, 42%). ЖХМС: анал. вычисл. для С₂₂Н₂^₆ 370, найденное значение 371 (М+Н)⁺.

Пример К33. (8)-2-Метоксикарбониламино-№(5-(4'-(2-((8)-1-((8)-2-метоксикарбониламино-3-метилбутаноил)пирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-5-ил)бифенил-4-ил)-1Н-имидазол-2-ил)-3-метилбутанамид.

ЫНСО_гМе

К раствору (8)-5-(4'-(2-(пирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-5-ил)бифенил-4-ил)-1Н-имидазол-2-аминтрифторуксусной кислоты (20 мг, 0,04 ммоль), (8)-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутановой кислоты (25 мг, 0,14 ммоль) и изо-Рг₂№! (0,09 мл, 0,53 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавлялся Н-АТУ (54 мг г, 0,14 ммоль). Раствор перемешивался в течение 3 ч, а затем выливался в воду. Смесь концентрировалась до сухого состояния под вакуумом, остаток очищался методом препаративной ВЭЖХ (СН₃С№Н₂О-ТЕА), в результате образовывалось основное соединение, а также восстанавливался исходный материал. Восстановленный исходный материал повторно принимал участие в реакции и очищался, как указано выше. Две партии продуктов очищались методом препаративной ВЭЖХ (СН₃С№Н₂О-Ж₄ОАс), что приводило к образованию основного соединения, имеющего вид твердого вещества желто-коричневого цвета (18 мг, 76%) Ή ЯМР (400 МГц, СИ₃ОИ) δ 7,80-7,88 (т, 9Н), 7,56 (8, 1Н), 5,24 (арр ΐ, 1=7,6 Гц, 1Н), 4,23 (ά, I = 7,1 Гц, 1Н), 4,18 (ά, I = 6,6 Гц, 1Н), 4,08-4,13 (т 1Н), 3,83-3,90 (т, 1Н), 3,68 (8, 3Н), 3,65 (8, 3Н), 2,54-2,63 (т, 1Н), 2,17-2,30 (т, 4Н), 2,01-2,09 (т, 1Н). ЖХМС: анал. вычисл. для С₃₆Н₄₄^О₆ 684, найденное значение 685 (М+Н)⁺.

Биологическая активность

В этом раскрытии сущности настоящего изобретения использовалось понятие анализа репликонов вирусного гепатита С (ВГС). Анализ был подготовлен, проведен и оценен в соответствии с описанием, опубликованным для всеобщего ознакомления в РСТ/И8 2006/022197 и в публикации О'Воу1е е! а1 АпйткгоЬ Л§еп18 СНетоШег 2005 Арг,49(4) 1346-53.

Для изучения серий описываемых соединений использовались клетки с репликоном ВГС 1Ь-377пео, а также клетки, устойчивые к соединению А вследствие мутации У2065Н гена №5А (описано в заявке на патент РСТ/и82006/022197). Изученные соединения должны были ингибировать клетки, устойчивые к соединению А, в 10 раз слабее, чем клетки дикого типа, что указывает на связанные механизмы действий соединений двух серий. Следовательно, соединения, представленные в раскрытии сущности этого изобретения, могут эффективно подавлять функцию протеина №5А ВГС и могут считаться такими же эффективными в комбинациях, как это ранее указывалось в заявке на патент РСТ/И82006/022197 и

- 59 018782 было опубликовано для всеобщего ознакомления (\УО/О4014852). Более того, соединения настоящего раскрытия сущности изобретения могут быть эффективными против ВГС с генотипом 1Ь. Кроме того, следует понимать, что соединения настоящего раскрытия сущности изобретения могут подавлять ВГС различных генотипов. В табл. 2 приведены значения ЕС₅₀ представленных соединений настоящего раскрытия сущности изобретения по отношению в ВГС с генотипом 1Ь В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения соединения, представленные в раскрытии сущности изобретения, активны в отношении вирусов с генотипами 1а, 1Ь, 2а, 2Ь, 3а, 4а и 5а. Диапазон ЕС₅₀ по отношению к ВГС с генотипом 1Ь составляет А = 1-10 мкМ, В=100-999 нМ, С = 1-99 нМ, Ό = 1-999 пМ.

Соединения, представленные в этом раскрытии сущности изобретения, могут подавлять ВГС по механизмам, отличающимся от подавления протеина Ν85Α, или одновременно по нескольким механизмам. В одном из вариантов осуществления этого изобретения соединения, представленные в настоящем раскрытии сущности изобретения, подавляют репликоны ВГС, в другом варианте соединения, представленные в этом раскрытии сущности изобретения, подавляют протеин гена Ν85Α.

Таблица 2

Заинтересованным специалистам будет очевидно, что это раскрытие сущности изобретения не ограничено представленными выше примерами и что некоторые варианты осуществления этого изобретения могут иметь несколько иной вид, не выходя за рамки указанных выше свойств. Следовательно, ожидается, что приведенные примеры будут рассматриваться во всех аспектах как иллюстративные, но не исключительные; здесь следует обращать внимание на прилагающиеся пункты изобретения, а не на приведенные выше примеры. Это изобретение также охватывает и другие варианты, которые соответствуют тому, что приведено в пунктах изобретения, а также эквивалентным данным.

Соединения, представленные в настоящем раскрытии сущности изобретения, могут подавлять ВГС по механизмам, отличающимся от подавления протеина Ν85Α, или одновременно по нескольким механизмам. В одном из вариантов осуществления этого изобретения соединения, представленные в настоящем раскрытии сущности изобретения, подавляют репликоны ВГС, в другом варианте соединения, представленные в раскрытии сущности изобретения, подавляют протеин Ν85Α. Соединения, представленные в раскрытии сущности изобретения, могут подавлять ВГС с различными генотипами.

Claims (14)

1. Соединение, выбранное из диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((18)-2-метил-1,1 -пропандиил)имино((28)-1 оксо-1,2-пропандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((18)-2-метил-1,1-пропандиил)имино((28,3Я)3 -метокси-1 -оксо-1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((18)-2-метил-1,1 -пропандиил)имино((28)-3 метил-1-оксо-1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((18)-2-метил-1,1-пропандиил)имино((28)-4метокси-1 -оксо - 1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((1Я)-2-метил-1,1-пропандиил)имино((28)-3метил-1-оксо-1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((1Я)-2-метил-1,1 -пропандиил)имино((28)-1оксо-1,2-пропандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((1Я)-2-метил-1,1-пропандиил)имино((28)-4метокси-1 -оксо - 1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((1Я)-2-метил-1,1-пропандиил)имино((28,3Я)3 -метокси-1 -оксо-1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((1Я)-2-метил-1,1 -пропандиил)имино((2Я)-3 метил-1 -оксо-1,2-бутандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((18)-2-метил-1,1-пропандиил)имино((2Я)-3метил-1 -оксо-1,2-бутандиил)))бискарбамата;

^-(метоксикарбонил)-И-((18)-1-(4-(4'-(2-((28)-1-(№(метоксикарбонил)-Е-валил)-2-пирролидинил)1Н-имидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-2-метилпропил)-Ь-валинамида;

- 60 018782 метил ((18,2К)-2-метокси-1-(((28)-2-(4-(4'-(2-((18)-1-((№(метоксикарбонил)-О-метил-Ь-треонил) амино)-2-метилпропил)-1Н-имидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-1пирролидинил)карбонил)пропил)карбамата;

метил ((18)-3-метокси-1-(((28)-2-(4-(4'-(2-((18)-1-((№(метоксикарбонил)-О-метил-Ь-гомосерил) амино)-2-метилпропил)-1Н-имидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-1пирролидинил)карбонил)пропил)карбамата;

метил ((18)-2-((28)-2-(4-(4'-(2-((18)-1-((№(метоксикарбонил)-Ь-аланил)амино)-2-метилпропил)-1Нимидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-1-пирролидинил)-1-метил-2-оксоэтил)карбамата;

^-(метоксикарбонил)-№((1К)-1-(4-(4'-(2-((28)-1-(№(метоксикарбонил)-Ь-валил)-2-пирролидинил)1Н-имидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-2-метилпропил)-Ь-валинамида;

метил ((18,2К)-2-метокси-1-(((28)-2-(4-(4'-(2-((1К)-1-((№(метоксикарбонил)-О-метил-Ь-треонил) амино)-2-метилпропил)-1Н-имидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-1пирролидинил)карбонил)пропил)карбамата;

метил ((18)-3-метокси-1-(((28)-2-(4-(4'-(2-((1К)-1-((№(метоксикарбонил)-О-метил-Ь-гомосерил) амино)-2-метилпропил)-1Н-имидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-1пирролидинил)карбонил)пропил)карбамата;

метил ((18)-2-((28)-2-(4-(4'-(2-((1К)-1-((№(метоксикарбонил)-Ь-аланил)амино)-2-метилпропил)-1Нимидазол-4-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-1-пирролидинил)-1-метил-2-оксоэтил)карбамата или фармацевтически приемлемой соли этих соединений.

2. Соединение, выбранное из или фармацевтически приемлемой соли этих соединений.

3. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по п. 1 или 2 или фармацевтически приемлемую соль этого соединения и фармацевтически приемлемый носитель.

4. Фармацевтическая композиция по п.3, дополнительно содержащая одно или два дополнительных соединения, обладающих активностью против вируса гепатита С (ВГС).

5. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой по меньшей мере одно из дополнительных соединений - это интерферон или рибавирин.

6. Фармацевтическая композиция по п.5, в которой интерферон представляет собой интерферон альфа 2В, пегилированный интерферон альфа, консенсус интерферон, интерферон альфа 2А или лимфобластоидный интерферон тау.

7. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой по меньшей мере одно из дополнительных соединений представлено интерлейкином 2, интерлейкином 6, интерлейкином 12, соединением, которое стимулирует ответ Т-хелперов 1-го типа, интерферирующей РНК, антисмысловой РНК, имикимодом, рибавирином, ингибитором инозин-5'-монофосфатдегидрогеназы, амантадином или ремантадином.

- 61 018782

8. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой по меньшей мере одно из дополнительных соединений эффективно подавляет функцию мишени, представленной металлопротеазой ВГС, сериновой протеазой ВГС, полимеразой ВГС, геликазой ВГС, протеином Ν84Β ВГС, проникновением ВГС, сборкой ВГС, выходом ВГС, протеином Ν85Α ВГС или ИМФДГ (инозин-монофосфатдегидрогеназой), использующейся для лечения инфекции, вызванной ВГС.

9. Способ лечения инфекции, вызванной ВГС, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или 2 или фармацевтически приемлемой соли этого соединения.

10. Способ по п.9, дополнительно включающий введение одного или двух дополнительных соединений, обладающих активностью против ВГС, до, во время или после применения соединения по п.1 или 2, или фармацевтически приемлемой соли этого соединения.

11. Способ по п.10, в котором по меньшей мере одно из дополнительных соединений - это интерферон или рибавирин.

12. Способ по п.11, в котором интерферон представляет собой интерферон альфа 2В, пегилированный интерферон альфа, консенсус интерферон, интерферон альфа 2А или лимфобластоидный интерферон тау.

13. Способ по п.10, в котором по меньшей мере одно из дополнительных соединений представлено интерлейкином 2, интерлейкином 6, интерлейкином 12, соединением, которое стимулирует ответ Тхелперов 1-го типа, интерферирующей РНК, антисмысловой РНК, имикимодом, рибавирином, ингибитором инозин-5'-монофосфатдегидрогеназы, амантадином или ремантадином.

14. Способ по п.10, в котором по меньшей мере одно из дополнительных соединений эффективно подавляет функцию мишени, представленной металлопротеазой ВГС, сериновой протеазой ВГС, полимеразой ВГС, геликазой ВГС, протеином Ν84Β ВГС, проникновением ВГС, сборкой ВГС, выходом ВГС, протеином Ν85Α ВГС или ИМФДГ (инозин-монофосфатдегидрогеназой), использующейся для лечения инфекции, вызванной вирусом гепатита С.