EA016311B1 - Производные пиперидин- или пиперазинзамещенной тетрагидронафталин 1-карбоновой кислоты, ингибирующие мтр - Google Patents

Производные пиперидин- или пиперазинзамещенной тетрагидронафталин 1-карбоновой кислоты, ингибирующие мтр Download PDF

Info

Publication number
EA016311B1
EA016311B1 EA200970398A EA200970398A EA016311B1 EA 016311 B1 EA016311 B1 EA 016311B1 EA 200970398 A EA200970398 A EA 200970398A EA 200970398 A EA200970398 A EA 200970398A EA 016311 B1 EA016311 B1 EA 016311B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compound
formula
evaporated
mol
solvent
Prior art date
Application number
EA200970398A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200970398A1 (ru
Inventor
Ливен Мерпул
Йоаннес Теодорус Мария Линдерс
Либуше Яроскова
Марсель Вьейевуа
Лео Якобус Йозеф Бакс
Дидье Жан-Клод Бертело
Гююске Фредерике Бюсхер
Original Assignee
Янссен Фармацевтика Нв
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Янссен Фармацевтика Нв filed Critical Янссен Фармацевтика Нв
Publication of EA200970398A1 publication Critical patent/EA200970398A1/ru
Publication of EA016311B1 publication Critical patent/EA016311B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/20—Nitrogen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/56—Nitrogen atoms
    • C07D211/58—Nitrogen atoms attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/10—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by doubly bound oxygen or sulphur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Изобретение относится к новым производным пиперидин- или пиперазинзамещенной тетрагидронафталин-1-карбоновой кислоты формулы (I), обладающим ингибирующей активностью в отношении секреции апоВ/МТР и сопутствующей гиполипидемической активностью. Кроме того, изобретение относится к способам получения таких соединений, фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения, а также использованию указанных соединений в качестве лекарственного средства для лечения атеросклероза, панкреатита, ожирения, гипертриглицеридемии, гиперхолестеринемии, гиперлипидемии, диабета и диабета по типу II.

Description

Изобретение относится к новым пиперидин- или пиперазинзамещенным производным тетрагидронафталин-1-карбоновой кислоты, обладающим ингибирующей активностью в отношении секреции апоВ/МТР и сопутствующей гиполипидемической активностью. Кроме того, изобретение относится к способам получения указанных соединений, фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения, а также к применению указанных соединений в качестве лекарственного средства для лечения атеросклероза, панкреатита, ожирения, гипертриглицеридемии, гиперхолестеринемии, гиперлипидемии, диабета и диабета по типу II.
Ожирение является причиной множества серьезных проблем со здоровьем, таких как развитие диабета и заболевания сердца у взрослых. Кроме того, снижение массы тела является навязчивой идеей у возрастающей части населения.
В настоящее время широко признается причинно-следственная связь между гиперхолестеринемией, особенно связанной с повышенными концентрациями в плазме крови липопротеинов низкой плотности (здесь далее обозначаются как ЛНП) и липопротеинов очень низкой плотности (здесь далее обозначаются как ЛОНП) и преждевременным развитием атеросклероза и/или сердечно-сосудистого заболевания. Тем не менее, в настоящее время для лечения гиперлипидемии доступно только ограниченное количество лекарственных препаратов.
Лекарственные препараты, в основном применяемые для лечения гиперлипидемии, включают полимеры для связывания желчных кислот, такие как холестирамин и холестипол, производные фиброевой кислоты, такие как безафибрат, клофибрат, фенофибрат, ципрофибрат и гемфиброзил, никотиновая кислота и ингибиторы синтеза холестерина, такие как ингибиторы НМС кофермент-А редуктазы. Тем не менее, остается потребность в новых средствах для снижения уровней липидов, обладающих большей эффективностью и/или действующие посредством других механизмов, чем вышеуказанные лекарственные препараты.
Липопротеины плазмы представляют собой водорастворимые высокомолекулярные комплексы, образованные из липидов (холестерин, триглицеридов, фосфолипидов) и аполипопротеинов. В соответствии с их плотностью (определяемой ультрацентрифугированием) определены пять основных групп липопротеинов, которые различаются по количеству липидов и типу аполипопротеина, все они образуются в печени и/или кишечнике. Они включают ЛНП, ЛОНП, липопротеины промежуточной плотности (здесь в дальнейшем обозначаются как ЛПП), липопротеины высокой плотности (здесь далее обозначаются как ЛВП) и хиломикроны. Идентифицировано десять основных аполипопротеинов в плазме человека. ЛОНП, которые секретируются печенью и содержат аполипопротеин В (здесь далее обозначаются как Апо-В), подвергаются разложению до ЛНП, которые переносят 60-70% от общего количества холестерина в сыворотке крови. Кроме того, Апо-В является основным белковым компонентом ЛНП. Повышенный уровень ЛНП-холестерина в сыворотке крови вследствие избыточного синтеза или пониженного метаболизма причинно связан с атеросклерозом. Напротив, липопротеины высокой плотности (здесь и далее указаны как ЛВП), которые содержат аполипопротеин А1, обладают защитным действием и обратно пропорционально соотносятся с риском развития заболевания коронарных сосудов сердца. Таким образом, соотношение ЛВП/ЛНП представляет собой удобный способ оценки атерогенного потенциала липидного профиля плазмы крови у индивидуума.
Две изоформы аполипопротеина (апо) В, апо В-48 и апо В-100, являются важными белками в липопротеиновом метаболизме человека. Апо В-48 имеет размер, составляющий около 48% от апо В-100 при анализе в натрий додецилсульфат полиакриламидных гелях, синтезируется в кишечнике человека. Апо В-48 неоходим для сборки хиломикрон и, следовательно, играет необходимую роль в процессе всасывания жиров пищи в кишечнике. Апо В-100, который вырабатывается в печени человека, необходим для синтеза и секреции ЛОНП. ЛНП, которые содержат примерно 2/3 холестерина плазмы крови человека, представляют собой продукты метаболизма ЛОНП. Фактически, апо В-100 представляет только один белковый компонент ЛНП. Признано, что повышенные концентрации апо В-100 и ЛНП-холестерина в плазме крови являются факторами риска для развития атеросклеротического заболевания коронарных сосудов.
Большое количество наследственных и приобретенных заболеваний может привести к гиперлипидемии. Их можно подразделить на первичные и вторичные гиперлипидемические состояния. Наиболее частыми причинами вторичных гиперлипидемии являются сахарный диабет, злоупотребление алкоголем, лекарственными препаратами, гипотиреоидизм, хроническая почечная недостаточность, нефротический синдром, холестаз и булимия. Первичные гиперлипидемии также подразделяются на обычную гиперхолестеринемию, семейную комбинированную гиперлипидемию, семейную гиперхолестеринемию, остаточную гиперлипидемию, синдром хиломикронемии и семейную гипертриглицеридемию.
Известно, что микросомальный белок переноса триглицеридов (здесь далее обозначается как МТР) катализирует транспорт триглицеридов, холестерилового эфира и фосфолипидов, таких как фосфатидилхолин. Это указывает на то, что МТР необходим для синтеза Апо В-содержащих липопротеинов, таких как хиломикроны и ЛОНП, предшественников ЛНП. Следовательно, это означает, что ингибитор МТР будет ингибировать синтез ЛОНП и ЛНП, тем самым снижая уровни ЛОНП, ЛНП, холестерина и триглицеридов у человека.
- 1 016311
Полагают, что соединения, способные ингибировать МТР, могут быть использованы при лечении расстройств, таких как ожирение, гиперлипидемия, гиперхолестеринемия, гипертриглицеридемия, диабет по типу II, атеросклероз, и для снижения возникающих после приема пищи сывороточных уровней триглицеридов в плазме.
Настоящее изобретение основано на неожиданном открытии того, что группа производных тетрагидронафталин-1-карбоновой кислоты обладает ингибирующей активностью в отношении секреции апо В/МТР. Эти соединения формулы (I) могут действовать системно и/или в качестве избирательных ингибиторов МТР, то есть способны избирательно блокировать МТР на уровне стенки кишечника у млекопитающих.
Настоящее изобретение относится к семейству новых соединений формулы (I) н н
н н их фармацевтически приемлемым солям присоединения кислот, их Ν-оксидам и их стереохимически изомерным формам, где
X представляет собой N или СН; когда X представляет собой СН, тогда А2 представляет собой -ΝΚ6-, где В6 представляет собой водород или С1-4алкил, или, когда X представляет собой Ν, тогда А2 отсутствует;
А1 представляет собой -(С=О)- или -СН2-;
В1 представляет собой ΝΒ7Β8, где каждый В7 и В8 независимо выбраны из водорода;
С1-8алкила;
С1-8алкила, замещенного одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо от другого выбран из гидрокси, С1-4алкилокси, С1-4алкилоксикарбонила, гидроксикарбонила, ΝΒ10Β11, ί.ΌΝΒΙ2Β17’. арила или гетероарила; где гетероарил представляет собой индолил;
или арила;
или В1 представляет собой ΝΒ7Β8, где В7 и В8 вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют пирролидинильное или пиперидинильное кольца, где каждое из этих колец может необязательно быть замещено одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, С1-4алкилокси, гидрокси, гидроксикарбонила или С1-4алкилоксикарбонила;
или В1 представляет собой ОВ9, где В9 представляет собой С1-6алкил или С3-8алкенил;
В10 представляет собой водород, С1-4алкил, С1-4алкилкарбонил, С1-4алкилоксикарбонил или Β12-ΝΗкарбонил;
В11 представляет собой водород;
В12 представляет собой водород;
В13 представляет собой водород,
В4 представляет собой фенил; или фенил, замещенный 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, галогена, гидрокси, С1-4алкилокси, полигалогенС1-4алкилокси, сульфамоила, фенила, замещенного трифторметилом, или гетероциклической группы, где указанная гетероциклическая группа представляет собой морфолинил или пиперазинил, замещенный С1-4алкилом; или
В4 представляет собой гетероарил, где указанный гетероарил представляет собой пиридинил или пиридазинил, необязательно замещенные одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, гидрокси, С1-4алкилокси или оксо;
В5 представляет собой водород или С1-4лкилокси; и арил представляет собой фенил; или фенил, замещенный заместителями в количестве от одного до двух, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, С1-4алкилокси, галогена или гидрокси.
Как используется в вышеуказанных определениях галоген включает фтор, хлор, бром и йод;
С1-4алкил обозначает насыщенные углеводородные радикалы с прямой или разветвленной цепью, содержащие от 1 до 4 атомов углерода, такие как, например, метил, этил, пропил, бутил, 1-метилэтил, 2метилпропил и тому подобное;
С1-6алкил включает С1-4алкил и его более высокие гомологи, содержащие 5 или 6 атомов углерода, такие как, например, 2-метилбутил, пентил, гексил и тому подобное;
С1-8алкил включает С1-6алкил и его более высокие гомологи, содержащие от 7 до 8 атомов углерода, такие как, например, гептил, этилгексил, октил и тому подобное;
полигалоген С1-4алкил определен как полигалогензамещенный С1-4алкил, в частности С1-4алкил (как
- 2 016311 определено в настоящем документе выше), замещенный 1-4 атомами галогена, такой как фторметил, дифторметил, трифторметил, трифторэтил и тому подобное;
С3-8диклоалкил включает циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил;
С3-8диклоалкенил включает циклопропенил, циклобутенил, циклопентенил, циклогексенил, циклогептенил и циклооктенил;
С3-8алкенил обозначает углеводородные радикалы с прямой или разветвленной цепью, содержащие одну двойную связь и содержащие от 3 до 8 атомов углерода, такие как, например, 2-пропенил, 3бутенил, 2-бутенил, 2-пентенил, 3-пентенил, 3-метил-2-бутенил, 3-гексенил, 2-гексенил, 2-пентенил, 2октенил и тому подобное;
С3-8алкинил обозначает углеводородные радикалы с прямой или разветвленной цепью, содержащие одну тройную связь и содержащие от 3 до 8 атомов углерода, такие как, например, 2-пропинил, 3бутинил, 2-бутинил, 2-пентинил, 3-пентинил, 3-метил-2-бутинил, 3-гексинил, 2-гексинил, 2-пентинил, 2октинил и тому подобное.
Фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот, описанные в настоящем документе выше, включают виды терапевтически активных нетоксичных солей присоединения кислот, которые могут быть образованы соединениями формулы (I). Обычно, эти фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот могут быть получены обработкой соединения в виде основания такой соответствующей кислотой. Подходящие кислоты включают, например, неорганические кислоты, такие как галогенводородные кислоты, например, хлористоводородная кислота или бромистоводородная кислота, серная, азотная, фосфорная и тому подобные кислоты; или органические кислоты, такие как, например, уксусная, пропановая, гидроксиуксусная, молочная, пировиноградная, щавелевая (то есть этандионовая), малоновая, янтарная (то есть бутандионовая кислота), малеиновая, фумаровая, яблочная, винная, лимонная, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, п-толуолсульфоновая, цикламовая, салициловая, п-аминосалициловая, памовая и тому подобные кислоты.
С другой стороны, указанные соли можно преобразовать в свободное основание обработкой соответствующим основанием.
Соединения формулы (I) могут быть как в несольватированном, так и в сольватированном виде. Для описания молекулярного комплекса, содержащего соединение по изобретению и одну или несколько молекул фармацевтически приемлемого растворителя, например этанола, в настоящем документе используют термин сольват. Когда указанный растворитель представляет собой воду, используют термин гидрат.
Ν-оксидная форма соединения в соответствии с формулой (I) включает соединение формулы (I), где один или несколько атомов азота окислены до так называемых Ν-оксидов, в частности до Ν-оксидов, где один или несколько третичных атомов азота (например, пиперазинильного или пиперидинильного радикала) являются Ν-окисленными. Такие Ν-оксиды могут быть легко получены специалистом в данной области, не обладающим какими-либо изобретательскими навыками, и они, очевидно, являются альтернативами соединения в соответствии с формулой (I), так как эти соединения представляют собой метаболиты, образующиеся путем окисления в организме человека при усвоении. Общеизвестно, что окисление обычно является первой стадией метаболизма лекарственного препарата (ТехФоок οί Отдашс МеФсша1 и Рйагшасеи!1са1 Скеш18!гу, 1977, радез 70-75). Кроме того, общеизвестно, что почти с такими же эффектами человеку вместо самого соединения также могут быть введены соединения в виде метаболитов.
Соединение формулы (I) может быть преобразовано в соответствующую форму Ν-оксида в соответствии со способами, известными в данной области для пребразования тривалентного азота в форму его Ν-оксида. Обычно, указанная реакция Ν-окисления может быть выполнена путем взаимодействия соединения формулы (I) с подходящим органическим или неорганическим пероксидом. Подходящие неорганические пероксиды содержат, например пероксид водорода, пероксиды щелочных или щелочноземельных металлов, например пероксид натрия, пероксид калия; подходящие органические пероксиды могут содержат пероксокислоты, такие как, например, пероксобензойная кислота или галоген замещенная пероксобензойная кислота, например, 3-хлорпероксобензойная кислота, пероксоалкановые кислоты, например, пероксоуксусная кислота, алкилгидропероксиды, например, трет-бутил гидропероксид. Подходящими растворителями являются, например, вода, низшие спирты, например этанол и тому подобное, углеводороды, например толуол, кетоны, например 2-бутанон, галогенированные углеводороды, например дихлорметан, и смеси таких растворителей.
Используемый в настоящем документе выше термин стереохимически изомерные формы обозначает все возможные изомерные формы, которые могут иметь соединения формулы (I). Если не указано иное, химическое название соединений обозначает смесь всевозможных стереохимически изомерических форм, при этом указанные смеси содержат все диастереомеры и энантиомеры основной молекулярной структуры. Более конкретно, стереоцентры могут быть К- или 8-конфигурации; заместители на бивалентных циклических (частично) насыщенных радикалах могут быть или цис- или транс-конфигурации. Соединения, содержащие двойные связи, могут иметь Е или Ζ-стереохимию указанной двойной связи.
- 3 016311
Очевидно, что стереохимически изомерные формы соединений формулы (I) входят в объем настоящего изобретения.
Абсолютная стереохимическая конфигурация соединений формулы (I) и промежуточных соединений, используемых при их получении, может легко быть определена специалистом в данной области путем использования хорошо известных методов, таких как, например, дифракция рентгеновских лучей.
Соединения формулы (I) имеют по меньшей мере два асимметрических атома углерода, как показано ниже на схеме, где асимметрические атомы углерода обозначены знаком*.
Ввиду присутствия по меньшей мере двух асимметрических атомов углерода общий термин соединение формулы (I) включает смесь четырех стереоизомеров. Большая часть полученных соединений
Каждое из иллюстрированных выше цис- или транс- соединений состоит из рацемической смеси двух энантиомеров, и для обозначения указанной относительно стереохимической конфигурации использовали обозначение связей жирным шрифтом или штриховкой.
В случае, когда цис- или транс-соединение разделено на два отдельных энантиомера, обозначение связей жирным шрифтом или штриховкой заменено на клиновидное обозначение этих связей для указания того, что соединение представляет собой индивидуальный энантиомер. Если абсолютная стереохимия конкретного хирального атома углерода в отдельном энантиомере не определена, тогда ее стереохимическая конфигурация обозначена как В*, или 8*, обозначая относительную стереохимию.
Кроме того, некоторые соединения формулы (I) и некоторые промежуточные соединения, используемые при их получении, могут проявлять полиморфизм. Понятно, что настоящее изобретение включает любые полиморфные формы, обладающие свойствами, которые могут быть использованы при лечении указанных выше состояний.
Некоторые соединения формулы (I) могут также быть в виде таутомерных форм. Предполагается, что такие формы, хотя и не указанные конкретно в вышеуказанной формуле, включены в объем настоящего изобретения. Например, когда ароматическое гетероциклическое кольцо замещено гидроксигруппой, то кетоформа может представлять наиболее распространенный таутомер.
В объеме настоящей заявки выражение соединение по изобретению также включает соединение, соответствующее общей формуле (I), и его пролекарство или их изотопно-меченное соединение.
Также в объем изобретения включены так называемые пролекарства соединений формулы (I). Пролекарства представляют собой некоторые производные фармацевтически активных соединений, ко
- 4 016311 торые могут обладать небольшой или не обладать фармакологической активностью сами по себе, но способные при введении в организм преобразовываться в соединения формулы (I), обладающие желаемой фармацевтической активностью, например, путем гидролитического расщепления. Такие производные называют пролекарствами.
В объеме настоящей заявки соединение по изобретению, по существу, включает все изотопные сочетания его химических элементов. В объеме настоящей заявки химический элемент, в частности, когда указано для соединения в соответствии с формулой (I), содержит все изотопы и изотопные смеси этого элемента либо природные, либо полученные путем синтеза, либо в распространенной в природе форме, либо в изотопно-обогащенной форме. В частности, когда указан водород, понятно, что имеется в виду 123 11121314
Η, Η, Н и их смеси; когда указан углерод, понятно, что имеется в виду С, С, С, С и их смеси; когда указан азот, понятно, что имеется в виду 13Ν, 14Ν, 15Ν и их смеси; когда указан кислород, понятно, что имеется в виду 14О, 15О, 16О, 17О, 18О и их смеси; и когда указан фтор, понятно, что имеется в виду 18Р, 19Р и их смеси.
Соответственно, соединение по изобретению, по существу, охватывает соединение с одним или несколькими изотопами одного или нескольких элементов и их смеси, включая радиоактивное соединение, также называемое радиомеченым соединением, где один или несколько нерадиоактивных атомов заменены на один из своих радиоактивных изотопов. Термин радиомеченое соединение обозначает любое соединение в соответствии с формулой (I), его фармацевтически приемлемую соль присоединения кислот или оснований, его Ν-оксидную форму, или его соль четвертичного аммония, которые содержат по меньшей мере один радиоактивный атом. Например, соединение может быть мечено позитроном или гамма-активными радиоизотопами. Для метода радиолигандного связывания (исследование мембранного рецептора), 3Н-атом или 1251-атом представляет собой атом для замещения, по выбору. Для получения изображения чаще всего используемыми радиоактивными изотопами, испускающими позитроны (РЕТ), 11 18 15 13 являются С, Р, О и Ν, каждый из которых получен на ускорителе элементарных частиц и имеет период полураспада 20, 100, 2 и 10 мин, соответственно. Так как эти радиоактивные изотопы имеют очень короткий период полураспада, то возможность их использования имеется лишь в учреждениях, имеющих собственный ускоритель для их получения, ограничивая таким образом их применение. Наиболее часто используемыми из них являются 18Р, 99тТс, 201Т1 и 1231. Способы обращения с этими радиоактивными изотопами, их получение, выделение и введение в молекулу хорошо известны специалисту в данной области.
В частности, радиоактивный атом выбран из группы, включающей водород, углерод, азот, серу, кислород и галоген. Предпочтительно, радиоактивный атом выбран из группы, включающей водород, углерод и галоген.
о 11 1 О 1 ОО 1 ОО 1 ОС 1 О1
В частности, радиоактивный изотоп выбран из группы, включающей Н, С, Р, I, I, I, I,
ОС ОС ОО ОО О 11
Вг, 6Вг, Вг и Вг. Предпочтительно, радиоактивный изотоп выбран из группы, включающей Н, С и 18Р.
Представляющие интерес соединениями формулы (I) являются соединения формулы (I), где имеют место одно или несколько следующих ограничений:
a) X представляет собой СН; или
b) X представляет собой Ν; или
c) А1 представляет собой -(С=О)-; или
б) А1 представляет собой -СН2-; или
е) В1 представляет собой ΝΚ7Κ.8, где каждый К7 и В8 независимо выбран из водорода; С1-8алкила; С1-8алкила, замещенного одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо от другого выбран из гидрокси, С1-4алкилокси, С1-4алкилоксикарбонила, гидроксикарбонила, ΝΒ10Β11, ί'ΌΝΡΎ13. арила или гетероарила; или арила; или
I) В представляет собой ΝΒ В , где Ви В объединены с атомом азота, несущим В и В , с образованием пирролидинильного или пиперидинильного кольца, где каждое из этих колец может необязательно быть замещено одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из С1-4 алкила, С1-4алкилокси, гидрокси, гидроксикарбонила или С1-4алкилоксикарбонила; или
д) В1 представляет собой ОВ9, где В9 представляет собой С1-6алкил или С3-8алкенил; или
II) В4 представляет собой фенил; фенил, замещенный 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, галогена, гидрокси, С1-4алкилокси, полигалогенС1-4алкилокси, сульфамоила, фенила, замещенного трифторметилом, или гетероциклической группы, где указанная гетероциклическая группа представляет собой морфолинил или пиперазинил, замещенные С1-4алкилом; или
ί) В4 представляет собой гетероарил, где указанный гетероарил представляет собой пиридинил или пиридазинил, необязательно замещенные одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, гидрокси, С1-4алкилокси или оксо; или
_)) арил представляет собой фенил; или фенил, замещенный одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, С1-4алкилокси, галогена или гидрокси; или
k) В9 представляет собой гетероарил, где гетероарил представляет собой индолил; или
l) В5 представляет собой водород или С1-4алкилокси.
- 5 016311
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I), где X представляет собой СН или Ν; когда X представляет собой СН, тогда А2 представляет собой -ΝΒ6-, где В6 представляет собой водород или С1-4алкил, или, когда X представляет собой Ν, тогда А2 отсутствует; А1 представляет собой -(С=О)- или -СН2-; В1 представляет собой ΝΒ7Β8, где каждый В7 и В8 независимо выбраны из водорода; С1-8алкила; С1-8алкила, замещенного одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо от другого выбран из гидрокси, С1-4алкилокси, С1-4алкилоксикарбонила, гидроксикарбонила, ΝΒ10Β11, ί.ΌΝΒΙ2Β17’. арила или гетероарила; или арила; или В1 представляет собой ΝΒ7Β8, где В7 и В8 объединены с атомом азота, несущим В7 и В8, с образованием пирролидинильного или пиперидинильного кольца, где каждое из этих колец может необязательно быть замещено одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, С1-4алкилокси, гидрокси, гидроксикарбонила или С1-4алкилоксикарбонила; или В1 представляет собой ОВ9, где В9 представляет собой С 6алкил или С3-8алкенил; В4 представляет собой фенил; или фенил, замещенный 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, галогена, гидрокси, С1-4алкилокси, полигалогенС14алкилокси, сульфамоила, фенила, замещенного трифторметилом, или гетероциклической группы, где указанная гетероциклическая группа представляет собой морфолинил или пиперазинил, замещенный С14алкилом; или В4 представляет собой гетероарил, где указанный гетероарил представляет собой пиридинил или пиридазинил, необязательно замещенные одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, гидрокси, С1-4алкилокси или оксо; В5 представляет собой водород или С1-4алкилокси; арил представляет собой фенил; или фенил, замещенный заместителями в количестве от одого до двух, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, С1-4алкилокси, галогена или гидрокси; и гетероарил представляет собой индолил.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к
a) соединениям формулы (I), где В4 представляет собой фенил, замещенный гетероциклической группой, где указанная гетероциклическая группа представляет собой пиперазинил, замещенный С1-4 алкилом, в частности метилом или изопропилом;
b) соединениям формулы (I), где заместители 1,2,3,4-тетрагидронафталинильной группы имеют транс -конфигурацию;
c) соединениям формулы (I), где заместители 1,2,3,4-тетрагидронафталинильной группы имеют (1В,48) конфигурацию.
Конкретными соединениями формулы (I) являются соединения (34), (39), (47), (129), (199), (208), (246), (247), (248), (249), (252) и (276).
Обычно соединения формулы (На), определенные как соединения формулы (I), где А1 представляет собой -СН2-, могут быть получены путем Ν-алкилирования промежуточного соединения формулы (III) промежуточным соединением формулы (II), где ОТ представляет собой подходящую удаляемую группу, такую как, например, галоген, например, хлор, бром, йод, или, в некоторых случаях, ОТ может также представлять собой сульфонилоксигруппу, например метансульфонилокси, арилсульфонилокси, такой как бензолсульфонилокси или п-метилбензолсульфонилокси, трифторметансульфонилокси и тому подобные реакционноспособные удаляемые группы. Взаимодействие может быть выполнено в реакционноинертном растворителе, таком как, например, ацетонитрил, 2-пентанол, изобутанол, диметилацетамид, дихлорметан, хлороформ, 1,2-дихлорэтан или ДМФ, и, необязательно, в присутствии подходящего основания, такого как, например, карбонат натрия, карбонат калия или триэтиламин. Перемешивание может повысить скорость реакции. Взаимодействие можно, соответственно, проводить при температуре в пределах от комнатной температуры до температуры кипения реакционной смеси. Скорость реакции и выход продукта могут быть повышены с помощью микроволнового воздейсвия.
Соединения формулы (НЬ), определенные как соединения формулы (I), в которых радикал А1 представляет собой -(С=О)-, могут быть получены путем взаимодействия промежуточного соединения формулы (V) с промежуточным соединением формулы (IV), по меньшей мере в одном реакционно-инертном растворителе и, необязательно, в присутствии по меньшей мере одного подходящего конденсирующего агента, например, такого как описан в 8о11б-Рйа5е 8уп1йе5щ: А Ртасбса1 Ошбе радек 275 - 330 Ьу 8. Ка1с5 апб Р. А1Ьег1С1о, Магсе1 Оеккет, Шс., 2000, Β8ΒΝ 0-8247-0359-6) и/или подходящего основания, такого как карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, триэтиламин, Ν,Ν-диизопропилэтиламин или Ν
- 6 016311 метилморфолин, при этом указанный способ также необязательно включает преобразование соединения формулы (Ι-Ь) в его соль присоединения, и/или получение его стереохимически изомерных форм. Скорость реакции и выход продукта могут быть повышены с помощью микроволнового воздействия.
Может быть удобным преобразовать промежуточное соединение формулы (IV) в производное ацилгалогенида путем его взаимодействия, например, с тионилхлоридом, оксалилбромидом, оксалилхлоридом, фосгеном, трихлоридом фосфора или трибромидом фосфора, с последующим добавлением промежуточного соединения формулы (V) и подходящего основания.
Также может быть удобным активировать карбоновую кислоту формулы (IV) путем добавления эффективного количества промотора реакции. Неограничивающие примеры таких промоторов реакции включают карбонилдиимидазол, диимиды, такие как Ν,Ν'-дициклогексил-карбодиимид или 1-(3диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид и их функциональные производные. В случае использования хирально чистого реагента формулы (IV) можно провести быстрое и без энантиомеризации взаимодействие промежуточного соединения формулы (IV) с указанным промежуточным соединением (V) в присутствии, дополнительно, эффективного количества соединения, такого как гидроксибензотриазол (НОВТ), бензотриазолилокситрис(диметиламино)фосфоний гексафторфосфат, тетрапирролидинофосфоний гексафторфосфат, бромтрипирролидинофосфоний гексафторфосфат или их функциональные производные, как описано Ό. Нибкои, 1. Огд. Сйеш. (1988), 53:617. Или может быть удобным преобразовать промежуточное соединение формулы (IV) в производное ацилгалогенида путем аго взаимодействия, например, с тионилхлоридом, оксалилбромидом, оксалилхлоридом, фосгеном, трихлоридом фосфора или трибромидом фосфора, с последующим добавлением промежуточного соединения формулы (V) и подходящего основания.
Промежуточные соединения формулы (XVII), где заместители К4, В5, А1, А2 и X являются такими, как определено для соединений формулы (I), могут быть преобразованы в соединения формулы (Не), определенные как соединения формулы (I), где К1 представляет собой ΝΚ7Β8, известными в данной области способами Ν-ацилирования, используя в качестве реагента Η-ΝΚ7Κ.8.
Также соединения формулы (I), где К1 представляет собой ОК9, и К9 представляет собой С1-6алкил, могут быть преобразованы в соединения формулы (I), где К1 представляет собой ОК9, и К9 представляет собой водород, путем гидролиза в кислотных условиях. Соединения формулы (I), где К1 представляет собой ОК9 и К9 представляет собой С3-8алкенил, могут быть преобразованы в соединения формулы (I), где К1 представляет собой ОК9, и К9 представляет собой водород, известными в данной области способами восстановления, такими как, например, обработка натрийборгидридом в присутствии тетракис(трифенилфосфин)палладия в подходящем растворителе, таком как, например, ТГФ. Соединения формулы (I), где К1 представляет собой ОК9, и К9 представляет собой защитную группу, такую как аллил, бензил или трет-бутил, могут быть преобразованы в соединения формулы (I), где К1 представляет собой ОК9, и К9 представляет собой водород, известными в данной области способами удаления защитных групп, такими как гидролиз в присутствии палладия, катализируемое кислотой и основанием снятие защитной группы, или любым способом, описанным в РгоЮсбме Сгоирк ίη Отдашс 8уи1йе818 Ьу Т.^. Стееие аиб Р.С.М. \Уи18. ^йеу-Шеткаеисе; 3 ебйюи (Мау 15, 1999) (ΚΒΝ 0471160199).
Промежуточные соединения формулы (XIII), определенные как промежуточные соединения формулы (IV), где К1 представляет собой ОК9, могут быть получены способом, представленным ниже.
- 7 016311
Η Η
Промежуточные соединения формулы (XV) могут быть получены способом, описанным ниже. Промежуточные соединения формулы (XV) представляют собой промежуточные соединения формулы (IV), где В1 представляет собой ΝΒ7Β8.
Промежуточные соединения формулы (II) могут быть получены способом, приведенным ниже. Промежуточные соединения формулы (П-а) определены как промежуточные соединения формулы (II), где В1 представляет собой ΝΒ7Β8, и промежуточные соединения формулы (П-Ь) определены как промежуточные соединения формулы (II), где В1 представляет собой ОВ9.
- 8 016311
Соединения формулы (I), полученные способами, описанными выше, можно синтезировать в виде рацемических смесей энантиомеров, которые можно отделить друг от друга, в соответствии с известными в данной области способами разделения. Эти соединения формулы (I), полученные в виде рацематов, можно преобразовать в со ответствующие формы диастереомерных солей путем взаимодействия с подходящей хиральной кислотой. Затем указанные формы диастереомерных солей разделяют, например, с помощью селективной или фракционной кристаллизации, и энантиомеры выделяют с помощью щелочи. Альтернативный способ разделения энантиомерных форм соединений формулы (I) включает жидкостную хроматографию с использованием хиральной стационарной фазы. Указанные стереохимически чистые формы изомеров можно также получить из соответствующих стереохимически чистых форм изомеров соответствующих исходных веществ, при условии, что реакция протекает стереоспецифически. Если желаемым является стереоизомер, то указанное соединение, предпочтительно, следует синтезировать стереспецифическими способами получения. В этих способах преимущественно будут использоваться энантиомерно чистые исходные вещества.
Соединения формулы (I), их Ν-оксидные формы, их фармацевтически приемлемые соли и стереоизомерные формы оказывают положительное влияние на секрецию апоВ и обладают ингибирующей активностью в отношении МТР, а также сопутствующей гиполипидемической активностью. Следовательно, соединения по настоящему изобретению формулы (I) могут быть использованы в качестве лекарственного средства, особенно в способе лечения пациентов, страдающих гиперлипидемией, ожирением, атеросклерозом или диабетом по типу II. Соответственно, соединения по настоящему изобретению могут быть использованы при получении лекарственного средства для лечения расстройств, вызванных избытком липопротеинов очень низкой плотности (ЛОНП) или липопротеинов низкой плотности (ЛНП), и особенно расстройств, вызванных холестерином, связанным с указанными ЛОНП и ЛНП. В частности, соединения по настоящему изобретению могут быть использованы при получении лекарственного средства для лечения гиперлипидемии, ожирения, атеросклероза или диабета по типу II.
Оказалось, что основной механизм действия соединений формулы (I) включает ингибирование активности МТР (микросомального белка переноса триглицеридов) в гепатоцитах и эпителиальных клетках кишечника, приводя, соответственно, к снижению уровня ЛОНП и выработке хиламикронов. Это представляет собой новый и инновационный подход к лечению гиперлипидемии, и полагают, что он приводит к снижению уровня ЛНП-холестерина и триглицеридов посредством снижения выработки ЛОНП в печени и хиломикронов в кишечнике.
Большое количество наследственных и приобретенных заболеваний может привести к развитию гиперлипидемии. Их можно подразделить на первичные и вторичные гиперлипидемические состояния. Наиболее частыми причинами вторичных гиперлипидемии являются сахарный диабет, злоупотребление алкоголем, лекарственными препаратами, гипотиреоз, хроническая почечная недостаточность, нефротический синдром, холестаз и булимия. Первичными гиперлипидемиями, как правило, являются гиперхолестеринемия, семейная комбинированная гиперлипидемия, семейная гиперхолестеринемия, остаточная гиперлипидемия, синдром хиломикронемии, семейная гипертриглицеридемия.
Соединения по настоящему изобретению также можно использовать для профилактики или лечения пациентов, страдающих ожирением или атеросклерозом, в частности коронарным атеросклерозом, и более того, в целом заболеваний, которые связаны с атеросклерозом, таких как ишемическая болезнь сердца, заболевание периферических сосудов, церебрально-васкулярное заболевание. Соединения по настоящему изобретению могут приводить к регрессии атеросклероза и подавлять клинические последствия атеросклероза, в частности заболеваемость и смертность.
С точки зрения полезности соединений формулы (I) следует, что настоящее изобретение также относится к способу лечения теплокровных животных, включая человека, (обычно называемого здесь пациентом) страдающих расстройствами, вызванными избыточным количеством липопротеинов очень низкой плотности (ЛОНП) или липопротеинов низкой плотности (ЛНП), и, в частности, расстройствами, вызванными холестерином, связанным с указанными ЛОНП и ЛНП. Следовательно, предложен способ лечения пациентов, страдающих, например, такими заболеваниями, как, например, гиперлипидемия, ожирение, атеросклероз или диабет по типу II.
Апо В-48, синтезируемый в кишечнике, необходим для сборки хиломикронов и поэтому играет важную роль во всасывании пищевых жиров в кишечнике. Настоящее изобретение относится к соединениям, которые действуют в качестве селективных ингибиторов МТР на уровне стенки кишечника.
Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтическим композицям, содержащим по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель и терапевтически эффективное количество соединения формулы (I).
Для получения фармацевтических композиций по настоящему изобретению эффективное количество конкретного соединения в виде соли присоединения оснований или кислот в качестве активного ингредиента объединяют в однородной смеси по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, который может быть разного вида в зависимости от вида препарата, предназначенного для введения. Эти фармацевтические композиции при желании имеют вид лекарственной формы для однократного приема, подходящей предпочтительно для перорального введения, ректального введения, чрез
- 9 016311 кожного введения или парентеральной инъекции.
Например, при получении композиций в виде лекарственного препарата для перорального введения можно использовать, в случае жидких лекарственных форм для перорального введения, таких как суспензии, сиропы, эликсиры и растворы, любые обычные жидкие фармацевтические носители, такие как, например, вода, гликоли, масла, спирты и тому подобное; или, в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток, твердые фармацевтические носители, такие как крахмалы, сахара, каолин, смазывающие вещества, связующие вещества, разрыхляющие вещества и тому подобное. Ввиду простоты введения, таблетки и капсулы являются наиболее предпочтительными стандартными пероральными лекарственными средствами, при этом обычно используются твердые фармацевтические носители. Для композиций для парентерального введения фармацевтический носитель будет в основном содержать стерильную воду, хотя могут быть включены другие ингредиенты для улучшения растворимости активного вещества. Например, инъецируемые растворы можно получить с использованием фармацевтического носителя, содержащего физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь их обоих. Также могут быть получены инъецируемые суспензии с использованием подходящих жидких носителей, суспендирующих веществ и тому подобное. В композициях, подходящих для введения через кожу, фармацевтический носитель может необязательно содержать средство для усиления проникновения и/или подходящее смачивающее вещество, необязательно, в смеси с небольшими количествами подходящих добавок, которые не оказывают существенного раздражающего действия на кожу. Указанные добавки можно выбрать для облегчения нанесения активного ингредиент на кожу и/или для содействия в получении желаемых композиций. Эти композиции для местного нанесения можно вводить различными способами, например, в виде трансдермального пластыря, наклейки или мази. Аддитивные соли соединений формулы (I), вследствие их повышенной водорастворимости по сравнению с формой соответствующего основания, очевидно, являются более подходящими при получении водных композиций.
Для простоты введения и единообразия дозирования особенно предпочтительно изготавливать фармацевтические композиции по изобретению в виде стандартных лекарственных форм для однократного приема. Используемый в настоящем документе термин стандартная лекарственная форма относится к физически дискретным единицам, пригодным в качестве однократных доз, где каждая единица содержит заранее определенное количество активного ингредиента, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта, в смеси с необходимым фармацевтическим носителем. Примерами таких стандартных лекарственных форм являются таблетки (включая таблетки с риской или покрытые оболочкой таблетки), капсулы, пилюли, пакеты с порошками, облатки, инъецируемые растворы или суспензии, препарат объемом чайной ложки, препарат в объеме столовой ложки и тому подобное, и их объединенные множественные дозы.
Для перорального введения фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть представлены в виде твердых дозированных форм, например, в виде таблеток (как в форме для проглатывания, так и в форме для жевания), капсул или мягких капсул, полученных обычными способами, с фармацевтически приемлемыми наполнителями и носителями, такими как связывающие вещества (например, предварительно желатинизированный кукурузный крахмал, поливинилпирролидон, гидроксипропилметилцеллюлоза и тому подобное), наполнители (например, лактоза, микрокристаллическая целлюлоза, фосфат кальция и тому подобное), смазывающие вещества (например, стеарат магния, тальк, диоксид кремния и тому подобное), разрыхляющие вещества (например, картофельный крахмал, натрий гликолят крахмал и тому подобное), увлажняющие вещества (например, лаурилсульфат натрия) и тому подобное. Также такие таблетки могут быть покрыты оболочками способами, хорошо известными в данной области.
Жидкие препараты для перорального введения могут иметь вид, например, растворов, сиропов или суспензий, или их можно изготовить в виде сухого продукта для смешивания с водой и/или другим подходящим жидким носителем перед применением. Такие жидкие препараты можно получить обычными способами, необязательно, с другими фармацевтически приемлемыми добавками, такими как суспендирующие вещества (например, сироп сорбита, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза или гидрогенизированные пищевые жиры), эмульгирующие вещества (например, лецитин или аравийская камедь), неводные носители (например, миндальное масло, жирные эфиры или этиловый спирт), подсластители, вещества, придающие вкус, вещества, маскирующие вкус и запах, и консерванты (например, метил- или пропил-п-гидроксибензоаты или сорбиновая кислота).
Фармацевтически приемлемые подсластители, используемые в фармацевтических композициях по изобретению, содержат, предпочтительно по меньшей мере один интенсивный подсластитель, такой как аспартам, ацесульфам калия, цикломат натрия, элитам, подсластитель дигидрохалькон, монеллин, стевиозид, сукралозу (4,1',6'-трихлор-4,1',6'-тридеоксигалактосахароза) или предпочтительно сахарин, сахарин натрия или кальция, и, необязательно, по меньшей мере один объемный подсластитель, такой как сорбит, маннит, фруктоза, сахароза, мальтоза, солод, глюкоза, гидрогенизированный глюкозный сироп, ксилит, карамель или мед. Обычно интенсивные подсластители применяют в низких концентрациях. Например, в случае сахарина натрия указанная концентрация может находится в пределах от около 0,04% до 0,1% (мас./об.) от конечной композиции. Объемный подсластитель можно эффективно использовать в
- 10 016311 более высоких концентрациях от около 10 до около 35%, предпочтительно от около 10 до 15% (мас./об.).
Фармацевтически приемлемые вкусовые вещества, которые могут маскировать горький вкус ингредиентов в композициях с низкими дозами, предпочтительно, представляют собой фруктовые вкусовые вещества, например, со вкусом и запахом вишни, малины, черной смородины или клубники. Очень хорошие результаты может давать сочетание двух вкусовых веществ. В композициях с высокими дозами могут быть необходимыми более сильные фармацевтически приемлемые вкусовые вещества, такие как Сагате1 СРосо1а!е, Мт! Соо1, Рап!а§у и тому подобное. Каждое вкусовое вещество может быть в конечной композиции в концентрации в пределах от около 0,05 до 1% (мас./об.). Преимущественно, применяют сочетания указанных сильных вкусовых веществ. Предпочтительно, используют вкусовое вещество, которое не претерпевает какого-либо изменения или потери вкуса и/или цвета в условиях композиции.
Соединения формулы (I) могут входить в состав препарата для парентерального введения путем инъекции, обычно внутривенной, внутримышечной или подкожной инъекции, например, болюс инъекции или длительной внутривенной инфузией. Композиции для инъекции могут быть в виде стандартной лекарственной формы, например, в виде ампул или контейнеров для дробных доз, включающих добавленный консервант. Они могут быть в виде таких форм, как суспензии, растворы или эмульсии в масляных или водных носителях, и могут содержать агенты, используемые при изготовлении препаратов, такие как изотонирующие, суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие вещества. Альтернативно, активный ингредиент может быть в виде порошка для смешивания с подходящим носителем перед использованием, например, для смешивания со стерильной непирогенной водой.
Соединения формулы (I) могут входить в состав препарата в виде композиции для ректального применения в виде суппозиториев или удерживающих клизм, например, содержащие обычные основы для суппозиториев, такие как масло какао и/или другие глицериды.
Соединения формулы (I) можно использовать в сочетании с другими фармацевтическими средствами, в частности, фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут дополнительно содержать по меньшей мере одно дополнительное средство для снижения уровней липидов, обеспечивая таким образом так называемую комбинированную терапию для снижения уровня липидов. Указанное дополнительное средство для снижения уровня липидов может представлять собой, например, известный препарат, обычно применяемый для контроля гиперлипидемии, такой как, например, полимер для связывания желчных кислот, производное фиброевой кислоты или никотиновой кислоты, как уже упоминалось выше в разделе уровень техники. Подходящие дополнительные средства для снижения уровня липидов также включают другие ингибиторы биосинтеза холестерина и ингибиторы всасывания холестерина, в частности ингибиторы НМС-СоА редуктазы и ингибиторы НМС-СоА-синтазы, ингибиторы гена экспрессии НМС-СоА-редуктазы, ингибиторы СЕТР, ингибиторы АСАТ, ингибиторы скваленсинтетазы, антагонисты СВ-1, ингибиторы всасывания холестерина, такие как эзетимиб и тому подобное.
Любой ингибитор НМС-СоА редуктазы можно использовать в качестве второго соединения в аспекте комбинированной терапии по настоящему изобретению. Используемый в настоящем документе термин ингибитор НМС-СоА редуктазы, если не указано иное, относится к соединению, которое ингибирует биотрансформацию гидроксиметилглутарил-кофермента А в мевалоновую кислоту, катализируемую ферментом НМС-СоА редуктазой. Такими ингибиторами НМС-СоА редуктазы являются, например, ловастатин, симвастатин, флувастатин, правастатин, ривастатин и аторвастатин.
Любой ингибитор НМС-СоА-синтазы можно использовать в качестве второго соединения в аспекте комбинированной терапии настоящего изобретения. Используемый в настоящем документе термин ингибитор НМС-СоА-синтазы, если не указано иное, относится к соединению, которое ингибирует биосинтез гидроксиметилглутарил-кофермента А из ацетил-кофермента А и ацетоацетил-кофермента А, катализируемый ферментом НМС-СоА-синтазой.
Любой ингибитор гена экспрессии НМС-СоА-редуктазы можно использовать в качестве второго соединения в аспекте комбинированной терапии настоящего изобретения. Эти средства могут быть ингибиторами транскрипции НМС-СоА-редуктазы, которые блокируют транскрипцию ДНК, или ингибиторами трансляции, которые предупреждают трансляцию мРНК, кодирующей НМС-СоА-редуктазы, в белок. Такие ингибиторы могут оказывать влияние на транскрипцию или трансляцию непосредственно или могут биотрансформироваться в соединения, обладающие вышеуказанными свойствами, под действием одного или нескольких ферментов в каскаде биосинтеза холестерина, или могут привести к накоплению метаболита, обладающего вышеуказанными активностями.
Любой ингибитор СЕТР можно использовать в качестве второго соединения в аспекте комбинированной терапии настоящего изобретения. Используемый в настоящем документе термин ингибитор СЕТР, если не указано иное, относится к соединению, которое ингибирует транспортный белок холестеринового эфира (СЕТР), опосредуемого транспорт различных холестериновых эфиров и триглицеридов от ЛВП до ЛНП и ЛОНП.
Любой ингибитор АСАТ можно использовать в качестве второго соединения в аспекте комбинированной терапии настоящего изобретения. Используемый в настоящем документе термин ингибитор АСАТ, если не указано иное, относится к соединению, которое ингибирует внутриклеточную этерификацию холестерина пищи, осуществляемую под действием фермента ацил СоА:холестерин
- 11 016311 ацилтрансферазы.
Любой ингибитор скваленсинтетазы можно использовать в качестве второго соединения в аспекте комбинированной терапии настоящего изобретения. Используемый в настоящем документе термин термин ингибитор скваленсинтетазы, если не указано иное, относится к соединению, которое ингибирует конденсацию двух молекул фарнезилпирофосфата с образованием сквалена, катализируемую ферментом скваленсинтетазой.
Специалист в области лечения гиперлипидемии легко сможет определит терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) на основе результатов тестов, представленных ниже. Обычно предполагается, что терапевтически эффективная доза будет находиться в пределах от около 0,001 мг/кг до около 50 мг/кг массы тела, более предпочтительно от около 0,01 мг/кг до около 5 мг/кг массы тела пациента, подвергаемого лечению. Может быть удобным вводить терапевтически эффективную дозу в виде двух или более субдоз с соответствующими интервалами в течение суток. Указанные субдозы могут быть изготовлены в виде лекарственных форм для однократного приема, например, каждая содержащая от около 0,1 мг до около 350 мг, более предпочтительно от около 1 до около 200 мг, активного ингредиента на одну лекарственную форму для однократного приема.
Точная дозировка и частота введения зависят от конкретного используемого соединения формулы (I), конкретного состояния, подвергаемого лечению, тяжести подвергаемого лечению состояния, возраста, массы и общего физического состояния конкретного пациента, а также от вида другого медикаментозного лечения (включая вышеуказанные дополнительные средства для снижения уровня липидов), которому может подвергаться пациент, как это хорошо известно специалисту в данной области. Кроме того, указанное эффективное суточное количество может быть снижено или повышено в зависимости от ответной реакции пациента, подвергаемого лечению, и/или в зависимости от оценки врача, назначающего соединения по настоящему изобретению. Таким образом, пределы эффективных суточных количеств, указанных выше, являются только рекомендациями.
Экспериментальная часть.
В способах, описанных далее, использованы следующие аббревиатуры: ИСМ обозначает дихлорметан; ΌΜΑ обозначает Ν,Ν-диметилацетамид, ДМФ обозначает Ν,Ν-диметилформамид; ТФУ обозначает трифторуксусную кислоту, ТГФ обозначает тетрагидрофуран; ЕЮН обозначает этанол; МеОН обозначает метанол и Ό!ΡΕ обозначает диизопропиловый эфир.
Ν-циклогексилкарбодиимид Ν-метил полистирольная НЬ смола (1,90 ммоль/г) представляет собой смолу ΝοναΝοοΙκιη 01-64-021; карбонатно основная [полистирилметил]-триметил аммоний бикарбонатная смола на полимерной основе (5,8 ммоль/г) представляет собой смолу ΝοναΝοοΙκιη 01-64-041; полистирол-карбодиимидная смола (1,90 ммоль/г) представляет собой смолу ΝοναΝοοΙκιη 01-64-024; полистирол-№метил морфолиновая НЬ (3,80 ммоль/г) смола представляет собой смолу ΝοναΝοοΙκιη 01-640211; полистиролбикарбонатная (5,8 ммоль/г) смола представляет собой смолу №уаЬюс11еш-01-0640419. Смолы ШуаЬюейет могут быть получены от фирмы Са1Ь^οсйет-NονаЬ^οсйет АС, \Уе1бептаи\уед 4, СН-4448 ЕаиГеИтдеи, Швейцария.
Р8-карбодиимидная смола (полистирольная смола, связанная с Ν-циклогексилкарбодиимидом) и Р8-изоцианатная смола (1% поперечносвязанный полистирол-со-дивинилбензольная смола с бензилизоцианатными функциональными группами) получены от фирмы ΑΓμοηαιιΙ (Вю1:аде), Νονν Βοаб, Неηдοеб, М1б С1атο^дап, Великобритания.
Ех1ге1и!™ является продуктом фирмы Мегск КдаА, Дармштадт, Германия, и представляет собой короткую колонку, содержащую диатомовую землю. СЫта1се1 ΟΌ, О1 и ΑΌ представляют собой материалы колонки с хиральной неподвижной фазой от фирмы Иа1се1 С11ет1са1 Мийпек, Ыб., Япония. Колонка Ртс^ют® Оуиатк Ах1а1 ί,’οιηρίΌδδίοη получена от фирмы Шмакер 8.А.8., Вοи1еνа^б бе 1а Μο^ΙΕ, В.Р. 50 Е- 54340 Рοтреу, Франция.
Абсолютную стереохимическую конфигурацию некоторых соединений определяли, используя колебательно-вращательный дихроизм (ν^Ь^аί^οηа1 с1тси1аг бкИгокт (νί,Ό)). Описание использования νί,Ό при определении абсолютной конфигурации может быть найдено в работе Иуа1кт А.В. е1. а1, СЫта1йу, 14:215-219 (2002).
А. Синтез промежуточных соединений.
Пример А.1. Получение
НО-1 промежуточного соединения (1).
Метиловый эфир 2-гидрокси-2-фенилпропионовой кислоты (0,1 моль) добавляли к раствору серной кислоты (300 мл) в воде (250 мл) и реакционную смесь перемешивали при температуре 100°С в течение 20 ч. Осадок отделяли фильтрованием и растворяли в ИСМ (600 мл) и промывали водой и насыщенным солевым раствором. Органический слой отделяли, сушили, фильтровали и растворитель упаривали до
- 12 016311 объема в 100 мл. Осадок отделяли фильтрованием и сушили, получая 9 г промежуточного соединения (1).
Пример А.2. Получение
промежуточного соединения (2) (транс).
Смесь промежуточного соединения (1) (1,327 моль) в сухом этаноле (2360 мл) перемешивали и добавляли концентрированную серную кислоту (4 мл). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 22 ч в атмосфере азота и затем реакционную смесь оставляли охлаждаться в течение ночи до комнатной температуры. Образовавшийся осадок отделяли фильтрованием, промывали сухим этанолом и сушили, получая 120 г промежуточного соединения (2) (т.пл. 186-187°С).
Этанольные слои объединяли и упаривали, и полученный остаток растворяли в ЭСМ (1450 мл), промывали водным раствором NаНСО3 (дважды по 500 мл), сушили и растворитель упаривали. Остаток перемешивали в ΌΓΡΕ (680 мл) при температуре 50-55°С и остаток ЭСМ отгоняли, а концентрат оставляли стоять в течение более 2 ч при комнатной температуре. Выпавшие твердые продукты удаляли фильтрованием, промывали с помощью ΌΓΡΕ (120 мл) и пентана и затем сушили при температуре 40°С, получая еще дополнительно 103,2 г промежуточного соединения (2) (т.пл. 187-188°С).
Получение
промежуточного соединения (3) (цис).
Указанные выше слои ΌΓΡΕ/пентан упаривали и остаток растворяли в сухом ацетонитриле (200 мл), затем растворитель вновь упаривали, получая 166,3 г промежуточного соединения (3) (т.пл. 75°С).
Пример А.3. Получение
промежуточного соединения (4).
Промежуточное соединение (2) (0,03 моль) перемешивали в хлороформе (50 мл). Добавляли тионилхлорид (0,06 моль) и реакционную смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч до прекращения выделения газа. Реакционную смесь концентрировали путем упаривания растворителя. Добавляли хлороформ (200 мл) и растворитель вновь упаривали, получая остаток, который медленно добавляли в сухой этанол (100 мл), охлаждаемый на водно-ледяной бане до температуры ± 5°С. Водно-ледяную баню отставляли и реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры. Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре. Растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (4) (т.пл. 78-80°С).
Промежуточное соединение (5) получали аналогичным образом, но исходя из промежуточного соединения (3).
Получение
промежуточного соединения (5).
Пример А.4. Получение
промежуточного соединения (6).
Смесь промежуточного соединения (4) (0,05 67 моль) и п-толуолсульфоновой кислоты (1 г) перемешивали и кипятили с обратным холодильником в смеси муравьиной кислоты (500 мл) и концентрированной НС1 (125 мл) в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали путем упаривания растворителя, остаток растворяли в ЭСМ, промывали водным раствором №1НСО3 и сушили. Растворитель упарива
- 13 016311 ли и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: этилацетат/гексан 1/9), получая промежуточное соединение (6) (т.пл. 115-118°С).
Промежуточное соединение (7) (т.пл. 133-135°С) получали аналогичным образом, но исходя из промежуточного соединения (5).
Получение
промежуточного соединения (7).
Пример А.5.
а) Получение
промежуточного соединения (8).
Промежуточное соединение (1) (0,1 моль) растворяли в этаноле (500 мл), добавляли Н28О4 (5 мл) и реакционную смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение ночи, затем охлаждали, и этанол упаривали. Остаток растворяли в БСМ, промывали водой (2x200 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл). Органический слой сушили, растворитель концентрировали и остаток растирали в ΌΙΡΕ, фильтровали и сушили, получая 18 г промежуточного соединения (8).
Ь) Получение
промежуточного соединения (9).
К раствору промежуточного соединения (8) (0,03409 моль) в трихлорметане (200 мл) добавляли тионилхлорид (0,255 моль). Смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч. Растворитель упаривали. Остаток растворяли в БСМ (125 мл) в токе азота. Смесь охлаждали до температуры -10°С. Добавляли по каплям раствор бензоламина (0,230 моль) в БСМ (75 мл) при температуре -10°С в токе азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Осадок отделяли фильтрованием, промывали 1 М НС1 (до рН <7), промывали водой (до рН 7), промывали насыщенным раствором №С'1. сушили, фильтровали и растворитель упаривали. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: (гексан/этилацетат 2/1)/СН2С12). Чистые фракции собирали и растворитель упаривали, получая 10,244 г промежуточного соединения (9).
с) Получение
промежуточного соединения (10).
Раствор промежуточного соединения (9) (0,01985 моль) в сухом ТГФ (400 мл) охлаждали до температуры 0°С в токе азота. Добавляли по каплям Ь1ВН4 (2М в ТГФ) (0,1 моль) при температуре 0°С в токе азота. Смесь перемешивали в течение 15 мин. Добавляли этанол (100 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли 1М раствор НС1 (200 мл). Смесь экстрагировали водой (дэтилацетатом (500 мл). Органический слой отделяли, промывали водой до рН 7), промывали насыщенным раствором ЫаС1, сушили, фильтровали и растворитель упаривали. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: гексан/этилацетат 1/2). Чистые фракции собирали и растворитель упаривали. Оставшуюся фракцию (6,62 г, 90%) сушили в вакууме при температуре 60°С в течение выходных, получая промежуточное соединение (10).
б) Получение
промежуточного соединения (11).
4-Метилбензолсульфонил хлорид (0,024 моль) добавляли по частям к раствору промежуточного со
- 14 016311 единения (10) (0,00782 моль) в пиперидине (75 мл) в токе азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель упаривали. Остаток растворяли в ЭСМ (300 мл) и промывали водой и насыщенным солевым раствором. Органический слой отделяли, промывали НС1 (0,1М), промывали водой (до рН 7), промывали насыщенным раствором №С1, сушили и растворитель упаривали. Остаток растворяли в толуоле. Растворитель упаривали дважды и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: гексан/этилацетат 2/1). Чистые фракции собирали и растворитель упаривали, получая 3,57 г промежуточного соединения (11).
Пример А.6.
а) Получение
К раствору промежуточного соединения (8) (0,0031 моль) в трихлорметане (20 мл) добавляли тионилхлорид (0,01551 моль). Смесь перемешивали при температуре 80°С в течение 4 ч. Растворитель упаривали. Остаток растворяли в ЭСМ (20 мл). Смесь охлаждали до температуры -10°С. Добавляли по каплям раствор бензоламина (0,05487 моль) в ЭСМ (20 мл) при температуре -10°С в токе азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 ч. Осадок отделяли фильтрованием. Фильтрат промывали три раза водой (20 мл), промывали насыщенным раствором №С1, сушили, фильтровали и растворитель упаривали. Остаток растворяли в 1М НС1 (100 мл). Смесь экстрагировали ЭСМ. промывали несколько раз водой и промывали насыщенным раствором №С1. Органический слой сушили, фильтровали и растворитель упаривали. Полученную фракцию обрабатывали ЭФЕ. Осадок отделяли фильтрованием и сушили, получая 0,6355 г промежуточного соединения (12).
Ь) Получение
промежуточного соединения (13).
Смесь промежуточного соединения (12) (0,00439 моль) в 36%-ном растворе НС1 (50 мл) перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение ночи. Осадок отделяли фильтрованием. Остаток перемешивали в ЭСМ (несколько мл) в течение 1 ч. Добавляли гексан и смесь перемешивали. Осадок отделяли фильтрованием и сушили, получая 1,2 г промежуточного соединения (13).
Пример А.7.
Получение
промежуточного соединения (14).
Смесь промежуточного соединения (9) (0,00469 моль) в 36%-ном растворе НС1 (40 мл) перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение ночи. Растворитель упаривали. Остаток сушили, а затем перемешивали в 1М №1ОН. Смесь экстрагировали дважды ЭСМ (2x20 мл) и слои разделяли. Водный слой подкисляли с помощью раствора НС1 и экстрагировали ЭСМ. Объединенный органический слой промывали насыщенным раствором №С1, сушили, фильтровали и растворитель упаривали. Остаток сушили в вакууме, получая 1,07 г промежуточного соединения (14).
Пример А.8.
а) Получение
промежуточного соединения (15).
К раствору промежуточного соединения (8) (0,00852 моль) в трихлорметане (50 мл) добавляли тио нилхлорид (0,0426 моль). Смесь перемешивали при температуре 80°С в течение 4 ч. Растворитель упари вали. Остаток растворяли в сухом ОСМ (60 мл). Смесь охлаждали до температуры -10°С. Добавляли по
- 15 016311 каплям смесь 1-пропанамина (0,1338 моль) в сухом ΌΟΜ (50 мл) при температуре -10°С в токе азота. Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура поднималась до комнатной температуры, а затем промывали водой, 0,5М НС1 (20 мл) и водой. Органический слой отделяли, промывали насыщенным раствором ЫаС1, сушили, фильтровали и растворитель упаривали. Полученную таким образом фракцию очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: ΌΟΜ 100%). Чистые фракции собирали и растворитель упаривали. Остаток суспендировали в ΌΙΡΕ. Осадок отделяли фильтрованием и сушили, получая 2,694 г промежуточного соединения (15).
Ь) Получение
промежуточного соединения (16).
Смесь промежуточного соединения (15) (0,00548 моль) в растворе НС1 (36%, 50 мл) перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. Добавляли еще раствор НС1 (36%, 20 мл). Смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение ночи. Осадок отделяли фильтрованием и сушили, получая 0,516 г промежуточного соединения (16).
Пример А.9.
а) Получение
промежуточного соединения (17).
Реакция в атмосфере азота. Промежуточное соединение (15) (0,00478 моль) растворяли в сухом ТГФ (150 мл) и охлаждали до 0°С. При температуре 0°С добавляли Ь1ВН4 (2Μ в ТГФ) (0,028 моль). Смесь перемешивали в течение 15 мин. Добавляли этанол (20 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Добавляли 1М НС1 (100 мл). Добавляли этилацетат (125 мл) и слои разделяли. Органический слой промывали водой, один раз насыщенным солевым раствором, сушили, фильтровали и растворитель упаривали, получая 1,5 г промежуточного соединения (17).
Ь) Получение
4-Метилбензолсульфонил хлорид (0,0418 моль) добавляли по частям к раствору промежуточного соединения (17) (0,00836 моль) в пиперидине (75 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Растворитель упаривали. Остаток растворяли в Ό0Μ (250 мл). Органический слой отделяли, промывали НС1 (0,1М), промывали водой (до рН=7), промывали насыщенным раствором ЫаС1, сушили, и растворитель упаривали. Остаток растворяли в толуоле (2x20 мл). Растворитель упаривали, и оставшуюся фракцию очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент:гексан/этилацетат 2:1). Чистые фракции собирали и растворитель упаривали. Полученную фракцию суспендировали в ΌΙΡΕ. Осадок отделяли фильтрованием и сушили, получая 3,305 г промежуточного соединения (18).
Пример А.10.
а) Получение
промежуточного соединения (19) транс и
промежуточного соединения (20) цис и
- 16 016311
промежуточного соединения (21) смесь цис/транс.
Раствор промежуточного соединения (8) (0,14 моль) в ЭСМ (600 мл) и хлороформе (600 мл) перемешивали при температуре 20°С в атмосфере азота, затем в течение 5 мин добавляли тионилхлорид (79 мл), и реакционную смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 4 мин. Смесь охлаждали до температуры 20°С и растворитель упаривали. Остаток растворяли в ТГФ (1000 мл) и раствор охлаждали до температуры -5°С в атмосфере азота, затем по каплям добавляли раствор этанамина (1,4 моль, 70%-ный водный раствор) в ТГФ (100 мл), поддерживая температуру ниже 0°С. Смесь затем нагревали до температуры 20°С и перемешивали в течение 2 ч. Добавляли эфир (1000 мл) и органический слой отделяли, затем промывали водой (3 раза по 400 мл) и насыщенным солевым раствором (400 мл). Смесь сушили и растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (21), которое может быть выделено с помощью хроматографии в виде транс-изомера промежуточного соединения (19) и цисизомера промежуточного соединения (20).
Ь) Получение
промежуточного соединения (23) транс.
Суспензию промежуточного соединения (21) (0,04 3 моль) в 37%-ном растворе концентрированной НС1 (200 мл) перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение ночи, затем отгоняли раствор НС1 (± 100 мл) и остаток разбавляли водой (400 мл). Полученную смесь экстрагировали ЭСМ (2 раза по 200 мл) и объединенные экстракты сушили. Растворитель упаривали и твердый остаток очищали с помощью флеш колоночной хроматографии (элюент: сначала эфир/гексан 1/1, затем эфир/гексан 1/0). Фракции продукта собирали с получением смеси цис/транс-изомеров, которую очищали с помощью флеш колоночной хроматографии (элюент 1: эфир; элюент 2: этилацетат/петролейный эфир 80/20; элюент 3: этилацетат). Желаемые фракции продукта собирали и растворитель упаривали. Остаток промывали эфиром (2 раза по 100 мл), получая твердый остаток (I) и эфирные промывки (II).
Остаток (I) (9,8 г) кристаллизовали из этилацетата и образовавшиеся кристаллы собирали, получая остаток Да) (4,6 г 'ТРАНС'-изомер, т.пл.: 182-187°С).
Эфирные промывки (II) очищали с помощью флеш колоночной хроматографии (элюент: ЭСМ/этилацетат 70/30) и затем очищали с помощью флеш колоночной хроматографии (элюент: ЭСМ/этилацетат 80/20). Две фракции продукта собирали и растворитель упаривали. Обе оставшиеся фракции кристаллизовали из этилацетата и собирали. Одну полученную фракцию, 4,9 г остатка (Па), объединяли с остатком Да), получая 9,5 г промежуточного соединения (23) (т.пл.: 182-187°С). Другую полученную фракцию, 2: 7 г остатка (ПЬ) собирали, получая промежуточное соединение (22) (т.пл.: 179
182°С).
Пример А.11. а) Получение
промежуточного соединения (24).
Раствор промежуточного соединения (8) (0,15 моль) в 0,15 М растворе NаΗСОз в воде (200 мл) перемешивали и добавляли трикаприлилметиламмоний хлорид (АНс|иа( 336®) (0,15 моль) и 3-бром-1пропен (0,75 моль) в ЭСМ (200 мл), затем реакционную смесь перемешивали в течение 4 дней при температуре 20°С и органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали ЭСМ (300 мл) и объединенные органические слои сушили. Растворитель упаривали и остаток перемешивали в гексане (500 мл), затем охлаждали до 0°С. Образовавшийся осадок отделяли фильтрованием, промывали гексаном и су- 17 016311 шили в течение ночи при температуре 60°С, получая 46 г промежуточного соединения (24).
Ь) Получение
промежуточного соединения (25) транс и
промежуточного соединения (26) смесь цис/транс (25:75).
Раствор 28%-ной концентрированной НС1 (100 мл) и 4-метилбензолсульфоновой кислоты (0,7 г) добавляли к раствору промежуточного соединения (24) (0,13 моль) в муравьиной кислоте (400 мл), затем реакционную смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 6 ч. Растворитель упаривали и остаток распределяли между ЭСМ (300 мл) и насыщенным водным раствором ЫаНСО3 (200 мл). ЭСМ-слой отделяли, сушили и растворитель упаривали. Остаток растирали в эфире с получением твердого продукта (I) и маточные слои концентрировали, затем кристаллизовали из смеси этилацетат/гексан с получением твердого продукта (II). Твердые продукты (I) и (II) объединяли и очищали с помощью флеш колоночной хроматографии (элюент: ОСМ/СН3ОН 95/5). Фракции продукта собирали, растворитель упаривали, и остаток растирали в гексане. Вновь выделенный остаток (9,5 г) затем растирали в эфире и отделяли фильтрованием. Одну фракцию твердого продукта собирали, получая 7 г промежуточного соединения (25) ('ТРАНС'-изомер, т.пл.: 138-139°С), и собранные маточные слои концентрировали, получая 2 г промежуточного соединения (26) ('ЦИС/ТРАНС'-смесь 25/75).
Пример А.12. а) Получение
промежуточного соединения (27) цис.
Раствор промежуточного соединения (3) (0,0031 моль) и №1НСО3 (0,0031 моль) в воде (10 мл) и смесь трикаприлилметиламмоний хлорида (АНс|иа( 336®) (0,0031 моль) и 3-бром-1-пропена (0,0031 моль) в ЭСМ (10 мл) энергично перемешивали в течение 3 дней. Реакционную смесь экстрагировали ЭСМ. сушили, концентрировали и очищали с помощью флеш колоночной хроматографии (элюент: СН3ОН/СНС13 10/90). Чистые фракции продукта собирали и растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (27).
Ь) Получение
промежуточного соединения (28) цис.
Смесь промежуточного соединения (27) (0,0165 моль) в муравьиной кислоте (100 мл) и раствор концентрированной НС1 (50 мл) с метансульфоновой кислотой (каталитическое количество) перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение ночи, затем реакционную смесь охлаждали и растворитель упаривали. Остаток растворяли в ЭСМ, промывали насыщенным раствором ЫаНСО3, сушили и растворитель упаривали, получая 1,81 г промежуточного соединения (28).
Пример А.13.
а) Получение
промежуточного соединения (29) транс.
Раствор промежуточного соединения (19) (0,05 68 моль) в ТГФ (800 мл) охлаждали до температуры 0°С в атмосфере азота, затем одной порцией добавляли бромид лития (0,17 моль) и боргидрид натрия (0,17 моль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при температуре 0°С. Добавляли этанол (300 мл) и смесь перемешивали в течение ночи при температуре 20°С. Добавляли НС1 (1н., 100 мл) и ор
- 18 016311 ганический слой отделяли, промывали насыщенным солевым раствором и сушили. Растворитель упаривали и полученный остаток растирали в эфире. Твердый остаток затем отделяли фильтрованием и кристаллизовали из эфира, получая 16,3 г промежуточного соединения (29) (т.пл. 122-129°С).
Ь) Получение
промежуточного соединения (30) транс.
Раствор промежуточного соединения (29) (0,0038 моль) и тозилхлорида (0,019 моль) в пиперидине (35 мл) перемешивали при комнатной температуре (16°С) в течение 20 ч, затем реакционную смесь выливали в воду со льдом (100 мл) и смесь перемешивали в течение 1 ч. Водный раствор экстрагировали ЭСМ (3 раза по 50 мл), затем органические слои объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили, и растворитель упаривали, получая 0,9 г промежуточного соединения (30) (т.пл. 130132°С).
Пример А.14.
а) Получение
промежуточного соединения (31) транс.
Тионилхлорид (15 мл) добавляли к суспензии промежуточного соединения (2) (0,05 моль) в ЭСМ. Реакционную смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение одного часа. Растворитель упаривали. Добавляли ЭСМ (100 мл). Растворитель упаривали. Остаток растворяли в ЭСМ. Добавляли концентрированный ΝΗ4ΟΗ/Η2Ο (100 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Органический слой отделяли, сушили, фильтровали и растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (31).
Ь) Получение
промежуточного соединения (32) транс.
Смесь промежуточного соединения (31) (0,05 моль) в концентрированной НС1 (60 мл) и диоксане (60 мл) перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (200 мл) и перемешивание продолжали в течение одного часа. Осадок отделяли фильтрованием, промывали водой и 2-пропанолом, затем сушили, получая 13,1 г промежуточного соединения (32).
Пример А.15.
а) Получение
промежуточного соединения (33) транс.
Реакция в атмосфере азота. Смесь 4-(трет-бутилоксикарбониламино)пиперидина (0,0345 моль), промежуточного соединения (25) (0,0345 моль), 1-гидрокси-1Н-бензотриазола (ΗΟΒΤ) (0,0517 моль) и Ν' -(этилкарбонилимидоил)-^№диметил-1,3-пропандиамина (0,0517 моль) в ЭСМ (1000 мл) перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре. Растворитель упаривали, и к остатку добавляли этилацетат (400 мл). Органический раствор промывали водой, 1н. ΗΟ (300 мл), водным раствором Ν;·ιΗί.Ό3, (300 мл), насыщенным солевым раствором (300 мл), затем сушили, фильтровали и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: гексан/этилацетат 2/1). Фракции продукта собирали и растворитель упаривали, получая 5,16 г промежуточного соединения (33).
Ь) Получение
промежуточного соединения (34) транс.
- 19 016311
Раствор промежуточного соединения (33) (4,5 г, 0,0087 моль) и трифенилфосфина (2,28 г, 0,0087 моль) в сухом ацетонитриле (60 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота. Добавляли пирролидин (0,75 мл) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (0,5 г, 5 моль%) и реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при комнатной температуре. Добавляли этилацетат (80 мл) и смесь экстрагировали насыщенным водным раствором №1НСО3 (4x100 мл). Объединенные основные экстракты подкисляли с помощью 1н. НС1, затем экстрагировали ЭСМ (3x150 мл). Объединенные органические слои сушили, фильтровали и растворитель упаривали, получая 2,82 г промежуточного соединения (34).
с) Получение
промежуточного соединения (35) транс.
Смесь промежуточного соединения (34) (0,001 моль), карбоната калия (0,003 моль) и йодметана (0,0 65 мл) в ДМФ (6 мл) перемешивали в течение 92 ч при комнатной температуре. Затем реакционную смесь выливали в воду (15 мл) и полученные твердые продукты удаляли фильтрованием, которые очищали с помощью флеш хроматографии Вю1аде (элюент 1: ЭСМ; элюент 2: гексан/этилацетат 4/1 3/1
2/1 1/1 1/2). Чистые фракции собирали и растворитель упаривали. Остаток перемешивали в течение ночи в гексане, получая промежуточное соединение (35) (т.пл. 190-191°С; транс).
Пример А.16.
а) Получение
Промежуточное соединение (3) (0,05 моль) растворяли в ЭСМ (100 мл). Добавляли тионилхлорид (0,2 моль) и смесь перемешивали. Добавляли несколько капель ДМФ и реакционную смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение одного часа. Растворитель упаривали. Добавляли ЭСМ. затем вновь упаривали. Остаток растворяли в ЭСМ. перемешивали и добавляли концентрированный ΝΗ.-ιΟΗ/вода 1/1 (50 мл; 1/1). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Слои разделяли. Органический слой сушили, фильтровали и растворитель упаривали, получая 16 г промежуточного соединения (36).
Ь) Получение
промывали водой и 2-пропанолом, затем сушили,
Смесь промежуточного соединения (36) (0,05 моль) в концентрированной НС1 (60 мл) и диоксане (60 мл) перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. Добавляли воду (200 мл). Смесь охлаждали. Осадок отделяли фильтрованием, получая 13,2 г промежуточного соединения (37).
Пример А.17.
Получение
промежуточного соединения (38) транс.
Промежуточное соединение (6) (0,154 моль) перемешивали в ЭСМ (200 мл) и добавляли ДМФ (5 капель), затем тионилхлорид (37 мл). Смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч и затем растворитель упаривали. Добавляли свежеперегнанный ЭСМ (100 мл) и растворитель упаривали два раза, получая промежуточное соединение (38).
Пример А.18.
а) Получение
- 20 016311 промежуточного соединения (41).
Сначала 2-метокси-3-пиперидинкарбоновую кислоту преобразовывали в ее хлорангидрид путем кипячения с обратным холодильником карбоновой кислоты в ЭСМ (100 мл, чистый для анализа) и тионилхлорида (7 мл). Растворитель упаривали. К смеси данного остатка (0,02 4 моль) в водном насыщенном растворе №1НСО3 (75 мл) добавляли смесь 1-(фенилметил)-4-пиперидинамина (0,024 моль) в ЭСМ (150 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Слои разделяли. Отделенный органический слой сушили (Мд§О4), фильтровали и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (СН3ОН/СН2С12 1/99). Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали. Остаток растирали в диизопропиловом эфире, получая 7,38 г промежуточного соединения (41).
Ь) Получение
промежуточного соединения (42).
Смесь промежуточного соединения (41) (7 г, 0,021 моль) в метаноле (50 мл) гидрировали при комнатной температуре на 10%-ном палладии-на-угле (1 г) в качестве катализатора. После воздействия водорода (1 эквивалент) катализатор отделяли фильтрованием и фильтрат упаривали. Добавляли небольшое количество НС1 в 2-пропаноле, что приводило к образованию белого твердого продукта и получению таким образом 4,08 г промежуточного соединения (42).
Пример А.19.
а) Получение
Смесь 1-(этоксикарбонил)-4-аминопиперидина (0,065 моль), триэтиламина (0,09 моль) в толуоле (160 мл) перемешивали на ледяной бане. Добавляли по каплям раствор 2-метокси-5-хлорбензоилхлорида (0,072 моль) в толуоле (40 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи и добавляли воду. Органический слой отделяли, промывали дважды водой, сушили и упаривали. Твердый остаток кристаллизовали из ΌΡΕ, получая 16,2 г промежуточного соединения (43) (т.пл. 113,2°С). Ь) Получение
промежуточного соединения (44). НС1 (1:1).
Смесь промежуточного соединения (43) (0,044 моль), гидроксида калия (12 г), изопропанола (150 мл) и воды (1 мл) перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. Реакционную смесь упаривали и остаток растворяли в смеси воды и хлороформа. Органический слой отделяли, промывали дважды водой, сушили и упаривали. Остаток растворяли в метилизобутилкетоне и подкисляли путем добавления изопропанола, насыщенного НС1. Образовавшийся осадок отделяли фильтрованием и сушили, получая 9,1 г промежуточного соединения (44).
Промежуточное соединение (45) получали аналогичным образом, но исходя из этилового эфира цис-4-амино-3-метоксипиперидин-1-карбоновой кислоты и 2-метоксибензойной кислоты.
Получение
промежуточного соединения (45).-НС1 (1:1).
Пример А.20.
Получение
промежуточного соединения (46).
6-Амино-н-гексановую кислоту (0,01 моль) растворяли в пропаноле (30 мл) и добавляли серную кислоту (1 мл) и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 48 ч. Растворитель упаривали, получая 2,1 г промежуточного соединения (46).
Пример А.21.
- 21 016311
Получение
промежуточного соединения (47).
Смесь (8)-2-аминопентандиовой кислоты (0,0068 моль) и серной кислоты (0,00816 моль) в пропаноле (40 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 48 ч. Растворитель упаривали и остаток сушили, получая промежуточное соединение (47). Пример А.22.
Получение
промежуточного соединения (48).
Серную кислоту (0,00816 моль) добавляли к раствору (8)-2-аминопентандиовой кислоты (0,0136 моль) в изопропаноле (40 мл) и кипятили с обратным холодильником в течение 48 ч. Растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (48).
Пример А. 23.
Получение
промежуточного соединения (49).
Серную кислоту (0,012 моль) добавляли к раствору 4-аминобутановой кислоты (0,01 моль) в изопропаноле (30 мл) и кипятили с обратным холодильником в течение 48 ч. Растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (49).
Пример А.24.
а) Получение
промежуточного соединения (50).
^-[(ХД-диметилэтокс^карбонилЦ^-^Н-флуорен^-илметокс^карбонилЦЬ-лизин (5 г) растворяли в метаноле (100 мл, сухой) и затем добавляли карбонат цезия (17 г, 0,5 эквивалент). Раствор перемешивали в течение 10 мин. Растворитель упаривали и остаток упаривали вместе с толуолом. Остаток растворяли в ацетонитриле (30 мл, сухой) и добавляли по частям 1-йодпропан (18 г, 10 эквивалентов). Реакционную смесь перемешивали. Растворитель упаривали при пониженном давлении, поддерживая температуру как можно более низкой. Остаток обрабатывали водой и экстрагировали эфиром. Органические слои разделяли и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (элюент: этилацетат/гексан 1/4). Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали. Остаток перемешивали в воде и отделяли фильтрованием, получая 2 г промежуточного соединения (50).
Ь) Получение
Промежуточного соединения (51).
Промежуточное соединение (50) (4 г, 0,0078 моль) растворяли в ЭСМ (30 мл) и добавляли ТФУ (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до тех пор, пока данные ТСХ не свидетельствовали об окончании реакции. Растворитель упаривали при пониженном давлении, поддерживая температуру как можно более низкой, получая промежуточное соединение (51).
с) Получение
- 22 016311 промежуточного соединения (52).
Промежуточное соединение (51) (0,0078 моль) растворяли в БСМ (200 мл). Добавляли насыщенный водный раствор ЫаНСО3 (200 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин в атмосфере азота. Затем по частям добавляли 1-метилэтиловый эфир хлоркарбоновой кислоты (11,4 мл). Реакционную смесь перемешивали и слои разделяли. Отделенный органический слой промывали водой, сушили, и растворитель упаривали, получая 3,5 г промежуточного соединения (52).
б) Получение
Промежуточное соединение (52) (3,5 г, 0,007 моль) растворяли в ацетонитриле (40 мл) и затем добавляли пиперидин (10 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин. Растворитель упаривали досуха. Остаток сырого продукта использовали как таковой в следующей реакции, получая промежуточное соединение (53).
Пример А.25. а) Получение
Тионилхлорид (0,0965 моль) добавляли по каплям к раствору 2-(4-морфолинил)-бензойной кислоты (0,029 моль) в БСМ (150 мл). Затем добавляли несколько капель ДМФ и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. Растворитель упаривали, добавляли немного БСМ и растворитель вновь упаривали. Вновь добавляли немного БСМ. В реакционную смесь добавляли 1-(фенилметил)4-пиперидинамин (0,029 моль). Затем добавляли в реакционную смесь насыщенный водный раствор ЫаНСО3 (75 мл) и перемешивали в течение 2 ч. Отделенный органический слой сушили, фильтровали и растворитель упаривали. Остаток растирали в ΌΙΡΕ. Осадок отделяли фильтрованием и сушили, получая 10,06 г промежуточного соединения (54).
Ь) Получение
промежуточного соединения (55).
Смесь промежуточного соединения (54) (0,026 моль) в БСМ (150 мл) и ТГФ (10 мл) гидрировали на 10%-ном палладии-на-угле (2 г) в качестве катализатора. Катализатор отделяли фильтрованием. Затем к фильтрату добавляли еще немного 10%-ного палладия-на-угле (2 г). Эту смесь опять гидрировали водородом (1 эквивалент для завершения процесса). Катализатор отделяли фильтрованием и растворитель упаривали, получая 5,3 г промежуточного соединения (55).
Пример А.26. а) Получение
промежуточного соединения (57).
Промежуточное соединение (2) очищали с помощью сверхкритической флюидной хроматографии на колонке АБ-Н (20x250 мм) со скоростью потока 50 мл/мин (элюент:СО2/(метанол с 0,1% 2-пропанола) 85/15). Температура колонки была установлена 40°С, и давление на входе было 100 бар. Две различные
- 23 016311 фракции продукта собирали и растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (56) и промежуточное соединение (57) ОК: -7,46° (с = 0,7502 масс./об.%, МеОН, 20°С, 365 нм).
Ь) Получение
промежуточного соединения (58).
Промежуточное соединение (57) (0,000308 моль, 0,1 г) растворяли в ЭСМ (3 мл). Добавляли тионилхлорид (0,045 мл) и ДМФ (одна капля) и смесь кипятили с обратным холодильником. Реакционную смесь концентрировали и опять добавляли ЭСМ (3 мл). Растворитель упаривали. Остаток медленно добавляли в этанол (6 мл) и охлаждали до температуры 0°С на ледяной бане. Ледяную баню отставляли и реакционной смеси давали достичь комнатной температуры. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель упаривали. Остаток растворяли в ЭСМ и промывали насыщенным водным раствором NаНСОз. Затем очищали с помощью колоночной хроматографии (от 100% СН2С12 до 2% МеОН/СН2С12). Одну фракцию продукта собирали и растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (58). с) Получение промежуточного соединения (59) и
промежуточного соединения (60).
Промежуточное соединение (58) (0,00284 моль, 1 г) растворяли в п-толуолсульфоновой кислоте (0,050 г), муравьиной кислоте (25 мл) и концентрированной соляной кислоте (6 мл). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником. Реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток затем растворяли в ЭСМ. промывали насыщенным водным раствором NаНСОз, сушили и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (этилацетат/гексан 1/9). Фракции продукта собирали и растворитель упаривали, получая 0,74 г промежуточного соединения (59) и 0,75 г промежуточного соединения (60).
Пример А. 27.
а) Получение
промежуточного соединения (61).
2-(4-Метил-1-пиперазинил)бензойную кислоту (6,33 г, 0,0287 моль) растворяли в ЭСМ (150 мл) и добавляли ДМФ (1 капля). Затем добавляли тионилхлорид (8,34 мл, 0,1148 моль, 4 эквивалента) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч и 30 мин. Растворитель упаривали и опять добавляли ЭСМ (150 мл). Растворитель упаривали и добавляли ЭСМ (150 мл) в три захода. Затем добавляли 1(фенилметил)-4-пиперидинамин (5,46 г, 0,0287 моль) и насыщенный водный раствор NаНСОз (75 мл) и двухслойную систему перемешивали при комнатной температуре. Слои разделяли. Отделенный органический слой сушили (Мд§О4), фильтровали и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (элюент: СН3ОН/СН2С12 1/9). Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали. Остаток кристаллизовали из ЭСМ и изопропилового эфира, получая 10,03 г промежуточного соединения (61).
Ь) Получение промежуточного соединения (62).
- 24 016311
Смесь промежуточного соединения (61) (7 г, 0,017 моль) в метаноле (100 мл) гидрировали на 10%ном палладии-на-угле (2 г) в качестве катализатора. После завершения воздействия водорода (1 эквивалент) катализатор отделяли фильтрованием и фильтрат упаривали, получая промежуточное соединение (62).
Пример А.28.
Получение
промежуточного соединения (64).
Промежуточное соединение (25) очищали с помощью сверхкритической флюидной хроматографии на колонке ΑΌ-Η (20x250 мм) со скоростью потока 50 мл/мин (элюент: СО2/СН3ОН с 0,1% 2пропанолом) 85/15). Температура колонки была установлена 40°С, и давление на входе было 100 бар. Две различные фракции продукта собирали и растворитель упаривали, получая 7,23 г промежуточного соединения (63) (1К, 48) и 7,55 г промежуточного соединения (64) (18, 4К).
Пример А.29.
а) Получение
промежуточного соединения (65).
2-Метоксибензойную кислоту (10,655 г, 0,0699 моль) растворяли в ЭСМ (100 мл). Добавляли тионилхлорид (10,09 мл, 0,1398 моль, 2 эквивалента) и ДМФ (1 капля) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. Растворитель упаривали и опять добавляли ΌΟΜ (100 мл). Растворитель упаривали и опять ΌΟΜ (100 мл) добавляли. Затем добавляли 1-бензил-4-(метиламино)пиперидин (14,2 г, 0,0699 моль) и насыщенный водный раствор №1НСО3 (50 мл). Двухслойную систему перемешивали и слои разделяли. Отделенный органический слой сушили (Мд8О4), фильтровали и растворитель упаривали, получая 22,8 3 г промежуточного соединения (65).
Ь) Получение
промежуточного соединения (66).
Смесь промежуточного соединения (65) (0,0 67 моль) в метаноле (250 мл) гидрировали при температуре 50°С на 10%-ном палладии-на-угле (2 г) в качестве катализатора. После завершения воздействия водорода (1686 мл), катализатор отделяли фильтрованием и фильтрат упаривали, получая 16 г промежуточного соединения (66).
Пример А.30.
а) Получение
промежуточного соединения (67).
Триметилсилил цианид (48 мл, 0,36 моль) и йодид цинка (0,114 г, 0,00036 моль) добавляли к 3ацетил-1-фторбензолу (44,6 мл, 0,36 моль). Реакционную смесь медленно нагревали до 50°С (температура повышалась на 10°С каждые 15 мин). Смесь перемешивали в течение 3 ч при температуре 50°С и затем в течение 20 ч при комнатной температуре. Растворитель упаривали и упаривали вместе с толуолом, получая промежуточное соединение (67).
Ь) Получение
- 25 016311 промежуточного соединения (68).
Метанол (400 мл) охлаждали до температуры 0°С и растворитель насыщали газообразным НС1. Добавляли охлажденное промежуточное соединение (67) (85,4 г, 0,36 моль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем смесь нагревали в течение ночи при температуре 60°С. Добавляли раствор NаНСО3 до установления рН 7 и смесь экстрагировали дважды с помощью ЭСМ. Отделенный органический слой сушили (Мд§О4), фильтровали и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (СН2С12). Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали, получая 55,3 г промежуточного соединения (68).
с) Получение
промежуточного соединения (69).
Промежуточное соединение (68) (5,8 г, 0,02 г) растворяли в метансульфоновой кислоте (36 мл) и раствор нагревали до 80°С и перемешивали в течение ночи. Затем смесь гасили водой и добавляли этилацетат. Отделенный органический слой сушили (Мд§О4), фильтровали и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (СН2С12). Собирали две различные фракции продукта и растворитель упаривали. Первую фракцию идентифицировали как метиловый эфир 3-фтор-аметилен-бензолуксусной кислоты. Вторую фракцию растворяли в этилацетате и раствор промывали раствором №1ОН и затем раствором серной кислоты. Органический слой сушили (Мд§О4), фильтровали и растворитель упаривали, получая 1,2 г промежуточного соединения (69).
й) Получение
промежуточного соединения (70) и
промежуточного соединения (71).
Промежуточное соединение (69) (10 г, 0,06 моль) растворяли в 50% водном растворе Н28О4 (80 мл) и раствор нагревали в течение ночи при 100°С. Осадок отделяли фильтрованием и промывали ЭСМ. Смесь опять оставляли взаимодействовать в течение ночи и опять осадок отделяли фильтрованием, промывали ЭСМ и очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фазой (Зкаийои Нурегргер® С18 ΒΌ8 (Вазе Эеас1|уа1ей 8Шса) 8 мкм, 250 г, ΓΌ. 5 см). Применяли градиент с буферным раствором и органическими растворителями. Две различные фракции продукта собирали и растворитель упаривали. Каждый остаток растворяли в небольшом количестве метанола. Затем добавляли ЭСМ, и раствор промывали НС1 (1н.). Растворитель в обеих фракциях упаривали, получая 1,8 г промежуточного соединения (70) и 2,67 г промежуточного соединения (71).
е) Получение
промежуточного соединения (72).
Промежуточное соединение (70) (0,2 г, 0,000602 моль) растворяли в ЭСМ (6 мл) и затем добавляли тионилхлорид (10 г, 0,0015 моль, 2,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли сухой этанол (2 мл). Смесь перемешивали в течение 2 ч. Растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии. Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (72).
ί) Получение
- 26 016311 промежуточного соединения (73).
Промежуточное соединение (72) растворяли в смеси муравьиной кислоты (2 мл) и концентрированной НС1 (2 мл). Смесь нагревали в течение 3 ч. Смесь очищали с помощью колоночной хроматографии (СН3ОН/СН2С12 1/9). Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (73).
Пример А.31.
а) Получение
промежуточного соединения (74).
Смесь 1-(фенилметил)-4-пиперидинамина (7 г, 0,037 моль) в ЭСМ (100 мл) добавляли к смеси 2метоксибензоил хлорида (6,4 г, 0,037 моль) в ЭСМ (100 мл). Затем добавляли раствор гидрокарбоната натрия (100 мл) и смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Слои разделяли. Отделенный органический слой сушили и растворитель упаривали. Остаток растирали в ΌΙΡΕ, отделяли фильтрованием и сушили, получая 10,6 г промежуточного соединения (74).
Ь) Получение
промежуточного соединения (75).
Смесь промежуточного соединения (74) (10,7 г, 0,033 моль) в метаноле (150 мл) гидрировали на 10%-ном палладии-на-угле (1 г) в качестве катализатора. После завершения воздействия водорода (1 эквивалент), катализатор отделяли фильтрованием и фильтрат упаривали. Остаток растворяли в 2пропаноле и раствор подкисляли с помощью раствора хлористоводородной кислоты в 2-пропаноле. Продукт кристаллизовали из этого раствора. Осадок отделяли фильтрованием и сушили, получая 8,3 г промежуточного соединения (75).
Пример А.32.
а) Получение
промежуточного соединения (76).
2-Бром-1-(2-метоксифенил)этанон (0,1 г, 0,000436 моль) растворяли в сухом ЭСМ (4 мл) и добавляли 1-(фенилметил)пиперазин (0,077 г) и триэтиламин (0,061 мл, 1,2 эквивалента). Смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем смесь промывали водой и водный слой экстрагировали ЭСМ. получая промежуточное соединение (76).
Ь) Получение /
промежуточного соединения (77).
Смесь промежуточного соединения (76) (0,00308 моль) в метаноле (100 мл) гидрировали на 10%ном палладии-на-угле (0,050 г) в качестве катализатора в присутствии 2-пропанола, насыщенного НС1 (5 мл). После завершения реакции катализатор отделяли фильтрованием и фильтрат упаривали, получая 0,46 г промежуточного соединения (77).
Пример А.33 а) Получение
2-(4-Метил-1-пиперазинил)-3-пиперидинкарбоновую кислоту (11,9 г, 0,0538 моль) растворяли в ЭСМ (10 мл) и добавляли тионилхлорид (12,7 г) и каплю ДМФ. Реакционную смесь перемешивали и
- 27 016311 кипятили с обратным холодильником в течение 90 мин. Растворитель упаривали. Добавляли еще БСМ (10 мл) и упаривали. Добавляли еще БСМ (10 мл), затем упаривали. Добавляли 1-(фенилметил)-4пиперидинамин (10,20 г) и насыщенным водный раствор NаΗСО3 (5 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции. Еще несколько раз добавляли БСМ и насыщенный водный раствор NаΗСО3 и органический слой отделяли, сушили (Мд8О4), фильтровали и растворитель упаривали, получая 4,24 г промежуточного соединения (84).
Ь) Получение
промежуточного соединения (85).
Смесь промежуточного соединения (84) (4,24 г, 0,0107 моль) в метаноле гидрировали на палладиина-активированном угле (2 г) в качестве катализатора. После завершения воздействия водорода (1 эквивалент), катализатор отделяли фильтрованием через целит и фильтрат упаривали, получая промежуточное соединение (85).
Пример А.34.
а) Получение
промежуточного соединения (87).
Промежуточное соединение (71) (0,2 г, 0,00052 моль) растворяли в этаноле (5 мл) и добавляли серную кислоту (0,5 мл). Реакционную смесь предварительно перемешивали в течение 10 с в микроволновой печи и затем нагревали в течение 2 ч при температуре 100°С и затем в течение 2 ч при температуре 140°С. Растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (87).
Ь) Получение
промежуточного соединения (88).
Промежуточное соединение (87) (0,00052 моль) растворяли в муравьиной кислоте (2 мл), добавляли концентрированную соляную кислоту (1 мл) и п-толуолсульфоновую кислоту (каталитическое количество). Раствор нагревали в течение 3 ч. Затем растворитель упаривали и остаток очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фазой (Ыапбоп Нурегргер® С18 ВБ8 (Ваке БеасШ'а1еб 8Шса) 8 мкм, 250 г, ГБ. 5 см). Применяли градиент с буферным раствором и органическими растворителями. Желаемые фракции собирали и обрабатывали, получая промежуточное соединение (88).
Пример А.35.
а) Получение
промежуточного соединения (89).
Триметилсилил цианид (0,05 моль) и йодид цинка (50 мг) добавляли к 1-ацетил-4-бромбензолу (5 г, 0,05 моль). Эту смесь перемешивали в течение 5,5 ч при температуре 50°С и затем в течение 12 ч при комнатной температуре. Осадок отделяли фильтрованием, промывали толуолом и фильтрат упаривали, получая 15 г промежуточного соединения (89).
Ь) Получение
промежуточного соединения (90).
Промежуточное соединение (89) (0,05 моль) добавляли к охлажденному раствору метанола, насыщенному хлористоводородной кислотой (150 мл). Смесь перемешивали и кипятили с обратным холо
- 28 016311 дильником в течение 20 ч, нейтрализовали насыщенным раствором №1НСО3 (220 мл) и экстрагировали три раза с помощью ЭСМ (100 мл). Объединенный органический слой промывали насыщенным раствор ЫаС1, сушили (Мд§О4), фильтровали и растворитель упаривали, получая 15 г промежуточного соединения (90).
с) Получение
промежуточного соединения (91).
Раствор промежуточного соединения (90) (0,05 моль) в серной кислоте (50%) (300 мл) перемешивали при температуре 100°С в течение 20 ч. Осадок отделяли фильтрованием и растворяли в ЭСМ и 2пропаноне. Смесь разделяли на слои. Водный слой экстрагировали ЭСМ (200 мл). Объединенный органический слой сушили (Мд§О4), фильтровали и растворитель упаривали. Остаток растворяли в ЭСМ. Добавляли гексан. Осадок отделяли фильтрованием и сушили, получая 4 г остатка. Остаток растирали в 2-пропаноне. Осадок отделяли фильтрованием и сушили. Остаток растирали в диэтиловом эфире. Осадок отделяли фильтрованием и сушили, получая 1 г промежуточного соединения (91).
б) Получение
промежуточного соединения (92).
Промежуточное соединение (94) (0,1 г, 0,0002 моль) растворяли в ацетонитриле (2 мл) и добавляли промежуточное соединение (91) (0,09 г, 0,0002 моль) и триэтиламин (0,033 мл). Смесь перемешивали в течение 6 дней. Остаток очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фазой (8йапбои Нурегргер® С18 ВЭ8 (Ваке Оеасбуа1еб 8Шса) 8 мкм, 250 г, ΓΌ. 5 см). Применяли градиент с двумя или тремя подвижными фазами (фаза А: 0,25%-ный раствор в воде ПН4НСО3; фаза В: СН3ОН (оптический); фаза С: СН3СЫ). Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали, получая
промежуточного соединения (93).
Промежуточное соединение (42) (0,0043 моль) растворяли в 2-пропаноле (10 мл). Добавляли гидроксид калия (2,38 г) и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 24 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Избыток растворителя удаляли в вакууме. Реакционную смесь экстрагировали водой и этилацетатом. Органический слой сушили и растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (93).
Пример А.37.
Получение
промежуточного соединения (94).
2-Метокси-Ы-4-пиперидинилбензамид моногидрохлорид (0,1 г, 0,000426 моль) растворяли в ЭСМ. Сначала добавляли 1,1'-карбонилбисимидазол (0,083 г, 1,2 эквивалента) и затем триэтиламин (0,120 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Затем смесь промывали водой, фильтровали через изолют (ЪобЦе) и растворитель упаривали. Остаток растворяли в ацетонитриле. Добавляли йодметан и смесь встряхивали. Затем растворитель и избыток йодметана упаривали в вакууме, получая 0,127 г промежуточного соединения (94).
Другие промежуточные соединения, которые были использованы при получении целевых соединений, являются известными соединениями, такие как 4-(фенилкарбоксамидо)пиперидин, 4-(2-метокси- 29 016311 бензамидо)пиперидин, 2-метил-Ы-4-пиперидинилбензамид, 4-амино-5-хлор-2-метокси-Ы-4-пиперидинилбензамид, 4-амино-5-хлор-2-метокси-Ы-(3-метокси-4-пиперидинил)бензамид, №4-пиперидинил-4'(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-2-карбоксамид, 3-гидрокси-6-метоксибензойная кислота, 1-бензоилпиперазин, 1-(2-метоксибензоил)пиперазин, пиперазин-1-ил-(4'-трифторметилбифенил-2-ил)метанон, метил глицинат, этил глицинат гидрохлорид, трет-бутил глицинат, метиловый эфир ^-ацетил-Ь-лизина, этиловый эфир ^-ацетил-Ь-лизина, этил глицинат, этил (К)-аланинат гидрохлорид, этил (8)-аланинат гидрохлорид, этил Ν-метилглицинат гидрохлорид, гидрохлорид метилового эфира β-аланина, этиловый эфир (К)-валина, этил Ό-валинат гидрохлорид, этил Ь-валинат гидрохлорид, этил Ь-лейцинат гидрохлорид, гидрохлорид этилового эфира Ь-серина, гидрохлорид диэтилового эфира (8)-аспарагиновой кислоты, 2этоксикарбонилпиперидин, 3-этоксикарбонилпиперидин, гидрохлорид метилового эфира Ь-глутамина, диэтил Ь-глутамат гидрохлорид, гидрохлорид этилового эфира (К)-пролина, гидрохлорид этилового эфира (8)-пролина, гидрохлорид метилового эфира (28,4К)-4-гидроксипирролидин-2-карбоновой кислоты, гидрохлорид этилового эфира (К)-фенилглицина, гидрохлорид этилового эфира (8)-фенилглицина, этиловый эфир (К)-фенилаланина, этиловый эфир (8)-фенилаланина, гидрохлорид этилового эфира тирозина, гидрохлорид этилового эфира триптофана, трет-бутил глицинат, трет-бутил Ь-аланинат гидрохлорид, трет-бутил Ό-аланинат гидрохлорид, гидрохлорид трет-бутилового эфира Ν-метилглицина, третбутил β-аланинат, трет-бутиловый эфир Ь-валина, трет-бутил Ь-лейцинат гидрохлорид, гидрохлорид трет-бутилового эфира О-трет-бутил-Ь-серина, гидрохлорид ди-трет-бутилового эфира Ь-аспарагиновой кислоты, гидрохлорид трет-бутилового эфира Ь-глутамина, гидрохлорид ди-трет-бутилового эфира Ьглутамовой кислоты, лизин, ^-карбокси-, ди-трет-бутиловый эфир, гидрохлорид; трет-бутиловый эфир Ь-пролина, трет-бутиловый эфир Ό-пролина, 1,1-диметилэтиловый эфир (4К)-4-(1,1-диметил-этокси)-Ьпролина, гидрохлорид трет-бутилового эфира К-аминофенилуксусной кислоты, гидрохлорид третбутилового эфира 8-аминофенилуксусной кислоты, гидрохлорид трет-бутилового эфира Ь-фенилаланина, гидрохлорид трет-бутилового эфира Ό-фенилаланина, трет-бутиловый эфир Ь-тирозина, третбутиловый эфир Ь-триптофана, трет-бутиловый эфир Ь-аспарагина, пропиловый эфир 4-аминобутановой кислоты, изопропиловый эфир 4-аминобутановой кислоты.
В. Получение целевых соединений.
Пример В.1.
Смесь промежуточного соединения (30) (0,0017 моль), 4-(фенилкарбоксамидо)пиперидина (0,0034 моль) и диизопропилэтиламина (0,0051 моль) в ацетонитриле (30 мл) перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 8 дней и затем растворитель упаривали. Остаток обрабатывали ЬСМ (10 мл) и очищали с помощью колоночной хроматографии (элюент: этилацетат), получая соединение (17).
Пример В.2.
Р8-карбодиимидную смолу (0,170 г) добавляли к ЬСМ (2 мл) и добавляли раствор промежуточного соединения (13) (0,000135 моль) в ЬСМ (0,5 мл). Эту реакционную смесь встряхивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Добавляли раствор 4-(фенилкарбоксамидо)пиперидина (0,00095 моль) в ЬСМ (0,5 мл) и реакционную смесь встряхивали в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и смолу промывали ЬСМ (3x3 мл). Фильтрат упаривали, остаток растворяли в ЬСМ (1 мл) и раствор добавляли к Р8-изоцианатной смоле (100 мг), затем встряхивали в течение ночи. Смесь фильтровали и смолу промывали ЬСМ (3x3 мл) и фильтрат упаривали, получая соединение (2).
Пример Β.3.
Смесь промежуточного соединения (25) (0,004 моль), Ν-4-пиперидинилбензамида (0,004 моль), Ν'(этилкарбонимидоил)-Н,№диметил-1,3-пропандиамина (0,006 моль), 1-гидрокси-1Н-бензотриазола (НОВТ) (0,006 моль) и 4-метилморфолина (0,016 моль) в ЬСМ (100 мл) перемешивали в течение 24 ч при температуре 20°С в атмосфере азота. Смесь разбавляли этилацетатом (300 мл), затем промывали НС1 (0,5 н, 100 мл), насыщенным водным раствором NаΗСОз (100 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл). Полученную смесь сушили и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной флеш-хроматографии (элюент: этилацетат/гексан 75/25). Фракции продукта собирали и растворитель упаривали, получая 1,2 г соединения (13) (т.пл. 103-107°С).
Пример В.4.
Промежуточное соединение (6) (0,0001 моль) растворяли в ЬСМ (3 мл). Добавляли тионилхлорид (0,001 моль). Пробирку запаивали, затем встряхивали в течение 2 ч. Растворитель упаривали в слабом токе азота. Добавляли ЬСМ (3 мл), затем вновь упаривали. Добавляли 4-амино-5-хлор-2-метокси-Ы-4пиперидинилбензамид (0,0002 моль) и смолу полистирол-И-метилморфолин НЬ (0,0002 моль). Добавляли ЬСМ (4 мл). Реакционную смесь встряхивали в течение ночи (16 ч) при комнатной температуре. Смолу удаляли с помощью фильтрования. Смолу промывали один раз ЬСМ (3 мл). затем добавляли Р8изоцианатной смолу (0,0004 моль) и реакционную смесь встряхивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Смолу отделяли фильтрованием, промывали ЬСМ и фильтратный растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фазой. Применяли градиент с буферным раствором и органическими растворителями. Желаемые фракции собирали и обрабатывали, получая 0,027 г соединения (24).
- 30 016311
Пример В.5.
Смесь 1-(2-метоксибензоил)пиперазина моногидрохлорида (0,0001 моль), полистиролкарбодиимидной (1,90 ммоль/г) смолы (0,0002 моль, 0,105 г), полистирол-^метилморфолиновой НЬ (3,80 ммоль/г) смолы (0,0005 моль, 0,132 г), раствора промежуточного соединения (6) (0,00015 моль) в ОСМ (1 мл) и 1-гидроксибензотриазола (НОВТ) (0,0015 моль, 0,020 г) в ТГФ (1 мл) встряхивали в течение ночи при комнатной температуре. Добавляли полистирол-бикарбонатную (5,8 ммоль/г) смолу (0,0005 моль, 0,086 г) в качестве поглотителя для удаления избытка НОВТ. Реакционную смесь встряхивали в течение двух часов, фильтровали и фильтрат упаривали. Остаток очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фазой. Применяли градиент с буферным раствором и органическими растворителями. Желаемые фракции собирали и обрабатывали, получая соединение (27).
Пример В.6.
Смесь промежуточного соединения (38) (0,0175 моль) в ОСМ добавляли к перемешиваемой смеси Ν-4-пиперидинил-бензамида (0,0175 моль) и 4-метилморфолина (0,0175 моль) в ОСМ (50 мл) и затем реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Смесь промывали водой, 10%-ным раствором NаНСОз, НС1 (1н.) и насыщенным солевым раствором, затем смесь сушили и фильтровали. Сырой продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (элюент 1: диэтил эфир; элюент 2: этилацетат/гексан 1/1). Фракции продукта собирали и растворитель упаривали, получая 5,1 г соединения (25) (т.пл. 112-115°С).
Пример В.7.
Соединение (25) (0,0137 моль) разделяли на его энантиомеры с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения (неподвижная фаза: ОО СШга1се1) (элюент: гексан/этанол 50/50). Две фракции продукта собирали и растворитель упаривали. Каждый остаток растирали в смеси /-пропанол/ЭРБ и затем желаемые продукты собирали, получая 2,66 г соединения (32) и 2,71 г соединения (33).
Пример В.8.
Соединение (26) (0,0159 моль) разделяли на его энантиомеры с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения (неподвижная фаза: О1 СЫга1се1) (элюент: гексан/этанол 50/50). Две фракции продукта собирали и растворитель упаривали. Каждый остаток растирали в Ό!ΡΕ с небольшим количеством 2-пропанола и затем желаемые продукты собирали, получая 3,23 г соединения (34) и 3,18 г соединения (35).
Пример В.9.
Смесь промежуточного соединения (32) (0,029 моль), 2-метокси-№4-пиперидинил-бензамида (0,029 моль) и 1-гидрокси-1Н-бензотриазола (НОВТ) (0,035 моль) перемешивали в ОСМ (300 мл) и добавляли Х-(этилкарбонимидоил)-^№диметил-1,3-пропандиамин (0,035 моль). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 ч при комнатной температуре и добавляли диизопропилэтиламин (10 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 24 ч и затем перемешивали с разбавленным раствором НС1 в течение 1 ч. Слои разделяли и органический слой промывали 3 раза раствором NаНСОз. Растворитель упаривали и остаток кристаллизовали из 2-пропанола. Осадок отделяли фильтрованием, сушили и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: ОСМ/метанол 99/1, 95/5). Чистые фракции продукта собирали и растворитель упаривали. Остаток растирали в Ό!ΡΕ, и затем желаемый продукт отделяли фильтрованием и сушили (1,51 г). Часть (0,150 г) этого остатка разделяли на его энантиомеры с помощью хиральной хроматографии (колонка Ргосйгот® Оупапис Ах1а1 Сотргекыоп с внутренним диаметром 5 см, заполненная 500 г хиральной фазы АО) (изократическое элюирование смесью гексан/этанол 50/50 со скоростью потока 110 мл/мин). Собирали две фракции продукта и растворитель упаривали, получая 67 мг соединения (43) и 69 мг соединения (44).
Пример В.10.
Промежуточное соединение (37) (0,027 моль) перемешивали в диоксане (100 мл) при комнатной температуре. Добавляли тионилхлорид (0,2 моль) и реакционную смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение одного часа. Растворитель упаривали. К остатку добавляли ОСМ (100 мл), затем вновь упаривали. Остаток растворяли в ОСМ (100 мл). Добавляли раствор 2-метокси-№4пиперидинилбензамида (0,027 моль) в ОСМ (50 мл). Добавляли раствор NаНСОз (50 мл) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение еще дополнительных 4 ч. Органический слой отделяли, сушили, фильтровали и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: ОСМ/метанол от 99/1 до 97/3). Фракции продукта собирали и растворитель упаривали. Остаток кристаллизовали из 2-пропанола (в течение 4 дней, при перемешивании). Осадок отделяли фильтрованием и сушили, получая 6,9 г соединения (37).
Соединение (37) очищали и разделяли на его энантиомеры с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения на СЫга1се1 ОО (250 г, 20 мкм, диаметр колонки 50 мм, длина колонки 21 см) с помощью метанола в качестве элюента (скорость потока: 80 мл/мин). Собирали две группы фракций продукта и растворитель упаривали. Каждый остаток перемешивали в Ό!ΡΕ в течение 20 ч, затем отделяли фильтрованием и сушили, получая 3,02 г соединения (40) и 2,72 г соединения (41).
Пример В.11.
а) Смесь соединения (35) (0,00092 моль) в 12 н НС1 (3 мл) и диоксане (3 мл) встряхивали в течение
- 31 016311 ч при температуре 100°С. Растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фазой. Применяли градиент с буферным раствором и органическими растворителями. Фракции продукта собирали и растворитель упаривали. Остаток растворяли в ЭСМ, затем промывали разбавленной соляной кислотой. Органический слой отделяли, сушили, фильтровали и растворитель упаривали. Остаток растирали в ΌΓΡΕ, отделяли фильтрованием и сушили, получая 0,024 г 4-[4-(2-метоксибензоиламино)пиперидин-1-карбонил]-1-фенил-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-карбоновой кислоты (промежуточное соединение (78) (18, 4В); или = +23° (с = 0,4000 масс./об.%, ЕЮН, 20°С, 589 нм).
Ь) Тионилхлорид (0,02 моль) и ДМФ (3 капли) добавляли к раствору промежуточного соединения (78) (0,0058 моль) в ЭСМ (100 мл), затем реакционную смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч. Растворитель упаривали и остаток растворяли в ЭСМ. Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре и затем добавляли этил глицинат (0,01 моль), далее водный раствор NаНСОз (50 мл). Реакционную смесь затем перемешивали в течение 1 ч и слои разделяли. Органический слой промывали 1 н соляной кислотой, сушили, отделяли фильтрованием и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: от ИСМ/метанол 99/1 до 90/10). Фракции продукта собирали и растворитель упаривали. Остаток кристаллизовали из смеси 2-пропанол/Э[РЕ и затем желаемые продукт собирали, получая 2,78 г соединения (48) (18, 4В).
Пример В.12.
Промежуточное соединение (35) (0,000061 моль) растворяли в ЭСМ (19 мл) и добавляли ЭСМ/ТФУ (9/1) (1 мл), затем реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре, и растворитель упаривали. Остаток растворяли в ЭСМ (9 мл) и раствор промывали 10%-ным водным раствором №СО3, затем фильтровали через Ех1ге1и1® и фильтр промывали ЭСМ (2x3 мл). Фильтрат собирали, и растворитель упаривали. Полученный остаток растворяли в ЭСМ (14 мл), получая раствор (I).
Раствор (I) (1 мл) добавляли к перемешиваемому раствору 2,3-диметокси-бензойной кислоты (0,000091 моль) и №-(этилкарбонимидоил)-Ы,№диметил-1,3-пропандиамина (0, 000122 моль) в ДМФ (1 мл) и диизопропилэтиламина (0,000134 моль) при комнатной температуре и затем реакционную смесь перемешивали в течение 70 ч при комнатной температуре. Добавляли ^№диметил-4-пиридинамин, и полученную смесь встряхивали в течение 80 ч при комнатной температуре, затем растворитель упаривали, и остаток растворяли в метаноле (2 мл) и воде (0,5 мл). Полученный раствор очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фазой. Применяли градиент с буферным раствором и органическими растворителями. Желаемые фракции собирали и обрабатывали, получая соединение (49).
Пример В.13.
Соединение (62) растворяли в ЭСМ (1 мл). Добавляли ТФУ (0,4 мл). Смесь встряхивали в течение одного часа при комнатной температуре (500 об./мин), затем в течение выходных при комнатной температуре (400 об./мин). Реакционную смесь упаривали, и остаток очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фазой (колонка: Х1егга Ргер М8 С18, размер частиц: 5 мм; длина: 10 см, внутренний диаметр: 19 мм, элюент: (0,2% НН4НСО3, в Н2О) /СН3ОН/ацетонитриле градиент). Фракции продукта объединяли и растворитель упаривали. К остатку добавляли ЭСМ (3 мл), затем вновь упаривали, получая 0,031 г соединения (63).
Пример В.14.
Соединение (243) (0,0215 моль) разделяли на его энантиомеры с помощью НРЬС с обращенной фазой на Эа1се1 СЫга1рак АО (2 кг, 1000 А, диаметр: 20 мкм; элюент: этанол 100%, скорость потока: 750 мл/мин). Собирали две группы фракций продукта и растворитель упаривали. Каждый остаток перемешивали в ОГРЕ, отделяли фильтрованием и сушили, получая соединение (245) (ОВ: +32,8° (при 589 нм, СН3ОН, 20°С)) и соединение (244), (ОВ: -37,55° (при 589 нм, 26,1 мг/5 мл, СН3ОН, 20°С)).
Пример В.15.
а) Раствор соединения (45) (0,0186 моль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (0,00037 моль) в ТГФ (100 мл) перемешивали и охлаждали на ледяной бане. Добавляли боргидрид натрия (0,0186 моль) и реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при охлаждении на ледяной бане. Добавляли еще боргидрид натрия (0,22 г) и реакционную смесь перемешивали в течение выходных при комнатной температуре. Реакцию гасили с помощью 1н. раствора НС1. Эту смесь экстрагировали ЭСМ. Отделенный органический слой сушили (Мд8О4), фильтровали, и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фазой (8Еапбоп Нурегргер® С18 ΒΌ8 (Ваке Эеас1|уа1еб 8Шса) 8 мкм, 250 г, ΓΌ. 5 см). Использовали градиент с двумя или тремя подвижными фазами (фаза А: (0,5% ИН4ОАс в Н2О)/СН3СN 90/10); фаза В: СН3ОН (необязательно); фаза С: ί.Ή3ί.’Ν). Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали. Остаток растворяли в ИСМ, промывали водой, отделяли, сушили (Мд8О4), фильтровали и растворитель упаривали. Остаток растирали в ИГОЕ, отделяли фильтрованием и сушили, получая 5,65 г (1В, 48)-4-[4-(2-метоксибензоиламино)пиперидин-1-карбонил]1-фенил-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (79)] (ОВ:
- 32 016311
-25,38° (при 589 нм, 0,532 мас./об.%, 20°С, этанол)).
Ь) Промежуточное соединение (79) (0,0078 моль) и 4-метилморфолин (3 мл) растворяли в ЭСМ (40 мл). 1-Гидрокси-Ш-бензотриазол (ΗΟΒΤ) (0,0075 моль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид (0,010 моль) и затем промежуточное соединение (46) (0,0078 моль) добавляли в реакционную смесь и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь промывали водой. Из отделенных органических слоев упаривали растворитель. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: гексан/этилацетат от 1/1 до 1/2). Собирали фракции продукта и растворитель упаривали, получая 3,1 г соединения (246) (1К, 48).
Пример Β.16.
Промежуточное соединение (25) (10 г; 0,0297 моль) растворяли в ЭСМ (150 мл, чистый для анализа). Затем добавляли небольшое количество ДМФ вместе с тионилхлоридом (20 мл). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч и затем растворитель упаривали. Добавляли промежуточное соединение (42) (6,99 г; 1 эквивалент), насыщенный водный раствор ΝαΗΟΌ,-, (150 мл) и ЭСМ (150 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем органический слой отделяли. Отделенный органический слой сушили и растворитель упаривали. Остаток кристаллизовали из изопропанола и изопропилового эфира. Осадок очищали с помощью колоночной хроматографии (обращенной фаза; в качестве буферного раствора был использован раствор ΝΗ4№Ο3 в сочетании с органическими растворителями). Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали. Остаток разделяли на его энантиомеры с помощью сверхкритической флюидной хроматографии на колонке ΑΌ-Η (60% метанол и 0,1% изопропиловый спирт; поток: 50 мл/мин). Фракции продукта собирали и растворитель упаривали, получая 2,0 г соединения (265), и 2,3 г соединения (266).
Пример Β.17.
a) Соединение (265) (2 г, 0,0036 моль) растворяли в ТГФ (18 мл, сухой). В реакционную смесь барботировали азот и затем добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (0,083 г, 2 мол.%). Смесь охлаждали до температуры 0°С на ледяной бане и затем добавляли боргидрид натрия (0,0036 моль). Охлаждение продолжали в течение 4 ч и смесь оставляли взаимодействовать в течение ночи при комнатной температуре. Затем добавляли ацетон (0,5 мл) и растворитель упаривали. Остаток растворяли в ЭСМ и добавляли Ηί,Ί (1н.). Отделенный органический слой сушили ^^Ο^, фильтровали и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (элюент: 0Η2Ο2/0Η3ΟΗ от 1/99 до 10/90. Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали. Остаток растворяли в №3ΟΗ^Η2Ο2 и раствор обрабатывали активированным углем Νοήΐ. Смесь фильтровали через декалит и растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (80).
b) Промежуточное соединение (80) (0,00194 моль, 1 г) растворяли в ЭСМ (10 мл). Добавляли тионилхлорид (0,00388 моль, 0,282 мл) и несколько капель ДМФ. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 90 мин. Растворители упаривали и добавляли ЭСМ (10 мл). Растворитель вновь упаривали. Сырой продукт растворяли в ЭСМ (10 мл) и добавляли гидрохлорид метилового эфира 3-аминопропионовой кислоты (0,00194 моль, 0,272 г). К этой смеси добавляли насыщенный водный раствор NаΗСΟ3 (10 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Слои разделяли и водный слой экстрагировали ЭСМ. Объединенные органические слои сушили (Мд8Ο4), фильтровали и растворители упаривали. Остаток очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения (8Ьапбоп Щрегргер® С18 ΒΌ8 (Бахе ЭеасНуа1е0 8Шса) 8 мкм, 250 г, Ι.Ό. 5 см). Использовали градиент с двумя или тремя подвижными фазами (фаза А: 0,25%-ный раствор ΝΗ4№Ο3 в воде; фаза Β: ί.Ή3ΟΗ (необязательно); фаза С: ίΉ3ΟΝ). Две различные фракции продукта собирали и растворитель упаривали, получая в качестве первой фракции 0,160 г соединения (254) и в качестве второй фракции 0,244 г соединения (255).
Пример Β.18.
a) Раствор соединения (46) (0,0139 моль) и тетракис(трифенилфосфин)-палладия (0,00083 моль) в ТГФ (80 мл) перемешивали и охлаждали на ледяной бане. Добавляли боргидрид натрия (0,0139 моль) и реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при охлаждении на ледяной бане, затем перемешивали в течение 20 ч при комнатной температуре. Реакцию гасили с помощью 1н. водного раствора Ηί,Ί. Эту смесь экстрагировали дважды ЭСМ. Отделенный органический слой сушили (Мд8Ο4), фильтровали и растворитель упаривали. Остаток очищали на силикагеле на стеклянном фильтре (элюент: ^2Ο2^Η3ΟΗ 97/3, затем 95/5). Фракции продукта собирали и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой (8Ьапбоп Цурегргер® С18 ΒΌ8 (Заке ЭеасРуа1е0 8Шса) 8 мкм, 250 г, Ι.Ό. 5 см). Использовали градиент с двумя или тремя подвижными фазами (фаза А: (0,5% ΝΗ/ЦАс в Η2Ο)/ίΉ3ΟΝ 90/10); фаза Β: ί.Ή3ΟΗ (необязательно); фаза С: СЩСЩ. Фракции продукта собирали и растворитель упаривали. Остаток растирали в ΌΙΡΕ, отделяли фильтрованием и сушили, получая 4,50 г промежуточного соединения (81) (63%; (Ι8, 4К); или: +21,03° (с = 0,504 мас./об.%, МеΟΗ, 20°С, 589 нм)).
b) Промежуточное соединение (81) (0,000194 моль, 0,1 г) растворяли в сухом ЭСМ (10 мл). Затем к смеси добавляли 1-гидрокси-Ш-бензотриазол (ΗΟΒΤ) (1,2 эквивалента, 0,031 г), 1-этил-3- (3'-диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорид (ЕЭС!) (1,2 эквивалента, 0,045 г) и гидрохлорид метилового
- 33 016311 эфира 3-аминолропионовой кислоты (3 эквивалента, 0,081 г) и диизопропилэтиламин (10 эквивалентов, 0,320 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли еще гидрохлорид метилового эфира 3-аминопропионовой кислоты (3 эквивалента, 0,081 г) и смесь промывали 3 раза насыщенным водным раствором №1НСО3. Отделенный органический слой сушили (МдЗО4), фильтровали и растворитель упаривали. Остаток затем очищали с помощью колоночной хроматографии (от 100% СН2С12 до 2% СН3ОН/СН2С12), получая 0,060 г соединения (256).
Пример В.19.
Промежуточное соединение (25) (0,00297 моль, 1 г) растворяли в ЭСМ (5 мл). Добавляли тионилхлорид (0,00742 моль, 0,539 мл) и несколько капель ДМФ. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 90 мин. Растворители упаривали и добавляли ЭСМ (5 мл). Растворитель вновь упаривали. Сырой продукт растворяли в ЭСМ (5 мл) и добавляли промежуточное соединение (55) (0,00297 моль, 0,859 г). К этой смеси добавляли насыщенный водный раствор ЫаНСО3 (5 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Слои разделяли и водный слой экстрагировали ЭСМ. Объединенные органические слои сушили (МдЗО4), фильтровали и растворители упаривали, получая 1,80 г соединения (264).
Пример В.20.
a) Соединение (264) (0,00297 моль) растворяли в ТГФ (20 мл). В реакционную смесь барботировали азот и затем добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (0,070 г). Смесь охлаждали до температуры 0°С на ледяной бане и затем добавляли боргидрид натрия (0,002 97 моль). Охлаждение продолжали в течение 4 ч и смесь оставляли взаимодействовать в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакцию гасили с помощью НС1 (1н.) и экстрагировали ЭСМ. Отделенный органический слой сушили (МдЗО4), фильтровали и растворитель упаривали. Продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (элюент: (СН2С12/СН3ОН) от 99/1 до 90/10). Фракции продукта собирали и растворители упаривали в вакууме. Остаток повторно растворяли в СН2С12/СН3ОН и обрабатывали активированным углем. Смесь фильтровали через декалит и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фазой (ЗНапбоп Нурегргер® С18 ВИЗ (Ваке Осасбта1сб ЗШса) 8 мкм, 250 г, ΓΌ. 5 см). Использовали градиент с двумя или тремя подвижными фазами (фаза А: 0,25%-ный раствор ИН4НСО3 в воде; фаза В: СН3ОН (необязательно); фаза С: СН3СИ). Собирали две различные фракции продукта и растворитель упаривали. Остатки вновь растворяли в ЭСМ и оба раствора добавляли в диизопропиловый эфир. В обоих случаях осадок отделяли фильтрованием и твердый продукт сушили, получая промежуточное соединение (82) (31%; т.пл.: 257°С), и соединение (260) (36%).
b) Промежуточное соединение (82) (0,000176 моль, 0,100 г) растворяли в сухом ЭСМ. Затем к смеси добавляли НОВТ (1-гидрокси-1Н-бензотриазол) (1,2 эквивалента, 0,028 г), 1-этил-3-(3'-диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорид (ΕΌΟ) (1,2 эквивалента 0,04052 г) и гидрохлорид метилового эфира 3-аминопропионовой кислоты (3 эквивалента, 0,07 3 г) и диизопропилэтиламин (10 эквивалентов, 0,290 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли еще диизопропилэтиламин (3 эквивалента, 0,073 г) и смесь промывали 3 раза насыщенным водным раствором №1НСО3. Отделенный органический слой сушили (МдЗО4), фильтровали, и растворитель упаривали. Остаток затем очищали с помощью колоночной хроматографии (от 100% СН2С12 до 20% СН3ОН/СН2С12). Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали, получая соединение (263).
Пример В.21.
a) Соединение (269) (0,00359 моль) растворяли в ТГФ (18 мл) и этот раствор охлаждали до температуры 0°С. Затем добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (0,083 г, 2 моль%) и боргидрид натрия (0,136 г, 1 эквивалент) и смесь перемешивали при температуре 0°С в течение 4 ч. Затем смесь гасили с помощью НС1 (1н.). Добавляли ЭСМ и органический слой сушили (МдЗО4), фильтровали и растворитель упаривали. К остатку добавляли НС1 (1н.) и смесь перемешивали в течение 2 ч. Водный слой упаривали и упаривали вместе с толуолом, получая промежуточное соединение (83) в виде гидрохлоридной соли присоединения кислоты.
b) Промежуточное соединение (83) (1 г, 0,0017 моль) растворяли в ЭСМ (15 мл) и к раствору добавляли 1-этил-3-(3'-диметил-аминопропил)карбодиимид гидрохлорид (ΕΌΟ) (0,397 г, 0,002 моль). Затем в реакционную смесь добавляли ИШЕА (2,8 мл, 0,017 моль), 1-гидрокси-1Н-бензотриазол (НОВТ) (0,276 г, 0,002 моль) и изопропил 3-аминопропионат гидрохлорид (0,851 г) в небольшом количестве ЭСМ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. Смесь промывали четыре раза водой. Отделенный органический слой сушили (МдЗО4), фильтровали и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фазой (ЗНапбоп Нурегргер® С18 ВИЗ (Ваке Оеас1|уа1еб ЗШса) 8 мкм, 250 г, ΓΌ. 5 см). Использовали градиент с двумя или тремя подвижными фазами (фаза А: 0,25%-ный раствор ИН4НСО3 в воде; фаза В: СН3ОН (необязательно); фаза С: СН3СИ). Фракции продукта собирали и растворитель упаривали. Продукт растворяли в этилацетате и раствор промывали насыщенным водным раствором ИаНСО3. Органический слой сушили и растворитель упаривали, получая 0,324 г соединения (276).
Соединение (272) получали аналогичным образом путем взаимодействия промежуточного соедине- 34 016311 ния (83) в присутствии метил 3-аминопропионата гидрохлорида вместо изопропил 3-амино-пропионата гидрохлорида.
Пример В.22.
Промежуточное соединение (63) (2,49 г, 0,00739 моль) растворяли в ЭСМ (6 мл). В раствор добавляли тионилхлорид (1,07 мл) и каплю ДМФ. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч и растворитель упаривали. Добавляли ЭСМ (6 мл), вновь упаривали и опять добавляли (6 мл). Затем добавляли промежуточное соединение (85) (2,24 г, 0,00739 моль) и насыщенный водный раствор №1НСО3 (3 мл) и двухслойную систему перемешивали при комнатной температуре. Слои разделяли и органический слой сушили (Мд8О4). Сырой продукт соединения очищали с помощью колоночной флеш хроматографии (элюент: ЭСМ/МеОН от 100/0 до 20/1). Соединение очищали опять с помощью колоночной флеш хроматографии (элюент: ЭСМ/МеОН от 100/0 до 99/1). Желаемые фракции собирали и растворитель упаривали, получая соединение (278).
Пример В.23.
Соединение (278) (1,52 г, 0,00244 моль) растворяли в ТГФ (12 мл) и барботировали газообразный азот в течение 10 мин при температуре 0°С. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (0,056 г, 2 мол.%) и боргидрид натрия (0,092 г) и реакционную смесь перемешивали в течение одного часа при температуре 0°С. Реакционную смесь обрабатывали 1н НС1 и перемешивали в течение ночи. После экстракции этилацетатом продукт был в водном слое. Чистый продукт экстрагировали из водного слоя путем добавления аммиака до рН 7. Отделенный органический слой сушили, фильтровали и растворитель упаривали, получая промежуточное соединение (86).
Ь) Промежуточное соединение (86) (0,3 г, 0,000515 моль) растворяли в ЭСМ и к раствору добавляли ΕΌΟΙ (0,395г). К этой смеси добавляли диизопропилэтиламин (0,850 мл) и изопропил 3-амино пропионата гидрохлорид (0,259 г, 3 эквивалента) в небольшом количестве ЭСМ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения взаимодействия. Смесь промывали четыре раза водой, сушили (Мд8О4), фильтровали и растворитель упаривали. Остаток очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фазой (81ιηηάοη Нурегргер® С18 ΒΌ8 (Ваке ОеасйШеД 8111са) 8 мкм, 250 г, Ι.Ό. 5 см). Использовали градиент с двумя или тремя подвижными фазами (фаза А: 0,25%-ный раствор ИН4НСО3 в воде; фаза В: СН3ОН (необязательно); фаза С: СН3СЫ). Фракции продукта собирали и растворитель упаривали, получая 0,324 г соединение (277).
Пример В.24.
Промежуточное соединение (88) (0,000602 моль) растворяли в ЭСМ (6 мл). Затем добавляли тионилхлорид (87 мл, 0,001204) и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. Растворитель упаривали и опять добавляли ЭСМ (6 мл). Растворитель упаривали еще раз и опять добавляли ЭСМ (6 мл). Затем добавляли промежуточное соединение (75) (0,000602 моль) и насыщенный водный раствор №НСО3 (3 мл). Смесь перемешивали. Затем смесь промывали водой и отделенный органический слой сушили (Мд8О4), фильтровали и растворитель упаривали, получая соединение (273).
Пример В.25.
Промежуточное соединение (92) растворяли в ЭСМ (4 мл) и добавляли ΕΌΟΙ (0,011 г). К этой смеси добавляли Э1РЕА (0,076 мл), 1-гидрокси-1Н-бензотриазол (0,008 г) и изопропил 3-аминопропионата гидрохлорид (0,023 г) в небольшом количестве ЭСМ и ДМФ. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь промывали водой (три раза), сушили (Мд8О4) и очищали с помощью колоночной хроматографии (1ко1и1е) от ЭСМ до ЭСМ/МеОН (1/9), получая 14 мг соединения (275).
Пример В.26.
Промежуточное соединение (80) (0,0040 моль) растворяли в ЭСМ (20 мл) и добавляли 1-этил-3(Ы,М-диметиламино)пропилкарбодиимид (0,920 г). К этой смеси добавляли Э1РЕА (0,659 мл), 1гидрокси-1Н-бензотриазол (0,648 г) и гидрохлорид изопропил 3-аминопропионата (2,00 г) в небольшом количестве ЭСМ (20 мл) и ДМФ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. Реакционную смесь обрабатывали. Добавляли еще ЭСМ и реакционную смесь промывали водой (три раза), сушили (Мд8О4) и органический слой упаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (гептан/этилацетат; 1/1 - МеОН /ЭСМ; 1/10). Продукт далее очищали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фазой (8Ьаийои Нурегргер® С18 ВЭ8 (Ваке ОеасйШеД 8Шса) 8 мкм, 250 г, Ι.Ό. 5 см). Применяли градиент с буферным раствором и органическими растворителями, получая 850 мг соединения (280).
В табл. Е-1 и Е-1а перечислены соединения, которые были получены в соответствии с одним из представленных выше примеров. Стереохимическая конфигурация некоторых соединений обозначена как В*, или 8*, что указывает на относительную стереохимию, при этом абсолютная стереохимия неопределенна, хотя само соединение выделено в виде индивидуального стереоизомера и является энантиомерно чистым. Для некоторых соединений указана температура плавления (т.пл.).
- 35 016311
Таблица Р-1
- 36 016311
^сн!ХЗ/^~^Х— ДЯ σ”^
р СТ} Ά ° ς
Соединение И* б; Пример В1 Соединение Ν' 142; Пример В17; [1К(8)г 43]
Р /Лн ₽/=\ $
Соединение № 7; Пример ВЗ; Соединение Ν' 143; Пример В17;
транс [1й(3),43]
б \.....ΐ ,.·^ Η 1 /=\ ,-φφΐ0
/......с °4
Соединение Ν' 8; Пример ВЗ; Соединение № 144; Пример В17;
транс (1К, 43)
χαβ О ? /~\ н Р/=\ р0
Соединение № 9; Пример ВЗ; цис Соединение Ν' 145; Пример В17; [1К(3) , 43]
С к С) °ν4
о Р Χλνη θ
СЕу
Соединение № 10; Пример В 3; Соединение Ν' 14 6; Пример Β17;
транс [1Κ(5), 43]
- 37 016311
съ Соединение К’ 11; Пример ВЗ; цис Соединение № 147; Пример В17; (1К, 43)
о Соединение № 12; Пример ВЗ; цис Шм <МО 0 / Соединение № 148; Пример В17; [1К(3],43]
О Соединение № 13; Пример ВЗ; транс; т.пл. 103-107 °С Соединение № 149; Пример В17; [1К(3],43]
О Соединение № 14; Пример ВЗ; транс Соединение № 150; Пример В17; [1К (К) , 43]
О \ Соединение №15; Пример В1; транс 6н Соединение № 151; Пример В17; [1Р.(23-транс),43]
- 38 016311
Соединение № 16; Пример В1;
транс
Соединение № 152; Пример В17;
[1В <В),45]
Соединение № 17; Пример В1;
транс
Соединение Ν' 153; Пример В17;
[1К(3),43]
Соединение В’ 18; Пример ВЗ;
транс
Соединение Ν* 154; Пример В17;
[1В(3),45]
СГ5
Соединение № 19; Пример ВЗ;
транс
Соединение № 155; Пример В17;
[ 1В. (В.) , 45]
Соединение № 20; Пример В4
Соединение К· 156; Пример В17;
(1В, 43)
- 39 016311
Соединение Ν' 21; Пример В4;
транс
Соединение Ν' 157; Пример В17;
(1К, 43)
/
Соединение Ν 22; Пример В5;
транс
Соединение Ν' 158; Пример В17;
(1К, 43)
Соединение Ν· 23; Пример В4
Соединение Ν' 159; Пример В17;
(1В, 43)
Соединение Ν' 24; Пример В4;
транс
Соединение Ν' 160; Пример В17;
(18,45)
Соединение № 25; Пример В6; транс; 112-115 °С
Соединение Ν' 161; Пример В17;
¢18(3),45]
- 40 016311
- 41 016311
Соединение Ν· 32; Пример В7;
т.пл. 164 °С (ВисЬ1 νΐ3ΐΐΗ1)
Соединение К* 168; Пример В17;
[1К(3),45]
Соединение Ν* 33; Пример В7;
т.пл. 165,4 °С (ВисЬ1 У1зиа1)
Соединение № 169; Пример В17;
[1К(3] ,45]
у.
Соединение Ν* 34; Пример В8;
(1К, 43); т.пл. 111,47 (ϋ5Ο
Соединение Я· 170; Пример В17;
[1К(3],48]
Соединение № 35; Пример В8;
(13, 4К); т.пл. 101,6 °С (ВисЬт аиСошаТюз)
Соединение И· 171; Пример В17;
[1Н(5),45]
- 42 016311
Соединение Я· 36; Пример В10;
(1К, 43); т.пл.: 206,0-207,3 °С (ВисИ! у!еиа1)
Соединение Я' 172; Пример В17;
[1К(3),43]
Соединение Н· 38; Пример В10
Соединение № 174; Пример В17;
[1К(К),43]
Соединение Я' 39; Пример В10
Соединение № 175; Пример В17;
Соединение К* 40; Пример В10
Соединение Н· 17 6; Пример В17;
[1В(К),43]
- 43 016311
Соединение № 41; Пример В10
Соединение Ν· 17 7; Пример В17;
[1К(5),43]
Соединение № 42; Пример В10;
(15, 4К); т.пл. 206,6-207,4 °С (ВисИ1 У1зиа1)
Соединение № 178; Пример В17; [1К(3),43]
Соединение № 179; Пример В17; Соединение № 43; Пример В9 [1К(К),43]
Соединение Ν· 180; Пример В17; Соединение № 44; Пример В9 [1К(3],48]
Соединение № 45; Пример В10;
(1К, 43); т.пл. 114,0-126,0 °С (Виски У1зиа1)
Соединение № 181; Пример В17;
[1К(3),43]
- 44 016311
- 45 016311
ί_7 \ ί? Γ-\ Η ί /=( (У г Соединение Ν' 51; Пример В12 Λ§5γσν?' Соединение Ν' 187; Пример В13; [1К(3),43]
О ^Г2 ΐ/ \ ν н 0 _о_с^и..... О °х Соединение Ν' 52; Пример В12 «Я^Яа?? Соединение № 188; Пример В13; [1К(К],43]
О Ц-СГ; Соединение Ν' 53; Пример В12 А>н Соединение Ν1 189; Пример В13; [1К(3],43]
0 у, Р Соединение Ν* 54; Пример В12 η2ν Соединение Ν· 190; Пример В13; [1В(3],45]
О г Соединение Ν· 55; Пример В12 Соединение № 191; Пример В13; [1К(К],43]
—ν-с— О \ Соединение Ν' 56; Пример В12 Соединение № 192; Пример В13;
- 46 016311
[ 1К (25- -транс) ,43]
о % <<4,
-°хо о М11Ю—Ν^~^-Ν-Γ— 0__* СДОДОТГ ΗθΆ о о
Соединение Я' 193; Пример В13;
Соединение № 57; Пример В12
[1В (В),43]
о О '^Α,λνη
0
Соединение Я* 194; Пример В13;
Соединение Я’ 58; Пример В12
[1В (3),43]
^Ίι н Г =1
оЧ —> \_/ о ? Л”\ н **С—N )—Ν—С—ά >--/ Ν цж (У до“Л 0 V
Соединение Я· 195; Пример В13;
Соединение Ν' 5 9; Пример Β12 [1К (3),43]
.....«^дорЛ-чр °χ О'У™1' ноА 2,σΫί о λ
Соединение № 196; Пример В13;
Соединение Ν' 60; Пример Β12
[1К(К),43]
О __ΡΗ г*) н ί
-до УСУ^'О НОЛДО[ Ηυ ?><ΝΕ 4 ДОЖ Г'-
о € ДО 0
Соединение № 197; Пример В13;
Соединение Ν' 61; Пример Β12 [1В (3),43]
\ УДО —4—0 нм—с*у V 0 к
о
- 47 016311
Соединение № 62; Пример В17;
(18, 45)
Соединение Ν' 198; Пример В13;
[18(3),43]
Соединение № 63; Пример В13;
(18, 43)
Соединение № 199; Пример В17;
(18, 43); т.пл. 161 °С (ВйсЫ ухзиа!)
Соединение № 64; Пример В17;
(18, 43)
Соединение Ν' 200; Пример В17;
(18, 43)
Соединение № 65; Пример В17;
(18, 43); т.пл. 188 °С (ВисМ ухзиа!)
Соединение Ν’ 201; Пример В17;
(18, 43)
Соединение Ν’ 66; Пример В17;
(18(3), 43)
Соединение № 202; Пример В17;
(18, 43)
- 48 016311
α 4
\ 7' С О °х к а
Соединение № 67; Пример В17; Соединение я· 203; Пример В17;
[1Κ(Β), 43] (1К, 43)
ΤΙ п Ύ''β ΗΝ Ό, 0==/ /° з! 'фр О Οχ О
Соединение № 68; Пример В17; Соединение № 204; Пример В17;
[ 1К(5),43] (1В, 43)
3¾ <ъ сгусо ί <3 г 0 % О НЧ к (СНзк, О&/ (στ1? 0
Соединение Ν' 69; Пример В17; Соединение Ν' 205; Пример В17;
[ 1В(В) ,43] (1К, 43)
β И'ТсНгЗц 4 ΕγνΡ γΜ О Οχ
Соединение № 70; Пример В17; Соединение Ν' 206; Пример В17;
[ 1Н(3),43] (1 В, 43)
Ρ Тх-мн К £ О I °уУ ΗΝ &Н2)3 ία!ίΛ о
\>н о А
Соединение № 71; Пример В17; Соединение Ν' 207; Пример В17;
[ 1Е< (3),43] ίΙΚ, 43)
- 49 016311
Соединение № 72; Пример В17;
[1К(5),45]
Соединение № 73; Пример В17;
[1К(3),45]
Соединение М· 74; Пример В17;
[1Н(5) , 43]
[1К(5),45]
- 50 016311
- 51 016311
Ύδ£σ“ϊί
и да 0 ς
Соединение № 80; Пример Β17; Соединение № 216; Пример В17;
[ΙΗ(3),45] [1К(В), 48]
°у*0
Соединение Ν' 81; Пример Β17; Соединение Ν1 217; Пример В17;
[1Η(5),45] [1К(В), 45]
ч^л ОХ··’. 0 Υ °
Соединение № 82; Пример В17; Соединение № 218; Пример В17;
[1К(К),45] [1К(Ю, 45]
дадасЛ? дажп? да о
Соединение Ν· 83; Пример В17; Соединение Ν· 219; Пример В17;
(1К,45) [1К(К>, 45]
8-0 Γγ^γΟ1 уО I г 0
Соединение № 84; Пример В17; Соединение № 220; Пример В17;
- 52 016311
- 53 016311
Соединение Ν1 89; Пример В13;
(18,43)
о
Соединение № 90; Пример В13;
(18,43)
Соединение № 91; Пример В17;
[18(23-транс),45)
Соединение Ν' 92; Пример В13; [1В(25-транс),43]
- 54 016311
- 55 016311
Соединение № 97; Пример В13;
[1Н(К),45]
Соединение № 233; Пример В17;
[1В(5],45]
Соединение Ν* 98; Пример В13;
[1К(Й),45]
Соединение № 234; Пример В17;
[1К(5),43]
Соединение № 99; Пример В13;
[1К(К),45]
Соединение № 235; Пример В17;
(1К(3),45]
Соединение № 100; Пример В13;
[1К(К],45]
Соединение Ν' 236; Пример В17;
[1К(3),43]
- 56 016311
- 57 016311
[ΙΚ(3),45] [ΙΚ(Κ),45]
Э МСсО у όγθ
©η) Г ΓΎγν \Μο<
У Ο^χ ο Λ
Соединение № 106; Пример Β17; Соединение Ν’ 24 2; Пример Β17;
(1Β(5),43] [ΙΚ(К),43]
/% Γ γ*'ίκ ^σ“τ?
__/—0 δ 0
0 ΝΗί δ
Соединение Ν’ 107; Пример Β17; Соединение № 243; Пример ВЗ
[ΙΚ(3),45]
_/ Г г €Ρ\-νκ <- Ο4=Ζ ζ,σΎ? 0
Соединение Ν’ 108; Пример Β17; Соединение Ν’ 244; Пример Β14;
[ΙΚ(3),43] (ΙΚ, 43)
“Υ Ηϊ£ 'β \ У ><>7Ρ ^Яо'У?' __у—0 о 0
V
Соединение № 109; Пример Β17; Соединение Ν' 245; Пример В14;
[ΙΚ(3),48] (15, 4В)
Α ©Λ 2σν? ο / сГрр нк-Ч о—
о
- 58 016311
Соединение Ν’ 110; Пример В17;
[1В(5) , 43]
Соединение N‘24 6; Пример В15;
(1В, 48)
Соединение № 111; Пример В17;
[1К(5),45]
Соединение Ν·247; Пример ВИЬ;
Соединение Ν· 112; Пример В17;
ЦН(3),45]
Соединение N24 8; Пример В11Ь;
(1В, 45)
Соединение Ν* 113; Пример В17;
[1К(5),45]
Соединение N249; Пример В11Ь;
(1Н, 45)
- 59 016311
Соединение № 115; Пример В17;
[1Н(5),43]
Соединение №251; Пример В11Ь;
[1В(5),43]
Соединение № 116; Пример В13;
[1К(5),43]
Соединение №252; Пример В19
Соединение № 117; Пример В13;
[1Н(8],43]
Соединение №253; Пример В19;
(1К, 45)
Соединение Ν· 118; Пример В13;
[1К(К},43]
Соединение №254; Пример В17;
(1К, 45)
Соединение Ν’ 119; Пример В13;
[1К(8),43]
Соединение №255; Пример В17;
(1В, 45); т.пл. 133 °С (ВисЬ1 утзиа!)
Соединение № 120; Пример В13;
Соединение №256; Пример В18;
- 60 016311 [1Η(3Ϊ,45] (13, 4К)
Соединение № 121; Пример Β13;
[1Β(3),45]
Соединение №257; Пример В15.Ь
Соединение № 122; Пример В13;
[1В(3),43]
(1К, 43)
Соединение № 123; Пример В13;
[1Н(3),45]
Соединение № 259; Пример В19
Соединение № 124; Пример В13;
[1В(3) , 45]
Соединение №260; Ех. В20а;
т.пл. 179,36 °С ЩЗС)
Соединение № 125; Пример В13;
[1в(3),45]
Соединение №261; Пример В18.Ь;
(13, 4В)
- 61 016311
- 62 016311
Соединение № 131; Пример В17; [1К(3),45}
Соединение №267; Пример В17.Ь;
(1К, 43)
Соединение № 132; Пример В13;
[1К(5),451
Соединение №268; Пример В19
Соединение № 133; Пример В17;
(1В,43)
Соединение №269; Пример В19;
(1В, 43); т.пл. 139,30 ’С (БЗС)
Соединение № 135; Пример В17;
[1В(3),45]
Соединение №270; Пример В19;
т.пл. 176,49 °С (БЗС)
г
Соединение № 136; Пример В17;
[1К(К),43]
Соединение №271; “Пример В19;
200,36 °С (ОЗС)
- 63 016311
I
Таблица Р-1а
г
Соединение № 272;
Пример В21
Соединение №273; Пример В24
о
Соединение № 274; Пример В4
Соединение №275; Пример В25
Соединение № 276; Пример
В21; (1К, 45)
Соединение №277; Пример В23;
(1К, 43)
Соединение № 278; Пример
В22; (1К, 43)
Соединение № 279; Пример В11Ь;
(1В, 43); т.пл.: 167,18°С (ЭЗС)
Соединение №280; Пример
В26; (1К, 43)
- 64 016311
Таблица 2. Промежуточные соединения формулы (XVII), полученные в соответствии со способами экспериментальной части.
Χ-Η^-ΝΗ^
о о
промежуточное соединение (95) промежуточное соединение (ЮЗ)
он
промежуточное соединение (96) промежуточное соединение
(104) ,· (18, 4К)
χώ σ’ό 1
СРз нсг^/ / 0 0
промежуточное соединение (97) промежуточное соединение (105)
- 65 016311
Идентификация соединений
Общий способ А.
ВЭЖХ измерение выполняли с помощью системы АШалсе НТ 2790 (^а1ет8), оборудованной четырехканальным насосом с дегазатором, автоматическим аппликатором образцов, колоночным термостатом (установленным на температуру 40°С, если не указано иное), диодно-матричным детектором (ΌΑΌ) и колонкой, как показано в описании соответствующих способов ниже. После разделения поток с колонки поступал в МБ спектрометр. МБ детектор снабжен с источником электрораспылительной ионизации. Масс спектры снимали при сканировании от 100 до 1000 в 1 с с перерывом, равным 0,1 с. Напряжение на капиллярной игле составляло 3 кВ и температуру поддерживали при 140°С. В качестве распыляющего газа использовали азот. Данные собирали с использованием системы ^а1ет8-М1стота88 МавзЬупхОреп1упх.
Общий способ В.
ЬС измерение выполняли с помощью системы Асс.|ийу ИРЬС (^а1ет8), оборудованной бинарным насосом, органайзером образцов, колоночным нагревателем (установленным на температуру 55°С), диодно-матричным детектором (ΌΑΌ) и колонкой, как показано в описании соответствующих способов ниже. После разделения поток с колонки поступал в МБ спектрометр. МБ детектор снабжен с источником электрораспылительной ионизации. Масс-спектры снимали при сканировании от 100 до 1000 в 1 с с перерывом, равным 0,18 с. Напряжение на капиллярной игле составляло 3,5 кВ и температуру поддерживали при 140°С. В качестве распыляющего газа использовали азот. Данные собирали с использованием системы ^а1ет8-М1стота88 Ма88Ьупх-Ореп1упх.
Общий способ С.
ВЭЖХ измерение выполняли с помощью системы для ЖХВР БЫтайхи 2010, оборудованной насосом, диодно-матричным детектором (ΌΑΌ) (установленным на 200-300 нм) и ЕЬБИ (испарительный детектор светорассеяния), колоночным нагревателем (установленным на температуру 40°С) и колонкой, как показано в описании соответствующих способов ниже. После разделения, поток с колонки поступал в МБ спектрометр.
В качестве стандарта использовали источник АРС.Ч (химическая ионизация при атмосферном давлении) в режимах положительной и отрицательной ионизации (два раздельных процесса). Масс спектры снимали при сканировании от 150 до 500 в 0,7 с с перерывом, равным 0,3 с (возможны другие диапазоны). В типичных настройках параметров использовали зондовый ток в 6,80 мкА для режима положительной ионизации и -13,50 мкА для отрицательной ионизации. Зондовое смещающее напряжения составляло 4,5 кВ для режима положительной ионизации и -4,00 кВ для отрицательной ионизации. Температура АРСЧ зонда равнялась 400°С. Температура СИЬ (Ситуей Иезокайоп Ьте с нагретым капилляром) равнялась 250°С. Напряжение СИЬ равнялось -5 В для режима положительной ионизации и +5 В для режима отрицательной ионизации. Температура нагревательного равнялась 200°С. В качестве распыляющего газа использовали азот (2,50 л/мин).
Для режимов положительной и отрицательной ионизации периодически (в зависимости от типа соединения) использовали электрораспылительную ионизацию. Расход распыляющего газа составлял 4,5 л/мин. В типичных настройках параметров использовали зондовый ток в 4,20 мкА, зондовое смещающее напряжения составляло 4,50 кВ, напряжение СИЬ составляло 25 В и температура СИЬ равнялась 250°С. Температура термостата равнялась 200°С. В типичных настройках параметров использовали зондовый ток в -3,50 мкА, зондовое смещающее напряжения составляло -3,50 кВ, напряжение СИЬ равнялось -25 В и температура СИЬ составляла 250°С.
Способ 1.
В дополнение к общему способу А. ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на колонке Х1егга МБ С18 (3,5 мкм, 4,6x100 мм) при скорости потока, равной 1,6 мл/мин. Три подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 25 мМ ацетат аммония + 5% ацетонитрила; подвижная фаза В: ацетонитрил; подвижная фаза С: метанол) использовали для создания градиентных условий от 100% А до 1% А, 49% В и 50% С в 6,5 мин, до 1% А и 99% В в 1 мин, и поддерживали эти условия в течение 1 мин, и вновь устанавливали равновесие с помощью 100% А в течение 1,5 мин. Объем введения составлял 10 мкл. Напряжение на конусе составляло 10 В для режима положительной ионизации и 20 В для режима отрицательной ионизации.
Способ 2.
В дополнение к общему способу В. ИРЬС с обращенной фазой (жидкостная хроматография сверхвысокого разрешения) осуществляли на колонке со смесью мостиковый этилсилоксан/гибрид силикагеля (ВЕН) С18 (1,7 мкм, 2,1x50 мм \Уа1ег8 ЛссцЩу) со скоростью потока, равной 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 0,1% муравьиная кислота в смеси Н2О/метанол 95/5; подвижная фаза В: метанол) использовали для создания градиентных условий от 95% А и 5% В до 5% А и 95% В в 1,3 мин и поддерживали в течение 0,2 мин. Использовали вводимый объем в 0,5 мл. Напряжение на конусе составляло 10В для режима положительной ионизации и 20В для режима отрицательной ионизации.
Способ 3.
- 66 016311
В дополнение к общему способу А. С обращенной фазой ВЭЖХ выполняли на СЬготоШЬ (4,6x25 мм) со скоростью потока, равной 3 мл/мин. Три подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 25 мМ ацетат аммония + 5% ацетонитрила; подвижная фаза Β: ацетонитрил; подвижная фаза С: метанол) использовали для создания градиентных условий от 96% А, 2% Β и 2% С, до 49% Β и 49% С в 0,9 мин, до 100% Β в 0,3 мин и поддерживали в течение 0,2 мин. Использовали вводимый объем в 2 мл. Напряжение на конусе составляло 10Β для режима положительной ионизации и 20Β для режима отрицательной ионизации.
Способ 4.
В дополнение к общему способу А. ВЭЖХ с обращенной фазой выполняли на СЬготоШЬ (4,6x25 мм) со скоростью потока, равной 3 мл/мин. Три подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 2 5 мМ ацетат аммония + 5% ацетонитрила; подвижная фаза Β: ацетонитрил; подвижная фаза С: метанол) использовали для создания градиентных условий от 100% А, до 50% Β и 50% С в 0,9 мин, до 100% Β в 0,3 мин и поддерживали в течение 0,2 мин. Использовали вводимый объем в 2 мкл. Напряжение на конусе составляло 10Β для режима положительной ионизации и 20Β для режима отрицательной ионизации.
Способ 5.
В дополнение к общему способу А. ВЭЖХ с обращенной фазой выполняли на колонке Х1егга М8 С18 (3,5 мкм, 4,6x100 мм) со скоростью потока, равной 1,2 мл/мин. Три подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 25 мМ ацетат аммония + 5% ацетонитрила; подвижная фаза Β: ацетонитрил; подвижная фаза С: метанол) использовали для создания градиентных условий от 100% А до 50% Β и 50% С в 10 мин, до 100% Β в 1 мин, 100% В в течение 3 мин и вновь устанавливали равновесие с помощью 100% А в течение 1,5 мин. Использовали вводимый объем в 10 мл.
Способ 6.
В дополнение к общему способу А. ВЭЖХ С обращенной фазой выполняли на колонке Х1егга М8 С18 (3,5 мкм, 4,6x100 мм) со скоростью потока, равной 1,6 мл/мин. Три подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 25 мМ ацетат аммония + 5% ацетонитрила; подвижная фаза Β: ацетонитрил; подвижная фаза С: метанол) использовали для создания градиентных условий от 100% А до 50% в и 50% С в 6,5 мин, до 100% Β в 1 мин, 100% Β в течение 1 мин и вновь устанавливали равновесие с помощью 100% А в течение 1,5 мин. Использовали вводимый объем в 10 мл. Напряжение на конусе составляло 10Β для режима положительной ионизации и 20Β для режима отрицательной ионизации.
Способ 7.
В дополнение к общему способу А. ВЭЖХ с обращенной фазой выполняли на колонке Х1егга М8 С18 (3,5 мкм, 4,6x100 мм) со скоростью потока, равной 1,2 мл/мин. Три подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 25 мМ ацетат аммония + 5% ацетонитрила; подвижная фаза Β: ацетонитрил; подвижная фаза С: метанол) использовали для создания градиентных условий от 100% А до 2% А, 49% Β и 49% С в 10 мин, до 1% А и 99% Β в 1 мин и сохраняли эти условия в течение 3 мин и вновь устанавливали равновесие с помощью 100% А в течение 2,5 мин. Использовали вводимый объем в 10 мкл. Напряжение на конусе составляло 10Β для режима положительной ионизации и 20Β для режима отрицательной ионизации. Температура колонки составляла 45°С.
Способ 8.
В дополнение к общему способу С. ВЭЖХ с обращенной фазой выполняли на колонке РНепотепех (Сет1ш 5и С18) (50 ммx4,6 мм) со скоростью потока, равной 1 мл/мин. Использовали две подвижные фазы (подвижная фаза А: 10 мМ ацетат аммония в Η2Ο; подвижная фаза Β: ацетонитрил). Сначала 80% А и 20% Β выдерживали в течение 30 с. Затем применяли линейный градиент до 10% А и 90% Β в течение 3,5 мин. 10% А и 90% Β выдерживали в течение 1 мин и затем 80% А и 20% Β выдерживали в течение 2 мин. Использовали вводимый объем в 1-5 мл.
Способ 9.
В дополнение к общему способу А. ВЭЖХ с обращенной фазой выполняли на колонке Х1егга М8 С18 (3,5 мкм, 4,6x100 мм) со скоростью потока, равной 1,6 мл/мин. Три подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 25 мМ ацетат аммония + 5% ацетонитрила; подвижная фаза Β: ацетонитрил; подвижная фаза С: метанол) использовали для создания градиентных условий от 100% А до 30% А, 35% Β; 35% С в 3 мин до 50% Β и 50% С в 3,5 мин, до 100% Β в 0,5 мин. Использовали вводимый объем в 10 мл. Напряжение на конусе составляло 10Β для режима положительной ионизации.
Таблица 3. Данные анализа.
Когда соединение представляет собой смесь изомеров, которые дают различные пики по методу ЬСМ8, в таблице ЬСМ8 приведено только время удерживания основного компонента (Κί: Время удерживания в минутах).
- 67 016311
Таблица
Соединение № (мн)* МесЪ. Соединение № Кс (МН)* МвЪк.
2 1,36 558 2 43 1, 15 512 2
3 1, 38 572 2 44 1, 15 512 2
4 1,34 524 2 45 5,85 553 1
5 1, 01 510 2 46 5, 85 553 1
6 1,20 654 2 46 1,38 553 2
7 1,25 540 2 47 0, 96 598 4
8 1,38 553 2 48 5,28 598 1
9 1,32 540 2 49 7, 79 557 5
10 1,39 654 2 50 7, 91 557 5
11 1,44 654 2 51 8,22 541 7
12 1,40 523 2 52 6,89 606 7
13 1, 36 523 2 53 8,28 625 7
14 1,22 510 2 54 7,81 563 7
15 0, 96 526 2 55 8,56 543 7
16 1, 16 640 2 56 7,66 528 7
17 6,05 496 1 57 8,06 542 7
1Θ 5, 72 510 1 58 7,44 556 7
19 6,75 667 1 59 7,47 559 7
20 5,76 570 1 60 1,32 527 2
21 5, 98 574 1 61 7,33 543 7
22 5,48 524 1 62 5,86 626 1
23 5, 55 619 1 63 1,15 570 2
24 6, 16 590 1 64 1,15 584 2
26 5,95 541 1 65 0, 96 598 3
27 6,09 527 1 66 5, 96 612 1
28 6,78 641 1 67 5,96 612 1
29 6,22 4 97 1 68 6, 46 640 1
30 6, 19 527 1 69 6, 41 640 1
31 6, 86 641 1 70 6, 6 654 1
32 5,61 511 1 71 5,38 628 1
33 5,61 511 1 72 6,05 684 1
34 5,78 541 1 4- 73 5,88 670 1
34 1,36 541 2 74 6,15 698 1
35 5,78 541 1 75 22 755 1
36 5,91 527 1 76 6, 15 638 1
37 5,21 512 1 77 6, 12 638 1
38 5, 11 540 1 78 5, 2 640 1
39 5,10 540 1 79 6, 38 674 1
40 1,25 512 2 80 6, 43 674 1
41 1, 25 512 2 81 6, 48 688 1
42 5,92 527 1 82 6, 45 683 1
- 68 016311
83 6, 45 652 1 147 5, 66 653 1
84 6,16 652 1 148 5,79 756 1
85 5, 89 704 1 149 5,59 639 1
86 6,31 727 1 150 5, 58 639 1
87 6,32 640 1 152 5,99 675 1
88 6,26 640 1 153 6,06 675 1
89 4,38 584 1 154 6, 12 689 1
90 1,11 584 2 155 6,05 689 1
91 6,28 738 6 157 5,93 728 1
92 3,57 626 6 158 4,73 585 1
93 6, 39 640 1 159 5, 16 613 1
94 6, 52 666 1 160 5,65 627 1
95 6,73 702 I 161 6,02 641 1
96 6, 15 716 6 162 5, 99 641 1
97 4,35 584 1 163 5,86 641 1
98 4,59 610 1 169 1,36 741 2
99 4,23 646 6 179 6,49 717 1
100 4,93 660 1 181 4,89 684 1
101 6, 43 640 1 182 5,05 571 9
102 6, 79 668 1 183 5, 12 585 9
103 6,76 668 1 184 4,83 585 9
104 6,26 682 6 185 4,80 585 9
105 6, 91 712 1 186 5,05 585 9
106 6,79 740 1 187 5, 51 613 9
107 5,03 697 6 188 5,06 613 9
108 6,19 754 6 189 5,35 627 9
109 6, 69 798 1 190 5,00 642 9
110 5,89 666 6 191 5,24 611 9
111 6,75 702 1 192 4, 69 627 9
112 6,78 716 1 193 5,01 647 9
ΐ и г 3Ζ υ 1 УЧ э г ъи Ό4 ί У
114 6,60 755 1 195 5,74 661 9
115 4,94 683 6 196 5,24 661 9
116 4,49 584 1 197 4,9 677 9
117 4,92 612 1 198 4,89 628 9
118 4, 66 612 1 199 1,27 62 6 2
119 5, 19 626 1 200 6,82 62 6 9
120 4,71 656 6 201 6,24 612 9
121 3, 66 628 1 202 6,44 626 9
122 3, 69 642 1 203 7,2 654 9
123 4, 56 610 1 204 6, 61 626 9
124 4,99 646 1 205 6, 63 640 9
125 5, 19 660 1 206 6,85 654 9
126 4,49 676 1 207 6,83 640 9
127 4,99 699 1 208 7,29 668 9
128 3,57 627 6 209 7,34 682 9
129 1,22 612 2 210 7,03 769 9
130 1,16 697 2 211 6,84 741 9
131 1,19 711 2 212 6,81 755 9
132 0, 94 641 2 213 7,26 769 9
133 5,05 599 1 214 6,22 697 9
135 5,46 613 1 215 6,88 755 9
136 5, 39 613 1 216 7,05 769 9
138 4,82 599 1 217 6,65 741 9
139 6, 08 641 1 218 7,15 755 9
140 5,99 641 1 219 6,87 741 9
141 6,23 655 1 220 7,09 755 9
142 4, 68 629 1 221 7,05 769 9
143 5,58 685 1 222 6,38 627 9
144 6, 02 653 1 223 6,34 627 9
146 5, 69 699 1 224 5,80 613 9
- 69 016311
225 6, 02 627 9 253 6,20 . 542 1
226 6,71 655 9 254 5,35 599 1
227 б, 45 655 9 255 4,54 585 1
228 6,32 641 9 256 0,90 598 3
229 6, 59 569 9 257 5,97 626 1
230 6, 83 683 9 258 0,78 585 3
231 6,85 770 9 259 1,09 541 2
232 6,18 742 9 260 1, 37 610 2
233 6, 36 756 9 261 1,26 627 2
234 6, 37 756 9 262 1,16 599 2
235 6,77 770 9 263 1, 18 653 2
236 5,59 698 9 264 6, 32 608 1
2 37 6, 41 756 9 265 6, 30 554 1
238 6, 05 728 9 266 6, 29 554 1
239 6, 3 742 9 267 1,08 641 3
240 6, 41 742 9 268 1,06 609 2
241 6,41 756 9 269 1,08 621 2
242 6, 64 770 9 270 1,30 555 2
244 5,30 554 6 271 1,34 577 2
245 5, 31 554 6 272 5, 19 666 1
246 1, 35 668 2 273 1, 38 577 2
247 1,36 726 2 274 1,42 570 2
248 1,35 726 2 275 1,46 782 2
249 1,29 640 2 276 1, 03 694 2
250 1,28 640 2 277 1,00 695 2
251 4,70 769 8 279 5,77 626 1
252 6, 24 596 1 280 1,29 627 2
Оптическое вращение
Оптическое вращение измеряли, используя поляриметр Регкш Е1тег 341. [а]с 20 указывало, что оптическое вращение измеряли в свете длины волны Ό-линии натрия (58 9 нм) при температуре 20°С. Размер кюветы 1 дм. Указаны действительное значение концентрации и растворитель в растворе, который использовали для измерения оптического вращения.
Таблица
Соединение № ί«1η2° Концентрация Растворитель
32 -30,79° 25,17 мг/5 мл ЕЮН
33 +29,84° 24,46 мг/5 мл ЕЮН
34 -28,21° 25,35 мг/5 мл ЕЮН
..............’........7 35 .......... ........ +27,70°........ 25,27 мг/5 мл ....... ЕЮН..................
36 -26,91° 24, 90 мг/5 мл ДМФ
38 +13,82° 25,68 мг/5 мл ЕЮН
39 -13,80° 25,36 мг/5 мл ЕЮН
................4 0................” +68,8° 24,20 мг/5 мл ЕЮН
........'...............41........................ ............-67,30°................ 24,07 мг/5 мл ...........ЕЮН
42 +27,24° 24,96 мг/5 мл ДМФ
- 70 016311
45 -31,12° 14,62 мг/5 мп МеОН
46 +31,63° 9,80 мг/5 мл ЕЪОН
47 -12,85° 22,96 мг/5 мл ДМФ
48 +12,26° 23,65 мг/5 мл ДМФ
62 -14,13° 20,52 мг/5 мл ДМФ
65 -15,29° 7,52 мг/5 мл МеОН
.... ... „ . . _ ..... .....
90 -12,66° 10,67 мг/5 мл МеОН
199 -16,30° 8,28 мг/5 мл МеОН
208 -19,29° 19,96 мг/5 мл МеОН
213 -28,33° 12,00 мг /5 мл МеОН
244 -37,55° 26,10 мг/5 мл МеОН
246 -20,81° 10,57 мг/5 мл МеОН
247 -33,40° 10,78 мг/5 мл МеОН
248 -33,89° 13,28 мг/5 мл МеОН
249 -21,64° 11,32 мг/5 мл МеОН
250 -20,72° 14,24 мг/5 мл МеОН
253 -27,74° 6,67 мг/5 мл ЕПОН
254 -64,08° 6, 32 мг/5 мл МеОН
255 -20,18° 5, 45 мг/5 мл МеОН
256 +14,93° 19,09 мг/5 мл МеОН
257 +14,89° 7,05 мг/5 мл МеОН
258 -7,40° 58,10 мг/5 мл СНС13
261 +15,60° 14,74 мг/5 мл МеОН
2 62 +12,55° 10,76 мг/5 мл МеОН
265 +31,68° 12,94 мг/5 мл МеОН
266 -34,09° 8,80 мг/5 мл МеОН
269 -25,49° 46,10 мг/5 мл МеОН
276 -11,82° 12,27 мг/5т1 МеОН
277 -13,12° 10,67 мг/5 мл МеОН
279 -15,70° 23,25 мг/5 мл ДМФ
280 -16,36° 6,42 мг/5 мл МеОН
8ЕС-М8
Некоторые соединения подвергали анализу 8РС-М8 (сверхкритическая флюидная хроматографиямасс спектрометрия) с помощью аналитической системы 8РС от фирмы Вегдег [пЦгишепЦ (Ыетеагк, ΌΕ, И8А), содержащей двойной насосный контрольный модуль (РСМ-1200) для удаления диоксида углерода (СО2) и модификатор, термический контрольный модуль для нагревания колонок (ТСМ2100) с контролем температуры в области 1-150°С и отборочные клапаны на колонках (Уа1со, УЮ, Ноик!оп, ТХ, И8А) для шести различных колонках. Фотодиодный определитель площади (АдПеп! 1100, ^а1бЬгопп, Сегтапу) был снабжен ячейками для потока высокого давления (до 400 бар) и объединен с СТС ЬС мини РАЬ авто образцом (Беар ТесЬпо1од1ек, СаггЬого, N0, И8А). Масс спектрометр ΖΡ (^а!егк, МПГогб, МА, И8А) с ортогональной Ζ-электрораспылительной поверхностью был соединен с 8РС-системой. Инструментальный контроль, данные отбора и способа осуществляли с помощью внутренней платформы, включающей программное обеспечение 8РС РгоХТо и программное обеспечение Макк1упх.
В случае соединения № (44) было определено очень небольшое количество (0,01%) второго изомера, когда 8РС-М8 проводили на колонке СЫга1рак АЭ-Н (500x4,6 мм) (Па1се1 Скет1са1 Ми^пек Ь!б) со скоростью потока 3 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: СО2; подвижная фаза В: 2пропанол, содержащий 0,2% 2-пропиламина) использовали для создания условий от 40% В (выдержан в течение 19,5 мин) до 50% В в 1 мин и выдерживали в течение 4,10 мин. Температура колонки была 50°С.
В случае соединения № (279) было определено очень небольшое количество (0,1%) второго изомера, когда 8РС-М8 проводили на колонке СЫга1се1 О1-Н (500x4,6 мм) (Па1се1 СЬетка1 ШбикМек Ь!б) со скоростью потока 3 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: СО2; подвижная фаза В: метанол, содержащий 0,2% 2-пропиламина) использовали для создания условий от 10% В до 40% В в 18,75 мин.
- 71 016311
Затем использовали градиент от 40% В до 50% В в течение 2 мин и выдерживали в течение 3,6 мин.
В случае соединения № (280) был обнаружен энантиомерный избыток в 100%, когда скрининг осуществляли на 4 различных колонках (СЫга1се1 Об-Н, СЫга1рак АО-Н, СЫга1се1 ОЭ-Н, СЫга1рак А8-Н; 500x4,6 мм; Эа1се1 Скет1са1 Шби^пек Ь1б) и с 3 различными растворителями (МеОН, ΕΏ^ 2-пропанол; растворитель, содержащий 0,2% 2-пропиламина.
8ЕС-М8 осуществляли на колонках, указанных выше, со скоростью потока 3 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: СО2; подвижная фаза В: один из растворителей, указанных выше, содержащий 0,2% 2-пропиламина) использовали для создания условий от 10% В до 40% В в течение 18,75 мин. Затем использовали градиент от 40% В до 50% В в течение 2 мин и выдерживали в течение 3,6 мин. Температура колонки была 50°С.
С. Фармакологические примеры.
С.1. Количественное определение секреции АпоВ.
Клетки НерС2 культивировали в 24-луночных планшетах в среде МБМ Веда 3, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки. При 70%-ном слиянии, среду меняли и вносили тестируемое соединение или носитель (ДМСО, конечная концентрация 0,4%). Через 24 ч инкубации среду переносили в пробирки Эппендорфа и осветляли центрифугированием. В супернатант добавляли овечьи антитела против апоВ и смесь выдерживали при 8°С в течение 24 ч. Затем вносили кроличьи анти-овечьи антитела и иммунному комплексу давали возможность осадиться в течение 24 ч при 8°С. Иммунопреципитат осаждали центрифугированием в течение 25 мин при 1320 г и дважды промывали буфером, содержащим 40 мМ Моря, 40 мМ NаН2ΡО4, 100 мМ ΝηΕ, 0, 2 мМ ΌΤΤ, 5 мМ ЭДТА, 5 мМ ЭГТА, 1% Тритона-Х-100, 0,5% дезоксихолата натрия (ЭОС), 0,1% 8Ό8, 0,2 мкМ лейпептина и 0,2 мкМ РМ8Е. Проводили количественное определение радиоактивности осадка с помощью жидкостной сцинтилляции. Для простоты использования, значения ^50 как правило, преобразовывали в значения рIС50 (= -1од значение ГС^о).
Таблица 4. Значения рIС50
Соединение № Р1С5О Соединение № Р1С5О Соединение Ν’ р1Сьо
1 5, 735 57 7,157 200 6, 594
2 7, 128 58 8,691 201 <6
3 7, 094 59 6, 648 202 6, 101
4 6, 643 61 6,544 203 7, 523
5 5,718 62 7,376 204 <6
6 7, 691 63 <5 205 7, 122
7 8, 642 64 7,75 206 7,373
8 8,188 65 8,098 207 <6
10 8,732 66 <6 208 7,239
11 <7 67 6,059 209 <6
13 7,541 68 <6 210 8,062
14 6, 194 69 6,813 211 7, 019
15 6,731 70 <6 212 7, 652
16 7, 824 72 <6 213 8,229
19 8, 121 73 <6 214 < 6
20 7, 641 74 <6 215 7,736
21 7,559 75 7,695 216 7,507
22 6, 811 79 6,894 217 6,591
23 6, 635 80 6,261 218 7,187
24 6, 695 81 <6 219 6,523
25 7, 824 82 6,539 220 7,676
26 8,196 83 6, 174 221 6,87
27 6, 109 84 <6 222 <6
28 6, 483 85 <6 225 <6
32 8,124 86 6, 185 226 <6
33 <6 88 7,687 229 <6
34 8, 421 90 <6 231 <6
35 5,27 96 6,291 233 <6
36 7,932 102 6, 775 235 <6
39 8, 504 103 6,418 246 6, 631
40 7,151 104 6,767 247 6, 418
- 72 016311
41 7,446 105 6, 567 248 6, 736
42 6 106 6, 733 249 6, 232
43 6,574 107 <6 250 6, 465
44 6, 975 108 7, 126 252 8,454
45 8,58 109 8,558 253 8,49
46 6, 649 110 6, 61 254 7,768
47 7,565 112 6,866 255 <6
48 5,01 121 <6 256 <6
49 6,195 129 8,361 257 <6
50 7,793 138 <6 258 <6
51 8,022 148 <6 260 8,198
53 7,209 159 <6 261 <6
54 7,182 164 <6 262 <6
55 <6 172 <6 263 7,191
56 8, 65 199 8,133 266 8,691
272 6,174 275 <6 279 7,851
273 6 276 7,124 280 8,418
274 7,761 277 6, 966
С.2. Тест МТР.
Активность МТР определяли с использованием теста, аналогичного описанному 1.В. ОТеПеган апб
Э.В. 211уегкшй ίη СйешШгу и Рйуыск о£ Ыр1бк, 38, 205-222 (1985). Для приготовления донорных и акцепторных везикул соответствующие липиды в хлороформе помещали в стеклянную пробирку и высушивали в струе азота. К высушенным липидам добавляли буфер, содержащий 15 мМ Трис-НС1 рН 7,5, 1 мМ ЭДТА, 40 мМ №С1, 0,02% NаNз (аналитический буфер). Смесь быстро перемешивали на Вортексе и затем липидам давали возможность гидратироваться в течение 20 мин на льду. Затем получали визикулы обработкой на ультразвуковой бане (Вгапкоп 2200) при комнатной температуре максимум в течение 15 мин. Во все везикулярные препараты включали бутилированный гидрокситолуол в концентрации 0,1%. Смесь для исследования переноса липидов содержала донорные везикулы (40 нмоль фосфатидилхолина, 7,5 мол.% кардиолипина и 0,25 мол.% глицерин три [1-14С] олеата), акцепторные везикулы (240 нмоль фосфатидилхолина) и 5 мг В8А в общем объеме 675 мкл в микроцентрифужной пробирке емкостью 1,5 мл. Вносили тестируемые соединения, растворенные в ДМСО (0,13% конечная концентрация). После предварительного инкубирования в течение 5 мин при 37°С, реакцию начинали добавлением МТР в 100 мкл буфера для диализа. Реакцию останавливали добавлением 400 мкл ЭЕАЕ-52 целлюлозы, предварительно уравновешенной в 15 мМ Трис-НС1 рН 7,5, 1 мМ ЕЭТА, 0,02% NаNз (1:1, об./об.). Смесь перемешивали в течение 4 мин и центрифугировали в течение 2 мин с максимальной скоростью в центрифужных пробирках Эппендорфа (4°С) для осаждения ПЕАЕ-52-связанных донорных везикул. Анализировали аликвотную порцию супернатанта, содержащего акцепторные липосомы и значения [14С]-импульсов использовали для подсчета процентной величины переноса триглицеридов от донорных в акцепторные везикулы.
Таблица 5. Значения рКА,
- 73 016311
21 8,007 109 8, 614 196 <5
22 7,539 110 <7 197 <5
23 7,22 111 6, 659 198 <5
24 7,261 112 7,745 199 8,879
25 8,415 113 6, 789 200 8,168
26 8,716 114 6, 692 201 8,11
27 7,186 115 6,521 202 8,501
28 <7 116 5, 075 203 8,689
29 5,476 117 5, 323 204 7,231
30 6, 221 118 6, 052 205 8,264
31 6, 459 119 <5 206 8,528
32 8,721 120 <5 207 8,586
33 <6 121 <5 208 8,731
34 8, 934 122 5, 323 209 7,441
35 5, 767 123 5,418 210 9,53
36 8,46 124 <5 211 8,215
37 5, 106 125 5,065 212 8,363
38 5, 418 126 5,208 213 8,509
39 8,523 127 <5 214 7,572
40 <5 128 <5 215 8,534
41 <5 129 8,752 216 8,174
42 <5 130 6, 582 217 8,085
43 7,044 131 7,341 218 8,618
44 <6 132 6, 45 219 8,373
47 8, 625 133 6, 099 220 8,731
48 7,875 135 5,872 221 8,75
49 7,743 136 5,963 222 7,339
50 7,934 137 6, 324 223 5,748
51 7, 892 138 6,225 224 5,943
52 6,203 139 6,083 225 <7
53 8,016 140 5,962 226 6, 955
54 7,985 141 5,731 227 6, 643
55 7,217 142 <5 228 6, 513
56 8,773 143 5,716 229 8, 121
- 74 016311
57 8,246 144 5,417 230 6,77
58 6,826 145 5,269 231 <7
59 <7 146 6, 11 232 5,477
60 8, 601 147 5 233 6, 931
61 <5 148 6,883 234 <5
62 9, 147 149 <5 235 6, 963
63 <6 150 <5 236 5,574
64 8,412 151 <5 237 6, 631
65 8,543 152 5,787 238 5,633
66 7,694 153 5,954 239 6, 192
67 7,694 154 5,733 240 6, 543
68 7,747 155 6, 136 241 6, 614
69 7,612 156 5, 814 242 5, 627
70 7,452 157 5,782 246 8,412
71 6,307 158 6, 072 247 8,225
72 7,972 159 6,89 248 8,18
73 <7 160 6, 437 249 8,579
74 8,294 161 6,339 250 8,747
75 8,649 162 5,748 252 8, 604
76 6, 487 163 5,84 253 9,007
77 6, 664 164 7, 186 254 8,523
78 5,418 165 6,296 255 6,233
79 7, 477 166 6, 122 256 <6
80 7, 154 167 6,101 257 <6
81 7, 901 168 6, 157 258 5,745
82 7,89 169 5,757 259 7,2
83 7,146 170 <5 260 8,439
84 6, 643 171 6,379 261 6, 121
85 <7 172 7,474 2 62 <6
86 7, 177 173 5,482 263 7,805
87 7, 931 174 5,564 266 9,015
88 8, 667 175 5,429 268 7,838
89 6 176 5,726 269 8,073
90 5, 671 177 5, 79 270 7,851
91 <7 178 5,827 271 8,532
272 7,293 275 <6 279 8,824
273 6,782 276 8,457 280 9, 086
274 8, 329 277 7,944
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims (15)

1. Соединение формулы (I) его фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот, Ν-оксиды и стереохимически изомерные формы, где
X представляет собой N или СН; когда X представляет собой СН, тогда А2 представляет собой -ΝΚ6-, где Я6 представляет собой водород или С1-4алкил, или, когда X представляет собой Ν, тогда А2 отсутствует;
А1 представляет собой -(С=О)- или -СН2- ;
Я1 представляет собой NЯ7Я8, где каждый Я7 и Я8 независимо выбраны из водорода;
С1-8алкила;
- 75 016311
С1-8алкила, замещенного одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо от другого выбран из гидрокси, С1-4алкилокси, С1-4алкилоксикарбонила, гидроксикарбонила, ΝΚ10Κ1!, СОХЯ12Я13, арила или гетероарила; где гетероарил представляет собой индолил;
или арила;
или К1 представляет собой ΝΚ7Κ8, где Я7 и Я8 вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют пирролидинильное или пиперидинильное кольца, где каждое из этих колец может необязательно быть замещено одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, С1-4алкилокси, гидрокси, гидроксикарбонила или С1-4алкилоксикарбонила;
или Я1 представляет собой ОЯ9, где Я9 представляет собой С1-6алкил или С3-8алкенил;
Я10 представляет собой водород, С1-4алкил, С1-4алкилкарбонил, С1-4алкилоксикарбонил или Я12-ЯНкарбонил;
Я11 представляет собой водород;
Я12 представляет собой водород;
Я13 представляет собой водород;
Я4 представляет собой фенил; или фенил, замещенный 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, галогена, гидрокси, С1-4алкилокси, полигалогенС1-4алкилокси, сульфамоила, фенила, замещенного трифторметилом, или гетероциклической группы, где указанная гетероциклическая группа представляет собой морфолинил или пиперазинил, замещенный С1-4алкилом; или
Я4 представляет собой гетероарил, где указанный гетероарил представляет собой пиридинил или пиридазинил, необязательно замещенные одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, гидрокси, С1-4алкилокси или оксо;
Я5 представляет собой водород или С1-4алкилокси; и арил представляет собой фенил; или фенил, замещенный заместителями в количестве от одного до двух, каждый из которых независимо выбран из С1-4алкила, С1-4алкилокси, галогена или гидрокси.
2. Соединение по п.1, где А1 представляет собой -(С=О)-.
3. Соединение по п.1, где А1 представляет собой -СН2-.
4. Соединение по п.1, где Я1 представляет собой ХЯ7Я8.
5. Соединение по п.1, где Я1 представляет собой ОЯ9.
6. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и терапевтически активное количество соединения по любому из пп.1-5.
7. Способ получения фармацевтической композиции по п.6, где терапевтически активное количество соединения по любому из пп.1-5 непосредственно смешано с фармацевтически приемлемым носителем.
8. Применение соединения по любому из пп.1-5 в качестве лекарственного средства.
9. Промежуточное соединение формулы (XVII) или его фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот, Ν-оксиды и стереохимически изомерные формы, где заместители Я4, Я5, А1, А2 и X являются такими, как определено в п.1
10. Способ получения соединения формулы (I), заключающийся во взаимодействии промежуточного соединения формулы (II), где представляет собой соответствующую удаляемую группу, с промежуточным соединением формулы (III) в инертном растворителе и, необязательно, в присутствии подходящего основания, с получением соединения формулы (Яа), представляющего собой соединение формулы (I), где А1 представляет собой -СН2-;
и н н н
- 76 016311
11. Способ получения соединения формулы (I), заключающийся во взаимодействии промежуточного соединения формулы (IV) с промежуточным соединением формулы (V) в инертном растворителе и, необязательно, в присутствии подходящего связующего реагента и/или подходящего основания, с получением соединения формулы (СЬ), представляющего собой соединение формулы (I), где А1 представляет собой -(С=О)-;
12. Способ получения соединения формулы (I), заключающийся в преобразовании соединения формулы (XVII), определенного в п.9, в соединение формулы (Ι-с), представляющего собой соединение формулы (I), где К1 представляет собой ΝΚ7Κ8, Ν-алкилированием, с использованием Н-ΝΚ’Κ8 в качестве реагента;
13. Способ получения соединения формулы (XVII) или его фармацевтически приемлемых солей присоединения кислот, Ν-оксидов и стереохимически изомерных форм, определенных в п.9, заключающийся в преобразовании соединения формулы (I), где К1 представляет собой ОК9, и К9 представляет собой С1-6алкил, путем гидролиза в кислотных условиях.
14. Способ получения соединения формулы (XVII) или его фармацевтически приемлемых солей присоединения кислот, Ν-оксидов и стереохимически изомерных форм, определенных в п.9, заключающийся в преобразовании соединения формулы (I), где К1 представляет собой ОК9, и К9 представляет собой С3-8алкенил, восстановлением натрийборгидридом в присутствии тетракис(трифенилфосфин)палла дия в подходящем растворителе.
15. Способ получения соединения формулы (XVII) или его фармацевтически приемлемых солей присоединения кислот, Ν-оксидов и стереохимически изомерных форм, определенных в п.9, заключающийся в преобразовании соединения формулы (I), где К1 представляет собой ОК9, и К9 представляет собой защитную группу, способами удаления защитных групп.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ
Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
EA200970398A 2006-10-24 2007-10-22 Производные пиперидин- или пиперазинзамещенной тетрагидронафталин 1-карбоновой кислоты, ингибирующие мтр EA016311B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP06122817 2006-10-24
PCT/EP2007/061286 WO2008049806A1 (en) 2006-10-24 2007-10-22 Piperidine or piperazine substituted tetrahydro-naphthalene-1-carboxylic acid mtp inhibiting compounds

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200970398A1 EA200970398A1 (ru) 2009-08-28
EA016311B1 true EA016311B1 (ru) 2012-04-30

Family

ID=37885794

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200970398A EA016311B1 (ru) 2006-10-24 2007-10-22 Производные пиперидин- или пиперазинзамещенной тетрагидронафталин 1-карбоновой кислоты, ингибирующие мтр

Country Status (28)

Country Link
US (1) US8114880B2 (ru)
EP (1) EP2076494B1 (ru)
JP (1) JP5506085B2 (ru)
KR (1) KR101415536B1 (ru)
CN (1) CN101528695B (ru)
AR (1) AR063517A1 (ru)
AT (1) ATE475648T1 (ru)
AU (1) AU2007310925B2 (ru)
BR (1) BRPI0717357A2 (ru)
CA (1) CA2664141C (ru)
CL (1) CL2007003042A1 (ru)
CY (1) CY1111010T1 (ru)
DE (1) DE602007008124D1 (ru)
DK (1) DK2076494T3 (ru)
EA (1) EA016311B1 (ru)
HK (1) HK1136823A1 (ru)
IL (1) IL198332A (ru)
JO (1) JO2653B1 (ru)
MX (1) MX2009004386A (ru)
NO (1) NO20092005L (ru)
NZ (1) NZ575615A (ru)
PL (1) PL2076494T3 (ru)
PT (1) PT2076494E (ru)
SI (1) SI2076494T1 (ru)
TW (1) TWI396688B (ru)
UA (1) UA99109C2 (ru)
WO (1) WO2008049806A1 (ru)
ZA (1) ZA200902822B (ru)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0211230D0 (en) 2002-05-16 2002-06-26 Medinnova Sf Treatment of heart failure
ES2346014T3 (es) * 2006-10-24 2010-10-07 Janssen Pharmaceutica Nv Derivados del acido tetrahidro-naftaleno-1-carboxilico inhibidores de mtp.
EP2025674A1 (de) 2007-08-15 2009-02-18 sanofi-aventis Substituierte Tetrahydronaphthaline, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
WO2011157827A1 (de) 2010-06-18 2011-12-22 Sanofi Azolopyridin-3-on-derivate als inhibitoren von lipasen und phospholipasen
NO2629776T3 (ru) 2010-10-18 2018-01-13
PE20160122A1 (es) 2013-03-13 2016-02-12 Forma Therapeutics Inc Compuestos nobles y composiciones para la inhibicion de fasn
EP3484528B1 (en) 2016-07-18 2020-11-25 Janssen Pharmaceutica NV Tau pet imaging ligands
CN111902393B (zh) * 2018-05-15 2023-11-10 旭化成株式会社 氨基酸氨基烷基酯或其无机酸盐的制造方法
TWI767148B (zh) 2018-10-10 2022-06-11 美商弗瑪治療公司 抑制脂肪酸合成酶(fasn)
CN113382633A (zh) 2018-10-29 2021-09-10 福马治疗股份有限公司 (4-(2-氟-4-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)(1-羟基环丙基)甲酮的固体形式
WO2024006701A1 (en) * 2022-06-28 2024-01-04 Stepan Company Method for making dialkyl amino acid ester sulfonates

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996040640A1 (en) * 1995-06-07 1996-12-19 Pfizer Inc. BIPHENYL-2-CARBOXYLIC ACID-TETRAHYDRO-ISOQUINOLIN-6-YL AMIDE DERIVATIVES, THEIR PREPARATION AND THEIR USE AS INHIBITORS OF MICROSOMAL TRIGLYCERIDE TRANSFER PROTEIN AND/OR APOLIPOPROTEIN B (Apo B) SECRETION
US5712279A (en) * 1995-02-21 1998-01-27 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of microsomal triglyceride transfer protein and method
WO2001047899A1 (de) * 1999-12-27 2001-07-05 Boehringer Ingelheim Pharma Kg Substituierte piperazinderivateals inhibitoren des mtp
WO2001092241A1 (en) * 2000-06-01 2001-12-06 Glaxo Group Limited Benzamide derivatives and their use as apob-100 and mtp inhibitors
WO2002042291A1 (en) * 2000-11-23 2002-05-30 Merck Patent Gmbh 4-(biphenylcarbonylamino)piperidine derivatives as mtp inhibitors

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5595872A (en) 1992-03-06 1997-01-21 Bristol-Myers Squibb Company Nucleic acids encoding microsomal trigyceride transfer protein
SK65499A3 (en) 1996-11-27 2001-05-10 Pfizer Apo b-secretion/mtp inhibitory amides
GB9826412D0 (en) 1998-12-03 1999-01-27 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
ES2346014T3 (es) 2006-10-24 2010-10-07 Janssen Pharmaceutica Nv Derivados del acido tetrahidro-naftaleno-1-carboxilico inhibidores de mtp.

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5712279A (en) * 1995-02-21 1998-01-27 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of microsomal triglyceride transfer protein and method
WO1996040640A1 (en) * 1995-06-07 1996-12-19 Pfizer Inc. BIPHENYL-2-CARBOXYLIC ACID-TETRAHYDRO-ISOQUINOLIN-6-YL AMIDE DERIVATIVES, THEIR PREPARATION AND THEIR USE AS INHIBITORS OF MICROSOMAL TRIGLYCERIDE TRANSFER PROTEIN AND/OR APOLIPOPROTEIN B (Apo B) SECRETION
WO2001047899A1 (de) * 1999-12-27 2001-07-05 Boehringer Ingelheim Pharma Kg Substituierte piperazinderivateals inhibitoren des mtp
WO2001092241A1 (en) * 2000-06-01 2001-12-06 Glaxo Group Limited Benzamide derivatives and their use as apob-100 and mtp inhibitors
WO2002042291A1 (en) * 2000-11-23 2002-05-30 Merck Patent Gmbh 4-(biphenylcarbonylamino)piperidine derivatives as mtp inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
HK1136823A1 (en) 2010-07-09
AR063517A1 (es) 2009-01-28
EA200970398A1 (ru) 2009-08-28
CN101528695A (zh) 2009-09-09
AU2007310925A1 (en) 2008-05-02
NO20092005L (no) 2009-06-04
CA2664141C (en) 2015-04-28
CN101528695B (zh) 2013-07-17
EP2076494B1 (en) 2010-07-28
EP2076494A1 (en) 2009-07-08
CY1111010T1 (el) 2015-06-11
ATE475648T1 (de) 2010-08-15
MX2009004386A (es) 2009-05-08
US8114880B2 (en) 2012-02-14
KR101415536B1 (ko) 2014-07-16
IL198332A (en) 2012-08-30
TW200833680A (en) 2008-08-16
CA2664141A1 (en) 2008-05-02
TWI396688B (zh) 2013-05-21
CL2007003042A1 (es) 2008-05-02
JP5506085B2 (ja) 2014-05-28
PL2076494T3 (pl) 2011-01-31
KR20090075832A (ko) 2009-07-09
BRPI0717357A2 (pt) 2013-10-22
ZA200902822B (en) 2010-07-28
JO2653B1 (en) 2012-06-17
UA99109C2 (ru) 2012-07-25
SI2076494T1 (sl) 2010-11-30
NZ575615A (en) 2011-01-28
AU2007310925B2 (en) 2012-07-26
DE602007008124D1 (de) 2010-09-09
PT2076494E (pt) 2010-10-18
US20090325980A1 (en) 2009-12-31
IL198332A0 (en) 2010-02-17
DK2076494T3 (da) 2010-11-08
WO2008049806A1 (en) 2008-05-02
JP2010507615A (ja) 2010-03-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA016311B1 (ru) Производные пиперидин- или пиперазинзамещенной тетрагидронафталин 1-карбоновой кислоты, ингибирующие мтр
EP3263565A1 (en) Cyclic amine derivative and pharmaceutical use thereof
EP1379515B1 (en) Lipid lowering biphenylcarboxamides
EA008061B1 (ru) N-арилпиперидинзамещенные бифенилкарбоксамиды в качестве ингибиторов секреции аполипопротеина b
PL205290B1 (pl) Pochodna bifenylokarboksyamidu, jej zastosowanie i sposób wytwarzania oraz kompozycja farmaceutyczna
EA033826B1 (ru) Производные фториндола в качестве положительных аллостерических модуляторов мускаринового рецептора m1
JP4790626B2 (ja) Ｎ−アリールピペリジン置換ビフェニルカルボキサアミド
EA017376B1 (ru) Производные тетрагидронафталин-1-карбоновой кислоты, ингибирующие мтр
KR20220118484A (ko) Oga 억제제 화합물
MXPA06006507A (en) N-aryl piperidine substituted biphenylcarboxamides as inhibitors of apolipoprote in b

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU