EA007844B1

EA007844B1 - Применение ферментированного экстракта проростков пшеницы в качестве противовоспалительного агента

Info

Publication number: EA007844B1
Application number: EA200500326A
Authority: EA
Inventors: Мате Хидвеги; Акош Решетар
Original assignee: Мате Хидвеги; Акош Решетар
Priority date: 2002-08-09
Filing date: 2003-08-08
Publication date: 2007-02-27
Also published as: NO20051168L; WO2004014406A1; CA2494744A1; HRP20050114A2; KR20050059066A; HUP0202638A3; AU2003255854A1; HU0202638D0; EA200500326A1; HUP0202638A2; CN1674924A; IL166732A0; EP1536809A1; MXPA05001469A; PL375391A1; BR0313589A; JP2006501214A

Abstract

Настоящее изобретение относится к новому применению ферментированного экстракта проростков пшеницы под товарным наименованием Avemar®, более конкретно, к применению Avemar® для изготовления лекарственного средства, пригодного в качестве противовоспалительного агента для профилактики или лечения, или облегчения воспалительных состояний, особенно артрита.

Description

Настоящее изобретение относится к новому терапевтическому применению ферментированного экстракта проростков пшеницы под товарным наименованием Луешат®, более конкретно, к применению Луешат® для изготовления фармацевтических композиций, пригодных в качестве противовоспалительного агента для профилактики, или лечения, или облегчения воспалительных состояний, особенно артрита.

Способ изготовления, а также иммуностимулирующий и антиметастатический эффекты ферментированного экстракта проростков пшеницы (далее упоминается как Луешат®) описаны в ^099/08694. Это вещество можно получить ферментированием проростков пшеницы с помощью 8ассйагошусе5 сегеуыае в водной среде и сушкой профильтрованного водного фермента. Полученное вещество характеризуется содержанием 2,6-диметокси-п-бензохинона, представляющего приблизительно 0,4 мг/г сухого вещества.

Неожиданно в ходе исследований авторами было установлено, что Луешат® можно применять для лечения или профилактики воспалительных заболеваний, особенно ревматоидного артрита, наблюдающегося у млекопитающих, включая людей.

Артрит представляет собой общее название для ряда артритических заболеваний, таких как ревматоидный артрит, бактериальный артрит и т.п. Ревматоидный артрит включает большую группу небактериальных состояний, наиболее важными симптомами которых являются воспаление и деформация суставов. В большинстве случаев классический ревматоидный артрит поражает ряд суставов (полиартрит), но он также может ограничиваться единственным суставом (моноартрит). Поражение суставного хряща представляет собой только один из факторов, деформирующих многочисленные хрящи и кости и разрушающих функцию сустава. Это заболевание поражает оболочку, связки сустава, а также костную ткань. В большинстве случаев заболевание характеризуется меняющимся течением, включая периоды обострения и улучшения, сопровождающими пациента на протяжении всей его жизни; однако, деформация суставов и общая инвалидность непрерывно ухудшаются. Только около 10% пациентов спонтанно выздоравливают.

Превалирующие способы лечения направлены на облегчение боли и уменьшение симптомов; в настоящее время не существует лечения, ведущего к полному выздоровлению от данного заболевания. В большинстве известных способов лечения применяются противовоспалительные агенты, такие как стероиды (преднизолон, дексаметазон), нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (Ν8ΑΙΌ) и противоревматические лекарственные средства, действующие на заболевание (ΌΜΛΚΌ). Группа Ν8ΑΙΌ включает салицилаты, ибупрофен, фенопрофен, напроксен, пироксикам, толметин, индометацин и другие, например, ингибиторы фермента циклооксигеназы. Указанные химиотерапевтические агенты характеризуются низкой эффективностью и высокой токсичностью.

Группы ΌΜΑΚΌ или 8ΑΛΚ. (противоревматические лекарственные средства с пролонгированным эффектом) включают Ό-пенициллинамин, соли золота, хлорохин, азатиоприн, метотрексат и циклофосфамид. С учетом их высокой токсичности эти лекарственные средства профессионалы обычно выбирают только во вторую очередь, когда реакция пациента на Ν8ΑΙΌ является менее благоприятной. Данные агенты обычно применяют в комбинации с Ν8ΑΙΌ.

Недавно нестероидные противовоспалительные агенты также были разработаны для лечения ревматоидного артрита, включая антагонисты гамма-интерферона и интерлейкина-6, циклоспорин, антагонисты ΡΑΓ, эйкозапентаноевую кислоту (ЕРА), аналоги соматостатина, пептидные производные и иммуномодуляторы.

В Венгерском патенте № 203044 описан фармацевтический препарат для облегчения артрита, в котором активным агентом является травяной экстракт.

Несмотря на большое количество лекарственных средств, доступных в настоящее время, трудно или невозможно улучшить состояние многих пациентов путем медикаментозного лечения.

Более того, не существует способа для профилактики ревматоидного артрита.

Таким образом, все еще существует потребность в новых типах противоревматических лекарственных средств, которые являются менее токсичными, вызывают меньше побочных эффектов и являются пригодными для устранения, облегчения и профилактики симптомов ревматоидного артрита. Новые агенты требуются для подавления или уменьшения воспаления, отека и патологической неоваскуляризации, эрозий костей и суставов, которые в то же время хорошо переносятся.

Таким образом, эффект Дуешаг® изучали на адъювантном артрите (АА), который возможно вызывать у крыс, которые являются наиболее часто используемой экспериментальной моделью ревматоидного артрита (Κ.Α) у человека. Было установлено, что развитие адъювантного артрита соответствует человеческому ревматоидному артриту по нескольким характеристикам, следовательно, его можно должным образом использовать для скрининга соединений. В большинстве случаев эта модель хронического воспаления используется фармакологами для испытания противовоспалительных и иммунодепрессантных эффектов лекарственных средств.

Время и степень развития АА у крыс зависит от нескольких факторов, таких как триггерный агент и его доза, место инъекции, линия экспериментальных крыс и т.п. Острая воспалительная реакция (первичный ответ) появляется на инъецированных подушечках лап в течение 24 ч после введения, и объем

- 1 007844 лапы постепенно увеличивается в течение 4 или 5 дней. В зависимости от линии используемых крыс степень воспаления становится постоянной (эффект плато) между 6-м и 11-м днями; затем интенсивность реакции возрастает далее. Воспалительная реакции генерируется также в той подушечке лапы, в которую инъекции не производилось (вторичный или иммуноопосредованный ответ), на 10-й-12-й день после инъекции. Воспалительная реакция, т.е., увеличение объема лапы, достигает максимума на как обработанных, так и не на обработанных подушечках лап между 18-м и 21-м днями.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1 показывает влияние лечения р.о. в течение 22 дней на АА (инъецированная подушечка лапы);

фиг. 2 - влияние лечения р.о. в течение 22 дней на АА (неинъецированная подушечка лапы);

фиг. 3 - влияние лечения р.о. в течение 22 дней на АА на 14-й день (инъецированная подушечка лапы);

фиг. 4 - влияние лечения р.о. в течение 22 дней на АА на 18-й день (инъецированная подушечка лапы);

фиг. 5 - влияние лечения р.о. в течение 22 дней на АА на 22-й день (инъецированная подушечка лапы);

фиг. 6 - влияние лечения р.о. в течение 22 дней на АА на 14-й день (неинъецированная подушечка лапы);

фиг. 7 - влияние лечения р.о. в течение 22 дней на АА на 18-й день (неинъецированная подушечка лапы);

фиг. 8 - влияние лечения р.о. в течение 22 дней на АА на 22-й день (неинъецированная подушечка лапы);

фиг. 9 - влияние лечения р.о. в течение 22 дней на массу тела крыс в зависимости от времени;

фиг. 10 - влияние лечения р.о. в течение 22 дней на массу тела крыс на 22-й день;

фиг. 11 - влияние лечения р.о. в течение 35 дней на АА (инъецированная подушечка лапы); фиг. 12 - влияние лечения р.о. в течение 35 дней на АА (неинъецированная подушечка лапы);

фиг. 13 - влияние лечения р.о. в течение 35 дней на АА на 28-й день (инъецированная подушечка лапы);

фиг. 14 - влияние лечения р.о. в течение 35 дней на АА на 32-й день (инъецированная подушечка лапы);

фиг. 15 - влияние лечения р.о. в течение 35 дней на АА на 35-й день (инъецированная подушечка лапы);

фиг. 16 - влияние лечения р.о. в течение 35 дней на АА на 28-й день (неинъецированная подушечка лапы);

фиг. 17 - влияние лечения р.о. в течение 35 дней на АА на 32-й день (неинъецированная подушечка лапы);

фиг. 18 - влияние лечения р.о. в течение 35 дней на АА на 35-й день (неинъецированная подушечка лапы);

фиг. 19 - влияние лечения р.о. в течение 35 дней на массу тела крыс в зависимости от времени;

фиг. 20 - влияние лечения р.о. в течение 35 дней на массу тела крыс на 35-й день;

фиг. 21 - тяжелую хроническую воспалительную инфильтрацию синовиальной оболочки и прилегающих тканей у нелеченных крыс, демонстрирующих АА;

фиг. 22 - тяжелую инфильтрацию, содержащую гигантские клетки в синовиальной оболочке нелеченных крыс, демонстрирующих АА;

фиг. 23 - микроабсцессы внутри воспалительной инфильтрации в периартикулярной ткани нелеченных крыс, демонстрирующих АА;

фиг. 24 - СО4-положительные лимфоциты в воспалительной инфильтрации, обнаруженной в синовиальной оболочке нелеченных крыс, демонстрирующих АА;

фиг. 25 - отсутствие воспалительной инфильтрации в синовиальной и перисиновиальной тканях крыс, ранее демонстрировавших АА и леченных Луешат®.

Влияние Ауешаг® на адъювантный артрит у крыс

В экспериментах авторов адъювантный артрит вызывали у самок крыс ^181ат путем инъекции 0,1 мл 0,5% убитых МусоЬас1епит ЬЩупсит (Όίίεο), суспендированных и гомогенизированных в жидком парафине, под кожу подошвы стопы правой задней лапы животного. Средняя исходная масса тела экспериментальных животных составляла 138±5 г в группе, леченной в течение 22 дней и 118±5 г в группе, леченной в течение 35 дней. Массу тела животных определяли плетизмографией во время лечения Луетаг®, вместе с объемом инъецированной правой конечности и неинъецированной левой конечности (для наблюдения за первичной и вторичной реакциями) на день 0, 1, 4, 7, 12, 14, 18 и 22 в 22-дневном эксперименте, и на день 0, 3, 7, 11, 15, 18, 21, 25, 28, 32 и 35 в 35-дневном эксперименте. Воспалительную реакцию запускали на день 1 (22-дневный тест) и на день 14 (35-дневный тест), соответственно, после начала лечения Луетаг®. В обоих экспериментах использовали следующие экспериментальные группы и

- 2 007844 методы: 1. Контроль 2x1,0 мл/150 г (дистиллированная вода); 2. Ауетаг® 2x2,5 г/кг/день; 3. Ауетаг® 2x1,0 г/кг/день; 4. Ауетаг® 2x0,25 г/кг/день; 5. Ауетаг® 2x0,05 г/кг/день; 6. Индометацин 2x0,5 мг/кг/день; 7. Дексаметазон 2x0,05 мг/кг/день. Каждая экспериментальная группа состояла из 10-16 крыс.

Суспензии с Ауетаг® и растворы дексаметазона всегда изготавливались или разбавлялись немедленно перед введением. Индометацин (изготовленный компанией СЫпош Рйагтасеибса1 аиб СНет1са1 Аогкк, ВибареМ. Венгрия), использованный в качестве положительного контроля, суспендировали в 0,5% карбоксиметилцеллюлозе и вводили. Различные дозы Ауетаг®, а также индометацина и дексаметазона (производства Огдаиои) вводили через желудочный зонд в дозе 1,0 мл/150 г массы тела, дважды в день, т.е. первую половину суточной дозы вводили между 8.00 и 10.00 утра, а вторую половину - между 4.00 и 6.00 вечера. Контрольная группа получала 1 мл/150 г дистиллированной воды. Однофакторный анализ вариансы (АЫОУА) осуществляли для статистической оценки результатов.

Результаты

Результаты 22-дневного лечения показаны на фиг. 1-10, а результаты 35-дневного лечения показаны на фиг. 11-20. Фигуры показывают групповые средние величины со стандартным отклонением (±8ЕМ) (для 22-дневных экспериментов п=14-15, а для 35-дневных экспериментов п=10-12) . Уровни значимости по сравнению с контрольной группой указаны * над столбиками (*=р<0,05; **=р<0,01; ***=р<0,001).

Результаты показывают, что Ауетаг® может в зависимости от дозы значимо ингибировать развитие как первичной, так и вторичной воспалительной реакций у крыс, что свидетельствует о его противовоспалительном эффекте. Подобно индометацину и дексаметазону, Ауетаг® минимизировал адъювантный артрит дозозависимым образом у леченных крыс. (Хотя его эффективность не достигала эффективности индометацина и дексаметазона, использовавшихся в качестве положительных контролей, он все же был способен значимо ингибировать адъювантный артрит). Во время 14-дневного предварительного лечения он не влиял на объем конечности, и это означает, что он не вызывал генерализованного воспалительного ответа. В зависимости от продолжительности предварительного лечения, он ингибирует развитие артрита. Предварительное лечение Ауетаг® не могло или могло лишь слегка увеличить массу тела крыс с артритом по время 22-дневного или 35-дневного лечения.

Гистологические исследования

Пораженные суставы подушечки правой задней конечности вместе с эпифизами костей и окружающими фиброзными и мышечными тканями фиксировали в 4% формалине с нейтральным буфером. Декальцификацию осуществляли с помощью ЕИТА, и образцы заливали в парафин. Нарезали 8 мкм продольные срезы и окрашивали их гематоксилином (Н) и эозином (Е). В избирательном положительном контроле и леченных случаях проводили иммунопероксидазную реакцию для выявления СО4-СО8положительных Т-лимфоцитов. Использовавшиеся антитела представляли собой продукт 8ап1а Сгих (8ап1а Сгих, СА, США), которые использовали в разведении 1:100.

Гистологическое исследование суставов нелеченных контрольных крыс, страдающих АА, выявило тяжелые воспалительные изменения синовиальной оболочки и окружающих (перисиновиальных) тканей (фиг. 21, окрашено Н и Е, увеличение в 300 раз). Клеточная инфильтрация состояла из лимфоцитов, плазматических клеток, гистиоцитов, многоядерных гигантских клеток и фибробластов (фиг. 22, окрашено Н и Е, увеличение в 300 раз). Внутри воспалительной инфильтрации наблюдались также микроабсцессы, образованные нейтрофильными гранулоцитами (фиг. 23, окрашено Н и Е, увеличение в 300 раз). Большинство лимфоцитов оказалось СЭ4-положительными в воспалительных инфильтратах крыс А (фиг. 24, ΓΌ4 иммунопероксидаза).

В суставах крыс, леченных Ауетаг®, 2x1,0 или 2x2,5 г/кг/день, не было выявлено или была выявлена минимальная воспалительная инфильтрация. Инфильтрация СЭ4-положительными лимфоцитами в синовиальных или перисиновиальных клетках почти полностью исчезла, и фиброз был сведен к минимуму в результате лечения Ауетаг® (фиг. 25, окрашено Н и Е, увеличение в 300 раз). Сходные результаты были получены у животных, леченных индометацином и дексаметазоном, использовавшихся в качестве положительных контролей. Полуколичественная оценка степени воспалительных инфильтратов в различных группах представлена в табл. 1. Достоверной разницы между группами, получавшими 24часовое и 14-дневное предварительное лечение, соответственно, не наблюдалось.

- 3 007844

Таблица 1. Полуколичественная гистологическая квалификация воспалительных инфильтратов у крыс АА, нелеченных и леченных Ауетаг®, индометацином и дексаметозоном

Лечение	Гистологическая градация (среднее от 1 . до 3)
24-часовое предварительное лечение	14-дневное предварительное лечение
Контроль	2,8	2,2
2x2,5 г/кг/день	1,6	1,4
Ачешаг®
2x1,0 г/кг/день	1,0	1,2
Ачешаг®
2x0,25 г/кг/день	2,4	2,6
Ауешаг®
2x0,05 г/кг/день	2,6	2,6
Ауешаг®
2x0,5 мг/кг/день	1,0	1,2
индометацина
2x0,05 мг/кг/день	1,4	1,2
дексаметазона

Следовательно, гистологические исследования недвусмысленно свидетельствовали в пользу противовоспалительного эффекта Ауешаг®.

На основании этих результатов можно предположить, что развитие ревматоидного артрита можно ингибировать подходящими дозами Ауешаг®.

Острые и подострые тесты на токсичность, выполненные по требованиям СБР (Сооб БаЪога!огу Ргаейее), показали, что в отличие от стероидных и нестероидных противовоспалительных соединений Ауешаг® не вызывает никаких токсических эффектов, включая эрозивный гастрит и острую язву желудка (Керог!. Аеи1е ога1 1ох1сйу Пибу о£ Ауешаг® ΐη Ш1ее. Собе: 9901. υηΐν. Уе1. 8ет, Верб Рйагшаео1. Тох1со1., ВибареП, 1999; АеШе ога1 1ох1ейу Пибу о£ Ауешаг® ΐη гаК Собе: 9902. υηΐν. Уе1. 8ет, Вер!. РЪагшаео1. Тох1ео1., ВибареП, 1999; 8иЪаеи!е ога1 !ох1ейу з!ибу о£ Ауетаг®. Собе: 0001. υηΐν. Уе!. 8ет, Верб РЪагшаео1. Тох1ео1., Вибарез!, 2000). Кроме того, этот препарат не был генотоксичным при проведении тестов на микроядрышках костного мозга крысы.

На основании полученных экспериментальных результатов было высказано предположение о том, что Ауетаг® может являться подходящим терапевтическим инструментом для лечения ревматоидного артрита у человека. Другие иммунопатологические заболевания также могут рассматриваться с этой точки зрения.

Влияние Ауешаг® на ревматоидный артрит у человека

Резистентные к терапии пациенты с подтвержденным ревматоидным артритом лечили препаратом Ауетаг® в 1У ревматологическом отделении Национального института ревматологии и физиотерапии (Будапешт, Венгрия). Это открытое клиническое испытание с самоконтролем имело целью оценку эффективности, переносимости и побочных эффектов Ауетаг®. Следующее является отчетом результатов экспериментов, полученных в ходе лечения 15 пациентов, продолжавшегося один год.

A. Отбор пациентов амбулаторных пациентов с подтвержденным КА на основе их критериев классификации АСК, классифицированных по анатомическим стадиям В1етЬгое1<ег от II до III, участвовали в данном исследовании. Их КА находился на одном уровне или ухудшался в течении 3-месячного курса лечения до начала лечения препаратом Ауетаг®. Пациенты были согласны участвовать в исследовании.

B. Критерии исключения возраст менее 18 и более 80 лет;

тяжелые заболевания печени, сердца, почек и гематопоэтических органов;

активная язва желудка;

психиатрические заболевания, отставания в психическом развитии;

недостаточное сотрудничество;

беременность или лактация.

- 4 007844

В случае неэффективности препарата, т.е., если ожидаемое улучшение не наступало приблизительно через 3 месяца, его введение временно прекращали.

С. Ход исследования

Помимо оригинального медикаментозного лечения (базовая терапия, стероид и Ν8ΑΙΌ) 15 пациентам с КЛ вводили суточную дозу 2x9 г водорастворимого гранулированного Ауешаг® (9 г утром и 9 г вечером). Пациентов проверяли в момент начала лечения и ежемесячно; их статистическая оценка производилась через 6 и 12 месяцев, соответственно.

Ό. Тест-параметры

Клинические параметры исследования были следующими:

индекс КйеЫе;

НЛО (НеаИЬ Аззеззешеп! ОиеДюппате) ;

продолжительность утренней скованности в часах;

скорость оседания эритроцитов;

СКР;

величина гематокрита.

Во время исследования изменение дозы вводившегося стероида также отмечалось. Средний возраст 15 пациентов с КА женского пола, участвовавших в исследовании, составлял 54,5 лет (44-68 лет), со средней продолжительностью заболевания 8 лет (3025 лет; все, кроме одной, были сероположительными. К началу исследования 10 из пациентов получали базовую терапию: 1 пациента лечили сульфасалазином (8а1а/оруг1п); 5 пациентов -метотрексатом (Ме11ю1геха1е, Баейеша); 3 пациентов циклоспорином (8апб1шшип, №ога1) и 1 пациента - хлорохином (ОеИадНН). 5 пациентов не получали базовой терапии: лекарственные средства базовой терапии, применявшиеся ранее, оказались неэффективными и/или вызывали побочные эффекты. К началу исследования 11 пациентов получали стероиды, и наивысшая пероральная доза стероида составляла 7,5-10 мг преднизолона или эквивалентную дозу метилпреднизолона или дексаметазона. Характеристики пациентов представлены в табл. 2.

Таблица 2. Данные о пациентах до начала лечения препаратом Ауешаг®

Пациент №	Возраст (ле*)	Продолжительность заболевания (лет)	Классификация по ЗЪехпЬгоскег	ЕЗН (мм/ч)	СРВ (С— реактивный белок)	нет л/л/ (гематокрит)	индекс НйгсМе	Утренняя скованность (часы)	НА<3	Суточная доза стероида (мг)	Доза базовой терапии в день
1	53	9	3	54	8	0,36	36	0	1,7	6 М	12,5 мг в неделю МТХ
2	68	7	3	70	17	0,33	40	5	1, 6	2 М	-
3	62	12	3	40	5	0,35	28	3	1, о	0,8 Ό	-
4	54	5	3	76	30	0,38	34	2	2,1	-	2 д 5
5	⁵⁰	25	2	36	10	0, 35	24	2,5	2, 1	-	-
6	44	5	3	46	10	0, 31	20	1	1,2	10 Р	7,5 мг в неделю МТХ
7	68	3	3	24	6	0, 40	4	1,5	1,1	-	-
8	50	3	2	20	5	0,30	10	1	0, 8	4 Т	7,5 мг в неделю МТХ
9	58	5	2	90	18	0,31	20	2,5	1, 1	10 Р	-
10	44	4	2	36	11	0,38	11	1,5	0, 6	5 Р	175 мг С
11	50	6	3	18	6	0,33	10	1	0,8	4 М	250 мг СЪ.
12	60	5	3	3	106	0, 37	16	5	2, 6	6 М	200 мг С

13	48	5	2	84	182	0,37	32	6	1,8	6 М	225 мг С
14	50	25	3	40	16	0, 36	24	0	1, 6	4 М	12, 5 мг в неделю МТХ
15	58	4	2	56	14	0,38	12	1,5	0, 8		7,5 мг в неделю МТХ

Стероиды Дексаметазон: Ό

Агенты базовой терапии

Хлорохин: СН

Е8К: скорость оседания эритроцитов

НЛО: НеаИЪ Аззеззешеп! ОчеЫюппаие анкета, позволяющая оценить общее состояние здоровья

Метилпреднизолон:

Триамцинолон: Т Преднизолон: П

М Метотрексат: МТХ

Циклоспорин: С

Сульфасалазин: 8

- 5 007844

Результаты

Статистические расчеты осуществляли с использованием критерия Вилкоксона. Результаты представлены в табл. 3-9.

Таблица 3. Изменение индекса КйеЫе по сравнению с первоначальной величиной через 6 и 12 месяцев

Время	Величина Ζ	Значимость
0-6 месяцев	2,574	р<0,010
0-12 месяцев	2, 953	р<0,003
6-12 месяцев	0,534	р<0,594 Ν.3.

Таблица 4. Изменение величины НАф по сравнению с первоначальной величиной через 6 и 12 месяцев

Время	Величина Ζ	Значимость
0-6 месяцев	3,020	р<0,003
0-12 месяцев	2,448	р<0,014
6-12 месяцев	1,433	р<0,152 Ν.5.

Таблица 5. Изменение продолжительности утренней скованности по сравнению с первоначальной величиной через 6 и 12 месяцев

Продолжительность лечения	Прекращено	Улучшение	Без изменений	Усилилось	Значимость Р
0-6 мес	2	9	2	0	0,009
0-12 мес	2	9	1	1	0,002

Таблица 6. Изменение скорости оседания эритроцитов по сравнению с первоначальной величиной через 6 и 12 месяцев

Время	Величина Ζ	Значимость
0-6 месяцев	2,131	р<0,033
0-12 месяцев	1,250	р<0,211 Ν.3.
6-12 месяцев	0,559	р<0,576 Ν.3.

Таблица 7. Изменение уровня СРК

Время	Величина Ζ	Значимость
0-6 месяцев	1, 318	р<0,187 Ν.3.
0-12 месяцев	0,426	р<0, 670 N. 3.
6-12 месяцев	0,565	р<0,572 Ν.3.

Сравнения были сделаны с помощью Т-критериев единственного образца.

Таблица 8. Изменение величины гематокрита

Время	Величина Ζ	Значимость
0-6 месяцев	1,494	р<0,157 Ν.3.
0-12 месяцев	3,011	р<0,009
6-12 месяцев	0,722	р<0,482 Ν.3.

Таблица 9. Изменение дозы стероидов через 6 и 12 месяцев

Продолжительность лечения	Доза не изменилась	Доза уменьшилась	Доза увеличилась	Значимость, Р
0-6 мес	5	6	0	0,031
0-12 мес	5	5	1	0,116 Ν.3.

пациента не получали стероидов.

- 6 007844

У 5 из 11 пациентов, получавших стероид, первоначальные дозы лекарственного средства оставались неизменными; 2 пациентам удалось уменьшить первоначальную дозу наполовину, и 2 пациентам - с 7,5 мг до 5 мг. Доза лекарственных средств базовой терапии у 4 пациентов изменилась за 12-месячный период исследования: у одного из них МТХ увеличился с 12,5 до 15 мг, а у других трех доза циклоспорина уменьшилась со 17 5 до 125 мг, с 225 до 100 мг, с 200 мг до 100 мг. У 5 пациентов доза не изменилась.

Достоверной разницы не наблюдалось по гемоглобину, лабораторным параметрам функции печени и почек.

Полученные данные показывают, что лечение лекарственно-резистентных пациентов с ЯЛ препаратом Ауетат® давало неожиданно благоприятные результаты в первые шесть месяцев. Что касается клинических параметров пациентов, было достигнуто значимое улучшение по всем параметрам без исключения; более того, было также возможно уменьшение дозы стероидов для пациентов. К концу второй половины лечения было достигнуто еще более значимое улучшение клинических параметров по сравнению с исходным состоянием.

На основании вышесказанного, целью настоящего изобретения является применение экстракта ферментированных проростков пшеницы (Луетат®) для изготовления фармацевтических композиций для лечения или профилактики или облегчения воспалительных состояний.

Предпочтительно, Луетат® можно применять для изготовления фармацевтических композиций, пригодных для лечения или профилактики или облегчения артрита, более предпочтительно, ревматоидного артрита.

Еще одной целью настоящего изобретения является способ изготовления фармацевтических композиций, содержащих ферментированный экстракт проростков пшеницы в качестве активного ингредиента, включающий изготовление указанного активного ингредиента с использованием общеупотребительных фармацевтических добавок в фармацевтическую композицию, подходящих для лечения, или профилактики, или облегчения воспалительных заболеваний.

Помимо этого, было установлено, что Луетат® можно применять предпочтительно вместе с другими противовоспалительными агентами нестероидного типа (Ν8ΑΙΌ), такими как диклофенак, ибупрофен, пироксикам, толметин и т.п. Благодаря указанному совместному введению, дозу лекарственных средств типа Ν8ΑΙΌ можно значительно уменьшить, что является большим преимуществом с точки зрения токсичности этих лекарственных средств. Например, совместное введение с диклофенаком позволяет уменьшить количество обоих агентов на 50% и в то же время получить сходные эффекты улучшения.

На основании вышесказанного, еще одной целью настоящего изобретения является применение ферментированного экстракта проростков пшеницы (Ауетат®) и другого активного ингредиента, особенно, противовоспалительного агента, для производства лекарственного средства для лечения, или профилактики, или облегчения артрита. Согласно настоящему изобретению, нестероидный противовоспалительный агент предпочтительно используют в качестве другого противовоспалительного агента.

Помимо этого, настоящее изобретение относится также к комбинированной фармацевтической композиции, содержащей эффективное количество ферментированного экстракта проростков пшеницы (Ауетат®) в комбинации с другим активным ингредиентом, особенно, противовоспалительным агентом, и фармацевтически приемлемым носителем.

Предпочтительные противовоспалительные фармацевтические композиции по настоящему изобретению содержат эффективную дозу ферментированного экстракта проростков пшеницы (Ауетат®) и диклофенака.

Активный ингредиент, используемый в настоящем изобретении, можно изготавливать в виде нескольких пероральных и парентеральных лекарственных форм и вводить для лечения и профилактики ревматоидного артрита. Обычно активный ингредиент присутствует в количестве приблизительно от 5 до 95% от массы композиции.

Фармацевтически приемлемые наполнители, используемые для изготовления фармацевтических композиций, могут быть в твердой или жидкой фазе. Примеры твердых фармацевтических композиций включают порошки, таблетки, пилюли, капсулы, крахмальные капсулы, ромбовидные лекарственные формы, суппозитории и диспергируемые гранулы. Твердые композиции могут включать несколько добавок, таких как разжижители, корригенты, растворимые агенты, смазывающие агенты, суспендирующие агенты, связывающие агенты, консерванты, агенты, способствующие распаду таблетки, или инкапсулирующие вещества.

Что касается порошков, наполнитель представляет собой тонко измельченное твердое вещество, которое составляет смесь с тонко диспергированным активным ингредиентом.

Что касается таблеток, носитель, обладающий требующимися связывающими свойствами, смешивают в должной пропорции с активным ингредиентом и прессуют для получения требующейся формы и размера.

Предпочтительно, порошки и таблетки содержат агент в количестве от 5 до 70%. Примеры подходящих наполнителей включают карбонат магния, стеарат магния, тальк, сахар, лактозу, пектин, декстрин, циклодекстрин, мальтодекстрин, крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлозу, натрий

- 7 007844 карбоксиметилцеллюлозу, воски с низкой температурой плавления, масло какао и т.п. Производство включает изготовление активного ингредиента с инкапсулирующим веществом в качестве наполнителя, в результате чего получают капсулу, в которой активный ингредиент с другими носителями или без них окружен наполнителем, причем последний таким образом связан с активным ингредиентом. Крахмальные капсулы и ромбовидные лекарственные формы изготавливают сходным образом. Таблетки, порошки, капсулы, пилюли, крахмальные капсулы и ромбовидные лекарственные формы можно применять для перорального введения.

Для изготовления суппозиториев воски с низкой температурой плавления, например смесь глицеридов жирных кислот или масла какао, сначала расплавляют, и активный ингредиент гомогенно диспергируют в ней перемешиванием. Затем расплавленную гомогенную смесь выливают в форму для суппозиториев соответствующего размера, оставляют для охлаждения и отверждения.

Жидкие фармацевтические препараты включают растворы, суспензии, эмульсии, сиропы и эликсиры, такие как водный или водно-пропиленгликолевый растворы. Для парентеральных инъекций жидкие фармацевтические композиции можно изготавливать в водно-пропиленгликолевом растворе.

Растворы, подходящие для перорального введения, можно изготавливать растворением активного ингредиента в воде и добавлением подходящих красителей, корригентов, стабилизаторов и коагулянтов.

Суспензии, подходящие для перорального введения, можно изготавливать диспергированием тонко размолотого активного ингредиента в воде вместе с вязким веществом, таким как натуральные или синтетические каучуки, смола, метилцеллюлоза, натрийкарбоксиметилцеллюлоза и другие хорошо известные суспендирующие агенты.

Твердые фармацевтические композиции также включают такие композиции, которые предназначены для превращения в жидкие препараты за короткое время до использования для перорального введения. Примеры указанные жидких фармацевтических препаратов включают растворы, суспензии и эмульсии. Помимо активного ингредиента, указанные фармацевтические препараты могут содержать красители, корригенты, стабилизаторы, буферы, искусственные и натуральные подсластители, диспергирующие агенты, коагулянты, растворимые агенты и подобные вещества.

Стерильные композиции для парентерального введения могут быть предпочтительно водными или неводными растворами, суспензиями или эмульсиями. Следующие агенты можно использовать в качестве растворителей: воду, пропиленгликоль, некоторые виды полиэтиленгликоля, растительные масла, такие как оливковое масло, органические сложные эфиры, подходящие для инъекций, такие как этилолеат. Указанные композиции могут также содержать другие вспомогательные агенты, особенно смазывающие, изотонизирующие, эмульгирующие, диспергирующие и стабилизирующие агенты. Стерилизацию можно осуществлять разными способами, включая асептическое фильтрование, включение в композицию стерилизаторов, облучение или термическую обработку. Стерильные твердые композиции можно также изготавливать таким образом, чтобы их можно было растворять в стерильной воде или любой другой среде для инъекций непосредственно перед использованием.

Предпочтительно, фармацевтические композиции упаковывают в виде стандартных доз. В указанных лекарственных формах, в которых препарат разделен на стандартные дозы, каждая из них содержит конкретное количество активного ингредиента. Лекарственная форма из стандартных доз может представлять собой упакованный препарат, в котором упаковка содержит отдельные количества препарата, такой как упакованные таблетки, капсулы и порошки во флаконах или ампулах. Лекарственная форма из стандартных доз может также включать капсулы, таблетки, крахмальные капсулы, ромбовидные лекарственные формы или определенное их количество, включенное в упаковку.

Количество активного ингредиента может меняться или может находиться в пределах от 1 до 1000 мг, предпочтительно от 10 до 100 мг в препаратах стандартной дозы, в соответствии с применением и потенциалом активного ингредиента.

Фармацевтические композиции могут также содержать другие совместимые терапевтические агенты, если это необходимо.

Эффективная доза композиции, применяемая в соответствии с настоящим изобретением, и частота дозирования для профилактики, подавления или борьбы с артритом зависит от ряда факторов. Подходящие дозы обязательно должен определять профессионал. Обычно таким профессионалом является лечащий врач, который определяет должную дозу в зависимости от возраста, массы тела и любых других индивидуальных факторов для лица, подвергаемого лечению. Уровни суточных доз могут варьировать приблизительно от 0,1 до 1000 мг/кг массы тела, предпочтительно, приблизительно от 1 до 500 мг/кг массы тела в день, и более предпочтительно от 50 до 250 мг/кг массы тела в день. В целях безопасности полную суточную дозу можно разделять и вводить ее частями в течение дня, если это необходимо.

Когда фармацевтические композиции включают другой активный ингредиент, помимо Ауешат®, указанный другой агент можно выбирать из следующей группы: кортикостероиды, противовоспалительные агенты, противоревматические агенты, иммунодепрессанты, антиметаболиты и иммуномодуляторы. Перечень соединений, подпадающих под данные категории, можно найти в следующем руководстве: Сошргейеи81уе МеФса1 СйешШту, Ретдашои Рге§8, Θχίοτά, 970-986 (1990). Эта группа включает, например, сульфасалазин и аминосалицилаты (противовоспалительные агенты); циклоспорин, РК-506 и рапа

- 8 007844 мицин (иммунодепрессанты); циклофосфамид и метотрексат (антиметаболиты); дексаметазон, метилпреднизолон, триамцинолон, преднизолон (стероиды); и интерфероны (иммуномодуляторы). Когда Ауешаг® используют в комбинации с одним или более других агентов, они могут упаковываться совместно или они могут вводиться в комбинации. Введение одного или более агентов в комбинации с Луешаг® осуществляют практически одновременно или последовательно. Профессионалы могут определить наиболее подходящий способ введения в зависимости от высвобождаемых агентов, желательных результатов, пациента и состояния, по поводу которого осуществляют лечение.

С учетом описанных выше в настоящем документе вариантов осуществления настоящего изобретения, специалистам будет понятно, что настоящее описание служит только примером, поэтому различные альтернативы, приспособления и модификации входят в объем настоящего изобретения и предполагаются заявителями. Соответственно настоящее изобретение не ограничивается конкретными вариантами осуществления, как проиллюстрировано выше, а определяется следующей формулой изобретения.

Claims

1. Применение ферментированного экстракта проростков пшеницы (Луешаг®) в качестве действующего начала при изготовлении лекарственного средства для лечения, или профилактики, или облегчения артрита.

2. Применение по п.1, в котором артрит представляет собой ревматоидный артрит.

3. Фармацевтическая композиция для лечения артрита, включающая эффективное количество ферментированного экстракта проростков пшеницы (Ауешаг®) в комбинации с противовоспалительным агентом и фармацевтически приемлемым носителем.

4. Фармацевтическая композиция по п.3, в которой противовоспалительный агент представляет собой нестероидный противовоспалительный агент.

5. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой нестероидный противовоспалительный агент представляет собой диклофенак.

6. Применение фармацевтической композиции по п.3 в качестве действующего начала при изготовлении лекарственного средства для лечения, или профилактики, или облегчения артрита.

7. Применение по п.6, в котором противовоспалительный агент представляет собой нестероидный противовоспалительный агент.

8. Применение по п.7, в котором нестероидный противовоспалительный агент представляет собой диклофенак.

9. Способ лечения, или профилактики, или облегчения артрита у млекопитающего, включая человека, включающий введение указанному млекопитающему, которому требуется указанное лечение или профилактика, или облегчение, эффективного количества ферментированного экстракта проростков пшеницы (Ауешаг®).

10. Способ по п.9, включающий дополнительное введение противовоспалительного агента.