EA007434B1 - Ингибиторы dpiv на основе глутаминила - Google Patents

Ингибиторы dpiv на основе глутаминила Download PDF

Info

Publication number
EA007434B1
EA007434B1 EA200401062A EA200401062A EA007434B1 EA 007434 B1 EA007434 B1 EA 007434B1 EA 200401062 A EA200401062 A EA 200401062A EA 200401062 A EA200401062 A EA 200401062A EA 007434 B1 EA007434 B1 EA 007434B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compounds
glutaminyl
compound
acid addition
dipeptidyl peptidase
Prior art date
Application number
EA200401062A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200401062A1 (ru
Inventor
Ханс-Ульрих Демут
Торстен Хоффманн
Ульрих Хайзер
Original Assignee
Прозидион Лимитед
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Прозидион Лимитед filed Critical Прозидион Лимитед
Priority claimed from PCT/EP2002/007124 external-priority patent/WO2003072556A1/en
Publication of EA200401062A1 publication Critical patent/EA200401062A1/ru
Publication of EA007434B1 publication Critical patent/EA007434B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/06—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/07—Tetrapeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/18—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/182—Radicals derived from carboxylic acids
    • C07D295/185—Radicals derived from carboxylic acids from aliphatic carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/081—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing O or S as heteroatoms, e.g. Cys, Ser
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)

Abstract

Согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (I), где X = СНили S, или его фармацевтически приемлемая соль. Такие соединения и формы их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты являются полезными при лечении состояний, опосредованных при помощи DPIV- и DPIV-подобных ферментов, таких как артрит, ожирение, иммунные и аутоиммунные расстройства, аллотрансплантация, рак, нейрональные расстройства и кожные заболевания.(I)

Description

Настоящее изобретение относится к области ингибирования дипептидилпептидазы IV и, более конкретно, относится к глутаминилпирролидину и глутаминилтиазолидину, фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения, и применению указанных соединений при ингибировании дипептидилпептидазы IV и дипептидилпептидаза ίν-подобной ферментной активности.
Предшествующий уровень техники
Дипептидилпептидаза IV (ИРГУ) представляет собой сериновую протеазу, которая отщепляет Νтерминальные дипептиды от пептидной цепи, содержащей предпочтительно пролиновый остаток в предпоследнем положении. Хотя биологическая роль ΌΚΐν в системах млекопитающих до конца не установлена, считают, что она играет важную роль в метаболизме нейропептидов, активации Т-клеток, присоединении раковых клеток к эндотелию и проникновении ВИЧ в лимфоидные клетки.
Более того, было обнаружено, что ИКГУ отвечает за инактивацию глюкагоноподобного пептида-1 (ОЬР-1) и глюкозозависимого инсулинотропного пептида, также известного как желудочный ингибиторный пептид (ОГР). Так как ОЬР-1 является главным стимулятором секреции панкреатического инсулина и оказывает прямое благоприятное воздействие на утилизацию глюкозы, в ^О 97/40832 и ϋδ 6,303,661 было показано, что ингибирование ИРГУ и ИРГУ-подобной ферментной активности представляет собой привлекательный подход, например, к лечению инсулиннезависимого сахарного диабета (ΝΙΌΌΜ). Это один аспект настоящего изобретения, в котором предложены новые ингибиторы ИРГУ, которые эффективны, например, при лечении состояний, опосредованных при помощи ИРГУ и ИРГУ-подобных ферментов, фармацевтические композиции, например, полезные при ингибировании ИРГУ и ИРГУ-подобных ферментов и способ ингибирования указанной ферментной активности.
Другой аспект изобретения относится к способу лечения, в частности, к способу лечения сахарного диабета, особенно инсулиннезависимого сахарного диабета (ΝΠ0ΌΜ) или диабета 2 типа и состояний, связанных с сахарным диабетом, и к композициям для применения в подобном способе.
Дипептидилпептидаза ГУ (ИРГУ) представляет собой сериновую протеазу, отщепляющую за остатком пролина (в меньшей степени аланина, серина или глицина), обнаруженную в различных тканях тела, включая почки, печень и кишечник.
Известно, что ингибиторы ИРГУ могут быть полезны при лечении нарушенной толерантности к глюкозе и сахарного диабета (Международная заявка на патент, номер публикации \УО 99/61431, Ребегзоп КА и др., 1)1аЬе1ез. 1998 Аид; 47(8):1253-8 и Раи1у КР и др., Ме1аЬо11зт. 1999 Маг; 48(3):385-9). В частности, в \УО 99/61431 раскрыты ингибиторы ИРГУ, содержащие аминокислотный остаток и тиазолидиновую или пирролидиновую группу, и их соли, особенно Ь-трео-изолейцилтиазолидин, Ь-алло-изолейцилтиазолидин, Ь-треоизолейцилпирролидин, Ь-алло-изолейцилтиазолидин, Ь-алло-изолейцилпирролидин, и их соли.
Дополнительными примерами низкомолекулярных ингибиторов дипептидилпептидазы ГУ являются агенты, такие как производные тетрагидроизохинолин-3-карбоксамида, Ν-замещенные 2-цианопирролы и -пирролидины, №(Х-замещенные глицил)-2-цианопирролидины, (Ν-замещенные глицил)тиазолидины, №(замещенный глицил)-4-цианотиазолидины, борониловые ингибиторы и пирролидины, конденсированные с циклопропилом. Ингибиторы дипептидилпептидазы ГУ описаны в ϋδ 6,011,155; ϋδ 6,107,317; ϋδ 6,110,949; ϋδ 6,124,305; ϋδ 6,172,081; \\Ό 99/61431; \\Ό 99/67278; \\Ό 99/67279; ΌΕ 198 34 591; \\Ό 97/40832; ΌΕ 196 16 486 С 2; \\Ό 98/19998; \\Ό 00/07617; \\Ό 99/38501; \\Ό 99/46272; \\Ό 99/38501; \\Ό 01/68603; \\Ό 01/40180; \\Ό 01/81337; \\Ό 01/81304; \\Ό 01/55105 и \\Ό 02/02560, содержание которых, касающееся ингибиторов, их получения и их применения, включено сюда полностью посредством этой ссылки.
Краткое описание изобретения
Согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы
где X = СН2 или δ, или его фармацевтически приемлемая соль.
Такие соединения и формы их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты являются полезными при лечении состояний, опосредованных при помощи ИРГУ и ИРГУподобных ферментов, таких как артрит, ожирение, иммунные и аутоиммунные расстройства, аллотрансплантация, рак, нейрональные расстройства и кожные заболевания.
В более предпочтительном воплощении соединения по настоящему изобретению улучшают толерантность к глюкозе при помощи снижения повышенных уровней глюкозы в крови в ответ на пероральное введение глюкозы и поэтому являются полезными при лечении инсулиннезависимого сахарного
- 1 007434 диабета.
Краткое описание чертежей
Дальнейшее понимание настоящего изобретения может быть получено при обращении к фигурам, где фиг. 1 показывает активность плазменной ΏΡΐν в сыворотке крыс линии ^181аг после перорального и интравазального введения 100 мг/кг массы тела глутаминилпирролидина;
фиг. 2 - активность плазменной ΏΡΐν в сыворотке крыс линии ^181аг после перорального и интравазального введения 100 мг/кг массы тела глутаминилтиазолидина;
фиг. 3 - дозозависимое снижение уровней глюкозы в крови крыс линии /нсксг, больных диабетом после перорального введения 5 мг/кг, 15 мг/кг, 50 мг/кг массы тела глутаминилпирролидина и плацебо, соответственно;
фиг. 4 - дозозависимое снижение уровней глюкозы в крови крыс линии /нсксг, больных диабетом после перорального введения 5 мг/кг, 15 мг/кг, 50 мг/кг массы тела глутаминилтиазолидина и плацебо, соответственно;
фиг. 5 - химическую структуру пироглутамилтиазолидина, продукта превращения, обнаруженного после перорального введения глутаминилтиазолидина крысам линии ^181аг, и фиг. 6 показывает хроматограмму экстракта плазмы крови крыс, полученного после перорального введения глутаминилтиазолидина крысам линии /нсксг с ожирением. Пик на 2,95 мин соответствует глутаминилтиазолидину, а пик на 6,57 мин соответствует пироглутамилтиазолидину.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к области ингибирования дипептидилпептидазы IV (ΏΡΐν) и, более конкретно, относится к глутаминилпирролидину и глутаминилтиазолидину, фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения, и применению указанных соединений при ингибировании ΏΡΐν и ΏΡΐν-подобной ферментной активности.
Согласно настоящему изобретению предложены новые ингибиторы ΏΡΐν, которые эффективны, например, при лечении состояний, опосредованных при помощи ΏΡΐν, фармацевтические композиции, например, полезные при ингибировании ΏΡΐν и ΏΡΐν-подобной ферментной активности и способ ингибирования ΏΡΐν и ΏΡΐν-подобной ферментной активности.
Согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы
и особенно соединение формулы (I)
или его фармацевтически приемлемая соль.
Кроме того, предпочтительным соединением по настоящему изобретению является соединение формулы (ΐΐ)
- 2 007434
или его фармацевтически приемлемая соль.
Соединения по настоящему изобретению могут быть превращены в соли присоединения кислоты, особенно в фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты. Фармацевтически приемлемая соль обычно принимает форму, в которой основная боковая цепь аминокислот протонирована неорганической или органической кислотой. Типичные органические или неорганические кислоты включают в себя соляную, бромисто-водородную, перхлорную, серную, азотную, фосфорную, уксусную, пропионовую, гликолевую, молочную, янтарную, малеиновую, фумаровую, яблочную, винную, лимонную, бензойную, миндальную, метансульфоновую, гидроксиэтансульфоновую, бензолсульфоновую, щавелевую, памовую, 2-нафталинсульфоновую, пара-толуолсульфоновую, циклогексансульфаминовую, салициловую, сахариновую или трифторуксусную кислоту. Все формы фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты соединений по настоящему изобретению предназначены для включения в объем данного изобретения.
Принимая во внимание тесную взаимосвязь между свободными соединениями и соединениями в форме солей, когда бы соединение ни упоминалось в данном контексте, подразумевается также и соответствующая соль, при условии, что такое является возможным или целесообразным при данных обстоятельствах.
Далее настоящее изобретение включает в себя в пределах своего объема пролекарства соединений по данному изобретению. Обычно такие пролекарства являются функциональными производными соединений, которые легко превращаются ΐη νΐνο в требуемое терапевтически активное соединение. Таким образом, в этих случаях для способов лечения по настоящему изобретению, термин введение охватывает лечение различных описанных расстройств, пролекарственными вариантами одного или более чем одного заявленного соединения, но которое превращается в вышеуказанное конкретное соединение ΐη νΐνο после введения субъекту. Традиционные методики подбора и получения подходящих пролекарственных производных описаны, например, в Оезщп οΓ Ргобгидз, еб. Н. Випбдаагб, Ε18еν^е^, 1985 и заявках на патент ΌΕ 198 28 113, ΌΕ 198 28 114, АО 99/67228 и АО 99/67279, которые включены сюда посредством ссылки.
В тех случаях, когда соединения согласно данному изобретению имеют по меньшей мере один хиральный центр, они, соответственно, могут существовать в виде энантиомеров. В тех случаях, когда соединения обладают двумя или более хиральными центрами, они, дополнительно, могут существовать в виде диастереомеров. Следует понимать, что все подобные изомеры и их смеси включены в объем настоящего изобретения. Более того, некоторые из кристаллических форм соединений могут существовать в виде полиморфов и как таковые подразумеваются включенными в настоящее изобретение. Кроме того, некоторые из соединений могут образовывать сольваты с водой (т. е. гидраты) или обычными органическими растворителями, и подразумевается, что такие сольваты также включены в объем данного изобретения.
Соединения, включая их соли, также могут быть получены в форме гидратов или включать в себя другие растворители, использованные для их кристаллизации.
Как указано выше, соединения по настоящему изобретению, и особенно соединения формул I и II, и формы их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты являются полезными при ингибировании ΌΡΐν и ΌΡΐν-подобной ферментной активности. Способность соединений по настоящему изобретению и форм их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты ингибировать ΌΡΐν и ΌΡΐν-подобную ферментную активность можно продемонстрировать, используя анализ активности ΌΡΐν для определения значений Κι ΐη νΐίΓο и в плазме человека, как описано в примерах 4 и 5. Значения Κι соединений по настоящему изобретению определяли для глутаминилтиазолидина как Κι = 3,12х10-7 М ± 5,11х10-10 М и для глутаминилпирролидина как Κι = 1,30х10-6 М ± 8,49х10-8 М в отношении ΌΡΐν из почек свиньи. Значения Κι соединений по настоящему изобретению определяли для глутаминилтиазолидина как Κι = 4,03х10-7 М ± 2,19х10-10 М после 5 мин и 5,13х10-7 М ± 1,26х10-8 М после 22 ч преинкубации, и для глутаминилпирролидина как Κι = 1,30х10-6 М ± 4,89х10-8 М после 5 мин и 1,36х10-6 М ± 3,21х10-8 М после 22 ч преинкубации в плазме человека.
Способность соединений по настоящему изобретению и форм их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты ингибировать ΌΡΐν ΐη νΐνο можно продемонстрировать
- 3 007434 при помощи перорального или интравазального (внутрисосудистого) введения крысам линии ХУМаг. как описано в примере 9. Соединения по настоящему изобретению ингибируют активность ΌΡΐν ίη νίνο как после перорального. так и после интравазального введения крысам линии ХУМаг.
ΌΡΐν присутствует в широком ряде органов и тканей млекопитающих. например щеточной каемке кишечника (Ои!8сйт1б! Б. с! а1.. ΐη δίΐιι - тсазигстспй оГ рго!сш соп(еп(8 ίη 1йс Ьгизй Ьогбсг гсдюп а1опд га! )с)ипа1 νί11ί апб 1Нс1г соггсЕШопх νίΐΗ Гоиг спхутс асЦуШсх. НШосйстШгу 1981. 72 (3). 467-79). экзокринном эпителии. гепатоцитах. почечных канальцах. эндотелии. миофибробластах (Рс11сг А.С. с! а1.. А топос1опа1 апйЬобу бс!сс1шд б1рср!1бу1рсрбба8с IV ш йитап !188ис. Щгсйо^з Агсй. А. Ра1йо1. Апа!. Н181ора1йо1. 1986; 409 (2):263-73). нервных клетках. латеральных мембранах некоторых поверхностных эпителиев. например. фаллопиевых трубах. матке и везикулярных железах. в цитоплазме люминальных клеток. например. эпителия везикулярных желез. и в слизистых клетках бруннеровых желез (Наг!с1 Б. с! а1.. П1рсрйбу1 рсрйбазс (ΩΡΡ) IV ш га! огдапз. Сотрагъоп оГ 1ттипой18!осйст181гу апб ас!М1у й18!осйст18!гу. Н18!осйст181гу 1988; 89 (2): 151-61). половых органах. например хвосте придатка яичка и ампуле. семенных пузырьках и их секретах (Адга\са1 & Vаηйа-Ρс^йи1а. П1рсрйбу1 рсрйбазсз ш Ьосшс гсргобисЩс огдапз апб 8ссгс!юп8. 1п!. 1. Апбго1. 1986. 9 (6): 435-52). В сыворотке человека присутствуют две молекулярные формы дипептидилпептидазы (Кгсрс1а Е. с! а1.. Пстоп81га1юп оГ 1\\ό то1сси1аг Гогпъ оГ б1рср!1бу1 рсрббазс IV ш погта1 йитап зсгит. Ρ^δ^Ε Войсто81оу. 1983. 32 (6): 486-96). Высокомолекулярная форма сывороточной ΌΡΐν экспрессируется на поверхности активированных Т-клеток (Оикс-Сойап 1.Б. с! а1.. Бсгит Ыдй то1сси1аг \\'сщй1 б1рср!1бу1 рсрббазс IV (СЭ26) ίδ 81тйаг !о а №ν^ апЦдсп ΩΡΡΤ-Ω гс1са8сб Ггот асбсаЮб Τ сс1к. 1. ^типоЕ 1996. 156(5): 1714-21).
Соединения по настоящему изобретению и формы их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты способны ингибировать ΩΡΑ ш νί\Ό. В одном воплощении настоящего изобретения все молекулярные формы. гомологи и эпитопы ΩΡ^ из всех тканей и органов млекопитающих. а также те. которые еще не открыты. предназначены для включения в объем данного изобретения.
Первоначально предполагали. что среди редкой группы пролин-специфичных протеаз ΩΡ^ является единственным мембранно-связанным ферментом. специфичным для пролина как предпоследнего остатка в амино (Ν) конце полипептидной цепи. Однако недавно были установлены другие молекулы даже структурно негомологичные ΩΡΑ. но обладающие соответствующей ферментной активностью. ^ΡIVподобными ферментами. которые установлены недавно. являются. например. белок активации фибробластов α. дипептидилпептидаза IV β. дипептидиламинопептидаза-подобный белок. Ν-ацетилированная α-связанная кислая дипептидаза. пролиндипептидаза покоящихся клеток. дипептидилпептидаза II. аттрактин и белок. родственный дипептидилпептидазе IV (ΩΡΡ 8). и они описаны в реферате Бсбо & Майк (Бсбо & Майк. О1рср!1бу1 рсрйбазс А-Нкс то1сси1с8: йото1одои8 рго!сш8 ог йото1одои8 асбуШсх? ВюсЫтюа с! Вюрйузюа Ас!а 2001. 36506: 1-10).
Кроме того. ^ΡIV-подобные ферменты раскрыты в ХУО 01/19866. ХУО 02/04610. ХУО 02/34900 и ХУО 02/31134. В ХУО 01/19866 раскрыта новая дипептидиламинопептидаза (ΩΡΡ8) человека со структурными и функциональными сходствами с ΩΡΑ и белком активации фибробластов (ΕАΡ). В ХУО 02/04610 предложены реагенты. которые регулируют дипептидилпептидаза ^-подобный фермент человека и реагенты. которые связываются с генным продуктом дипептидилпептидаза ^-подобного фермента человека. Эти реагенты могут играть роль в предупреждении. улучшении или корректировке дисфункций или заболеваний. которые включают в себя опухоли и расстройства периферической и центральной нервной системы. включая боль и нейродегенеративные расстройства. но не ограничиваются ими. Дипептидилпептидаза ^-подобный фермент из УО 02/04610 хорошо известен в данной области техники. В базе данных банка генов этот фермент зарегистрирован как ШАА1492 (регистрация в феврале 2001. представлен на рассмотрение 4 апреля 2000 г.. АВ040925). В ХУО 02/34900 раскрыта дипептидилпептидаза 9 (ΩΡΡ9) со значительной гомологией с аминокислотными последовательностями ΩΡΑ и ΩΡΡ8. В ХУО 02/31134 раскрыты три ^ΡIV-подобных фермента. ΩΡΡΡ1. ΩΡΡΡ2 и ΩΡΡΡ3. Анализ последовательности показал. что ΩΡΡΡ1 идентичен ΩΡΡ8. который раскрыт в ХУО 01/19866. что ΩΡΡΡ2 идентичен ΩΡΡ9 и что ΩΡΡΡ3 идентичен ШАА1492. который раскрыт в ХУО 02/04610.
В другом предпочтительном воплощении настоящего изобретения все молекулярные формы. гомологи и эпитопы протеинов. обладающих ^ΡIV-подобной ферментной активностью. из всех тканей и органов млекопитающих. а также те. которые еще не открыты. предназначены для включения в объем данного изобретения.
Способность соединений по настоящему изобретению и форм их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты ингибировать ^ΡIV-подобные ферменты можно продемонстрировать. используя анализ ферментной активности для определения значений К1 ш уйго. как описано в примере 6. Значения К1 соединений по настоящему изобретению в отношении свиной дипептидилпептидазы II определяли как К1 = 8.52х10-5 М ± 6.33х10-6 М для глутаминилпирролидина и К1 = 1.07х10-5 М ± 3.81х10-7 М для глутаминилтиазолидина. Все соединения ингибируют свиную дипептидилпептидазу II.
- 4 007434
В другом воплощении настоящего изобретения соединения по настоящему изобретению и формы их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты обладают лишь небольшой, если вообще обладают, ингибиторной активностью в отношении не-ОР1У и не-ЭР1У-подобных пролин-специфичных ферментов. Как описано в примере 7, не обнаружено ингибирования дипептидилпептидазы I и пролилолигопептидазы глутаминилтиазолидином и глутаминилпирролидином. В отношении пролидазы оба соединения проявили значительно более низкую эффективность, чем в отношении ΌΡίν. Значения 1С50 в отношении пролидазы определяли как 1С50 > 3 мМ для глутаминилтиазолидина и как 1С50 = 3,4х10-4 М ± 5,63х10-5 для глутаминилпирролидина.
Принимая во внимание способность ингибировать ΌΡΐν и ΌΡΐν-подобную ферментную активность, соединения по настоящему изобретению, особенно соединения формул I и II, и формы их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты являются полезными при лечении состояний, опосредованных при помощи указанной ферментной активности. Таким образом, соединения, раскрытые здесь, являются полезными при лечении состояний, таких как инсулиннезависимый сахарный диабет, артрит, ожирение, иммунные и аутоиммунные расстройства, аллотрансплантация, рак, нейрональные расстройства подобные рассеянному склерозу и кожные заболевания.
В более предпочтительном воплощении настоящего изобретения соединения по настоящему изобретению и формы их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты улучшают толерантность к глюкозе при помощи снижения повышенных уровней глюкозы в крови в ответ на пероральное введение глюкозы и поэтому являются полезными при лечении инсулиннезависимого сахарного диабета. Способность соединений по настоящему изобретению и форм их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты улучшать толерантность к глюкозе в ответ на пероральное введение глюкозы можно оценить на крысах линии ΖιιοΚογ. больных диабетом. Эти способы описаны в примерах 10 и 11. Пероральное введение 5 мг/кг массы тела, 15 и 50 мг/кг массы тела глутаминилтиазолидина или глутаминилпирролидина приводит к дозозависимому снижению повышенных уровней глюкозы в крови и, таким образом, улучшению толерантности к глюкозе у крыс ΖιιοΚογ с диабетом.
Соединения по настоящему изобретению, согласно примеру 5, стабильны в плазме человека. Неожиданно, и в качестве дальнейшего предпочтительного воплощения настоящего изобретения, соединения по настоящему изобретению и формы их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты могут претерпевать превращение ίη νίνο после введения млекопитающему. Способность соединений по настоящему изобретению и форм их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты претерпевать превращение ίη νίνο можно продемонстрировать, используя модель крыс линии \У181аг и последующий ЬС/М8 анализ (жидкостная хроматография/массспектрометрия). Установлено, что глутаминилтиазолидин превращается после перорального введения крысам линии \У181аг в соответствующий пироглутамилтиазолидин.
Поэтому, согласно настоящему изобретению предложен способ лечения состояния, опосредованного при помощи модуляции ΌΡ!ν и ЭР^-подобной ферментной активности, у субъекта, которому это необходимо, при котором вводят любое из соединений по настоящему изобретению или их фармацевтические композиции в количестве и режиме дозирования терапевтически эффективном для лечения состояния. Кроме того, настоящее изобретение включает в себя применение соединений по настоящему изобретению и форм их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты для приготовления лекарства для предупреждения или лечения состояния, опосредованного при помощи модуляции активности ΌΡ^, у субъекта. Соединение можно вводить пациенту посредством традиционного пути введения, которые включают в себя внутривенный, пероральный, подкожный, внутримышечный, интрадермальный и парентеральный, но не ограничиваются ими.
В дальнейшем воплощении согласно настоящему изобретению предложены прописи для соединений по настоящему изобретению и форм их соответствующих фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты в фармацевтических композициях.
Термин субъект, который использован здесь, относится к животному, предпочтительно млекопитающему, более предпочтительно к человеку, который является объектом лечения, наблюдения или эксперимента.
Термин терапевтически эффективное количество, который использован здесь, означает такое количество активного соединения или фармацевтического агента, которое вызывает биологический или лечебный эффект в тканевой системе, у животного или человека, устанавливаемое исследователем, ветеринаром, врачом или другим клиницистом, которое включает в себя облегчение симптомов заболевания или расстройства, которое лечат.
Термин композиция, который использован здесь, предназначен для описания продукта, содержащего заявленные соединения в терапевтически эффективных количествах, а также любой продукт, который прямо или косвенно является следствием сочетаний заявленных соединений.
Для приготовления фармацевтических композиций по данному изобретению, одно или более чем одно соединение по настоящему изобретению, особенно соединение формул I или II, или форму его соответствующей фармацевтически приемлемой соли присоединения кислоты в качестве активного ингре
- 5 007434 диента тщательно смешивают с фармацевтическим носителем в соответствии с традиционными фармацевтическими методиками приготовления. Такой носитель может принимать большое многообразие форм, в зависимости от формы требуемого для введения препарата, например, пероральную или парентеральную, такую как внутримышечная. При приготовлении композиций в пероральной лекарственной форме могут быть использованы любые обычные фармацевтические среды. Таким образом, для жидких пероральных препаратов, таких как, например, суспензии, эликсиры и растворы, подходящие носители и добавки могут преимущественно включать в себя воду, гликоли, масла, спирты, ароматизаторы, консерванты, красители и тому подобное; для твердых пероральных препаратов, таких как, например, порошки, капсулы, желатиновые капсулы и таблетки, подходящие носители и добавки включают в себя крахмалы, сахара, разбавители, гранулирующие агенты, смазывающие вещества, связующие вещества, разрыхлители и тому подобное. Из-за своего удобства при введении таблетки и капсулы представляют собой наиболее пригодную пероральную стандартную лекарственную форму, в этом случае используются твердые фармацевтические носители. Если требуется, таблетки могут быть покрыты сахаром или энтеросолюбильным покрытием при помощи стандартных методик. Для парентеральных препаратов носитель будет обычно содержать стерильную воду, хотя могут быть включены и другие ингредиенты, например, для целей, таких как вспомогательная растворимость или для консервации.
Инъекционные суспензии также могут быть приготовлены, и в этом случае могут быть использованы соответствующие жидкие носители, суспендирующие агенты и тому подобное. Фармацевтические композиции при этом будут содержать на единицу дозировки, например на таблетку, капсулу, порошок, инъекцию, чайную ложку и тому подобное, количество активного ингредиента, необходимое для доставки эффективной дозы, как описано выше. Фармацевтические композиции при этом будут содержать на единицу дозировки, например на таблетку, капсулу, порошок, инъекцию, суппозиторий, чайную ложку и тому подобное, от примерно 0,01 до примерно 1000 мг (предпочтительно от примерно 5 до примерно 500 мг) и могут быть даны в дозировке от примерно 0,1 до примерно 300 мг/кг массы тела в день (предпочтительно от 1 до 50 мг/кг в день). Дозировки, однако, могут варьироваться в зависимости от потребности пациентов, тяжести состояния, которое лечат, и соединения, которое используют. Можно использовать либо суточное введение, либо дозы, повторяемые через определенное время. Типично дозировка будет регулироваться врачом на основании особенностей пациента, его/ее состояния и требуемого терапевтического эффекта.
Предпочтительно эти композиции находятся в стандартных лекарственных формах, таких как таблетки, пилюли, капсулы, порошки, гранулы, стерильные парентеральные растворы или суспензии, дозированные аэрозоли или жидкие спреи, капли, ампулы, автоинжекторы или суппозитории, для перорального, парентерального, интраназального, сублингвального или ректального введения или для введения посредством ингаляции или инсуффляции. Альтернативно композиция может быть представлена в форме, подходящей для введения один раз в неделю или один раз в месяц; например, нерастворимая соль активного соединения, такая как деканоат, может быть адаптирована, чтобы обеспечить создание депо для внутримышечной инъекции. Для приготовления твердых композиций, таких как таблетки, основной активный ингредиент идеально смешивают с фармацевтическим носителем, например традиционными таблетирующими ингредиентами, такими как кукурузный крахмал, лактоза, сахароза, сорбит, тальк, стеариновая кислота, стеарат магния, двухкальциевый фосфат или камедь, и другими фармацевтическими разбавителями, например водой, для создания твердой композиции предварительного препарата, содержащей гомогенную смесь соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли. Описывая эти композиции предварительных препаратов как гомогенные, подразумевают, что активный ингредиент идеально диспергирован равномерно по всей композиции, так что композиция может быть легко разделена на равные эффективные лекарственные формы, такие как таблетки, пилюли и капсулы. Эта твердая композиция предварительного препарата может быть затем разделена на стандартные лекарственные формы по типу, описанному выше, содержащие от примерно 0,1 до примерно 1000 мг, предпочтительно от примерно 5 до примерно 500 мг активного ингредиента по настоящему изобретению.
Таблетки или пилюли новой композиции предпочтительно могут быть покрыты или иным образом составлены, чтобы обеспечить лекарственную форму, дающую преимущество в виде пролонгированного действия. Например, таблетка или пилюля может содержать внутренний и внешний дозируемый компонент, причем последний находится в виде оболочки над первым. Эти два компонента могут быть разделены энтеросолюбильным слоем, который служит для противодействия разрушению в желудке и позволяет внутреннему компоненту проходить неповрежденным в двенадцатиперстную кишку или высвобождаться замедленно. Ряд веществ может быть использован для таких энтеросолюбильных слоев или покрытий, при этом такие вещества включают в себя ряд полимерных кислот с такими веществами как шеллак, цетиловый спирт и ацетат целлюлозы.
Жидкие формы, в которые новые композиции по настоящему изобретению преимущественно могут быть включены для введения перорально или посредством инъекции, включают в себя водные растворы, подходящие ароматизированные сиропы, водные или масляные суспензии и ароматизированные эмульсии с пищевыми маслами, такими как хлопковое масло, кунжутное масло, кокосовое масло или арахисо
- 6 007434 вое масло, а также эликсиры и сходные фармацевтические носители. Подходящие диспергирующие или суспендирующие агенты для водных суспензий включают в себя синтетические или природные камеди, такие как трагакант, гуммиарабик, альгинат, декстран, карбоксиметилцеллюлоза натрия, метилцеллюлоза, поливинилпирролидон или желатин.
В тех случаях, когда способы получения соединений согласно изобретению приводят к получению смеси стереоизомеров, эти изомеры могут быть разделены при помощи традиционных методик, таких как препаративная хроматография. Соединения могут быть получены в рацемической форме или отдельные энантиомеры могут быть получены либо при помощи энантиоспецифичного синтеза, либо посредством разделения. Соединения, например, могут быть разделены на их составляющие энантиомеры при помощи стандартных методик, таких как образование диастереомерных пар посредством образования соли с оптически активной кислотой, такой как (-)-ди-паратолуоил-Э-винная кислота и/или (+)-ди-паратолуоил-Ь-винная кислота, с последующей фракционной кристаллизацией и регенерацией свободного основания. Соединения также могут быть разделены при помощи образования диастереомерных эфиров или амидов с последующим хроматографическим разделением и удалением хирального вспомогательного вещества. Альтернативно соединения могут быть разделены при использовании хиральной колонки ВЭЖХ (высокоэффективной жидкостной хроматографии).
При любом из способов получения соединений по настоящему изобретению может быть необходимым и/или желательным защищать чувствительные или активные группы в любых из упомянутых молекул. Это может быть достигнуто при помощи традиционных защитных групп, таких как описано в Рго1ес11уе Стоир ίη Отдашс Сйешкйу, еб. б.Р.ЭД. МеОш1е, Р1епит Ргекк, 1973; и Т.ЭД. Стееие & Р.С.М. ЭДи1к, Рто1ес11уе Сгоир ίη Отдашс 8уи1йек1к, Ιοίιη ЭДйеу & 8оик, 1991, упомянутые здесь посредством ссылки. Защитные группы могут быть удалены на любой подходящей последующей стадии, используя способы, известные в данной области техники.
Способ лечения состояний, модулируемых дипептидилпептидазой IV и ЭР1У-подобными ферментами, описанный в настоящем изобретении, также может быть осуществлен при использовании фармацевтической композиции, содержащей одно или более чем одно соединение, которое определено здесь, и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтическая композиция может содержать между примерно 0,01 и 1000 мг, предпочтительно от примерно 5 до примерно 500 мг соединений и может быть составлена в любой форме, подходящей для выбранного способа введения. Носители включают в себя необходимые и инертные фармацевтические эксципиенты, которые включают в себя связующие вещества, суспендирующие агенты, смазывающие вещества, ароматизаторы, подслащивающие вещества, консерванты, красители и покрытия, но не ограничиваются ими. Композиции, подходящие для перорального введения, включают в себя твердые формы, такие как пилюли, таблетки, каплеты, капсулы (каждая включает в себя препараты с немедленным высвобождением, отсроченным высвобождением и продолжительным высвобождением), гранулы и порошки, и жидкие формы, такие как растворы, сиропы, эликсиры, эмульсии и суспензии. Формы, полезные для парентерального введения включают в себя стерильные растворы, эмульсии и суспензии.
Преимущественно соединения по настоящему изобретению могут вводиться в однократной суточной дозе, или суммарная суточная доза может вводиться разделенными дозами два, три или четыре раза в день. Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут вводиться в интраназальной форме посредством местного применения подходящих интраназальных носителей или посредством трансдермальных кожных пластырей, хорошо известных специалистам в данной области техники. Для введения в форме трансдермальной системы доставки введение дозы будет, конечно, непрерывным, а не дробным на протяжении режима дозирования, и интенсивность дозировки необходимо будет соответственно корректировать, чтобы получить требуемые терапевтические эффекты.
Более предпочтительно, для перорального введения в форме таблетки или капсулы, активный компонент лекарственного средства может быть комбинирован с пероральным, нетоксичным фармацевтически приемлемым инертным носителем, таким как этанол, глицерин, вода и тому подобное. Более того, когда требуется или необходимо, подходящие связующие вещества, смазывающие вещества, разрыхлители и красители могут также быть включены в смесь. Подходящие связующие вещества включают в себя, без ограничения, крахмал, желатин, природные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, подслащивающие вещества кукурузы, природные и синтетические камеди, такие как гуммиарабик, трагакант, или олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и тому подобное. Разрыхлители включают в себя, без ограничения, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и тому подобное.
Для жидких форм подходят ароматизированные суспендирующие или диспергирующие агенты, такие как синтетические или природные камеди, например, трагакант, гуммиарабик, метилцеллюлоза и тому подобное. Для парентерального введения требуются стерильные суспензии и растворы. Изотонические препараты, которые обычно содержат подходящие консерванты, используются, когда требуется внутривенное введение.
Соединение по настоящему изобретению также может быть введено в форме липосомальных систем доставки, таких как однослойные везикулы, большие однослойные везикулы и многослойные вези
- 7 007434 кулы. Липосомы могут быть образованы из множества фосфолипидов, таких как холестерин, стериламин или фосфатидилхолины, используя способы, хорошо описанные в данной области техники.
Соединения по настоящему изобретению также могут быть соединены с растворимыми полимерами в качестве носителей лекарственных средств с целевой доставкой. Такие полимеры могут включать в себя поливинилпирролидон, сополимер пирана, полигидроксипропилметакриламидофенол, полигидроксиэтиласпартамидофенол или полиэтиленоксидполилизин, замещенный пальмитоиловым остатком. Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут быть соединены с классом биоразрушаемых полимеров, полезных для достижения контролируемого высвобождения лекарственного средства, например, с полиактиковой кислотой, полиэпсилонкапролактоном, полигидроксимасляной кислотой, полиортоэфирами, полиацеталями, полидигидропиранами, полицианакрилатами и поперечно-сшитыми или амфипатическими блоксополимерами гидрогелей.
Соединения по данному изобретению могут быть введены в любых вышеупомянутых композициях и в соответствии с режимами дозирования, установленными в данной области техники, когда бы ни потребовалось лечение расстройств, для терапии которых они предназначены.
Суточная дозировка продуктов может варьироваться в широком диапазоне от 0,01 до 1000 мг на взрослого человека в день. Для перорального введения, композиции предпочтительно предлагаются в форме таблеток, содержащих 0,01; 0,05; 0,1; 0,5; 1,0; 2,5; 5,0; 10,0; 15,0; 25,0; 50,0; 100; 150; 200; 250; 500 и 1000 мг активного ингредиента для симптоматического регулирования дозировки для пациента, которого подвергают лечению. Эффективное количество лекарственного средства обычно вводится при уровне дозировки от примерно 0,1 до примерно 300 мг/кг массы тела в день. Предпочтительно, диапазон составляет от примерно 1 до примерно 50 мг/кг массы тела в день. Соединения могут быть введены в режиме от 1 до 4 раз в день.
Оптимальные дозировки для введения могут быть легко определены специалистом в данной области техники и будут варьироваться в зависимости от конкретного используемого соединения, способа введения, активности лекарственного препарата, биодоступности, обусловленной способом введения, и развития болезненного состояния. Кроме того, факторы, связанные с конкретным пациентом, которого подвергают лечению, включающие возраст пациента, вес, диету и время введения обычно следует учитывать при подборе дозировок.
Соединения или композиции по настоящему изобретению можно принимать перед едой, во время еды или после еды.
При приеме перед едой, соединения или композиции по настоящему изобретению можно принимать за 1 ч, предпочтительно за 30 или даже 15 или 5 мин перед едой.
При приеме во время еды, соединения или композиции по настоящему изобретению можно смешивать с едой или принимать в виде самостоятельной лекарственной формы, как описано выше.
При приеме после еды, соединения или композиции по настоящему изобретению можно принимать через 5, 15 или 30 мин или даже через 1 ч после еды.
Примеры
Пример 1. Синтез свободного основания глутаминилпирролидина
Ацилирование
Ν-Бензилоксикарбонилглутамин (2,02 г; 7,21 ммоль) растворяли в 35 мл ТГФ (тетрагидрофурана) и доводили до -15°С. В эту смесь добавляли СА1ВЕ (изобутилхлорформиат) (0,937 мл; 7,21 ммоль) и 4метилморфолин (0,795 мл; 7,21 ммоль) и раствор перемешивали в течение 15 мин. Образование смешанного ангидрида проверяли при помощи ТСХ (тонкослойной хроматографии) (элюент: СНС13/МеОН: 9/1). После нагревания до -10°С добавляли пирролидин (0,596 мл; 7,21 ммоль). Смесь доводили до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи.
Обработка
Образовавшийся осадок отфильтровывали и выпаривали растворитель. Полученное масло собирали в этилацетат (20 мл) и промывали насыщенным раствором гидросульфата натрия, а затем насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, водой и рассолом. Органический слой отделяли, сушили и упаривали. Чистоту полученного продукта проверяли при помощи ТСХ (элюент: СНС13/МеОН: 9/1).
Выход: 1,18 г восковидного твердого вещества.
Расщепление
1,18 г полученного твердого Ζ-защищенного соединения растворяли в 40 мл абсолютного этанола. В раствор добавляли приблизительно 20 мг палладия на угле (10%, ГЬИКА), и суспензию встряхивали в атмосфере водорода в течение 3 ч. За ходом реакции наблюдали при помощи ТСХ (элюент: СНС13/МеОН: 9/1). После завершения реакции растворитель удаляли с получением свободного основания.
Выход: 99%.
Чистоту проверяли посредством ТСХ: н-бутанол/АсОН/вода/этилацетат: 1/1/1/1, К£ = 0,4.
Идентичность продукта реакции проверяли при помощи анализа ЯМР.
- 8 007434
Пример 2. Синтез гидрохлорида глутаминилтиазолидина Ацилирование
Ν-трет-Бутилоксикарбонилглутамин (2,0 г; 8,12 ммоль) растворяли в 5 мл ТГФ и доводили до -15°С. В эту смесь добавляли СА1ВЕ (изобутилхлорформиат) (1,06 мл; 8,12 ммоль) и 4-метилморфолин (0,895 мл; 8,12 ммоль), и раствор перемешивали в течение 15 мин. Образование смешанного ангидрида проверяли при помощи ТСХ (элюент: СНС1з/МеОН: 9/1). После нагревания до -10°С добавляли еще один эквивалент 4метилморфолина (0,895 мл; 8,12 ммоль) и гидрохлорид тиазолидина (1,02 г; 8,12 ммоль). Смесь доводили до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи.
Обработка
Образовавшийся осадок отфильтровывали и выпаривали растворитель. Полученное масло собирали в хлороформ (20 мл) и промывали насыщенным раствором гидросульфата натрия, а затем насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, водой и рассолом. Органический слой отделяли, сушили и упаривали. Чистоту полученного продукта проверяли при помощи ТСХ (элюент: СНС13/МеОН: 9/1).
Выход: 1,64 г твердого вещества.
Расщепление
640 мг полученного твердого Вос-защищенного соединения растворяли в 3,1 мл ледяной НС1 в диоксане (12,98 М; 20 эквивалентов) и оставляли на льду. За ходом реакции наблюдали при помощи ТСХ (элюент: СНС13/МеОН: 9/1). После завершения реакции растворитель удаляли, и полученное масло собирали в метанол и снова упаривали. После этого полученное масло сушили над оксидом фосфора V и дважды растирали с диэтиловым эфиром.
Выход: 0,265 г.
Чистоту проверяли при помощи ВЭЖХ.
Идентичность продукта реакции проверяли при помощи анализа ЯМР.
Пример 3. Синтез гидрохлорида глутаминилпирролидина
Ацилирование
Ν-трет-Бутилоксикарбонилглутамин (3,0 г; 12,18 ммоль) растворяли в 7 мл ТГФ и доводили до -15°С. В эту смесь добавляли СА1ВЕ (изобутилхлорформиат) (1,6 мл; 12,18 ммоль) и 4-метилморфолин (1,3 мл; 12,18 ммоль), и раствор перемешивали в течение 15 мин. Образование смешанного ангидрида проверяли при помощи ТСХ (элюент: СНС13/МеОН: 9/1). После нагревания до -10°С добавляли один эквивалент пирролидина (1,0 мл; 12,18 ммоль). Смесь доводили до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи.
Обработка
Образовавшийся осадок отфильтровывали и выпаривали растворитель. Полученное масло собирали в хлороформ (20 мл) и промывали насыщенным раствором гидросульфата натрия, а затем насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, водой и рассолом. Органический слой отделяли, сушили и упаривали. Чистоту полученного продукта проверяли при помощи ТСХ (элюент: СНС13/МеОН: 9/1).
Выход: 2,7 г твердого вещества.
Расщепление
2,7 г полученного твердого вещества растворяли в 13 мл ледяной НС1 в диоксане (12,98 М; 20 эквивалентов) и оставляли на льду. За ходом реакции наблюдали при помощи ТСХ (элюент: СНС13/МеОН: 9/1). После завершения реакции растворитель удаляли, и полученное масло собирали в метанол и снова упаривали. После этого полученное масло сушили над оксидом фосфора V и дважды растирали с диэтиловым эфиром.
Выход: 980 мг.
Чистоту проверяли при помощи ВЭЖХ.
Идентичность продукта реакции проверяли при помощи анализа ЯМР.
Пример 4. Определение К1
Для определения К1 глутаминилпирролидина и глутаминилтиазолидина использовали дипептидилпептидазу IV из почек свиньи с удельной активностью в отношении глицилпролил-4-нитроанилина 37,5 Ед/мг и концентрацией фермента в исходном растворе 1,41 мг/мл.
Анализируемая смесь:
Смешивали 100 мкл глутаминилпирролидина или глутаминилтиазолидина с концентрацией в пределах 1х10-5 - 1х10-7 М (глутаминилпирролидин) и 1х10-6 - 1х10-8 М (глутаминилтиазолидин), соответственно, с 50 мкл глицилпролил-4-нитроанилина в различных концентрациях (0,4 мМ; 0,2 мМ; 0,1 мМ; 0,05 мМ) и 100 мкл НЕРЕ8 (№[2-гидроксиэтил]пиперазин-№[2-этансульфоновой кислоты]) (40 мМ; рН 7,6; ионная сила = 0,125). Анализируемую смесь преинкубировали при 30°С в течение 30 мин. После преинкубации добавляли 20 мкл ЭРГУ (в разведении 1:600) и проводили измерение развития желтого окрашивания из-за высвобождения 4-нитроанилина при 30°С и X = 405 нм в течение 10 мин, используя прибор для считывания планшетов (НТ87000 р1ц§, АррИей Вюкуйешк, \Уейег51ай1 Оегшапу).
Значения К1 подсчитывали, используя Огарйй 4.0.15 (Егййасик 8ой^аге, Ь1й, ИК), на основании конкурентного ингибирования ΌΡΐν глутаминилпирролидином или глутаминилтиазолидином. Значения К1 определяли для глутаминилтиазолидина как К1= 3,12х10-7 М ± 5,11х10-10М и для глутаминилпирролидина как К1 = 1,30х10-6 М ± 8,49х10-8 М.
- 9 007434
Пример 5. Определение К1 в плазме человека
Плазма человека имеет активность, отщепляющую Ν-терминальный Хаа-Рго.
Смешивали 70 мкл глутаминилпирролидина или глутаминилтиазолидина с концентрацией в пределах 1х10-5 - 1х10-7 М (глутаминилпирролидин) и 1х10-6 - 1х10-8 М (глутаминилтиазолидин), соответственно, с 50 мкл глицилпролил-4-нитроанилина в различных концентрациях (0,4 мМ; 0,2 мМ; 0,1 мМ; 0,05 мМ) и 100 мкл НЕРЕ8 (40 мМ; рН 7,6). Анализируемую смесь преинкубировали при 30°С в течение 5 мин и 22 ч соответственно. После преинкубации добавляли 50 мкл плазмы человека и проводили измерение развития желтого окрашивания из-за высвобождения 4-нитроанилина при 30°С и X = 405 нм в течение 10 мин, используя прибор для считывания планшетов (НТ87000 р1и§, Аррйек ВюууЦспъ. ^ейегδίαάΐ. Сегтапу).
Значения К1 подсчитывали, используя СгарЬй 4.0.15 (Егййасик 8о£Щаге, Ь!к, ИК), на основании конкурентного ингибирования ΌΡΐν глутаминилпирролидином или глутаминилтиазолидином. Значения К1 определяли для глутаминилтиазолидина как К1 = 4,03х10-7 ± 2,19х10-10 М после 5 мин и 5,13х10-7 ± 1,26х10-8М после 22 ч преинкубации, и для глутаминилпирролидина как К1 = 1,30х10-6 ± 4,89х10-8М после 5 мин и 1,36х10-6 ± 3,21 х10-8 М после 22 ч преинкубации.
Пример 6. Ингибирование ΌΡΐν-подобных ферментов - дипептидилпептидазы II
ΌΡ II (3.4.14.2) отщепляет Ν-терминальные дипептиды от олигопептидов, если Ν-конец не протонирован (МсЭопа1к, ЕК., ЕШ§, 8. & ВеШу, Т.Е, 1966, I. Βίο1. СЬет., 241, 1494-1501). Рго и А1а в Р1положении являются предпочтительными остатками. Ферментную активность описывают как ЭРЮподобную активность, но ΌΡ II имеет оптимум рН в кислой области. Используемый фермент выделяли из почек свиньи.
Анализ:
Смешивали 100 мкл глутаминилпирролидина или глутаминилтиазолидина с концентрацией в пределах 1х10-4 - 5х10-8 М со 100 мкл буферного раствора (40 мМ НЕРЕ8; рН 7,6, 0,015% Вгу (Бридж - неионный детергент), 1 мМ ДТТ (1,4-дитиотрейтол)), 50 мкл раствора лизилаланиламинометилкумарина (5мМ) и 20 мкл свиной ОР II (с 250-кратным разведением в буферном растворе). Проводили измерение флуоресценции при 30°С и А[;озбужде[|[|я = 380 нм, Хэмиссии = 465 нм в течение 25 мин, используя прибор для считывания планшетов (НТ87000 р1и8, Аррйек ВюууЦепъ, ХУейегЦакГ Сегтапу).
Значения К1 подсчитывали, используя СгарЬй 4.0.15 (Егййасик 8о£Щаге, Ь!к, ИК), и определяли как К1 = 8,52х10-5 ± 6,33х10-6 М для глутаминилпирролидина и К1 = 1,07х10-5 ± 3,81х10-7 М для глутаминилтиазолидина.
Пример 7. Перекрестно реагирующие ферменты
Глутаминилпирролидин и глутаминилтиазолидин тестировали на способность к перекрестному реагированию с дипептидилпептидазой I, пролилолигопептидазой и пролидазой.
Дипептидилпептидаза I (ОР I, катепсин С)
ОР I или катепсин С представляет собой лизосомальную цистеинпротеазу, которая отщепляет дипептиды от Ν-конца субстратов (Си!тап, Н.В. & ЕгЩоп, Е8., 1948, I. ВюЕ СЬет., 174, 851-858). Ее классифицируют как цистеинпротеазу.
Используемый фермент закупали у ф1адеп (ф1адеп СтЬН, Нйкеп, Сегтапу). Для получения в полной мере активного фермента фермент разбавляли в 1000 раз в МЕ8 буфере с рН 5,6 (40 мМ МЕ8, 4 мМ ДТТ, 4 мМ КС1, 2 мМ ЭДТА, 0,015% Вгу) и преинкубировали в течение 30 мин при 30°С.
Анализ:
Смешивали 50 мкл глутаминилпирролидина или глутаминилтиазолидина с концентрацией в пределах 1х10-5 - 1х10-7 М со 110 мкл смеси буфера с ферментом. Анализируемую смесь преинкубировали при 30°С в течение 15 мин. После преинкубации добавляли 100 мкл гистидилсерил-в-нитроанилина (2х10-5М) и проводили измерение развития желтого окрашивания из-за высвобождения β-нитроанилина при 30°С и λ возбуждения = 380 нм, ^эмиссии = 465 нм в течение 10 мин, используя прибор для считывания планшетов (НТ87000 р1и8, Аррйек Вюкук!ет§, ХУейеШакГ Сегтапу).
Значения ГС50 подсчитывали, используя СгарЬй 4.0.15 (Егййасик 8ойгаге, Ь!к, ИК). Не обнаружено ингибирования ферментной активности ЭР I глутаминилпирролидином и глутаминилтиазолидином.
Пролилолигопептидаза (РОР)
Пролилолигопептидаза (ЕС 3.4.21.26) представляет собой сериновую эндопротеазу, которая отщепляет пептиды в Ν-терминальной части связи Хаа-Рго (^айег, В., 8Ь1апк, Н., С1а§8, ΕΌ., 8скетай7, ЕЬ & Кегепуг Т.Э., 1971, 8с1епсе, 173, 827-829). Субстратами являются пептиды с молекулярной массой до 3000 Да.
Используемый фермент представлял собой рекомбинантную человеческую пролилолигопептидазу. Рекомбинантную экспрессию проводили у Е.соН при стандартных условиях, как описано в данном уровне техники.
Анализ:
Смешивали 100 мкл глутаминилпирролидина или глутаминилтиазолидина с концентрацией в пределах 1х10-4 - 5х10-8 М со 100 мкл буферного раствора (40 мМ НЕРЕ8; рН 7,6, 0,015% Вгу, 1 мМ ДТТ) и
- 10 007434 мкл раствора РОР. Анализируемую смесь преинкубировали при 30°С в течение 15 мин. После преинкубации добавляли 50 мкл раствора глицилпролилпролил-4-нитроанилина (0,29 мМ) и проводили измерение развития желтого окрашивания из-за высвобождения 4-нитроанилина при 30°С и λ = 405 нм в течение 10 мин, используя прибор для считывания планшетов (8ипп5е, Тесап, СтаШНем, бегтапу).
Значения 1С50 подсчитывали, используя бгарЫ! 4.0.15 (Егййасик 8ойгаге, Ь1б, ИК). Не обнаружено ингибирования ферментной активности РОР глутаминилпирролидином и глутаминилтиазолидином.
Пролидаза (Х-Рго дипептидаза)
Пролидазу (ЕС 3.4.13.9) впервые описали Вегдтапп & Еги1оп (Вегдтапп, М. & Еги1оп, 18, 1937, 1. ΒίοΙ. СНет. 189-202). Пролидаза отщепляет Ν-терминальную аминокислоту от Хаа-Рго дипептидов и имеет оптимум рН между 6 и 9.
Пролидазу из почек свиньи (Κ.’Ν ВютебюаН, Ексйетеде, бегтапу) растворяли (1 мг/мл) в анализируемом буфере (20 мМ ΝΗ4^Η3№0)2, 3 мМ МпС12, рН 7,6). Для получения в полной мере активного фермента раствор инкубировали в течение 60 мин при комнатной температуре.
Анализ:
Смешивали 450 мкл глутаминилпирролидина или глутаминилтиазолидина с концентрацией в пределах 5х10-3 - 5х10-7 М с 500 мкл буферного раствора (20 мМ ΝΗ·ι(ί.Ή3,ί.Ό0)2: рН 7,6) и 250 мкл 11е-РгоОН (0,5 мМ в анализируемой смеси). Анализируемую смесь преинкубировали при 30°С в течение 5 мин. После преинкубации добавляли 75 мкл пролидазы (с разведением 1:10 в анализируемом буфере) и проводили измерение при 30°С и λ = 220 нм в течение 20 мин, используя иУ/Уй фотометр, ИУ1 (ТНегшо 8рескгошс, СатЬпбде, ИК).
Значения 1С50 подсчитывали, используя бгарЫ! 4.0.15 (Егййасик 8ой^аге, Ь1б, ИК). Их определяли как 1С50 > 3 мМ для глутаминилтиазолидина и как 1С50 = 3,4х10-4 М ± 5,63х10-5 для глутаминилпирролидина.
Пример 8. Стабильность в плазме
Для исследования стабильности глутаминилпирролидина или глутаминилтиазолидина в плазме человека, активность ИР1У в плазме устанавливали в определенное время. Среднюю активность ИР1У в плазме человека определяли как 43,69 Ед/мл. В рабочем растворе плазму разводили в 0,9% №1С1 для установления уровня активности ИР1У 25 Ед/мл.
Плазму и глутаминилпирролидин или глутаминилтиазолидин в различных концентрациях (5х10-5: 2,5х10-5; 1,25х10-5 М в плазме) инкубировали при 37°С. В определенное время отбирали образцы, используя автоматическую пипетку (б1коп 215, Ыс.|шб Напб1ег, бШоп), и переносили в планшет для микротитрования, содержащий 5х10-5 М глицилпролиламинометилкумарина в 0,9% №1С1 + 0,15% Вп) на ячейку. Через 6 мин реакцию прекращали при помощи добавления изолейцилтиазолидина (5х10-5 М в 0,9% растворе №1С1).
Измерение флуоресценции проводили относительно 0,9% №1С1 в плазме (стандартный образец), используя прибор для считывания планшетов (НТ87000 р1ц§, Аррйеб Вюкуйетк, ХУеПегДабЬ бегтапу). Период, за который наблюдалось 50%-ное снижение ингибиторной активности глутаминилпирролидина или глутаминилтиазолидина, подсчитывали при помощи построения графика ферментной активности относительно времени реакции.
Для обоих соединений не смогли определить этот полупериод. Считается, что вещество стабильно в плазме человека более 22 ч.
Пример 9. Определение ингибиторной активности глутаминилпирролидина или глутаминилтиазолидина в отношении ИРГУ после интравазального и перорального введения крысам линии \У|Чаг
Животные
Самцов крыс линии \УМаг (8Ное: ^ίδΐ(81ο)) с массой тела в пределах между 250 и 350 г закупали у ПегхисЫ 8с1юп\га1бе (8сйопета1бе, бегтапу).
Условия содержания
Животных содержали в клетках по одному в обычных условиях с контролируемой температурой (22±2°С) с чередующимся 12/12-часовым циклом свет/темнота (включение света в 6:00). Стандартный гранулированный корм СынГГ® 8ое§1, бегтапу) и подкисленную НС1 водопроводную воду давали без ограничений.
Введение катетера в сонную артерию
Через одну или более чем одну неделю адаптации к условиям содержания в сонную артерию крыс линии \УМаг имплантировали катетеры под общим наркозом (интраперитонеальная инъекция 0,25 мл/кг массы тела ромпуна (Вотрцп®) [2%], ВауегУйа1, бегтапу и 0,5 мл/кг массы тела кетамина 10, А1аго81 бтЬН & Со., ТМйппдеп, бегтапу). Животным давали восстановиться в течение одной недели. Катетеры промывали физиологическим раствором, содержащим гепарин (100 МЕд/мл) три раза в неделю. В случае дисфункции катетера, второй катетер вводили в противоположную сонную артерию соответствующей крысы. Через неделю восстановления после операции это животное повторно включали в исследование. В случае дисфункции второго катетера, животное исключали из исследования. Брали новое животное и продолжали эксперимент в плановом порядке, начиная по меньшей мере через 7 дней после
- 11 007434 имплантации катетера.
Планирование эксперимента
Крысам с нормально функционирующим катетером вводили плацебо (1 мл физиологического раствора, 0,154 моль/л) или 100 мг/кг массы тела глутаминилпирролидина или 100 мг/кг массы тела глутаминилтиазолидина посредством перорального и интравазального (внутриартериального) пути введения.
После голодания в течение ночи отбирали образцы гепаринизированной артериальной крови по 100 мкл в -30, -5 и 0 мин. Тестируемое вещество растворяли в 1,0 мл физиологического раствора (0,154 моль/л) и сразу же вводили в 0 мин либо перорально при помощи питательной трубки (75 мм; Еше 8С1епсе Тоо1а, Не10е1Ьегд. Сегтапу) или посредством интравазального пути введения. В случае перорального введения, в артериальный катетер дополнительно вводили 1 мл физиологического раствора. В случае внутриартериального введения, катетер сразу же промывали 30 мкл физиологического раствора и дополнительно давали 1 мл физиологического раствора перорально при помощи питательной трубки. После применения плацебо или тестируемого вещества отбирали образцы артериальной крови в 2,5; 5; 7,5; 10; 15; 20; 40; 60 и 120 мин из катетера сонной артерии находящихся в сознании нормальных крыс. Все образцы крови отбирали в ледяные пробирки Эппендорфа (ЕррепбогГ-МеШе1ег-Нш7, НатЬигд, Сегтапу), наполненные 10 мкл 1 М буферного раствора на основе цитрата натрия (рН 3,0), для измерения активности ΌΡΐν в плазме. Пробирки Эппендорфа сразу же центрифугировали (12000 об/мин в течение 2 мин, НеШс11 2еп1пГиде ЕВА 12, ТиШшдеп, Сегтапу). Фракции плазмы хранили на льду до анализа или замораживали при -20°С до анализа. Все образцы плазмы помечали следующими данными:
кодовый номер, номер животного, дата отбора образца, время отбора образца.
Аналитические методы
Анализируемая смесь для определения активности ΌΡΐν в плазме содержала 80 мкл реагента и 20 мкл образца плазмы. Проводили измерение кинетики образования желтого продукта 4-нитроанилина из субстрата глицилпролил-4-нитроанилина при 390 нм в течение 1 мин при 30°С через 2 мин преинкубации при такой же температуре. Активность ΌΡΐν выражали в мЕд/мл.
Статистические методы
Статистические оценки и построение графиков производили при помощи ΡΒΙ8Μ® 3.02 (СтарйРаб Зойгаге, 1пс.). Все параметры анализировали описательно, включая среднее значение и среднеквадратичное отклонение.
Результаты
Соединения глутаминилпирролидин и глутаминилтиазолидин в дозе 100 мг/кг массы тела по сравнению с плацебо ингибировали активность ΌΡΐν в плазме после перорального и интравазального введения (см. фиг. 1 и 2).
Пример 10. Исследование возрастания доз на крысах линии 2искег с ожирением после перорального введения глутаминилпирролидина
Животные самцов крыс линии 2искег (Га/Га) со средним возрастом 11 недель (5-12 недель), средней массой тела 350 г (150-400 г) закупали у СНаг1е8 Ктуег (8и1хГе1Д Сегтапу). После доставки их содержали в течение более чем 12 недель до тех пор, пока почти все крысы линии 2искег с ожирением не приобретали признаки явного сахарного диабета. Группу из 8 животных отбирали для тестирования трех возрастающих доз глутаминилпирролидина в сравнении с плацебо (физиологическим раствором).
Условия содержания
Животных содержали в клетках по одному в обычных условиях с контролируемой температурой (22±2°С) с чередующимся 12/12-часовым циклом свет/темнота (включение света в 6:00). Стерильный стандартный гранулированный корм (ззшГГ® Зоеа!, Сегтапу) и подкисленную НС1 водопроводную воду давали без ограничений.
Катетеризация сонной артерии
Крыс линии 2искег с ожирением в возрасте 24-31 недели (в среднем: 25 недель), адаптировавшихся к условиям содержания, основательно подготавливали для исследования.
В сонную артерию крыс линии 2искег с ожирением имплантировали катетеры под общим наркозом (интраперитонеальная инъекция 0,25 мл/кг массы тела ромпуна [2%], ВауегМ1:а1, Сегтапу и 0,5 мл/кг массы тела кетамина 10, А1аго81 СтЬН & Со., ТМзйшдеп, Сегтапу). Животным давали восстановиться в течение одной недели. Катетеры промывали физиологическим раствором, содержащим гепарин (100 МЕд/мл) три раза в неделю.
Планирование эксперимента
Группам, состоящим из 8 крыс линии 2искег с ожирением, вводили плацебо (1 мл физиологического раствора, 0,154 моль/л) или возрастающие дозы глутаминилпирролидина (5, 15 и 50 мг/кг массы тела). 375 мг глутаминилпирролидина растворяли в 1000 мкл ДМСО (Е.Мегск, ИагтзЕаФ, Сегтапу [диметилсульфоксид р.а.]). Добавляли 10 мл физиологического раствора, и аликвоты по 1 мл, каждая из которых
- 12 007434 содержала по 34,09 мг глутаминилпирролидина, хранили при -20°С. Для приготовления тестируемого вещества дозозависимые аликвоты разводили в физиологическом растворе.
После голодания в течение ночи крысам линии 2искег с ожирением вводили плацебо или тестируемое вещество перорально при помощи питательной трубки (15 6, 75 мм; Рте каепсе Тоок, Не1йе1Ьегд, бегтапу) в -10 минут. Для постановки теста толерантности к глюкозе (ОбТТ) вводили 2 г/кг массы тела глюкозы (40%-ный раствор, В. Вгаип Ме18ипдеп, Ме18ипдеп, бегтапу) в ± 0 мин при помощи второй питательной трубки. Образцы венозной крови из хвостовых вен отбирали в -30 мин, -15 мин, ± 0 мин и в 5, 10, 15, 20, 30, 40, 60, 90 и 120 мин в стеклянные капилляры по 20 мкл, которые помещали в стандартные пробирки, наполненные 1 мл раствора для измерения глюкозы в крови.
Все образцы плазмы помечали следующими данными:
кодовый номер, номер животного, дата отбора образца, время отбора образца.
Аналитические методы
Уровни глюкозы измеряли, используя глюкозооксидазный метод (анализатор глюкозы 8ирег С; Иг. Ми11ег 6ега1еЬаи, Егейа1, бегтапу).
Статистические методы
Статистические оценки и построение графиков производили при помощи РШ8М® 3.02 (бгарйРай 8ойгаге, 1пс.). Все параметры анализировали описательно, включая среднее значение и среднеквадратичное отклонение.
Воздействие лечения на толерантность к глюкозе
Крысы линии 2искег, больные диабетом, которых лечили плацебо, показали сильно возрастающие отклонения уровней глюкозы в крови, указывающие на интолерантность к глюкозе при явном сахарном диабете. Введение 5 мг/кг массы тела глутаминилпирролидина приводило к ограниченному улучшению толерантности к глюкозе у крыс линии 2искег, больных диабетом. Значительное снижение повышенных уровней глюкозы в крови и улучшение толерантности к глюкозе достигали после введения 15 мг/кг и 50 мг/кг массы тела глутаминилпирролидина (см. фиг. 3).
Пример 11. Исследование возрастания доз на крысах линии 2искег с ожирением после перорального введения глутаминилтиазолидина
Животные самцов крыс линии 2искег (Га/Га) со средним возрастом 11 недель (5-12 недель), средней массой тела 350 г (150-400 г) закупали у Сйаг1е§ Ктуег (Зи1хГе1й. бегтапу). После доставки их содержали в течение более чем 12 недель до тех пор, пока почти все крысы линии 2искег с ожирением не приобретали признаки явного сахарного диабета. Группу из 8 животных отбирали для тестирования трех возрастающих доз глутаминилтиазолидина в сравнении с плацебо (физиологическим раствором).
Условия содержания
Животных содержали в клетках по одному в обычных условиях с контролируемой температурой (22±2°С) с чередующимся 12/12-часовым циклом свет/темнота (включение света в 6:00). Стерильный стандартный гранулированный корм (ккшй® 8ое§1, бегтапу) и подкисленную НС1 водопроводную воду давали без ограничений.
Катетеризация сонной артерии
Крыс линии 2искег с ожирением в возрасте 24-31 недели (в среднем: 25 недель), адаптировавшихся к условиям содержания, основательно подготавливали для исследования.
В сонную артерию крыс линии 2искег с ожирением имплантировали катетеры под общим наркозом (интраперитонеальная инъекция 0,25 мл/кг массы тела ромпуна [2%], ВауегУйак бегтапу и 0,5 мл/кг массы тела кетамина 10, Л1аго81 бтЬН & Со., Т^к1ппдеп, бегтапу). Животным давали восстановиться в течение одной недели. Катетеры промывали физиологическим раствором, содержащим гепарин (100 МЕд/мл) три раза в неделю.
Планирование эксперимента
Группам, состоящим из 8 крыс линии 2искег с ожирением, вводили плацебо (1 мл физиологического раствора, 0,154 моль/л) или возрастающие дозы глутаминилтиазолидина (5, 15 и 50 мг/кг массы тела). Соответствующие количества глутаминилтиазолидина растворяли в 1000 мкл физиологического раствора. После голодания в течение ночи крысам линии 2искег с ожирением вводили плацебо или тестируемое вещество перорально при помощи питательной трубки (15 б, 75 мм; Рте каепсе Тоо1к, Не1йе1Ьегд, бегтапу) в -10 мин. Для постановки теста толерантности к глюкозе (ОбТТ) вводили 2 г/кг массы тела глюкозы (40%-ный раствор, В. Вгаип Ме18ипдеп, Мекипдеп, бегтапу) в ± 0 мин при помощи второй питательной трубки. Образцы венозной крови из хвостовых вен отбирали в -30 мин, -15 мин, ± 0 мин и в 5, 10, 15, 20, 30, 40, 60, 90 и 120 мин в стеклянные капилляры по 20 мкл, которые помещали в стандартные пробирки, наполненные 1 мл раствора для измерения глюкозы в крови.
Все образцы плазмы помечали следующими данными:
- 13 007434 кодовый номер, номер животного, дата отбора образца, время отбора образца.
Аналитические методы
Уровни глюкозы измеряли, используя глюкозооксидазный метод (анализатор глюкозы 8ирег О; Иг. Ми11ег Оега1еЪаи, ЕгеПаЕ Оегтапу).
Статистические методы
Статистические оценки и построение графиков производили при помощи РК18М® 3.02 (ОгарйРад 8оГ1\\ше, 1пс.). Все параметры анализировали описательно, включая среднее значение и среднеквадратичное отклонение.
Воздействие лечения на толерантность к глюкозе
Крысы линии /искег, больные диабетом, которых лечили плацебо, показали сильно возрастающие отклонения уровней глюкозы в крови, указывающие на интолерантность к глюкозе при явном сахарном диабете. Введение 5 мг/кг массы тела, 15 и 50 мг/кг массы тела глутаминилтиазолидина приводило к дозозависимому снижению повышенных уровней глюкозы в крови и улучшению толерантности к глюкозе у крыс линии /искег, больных диабетом (см. фиг. 4).
Пример 12. Инактивация глутаминилтиазолидина после перорального введения крысам линии АТ1аг ίη νίνο
Животные/Планирование эксперимента
Глутаминилтиазолидин вводили перорально крысам линии А181аг, как описано в примере 9.
Аналитические методы
После применения плацебо или глутаминилтиазолидина отбирали образцы артериальной крови в 2,5; 5; 7,5; 10; 15; 20; 40; 60 и 120 мин из катетера сонной артерии находящихся в сознании нормальных крыс для определения образования продуктов превращения глутаминилтиазолидина.
Для анализа использовали простой метод твердофазной экстракции на картриджах С 18 для выделения интересующих соединений из плазмы. Экстракты анализировали, используя жидкостную хроматографию с обращенной фазой на колонке Ысйгозрйег 60 КР 8е1ес1 В, с последующей тандемной массспектрометрией, действующей в режиме регистрации положительных ионов АРС1 (химическая ионизация при атмосферном давлении).
Для определения количества использовали метод внутреннего стандарта.
Результаты
После перорального введения глутаминилтиазолидина крысам линии А181аг обнаружили превращение соединения. Используя 1.СМ8, смогли определить продукт превращения как пироглутамилтиазолидин. См. фиг. 5 и 6.

Claims (11)

1. Соединение формулы где X = СН2 или 8, или его соль присоединения кислоты.
2. Соединение по п.1, где соль присоединения кислоты выбрана из группы, состоящей из солей соляной, бромисто-водородной, перхлорной, серной, азотной, фосфорной, уксусной, пропионовой, гликолевой, молочной, янтарной, малеиновой, фумаровой, яблочной, винной, лимонной, бензойной, миндальной, метансульфоновой, гидроксиэтансульфоновой, бензолсульфоновой, щавелевой, памовой, 2нафталинсульфоновой, паратолуолсульфоновой, циклогексансульфаминовой, салициловой, сахариновой и трифторуксусной кислоты.
3. Соль присоединения кислоты соединения формулы
- 14 007434 где X = СН2 или 8 и где соль присоединения кислоты выбрана из группы, состоящей из солей соляной, бромисто-водородной, перхлорной, азотной, пропионовой, гликолевой, молочной, малеиновой, яблочной, лимонной, бензойной, миндальной, метансульфоновой, гидроксиэтансульфоновой, бензолсульфоновой, щавелевой, памовой, 2-нафталинсульфоновой, паратолуолсульфоновой, циклогексансульфаминовой, салициловой, сахариновой и трифторуксусной кислоты.
4. Соединение по п.3, выбранное из гидрохлорида глутаминилтиазолидина или гидрохлорида глутаминилпирролидина.
5. Гидрохлорид глутаминилтиазолидина.
6. Гидрохлорид глутаминилпирролидина.
7. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и/или разбавитель и соединение по любому из пп.1-6.
8. Способ ингибирования дипептидилпептидазы IV или дипептидилпептидаза ΐν-подобной ферментной активности для предупреждения или лечения заболеваний или состояний, связанных с дипептидилпептидазой IV или дипептидилпептидаза ΐν-подобными ферментами, при котором млекопитающему, нуждающемуся в подобном лечении, вводят терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-6.
9. Способ по п.8, при котором снижают уровни глюкозы в крови у млекопитающих, являющиеся следствием приема пищи.
10. Способ по п.8 или 9, при котором предупреждают или лечат заболевания или состояния, выбранные из группы, состоящей из инсулиннезависимого сахарного диабета, артрита, ожирения, иммунных и аутоиммунных расстройств, аллотрансплантации, рака, нейрональных расстройств и кожных заболеваний.
11. Способ по п.10, при котором предупреждают или лечат инсулиннезависимый сахарный диабет.
EA200401062A 2002-02-28 2002-06-27 Ингибиторы dpiv на основе глутаминила EA007434B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US36090902P 2002-02-28 2002-02-28
PCT/EP2002/007124 WO2003072556A1 (en) 2001-06-27 2002-06-27 Glutaminyl based dpiv inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200401062A1 EA200401062A1 (ru) 2005-02-24
EA007434B1 true EA007434B1 (ru) 2006-10-27

Family

ID=23419891

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200401062A EA007434B1 (ru) 2002-02-28 2002-06-27 Ингибиторы dpiv на основе глутаминила

Country Status (27)

Country Link
US (2) US6946480B2 (ru)
EP (1) EP1480961B1 (ru)
JP (1) JP2005527504A (ru)
KR (1) KR20040095241A (ru)
CN (1) CN1622941A (ru)
AT (1) ATE349435T1 (ru)
AU (1) AU2002325278A1 (ru)
BG (1) BG108857A (ru)
BR (1) BR0215622A (ru)
CA (1) CA2479812A1 (ru)
CZ (1) CZ2004973A3 (ru)
DE (2) DE20220238U1 (ru)
DK (1) DK1480961T3 (ru)
EA (1) EA007434B1 (ru)
ES (1) ES2278944T3 (ru)
HK (1) HK1067120A1 (ru)
HU (1) HUP0600057A2 (ru)
IL (1) IL163629A0 (ru)
MX (1) MXPA04008278A (ru)
NO (1) NO20044038L (ru)
NZ (1) NZ534877A (ru)
PL (1) PL372316A1 (ru)
PT (1) PT1480961E (ru)
SI (1) SI1480961T1 (ru)
SK (1) SK3622004A3 (ru)
UA (1) UA76309C2 (ru)
ZA (1) ZA200406813B (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2499792C2 (ru) * 2009-03-30 2013-11-27 Донг-А Фармасьютикал. Ко., Лтд Усовершенствованный способ получения ингибитора дипептидилпептидазы-iv и промежуточного соединения

Families Citing this family (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100458403B1 (ko) * 1997-09-29 2004-11-26 포인트 써러퓨틱스, 인크. 생체외 조혈세포의 자극방법
DE19823831A1 (de) * 1998-05-28 1999-12-02 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Neue pharmazeutische Verwendung von Isoleucyl Thiazolidid und seinen Salzen
US6979697B1 (en) * 1998-08-21 2005-12-27 Point Therapeutics, Inc. Regulation of substrate activity
US6890904B1 (en) * 1999-05-25 2005-05-10 Point Therapeutics, Inc. Anti-tumor agents
US20070293426A1 (en) * 2001-04-02 2007-12-20 Hans-Ulrich Demuth Methods for improving islet signaling in diabetes mellitus and for its prevention
DE60223920T2 (de) * 2001-06-27 2008-11-13 Smithkline Beecham Corp. Pyrrolidine als dipeptidyl-peptidase-inhibitoren
US20040242568A1 (en) 2003-03-25 2004-12-02 Syrrx, Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors
US7169926B1 (en) 2003-08-13 2007-01-30 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
US7678909B1 (en) 2003-08-13 2010-03-16 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
US7790736B2 (en) 2003-08-13 2010-09-07 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
AU2004267955A1 (en) * 2003-09-02 2005-03-10 Prosidion Ltd. Combination therapy for glycaemic control
US7790734B2 (en) 2003-09-08 2010-09-07 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
US7732446B1 (en) 2004-03-11 2010-06-08 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
CN102134229B (zh) 2004-03-15 2020-08-04 武田药品工业株式会社 二肽基肽酶抑制剂
WO2005118555A1 (en) 2004-06-04 2005-12-15 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
WO2006019965A2 (en) 2004-07-16 2006-02-23 Takeda San Diego, Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors
WO2006012395A2 (en) * 2004-07-23 2006-02-02 Susan Marie Royalty Peptidase inhibitors
US20060063719A1 (en) * 2004-09-21 2006-03-23 Point Therapeutics, Inc. Methods for treating diabetes
WO2006068978A2 (en) * 2004-12-21 2006-06-29 Takeda Pharmaceutial Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
DOP2006000008A (es) 2005-01-10 2006-08-31 Arena Pharm Inc Terapia combinada para el tratamiento de la diabetes y afecciones relacionadas y para el tratamiento de afecciones que mejoran mediante un incremento de la concentración sanguínea de glp-1
ZA200708179B (en) 2005-04-22 2009-12-30 Alantos Pharmaceuticals Holding Inc Dipeptidyl peptidase-IV inhibitors
PL1942898T5 (pl) 2005-09-14 2014-10-31 Takeda Pharmaceuticals Co Inhibitory peptydazy dipeptydylowej do leczenia cukrzycy
CN102675221A (zh) 2005-09-16 2012-09-19 武田药品工业株式会社 用于制备嘧啶二酮衍生物的方法中的中间体
CN1979367B (zh) * 2005-11-30 2013-05-15 北京中电华大电子设计有限责任公司 采用测试校准提高器件参数精度的方法
WO2007112347A1 (en) 2006-03-28 2007-10-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
UA97479C2 (ru) 2006-04-11 2012-02-27 Арена Фармасьютикалз, Инк. Применение g-белок-связанного рецептора (gpcr) для идентификации средств, которые усиливают секрецию глюкозозависимого инсулинотропного пептида (gi)
PE20071221A1 (es) 2006-04-11 2007-12-14 Arena Pharm Inc Agonistas del receptor gpr119 en metodos para aumentar la masa osea y para tratar la osteoporosis y otras afecciones caracterizadas por masa osea baja, y la terapia combinada relacionada a estos agonistas
US8324383B2 (en) 2006-09-13 2012-12-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Methods of making polymorphs of benzoate salt of 2-[[6-[(3R)-3-amino-1-piperidinyl]-3,4-dihydro-3-methyl-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinyl]methyl]-benzonitrile
TW200838536A (en) 2006-11-29 2008-10-01 Takeda Pharmaceutical Polymorphs of succinate salt of 2-[6-(3-amino-piperidin-1-yl)-3-methyl-2,4-dioxo-3,4-dihydro-2H-pyrimidin-1-ylmethy]-4-fluor-benzonitrile and methods of use therefor
US8093236B2 (en) 2007-03-13 2012-01-10 Takeda Pharmaceuticals Company Limited Weekly administration of dipeptidyl peptidase inhibitors
EP2108960A1 (en) 2008-04-07 2009-10-14 Arena Pharmaceuticals, Inc. Methods of using A G protein-coupled receptor to identify peptide YY (PYY) secretagogues and compounds useful in the treatment of conditons modulated by PYY
AR077642A1 (es) 2009-07-09 2011-09-14 Arena Pharm Inc Moduladores del metabolismo y el tratamiento de trastornos relacionados con el mismo
MX2012011631A (es) 2010-04-06 2013-01-18 Arena Pharm Inc Moduladores del receptor gpr119 y el tratamiento de trastornos relacionados con el mismo.
BR112013008100A2 (pt) 2010-09-22 2016-08-09 Arena Pharm Inc "moduladores do receptor de gpr19 e o tratamento de distúrbios relacionados a eles."
CN102453001B (zh) * 2010-10-22 2016-06-01 中国医学科学院药物研究所 硫代吗啉类化合物及其制备方法和用途
US20140018371A1 (en) 2011-04-01 2014-01-16 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators Of The GPR119 Receptor And The Treatment Of Disorders Related Thereto
WO2012145361A1 (en) 2011-04-19 2012-10-26 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
WO2012145604A1 (en) 2011-04-22 2012-10-26 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
WO2012145603A1 (en) 2011-04-22 2012-10-26 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
WO2012170702A1 (en) 2011-06-08 2012-12-13 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
WO2013055910A1 (en) 2011-10-12 2013-04-18 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
WO2014074668A1 (en) 2012-11-08 2014-05-15 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of gpr119 and the treatment of disorders related thereto
CA2979033A1 (en) 2015-03-09 2016-09-15 Intekrin Therapeutics, Inc. Methods for the treatment of nonalcoholic fatty liver disease and/or lipodystrophy
US11253508B2 (en) 2017-04-03 2022-02-22 Coherus Biosciences, Inc. PPARy agonist for treatment of progressive supranuclear palsy

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DD296075A5 (de) * 1989-08-07 1991-11-21 Martin-Luther-Universitaet Halle-Wittenberg,De Verfahren zur herstellung neuer inhibitoren der dipeptidyl peptidase iv
WO1995015309A1 (en) * 1993-12-03 1995-06-08 Ferring B.V. Dp-iv-serine protease inhibitors
WO1999061431A1 (de) * 1998-05-28 1999-12-02 Probiodrug Gesellschaft für Arzneimittelforschung mbH Neue effektoren von dipeptidylpeptidase iv

Family Cites Families (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE296075C (ru)
US2961377A (en) 1957-08-05 1960-11-22 Us Vitamin Pharm Corp Oral anti-diabetic compositions and methods
US3174901A (en) 1963-01-31 1965-03-23 Jan Marcel Didier Aron Samuel Process for the oral treatment of diabetes
DE2009743A1 (de) 1970-03-03 1971-09-16 Farbenfabriken Bayer Ag, 5090 Leverkusen Substituierte Biguanide mit antihyperglykämischer Wirkung
US3879541A (en) 1970-03-03 1975-04-22 Bayer Ag Antihyperglycemic methods and compositions
US3960949A (en) 1971-04-02 1976-06-01 Schering Aktiengesellschaft 1,2-Biguanides
CH602612A5 (ru) 1974-10-11 1978-07-31 Hoffmann La Roche
US4935493A (en) 1987-10-06 1990-06-19 E. I. Du Pont De Nemours And Company Protease inhibitors
US5433955A (en) 1989-01-23 1995-07-18 Akzo N.V. Site specific in vivo activation of therapeutic drugs
EP0512042B1 (en) 1990-01-24 1998-04-08 BUCKLEY, Douglas I. Glp-1 analogs useful for diabetes treatment
US5462928A (en) 1990-04-14 1995-10-31 New England Medical Center Hospitals, Inc. Inhibitors of dipeptidyl-aminopeptidase type IV
ATE148130T1 (de) 1990-04-14 1997-02-15 New England Medical Center Inc Typ-iv-dipeptidyl-aminopeptidase-inhibitoren
WO1991017767A1 (en) 1990-05-21 1991-11-28 New England Medical Center Hospitals, Inc. Method of treating inhibition of dipeptidyl aminopeptidase type iv
JPH0819154B2 (ja) 1991-03-14 1996-02-28 江崎グリコ株式会社 ジペプチジルカルボキシペプチダーゼを阻害するペプチド
JPH04334357A (ja) 1991-05-02 1992-11-20 Fujirebio Inc 酵素阻害作用を有するアシル誘導体
EP0610317B1 (en) 1991-10-22 2001-01-31 New England Medical Center Hospitals, Inc. Inhibitors of dipeptidyl-aminopeptidase type iv
IL106998A0 (en) 1992-09-17 1993-12-28 Univ Florida Brain-enhanced delivery of neuroactive peptides by sequential metabolism
FR2696740B1 (fr) 1992-10-13 1994-12-30 Dospharma Sa Dérivés prodrogués de la diméthylbiguanide et applications comme médicaments.
WO1995011689A1 (en) 1993-10-29 1995-05-04 Trustees Of Tufts College Use of inhibitors of dipeptidyl-aminopeptidase to block entry of hiv into cells
CA2137206A1 (en) 1993-12-09 1995-06-10 John A. Galloway Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods
US5543396A (en) 1994-04-28 1996-08-06 Georgia Tech Research Corp. Proline phosphonate derivatives
US5512549A (en) 1994-10-18 1996-04-30 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptide analogs, compositions, and methods of use
US5614379A (en) 1995-04-26 1997-03-25 Eli Lilly And Company Process for preparing anti-obesity protein
DE19616486C5 (de) 1996-04-25 2016-06-30 Royalty Pharma Collection Trust Verfahren zur Senkung des Blutglukosespiegels in Säugern
CZ389398A3 (cs) 1996-05-29 1999-07-14 Prototek, Inc. Proléčiva thalidomidu a jejich použití pro modulaci funkce T-buněk
US6006753A (en) 1996-08-30 1999-12-28 Eli Lilly And Company Use of GLP-1 or analogs to abolish catabolic changes after surgery
US5827898A (en) 1996-10-07 1998-10-27 Shaman Pharmaceuticals, Inc. Use of bisphenolic compounds to treat type II diabetes
TW492957B (en) 1996-11-07 2002-07-01 Novartis Ag N-substituted 2-cyanopyrrolidnes
AR016751A1 (es) 1996-11-22 2001-08-01 Athena Neurosciences Inc Metodo para inhibir la liberacion del peptido beta-amiloide en una celula, composicion farmaceutica y compuestos utiles en dicho metodo
AU3034299A (en) 1998-03-09 1999-09-27 Fondatech Benelux N.V. Serine peptidase modulators
KR100704814B1 (ko) 1998-06-05 2007-04-10 포인트 써러퓨틱스, 인크. 시클릭 보로프롤린 화합물
DE19826972A1 (de) 1998-06-18 1999-12-23 Univ Magdeburg Tech Verwendung von Enzyminhibitoren und pharmazeutische Zubereitung zur Therapie von dermatologischen Erkrankungen mit follikulären und epidermalen Hyperkeratosen und einer verstärkten Keratinozytenproliferation
WO2000001849A1 (en) 1998-07-02 2000-01-13 Invitro Diagnostics, Inc. Methods, compositions and apparatus for making nucleic acid molecules having a selected affinity to a target molecule
DE19834591A1 (de) 1998-07-31 2000-02-03 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Verfahren zur Steigerung des Blutglukosespiegels in Säugern
AU5480199A (en) 1998-08-21 2000-03-14 Point Therapeutics, Inc. Regulation of substrate activity
WO2000053171A1 (en) 1999-03-05 2000-09-14 Molteni L. E C. Dei Fratelli Alitti Societa' Di Esercizio S.P.A. Use of metformin in the preparation of pharmaceutical compositions capable of inhibiting the enzyme dipeptidyl peptidase iv
JP2003535034A (ja) 1999-11-12 2003-11-25 ギルフォード ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ジペプチジルペプチダーゼｉｖ阻害剤並びにジペプチジルペプチダーゼｉｖ阻害剤の製造及び使用法
JP2003523396A (ja) 2000-02-25 2003-08-05 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ ベータ細胞変性の抑制
KR20080067009A (ko) 2000-03-31 2008-07-17 프로시디온 리미티드 디펩티딜 펩티다제 ⅳ 효소 활성 억제제를 포함하는약제학적 조성물
US6573096B1 (en) 2000-04-01 2003-06-03 The Research Foundation At State University Of New York Compositions and methods for inhibition of cancer invasion and angiogenesis
DE10025464A1 (de) 2000-05-23 2001-12-06 Inst Medizintechnologie Magdeb Kombinierte Verwendung von Enzyminhibitoren zur Therapie von Autoimmunerkrankungen, bei Transplantationen und Tumorerkrankungen sowie Kombinationen von Enzyminhibitoren umfassende pharmazeutische Zubereitungen
GB0014969D0 (en) 2000-06-19 2000-08-09 Smithkline Beecham Plc Novel method of treatment
EP1315829B1 (en) 2000-09-09 2010-07-28 The Research Foundation Of State University Of New York Method and compositions for isolating metastatic cancer cells, and use in measuring metastatic potential of a cancer thereof
CA2424964C (en) * 2000-10-06 2007-12-04 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Nitrogen-containing 5-membered ring compound

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DD296075A5 (de) * 1989-08-07 1991-11-21 Martin-Luther-Universitaet Halle-Wittenberg,De Verfahren zur herstellung neuer inhibitoren der dipeptidyl peptidase iv
WO1995015309A1 (en) * 1993-12-03 1995-06-08 Ferring B.V. Dp-iv-serine protease inhibitors
WO1999061431A1 (de) * 1998-05-28 1999-12-02 Probiodrug Gesellschaft für Arzneimittelforschung mbH Neue effektoren von dipeptidylpeptidase iv

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DEMUTH H.-U. ET AL.: "Design of (omega-N-(O-acyl)hydroxy amid) aminodicarboxylic acid pyrrolidides as potent inhibitors of proline-specific peptidases." FEBS (FEDERATION OF EUROPEAN BIOCHEMICAL SOCIETIES) LETTERS, vol. 320, no. 1, 1993, pages 23-27, XP001007983, ISSN: 0014-5793, the whole document *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2499792C2 (ru) * 2009-03-30 2013-11-27 Донг-А Фармасьютикал. Ко., Лтд Усовершенствованный способ получения ингибитора дипептидилпептидазы-iv и промежуточного соединения

Also Published As

Publication number Publication date
US20040167191A1 (en) 2004-08-26
EP1480961A1 (en) 2004-12-01
SK3622004A3 (sk) 2005-02-04
US6946480B2 (en) 2005-09-20
ATE349435T1 (de) 2007-01-15
BR0215622A (pt) 2004-12-07
ZA200406813B (en) 2006-06-28
DE20220238U1 (de) 2003-05-08
EP1480961B1 (en) 2006-12-27
CN1622941A (zh) 2005-06-01
HUP0600057A2 (en) 2006-05-29
BG108857A (en) 2005-12-30
US7060719B2 (en) 2006-06-13
JP2005527504A (ja) 2005-09-15
KR20040095241A (ko) 2004-11-12
UA76309C2 (en) 2006-07-17
AU2002325278A1 (en) 2003-09-09
MXPA04008278A (es) 2005-09-20
CZ2004973A3 (cs) 2004-12-15
NO20044038L (no) 2004-09-28
DE60217186T2 (de) 2007-09-27
HK1067120A1 (en) 2005-04-01
IL163629A0 (en) 2005-12-18
DE60217186D1 (de) 2007-02-08
ES2278944T3 (es) 2007-08-16
EA200401062A1 (ru) 2005-02-24
CA2479812A1 (en) 2003-09-04
NZ534877A (en) 2006-05-26
PL372316A1 (en) 2005-07-11
SI1480961T1 (sl) 2007-06-30
US20030162820A1 (en) 2003-08-28
DK1480961T3 (da) 2007-05-07
PT1480961E (pt) 2007-02-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA007434B1 (ru) Ингибиторы dpiv на основе глутаминила
EP3609889B1 (en) Small molecules
EP1399471B1 (en) Use of dipeptidyl peptidase iv inhibitors as therapeutics for neurological disorders
JP2019023206A (ja) Ｅ３ユビキチンリガーゼによる標的タンパク質および他のポリペプチドの分解増強のための化合物および方法
IL139862A (en) History of thiazolidine or pyroladine as effects of dipheptidyl peptides IV and pharmaceutical preparations containing them
JP2008505976A (ja) テトラペプチド類似体
US9701711B2 (en) Modulators of protease activated receptors
US20100113433A1 (en) N-Substituted Thiomorpholine Derivatives as the Inhibitors of Dipeptidyl Peptidase IV and the Pharmaceutical Uses Thereof
JPH03386B2 (ru)
EP2681209B1 (en) Compounds and methods for the treatment of pain and other disorders
US20240083846A1 (en) Smac mimetics for treatment of cancer, process for preparation and pharmaceutical composition thereof
RU2628573C2 (ru) Ингибитор дипептидилпептидазы-4 для лечения сахарного диабета 2-го типа
US20060194852A1 (en) Glutaminyl based DPIV inhibitors
EP1695970A1 (en) Peptides useful for competitive modulation of dipeptidyl peptidase IV catalysis
NZ545366A (en) Glutaminyl based DPIV inhibitors
US7084134B2 (en) Thrombin inhibitors
JP2007261958A (ja) ペプチド誘導体
NO154836B (no) Analogifremgangsmaate for fremstilling av en inhibitor for et angiotensin-omdannende enzym.

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU