CZ2004973A3 - Inhibitory DPIV na bázi glutaminylu - Google Patents

Inhibitory DPIV na bázi glutaminylu Download PDF

Info

Publication number
CZ2004973A3
CZ2004973A3 CZ2004973A CZ2004973A CZ2004973A3 CZ 2004973 A3 CZ2004973 A3 CZ 2004973A3 CZ 2004973 A CZ2004973 A CZ 2004973A CZ 2004973 A CZ2004973 A CZ 2004973A CZ 2004973 A3 CZ2004973 A3 CZ 2004973A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
dipeptidyl peptidase
dpiv
compound
compounds
glutaminylthiazolidine
Prior art date
Application number
CZ2004973A
Other languages
English (en)
Inventor
Hans-Ulrich Demuth
Torsten Hoffmann
Ulrich Heiser
Original Assignee
Prosidion Limited
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Prosidion Limited filed Critical Prosidion Limited
Publication of CZ2004973A3 publication Critical patent/CZ2004973A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/06—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/07—Tetrapeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/18—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/182—Radicals derived from carboxylic acids
    • C07D295/185—Radicals derived from carboxylic acids from aliphatic carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/081—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing O or S as heteroatoms, e.g. Cys, Ser
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)

Description

(57) Anotace:
Předložené řešení poskytuje sloučeninu obecného vzorce I, ve které X = CH2 nebo S, nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl. Tyto sloučeniny a jejich odpovídající farmaceuticky přijatelné adiční soli jsou účinné při léčení stavů zprostředkovaných DPIV nebo enzymů podobných DPIV, jako je např. artritida, obezita, imunní a autoimunní choroby, transplantace aloštěpu, rakovina, neuronové poruchy a kožní onemocnění.
CO <
co hO)
CM
N
O • ·
PV MM-9·% i
Inhibitory DPIV na bázi glutaminylu
Oblast techniky
Předložený vynález se týká inhibice dipeptidyl peptidázy IV, konkrétněji se týká glutaminylpyrrolidinu a glutaminylthiazolidinu, farmaceutických kompozicí obsahujících uvedené sloučeniny a použití uvedených sloučenin při inhibici dipeptidyl peptidázy IV a enzymové aktivity podobné dipeptidyl peptidáze IV.
Dosavadní stav techniky
Dipeptidyl peptidáza (DPIV) je šeřinová proteáza, která štěpí V-koncové dipeptidy z peptidového řetězce obsahujícího, výhodně, prolinový zbytek v předposlední poloze. Ačkoliv ještě nebyla biologická role DPIV v savčích systémech plně objasněna, předpokládá se, že hraje důležitou roli v metabolizmu neuropeptidů, aktivaci T-buněk, připojení rakovinových buněk na endotel a průnik HIV do lymfoidních buněk.
Rovněž bylo zjištěno, že DPIV je odpovědná za inaktivaci peptidu-1 (GLP-1) podobného glukagonu a glukózového-dependentně inzulinotropního polypeptidu také známého jako gastroinhibiční peptid (GIP). Poněvadž GLP-1 je hlavní stimulátor sekrece inzulínu pankreatem a má přímé, výhodné účinky na metabolizaci glukózy, bylo v přihlášce WO 97/40832 a patentu US 6 303 661 prokázáno, že inhibice DPIV a enzymové aktivity podobné DPIV reprezentuje velmi zajímavý přístup k léčení např. non-inzulindependentní diabetes mellitus (NIDDM). Záměrem předloženého vynálezu je poskytnout nové inhibitory DPIV, které jsou účinné například při léčení stavů zprostředkovaných inhibici DPIV a enzymů podobných DPIV, farmaceutické kompozice účinné například při inhibici DPIV a enzymů podobných DPIV a způsob inhibice aktivity uvedeného enzymu.
Dalším záměrem předloženého vynálezu je poskytnout způsob ošetření, konkrétně způsob ošetření diabetes mellitus, zejména non-inzulin-dependentní diabetes mellitus (NIDDM) nebo diabetů 2. typu a stavů spojených s diabetes mellitus, a kompozice pro použití v tomto způsobu.
Dipeptidyl peptidáza IV (DPIV) je post-prolin (v menší míře post-alanin, post-serin nebo post-glycin) štěpící serinovou proteázu nalezenou v různých tkáních těla, včetně ledvin, jater a zažívacího traktu.
• · • · · • · · · · ♦ · · ·
Je známo, že inhibitory DPIV mohou být použitelné k léčení porušené glukózové tolerance a diabetes mellitus (mezinárodní přihláška vynálezu č. WO 99/61431, Pederson RA et al, Diabetes. 1998 Aug; 47(8): 1253-8 a Pauly RP et al, Metabolism 1999 Mar; 48(3): 385-9). Konkrétně přihláška WO 99/61431 publikuje inhibitory DPIV obsahující aminokyselinový zbytek a thiazolidinovou nebo pyrrolidinou skupinu a jejich soli, zejména pak L-íhreo-isoleucylthiazolidin, L-a/Zo-isoleucylthiazolidin, L-//zreo-isoleucyIpyrrolidin, L-a/Zo-isoleucylthiazolidin, L-a//o-isoleucylpyrrolidin a jejich soli.
Dalšími příklady inhibitorů dipeptidyl peptidázy IV s nízkou molekulovou hmotností jsou agens, např. tetrahydroisochinolin-3-karboxamidové deriváty, Nsubstituované 2-kyanopyroly a -pyrrolidiny, A-(A-substituované glycyl)-2kyanopyrrolidiny, ^-(substituované glycyl)-thiazolidiny, //-(substituované glycyl)-4kyanothiazolidiny, boronylové inhibitory a cyklopropyl-kondenzované pyrrolidiny. Inhibitory dipeptidyl peptidázy IV jsou popsány v US 6 011 155; US 6 107 317; US 6 110 949; US 6 124 305; US 6 172 081; WO 99/61431, WO 99/67278, WO 99/67279, DE 198 34 591, WO 97/40832, DE 196 16 486 C 2, WO 98/19998, WO 00/07617, WO 99/38501, WO 99/46272, WO 99/38501, WO 01/68603, WO 01/40180, WO 01/81337, WO 01/81304, WO 01/55105 a WO 02/02560, informace z těchto textů týkající se inhibitorů, jejich přípravy a použití jsou zde v souhrnu uvedeny jako odkaz.
Podstata vynálezu
Předložený vynález se týká sloučeniny obecného vzorce:
h2n-CH \
HaN CH2
kde X = CH2 nebo S nebo její farmaceuticky přijatelné soli.
Tyto sloučeniny a jejich odpovídající farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou jsou účinné při ošetření stavů zprostředkovaných DPIV nebo enzymů podobných • · • ·
DPI V, např. artritida, obezita, imunní a autoimunní choroby, transplantace aloimplantátu, rakovina, neuronové poruchy a kožní onemocnění.
Ve výhodnějším provedení zlepšují sloučeniny podle předloženého vynálezu glukózovou toleranci snižováním zvýšených hladin krevní glukózy v rámci odpovědi na perorální podání glukózy, a tudíž jsou účinné při léčení non-inzulin-dependentní diabetes mellitus.
Podrobný popis vynálezu
Předložený vynález se týká inhibice dipeptidyl peptidázy IV (DPIV), konkrétněji se týká glutaminylpyrrolidinu a glutaminylthiazolidinu, farmaceutických kompozic obsahujících uvedené sloučeniny a použití uvedených sloučenin při inhibici DPIV a enzymové aktivity podobné DPIV.
Předložený vynález poskytuje nové inhibitory DPIV, které jsou účinné např. při léčení stavů zprostředkovaných inhibici DPIV, farmaceutické kompozice účinné např. při inhibici DPIV a enzymové aktivity podobné DPIV a způsobu inhibice DPIV a enzymové aktivity podobné DPIV.
Předložený vynález poskytuje sloučeninu obecného vzorce:
a zejména pak sloučeninu obecného vzorce (I) • · « · · )c-N
H2N-CH \
H2N /CH;
,C-CHj i' (l) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl.
Další výhodná sloučenina podle předloženého vynálezu je sloučenina obecného vzorce (II):
\ / ,c—ch2 í
(II) nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být konvertovány na adiční soli s kyselinou, zejména pak na farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou. Farmaceuticky přijatelná sůl obecně nabývá formy, ve které boční bazický řetězec aminokyselin je protonován anorganickou nebo organickou kyselinou. Reprezentativní organické nebo anorganické kyseliny zahrnují kyselinu chlorovodíkovou, bromovodíkovou, chloristou, sírovou, dusičnou, fosforečnou, octovou, propionovou, glykolovou, mléčnou, sukcinovou, maleinovou, filmařovou, jablečnou, tartarovou, citrónovou, benzoovou, mandlovou, methansulfonovou, hydroxyethansulfonovou, benzensulfonovou, oxalovou, pamoovou, 2-naftalensulfonovou, p-toluensulfonovou, cyklohexansulfamovou, salicylovou, sacharinovou nebo trifluoroctovou. Všechny farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou a sloučeninami podle předloženého vynálezu spadají do rozsahu předloženého vynálezu.
• » · • · · · · • · · · • · · · • · · · • ·
Z hlediska velmi úzkého vztahu volných sloučenin a sloučenin ve formě svých solí, ať už sloučenina v této spojitosti je uvedena či nikoliv, vždy za těchto okolností sem bude patřit i její sůl.
Předložený vynález v rámci svého rozsahu dále zahrnuje proléčiva sloučenin podle tohoto vynálezu. Obecně budou taková proléčiva funkční deriváty sloučenin, které jsou snadno převoditelné in vivo na požadované terapeuticky aktivní látky. Tudíž v těchto případech budou způsoby ošetření podle předloženého vynálezu zahrnovat termín podání, jenž se vztahuje na ošetření různých poruch popsaných s verzí proléčiva jedné nebo více nárokovaných sloučenin, ale které se konvertují na shora specifikovanou sloučeninu in vivo po podání subjektu. Standardní postupy selekce a preparace vhodných proléčivových derivátů jsou popsány např. v Design of Prodrugs, ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985 a přihláškách vynálezu DE 198 28 113, DE 198 28 114, WO 99/67228 a WO 99/67279, které jsou zde plně uvedeny jako odkaz.
Tam, kde sloučeniny podle předloženého vynálezu mají alespoň jedno chirální centrum, mohou existovat ve formě enantiomerů. Tam, kde sloučeniny mají dvě nebo více chirálních center, mohou navíc existovat ve formě diastereoizomerů. Je jasné, že všechny tyto izomery a jejich směsi spadají do předloženého vynálezu. Navíc některé z krystalických forem sloučenin mohou existovat jako polymorfy, jenž rovněž spadají do předloženého vynálezu. Dále některé ze sloučenin mohou vytvářet solváty s vodou (tzn. hydráty) nebo běžnými organickými rozpouštědly, jenž rovněž spadají do předloženého vynálezu.
Sloučeniny, včetně svých solí, mohou být také připraveny ve formě svých hydrátů nebo zahrnují další rozpouštědla používaná pro jejich krystalizací.
Jak je uvedeno výše, jsou sloučeniny podle předloženého vynálezu, zejména sloučeniny obecných vzorců I a II, a jejich odpovídající farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou účinné při inhibici DPIV a enzymové aktivity podobné DPIV. Schopnost sloučenin podle předloženého vynálezu a jejich odpovídajících farmaceuticky přijatelných adičních solí s kyselinou inhibovat DPIV a enzymovou aktivitou podobnou DPIV lze demonstrovat na DPIV testu aktivity při stanovení hodnot Kj in vitro a v lidské plazmě podle způsobu popsaného v příkladech 4 a 5. Hodnoty Kj sloučenin podle předloženého vynálezu byly stanoveny pro glutaminylthiazolidin jako Kj = 3,12*10'7 M + 5,11*10·'° M a pro glutaminylpyrrolidin jako K, = 1,30*10'6 M ± 8,49*10'8 M proti DPIV z vepřových ledvin. Hodnoty Kj sloučenin podle předloženého vynálezu byly stanoveny pro glutaminylthiazolidin jako Kj 4,03* 10'7 M ± 2,19* 1O‘10 M po 5 minutách 5,13* 10'7 M 1,26*10'8 Mpo 22 hodinách preinkubace a pro glutaminylpynolidin jako Kj = 1,30*10'6 M ± 4,89*10'8 M po 5 minutách a 1,36*10'6 M ± 3,21 *10’8 M po 22 hodinách preinkubace v lidské plazmě.
Schopnost sloučenin podle předloženého vynálezu a jejich odpovídajících farmaceuticky přijatelných adičních solí s kyselinou inhibovat DPIV in vivo může být demonstrována perorálním nebo intravazálním podáním krysám kmene Wistar, jak je popsáno v příkladu 9. Sloučeniny podle předloženého vynálezu inhibují in vivo aktivitu DPIV při perorálním i intravazálním podání krysám kmene Wistar.
DPIV lze nalézt v širokém spektru savčích orgánů a tkání, např. intestinálním kartáčovém lemu (Gutschmidt S. et al., In šitu - měření obsahů proteinu v oblasti kartáčového lemu společně s krysím jejunálním villi a jejich korelace se čtyřmi enzymovými aktivitami. Histochemie 1981, 72(3) 467 - 79 exokrinní epitel, hepatocyty, renální tubuli, endotel, myofibroblasty (Feller A. C. et al., A monoclonal antibody detecting dipeptidyl peptidase IV in human tissue. Virchows Arch. A. Pathol. Anat. Histopathol. 1986; 409 (2): 263 - 73), nervové buňky, laterální membrány určitého povrchového epitelu, např. vejcovod, dělohy a vezikulámí žlázy, v luminální cytoplazmě, např. epitel vezikulámí ch žláz, a v mukózních buňkách brunnerovy žlázy (Hartel S. et al., Dipeptidyl peptidase (DPP) IV v krysích orgánech. Srovnání imunohistochemie a aktivity histochemie. Histochemie 1988; 89 (2): 151 - 61), reprodukční orgány, např. cauda epididymis a ampula, semenný váček a jejich sekrece (Agrawal & Vanha-Perttula, Dipeptidyl peptidases in bovine reproductive organs and secretions. Int. J. Androl. 1986, 9 (6): 435-52). V lidském séru jsou přítomné dvě molekulové formy dipeptidyl peptidázy (Krepela E. et al., Demonstration of two molecular forms of dipeptidyl peptidase IV in normál human sérum. Physio. Bohemoslov. 1983, 32 (6): 486-96). Sérová vysokomolekulámí forma DPIV je exprimována na povrchu aktivovaných T-buněk (DukeCohan J. S. et al., Sérum high molecular weight dipeptidyl peptidase IV (CD26) is similar • · • · • · « • · to a novel antigen DPPT-L released from activated T cells. J. Immunol. 1996,156 (5): 1714-21).
Sloučeniny podle předloženého vynálezu a jejich odpovídající farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou jsou schopné inhibovat DPIV in vivo. V rámci jednoho provedení podle předloženého vynálezu spadají všechny molekulové formy, homologa a epitopy DPIV ze všech savčích tkání a orgánů a také ty, které ještě nebyly objeveny, do rozsahu předloženého vynálezu.
Mezi unikátní skupinu prolin-specifických proteáz se původně předpokládalo, že patří pouze DPIV, enzym spojený s membránou, který je specifický pro prolin jako předposlední zbytek na amino-konci polypeptidového řetězce. Nicméně v současné době byly identifikovány další molekuly, i strukturně nehomogenní s DPIV, ale s odpovídající enzymovou aktivitu. Enzymy podobné DPIV, které jsou identifikované, např. aktivační protein a fibroblastů, dipeptidyl peptidáza IV β, protein podobný dipeptidyl aminopeptidáze, V-acetylovaná α-připojená kyselá dipeptidáza, inaktivní buněčná prolin dipeptidáza, dipeptidyl peptidáza II, protein odvozený od attractinu a dipeptidyl peptidázy IV (DPP 8) a jsou popsány v rešerši vypracované Sedoem a Malíkem (Šedo & Malik, Dipeptidyl peptidase IV-like molecules: homologous proteins or homologous activities? Biochimica et Biophysica Acta 2001, 36506: 1-10).
Další podobné enzymy podobné DPIV jsou popsány v mez. přihláškách WO 01/19866, WO 02/04610, WO 02/34900 a WO 02/31134. WO 01/19866 popisuje novou lidskou dipeptidyl aminopeptidázu (DPP8) se strukturními a funkčními podobnostmi s DPIV a aktivačním proteinem fibroblastů (FAP). WO 02/04610 poskytuje agens, která regulují lidský enzym podobný dipeptidyl peptidáze IV, a agens, která se vážou na genový produkt lidského enzymu podobného dipeptidyl peptidáze IV. Tato činidla mohou hrát roli při prevenci, zlepšení nebo korekci dysfunkce nebo onemocnění zahrnující, ale není to nikterak limitováno, nádory a poruchy periferního a centrálního nervového systému, včetně bolesti a neurodegenerativních poruch. Enzym podobný dipeptidyl peptidáze IV z WO 02/04610 je v dosavadním stavu techniky dobře znám. V Gene Bank databázi je tento enzym registrován jako KIAA1492 (registrace v únoru 2001, podán 4.dubna, 2000, AB040925). WO 02/34900 popisuje dipeptidyl peptidázu 9 (DPP9) se signifikantní homologii s aminokyselinovými sekvencemi enzym podobný DPIV a DPP8. WO • ♦ · • · · · · • · · · ♦ · · · ·« *· • ·
02/31134 popisuje tři enzymy podobné DPIV, DPRP1, DPRP2 a DPRP3. Sekvenční analýza odhalila, že DPRP1 je identická s DPP8, jak je uvedeno v WO 01/19866, dále DPRP2 je identická s DPP9 a DPRP3 je identická s KIAA1492, jak je uvedeno v WO 02/04610.
V dalším výhodném provedení předloženého vynálezu spadají všechny molekulové formy, homologa a epitopy proteinů obsahujících enzymovou aktivitu podobnou DPIV ze všech savčích tkání a orgánů zahrnující i ty, které ještě nebyly objeveny, do rozsahu předloženého vynálezu.
Schopnost sloučenin podle předloženého vynálezu a jejich odpovídajících, farmaceuticky přijatelných adiční solí s kyselinou inhibovat enzymy podobné DPIV může být demonstrována využitím testu enzymové aktivity ke stanovení hodnot Ki in vitro, jak je popsáno v příkladu 6. Hodnoty Kj sloučenin podle předloženého vynálezu proti vepřové dipeptidyl peptidáze II byly stanoveny jako Ki = 8,52*10'5 Μ ± 6,33*10’6 M pro glutaminylpyrrolidin aK,= 1,07*10'5 M ± 3,81* 10'7 pro glutaminylthiazolidin. Všechny sloučeniny inhibují vepřovou dipeptidyl peptidázu II.
V dalším provedení podle předloženého vynálezu mají sloučeniny podle předloženého vynálezu a jejich odpovídající, farmaceuticky přijatelné soli pouze nízkou, jestli nějakou vůbec mají, inhibiční aktivitu vůči non-DPIV a prolinovým specifickým enzymům nepodobným DPIV. Jak je popsáno v příkladu 7, nebyla zjištěna žádná inhibice dipeptidyl peptidázy I a prolyloligopeptidázy glutaminylthiazolidinem a glutaminylpyrrolidinem. Proti prolidáze vykazovaly obě sloučeniny značně nižší účinnost v porovnání s DPIV. Hodnoty IC50 proti prolidáze byly stanoveny jako IC50 > 3 mM pro glutaminylthiazolidin a jako IC50 = 3,4*1 θ'4 M ± 5,63* 10’5 pro glutaminylpyrrolidin.
Vzhledem k jejich stabilitě inhibovat DPIV a enzymovou aktivitu podobnou DPIV jsou sloučeniny podle předloženého vynálezu, zejména pak sloučeniny obecných vzorců I a II, a jejich odpovídající, farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou účinné při ošetření stavů zprostředkovaných uvedenými enzymovými aktivitami. Tudíž zde publikované sloučeniny jsou účinné při ošetření stavů, např. non-inzulin-dependentní diabetes mellitus, artritidy, obezity, imunních a autoimunních chorob, transplantace • *
• · « • · · · · • · . · · • · · ·
9 9 9 aloimplantátu, rakoviny, neuronových poruch jako například roztroušené sklerózy a kožních onemocnění.
Ve výhodnějším provedení tohoto vynálezu zlepšují sloučeniny podle předloženého vynálezu a jejich odpovídající, farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou glukózovou toleranci snížením zvýšených hladin krevní glukózy při reakci na perorální příjem glukózy, a tudíž jsou účinné při léčení non-inzulin-dependentní diabetes mellitus. Schopnost sloučenin podle předloženého vynálezu a jejich odpovídajících, farmaceuticky přijatelných adičních solí s kyselinou zlepšovat glukózovou toleranci při reakci na perorální příjem glukózy může být sledována na diabetických krysách kmene Zucker. Metoda je popsána v příkladech 10 a 11. Perorální podání 5 mg/kg b.w., 15 mg/kg a 50 mg/kg b.w. glutaminylthiazolidinu nebo glutaminylpyrrolidinu má za následek na dávce závislé snížení zvýšených hladin krevní glukózy, a tím i zlepšení glukózové tolerance u diabetických krysách kmene Zucker.
Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou podle příkladu 5 stabilní v lidské plazmě. Překvapivě a jako další výhodné provedení předloženého vynálezu mohou být sloučeniny podle předloženého vynálezu a jejich odpovídající, farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou po podání savci degradovány in vivo. Schopnost sloučenin podle předloženého vynálezu a jejich odpovídajících, farmaceuticky přijatelných adičních solí s kyselinou být degradována in vivo může být stanovena na krysím modelu (kmeti Wistar) a následně LC/MS analýzou. Bylo zjištěno, že glutaminylthiazolidin je degradován po perorálním podání krysám kmene Wistar na odpovídající pyroglutaminylthiazolidin.
Proto předložený vynález poskytuje způsob ošetření stavu zprostředkovaného modulací enzymové aktivity DPIV nebo enzymu podobného DPI V u subjektu, při potřebě takového ošetření, vyznačující se tím, že zahrnuje podání kterékoliv ze sloučenin podle předloženého vynálezu nebo její farmaceutických kompozic v množství a dávkovacím režimům, který je terapeuticky účinný při ošetření daného stavu. Navíc předložený vynález zahrnuje použití sloučenin podle předloženého vynálezu a jejich odpovídajících, farmaceuticky přijatelných adičních, solí s kyselinou k přípravě léčebného prostředku určeného k prevenci nebo ošetření stavu zprostředkovaného modulací aktivity DPIV v subjektu. Sloučenina může být podávána pacientovi jakýmkoliv standardním způsobem • · • · « • · podání zahrnujícím, ale není to nikterak limitováno, íntravenózní, perorální, subkutánní, intramuskulární, intradermální a parenterální způsob.
V dalším provedení poskytuje předložený vynález formulace pro sloučeniny podle předloženého vynálezu a jejich odpovídající, farmaceuticky přijatelné adiční soli ve farmaceutických kompozicích.
Termín subjekt, jak je používán v předloženém vynálezu, se vztahuje na zvíře, výhodně savce, nejvýhodněji člověka, který byl předmětem ošetření, pozorování nebo experimentu.
Termín terapeuticky účinné množství, jak je používán v předloženém vynálezu, znamená, že množství aktivní sloučeniny nebo farmaceutického agens, které vyvolá biologickou nebo medicinální reakci v tkáňovém systému, zvířecím nebo lidském, jenž je zpozorována výzkumníkem, veterinářem, lékařem nebo jiným klinickým lékařem, zahrnuje zmírnění symptomů onemocnění nebo poruchy, která je ošetřována.
Termín kompozice, jak je používán v předloženém vynálezu, zahrnuje produkt obsahující patentované sloučeniny v terapeuticky účinných množstvích, jakož i kterýkoliv produkt vyplývající přímo či nepřímo z kombinací nárokovaných sloučenin.
K připravení farmaceutických kompozicí podle předloženého vynálezu jsou jedna nebo více sloučenin podle předloženého vynálezu, zejména pak sloučeniny obecných vzorců I nebo II, a jejich odpovídající, farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou, jako aktivní složky důkladně smíchány s farmaceutickým nosičem podle standardních farmaceutických míchacích technik, kde nosič může nabývat různých forem v závislosti na formě preparátu potřebného k podání, např. perorální nebo parenterální, např. intramuskulární. Při přípravě kompozic v perorální dávkovači formě může být používáno kterékoliv z obvyklých farmaceutických prostředí. Tudíž pro tekuté perorální preparáty, např. suspenze, léčebné nápoje a roztoky, mohou být používány vhodné nosiče a aditiva včetně vody, glykolů, olejů, alkoholů, ochucovadel, konzervačních prostředků, barvicích prostředků, atd.; pro pevné perorální preparáty, např. prášky, kapsle, gelové kapsle a tablety, vhodné nosiče a aditiva zahrnují škroby, cukry, ředící roztoky, granulační • · • · · ·
prostředky, lubrikans, pojivá, dezintegrační prostředky, atd. Díky svému snadnému podání reprezentují tablety a kapsle nej výhodnější perorální dávkovači jednotkovou formu, ve které jsou používány pevné farmaceutické nosiče. Pokud je potřeba, mohou být tablety pomocí standardních technik potaženy cukrem nebo enterickým povlakem. Pro parenterální způsoby bude nosič obvykle obsahovat sterilní vodu, kromě jiných složek, např. pro účely lepšího rozpouštění nebo konzervace.
Připraveny mohou být rovněž injikovatelné suspenze, přičemž mohou být používány vhodné tekuté nosiče, suspendační prostředky, atd. Farmaceutické kompozice uvedené v předloženém vynálezu budou obsahovat v dávkovači jednotce, např. tabletě, kapsli, prášku, injekci, kávové lžičce, atd., množství aktivní složky, které je nezbytné k dodání shora popsané účinné dávky. Farmaceutické kompozice uvedené v předloženém vynálezu budou obsahovat v dávkovači jednotce, např. tabletě, kapsli, prášku, injekci, kávové lžičce, atd., od asi 0,01 mg do asi 1000 mg (výhodně asi 5 až asi 500 mg) látky a může být podávána v dávce od asi 0,1 do asi 300 mg/kg tělesné hmotnosti denně (výhodně 1 až 50 mg/kg denně). Nicméně množství dávky může být různé v závislosti na požadavcích pacienta, závažnosti stavu, který je ošetřován, a používané sloučenině. Využito může být denního nebo postperiodického podání. Typicky bude dávka regulována lékařem podle konkrétního pacienta, jeho stavu a požadovaném terapeutickém účinku.
Výhodně jsou tyto kompozice v jednotkové dávkovači formě, např. tablety, pilulky, kapsle, prášky, granule, sterilní parenterální roztoky nebo suspenze, měřená dávka aerosolu nebo tekutého spreje, kapky, ampule, autoinjektorové přístroje nebo čípky, pro parenterální, intranazální, sublingvální nebo rektální podání nebo pro podání inhalací nebo insuflací. Alternativně může být kompozice přítomna ve formě vhodné pro jednotýdenní nebo jednoměsíční podání, např. nerozpustná sůl aktivní sloučeniny, např. dekanoátová sůl, může být upravena k získání depotního preparátu pro intramuskulámí injekci. K připravení pevných kompozic, např. tablet, je hlavní aktivní složka ideálně smíchána s farmaceutickým nosičem, např. standamí tabletovací složky, např. kukuřičný škrob, laktóza, sacharóza, sorbitol, talek, kyselina stearová, stearát hořečnatý, kalciumdihydrofosfát nebo gumy a jiné farmaceutické ředící roztoky, např. voda, k vytvoření pevné preformulační kompozice obsahující homogenní směs sloučeniny podle předloženého vynálezu nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl. Pokud se odkazuje na tyto • · ·· » · · ··· • · · · · · · · · · • · · · · · · · · ··· • ·· · · · · ··· ····· ···· ··· ·· · • · ·· ····· · · « preformulační kompozice jako na homogenní, znamená to, že aktivní složka může být snadno rozdělena na ekvivalentní účinné dávkovači formy, např. tablety, pilulky a kapsle. Tyto pevné preformulační kompozice pak mohou být rozděleny na jednotkové dávkovači formy shora popsaného typu obsahující asi 0,1 až asi 1000 mg, výhodně od asi 5 do asi 500 mg aktivní složky podle předloženého vynálezu.
Tablety nebo pilulky nové kompozice mohou být výhodně potaženy nebo jinak obaleny k vytvoření dávkovači formy poskytující výhody ve formě prodlouženého účinku. Například tableta nebo pilulka může obsahovat vnitřní dávku a vnější dávkovači složku, která je ve formě obálky překrývající daný vnitřek. Dvě složky mohou být separovány enterickou vrstvou, která slouží k ochraně před dezintegrací v žaludku a umožňuje vnitřní složce neporušeně prostoupit do dvanáctemíku nebo zpožděné uvolňování. Pro takové enterické vrstvy mohou být používány různé materiály nebo potahy, např. materiály zahrnující velký počet polymemích kyselin s těmito materiály jako např. šelak, cetylalkohol a acetát celulózy.
Tekuté formy, ve kterých nové kompozice podle předloženého vynálezu mohou být výhodně inkorporovány k podání perorálně nebo injekcí zahrnují vodné roztoky, výhodně ochucené sirupy, vodné nebo olejovité suspenze a ochucené emulze s jedlými oleji, např. bavlníkovým olejem, sezamovým olejem, kokosovým olejem nebo olejem z podzemnice olejně, jakož i léčebné nápoje a podobné farmaceutické nosiče. Vhodné dispergační prostředky nebo suspendační prostředky pro vodné suspenze zahrnují syntetické a přírodní gumy, např. tragant, arabskou gumu, alginát, dextran, karboxymethylcelulózu sodnou, methylcelulózu, polyvinylpyrrolidon nebo želatinu.
Pokud při přípravě sloučenin podle předloženého vynálezu vzniká směs stereoizomerů, mohou být tyto izomery separovány standardními technikami, např. preparativní chromatografií. Sloučeniny mohou být připraveny v racemické formě nebo jednotlivé enantiomery mohou být připraveny buď enantiospecifickou syntézou nebo rozdělením pomocí enantiospecifických technik. Sloučeniny mohou být např. rozlišeny na své jednotlivé enantiomery standardními technikami, např. tvorba diastereoizomemích párů tvorbou solí s opticky aktivními kyselinami, např. (-)-di-p-toluoyl-íZ-vinná kyselina a/nebo (+)-di-/?-toluoyl-I-vinná kyseliny, poté frakční krystalizací a regenerací volné báze.
Sloučeniny mohou být rozděleny tvorbou diastereoizomemích esterů nebo amidů, poté chromatografickou separací a odstraněním chirálních pomocných látek. Alternativně mohou být sloučeniny rozděleny HPLC na chirálním sloupci.
Během kteréhokoliv z kroků způsobu přípravy sloučenin podle předloženého vynálezu může být nezbytné a/nebo žádoucí chránit citlivé nebo reaktivní skupiny na kterékoliv molekule. Toho lze dosáhnout zaváděním standardních chrámcích skupin, např. skupin, které jsou popsány v Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J.F.W. McOmie, Plenům Press, 1973; a T.W. Greene & P.G.M. Wuts, Protective in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1991, zde je zcela uvedeno jako odkaz. Chrániči skupiny mohou být odstraněny standardně v následujícím kroku běžnými technikami.
Způsob ošetření stavů modulovaných dipeptidyl peptidázou IV a enzymy podobnými DPIV popsanými v předloženém vynálezu může být prováděn farmaceutickou kompozicí obsahující jednu nebo více sloučenin definovaných v předloženém vynálezu a farmaceuticky přijatelný nosič. Farmaceutická kompozice může obsahovat od asi 0,01 mg do 1000 mg, výhodně asi 5 až asi 500 mg, sloučenin a může být připravena v kterékoliv formě vhodné pro vybraný způsob podání. Nosiče zahrnují potřebné a inertní farmaceutické excipienty, včetně, ale není to nikterak limitováno, pojiv, suspendačních prostředků, lubrikans, ochucovadel, sladidla, konzervačních látek, barviv a potahů. Kompozice vhodné pro perorální podání zahrnují pevné formy, např. pilulky, tablety, caplety, kapsle (přičemž každá zahrnuje formulace uvolňující se ihned, v čase nebo postupně), granule a prášky a tekuté formy, např. roztoky, sirupy, léčebné nápoje, emulze a suspenze. Formy, které jsou použitelné pro parenterální podání, zahrnují sterilní roztoky, emulze a suspenze.
Výhodně mohou být sloučeniny podle předloženého vynálezu podávány jednorázově jednou denně nebo celková denní dávka může být podávána v dělených dávkách dvakrát, třikrát nebo čtyřikrát denně. Navíc sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být podávány v intranazální formě pomocí místního použití vhodných intranazálních nosičů nebo přes transdermální náplasti na kůži, které jsou odborníkům v oboru dobře známy. Aby mohla být dávka podávána ve formě transdermálního podávacího systému, bude dávkování samozřejmě spíše kontinuální než intermitentní
• · ·· ··» · · v průběhu celého dávkovacího režimu a síla dávky bude tudíž modifikována k získání požadovaných terapeutických účinků.
Výhodněji může být pro perorální podání ve formě tablety nebo kapsle aktivní složka léku kombinována s perorálním, netoxickým, farmaceuticky přijatelným, inertním nosičem, např. ethanolem, glycerolem, vodou, atd. Navíc, pokud je žádoucí nebo potřeba, mohou být vhodná pojivá, lubrikans, dezintegrační prostředky a obarvovací prostředky zabudovány do směsi. Vhodná pojivá zahrnují, ale není to nikterak limitováno, škrob, želatinu, přírodní cukry, např. glukózu nebo betalaktózu, kukuřičná sladidla, přirozené nebo syntetické gumy, např. arabskou gumu, tragant nebo oleát sodný, stearát sodný, stearát hořečnatý, benzoát sodný, acetát sodný, chlorid sodný, atd. Dezintegrátory zahrnují, ale není to nikterak limitováno, škrob, methylcelulózu, agar, bentonit, xanthátovou gumu, atd.
Tekuté formy jsou výhodné v ochucených suspendačních nebo dispergačních prostředcích, např. syntetické a přirozené gumy, např. tragant, arabská guma, methylcelulóza, atd. Pro parenterální podání jsou žádoucí sterilní suspenze a roztoky. Izotonické preparáty, které obecně obsahují vhodné konzervační látky jsou používány v případě, kdy je potřeba intravenózní podání.
Sloučenina podle předloženého vynálezu může být podávána ve formě lipozómových dávkovačích systémů, jako např. malé jednolamelámí nosiče, velké jednolamelámí nosiče a vícelamelámí nosiče. Lipozómy mohou být připraveny z různých fosfolipidů, např. cholesterol, steary lamin nebo fosfatidylcholiny, způsoby, které jsou popsány v dosavadním stavu techniky.
Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být také kopulovány s rozpustnými polymery jako směrované lékové nosiče. Tyto polymery mohou zahrnovat polyvinylpyrrolidon, kopolymer na bázi pyranu, polyhydroxypropylmethakrylamidfenol, polyhydroxyethylaspartamidfenol nebo polyethylenoxidpolylysin substituovaný palmitoylovým zbytkem. Navíc sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být kopulovány se skupinou biologicky degradovatelných polymerů použitelných při vytváření kontrolovaného uvolňování léku, např. polymléčné kyseliny, polyepsilonkaprolaktonu, • · ·« · · · ··· ··· ···· ··· • ···· » · · · · · · • ·· ·· · · ··· ····· ···· · · * ·· · • · · * »···· ·· · polyhydroxy butyerové kyseliny, polyorthoesterů, polyacetalů, polydihydropyranů, polykyanoakrylátů a zesítěných nebo amfipatických blokových kopolymerů hydrogelů.
Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být podávány v kterémkoliv ze shora uvedených kompozic a podle dávkovačích režimů vytvořených podle dosavadní techniky kdykoliv je potřeba léčit konkrétní nemoc.
Denní dávka produktů se může pohybovat v širokém rozmezí od 0,01 do 1,000 mg na člověka denně. Pro perorální podání jsou kompozice výhodně poskytovány ve formě tablet obsahujících 0,01, 0,05, 0,1, 1,0, 2,5, 5,0, 10,0, 15,0, 25,0, 50,0, 100, 150, 200, 250, 500 a 1000 miligramů aktivní složky pro symptomatické upravení dávky pro pacienta, který má být ošetřován. Účinné množství léku se obvykle pohybuje v rozmezí od asi 0,1 mg/kg do asi 300 mg/kg tělesné hmotnosti denně. Výhodně v rozmezí od 1 do asi 50 mg/kg tělesné hmotnosti denně. Sloučeniny mohou být podávány jednou až čtyřikrát denně.
Optimální dávky k podání mohou být snadno určeny odborníky v oboru a budou se lišit v závislosti na konkrétní sloučenině, způsobu podání, síle preparátu, biologické dostupnosti podle způsobu podání a postupu onemocnění. Navíc by při úpravě dávek měly být brány v úvahu faktory zahrnující konkrétního pacienta, včetně jeho věku, hmotnosti, stravy a době podání.
Sloučeniny nebo kompozice podle předloženého vynálezu mohou být podávány před jídlem, během jídla nebo pojidle.
Pokud jsou sloučeniny nebo kompozice podle předloženého vynálezu podávány před jídlem, pak 1 hodinu, výhodně 30 nebo ještě výhodněji 15 nebo 5 minut před jídlem.
Pokud jsou sloučeniny nebo kompozice podle předloženého vynálezu podávány během jídla, mohou být přimíchány do jídla nebo podány v oddělené dávkovači formě, jak je popsáno výše.
Pokud jsou sloučeniny nebo kompozice podle předloženého vynálezu podávány po jídle, mohou být podávány 5,15 nebo 30 minut nebo ještě 1 hodinu po jídle.
Přehled obrázků na výkresech
Předložený vynález bude lépe pochopen v souvislosti s následujícími obrázky.
Na obrázku 1 je uvedena plazmatická aktivita DPIV v séru z krys kmene Wistar po perorálním a intravazálním podání 100 mg/kg b.w. glutaminylpyrrolidinu;
Na obrázku 2 je uvedena plazmatická aktivita DPIV v séru z krys kmene Wistar po perorálním a intravazálním podání 100 mg/kg b.w. glutaminylthiazolidinu;
Na obrázku 3 je uvedeno na dávce závislé snížení hladin krevní glukózy v diabetických krysách kmene Zucker po perorálním podání 5 mg/kg, 15 mg/kg, 50 mg/kg b.w. glutaminylpyrrolidinu, resp. placeba.
Na obrázku 4 je uvedeno na dávce závislé snížení hladin krevní glukózy v diabetických krysách kmene Zucker po perorálním podání 5 mg/kg, 15 mg/kg, 50 mg/kg b.w. glutaminylthiazolidinu, resp. placeba.
Na obrázku 5 je uvedena chemická struktura pyroglutaminylthiazolidinu, degradačního produktu, zjištěného po perorálním podání glutaminylthiazolidinu v krysáeh kmene Wistar; a
Na obrázku 6 je uveden chromatogram krysího plazmatického extraktu získaného po perorálním podání glutaminylthiazolidinu tlustým krysám kmene Zucker. Pík s časem 2,95 min reprezentuje glutaminylthiazolidin a pík s časem 6,57 min reprezentuje pyroglutaminylthiazolidin.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Syntéza volné báze glutaminylpyrrolidinu
Acylace:
V-Benzyl-oxykarbonylglutamin (2,02 g, 7,21 mmol) se rozpustí v 35 ml THF a ochladí se na teplotu -15 °C. Do této směsi se přidá CAIBE (isobutylchlorformiát) (0,937 ml, 7,21 mmol) a 4-methylmorfolin (0,795 ml, 7,21 mmol) a roztok se míchá po dobu 15 minut. Tvorba směsného anhydridu se kontroluje technikou TLC (eluent: CHCl3/MeOH:9/l). Po ohřátí na teplotu -10° C se přidá pyrrolidin (0,596 ml, 7,21 mmol). Teplota směsi se nechá vystoupat na pokojovou teplotu a míchá přes noc.
Zpracování:
Sediment se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří. Výsledný olej se vytřepe v ethylacetátu (20 ml) a promyje nasyceným roztokem hydrogensíranu sodného, poté nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a solankou. Organická vrstva se oddělí, suší a odpařuje. Čistota výsledného produktu se kontroluje technikou TLC (eluent: CHClj/MeOH: 9/1)
Výtěžek: 1,18 g, voskovitá pevná látka.
Štěpení:
1,18 g výsledná pevná Z-chráněná sloučenina se rozpustí v 40 ml absolutního ethanolu. Do roztoku se přidá asi 20 mg palladia na aktivním uhlí (10%, FLUKA) a suspenze se třepe pod atmosférou vodíku po dobu 3 hodin. Průběh reakce se monitoruje technikou TLC (eluent: CHCl3:MeOH: 9/1). Po skončení reakce se rozpouštědlo odtáhne, čímž se získá volná báze.
Výtěžek: 99%
Čistota se ověří technikou TLC: «-butanol/AcOH/voda/ethylacetát: l/l/l/l, Rf = 0,4. Struktura reakčního produktu se analyzuje technikou NMR.
Příklad 2:
Syntéza glutaminylthiazolidin-hydrochloridu
Acylace:
N-f-butyl-oxykarbonylglutamin (2,0 g, 8,12 mmol) se rozpustí v 5 ml THF a ochladí se na teplotu -15 °C. Do této směsi se přidá CAIBE (isobutylchlorformiát) (1,06 ml ml, 8,12 mmol) a 4-methylmorfolin (0,895 ml, 8,12 mmol) a roztok se míchá po dobu 15 minut. Tvorba směsného anhydridu se kontroluje technikou TLC (eluent: CHCl3/MeOH:9/l). Po ohřátí na teplotu -10° C se přidá další ekvivalent 4-methylmorfolinu • · •· · ·· ·· · • · ···· · · · ···· · · · · · · · • · ·· · · · · · ····· • « · » · · · · · ·· ····· ·· » (0,895 ml, 8,12 mmol) a thiazolidin-hydrochlorid (1,02 g, 8,12 mmol). Teplota směsi se nechá vystoupat na pokojovou teplotu a míchá přes noc.
Zpracování:
Sediment se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří. Výsledný olej se vytřepe v chloroformu (20 ml) a promyje nasyceným roztokem hydrogensíranu sodného, poté nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a solankou. Organická vrstva se oddělí, suší a odpařuje. Čistota výsledného produktu se kontroluje technikou TLC (eluent: CHCl3/MeOH: 9/1)
Výtěžek: 1,64 g, pevná látka.
Štěpení:
640 mg výsledné pevné Boc-chráněné sloučeniny se rozpustí v 3,1 ml ledově studené HCI v dioxanu (12,98 M, 20 ekvivalentů) a nechá se stát na ledu. Průběh reakce se monitoruje technikou TLC (eluent: CHCl3:MeOH: 9/1). Po skončení reakce se rozpouštědlo odstraní a výsledný olej se promyje methanolem, znovu odpařuje a následně suší nad oxidem fosforečným a dvakrát trituruje s diethyletherem.
Výtěžek: 0,265 g
Čistota se analyzuje technikou HPLC.
Struktura reakčního produktu se analyzuje technikou NMR.
Příklad 3
Syntéza glutaminylpyrrolidin-hydrochloridu
Acylace:
V-/-butyl-oxykarbonylglutamin (3,0 g, 12,18 mmol) se rozpustí v 7 ml THF a ochladí se na teplotu -15 °C. Do této směsi se přidá CAIBE (isobutylchlorformiát) (1,6 ml ml, 12,18 mmol) a 4-methylmorfolin (1,3 ml, 12,18 mmol) a roztok se míchá po dobu 15 minut. Tvorba směsného anhydridu se kontroluje technikou TLC (eluent: CHCl3/MeOH:9/l). Po ohřátí na teplotu -10° C se přidá 1 ekvivalent pyrrolidinu (1,0 ml, 12,18 mmol). Teplota směsi se nechá vystoupat na pokojovou teplotu a míchá přes noc.
Zpracování:
Vytvořený sediment se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří. Výsledný olej se vytřepe v chloroformu (20 ml) a promyje nasyceným roztokem hydrogensíranu sodného, poté nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a solankou. Organická vrstva se oddělí, suší a odpařuje. Čistota výsledného produktu se kontroluje technikou TLC (eluent: CHCl3/MeOH: 9/1)
Výtěžek: 2,7 g, pevná látka.
Štěpení:
2,7 g výsledné pevné látky se rozpustí v 13,0 ml ledově studené HCl v dioxanu (12,98 M, 20 ekvivalentů) a nechá se stát na ledu. Průběh reakce se monitoruje technikou TLC (eluent: CHCh.MeOH: 9/1). Po skončení reakce se rozpouštědlo odstraní a výsledný olej se promyje methanolem, znovu odpařuje a následně suší nad oxidem fosforečným a dvakrát trituruje s diethyletherem.
Výtěžek: 980 mg
Čistota se analyzuje technikou HPLC.
Struktura reakčního produktu se analyzuje technikou NMR.
Příklad 4
Stanovení hodnoty Kj
Pro stanovení hodnoty K, glutaminylpyrrolidinu a glutaminylthiazolidinu byla používána dipeptidyl peptidáza IV z vepřových ledvin se specifickou aktivitou proti glycylpropyl-4-nitroanilinu 37,5 U/mg a s koncentrací enzymu 1,41 mg/ml v zásobním roztoku.
Testovací směs:
100 μΐ glutaminylpyrrolidinu nebo glutaminylthiazolidinu v rozmezí koncentrací od l*10'5 M - l*10'7M (glutaminylpyrrolidin), resp. l*10'6 Μ - l*10'8 M (glutaminylthiazolidin) bylo smícháno s 50 μΐ glycylprolyl-4-nitroanilinu v různých koncentrací (0,4 mM, 0,2 mM, 0,1 mM, 0,05 mM) a 100 μΐ HEPES (40 mM, pH 7,6; iontová síla = 0,125). Testovací směs byla předem inkubována při teplotě 30° C po dobu 30 minut, poté bylo přidáno 20 μΐ DPIV (1:600 zředění) a bylo provedeno měření vývoje žluté
barvy v důsledku uvolňování 4-nitroanilinu při teplotě 30° C a λ = 405 nm po dobu 10 minut na čtečce destiček (HTS7000 plus, Applied Biosystems, Weiterstadt, Germany).
Hodnoty K, byly vypočteny v programu Graphit 4.0.15 (Erithacus Software, Ltd., UK) na bázi kompetitivní inhibice DPIV glutaminylpyrrolidinem nebo glutaminylthiazolidinem. Byly vypočteny hodnoty pro glutaminylthiazolidin jako Kj = 3,12*107 M ± 5,11 * 10'10 M a pro glutaminylpyrrolidin jako Kj = l,30*10'6 M ± 8,49*10’8 M.
Příklad 5
Stanovení hodnoty K, v lidské plazmě
Lidská plazma zahrnuje uvolňovací aktivitu /V-koncového Xaa-Pro μΐ glutaminylpyrrolidinu nebo glutaminylthiazolidinu v rozmezí koncentrací l*10'5 M -l*10'7 M (glutaminylpyrrolidin) a l*10’6 M - l*10'8 M (glutaminylthiazolidin) respektive byly smíchány s 50 μΐ glycylprolyl-4-nitroanilinem v různých koncentracích (0,4 mM, 0,2 mM, 0,1 mM, 0,05 mM) a 100 μΐ HEPES (40 mM, pH 7,6). Testovací směs byla předem inkubována při teplotě 30° C po dobu 5 minut, resp. 22 hodin. Po preinkubaci bylo přidáno 50 μΐ lidské plazmy a bylo prováděno měření vývoje žluté barvy v důsledku uvolňování 4-nitroanilinu při teplotě 30° C a λ - 405 nm po dobu 10 minut na čtečce destiček (HTS7000 plus, Applied Biosystems, Weiterstadt, Germany).
Hodnoty Kj byly vypočteny v programu Graphit 4.0.15 (Erithacus Software, Ltd., UK) na bázi kompetitivní inhibice DPIV glutaminylpyrrolidinem nebo glutaminylthiazolidinem. Byly vypočteny hodnoty pro glutaminylthiazolidin jako Kj 4,03*10’7 Μ ± 2,19*1O'10 M po 5 minutách a Kj = 5,13*10’7 M ± l,26*10’8 M po 22 hodinách preinkubace a pro glutaminylpyrrolidin jako K, = 1,30*10 M ± 4,89*10’ M po 5 minutách a K, = 1,36*10'6 M ± 3,21*10'8 M po 22 hodinách preinkubace.
Příklad 6
Inhibice enzymu podobného DPIV- dipeptidyl peptidáza II
DP II (3.4.14.2) uvolňuje V-koncové dipeptidy z oligopeptidu v případě, kdy jV-konec není protonován (McDonald, J.K., Ellis, S. & Reilly, T.J., 1966, J. Biol. Chem., 241, 1494 - 1501). Pro a Ala v poloze Pi jsou preferovanými zbytky. Enzymová aktivita byla popsána jako aktivita podobné DPIV, ale DP II má kyselé pH optimum. Používaný enzym byl purifikován z vepřových ledvin.
Test:
100 μΐ glutaminylpyrrolidinu nebo glutaminylthiazolidinu v rozmezí koncentrací P104 Μ - 5*10'8 M bylo smícháno s 100 μΐ pufrovacího roztoku (40 mM HEPES, pH 7,6, 0,015% Brij, 1 mM DTT), 50 μΐ roztoku lysylalanylaminomethylkumarinu (5 mM) a 20 μΐ vepřové DP II (250-ti násobné zředění v pufřovacím roztoku). Měření fluorescence bylo prováděno při teplotě 30° C a Xexitace = 380 nm, Xemise ~ 465 nm po dobu 25 minut na čtečce destiček (HTS7000plus, Applied Biosystems, Weiterstadt, Germany).
Hodnoty K, byly vypočteny v programu Graphit 4.0.15 (Erithacus Software, Ltd., UK) a vypočteny jako K, = 8,52*10'5 Μ ± 6,33*10’6 M pro glutammylpyrrolidin a K; = 1,07*10'5 M ± 3, 81*10'7 M pro glutaminylthiazolidin.
Příklad 7
Enzymové zkřížené reakce
Glutammylpyrrolidin nebo glutaminylthiazolidin byly testovány z hlediska účinnosti svých zkřížených reakcí proti dipeptidyl peptidáze I, prolyloligopeptidáze a prolidáze.
Dipeptidyl peptidáza I (DP I, katepsin C):
DP I nebo katepsin C jsou lysosomální cysteinové proteázy, které odštěpují dipeptidy z V-konce svých substrátů (Gutman, H. R. & Fruton, J. S., 1948, J. Biol. Chem., 174, 851-858) a jsou klasifikovány jako cysteinové proteázy.
• · ·· · · · ·· · ··· ···· · * · • ···· · · · · ··· • · · ·· · · · · · ··«·· ···· ··· · · · ·· ·· · · · · · ·· ·
Používaný enzym byl zakoupen u firmy Qiagen (Qiagen GmbH, Hilden, Germany) k získání zcela aktivního enzymu. Enzym byl 1000-ti násobně zředěn v MES pufru pH 5,6 (40 mM MES, 4 mM DTT, 4 mM KC1, 2 mM EDTA, 0,015% Brij) a předem inkubován po dobu 30 minut při teplotě 30° C.
Test:
μΐ glutaminylpyrrolidinu nebo glutaminylthiazolidinu v rozmezí koncentrací l*105 Μ - l*10'7 M bylo smícháno s 110 μΐ směsi pufru a enzymu. Testovací směs byla předem inkubována při teplotě 30° C po dobu 15 minut. Po preinkubaci bylo přidáno 100 μΐ histidylseryl-^nitroanilinu (2*10'5M) a měření žluté barvy v důsledku uvolňování β-nitroanilinu bylo prováděno při teplotě 30° C a Zexitace= 380 nm, Xemise= 465 nm po dobu 10 minut na čtečce destiček (HTS7000plus, Applied Biosystems, Weiterstadt, Germany).
Hodnoty IC50 byly vypočteny programem Graphit 4.0.15 (Erithacus Software, Ltd., UK). Nebyla zjištěna žádná inhibice DP I enzymové aktivity glutaminylpyrrolidinem nebo glutaminylthiazolidinem.
Prolyl oligopeptidáza (POP)
Prolyloligopeptidáza (EC 3.4.21.26) je endoproteáza serinového typu, která odštěpuje peptidy na TV-konci části vazby Xaa-Pro (Walter, R., Shlank, H., Glass, J. D., Schwartz, I. L. & Kerenyi, T. D., 1971, Science, 173, 827-829). Substráty jsou peptidy s molekulovou hmotností až 3000 Da.
Používaný enzym byl rekombinantní lidská prolyl oligopeptidáza. Rekombinantní exprese byla prováděna v E.coli za standardních podmínek podle literatury.
Test:
100 μΐ glutaminylpyrrolidinu nebo glutaminylthiazolidinu v rozmezí koncentrací 1*1 θ'4 Μ - 5*10'8 M bylo smícháno s 100 μΐ pufrovacího roztoku (40 mM HEPES, pH 7,6, 0,015% Brij, 1 mM DTT) a 20 μΐ POP roztoku. Testovací směs byla předem inkubována při teplotě 30 °C po dobu 15 minut. Po preinkubaci bylo přidáno 50 μΐ glycylprolylprolyl4-nitroanilinového roztoku (0,29 mM) a měření žluté barvy v důsledku uvolňování • · ··· · · · · · · · • · · · · ·· · · ··· • ·· ·· · · · · · ····· ···· · · · · · · • · · · ····· ·· ·
4-nitroanilinu bylo prováděno při teplotě 30 °C a λ = 405 nm po dobu 10 minut na čtečce destiček (sunrise, Tecan, Crailsheim, Germany).
Hodnoty IC50 byly vypočteny programem Graphit 4.0.15 (Erithacus Software, Ltd., UK). Nebyla zjištěna žádná POP aktivita ovlivněná glutaminylpyrrolidinem nebo glutaminylthiazolidinem.
Prolidáza (X-Pro dipeptidáza)
Prolidáza (EC 3.4.13.9) byla poprvé popsána Bergmannem & Frutonem (Bergmann, M. & Fruton, JS, 1937, J. Biol. Chem. 189-202). Prolidáza uvolňuje V-koncovou aminokyselinu z Xaa-Pro dipeptidů a má optimální pH mezi 6 a 9.
Prolidáza z vepřových ledvin (ICN Biomedicals, Eschwege, Germany) byla rozpuštěna (1 mg/ml) v testovacím pufru (20mM ΝΗχΟΗβΟΟΟΕ, 3 mM MnCE, pH 7,6). K získání zcela aktivního enzymu byl roztok inkubován po dobu 60 minut při pokojové teplotě.
Test:
450 μΐ glutaminylpyrrolidinu nebo glutaminylthiazolidinu v rozmezí koncentrací 5*10'3 M - 5*10'7 M bylo smícháno s 500 μΐ pufrovacího roztoku (20mM NH4(CH3COO)2, pH 7,6) a 250 μΐ Ile-Pro-OH (0,5 mM v testovací směsi). Testovací směs byla předem inkubována při teplotě 30 °C po dobu 5 minut. Po preinkubaci bylo přidáno 75 μΐ Prolidázy (1:10 zředění v testovacím pufru) a měření bylo prováděno při teplotě 30° C a λ = 220 nm po dobu 20 minut na UV/Vis fotometru, UV1 (Thermo Spectronic, Cambridge, UK).
Hodnoty IC5o byly vypočteny programem Graphit 4.0.15 (Erithacus Software, Ltd., UK). Byly stanoveny jako IC 50 > 3 mM pro glutaminylthiazolidin a jako IC50 = 3,4*10-4 M ± 5,63*10'5 pro glutaminylpyrrolidin.
• · • · ·
Příklad 8
Plazmatická stabilita
K určení stability glutaminylpyrrolidinu nebo glutaminylthiazolidinu v lidské plazmě byla stanovena aktivita DPIV v definovaných časech. Průměrná aktivita DPIV v lidské plazmě byla stanovena jako 43,69 U/ml. V pracovním roztoku byla plazma zředěna v 0,9% NaCl k fixaci hladiny aktivity DPIV při 25 U/ml.
Plazma a glutaminylpyrrolidin nebo glutaminylthiazolidin v různých koncentracích (5*10's, 2,5*10'5, l,25*10‘5 M v plazmě) byly inkubovány při teplotě 37 °C. V definovaných časech byly vzorky odebírány robotickou pipetou (Gilson 215, Liquid handler, Gilson) a převedeny do mikrotitrační destičky obsahující 5*10'5 M glycylprolylaminomethylkumarinu v 0,9% NaCl + 015% Brij na jamku. Po 6 minutách byla reakce zastavena přidáním izoleucylthiazolidinu (5*10‘5 M v 0,9% NaCl roztoku).
Měření fluorescence bylo provedeno proti 0,9% NaCl v plazmě (referenční standard) na čtečce destiček (HTS7000plus, Applied Biosystems, Weiterstadt, Germany). Poločas inhibiční účinnosti glutaminylpyrrolidinu nebo glutaminylthiazolidinu byl vypočten vynesením závislosti enzymové aktivity na reakční době.
U obou sloučenin nemohl být stanoven žádný poločas. Látka byla stabilní v lidské plazmě po dobu více jak 22 hodin.
Příklad 9
Stanovení DPIV inhibiční aktivity glutaminylpyrrolidinu a glutaminylthiazolidinu po intravazálním dávkování krysám kmene Wistar
Zvířata
Samci kmene Wistar (Shoe: Wist(Sho)) s tělesnou hmotností v rozmezí od 250 do 350 g byly zakoupeny u Tierzucht Schonwalde (Schonwalde, Germany).
Podmínky chovu
Zvířata byla chována v jediné kleci za standardních podmínek s kontrolovanou teplotou (22 ± 2°C) v 12/12 hodinovém cyklu světlo/tma (světlo od 6:00 ráno). Podle potřeby byla poskytnuta standardní peletizovaná potrava (ssniff® Soest, Germany) a voda z kohoutku okyselená HCI.
Vložení katetru do karotické artérie
Po > jednom týdnu adaptace na podmínky chovu byly katetry implantovány do karotické artérie krys kmene Wistar za standardní anestézie (i.p. injekce 0,25 ml/kg b.w. Rompun® [2%], BayerVital, Germany a 0,5 ml/kg b.w. Ketaminu 10, Atarost GmbH & Co., Twistringen, Germany). Zvířata se nechala jeden týden regenerovat. Poté byly katetry propláchnuty heparinovým fyziologickým roztokem (100 IU/ml) třikrát týdně. V případě dysfunkce katetru byl do kontralaterální karotické artérie dotyčné krysy vložen druhý katetr. Po jednom týdnu regenerace po chirurgickém zákroku byla zvířata opět zapojena do studie. Bylo zapojeno nové zvíře a v experimentech bylo pokračováno podle naplánovaného postupu začínajícím alespoň 7 dnů po implantaci katetru.
Experiment
Krysám s intaktní funkcí katetru bylo perorálně a intravazálně (intraarteriálně) podáváno placebo (1 ml fyziologického roztoku, 0,154 mol/1) nebo 100 mg/kg b.w. glutaminylpyrrolidinu nebo 100 mg/kg b.w. glutaminylthiazolidinu.
Po vyhladovění přes noc byly odebrány 100 μί vzorky heparinizované arteriální krve v -30, -5 a 0 minutě. Testovaná látka byla čerstvě rozpuštěna v 1,0 ml fyziologického roztoku (0,154 mol/1) a podávána v 0 minutě perorálně nebo přes potravinový kanálek (75 mm; Fin Science Tools, Heidelberg, Germany) nebo intravazálně. V případě perorálního podání bylo do arteriálního katetru injikováno 1 ml fyziologického roztoku. V případě intraarteriálního podání byl katetr ihned promyt 30 μί fyziologického roztoku a další 1 ml fyziologického roztoku bylo podáváno perorálně přes potravinový kanálek.
Po aplikaci placeba nebo testovaných látek byly odebrány vzorky arteriální krve v časech 2,5, 5, 7,5, 10, 15, 20, 40, 60 a 120 minut z karotického katetru od volně pohybujících se krys při vědomí. Všechny vzorky krve byly odebírány do ledově studených ependorfek (Eppendorf-Netheler-Hinz, Hamburg, Germany) naplněných 10 μί pufru 1M citrátu sodného (pH 3,0) k měření plazmatické aktivity DPIV. Ependorfky byly
ihned centrifugovány (12000 ot./min po dobu 2 minut, Hettich Zentrifuge EBA 12, Tuttlingen; Germany): Plazmatické frakce byly skladovány na ledu do analýzy nebo byly zmrazený při teplotě -20° C do analýzy. Všechny vzorky plazmy byly opatřeny následujícími údaji:
Kódové číslo
Číslo zvířete
Datum odběru vzorku
Čas odběru vzorku
Analytické metody
Testovací směs pro stanovení plazmatické DPIV aktivity se sestávala z 80 μΐ činidla a 20 μΐ vzorku plazmy. Kinetická měření tvorby žlutého produktu 4-nitroanilinu ze substrátu glycylprolyl-4-nitroanilinu byla prováděna při 390 nm po dobu 1 minuty při teplotě 30 °C po 2 minutové preinkubaci při stejné teplotě. DPIV aktivita byla vyjádřena v mU/ml.
Statistické metody
Statistická vyhodnocení a grafická vyjádření byla provedena programem PRISM® 3.02 (GraphPad Software, lne.). Všechny parametry byly analyzovány popisně včetně střední a standardní odchylky.
Výsledky
Sloučeniny na bázi glutaminylpyrrolidinu a glutaminylthiazolidinu v dávce 100 mg/kg b.w. při srovnání s placebem inhibovaly plazmatickou aktivitu DPIV po perorálním a intravazálním podání (viz obrázky 1 a 2).
Příklad 10
Studie zvyšování dávky provedená na tlustých krysách kmene Zucker zahrnující po perorálním podání glutaminylpyrrolidinu
•« · • » » • * · · · » • · * • · ·
Zvířata
N=30 samčí krysy kmene Zucker (fa/fa), průměrný věk 11 týdnů (5-12 týdnů), průměrná tělesná hmotnost 350 g (150-400 g), byly zakoupeny od firmy Charles River (Sulzfeld, Germany). Po dodání byly chovány po dobu více jak 12 týdnů do té doby, dokud téměř všechny tlusté krysy kmene Zucker neměly charakteristické příznaky diabetes mellitus. Skupina (N=8) zvířat byla zapojena do testu porovnávajícího tří zvyšující se dávky glutaminylpyrrolidinu s placebem (fyziologický roztok).
Podmínky chovu
Zvířata byla chována v jediné kleci za standardních podmínek s kontrolovanou teplotou (22 ± 2°C) v 12/12 hodinovém cyklu světlo/tma (světlo od 6:00 ráno). Podle potřeby byla poskytnuta standardní peletizovaná potrava (ssniff® Soest, Germany) a voda z kohoutku okyselená HCI.
Katetrizace karotické artérie
Tlusté krysy kmene Zucker 24-31 týdnů staré (průměrně 25 týdnů), které byly zadaptované na podmínky chovu, byly vhodně připravené k provedení studie.
Katetry byly implantovány do karotické artérie tlustých krys kmene Zucker za standardní anestézie (i.p. injekce 0,25 ml/kg b.w. Rompun® [2%], BayerVital, Germany a 0,5 ml/kg b.w. Ketaminu 10, Atarost GmbH & Co., Twistringen, Germany). Zvířata se nechala jeden týden regenerovat. Poté byly katetry propláchnuty heparinovým fyziologickým roztokem (100 IU/ml) třikrát týdně.
Experiment
Skupinám (N=8) tlustých krys kmene Zucker bylo podáváno placebo (1 ml fyziologický roztok, 0,154 mol/1) nebo zvyšující se dávky glutaminylpyrrolidinu (5, 15 a 50 mg/kg b.w.). 375 mg glutaminylpyrrolidinu bylo rozpuštěno v 1000 μΐ DMSO (E.Merck, Darmstadt; Germany [dimethylsulfoxid p.a.]). Bylo přidáno 10 ml fyziologického roztoku a 1 ml alikvótů, přičemž každý obsahoval 34,09 mg glutaminylpyrrolidinu, bylo skladováno při teplotě -20 °C. K přípravě testované látky byla dávka závislá na alikvótech zředěna ve fyziologickém roztoku.
« ·· ·Λ « » · · · « * * • · · · » <- « • · · · · «>«··<
··· ·· ·· #
Tlustým krysám kmene Zucker, které se nechaly přes noc vyhladovět, bylo perorálně podáváno placebo nebo testovaná látka prostřednictvím potravinového kanálku (15 G, 75 mm; Fine Science Tools, Heidelberg, Germany) v -10 minut. Byl proveden perorální glukózový toleranční test (OGTT) s 2 g/kg b.w. glukózy (40% roztok, B. Braun Melsungen, Germany) podávané v ± 0 minutě prostřednictvím druhého potravinového kanálku. Vzorky venózní krve z ocasní žíly byly odebírány v -30 min, -15 min, ±0 min a v 5, 10, 15, 20, 30, 40, 60, 90 a 120 minutě do 20 μΐ skleněných kapilár, které byly umístněny do standardních nádob s 1 ml roztoku pro měření krevní glukózy.
Všechny vzorky plazmy byly opatřeny následujícími údaji:
Kódové číslo
Číslo zvířete
Datum odběru vzorku
Čas odběru vzorku
Analytické metody
Hladiny glukózy byly měřeny glukózoxidázovou metodou (Super G Glucose analyzer; Dr. Miiller Gerátebau, Freital, Germany).
Statistické metody
Statistická vyhodnocení a grafická vyjádření byla provedena programem PRISM® 3.02 (GraphPad Software, lne.). Všechny parametry byly analyzovány popisným způsobem včetně střední a standardní odchylky.
Účinek léčení na glukózovou toleranci
Diabetické krysy kmene Zucker ošetřované placebem vykazovaly zvýšenou odchylku v hladině krevní glukózy indikující glukózovou intoleranci, která dokazuje přítomnost diabetes mellitus. Podání 5 mg/kg b.w. glutaminylpyrrolidinu vedlo k omezenému zlepšení glukózové tolerance v diabetických krysách kmene Zucker. Signifikantní snížení zvýšených hladin krevní glukózy a zlepšení glukózové tolerance bylo dosaženo po podání 15 mg/kg a 50 mg/kg b.w. glutaminylpyrrolidinu (viz obrázek 3).
Příklad 11
Studie zvyšování dávky provedená na tlustých krysách kmene Zucker po perorálním podání glutaminylthiazolidinu ·· ·· · ·· · · · ··· · · · · ··· • ···· · · · · ··· • ·· ·· ·· · · · ···· •· · · ····· ·· ·
Zvířata
N=30 samčí krysy kmene Zucker (fa/fa), průměrný věk 11 týdnů (5-12 týdnů), průměrná tělesná hmotnost 350 g (150-400 g), byly zakoupeny od firmy Charles River (Sulzfeld, Germany). Po dodání byly chovány po dobu více jak 12 týdnů do té doby, dokud téměř všechny tlusté krysy kmene Zucker neměly charakteristické příznaky diabetes mellitus. Skupina (N=8) zvířat byla zapojena do testu porovnávajícího tří zvyšující se dávky glutaminylthiazolidinu s placebem (fyziologický roztok).
Podmínky chovu
Zvířata byla chována v jediné kleci za standardních podmínek s kontrolovanou teplotou (22 ± 2°C) v 12/12 hodinovém cyklu světlo/tma (světlo od 6:00 ráno). Podle potřeby byla poskytnuta standardní peletizovaná potrava (ssniff® Soest, Germany) a voda z kohoutku okyselená HCI.
Katetrizace karotické artérie
Tlusté krysy kmene Zucker 24-31 týdnů staré (průměrně 25 týdnů), které byly zadaptované na podmínky chovu, byly vhodně připravené k provedení studie. Katetry byly implantovány do karotické artérie tlustých krys kmene Zucker za standardní anestézie (i.p. injekce 0,25 ml/kg b.w. Rompun® [2%], BayerVital, Germany a 0,5 ml/kg b.w. Ketaminu 10, Atarost GmbH & Co., Twistringen, Germany). Zvířata se nechala jeden týden regenerovat. Poté byly katetry proplachovány heparinovým fyziologickým roztokem (100 IU/ml) třikrát týdně.
Experiment
Skupinám (N=8) tlustých krys kmene Zucker bylo podáváno placebo (1 ml fyziologický roztok, 0,154 mol/1) nebo zvyšující se dávky glutaminylthiazolidinu (5, 15 a 50 mg/kg b.w.). Odpovídající množství glutaminylthiazolidinu bylo rozpuštěno v 1000 μΐ fyziologického roztoku. Tlustým krysám kmene Zucker, které se nechaly přes noc • · • · vyhladovět, bylo perorálně podáváno placebo nebo testovaná látka prostřednictvím potravinového kanálku (15 G, 75 mm; Fine Science Tools, Heidelberg, Germany) v -10 minut. Perorální glukózový toleranční test (OGTT) s 2 g/kg b.w. glukózy (40% roztok, B. Braun Melsungen, Germany) podávané v ± 0 minutě prostřednictvím druhého potravinového kanálku. Vzorky venózní krve z ocasní žíly byly odebírány v -30 min, -15 min, ±0 min a v 5, 10, 15, 20, 30, 40, 60, 90 a 120 minutě do 20 μΐ skleněných kapilár, které byly umístněny do standardních nádob s 1 ml roztoku pro měření hladin krevní glukózy.
Všechny vzorky plazmy byly označeny následujícími značkami:
Kódové číslo Číslo zvířete Datum odběru vzorku Čas odběru vzorku
Analytické metody
Hladiny glukózy byly měřeny glukózoxidázovou metodou (Super G Glucose analyzer; Dr. Muller Gerátebau, Freital, Germany).
Statistické metody
Statistická vyhodnocení a grafická vyjádření byla provedena programem PRISM® 3.02 (GraphPad Software, lne.). Všechny parametry byly analyzovány popisným způsobem včetně střední a standardní odchylky.
Účinek léčení na glukózovou toleranci
Diabetické krysy kmene Zucker ošetřované placebem vykazovaly zvýšenou odchylku v hladině krevní glukózy indikující glukózovou intoleranci, která dokazuje přítomnost diabetes mellitus. Podání 5 mg/kg b.w. glutaminylthiazolidinu vedlo k omezenému zlepšení glukózové tolerance v diabetických krysách kmene Zucker. Signifikantní snížení zvýšených hladin krevní glukózy a zlepšení glukózové tolerance bylo dosaženo po podání 15 mg/kg a 50 mg/kg b.w. glutaminylpyrrolidinu (viz obrázek 4).
• ·
Příklad 12
In vivo inaktivace glutaminylthiazolidinu po perorálním podání krysám kmene Wistar
Zvířata/ experiment
Glutaminylthiazolidin byl podáván perorálně krysám kmene Wistar podle příkladu
9.
Analytické metody
Po aplikaci placeba nebo glutaminylthiazolidinu byly z karotického katetru od volně se pohybujících krys při vědomí odebrány vzorky krve v 2,5, 5, 7,5, 10, 15, 20, 40, 60 a 120 minutách pro stanovení tvorby degradačních produktů glutaminylthiazolidinu.
K analýze byla provedena jednoduchá extrakce na pevné fázi na Cl8 patronách k izolaci požadovaných sloučenin z plazmy. Extrakty byly analyzovány HPLC na reverzní fázi na sloupci Lichrospher 60 RP Select B kombinovanou s hmotnostní spektrometrií v APCI pozitivním módu (HPLC s výstupem na MS). Ke kvantifikaci byla používána metoda vnitřního standardu.
Výsledky
Po perorálním podání glutaminylthiazolidinu krysám kmene Wistar byla zjištěna degradace sloučeniny. Pomocí LC/MS mohl být definován produkt degradace jako pyroglutaminylthiazolidin. Viz obrázky 5 a 6.

Claims (17)

  1. Patentové nároky (Změněné)
    1. Sloučenina obecného vzorce:
    kde X = CH2 nebo S, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
  2. 2. Sloučenina podle nároku 1, kde adiční sůl s kyselinou je vybrána ze skupiny se stávající z kyseliny chlorovodíkové, bromovodíkové, chloristé, sírové, dusičné, fosforečné, octové, propionové, glykolové, mléčné, sukcinové, maleinové, filmařové, jablečné, vinné, citrónové, benzoové, mandlové, methansulfonové, hydroxyethansulfonové, benzensulfonové, oxalové, pamoové, 2-naftalensulfonové, p-toluensulfonové, cyklohexansulfamové, salicylové, sacharinové a trifluoroctové.
  3. 3. Adiční sůl sloučeniny obecného vzorce \ / ,c—ch2 f
    s kyselinou, kde X = CH2 nebo S, a kde adiční sůl s kyselinou je vybrána ze skupiny sestávající se z kyseliny chlorovodíkové, bromovodíkové, chloristé, dusičné, propionové, glykolové, mléčné, maleinové, jablečné, citrónové, benzoové, mandlové, methansulfonové, hydroxyethansulfonové, benzensulfonové, oxalové, pamoové,
    2-naftalensulfonové, p-toluensulfonové, cyklohexansulfamové, salicylové, sacharinové a trifluoroctové.
    • ·
  4. 4. Sloučenina podle nároku 3 vybraná z hydrochloridu glutaminylthiazolidinu a hydrochloridu glutaminylpyrrolidinu.
  5. 5. Hydrochlorid glutaminylthiazolidinu.
  6. 6. Hydrochlorid glutaminylpyrrolidinu.
  7. 7. Polymorf sloučeniny podle kteréhokoliv z předchozích nároků.
  8. 8. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceuticky přijatelný nosič a/nebo ředící roztok a sloučeninu podle kteréhokoliv z předchozích nároků.
  9. 9. Použití sloučeniny nebo farmaceutické kompozice podle kteréhokoliv z předchozích nároků k přípravě léčebného prostředku k inhibici dipeptidyl peptidázy IV nebo enzymové aktivity podobné dipeptidyl peptidáze IV k prevenci nebo léčení onemocnění nebo stavů souvisejících s dipeptidyl peptidázou IV nebo enzymů s podobnou dipeptidyl peptidázou IV.
  10. 10. Použití podle nároku 9 ke snížení zvýšených hladin krevní glukózy u savců vyplývajících z příjmu potravy.
  11. 11. Použití podle nároků 9 nebo 10 k prevenci nebo léčení non-inzulin dependentní diabetes mellitus, artritidy, obezity, imunních a autoimunních chorob, transplantace aloimplantátu, rakoviny, neuronových poruch a kožních onemocnění.
  12. 12. Použití podle nároku 11 k prevenci nebo ošetření non-inzulin-dependentní diabetes mellitus.
  13. 13. Způsob inhibice dipeptidyl peptidázy IV nebo enzymové aktivity podobné dipeptidyl peptidáze IV k prevenci nebo léčení onemocnění nebo stavů souvisejících s dipeptidyl peptidázou IV nebo s enzymy podobnými dipeptidyl peptidáze IV, vyznačující se tím, že zahrnuje podání, při potřebě takového ošetření, • · terapeuticky účinného množství sloučeniny nebo farmaceutické kompozice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 8 savci.
  14. 14. Způsob podle nároku 13, vyznačující se tím, že vede ke snížení zvýšených hladin krevní glukózy u savců v důsledku příjmu potravy.
  15. 15. Způsob podle nároků 13 nebo 14, vyznačující se tím, že vede k prevenci nebo ošetření onemocnění nebo stavů vybraných ze skupiny sestávající se z non-inzulin dependentní diabetes mellitus, artritidy, obezity, imunních a autoimunních chorob, transplantace aloimplantátu, rakoviny, neuronových poruch a kožních onemocnění.
  16. 16. Způsob podle nároku 15 k prevenci nebo ošetření non-inzulin-dependentní diabetes mellitus.
  17. 17. Degradační produkt sloučeniny podle nároku 1, 3 nebo 5 mající vzorec:
CZ2004973A 2002-02-28 2002-06-27 Inhibitory DPIV na bázi glutaminylu CZ2004973A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US36090902P 2002-02-28 2002-02-28

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ2004973A3 true CZ2004973A3 (cs) 2004-12-15

Family

ID=23419891

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2004973A CZ2004973A3 (cs) 2002-02-28 2002-06-27 Inhibitory DPIV na bázi glutaminylu

Country Status (26)

Country Link
US (2) US6946480B2 (cs)
EP (1) EP1480961B1 (cs)
JP (1) JP2005527504A (cs)
KR (1) KR20040095241A (cs)
CN (1) CN1622941A (cs)
AT (1) ATE349435T1 (cs)
AU (1) AU2002325278A1 (cs)
BG (1) BG108857A (cs)
BR (1) BR0215622A (cs)
CA (1) CA2479812A1 (cs)
CZ (1) CZ2004973A3 (cs)
DE (2) DE60217186T2 (cs)
DK (1) DK1480961T3 (cs)
EA (1) EA007434B1 (cs)
ES (1) ES2278944T3 (cs)
HU (1) HUP0600057A2 (cs)
IL (1) IL163629A0 (cs)
MX (1) MXPA04008278A (cs)
NO (1) NO20044038L (cs)
NZ (1) NZ534877A (cs)
PL (1) PL372316A1 (cs)
PT (1) PT1480961E (cs)
SI (1) SI1480961T1 (cs)
SK (1) SK3622004A3 (cs)
UA (1) UA76309C2 (cs)
ZA (1) ZA200406813B (cs)

Families Citing this family (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6258597B1 (en) * 1997-09-29 2001-07-10 Point Therapeutics, Inc. Stimulation of hematopoietic cells in vitro
DE19823831A1 (de) * 1998-05-28 1999-12-02 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Neue pharmazeutische Verwendung von Isoleucyl Thiazolidid und seinen Salzen
US6979697B1 (en) * 1998-08-21 2005-12-27 Point Therapeutics, Inc. Regulation of substrate activity
US6890904B1 (en) * 1999-05-25 2005-05-10 Point Therapeutics, Inc. Anti-tumor agents
US20070293426A1 (en) * 2001-04-02 2007-12-20 Hans-Ulrich Demuth Methods for improving islet signaling in diabetes mellitus and for its prevention
US7196201B2 (en) * 2001-06-27 2007-03-27 Smithkline Beecham Corporation Pyrrolidines as dipeptidyl peptidase inhibitors
CA2518465A1 (en) 2003-03-25 2004-10-14 Takeda San Diego, Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors
WO2004103993A1 (en) 2003-05-14 2004-12-02 Syrrx, Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors
US7169926B1 (en) 2003-08-13 2007-01-30 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
DE602004010206T2 (de) 2003-08-13 2008-10-09 Takeda Pharmaceutical Co. Ltd. Dipeptidyl Peptidase Inhibitoren.
US7678909B1 (en) 2003-08-13 2010-03-16 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
US20060287251A1 (en) * 2003-09-02 2006-12-21 Hans-Ulrich Demuth Combination therapy for glycaemic control
US7790734B2 (en) 2003-09-08 2010-09-07 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
US7732446B1 (en) 2004-03-11 2010-06-08 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
UA85871C2 (uk) 2004-03-15 2009-03-10 Такеда Фармасьютікал Компані Лімітед Інгібітори дипептидилпептидази
EP1753730A1 (en) 2004-06-04 2007-02-21 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
WO2006019965A2 (en) 2004-07-16 2006-02-23 Takeda San Diego, Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors
ATE553077T1 (de) * 2004-07-23 2012-04-15 Nuada Llc Peptidaseinhibitoren
US20060063719A1 (en) * 2004-09-21 2006-03-23 Point Therapeutics, Inc. Methods for treating diabetes
WO2006068978A2 (en) * 2004-12-21 2006-06-29 Takeda Pharmaceutial Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
DOP2006000008A (es) 2005-01-10 2006-08-31 Arena Pharm Inc Terapia combinada para el tratamiento de la diabetes y afecciones relacionadas y para el tratamiento de afecciones que mejoran mediante un incremento de la concentración sanguínea de glp-1
CN101277949A (zh) 2005-04-22 2008-10-01 阿兰托斯制药控股公司 二肽基肽酶-ⅳ抑制剂
CN101374523B (zh) 2005-09-14 2012-04-11 武田药品工业株式会社 用于治疗糖尿病的二肽基肽酶抑制剂
CA2622642C (en) 2005-09-16 2013-12-31 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
CN1979367B (zh) * 2005-11-30 2013-05-15 北京中电华大电子设计有限责任公司 采用测试校准提高器件参数精度的方法
WO2007112347A1 (en) 2006-03-28 2007-10-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
DE602007010420D1 (de) 2006-04-11 2010-12-23 Arena Pharm Inc Verfahren zur verwendung des gpr119-rezeptors zur identifizierung von verbindungen zur erhöhung der knochenmasse bei einer person
PE20071221A1 (es) 2006-04-11 2007-12-14 Arena Pharm Inc Agonistas del receptor gpr119 en metodos para aumentar la masa osea y para tratar la osteoporosis y otras afecciones caracterizadas por masa osea baja, y la terapia combinada relacionada a estos agonistas
US8324383B2 (en) 2006-09-13 2012-12-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Methods of making polymorphs of benzoate salt of 2-[[6-[(3R)-3-amino-1-piperidinyl]-3,4-dihydro-3-methyl-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinyl]methyl]-benzonitrile
TW200838536A (en) 2006-11-29 2008-10-01 Takeda Pharmaceutical Polymorphs of succinate salt of 2-[6-(3-amino-piperidin-1-yl)-3-methyl-2,4-dioxo-3,4-dihydro-2H-pyrimidin-1-ylmethy]-4-fluor-benzonitrile and methods of use therefor
US8093236B2 (en) 2007-03-13 2012-01-10 Takeda Pharmaceuticals Company Limited Weekly administration of dipeptidyl peptidase inhibitors
EP2108960A1 (en) 2008-04-07 2009-10-14 Arena Pharmaceuticals, Inc. Methods of using A G protein-coupled receptor to identify peptide YY (PYY) secretagogues and compounds useful in the treatment of conditons modulated by PYY
NZ595542A (en) * 2009-03-30 2013-05-31 Dong A Pharm Co Ltd Improved method for preparing dipeptidyl peptidase-iv inhibitor and intermediate
AR077642A1 (es) 2009-07-09 2011-09-14 Arena Pharm Inc Moduladores del metabolismo y el tratamiento de trastornos relacionados con el mismo
MX2012011631A (es) 2010-04-06 2013-01-18 Arena Pharm Inc Moduladores del receptor gpr119 y el tratamiento de trastornos relacionados con el mismo.
EP2619198A1 (en) 2010-09-22 2013-07-31 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
CN102453001B (zh) * 2010-10-22 2016-06-01 中国医学科学院药物研究所 硫代吗啉类化合物及其制备方法和用途
US20140018371A1 (en) 2011-04-01 2014-01-16 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators Of The GPR119 Receptor And The Treatment Of Disorders Related Thereto
US20140066369A1 (en) 2011-04-19 2014-03-06 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators Of The GPR119 Receptor And The Treatment Of Disorders Related Thereto
WO2012145603A1 (en) 2011-04-22 2012-10-26 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
WO2012145604A1 (en) 2011-04-22 2012-10-26 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
WO2012170702A1 (en) 2011-06-08 2012-12-13 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
WO2013055910A1 (en) 2011-10-12 2013-04-18 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
WO2014074668A1 (en) 2012-11-08 2014-05-15 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of gpr119 and the treatment of disorders related thereto
JP2018507914A (ja) 2015-03-09 2018-03-22 インテクリン・セラピューティクス・インコーポレイテッド 非アルコール性脂肪肝疾患および／またはリポジストロフィーの処置のための方法
CN110996951A (zh) 2017-04-03 2020-04-10 科赫罗斯生物科学股份有限公司 治疗进行性核上性麻痹的PPARγ激动剂

Family Cites Families (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE296075C (cs)
US2961377A (en) 1957-08-05 1960-11-22 Us Vitamin Pharm Corp Oral anti-diabetic compositions and methods
US3174901A (en) 1963-01-31 1965-03-23 Jan Marcel Didier Aron Samuel Process for the oral treatment of diabetes
US3879541A (en) 1970-03-03 1975-04-22 Bayer Ag Antihyperglycemic methods and compositions
DE2009743A1 (de) 1970-03-03 1971-09-16 Farbenfabriken Bayer Ag, 5090 Leverkusen Substituierte Biguanide mit antihyperglykämischer Wirkung
US3960949A (en) 1971-04-02 1976-06-01 Schering Aktiengesellschaft 1,2-Biguanides
CH602612A5 (cs) 1974-10-11 1978-07-31 Hoffmann La Roche
US4935493A (en) 1987-10-06 1990-06-19 E. I. Du Pont De Nemours And Company Protease inhibitors
US5433955A (en) 1989-01-23 1995-07-18 Akzo N.V. Site specific in vivo activation of therapeutic drugs
DD296075A5 (de) * 1989-08-07 1991-11-21 Martin-Luther-Universitaet Halle-Wittenberg,De Verfahren zur herstellung neuer inhibitoren der dipeptidyl peptidase iv
JP3262329B2 (ja) 1990-01-24 2002-03-04 アイ． バックレイ，ダグラス 糖尿病治療に有用なｇｌｐ―１アナログ
DE69124371T2 (de) 1990-04-14 1997-06-12 New England Medical Center Inc Typ-iv-dipeptidyl-aminopeptidase-inhibitoren
US5462928A (en) 1990-04-14 1995-10-31 New England Medical Center Hospitals, Inc. Inhibitors of dipeptidyl-aminopeptidase type IV
WO1991017767A1 (en) 1990-05-21 1991-11-28 New England Medical Center Hospitals, Inc. Method of treating inhibition of dipeptidyl aminopeptidase type iv
JPH0819154B2 (ja) 1991-03-14 1996-02-28 江崎グリコ株式会社 ジペプチジルカルボキシペプチダーゼを阻害するペプチド
JPH04334357A (ja) 1991-05-02 1992-11-20 Fujirebio Inc 酵素阻害作用を有するアシル誘導体
EP0610317B1 (en) 1991-10-22 2001-01-31 New England Medical Center Hospitals, Inc. Inhibitors of dipeptidyl-aminopeptidase type iv
IL106998A0 (en) 1992-09-17 1993-12-28 Univ Florida Brain-enhanced delivery of neuroactive peptides by sequential metabolism
FR2696740B1 (fr) 1992-10-13 1994-12-30 Dospharma Sa Dérivés prodrogués de la diméthylbiguanide et applications comme médicaments.
WO1995011689A1 (en) 1993-10-29 1995-05-04 Trustees Of Tufts College Use of inhibitors of dipeptidyl-aminopeptidase to block entry of hiv into cells
IL111785A0 (en) 1993-12-03 1995-01-24 Ferring Bv Dp-iv inhibitors and pharmaceutical compositions containing them
EP0658568A1 (en) 1993-12-09 1995-06-21 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods
US5543396A (en) 1994-04-28 1996-08-06 Georgia Tech Research Corp. Proline phosphonate derivatives
US5512549A (en) 1994-10-18 1996-04-30 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptide analogs, compositions, and methods of use
US5614379A (en) 1995-04-26 1997-03-25 Eli Lilly And Company Process for preparing anti-obesity protein
DE19616486C5 (de) 1996-04-25 2016-06-30 Royalty Pharma Collection Trust Verfahren zur Senkung des Blutglukosespiegels in Säugern
CZ389398A3 (cs) 1996-05-29 1999-07-14 Prototek, Inc. Proléčiva thalidomidu a jejich použití pro modulaci funkce T-buněk
US6006753A (en) 1996-08-30 1999-12-28 Eli Lilly And Company Use of GLP-1 or analogs to abolish catabolic changes after surgery
US5827898A (en) 1996-10-07 1998-10-27 Shaman Pharmaceuticals, Inc. Use of bisphenolic compounds to treat type II diabetes
TW492957B (en) 1996-11-07 2002-07-01 Novartis Ag N-substituted 2-cyanopyrrolidnes
AR016751A1 (es) 1996-11-22 2001-08-01 Athena Neurosciences Inc Metodo para inhibir la liberacion del peptido beta-amiloide en una celula, composicion farmaceutica y compuestos utiles en dicho metodo
JP2002506075A (ja) 1998-03-09 2002-02-26 フォンダテッヒ・ベネルクス・ナムローゼ・フェンノートシャップ セリンペプチダーゼ調節剤
DE19823831A1 (de) * 1998-05-28 1999-12-02 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Neue pharmazeutische Verwendung von Isoleucyl Thiazolidid und seinen Salzen
AU765370B2 (en) 1998-06-05 2003-09-18 Point Therapeutics, Inc. Cyclic boroproline compounds
DE19826972A1 (de) 1998-06-18 1999-12-23 Univ Magdeburg Tech Verwendung von Enzyminhibitoren und pharmazeutische Zubereitung zur Therapie von dermatologischen Erkrankungen mit follikulären und epidermalen Hyperkeratosen und einer verstärkten Keratinozytenproliferation
WO2000001849A1 (en) 1998-07-02 2000-01-13 Invitro Diagnostics, Inc. Methods, compositions and apparatus for making nucleic acid molecules having a selected affinity to a target molecule
DE19834591A1 (de) 1998-07-31 2000-02-03 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Verfahren zur Steigerung des Blutglukosespiegels in Säugern
JP2002523365A (ja) 1998-08-21 2002-07-30 ポイント セラピューティクス， インコーポレイテッド 基質の活性の調節
WO2000053171A1 (en) 1999-03-05 2000-09-14 Molteni L. E C. Dei Fratelli Alitti Societa' Di Esercizio S.P.A. Use of metformin in the preparation of pharmaceutical compositions capable of inhibiting the enzyme dipeptidyl peptidase iv
AU1916401A (en) 1999-11-12 2001-06-06 Guilford Pharmaceuticals Inc. Dipeptidyl peptidase iv inhibitors and methods of making and using dipeptidyl peptidase iv inhibitors
WO2001062266A2 (en) 2000-02-25 2001-08-30 Novo Nordisk A/S Use of dpp-iv inhibitors for the treatment of diabetes
BR0109553A (pt) 2000-03-31 2003-06-03 Probiodrug Ag Método para o melhoramento de sinalização de ilhota em diabetes melito e para sua prevenção
US6573096B1 (en) 2000-04-01 2003-06-03 The Research Foundation At State University Of New York Compositions and methods for inhibition of cancer invasion and angiogenesis
DE10025464A1 (de) 2000-05-23 2001-12-06 Inst Medizintechnologie Magdeb Kombinierte Verwendung von Enzyminhibitoren zur Therapie von Autoimmunerkrankungen, bei Transplantationen und Tumorerkrankungen sowie Kombinationen von Enzyminhibitoren umfassende pharmazeutische Zubereitungen
GB0014969D0 (en) 2000-06-19 2000-08-09 Smithkline Beecham Plc Novel method of treatment
CA2422162C (en) 2000-09-09 2012-10-23 The Research Foundation Of State University Of New York Method and compositions for isolating metastatic cancer cells, and use in measuring metastatic potential of a cancer thereof
MXPA03003006A (es) * 2000-10-06 2003-07-14 Tanabe Seiyaku Co Compuestos de anillo de 5 miembros nitrogenados.

Also Published As

Publication number Publication date
EP1480961A1 (en) 2004-12-01
DE20220238U1 (de) 2003-05-08
MXPA04008278A (es) 2005-09-20
DE60217186D1 (de) 2007-02-08
IL163629A0 (en) 2005-12-18
DK1480961T3 (da) 2007-05-07
UA76309C2 (en) 2006-07-17
CA2479812A1 (en) 2003-09-04
BG108857A (en) 2005-12-30
ES2278944T3 (es) 2007-08-16
HUP0600057A2 (en) 2006-05-29
KR20040095241A (ko) 2004-11-12
HK1067120A1 (en) 2005-04-01
EA200401062A1 (ru) 2005-02-24
NZ534877A (en) 2006-05-26
SK3622004A3 (sk) 2005-02-04
PT1480961E (pt) 2007-02-28
ZA200406813B (en) 2006-06-28
CN1622941A (zh) 2005-06-01
ATE349435T1 (de) 2007-01-15
US7060719B2 (en) 2006-06-13
US20040167191A1 (en) 2004-08-26
NO20044038L (no) 2004-09-28
PL372316A1 (en) 2005-07-11
EP1480961B1 (en) 2006-12-27
SI1480961T1 (sl) 2007-06-30
DE60217186T2 (de) 2007-09-27
AU2002325278A1 (en) 2003-09-09
BR0215622A (pt) 2004-12-07
US20030162820A1 (en) 2003-08-28
EA007434B1 (ru) 2006-10-27
US6946480B2 (en) 2005-09-20
JP2005527504A (ja) 2005-09-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ2004973A3 (cs) Inhibitory DPIV na bázi glutaminylu
EP1399471B1 (en) Use of dipeptidyl peptidase iv inhibitors as therapeutics for neurological disorders
RU2305553C2 (ru) Новые ингибиторы дипептидилпептидазы iv и их применение для понижения кровяного давления
CA2333603C (en) New dipeptidyl peptidase iv effectors
US7368421B2 (en) Use of dipeptidyl peptidase IV inhibitors in the treatment of multiple sclerosis
US20050107308A1 (en) Dipeptidyl peptidase IV inhibitors and their uses for lowering blood pressure levels
US20060194852A1 (en) Glutaminyl based DPIV inhibitors
EP1695970A1 (en) Peptides useful for competitive modulation of dipeptidyl peptidase IV catalysis
HK1094580A (en) Peptides useful for competitive modulation of dipeptidyl peptidase iv catalysis
HK1067120B (en) Glutaminyl based dpiv inhibitors
NZ545366A (en) Glutaminyl based DPIV inhibitors
WO2025175250A1 (en) Orally deliverable non-naturally occurring melanocortin analogs and uses thereof for modulating weight loss
AU2003262286B2 (en) Novel Effectors of Dipeptidyl Peptidase IV
CENTER Pospisilik et al.(43) Pub. Date: Sep. 18, 2003