EA006597B1 - Ингибиторы аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью, и их применение в лечении диабетической ретинопатии - Google Patents

Ингибиторы аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью, и их применение в лечении диабетической ретинопатии Download PDF

Info

Publication number
EA006597B1
EA006597B1 EA200100791A EA200100791A EA006597B1 EA 006597 B1 EA006597 B1 EA 006597B1 EA 200100791 A EA200100791 A EA 200100791A EA 200100791 A EA200100791 A EA 200100791A EA 006597 B1 EA006597 B1 EA 006597B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
acetic acid
acid hydrochloride
alkyl
methyl
dimethylcyclohexyl
Prior art date
Application number
EA200100791A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200100791A1 (ru
Inventor
Джастин Стефен Брайнс
Лайн-Йен Ху
Сьюзан М. Хутсон
Катрин Фоли Ланоуэ
Эрих Лиет
Михаель Франсис Рафферти
Тодд Роберт Райдер
Ти-Жи Су
Девин Франклин Велти
Девид Юрген Вустроу
Original Assignee
Варнер-Ламберт Компани
Дзе Пенн Стейт Рисёрч Фаундейшн
Вэйк Форест Юнивёрсити
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Варнер-Ламберт Компани, Дзе Пенн Стейт Рисёрч Фаундейшн, Вэйк Форест Юнивёрсити filed Critical Варнер-Ламберт Компани
Publication of EA200100791A1 publication Critical patent/EA200100791A1/ru
Publication of EA006597B1 publication Critical patent/EA006597B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/22—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/28—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being saturated and containing rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/34—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/45—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C07C233/46—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
    • C07C233/47—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom having the carbon atom of the carboxamide group bound to a hydrogen atom or to a carbon atom of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/01—Saturated compounds having only one carboxyl group and containing hydroxy or O-metal groups
    • C07C59/11—Saturated compounds having only one carboxyl group and containing hydroxy or O-metal groups containing rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/02—Systems containing only non-condensed rings with a three-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/04—Systems containing only non-condensed rings with a four-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/06—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring
    • C07C2601/08—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring the ring being saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/14—The ring being saturated

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение представляет собой способ профилактики и терапевтического лечения диабетической ретинопатии. Способ включает назначение ингибитора формул I, II и III аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью (ВСАТ) животным, таким как млекопитающие, в частности, человек, в количестве, достаточном для лечения сетчатки при диабетической ретинопатии профилактически или терапевтически. Настоящее изобретение также представляет несколько новых ингибиторов ВСАТ формулы IV. В формулах I-IV n, m, X и R-Rимеют значения, данные в описании.

Description

В Соединенных Штатах более 14 миллионов людей страдают диабетом. Все больные диабетом находятся в группе риска по осложнениям на сетчатку глаза. Однако больные диабетом типа I, то есть инсулинзависимым диабетом, в гораздо большей степени рискуют потерять зрение, чем больные диабетом типа II, то есть инсулиннезависимым диабетом.
Ретинопатией называют любое невоспалительное заболевание сетчатки глаза. Диабетической ретинопатией называют любую ретинопатию, связанной с любой формой сахарного диабета.
Первоначально высокий уровень глюкозы в крови у диабетических больных вызывает повышение активности факторов роста в их глазах. Это состояние известно как предварительная стадия диабетической ретинопатии и может привести к полной диабетической ретинопатии при отсутствии профилактического лечения.
Ретинопатия охватывает большинство диабетических больных практически на протяжении всей их жизни. В настоящее время это основная причина слепоты у американцев в возрасте от 20 до 74 лет и предположительно около трети диабетических больных в Соединенных Штатах страдает ухудшением зрения. В год в Соединенных Штатах обнаруживается до 40000 новых случаев слепоты среди больных диабетом (СЭС, неопубликованные данные, 1993). Больные диабетом в 25 раз чаще слепнут от ретинопатии, чем остальная популяция людей.
Течение диабетической ретинопатии включает двухэтапную непролиферативную стадию, обычно наступающую первой, и пролиферативную стадию. Непролиферативная стадия, известная также как фоновая диабетическая ретинопатия, характеризуется утолщением базальной мембраны, потерей ретинальных перицитов, нарушениями в капиллярах, интраретинальными аневризмами, ретинальными кровоизлияниями (также известными как пятнистые кровоизлияния), ретинальными отеками, в частности, диабетическим макулярным отеком, закупоркой капилляров, связанной с ретинальной ишемией или плохой ретинальной перфузией (то есть, плохим развитием сосудов), и мягкими или твердыми экссудатами. Пролиферативная стадия, которая охватывает ориентировочно 700000 американцев (Сйеи с1 а1., 1. Μίδδ. 81а1е Меб. Аккос. 36(7): 201-208 (1995)), характеризуется неоваскулярными процессами и фиброваскулярным ростом (то есть, рубцевание, включающее глиальные и фиброзные элементы) из сетчатки или оптического нерва через внутреннюю поверхность сетчатки или диска или внутрь полости стекловидного тела.
Пролиферативная стадия может привести к коревой или неоваскулярной глаукоме. Макулярный отек может проявиться на любой стадии и, вместе с осложнениями, связанными с неоваскулярными процессами в сетчатке, они являются двумя основными ретинальными проблемами, которые вызывают потерю зрения, связанную с диабетом.
Хотя патологические стадии диабетической ретинопатии хорошо описаны, молекулярные события, лежащие в ее основе, понятны не вполне. Отчасти это связано с тем, что болезнь развивается в течение 10-30 лет, в зависимости от персональных особенностей.
Строгий контроль гликемии и гипертензии и офтальмологические наблюдения больных диабетом дают результаты в предотвращении заболевания. Современные способы лечения подразумевают наблюдение у офтальмолога, лазерную фотокоагуляцию и иссечение стекловидного тела.
Угрозу макулярного отека или поражения макулярного центра лечат с помощью фокальной макулярной фотокоагуляции. Это небольшие (50 миллимикрон в диаметре) прижигания низкоинтенсивным лазером в районах утечки на желтом пятне (Мигрйу, Атег. Батбу Рйуыаап 51 (4): 785-796 (1995)). Если макулярный отек возникает снова, может оказаться необходимым повторное лечение.
Пациентов с интенсивной и очень интенсивной непролиферативной ретинопатией и пациентов с высоким риском пролиферативной ретинопатии или с ранней или развитой пролиферативной ретинопатией лечат с помощью рассеянной или панретинальной фотокоагуляции. Панретинальная фотокоагуляция подразумевает 1500-2000 лазерных прижиганий, каждое в диаметре около 500 миллимикрон в среднепериферической или периферической части сетчатки (Мигрйу (1995), см. выше).
Наилучшим образом описанным биохимическим механизмом развития микрососудистых осложнений диабета является метаболический путь сорбита. В метаболическом пути сорбита фермент альдозоредуктаза катализирует превращение глюкозы в сорбит и галактозы в галактит. Альдозоредуктаза имеет низкую субстратную специфичность в отношении глюкозы. Поэтому, когда концентрация глюкозы нормальна, этот метаболический путь неактивен. При гипергликемии он становится активным. Активация метаболического пути сорбита важна, например, для ретинальных перицитов, которым не требуется инсулин для поглощения глюкозы. Также клетки капилляров сетчатки показывают содержание существенного количества альдозоредуктазы (Беттщ, Но8рйа1 Ртасбсе: 79-89 (Мау 15,1993).
Принимая во внимание распространенность диабетической ретинопатии, становится очевидной необходимость эффективного профилактического и терапевтического лечения этого заболевания. Поэтому основным объектом настоящего изобретения является способ профилактического и терапевтического лечения диабетической ретинопатии, включая лечение предварительной стадии диабетической ретинопатии, непролиферативной стадии диабетической ретинопатии и пролиферативной стадии диабетической ретинопатии. Этот и другие объекты настоящего изобретения станут очевидными из подробного описания, приведенного ниже.
-1006597
Настоящее изобретение относится к способу профилактического и терапевтического лечения диабетической ретинопатии, включая лечение предварительной стадии диабетической ретинопатии, непролиферативной стадии диабетической ретинопатии, и пролиферативной стадии диабетической ретинопатии. Способ включает назначение терапевтически эффективного количества ингибитора метаболических путей, контролируемых аминотрансферазами, зависимыми от аминокислот с разветвленной цепью (ВСАТ), представляющего собой соединение формул I, II и/или III нуждающемуся в этом пациенту
где К9 означает Н; С^Сщ-алкил; С3-С10-циклоалкил, в котором от 1 до 3 атомов углерода могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или ΝΒ2, где К2 означает водород или С1-С10-алкил; замещенный С1-С10-алкил, содержащий галоген, амин, С1-С10-алкоксигруппу, С3-С10-циклоалкил или гидроксил; аллил; С2-С6-алкинил; С1-С10-алканоил; С1-С10-алкокси-С1-С10-алканоил; сульфонил; фенил; бензил или С4-С9-арил-С1-С10-алкил, в котором от 1 до 4 кольцевых атомов арила могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или Ν; причем указанные алкильные, алкоксильные, алкинильные, алканоильные или аллильные группы могут быть замещены, предпочтительно 1-3 группами, выбранными из группы, включающей ΝΚ4Κ5, где К4 и К5 означают водород или С1-С10-алкил, незамещенный или замещенный фенил, тио-С1-С6-алкил, С1-С6-алкокси, гидрокси, карбокси, С1-С6-алкоксикарбонил, галоген, нитрил, С3С10-циклоалкил, и 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, выбранного из группы, включающей азот, который в свою очередь может быть замещен С1-С6-алкилом или незамещенным или замещенным галогеном (СН2)пфенилом, где η означает 1, 2 или 3, кислород и серу; и причем указанные циклоалкильные группы могут быть замещены гидроксигруппой или кетогруппой, а указанные арильные, фенильные и бензильные группы могут быть замещены 1, 2 или 3 группами, выбранными из перечня, включающего С1-С10-алкил, возможно замещенный как указано выше, С1-С10-алкоксил, возможно замещенный как указано выше, тиогруппу, тио-С1-С10-алкил, гидрокси, карбонил, группу формулы -ΝΚ4Κ5, Т(СН2)шОК'1 или Т(СН2)тСО2К4, где т означает от 1 до 6, Т означает О, 8, ΝΕ4, К(О)К4, КК4К6 или СК4К5, С) означает О, 8, ΝΕ5, К(О)К5 или КК5К6, где К4 и К5 определены как выше, а К6 означает незамещенный или замещенный как указано выше С1-С10-алкил;
т и η означают независимо целое число от 1 до 3;
К1-К8 и К10-К14 означают независимо Н, незамещенный или замещенный как выше указано С1-С10алкил; и Х=КК14, причем где существует более чем 1 стереоизомер, каждый хиральный центр может независимо быть К или 8; или их фармацевтически приемлемую соль, сложный эфир или амид.
Это соединение может иметь один или более ассимметричных атомов углерода и каждый из центров ассимметрии может быть рацемическим (К и 8) или хиральным (К или 8).
Предпочтительными соединениями формул I, II или III являются те, где т и η означают 1; Х означает ΝΕ14; К9 означает Н; К4 означает метил; К4 и К5 означают метил; К8 означает метил; К10 означает метил; К7 и К8 означают метил; К4 и К8 означают метил; К1-К8 и К10-К13 означают Н; К9 означает С1-С10 алкил; К9 означает бензил; К14 означает С1-Сю-алкил; К9 означает С4-С9-арил-С1-Сю-алкил; К9 означает Сз-Сю-циклоалкил; Я1-К8 означают Н; К1-К8 и К10-Кп означают Н; Я1-К2 и К7-К8 означают Н или К2 означает метил, причем указанные группы могут быть замещены как указано выше.
Более предпочтительными соединениями являются соединения формул I, II или III, где К3 означает алкил, Я1-К2 и К.4-К.ц и К14 означают водород, т и η означают 1, а Х означает ΝΚ14; К3 и Кп означают алкил, Я1-К2 и К4-К10 и К14 означают водород, т и η означают 1, а Х означает ΝΚ14; К3 и Кп означают алкил, К1-К2 и К.4-К10 и К14 означают водород, т и η означают 1, К9 означает алкил, а Х означает ΝΚ14; и Κι-Кц и К14 означают водород, т и η означают 1, а Х означает О, причем указанные группы могут быть замещены как указано выше.
Особенно предпочтительные соединения выбраны из α,3 β,5 в-(1-аминометил-3,5-диэтилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; транс-(1К,3К)(1-аминометил-3-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-аминометил-2-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-аминометил-3,3-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (+/-)(транс)-(1-аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид; (цис/транс)-(3К)-( 1 -аминометил-3-метилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид; (+)(транс)-(1 -аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид; (+)(транс)-(1 -аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид;
α,3 в,5в-(1-аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-(3,5-диметил-1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
α,3 в,5в-(1-этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1α,3β,5β-[(1 -бензиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
α,3 в,5в-(1-диметиламинометил-3,5-диметил-циклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
α,3 в,5в-(1-бутиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-{1-[(бензилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-(3,5-диметил-1-метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[1-(изобутиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(циклобутилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[1-(изопропиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; 1-аминометил-1 -циклогексануксусная кислота;
1-аминометил-1 -циклопентануксусная кислота;
1-аминометил-1-циклопентануксусной кислоты натриевая соль; {1-[(2-метилбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(4,4,4-трифторбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; (1-этиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
{1-[(циклопропилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(2-гидрокси-1-метилэтиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(изобутиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
(1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(изопропиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; (1-циклогексиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(бензиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
((1К,3К)-3 -метил-1 -пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(циклопентилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(циклогексилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
[1 -(трет-бутоксикарбониламинометил)циклогексил]уксусная кислота; ((3К,58)-(1-циклобутиламинометил)-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; {(3К,58)-3,5-диметил-(1-[(2-метилбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {(3К,58)-1-[(2-гидрокси-1 -метилэтиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
{(3К,58)-1-[(2,2-диметоксиэтиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
{(3К,58)-1-[(циклопентилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
{(3К,58)-1-[(циклогексилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
((3К,58)-1-циклогексиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-диметиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
(1-бутиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(2,2-диметоксиэтиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
(1-метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
-3006597 {1-[(бензилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; ((3К,58)-1-этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-аминометил-4-этилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
(1-аминометил-4-пропилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид или ((3К,58)-3,5-диметил-1 -пропиламинометилциклогексил )уксусной кислоты гидрохлорид. Несколько соединений, описываемых формулами I, II и III, известны.
Соединения формулы А η2ν---сн2---с---сн2---соок^ (СН2)П где К1 означает водород или низший алкильный радикал, а η означает 4, 5 или 6, известны из патента США № 4024175 и выделенного из него патента США № 4087544. Описанные там соединения обладают следующими качествами: защитный эффект от спазмов, вызванных тиосемикарбазидом, защитное действие от кардиазольных спазмов, церебральных заболеваний, эпилепсии, приступов слабости, гипокинезии и черепных травм, улучшение церебральных функций. Эти соединения полезны для гериатрических пациентов. Упомянутые патенты включены здесь в виде ссылок.
Соединения формулы В
или их фармацевтически приемлемые соли, где К1 означает линейную или разветвленную алкильную группу с числом углеродных атомов от 1 до 6, фенил или циклоалкил с числом углеродных атомов от 3 до 6; К2 означает водород или метил; К3 означает водород или карбоксил, известны по патенту США № 5563175 и выделенным из него патентам. Эти патенты включены здесь в виде ссылок.
Настоящее изобретение также относится к новым соединениям формулы IV
где К1-К4 означают водород или С1-С10-алкил;
Х означает ΝΚ5;
К5 означает водород или С1-С10-алкил, К6 означает С1-С10-алкил; бензил; С4-С9-арил-С1-С10-алкил, в котором от 1 до 4 кольцевых атомов арила могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или Ν; С1-С10-алкокси; С3-С10-циклоалкил, в котором от 1 до 3 атомов углерода могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или ΝΚ2, где К2 означает водород или С1-С10-алкил; аллил; С1-С10-алкилС3-С10-циклоалкил, в котором от 1 до 3 кольцевых атомов циклоалкила могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или ΝΚ2, где К2 имеет вышеуказанное значение; тризамещенный галоген-С1-С10алкил; причем указанные алкильные, алкоксильные, аллильные группы могут быть замещены, предпочтительно 1-3 группами, выбранными из группы, включающей ΝΚ4Κ5, где К4 и К5 означают водород или С1-С10-алкил, незамещенный или замещенный фенил, тио-С1-С6-алкил, С1-С6-алкокси, гидрокси, карбокси, С1-С6-алкоксикарбонил, галоген, нитрил, С3-С10-циклоалкил, и 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, выбранного из группы, включающей азот, который, в свою очередь, может быть замещен С1-С6-алкилом или незамещенным или замещенным галогеном (СН2)пфенилом, где η означает 1, 2 или 3, кислород и серу; и причем указанные циклоалкильные группы могут быть замещены гидроксигруппой или кетогруппой, а указанные арильные и бензильные группы могут быть замещены 1, 2 или 3 группами, выбранными из перечня, включающего С1-С10-алкил, возможно замещенный как указано выше, С1-С10-алкоксил, возможно замещенный как указано выше, тио-группу, тио-С1-С10-алкил, гидрокси, карбонил, группу формулы -ΝΚ4Κ5, Т(СН2)трК4 или Т(СН2)тСО2К4, где т означает от 1 до 6, Т означает О, 8, ΝΚ4, Ν(Ο)Κ4, ΝΚ4Κ6 или СК4К5, О означает О, 8, ΝΚ5, Ν(Ο)Κ5 или ΝΚ5Κ6, где К4 и К5 определены как выше, а К6 означает незамещенный или замещенный как указано выше С1-С10-алкил;
и если К1-К4 каждый означают водород, то К6 не означает метил; или его фармацевтически приемлемая соль, сложный эфир или амид.
Как и соединения формул I, II и III, эти соединения применимы для профилактического и терапевтического лечения диабетической ретинопатии, включая лечение предварительной стадии диабетической ретинопатии, непролиферативной стадии диабетической ретинопатии, и пролиферативной стадии диабетической ретинопатии.
Предпочтительными являются те соединения формулы IV, где В2 и В4 означают водород, а Κι и В3 означают С1-Сю-алкил; В2 и В4 означают водород, а В! и В3 означают метил; В!-В4 означают водород; В! означает С1-С10-алкил, а В2-В4 означают водород; В1 означает метил, а В2-В4 означают водород; В5 означает водород; Х означает ИВ5; Х означает О; В6 означает С1-С10-алкил; В6 означает бензил; В6 означает фенил-С1-С10-алкил; В6 означает С3-С10-циклоалкил, в котором по меньшей мере один кольцевой атом циклоалкила может быть заменен гетероатомом, выбранным из О, 8 или ИВ2, где В2 имеет вышеуказанное значение; В6 означает трифтор-С1-С10-алкил; В6 означает С1-С10-алкил-С3-С10-циклоалкил, в котором по меньшей мере один кольцевой атом циклоалкила может быть заменен гетероатомом, выбранным из О, 8 или ИВ2, где В2 имеет вышеуказанное значение; В6 означает С1-С10-алкоксигруппу и В6 означает аллил, причем указанные группы могут быть замещены как указано выше.
Другими предпочтительными соединениями формулы IV являются те, где В2 и В4 означают водород, а В1 и В3 означают метил; В1-В4 означают водород; В1 означает метил, а В2-В4 означают водород; В5 означает водород; Х означает ИВ5; В6 означает С1-С10-алкил; В6 означает бензил; В6 означает фенил-С1С10-алкил; В6 означает С3-С10-циклоалкил, в котором по меньшей мере один кольцевой атом циклоалкила может быть заменен гетероатомом, выбранным из О, 8 или ИВ2, где В2 имеет вышеуказанное значение; Вб означает трифтор-С1-С10-алкил; В6 означает С1-С10-алкил-С3-С10-циклоалкил, в котором по меньшей мере один кольцовый атом циклоалкила может быть заменен гетероатомом, выбранным из О, 8 или ИВ2, где В2 имеет вышеуказанное значение; В6 означает С1-С10-алкоксигруппу и В6 означает аллил, причем указанные группы могут быть замещены как указано выше.
Также предпочтительными являются соединения формулы Ν, где В2 и В4 означают водород, а В1и В3 означают метил; В1-В4 означают водород.
Особенно предпочтительные соединения выбраны из перечня:
1а,3в,5в-(3,5-диметил-1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-(1-этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1α,3β,5β-[(1 -бензиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
α,3 в,5в-(1-диметиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1 α,3 в,5в-(1-бутиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-{1-[(бензилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-(3,5-диметил-1-метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[1-(изобутиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[3,5-диметил-1-(фенэтиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
α,3 в,5в-{3,5-диметил-1-[(3 -фенилпропиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
{1-[(циклобутилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[1-(изопропиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(2-метилбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
{1-[(4,4,4-трифторбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; (1-этиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
{1-[(циклопропилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(изобутиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
(1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(изопропиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; (1-циклогексиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(бензиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
((1В,3В)-3 -метил-1 -пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
{1-[(циклопентилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(циклогексилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
[1 -(трет-бутоксикарбониламинометил)циклогексил]уксусная кислота;
((3В,58)-1-циклобутиламинометил)-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; {(3В,58)-3,5-диметил-1-[(2-метилбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {(3В,58)-1-[(2,2-диметоксиэтиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
{(3В,58)-1-[(циклопентилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
{(3В,58)-1-[(циклогексилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил }уксусной кислоты гидрохлорид;
((3В,58)-1-циклогексиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-бутиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
{1-[(2,2-диметоксиэтиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
-5006597 {1-[(бензилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
1- [(фенэтиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(3-фенилпропиламино)метил] циклогексил} уксусной кислоты гидрохлорид; ((3К,58)-1-этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; ((3К,58)-3,5-диметил-1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; [(1К,3К)-1-(бензиламинометил)-3-метилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; {(1К,3К)-1-[(бензилметиламино)метил]-3-метилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; или ((1К,3К)-3-метил-1 -метиламинометилциклогексил )уксусной кислоты гидрохлорид.
Настоящее изобретение также относится к способу ингибирования аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью, у пациентов, нуждающихся в этом, включающий стадию назначения терапевтически эффективного количества соединения формул I, II и/или III
η
где К9 означает Н; С1-С10-алкил; С3-С10-циклоалкил, в котором от 1 до 3 атомов углерода могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или КК2, где К2 означает водород или С1-С10-алкил; замещенный С1-Сю-алкил, содержащий галоген, амин, С1-Сю-алкоксигруппу, С3-Сю-циклоалкил или гидроксил; аллил; С2-Сб-алкинил; С1-Сю-алканоил; С1-Сю-алкокси-С1-Сю-алканоил; сульфонил; фенил; бензил или С4-С9-арил-С1-С10-алкил, в котором от 1 до 4 кольцевых атомов арила могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или Ν; причем указанные алкильные, алкоксильные, алкинильные, алканоильные или аллильные группы могут быть замещены, предпочтительно 1-3 группами, выбранными из группы, включающей ΝΚ4Κ5, где К4 и К5 означают водород или С1-С10-алкил, незамещенный или замещенный фенил, тио-С1-С6-алкил, С1-С6-алкокси, гидрокси, карбокси, С1-С6-алкоксикарбонил, галоген, нитрил, С3С10-циклоалкил, и 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, выбранного из группы, включающей азот, который, в свою очередь, может быть замещен С1-С6-алкилом или незамещенным или замещенным галогеном (СН2)пфенилом, где η означает 1, 2 или 3, кислород и серу; и причем указанные циклоалкильные группы могут быть замещены гидроксигруппой или кетогруппой, а указанные арильные, фенильные и бензильные группы могут быть замещены 1, 2 или 3 группами, выбранными из перечня, включающего С1-С10-алкил, возможно замещенный как указано выше, С1-С10-алкоксил, возможно замещенный как указано выше, тиогруппу, тио-С1С10-алкил, гидрокси, карбонил, группу формулы -КК4К5, Т(СН2)ШОК'1 или Т(СН2)тСО2К4, где т означает от 1 до 6, Т означает О, 8, ΝΚ4, Ν(Ο)Κ4, ΝΚ4Κ6 или СК4К5, С) означает О, 8, ΝΚ5, Ν(Ο)Κ5 или ΝΚ5Κ6, где К4 и К5 определены как выше, а К6 означает незамещенный или замещенный как указано выше С1-С10 алкил;
т и η означают независимо целое число от 1 до 3;
-6006597
Я1-К8 и К10-К.14 означают независимо Н, незамещенный или замещенный как выше указано С1-Сюалкил; и Х=ИК14, причем где существует более, чем 1 стереоизомер, каждый хиральный центр может независимо быть К или 8; или их фармацевтически приемлемую соль, сложный эфир или амид.
Предпочтительно используют соединения формул I, II или III, где т и η означают 1; Х означает ΝΚ.|4; К9 означает Н; К4 означает метил; К4 и К5 означают метил; К8 означает метил; К10 означает метил; К7 и К8 означают метил; К4 и К8 означают метил; К1-К8 и К10-К13 означают Н; К9 означает Ц-Сю-алкил; К9 означает бензил; К14 означает С^С10-алкил; К9 означает С4-С9-арил-С1-С10-алкил; К9 означает С3-С10циклоалкил; К1-К8 означают Н; К1-К8 и К10-К11 означают Н; К1-К2 и К7-К8 означают Н или К2 означает метил, причем указанные группы могут быть замещены как указано выше.
Более предпочтительно используют соединения формул I, II или III, где К3 означает С1-С10-алкил, К1-К2 и К4-К11 и К14 означают водород, т и η означают 1, а Х означает ΝΚ14; К3 и К11 означают С1-С10алкил, К1-К2 и К4-К10 и К14 означают водород, т и η означают 1, а Х означает ΝΚ14; К3 и К11 означают С1С10-алкил, К1-К2 и К4-К10 и К14 означают водород, т и η означают 1, К9 означает С1-С10-алкил, а Х означает ΝΚ14; и К1-К11 и К14 означают водород, т и η означают 1, а Х означает О, причем указанные группы могут быть замещены как указано выше.
Особенно предпочтительно используют соединения из транс-(1К,3К)(1-аминометил-3-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-аминометил-2-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-аминометил-3,3-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
(+/-)(транс)-(1-аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид;
(цис/транс)-(3К)-( 1 -аминометил-3-метилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид;
(+)(транс)-(1 -аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид;
α,3 в,5в-(1-аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-(3,5-диметил-1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
α,3 в,5в-(1-этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1α,3β,5β-[(1 -бензиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
α,3 р,5р-(1-диметиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
α,3 в,5в-(1-бутиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-{1-[(бензилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-(3,5-диметил-1-метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[1-(изобутиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(циклобутилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[1-(изопропиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; 1-аминометил-1 -циклогексануксусная кислота;
1-аминометил-1 -циклопентануксусная кислота;
1-аминометил-1-циклопентануксусной кислоты натриевая соль; {1-[(2-метилбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(4,4,4-трифторбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; (1-этиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
{1-[(циклопропилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(2-гидрокси-1-метилэтиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(изобутиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
(1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(изопропиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
(1-циклогексиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(бензиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
((1К,3К)-3 -метил-1 -пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
{1-[(циклопентилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(циклогексилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
[1 -(трет-бутоксикарбониламинометил)циклогексил]уксусная кислота;
((3К,58)-1-циклобутиламинометил)-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; {(3К,58)-3,5-диметил-1-[(2-метилбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
{(3К,58)-1-[(2-гидрокси-1 -метилэтиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
{(3К,58)-1-[(2,2-диметоксиэтиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
{(3К,58)-1-[(циклопентилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
{(3К,58)-1-[(циклогексилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил }уксусной кислоты гидрохлорид;
((3К,58)-1-циклогексиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
-7006597 (1-диметиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-бутиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(2,2-диметоксиэтиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
(1-метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(бензилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
((3К,58)-1-этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-аминометил-4-этилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
(1-аминометил-4-пропилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид или ((3К,58)-3,5-диметил-1пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
Дальнейшим объектом данного изобретения является способ лечения нейрологических расстройств, депрессии, тревожного состояния, панического состояния, мании, биполярных расстройств, антивоспалительных заболеваний, глаукомы, боли или желудочно-кишечных нарушений, включающий стадию назначения терапевтически эффективного количества соединения формулы IV нуждающемуся в этом пациенту
где К1-К4 означают водород или С1-С10-алкил;
Х означает ΝΒ5;
К5 означает водород или С1-С10-алкил;
К6 означает С1-С10-алкил; бензил; С4-С9-арил-С1-С10-алкил, в котором от 1 до 4 кольцевых атомов арила могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или Ν; С1-С10-алкокси; С3-С10-циклоалкил, в котором от 1 до 3 атомов углерода могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или ΝΚ2, где К2 означает водород или С1-С10-алкил; аллил; С1-С10-алкил-С3-С10-циклоалкил, в котором от 1 до 3 кольцевых атомов циклоалкила могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или ΝΚ2, где К2 имеет вышеуказанное значение; тризамещенный галоген-С1-С10-алкил; причем указанные алкильные, алкоксильные аллильные группы могут быть замещены предпочтительно 1-3 группами, выбранными из группы, включающей ΝΚ4Κ5, где К4 и К5 означают водород или С1-С10-алкил, незамещенный или замещенный фенил, тио-С1-С6-алкил, С1-С6-алкокси, гидрокси, карбокси, С1-С6-алкоксикарбонил, галоген, нитрил, С3-С10-циклоалкил, и 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, выбранного из группы, включающей азот, который в свою очередь может быть замещен С1-С6-алкилом или незамещенным или замещенным галогеном (СН2)пфенилом, где η означает 1, 2 или 3, кислород и серу; и причем указанные циклоалкильные группы могут быть замещены гидроксигруппой или кетогруппой, а указанные арильные и бензильные группы могут быть замещены 1, 2 или 3 группами, выбранными из перечня, включающего С1-С10-алкил, возможно замещенный как указано выше, С1-С10-алкоксил, возможно замещенный как указано выше, тиогруппу, тио-С1-С10-алкил, гидрокси, карбонил, группу формулы -ΝΚ4Κ5, Т(СН2)тОК'1 или Т(СН2)тСО2К4, где т означает от 1 до 6, Т означает О, 8, ΝΚ4, Ν(Ο)Κ4, ΝΚ4Κ6 или СК4К5, р означает О, 8, ΝΚ5, Ν(Ο)Κ5 или ΝΚ5Κ6, где К4 и К5 определены как выше, а К6 означает незамещенный или замещенный как указано выше С1-С10-алкил;
и если К1-К4 каждый означают водород, то Кб не означает метил; или его фармацевтически приемлемая соль, сложный эфир или амид.
Соединения формулы II, такие как габапентин, применимы для лечения различных состояний, таких как нейродегенеративные расстройства (И8 5084479), депрессия (И8 5025035), тревожное/паническое состояние (И8 5792796), мании/биполярные расстройства (И8 5510381), антивоспалительные заболевания (АО 98 158641), желудочно-кишечные нарушения (АО 99 108670), глаукома и боль. Поскольку соединения формулы II и формулы IV действуют через влияние на метаболические пути ВСАТ и синтез глутамата, которые вовлечены во все упомянутые выше состояния, соединения формулы IV также применимы для лечения этих состояний. Таким образом, настоящее соединение также относится к применению соединений формулы IV для лечения каждого или более чем одного нейродегенеративных расстройств (включая, но не ограничиваясь этим, боковой амиотрофический склероз, болезнь Паркинсона и болезнь Альцгеймера), депрессии, тревожного/панического состояния, маний/биполярных расстройств, антивоспалительных заболеваний, глаукомы, боли или желудочно-кишечных нарушений.
Изобретение иллюстрируется с помощью приложенного чертежа, где на фиг. 1 показана схема, демонстрирующая циркуляцию ВСАТ в сетчатке. Выделены нормальные пути, показывающие как аминокислоты с разветвленной цепью в глие могут трансаминировать α-кетоглутарат с образованием глутамата. Продукт ВСКА диффундирует через интерстициум (показан серым) к нейронам, где он снова превращается в аминокислоту с разветвленной цепью путем трансаминирования глутаматом с помощью ВСАТс. Аббревиатуры означают следующее: ВСАА - аминокислота с разветвленной цепью; 01.0 - глу тамат, СЬЫ - глутамин; СЬЫ'аке - глутаминаза; руг - пируват; РС - пируваткарбоксилаза; аКС - акетоглутарат; ВСАТт - митохондриальная ВСАТ; ВСАТс - цитозольная ВСАТ; ВСКА - кетокислота с разветвленной цепью; СОН - глутаматдегидрогеназа;
фиг. 2 - действие концентрации пирувата на включение Н14СО3 в суммарный глутамат/глутамин (А) и суммарный пируват/лактат (В) в сетчатке еx νΐνο. Препарат геми-ретины инкубировали при 37°С в стандартных условиях с 25 мМ Н14СО3 в течение 20 мин. Пирувата в среде было либо 0,2, либо 5 мМ. Указаны средние величины с учетом (+/-) стандартной погрешности среднего (СПС, п=4, *р<0,5). Сокращения: д1и+д1и означает суммарный меченый глутамин/глутамат; руг+1ас( означает суммарный меченый пируват/лактат;
фиг. 3 - экспрессия изоферментов ВСАТ в сетчатке крысы. Экстракция из ткани, электрофорез в δΌδ-полиакриламидном геле (δΌδ-ПААГ) и иммуноблоттинг проводили как описано, используя набор для детектирования ЕСЬ. Использовали иммуноаффинные очищенные анти-ВСАТс-пептидные антитела крысы (1:1000) и анти-ВСАТт антитела человека (1:1000);
фиг. 4 - влияние габапентина (ГБП) и аминокислот с разветвленной цепью на включение Н14СО3 в глутамат/глутамин в сетчатке ех νΐνο. Половину сетчатки инкубировали при 37°С в стандартных условиях с 25 мМ Н14СО3 и 0,2 мМ пирувата в течение 20 мин. В некоторых случаях в инкубационную среду включали габапентин (1 мМ), в других - ГБП (1 мМ) и все три разветвленные аминокислоты по 0,2 мМ каждой. Указаны средние величины +/-СПС НСО3, включенного в глутамат/глутамин за 20 мин (и=4, *р<0,001, **р<0,01). Сокращения: д1и+д1и означает суммарный меченый глутамин/глутамат;
фиг. 5 - влияние концентрации габапентина (ГБП) на включение Н14СО3 в глутамат и глутамин в сетчатке ех νΐνο. Условия сходные с описанными к фиг. 4, за исключением концентрации ГБП. Указаны средние величины +/-СПС (и=6-7, *р<0,05). Сокращения: СБ-ЖСБи означает суммарный глутамин/глутамат; ЬАСТ+ТСА означает суммарную величину лактата и интермедиатов цикла ТСА.
Настоящее изобретение основано на наблюдении, что внутриглазная инъекция глутамата вызывает потерю клеток ганглия, что обычно происходит на ранних стадиях диабетической ретинопатии (Уогтегк е1 а1. 1ОУ8 37:1618-1624 (1996)), и что ингибитор метаболического пути аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью, такой как габапентин, эффективно ингибирует синтез глутамата, предотвращая, таким образом, диабетическую ретинопатию. В соответствии с этим, настоящее изобретение относится к способу профилактического и терапевтического лечения диабетической ретинопатии, включая лечение предварительной стадии диабетической ретинопатии, непролиферативную стадию диабетической ретинопатии и пролиферативную стадию диабетической ретинопатии. Под профилактическим лечением подразумевается защита полностью или частично от диабетической ретинопатии, в особенности от макулярного диабетического отека. Под терапевтическим лечением подразумевается преодоление последствий диабетической ретинопатии самой по себе и защита полностью или частично от дальнейшего развития диабетической ретинопатии, в частности, от макулярного диабетического отека.
Способ включает назначение ингибитора метаболических путей аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью, в количестве, достаточном для лечения сетчатки от ретинопатии профилактически или терапевтически. В принципе любой ингибитор метаболических путей аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью, может быть использован в способе настоящего изобретения, если он безопасен и эффективен. Здесь термин ингибитор аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью (ВСАТ) используется в отношении таких соединений и охватывает все соединения, которые действуют на метаболические пути аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью на любых и на всех точках метаболического пути.
Предпочтительно, ингибитор ВСАТ представляет собой соединение формул I, II и/или III, как описано выше, или фармацевтически приемлемые аналоги, ингибирующие метаболические пути ВСАТ, или их пролекарства, или их фармацевтически приемлемые соли, эфиры или амиды любого из них.
Если не оговорено особо, следующие определения справедливы для всего текста описания.
Алкил означает линейный или разветвленный углеводородный радикал, содержащий от 1 до 10 углеродных атомов (если не оговорено особо) и включает, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, н-гексил, и им подобные.
Галоген означает фтор, хлор, бром и иод.
Алкенил означает линейный или разветвленный углеводородный радикал, содержащий от 2 до 6 углеродных атомов и одну двойную связь, и включает этенил, 3-бутен-1-ил, 2-этенилбутил, 3-гексен-1-ил и им подобные.
Алкинил означает линейный или разветвленный углеводородный радикал, содержащий от 2 до 6 углеродных атомов и одну тройную связь, и включает этинил, 3-бутин-1-ил, пропинил, 2-бутин-1-ил, 3пентин-1-ил и им подобные.
Циклоалкил означает моноциклическую или полициклическую углеводородную группу, такую как циклопропил, циклогептил, циклооктил, циклодецил, циклобутил, адамантил, норпинанил, декалинил, норборнил, циклогексил и циклопентил. Такие группы могут быть замещены гидроксилом, кетогруппой и им подобными. Термин также включает кольца, в которых от 1 до 3 гетероатомов замещают атомы углерода. Такие группы называют гетероциклилами, которые означают циклоалкильные груп-9006597 пы, несущие как минимум один гетероатом, выбранный из О, 8 или ΝΚ2, примерами которых являются замещенные или незамещенные оксиранил, пирролидинил, пиперидил, тетрагидрофуран, пиперазинил, ацилпиперазинил, пирролидинил и морфолин.
Алкоксигруппа относится к алкильным группам, упомянутым выше, связанным через кислород, примеры которых включают метокси-, этокси-, изопропокси-, трет-бутоксигруппы и им подобные. Кроме того, термин алкокси-группа относится к полиэфирам, таким как -О-(СН2)2-О-СН3, и им подобным.
Алканоил означает алкил, связываемый через карбонил, то есть С1-С5-С(О)-. Такие группы включают формил, ацетил, пропионил, бутирил и изобутирил.
Ацил означает алкильную или арильную (Аг) группу, связываемую через карбонил, то есть, КС(О)-. Например, ацил включает алканоил с числом углеродных атомов от 1 до 6, включая замещенный алканоил, где алкильная часть может быть замещена ΝΚ4Κ5 или карбоксильной или гетероциклической группой. Типичные ацильные группы включают ацетил, бензоил и им подобные.
Алкильные, алкенильные, алкокси- и алкинильные группы, описанные выше, могут быть необязательно замещены предпочтительно 1-3 группами, выбранными из группы, включающей ΝΚ4Κ5, фенил, замещенный фенил, тиоалкил с числом углеродных атомов от 1 до 6, алкоксигруппу с числом углеродных атомов от 1 до 6, гидроксил, карбоксил, алкоксикарбонил с числом углеродных атомов от 1 до 6, галогруппу, нитрил, циклоалкил, и 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, выбранного из группы, включающей азот, замещенный азот, кислород и серу.
Замещенный азот означает азот, несущий алкил с числом углеродных атомов от 1 до 6 или (СН2)пРй, где η означает 1, 2 или 3. Пергалоген- или полигалоген-замены также включены.
Примеры замещенных алкильных групп включают 2-аминоэтил, пентахлорэтил, трифторметил, 2диэтиламиноэтил, 2-диметиламинопропил, этоксикарбонилметил, 3-фенилбутил, метанилсульфанилметил, метоксиметил, 3-гидроксипентил, 2-карбоксибутил, 4-хлорбутил, 3-циклопропилпропил, пентафторэтил, 3-морфолинпропил, пиперазинилметил и 2-(4-метилпиперазинил)этил.
Примеры замещенных алкинильных групп включают 2-метоксиэтинил, 2-этилсульфанилэтинил, 4(1-пиперазинил)-3-(бутинил), 3-фенил-5-гексинил, 3-диэтиламино-3-бутинил, 4-хлор-3-бутинил, 4циклобутил-4-гексенил и им подобные.
Типичные замещенные алкоксигруппы включают аминометоксигруппу, трифторметоксигруппу, 2диэтиламиноэтоксигруппу, 2-этоксикарбонилэтоксигруппу, 3-гидроксипропоксигруппу, 6карбоксгексилоксигруппу и им подобные.
Кроме того, примеры замещенных алкильных, алкенильных и алкинильных групп включают диметиламинометил, карбоксиметил, 4-диметиламино-3-бутен-1-ил, 5-этилметиламино-3-пентин-1-ил, 4морфолинбутил, 4-тетрагидропиридинилбутил, 3-имидазолидин-1-илпропил, 4-тетрагидротиазол-3-илбутил, фенилметил, 3-хлорфенилметил и им подобные.
Термины арил и Аг относятся к незамещенным и замещенным ароматическим группам. Гетероарильные группы содержат от 4 до 9 кольцевых атомов, от 1 до 4 из которых независимо выбраны из перечня, включающего О, 8 и Ν. Предпочтительные гетероарильные группы содержат 1 или 2 гетероатома в 5- или 6-членном ароматическом кольце. Моно- и бициклические ароматические кольцевые системы включены в определение арила и гетероарила. Типичные арильные и гетероарильные группы включают фенил, 3-хлорфенил, 2,6-дибромфенил, пиридил, 3-метилпиридил, бензотиенил, 2,4,6трибромфенил, 4-этилбензотиенил, фуранил, 3,4-диэтилфуранил, нафтил, 4,7-дихлорнафтил, пиррол, пиразол, имидазол, тиазол и им подобные.
Предпочтительными Аг-группами являются фенил и фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из перечня, включающего алкил, алкоксигруппу, тиогруппу, тиоалкил, гидроксил, карбонил, аминогруппу формулы -ΝΚ4Κ5 и Т(СН2)тОк' или Т(СН2)тСО2К4, где т означает от 1 до 6, Т означает О, 8, ΝΚ4, МО)К4. ΝΚ4Κ6Υ или СК4К5, О означает О, 8, ΝΚ5, МО)К5 или ΝΚ5Κ6Υ, где К4 и К5 определены как выше, а К7 означает алкил или замещенный алкил, например метил, трихлорэтил, дифенилметил и им подобные. Алкильные и алкоксигруппы могут быть замещены как определено выше. Например, типичными группами являются карбоксиалкил, алкоксикарбонилалкил, гидроксиалкил, гидроксиалкоксигруппа и алкоксиалкил.
Символ - означает связь.
Термин пациент означает всех животных, включая людей. Примеры пациентов включают людей, коров, собак, кошек, коз, овец и свиней.
Соединения настоящего изобретения могут существовать в несольватированных формах, а также в сольватированных формах, включая гидратированную форму. В общем случае сольватированные формы, включая гидратированную форму, эквивалентны несольватированным формам и охватываются пределами настоящего изобретения.
Некоторые соединения настоящего изобретения содержат один или несколько хиральных центров, и каждый центр может существовать в конфигурации К (Ό) или 8 (Ь). Настоящее изобретение включает все энантиомерные и эпимерные формы, а также их смеси.
-10006597
Соединения формул I, II и III способны к дальнейшему образованию как фармацевтически приемлемых аналогов, включающих соли, эфиры, амиды, так и пролекарств. В настоящем описании термин фармацевтически приемлемые соли, эфиры, амиды и пролекарства относится к тем карбоксилатным солям, солям присоединения аминокислот, эфирам, амидам и пролекарствам соединений настоящего изобретения, которые, в пределах известных медицине данных, являются применимыми для использования в контакте с тканями пациентов, не обладая нежелательным токсичным, раздражающим или аллергическим действием и подобными эффектами, соответствуют необходимому соотношению преимуществ и риска и эффективны в их использовании, а также, когда это возможно, цвиттерионные формы соединений настоящего изобретения. Термин соли относится к относительно нетоксичным неорганическим и органическим солям кислот присоединения соединений настоящего изобретения. Эти соли могут быть получены ίη δίΐιι в ходе окончательного выделения и очистки соединений или в ходе отдельных реакций очищенных соединений в их свободноосновной форме с соответствующими органическими или неорганическими кислотами с последующей очисткой, и включают, но не ограничиваются этим, соли присоединения кислот и/или основний, растворители и М-окислы соединений формул I, II и III. Это изобретение также включает фармацевтические рецептуры, включающие соединения формул I, II или III вместе с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или наполнителем. Все эти формы охватываются пределами настоящего изобретения.
Фармацевтически приемлемые соли соединения кислот соединений формул I, II и III включают соли неорганических солей, таких как соляная, азотная, фосфорная, серная, бромисто-водородная, иодистоводородная, фосфористая и им подобных, а также соли органических кислот, таких как алифатических моно- и дикарбоновых кислот, фенилзамещенных алкановых кислот, гидроксиалкановых кислот, алкандиоевых кислот, ароматических кислот, алифатических и ароматических сульфоновых кислот и т. д. Такие соли, соответственно, включают сульфаты, пиросульфаты, бисульфаты, сульфиты, бисульфиты, нитраты, фосфаты, моногидрофосфаты, дигидрофосфаты, метафосфаты, пирофосфаты, хлориды, бромиды, иодиды. ацетаты, пропионаты, каприлаты, изобутираты, оксалаты, малонаты, сукцинаты, субераты, себацинаты, фумараты, малеаты, манделаты, бензоаты, хлорбензоаты, метилбензоаты, динитробензоаты, фталаты, бензолсульфонаты, толуолсульфонаты, фенилацетаты, цитраты, лактаты, тартраты, метансульфонаты и им подобные. Рассматриваются также соли аминокислот, такие как аргинаты, глюконаты, галактуронаты и им подобные, см., например, Веще, е! а1., Рйагтасеийса1 8а11з, I. οί Рйагтасеийса1 8οΐепсе, 1977; 66: 1-19.
Соли присоединения кислот основных соединений получают путем проведения реакции свободноосновной формы с достаточным количеством желаемой кислоты с получением соли известным способом. Свободноосновную форму можно регенерировать путем проведения реакции солевой формы с основанием и выделением свободного основания известным способом. Свободноосновные формы иногда отличаются от соответствующих солевых форм по некоторым физическим свойствам, таким как растворимость в полярных растворителях, но если нет, то такие соли являются эквивалентными их соответствующим свободноосновным формам в отношении целей настоящего изобретения.
Фармацевтически приемлемые соли присоединения оснований образуются с металлами или аминами, такими как гидроксиды щелочных или щелочно-земельных металлов или органическими аминами. Примерами металлов, используемых в качестве катионов, являются натрий, калий, магний, кальций и им подобные. Примерами применимых аминов являются Ν,Ν'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, этилендиамин, Ν-метилглюкамин и прокаин, см., например, Вегде е! а1. выше.
Соли присоединения оснований кислых соединений получают путем реакции свободнокислотной формы с достаточным количеством желаемого основания с получением соли известным способом. Свободнокислотную форму можно регенерировать путем реакции солевой формы с кислотой и выделением свободной кислоты известным способом. Свободнокислотные формы иногда отличается от соответствующих солевых форм по некоторым физическим свойствам, таким как растворимость в полярных растворителях, но если нет, то такие соли являются эквивалентными их соответствующим свободнокислотным формам в отношении целей настоящего изобретения.
Примеры фармацевтически приемлемых нетоксичных эфиров соединений настоящего изобретения включают алкильные эфиры с числом углеродных атомов от 1 до 6, где алкильная группа является линейной или разветвленной цепью. Приемлемые эфиры также включают циклоалкильные эфиры с числом углеродных атомов от 5 до 7, а также арилалкильные эфиры, такие как, но не ограничиваясь этим, бензил. Предпочтительны алкильные эфиры с числом углеродных атомов от 1 до 4. Эфиры соединений настоящего изобретения могут быть получены в соответствии с известными способами.
Примеры фармацевтически приемлемых нетоксичных амидов соединений настоящего изобретения включают амиды, полученные из аммиака, первичные алкильные амины с числом углеродных атомов от 1 до 6 и вторичные диалкильные амины с числом углеродных атомов от 1 до 6, где алкильные группы представляют собой линейные или разветвленные цепи. В случае вторичных аминов, амины также могут быть в форме 5- или 6-членного гетероцикла, содержащего 1 атом азота. Амиды, получаемые из аммиака, первичные алкильные амины с числом углеродных атомов от 1 до 3 и диалкильные вторичные амины с числом углеродных атомов от 1 до 2 являются предпочтительными. Амиды соединений настоящего изобретения могут быть получены известными способами.
Термин пролекарство относится к соединениям, которые быстро трансформируются ίη νίνο в продукт, соответствующий упомянутым выше формулам, например, путем гидролиза в крови. Подробное обсуждение проблемы можно найти в Т. НщисЫ апб V. 81е11а, Рго-бгидк а§ ηονе1 Ос1б'сгу Зу^спъ. Уо1 14 из А.С.8. 81шро5шш 8спс5, а также в Вюгс^'СгбЫс Сатега ίη Эгид Ωοδίβη, еб. Ьу Еб\гагб В. Косйе, Атепсап Р11агтасеиОса1 Аккошабоп апб Регдатоп Рге§8, 1987, оба источника включены в настоящее описание в виде ссылки. В общем случае пролекарство представляет собой лекарство, которое было химически модифицировано и может быть биологически неактивным на месте действия, но которое может быть деградировано или модифицировано в ходе одного или более ферментативных или других процессов ίη νί\Ό в родительскую биоактивную форму.
Терапевтически эффективным количеством является количество соединения формул I, II или III, которое, при назначении его пациенту, позитивно влияет на симптомы заболевания.
Ингибитор ВСАТ, который предпочтительно представляет собой соединение формул I, II и/или III, ингибирующие метаболические пути ВСАТ аналоги соединений формул I, II и/или III, ингибирующие метаболические пути ВСАТ пролекарства соединений формул I, II и/или III, или фармацевтически приемлемые соли любого из вышеупомянутых вариантов могут быть назначены в соответствии со способом настоящего изобретения любым применимым путем. Применимые пути назначения включают системные, такие как пероральный или с помощью инъекции, местные, внутриглазной, окологлазной (например, субтенональный), субконъюктивный, субретинальный, надхороидальный и ретробульбарный. Выбор пути, которым назначается ингибитор ВСАТ, частично зависит от того, осуществляется ли профилактическое или терапевтическое лечение ретинопатии. Для терапевтического лечения выбор пути зависит от причины возникновения ретинопатии.
Например, поскольку известно, что основной причиной ретинопатии является диабет, ингибитор ВСАТ может быть назначен профилактически, как только будет установлена предварительная стадия диабетической ретинопатии. Для профилактического лечения ретинопатии, которая возникает в результате диабета, предпочтительно системное назначение ингибитора ВСАТ, например, перорально или с помощью инъекции. Для терапевтического лечения непролиферативной диабетической ретинопатии ингибитор ВСАТ может быть назначен системно, например, перорально или путем инъекции, или внутриглазным путем. Пролиферативная диабетическая ретинопатия может быть подвергнута терапевтическому лечению назначением ингибитора ВСАТ внутриглазным путем, местным назначением, субконьюктивно или окологлазным путем (например, субтенонально). Для профилактики или терапевтического лечения ретинопатии до, в ходе или после хирургического удаления с глаза рубцовой ткани, возникающей в результате неоваскуляризации на пролиферативной стадии диабетической ретинопатии, ингибитор ВСАТ предпочтительно назначается внутриглазным, местным, субконъюктивным или окологлазным (например, субтенональным) путями.
Ингибитор ВСАТ предпочтительно назначают как можно скорее после того, как было установлено, что животное, такое как млекопитающее, в частности человек, находится в группе риска по ретинопатии (профилактическое лечение), или когда ретинопатия уже начала свое развитие (терапевтическое лечение). Частично лечение будет зависеть от конкретного используемого ингибитора ВСАТ, количества назначаемого ингибитора ВСАТ, способа назначения, причины и пути развития ретинопатии.
Специалистам очевидно, что существуют подходящие пути назначения ингибитора ВСАТ, применимые для способа настоящего изобретения. Для назначения конкретного ингибитора ВСАТ могут быть использованы несколько путей назначения, но один из путей всегда обеспечивает более быструю и эффективную реакцию, чем другой. Поэтому описанные пути назначения являются чисто демонстрационными и не ограничивают собой все возможные пути.
Доза, назначаемая животному, в частности человеку, в соответствии с настоящим изобретением должна быть достаточной для достижения желаемого эффекта у животного в приемлемые сроки. Специалисту очевидно, что дозировка зависит от различных факторов, включая силу конкретного используемого ингибитора ВСАТ, возраст, вид, условия протекания или фаза болезни и вес тела животного, а также ожидаемая или фактическая площадь поражения сетчатки. Величина дозировки также будет определяться путем, частотой и длительностью назначения, а также наличием, природой и значимостью нежелательных побочных явлений, которые могут сопровождать назначение некоторых ингибиторов ВСАТ и желаемым физиологическим эффектом. Специалисту очевидно, что различные условия протекания или фаза болезни, в частности хронические условия или фаза, могут требовать длительного лечения, включающего множественные назначения.
Применимые дозы и режим дозировки могут быть установлены с помощью обычных методик, известных специалистам. В общем случае лечение начинают с небольших доз, меньших, чем оптимальные. Затем дозы понемногу увеличивают до тех пор, пока не будет достигнут оптимальный в данных обстоятельствах эффект. Способ настоящего изобретения в общем случае включает назначение от примерно 1 до примерно 100 мг/кг/день, предпочтительно от примерно 15 до примерно 50 мг/кг/день при системном назначении. Типичное внутриглазное назначение будет включать от примерно 0,1 до примерно 5 мг пол ной дозы, предпочтительно от примерно 0,5 до примерно 1 мг полной дозы. Предпочтительная концентрация для местного назначения составляет 100 мкМ.
Композиции для использования в способе настоящего изобретения предпочтительно включают фармацевтически приемлемый наполнитель и количество ингибитора ВСАТ, достаточное для лечения ретинопатии профилактически или терапевтически. Носитель может быть любым из обычно используемых, их применение ограничивается лишь физико-химическими соображениями, такими как растворимость, реакционная способность в отношении действующего компонента и путь назначения. Специалисту очевидно, что помимо описанных ниже фармацевтических композиций, ингибитор ВСАТ может быть использован в полимерных композициях, комплексах включения, таких как циклодекстриновые комплексы включения, липосомах, микросферах, микрокапсулах и им подобных (см., например, Патенты США NN 4997652, 5185152 и 5718922).
Ингибитор ВСАТ может быть использован в рецептурах как соль присоединения фармацевтически приемлемой кислоты. Примеры солей присоединения фармацевтически приемлемых кислот для использования в фармацевтических композициях включают соли, полученные из минеральных кислот, таких как соляная, бромисто-водородная, фосфорная, метафосфорная, азотная и серная кислоты, и органических кислот, таких как винная, уксусная, лимонная, яблочная, молочная, фумаровая, бензойная, гликолевая, глюконовая, янтарная и арилсульфоновая, например, п-толуолсульфоновая. Фармацевтически приемлемые наполнители, описываемые здесь, например, адъюванты, носители или разбавители, хорошо известны специалистам и широко используются в быту. Предпочтительно, чтобы носитель был химически инертен по отношению к ингибитору ВСАТ и не оказывал вредных побочных эффектов или токсического действия в условиях применения.
Выбор наполнителя частично определяется конкретным ингибитором ВСАТ, а также конкретным путем назначения композиции. Соответственно, существует широкое разнообразие применимых рецептур фармацевтических композиций настоящего изобретения. Следующие рецептуры являются чисто демонстрационными и не ограничивают собой возможные варианты.
Рецептуры для инъекций, в числе прочих, являются предпочтительными для способа настоящего изобретения. Требования к фармацевтически эффективным носителям для инъецируемых композиций хорошо известны специалистам (см. Рйагтасеибсх аиб Рйагтасу Ргасбсе, 1. В. ЫрршсоИ Со., РЫ1абе1рЫа, Ра., Вапкег апб Сйа1 тегх, ебх., радех 238-250 (1982), и А8НР НаибЬоок оп 1п)ес1аЬ1е Игидх, То1ххе1, 4‘ь еб., радех 622-630 (1986)). Предпочтительно, чтобы такие инъецируемые композиции назначались внутримышечно, внутривенно или внутрибрюшинно.
Рецептуры местного назначения хорошо известны специалистам. Такие рецептуры применимы в контексте настоящего изобретения для нанесения на кожу. Применение повязок, роговичных щитков (см., например, патент США № 5185152) и офтальмологических растворов (см., например, патент США № 5710182) и мазей, например, глазных капель, также хорошо известны.
Рецептуры, применимые для назначения перорально, могут включать (а) жидкие растворы, такие как эффективное количество соединения, растворенного в разбавителе, таком как вода, солевой раствор или апельсиновый сок; (б) капсулы, саше, таблетки, лепешки и леденцы, содержащие определенное количество активного компонента в твердом виде или в гранулах; (в) порошки; (г) суспензии в соответствующей жидкости и (е) эмульсии. Жидкие рецептуры могут включать разбавители, такие как вода и спирты, например, этанол, бензиловый спирт и полиэтиленовые спирты, с добавлением или без добавления фармацевтически приемлемого поверхностно-активного вещества, суспендирующего средства или эмульгирующего средства. Капсульные формы могут представлять собой обычные твердые или мягкие оболочки желатинового типа, заполненные, например, поверхностно-активными веществами, смазками и инертными наполнителями, такими как лактоза, сахароза, фосфат кальция и кукурузный крахмал. Таблеточные формы могут включать саму по себе или в комбинации лактозу, сахарозу, маннит, кукурузный крахмал, картофельный крахмал, альгиновую кислоту, микрокристаллическую целлюлозу, гуммиарабик, желатин, гуаровую смолу, коллоидную окись кремния, натриевую кроскармеллозу, тальк, стеарат магния, стеарат кальция, стеарат цинка, стеариновую кислоту и другие наполнители, красители, разбавители, буферные средства, разрыхлители, увлажнители, консерванты, вкусовые добавки и фармакологически совместимые наполнители. Лепешки могут состоять из активного компонента и вкусовой добавки, обычно сахарозы, и гуммиарабика или трагаканта; пастилки включают активный компонент в инертной основе, такой как желатин и глицерин, или сахароза и гуммиарабик; эмульсии, гели и им подобные формы содержат кроме активного компонента известные специалистам наполнители.
Эффективность орального назначения лекарства зависит от эффективности его переноса через слизистый эпителий и его стабильности во внутрипеченочной циркуляции. Лекарства, эффективные при парентеральном назначении, но менее эффективны при пероральном, или чье время полужизни в плазме очень невелико, могут быть химически модифицированы в форму пролекарства.
Рецептуры, пригодные для парентерального назначения включают водные и неводные изотонические стерильные растворы для инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатики и вещества, поддерживающие изотоническое состояние по отношению к крови реципиента, и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать суспендирующие средства, солюби лизаторы, сгустители, стабилизаторы и консерванты. Ингибитор может быть назначен вместе с физиологически приемлемым разбавителем в фармацевтическом наполнителе, таком как стерильная жидкость или смесь жидкостей, включая воду, солевой раствор, водную декстрозу и растворы родственных ей сахаров, спирт, такой как этанол, изопропанол или гексадециловый спирт, гликоли, такие как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль диметилсульфоксид, кетали глицерина, такие как 2,2-диметил-1,3диоксолан-4-метанол, эфиры, такие как поли(этиленгликоль) 400, масло, жирная кислота, эфир жирной кислоты или глицерид, или ацетилированный глицерид жирной кислоты с добавлением или без добавления фармацевтически приемлемого поверхностно-активного вещества, такого как мыло или детергент, суспендирующего средства, такого как пектин, карбомеры, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза или карбоксиметилцеллюлоза, или эмульгирующие средства и других фармацевтических адъювантов. Масла, которые могут быть использованы в парентеральных рецептурах включают нефтяные, животные, растительные и синтетические масла. Специфические примеры масел включают арахисовое, соевое, кунжутное, хлопковое, кукурузное, оливковое, вазелин и минеральное масло.
Пригодные жирные кислоты для применения в парентеральных рецептурах включают олеиновую кислоту, стеариновую кислоту и изостеариновую кислоту. Этилолеат и изопропилмиристат представляют собой примеры пригодных эфиров жирных кислот.
Пригодные мыла для использования в парентеральных рецептурах включают соли жирных кислот щелочных металлов, аммиака и триэтаноламиновые соли, а пригодные детергенты включают (а) катионовые детергенты, такие как, например, галогениды диметилдиалкиламмония и галогениды алкилпиридина, (б) анионовые детергенты, такие как, например, алкил-, арил- и олефинсульфонаты, сульфаты алкилов, олефинов, эфиров и моноглицеридов и сульфосукцинаты, (в) неионные детергенты, такие как, например, окислы жирных аминов, алканоламиды жирных кислот и сополимеры полиоксиэтиленполипропилена, (г) амфотерические детергенты, такие как, например, алкил-п-аминопропионаты и 2алкилимидазолиновые соли четвертичного аммония и (д) их смеси.
Парентеральные рецептуры обычно будут содержать от примерно 0,5 до примерно 25 вес.% активного компонента в растворе. Могут быть использованы консерванты и буферы. С целью уменьшения или предотвращения раздражения в месте инъекции, такие композиции могут содержать один или более неионных поверхностно-активных веществ с гидрофильно-липофильным балансом (ГЛБ) от примерно 12 до примерно 17.
Количество поверхностно-активного средства в таких рецептурах должно варьировать от примерно 5 до примерно 15 вес.%. Пригодные поверхностно-активные средства включают жирнокислотные эфиры полиэтиленсорбитана, такие как моноолеат сорбитана и высокомолекулярные аддукты оксида этилена с гидрофобной основой, образованные конденсацией пропиленоксида с пропиленгликолем. Парентеральные рецептуры могут быть представлены в однодозовых или многодозовых контейнерах, таких как ампулах и флаконах, и могут храниться в лиофилизированной форме, требуя только добавления стерильного жидкого наполнителя, например воды, для инъекций непосредственно перед использованием. Растворы и суспензии немедленного применения могут быть приготовлены из стерильных порошков, гранул и таблеток описанных ранее видов.
Такие композиции могут быть созданы как внутриглазные рецептуры, как рецептуры или устройства для продолжительного введения (см., например, патент США № 5378475). Например, желатин, хондроитинсульфат, полифосфоэфир, такой как бис-2-гидроксиэтилтерфталат (БГЭТ) или полимолочногликолевая кислота (в различных пропорциях) могут быть использованы для создания рецептур продолжительного действия. Могут быть использованы имплантаты (см., например, патенты США № 5443505, 4853224 и 4997652), устройства (см., например, патенты США № 5554187, 4863457, 5098443 и 5725493), такие как имплантируемые устройства, например механический резервуар, внутриглазные устройства или внеглазные устройства с внутриглазным каналом (например, от 100 мкм до 1 мм в диаметре), или устройства, включающие полимерные композиции, вроде тех, что описаны выше.
Способ настоящего изобретения может также включать сопутствующее назначение других фармацевтически активных компонентов. Сопутствующее назначение означает назначение до, одновременно, например, в комбинации с ингибитором ВСАТ, в той же рецептуре или в отдельной рецептуре, или после назначения ингибитора ВСАТ, как описано выше. Например, кортикостероиды, например, преднизон, метилпреднизолон, дексаметазон или триамсиналона ацетинид или некортикостероидные антивоспалительные соединения, такие как ибупрофен или флубипробен, могут быть назначены совместно. Подобным образом, могут быть совместно назначены витамины и минеральные вещества, например, цинк, антиоксиданты, например каротиноиды (такие как ксантофильные каротиноиды, наподобие зеаксантина или лютеина), и микроэлементы.
Общие схемы синтеза при получении соединений формул Ι-ΐν.
Пример 1. транс-(1К,3К.)(1-Аминометил-3-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
-14006597
(ΐ) ЕЮ2ССН2СЫ, ЫНдАс, АсОН, толуол, 120°С (й) а. №ΟΝ, ЕЮН (95%), Н2О, 115°С, б. НС1 (газ) (Ηϊ) ΕΐΟΗ, НС1 (газ), толуол (ίν) НС1, Н2О (ν) Н2, ΕΐΟΗ/ΝΗ3, Νϊ Реннея, 30-50°С (νΐ) НС1, Н2О, 140°С
Этап 1. 2-Циано-((К)-3-метилциклогексилиден)уксусной кислоты этиловый эфир.
Смесь 3-(К)-метилциклогексанона (125 мМоль), этилцианоацетата (124 мМоль), ацетата аммония (12,5 мМоль) и ледяной уксусной кислоты (24 мМоль) кипятили с обратным холодильником с ловушкой Дина Старка в течение 24 ч. Смесь охлаждали и промывали Н2О. Смыв Н2О экстрагировали толуолом. Толуольные экстракты объединяли с полученной органической фазой, сушили над М§8О4 и выпаривали растворитель. Грубый масляный препарат очищали дистилляцией Кугельрора с получением масла (температура кипения 150-160°С). Выход 86%.
1Н ЯМР (СЭС13) 400 МГц: δ 1,01-1,05 (3Н, т), 1,17-1,32 (1Н, т), 1,35 (3Н, ΐ, 1=7 Гц), 1,42-2,30 (6Н, т), 2,98 (1Н, б, Д=13 Гц), 3,74 (1Н, б, 6=13 Гц), 4,27 (2Н, ς, >7 Гц).
Масс-спектрометрия (С1) м/з: 208 (МН+).
Микроанализ: С12Н17ХО2.
Расчет: С 69,54; Н 8,27; N 6,76.
Результат анализа: С 69,44; Н 8,22; N 6,76.
Этап й. транс-(1К,3К)-1-Цианометил-3-метилциклогексанкарбонитрил.
К раствору NаСN (40 мМоль) в 6 мл Н2О и 160 мл этанола (95%) добавляли 2-циано((В)-3метилциклогексилиден)уксусной кислоты этилового эфира (40 мМоль). Через 22 ч кипения под обратным холодильником охлажденный раствор фильтровали, фильтрат подкисляли газообразным НС1 и снова фильтровали. Растворитель удаляли, а грубый масляный препарат очищали колоночной хроматографией с получением бледно-желтого кристаллического твердого вещества. Выход 88%.
1Н ЯМР (СЭС13) 400 МГц: δ 0,90 (1Н, т), 0,98 (3Н, б, 1=6 Гц), 1,11 (1Н, ΐ, >12 Гц), 1,38 (1Н, 6ΐ, >4,9 Гц), 1,60-1,90 (4Н, т), 2,07 (2Н, т), 2,68 (2Н, §).
Масс-спектрометрия (С1) м/з: 163 (МН+).
Микроанализ: С10Н14^.
Расчет: С 74,04; Н 8,70; N 17,27.
Результат анализа: С 74,05; Н 8,71; N 17,25.
Этап ш. транс-2-((1К,3К)-1-Циано-3-метилциклогексил)ацетимидовой кислоты этиловый эфир.
К раствору транс-(1В,3В)-1-цианометил-3-метилциклогексанкарбонитрила (6,2 мМоль) в 30 мл этанола (абсолютного) добавляли 30 мл сухого толуола. Раствор охлаждали во льду, насыщая при этом газообразным НС1. Закрытый раствор затем оставляли при комнатной температуре на 24 ч. Растворитель удаляли, а твердый остаток растирали с диэтиловым эфиром с получением осадка, который высушивали с получением белого кристаллического твердого вещества. Выход 50%.
Тпл. 118-120°С.
1Н ЯМР (ДМСО) 400 МГц: δ 0,8-0,89 (1Н, т), 0,91 (3Н, б, 1=6,3 Гц), 1,06-1,12 (1Н, т), 1,24-1,35 (1Н, т), 1,37 (3Н, ΐ, >7 Гц), 1,41-1,95 (6Н, т), 3,02 (2Н, §), 4,49 (2Н, ς, >7 Гц).
Масс-спектрометрия (С1) м/з: 195 (МН+).
Микроанализ: С12Н20^О-1,08М НС1.
Расчет: С 58,19; Н 8,58; N 11,31.
Результат анализа: С 58,25; Н 8,59; N 11,59.
Этап ΐν. транс-((1К,3К)-1-Циано-3-метилциклогексил)уксусной кислоты этиловый эфир. транс-2-((1К,3К)-1-Циано-3-метилциклогексил)ацетимидовой кислоты этиловый эфир (1,1 мМоль) растворяли в ледяной Н2О (40 мл) и доводили рН Ш НС1 до рН 1,5. Раствор перемешивали при комнат-15 ной температуре 20 ч. Добавляли этилацетат (30 мл) и промывали органический слой Н2О, сушили и удаляли растворитель с получением прозрачного масла. Выход 82%.
1Н ЯМР (СПС13) 400 МГц: δ 0,78-0,90 (1Н, ш), 0,93 (3Н, б, 1=6 Гц), 0,97-1,00 (1Н, ш), 1,23-1,25 (1Н, ш), 1,29 (3Н, 1, 1=7,2 Гц), 1,59-1,80 (4Н, ш), 2,05-2,08 (2Н, Вг 1), 2,54 (2Н, з), 4,20 (2Н, ц, 1=7,2 Гц).
Масс-спектрометрия (С1) м/з: 210 (МН+).
Микроанализ: С12Н19ЫО2.
Расчет: С 68,87; Н 9,15; N 6,69.
Результат анализа: С 68,87; Н 9,11; N 6,90.
Этап ν. транс-(5К,7К)-7-Метил-2-азаспиро[4,5]декан-3-он.
транс-((1К,3К)-1-Циано-3-метилциклогексил)уксусной кислоты этиловый эфир (8,9 мМоль) растворяли в ЫН3/Е1ОН (7%, 40 мл) вместе с предварительно промытым никелем Реннея (Н2О, затем Е1ОН) в 250 мл колбе Парра. Раствор гидрогенизировали при 30°С, 46 рз1, в течение 24 ч. Охлажденный раствор фильтровали через подушку целита, промытую этилацетатом. Растворитель из фильтрата удаляли с получением белого твердого вещества. Выход 30%.
Тпл. 92-98°С.
1Н ЯМР (ДМСО) 400 МГц: δ 0,75-0,82 (1Н, ш), 0,84 (3Н, б, 1=6,4 Гц), 0,88-0,94 (1Н, ш), 1,14-1,19 (1Н, ш), 1,20-1,50 (2Н, ш), 1,50-1,63 (4Н, ш), 1,91 (2Н, з), 3,03 (2Н, з), 7,42 (1Н, з).
Масс-спектрометрия (С1) м/з: 168 (МН+).
Микроанализ: С10Н17ЫО.
Расчет: С 71,81; Н 10,25; N 8,37.
Результат анализа: С 71,80; Н 10,29; N 8,31.
Этап νί. транс-((1К,3К)-1-Аминометил-3-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид. транс-(5К,7К)-7-Метил-2-азаспиро[4,5]декан-3-он (2,17 мМоль) растворяли в растворе 10М НС1 (5 мл) и Н2О (5 мл) и смесь кипятили под обратным холодильником при примерно 140°С 5 ч. Охлажденный раствор разбавляли 10 мл Н2О и 10 мл ЭСМ и водный слой далее промывали 2х15 мл ЭСМ. Водный слой концентрировали до сухости с получением белого твердого вещества. Выход 76%.
Тпл. 148-155°С.
[α]ο=-2,5 (Т=20°С, с=1, МеОН). Один изомер (КК).
1Н ЯМР (СПС13) 400 МГц: δ 0,69-0,79 (1Н, ш), 0,82 (3Н, б, 1=6 Гц), 0,87-0,90 (1Н, ш), 1,12-1,20 (1Н, б1, 1=4,5, 13,3 Гц), 1,34-1,50 (3Н, ш), 1,60-1,63 (3Н, ш), 2,30 (2Н, з), 3,01 (2Н, з), 7,93 (3Н, Вг з).
Масс-спектрометрия (С1) м/з: 186 (МН+).
Микроанализ: СщН^Ог-П НС1.
Расчет: С 53,29; Н 8,99; N 6,21.
Результат анализа: С 53,23; Н 8,99; N 6,45.
Пример 2. (1-Аминометил-2-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
I. ЕлОВСС! 12С\, \Н4Ас, АсОН, толуол, 120°С.
II. а. №СН ЕЮН (95%), Н2О, 115°С, б. НС1 (газ).
ίίί. ЕЮН, НС1 (газ), толуол.
ιν. НС1, Н2О.
ν. Н2, ЕЮН/ЫНз, N1 Реннея, 30-50°С.
νί. НС1, Н2О, 140°С.
Этап ί. 2-Циано-(2-метилциклогексилиден)уксусной кислоты этиловый эфир.
Реакцию (+/-)2-метилциклогексанона (80 мМоль), этилцианоацетата (80 мМоль), ацетата аммония (8 мМоль) и ледяной уксусной кислоты (16 мМоль) проводили как этап ί общего способа (пример 1) с получением прозрачного масла. Выход 76%.
1Н ЯМР (СПС13) 400 МГц: δ 1,23 (3Н, бб, 1=7, 10 Гц), 1,35 (3Н, 1, 1=7 Гц), 1,55-1,82 (5Н, ш), 1,93-2,05 (1Н, ш), 2,17 (1Н, б1, 1=5, 14 Гц), 2,47 (1Н, б1, 1=5, 9 Гц), 2,92-2,97 (1Н, Вг, б, 1=15 Гц), 3,30-3,35 (1Н, ш), 3,81-3,86 (1Н, Вг б, 1=15 Гц), 4,06-4,14 (1Н, ш), 4,23-4,30 (3Н, бц, 1=1, 6 Гц).
Масс-спектрометрия (С1) м/з: 208 (МН+).
-16006597
Микроанализ: С12Н17КО2.
Расчет: С 69,54; Н 8,27; N 6,76.
Результат анализа: С 69,26; Н 8,26; N 6,66.
Этап ίί. 1-Цианометил-2-метилциклогексанкарбонитрил.
Реакцию 2-циано-(2-метилциклогексилиден)уксусной кислоты этиловый эфира (37 мМоль) и ΝαΟΝ (37 мМоль) проводили как в этапе и общего способа (пример 1). Грубый препарат твердого вещества очищали колоночной хроматографией (3:1 гептан: этилацетат) с получением прозрачного масла. Выход 76%.
1Н ЯМР (СПС13) 400 МГц: δ 1,06 (3Н, б, 1=6,8 Гц), 1,11 (3Н, б, 1=6,8 Гц), 1,20-2,20 (18Н, т), 2,77 (2Н, бб, 1=16,8 Гц), 2,63 (2Н, бб, 1=16,8 Гц).
Масс-спектрометрия (О) м/з: 163 (МН+).
Микроанализ: С10Н14К2-0,1Н2О.
Расчет: С 73,49; Н 8,69; N 16,86.
Результат анализа: С 73,24; Н 8,73; N 17,08.
Этап ίίί. 2-(1-Циано-2-метилциклогексил)ацетимидовой кислоты этиловый эфир.
Реакцию 1-цианометил-2-метилциклогексанкарбонитрила (7,3 мМоль) проводили как в этапе ίίί общего способа (пример 1) с получением белого твердого вещества. Выход 70%.
Тпл. 107-114°С.
1Н ЯМР (ДМСО) 400 МГц: δ 1,00-1,06 (3Н, 2x1, 1=6,4 Гц), 1,10-1,38 (2Н, т), 1,38 (3Н, 1, 1=6,8 Гц), 1,40-2,10 (7Н, т), 2,86, 2,92, 3,10, 3,28 (2Н, 4хб, 1=14, 14,4, 14,8, 14 Гц соотв.), 4,48 (2Н, ф 1=6,8 Гц).
Масс-спектрометрия (О) м/з: 209 (МН+).
Микроанализ: С12Н20N2О.1,06Μ НС1.
Расчет: С 58,37; Н 8,60; N 11,34.
Результат анализа: С 58,15; Н 8,63; N 11,60.
Этап ίν. (1-Циано-2-метилциклогексил)уксусной кислоты этиловый эфир.
Реакцию 2-(1-циано-2-метилциклогексил)ацетимидовой кислоты этилового эфира (4,1 мМоль) проводили как в этапе (ίν) общего способа (пример 1) с получением прозрачного масла. Выход 82%.
1Н ЯМР (СОС13) 400 МГц: δ 1,03, 1,09 (3Н, 2хб, 1=7 Гц), 1,27-1,30 (3Н, т), 1,32-2,00 (8Н, т), 2,102,20 (1Н, т), 2,44, 2,82 (3Н, 2хб, 1=14,8 Гц), 2,54 (1Н, т), 4,16-4,22 (2Н, т).
Масс-спектрометрия (О) м/з: 210 (МН+).
Микроанализ: С^Н^О^
Расчет: С 68,87; Н 9,15; N 6,69.
Результат анализа: С 68,84; Н 9,13; N 6,75.
Этап ν. 6-Метил-2-азаспиро[4,5]декан-3-он.
Реакцию (1-циано-2-метилциклогексил)уксусной кислоты этилового эфира (8,4 мМоль) проводили как в этапе (ν) общего способа (пример 1) в течение 24 ч при 10°С 50 ρ8ΐ. Грубый масляный препарат очищали колоночной хроматографией (этилацетат) с получением белого твердого вещества. Выход 34%.
ТПл. 85-90°С.
Ή ЯМР (СПС13) 400 МГц: δ 0,88-0,91 (3Н, бб, 1=4, 6,8 Гц), 1,41-1,78 (9Н, т), 2,00-2,30 (2Н, т), 3,063,23 (2Н, т), 7,27 (1Н, Вг 8).
Масс-спектрометрия (О) м/з: 168 (МН+).
Микроанализ: СюН^О.
Расчет: С 71,81; Н 10,24; N 8,37.
Результат анализа: С 71,83; Н 10,19; N 8,27.
Этап νί. (1-Аминометил-2-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
Реакцию 6-метил-2-азаспиро[4,5]декан-3-она (2,5 мМоль) проводили как в этапе (νί) общего способа (пример 1) с получением белого твердого вещества. Выход 42%.
Тпл. 108-110°С.
|α|υ=0 (Т=20,5°С, С=1, МеОН). Два диастереомера 3:1.
Ή ЯМР (ДМСО + 1РО) 400 МГц: δ 0,79, 0,85 (3Н, 2хб, 1=6,8 Гц), 1,21-1,65 (9Н, т), 2,22, 2,43 (1Н, 2хб, 1=15 Гц), 2,46, 2,49 (1Н, 2хб, 1=15 Гц), 2,83-2,92 (1Н, 2хб, 1=13,6 Гц), 3,05, 3,15 (1Н, 2хб, 1=13,6 Гц).
Масс-спектрометрия (О) м/з: 186 (МН+).
Микроанализ: СюН^О^^ НС1.
Расчет: С 51,64; Н 8,79; N 6,02.
Результат анализа: С 51,66; Н 8,91; N 6,16.
Пример 3. (1-Аминометил-3,3-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
-17006597
ΐ. Си1, МеЬ1, ЫН4С1, ΝΗ3 (92%).
ΐΐ. ЖСН2СО2Б1, N ГОАс, АсОН, толуол (83%).
111. ИаСИ, Е1ОН, Н2О (57%).
ΐν. НС1, ЕЮН, толуол (93%).
ν. Н2, N Реннея, ЕЮН, ИН3 (84%).
νι. НС1, Н2О (64%).
Этап 1. 3,3-Диметилциклогексанон.
Синтезировали способом, описанным в РеПеПег, 8. ^., Мобу, N. V., I. Огд. СЕет., 1976, 41, 1069.
Раствор диметилкупрата лития готовили добавлением метиллития (1,4 М в эфире 77,25 мл, 2,45 Моль) к иодиду меди (I) (8,8 г, 0,046 Моль) в атмосфере аргона. Раствор охлаждали до 0°С и добавляли по каплям 3-метилциклогексен-1-он (5 мл, 0,044 Моль) с перемешиванием, после чего образовывался осадок интенсивно-желтого цвета. Суспензию перемешивали при комнатной температуре 1 ч, затем вливали в раствор водного аммиака (100 мл) и ацетата аммония (около 5 г). Слои разделяли, и водный слой промывали диэтиловым эфиром (3х50 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (3х100 мл), сушили (Мд8О4) и удаляли растворитель под вакуумом с получением темно-желтой жидкости.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) 0,98 (6Н, 8), 1,59 (2Н, т), 1,88 (2Н, т), 2,14 (2Н, т), 2,26 (2Н, т).
ИК-спектроскопия (пленка) Утахсм-1 2956, 1711 (С=О), 1457, 1368, 1292, 1226, 1076.
Этап ΐΐ. 2-Циано-5,5-диметил-3-пропил-гекс-2-еноевой кислоты этиловый эфир.
К раствору 3,3-диметилциклогексанона (4 г, 0,032 Моль) в толуоле (25 мл) добавляли этилцианацетат (3,37 мл, 0,032 Мол, 0,1 экв.), ацетат аммония (0,24 г, 0,003 Моль, 0,1 экв.), и уксусную кислоту (0,36 мл, 0,006 Моль, 0,2 экв.). Желтый раствор нагревали до кипения под обратным холодильником с ловушкой Дина-Старка, и продолжали нагрев до тех пор, пока вода не перестала конденсироваться в ловушке. После охлаждения оранжевый теперь уже раствор промывали водой (3х25 мл) и органический слой сушили (Мд8О4). Фильтрация и удаление растворителя под вакуумом привели к получению грубого продукта в виде темно-оранжевой жидкости. После очистки дистилляцией Кугельрора получали смесь циси транс-продуктов в виде бледно-желтой жидкости, Ткип. 160-170°С, 4 мбар (5,83 г, 83%).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) 0,96 (6Н, 8, 2х Ме), 0,99 (6Н, 8, 2х Ме), 1,34 (6Н, т, 2хМе эфира), 1,49 (4Н, т), 1,75 (2Н, хин., 16,4), 1,82 (2Н, хин., 16,4), 2,46 (2Н, 8), 2,60 (2Н, 1, 1=6,4 Гц) 2,80 (2Н, 8), 2,93 (2Н,
1, 1=6,4 Гц), 4,27 (4Н, т).
Масс-спектрометрия (О) з/е: 222 (М++1).
ИК-спектроскопия (пленка) утахсм-1 2958, 2870, 2224 (СЫ), 1731 (С=О), 1606 (С=С), 1277, 1223.
Микроанализ: С13Н19О2К
Расчет: С 70,56; Н 8,65; N 6,32.
Результат анализа: С 70,35; Н 8,79; N 6,25.
Этап Ш. 1-Цианометил-3,3-диметилциклогексанкарбонитрил.
К раствору 2-циано-5,5-диметил-3-пропил-гекс-2-еноевой кислоты этилового эфира (1,26 г, 0,006 Моль) в этаноле (100 мл) и воде (4 мл) добавляли цианистый натрий (0,28 г, 0,006 Моль, 1 экв.). Желтоватый раствор кипятили под обратным холодильником 8 ч, затем охлаждали, в ходе чего образовывался грязно-белый осадок.
Суспензию фильтровали под вакуумом и фильтрат подкисляли газообразным НС1 примерно до рН
2. Затем смесь фильтровали вторично и удаляли растворитель под вакуумом с получением грубого продукта в виде бледно-зеленого твердого вещества.
Колоночная флеш-хроматография грубого продукта на силикагеле с элюцией 0-50% ЕЮЛс в гептане дает бинитрил в виде бесцветного твердого вещества (0,57 г, 57%).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) 0,99 (3Н, 8, Ме), 1,13 (1Н, ίά, И3,2, 4,2), 1,21 (3Н, 8, Ме), 1,32 (2Н, т), 1,54 (1Н, т), 1,82 (3Н, т), 2,15 (1Н, т), 2,65 (2Н, 8, ОДСК).
13С ЯМР (400 МГц, СОС13) 19,61, 25,17, 30,79, 31,18, 33,77, 34,79, 35,37, 37,92, 46,26, 115,06, 122,19.
Масс-спектрометрия (О) з/е: 177 (М++1).
ИК-спектроскопия (пленка) Утахсм-1 2988, 2937, 2869, 2237 (2χΟΝ), 1749, 1456, 1423, 1369, 1202, 1180, 1031, 972.
-18006597
Микроанализ: СпН1&Ы2.
Расчет: С 74,96; Н 9,15; Ν 15,89.
Результат анализа: С 75,08; Н 9,32; Ν 15,80.
Этап ίν. (1-Циано-3,3-диметилциклогексил)уксусной кислоты этиловый эфир.
1-Цианометил-3,3-диметилциклогексанкарбонитрил (0,50 г, 2,84 мМоль) растворяли в абсолютном этаноле (20 мл) при комнатной температуре, затем охлаждали до 0°С. К раствору добавляли толуол (20 мл), после чего реакционную смесь подкисляли пропусканием через нее газообразного НС1 при небольшой скорости в течение приблизительно 45 мин. Затем колбу затыкали и оставляли при комнатной температуре на 24 ч.
Полученный желтый раствор распределялся между фазами этилацетата и воды, слои отделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (3х30 мл), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия (3х50 мл), солевым раствором (3х50 мл), сушили (Мд8О4) и удаляли растворитель под пониженным давлением с получением бледно-желтой жидкости (0,59 г, 93%).
1Н ЯМР (400 МГц, СЛС13) 0,94 (3Н, 8, Ме), 1,16 (3Н, т), 1,21 (3Н, 8, Ме), 1,29 (3Н, 1, 17,2, СН2СН3), 1,50 (1Н, т), 1,65 (1Н, 61, Л4,4, 7,6), 1,84 (1Н, ц1, Л3,3, 3,2), 1,96 (1Н, 61, Л3,7, 2,2), 2,16 (1Н, т), 2,48 (1Н, 6, Л5,6, С-2Н), 2,54 (1Н, 6, Л5,6, С-2Н), 4,20 (2Н, ц, 17,2, СН2СН3).
13С ЯМР (400 МГц, СЛС13) 14,21, 19,6, 25,42, 31,03, 34,04, 34,14, 36,08, 38,44, 46,14, 46,80, 61,02, 123,67, 169,00.
Масс-спектрометрия (СЦ з/е: 224 (М++1).
ИК-спектроскопия (пленка) утахсм-1 2998, 2937, 2868, 2234 (СМ), 1738 (С=О), 1457, 1372, 1217, 1181, 1154, 1026.
Микроанализ: С13Н2^О2.
Расчет: С 69,92; Н 9,48; Ν 6,27.
Результат анализа: С 69,63; Н 9,45; Ν 6,15.
Этап ν. 7,7-Диметил-2-азоспиро-[4,5]декан-3-он.
(1-Циано-3,3-диметилциклогексил)уксусной кислоты этиловый эфир (0,5 г, 2,23 мМоль) гидрогенизировали в этанольном аммиаке (60 мл) с никелем Реннея в качестве катализатора (около 0,25 г) при 50°С и 50 ρ8ΐ в течение 48 ч. Затем катализатор удаляли фильтрацией через целит, а растворитель удаляли под вакуумом с получением желтоватого кристаллического вещества.
Колоночная флэш-хроматография с элюцией 0-100% этилацетатом в гептане привела к получению чистого лактама в виде бесцветного твердого вещества (340 мг, 84%).
1Н ЯМР (400 МГц, СЛС13) 0,89 (3Н, 8, Ме), 0,92 (3Н, 8, Ме), 1,25 (2Н, т), 1,36 (2Н, т), 1,51 (3Н, т), 1,68 (1Н, 8), 2,18 (1Н, 6, Л6,4, СН^Н), 2,24 (1Н, 6, Л6,8, СН2ЛН), 3,15 (2Н, 8, СН2СО).
13С ЯМР (400 МГц, СЛС13) 19,16, 29,88, 30,36, 31,28, 36,57, 39,05, 39,61, 44,58, 49,54, 54,79, 177,72.
Масс-спектрометрия (СЦ з/е: 182 (М++1).
ИК-спектроскопия (пленка) утахсм-1 3203, 3100 (ΝΉ), 2914, 2860, 1698(С=О), 1486, 1374, 1317, 1289, 1257, 1076.
Микроанализ: С/Н^О.
Расчет: С 72,88; Н 10,56; Ν 7,73.
Результат анализа: С 72,38; Н 10,47; Ν 7,56.
Этап νί. (1-Аминометил-3,3-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
7,7-Диметил-2-азоспиро-[4,5]декан-3-он (0,3 г, 1,66 мМоль) растворяли в смеси НС1 (конц., 5 мл) и воды (5 мл) и полученный бесцветный раствор кипятили под обратным холодильником 20 ч. Раствор охлаждали и затем распределяли между водой и дихлорметаном, после чего отделяли слои. Водный слой промывали дихлорметаном (3х20 мл) и удаляли воду и НС1 в ротационном испарителе с получением грубого продукта в виде грязно-белого твердого вещества. Растирание его с этилацетатом и фильтрация продукта привело к получению (1-аминометил-3,3-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорида в виде бесцветного твердого вещества (140 мг, 42%, 64% в пересчете на использованное исходное вещество).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО) 0,90 (3Н, 8, Ме), 0,92 (3Н, 8, Ме), 1,15-1,49 (8Н, т), 2,45 (2Н, 8, СН2СО2Н), 2,90 (2Н, Ьт.ц, Л3,5, СН^НД 7,96 (3Н, Ьг.8, ΝΉ3), 12,36 (1Н, Ьг.8, ОН).
ИК-спектроскопия (пленка) утахсм-1 2930, 1728(С=О), 1272, 1123.
Микроанализ: СцН22ЛО2С1
Расчет: С 56,04; Н 9,41; Ν 5,94
Результат анализа: С 55,79; Н 9,61; Ν 6,23
Пример 4. (+/-)-(транс)-(1-Аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид.
-19006597
Реактивы:
(ΐ) триэтилфосфоноацетат, ΝαΗ;
(п) ΜβΝΟ2, Βπ4Ν+Ε-;
(111) Η2, Νΐ;
(ίν) НС1.
Этап ΐ. Синтез (+/-)(транс)-(3,4-диметилциклопентилиден)уксусной кислоты этилового эфира (4Ь).
ΝαΗ (60% дисперсия в масле, 737 мг, 18,42 мМоль) суспендировали в сухом тетрагидрофуране (50 мл) и охлаждали до 0°С. Затем добавляли триэтилфосфоноацетат (3,83 мл, 19,30 мМоль) и перемешивали смесь при 0°С 15 мин. Затем добавляли кетон (+/-)-(4а) (1,965 г, 17,54 мМоль) в ТГФ (10 мл) и оставляли смесь нагреться до комнатной температуры. Через 2 ч смесь распределяли между диэтиловым эфиром (200 мл) и водой (150 мл). Органическую фазу отделяли, промывали солевым раствором, сушили (М§804) и удаляли растворитель под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, этилацетат:гептан 1:9) с получением 3,01 г (94%) (4Ь) в виде бесцветного масла.
1Н ЯМР 400 МГц, (СОС13): δ 1,01 (3Н, б, 1=6 Гц), 1,03 (3Н, б, 1=6 Гц), 1,26 (3Н, ΐ, >7 Гц), 1,49 (2Н, т), 2,07 (1Н, т), 2,24 (1Н, т), 2,61 (1Н, т), 4,13 (2Н, ς, 1=7 Гц), 5,72 (1Н, §).
Масс-спектрометрия (С1+) м/е: 183 (М+1).
Этап ΐΐ. Синтез (+/-)(транс)-(3,4-диметил-1-нитрометилциклопентил)уксусной кислоты этилового эфира (4с).
(+/-)(транс)-(3,4-Диметилциклопентилиден)уксусной кислоты этиловый эфир (4Ь) (2,95 г, 16,2 мМоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) и перемешивали при 70°С с нитрометаном (1,9 мл, 35,2 мМоль) и фторидом тетрабутиламмония (1,0 М в тетрагидрофуране, 22 мл, 22,0 мМоль). Через 6 ч смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом (50 мл) и промывали 2Ν НС1 (30 мл) и затем солевым раствором (50 мл). Органическую фазу собирали, сушили (М§804) и удаляли под вакуумом растворитель. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, этилацетат: гептан 1:9) с получением 1,152 г (29%) прозрачного масла.
1Н ЯМР 400 МГц, (СОС13): δ 0,98 (6Н, б, 1=6 Гц), 1,10-1,39 (5Н, т), 1,47 (2Н, т), 1,87 (1Н, т), 2,03 (1Н, т), 2,57 (2Н, ЛВц, 6=16, 38 Гц), 4,14 (2Н, ς, 1=7 Гц), 4,61 (2Н, ЛВц, 1=12,60 Гц).
Масс-спектрометрия (Е8+) м/е: 244 (М+1).
ИК-спектроскопия (пленка) ν см-1: 1186, 1376, 1549, 1732, 2956.
Этап ϊϊί. Синтез (+/-)-(транс)-7,8-диметилспиро[4,4]нонан-2-она (4б).
(+/-)(транс)-(3,4-Диметил-1-нитрометилциклопентил)уксусной кислоты этиловый эфир (4с) (1,14 г,
4,7 мМоль) растворяли в метаноле (50 мл) и встряхивали над катализатором никелем Реннея в атмосфере водорода (40 ρ§ΐ) при 30°С. Через 5 ч катализатор удаляли фильтрацией через целит. Растворитель удаляли под вакуумом с получением 746 мг (95%) бледно-желтого масла, которое затвердевало со временем.
1Н ЯМР 400 МГц, (СОС13): δ 0,98 (6Н, б, 1=6 Гц), 1,32 (2Н, т), 1,46 (2Н, т), 1,97 (2Н, т), 2,27 (2Н, ЛВц, 1=16,27 Гц), 3,23 (2Н, §), 5,62 (1Н, Ьг§).
Масс-спектрометрия (Е8+) м/е: 168 (М+1).
ИК-спектроскопия (пленка) ν см-1: 1451, 1681, 1715, 2948, 3196.
Этап ΐν. Синтез (+/-)-(транс)-(1-аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорида (4).
(+/-)-(транс)-7,8-Диметилспиро[4,4]нонан-2-он (4б) (734 мг, 4,40 мМоль) кипятили под обратным холодильником в смеси 1,4-диоксана (5 мл) и 6Ν НС1 (15 мл). Через 4 ч смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (20 мл) и промывали дихлорметаном (3х30 мл). Водную фазу собирали и удаляли растворитель под вакуумом. Остаток растирали с этилацетатом и после сбора и высушивания получали 675 мг (69%) белого твердого вещества.
1Н ЯМР 400 МГц, (б6-ДМСО): δ 0,91 (6Н, б, 1=6 Гц), 1,18 (2Н, т), 1,42 (2Н, т), 1,72 (1Н, т), 1,87 (1Н, т), 2,42 (2Н, ЛВд, 1=16,24 Гц), 2,90 (2Н, ЛВд, 1=12,34 Гц), 8,00 (3Н, Ьг§), 12,34 (1Н, Ьг§).
-20006597
Масс-спектрометрия (Е8+) м/е: 186 (М+1 для свободноосновной формы).
Пример 5. (цис/транс)-(3К)-(1-Аминометил-3-метилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид (5).
Реактивы:
(ΐ) триэтилфосфоноацетат, ХаН;
(ίί) Ме\О;. ΒυΝΚ;
(111) Н2, Ν1;
(ΐν) НС1.
Этап ΐ. Синтез (К)-(3-метилциклопентилиден)уксусной кислоты этилового эфира (5Ь).
ХаН (60% дисперсия в масле, 1,87 г, 46,5 мМоль) суспендировали в сухом тетрагидрофуране (40 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли триэтилфосфоноацетат (9,69 мл, 48,8 мМоль) и перемешивали смесь при 0°С 15 мин. Затем добавляли (К)-3-метилциклопентанон (5а) (5 мл, 46,5 мМоль) в ТГФ (10 мл) и оставляли смесь нагреться до комнатной температуры. Через 2 ч смесь распределяли между диэтиловым эфиром (200 мл) и водой (150 мл). Органическую фазу отделяли, промывали солевым раствором, сушили (Мд8О4) и удаляли растворитель под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, этилацетат: гептан 1:9) с получением 5,45 г (70%) (2) в виде бесцветного масла.
Ίί ЯМР 400 МГц, (СЭС13): δ 1,04 (3Н, т), 1,27 (3Н, 1, 1=7 Гц), 1,80-2,74 (7Н, т), 2,90-3,15 (1Н, т), 4,13 (2Н, ς, 1=7 Гц), 5,76 (1Н, 8).
Масс-спектрометрия (СН) м/е: 169 (М+1).
ИК-спектроскопия (пленка) ν см-1: 1205,1371, 1653, 1716, 2955.
Этап ΐΐ. Синтез (цис/транс)-(3К)-(3-метил-1-нитрометилциклопентил)уксусной кислоты этиловый эфир (5с).
(К)-(3-Метилциклопентилиден)уксусной кислоты этиловый эфир (5Ь) (3,0 г, 17,8 мМоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) и перемешивали при 70°С с нитрометаном (1,92 мл, 35,6 мМоль) и фторидом тетрабутиламмония (1,0 М в тетрагидрофуране, 25 мл, 25,0 мМоль). Через 18 ч смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом (50 мл) и промывали 2Ν НС1 (30 мл) и затем солевым раствором (50 мл). Органическую фазу собирали, сушили (Мд8О4) и удаляли под вакуумом растворитель. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, этилацетат: гептан 1:9) с получением 2,00 г (49%) прозрачного масла.
Ίί ЯМР 400 МГц, (СЭС13): δ 1,02 (3Н, ά, 1=6 Гц), 1,08-1,37 (5Н, т), 1,59-2,17 (5Н, т), 2,64 (2Н, т), 4,15 (2Н, ς, 1=7 Гц), 4,64 (2Н, т).
Масс-спектрометрия (Е8+) м/е: 230 (М+1).
ИК-спектроскопия (пленка) ν см-1: 1183,1377, 1548, 1732, 2956.
Этап ш. Синтез (цис/транс)-(7К)-7-метилспиро[4,4]нонан-2-она (5ά).
(цис/транс)-(3К)-(3-Метил-1-нитрометилциклопентил)уксусной кислоты этиловый эфир (5с) (1,98 г, 8,66 мМоль) растворяли в метаноле (50 мл) и встряхивали над катализатором никелем Реннея в атмосфере водорода (40 р81) при 30°С. Через 18 ч катализатор удаляли фильтрацией через целит. Растворитель удаляли под вакуумом и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, этилацетаттептан 1:1) с получением 1,05 г (79%) белого твердого вещества.
'Н ЯМР 400 МГц, (СЭС13): δ 1,03 (3Н, т), 1,22 (2Н, т), 1,60-2,15 (5Н, т), 2,22 (2Н, т), 3,20 и 3,27 (2Н всего, 2 х 8, цис и транс), 6,18 (1Н, Ьг 8).
Масс-спектрометрия (Е8+) м/е: 154 (М+1).
ИК-спектроскопия (пленка) ν см-1: 1695, 2949, 3231.
Этап ΐν. Синтез (цис/транс)-(3К)-(1-аминометил-3-метилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорида (5).
-21006597 (цис/транс)-(7К)-7-Метилспиро[4,4]нонан-2-он (5б) (746 мг, 4,88 мМоль) кипятили под обратным холодильником в смеси 1,4-диоксана (5 мл) и 6Ν НС1 (15 мл).
Через 4 ч смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (20 мл) и промывали дихлорметаном (3х30 мл). Водную фазу собирали и удаляли растворитель под вакуумом. Остаток растирали с этилацетатом и после сбора и высушивания получали белое твердое вещество. Его перекристаллизовывали из смеси этилацетат/метанол и после сбора и высушивания получали 656 мг (65%) (5).
1Н ЯМР 400 МГц, (а6-ДМСО): δ 0,96 (3Н, т), 1,01-1,24 (2Н, т), 1,42-2,10 (5Н, т), 2,41 и 2,44 (2Н всего, 2 х 8, цис/транс), 2,94 (2Н, т), 7,96 (3Н, Ьг з), 12,35 (1Н, Ьг з).
Масс-спектрометрия (Е8+) м/е: 172 (М+1 для свободноосновной формы).
Пример 6. (+)-(транс)-(1-Аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид.
Реактивы:
(1) триэтилфосфоноацетат, \а11;
(и) МеХО2, ВщУЕ-;
(111) Н2, Νι;
(ίν) НС1.
Этап ι. Синтез (цис)-(3,4-диметилциклопентилиден)уксусной кислоты этилового эфира (6Ь).
\а!1 (60% дисперсия в масле, 519 мг, 12,96 мМоль) суспендировали в сухом тетрагидрофуране (30 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли триэтилфосфоноацетат (2,68 мл, 13,35 мМоль) и перемешивали смесь при 0°С 15 мин. Затем добавляли (38,4К)-3,4-диметил-циклопентанон (6а) (1,21 г, 10,80 мМоль) в ТГФ (10 мл) и оставляли смесь нагреться до комнатной температуры. Через 2 ч смесь распределяли между диэтиловым эфиром (200 мл) и водой (150 мл). Органическую фазу отделяли, промывали солевым раствором, сушили (Мд8О4) и удаляли растворитель под вакуумом. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, этилацетат:гептан 5:95) с получением 1,40 г (71%) (2) в виде бесцветного масла.
1Н ЯМР 400 МГц, (СВОД: δ 0,84 (3Н, б, 1=6 Гц), 0,91 (3Н, б, 1=6 Гц), 1,26 (3Н, 1, 1=7 Гц), 2,01-2,95 (6Н, т), 4,13 (2Н, ς, 1=7 Гц), 5,76 (1Н, з).
Масс-спектрометрия (С1+) м/е: 183 (М+1).
ИК-спектроскопия (пленка) ν см-1: 1043, 1125, 1200, 1658, 1715, 2959.
Этап б. Синтез (транс)-(3,4-диметил-1-нитрометилциклопентил)уксусной кислоты этилового эфира (6с).
(цис)-(3,4-Диметилциклопентилиден)уксусной кислоты этиловый эфир (6Ь) (1,384 г, 7,60 мМоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) и перемешивали при 70°С с нитрометаном (0,82 мл, 15,2 мМоль) и фторидом тетрабутиламмония (1,0 М в тетрагидрофуране, 11,4 мл, 11,4 мМоль). Через 6 ч смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом (50 мл) и промывали 2Ν НС1 (30 мл) и затем солевым раствором (50 мл). Органическую фазу собирали, сушили (Мд8О4) и удаляли под вакуумом растворитель. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, этилацетат: гептан 5:95) с получением 0,837 г (45%) прозрачного масла.
1Н ЯМР 400 МГц, (СВОД: δ 0,91 (6Н, б, 1=6 Гц), 1,21-1,39 (5Н, т), 1,98 (2Н, т), 2,18 (2Н, т), 2,64 (2Н, з), 4,15 (2Н, ς, 1=7 Гц), 4,61 (2Н, з).
Масс-спектрометрия (Е8+) м/е: 244 (М+1).
ИК-спектроскопия (пленка) ν см-1: 1184, 1377, 1548, 1732, 2961.
Этап ίίί. Синтез (транс)-7,8-диметилспиро[4,4]нонан-2-она (6б).
(транс)-(3,4-Диметил-1-нитрометилциклопентил)уксусной кислоты этиловый эфир (6с) (0,83 г, 3,4 мМоль) растворяли в метаноле (30 мл) и встряхивали над катализатором никелем Реннея в атмосфере водорода (40 рзД при 30°С. Через 4 ч катализатор удаляли фильтрацией через целит. Растворитель удаляли под вакуумом с получением 567 мг (99%) бледно-желтого масла, которое затвердевало со временем.
-22006597
Ή ЯМР 400 МГц, (СЭС13): δ 0,89 (6Н, ά, 1=6 Гц), 1,38 (2Н, т), 1,91 (2Н, т), 2,10 (2Н, т), 2,32 (2Н, 8), 3,18 (2Н, в), 5,61 (1Н, Ьг в).
Масс-спектрометрия (Е8+) м/е: 168 (М+1).
ИК-спектроскопия (пленка) V см-1: 1304, 1450, 1699, 2871, 3186.
Этап ίν. Синтез (транс)-(1-аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорида (6).
(транс)-7,8-Диметилспиро[4,4]нонан-2-он (6ά) (563 мг, 4,40 мМоль) кипятили под обратным холодильником в смеси 1,4-диоксана (5 мл) и 6Ν НС1 (15 мл). Через 4 ч смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (20 мл) и промывали дихлорметаном (3х30 мл). Водную фазу собирали и удаляли растворитель под вакуумом. Остаток растирали с этилацетатом и после сбора и высушивания получали белое твердое вещество. Его перекристаллизовывали из смеси этилацетат/метанол и после сбора и высушивания получали 440 мг (59%) (6).
Ή ЯМР 400 МГц, (б6-ДМСО): δ 0,84 (6Н, ά, 1=6 Гц), 1,21 (2Н, т), 1,81 (2Н, т), 2,06 (2Н, т), 2,47 (2Н, 8), 2,89 (2Н, в), 7,94 (3Н, Ьг в), 12,30 (1Н, Ьг в).
Масс-спектрометрия (Е8+) м/е: 186 (М+1 для свободноосновной формы).
Пример 7. (+)-(транс)-(1-Аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид.
Реактивы:
(ί) триэтилфосфоноацетат, ΝαΗ;
(ίί) Ме^2, БщМР-;
(их) Н2, Νι;
(ίν) НС1 (38,48)-3,4-Диметилциклопентанон (7а) описан в литературе и может быть синтезирован способом, описанным в Υ. Ка!о, СЬет. РЬагт. Ви11., 1966; 14:1438-1439 и в относящихся к этой публикации сылках: \¥.С’.М.С’. Кокке, Р.А. Уагке\лввег, 1. Огд. СЬет., 1974:39:1535; К. Вакег, Ώ. ВШтд!оп, Ν. Егапауаке, 1С8 СЬет. Сотт., 1981:1234; К. Риги1а, К. Рхапада, Н. Υататοΐο, Те!. Ье!!., 1986:27:4507; С. 8о11аб1е, О. ЬоЬве, Те!. Авутт., 1993:4:1547; А. Ковепс|швк I. 1<л'агпв1гот, 8.С.Т. 8уепввоп, В. С1аввоп, В. 8атие1ввоп, Ас!а СЬет. 8сапб., 1992; 46:1127; Е.Р Согеу, 8и, Те!. Ье!!., 1988:29:3423; Ώ/Ψ. КшдЬк В. О_)Ьага, Те!. Ье!!., 1981;22:5101.
Этап ί. Синтез (транс)-(3,4-диметилциклопентилиден)уксусной кислоты этилового эфира (7Ь).
К суспензии гидрида натрия (1,3 г, 32,5 мМоль) в ТГФ (60 мл) в атмосфере азота при 0°С добавляли триэтилфосфоноацетат (6,5 мл, 32,7 мМоль) в течение 5 мин. После перемешивания в течение еще 10 мин, к прозрачному теперь уже раствору добавляли раствор (38,48)-3,4-диметилциклопентанона (7а) (примерно 2,68 г, примерно 30 мМоль) в ТГФ (2х10 мл) и ледяную баню убирали. Через 4 ч реакцию гасили, выливая смесь в воду (100 мл), затем экстрагировали эфиром (400 мл). Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили и концентрировали под вакуумом. После колоночной хроматографии (10:1 гептан/этилацетат) получали продукт в виде масла (4,53 г) (выход примерно 91%).
Ή ЯМР 400 МГц, (СОС13): δ 1,01 (3Н, ά, 1=6 Гц), 1,03 (3Н, ά, 1=6 Гц), 1,26 (3Н, !, 1=7 Гц), 1,49 (2Н, т), 2,07 (1Н, т), 2,24 (1Н, т), 2,61 (1Н, т), 4,13 (2Н, ς, 1=7 Гц), 5,72 (1Н, в).
Масс-спектрометрия (СН) м/е: 183 (М+1).
Этап ίί. Синтез (транс)-(3,4-диметил-1-нитрометилциклопентил)уксусной кислоты этилового эфира (7с).
К раствору (транс)-(3,4-диметилциклопентилиден)уксусной кислоты этилового эфира (7Ь) (4,24 г, 23,3 мМоль) в ТГФ (15 мл) добавляли ТВАР (32 мл 1М раствора в ТГФ, 32 мМоль) и затем нитрометан (3 мл), после чего реакцию держали 8 ч при температуре 60°С. После охлаждения реакционную смесь
-23006597 разбавляли этилацетатом (150 мл) и промывали 2Ν НС1 (40 мл) и затем насыщенным солевым раствором (50 мл). Послее колоночной хроматографии (10:1 гептан/этилацетат) получали продукт в виде масла (2,24 г) (выход 40%).
1Н ЯМР 400 МГц, (СБС13): δ 0,98 (6Н, б, 1=6 Гц), 1,10-1,39 (5Н, т), 1,47 (2Н, т), 1,87 (1Н, т), 2,03 (1Н, т), 2,57 (2Н, АВц, 1=16,38 Гц), 4,14 (2Н, ς, 1=7 Гц), 4,61 (2Н, АВц, 1=12,60 Гц).
Масс-спектрометрия (Е8+) м/е: 244 (М+1).
ИК-спектроскопия (пленка) ν см-1: 1186, 1376, 1549, 1732, 2956.
Этап ίίί. Синтез (+)-(транс)-(1-Аминометил-3,4-диметилциклопентил )уксусной кислоты гидрохлорида (7).
Раствор (транс)-(3,4-диметил-1-нитрометилциклопентил)уксусной кислоты этиловый эфир (7с) (3,5 г, 14,4 мМоль) в метаноле (100 мл) в присутствии никелевой губки гидрогенизировали при 30°С и 50 ρχι в течение 4 ч. Катализатор отфильтровывали и фильтрат концентрировали под вакуумом с получением смеси 2:1 лактама и аминоэфира, 2,53 г 96%, которая далее использовалась без очистки. Эту смесь (2,53 г, 13,8 мМоль) в диоксане (15 мл) и 6Ν НС1 (45 мл) кипятили под обратным холодильником (110°С в масляной бане) 4 ч. После охлаждения и разбавления водой (60 мл), смесь промывали дихлорметаном (3х50 мл) и затем концентрировали под вакуумом. Полученное масло промывали этилацетатом, затем дихлорметаном с получением липкой пены, которую сушили с получением продукта в виде белого порошка (2,32 г) (выход 76%).
[α]π (23°С) (Н2О) (с=1,002)=+28,2°.
1Н ЯМР 400 МГц, (б6-ДМСО): δ 0,91 (6Н, б, 1=6 Гц), 1,18 (2Н, т), 1,42 (2Н, т), 1,72 (1Н, т), 1,87 (1Н, т), 2,42 (2Н, АВц, 1=16, 24 Гц), 2,90 (2Н, АВц, 1=12, 34 Гц), 8,00 (3Н, Ьг х), 12,34 (1Н, Ьг х).
Масс-спектрометрия (Е8+) м/е: 186 (М+1 для свободноосновной формы).
Пример 8. 1а,3в,5в-(1-Аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
Этап 1. Синтез 2-циано-((3К,58)-3,5-диметилциклогексилиден)уксусной кислоты этилового эфира (8Ь).
цис-3,5-Диметилциклогексанон (8а, 15,78 г, 125,0 мМоль) растворяли в толуоле (150 мл) и обрабатывали ацетатом аммония (0,96 г, 0,099 мМоль), уксусной кислотой (1,4 мл, 0,195 мМоль) и этилцианоацетатом (14,04 г, 99,2 мМоль). Реакционную смесь кипятили под обратным холодильником в течение ночи с ловушкой Дина-Старка, затем охлаждали до комнатной температуры и промывали Н2О (3х50 мл). Водный слой промывали толуолом (2х50 мл). Органические слои объединяли, сушили над №28О4 и концентрировали. Остаток подвергали хроматографии на силикагеле, элюируя 5% ЕЮАс/гексан с получением 22,0 г (80%) искомого продукта в виде прозрачного масла.
Масс-спектрометрия: 222,1 (М+1 для С13Н19МО2); масло; ТСХ: 81О2, Кд 0,40 (9:1 гексан/ЕЮАс). Микроанализ: С13Н19МО2
Расчет: С 70,56; Н 8,68; N 6,33
Результат анализа: С 70,74; Н 8,68; N 6,33 1Н ЯМР (СБС13): δ 0,83-0,95 (т, 1Н), 1,01 (1, 6Н, 1=6,1 Гц), 1,32 (1, 3Н, 1=7,3 Гц), 1,48-1,85 (т, 5Н), 2,97-3,02 (т, 1Н), 3,92 (бб, 1Н, 1=12,2, 2,2 Гц), 4,24 (ς, 2Н, 1=7,1 Гц).
Этап 11. Синтез 1а,3в,5в-1-цианометил-3,5-диметилциклогексанкарбонитрила (8с).
2-Циано-((3К,58)-3,5-диметилциклогексилиден)уксусной кислоты этиловый эфир (8Ь, 6,64 г, 30,0 мМоль) растворяли в Е1ОН (60 мл) и добавляли к суспензии NаСN (1,47 г, 30,0 мМоль) в ЕЮН/Н2О (100 мл/8 мл). Реакционную смесь кипятили под обратным холодильником в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением прозрачного масла, затвердевающего под вакуумом. Остаток хроматографировали на силикагеле, элюируя 4:1 гексан/ЕЮАс с получением 4,05 г (77%) искомого продукта в виде белого, липкого твердого вещества.
Масс-спектрометрия: ион М+1 не наблюдался (СПН16^); масло; ТСХ: 81О2, Кд 0.31 (4:1 гексан/ЕЮАс).
Микроанализ: СПН16^
-24006597
Расчет: С 74,96; Н 9,15; N 15,89
Результат анализа: С 74,81; Н 9,25; N 15,65 1Н ЯМР (СБС13): δ 0,58 (бб, 1Н, 1=24,9, 12,2 Гц), 0,96 (б, 6Н, 1=6,6 Гц), 1,03 (ΐ, 2Н, 1=12,9 Гц), 1,751,90 (т, 3Н), 2,01 (б, 2Н, 1=11,5 Гц), 2,65 (з, 2Н).
Этап ίίί. Синтез 1а,3в,5в-(1-аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорида (8б).
1а,3в,5в-1-Цианометил-3,5-диметилциклогексанкарбонитрил (8с, 5,51 г, 31,26 мМоль) растворяли в ЕЮН (80 мл) и толуоле (80 мл), охлаждали до 0°С и насыщали газообразным НС1. Раствор плотно закрывали и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем концентрировали под вакуумом с получением грубого иминоэфира в виде белого твердого вещества. Этот грубый материал растирали с Εΐ2Ο (150 мл) и сушили под вакуумом, затем обрабатывали Н2О (100 мл) и 1Ν НС1 (4 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем экстрагировали ЕЮ Ас (3х100 мл). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором, сушили над Nа28Ο4 и концентрировали. Остаток хроматографировали на силикагеле, элюируя 6:1 гексан/ЕЮАс с получением 5,78 г (83%) искомого продукта в виде прозрачного масла.
Масс-спектрометрия: 224,1 (М+1 для С13Н21^О2); масло; ТСХ: 8Ю2, 1ч 0,32 (6:1 гексан/ЕЮАс).
Микроанализ: С13Н21^О2
Расчет: С 69,92; Н 9,48; N 6,27
Результат анализа: С 70,03; Н 9,45; N 6,30.
1Н ЯМР (СБС13) δ 0,53 (бб, 1Н, 1=24,9, 12,0 Гц), 0,91 (б, 6Н, 1=6,6 Гц), 1,27 (ΐ, 3Н, 1=7,1 Гц), 1,701,76 (т, 1Н), 1,80-1,90 (т, 2Н), 2,02 (б, 2Н, 1=12,9 Гц), 2,51 (з, 2Н), 4,18 (ς, 2Н, 1=7,1 Гц).
Этап ίν. Синтез 5а,7в,9в-7,9-диметил-2-азоспиро[4,5]декан-3-она (8е).
1а,3в,5в-(1-Циано-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты этиловый эфир (8б, 5,82 г, 26,1 мМоль) растворяли в МеОН (150 мл), обрабатывали 10% Кй/2%Рб/С (1,0 г) и встряхивали в атмосфере Н2 (50 рз1) в течение 28 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток хроматографировали на силикагеле, элюируя градиентом 2:3 гексан/ЕЮАс, ЕЮ Ас, 5% МеОН/ЕЮАс с получением 2,21 г (47%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 182,0 (М+1 для СпНщ^ОО·
Тпл. 116-118°С.
ТСХ: 8ιΟ2, Кг 0,36 (6%МеОН/СН2С12).
Микроанализ: СпН^Юь
Расчет: С 72,88; Н 10,56; N 7,73.
Результат анализа: С 72,84; Н 10,67; N 7,63.
1Н ЯМР (СБС13): δ 0,49 (бб, 1Н, 1=24,4, 12,0 Гц), 0,86-0,93 (т, 8Н), 1,38-1,48 (т, 2Н), 1,60-1,71 (т, 3Н), 2,09 (з, 2Н), 3,16 (з, 2Н), 5,79 (Ьг, 1Н).
Этап ν. Синтез 1а,3в,5в-(1-аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорида (8).
5а,7в,9в-7,9-Диметил-2-азоспиро[4,5]декан-3-он (8е, 0,52 г, 2,87 мМоль) обрабатывали 6N НС1 (19 мл) и кипятили под обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, в ходе чего образовывался белый осадок. Твердый остаток отфильтровывали, а фильтрат охлаждали до 0°С чтобы спровоцировать второе выпадение кристаллов, затем снова фильтровали. Твердые остатки объединяли и сушили под вакуумом с получением 0,46 г (68%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 200,1 (М+1 для СцН2^1О2).
Тпл. 179-180°С.
Микроанализ: СцН2^1О2.
Расчет: С 56,04; Н 9,41; N 5,94.
Результат анализа: С 56,16; Н 9,42; N 5,73.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,46-0,53 (т, 1Н), 0,77 (ΐ, 1Н, 1=12,5 Гц), 0,85-0,91 (т, 7Н), 1,55-1,67 (т, 5Н), 2,11 (б, 2Н, 1=13,4 Гц), 2,36 (з, 2Н), 2,44 (з, 1Н), 3,14 (з, 2Н).
Пример 9. 1а,3в,5в-(3,5-Диметил-1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
1а,3в,5в-(1-Аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид (8, 1,0 г, 4,2 мМоль) растворяли в ЕЮН (100 мл), обрабатывали раствором гидроокиси натрия (Ш, 5 мл), пропионо вым альдегидом (0,9 мл, 12,6 мМоль) и 10% Ρά/С (0,3 г), и встряхивали в атмосфере Н2 (50 рз1) в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали, обрабатывали НС1/Е!2О (1М, 10 мл) и концентрировали под вакуумом. Остаток обрабатывали горячим изопропанолом(100 мл), №С1, вновь фильтровали и чистый раствор концентрировали в вакууме. Грубый продукт перекристаллизовывали из и-РгОН/ацетон/гексан (14:200:225 мл) и сушили под вакуумом с получением 0,136 г (12%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 242,1 (М+1 для С14Н27^О2).
Тпл. 178-180°С.
Микроанализ: С14Н27^О2-НС1-0,27Н2О.
Расчет: С 59,48; Н 10,18; Ν 4,95.
Результат анализа: С 59,53; Н 10,21; Ν 4,78.
1Н ЯМР (С[)Ю1)): δ 0,52 (άά, 1Н, 1=24,2, 12,0 Гц), 0,83-0,90 (т, 8Н), 1,00 (ΐ, 3Н, 1=7,6 Гц), 1,61-1,80 (т, 7Н), 2,43 (§, 2Н), 2,98 (ΐ, 2Н, 1=7,8 Гц), 3,20 (з, 2Н).
Пример 10. 1а,3в,5в-(1-Этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 10 синтезировали способом примера 9, за исключением того, что вместо пропионового альдегида был использован ацетальдегид, и для перекристаллизации был использован этилацетат/гептан (выход 30%).
Масс-спектрометрия: 228 (М+1 для С[5Н29^О2).
Тпл. 188-190°С.
1Н ЯМР (ДМСО): δ 0,83 (8Н, Ъг ά), 1,24 (3Н, ΐ, 1=7,1 Гц), 1,60 (6Н, т), 2,38 (ά, з), 2,98 (2Н, т), 3,10 (2Н, Ъг з), 8,33 (2Н, Ъг з), 12,42 (1Н, Ъг з).
Пример 11. 1а,3в,5в-(1-Бензиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 11 синтезировали способом примера 9, за исключением того, что вместо пропионового альдегида был использован бензальдегид, и для перекристаллизации был использован ЕьО (выход 30%).
Масс-спектрометрия: 290,1 (М+1 для С18Н27^О2).
Тпл. 162-163°С.
Микроанализ: С18Н2^ 1О2-НС1· 0,20Н2О.
Расчет: С 65,62; Н 8,69; Ν 4,25.
Результат анализа: С 65,60; Н 8,71; Ν 4,31.
1Н ЯМР (СПэОП): δ 0,48 (άά, 1Н, 1=12,5 Гц), 0,79-0,90 (т, 8Н), 1,46 (Ъг, 2Н), 1,64 (ά, 3Н, 1=13,4 Гц), 2,42 (з, 2Н), 3,19 (з, 2Н), 4,23 (з, 2Н), 7,43-7,50 (т, 5Н).
Пример 12. 1а,3в,5в-(1-Диметиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
Раствор 1а,3в,5в-(1-аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорида (8, 0,20 г, 0,59 мМоль) в ЕЮН (15 мл), гидроокиси натрия (1Ν, 0,59 мМоль) и Н2О (1 мл)обрабатывали 20% Ρά/С (50 мг) и встряхивали в атмосфере Н2 (50 рз1) в течение 15 ч. Реакционную смесь затем фильтровали, обрабатывали 1Ν 11С1/ЕьО (1 мл) и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изо-26
РгОН (4 мл), разбавляли ацетоном (100 мл) и Е12О (350 мл) и охлаждали до 0°С. Твердый остаток отфильтровывали и сушили под вакуумом с получением 103 мг (выход 70%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 228,1 (М+1 для СцНгз^Ог).
Тпл. 195-196°С.
Микроанализ: С 1О2 -НС1- 0,41 Н2О.
Расчет: С 57,58; Н 9,97; N 5,16.
Результат анализа: С 57,73; Н 9,71; N 4,91.
1Н ЯМР (СВ3ОП): δ 0,56 (бб, 1Н, 1=24,4, 12,0 Гц), 0,89-0,92 (т, 8Н), 1,59-1,75 (т, 8Н), 2,51 (8, 2Н), 2,95 (8, 6Н), 3,44 (8, 2Н).
Пример 13. 1а,3в,5в-(1-Бутиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 13 синтезировали способом примера 9, за исключением того, что вместо пропионового альдегида был использован масляный альдегид (выход 48%).
Масс-спектрометрия: 256,1 (М+1 для С^Н^^ОД.
Тпл. 184-185°С.
Микроанализ: С^Н^^ОгНСЕ
Расчет: С 61,73; Н 10,36; N 4,80.
Результат анализа: С 61,71; Н 10,21; N 4,72.
1Н ЯМР (СВ3ОП): δ 0,53 (бб, 1Н, 1=24,4, 12,0 Гц), 0,86-0,99 (т, 11Н), 1,37-1,47 (т, 2Н), 1,60-1,75 (т, 7Н), 2,43 (8, 2Н), 3,02 (1, 2Н, 6=8,1 Гц), 3,20 (8, 2Н).
Пример 14. 1а,3в,5в-{1-[(Бензилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 14 синтезировали способом примера 9, за исключением того, что в качестве исходного материала использовали ^бензильный аналог (11) и формальдегид, а Р1О2 использовали в качестве катализатора вместо Рб/С (выход 70%).
Масс-спектрометрия: 304,1 (М+1 для С^Н^^ОД.
ТпЛ. 209-210°С.
Микроанализ: С^Н^^ОгНСЮДШ^.
Расчет: С 66,40; Н 8,92; N 4,08.
Результат анализа: С 66,40; Н 9,05; N 4,06.
1Н ЯМР (СВ3ОВ): δ 0,51 (бб, 1Н, 1=24,4, 12,2 Гц), 0,79-0,92 (т, 9Н), 1,29 (Ьг, 1Н), 1,56-1,82 (т, 4Н), 2,51 (бб, 2Н, 1=18,8, 16,3 Гц), 2,85 (8, 2Н), 3,23-3,49 (т, 2Н), 4,37 (бб, 2Н, 1=31,7, 12,7 Гц), 7,45-7,54 (т, 5Н).
Пример 15. 1а,3в,5в-(3,5-Диметил-1-метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
НС1
Соединение примера 14 (0,14 г, 1,21 мМоль) растворяли в 95% Е1ОН (50 мл), обрабатывали раствором гидроокиси натрия (Ш, 1,21 мМоль) и 20% Рб/С (0,1 г) и встряхивали в атмосфере Н2 (50 ρ8ΐ) в течение 45 мин. Реакционную смесь затем фильтровали, обрабатывали НС1/Е12О (1М, 1 мл) и концентрировали под вакуумом. Остаток обрабатывали горячим изо-РгОН, №С1 отфильтровывали, а раствор концентрировали под вакуумом. Грубый продукт перекристаллизовывали из и-РгОН/ацетон/гексан (7:150:110 мл) и сушили под вакуумом с получением 0,189 (63%) искомого продукта.
-27006597
Масс-спектрометрия: 214,1 (М+1 для С^Н^^ОД.
Тпл. 182-183°С.
Микроанализ: С^Н^О^НСЕ
Расчет: С 57,70; Н 9,68; N 5,61.
Результат анализа: С 57,47; Н 9,58; N 5,35.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,52 (бб, 1Н, 1=24,4, 12,2 Гц), 0,84-0,98 (ш, 8Н), 1,57-1,72 (ш, 5Н), 2,38 (з, 2Н), 2,72 (з, 3Н), 3,21 (з, 2Н).
Пример 16. 1а,3в,5в-[1-(Ацетиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусная кислота.
о
охлаждали до 0°С и обрабатывали уксусным ангидридом. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре, затем разбавляли Е1ОАс (100 мл) и промывали Ш НС1 (100 мл). Органический слой сушили над Nа38О4 и концентрировали под вакуумом. Грубый материал хроматографировали на силикагеле, элюируя 4% МеОН/СН2С12 с получением 0,138 г (27%) искомого продукта в виде масла, которое затвердевало под вакуумом.
Масс-спектрометрия: 242,1 (М+1 для СвН^^О^).
Тпл. 122-124°С.
Микроанализ: СвН^О^
Расчет: С 64,70; Н 9,61; N 5,80.
Результат анализа: С 64,65; Н 9,59; N 5,63.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,46 (бб, 1Н, 1=23,7, 11,7 Гц), 0,81-0,87 (ш, 9Н), 1,56 (б, 2Н, 1=13,4 Гц), 1,65-1,76 (ш, 3Н), 1,98 (з, 3Н), 2,18 (з, 2Н), 3,30 (з, 3Н).
Пример 17. 1а,3в,5в-[1-(Изобутиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид.
НС1 он о
Соединение примера 17 синтезировали способом примера 9, за исключением того, что вместо пропионового альдегида использовали изомасляный альдегид (выход 53%). Масс-спектрометрия: 256 (М+1 для С^Н^^ОД.
Тпл. 193-194°С.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,53 (бб, 1Н, 1=24,3, 12,5 Гц), 0,81-0,90 (ш, 2Н), 0,89 (б, 6Н, 1=6,4 Гц), 1,03 (б,
6Н, 1=6,8 Гц), 1,57-1,71 (ш, 5Н), 2,09 (ш, 1Н), 2,49 (з, 2Н), 2,88 (б, 2Н, 1=7,1 Гц), 3,19 (з, 2Н).
Пример 18. 1а,3в,5в-[3,5-Диметил-1-(фенэтиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 18 синтезировали способом примера 9, за исключением того, что вместо пропионового альдегида использовали фенилацетальдегид (выход 16%).
Масс-спектрометрия: 304 (М+1 для СщН^^ОД.
Тпл. 188-189°С.
Микроанализ: СщН^^О^НСЕ
Расчет: С 67,14; Н 8,90; N 4,12.
Результат анализа: С 66,94; Н 8,91; N 3,98.
-28006597
Ή ЯМР (СО3ОО): δ 0,46 (бб, 1Н, 1=24,6, 12,3 Гц), 0,81-0,91 (т, 8Н), 1,58-1,72 (т, 5Н), 2,50 (з, 2Н), 3,04-3,08 (т, 2Н), 3,26-3,30 (т, 4н), 7,23-7,75 (т, 5Н).
Пример 19. 1а,3в,5в-{3,5-Диметил-1-[(3-фенилпропиламинометил)циклогексил]}уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 19 синтезировали способом примера 9, за исключением того, что вместо пропионового альдегида использовали гидроциннамовый альдегид (выход 50%).
Масс-спектрометрия: 318 (М+1 для СгоНз^Ог).
Тпл. 171-172°С.
Микроанализ: С^Н^^О^НСЕ
Расчет: С 67,87; Н 9,11; Ν 3,96.
Результат анализа: С 67,83; Н 9,13; Ν 3,78.
1Н ЯМР (СО3ОО): δ 0,53 (бб, 1Н, 1=24,6, 12,1 Гц), 0,80-0,90 (т, 2Н), 0,90 (б, 6Н, 1=6,0 Гц), 1,60-1,72 (т, 5Н), 2,03-2,11 (т, 2Н), 2,45 (з, 2Н), 2,73 (ΐ, 2Н, 1=7,5 Гц), 3,06 (ΐ, 2Н, 1=7,7 Гц), 3,3 (з, 2Н), 7,20-7,18 (т, 5Н).
Пример 20. {1-[(Циклобутилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 20 синтезировали способом примера 26, за исключением того, что вместо 2метилмасляного альдегида использовали циклобутанон (выход 70%).
Масс-спектрометрия: 226 (М+1 для СвНг^Ог).
Тпл. 176-177°С.
Микроанализ: С^Н^О^НСЕ
Расчет: С 59,64; Н 9,24; Ν 5,35.
Результат анализа: С 59,88; Н 9,18; Ν 5,19.
1Н ЯМР (СО3ОО): δ 1,16-1,60 (Ьг., 10Н), 1,80-1,96 (т, 2Н), 2,21-2,40 (т, 4Н), 2,53 (з, 2Н), 2,97 (з, 2Н), 3,73 (т, 1Н).
Пример 21. 1а,3в,5в-(1-Изопропиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 21 синтезировали способом примера 9, за исключением того, что вместо пропионового альдегида использовали ацетон (выход 50%).
Масс-спектрометрия: 242 (М+1 для СщН^^ОД.
Тпл. 206-207°С.
1Н ЯМР (СО3ОО): δ 0,53 (бб, 1Н, 1=24,8, 12,5 Гц), 0,80-0,90 (т, 2Н), 0,99 (б, 6Н, 1=6,1 Гц), 1,35 (б, 6Н, 1=6,6 Гц), 1,55-1,78 (т, 5Н), 2,45 (з, 2Н), 3,18 (з, 2Н), 3,41 (т, 1Н).
Пример 22. 1-Аминометил-1-циклогексануксусная кислота.
Ранее описан в 8а171пдег е1 а1. ϋ8 4087544, от 2 мая 1978.
Пример 23. 1-Аминометил-1-циклопентануксусная кислота.
Ранее описан в 8а171пдег е1 а1. ϋ8 4087544, от 2 мая 1978.
Пример 24. 1-Аминометил-1-циклопентануксусной кислоты натриевая соль.
Ранее описан в 8а171пдег е1 а1. ϋ8 4087544, от 2 мая 1978.
Пример 25. 1-(Гидроксиметил)циклогексануксусной кислоты натриевая соль.
Ранее описан в 8а1/тцег е1 а1. ϋ8 2960441, 1960.
-29006597
Пример 26. Синтез {1-[(2-метилбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид.
Раствор (1-аминометил-1-циклогексил)уксусной кислоты (пример 22, 2,0 г, 11,7 мМоль) в Е1ОН (100 мл) обрабатывали 2-метилмасляным альдегидом (4 мл, 35,1 мМоль) и Р1О2 (0,5 г) и встряхивали в атмосфере Н2 (50 р81) в течение 2 ч. Рееакционную смесь фильтровали, обрабатывали 1Ν НС1/Е12О (12 мл), концентрировали под вакуумом, растворяли в горячем изо-РгОН (10 мл), разбавляли ацетоном (600 мл), охлаждали до 0°С и фильтровали с получением 1,58 г (49%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 242 (М+1 для С14Н27Н1О2).
Тпл. 162-163°С.
Микроанализ: С14Н27Н1О2-НС1.
Расчет: С 60,52; Н 10,16; Ν 5,04.
Результат анализа: С 60,41; Н 10,26; Ν 4,95.
1Н ЯМР (СО;О1)): δ 0,95 (1, 3Н, 1=7,3 Гц), 1,02 (ά, 3Н, 1=6,6 Гц), 1,20-1,31 (т, 1Н), 1,42-1,56 (т, 11Н), 1,81-1,89 (т, 1Н), 2,63 (άά, 2Н, 1=18,3, 16,1 Гц), 2,82 (άά, 1Н, 1=12,5, 8,3 Гц), 2,99 (12,5, 6,1 Гц), 3,07 (άά, 2Н, 1=25,6, 12,9 Гц).
Пример 27.
{1-[(4,4,4-Трифторбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид был синтезирован способом примера 26, за исключением того, что вместо 2-метилмасляного альдегида использовали 4трифтормасляный альдегид (выход 19%).
Масс-спектрометрия: 282,1 (М+1 для С^Н^^О^).
Тпл. 163-164°С.
Микроанализ: СвН^^О^-НСЮ^^О.
Расчет: С 49,00; Н 7,31; Ν 4,40.
Результат анализа: С 48,60; Н 7,29; Ν 4,19.
1Н ЯМР |('1),О1)): δ 1,40-1,54 (т, 11Н), 1,96-2,04 (т, 2Н), 2,26-2,38 (т, 2Н), 2,57 (8, 2Н), 3,09-3,13 (т, 4Н).
Пример 28. (1-Этиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 28 синтезировали способом примера 26, за исключением того, что вместо 2метилмасляного альдегида использовали ацетальдегид (выход 30%).
Масс-спектрометрия: 200,1 (М+1 для С11Н21Н1О2).
Тпл. 160-166°С.
Микроанализ: С11Н21Н1О2-НС1.
Расчет: С 56,04; Н 9,41; Ν 5,94.
Результат анализа: С 55,98; Н 9,36; Ν 5,79.
1Н ЯМР (СО;ОО): δ 1,31-1,54 (т, 13Н), 2,54-2,56 (т, 2Н), 3,06-3,13 (т, 4Н).
Пример 29. {1-[(Циклопропилметиламино)метил] циклогексил }уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 29 синтезировали способом примера 26, за исключением того, что вместо 2метилмасляного альдегида использовали циклопропанкарбоксиальдегид (выход 62%).
Масс-спектрометрия: 226 (М+1 для С13Н23Н1О2).
Тпл. 177-178°С.
Микроанализ: С13Н23Н1О2-НС1.
-30006597
Расчет: С 59,64; Н 9,24; N 5,35.
Результат анализа: С 59,72; Н 9,15; N 5,27.
1Н ЯМР (СЭзОЭ): δ 0,50-0,56 (т, 2Н), 0,71-0,74 (т, 2Н), 1,05-1,30 (т, 1Н), 1,42-1,54 (т, 10Н), 2,52 (8, 2Н), 2,94 (б, 2Н, 1=7,3 Гц), 3,10 (8, 2Н).
Пример 30. {1-[(2-Гидрокси-1-метилэтиламино)метил]циклогексил (уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 30 синтезировали способом примера 26, за исключением того, что вместо 2метилмасляного альдегида использовали 1-гидрокси-2-пропанон (выход 60%).
Масс-спектрометрия: 230 (М+1 для С12Н23>О3).
Тпл. 164-165°С.
Микроанализ: С12Н23>О2-НС1.
Расчет: С 54,23; Н 9,10; N 5,27.
Результат анализа: С 54,23; Н 9,01; N 5,18.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 1,30-1,32 (т, 3Н), 1,44-1,55 (т, 10Н), 2,60 (8, 2Н), 3,11 (т, 2Н), 3,28 (Ьг., 2Н),
3,37 (Ьг., 1Н), 3,57-3,61 (т, 1Н), 3,78-3,81 (т, 1Н).
Пример 31. [1-(Изобутиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 31 синтезировали способом примера 26, за исключением того, что вместо 2метилмасляного альдегида использовали циклопропанкарбоксиальдегид (выход 35%).
Масс-спектрометрия: 228 (М+1 для С13Н25>О2).
Тпл. 175-176°С.
Микроанализ: С13Н25>О2-НС1.
Расчет: С 59,19; Н 9,93; N 5,51.
Результат анализа: С 59,28; Н 9,98; N 5,24.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 1,03 (б, 6Н, 1=6,9 Гц), 1,37-1,60 (т, 10Н), 2,10-2,17 (т, 1Н), 2,63 (8, 2Н), 2,87 (б, 2Н, 1=7,4 Гц), 3,07 (8, 2Н).
Пример 32. (1-Пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 32 синтезировали способом примера 26, за исключением того, что вместо 2метилмасляного альдегида использовали пропионовый альдегид.
Масс-спектрометрия: 214,1 (М+1 для С12Н23>О2).
Тпл. 174-177°С.
Микроанализ: С12Н23>О2-НС1.
Расчет: С 57,70; Н 9,69; N 5,61.
Результат анализа: С 57,55; Н 9,77; N 5,48.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0.93 (ΐ, 1Н, 1=6,3 Гц), 0,99-1,03 (т, 4Н), 1,40-1,54 (т, 13Н), 1,72-1,78 (т, 2Н), 2,96-3,29 (т, 2Н).
Пример 33. [1-(Изопропиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид.
-31006597
Соединение примера 33 синтезировали способом примера 26, за исключением того, что вместо 2метилмасляного альдегида использовали ацетон.
Масс-спектрометрия: 214,1 (М+1 для С12Н23И1О2).
Тпл. 193-194°С.
1Н ЯМР (ΟΌ3ΟΌ): δ 1,29-1,57 (т, 18Н), 2,59 (з, 2Н), 3,07 (з, 2Н), 3,38-3,42 (т, 1Н).
Пример 34. (1-Циклогексиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 34 синтезировали способом примера 26, за исключением того, что вместо 2метилмасляного альдегида использовали циклогексанон (выход 48%).
Масс-спектрометрия: 254 (М+1 для С15Н27И1О2).
Тпл. 198-199°С.
Микроанализ: С15Н27И1О2.НС1.
Расчет: С 62,12; Н 9,74; N 4,83.
Результат анализа: С 62,18; Н 9,84; N 4,75.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 1,20-1,60 (т, 16Н), 1,63-1,76 (т, 1Н), 1,88 (Ьг., 2Н), 2,13 (Ьг., 2Н), 2,60 (т., 2Н), 3,09 (т., 3Н).
Пример 35. [1-(Бензиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид.
Соединение примера 35 синтезировали способом примера 26, за исключением того, что вместо 2метилмасляного альдегида использовали бензальдегид.
Масс-спектрометрия: 262.0 (М+1 для С16Н23^О2).
Тпл. 125-135°С.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 1,38-1,49 (т, 11Н), 2,55 (з, 2Н), 3,07 (з, 2Н), 4,23 (з, 2Н), 7,43-7,49 (т, 5Н). Пример 36. ((1В,3В)-3-Метил-1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
((1В,3В)-1-Аминометил-3-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид (пример 1, 1,1 г, 4,9 мМоль) растворяли в этаноле (95 мл) и обрабатывали 1Ν NаΟН (5 мл). Добавляли пропионовый альдегид (4,9 мл) и затем 10% Рб/С (0,5 г), после чего реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 ρδί) в течение 15,75 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли 1М НС1 (20 мл) в эфире, после чего раствор концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изопропаноле (100 мл), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Затем остаток растворяли в изопропаноле (10 мл) и перекристаллизовывали из ацетона. Твердую фазу отфильтровывали и фильтрат охлаждали в течение ночи, добиваясь вторичного выпадения кристаллов. Твердые остатки объединяли с получением искомого продукта (0,78 г, 66%).
Масс-спектрометрия: 228,1 (М+1 для С13Н25NО2).
-32006597
Тпл. 179-179,5°С.
Микроанализ: С13Н25NО2НС1.
Расчет: С 59,19; Н 9,93; N 5,31.
Результат анализа: С 59,27; Н 9,97; N 5,07.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2929 (Ьг), 1717, 1188.
Ή ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,84-1,03 (т, 8Н), 1,12-1,17 (т, 1Н), 1,46-1,79 (т, 8Н), 2,43 (8, 2Н), 3,00 (ί, 2Н, 1=7,8 Гц), 3,22 (8, 2Н).
Пример 37. {1-[(Циклопентилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид.
(1-Аминометилциклогексил)уксусную кислоту (3,0 г, 17,5 мМоль) растворяли в этаноле (45 мл). Добавляли циклопентанкарбальдегид (5 мл, 3 экв.) и обрабатывали реакционную смесь Р1О2 (0,25 г). Затем реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 р81) в течение 16,5 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли Ш НС1 (20 мл) в эфире, после чего раствор концентрировали под вакуумом. Затем остаток перекристаллизовывали из горячего изопропанола и ацетона с получением искомого продукта (2,32 г, 52%).
Масс-спектрометрия: 254,1 (М+1 для С|5Н;-\О).
Тпл. 172-173°С.
Микроанализ: С15Н2^О2-НС1.
Расчет: С 62,16; Н 9,74; N 4,83.
Результат анализа: С 61,92; Н 9,88; N 4,86.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2930, 2854, 2509, 1689, 1455, 1211.
ΉЯМР (СП3ОЭ): δ 1,23-1,32 (т, 2Н), 1,41-1,73 (т, 16Н), 1,90 (т, 1Н), 2,63 (8, 2Н), 3,01 (ά, 2Н, 1=7,6 Гц), 3,09 (8, 2Н).
Пример 38. {1-[(Циклогексилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид.
(1-Аминометилциклогексил)уксусную кислоту (3,0 г, 17,5 мМоль) растворяли в этаноле (45 мл). Добавляли циклогексанкарбальдегид (5 мл, 3 экв.) и обрабатывали реакционную смесь Р1О2 (0,25 г). Затем реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 р81) в течение 16,5 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли Ш НС1 (20 мл) в эфире, после чего раствор концентрировали под вакуумом. Затем остаток перекристаллизовывали из горячего изопропанола и эфира с получением искомого продукта (3,57 г, 67%).
Масс-спектрометрия: 268,1 (М+1 для С16Н2^О2).
Тпл. 167,5-168°С.
Микроанализ: С16Н2<^О2.НС1.
Расчет: С 63,24; Н 9,95; N 4,61.
Результат анализа: С 63,14; Н 10,01; N 4,45.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2926, 2851, 1718, 1684.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 1,03 (т, 1Н), 1,20-1,85 (т, 20Н), 2,63 (8, 2Н), 2,88 (ά, 2Н, 1=6,8 Гц), 3,07 (8, 2Н).
Пример 39. [1-(трет-Бутоксикарбониламинометил)циклогексил]уксусная кислота.
-33006597 (1-Аминометилциклогексил)уксусную кислоту (10,0 г, 58,4 мМоль) растворяли в ТГФ (280 мл) и обрабатывали Ш \аО11 (128,5 мл). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и небольшими порциями при тщательном перемешивании добавляли 14,0 г (1,1 экв.) ди-трет-бутилдикарбонат. Смеси позволяли прогреться до комнатной температуры и перемешивали ее в течение ночи. Затем ТГФ выпаривали, а водную фазу промывали этилацетатом (3х50 мл). Водную фазу подкисляли КН2РО4 (44 г) и наблюдали пенообразование. Постепенно пена превращалась в белый осадок. Смесь перемешивали 2 ч, постепенно, очень медленно, добавляя КН2РО4 (1 г). Осадок отфильтровывали и промывали водой с получением искомого продукта (15,2 г, 96%).
Масс-спектрометрия: 272,1 (М+1 для С14Н25NО4).
Тпл. 181°С.
Микроанализ С14Н25NО4.
Расчет: С 59,52; Н 9,36; N 4,76.
Результат анализа: С 59,51, Н 9,03; N 4,87.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 3413, 3054, 2933 (Ьг), 1709, 1666, 1531, 1248.
1Н ЯМР (СП3ОП) 1,27-1,58 (т, 19Н), 2,29 (х, 2Н), 3,12 (б, 2Н, 1=6,8 Гц), 4,97 (Ьг, 1Н).
Пример 40. [1-(Ацетиламинометил)циклогексил]уксусная кислота.
(1-Аминометилциклогексил)уксусную кислоту (2,0 г, 11,7 мМоль) растворяли в Н2О (20 мл), затем добавляли \аО11 (3,1 г, 77,5 мМоль, 6,6 экв.) и уксусный ангидрид (1,8 мл, 19,3 мМоль, 1,7 экв.). Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре на 2 дня. Затем добавляли Ш НС1 (125 мл) и реакционную смесь экстрагировали ЕЮАс (125 мл). Органическую фазу отделяли, сушили над \а28О.| и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в Н2О (100 мл), обрабатывали ХаОН (0,12 г) и концентрировали под вакуумом. Образец затем подвергали флэш-хроматографии, элюируя 6%МеОН/СН2С12, с получением искомого продукта (0,31 г, 12%).
Масс-спектрометрия: 214,1 (М+1 для СцН^О^.
Тпл. 107-108°С.
Микроанализ: СцН^О^
Расчет: С 61,95; Н 8,98; N 6,57.
Результат анализа: С 61,96; Н 9,03; N 6,54.
ТСХ: 0,31 6%МеОН/СН2С12; ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 3286, 3120, 2932, 2440, 1714, 1576, 1419, 1333, 1208.
1Н ЯМР (СБС13): δ 1,25-1,51 (т, 10Н), 2,06 (х, 3Н), 2,28 (х, 2Н), 3,26-3,29 (т, 2Н), 6,32 (Ьг, 1Н).
Пример 41. (3К,58)-1-(Циклобутиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
((3К,58)-1-Аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид (0,76 г, 3,2 мМоль) растворяли в этаноле (45 мл) и обрабатывали 1 N \аО11 (3,2 мл). Затем последовательно добавляли циклобутанон (1 мл, 6 экв.) и Р1О2 (0,2 г). Затем реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 рх1) в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли Ш НС1 (35 мл) в эфире, после чего раствор концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изопропаноле (150 мл) и фильтровали. Затем добавляли ацетон (100 мл) и эфир (600 мл), которые предварительно охладили до 0°С. Раствор оставляли при 0°С на 2 ч для образования кристаллов. Кристаллы собирали и промывали эфиром и ацетоном (0,38 г, 41%).
Масс-спектрометрия: 254,1 (М+1 для С15Н27NО2).
Тпл. 200-201°С.
Микроанализ: С15Н27NО2·НС1.
Расчет: С 62,16; Н 9,74; N 4,83.
Результат анализа: С 62,09; Н 9,72; N 4,68. ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2926, 1720, 1189.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,48-0,57 (т, 1Н), 0,85-0,92 (т, 8Н), 1,60-1,73 (т, 5Н), 1,78-1,93 (т, 2Н), 2,22-
2,38 (т, 4Н), 2,42 (х, 2Н), 3,11 (х, 2Н), 3,72-3,78 (т, 1Н).
-34006597
Пример 42. {(3К,58)-3,5-[Диметил-1-(2-метилбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид.
((3К,58)-1-Аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид (1,0 г, 4,4 мМоль) растворяли в этаноле (47 мл) и обрабатывали 1Ν NаΟΗ (4,4 мл). Затем последовательно добавляли изомасляный альдегид (1 мл, 3 экв.) и РЮ2 (0,17 г). Затем реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 ρδί) в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли 1Ν НС1 (10 мл) в эфире, после чего раствор концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изопропаноле (100 мл) и фильтровали. Затем концентрировали под вакуумом и перекристаллизовывали из ацетона и гексана. Кристаллы собирали и промывали гексаном с получением искомого продукта (0,89 г, 75%).
Масс-спектрометрия: 270,1 (М+1 для С16Н3^О2).
Тпл. 171-173°С.
Микроанализ: С16Н3^О2-НС1.
Расчет: С 62,82; Н 10,54; Ν 4,58
Результат анализа: С 62,59; Н 10,43; Ν 4,52
ИК-спектроскопия (КВг, см'1): 2964 (Ьг), 1721, 1485, 1186, 840.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,48-0,57 (т, 1Н), 0,81-1,07 (т, 12Н), 1,23-1,27 (т, 1Н), 1,45-1,72 (т, 6Н), 1,831,91 (т, 1Н), 2,50 (δ, 2Н), 2,83 (бб, 1Н, 1=8,3, 12,5 Гц), 3,00 (бб, 1Н, 1=6,1, 12,5 Гц), 3,13-3,29 (т, 4Н).
Пример 43. {(3К,58)-1-[(2-Гидрокси-1-метилэтиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид.
((3К,58)-1-Аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид (1,0 г, 4,3 мМоль) растворяли в этаноле (45 мл) и обрабатывали 1Ν NаΟΗ (4,3 мл). Затем последовательно добавляли 1гидрокси-пропан-2-он (1 мл, 3 экв.) и РЮ2 (0,15 г). Затем реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 ρδί) в течение 82 ч. Добавляли РЮ2 (0,1 г) и 1-гидроксипропан-2-он (1 мл) и реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 в течение 24 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли 1Ν НС1 (35 мл) в эфире, после чего раствор концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изопропаноле (150 мл) и фильтровали. Затем концентрировали под вакуумом и перекристаллизовывали из горячего изопропанола, ацетона и эфира. Кристаллы собирали и промывали эфиром, а также ацетоном и сушили (0,30 г, 1,04 мМоль, 24%).
Масс-спектрометрия: 258,1 (М+1 для СнИ^ХОД.
Тпл. 178-179°С.
Микроанализ: С14Η27NΟ3·ΗС1.
Расчет: С 57,23; Н 9,60; Ν 4,77.
Результат анализа: С 56,77; Н 9,39; Ν 4,45.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 3349, 2897, 1704, 1419, 1194.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,48-0,57 (т, 1Н), 0,82-0,90 (т, 8Н), 1,25-1,32 (т, 4Н), 1,60-1,75 (т, 5Н), 2,47 (δ, 2Н), 3,23 (б, 2Н, 1=5,1 Гц), 3,38 (т, 1Н), 3,58 (бб, 1Н, 1=12,0, 7,1 Гц), 3,79 (бб, 1Н, 1=12,0, 4,2 Гц).
Пример 44. {(3К,58)-1-[(2,2-Диметоксиэтиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид.
((3К,58)-1-Аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид (1,0 г, 4,3 мМоль) растворяли в этаноле (47 мл). Затем добавляли глиоксаль 1,1-диметилацеталь (3,7 мл, 3,0 экв.) и обрабатывали смесь РЮ2 (0,17 г). Затем реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 ρδί) в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли 1Ν НС1 в эфире (10 мл), после чего раствор концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изопропаноле (100 мл) и фильтровали. Затем фильтрат концентрировали и остаток перекристаллизовывали из ацетона и гексана с получением искомого продукта (0,92 г, 75%).
Масс-спектрометрия: 288,1 (М+1 для С15Н29ЫО4).
Тпл. 125°С (разл).
Микроанализ: С15Н24ЫО4-НС1.
Расчет: С 55,63; Н 9,34; Ν 4,32.
Результат анализа: С 55,29; Н 9,48; Ν 4,18. ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2949, 1715, 1457, 1191, 1134, 1077.
1Н ЯМР (СПэОО): δ 0,47-0,56 (т, 1Н), 0,81-0,90 (т, 8Н), 1,59-1,71 (т, 5Н), 2,46 (8, 2Н), 3,18 (6, 2Н, 1=5,1 Гц), 3,26-3,29 (т, 2Н), 3,45-3,47 (т, 6Н), 4,73 (1, 1Н, 1=5,1 Гц).
Пример 45. {(3К,58)-1-[(Циклопентилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид.
((3К,58)-1-Аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид (1,0 г, 4,1 мМоль) растворяли в этаноле (45 мл) и обрабатывали 1Ν №О11 (4,2 мл). Затем последовательно добавляли циклопентанкарбальдегид (1,5 мл, 3 экв.) и Р1О2 (0,2 г). Затем реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 ρ8ΐ) в течение 12 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли 1Ν НС1 в эфире (35 мл), после чего раствор концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изопропаноле (150 мл) и фильтровали. Затем раствор концентрировали под вакуумом и перекристаллизовывали из горячего изопропанола, ацетона и эфира. Кристаллы собирали и промывали эфиром и ацетоном (0,40 г, 27%).
Масс-спектрометрия: 282,1 (М+1 для С17Н31КО2).
Тпл. 187-188°С.
Микроанализ: С17Н31ЫО2-НС1.
Расчет: С 64,23; Н 10,15; Ν 4,41.
Результат анализа: С 64,11; Н 10,04; Ν 4,34.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2952, 1720, 1452, 1185.
1Н ЯМР (СОэОО): δ 0,48-0,57 (т, 1Н), 0,81-0,90 (т, 8Н), 1,25-1,32 (т, 2Н), 1,60-1,71 (т, 9Н), 1,891,93 (т, 2Н), 2,25-2,29 (т, 1Н), 2,49 (8, 2Н), 3,01 (6, 2Н, 1=7,6 Гц), 3,20 (8, 2Н).
Пример 46. {(3К,58)-1-[(Циклогексилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид.
((3К,58)-1-Аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид (1,0 г, 4,2 мМоль) растворяли в этаноле (45 мл) и обрабатывали 1Ν №О11 (4,3 мл). Затем последовательно добавляли циклогексанкарбальдегид (1,5 мл, 3 экв.) и Р1О2 (0,15 г). Затем реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 ρ8ΐ) в течение 17 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли 1Ν НС1 в эфире (35 мл), после чего раствор концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изопропаноле (150 мл) и фильтровали. Затем раствор концентрировали под вакуумом и перекристаллизовывали из горячего изопропанола, ацетона и эфира. Кристаллы собирали и промывали эфиром и ацетоном (0,46 г, 34%).
Масс-спектрометрия: 296,2 (М+1 для С18НззNΟ2).
Тпл. 176-177°С.
Микроанализ С18НззNΟ2·НС1.
Расчет: С 65,13; Н 10,32; Ν 4,22.
Результат анализа: С 64,89; Н 10,36; Ν 4,09.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2919, 2851, 1721, 1453, 1192.
1Н ЯМР (СЭзОЭ): δ 0,48-0,57 (т, 1 Н), 0,81-0,90 (т, 8Н), 1,00-1,36 (т, 5Н), 1,60-1,71 (т, 11Н), 2,49 (8, 2Н), 2,88 (6, 2Н, 1=6,8 Гц), 3,18 (8, 2Н).
Пример 47. ((3К,58)-1-Циклогексиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
-36006597 ((3К,58)-1-Аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид (0,99 г, 4,2 мМоль) растворяли в этаноле (45 мл) и обрабатывали 1Ν №ОН (4,2 мл). Затем последовательно добавляли циклогексанон (1,5 мл, 3 экв.) и Р!О2 (0,2 г). Затем реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 рв1) в течение 17 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли 1Ν НС1 в эфире (35 мл), после чего раствор концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изопропаноле (150 мл) и фильтровали. Затем раствор концентрировали под вакуумом и перекристаллизовывали из горячего изопропанола, ацетона и эфира. Кристаллы собирали и промывали эфиром и ацетоном (0,33 г, 25%).
Масс-спектрометрия: 282,1 (М+1 для С17Н3ХО2).
Тпл. 210°С.
Микроанализ: С17Н3ХО2-НС1.
Расчет: С 64,23; Н 10,15; Ν 4,4.
Результат анализа: С 63,89; Н 9,98; Ν 4,33.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2921, 1691, 1452, 1216.
Ή ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,47-0,57 (т, 1Н), 0,82-0,90 (т, 8Н), 1,30-1,46 (т, 5Н), 1,57-1,63 (т, 2Н), 1,69 (ά, 4Н, 1=12,9 Гц), 1,86 (ά, 2Н, 1=12,5 Гц), 2,13 (ά, 2Н, 1=10,3 Гц), 2,46 (в, 2Н), 3,04-3,10 (т,1Н), 3,21 (в, 2Н).
Пример 48. ((3К,58)-1-Карбоксиметил-3,5-диметилциклогексил)уксусная кислота.
48а Пример 48
Этап ί. Синтез (8К,108)-8,10-диметил-2,4-диоксо-3-азоспиро[5,5]ундекан-1,5-дикарбонитрила аммониевая соль (48а).
Раствор абсолютного этанола (40 мл) охлаждали до 0°С и насыщали газообразным Ν43, затем обрабатывали цис-3,5-диметилциклогексаноном (5,0 г, 39,62 мМоль) и этилцианоацетатом (8,43 мл, 79,24 мМоль). Колбу плотно закрывали, позволяли прогреться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Осадок отфильтровывали, промывали Е!2О и сушили под вакуумом с получением 6,04 г (59%) искомого продукта в виде бледно-окрашенного твердого вещества.
Масс-спектрометрия: 260,1 (М+1 для С14Н17^О2).
Микроанализ: С14Н17^О2-ХН3-0,88Н2О.
Расчет: С 57,55; Н 7,51; Ν 19,17.
Результат анализа: С 57,67; Н 7,45; Ν 19,06.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 3298, 2954, 2172, 1700, 1575.
1Н ЯМР (СЭС13): δ 0,46-0,50 (т, 1Н), 0,82-1,17 (т, 11Н), 1,65-1,98 (т, 3Н), 3,58 (άά, 2Н, 1=13,9, 6,8 Гц).
Этап ίί. Синтез соединения примера 48.
(88,10К)-8,10-Диметил-2,4-диоксо-3-азоспиро[5,5]ундекан-1,5-дикарбонитрил (48а, 25,36 г, 97,8 мМоль) обрабатывали концентрированной Н28О4 (102 мл) и водой (30 мл). Реакционную смесь нагревали до 150°С на 5 ч, затем позволяли остыть до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали, твердую фазу собирали и растворяли в 1Ν №ОН. Этот раствор фильтровали и фильтрат подкисляли концентрированной НС1 (40 мл). Осадок собирали и сушили в течение ночи под высоким вакуумом. Соединение затем растворили в горячем изопропаноле (100 мл) и перекристаллизовывали из воды с получением искомого продукта (13,21 г, 59%).
Масс-спектрометрия: 229,1 (М+1 для С12Н20О4).
Микроанализ: С12Н20О4.
Расчет: С 63,14; Н 8,83.
Результат анализа: С 63,36; Н 8,92.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2950, 2913, 1698.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,40-0,48 (т, 1Н), 0,77-0,85 (т, 8Н), 1,57-1,77 (т, 5Н), 2,41 (в, 2Н), 2,56 (в, 2Н).
Пример 49. транс-((3К,58)-1-Гидроксиметил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
-37006597
Этапы ί и ίί. Синтез (цис/транс)-(78,9К)-7,9-диметил-2-оксаспиро[4,5]декан-3-она (49а).
(ί). Бикарбоновую кислоту (48, 6,36 г, 27,9 мМоль) суспендировали в Н2О (93 мл), обрабатывали гидроокисью аммония (3,5 мл) и нитратом серебра (4,73 г, 27,9 мМоль) и перемешивали 20 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтровали и твердый остаток трижды размешивали с Н2О, затем сушили под вакуумом в темноте два дня при 50°С с получением 6,41 г бинарной соли серебра, которую немедленно использовали далее. (ίί). Бинарную соль серебра (1,24 г, 2,81 мМоль) помещали в темную колбу, обрабатывали СС14 (50 мл) и йодом (0,72 г, 2,81 мМоль) и держали при 75°С в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали, концентрировали под вакуумом и хроматографировали на силикагеле, элюируя 4:1 гексан/ЕЮАс с получением 0,37 г (72%) искомого продукта в виде слабоокрашенного масла (49а).
Масс-спектрометрия: 183,0 (М+1 для СцН18О2).
Микроанализ: СцН18О2-0,05Н2О.
Расчет: С 72,13; Н 9,96.
Результат анализа: С 71,77; Н 9,69.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 3298, 2954, 2172, 1700, 1575, 1450, 1337.
1Н ЯМР (СЭС13, ~1:1 смесь цис/транс диастереомеров): δ 0,49-0,59 (т, 1Н), 0,82-1,02 (т, 10Н), 1,421,53 (т, 2Н), 1,58-1,72 (т, 3Н), 2,30 (в, 1Н, для одного изомера), 2,39 (в, 1Н, для другого изомера 2), 3,96 (в, 1Н, для одного изомера), 4,10 (в, 1Н, для другого изомера).
Этап ϊΐϊ. Синтез (цис/транс)-№бензил-2-((3К,58)-1-гидроксиметил-3,5-диметилциклогексил)ацетамида (49Ь и 49с).
Лактон (49а, 0,85 г, 4,66 мМоль) растворяли в ТГФ (18 мл), обрабатывали бензиламином (0,61 мл, 5,60 мМоль) и кипятили под обратным холодильником 2 дня. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс, промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и солевым раствором, сушили над №28О4 и концентрировали под вакуумом. Остаток хроматографировали на силикагеле, элюируя 1:1 гексан/ЕЮАс с получением 0,79 г (59%) искомого продукта в виде прозрачного масла (смесь цис- и транс- изомеров, 49Ь и 49с).
Масс-спектрометрия: 290,1 (М+1 для С18Н27^О2): масло; ТСХ: 81О2, КД16 (2:1 гексан/ЕЮАс).
Микроанализ: С18Н27^О2.
Расчет: С 74,70; Н 9,40; N 4,84.
Результат анализа: С 74,41; Н 9,35; Ν 4,57.
Этап ίν. Разделение 49Ь и 49с.
Смесь цис- и транс- изомеров (49Ь и 49с) была разделена с помощью препаративной ВЭЖХ (колонка С18, элюция градиентом 60% СН3С№40% Н2О 5 мин, затем 45% СН3СШ55% Н2О 35 мин, все подвижные фазы включали 0,05% ТФУ).
транс-Изомер (49Ь): КТ=23,600 мин, выход 54 мг.
1Н ЯМР (СОС13): δ 0,36-0,62 (т, 3Н), 0,82 (б, 6Н, 1=6,3 Гц), 1,39-1,70 (т, 5Н), 2,14 (в, 2Н), 2,58 (Ьг, 1Н), 3,60 (в, 2Н), 4,43 (б, 2Н, 1=5,9 Гц), 5,97 (Ьг, 1Н), 7,26-7,37 (т, 5Н).
цис-Изомер (49с): КТ=25,828 мин, выход 87 мг.
1Н ЯМР (СЭС13): δ 0,47-0,56 (т, 1Н), 0,65 (ΐ, 2Н, 1=13,2 Гц), 0,85 (б, 6Н, 1=6,3 Гц), 1,47-1,68 (т, 5Н),
2,38 (в, 2Н), 2,58 (Ьг, 1Н), 3,40 (в, 2Н), 4,45 (б, 2Н, 1=5,9 Гц), 6,03 (Ьг, 1Н), 7,28-7,36 (т, 5Н).
Этап ν. Синтез соединения примера 49.
транс-Изомер №бензил-2-(1-гидроксиметилциклогексил)ацетамида (49Ь, 87 мг, 0,303 мМоль) брали после ВЭЖХ, растворяли в 5 мл воды и обрабатывали 24 мг NаОН. Реакционную смесь кипятили под обратным холодильником 3 дня. Затем ее охлаждали до комнатной температуры, разбавляли 1Ν NаОН и экстрагировали ЕЮ Ас. Водную фазу подкисляли концентрированной НС1 (5 мл), затем разбавляли Ш НС1 и продукт экстрагировали ЕЮАс. Органическую фазу промывали солевым раствором и сушили над №28О4. Раствор концентрировали с получением 23 мг (61%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 201 (М+1 для СцН20Оз).
Ή ЯМР (СО3ОП): δ 0,48-0,57 (т, 1Н), 0,88-1,00 (т, 8Н), 1,40-1,49 (т, 2Н), 1,68-1,70 (т, 3Н), 2,28 (з, 2Н), 4,11 (з, 2Н).
Пример 50. цис-((3К,58)-1-Гидроксиметил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохло рид.
цис-Изомер №бензил-2-(1-гидроксиметилциклогексил)ацетамида (49с, 87 мг, 0,303 мМоль) брали после ВЭЖХ, растворяли в 5 мл воды и обрабатывали 24 мг №ОН. Реакционную смесь кипятили под обратным холодильником 3 дня, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли Ш №ОН и экстрагировали ЕЮАс. Водную фазу подкисляли концентрированной НС1 (5 мл), затем разбавляли Ш НС1 и продукт экстрагировали ЕЮАс. Органическую фазу промывали солевым раствором и сушили над №28О4. Раствор концентрировали с получением 43 мг (71%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 201,1 (М+1 для С11Н20О3).
Ή ЯМР (СО3ОП): δ 0,48-0,57 (т, 1Н), 0,88-0,96 (т, 8Н), 1,42-1,50 (т, 2Н), 1,59-1,69 (т, 3Н), 2,37 (з, 2Н), 3,94 (з, 2Н).
Пример 51. (1-Диметиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
(1-Аминометилциклогексил)уксусную кислоту (0,51 г, 3,0 мМоль) растворяли в этаноле и добавляли формальдегид (3 мл, 2 экв.). Затем добавляли 10% Рб/С (1,6 г) и встряхивали реакционную смесь при комнатной температуре в атмосфере водорода при 760 Торр в течение 12 ч. Реакционную смесь затем обрабатывали НС1, пока рН не достиг примерно 2, после чего перекристаллизовывали из ацетона и эфира с получением 1,62 г (87%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 200,1 (М+1 для СцН2^О2).
Тпл. 140-142°С.
Микроанализ: СцН2^О2.
Расчет: С 54,99; Н 9,44; N 5,83.
Результат анализа: С 54,90; Н 9,36; N 6,22.
Ή ЯМР (СО3ОО): δ 1,42-1,59 (т, 10Н), 2,63 (з, 2Н), 2,96 (з, 6Н), 3,26-3,29 (т, 2Н).
Пример 52. (1-Бутиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
(1-Аминометилциклогексил)уксусную кислоту (0,86 г, 5,0 мМоль) растворяли в этаноле (100 мл) и добавляли Рб/С (10%, 0,86 г) и масляный альдегид (1,44 г, 3 экв.). Реакционную смесь поместили в атмосферу водорода при 760 Торр и держали при комнатной температуре, пока реакция не завершилась. Затем ее фильтровали, подкисляли и концентрировали. Остаток растворяли в изопропаноле, фильтровали и перекристаллизовывали из ацетона и эфира с получением искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 228,1 (М+1 для С13Н25NΟ2)·
Тпл. 142-154°С.
Микроанализ С13Н25NΟ2·НС1·
Расчет: С 59,19; Н 9,93; N 5,31
Результат анализа: С 58,85; Н 9,86; N 5,05.
Ή ЯМР (СО3ОП): δ 0,98 (ΐ, 3Н, 1=7,3 Гц), 1,39-1,54 (т, 12Н), 1,66-1,72 (т, 2Н), 2,57 (з, 2Н), 3,01 (ΐ, 2Н, 1=9,3 Гц), 3,09 (з, 2Н).
Пример 53. {1-[(2,2-Диметоксиэтиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид.
-39006597 (1-Аминометилциклогексил)уксусную кислоту (2,0 г, 11,7 мМоль) растворяли в этаноле (100 мл). Затем добавляли глиоксаль 1,1-диметилацеталь (3,7 мл, 3 экв.) и обрабатывали реакционную смесь РЮ2 (0,5 г). Реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 рз1) 4 ч. Затем ее фильтровали, добавляли 1Ν НС1 в эфире (15 мл) и концентрировали под вакуумом. Остаток перекристаллизовывали из горячего изопропанола (25 мл) и ацетона (700 мл) с получением 0,44 г (52%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 260,1 (М+1 для С13Н25NΟ4).
Тпл. 128-129°С.
Микроанализ: С13Н25NΟ4·НС1.
Расчет: С 52,79; Н 8,86; Ν 4,74.
Результат анализа: С 52,84; Н 8,94; Ν 4,67.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2926, 1693, 1457, 1208, 1087.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 1,40-1,55 (т, 10Н), 2,60 (з, 2Н), 3,13 (з, 2Н), 3,17 (ά, 2Н, 1=4,9 Гц), 3,45 (з, 6Н), 4,72 (ΐ, 1Н, 1=5,1 Гц).
Пример 54. (1-Метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
{1-[(Бензилметиламино)метил]циклогексил (уксусной кислоты гидрохлорид (пример 55, 4,1 г, 13,2 мМоль) растворяли в 95% этаноле (250 мл). Затем добавляли 10% Ρά/С (1 г) и встряхивали реакционную смесь при комнатной температуре в атмосфере водорода при 760 Торр 1 ч. Затем ее фильтровали, концентрировали и перекристаллизовывали из ацетона и эфира с получением 2,69 г (92%) искомого продук та.
Масс-спектрометрия: 186,0 (М+1 для С10Нд^О2).
Тпл. 158-162°С.
Микроанализ: С10Нд^ОгНС1. Расчет: С 53,09; Н 9,13; Ν 6,19.
Результат анализа: С 53,14; Н 8,96; Ν 6,34.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 1,42-1,54 (т, 10Н), 2,50-2,53 (т, 2Н), 2,71-2,74 (т, 3Н), 3,09-3,11 (т, 2Н). Пример 55. {1-[(Бензилметиламино)метил]циклогексил (уксусной кислоты гидрохлорид.
[1-(Бензиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид (0,49 г, 1,7 мМоль) растворяли в этаноле (45 мл) и обрабатывали 1Ν №ОН (1,8 мл). Добавляли формальдегид (1 мл, 5 экв.) и обрабатывали смесь РЮ2 (0,2 г). Реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 рз1) 30 ч. Затем ее фильтровали, добавляли 1Ν НС1 в эфире (10 мл) и концентрировали под вакуумом. Получали 0,31 г (1,14 мМоль, 67%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 274,1 (М-1 для С17Н25NΟ2); масло.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 3205, 2930, 2261, 1684, 1451, 1198.
Масс-спектрометрия высокого разрешения: (расчет) 276,1963 (результат анализа) 276,1973 (М+1 для 1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 1,33-1,63 (т, 13Н), 2,28 (з, 2Н), 3,06 (з, 2Н), 4,40 (з, 2Н), 7,21-7,34 (т, 5Н).
Пример 56. [1-(Фенэтиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид.
(1-Аминометилциклогексил)уксусную кислоту (2,0 г, 11,7 мМоль) растворяли в этаноле (100 мл). Добавляли фенилацетальдегид (4 мл, 3 экв.) и обрабатывали реакцию 10% Ρά/С (0,5 г). Реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 рз1) 3 ч. Затем ее фильтровали, добавляли 1Ν НС1 в эфире (20 мл) и концентрировали под вакуумом. Остаток перекристаллизовывали из горячего изопропанола и эфира с получением 0,15 г (4,1%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 276,1 (М+1 для С17Н25NΟ2).
Тпл. 182-183°С.
Микроанализ: С17Н25NΟ2·НС1.
Расчет: С 64,54; Н 8,46; Ν 4,43.
Результат анализа: С 64,54; Н 8,35; Ν 4,34.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2929, 2855, 2813, 1693, 1455, 1220.
-40006597 1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 1,38-1,58 (ш, 10Н), 2,56 (з, 2Н), 3,01-3,06 (ш, 2Н), 3,14 (з, 2Н), 3,23-3,29 (ш, 2Н), 7,21-7,34 (ш, 5Н).
Пример 57. {1-[(3-Фенилпропиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид.
(1-Аминометилциклогексил)уксусную кислоту (2,0 г, 11,7 мМоль) растворяли в этаноле (100 мл). Добавляли 3-фенилпропионовый альдегид (4,6 мл, 3 экв.) и обрабатывали реакцию 10% Рб/С (0,5 г). Реакционную смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 рз1) 3 ч. Затем ее фильтровали, добавляли Ш НС1 в эфире (20 мл) и концентрировали под вакуумом. Остаток перекристаллизовывали из горячего изопропанола и эфира с получением 0,46 г (12%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 290,1 (М+1 для С18Н27NО2).
Тпл. 168-169°С.
Микроанализ: С18Н27NО2·НС1.
Расчет: С 66,34; Н 8,66; N 4,40.
Результат анализа: С 66,48; Н 8,65; N 4,17.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2932, 2854, 1686, 1454, 1217.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 1,38-1,58 (ш, 10Н), 2,00-2,04 (ш, 2Н), 2,56 (з, 2Н), 2,71 (1, 2Н, 1=7,6 Гц), 3,013,08 (ш, 4Н), 7,21-7,34 (ш, 5Н).
Пример 58. ((3К,58)-1-Гидроксиметил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты натриевая соль.
(78,9К)-7,9-Диметил-2-оксоспиро[4,5]декан-3-он (49а, 1,04 г, 5,71 мМоль) растворяли в воде (25 мл) и обрабатывали №ОН (2,5 г). Реакционную смесь кипятили под обратным холодильником 4 ч. Затем раствор охлаждали до комнатной температуры, промывали Е12О и концентрировали водную фазу под вакуумом с получением твердого вещества (8 г). Остаток промывали Ш уксусной кислотой и экстрагировали Е1ОАс, который затем концентрировали. Остаток перекристаллизовывали из Е1ОН, МеОН и гексана с получением 0,75 г (3,75 мМоль, 66%).
Масс-спектрометрия: 199,0 (М-1 для СцН20О3); масло.
Масс-спектрометрия высокого разрешения: (расчет) 199,1334 (результат анализа) 199,1333 (М-1 для С11Н20О3).
Тпл. >250°С.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2953, 2910, 1777, 1706, 1458, 1168, 1012.
Пример 59. ((3К,58)-1-Этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
((3К,58)-1-Аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид (59а, 0,418 г, 1,8 мМоль; соединение 59а было получено в соответствии с методикой, описанной в Вгуапз, 1. Вюогдашс & Меб1сша1 СЬет^81^у ЬеНегз, 1997, 7(19), 2481) растворяли в этаноле (45 мл) и обрабатывали Ш №ОН (1,8 мл). Затем добавляли ацетальдегид (0,5 мл, 3 экв.) и обрабатывали реакцию Р1О2 (0,2 г). Затем смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 рз1) 3 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли Ш НС1 в эфире (2 мл) и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изопропаноле (100 мл) и фильтровали. К фильтрату при 0°С добавляли гексан (100 мл) и собирали осадок с получением 31 мг (0,14 мМоль, 8%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 228,1 (М+1 для Св^^ОД
Тпл. 167-168°С.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2954 (Ьг), 2502, 1685, 1459, 1223.
Микроанализ: Св^^О^НСЕ
Расчет: С 56,60; Н 9,98; N 5,11.
Результат анализа: С 56,60; Н 9,85; N 4,77.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,47-0,56 (ш, 1Н), 0,78-0,89 (ш, 8Н), 1,30-1,36 (ш, 3Н), 1,61-1,79 (ш, 5Н), 2,58 (з, 2Н), 2,99-3,10 (ш, 4Н).
Пример 60. (1-Аминометил-4-этилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
-41006597
Этап ι. Синтез 2-циано-(4-этилциклогексилиден)уксусной кислоты этилового эфира (60а).
4-Этилциклогексанон (13,0 г, 103,0 мМоль) растворяли в толуоле (150 мл) и обрабатывали ацетатом аммония (0,79 г, 10,3 мМоль), ледяной уксусной кислотой (1,2 мл) и этилцианацетатом (11,65 г, 103,0 мМоль). Реакционную смесь кипятили под обратным холодильником 56 ч с ловушкой Дина-Старка, затем охлаждали до комнатной температуры и промывали Н2О (2х100 мл). Водный слой дополнительно промывали толуолом (2х150 мл). Органические слои объединяли, сушили над №28О4 и концентрировали под вакуумом. Остаток хроматографировали на силикагеле, элюируя 5:1 гексан/этилацетат с получением 19.81 г (87%) искомого продукта в виде прозрачного желтого масла (60а).
Масс-спектрометрия: 222,1 (М+1 для С13Н19>О2); масло; ТСХ: 8Ю2, КД93 (1:1 гексан/ЕЮАс).
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2931, 2225, 1728, 1602, 1223.
1Н ЯМР (СБС13): δ 0,82 (ΐ, 3Н, 1=7,4 Гц), 1,11-1,38 (т, 7Н), 1,39-1,45 (т, 1Н), 1,90-2,09 (т, 3Н), 2,202,28 (т, 1Н), 2,91-2,98 (т, 1Н), 3,75-3,79 (т, 1Н), 4,15-4,20 (т, 2Н).
Этап ΐΐ. Синтез цис-1-цианометил-4-этилциклогексанкарбонитрила (60Ь).
2-Циано-(4-этилциклогексилиден)уксусной кислоты этиловый эфир (60а, 16,57 г, 74,86 мМоль) растворяли в ЕЮН (100 мл) и добавляли к суспензии NаСN (3,67 г, 74,86 мМоль) в ЕЮН/Н2О (300 мл/16 мл). Реакционную смесь кипятили под обратным холодильником в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали для удаления выпавшей в осадок соли (4,58 г). Фильтрат концентрировали под вакуумом с получением прозрачного очень вязкого масла желтого цвета. Остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 16:1 гексан/ЕЮАс с получением 11,82 г (77%) (смесь, состоящая из 81% цис- и 19% транс-изомера) продукта в виде желтого масла (60с).
Масс-спектрометрия: ион М+1 не наблюдался (СцН16^); масло; ТСХ: 8Ю2, КД55 (2:1 гексан/ЕЮАс).
Микроанализ: СПН16^.
Расчет: С 74,96; Н 9,15; N 15,89.
Результат анализа: С 74,84; Н 8,97; N 15,74.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2934, 2240, 1453.
1Н ЯМР (СЭЮЭ): δ 0,90 (ΐ, 3Н, 1=7,6 Гц), 1,18-1,47 (т, 7Н), 1,83-1,87 (т, 2Н), 2,07-2,10 (т, 2Н), 2,85 (8, 2Н).
Этап ίίί. Синтез цис-(1-циано-4-этилциклогексил)уксусной кислоты этилового эфира.
цис-1-Цианометил-4-этилциклогексанкарбонитрил (60Ь, 6,16 г, 34,95 мМоль) растворяли в ЕЮН (92 мл) и толуоле (92 мл), охлаждали до 0°С и насыщали газообразным НС1. Раствор плотно закрывали и оставляли перемешиваться на ночь при комнатной температуре. Затем его концентрировали под вакуумом с получением желтовато-белого твердого вещества. Остаток растирали с этиловым эфиром (200 мл) и сушили под вакуумом, затем обрабатывали Н2О (90 мл) и добавляли Ш НС1 (4 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и через 18 ч в растворе наблюдали образование капель желтого масла. Соединение экстрагировали ЕЮ Ас (3х100 мл); органические слои объединяли, промывали солевым раствором, сушили над №28О4 и концентрировали. Остаток подвергали флэшхроматографии с 16:1 гексан/ЕЮАс с получением 4,40 г (56%) искомого продукта (60с).
Масс-спектрометрия: 224,1 (М+1 для С13Н2^О2); масло; ТСХ: 8Ю2, КД38 (СН2С12).
Микроанализ: С13Н2^О2.
Расчет: С 69,92; Н 9,48; N 6,27.
Результат анализа: С 69,97; Н 9,49; N 6,17.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2930, 2236, 1736, 1187.
1Н ЯМР (СО3ОП): δ 0,87-0,90 (т, 3Н), 1,18-1,46 (т, 10Н), 1,77-1,80 (т, 2Н), 2,05-2,09 (т, 2Н), 2,59 (8, 2Н), 4,13-4,15 (т, 2Н).
Этап ίν. Синтез 8-этил-2-азоспиро[4,5]декан-3-она (606).
цис-(1-Циано-4-этилциклогексил)уксусной кислоты этиловый эфир (60с, 2,7 г, 12,1 мМоль) растворяли в МеОН (250 мл) и обрабатывали 10% Рй/2% Рб/С (0,5 г), после чего встряхивали в атмосфере Н2 (50 р81) 3 ч. Затем реакционную смесь фильтровали, концентрировали под вакуумом и хроматографировали на силикагеле, элюируя 3% МеОН/СН2С12 с получением 1,13 г (52%) искомого продукта в виде белого твердого вещества (60б).
Масс-спектрометрия: 181,0 (М+1 для СцН19>О1).
Тпл. 131-133°С.
-42006597
ТСХ: 81О2, Κί0, 22 (4% МеОН/СН2С12).
Микроанализ: СцН^^О^
Расчет: С 72,28; Н 10,08; N 7,66.
Результат анализа: С 72,66; Н 10,45; N 7,26.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 3197, 2918, 1680.
1Н ЯМР (СБС13): δ 0,83-0,97 (т, 5Н), 1,06-1,23 (т, 3Н), 1,31-1,39 (т, 2Н), 1,63-1,67 (т, 4Н), 2,092,11 (т, 2Н), 3,15-3,17 (т, 2Н), 5,73 (Ьг, 1Н).
Этап ν. Синтез соединения примера 60.
8-Этил-2-азоспиро[4,5]декан-3-он (60ά, 3,8 г, 21,1 мМоль) обрабатывали концентрированной НС1 (141 мл) и грели при 110°С 24 ч. Реакционную смесь затем концентрировали и перекристаллизовывали из горячего изопропанола (20 мл) и ацетона с получением 3,3 г, (16,6 мМоль, 79%) продукта.
Масс-спектрометрия: 200,1 (М+1 для СпН2^О2).
Микроанализ: СПН2^О2-НС1.
Расчет: С 56,04; Н 9,41; N 5,94.
Результат анализа: С 56,06; Н 9,46; N 5,88.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2916 (Ьг), 1698, 1526, 1281.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,89 (1, 3Н, 1=7,3 Гц), 1,02-1,40 (т, 8Н), 1,68 (1, 4Н, 1=16,1 Гц), 2,38 (8, 2Н), 3,13 (8, 2Н).
Пример 61. (1-Аминометил-4-пропилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
(61а) (61Ь) (61с) (61ά) Пример 61
Этап 1. Синтез 2-циано-(4-пропилциклогексилиден)уксусной кислоты этилового эфира (61а).
4-н-Пропилциклогексанон (14,0 г, 99,8 мМоль) растворяли в толуоле (145 мл) и обрабатывали ацетатом аммония (0,77 г, 9,98 мМоль), ледяной уксусной кислотой (1,1 мл) и этилцианацетатом (11,3 г, 99,8 мМоль). Реакционную смесь кипятили под обратным холодильником в течение ночи с ловушкой ДинаСтарка, затем охлаждали до комнатной температуры и промывали Н2О (2х200 мл). Водный слой дополнительно промывали толуолом (3х200 мл). Органические слои объединяли, сушили над Nа2О4 и концентрировали под вакуумом. Остаток хроматографировали на силикагеле, элюируя 8:1 гексан/этилацетат с получением 21,58 г (92%) искомого продукта в виде прозрачного желтого масла (61а).
Масс-спектрометрия: 236,1 (М+1 для С14Н2^О2); масло; ТСХ: 81О2, К(0,57 (8:1 гексан/Е1ОАс). Микроанализ: С14Н2^О2.
Расчет: С 71,46; Н 8,99; N 5,95.
Результат анализа: С 71,38; Н 8,92; N 6,10.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2929, 2225, 1728, 1603, 1227.
1Н ЯМР (СБС13): δ 0,83 (1, 3Н, 1=7,3 Гц), 1,07-1,30 (т, 9Н), 1,51-1,56 (т, 1Н), 1,91-2,00 (т, 2Н), 2,042,12 (т, 1Н), 2,23-2,30 (т, 1Н), 2,95-3,01 (т, 1Н), 3,77-3,83 (т, 1Н), 4,20 (ς, 2Н, 1=7,1 Гц).
Этап и. Синтез цис-1-цианометил-4-пропилциклогексанкарбонитрила (61Ь).
2-Циано-(4-н-пропилциклогексилиден)уксусной кислоты этиловый эфир (61а, 19,46 г, 82,70 мМоль) растворяли в Е1ОН (100 мл) и добавляли к суспензии NаСN (4,053 г, 82,70 мМоль) в Е1ОН/Н2О (340 мл/20 мл). Реакционную смесь кипятили под обратным холодильником в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали для удаления выпавшей в осадок соли. Фильтрат концентрировали под вакуумом с получением прозрачного очень вязкого масла желтого цвета. Масло перерастворяли в Е1ОАс и промывали солевым раствором (2х150мл), сушили над Nа28О4 и концентрировали. Остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 19:1 гексан/Е1ОАс с получением 4,69 г 61Ь (74%).
Масс-спектрометрия: ион М+1 не наблюдался (С12Н18^); масло; ТСХ: 81О2, КД38 (3:1 гексан/Е1ОАс).
Микроанализ: С12Н18^.
Расчет: С 75,74; Н 9,53; N 14,72.
Результат анализа: С 76,05; Н 9,58; N 14,90.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2931, 2239, 1453, 758.
1Н ЯМР (СБС13): δ 0,86 (1, 3Н, 1=7,1 Гц), 1,18-1,34 (т, 7Н), 1,42-1,61 (т, 2Н), 1,81-1,83 (т, 2Н), 2,062,09 (т, 2Н), 2,65 (8, 2Н).
-43006597
Этап ίίί. Синтез цис-(1-циано-4-пропилциклогексил)уксусной кислоты этилового эфира (61с). цис-1-Цианометил-4-н-пропилциклогексанкарбонитрил (61Ь, 3,87 г, 20,34 мМоль) растворяли в ЕЮН (50 мл) и толуоле (50 мл), охлаждали до 0°С и насыщали газообразным НС1 в течение 20 мин. Раствор плотно закрывали и оставляли перемешиваться на ночь при комнатной температуре. Затем его концентрировали под вакуумом с получением желтовато-белого твердого вещества. Остаток растирали с этиловым эфиром (200 мл) и сушили под вакуумом, затем растворяли в Н2О (80 мл) и добавляли 1Ν НС1 (4 мл). Реакционная смесь становилась прозрачной через 4 ч перемешивания, после чего ее продолжали перемешивать в течение ночи при комнатной температуре. Через 18 ч в растворе наблюдали образование капель желтого масла. Соединение экстрагировали ЕЮАс (4х200 мл); органические слои объединяли, промывали солевым раствором (2х200 мл), сушили над №28О4 и концентрировали. Остаток подвергали флэш-хроматографии с 19:1 гексан/ЕЮАс с получением 3,27 г продукта (61с, 68%).
Масс-спектрометрия: 238,1 (М+1 для С13Н2^О2); масло; ТСХ: 8Ю2, ВД38 (СН2С12).
Микроанализ: С13Н2^О2.
Расчет: С 70,85; Н 9,77; N 5,90.
Результат анализа: С 70,65; Н 9,72; N 5,84.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2929, 2236, 1736, 1185.
1Н ЯМР (СОС13): δ 0,85 (ί, 3Н, 1=7,1 Гц), 1,19-1,55 (т, 10Н), 1,71-1,74 (т, 2Н), 2,08-2,10 (т, 2Н), 2,59 (з, 2Н), 4,16 (д, 2Н, 3=7,1 Гц).
Этап ίν. Синтез цис-8-пропил-2-азоспиро[4,5]декан-3-она (616).
цис-(1-Циано-4-пропилциклогексил)уксусной кислоты этиловый эфир (61с, 8,27 г, 34,8 мМоль) растворяли в МеОН (90 мл) и обрабатывали триэтиламином и 10% РН/2% Р6/С (0,5 г), после чего встряхивали в атмосфере Н2 (50 рз1) 55 ч. Затем реакционную смесь фильтровали, концентрировали под вакуумом. Остаток хроматографировали на силикагеле, элюируя 5:1 гексан/ЕЮАс с получением 6,41 г (61 б, 94%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 196,1 (М+1 для С12Н2^О); масло; ТСХ: 8Ю2, ВД,38 (гексан/ЕЮАс).
Микроанализ: С|2Н2|М).
Расчет: С 73,80; Н 10,84; N 7,17.
Результат анализа: С 73,86; Н 10,76; N 7,11.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 3192, 2924,1704, 1678.
1Н ЯМР (СОС13): δ 0,83-1,17 (т, 5Н), 1,18-1,39 (т, 7Н), 1,61-1,65 (т, 2Н), 1,71-1,74 (т, 2Н), 2,11 (з, 2Н), 3,16 (з, 2Н), 5,85 (Ьг, 1Н).
Этап ν. Синтез соединения примера 61: (1-аминометил-4-пропилциклогексил) уксусной кислоты гидрохлорида.
8-Пропил-2-азоспиро[4,5]декан-3-он (616, 5,8 г, 29,75 мМоль) обрабатывали концентрированной НС1 (150 мл) и грели при 115°С в течение ночи. Реакционной смеси позволяли остыть до комнатной температуры, наблюдая выпадение осадка. Осадок отфильтровывали с получением 3,47 г белого твердого вещества, а фильтрат охлаждали и перефильтровывали с получением в сумме 6,24 г (99%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 214,1 (М+1 для С12Н2зNΟ2).
Тпл. 142-144°С.
Микроанализ: С12Н2зNΟ2·НС1·0,86Н2Ο.
Расчет: С 58,91; Н 9,83; N 5,72.
Результат анализа: С 59,27; Н 9,60; N 5,71.
1Н ЯМР (СЭзОЭ): δ 0,86-0,90 (т, 3Н), 0,97-1,41 (т, 10Н), 1,61-1,75 (т, 4Н), 2,37 (з, 2Н), 3,13 (з, 2Н). ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2919, 1702, 1525, 1461, 1188.
Пример 62. ((3В,58)-3,5-Диметил-1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
((3В,58)-1-Аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид (59а, 0,50 г, 2,12 мМоль) растворяли в этаноле (45 мл) и обрабатывали Ш №ОН (1,8 мл). Затем добавляли пропионовый альдегид (0,5 мл, 3 экв.) и обрабатывали реакцию РЮ2 (0,2 г). Затем смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 рз1) 3 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли Ш НС1 в эфире (5 мл) и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изопропаноле (100 мл) и фильтровали. Фильтрат концентрировали и перекристаллизовывали из горячего изопропанола (4 мл), Е12О (225 мл) и гексана (150 мл) с получением 200 мг (0,83 мМоль, 39%) продукта.
Масс-спектрометрия: 242,1 (М+1 для С14Н27NΟ2).
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2952 (Ьг), 1686, 1457, 1218.
Микроанализ: С14Н27NΟ2·НС1·0,24Н2Ο.
-44006597
Расчет: С 59,60; Н 10,17; Ν 4,96.
Результат анализа: С 59,68; Н 10,09; Ν 4,64.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,48-0,57 (т, 1Н), 0,78-1,05 (т, 11Н), 1,61-1,78 (т, 7Н), 2,60 (з, 2Н), 2,93-3,00 (т, 4Н).
Пример 63. [(1К,3К)-1-(Бензиламинометил)-3-метилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид.
((1К,3К)-1-Аминометил-3-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид (пример 1, 3,0 г, 13,5 мМоль) растворяли в этаноле (80 мл) и обрабатывали 1Ν №ОН (14 мл, 1+экв.). Затем добавляли бензальдегид (4,5 мл) и 10% Рб/С (1,0 г) и смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 рз1) 2,75 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли 1М НС1 в эфире (20 мл) и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изопропаноле (100 мл), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в минимально необходимом количестве горячего изопропанола и перекристаллизовывали из эфира. Твердую фазу отфильтровывали, а фильтрат охлаждали в течение ночи для получения второй порции кристаллов. Твердую фазу объединяли с получением 1,35 г (36%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 276,1 (М+1 для С17Н25\О2).
Масс-спектрометрия высокого разрешения: (расчет) 276,1963 (результат анализа) 276,1962 (М+1 для С17Н25\О2).
Тпл. 157-158°С.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2932 (Ьг), 1691, 1450, 1201.
Микроанализ: С17Н25\О2НС10,24Н2О.
Расчет: С 64,58; Н 8,44; Ν 4,43.
Результат анализа: С 64,57, Н 8,44, Ν 4,28.
1НЯМР (СП3ОЭ): δ 0,77-1,69 (т, 12Н), 2,42 (з, 2Н), 3,21 (з, 2Н), 4,25 (з, 2Н), 7,43-7,52 (т, 5Н).
Пример 64. {(1К,3К)-1-[(Бензилметиламино)метил]-3-метилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид.
[(1К,3К)-1-(Бензиламинометил)-3-метилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид (пример 63, 1,02 г, 3,27 мМоль) растворяли в этаноле (40 мл) и обрабатывали 1Ν №ОН (3,3 мл, 1+экв.). Затем добавляли формальдегид (2,5 мл) и Р1О2 (0,1 г) и смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 рз1) 8 ч. Реакционную смесь фильтровали, добавляли 1М НС1 в эфире (10 мл) и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изопропаноле (100 мл), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в минимально необходимом количестве горячего изопропанола и перекристаллизовывали из эфира и гексана. Твердую фазу собирали с получением 0,704 г (2,16 мМоль, 66%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 290,1 (С^Н^^Д.
Масс-спектрометрия высокого разрешения: 290,2128 (С18Н27\О2).
Тпл. 204-205°С.
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2926 (Ьг), 1720, 1457, 1387, 1203.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,82-0,98 (т, 5Н), 1,24-1,91 (т, 7Н), 2,38-2,58 (т, 2Н), 2,91 (б, 3Н, 1=11,2 Гц), 3,43-3,54 (т, 2Н), 4,33-4,49 (т, 2Н), 7,50-7,56 (т, 5Н).
Пример 65. ((1К,3К)-3-Метил-1-метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
{(1К,3К)-1-[(Бензилметиламино)метил]-3-метилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид (пример 64, 0,60 г, 1,84 мМоль) растворяли в этаноле (50 мл). Добавляли 20% Рб/С (0,1 г) и смесь встряхивали в атмосфере Н2 (50 рз1) 7 мин. Реакционную смесь фильтровали, добавляли 1М НС1 в эфире (5 мл) и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в горячем изопропаноле (100 мл), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в минимально необходимом количестве горячего изопропанола и перекристаллизовывали из эфира и гексана. Кристаллы представляли собой 0,15 г (35%) искомого продукта.
Масс-спектрометрия: 200,1 (М+1 для С^Щ^ОД.
Масс-спектрометрия высокого разрешения: (расчет) 200,1650 (результат анализа) 200,1646 (М+1 для СцН^О^.
Тпл. 160-161°С.
-45006597
ИК-спектроскопия (КВг, см-1): 2925 (Ьг), 1719, 1457.
Микроанализ: СцН2^02-НС1-0,40Н20.
Расчет: С 54,38; Н 9,46; N 5,77.
Результат анализа: С 54,27; Н 9,36; N 5,65.
1Н ЯМР (СП3ОЭ): δ 0,83-0,97 (т, 5Н), 1,20-1,28 (т, 1Н), 1,42-1,74 (т, 6Н), 2,38 (8, 2Н), 2,73 (8, 3Н), 3,23 (8, 2Н).
Пример 66. Резюме.
Используя ех νίνο модель свежеиссеченной сетчатки крысы, исследовали механизмы поддержания уровня глутамата в тканях мозга в нормальных пределах. Анаплеротический синтез глутамата может быть важным процессом для восполнения глутамата, окисляемого в глие вследствие нейротрансмиссии. В качестве точек контроля уровня в этих бе ηονο метаболических путях были идентифицированы карбоксилирование пирувата и трансаминирование аминокислот с разветвленной цепью. Для проверки взаимоотношений между синтезом глутамата и карбоксилазной активностью, исследовали синтез 14Сглутамата + 14С-глутамина из Н14СО3 как функцию содержания пирувата в среде. Увеличение концентрации пирувата от 0,2 до 5 мМ увеличивает синтез 14С-аминокислот на 66 +/-15%. Удельная радиоактивность глутамина относительно Н14СО3 через 20 мин инкубации показала, что ~30% глутамина в сетчатке происходит из бикарбоната. Для проверки зависимости синтеза глутамата от наличия аминокислот с разветвленной цепью (ВСАА) как источника азота, исследовали эффект ингибирования нейронных аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью (ВСАТс). Габапентин (ГБП) (1мМ), селективный ингибитор ВСАТс в нейронах, ингибировал синтез 14С-глутамата+14С-глутамина из Н14СО3 на 31% без замедления включения Н14СО3 в лактат и интермедиаты цикла лимонной кислоты. Ингибирование синтеза глутамата бе ηονο может быть обращено добавлением 0,6 мМ ВСАА. Существующие данные показывают, что пируваткарбоксилаза и аминотрансфераза, зависимая от аминокислот с разветвленной цепью, обе осуществляют контроль за синтезом глутамата бе ηονο в сетчатке и что синтез глутамата бе ηονο важен в количественном отношении для поддержания уровня глутамата в сетчатке.
Методики Экспериментальные животные
Для экспериментов были использованы крысы 8ргадие Эа\\'1еу (200-400 г). Крыс содержали при 12часовом световом цикле, кормили и поили аб 11Ь1бит. После анестезии крыс нембуталом (внутрибрюшинно) глаза извлекали и иссекали сетчатку в охлажденный на льду буфер.
Включение СО2
Свежевыделенные препараты полуретины проинкубировали при 37°С 3 мин в буфере А (рН 7,4), содержащем 118 мМ №С1, 4,7 мМ КС1, 2,5 мМ СаС12, 1,2 мМ КН2РО4, 1,17 мМ М§§04, 20 мМ НЕРЕ8, 5 мМ глюкозы, 0,05 мМ ΝΠ·|Ο и 25 мМ Να^ΉΟ^ Пируват (либо 0,2, либо 5 мМ) также был включен в буфер. 1 мл буфера, также как и газовую фазу в 20 мл флаконе уравновешивали 95% О2, 5% СО2. Инкубацию инициировали добавлением 10 цС1/мл Н14СО3. Сосуды немедленно закрывали от атмосферы. Наибольшая длительность инкубации составляла 20 мин, хотя в некоторых предварительных исследованиях время инкубации варьировало от 10 до 60 мин. Реакцию останавливали удалением полуретины из буфера и помещением ее в 2% перхлорную кислоту. Буфер отдельно подкисляли перхлорной кислотой (конечная концентрация 2%) и непрореагировавшему 14СО2 позволяли диффундировать из подкисленного образца.
Общее количество продукта (нелетучие 14С-метаболиты) определяли измерением радиоактивности в аликвотах образцов среды и ткани. Метаболиты в экстрактах выделяли с помощью хроматографии на ацетатном Οο\\Ό.χ-1. как описано в \νί11ίηιη5οη, ГК., аиб ^тсеу, В. (1969) Ме11юб8 ίη ΕηζΜο1ο^, νο1. 13, еб. Б^тенМет, ГМ. (Асабетк Ргезз) рр. 434-513, и проводили количественное определение на сцинтилляционном счетчике. В большинстве случаев данные по индивидуальным 14С-метаболитам показаны как сумма радиоактивности в среде и тканевых экстрактах. Полная количественная характеристика 14Сметаболитов как в сетчатке, так и в среде демонстрируется в табл. 1 и 2.
В разделе результатов и обсуждений не демонстрируются данные, собранные в ходе проведения оценки влияния пирувата на включение Н14СО3 в сетчатке. Фиг. 2 показывает только действие пирувата на сумму глутамат+глутамин и сумму пируват+лактат. В табл. 1 демонстрируются значения для всех метаболитов, включивших метку с Н14СО3 и их распределение.
Подобным образом, дополнительные данные, не показанные в разделе результатов и обсуждений, касаются оценки влияния габапентина. Табл. 2 представляет собой более подробные данные, показанные на фиг. 4, и включает значения для всех метаболитов, меченых Н14СО3 и их распределение.
-46006597
Таблица 1
Условия Локализация Глутамин Глутамат Аспартат Лактат Цикл ТКК Всего
Контроль (0.2 Пиру- ват) в 0.59+0.05 1.47+0.29 0.85+0.06 0.16+0.06 1.02+0.26 4.08+0.41
вне 0.61+0.08 0.04+0.01 0.08+0.01 0.55+0.03 0 1.19+0.13
сумма 1.20+0.09 1.51+0.29 0.93+0.08 0.71±0.06 1,02±0.26 5.27+0.45
+5.0 Пируват в 0.91+0.13 2.67+0.29 1.08+0.12 0.29+0.04 2.31+0.13 7.26+0.61
вне 0.96+0.14 0.06±0.01 0.08+0.01 1.18+0.11 0 2.24+0.21
сумма 1.87+0.23 2.73+0.28 1.16±0.12 1.47+0.13 2.31+0.13 9.50+0.74
Таблица 2
Усло- вия Локализация Глутамин Глутама т Аспарта т Лактат Цикл ТКК Всего
Контроль в 0.440 +0.032 1.477 ±0.097 0.634 ±0.038 0.080 ±0.008 1.096 ±0.105 3.715 ±0.266
вне 0.551 +0.036 0.008 +0.001 0.070 ±0.003 0.478 ±0.030 0 1.117 ±0.075
сумма 0.991 +0.054 1.485 +0.096 0.704 ±0.040 0.558 ±0.031 1.096 ±0.105 4.832 ±0.303
+ГБП в 0.389 ±0.026 1.324 +0.025 0.549 ±0.019 0.089 ±0.006 1.514 ±0.103 3.902 ±0.122
вне 0.545 ±0.024 0.008 +0.002 0.035 ±0.003 0.516 ±0.030 0 1.066 ±0.028
сумма 0.934 +0.036 1.332 +0.025 0.584 ±0.022 0.605 ±0.028 1.514 ±0.103 4.968 ±0.028
+ГБП +ВСАА в 0.480 +0.011 1.549 ±0.070 0.609 ±0.021 0.086 ±0.008 1.220 ±0.116 3.989 ±0.043
вне 0.806 +0.086 0.009 ±0.001 0.093 ±0.008 0.458 ±0.048 0 1.322 ±0.076
сумма 1.286 +0.082 1.558 ±0.070 0.702 ±0.016 0.5445 ±0.040 1.220 ±0.116 5.311 ±0.119
Хроматографическая методика, используемая в этом примере, разделяет глутамин, глутамат, аспартат и лактат. Интермедиаты цикла лимонной кислоты остаются на колонке Оошех и оцениваются как разница между общим числом импульсов в образце и числом импульсов в элюированном материале. Доказательства применимости такой методики были приведены ранее. Перед тем как подвергнуть образец хроматографическому разделению, 14С-пировиноградная кислота в образце стехиометрически превращается в лактат путем обработки образца избытком ХАОН и лактатдегидрогеназы. Поэтому единственный 14 на хроматограмме пик лактата содержит весь С, первоначально принадлежавший как лактату, так и пирувату. Чтобы определить удельную активность глутамина и глутамата в образцах сетчатки, массовое количество глутамата измеряли флюориметрически, используя стандартную ферментативную методику; Ра1е1, М.8. (1989) ίη Хеиготе1йо08: СагЬойубга1е апб Епегду Ме1аЬо118т, νο1 II, еб8. ВоиЙоп, А.А. апб Вакег Ο.Ό. (Тйе Нитапа Рге88, Ыс.) рр. 309-340. Массовое количество глутамина определяли после хроматографического отделения от глутамата с последующим, описанным ранее люминометрическим определением. АТФ и креатинфосфат измеряли флюориметрически, используя ферментативную методику.
-47006597
Ретинальный белок определяли используя методику определения белка ОС (Вю-Каб, Ктсйтопб, СА, И8А). Каждая полуретина содержала примерно 0,4 мг белка.
Пируваткарбоксилазная методика
Активность пируваткарбоксилазы определяли на свежих образцах цельного мозга и иссеченной сетчатки. Способ, описанный Ра1е1, М.8. (1989) ίη №иготе1йобх: СагЬойубга1е апб Епегду Ме1аЬойхт, уо1 II, ебх. ВоиЙоп, А.А. апб Вакег Ο.Ό. (Тйе Нитапа Ргехх, 1пс.) рр. 309-340, использовали для измерения включения 14СО2 в оптимальных условиях в тканях, подвергшихся ультразвуковой дезинтеграции.
Белковый блоттинг (^сх1сгп В1о1)
Электрофорез в 8О8-ПААГ был выполнен как описано в Ра1еЬ М.8. (1989) ш №иготе1йобх: СагЬойубга1е апб Епегду МеПЬойхт, уо1 II, ебх. ВоиЙоп, А.А. апб Вакег Ο.Ό. (Тйе Нитапа Ргехх, 1пс.) рр 309340, используя 10% гели. Для иммуноблоттинга белки переносили на мембраны [штоЬПоп Р. Мембраны блокировали 5% БСА и инкубировали с иммуноаффинно очищенными антителами кролик-анти-крыса к пептидам ВСАТс (разведение 1:1000) или иммуноаффинно очищенными антителами кролик-античеловек к пептидам ВСАТт (разведение 1:1000). Иммунореактивные белковые полосы визуализировали с помощью системы ЕСЬ в соответствии с инструкциями производителя (Атегхйат, Аг1тд1оп Не1§й1х, Ш, и8А).
Расчеты и статистика
Данные, изложенные в тексте и на рисунках, представлены как значение брт/мг в конкретном метаболите, деленное на удельную активность НСОз в среде. Поэтому все данные демонстрируются как нМоль Н14СО3/мг белка для любого данного метаболита.
Результаты представлены как среднее ± стандартная погрешность среднего. Статистическая значимость оценивалась спаренным т-тестом и значением р<0,05. Число независимых определений (п) указано в подписях к рисункам и таблицам.
Результаты
Уровень пируваткарбоксилазы сходен в сетчатке и цельном мозге.
Ра1е1 показал, что пируваткарбоксилаза является основным ферментом, утилизирующим СО2 в мозгу взрослых грызунов. Чтобы определить, верно ли это и для сетчатки, активность пируваткарбоксилазы при 37°С в дезинтегрированных ультразвуком тканях неокортекса сравнивали с ее активностью в сетчатке. Уровень в неокортексе (2,9±0,1 нМоль Н14СО3 связ./мин/мг) был сходен с уровнем, обнаруженным в дезинтегрированных ультразвуком тканях сетчатки (3,4±0,4 нМоль Н14СО3 связ./мин/мг), что говорит о том, что пируваткарбоксилаза настолько же активна в сетчатке, насколько и в цельном мозгу.
Уровни включения 14СО2 и появления 14С-глутамата являются функцией уровня пирувата в сетчатке.
В предварительных экспериментах сетчатку инкубировали с 0,2 мМ пирувата как описано ранее в течение 10, 20, 40 и 60 мин. Отслеживали общее содержание 14СО2 и уровни АТФ и креатинфосфата. Уровни АТФ и креатинфосфата оставались постоянными как функция времени, демонстрируя, что контроль окисления и рН были адекватными. Общее включение СО2 (5,50±0,14 нМоль/мг белка) было максимальным между 20 и 40 мин, но достигало 76% от максимума (4,2±0,1 нМоль/мг) уже к 10 мин. Поскольку уровни АТФ (20±0,2 нМоль/мг) и креатинфосфат (16±1,1 нМоль/мг) были высокими и не изменялись со временем, этот максимум показывает, что уровень включения СО2 был постоянным, но постоянный распад нелетучих 14С-продуктов на СО2 и Н2О давал близкий к устойчивому уровень глутамат/глутаминсвязанной радиоактивности на 20-ой минуте.
Чтобы выяснить влияние карбоксилирования пирувата на синтез глутамата, сетчатку инкубировали либо с 0,2, либо с 5 мМ пирувата в среде и анализировали как внутриклеточные, так и внеклеточные метаболиты. Общее включение 14СО2 за 20 мин в присутствии 0,2 мМ пирувата составляло 5,27±0,45 нМоль Н14СО3/мг, тогда как включение в присутствии 5 мМ пирувата - 9,50±0,74 нМоль Н14СО3/мг. Фиг. 2 показывает, что увеличение немеченного пирувата от 0,2 до 5 мМ увеличивает сумму 14С-глутамат+14Сглутамин (от 1,74±0,19 до 2,90±0,31 нМоль/мг, р<0,005). Фиг. 2 также показывает, что инкубация с большим количеством пирувата увеличивает сумму 14С-лактат+14С-пируват. Таким образом, в устойчивом состоянии увеличение концентрации пирувата от 0,2 до 5 мМ увеличивает включение Н14СО3 в глутамат и глутамин на 66%, а в лактат и пируват на 111%. 14С, включаемый в пируват и лактат, включается в глиальное циркулирование через пируваткарбоксилазу, малик-фермент и фосфоэнолпируваткарбоксикиназу и, в первую очередь, демонстрирует активность декарбоксилирования в цикле лимонной кислоты в интактной нервной ткани.
Эти данные демонстрируют, что увеличение пируваткарбоксилазы индуцирует увеличение синтеза бе поуо ретинального глутамата. Одновременно проявляется несколько более крупное увеличение оборота пирувата.
Значительная часть общего синтеза глутамата обусловлена карбоксилированием пирувата.
Важность карбоксилирования пирувата как источника восполнения глутамата, освобождаемого из нервных окончаний сетчатки в ходе нейронной трансмиссии, была продемонстрирована определением удельной активности глутамата в тканях сетчатки, инкубированных со средой, содержащей Н14СО3. Известная часть синтеза глутамина в сетчатке осуществляется из немеченого глутамата, освобождаемого нейронами и захватываемого глией Мюллера. Остальное приходит из глиального α-кетоглутарата, син-48006597 тезируемого анаплеротически из пирувата и 14СО2. Поэтому, удельная радиоактивность глутамина, относительно удельной радиоактивности Н14СО3 дает минимальную величину той части глутамина, который образуется в ходе анаплероза. Продуктом пируваткарбоксилазы в глие является [1,4-14С]-оксалоацетат. Обе позиции 1 и 4 являются мечеными, поскольку 14С, поначалу включенный в позицию 4-С оксалоацетата, затем рандомизируется между позициями 1 и 4 за счет уравновешивания оксалоацетата симметричным фумаратом. Меченый оксалоацетат конденсируется с пируватом с образованием цитрата, который затем изомеризуется в изоцитрат. [1,4-14С]-изоцитрат окисляется и декарбоксилируется в [5-14С]-акетоглутарат с помощью изоцитратдегидрогеназы. Поэтому α-кетоглутарат, синтезируемый анаплеротически, имеет приблизительно половину удельной радиоактивности от первоначального субстрата Н14СО3, в зависимости от степени рандомизации метки в оксалоацетате. Это также верно для глутамина, синтезируемого из [5-14С]-а-кетоглутарата.
Удельную активность глутамина измеряли в экстрактах ретинальной ткани, инкубированных с 0,2 мМ пирувата и Н14СО3 в течение 10, 20, 40 и 60 мин. Данные собраны только для тканевого (не из среды) глутамата. Удельная радиоактивность глутамата в ткани была постоянной между 10-ой и 60-ой минутами. Через 20 мин инкубации массовое количество глутамина в ткани было 4,5±0,44 нМоль/мг, а удельная радиоактивность 1970±115 брт/нМоль или 0,158±0,009 брт/нМоль удельной активности бикарбоната. Это говорит о том, что примерно 32% глутамина продуцируется анаплеротически и пируваткарбоксилазой.
Удельная радиоактивность ретинального глутамата (269±8 брт/нМоль) была ниже, чем у глутамина и также была постоянной в период от 10-ой до 60-ой минуты. Она составляла всего 14% от удельной активности глутамина. Это говорит о том, что метаболизм глутамата в нейронах более быстрый, чем при анаплеротическом синтезе. Однако, поскольку оборот глутамата в нейронах не может восполнить углеродный скелет глутамата, утерянный в ходе нейротрансмиссии, анаплеротический путь имеет особую важность в поддержании уровня глутамата в нейронах. Представленные данные недвусмысленно демонстрируют, что анаплеротический путь обеспечивает значительную часть (~32%) глутамина, необходимого для восполнения глутамата.
Синтез ретинального глутамата и глутамина частично зависит от транс-аминирования аминокислот с разветвленной цепью.
Недавние исследования синтеза глутамата в культурах астроцитов позволяют предположить, что стадия превращения α-кетоглутарата в глутамат может служить в качестве стадии контроля в анаплеротическом синтезе глутамата. Несколько групп показали, что α-аминогруппа глутамата не может происходить от аммиака и должна быть поэтому доставлена путем трансаминирования α-кетоглутарата с другой аминокислотой: Капатоп, К., Ко88, Β.Ό., апб Копбга1, К. А. (1998) 1. №игосйет. 70, 1304-1315, Ьаеттй, и.К. (1970) №11иге 227, 680-885, включая нашу собственную НаЬеггд, А., Он, Н., Ваккеп, I.!, 8апбе, Ь.М., \У1Ше. Ь.К., Нага1б8е!й, О., Ип8дагб, 6., А881еу, 1., 8оппе\\'а1б. и. (1998) Эеу. №υΐΌ8α. 20, 389-398. Аминокислоты с разветвленной цепью, вероятно, являются источником азота, поскольку они могут эффективно пересекать гематоэнцефалический и гематоретинальный барьеры. Ни18оп с сотр. предположил, что азотный челнок между нейронами и глией, который включает аминокислоты с разветвленной цепью и два изофермента ВСАТ: один из цитозоля нейронов (ВСАТс), а другой из глиальных митохондрий (ВСАТт), может также обеспечивать азотом: Ни18оп, 8.М., Вегкюй, Ό., Эо^п, Р., Хи, В., А8супег, М., апб Ьа^ие, К.Е. (1998) 1. №игосйет, 71 863-874. В соответствии с этим гипотетическим челноком, нейронные ВСАТс помогают глиальной конверсии α-кетоглутарата в глутамат с участием ВСАТт, обеспечивая регенерируемые в нейронах ВСАА (см. фиг. 1).
В качестве первого шага к изучению роли изоферментов ВСАТ в синтезе глутамата бе ηоνо в сетчатке, был использован иммуноблоттинг с ВСАТс и ВСАТт-специфическими антителами, чтобы выяснить экспрессируются ли изоферменты ВСАТ в сетчатке крысы. Как показано на фиг. 3, и ВСАТс и ВСАТт экспрессируются в сетчатке на уровне, сравнимом с уровнем, обнаруженным в гомогенатах цельного мозга. Поэтому, свежеиссеченная сетчатка крысы представляет собой вполне подходящую интактную нейросистему для изучения концепции азотного челнока между нейронами и глией.
Аналог лейцина габапентин (ГБП) является нейроактивным препаратом, который ингибирует ВСАТс, но не ВСАТт: 8и, Т.-Ζ., Ьиппеу, Е., СатрЬе11, 6., Охепбег, О.Ь. (1995) 1. №игосйет, 64, 21252131. Было подтверждено, что ГБП ингибирует синтез лейцина в свеже-иссеченных сетчатках крыс (данные не показаны). Эффект ГБП на синтез 14С-глутамат+14С-глутамина из Н14СО3 в сетчатке крысы ех νί\Ό был измерен. Как показано на фиг. 4, 1 мМ ГБП подавляет образование 14С-глутамат+14Сглутаминна на 71% от контрольной величины (2,26±0,05 против 3,18±0,12 нМоль/мг, р<0,001). Добавление по 200 рМ лейцина, изолейцина и валина обращает ингибирование на 89% от контроля (2,84±1,15 нМоль/мг, р<0,01 против только ГБП). Действие ГБП на АТФ или креатинфосфат не было обнаружено, что говорит о том, что ГБП не подавляет биоэнергетические процессы в сетчатке. Небольшое увеличение включения 14С в лактат и интермедиаты цикла лимонной кислоты (от 1,93±0,06 до 2,12±0,13) обусловленное наличием 1 мМ ГБП, не является значительным. Включение метки во все метаболиты показано в табл. 2.
-49006597
Дальнейшие эксперименты были проведены для исследования свойств ГБП доза/ответ. Свежеиссеченную сетчатку инкубировали 20 мин в буфере А, содержащем 0, 0,2, 1 или 5 мМ ГБП. Как показано на фиг. 5, увеличение концентрации ГБП более 1 мМ не приводит к заметному увеличению ингибирования синтеза 14С-глутамат+14С-глутамина из Н14СО3. Также ГБП не влияет на образование интермедиатов цикла лимонной кислоты, лактата и пирувата (фиг. 5). Это подтверждает предположение, что участком, который ГБП ингибирует в синтезе глутамина, является опосредованная ВСАТ конверсия αкетоглутарата в глутамат.
Обсуждение
Описываемые исследования относятся к механизмам поддержания уровня глутамата в ЦНС. Прежние исследования показали, что глутаматсинтетаза необходима в сетчатке и гиппокампальных срезах для поддержания уровня нейронного глутамата: 8и, Т.-Ζ., Ьиппеу, Е.,СатрЬе11, С., Охеп6ег, Л.Ь. (1995) 1. №игоскет, 64, 2125-2131.
Иммуноцитохимические измерения показали, что 90% или более ретинального глутамата и глутамата цельного мозга является нейронным, и что ингибирование глутаминсинтетазы в течение 90 мин истощает нейронный запас глутамата до незначительного уровня: О11ег8еп, О.Р., Ζ1ι;·ιη§. Ν., ап6 Аа1Ьегд, Е. (1992) №иго8С1. 46, 519-534. Это показывает, что глутаминсинтетаза необходима для поддержания уровня нейронного глутамина. Хотя глутамат может быть синтезирован в нейронах из α-кетоглутарата, удаление пируваткарбоксилазы или другого анаплеротического фермента препятствует восполнению αкетоглутарата, и, таким образом, предотвращает синтез глутамата внутри нейронов, за исключением пути через глутаминазу.
В этом примере источники и контроль синтеза глутамина исследовали с помощью инкубации иссеченной сетчатки с Н14СО3 и измерением появления и удельной радиоактивности 14С-глутамина и 14Сглутамата. Больше 14С-глутамина синтезируется в присутствии 5 мМ пирувата, чем в присутствии 0,2 мМ пирувата. Это показывает, что пируваткарбоксилазная активность влияет на объем синтеза глутамина. Однако, недостаточная чувствительность этого типа контроля демонстрируется наблюдением, что когда пируват увеличивают от 0,2 до 5 мМ, величина возрастания пируваткарбоксилазы (80,3%) не вызывает эквивалентного увеличения 14С-глутамина+14С-глутамата (69,0%). Гибкость этого контроля обеспечивается потенциалом декарбоксилирования цикла лимонной кислоты и обмена пирувата. Зависимость от пирувата общего включения Н14СО3 в тканях сетчатки подобна той, что наблюдалась в астроцитах: СатЬегшо, А.С., Вегкюк, Л.А., Ыпск С.Е, Хи, В., ап6 Б-аХоие, К.Е. (1997) 1. №игоскет. 69, 23122325. Однако в астроцитах, которые не имеют путей для регенерации эндогенных ВСАА, используемых для трансаминирования α-кетоглутарата, пируват-индуцируемое увеличение утилизации СО2 не приводит к увеличению уровня 14С-глутамина и 14С-глутамата. Вместо этого, 14С накапливается в интермедиатах цикла лимонной кислоты и в рециркулирующем пирувате.
В ретинальных исследованиях, описанных здесь, удельная радиоактивность глутамина в устойчивом состоянии составляла 0,158 от удельной активности бикарбоната. Поскольку примерно половина 14С, включенного в оксалоацетат, оказывалось в α-кетоглутарате, результаты показывают, что ~32% глутамина происходит из Н14СО3. Это первое прямое доказательство вклада анаплероза в синтез глутамата в нервной ткани. Предыдущие доказательства были непрямыми и включали изотопомерный анализ ЯМРспектров после инфузии 13С-глюкозы (3-5, 11-13) в интактный мозг. Оценка вклада карбоксилирования пирувата в синтез глутамата используя такие ЯМР-методы, давала более низкие величины в диапазоне от менее чем 1% (3) до 5-10% (4,5) и до 20-25%: 81апк, К.Р., Веппе1, С.8., Егеу1ад, 8.О., ап6 СатрЬе11, С.Ь. (1985) Вгат Ке8. 329, 364-367, СпНеп, 1.Б., Кае, С., Ка66а, С.К., ап6 Ма11еу8, Р.М. (1999) ВюсЫт. Вюр11у8. Лс1а 1450, 297-307, в зависимости, очевидно, от первоначальных допущений в используемой математической модели. Приведенные результаты позволяют предположить, что глиальное карбоксилирование пирувата и конверсия интермедиатов цикла лимонной кислоты в глутамат и глутамин, видимо важны в количественном отношении для ретинальной функции и возможно в целом для функции мозга.
Наблюдение, что ГБП замедляет конверсию интермедиатов цикла лимонной кислоты в глутамин и глутамат явно наводит на мысль, что нейронный синтез ВСАА с помощью ВСАТс необходим для оптимального уровня аминирования α-кетоглутарата в глутамат. Соответствующая схема вовлечения в этот процесс показана на фиг. 1.
Результаты, показывающие ингибирование синтеза 14С-глутамат+14С-глутамина из Н14СО3 габапентином и обращение ингибирования ВСАА, вполне соответствуют описанному ранее челноку. Эта гипотеза также дает возможность объяснения анти-эпилептического действия ГБП: Тау1ог, С.Р., Сее, Ν.8., 8и, Τ.Ζ., Кос818, ΕΌ., Ае11у, Ό.Ρ., Вго\уп, ЕР., Лоо1еу, Ό.Ε, Во6еп, 8тдЬ, Ь. (1998) Ер11ер8у Ке8. 29, 233-249. Действительно, подавление синтеза глутамата является общим действием ГБП и антиэпилептических карбоангидразных ингибиторов: Нахеп, 8.А., Аа11ее6, А., 81у, А.8., БаХоие, К.Е., Ьупск, С.1. (1997) Эеу. №иго8ск19, 162-171. Кроме того, болезнь кленового сиропа - наследственное заболевание, вызываемое мутацией гена дегидрогеназы кетокислот с разветвленной цепью, если ее не лечить, вызывает большое содержание ВСАА в сыворотке у пациентов и последующие нейрологические осложнения: С1шапд, Ό.Ε Ап6 81пп, МЕ. (1995) ш Т11е Ме1аЬо1ю Ва818 о! !п11еп1е6 Л18еа8е, е68. 8сЬпуег, С.К., Веаи6е1, А.Ь, 81у, 8.,
-50006597 апб ναΐ16, Ώ. (МсОга^-НШ) ρρ. 1239-1277, которые могут быть связаны с ненормальной регуляцией синтеза глутамата. Наконец, участие азотного челнока в ходе синтеза глутамата следует изучать далее в свете эффективности ГБП при лечении нейропатических болей: ОЯегзеп, О.Р., /Капу. Ν. апб Ша1Ьегч. Р. (1992) №игозст 46, 519-534 и нейродегенеративных заболеваний, СКиапч. Ώ.Ι. апб 8ЫК, ν.Ε. (1995) т ТКе МеΐаЬо1^с Ваз1з оЕ 1пКегРеб Э1зеазе, ебз. 8сКгкег, С.К., Веаибер Л.Ь., 81у, 8., апб Vа^1е, Ώ. (МсОга^Н111) ρρ. 1239-1277, КоШзеРп, Ι.Ώ. апб Кипс1, О, (1995) I. №игосЬеп1. 65, 643-651.
Пример 67.
Получение фермента: замороженные мозги крыс оттаивали на льду и разрезали на мелкие кусочки. К каждому мозгу добавляли 5 мл изотонического буфера [225мМ маннита, 75 мМ сахарозы, 5мМ МОР8 (рН 7,1), 1 мМ ЭДТА, 1 мМ ДТТ, содержащий лейпептин, пепстатин и ПМСФ]. Образцы гомогенизировали в гомогенизаторе Поттера (В. Вгап ВкИесК I п1егпа11опа1) при 500 об./мин (10 заходов) и при 800 об./мин (10 заходов). Гомогенат центрифугировали в центрифуге Весктап 12-М1, ротор ΙΆ-20 при 19000 об./мин 1 ч. Супернатант диализовали против как минимум 3х смен диализного буфера (225 мМ маннит, 75 мМ сахароза, 5 мМ МОР8 рН 7,1, 1 мМ ЭДТА, 1 мМ ЭГТА и 1 мМ ДТТ) в течение 24 ч. Полученный фермент хранили на -80°С для дальнейшего использования.
ВСАТ-процедура: реакцию проводили в 1,5 мл пробирках Эппендорф в объеме 100 мкл, содержащем 50 мМ Трис.НС1 (рН 8,3), 25 мкл [14С]Ь-лейцина, 10 мМ 2-оксоглутарата, 15 мкМ пиридоксальфосфата, 1 мМ ДТТ и фермент. Растворы для реакционной смеси были сделаны в 10-кратной концентрации. Через 10 мин инкубации при комнатной температуре (22°С) реакцию останавливали добавлением 100 мкл 15 мМ п-нитрофенилгидразина в 2М НС1. Через несколько минут добавляли 1 мл сцинтилляционной жидкости на основе толуола (4,5 г РРО и 0,5 г бис-М8В в 1 л толуола). Пробирки закрывали и тщательно перемешивали на миксере Vо^ιеx. Затем пробирки центрифугировали при 13500 об./мин (центрифуга Ερρеηбо^Е 5415С) 10 мин. 600 мкл органического слоя из каждой пробирки помещали в сцинтилляционные флаконы и добавляли по 10 мл сцинтилляционной жидкости для счета.
Пример №
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
гВСАТс 1С50(мкМ)
146
1136
1660
2515
2934
2620
2165
74
120
121
1387
1490
>10000
8592
82
1319
>10000
...
...
469
169
389
2121
942
170
8592
1553
-51006597

Claims (14)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы ГУ где Кд-Кд означают водород или С1-С10-алкил;
    Х означает ΝΚ5;
    К5 означает водород или С1-С10-алкил,
    Кб означает С1-С10-алкил; бензил; С4-С9-арил-С1-С10-алкил, в котором от 1 до 4 кольцевых атомов арила могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или Ν; С1-С10-алкокси; С3-С10-циклоалкил, в котором от 1 до 3 атомов углерода могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или NК2, где К2 означает водород или С1-С10-алкил; аллил; С1-С10-алкил-С3-С10-циклоалкил, в котором от 1 до 3 кольцевых атомов циклоалкила могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или NК2, где К2 имеет вышеуказанное значение; тризамещенный галоген-С1-С10-алкил; причем указанные алкильные, алкоксильные, аллильные группы могут быть замещены, предпочтительно 1-3 группами, выбранными из группы, включающей ИК4К5, где К4 и К5 означают водород или С1-С10-алкил, незамещенный или замещенный фенил, тио-С1-С6-алкил, С1-С6-алкокси, гидрокси, карбокси, С1-С6-алкоксикарбонил, галоген, нитрил, С3-С10-циклоалкил, и 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, выбранного из группы, включающей азот, который, в свою очередь, может быть замещен С1-С6-алкилом или незамещенным или замещенным галогеном (СН2)пфенилом, где η означает 1, 2 или 3, кислород и серу; и причем указанные циклоалкильные группы могут быть замещены гидроксигруппой или кетогруппой, а указанные арильные и бензильные группы могут быть замещены 1, 2 или 3 группами, выбранными из перечня, включающего С1-С10-алкил, возможно замещенный как указано выше, С1-С10-алкоксил, возможно замещенный как указано выше, тиогруппу, тио-С1-С10-алкил, гидрокси, карбонил, группу формулы -NК4К5, Т(СН2)трК4 или Т(СН2)тСО2К4, где т означает от 1 до 6, Т означает О, 8, NК4, ^О)К4, NК4К6 или СК4К5, О означает О, 8, NК5, МО)К5 или NК5К6, где К4 и К5 определены как выше, а К6 означает незамещенный или замещенный как указано выше С1-С10-алкил;
    и если К1-К4 каждый означают водород, то К6 не означает метил; или его фармацевтически приемлемая соль, сложный эфир или амид.
  2. 2. Соединение по п.1, где К2 и К4 означают водород, а К1 и К3 означают С1-С10-алкил; К2 и К4 означают водород, а К1 и К3 означают метил; К1-К4 означают водород; К1 означает С1-С10-алкил, а К2-К4 означают водород; К1 означает метил, а К2-К4 означают водород; К5 означает водород; Х означает N^5; Х означает О; Кб означает С1-С10-алкил; Кб означает бензил; К6 означает фенил-С1-С10-алкил; Кб означает С3С10-циклоалкил, в котором по меньшей мере один кольцевой атом циклоалкила может быть заменен гетероатомом, выбранным из О, 8 или NК2, где К2 имеет вышеуказанное значение; К6 означает трифтор-С1С10-алкил; К6 означает С1-С10-алкил-С3-С10-циклоалкил, в котором по меньшей мере один кольцевой атом циклоалкила может быть заменен гетероатомом, выбранным из О, 8 или NК2, где К2 имеет вышеуказанное значение; К6 означает С1-С10-алкоксигруппу и К6 означает аллил, причем указанные группы могут быть замещены как указано выше.
  3. 3. Соединение по п.1, где К2 и К4 означают водород, а К1 и К3 означают метил; К1-К4 означают водород; К1 означает метил, а К2-К4 означают водород; К5 означает водород; Х означает NК5; К6 означает С1-С10-алкил; К6 означает бензил; К6 означает фенил-С1-С10-алкил; К6 означает С3-С10-циклоалкил, в котором по меньшей мере один кольцевой атом циклоалкила может быть заменен гетероатомом, выбранным из О, 8 или NК2, где К2 имеет вышеуказанное значение; К6 означает трифтор-С1-С10-алкил; К6 означает С1-С10-алкил-С3-С10-циклоалкил, в котором по меньшей мере один кольцевой атом циклоалкила может быть заменен гетероатомом, выбранным из О, 8 или NК2, где К2 имеет вышеуказанное значение; К6 означает С1-С10-алкоксигруппу и К6 означает аллил, причем указанные группы могут быть замещены как указано выше.
  4. 4. Соединение по п.1, где К2 и К4 означают водород, а К1 и К3 означают метил; К1-К4 означают водород.
  5. 5. Соединение по п.1, выбранное из группы, включающей
    1а,3р,5р-(3,5-диметил-1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3р,5р-(1-этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    1α,3β,5β-[(1 -бензиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
    1 α,3 р,5р-(1-диметиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    1 α,3 в,5в-(1-бутиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-{1-[(бензилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-(3,5-диметил-1-метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[1-(изобутиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[3,5-диметил-1-(фенэтиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
    1 α,3 в,5в-{3,5-диметил-1-[(3 -фенилпропиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    {1-[(циклобутилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[1-(изопропиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(2-метилбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    {1-[(4,4,4-трифторбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; (1-этиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    {1-[(циклопропилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(изобутиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
    (1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(изопропиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
    -53006597 (1-циклогексиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    [1-(бензиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
    ((1К,3К)-3-метил-1 -пропиламинометилциклогексил )уксусной кислоты гидрохлорид;
    {1-[(циклопентилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    {1-[(циклогексилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    [1 -(трет-бутоксикарбониламинометил)циклогексил]уксусную кислоту;
    {(3К,58)-[(1-циклобутиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    {(3К,58)-3,5-диметил-1-[(2-метилбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    {(3К,58)-1-[(2,2-диметоксиэтиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил }уксусной кислоты гидрохлорид;
    {(3К,58)-1-[(циклопентилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    {(3К,58)-1-[(циклогексилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    ((3К,58)-1-циклогексиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-бутиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    {1-[(2,2-диметоксиэтиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(бензилметиламино)метил] циклогексил }уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(фенэтиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
    {1-[(3-фенилпропиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    ((3К,58)-1-этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    ((3К,58)-3,5-диметил-1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    [(1К,3К)-1 -(бензиламинометил)-3-метилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
    {(1К,3К)-1-[(бензилметиламино)метил]-3-метилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид или ((1К,3К)-3-метил-1-метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
  6. 6. Способ лечения диабетической ретинопатии, включающий стадию назначения терапевтически эффективного количества соединения формул I, II и/или III нуждающемуся в этом пациенту где К9 означает Н; С1-С10-алкил; С3-С10-циклоалкил, в котором от 1 до 3 атомов углерода могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или ΝΚ2, где К2 означает водород или С1-С10-алкил; замещенный С1-С10-алкил, содержащий галоген, амин, С1-С10-алкоксигруппу, С3-С10-циклоалкил или гидроксил; аллил; С2-С6-алкинил; С1-С10-алканоил; С1-С10-алкокси-С1-С10-алканоил; сульфонил; фенил; бензил или С4-С9-арил-С1-С10-алкил, в котором от 1 до 4 кольцевых атомов арила могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или Ν; причем указанные алкильные, алкоксильные, алкинильные, алканоильные или аллильные группы могут быть замещены, предпочтительно 1-3 группами, выбранными из группы, включающей ΝΚ4Κ5, где К4 и К5 означают водород или С1-С10-алкил, незамещенный или замещенный фенил, тио-С1-С6-алкил, С1-С6-алкокси, гидрокси, карбокси, С1-С6-алкоксикарбонил, галоген, нитрил, С3С10-циклоалкил, и 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, выбранного из группы, включающей азот, который в свою очередь может быть замещен С1-С6-алкилом или незамещенным или замещенным галогеном (СН2)ифенилом, где и означает 1, 2 или 3, кислород и серу; и причем указанные циклоалкильные группы могут быть замещены гидроксигруппой или кетогруппой, а указанные арильные, фенильные и бензильные группы могут быть замещены 1, 2 или 3 группами, выбранными из перечня, включающего С1-С10-алкил, возможно замещенный как указано выше, С1-С10-алкоксил, возможно замещенный как указано выше, тиогруппу, тио-С1-С10-алкил, гидрокси, карбонил, группу формулы -ΝΚ4Κ5, Т(СН2)трК4 или Т(СН2)тСО2К4, где т означает от 1 до 6, Т означает О, 8, ΝΚ4, МО)К.4. ΝΚ4Κ6 или СК4К5, О означает О, 8, ΝΚ5, МО)К.5 или ΝΚ5Κ6, где К4 и К5 определены как выше, а К6 означает незамещенный или замещенный как указано выше С1-С10-алкил;
    т и и означают независимо целое число от 1 до 3;
    К1-К8 и К10-К14 означают независимо Н, незамещенный или замещенный как выше указано С1-С10алкил; и Х=ХК44, причем где существует более чем 1 стереоизомер, каждый хиральный центр может независимо быть К или 8; или их фармацевтически приемлемую соль, сложный эфир или амид.
  7. 7. Способ по п.6, где т и и означают 1; Х означает ΝΗ14; К9 означает Н; К4 означает метил; К4 и К5 означают метил; К8 означает метил; К10 означает метил; К7 и К8 означают метил; К4 и К8 означают метил; К1-К8 и К10-К13 означают Н; К9 означает С1-С10-алкил; К9 означает бензил; К14 означает С1-С10-алкил; К9 означает С4-С9-арил-С1-С10-алкил; К9 означает С3-С10-циклоалкил; К1-К8 означают Н; К1-К8 и К10-К11 означают Н; К1-К2 и К7-К8 означают Н или К2 означает метил, причем указанные группы могут быть замещены как указано выше.
  8. 8. Способ по п.6, где К3 означает С1-С10-алкил, К1-К2 и К4-К11 и К14 означают водород, т и и означают 1, а Х означает ΝΗ14; К3 и К11 означают С1-С10-алкил, К1-К2 и К4-К10 и К14 означают водород, т и и означают 1, а Х означает ΝΗ14; К3 и К11 означают С1-С10-алкил, К1-К2 и К4-К10 и К14 означают водород, т и и означают 1, К9 означает С1-С10-алкил, а Х означает ΝΗ14; и К1-К11 и К14 означают водород, т и и означают 1, а Х означает О, причем указанные группы могут быть замещены как указано выше.
  9. 9. Способ по п.6, где соединение выбрано из группы, включающей
    1 а,3 в,5р-(1-аминометил-3,5-диэтилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; транс-(1К,3К)(1-аминометил-3-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-аминометил-2-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-аминометил-3,3-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (+/-)(транс)-(1-аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид; (цис/транс)-(3К)-( 1 -аминометил-3-метилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид; (+)(транс)-(1 -аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    1 а,3 в,5в-(1-аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-(3,5-диметил-1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    1 а,3 в,5в-(1-этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1α,3β,5β-[(1 -бензиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
    1 а,3 в,5в-(1-диметиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    1 а,3 в,5в-(1-бутиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-{1-[(бензилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-(3,5-диметил-1-метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[1-(изобутиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(циклобутилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[1-(изопропиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; 1-аминометил-1 -циклогексануксусную кислоту;
    1-аминометил-1 -циклопентануксусную кислоту;
    1-аминометил-1-циклопентануксусной кислоты натриевая соль; {1-[(2-метилбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(4,4,4-трифторбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; (1-этиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    {1-[(циклопропилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(2-гидрокси-1-метилэтиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(изобутиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
    (1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(изопропиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(циклогексиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(бензиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
    ((1К,3К)-3 -метил-1 -пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(циклопентилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(циклогексилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    -55006597 [1-(трет-бутоксикарбониламинометил)циклогексил]уксусную кислоту;
    {(3К,58)-1-[(циклобутиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил(уксусной кислоты гидрохлорид; {(3К,58)-3,5-диметил-1-[(2-метилбутиламино)метил]циклогексил(уксусной кислоты гидрохлорид; {(3К,58)-1-[(2-гидрокси-1 -метилэтиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил(уксусной кислоты гидрохлорид;
    {(3К,58)-1-[(2,2-диметоксиэтиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил (уксусной кислоты гидрохлорид;
    {(3К,58)-1-[(циклопентилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил(уксусной кислоты гидрохлорид;
    {(3К,58)-1-[(циклогексилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил(уксусной кислоты гидрохлорид;
    ((3К,58)-1 -циклогексиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-диметиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    (1-бутиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(2,2-диметоксиэтиламино)метил]циклогексил(уксусной кислоты гидрохлорид;
    (1-метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    {1-[(бензилметиламино)метил]циклогексил(уксусной кислоты гидрохлорид; ((3К,58)-1-этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-аминометил-4-этилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    (1-аминометил-4-пропилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид или ((3К,58)-3,5-диметил-1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
  10. 10. Способ ингибирования аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью, у пациентов, нуждающихся в этом, включающий стадию назначения терапевтически эффективного количества соединения формул I, II и/или III где К9 означает Н; С1-С10-алкил; С3-С10-циклоалкил, в котором от 1 до 3 атомов углерода могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или ПК2, где К2 означает водород или С1-С10-алкил; замещенный С1-С10-алкил, содержащий галоген, амин, С1-С10-алкоксигруппу, С3-С10-циклоалкил или гидроксил; аллил; С2-С6-алкинил; С1-С10-алканоил; С1-С10-алкокси-С1-С10-алканоил; сульфонил; фенил; бензил или С4-С9-арил-С1-С10-алкил, в котором от 1 до 4 кольцевых атомов арила могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или Ν; причем указанные алкильные, алкоксильные, алкинильные, алканоильные или аллильные группы могут быть замещены предпочтительно 1-3 группами, выбранными из группы, включающей ХК4К5, где К4 и К5 означают водород или С1-С10-алкил, незамещенный или замещенный
    -56006597 фенил, тио-С1-С6-алкил, С1-С6-алкокси, гидрокси, карбокси, С1-С6-алкоксикарбонил, галоген, нитрил, С3С10-циклоалкил, и 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, выбранного из группы, включающей азот, который, в свою очередь, может быть замещен С1 -С6-алкилом или незамещенным или замещенным галогеном (СН2)пфенилом, где η означает 1, 2 или 3, кислород и серу; и причем указанные циклоалкильные группы могут быть замещены гидроксигруппой или кетогруппой, а указанные арильные, фенильные и бензильные группы могут быть замещены 1, 2 или 3 группами, выбранными из перечня, включающего С1-С10-алкил, возможно замещенный как указано выше, С1-С10-алкоксил, возможно замещенный как указано выше, тиогруппу, тио-С1С10-алкил, гидрокси, карбонил, группу формулы -ИКК5, Т(СН2)шЦК4 или Т(СН2)шСО2К4, где ш означает от 1 до 6, Т означает О, 8, ЯК4, N(9)^, N4% или СК4К5, 9 означает О, 8, НК5, или где
    К4 и К5 определены как выше, а К6 означает незамещенный или замещенный как указано выше С1-С10алкил;
    ш и η означают независимо целое число от 1 до 3;
    К1-К8 и К10-К14 означают независимо Н, незамещенный или замещенный как выше указано С1-С10алкил; и Х=NΚ14, причем где существует более, чем 1 стереоизомер, каждый хиральный центр может независимо быть К или 8; или их фармацевтически приемлемую соль, сложный эфир или амид.
  11. 11. Способ по п.10, где ш и η означают 1; Х означает N844; К9 означает Н; К4 означает метил; К4 и К5 означают метил; К8 означает метил; К10 означает метил; К7 и К8 означают метил; К4 и К8 означают метил; К1-К8 и К10-К13 означают Н; К9 означает С1-С10-алкил; К9 означает бензил; К14 означает С1-С10-алкил; К9 означает С4-С9-арил-С1-С10-алкил; К9 означает С3-С10-циклоалкил; К1-К8 означают Н; К1-К8 и К10-К11 означают Н; К1-К2 и К7-К8 означают Н или К2 означает метил, причем указанные группы могут быть замещены как указано выше.
  12. 12. Способ по п.10, где К3 означает С1-С10-алкил, К1-К2 и К4-К11 и К14 означают водород, ш и η означают 1, а Х означает №14; К3 и К11 означают С1-С10-алкил, К1-К2 и К4-К10 и К14 означают водород, ш и η означают 1, а Х означает N^44; К3 и К11 означают С1-С10-алкил, К1-К2 и К4-К10 и К14 означают водород, ш и η означают 1, К9 означает С1-С10-алкил, а Х означает N^44; и К1-К11 и К14 означают водород, ш и η означают 1, а Х означает О, причем указанные группы могут быть замещены как указано выше.
  13. 13. Способ по п.10, где соединения выбраны из транс-(1К,3К)(1-аминометил-3-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-аминометил-2-метилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-аминометил-3,3-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (+/-)(транс)-(1-аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид; (цис/транс)-(3К)-( 1 -аминометил-3-метилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид; (+)(транс)-(1 -аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид; (+)(транс)-(1 -аминометил-3,4-диметилциклопентил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    1 α,3 в,5в-(1-аминометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-(3,5-диметил-1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    1 α,3 в,5в-(1-этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1α,3β,5β-[(1 -бензиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
    1 α,3 в,5в-(1-диметиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    1 α,3 в,5в-(1-бутиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-{1-[(бензилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-(3,5-диметил-1-метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[1-(изобутиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(циклобутилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; 1а,3в,5в-[1-(изопропиламинометил)-3,5-диметилциклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; 1-аминометил-1 -циклогексануксусная кислота;
    1-аминометил-1 -циклопентануксусная кислота;
    1-аминометил-1-циклопентануксусной кислоты натриевая соль; {1-[(2-метилбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(4,4,4-трифторбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; (1-этиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    {1-[(циклопропилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(2-гидрокси-1-метилэтиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(изобутиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; (1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(изопропиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид; (1-циклогексиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; [1-(бензиламинометил)циклогексил]уксусной кислоты гидрохлорид;
    ((1К,3К)-3 -метил-1 -пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(циклопентилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    -57006597 {1-[(циклогексилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    [1 -(трет-бутоксикарбониламинометил]циклогексил }уксусная кислота;
    {(3К,58)-1-[(циклобутиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид; {(3К,58)-3,5-диметил-1-[(2-метилбутиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    {(3К,58)-1-[(2-гидрокси-1-метилэтиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    {(3К,58)-1-[(2,2-диметоксиэтиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    {(3К,58)-1-[(циклопентилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    {(3К,58)-1-[(циклогексилметиламино)метил]-3,5-диметилциклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    ((3К,58)-1-циклогексиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-диметиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    (1-бутиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(2,2-диметоксиэтиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    (1-метиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; {1-[(бензилметиламино)метил]циклогексил}уксусной кислоты гидрохлорид;
    ((3К,58)-1 -этиламинометил-3,5-диметилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид; (1-аминометил-4-этилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид;
    (1-аминометил-4-пропилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид или ((3К,58)-3,5-диметил-1-пропиламинометилциклогексил)уксусной кислоты гидрохлорид.
  14. 14. Способ лечения нейрологических расстройств, депрессии, тревожного состояния, панического состояния, мании, биполярных расстройств, антивоспалительных заболеваний, глаукомы, боли или желудочно-кишечных нарушений, включающий стадию назначения терапевтически эффективного количества соединения формулы IV нуждающемуся в этом пациенту где К1-К4 означают водород или С1-С10-алкил;
    Х означает ΝΕ^;
    К5 означает водород или С1-С10-алкил;
    К6 означает С1-С10-алкил; бензил; С4-С9-арил-С1-С10-алкил, в котором от 1 до 4 кольцевых атомов арила могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или Ν; С1-С10-алкокси; С3-С10-циклоалкил, в котором от 1 до 3 атомов углерода могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или ΝΕ2, где К2 означает водород или С1-С10-алкил; аллил; С1-С10-алкил-С3-С10-циклоалкил, в котором от 1 до 3 кольцевых атомов циклоалкила могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, 8 или ХК2, где К2 имеет вышеуказанное значение; тризамещенный галоген-С1-С10-алкил; причем указанные алкильные, алкоксильные аллильные группы могут быть замещены, предпочтительно 1-3 группами, выбранными из группы, включающей \К4К5, где К4 и К5 означают водород или С1-С10-алкил, незамещенный или замещенный фенил, тио-С1-С6-алкил, С1-С6-алкокси, гидрокси, карбокси, С1-С6-алкоксикарбонил, галоген, нитрил, С3-С10-циклоалкил, и 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, выбранного из группы, включающей азот, который, в свою очередь, может быть замещен С1-С6-алкилом или незамещенным или замещенным галогеном (СН2)пфенилом, где η означает 1, 2 или 3, кислород и серу; и причем указанные циклоалкильные группы могут быть замещены гидроксигруппой или кетогруппой, а указанные арильные и бензильные группы могут быть замещены 1, 2 или 3 группами, выбранными из перечня, включающего С1-С10-алкил, возможно замещенный как указано выше, С1-С10-алкоксил, возможно замещенный как указано выше, тиогруппу, тио-С1-С10-алкил, гидрокси, карбонил, группу формулы ^К4^, Т(СН2)трК4 или Т(СН2)тСО2К4, где т означает от 1 до 6, Т означает О, 8, Ж4, ХО)^, МПК или СК4К5, р означает О, 8, Ж5, ^О)К5 или ^К6, где К4 и К5 определены как выше, а К6 означает незамещенный или замещенный как указано выше С1-С10-алкил;
    и если К1-К4 каждый означают водород, то К6 не означает метил; или его фармацевтически приемлемая соль, сложный эфир или амид.
EA200100791A 1999-12-08 2000-11-08 Ингибиторы аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью, и их применение в лечении диабетической ретинопатии EA006597B1 (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US16963599P 1999-12-08 1999-12-08
US17539900P 2000-01-11 2000-01-11
US23002000P 2000-09-05 2000-09-05
PCT/US2000/030769 WO2001042191A1 (en) 1999-12-08 2000-11-08 Branched chain amino acid-dependent aminotransferase inhibitors and their use in the treatment of diabetic retinopathy

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200100791A1 EA200100791A1 (ru) 2002-04-25
EA006597B1 true EA006597B1 (ru) 2006-02-24

Family

ID=27389690

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200100791A EA006597B1 (ru) 1999-12-08 2000-11-08 Ингибиторы аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью, и их применение в лечении диабетической ретинопатии

Country Status (33)

Country Link
EP (1) EP1157000B1 (ru)
JP (1) JP2003516379A (ru)
KR (1) KR20010101811A (ru)
CN (2) CN1626069A (ru)
AP (1) AP2001002242A0 (ru)
AR (1) AR037738A1 (ru)
AT (1) ATE308510T1 (ru)
AU (1) AU784553B2 (ru)
BG (1) BG105875A (ru)
BR (1) BR0008443A (ru)
CA (1) CA2361647A1 (ru)
CO (1) CO5280055A1 (ru)
CZ (1) CZ20012758A3 (ru)
DE (1) DE60023657T2 (ru)
DZ (1) DZ3141A1 (ru)
EA (1) EA006597B1 (ru)
EE (1) EE200100416A (ru)
ES (1) ES2252075T3 (ru)
GE (1) GEP20043298B (ru)
HK (1) HK1044933B (ru)
HR (1) HRP20010581A2 (ru)
HU (1) HUP0200570A3 (ru)
IS (1) IS6033A (ru)
MA (1) MA26777A1 (ru)
MX (1) MXPA01008085A (ru)
NO (1) NO20013844L (ru)
OA (1) OA11759A (ru)
PE (1) PE20010929A1 (ru)
PL (1) PL349193A1 (ru)
SK (1) SK11022001A3 (ru)
UY (1) UY26474A1 (ru)
WO (1) WO2001042191A1 (ru)
YU (1) YU57401A (ru)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL159299A0 (en) * 2001-06-11 2004-06-01 Xenoport Inc Orally administered dosage forms of gaba analog prodrugs having reduced toxicity
US8048917B2 (en) 2005-04-06 2011-11-01 Xenoport, Inc. Prodrugs of GABA analogs, compositions and uses thereof
US6818787B2 (en) 2001-06-11 2004-11-16 Xenoport, Inc. Prodrugs of GABA analogs, compositions and uses thereof
US7186855B2 (en) 2001-06-11 2007-03-06 Xenoport, Inc. Prodrugs of GABA analogs, compositions and uses thereof
MXPA02010430A (es) * 2001-11-27 2003-06-02 Warner Lambert Co Inhibidores aminotransferasa dependientes de aminoacidos de cadena ramificada y su uso en el tratamiento de las enfermedades neurodegenerativas.
MXPA02010231A (es) * 2001-11-27 2004-12-13 Warner Lambert Co Inhibidores aminotransferasa dependientes de aminoacidos de cadena ramificada y su uso en el tratamiento de las enfermedades neurodegenerativas.
US20040058313A1 (en) * 2002-04-24 2004-03-25 Abreu Marcio Marc Compositions, targets, methods and devices for the therapy of ocular and periocular disorders
ES2295751T3 (es) * 2004-09-20 2008-04-16 Kao Corporation Procedimiento para preparar lactonas y uso de las mismas como material odorifero.
US8795725B2 (en) 2004-11-04 2014-08-05 Xenoport, Inc. GABA analog prodrug sustained release oral dosage forms
US8828665B2 (en) 2007-02-16 2014-09-09 Ark Diagnostics, Inc. Compounds and methods for use in detecting gabapentin
WO2008155619A2 (en) * 2007-06-21 2008-12-24 Pfizer Inc. Preparation of optically-active cyclic amino acids
EP2383255A1 (en) 2010-04-28 2011-11-02 Lacer, S.A. New compounds, synthesis and use thereof in the treatment of pain
EP2481801A1 (en) * 2011-01-28 2012-08-01 Deutsches Krebsforschungszentrum Inhibitors of branched-chain-aminotransferase-1 (BCAT1) for the treatment of neoplasia
US10941109B2 (en) 2011-06-13 2021-03-09 Ergon Pharmaceuticals Llc Compositions and methods of treatment using a BCAT1 inhibitor
US9422224B2 (en) * 2011-06-13 2016-08-23 Ergon Pharmaceuticals Llc Methods of treatment using a BCAT1 inhibitor
CN113694202B (zh) * 2020-06-29 2023-03-31 江苏省中医院 Ass1或bckdk抑制剂在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ293759B6 (cs) * 1996-03-14 2004-07-14 Warner-Lambert Company Substituovaná cyklická aminokyselina, její použití a farmaceutický prostředek na její bázi

Also Published As

Publication number Publication date
OA11759A (en) 2005-07-19
CN1170811C (zh) 2004-10-13
NO20013844D0 (no) 2001-08-07
YU57401A (sh) 2004-05-12
NO20013844L (no) 2001-10-04
AU784553B2 (en) 2006-05-04
DZ3141A1 (fr) 2001-01-14
AR037738A1 (es) 2004-12-01
EP1157000B1 (en) 2005-11-02
EP1157000A1 (en) 2001-11-28
CN1626069A (zh) 2005-06-15
KR20010101811A (ko) 2001-11-14
HK1044933A1 (en) 2002-11-08
JP2003516379A (ja) 2003-05-13
DE60023657T2 (de) 2006-07-20
HRP20010581A2 (en) 2002-08-31
WO2001042191A1 (en) 2001-06-14
ES2252075T3 (es) 2006-05-16
BG105875A (en) 2002-05-31
IS6033A (is) 2001-07-31
CO5280055A1 (es) 2003-05-30
GEP20043298B (en) 2004-03-10
PE20010929A1 (es) 2001-09-08
AU1477901A (en) 2001-06-18
EA200100791A1 (ru) 2002-04-25
EE200100416A (et) 2002-12-16
ATE308510T1 (de) 2005-11-15
AP2001002242A0 (en) 2001-09-30
BR0008443A (pt) 2001-10-30
CA2361647A1 (en) 2001-06-14
HK1044933B (zh) 2005-06-03
MXPA01008085A (es) 2002-04-24
HUP0200570A3 (en) 2003-02-28
DE60023657D1 (de) 2005-12-08
HUP0200570A2 (en) 2002-06-29
MA26777A1 (fr) 2004-12-20
CZ20012758A3 (cs) 2002-09-11
SK11022001A3 (sk) 2002-11-06
PL349193A1 (en) 2002-07-01
CN1344245A (zh) 2002-04-10
UY26474A1 (es) 2001-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA006597B1 (ru) Ингибиторы аминотрансфераз, зависимых от аминокислот с разветвленной цепью, и их применение в лечении диабетической ретинопатии
KR100600518B1 (ko) 항균제
NO314934B1 (no) Heterocykliske metallproteaseinhibitorer
US11866422B2 (en) Carbocyclic prolinamide derivatives
EP3472130B1 (en) Aliphatic prolinamide derivatives
MXPA04004105A (es) Metodo de tratamiento de tinnitus.
US20030119826A1 (en) Neuroprotective treatment methods using selective iNOS inhibitors
EP1140058B1 (en) N-formyl hydroxylamine derivatives as antibacterial agents
HU216789B (hu) Eljárás hidrogénezett ciklopenta-piridin-tetrol alfa-mannozidáz inhibitorok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
UA75572C2 (en) Branched chain amino acid-dependent aminotransferase inhibitors and their use in the treatment of diabetic retinopathy
ZA200106260B (en) Branched chain amino acid-dependent aminotransferase inhibitors and their use in the treatment of diabetic retinopathy.
JP2002535272A (ja) 抗炎症剤
JP2002503649A (ja) 細胞増殖抑制剤
US20030109522A1 (en) Ophthalmologic treatment methods using selective iNOS inhibitors
JP2022535802A (ja) ドキサジアジン化合物の使用
US20130225694A1 (en) Compositions and methods of inhibiting retinal degeneration

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU