CZ20012758A3 - Větvené aminokyselinově dependentní aminotransferasové inhibitory a jejich použití při léčení diabetické retinopatie - Google Patents

Větvené aminokyselinově dependentní aminotransferasové inhibitory a jejich použití při léčení diabetické retinopatie Download PDF

Info

Publication number
CZ20012758A3
CZ20012758A3 CZ20012758A CZ20012758A CZ20012758A3 CZ 20012758 A3 CZ20012758 A3 CZ 20012758A3 CZ 20012758 A CZ20012758 A CZ 20012758A CZ 20012758 A CZ20012758 A CZ 20012758A CZ 20012758 A3 CZ20012758 A3 CZ 20012758A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
acetic acid
cyclohexyl
methyl
hydrochloride salt
dimethyl
Prior art date
Application number
CZ20012758A
Other languages
English (en)
Inventor
Justin Stephen Bryans
Lain-Yen Hu
Susan M. Hutson
Kathryn Foley Lanoue
Erich Lieth
Michael Francis Rafferty
Todd Robert Ryder
Ti-Zhi Su
Devin Franklin Welty
David Juergen Wustrow
Original Assignee
Warner-Lambert Company
The Penn State Research Foundation
Wake Forest University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Warner-Lambert Company, The Penn State Research Foundation, Wake Forest University filed Critical Warner-Lambert Company
Publication of CZ20012758A3 publication Critical patent/CZ20012758A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/22—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/28—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being saturated and containing rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/34—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/45—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C07C233/46—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
    • C07C233/47—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom having the carbon atom of the carboxamide group bound to a hydrogen atom or to a carbon atom of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/01—Saturated compounds having only one carboxyl group and containing hydroxy or O-metal groups
    • C07C59/11—Saturated compounds having only one carboxyl group and containing hydroxy or O-metal groups containing rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/02—Systems containing only non-condensed rings with a three-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/04—Systems containing only non-condensed rings with a four-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/06—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring
    • C07C2601/08—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring the ring being saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/14—The ring being saturated

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

(57) Anotace:
Řešení se týká způsobu profylaktického a terapeutického ošetřování diabetické retinopatie. Postup zahrnuje podávání inhibitoru vzorce (I), (II) a (III) dráhy aminotransferasy ,1...·,.ι;„.·...ι, ,· ..λ,..s,
C|lv|?VIIMV|IUH 11*4 Μ I J 1 I V< ík J 11 IUV 1 J O « Cl> Vlljlll IV l VZ-.WJ 1 1 (BCAT) živočichům, jako jsou savci, zejména člověk, v množství postačujícím pro léčení retiny u diabetické retinopatie, profylakticky nebo terapeuticky, Předložený vynález je rovněž veden na několik nových inhibitorů vzorce (IV) BCAT dráhy. Ve vzorcích (1-1 V), n, m X a β,-Κ, . mají významy uvedené v popisu.
O
II
111
D > ir^gju • »44 4* 44 «4 44 4444
01-2491-01-Če PV 2001-2758
Větvené aminokyselinové dependentní aminotransferasové inhibitory a jejich použití při léčení diabetické retinopatie
Dosavadní stav techniky.·
Ve Spojených státech má více než 14 milionů lidí diabetes. U všech lidí s diabetes je riziko retinálních (sítnicových) komplikací. Lidé s diabetes
l.typu, tj. diabetes závislém na insulinu, čelí většímu riziku prudké ztráty zraku než lidé s diabetem 2.typu, tedy diabetes nezávislém na insulinu.
Onemocnění sítnice (retinopatie) je nezánětlivé onemocnění sítnice. Diabetická retinopatie je retinopatie spojená s určitou formou diabetes mellitus - cukrovkou.
Při výchozím stavu způsobuje vysoká hladina glukosy v krvi zvýšení růstových faktorů v očích pacientů. Tento stav je známý jako „stav prediabetické retinopatie“ a může vést k úplné diabetické retinopatii, pokud není profylakticky léčen.
Retinopatie ovlivňuje v určitém rozsahu jejich života většinu diabetem postižených lidí. Dnes je nejpodstatnější příčinou slepoty Američanů ve věku 20 až 74 let, a předpokládá se, že zhoršuje zrak u přibližně jedné třetiny diabetiků ve Spojených státech. Každý rok se ve Spojených státech objeví mezi diabetiky asi 40 000 nových případů slepoty (CDC, nepublikovaná data, 1993). U diabetiků je 25krát větší pravděpodobnost, že se vyskytne slepota vzhledem k retinopatii, než u obecné populace.
Diabetická retinopatie má dva stupně - neproliferativní stav, který obvykle nastává jako první, a proliferativní stav. Neproliferativní stupeň, který je také označován jako „základ diabetické retinopatie“, je charakterizován zhuštěním základní membrány, ztrátou retinálních pericytů, ·*· · · * · · ·
99« 9 9 9 9· · 9 mikrovaskulárními abnormalitami, intraretinální mikroaneurysmou, krvácením do sítnice (také označovaným jako „dot-blot“ krvácení, tedy „tečka-skvrna“ krvácení), otokem sítnice, zvláště diabetickým makulárním otokem, kapilárním uzávěrem spojeným s retinální ischemií nebo slabou retinální perfusí (tedy špatným cévním rozvojem ) a měkkými nebo tvrdými exudáty. Proliferativní stupeň, který, jak se odhaduje, ovlivňuje 700 000 Američanů (Chen a kol., J. Miss. Statě Med. Assoc. 36(7): 201-208 (1955)) je charakterizován neovaskularizací a fibrovaskulárním růstem (jako je zjizvení zahrnující gliové a vazivové elementy) ze sítnice nebo zrakového nervu přes vnitřní povrch sítnice nebo papily zrakového nervu nebo do sklivcové dutiny.
Proliferativní stav může vést k rubeotickému nebo neovaskulárnímu glaukomu. Makulární edem se může vyskytnout v každém stavu, a spolu s komplikacemi z retinální neovaskularisace jsou dvěma velkými retinálními problémy, které způsobují, že diabetici jsou postižení ztrátou zraku.
Zatímco patologické stavy diabetické retinopatie jsou velmi dobře popsány, molekulární záležitosti provázející diabetickou retinopatii jsou pochopeny málo. To je částečně proto, že se choroba vyvíjí po dobu deseti až třiceti let, v závislosti na každém jednotlivci.
Pro prevenci této nemoci se zdá být výhodné provádět důslednou kontrolu glykémie a hypertense a oftalmický screening diabetiků. Současná léčba sestává z pravidelného pozorování oftalmologem, laserové fotokoagulace a vitrektomie.
Hrozba makulárního edému nebo zasažení makulárního centra jsou léčeny fokální makulární fotokoagulací. Malá (50 mu v průměru) laserová vypalování střední intenzity jsou zaměřena na plochu vytékání v makule (Murphy, Amer. Family Physician 51 (4): 785-796 (1995)). Pokud makulární edém přetrvává, je opětovné přeléčení nezbytné.
» · «·«· ♦♦ ·· <· ·· ···«
Pacienti s těžkou až velmi těžkou neproliferativní retinopatií a pacienti, u nichž je velké riziko proliferativní retinopatie, nebo kteří již mají rannou nebo pokročilou proliferativní retinopatií, jsou léčeni rozptylovou nebo panretinální fotokoagulací. Panretinální fotokoagulace zahrnuje 1500 - 2000 laserových vypálení, která jsou 500 mu v průměru, ve střední periferní a periferní části sítnice (Murphy (1995), supra).
Nejlépe dokumentovaným biochemickým mechanismem pro rozvoj mikrovaskulárních komplikací diabetes je sorbitolová dráha. V sorbitolové dráze katalyzuje enzym reduktasa aldosa konverzi glukosy na sorbitol, a z galaktosy na galaktitol. Reduktasa aldosa má nízkou afinitu substrátu pro glukosu. Proto, pokud je koncentrace glukosy normální, je dráha inaktivní. Při hyperglykemii se stává sorbitolová dráha aktivní. Aktivace sorbitolové dráhy je důležitá například pro retinální pericyty, které nevyžadují insulin pro penetraci glukosy. Obdobně retinální kapilární buňky, zdá se, obsahují podstatná množství reduktasy aldosy (Ferris, Hospital Practice: 79-89 (May, 15, 1993).
Vzhledem k rozšiřování diabetické retinopatie přetrvává potřeba účinné profylaktické a terapeutické léčby této nemoci. Proto je základním předmětem předloženého vynálezu poskytnout metodu profylaktického a terapeutického ošetření diabetické retinopatie, včetně léčby stavu pre-diabetické retinopatie, neproliferativního stavu diabetické retinopatie a proliferativního stavu diabetické retinopatie. Tento a další předměty předloženého vynálezu budou zřejmé z následného podrobného popisu.
Podstata vynálezu:
Předložený vynález je veden na způsob profylaktického a terapeutického ošetřování diabetické retinopatie, včetně ošetření ve stupni prediabetické retinopatie, neproliferativního stupně diabetické retinopatie a proliferativního stupně diabetické retinopatie. Postup zahrnuje podávání inhibitoru dráhy větvené aminokyseliny-dependentní aminotransferasy. Přednostně jsou inhibitorem dráhy větvené aminokyseliny-dependentní aminotransferasy (BCAT) sloučeniny vzorců I, II a/nebo III:
II
111 kde
R9 je H; alkyl; cykloalkyl; substituovaný alkyl obsahující halogen, amin, alkoxy, cykloalkyl, nebo hydroxy; allyl; alkynyl; alkanoyl; alkoxyalkanoyl, sulfonyl; fenyl; benzyl; nebo arylalkyl;
man jsou nezávisle celá čísla 1-3;
Rj-Rg a Rio-RI4 jsou nezávisle H, alkyl nebo substituovaný alkyl; a
X = NR]4, O nebo S;
nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl, ester, proléčivo nebo amid.
Sloučeniny mohou mít jeden nebo více asymetrických uhlíkových atomů a každé asymetrické centrum může být racemické (R a S) nebo chirální (R nebo S).
Výhodnými sloučeninami jsou ty sloučeniny vzorce I, II nebo III, kde m a n jsou 1; X je NR]4; R9 je H; R4 je methyl; R4 a R5 jsou methyl; Rg je methyl; Rjo je methyl, R7 a Rg jsou methyl; R4 a Rg jsou methyl; Rj-Rg a RjoR]3 jsou H; R9 je alkyl; R9 je alkyl; R9 je benzyl; Ri4 je alkyl; R9 je arylalkyl; Rg je cykloalkyl; Rj-Rg jeou H; Rj-Rg a R10.Rn jsou H; Rj-R2 a R7-Rg jsou H; nebo R2 je methyl.
Výhodnějšími sloučeninami jsou ty sloučeniny vzorce II, kde R3 je alkyl, Rj-R2 a R4-Rj i a R)4 jsou vodík, am a n jsou 1, a X je NRt4; R3 a Rn jsou alkyl, Rj-R2 a R4 a-Rjo a Rn jsou vodík, man jsou 1, a X je NRj4; R3 a Rji jsou alkyl; Rj-R2 a R4-R10 aR^jsou vodík, man jsou 1, R9 je alkyl a X je NR)4; a Rj-Ru a Rj4jsou vodík, m a njsou 1, a Xje O.
· * 4 · · · 4··· • ·* 44*44 ·· 4 ·*·· ·· 4* * ·· ·*♦·
Zejména výhodné sloučeniny jsou zvoleny ze sloučenin :
(1 -Allylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
(l-Prop-2-ynylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
{1 - [(2,2,2-Tri fluoro-ethy lamino)-methylj-cyklohexyl}-octová kyselina;
{1 -[(3,3, 3-Trifluoro-propylamino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina;
1α,3 β,5 β- (l-Allylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
1α,3β,5 β-(3,5-Dimethyl-1 -prop-2-ynylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
1α,3β,5 β-{ 3,5-Dimethyl-1 -[(2,2,2-trifluoro-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
1α,3 β,5 β-{ 3,5-Dimethyl-1-[(3,3,3-trifluoro-propylamino)-methyl]cyklohexyl}-octová kyselina;
trans-((lR,3R)-l-Allylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)-octová kyselina; trans-((1 R,3R)-3-Methyl- l-prop-2-ynylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
trans-{(l R,3R)-3-Methyl-l-[(2,2;2-trifluoro-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
trans-{(lR,3R)-3-Methyl-1-[(3,3,3-trifluoro-propylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
trans-{(1 R,3R)-3-Methyl-1 - [(4,4,4-trifluoro-butylamino)-methyl ]-cykl o hexyl}octová kyselina;
1α,3β, 5 β-{3,5-Dimethyl-1-[(4,4,4-trifluoro-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
α,3β,5β - {1 -[(Cyklopr opylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cykl o hexyl} octová kyselina;
trans- {(1 R,3R)-1 -[(Cyklopropylmethyl-amino)-methyl]-3 - methyl-cyklohexyl} octová kyselina;
trans-((lR,3R)-3-Methyl -1 -methylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
trans-((lR,3R)-l-Ethylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina;
trans-((l R,3R)-3-Methyl -1 -propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina;
trans-((l R,3R)-1 -Butylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina;
• · « ♦ · · · · · • «· · · · · * * ···« trans-((1 R,3R)-1 -Hydroxymethyl-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina;
cc,3 β,5β - {l-[(Hydroxymethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl} octová kyselina;
a,3β,5β-(1 - Aminomethyl-3,5-diethyl-cyklohexy 1)- octová kyselina, hydrochlorid;
trans-(lR,3R)(l - Aminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
(1 -Aminomethyl-2-methyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochlorid;
(1 -Aminomethyl-3,3-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochlorid;
(±)-(trans)-(l-Aminomethyl-3,4-dimethyl-cyklopentyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
(cis/trans)-(3R)-(l-Aminomethyl-3-methyl-cykIopentyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
(+)-(trans)-(l - Aminomethyl-3,4-dimethyl-cyklopentyl)- octová kyselina; hydrochlorid;
(+)-(trans)-(1 -Aminomethyl-3,4-dimethyl-cyklopentyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
a,3β,5β-(1-Aminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
1α,3β,5β-(3,5-Οίιηεί1τ^1-1 -propy lamino methyl-cyklohexyl )-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
a,3β,5β-(1 -Ethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl;
a,3β,5β-(Ι-Benzylamino-methy 1)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
a,3β,5β-(1 -Dimethylaminomethy 1-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
1α,3β,5β-(1 -Butylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexvl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
a,3 β,5β-{ 1 -[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl} octová kyselina, hydrochloridová sůl;
* 4 4 4 4 4 *· · · 4
1α,3β ,5 β-(3,5-Dimethyl-1-methylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
a,3β,5β-[ 1 -(Acetylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
α,3β,5β-(1 - (Isobutylamino-methy 1)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
la,3 3,5P-[3,5-Dimethyl-l-(fenethylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
α,3β,5β-{ 3,5-Dimethyl-1 - [(3-fenyl-propylamino)-methyl]-cyklohexyl} octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{l-[(Cyklobutylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
a,3β, 5β-(1 -(Isopropylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
1-Aminomethyl-l-cyklohexan- octová kyselina;
-Aminomethyl-1 -cyclopentan-octová kyselina;
l-Aminomenthyl-l-cyklopentan-octová kyselina, sodná sůl;
-(hydroxymethyl)cyklohexan-octová kyselina, sodná sůl;
{l-[(2-Methyl-butylamino)-methyl]-cykIohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{1-[(4,4,4-Trifluor-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
(1-Ethylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{l-[(Cyklopropylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{l-[(2-Hydroxy-l-methyl-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl} - octová kyselina, hydrochloridová sůl;
[1 -(Isobutylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
(1-Propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
[1-(Isopropylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
(1-Cyklohexylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
[1 -(Benzylamino-methyl)-cyklohexylJ- octová kyselina, hydrochloridová sůl; ((1R,3R)-3-Methyl-1 -propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{1-[Cyklopentylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{1 -[(Cyklohexylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
[l-(tert-Butoxykarbonylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, [1 -(Acetylamino-methyl)-cyklohexylJ-octová kyselina;
((3R, 5S)-1 -Cyklobutylaminomethyl-3,5“dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{(3R, 5S)-3,5-Dimethyl-l-[(2-methyl-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{(3R, 5S)-l-[(2-Hydroxy-l-methyl-ethylamino)-methyl]-3,5-dimethylcyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{(3R, 5S)-1 - [(2,2-Dimethoxy-ethylamino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl} octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{(3R, 5S)-l-[(Cyklopentylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{(3R,5S)-1 -[(CykIohexylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
((3R, 5S)-1 -Cyklohexylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
((3R,5S)-1 -Karboxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; trans-((3R, 5S)-1 -Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
cis-((3R, 5S)-l-Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
(1-Dimethylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl; (1-Butylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{l-[2,2-Dimethoxy-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl} - octová kyselina, hydrochloridová sůl;
(l-methylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{l-[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
[1 -(Fenethylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{1-[(3-Fenyl-propylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
((3R, 5S)-1 -Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, sodná sůl;
((3R, 5S)-l-Ethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
(1-Aminomethyl-4-ethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
(1-Aminomethyl-4-propyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl; ((3R, 5S)-3,5-Dimethyl- 1-propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
[(IR, 3R)-l-(Benzylamino-methyl)-3-methyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{(IR, 3R)-l-[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-3-methyl-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl; a ((IR, 3R)-3-MethyI-l-methylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl.
Řada sloučenin popsaných vzorci I, II, a III je známá. Sloučeniny vzorce
A:
h2n—ch2—C ch2--COOR1 (cH2)n kde
R je vodík nebo radikál nižšího alkylu a n je 4, 5, nebo 6 jsou známé z patentu US 4 024 175 a jeho rozděleného patentu US 4 087 544. Zde popsaná použití jsou: ochrana proti křečím indukovaných thiosemikarbazidem; ochrana • « · φ ♦ ♦ · · · · * Φ Φ ··· · ♦ φ proti kardiazolové křeči; mozkové příhody, epilepsie, záchvaty mdloby, hypokinese a kraniální traumata; a zlepšení funkcí mozku. Sloučeniny jsou vhodné pro starší pacienty. Tyto patenty jsou zde začleněny jako odkazy.
Sloučeniny vzorce B:
R3 r2 h2nch-c-ch2cooh
Ri B nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, kde R] je přímá nebo větvená alkylová skupina mající 1 až 6 atomů uhlíku, fenyl nebo cykloalkyl mající 3 až 6 atomů uhlíku; R2 is vodík nebo methyl; a R3 je vodík nebo karboxyl, jsou známé z patentu US 5 563 175 a jeho rozdělených patentů. Proto jsou tyto patenty zahrnuty jako odkaz.
Předložený vynález rovněž popisuje nové sloučeniny vzorce IV
Re
p < _ ϋ . i c ri n i r /4 í lz ťi o b η o 1 lz w 1 ’ J-V j J V u U.1 IV 11 V UV Ulil j 1 J
X je NR5 nebo O;
R5 je vodík nebo alkyl;
R-6 is vodík, alkyl, benzyl, alkanoyl, alkoxyalkanoyl, arylalkyl, alkoxy, cykloalkyl, allyl, alkylcykloalkyl, alkoxy, cykloalkyl, alkylcykloalkyl, trisubstituovaný halogenalkyl, a kde R1-R4 jsou každý vodík, potom Rg není vodík nebo methyl; nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, estery, proléčiva nebo amidy. Stejně jako sloučeniny vzorce I, II, a III, jsou sloučeniny vhodné pro profylaktické i léčebné použití u diabetické retinopatie, včetně léčení stavu pre-diabetické retinopatie, stavu nonproliferativní diabetické retinopatie, a stavu proliferativní diabetické retinopatie.
Výhodnými sloučeninami jsou ty sloučeniny vzorce IV, kde R2 a R4 jsou vodík a R] a R3 jsou alkyl; R2 a R4 jsou vodík a Rj a R3 jsou methyl; RiR4 jsou vodík; Rj je alkyl a R2-R4 jsou vodík; Ri je methyl a R2-R4 jsou vodík; R5 je vodík; X je NRg; X je O; Rg je alkyl; Rě je benzyl; Ró je acetyl; Rg je fenylalkyl; Rg je cykloalkyl; Rg je trifluoroalkyl; RĚ je alkylcykloalkyl; Rg je alkoxy; a Rg je allyl.
Dalšími výhodnými sloučeniny jsou ty sloučeniny vzorce IV, kde R2 a R4 jsou vodík a Ri a R3 jsou methyl; Rj-R4 jsou vodík; R| je methyl a R2-R4 jsou vodík; R5 je vodík; X je NRg; Rg je alkyl; Rg je benzyl; Rg je acetyl; Rg je fenylalkyl; Rg je cykloalkyl; Rg je trifluoroalkyl; Rg je alkylcykloalkyl; Rg je alkoxy; a Rg je allyl.
Zvláště výhodné sloučeny jsou zvoleny z těchto:
(1 -Allylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
(1 -Prop-2-ynylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
{1 -[(2,2,2-Trifluoro-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina;
{1 -[(3,3,3-Trifluoro-propylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina;
α,3β,5β- (1 - Allylaminomethy 1-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
α,3β,5β-(3,5-ϋίιηεί1^1-1 -prop-2-ynylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
1α,3β,5β-{3,5-ΟίπιεΐΙιγ1-1-[(2!2;2-ίιϊί'1υθΓθ-εΐ1^^ιηϊηο)-πιεΐΙιγ1]-ογΗοήεχγ1}octová kyselina;
· la,3p,53-{3,5-Dimethyl-l-[(3í3,3-trifluoro-propylamino)-methyl]cyklohexyl}-octová kyselina;
Irans-((1R,3R)-1 -Allylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)-octová kyselina; trans-((lR,3R)-3-Methyl-l -prop-2-ynylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina;
trans-{(IR, 3 R)-3-Methyl-1-((2,2,2-trifluoro-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
trans-{(1 R,3 R)-3-Methy 1-1 -[ (3,3,3-trifluoro-propylamino)-methyljcyklohexyl}-octová kyselina;
trans-{(lR,3R)-3-Methyl-l-[(4,4,4-trifIuoro-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
la,3p,5p-{3,5-Dimethyl-l -[(4,4,4-trifluoro-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
1α,3β,5β-{ 1 -[(Cyklopropylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl} octová kyselina;
trans-{(lR,3R)-l-[(Cyklopropylmethyl-amino)-methyl]-3-methyl-cyklohexyl}octová kyselina;
trans-((lR,3R)-3-Methyl-1 -methylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina; trans-((lR,3R)-l-Ethylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina; trans-(( 1 R,3R)-3-Methyl- 1-propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina; trans-((lR,3R)-l -Butylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina; trans-((lR,3R)-l -Hydroxymethyl-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina;
α,3β,5β-{ 1 - [(Hydro xy methyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cykl ohexyl}octová kyselina;
1α,3β,5β-(1 -Aminomethyl-3,5-diethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
oc,3β,5β-(3,5-Dimethyl- 1-propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
cc,3β,5β-(1 -Ethylaminomethy 1-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
a, 3 β, 5 β-(1 -Benzylami no-methy 1)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
φ« a,3p,5p-(l-Dimethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
a,3p,5p-(l-Butylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina; hydrochloridová sůl;
1α,3β,5β-{ l-[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl} octová kyselina, hydrochloridová sůl;
a, 3 β,5 β-(3,5-D i methyl -1 -methy lam i nomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
α,3β,5β-[1 -(Acetylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexylJ- octová kyselina;
α,3β,5β-[1 -(ísobutylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
a,3p,5p-[3,5-Dimethyl-l-(fenethylamino-methyl)-cyklohexylj- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
a, 3 β,5β-{ 3,5-Dimethyl-1-[(3-fenyl-propylamino)-methyl]-cyklohexyl} octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{l-[(Cyklobutylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
α.,3β,5β-[1 -(Isopropylamino-methyl)-3,5-dimethyi-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{l-[(2-Methyl-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{1-((4,4,4-Trifluoro-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
(1-Ethylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{l-[(Cyklopropylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{1 -[(2-Hydroxy -1 - methyl-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
[ 1 -(Isobutylamino-methyl)-cyklohexyll- octová kyselina, hydrochloridová sůl; (1 -Propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl; [l-(Isopropylamino-methyl)-cyklohexyl]-octová kyselina, hydrochloridová sůl; (l-Cyklohexylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
9» 9» 9« ·· <*·· ··· 9 9 9 9 * 9· • 99 9 9 ♦ · · 9 9· • 9 · 9 9··999 • «»1 99 99 99 <····· [l-(Benzylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
((lR,3R)-3-Methyl-1 -propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
l-[Cyklopentylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{l-[(Cyklohexylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
[ 1 -(tert-Butoxy karbony lamino-methyl)-cykl ohexyl]-octová kyselina, [l-(Acetylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina;
((3R, 5S)-1 -Cyklobutylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{(3R, 5 S)-3,5-Dimethyl-l-[(2-methyl-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{(3R, 5S)-1 -[(2-Hydroxy-l-methyl-ethylamino)-methyl]~3,5-dimethylcyklohexyl}-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{(3R, 5S)-l-[(2,2-Dimethoxy-ethylamino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{(3R, 5S)-1 -[(Cyklopentylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{(3R,5S) -1 -[(Cyklohexyl methyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl} octová kyselina, hydrochloridová sůl;
((3R, 5 S)-l -Cyklohexyl aminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
((3R,5S)-1 -Karboxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
trans-((3R, 5S)-l-Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
cis-((3R, 5S)-1 -Hydroxymethy 1-3,5-dimethyl-cyklohexyl-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
(1-Dimethylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
(1 -Butylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{1 -[2,2-Dimethoxy-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
«· ·* ·· ♦ * • •«I* ♦ » · · · * <
• ·* » · ··* * · * ··«· ·· ·· ·« · ·»·» (l-methylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{1 -[(Benzyl-methyl-amino)-methylJ-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
[1 -(Fenethylamino-methyl)-cyklohexylj-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{1 -[(3-Feny l-propylamino)-methyl]-cyklohexyl} - octová kyselina, hydrochloridová sůl;
((3R, 5S)-1-Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, sodná sůl;
((3 R, 5S)-l-Ethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
(1-Aminomethyl-4-ethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl; (l-Aminomethyl-4-propyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl; ((3R, 5S)-3,5-Dimethyl-l-propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
[(IR, 3R)-1 -(Benzylamino-methyl)-3-methyl-cyklohexyl]-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
{(IR, 3 R)-1 -[(Benzyl-methyl-amino)-methyI]-3-methyl-cyklohexyl} -octová kyselina, hydrochloridová sůl;
a ((IR, 3R)-3-Methyl-l-methylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl.
Předloženým vynálezem je rovněž farmaceutický prostředek obsahující terapeuticky účinné množství jedné nebo více sloučenin vzorce IV a a farmaceuticky přijatelný nosič.
Sloučeniny vzorce II, jako je gabapentin, jsou vhodné pro léčení různých stavů jako je neurodegenerativní choroba (US 5 084 479), deprese (US 5 025 035), pocit úzkosti/panika (US 5 792 796), mánie/bipolarní choroby (US 5 510 381), proti-zánětlivá onemocnění (WO 98/158641), gastrointestinální choroby (WO 99/108670), glaukom a bolest. Protože sloučeniny vzorce II a vzorce IV obě pracují tak, že ovlivňují dráhu BCAT a způsobují syntézu glutamátu, který je obsažen v každé z výše uvedených indikací, sloučeniny • · · * vzorce IV budou také vhodné pro léčení těchto indikací. Proto je předložený vynález rovněž veden na použití sloučeniny vzorce IV pro léčení jedné nebo více než jedné neurodegenerativní poruchy (včetně, ale bez omezení se na ně, ALS, Parkinsonovy nemoci a Alzheimerovy nemoci), deprese, stavů úzkosti/paniky, mánie/bipolarních chorob, protizánětlivých onemocnění, glaucomu, bolesti nebo gastrointestinalních chorob.
Podrobný popis výkresů
Obrázek 1. Schéma ukazující BCAT trasu oběhu v sítnici. Vlastní trasa ukazuje, jak větvené aminokyseliny v glii mohou transaminovat oc-ketoglutarát za vzniku glutamátu. BCKA produkt proniká přes interstitium (znázorněno šedě) do neuronů, kde je konvertován zpět na větvenou aminokyselinu transaminací s glutamátem přes BCATc.
Zkratky jsou následující: BCAA=větvená aminokyselina; GLU-glutamát; GLN=glutamin; Gín’ase=glutaminasa; pyr=pyruvát; PC=pyruvátkarboxylasa, aKG = a-ketoglutarát, BCATm = mitochondriální větvená aminotransferasa; BCATc=cytosolická větvená aminotransferasa; BCKA=větvený řetězec keto kyseliny; GDH=glutamátdehydrogenasa.
Obrázek 2. Vliv kocentrace pyruvátu na zabudování H14CO3 do glutamátu plus glutaminu (A) a pyruvátu plus laktátu (B) přes ex vivo sítnice. Hemi-sítnice byly inkubovány při 37 °C za standardních podmínek s 25 mM HI4CO3 po 20 minut. Pyruvát v médiu byl buď 0,2 nebo 5 mM. Znázorněné hodnoty jsou střední ± SEM (n=4, * p<0.05). Zkratky; gln+glu = suma značeného glutaminu plus glutamátu; pyr+lact = suma značeného pyruvátu plus laktátu.
Obrázek 3. Exprese BCAT isoenzymů v sítnici krysy. Extrakce tkáně, SDS-PAGE, a immunoblotting byly prováděny, jak je popsáno použitím ECL detekčního křtu. Byly použity immunoafinitně purifikované krysí anti-BCATc peptidové protilátky (1:1000) a lidská anti-BCATm protilátka (1:1000).
« · ··** ·· ·· ·· ♦♦ ♦···
Obrázek 4. Vliv gabapentinu (GBP) a větvených aminokyselin na zabudování H14CO3 do glutamátu plus glutaminu ex vivo sítnicemi. Polovina sítnic byla inkubována při 37 °C za standardních podmínek s 25 mM H14CO3 a 0,2 mM pyruvátu po 20 minut. V některých případech byl gabapentin (1 mM) zahrnut do inkubačního média a v jiných byl zahrnut GBP (1 mM) plus všechny tři větvené aminokyseliny (0,2 mM). Znázorněné hodnoty jsou střední ± SEM HCO3 zabudovaného do glutamátu plus glutaminu ve 20 minutách (n=4, * p<0.001, ** p<0.01). Zkratky: gln+glu ~ suma zunačeného glutaminu plus glutamátu.
Obrázek 5. Vliv koncentrace gabapentinu (GBP) na zabudování HI4CO3 do glutamátu a glutaminu v ex vivo sítnicích. Podmínky byly podobné jako u Obr.4 s výjimkou pro koncentraci GBP. Znázorněné hodnoty jsou střední ±SEM (n=6-7, * p<0.05). Zkratky GLN+GLU - suma glutaminu plus glutamátu; LACT + TCA = suma laktátu plus meziproduktů TCA cyklu.
PODROBNÝ POPIS VYNÁLEZU
Předložený vynález je založen na zjištění, že intraokularní glutamátová injekce způsobí ztrátu ganglionových buněk, které jsou ve vztahu k časnénu stupni diabetické retinopatie (Vorwerk a kol., IOVS 37:1618-1624 (1996)), a že inhibitor dráhy - větvená aminokyselina -dependentní aminotransferasy, jako je například gabapentin, je účinný při inhibování syntézy glutamátu, a tím brání diabetické retinopatii. Předložený vynález tudíž poskytuje metodu pro profylaktické a terapeutické ošetření diabetické retinopatie, zahrnující ošetření v pre-diabetickém stupni retinopatie, non-proliferativním stupni diabetické retinopatie, a proliferativním stupni diabetické retinopatie. Profylakticky je míněna ochrana, celkově nebo částečně, proti diabetické retinopatii, zvláště diabetickému makularnímu edému. Termínem terapeutické se míní zmírnění samotné diabetické retinopatie, a ochrana, celkově nebo z části, proti další diabetické retinopatii, zvláště diabetickému makulárnímu edému.
·♦ · · · +
Postup zahrnuje podávání inhibitoru - aminokyselina s větveným řetězcem-dependentní aminotransferasové dráhy, v množství postačujícím k léčení retiny při retinopatii profylakticky nebo terapeuticky. V postupu podle předloženého vynálezu může být použit jakýkolv inhibitor dráhy aminotransferasy dependentní na aminokyselině s větveným řetězcem, potud, jestliže je to bezbečné a účinné. Zde uváděný „ inhibitor - větvená aminokyselina-dependentní aminotransferasy (BCAT) bude použit k označení takových sloučenin, a je uvažován za zahrnující všechny sloučeniny, které ovlivňují dráhu větvená aminokyselina-dependentní aminotransferasy na kterémkoliv a všech místech dráhy.
Přednostně je BCAT inhibitor sloučenina vzorce I, II, a/nebo III, jak je popsáno výše, nebo jejich farmaceuticky přijatelný BCAT dráhu-inhibující analog nebo proléčivo, nebo farmaceuticky přijatelná sůl, ester nebo amid některého z výše uvedených.
Pokud nebude uvedeno jinak, následující definice jsou uvažovány v celém tomto popisu:
„Alkyl“ znamená přímý nebo větvený uhlovodíkový radikál mající od 1 do 10 atomů uhlíku (pokud nebude uvedeno jinak) a zahrnuje například methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sek-butyl, isobutyl, tert-butyl, n-pentyl, iso-pentyl, n-hexyl a podobné.
„Halogen“ zahrnuje fluor, chlor, brom a jod.
„Alkenyl“ znamená přímý nebo větvený uhlovodíkový radikál mající od 2 do 6 atomů uhlíku a jednu dvojnou vazbu a zahrnuje ethenyl, 3-buten-l-yl,
2-ethenylbutyl, 3-hexen-l-yl a podobné.
„Alkynyl“ znamená přímý nebo větvený uhlovodíkový radikál mající od 2 do 6 atomů uhlíku a jednu trojnou vazbu a zahrnuje ethynyl, 3-butyn-1-yl, propynyl, 2-butyn-1-yl, 3-pentyn-l-yl a podobné.
„Cykloalkyl“ znamená monocyklickou nebo polycyklickou hydrokarbylovou skupinu jako je cyklopropyl, cykloheptyl, cyklooktyl, cyklodecyl, cyklobutyl, adamantyl, norpinanyl, dekalinyl, norbornyl, cyklohexyl a cyklopentyl. Tyto skupiny mohou být substituovány skupinami jako je hydroxy, keto a podobné. Rovněž zahrnuty jsou kruhy, v nichž 1 až 3 heteroatomy nahradí uhlíky. Tyto skupiny jsou označeny „heterocyklické“, což označuje rovněž cykloalkylovou skupinu nesoucí alespoň jeden heteroatom zvolený z O, S, nebo NR2. Příklady jsou substituovaný nebo nesubstituovaný oxiranyl, pyrrolidinyl, piperidyl, tetrahydropyran, piperazinyl, acylpiperazinyl, pyrrolidinyl a morfolin.
„Alkoxy“ označuje alkylové skupiny uvedené výše vázané přes kyslík, jejichž příklady zahrnují methoxy, ethoxy, isopropoxy, terc-butoxy a podobné. Dále označuje „alkoxy“ polyethery jako je -O-(CH2)2'O-CH3, a podobné.
„Alkanoyl“ skupiny jsou alkyl vázaný přes karbonyl, tj, C}-C5-C(O)-. Tyto skupiny zahrnují formyl, acetyl, propionyl, butyryl a isobutyryl.
„Acyl“ znamená alkylová nebo arylová (Ar) skupina vázaná přes karbonylovou skupinu, tj. R-C(O)-. Například, acyl zahrnuje Cj-Cg alkanoyl, včetně substituovaného alkanoylu, přičemž alkylová část může být substituována NR^rS nebo karboxylovou nebo heterocylickou skupinou. Typické acylové skupiny zahrnují acetyl, benzoyl a podobné.
Alkylové, alkenylové, alkoxy- a alkynylové skupiny skupiny popsané výše jsou popřípadě substituované, přednostně 1 až 3 skupinami zvolenými z NR^rS, fenylu, substituovaného fenylu, thioCi-Cg alkylu, Cj-Cg alkoxyskupiny, hydroxyskupiny, karboxyskupiny, Cj-C^ alkoxykarbonylu, halogenu, nitrilu, cykloalkylu a 5- nebo 6-členného karbocyklického kruhu nebo heterocyklického kruhu majícího 1 nebo 2 heteroatomy zvolené z dusíku, substituovaného dusíku, kyslíku a síry. „Substituovaný dusík“ znamená dusík nesoucí Cj-Cg alkyl nebo (CH2)nPh > kde n je 1, 2, nebo 3. Perhalo- a polyhalogenová substituce je rovněž zahrnuta.
Příklady substituovaných alkylových sklupin zahrnují 2-aminoethyl, pentachloroethyl, trifluoromethyl, 2-diethylamin.oethyl,
2-dimethylaminopropyl, ethoxykarbonylmethyl, 3-fenylbutyl, methanylsulfanylmethyl, methoxymethyl, 3-hydroxypentyl, 2-karboxybutyl, 4-chlorbutyl, 3-cyklopropylpropyl, pentafluorethyl, 3-morfolinopropyl, piperazinylmethyl a 2-(4-methylpiperazinyl)ethyl.
Příklady substituovaných alkynylových skupin zahrnují
2- methoxyethynyl, 2-ethylsulfanyethynyl, 4-(l-piperazinyl)-3-(butynyl),
3- fenyl-5-hexynyl, 3-diethylamino-3-butynyl, 4-chloro-3-butynyl,
4- cyklobutyl-4-hexenyl a podobné.
Typické substituované alkoxyskupiny zahrnují aminomethoxy, trifluoromethoxy, 2-diethylaminoethoxy, 2-ethoxykarbonylethoxy,
3-hydroxypropoxy, 6-karboxhexyloxy a podobné.
Dále, příklady substituovaných alkylových, alkenylových a alkynylových skupin zahrnují dimethylaminomethyl, karboxymethyl, 4-dimethylamino-
3- buten- 1-yl, 5-ethylmethylamino-3-pentyn-l -yl, 4-morfolinobutyl,
4- tetrahydropyrinidylbutyl, 3-imidazolidin-l-ylpropyl, 4-tetrahydrothiazol-
3-yl-butyl, fenylmethyl, 3-chlorofenylmethyl a podobné.
Termíny „Ar“ a „aryl“ označují nesubstituované a substituované aromatické skupiny. Heteroarylové skupiny mají od 4 do 9 atomů v kruhu, z nichž 1 až 4 jsou nezávisle zvoleny ze skupiny sestávající z O, S, a N. Výhodné heteroarylové skupiny mají 1 nebo 2 heteroatomy v 5- nebo 6-členn.ém aromatickém kruhu. Mono a bicyklické aromatické kruhové systémy jsou zahrnuty do definice arylu a heteroarylu. Typické arylové a heteroarylové skupiny zahrnují fenyl, 3-chlorfenyl, 2,6-dibromfenyl, pyridyl,
3-methylpyridyl, benzothienyl, 2,4,6-tribromfenyl, 4-ethylbenzothienyl, furanyl, 3,4-diethylfuranyl, naftyl, 4,7-dichlornaftyl, pyrrol, pyrazol, imidazol, thiazol a podobné.
Výhodnými Ar skupinami jsou fenyl a fenyl substituovaný 1, 2, nebo skupinami nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z alkylu, alkoxyskupiny, thioskupiny, thioalkylu, hydroxyskupiny, karbonylové skupiny, aminoskupiny vzorce -NR4R$, a T(CH2)mQR^ nebo T(CH2)mCO2R4 , kde m je 1 až 6, T je O, S, NR4, N(O)R4, NR4R^Y, nebo CR4R5, Q je O, S, NR5, N(O)R5, nebo NR5RČY , kde R4 a R5 jsou jak je popsáno výše, a R7 je alkyl nebo substituovaný alkyl, například methyl, trichloroethyl, difenylmethyl, a podobné. Alkyl a alkoxy skupiny mohou být substituovány jak je definováno výše. Například jsou typickými skupinami karboxyalkyl, alkoxykarbonylalkyl, hydroxyalkyl, hydroxyalkoxy, a alkoxyalkyl.
Symbol označuje vazbu.
Termín „pacient“ označuje všechny živočichy včetně lidí. Příklady pacientů zahrnují lidi, krávy, psy, kočky, kozy, ovce a vepře.
Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou existovat v nesolvatovaných formách stejně jako solvatovaných formách, včetně hydratovaných forem. Obecně sovatované formy, včetně hydratovaných forem, jsou ekvivalenty nesolvatovaným formám a jsou uvažovány za zahrnuté do rozsahu předloženého vynálezu.
Některé ze sloučenin podle předloženého vynáklezu vykazují jedno nebo více chirálních center a každé centrum může existovat v R(D) nebo S(L) konfiguraci. Předložený vynález zahrnuje všechny enantiomerní a epimerní formy, stejně jako jejich směsi.
·· «Μ* ·· ·· ·· ·· ····
Sloučeniny vzorců I, II, a III jsou schopné dalšího formování farmaceuticky přijatelných analogů zahrnujících soli, estery, amidy a proléčiva. Jak se zde používá, termín „farmaceuticky přijatelné soli, estery, amidy a proléčiva“ označuje ty karboxylátové soli, aminokyselinové adiční soli, estery, amidy a proléčiva sloučenin podle předloženého vynálezu, které jsou v rozsahu předpokládaného výkladu lékařského použití, vhodné pro použití v kontaktu s tkání pacienta bez nebezpeční toxicity, podráždění, alergické odezvy a podobně, úměrné rozumnému poměru výhody/rizika, a účinné pro jejich uvažované použití, stejně jako zwitteriontové formy, pokud jsou možné, sloučenin podle vynálezu. Termín „soli“ se týkají relativně netoxických, anorganických a organických kyselinových adičních solí sloučenin podle předloženého vynálezu. Tyto soli mohou být připraveny in šitu v průběhu finální izolace a purifikace sloučenin nebo samostatně reakcí purifikované sloučeniny ve formě volné báze s vhodnou organickou nebo anorganickou kyselinou a izolováním takto vzniklé soli a včetně, ale bez omezení se na to, adičních solí s kyselinami a/nebo bazických solí, rozpouštědel a N-oxidů sloučeniny vzorců I, II a III. Tento vynález také poskytuje farmaceutické prostředky obsahující sloučeninu vzorce I, II nebo III společně s farmaceuticky přijatelným nosičem, ředidlem, nebo jejich excipientem. Všechny tyto formy jsou v rozsahu předloženého vynálezu.
Farmaceuticky přijatelné adiční soli sloučenin vzorců I, II a III s kyselinami zahrnují soli odvozené od anorganických kyselin jako je kyselina chlorovodíková, dusičná, fosforitá, sírová, bromovodíková, jodovodíková, fosforečná a podobné, stejně jako soli odvozené od organických kyselin, jako jsou alifatické mono- a dikarboxylové kyseliny, fenyl-substitutované alkanové kyseliny, hydroxyalkanové kyseliny, alkandiové kyseliny, aromatické kyseliny, alifatické a aromatické sulfonové kyseliny atd. Tyto soli tedy zahrnují sulfáty, pyrosulfáty, bisulfáty, sulfity, bisulfity, nitráty, fosfáty, monohydrogenfosfáty, dihydrogenfosfáty, metafosfáty, pyrofosfáty, chloridy, bromidy, jodidy, acetáty, propionáty, kapryláty, isobutyráty, oxaláty, malonáty, jantaráty, korkany, sebakáty, fumaráty, maleáty, estery kyseliny mandlové, benzoáty, chlorobenzoáty, methylbenzoáty, dinitrobenzoáty, ftaláty, benzensulfonáty, toluensulfonáty, fenylacetáty, citráty, laktáty, maleáty, vínany, methansulfonáty a podobné. Rovněž jsou zvažovány soli aminokyselin, jako je arginát, glukonát, galakturonát a podobné; viz například, Berge, a kol., „Pharmaceutical Salts,“ J. of Pharmaceutical Science, 1977;66:1-19.
Adiční soli zásaditých sloučenin s kyselinami jsou připraveny uvedením do kontaktu volné bázické formy s dostatečným množstvím požadované kyseliny za vzniku soli běžným postupem. Volná forma báze může být regenerována uvedením do kontaktu solné formy s bází a izolováním volné báze běžným postupem. Formy volných bází se liší od jejich konkrétních solných forem v některých fyzikálních vlastnostech, jako je rozpustnost v polárních rozpouštědlech, ale jinak jsou, pro účely předloženého vynálezu, soli ekvivalentní ke své konkrétní volné bázi .
Farmaceuticky přijatelné adiční soli s bázemi jsou tvořeny s kovy nebo aminy, jako jsou hydroxidy alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin, nebo organické aminy. Příklady kovů použitých jako kationty jsou sodík, draslík, hořčík, vápník a podobné. Příklady vhodných aminů jsou N,N'-dibenzylethylendiamin, chloroprokain, cholin, diethanolamin, ethylendiamin, N-methylglukamin a prokain; viz např. Berge a kol., supra.
Adiční soli kyselých sloučenin s bázemi jsou připraveny uvedením do kontaktu volné kyselinové formy s dostatečným množstvím požadované báze za získání soli běžným postupem. Volná kyselinová forma může být regenerována uvedením do kontaktu solné formy s kyselinou a izolováním volné kyseliny běžným způsobem. Volné kyselinové formy se liší od svých konkrétních solných forem v některých fyzikálních vlastnostech, jako je rozpustnost v polárních rozpouštědlech, ale jinak jsou, pro účely předloženého vynálezu, soli ekvivalentní ke své konkrétní volné kyselině.
Příklady farmaceuticky přijatelných, netoxických esterů sloučenin podle tohoto vynálezu zahrnují Cj.Cůalkylestery, kde alkylová skupina je přímý nebo větvený řetězec. Přijatelné estery rovněž zahrnují Cs-Cvcykloalkylestery stejně • * · · · · ♦ · · · • ·« · ♦ · ♦ · · · · jako arylalkylestery jako je, ale bez omezení se, benzyl. Preferovány jsou C]_ C4alkylestery. Estery sloučenin podle předloženého vynálezu mohou být připraveny běžnými postupy.
Příklady farmaceuticky přijatelných, netoxických amidů sloučenin podle předloženého vynálezu zahrnují amidy odvozené od amonia, primárních CiC6alkylaminů a sekundárních Ci-C6dialkylaminů, kde alkylové skupiny jsou přímé nebo větvené řetězce. V případě sekundárních aminů mohou být také aminy ve formě 5- nebo 6-členného heterocyklu obsahujícího atom dusíku. Preferovány jsou amidy odvozené od amonia, Ci-C3alkyl-primární aminy a CiCjdialkyl-sekundární aminy. Amidy sloučeniny podle vynálezu mohou být připraveny běžnými metodami.
Termín „proléčivo“ označuje sloučeniny, které jsou rychle transformovány in vivo za získání mateřské sloučeniny výše uvedeného vzorce, například hydrolýzou v krvi. Diskuse je uvedena T. Higuchí a V. Stella, „Prodrugs as Novel Delivery Systems“, Vol. 14 z řady „A.C.S. Symposium Series“, a v Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, Američan Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987; obě publikace jsou zde zahrnuty jako odkaz. Obecně proléčivo je léčivo, které bylo chemicky upraveno a může být biologicky inaktivní na svém místě působení, ale které může být štěpeno nebo modifikováno jedním nebo více enzymatickými nebo jinými in vivo postupy na mateřskou bioaktivní formu.
Terapeuticky účinné množství je množství sloučeniny vzorců I, II nebo III, které při podání pacientovi zlepšuje symptomy choroby.
Inhibitor BCAT, kterým jsou přednostně sloučeniny vzorců I, II a/nebo III, BCAT dráhu-inhibující analog vzorců I, II a/nebo III, BCAT dráhuinhibující proléčivo vzorců I, II a/nebo III, nebo farmaceuticky přijatelná sůl některého z výše uvedených, může být podáván v souladu s předloženým inventivním postupem jakoukoliv vhodnou cestou. Vhodné cesty podávání zahrnují systémícké, jako je orálně nebo injekčně, topicky, intraokulárně, periokulárně (např, subTenon), subkonjunktiválně, subretinálně,
suprachoroidálně nebo za oční bulvu. Způsob, jakým je inhibitor BCAT podáván, závisí částečně na tom, zdaje ošetření retinopatie profylaktické nebo terapeutické. Způsob, jímž je inhibitor BCAT podáván pro terapeutické ošetření retinopatie, závisí částečně na příčině retinopatie.
Například pokud je diabetes hlavní příčinou retinopatie, inhibitor BCAT může být podáván profylakticky okamžitě, jakmile je stav prediabetické retinopatie detekován. U profylaktického ošetření retinopatie, které může vyplývat z diabetes, je inhibitor BCAT přednostně podáván systémicky, tedy orálně nebo injekčně. Pro terapeutické ošetření neproliferativní diabetické retinopatie může být inhibitor BCAT podáván systémicky, tedy orálně nebo injekčně, nebo intraokulárně. Proliferativní diabetická retinopatie může být terapeuticky ošetřena podáváním inhibitoru BCAT intraokulárně, topicky, subkonjunktiválně nebo periokulárně (jako subTenon), příkladně. Inhibitor BCAT je přednostně podáván intraokulárně, topicky, subkonjunktiválně nebo periokulárně (např.subTenon) pro profylaktické nebo terapeutické ošetřování retinopatie před, během nebo po chirurgickém odstranění zjizvené tkáně z oka vytvořené v průběhu neovaskulirazace během proliferativního diabetického stavu.
BCAT inhibitor je přednostně podáván tak brzy, jak je to možné, poté co bylo nalezeno, že u živočicha, jako je savec, konkrétně člověk, je riziko retinopatie (profylaktická léčba), nebo se začala rozvíjet retinopatie (terapeutické ošetření). Ošetření bude částečně závislé na konkrétně použitém inhibitoru BCAT, množství podáváného inhibitoru BCAT, cestě podávání a příčině a rozsahu, pokud existuje, vzniklé retinopatie.
Odborník znalý stavu techniky bude očekávat, že jsou dostupné vhodné metody podávání inhibitoru BCAT, které jsou vhodné pro předloženou inventivní metodu. Ačkoliv může být použita pro podání konkrétního BCAT ihibitoru více než jedna cesta, konkrétní cesta může poskytnout bezprostřednější a efektivnější reakci než cesta jiná. Proto jsou popsané cesty podávání pouze exemplární a v žádné případě nejsou omezující.
··
Dávka podáváná savci, zejména člověku, v souladu s předloženým vynálezem, by měla být postačující pro zajištění požadované odezvy u živočicha v rozumném časovém rámci. Odborník znalý stavu techniky určí, že dávka bude záviset na řadě faktorů, včetně síly konkrétně použitého BCAT inhibitoru, věku, typu, stavu nebo stupně onemocnění, a tělesné hmotnosti živočicha, stejně jako objemu retiny, na kterou má působit nebo který je skutečně zasažen retinopatií. Velikost dávky bude také dána cestou, dobou a frekvencí podávání, stejně jako přítomností, povahou a rozsahem jakýchkoliv nežádoucích vedlejších účinků, které by mohly doprovázet podávání konkrétního BCAT inhibitoru, a požadovaným fyziologickým účinkem. Odborník znalý této oblasti techniky si je vědom toho, že různé podmínky nebo stavy nemoci, zvláště chronické podmínky nebo stavy nemoci, mohou vyžadovat prodloužené léčení zahrnující vícenásobné podávání.
Vhodné dávky a režim dávkování lze stanovit běžnými technikami známými odborníkovi stavu techniky. Obecně je léčení zahájeno malými dávkami, které jsou nižší než optimální dávka sloučeniny. Potom je dávka zvyšována malými díly až je dosaženo optimální efektu s ohledem na okolnosti. Předložená inventivní metoda zahrnuje typicky podávání od asi 1 mg/kg/den do asi 100 mg/kg/den, přednostně od asi 15 mg/kg/den do asi 50 mg/kg/den, pokud je podávána systematicky. Intraokulární (tj .nitrooční) podávání typicky zahrnuje podávání od 0,1 mg celkově do asi 5 mg celkově, přednostně od asi 0,5 mg celkově do asi 1 mg celkově. Výhodná koncentrace pro topické podávání je 100 mu M.
Prostředky pro použití v předložené inventivní metodě zahrnují přednostně farmaceuticky přijatelný nosič a množství inhibitoru BCAT postačující pro léčení retinopatie profylakticky nebo terapeuticky. Nosič může být kterýkoliv z běžně používaných a je omezen pouze chemicko-fyzikálními požadavky, jako je rozpustnost a nedostatek rektivity se sloučeninou, a cestou podání. Odborník znalý stavu techniky určí, že spolu s následně popsanými farmaceutickými prostředky mohou být inhibitory BCAT formulovány jako ·· «· ·· ·* · ·· • · « 9 · 9 9 · · 9 • ·« *9999 *9 9 • 999 09 99 99 99 ··!* polymerní kompozice, zahrnující komplexy, jako jsou cyklodextrinové inklusní komplexy, liposomy, mikrokuličky, mikrokapsle a podobné (viz např. patenty US 4 997 652, 5 185 152 a 5 718 922).
Inhibitor BCAT může být formulován jako farmaceuticky přijatelná adiční sůl s kyselinou. Příklady farmaceuticky přijatelných adičních solí s kyselinou pro použití ve farmaceutickém prostředku zahrnují ty deriváty minerálních kyselin, jako jsou od kyseliny chlorovodíkové, bromovodíkové, fosforečné, metafosforečné, dusičné a sírové, a organických kyselin, jako jsou kyseliny vinná, octová, citrónová, jablečná, mléčná, fumarová, benzoová, glykolová, glukonová, jantarová a arylsulfonová, například kyselina ptoluensulfonová.
Farmaceuticky přijatelné excipienty, jak jsou zde popsané, například vehikula, adjuvans, nosiče nebo ředidla, jsou velmi dobře známé odborníku ze stavu techniky a jsou veřejnosti snadno dostupné. Je výhodné, pokud je farmaceuticky přijatelný nosič chemicky inertní k inhibitoru BCAT a nemá škodlivé vedlejší účinky nebo toxicitu za podmínek používání.
Výběr excipientu bude určen jednak konkrétním BCAT inhibitorem, stejně jako konkrétní metodou použitou pro podávání prostředku. Dále existuje široká řada vhodných formulací farmaceutického prostředku podle předloženého vynálezu. Následující složení jsou pouze příkladná a nejsou v žádném případě omezující.
Injekční složení jsou mezi výhodnými v souladu s předloženým postupem. Požadavky na účinné farmaceutické nosiče pro injekční prostředky jsou odborníkům velmi dobře známé (viz Pharmaceutics and Pharmacy Practice, J.B.Lippincott Co., Philadelphia, Pa., Bankéř and Chalmers, 4. Vydání, str. 622-630 (1986)).Je výhodné, aby injekční prostředky byly podávány intramuskulárně, intravenosně nebo intraperitoneálně.
·· ·· φφ ·· ·φ Φ· • · · v φ φ · · « ·* ··· * · φ · · φ φφ ♦ 9 · · Φ ΦΦ ·ΦΦ ♦φ • ·Φ Φ · Φ · · ·· • ·Φ9 ·· ·· ·Φ Φ· Φ···
Topické prostředky jsou odborníkům velmi dobře známé. Tyto prostředky jsou vhodné v souvislosti s předloženým vynálezem pro aplikaci na kůži. Použití náplastí, rohovkových clon (víz např. patent US 5 185 1 52) a oftalmických roztoků (viz např. patent US 5 710 182) a mastí, i očních kapek, je také v rozsahu znalostí v této oblasti.
Prostředky vhodné pro orální podávání mohou sestávat z (a) kapalných roztoků, jako je účinné množství sloučeniny rozpuštěné v ředidlech, jako je voda, fyziologický roztok nebo pomerančový džus; (b) kapslí, sáčků, tablet, pastilek a pilulek, každé obsahující předem stanovené množství účinné složky, jako pevné látky nebo granule; ( c) prášků; (d) suspenzí v příslušném rozpouštědle; a (e) vhodných emulzí. Kapalné prostředky mohou zahrnovat ředidla, jako je voda a alkoholy, například ethanol, benzylalkohol, a polyethylenalkoholy, buď s nebo bez přidání farmaceuticky přijatelného povrchově aktivního činidla, nebo emulgačního činidla. Formy kapslí mohou být obvyklého typu s tvrdým nebo měkkým želatinovým obalem, obsahující například povrchově aktivní látky, mazadla a inertní plniva, jako je laktosa, sacharosa, kalcium fosfát a kukuřičný škrob. Tabletové formy mohou obsahovat jednu nebo více složek z laktosy, sacharosy, mannitolu, kukuřičného škrobu, bramborového škrobu, kyseliny alginové, mikrokrystalické celulosy, arabské gumy, želatiny, klovatiny, koloidního oxidu křemičitého, stearátu zinečnatého, kyseliny stearové a dalších excipientů, barviv, ředidel, pufrovacích látek, dezintegračních prostředků, zvlhčovačích látek, konzervačních látek, ochucovadel a farmakologicky přijatelných excipientů. Pastilkové formy, tedy formy zdravotních bonbonů, mohou obsahovat účinnou látku v ochucovadle, obvykle v sacharose a arabské gumě nebo tragakantu, stejně tak pastilky obsahující účinné látky v inertní bázi, jako je želatina a glycerin, nebo sacharosa a arabská guma, emulse, gely a podobné obsahující spolu s účinou látkou takové excipienty, které jsou známé ze stavu techniky.
Účinnost orálně podávaných léčiv závisí na účinosti transportu léčiva přes svalový epitel, a na jeho stabilitě v entro-hepatickém oběhu. Léčiva, která ·· ·· ·· *· ♦· ··»· · · · · · ♦ * ·« 4 · « · 4 · * « • «· · · · ♦ · · · ···· ·· ·· ·· ·* ♦ ·*· jsou účinná při parenterálním podání ale méně účinná orálně, nebo jejichž plasmová životnost je považována za příliš krátkou, mohou být chemicky modifikovány na formu proléčiva.
Prostředky vhodné pro parenterální podávání zahrnují vodné a nevodné, isotonické sterilní injekční roztoky, které mohou obsahovat antioxidanty, pufry, bakteriostatika a přísady, které poskytují prostředku isotonicitu s krví uvažovaného příjemce, a vodné a nevodné sterilní suspenze, které mohou zahrnovat suspendační látky, solubilizátory, zahušťovadla, stabilizátory a konzervační látky. Inhibitor může být podáván ve fyziologicky přijatelném ředidle ve farmaceutickém nosiči, jako je sterilní kapalina nebo směs kapalin, včetně vody, fyziologického roztoku, vodné dextrosy a podobných cukrových roztoků, alkoholu, jako je ethanol, isopropanol nebo hexadecylalkohol, glykolu, jako je propylenglykol nebo polyethylenglykol, dimethylsulfoxidu, glycerolketalu, jako je 2,2-dimethyl-l.3-dioxolan-4-methanoi, etheru, jako je poly(ethylenglykol) 400, oleje, mastné kyseliny, esteru mastné kyseliny nebo glyceridu, nebo acetylovaného glyceridu mastné kyseliny, s nebo bez přidání farmaceuticky přijatelné povrchově aktivní látky, jako je mýdlo nebo detergent, suspendační činidlo, jako je pektin, karbomery, methylcelulosa, hydroxypropylmethylcelulosa nebo karboxymethylcelulosa, nebo emulgační činidla nebo jiná farmaceutická adjuvans. Oleje, které mohou být použity pro parenterální formulace, zahrnují petroleum, živočišné, rostlinné nebo syntetické oleje. Specifické příklady olejů zahrnují arašídový, sojový, sezamový olej, olej z bavlníkových semen, kukuřičný, olivový olej, vazelínový (petrolatum) a minerální olej.
Vhodné mastné kyseliny pro použití v parenterální formulaci zahrnují kyselinu olejovou, kyselinu stearovou a kyselinu isostearovou. Ethyloleát a isopropylmyristát jsou příklady vhodných esterů mastných kyselin.
Vhodná mýdla pro použití v parenterálních prostředcíéch zahrnují soli s alkalickými kovy, amonné a triethanolaminové mastné soli, a vhodné detergenty zahrnují (a) kationtové detergenty, jako jsou například dimethyldialkylamonium halogenidy a alkyl-pyridinium halogenidy, (b) * · · * · · · · · · · • *4 9 4 4 4 · · ♦ 4 • 4 ···· · · · • ·4· ·4 44 ·· ·· ···· aniontové detergenty jako jsou například alkyl-, aryl- a olefinové sulfonáty, alkyl-, olefin-, ether- a monoglycerid- sulfáty a sulfosukcináty, ( c) neiontové detergenty jako jsou například mastné aminoxidy, alkanolamidy mastných kyselin a polyoxyethylenpropylenové kopolymery, (d) amfoterní detergenty, jako jsou například alkyl-p-aminopropionáty a 2-alkyl-imidazolínové kvarterní-amoniové soli, a (e) jejich směsi.
Parenterální formulace typicky obsahují od asi 0,5 do asi 25 % hmotnostně účinné látky v roztoku. Mohou být použity konzervační látky a pufry. Aby se minimalizovalo nebo eliminovalo podráždění na místě vpichu, může tato kompozice obsahovat jeden nebo více neiontových povrchově aktivních látek majících hydrofilně-lipofilní rovnováhu (HBL) od asi 12 do asi
17.
Množství povrchově aktivní látky v takovém prostředku leží typicky v rozmezí od asi 5 do asi 15% hmotnostně. Vhodné povrchově aktivní látky zahrnují estery polyethylen-sorbitanové mastné kyseliny, jako je sorbitan monooleát, a vysokomolekulární adukty ethylenoxidu s hydrofobní bází, vytvořené kondenzací propylenoxidu s propylenglykolem. Parenterální prostředky mohou být prezentovány jednodávkovými nebo vícedávkovými uzavřenými zásobníky, jako jsou ampule a lékovky, a mohou být uloženy za podmínek mrazového sušení (lyofiolizovány), požadovaných pouze pro přidání sterilního kapalného excipientu, například vody, pro injekce, bezprostředně před použitím. Prozatímní (improvizované) injekční roztoky a suspenze mohou být připraveny ze sterilních prášků, granulí a tablet dříve popsaného druhu.
Tyto prostředky mohou být formulovány jako intraokulární prostředky, prostředky s postupným uvolňováním nebo zařízení (viz např. patent US 5 378 475). Například gelantin, hondroitin-sulfát, polyfosfoester, tako je bis-2-hydroxyethyl-tereftalát (BHET), nebo polymléčná-glykolová kyselina (v různých poměrech), mohou být použity pro vytvoření prostředků s postupným uvolňováním. Implantáty (viz patenty US 5 443 505, 4 853 224 a 4 997 652), zařízení (viz např. patenty US 5 554 187, 4 863 457, 5 098 443 a 5 725 493), jako jsou implanovatelné prostředky, např. mechanický rezervoár, « · · • * ·»· intraokulární prostředek nebo extraokulární prostředek s intraokulárním průchodem (jako 100 mu -1 mm v průměru), nebo implantát nebo prostředek složený z polymerních kompozicí popsaných výše, mohou být použity.
Předložená inventivní metoda rovněž zahrnuje společné podávání dalších farmaceuticky aktivních sloučenin. „Společným podáváním“ („kopodávání“) se míní podávání před, současně s, např,. v kombinaci s BCAT inhibitorem ve stejném prostředku nebo v samostatných složeních, nebo po podání BCAT inhibitoru, jak byl popsán výše. Například kortikosteroidy, jako je prednison, methylprednisolon, dexamethason nebo triamcialon acetinid, nebo nekortikosteroidní protizánětlivé sloučeniny, jako je ibuprofen nebo flubiproben mohou být podávány společně. Podobně vitamíny a minerály, jako je zinek, antioxidanty, jako karotenoidy (jako je xantofyl, karotenoid jako zeaxantin nebo lutein), a mikronutriční látky mohou být podávány společně.
• *
4··
...... 1 · · · · .. .· ·· ··
Obecná schémata syntéz pro přípravu sloučenin vzorců I-IV.
PŘÍKLAD 1: trans-(lR,3R)(l-Aminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochlorid
(i) EtO£CH£N,NH^Ac, AcOH,Tohien120°C (ii) a.NaCN, EtOH(95%l H£, 115°C,b. HCl(g) (iii) EtOH, HC1 (g), Tdneni (iv) HC1, HjO (v) H^EtOH/NH^ RaneyNi, 30-50° C (vi) HCl, HgO, 140° C
Krok i: 2-Kyano-((R)-3-methyl-cyklohexyliden)-octová kyselina, ethylester
Směs 3-(R)-Methylcyklohexanonu (125mmol), ethylkyanoacetátu (124mmol), amonium-acetátu (12.5mmol) a ledové kyseliny octové (24 mmol) byla refluxována s Dean Stark- vodním lapačem po 24 hodiny. Směs byla ochlazena a promyta H2O.Vodné výplachy byly extrahovány toluenem. Toluenové extrakty byly spojeny s původní organickou vrstvou, sušeny nad MgSO4 a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový olej byl purifikován Kugelrohrdestilací za získání oleje (teplota Bpt pece 150-160°C). Výtěžek 86 %. ‘HNMR (CDC13) 400MHz δ: 1,01-1,05 (3H, m), 1,17-1,32 (1H, m), 1,35 (3H, t, J=7Hz), 1,42-2,30 (6H, m), 2,98 (1H, d, J=13Hz), 3,74 (1H, d, J=13Hz),
4,27 (2H, q, J=7Hz)
MS (Cl) m/z: 208 (MH+) • «
Analýza: C12H17NO2 Vypočt: C 69,54 H 8,27 N 6,76;
Nalezeno: C 69,44 H 8,22 N 6,76
Krok ii: t rans-( 1 R,3R)- 1-Ky ano met hy 1-3-methy 1-cy kloh ex a n kar boni t r i 1
Do roztoku NaCN (40mmol) v 6ml H2O a 160mL ethanolu (95%) byl přidán ethylester 2-kyano-((R)-3-methyl-cyklohexyliden)-octové kyseliny (40mmol). Po 22 hodinách refluxu byl ochlazený roztok filtrován, a filtrát byl okyselen plynným HC1 a opět filtrován. Rozpouštědlo bylo odstraněno a surový olej byl purifikován chromatografii na koloně za zídkání bledě žluté krystalické pevné látky. Výtěžek 88 %.
'HNMR (CDCI3) 400MHz δ: 0,90 (1H, m), 0,98 (3H, d, J=6Hz), 1,11 (1H, t, J=12Hz), 1,38 (1H, dt, J=4, 9Hz), 1,60-1,90 (4H, m), 2,07 (2H, m), 2,68 (2H, s). MS (Cl) m/z: 163 (MH+)
Analýza: CioH]4N2 Vypočt.: C 74,04 H 8,70 N 17,27
Nalez: C 74,05 H 8,71 N 17,25
Step iii: ethylester trans-2-((lR,3R)-l-kyano-3-methyl-cyklohexyl)acetimidové kyseliny
Do roztoku trans-(lR,3R)-l-kyanomethyl-3-methyl-cyklohexankarbonitrilu (6,2mmol) ve 30mL ethanolu (absolutní) bylo přidáno 30 mL suchého toluenu. Roztok byl zmrazen v ledu zatímco probíhalo sycení plynným HC1. Zazátkovaný roztok byl potom ponechán stát při teplotě místnosti po 24 hodiny. Rozpouštědlo bylo odstraněno a pevný zbytek byl rozmělněn s diethyletherem za získání výše uvedené látky, která byla sušena za získání bílé krystalické pevné látky, Výtěžek: 50%.
T.t. 118-120 °C ‘HNMR (DMSO) 400MHz δ: 0,8-0,89 (1H, m), 0,91 (3H, d, J=6,3Hz), 1,061,12 (1H, m), 1,24-1,35 (1H, m), 1,37 (3H, t, J=7Hz), 1,41-1,95 (6H, m), 3,02 (2H, s), 4,49 (2H, q, J=7Hz) MS (Cl) m/z: 195 (MH+)
Analýza: C]2H2oN20.1,08M HC1 Vypočt: C 58,19 H 8,58 N 11,31
Nalez: C 58,25 H 8,59 N 11,59
Krok iv: ethylester kyseliny trans-((lR,3R)-l-kyano-3-methyl-cyklohexyl)octové
Ethylester trans-2-((lR,3R)-l-kyano-3-methyl-cyklohexyl)-acetimidové kyseliny (1,1 mmol) byl rozpuštěn v ledově chladné vodě (40mL) a pH bylo upraveno IN HC1 na pH 1,5, Roztok byl míchán při teplotě místnosti po 20 hodin. Byl přidán ethylacetát (30mlL) a organická vrstva byla promyta vodou, sušena a rozpouštědlo bylo odstraněno za získání čirého oleje. Výtěžek 82% ‘HNMR (CDC13) 400MHz δ: 0,78-0,90 (1H, m), 0,93 (3H, d, J=6Hz), 0,971,00 (1H, m), 1,23-1,25 (1H, m), 1,29 (3H, t, J=7,2Hz), 1,59-1,80 (4H, m), 2,05-2,08 (2H, Br t), 2,54 (2H, s), 4,20 (2H, q, J=7,2Hz)
MS (Cl) m/z: 210 (MH+) Analýza: C12H19NO2 Vypočt: C 68,87 H 9,15 N 6,69
Nalez.: C 68,87 H 9,11 N 6,90
Krok v: trans-(5R,7R)-7-methyl-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-on
Ethylester kyseliny trans-((lR,3R)-l-kyano-3-methyl-cyklohexyl)octové (8,9mmol) byl rozpuštěn v NEU/EtOH (7%, 40mL) spolu s předem propláchnutým Raney-niklem (H2O následovaná EtOH) ve 250ml Parrově baňce. Roztok byl hydrogenated při 300 °C, 46 psi po 24 hodin (1 psi = 6,89 kPa). Ochlazený roztok byl filtrován přes podložku z celitu, promyt ethylacetátem. Rozpouštědlo bylo odstraněno z filtrátu za získání bílé pevné látky. Výtěžek 30 %. T.t. 92-98 °C ‘HNMR (DMSO) 400MHz δ: 0,75-0,82 (1H, m), 0,84 (3H, d, J=6,4Hz), 0,880,94 (1H, m), 1,14-1,19 (1H, m), 1,20-1,50 (2H, m), 1,50-1,63 (4H, m), 1,91 (2H, s), 3,03 (2H, s), 7,42 (1H, s)
MS (Cl) m/z: 168 (MH+)
Analýza: C10H17NO Vypočt.: C 71,81 H 10,25 N 8,37
Nalez.: C 71,80 H 10,29 N 8,31
Krok vi: trans-((lR,3R)-l-Aminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochlorid • φ trans-(5R,7R)-7-Methyl-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-one (2,17mmol) byl rozpuštěn v roztoku 10M HC1 (5mL) a H2O (5mL) a směs byla refluxováína při asi 140 °C po 5 hodin. Ochlazený roztok byl zředěn 10 mL H2O a 10 mL DCM a vodná vrstva byla dále promyta 2x15 mL DCM. Vodná vrstva potom byla vysušena za získání bílé pevné látky. Výtěžek 76%.
T.t. 148-155 °C. [cc]d = -2.5 (T=20 °C, c=l, MeOH). Jeden isomer (RR). 'HNMR (CDC13) 400MHz δ: 0,69-0,79 (1H, m), 0,82 (3H, d, J=6Hz), 0,870,90 (1H, m), 1,12-1,20 (1H, dt, J=4,5, 13,3 Hz), 1,34-1,50 (3H, m), 1,60-1,63 (3H, m), 2,30 (2H, s), 3,01 (2H, s), 7,93 (3H, Br s). MS (Cl) m/z: 186 (MH+)
Analýza: CioHt<iN02 . 1,1 HC1 Vypočt.: C 53,29 H 8,99 N 6,21
Nalez.: C 53,23 H 8,99 N 6,45
PŘÍKLAD 2: (l-Aminomethyl-2-methyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochlorid
(i) EtO^CCH^CN, NH^Ac, AcOH, Tdrie»., 120 °C (ii) a. NaCN, EtOH(95%), H^, 115° C,b. HC1 (g) (iii) EtOH, HC1 (g), Tohien (iv) HCL, Hp (v) H.? EtOHJNH ? RaneyNi, 30-50° C (ň)Hd,Hp, 140° C
Krok i: Ethylester kyseliny 2-kyano-(2-methyl-cyklohexyliden)-octové • 9 · · (+/-) 2-Methylcyklohexanon (80 mmol), ethyl-kyanoacetát (80 mmol), amonium acetát (8 mmol) a ledová kyselina octová (16 mmol) reagovaly podle Obecného postupu (Příklad 1) krok (i) za získání čirého oleje. Výtěžek 76 %. ‘HNMR (CDCh) 400MHz δ: 1,23 (3H, dd, J=7, 10Hz), 1,35 (3H, t, J=7Hz), 1,55-1,82 (5H, m), 1,93-2,05 (1H, m), 2,17 (1H, dt, J=5, 14Hz), 2,47 (1H, dt, J=5, 9Hz), 2,92-2,97 (1H, Br d, J=15Hz), 3,30-3,35 (1H, m), 3,81-3,86 (1H, Br d, J=1 5 Hz), 4,06-4,14 (1H, m), 4,23-4,30 (3H, dq, J=l, 6Hz) MS (Cl) m/z: 208 (MH+)
Analýza: CnHpNOa Vypočt.: C 69,54 H 8,27 N 6,76
Nalez.: C 69,26 H 8,26 N 6,66
Krok ii: l-Kyanomethyl-2-methyl-cyklohexankarbonitril
Ethylester 2-kyano-(2-methyl-cyklohexyliden)-octové kyseliny (37 mmol), NaCN (37 mmol) reagovaly jako v Obecném postupu (příklad 1) krok (ii). Surová pevná látka byla purifikována chromatografii na koloně (3:1, heptan : ethylacetát), za získání čirého oleje. Výtěžek 76% ‘HNMR (CDCh) 400MHz δ: 1,06 (3H, d, J=6,8Hz), 1,11 (3H, d, J=6,8Hz),
1,20-2,20 (18H, m), 2,77 (2H, dd, J=16,8Hz), 2,63 (2H, dd, J=16,8Hz) MS (Cl) m/z: 163 (MH+)
Analýza: Ci0Hi4N2 . 0,1 H2O Vypočt: C 73,49 H 8,69 N 16,86
Nalez.: C 73,24 H 8,73 N 17,08
Krok iii: Ethylester kyseliny 2-(l-kyano-2-methyl-cyklohexyl)-acetimidové
1-Kyanomethyl-2-methyl-cyklohexankarbonitril (7,3 mmol) reagoval jako v Obecném postupu (příklad 1) krok (iii) za získání bílé pevné látky. Výtěžek 70 %. T.t. 107-114 °C.
‘HNMR (DMSO) 400MHz δ: 1,00-1,06 (3H, 2xt, J=6,4Hz), 1,10-1,38 (2H, m), 1,38 (3H, t, J=6,8Hz), 1,40-2,10 (7H, m), 2,86, 2,92, 3,10, 3,28 (2H, 4xd, J= 14, 14.4, 14.8, 14 Hz resp.), 4,.48 (2H, q, J=6,.8Hz)
MS (Cl) m/z: 209 (MH+)
Analýza: C12H2oN20.1,06 HC1 Vypočt.:C 58,37 H 8,60 N 11,34
Nalez.: C 58,15 H 8,63 N 11,60 ♦ · ··
Krok iv: Ethylester kyseliny (l-kyano-2-methyl-cyklohexyl)-octové
Ethylester kyseliny 2-( 1 -kyano-2-methyl-cyklohexyl)-acetimidové (4,1 mmol) reagoval jako v Obecném postupu (Příklad 1) krok (iv) za získání čirého oleje. Výtěžek 82 %.
'HNMR (CDC13) 400MHz δ: 1,03, 1,09 (3H, 2xd, J=7Hz), 1,27-1,30 (3H, m), 1,32-2,00 (8H, m), 2,10-2,20 (1H, m), 2,44, 2,82 (3H, 2xd, J=14,8Hz), 2,54 (1H, m), 4,16-4,22 (2H, m). MS (Cl) m/z: 210 (MH+)
Analýza: C12Hi9NO2 Vypočt.: C 68,87 H 9,15 N 6,69
Nalezeno: C 68,84 H 9,13 N 6,75
Krok v: 6-Methyl-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-on
Ethylester kyseliny (l-kyano-2-methyl-cyklohexyl)-octové (8,4 mmol) reagoval podle Obecného postupu (Příklad 1) krok (v) po 24 hodiny při 100 °C, 50 psi (1 psi = 6,89 kPa). Surový olej byl purifikován chromatografii na koloně (ethylacetát), za získání bílé pevné látky. Výtěžek 34 %. T.t: 85-90 °C. ]HNMR (CDC13) 400MHz δ: 0,88-0,91 (3H, dd, J=4, 6,8Hz), 1,41-1,78 (9H,
m), 2,00-2,30 (2H, m), 3,06-3,23 (2H, m), 7,27 (1H, Br s)
MS (Cl) m/z: 168 (MH+)
Analýza: C10H17NO Vypočt.: C 71,81 H 10,24 N 8,37
Nalez.: C 71,83 H 10,19 N 8,27
Krokvi: (l-Aminomethyl-2-methyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloride
6-Methyl-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-on (2,5 mmol) reagoval jako v Obecném postupu (Příklad 1) krok (vi) za získání bílé pevné látky. Výtěžek 42 %. T.t.: 108-110 °C.
[a]o = 0 (T=20,5 °C, c=l, MeOH). Dva diastereomery 3:1 ’HNMR (DMSO + D2O) 400MHz δ: 0,79, 0,85 (3H, 2xd, J=6,8Hz), 1,21-1,65 (9H, m), 2,22, 2,43 (1H, 2xd, J=15Hz), 2,46, 2,49 (1H, 2xd, J=15Hz), 2,832,92 (1H, 2xd, J=13,6Hz), 3,05, 3,15 (1H, 2xd, J=13,6Hz).
MS (Cl) m/z: 186 (MH+) ·
Analýza: CjoHjgNC^. 1,3 HC1
VypoČt.: C 51,64 H 8,79 N 6,02
Nalez.: C 51,66 H 8,91 N 6,16
PŘÍKLAD 3 (l-Aminomethyl-3,3-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochlorid
i) Cul, MeLi, NI^Cl, NH* (92%) ii) irCCH2CO2E-t’ tíH4OAc. toliku, $3¾) iiijNiCN, ZtCH, HjO, (57%) iv) HC1, EtOH, tetany (93%)
v) 1¾. Raiůy Ni, ECH, NH*, (84%) vij HE1, H^O, (¢4%)
Krok i: 3,3-Dimethyl-cyklohexanon;
Syntetizováno metodou uvedenou od Pelletier, S.W., Mody, N.V., J. Org. Chem., 1976, 41, 1069.
Roztok lithium-dimethylkuprátu byl připraven adicí methyl-lithia (1,4 M v etheru, 77,25 mL, 2,45 mol) do jodidu měďného (8,8g, 0,046 mol) pod argonem. Roztok byl ochlazen na 0 °C a po kapkách byl přidán 3-methylcyklohexen-1 -on (5 mL, 0,044 mol), za míchání, a byla vytvořena temně žlutá sraženina. Suspenze byla míchána při teplotě místnosti po jednu hodinu předtím, než byla nalita do vodného roztoku ammonia (100 mL) a ammonium acetátu (asi 5 g). Vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla promyta diethyletherem (3 x 50 mL). Spojené organické vrstvy byly promyty nasycenou ··
solankou (3x lOOmL), sušeny (MgSCU) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu za získání tmavě žluté kapaliny.
‘H NMR (400MHz. CDCI3) 0,98 (6H, s), 1,59 (2H, m), 1,88 (2H, m), 2,14 (2H, m), 2,26 (2H, m).
IR (film) Vmaxcm'1 2956, 171 1 (C=O), 1457, 1368, 1292, 1226, 1076.
Krok ii: Ethylester kyseliny 2-kyano-5,5-dimethyl-3-propyl-hex-2-enové
Do roztoku 3,3-dimethylcyklohexanonu (4 g, 0,032mol) v toluenu (25 mL) byl přidán ethylkyanoacetát (3,37mL, 0,032 mol, 1 ekv.), ammonium acetát (0,24g, 0,003mol, 0,1 ekv.), a kyselina octová (0,36mL, 0,006mol, 0,2 ekv.). Žlutý roztok byl zahříván k refluxu při připojení na Dean-Stark lapač, a zahřívání pokračovalo až do doby, kdy 1 chladiči nekondenzovala žádná voda. Po ochlazení by oranžový roztok promyt vodou (3x 25mL) a organická vrstva byla sušena (MgSCU). Filtrace a odstranění rozpouštědla poskytly surový produkt jako temně oranžovou tekutinu. Purifikace byla provedena Kugelrohr-destilací za získání směsi cis a trans produktů jako bledě žluté kapaliny. T.varu 160-170 °C, 4 mbar (5,83g, 83 %).
’H NMR (400MHz, CDC13) 0,96 (6H, s, 2x Me), 0,99 (6H, s, 2x Me), 1,34 (6H, m, 2x Me z esteru), 1,49 (4H, m), 1,75 (2H, quin, J 6,4), 1,82 (2H, quin, J 6,4), 2,46 (2H, s), 2,60 (2H, t, J = 6,4 Hz), 2,80 (2H, s), 2,93 (2H, t, J = 6,4 Hz), 4,27 (4H, m).
MS (Cl) z/e 222 (M++1)
IR (film) v,·»/·1’’'1 2958, 2870, 2224 (CN), 1731 (C=O), 1606 (C=C), 1277, 1223.
Analýza: C13H19O2N Vypočt.: C 70,56 H 8,65 N 6,32
Nalez.: C 70,35 H 8,79 N 6,25
Krok iii: l-Kyanomethyl-3,3-dimethyl-cyklohexankarbonitril
Do roztoku ethylesteru kyseliny 2-kyano-5,5-dimethyl-3-propyl-hex-2enové (1,26g, 0,006mol) v ethanolu (100 ml) a vodě (4mL) byl přidán kyanid sodný (0,28g, 0,006mol, 1 ekv.). Nažloutlý roztok byl zahříván pod refluxem po 8 hodin a potom byl ochlazen, přičemž během této doby se tvořila téměř bílá sraženina. Suspenze byla filtrována pod vakuem a filtrát byl okyselen
plynným HC1, až bylo pH přibližně 2. Potom byla směs podruhé filtrována a potom bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu za získání surového produktu jako bledě zelené pevné látky. Mžiková chromatografie na koloně, po adsorpci surového produktu na silice, promýváním s 0-50% EtOAc v heptanu poskytla binitril jako bezbarvou pevnou látku (0,57g, 57%).
:H NMR (400MHz, CDC13) 0,99 (3H, s, Me), 1,13 (1H, td, J 13,2, 4,2), 1,21 (3H, s, Me), 1,32 (2H, m), 1,54 (1H, m), 1,82 (3H, m), 2,15 (1H, m), 2,65 (2H, s, CH2CN).
13C NMR (400MHz, CDC13) 19.61, 25.17, 30.79, 31.18, 33.77, 34.79, 35.37, 37.92, 46.26, 1 15.06, 122.19.
MS (Cl) z/e 177 (M+ +1)
IR (film) vmsx cm·’ 2988, 2937, 2869, 2237 (2x CN), 1749, 1456, 1423, 1369, 1202, 1 180, 1031, 972.
Analýza: C]]H]6N2 Vypočt.: C 74,96 H 9,15 N 15,89
Nalezeno: C 75,08 H 9,32 N 15,80
Krok iv: Ethylester kyseliny (l-kyano-3,3-dimethyl-cykIohexyl)-octové
-Kyanomethyl-3,3-dimethyl-cyklohexankarbonitril (0,50g, 2,84mmol) byl rozpuštěn v absolutním ethanolu (20mL) při teplotě místnosti a potom ochlazen na 0 °C. Do roztoku byl přidán toluen (20 ml) a potom byla reakční směs okyselena průchodem plynného HC1 skrze směs při mírné rychlosti po asi 45 minut. Potom byla baňka uzavřena a ponechána stát při teplotě místnosti po 24 hodiny. Žlutý roztok byl rozdělen mezi ethylacetát a vodu a vrstvy byly odděleny. Vodná vrstva byla extrahována ethylacetátem (3x 30 mL), a spojené organické látky byly promyty vodným nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3x 50mL), solankou (3x 50mL), sušeny (MgSO4) a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku za získání bledě žluté kapaliny (0,59g, 93%). ’H NMR (400MHz, CDC13) 0,94 (3H, s, Me), 1,16 (3H,m), 1,21 (3H, s, Me),
1.29 (3H, t, J 7,2, CH2CH3), 1,50 (1H, m), 1,65 (1H, dt, J 14.4, 7.6), 1,84 (1H, qt, J 13.3, 3.2), 1,.96 (1H, dt, J 13,7, 2,2), 2,16 (1H, m), 2,48, (1H, d, J 15,6, C-2H), 2,54 (1H, d, J 15,6, C-2H), 4,20 (2H, q, J 7,2, CH2CH3).
I3C NMR (400MHz, CDC13) 14,21, 19,65, 25,42, 31,03, 34,04, 34,14, 36,08, 38,44, 46,14, 46,80, 61,02, 123,67, 169,00. MS (Cl) z/e 224 (M+ +1).
IR (film) ν^Γ'1 2998, 2937, 2868, 2234 (CN), 1738 (C=0), 1457, 1372, 1217, 1 1 81, 1 154, 1026.
Analýza: C]3H21NO2 Vypočt.: C 69,92 H 9,48 N 6,27
Nalez.: C 69,63 H 9,45 N 6,15
Krok (v) 7,7-Dimethyl-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-on:
Ethylester kyseliny (l-kyano-3,3-dimethyl-cyklohexyl)-octové (0 5 g, 2,23 mmol) byl hydrogenován v ethanolickém ammoniu (60 mL) s Raney niklem jako katalyzátorem (ca. 0,25g) při 50 °C a 50 psi (1 psi = 6,89 kPa) po 48 hodin. Potom byl katalyzátor odstraněn filtrací přes celit a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu za získání nazelenalé krystalické pevné látky. Mžiková chromatografie na koloně s promýváním 0-100% ethylacetátem v heptanu poskytla čistý laktam jako bezbarvou pevnou látku (340 mg, 84%).
NMR (400MHz, CDC13) 0.89 (3H, s, Me), 0.92 (3H, s, Me), 1.25 (2H, m), 1.36 (2H, m), 1.51 (3H, m), 1.68 (1H, s), 2.18 (1H, d, J 16.4, CH2NH), 2.24 (1H, d, J 16.8, CH2NH), 3.15 (2H, s, CH2CO).
13C NMR (400MHz, CDC13) 19.16, 29.88, 30.36, 31.28, 36.57, 39.05, 39.61, 44.58, 49.54, 54.79, 177.72. MS (Cl) z/e 182 (M++l).
IR (film) vmaxcm·' 3203, 3100 (NH), 2914, 2860, 1698 (C=O), 1486, 1374, 1317, 1289, 1257, 1076.
Analýza: Ci 1H19NO Vypočt.: C 72,88 H 10,56 N 7,73
Nalez.: C 72,38 H 10,47 N 7,56
Krok ví: (l-AminomethyI-3,3-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochlorid:
7,7-Dimethyl-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-on (0,3g, 1,66 mmol) byl rozpuštěn ve směsi HC1 (konc., 5mL) a vodě (5mL) a získaný bezbarvý roztok byl zahříván k refluxu po 20 hodin. Roztok byl ochlazen a potom rozdělen mezi vodu a dichlormethan a vrstvy byly odděleny. Vodná vrstva byla promyta dichlormethanem (3x 20mL) a voda/HCl odstraněna na rotační odparce za získání surového produktu jako téměř bílé pevné látky. Rozetřením této pevné látky s ethylacetátem a filtrací produktu se získala (1-aminomethyl-3,3-
dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl, jako bezbarvá pevná látka (140mg, 42%, 64% vztaženo na obnovený výchozí materiál).
’H NMR (400MHz, DMSO) 0.90 (3H, s, Me), 0.92 (3H, s, Me), 1.15-1.49 (8H, m), 2.45 (2H, s, CH2CO2H), 2.90 (2H, br.q, J 13.5, CH2NH3), 7.96 (3H, br.s, NH3), 12.36 (1H, br.s, OH).
IR (film) vmaxcm’1 2930, 1728 (C=O), 1272, 1 123.
Analýza: ChH22NO2C1 Vypočt: C 56,04 H 9,41 N 5,94
Nalez.: C 55,79 H 9,61 N 6,23
PŘÍKLAD 4: (±)-(trans)-(l-Aminomethyl-3,4-dimethyl-cyklopentyl)-octová kyselina, hydrochlorid
Reagens: (i) Triethylfosfonacetát NaH; (ii) MeNO23Bu4N+F_; (iii) H2> Ni; (iv)
HC1
Krok i: syntéza ethylesteru (±) (trans)-(3,4-d imethyl-cy klopen ty liden)octové kyseliny (4b)
suchém tetrahydrofuranu (50 mL) a ochlazena na 0 °C. Triethylfosfonacetát (3,83 mL, 19,30 mmol) byl přidán a směs byla míchána při 0 °C po 15 minut.
Potom byl přidán keton (+/-)-(4a) (1,965 g, 17,54 mmol) v THF (10 mL) a
směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti. Po 2 hodinách byla směs rozdělena mezi diethylether (200 mL) a vodu (150 mL). Organická fáze byla oddělena, promyta solankou, sušena (MgSOq) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl purifikován mžikovou chromatografii (silika, ethylacetát : heptan 1:9) za získání 3.01 g (94%) látky (4b) jako bezbarvého oleje.
]H NMR 400 MHz (CDCI3): δ 1.01 (3H, d, J = 6 Hz), 1.03 (3H, d, J = 6 Hz),
1.26 (3H, t, J = 7 Hz), 1.49 (2H, m), 2.07 (1H, m), 2.24 (1H, m), 2.61 (1H, m),
4.13 (2H, q, J = 7 Hz), 5.72 (1H, s).
MS (C1+) m/e: 183 (M+l).
krok ii: syntéza ethylesteru kyseliny (±)(trans)-(3,4-dimethyl-l-nitromethyl-cyklopentyl)-octové (4c)
Ethyle ster kyseliny (±)(trans)-(3,4-dimethyl-cyklopentyliden)-octové (4b) (2.95 g, 16.2 mmol) byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (10 mL) a míchán při 70 °C s nitromethanem (1,9 mL, 35,2 mmol) a tetrabutylammonium fluoridem (1.0 M v tetrahydrofuranu, 22 mL, 22.0 mmol). Po 6 hodinách byla směs ochlazena na teplotu místnosti, zředěna ethylacetátem (50 mL) a promyta 2N HC1 (30 mL), následně solankou (50 mL). Organická fáze byla spojena, sušena (MgSO4) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl purifikován mžikovou chromatografii (silika, ethylacetát:heptan 1:9) za získání 1.152 g (29%) čirého oleje.
1H NMR 400 MHz (CDCI3): δ 0.98 (6H, d, J = 6 Hz), 1.10-1.39 (5H, m), 1.47 (2H, m), 1.87 (1H, m), 2.03 (1H, m), 2.57 (2H, ABq, J = 16, 38 Hz), 4.14 (2H, q, J = 7 Hz), 4.61 (2H, ABq, J - 12, 60 Hz).
MS (ES+) m/e: 244 (M+l).
IR (film) Vmaxcm’1 : 1 186, 13 76, 1549, 1 732, 2956.
Krok iii: Syntéza (+)-(trans)-7,8-dimethyl-spiro[4.4]nonan-2-onu (4d)
Ethyl ester kyseliny (±) (trans)-(3,4-dimethyl -1 -nitromethyl-cyklopentyl)octové (4c) (1.14 g, 4.7 mmol) byl rozpuštěn v methanolu (50 mL) a protřepáván s katalyzátorem Raney niklem pod atmosférou vodíku (40 psi; lpsi = 6,89 kPa) při 30 °C. Po 5 hodinách byl katalyzátor odstraněn filtraci • · přes celit. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu za získání 746 mg (95%) bledě žlutého oleje, který při stání tuhnul.
1H NMR 400 MHz (CDCI3): δ 0.98 (6H, d, J = 6 Hz), 1.32 (2H, m), 1.46 (2H,
m), 1.97 (2H, m), 2.27 (2H, ABq, J = 16, 27 Hz), 3.23 (2H, s), 5.62 (1H, br s).
MS (ES+) m/e: 168 (M+l).
IR (film) vmaxcm·' : 1451, 1681, 1715, 2948, 3196.
Krok iv: Syntéza (+)-(trans)-(l-aminomethyl-3,4-dimethyl-cyklopentyl)octové kyseliny, hydrochloridu(4) (±)-(trans)-7,8-Dimethyl-spiro[4.4]nonan-2-on (4d) (734 mg, 4.40 mmol) byl zahříván k refluxu ve směsi 1,4-dioxanu (5 mL) a 6N HC1 (15 mL). Po 4 hodinách byla směs ochlazena na teplotu místnosti, zředěna vodou (20 mL) a promyta dichlormethanem (3 x 30 mL). Vodná fáze byla spojena a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl rozetřen s ethylacetátem za získání 675 mg (69%) bílé pevné látky po spojení a sušení.
1H NMR 400 MHz (d6-DMSO): δ 0.91 (6H, d, J = 6 Hz), 1.18 (2H, m), 1.42 (2H, m), 1.72 (1H, m), 1.87 (1H, m), 2.42 (2H, ABq, J = 16, 24Hz), 2.90 (2H, ABq, J = 12, 34 Hz), 8.00 (3H, br s), 12.34 (1H, br s).
MS (ES+) m/e: 186 (M+l pro volnou bázi).
PŘÍKLAD 5 (cis/tr ans)-(3R)-(l-Aminomethy 1-3-methyl-cy klopen ty l)-octová kyselina, hydrochloride (5)
(Sa)
(5b)
Reagens: (i) Triethylfosfonacetát, NaH; (ii) MeNO2, Bu4N+F‘; (iii) H2, Ni; (iv)
HC1
Krok i: Syntéza ethylesteru (R)-(3-Methyl-cyklopentyIiden)-octové kyseliny (5b)
NaH (60% disperze v oleji, 1.86 g, 46.5 mmol) byla suspendována v suchém tetrahydrofuranu (40 mL) a ochlazena na 0 °C. Triethylfosfonacetát (9.69 mL, 48.8 mmol) byl přidán a směs byla míchána při 0 °Cpo 15 minut. Potombyl přidán (R)-3-methyl-cyklopentanon (5a) (5 ml, 46.5 mmol) v THF (10 mL) a směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti. Po 2 hodinách byla směs rozdělena mezi diethylether (200 mL) a vodu (150 mL). Organická fáze byla oddělena, promyta solankou, sušena (MgSOz)) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl purifikován mžikovou chromatografii (silika, ethylacetátiheptane 1:9) za získání 5,45 g (70%) of (2) jako bezbarvého oleje. 1H NMR 400 MHz (CDCI3): δ 1.04 (3H, m), 1.27 (3H, t, J - 7 Hz), 1.80-2.74 (7I-I, m), 2.90-3.15 (1H, m), 4.13 (2H, q, J = 7 Hz), 5.76 (1H, s).
MS (CI+) m/e: 169 (M+l).
IR (film) vtriaxcm'! : 1205, 1371, 1653, 1716,2955.
Krok ii: Syntéza ethylesteru (cis/trans)-(3R)-(3-methyl-l-nitromethylcyklopentyl)-octové kyseliny (5c)
Ethylester (R)-(3-methyl-cyklopentyliden)-octové kyseliny (5b) (3.0 g, 17.8 mmol) byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (20 mL) a míchán při 70 °C s nitromethanem (1.92 mL, 35.6 mmol) a tetrabutylammonium fluoridem (1.0 M v tetrahydrofuranu, 25 mL, 25.0 mmol). Po 18 hodinách byla směs ochlazena na teplotu místnosti, zředěna ethylacetátem (50 mL) a promyta 2N HC1 (30 mL) a následně solankou (50 mL). Organická fáze byla spojena, sušena (MgSO4) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl purifikovám mžikovou chromatografii (silika, ethylacetát:heptan 1:9) za získání 2.00 g (49%) čirého oleje.
]H NMR 400 MHz (CDC13): δ 1.02 (3H, d, J = 6 Hz), 1.08-1.37 (5H, m), 1.59-2.17 (5H, m), 2.64 (2H, m), 4.15 (2H, q, J = 7 Hz), 4.64 (2H, m). MS (ES+) m/e: 230 (M+l).
IR (film) vmaxcm' : 1 183, 1377, 1548, 1732, 2956.
Krok iii: Syntéza (cis/trans)-(7R)-7-methyl-spiro[4.4]nonan-2-onu (5d)
Ethylester (cis/trans)-(3R)-(3-methyl-1 -nitromethyl-cyklopentyl)-octové kyseliny (5c) (1.98 g, 8.66 mmol) byl rozpuštěn v methanolu (50 mL) a protřepáván s katalyzátorem Raney niklem pod atmosférou vodíku (40 psi; 1 psi = 6,89 kPa) při 30 °C. Po 18 hodinách byl katalyzátor odstraněn filtrací přes celit. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek byl purifikován mžikovou chromatografii (silika, ethylacetát:heptan 1:1) za získání 1,05 g (79%) bílé pevné látky.
]H NMR 400 MHz (CDCI3): δ 1.03 (3H, m), 1.22 (2H, m), 1.60-2.15 (5H, m), 2.22 (2H, m), 3.20 a 3.27 (2H celkově, 2xs, cis a trans), 6.18 (1H, br s). MS (ES+) m/e: 154 (M+l).
IR (film) VmaxCrn'1 : 1695, 2949, 3231.
Krok iv: Syntéza (cis/trans)-(3R)-(l-aminomethyl-3-methyl-cyklopentyl)-
(cis/trans)-(7R)-7-Methyl-spiro[4.4]nonan-2-on (5d) (746 mg, 4.88 mmol) byl zahříván k refluxu ve směsi 1,4-dioxanu (5 mL) a 6N HC1 (15 mL).
Po 4 hodinách byla směs ochlazena na teplotu místnosti, zředěna vodou (20 mL) a promyta dichlormethanem (3 x 30 mL). Vodná fáze byla spojena a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl rozetřen s ethylacetátem za získání bílé pevné látky, která byla spojena a sušena. Potom rekrystalizovala z ethylacetátu/methanolu za získání 656 mg (65%) (5) po spojení a sušení.
NMR 400 MHz (d6-DMSO): δ 0.96 (3H, m), 1.01-1.24 (2H, m), 1.42-2.10 (5H, m), 2.41 a 2.44 (2H celkově, 2 x s, cis/trans), 2.94 (2H, m), 7.96 (3H, br s), 12.35 (1H, br s).
MS (ES+) m/e: 172 (M+l pro volnou bázi).
PŘÍKLAD 6; (+)-(t ran s)-( 1 - Amin omethyI-3,4-dimethyl-cy klopen tyl)-octová kyselina, hydrochlorid
(6d)
Reagens: (i) Triethylfosfonacetát, NaH; (ii) MeNOg, Bu4N+F; (iii) H2, Ni;
(iv) HC1
Krok i: Syntéza ethylesteru (cis)-(3,4-dimethyl-cyklopentyliden)-octové kyseliny (6b)
NaH (60% disperze v oleji, 519 mg, 12.96 mmol) byl suspendován v suchém tetrahydrofuranu (30 mL) a ochlazen na 0 °C. Triethylfosfonacetát (2.68 mL, 13.5 mmol) byl přidán a směs byla míchána při 0 °C po 15 minut. Potom byl přidán (3S,4R)-3,4-dimethyl-cyklopentanon (6a) (1.21 g, 10.80 mmol) v THF (10 mL) a směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti. Po dvou hodinách byla směs rozdělena mezi diethylether (200 mL) a vodu (150 mL). Organická fáze byla oddělena, promyta solankou, sušena (MgSO4) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl purifikován mžikovou chromatografii (silika, ethylacetát:heptan 5:95) za získání 1,40 g (71%) (2) jako bezbarvého oleje.
1H NMR 400 MHz (CDCJ 13): δ 0.84 (3H, d, J = 6 Hz), 0.91 (3H, d, J = 6 Hz),
1.26 (3H, t, J = 7 Hz), 2.01-2.95 (6H, m), 4.13 (2H, q, J = 7 Hz), 5.76 (1H, s). MS (CI+) m/e: 183 (M+l).
IR (film) vmaxcm·' : 1043, 1 125, 1200, 1658, 1715, 2959.
Krok ii: Syntéza ethylesteru (trans)-(3,4-dimethyl-l-nitromethylcyklopentyl)-octové kyseliny (6c)
Ethylester (cis)-(3,4-dimethyl-cyklopentyliden)-octové kyseliny (6b) (1.384 g, 7,60 mmol) byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (10 mL) a míchán při 70 °C s nitromethanem (0.82 mL, 15.2 mmol) a tetrabutylammonium fluoridem (1.0 M v tetrahydrofuranu, 11.4 mL, 11.4 mmol). Po 6 hodinách byla směs ochlazena na teplotu místnosti, zředěna ethylacetátem (50 mL) a promyta 2N HC1 (30 mL), následně solankou (50 mL). Organická fáze byla spojena, sušena (MgSO4) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl purifikován mžikovou chromatografii (silika, ethylacetát:heptan 5:95) za získání 0.837 g (45%) čirého oleje.
1H NMR 400 MHz (CDCI3): δ 0.91 (6H, d, J = 6 Hz), 1.21-1.39 (5H, m), 1.98 (2H, m), 2.18 (2H, m), 2.64 (2H, s), 4.15 (2H, q, J = 7 Hz), 4.61 (2H, s). MS (ES+) m/e: 244 (M+l).
IR (film) Vmaxcm'1 : 1 184, 1377, 1548, 1732, 2961.
Krok iii: Syntéza (trans)-7,8-dimethyl-spiro[4.4]nonan-2-onu (6d)
Ethylester (trans)-(3,4-dimethyl-1 -nitromethyl-cyklopentyl)-octové
protřepáván s katalyzátorem Raney niklem pod atmosférou vodíku (40 psi; 1 psi= 6,89 kPa) při 30 °C. Po 4 hodinách byl katalyzátor odstraněn filtrací přes * ·
*♦ • · · · • · · • · · • · · *♦ ··♦· celit. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu za získání 567 mg (99%) bledě žlutého oleje, který při stání tuhnul.
!H NMR 400 MHz (CDCI3): δ 0.89 (6H, d, J = 6 Hz), 1.38 (2H, m), 1.91 (2H, m), 2.10 (2H, m), 2.32 (2H,s), 3.18 (2H, s), 5.61 (1H, br s).
MS (ES+) m/e: 168 (M+l).
IR (film) vmaxcm'' : 1304, 1450, 1699, 2871, 3186.
Krok iv: Syntéza (trans)-(l-aminomethyl-3,4-dimethyJ-cykJopentyl)octové kyseliny, hydrochloridu (6) (trans)-7,8-Dimethyl-spiro[4.4]nonan-2-on (6d) (563 mg, 4.40 mmol) byl zahříván k refluxu ve směsi 1,4-dioxanu (5 mL) a 6N HC1 (15 mL). Po 4 hodinách byla směs ochlazena na teplotu místnosti, zředěna vodou (20 mL) a promyta dichlormethanem (3 x 30 mL). Vodná fáze byla spojena a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl rozetřen s ethylacetátem za získání bílé pevné látky, která byla spojena a sušena. Potom recrystalizovala z ethylacetátu/methanolu za získání 440 mg (59%) (6) po spojení a sušení.
1H NMR 400 MHz (dg-DMSO); δ 0.84 (6H, d, J = 6 Hz), 1.21 (2H, m), 1.81 (2H, m), 2.06 (2H, m), 2.47 (2H, s), 2.89 (2H, s), 7.94 (3H, br s), 12.30 (1H, br s).
MS (ES+) m/e: 186 (M+l pro volnou bázi).
• * • · « ·
PŘÍKLAD 7 (+)-(trans)-(l-Aminomethy 1-3,4-dimethyl-cy klopen ty l)-octová kyselina, hydrochlorid
Reagens: (i) Triethylfosfonacetát, NaH; (ii) MeN02, Bu4N+F; (iii) H2, Ni;
(iv) HC1.
(3S,4S)-3,4-Dimethyl-cyklopentanon (7a) je v literatuře známý a může být syntetizován dále uvedenými metodami: Y. Kato, Chem. Pharm. Bull., 1966;14:1438-1439 a podobné odkazy: W. C. M. C. Kokke, F. A. Varkevisser, J. Org. Chem., 1974;39:1 535; R. Baker, D. C. Billington, N. Eranayake, JCS Chem. Comm., 1981:1234; K. Furuta, K. Iwanaga, H. Yamamoto, Tet. Lett., 1986;27:4507; G. Solladie, O. Lohse, Tet. Asymm., 1993;4:1 547;
A. Rosenquist, I. Kvarnstrom, S. C. T. Svensson, B. Classon, B. Samuelsson, Acta Chem. Scand., 1 992;46:1 127; E. J. Corey, W. Su, Tet. Lett., 1988;29:3423; D. W. Knight, B. Ojhara, Tet. Lett., 1981 ;22:5 1 01.
Krok i: Syntéza ethylesteru (trans)-(3,4-dimethyl-cyklopentyliden)-octové kyseliny (7b)
Do suspenze hydridu sodného (1.3 g, 32.5 mmol) v THF (60 mL) pod dusíkem při 0 °C byl přidáván triethylfosfonacetát (6.5 mL, 32.7 mmol) po dobu 5 minut. Po míchání po dalších 10 minut byl přidán do nyní čirého roztoku (3S,4S)-3,4-dimethyl-cyklopentanon (7a) (přibližně 2.68 g, přibližně mmol) v THF (2 x 10 mL) a ledová lázeň byla odstraněna. Po 4 hodinách byla reakce zchlazena nalitím do vody (100 mL) a směs byla extrahována etherem (400 mL). Organická fáze byla promyta nasycenou solankou (100 mL). sušena a koncentrována ve vakuu. Chromatografie na koloně (10:1 heptan / ethylacetát) poskytla produkt jako olej (4.53 g). (přibližně 91% výtěžek) 1H NMR 400 MHz (CDCI3): δ 1.01 (3H, d, J = 6 Hz), 1.03 (3H, d, J = 6 Hz),
1.26 (3H, t, J = 7 Hz), 1.49 (2H, m), 2.07 (1H, m), 2.24 (1H, m), 2.61 (1H, m),
4.13 (2H, q, J = 7 Hz), 5.72 (1H, s).
MS (CI+) m/e: 183 (M+l).
Krok ii: Syntéza ethylesteru (trans)-(3,4-dimethyl-l-nitromethylcyklopentyl)-octové kyseliny (7c)
Do roztoku ethylesteru (trans)-(3,4-dimethyl-cyklopentyliden)-octové kyseliny (7b) (4.24 g, 23.3 mmol) v THF (15 mL) byl přidán TBAF (32 mL 1 M roztoku v THF, 32 mmol), a následně nitromethan (3 mL) a reakční směs byla zahřívána při 60 °C po 8 hodin. Po ochlazení byla reakční směs zředěna ethylacetátam (150 mL) a promyta 2N HC1 (40 mL), potom nasycenou solankou (50 mL). Chromatografie na koloně (10:1 heptan/ethylacetát) poskytla produkt jako olej (2.24 g) (40% výtěžek).
1H NMR 400 MHz (CDCI3): δ 0.98 (6H, d, J = 6 Hz), 1.10-1.39 (5H, m),
1.47 (2H, m), 1.87 (1H, m), 2.03 (1H, m), 2.57 (2H, ABq, J = 16, 38 Hz),
4.14 (2H, q, J = 7 Hz), 4.61 (2H, ABq, J = 12, 60 Hz).
MS (ES+) m/e: 244 (M+l).
IR (film) vmaxcm ' : 1186, 1376, 1549, 1732, 2956.
Krok iii: Syntéza (+)-(trans)-(l-aminomethyl-3,4-dimethyl-cyklopentyl)octové kyseliny, hydrochloridu (7)
Roztok ethylesteru (trans)-(3,4-dimethyl -1 -nitromethyl-cyklopentyl)octové kyseliny (7c) (3 5 v 14 4 mmol) v methanolu 61 00 mL) za ořítomnosti Ni- houby byl hydrogenován při 30 °C a 50 psi po 4 hodiny. Odfiltrování katalyzátoru a koncentrování ve vakuu poskytlo směs 2:1 laktamu a aminoesteru, 2.53 g, vypočteno jako 96%, která byla použita bez purifikace.
Tato směs (2.53 g, 13.8 mmol) v dioxanu (15 mL) a 6N HC1 (45 mL) byla zahřívána pod refluxem (olejová lázeň =110 °C) po 4 hodiny. Po ochlazení a zředění vodou (60 mL) byla směs promyta dichlormethanem (3 x 50 mL) a potom koncentrována ve vakuu. Získaný olej byl promyt ethylacetátem, potom dichlormethanem za získání lepivé pěny, která byla sušena za získání produktu jako bílého prášku (2.32 g) (76% výtěžek).
aD(23 °C) (H2O) (c - 1,002) '+ 28,2°.
'HNMR 400 MHz (d6-DMSO): δ 0.91 (6H, d, J = 6 Hz), 1.18 (2H, m),
1.42 (2H, m), 1.72 (1H, m), 1.87 (1H, m), 2.42 (2H, ABq, J = 16, 24 Hz),
2.90 (2H, ABq, J = 12, 34 Hz), 8.00 (3H, br s), 12.34 (1H, br s).
MS (ES+) m/e: 186 (M+l pro volnou bázi).
PŘÍKLAD 8 la,3p,5p-(l-Aminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochlorid
Krok i: Syntéza ethyiesteru 2-kyano-((3R,5S)-3,5-dimethyicyklohexyliden)-octové kyseliny (8b):
Cis-3,5-dimethylcyklohexanon (8a, 15.78 g, 125.0 mmol) byl rozpuštěn v toluenu (150 mL) a zpracován s ammonium acetátem (0.96 g, 0.099 mmol),
kyselinou octovou (1.4 mL, 0,195 mmol) a ethylkyanoacetátem (14.04 g, 99.2 mmol). Reakční směs byla zahřívána k refluxu přes noc s Dean-Starkovým lapačem, potom ochlazena na teplotu místnosti a promyta H2O (3 x 50 mL). Vodná vrstva byla opětovně promyta toluenem (2 x 50 mL). Organické vrstvy byly spojeny, sušeny nad Na2SO4 a koncentrovány. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu promýváním s 5% EtOAc/hexanem za získání 22.0 g (80%) požadovaného produktu jako čirého oleje.
MS: 222.1 (M+l pro C13H19NiO2); olej; TLC: SiO2, Rf 0.40 (9:1 hexan/EtOAc);
Analýza (Ci3Hi9N]O2) (Vyp.) C: 70.56, H: 8.68, N: 6.33 (nalez) C: 70.74, H: 8.68, N: 6.33. ’H NMR (CDC13) δ 0.83-0.95 (m, 1 H), 1.01 (t, 6 H, J = 6.1 Hz), 1.32 (t, 3 H, J = 7.3 Hz), 1.48-1.85 (m, 5 H), 2.97-3.02 (m, 1 H), 3.92 (dd, 1 H, J = 12.2, 2.2 Hz), 4.24 (q, 2 H, J = 7.1 Hz).
Krok ii: Syntéza 1α,3β,5β-1 -kyanoniethyl-3,5-dimethyl-cyklolie.xankarbonitrilu (8c):
Ethylester 2-kyano-((3R,5S)-3,5-dimethyl-cyklohexyliden)-octové kyseliny (8b, 6.64 g, 30.0 mmol) byl rozpuštěn v EtOH (60 mL) a přidán do suspenze NaCN (1.47 g, 30.0 mmol) v EtOH / H2O (100 mL / 8 mL). Reakční směs byla zahřívána k refluxu přes noc, potom byla ochlazena na teplotu místnosti, filtrována a koncentrována ve vakuu za získání čirého oleje, který ve vakuu tuhnul. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu promýváním 4:1 hexanem/EtOAc za získání 4.05 g (77%) požadovaného produktu jako bílé lepivé pevné látky.
MS: žádný M+l ion nepozorován (CiiHigN2); olej; TLC: SiO2, Rf 0.3 1 (4:1 hexan/EtOAc);
Analýza (ChHi6N2) (Vyp.) C: 74.96, H: 9.15, N: 15.89 (nalez.) C: 74.81, H: 9.25, N: 15.65. ]H NMR (CDC13) 6 0.58 (dd, 1 H, J = 24.9, 12.2 Hz), 0.96 (d, 6H..J - 6.6 Hz), 1.03 ( t, 2 H, J = 12.9 Hz), 1.75-1.90 (m, 3 H), 2.01 (d, 2 H, J = 11.5 Hz), 2.65 (s, 2 H).
Krok iii: Syntéza 1α,3β,5β-(1-Aniinomethyl-JjS-diniethvl-cyklohexyl)octové kyseliny, hydrochloridu (8d):
• ·
l,3,5-l-Kyanomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexankarbonitriI (8c, 5.51 g,
31.26 mmol) byl rozpuštěn v EtOH (80 mL) a toluenu (80 mL), ochlazen na 0 °C a nasycen plynným HC1. Roztok byl zazátkován a míchán přes noc při teplotě místnosti, potom koncentrován ve vakuu za získání surového iminoesteru jako bílé pevné látky. Tento surový materiál byl rozetřen s Et2O (150 mL) a sušen pod vakuem, potom zpracován s H2O (100 mL) a 1 N HC1 (4 mL). Reakční směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti, potom byla extrahována EtOAc (3 x 100 mL). Organická vrstva byla spojena, promyta solankou, sušena nad Na2SO4 a koncentrována. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu promýváním s hexanem/EtOAc za získání 5.78 g (83%) požadovaného produktu jako čirého oleje.
MS: 224.1 (M+l pro Ci3H2]NO2); olej; TLC: SiO2, Rf 0.32 (6:1 hexan/EtOAc);
Analýza (C]3H2iNO2) (Vyp.) C: 69.92, H: 9.48, N: 6.27 (nalez. C: 70.03, H: 9.45, N: 6.30. 1H NMR (CDC13) d 0.53 (dd, 1 H, J - 24.9, 12.0 Hz), 0.91 (d, 6 H, J = 6.6 Hz), 1.27 (t, 3 H, J = 7.1 Hz), 1.70-1.76 (m, 1 H), 1.80-1.90 (m, 2 H), 2.02 (d, 2 H, J = 12.9 Hz), 2.51 (s, 2 H), 4.18 (q, 2 H, J = 7.1 Hz).
Krok iv: Synthéza 5a,7p,7p-7,9-Dimethyl-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-onu (8e):
Ethylester 1 α,3β,5β-(1 -kyano-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octové kyseliny (8d, 5.82 g, 26.1 mmol) byl rozpuštěn v MeOH (150 mL), zpracován s 10% Rh / 2% Pd/C (1.0 g) a protřepáván pod atmosférou H2 (50 psi) po 28 hodin. Reakční směs byla zfiltrována a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu promýváním s gradientem 2:3 hexanu/EtOAc, EtOAc, 5% MeOH/EtOAc za získání 2.21 g (47%) požadovaného produktu.
MS: 182.0 (M+l pro C11H19NO); t.t. 116-118 °C; TLC: SiO2, Rf 0.36 (6% MeOH/CH2Cl2); Analýza (Ci]H19NO) (Vyp.) C: 72.88, H: 10.56, N: 7.73 (nalez.) C: 72.84, H: 10.67, N: 7.63. ’H NMR (CDCI3) δ 0.49 (dd, 1 H, J = 24.4, 12.0 Hz), 0.86-0.93 (m, 8 H), 1.38-1.48 (m, 2 H), 1.60-1.71 (m, 3 H), 2.09 (s, 2 H), 3.16 (s, 2 H), 5.79 (br, 1 H).
·
Krok v: Syntéza la,3p,5p-(l-aminomethyl-3,5dimethyl-cyklohexyl)-octové kyseliny, hydrochloridové soli (8):
5a,73,9p-7,9-Dimethyl-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-on (8e, 0.52 g, 2.87 mmol) byl zpracován se 6 N HC1 (19 mL) a zahříván k refluxu přes noc. Reakční směs byla ochlazena na teplotu místnosti, až se vytvořila bílá sraženina. Pevná látka byla odfiltrovány a filtráe byl ochlazen na 0 °C za získání druhé sady krystalů, potom byla opět filtrována. Pevné látky byly spojeny a sušeny pod vakuem za získání 0.46 g (68%) požadovaného produktu. MS; 200.1 (M+l for Cj^jN^); t.t. 179-180 °C; Analýza (CnH2iNiO2.HCl) (Vyp.) C: 56.04, H: 9.41, N; 5.94 (nalez) C: 56.16, H: 9.42, N; 5.73. ’H NMR (CD3OD) S 0.46-0.53 (m, 1 H), 0.77 (t, l H, J = 12.5 Hz), 0.85-0.91 (m, 7 H), 1.55-1.67 (m, 5 H), 2.11 (d, 2 H, J = 13.4 Hz), 2.36 (s, 2 H), 2.44 (s, 1 H),
3.14 (s, 2 H).
PŘÍKLAD 9 la,3p,5p-(3,5-Dimethyl-l-propylaminomethyl-cyklohexyl)octová kyselina, hydrochloridová sůl:
3,5-(1 -Aminomethyl-3,5-dimethyl-cyclohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůlt (8, 1.0 g, 4.2 mmol) byla rozpuštěna v EtOH (100 mL), zpracována s roztokem hydroxidu sodného (1 N, 5 mL), propionaldehydu (0.9 mL, 12.6 mmol) a 10 % Pd/C (0.3 g) a třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 3 hodiny. Reakční směs byla odfiltrována, zpracována s HCl/Et2O (1 M, 10 mL) a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl zpracován s horkým isopropanolem (100 mL), NaCl byl odfiltrován a čirý roztok koncentroval ve vakuu. Surový
9 9
produkt rekrystalizoval z i-PrOH/acetonu/hexanu (14: 200: 225 mL) a byl sušen ve vakuu za získání 0.136 g (12%) požadovaného produktu.
MS: 242.1 (M+l pro C14H27N1O2); t.t. 178-180 °C; Analýza (C14H27N]O2.HCL0.27 H2O) (Vyp) C: 59.48, H: 10.18, N: 4.95 (nalez) C: 59.53, H: 10.21, N: 4.78. !H NMR (CD3OD) δ 0.52 (dd, 1 H, J = 24.2, 12.0 Hz), 0.83-0.90 (m, 8 H), 1.00 (t, 3 H, J = 7.6 Hz), 1.61-1.80 (m, 7 H), 2.43 (s, 2 H), 2.98 (t, 2 H, J = 7.8 Hz), 3.20 (s, 2 H).
PŘÍKLAD 10 la,3p,5P-(l-Ethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)octová kyselina, hydrochloridová sůl
Příklad 10 byl syntetizován podle metody z příkladu 9, s tím rozdílem, že acetaldehyd byl použit namísto propionaldehydu, a ethylacetát/heptan byl použit namísto rekrystalizace (30% výtěžek).
MS: 228 (M+l pro C15H29N1O2); t.t. 188-190 °C; NMR (DMSO) d 0.83 (8H, br d), 1.24 (3 H, t, J = 7.1 Hz), 1.60 (6 H, m), 2.38 (d, s), 2.98 (2 H, m),
3.10 (2 H, br s), 8.33 (2 H, br s), 12.42 (1 H, br s).
PŘÍKLAD 11 la,3P,5p-(l-Benzylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cy klohexylj-octová kyselina, hydrochloridová sůl:
··
Příklad 1 1 byl syntetizován podle metody z příkladu 9, s tím, že benzaldehyd byl použit namísto propionaldehydu, a Et2O byl použit pro rekrystalizaci (30% výtěžek).
MS: 290.1 (M+l pro Ci8H27N1O2); t.t. 162-163 °C; Analýza (Ci8H27Nt02.HC1.0.20H20) (Vyp.) C: 65.62, H: 8.69, N: 4.25 (nalez) C: 65.60, H: 8.71, N: 4.31. ]H NMR (CD3OD) δ 0.48 (dd, 1 H, J = 12.5 Hz), 0.79-0.90 (m, 8 H), 1.46 (br, 2 H), 1.64 (d, 3 H J = 13.4 Hz), 2.42 (s, 2 H), 3.19 (s, 2 H), 4.23 (s, 2 H), 7.43-7.50 (m, 5 H).
PŘÍKLAD 12 la,3p,5p-(l-Dimethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl:
Roztok 1 α,3β,5β-(1 -Aminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octové kyseliny; hydrochloridové soli (8, 0.20 g, 0.59 mmol) v EtOH (15 mL), roztoku hydroxidu sodného (1 N, 0.59 mmol) a H2O (1 mL) byl zpracován s 20% Pd/C (50 mg) a třepán pod atmosférou H2 (50 psi) po 15 hodin. Reakční směs byla filtrována, zpracována s 1 N HCl/Et2O (1 mL) a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v horkém i-PrOH (4 mL), zředěn acetonem (100 mL) a Et2O (350 mL) a ochlazen na 0 °C. Pevná látka byla odfiltrována a sušena pod vakuem za získání 103 mg (70% výtěžek) požadovaného produktu. MS: 228.1 (M+l pro C!2H23NiO2); t.t. 195-196 °C; Analýza (Ci2H23NiO2.HC1.0.41H2O) (Vyp.) C: 57.58, H: 9.97, N: 5.16 (nalez) C: 57.73, Η: 9.71, N: 4.91. ’H NMR (CD3OD) δ 0.56 (dd, 1 H, J = 24.4, 12.0 Hz),
0.89-0.92 (m, 8 Η), 1.59-1.75 (m, 8 Η), 2.51 (s, 2 Η), 2.95 (s, 6 Η), 3.44 (s, 2 Η).
PŘÍKLAD 13 1 α,3 β,5β-(1-Bu ty lamin omet hy 1-3,5-dim ethyl-cyklohexy 1)octová kyselina; hydrochloridová sůl:
Příklad 13 byl syntetizován podle metody z příkladu 9, s tím, že butyraldehyd byl použit namísto propionaldehydu (48% výtěžek).
MS: 256.1 (M+l pro C15H29NiO2); t.t. 184-185 °C; Analýza (CjsHsgNjOz-HCl) (Vyp) C: 61.73, H: 10.36, N: 4.80 (nalez) C: 61.71, H: 10.21, N: 4.72. ’H NMR (CD3OD) δ 0.53 (dd, 1 H, J = 24.4, 12.0 Hz), 0.86-0.99 (m, 11 H), 1.371.47 (m, 2 H), 1.60-1.75 (m, 7 H), 2.43 (s, 2 H), 3.02 (t, 2 H, J = 8.1 Hz), 3.20 (s, 2 H).
PŘÍKLAD 14 1α,3β,5β-{ 1-[(Benzyl-methyl-amin o)-methyl]-3,5-dim ethylcyklohexylj-octová kyselina; hydrochloridová sůl:
Příklad 14 byl připraven podle postupu z příkladu 9, s tím, že ·«
N-benzylový analog (11) a formaldehyd byly použity jako výchozí materiál, a PtCh byl použit jako katalyzátor namísto Pd/C (70% výtěžek).
MS: 304.1 (M+l pro C19H29N1O2); t.t. 209-210 °C; Analýza (C]9H29N1O2.HC1.0.21H2O) (Vyp.) C: 66.40, H: 8.92, N: 4.08 (nalez) C:
66.40, H: 9.05, N: 4.06. 'H NMR (CD3OD) δ 0.51 (dd, 1 H, J = 24.4, 12.2 Hz),
0.79-0.92 (m, 9 H), 1.29 (br, 1 H), 1.56-1.82 (m, 4 H), 2.51 (dd, 2 H, J = 18.8, 16.3 Hz) 2.85 (s, 2 H), 3.23-3.49 (m, 2 H), 4.37 (dd, 2 H, J = 31.7, 12.7 Hz), 7.45-7.54 (m, 5 H).
PŘÍKLAD 15 1 a,3 β,5β-(3,5-ϋϊπι ethyl-1-met hy lamin om ethyl-cyklohexyl)octová kyselina; hydrochloridová sůl:
Příklad 14 (0.14 g, 1.21 mmol) byl rozpuštěn v 95% EtOH (50 mL), zpracován s roztokem hydroxidu sodného (1 N, 1.21 mmol) stejně jako 20% Pd/C (0.1 g) a byl třepán pod atmosférou H2 (50 psi) po 45 minut. Reakční směs byla zfiltrována, zpracována s HCl/EtjO (1 Μ, 1 mL) a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl zpracován s horkým iPrOH, NaCl byl odfiltrován, a roztok koncentroval ve vakuu. Surový produkt rekrystalizoval z iPrOH / aceton / hexanu (7: 150: 110 mL) a byl sušen pod vakuem za získání 0.189 (63%) požadovaného produktu.
MS: 214.1 (M+l pro Ci2H23NiO2); t.t. 182-183 °C; Analýza (C12H23N] O2-HC1)
c
ίπ r, I -A f'·
I^naivz,y .
c *7 /1 π u.nco υ ! . “T / , u. 7. JO j
IN IVA IX.
(CD3OD) δ 0.52 (dd, 1H,J = 24.4, 12,2 Hz), 0.84-0.98 (m, 8 H), 1.57-1.72 (m, 5 H), 2.38 (s, 2 H), 2.72 (s, 3 H), 3.21 (s, 2 H).
«4 • »
PŘÍKLAD 16 la,3p,5p-[l-(Acetylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]octová kyselina:
Příklad 8 (0.5 g, 2.1 mmol) byl zpracován s H2O (10 mL) a NaOH (0.56 g, 14.0 mmol), ochlazen naO°Ca zpracován s acetanhydridem. Reakčni směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti, potom byla zředěna EtOAc (100 mL) a promyta 1N HC1 (100 mL). Organická vrstva byla sušena nad Na2SO4 a koncentrována ve vakuu. Surový materiál byl podroben chromatografii na silikagelu promýváním s 4% MeOH/CH2Cl2 za získání 0.138 g (27%) požadovaného produktu jako oleje, který ve vakuu tuhnul.
MS: 242.1 (M+l pro Ci3H23N,O3); t.t. 122-124 °C; Analýza (C13H23N]O3) (Vyp.) C: 64.70, H: 9.61, N: 5.80 (nalez.) C: 64.65, H: 9.59, N: 5.63. *H NMR (CD3OD) δ 0.46 (dd, 1 H, J = 23.7, 11.7 Hz), 0.81-0.87 (m, 9 H), 1.56 (d, 2 H, J = 13.4 Hz), 1.65-1.76 (m, 3 H), 1.98 (s, 3 H), 2.18 (s, 2 H), 3.30 (s, 3 H).
PŘÍKLAD 17 la,3P,5P-(l-(Isobutylamino-methyl)-3,5-dimethylcyklohexylj-octová kyselina, hydrochloridová sůl
Příklad 17 byl syntetizován podle postupu z příkladu 9, s tím, že isobutyraldehyd byl použit namísto propionaldehydu (53% výtěžek).
MS: 256 (M+l pro C15H29N]O2); t.t. 193-194 °C; ’H NMR (CD3OD) δ 0.53 (dd, 1 H, J = 24.3, 12.5 Hz), 0.81-0.90 (m, 2 H), 0.89 (d, 6H, J = 6.4 Hz), 1.03 (d, 6H, J = 6.8 Hz), 1.57-1.71 (m, 5H), 2.09 (m, 1H), 2.49 (s, 2 H), 2.88 (d, 2H, J = 7.1 Hz), 3.19 (s, 2 H).
PŘÍKLAD 18 la,33,5p-[3,5-Dimethyl-l-(fenethylamino-methyl)cyklohexylj-octová kyselina, hydrochloridová sůl:
Příklad 18 byl syntetizován podle postupu z příkladu 9, s tím, že fenylacetaldehyd byl použit namísto propionaldehydu (16% výtěžek).
MS: 304 (M+l pro Cj^gNjOz); t.t. 188-189 °C; Analýza (C19H29N1O2.HC1) (Vyp.) C: 67.14, H: 8.90, N: 4.12 (nalez) C: 66.94, H: 8.91, N: 3.98. ]H NMR (CD3OD) δ 0.46 (dd, 1 H, J = 24.6, 12.3 Hz), 0.81-0.91 (m, 8 H), 1.58-1.72 (m, 5 H), 2.50 (s, 2H), 3.04-3.08 (m, 2H), 3.26-3.30 (m, 4H), 7.23-7.75 (m, 5H).
PŘÍKLAD 19 1α,3β,5β-{3,5-Dimethy l-l-[(3-fenyl-propylamino)-methyljcyklohexyl}-octová kyselina, hydrochloridová sůl:
Příklad 19 byl syntetizován podle postupu z příkladu 9, s tím, že hydrocinnamaldehyd byl použit namísto propionaldehydu (50% výtěžek).
»<
MS: 318 (M+l pro C20H31N1O2); t.t. 171-172 °C; Analýza (C20H3iNiO2.HC1) (Vyp.) C: 67.87, H: 9.11, N: 3.96 (nalez.) C: 67.83, H: 9.13, N: 3. 78. ’H NMR (CD3OD) δ 0.53 (dd, 1 H, J = 24.6, 12.1 Hz), 0.80-0.90 (m, 2 H), 0.90 (d, 6H, J = 6.0 Hz), 1.60-1.72 (m, 5 H), 2.03-2.11 (m, 2H), 2.45 (s, 2H), 2.73 (t, 2H, J = 7.5 Hz), 3.06 (t, 2H, J = 7.7 Hz), 33 (s, 2H), 7.20-7.18 (m, 5H).
PŘÍKLAD 20 {l-[(Cyklobutylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina, hydrochloridová sůl:
Příklad 20 byl syntetizován podle postupu z příkladu 26, s tím, že cyklobutanon byl použit namísto 2-methylbutyraldehydu (70% výtěžek).
MS: 226 (M+l pro C13H23NiO2); t.t. 176-177 °C; Analýza (Ci3H23NiO2.HCl) (Vyp.) C: 59.64, H: 9.24, N: 5.35 (nalez.) C: 59.88, H: 9.18, N: 5.19. lH NMR (CD3OD) δ 1.16-1.60 (br., 10 H), 1.80-1.96 (m, 2 H), 2.21-2.40 (m, 4 H), 2.53 (s, 2H), 2.97 (s, 2H), 3.73 (m, 1H).
PŘÍKLAD 21 lcc,3p,5p-(l-(Isopropylamino-methyl)-3,5-dimethylcyklohexylj-octová kyselina, hydrochloridová sůl:
Příklad 21 byl syntetizován podle postupu z příkladu 9, s tím, že aceton byl použit namísto propionaldehydu (50% výtěžek).
♦ ··
MS: 242 (M+l pro C!4H27NiO2); t.t. 206-207 °C; *H NMR (CD3OD) δ 0.53 (dd, 1H,J = 24.8, 12.5 Hz), 0.80-0.90 (m, 2 H), 0.99 (d, 6H, J = 6.1 Hz), 1.35 (d, 6H, J = 6.6 Hz), 1.55-1.78 (m, 5H), 2.45 (s, 2H), 3.18 (s, 2 H), 3.41 (m, 1H).
PŘÍKLAD 22 1-AminomethyI-l-cyklohexan-octová kyselina byla dříve popsána Satzingerem a kol., v US 4 087 544, 2.května 1978.
V r
PŘIKLAD 23 1-Aminomethyl-l-cyklopentan-octová kyselina byla dříve popsána Satzingerem a kol., v US 4 087 544, 2.května, 1978.
V r
PŘIKLAD 24 Sodná sůl 1-aminomethyl-l-cyklopentan-octové kyseliny byla dříve popsána Satzingerem a kol., US 4 087 544, 2.května, 1978.
v r
PŘIKLAD 25 Sodná sůl l-(hydroxymethyl)cyklohexan-octové kyseliny byla dříve popsána Satzingerem a kol., US 2 960 441, 1960.
PŘÍKLAD 26 Syntéza {l-[(2-Methyl-butyJamino)-methyl]-cyklohexyl}octové kyseliny, hydrochloridové soli :
Roztok (l-aminomethyl-cyklohexyl)-octové kyseliny (Příklad 22, 2.0 g,
11.7 mmol) v EtOH (100 mL) byl zpracován s 2-methyl-butyraldehydem (4mL,
35.1 mmol) a PtO2 (0.5 g) a třepán pod atmosférou H2 (50 psi) po 2 h. Reakční
vakuu, rozpuštěna v horkém i-PrOH (10 mL), zředěna acetonem (600 mL), ochlazena na 0 °C a filtrována za získání 1.58 g (49%) požadovaného produktu.
* · · · · ·
MS: 242.1 (M+l pro Ci4H27N|O2); t.t. 162-163 DC; Analýza (C14H27N1O2.HCI) (Vyp.) C: 60.52, H: 10.16, N: 5.04 (nalez.) C: 60.41, H: 10.26, N: 4.95. lH NMR (CD3OD) δ 0.95 (t, 3 H, J = 7.3 Hz), 1.02 (d, 3 H, J - 6.6 Hz), 1.20-1.31 (m, 1 H), 1.42-1.56 (m, 11 H), 1.81-1.89 (m, 1 H), 2.63 (dd, 2 H, J = 18.3,
16.1 Hz), 2.82 (dd, 1 H, J = 12.5, 8.3 Hz), 2.99 (12.5, 6.1 Hz), 3.07 (dd, 2 H, J = 25.6, 12.9 Hz).
PŘÍKLAD 27 {1- [(4,4,4-Trifluor-butylamino)-m ethyl]-cyklohexyl}-octová kyselina; hydrochloridová sůl byla syntetizována podle postupu z příkladu 26, s tím, že 4-trifluorbutyraldehyd byl použit namísto 2-methylbutyraldehydu (19% výtěžek).
MS: 282.1 (M+l pro C13H22N1O2F3); t.t. 163-164 °C; Analýza (Ci3H22N102F3.HC1.0.05H20) (Vyp.) C: 49.00, H: 7.31, N: 4.40 (nalez.) C: 48.60, H: 7.29, N: 4.19. ]H NMR (CD3OD) δ 1.40-1.54 (m, 11 H), 1.96-2.04 (m, 2 H), 2.26-2.38 (m, 2 H), 2.57 (s, 2H), 3.09-3.13 (m, 4 H).
PŘÍKLAD 28 (l-Ethylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl
Příklad 28 byl syntetizován podle postupu z příkladu 26, s tím, že acetaldehyd byl použit namísto 2-methylbutyraldehydu (30% výtěžek).
J.V1 O .
LVU. 1 /λ T i 1 ___- Γ'' TT λ' f~\ + .
^ινι-τι piu v- I ι ι ν»2Λ L-L··
1ΖΆ 1/7/7 Ο . Α .. _ I / _ χυυ-ιυυ v,, Λΐιαιγζ,ϋ (C 11H2ÍN1O2.HC1.) (Vyp.) C: 56.04, Η: 9.41, Ν: 5.94 (nalez.) C: 55.98, Η:
9.36, Ν: 5.79. ιΗ NMR (CD3OD) δ 1.31-1.54 (m, 13 Η), 2.54-2.56 (m, 2 Η),
3.06-3.13 (m, 4 Η).
PŘÍKLAD 29 {l-[(Cyklopropylmethyl-amino)-methyl]-cykIohexyl}-octová kyselina, hydrochloridová sůl:
Příklad 29 byl syntetizován podle postupu z příkladu 26, s tím, že cyklopropankarboxaldehyd byl použit namísto 2-methylbutyraldehydu (62% výtěžek).
MS: 226 (M+l pro CijHjjNA); t.t. 177-178 °C; Analýza (CiařhsNjO2.HC1) (Vyp.) C: 59.64, H: 9.24, N: 5.35 (nalez) C: 59.72, H: 9.15, N: 5.27.!H NMR (CD3OD) δ 0.50-0.56 (m, 2 H), 0.71-0.74 (m, 2H), 1.05-1.30 (m, 1H), 1.421.54 (m, 10H), 2.52 (s, 2H), 2.94 (d, 2H, J = 7.3 Hz), 3.10 (s, 2H).
PŘÍKLAD 30 {l-[(2-Hydroxy-l-methyl-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl:
Příklad 30 byl syntetizován podle postupu z příkladu 26, s tím, že 1hydroxy-2-propanon byl použit namísto 2-methylbutyraldehydu (60% výtěžek). MS: 230 (M+l pro Ci2H23N1O3); t.t. 164-165 °C; Analýza (Ci2H23NiO3.HC1) (Vyp.) C: 54.23, H: 9.10, N: 5.27 (nalez.) C: 54.23, H: 9.01, N: 5.18.
• · ‘H NMR (CD3OD) δ 1.30-1.32 (m, 3 Η), 1.44-1.55 (m, 1 OH), 2.60 (s, 2H),
3.11 (m, 2H), 3.28 (br., 2H), 3.37 (br., 1H), 3.57-3.61 (m, 1H), 3.78-3.81 (m, 1H).
PŘÍKLAD 31 [l-(Isobutylamino-methyl)-cyklohexyl]-octová kyselina, hydrochloridová sůl:
Příklad 31 byl syntetizován podle postupu z příkladu 26, s tím,že cyklopropankarboxaldehyd byl použit namísto 2-methylbutyraldehydu (35% výtěžek).
MS: 228 (M+l pro C13H25N1O2); t.t. 175-176 °C; Analýza (C13H25N1O2.HCI) (Vyp.) C: 59.19, H: 9.93, N: 5.51, (nalez.) C: 59.28, H: 9.98, N: 5.24.lH NMR (CD3OD) δ 1.03 (d, 6H, J = 6.9 Hz), 1.37-1.60 (m, 10H), 2.10-2.17 (m, 1H), 2.63 (s, 2H), 2.87 (d, 2H, J = 7.4 Hz), 3.07 (s, 2H).
PŘÍKLAD 32 (l-Propylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl:
Příklad 32 byl syntetizován postupem podle příkladu 26, s tím že propionaldehyd byl použit namísto 2-methylbutyraldehydu.
·· 9 ·
MS: 214.1 (M+l pro Ci2H23N]O2); t.t.: 174-177 °C; Analýza (C12H23N!O2.HC1) (Vyp.) C: 57.70, H: 9.69, N: 5.61 (nalez.) C: 57.55, H: 9.77, N: 5.48. 'H NMR (CD3OD) δ 0.93 (t, 1 H, J = 6.3 Hz), 0.99-1.03 (m, 4 H), 1.40-1.54 (m, 13 H), 1.72-1.78 (m, 2 H), 2.96-3.29 (m, 2 H).
PŘÍKLAD 33 [l-(Isopropylamino-methyl)-cyklohexyl]-octová kyselina, hydrochloridová sůl:
Příklad 33 byl syntetizován postupem podle příkladu 26, s tím, že aceton byl použit namísto 2-methylbutyraldehydu.
MS: 214.1 (M+l pro Ci2H23N]O2); t.t.; 193-194 °C; lH NMR (CD3OD) δ 1.291.57 (m, 18 H), 2.59 (s, 2 H), 3.07 (s, 2 H), 3.38-3.42 (m, 1 H).
v r
PŘIKLAD 34 (l-Cyklohexylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl:
cyklohexanon byl použit namísto 2-methylbutyraldehydu (48% výtěžek).
MS: 254 (M+l pro ΟΙ5Η27ΝιΟ2); t.t. 198-199 °C; Analýza (C15H27N1O2.HC1) (Vyp.) C: 62.12, H: 9.74, N: 4.83 (nalez.) C: 62.18, H; 9.84, N: 4.75.’H NMR (CD3OD) δ 1.20-1.60 (m, 16 Η), 1.63-1.76 (m, 1H), 1.88 (br., 2H), 2.13 (br., 2H), 2.60 (m., 2H), 3.09 (m., 3H).
PŘÍKLAD 35 [l-(Benzylamino-methyl)-cyklohexyl]-octová kyselina, hydrochloridová sůl:
Příklad 35 byl syntetizován postupem podle příkladu 26, s tím, že benzaldehyd byl použit namísto 2-methylbutyraldehydu.
MS: 262.0 (M+l pro C16H23N]O2); t.t.: 125-135 °C; ]H NMR (CD3OD) δ 1.381.49 (m, 11 H), 2.55 (s, 2 H), 3.07 (s, 2 H), 4.23 (s, 2 H), 7.43-7.49 (m, 5 H).
PŘÍKLAD 36. ((ÍR,3R)-3-Methyl-l-propylaminomethyl-cyklohexyl)octová kyselina; hydrochloridová sůl
((IR, 3R)-1-Aminomethyl-3“methyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl (Příklad 1, 1.1 g, 4.9 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (95 mL) a zpracována s 1 N NaOH (5 mL). Byl přidán propionaldehyd (4.9 mL), následovaný 10% Pd/C (0.5 g), a reakční směs byla protřepávána pod atmosférou H2 (50 psi) po 15.75 h. Reakční směs byla zfiltrována, byla přidána 1 M HC1 (20 mL) v etheru a roztok byl koncentrován ve vakuu. Potom byl zbytek rozpuštěn v horkém propanolu (100 mL), zfiltrován a koncentrován ve vakuu. Zbytek byl potom zředěn v isopropanolu (10 mL) a rekrystalizoval z ·· · · acetonu. Pevná látka byla zfiltrována, filtrát byl chlazen přes noc za získání druhé dávky krystalů. Pevné látky byly spojeny za získání požadovaného produktu (0.78 g, 66%).
MS: 228.1 (M+l pro Ci3H25NO2); t.t.: 179-179.5 °C; Analýza (Ci3H25NO2.HCl) (Vyp.) C: 59.19, H: 9.93, N: 5.31; (nalez.) C: 59.27, H: 9.97, N: 5.07. IR (KBr, cm'1): 2929 (br), 1717, 1188. ]H NMR (CD3OD) δ 0.84-1.03 (m, 8H), 1.12-1.17 (m, 1H) 1.46-1.79 (m, 8H), 2.43 (s, 2H), 3.00 (t, 2H, J = 7.8 Hz) 3.22 (s, 2H).
PŘÍKLAD 37 {l-[Cyklopentylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina; chlorovodíková sůl
(l-Aminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina (3.0 g, 17.5 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (45 mL). Byl přidán cyklopentankarbaldehyd (5 mL, 3 ekv.) a reakční směs byla zpracována s PtO2 (0.25 g). Potom byla reakční směs protřepávána pod atmosférou H2 (50 psi) po 16.5 h. Reakční směs byla zfiltrována, byl přidán IN HC1 (20 mL) v etheru a reakční směs byla zkoncentrována ve vakuu. Zbytek rekrystalizoval z horkého isopropanolu a acetonu za získání požadovaného produktu (2.32 g, 52%).
MS: 254.1 (M+l pro C15H27NO2); t.t. 172-173 °C; Analýza (C,5H27NO2.HC1) (Vyp.) C: 62.16, H: 9.74, N: 4.83; (nalez) C: 61.92, H: 9.88, N: 4.86. IR (KBr, cm‘'): 2930, 2854, 2509, 1689, 1455, 1211. ’H NMR (CD3OD) δ 1.231.32 (m, 2H), 1.41-1.73 (m, 16H), 1.90 (m, 1H), 2.63 (s. 2H), 3.01 (d, 2H, J =
7.6 Hz), 3.09 (s, 2H).
PŘÍKLAD 38. {l-[(Cyklohexylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina; chlorovodíková sůl
(1 -Aminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina (3.0 g, 17.5 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (45 mL). Byl přidán cyklohexankarbaldehyd (5 mL, 3 ekv.) a reakce byla zpracována s PtO2 (0.25 g). Potom byla směs třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 16.5 h. Reakční směs byla zfitrována, byl přidán IN HC1 (20 mL) v etheru a reakční směs byla koncentrována ve vakuu. Zbytek rekrystalizoval z horkého isopropanolu a etheru za získání požadovaného produktu (3.57 g, 67%).
MS: 268.1 (M+l pro C16H29NO2); t.t. 167.5-168 °C; Analýza (Ci6H29NO2.HCl) (Vyp.) C; 63.24, H: 9.95, N: 4.61; (nalez.) C: 63.14, H: 10.01, N: 4.45. IR (KBr, cm’1): 2926, 2851, 1718, 1684. !H NMR (CD3OD) δ 1.03 (m, 1H), 1.20-
1.85 (m, 20H), 2.63 (s, 2H), 2.88 (d, 2H, J = 6.8 Hz), 3.07 (s, 2H).
PŘÍKLAD 39: [ l-(/erí-Butoxy karbony lamin o-methyl)-cyklohexyl]-octová kyselina;
(1 -Aminomethyi-cyklohexyi)-ocíová kyselina (10.0 g, 58.4 mmol) byla rozpuštěna v THF (280 mL) a zpracována s 1 N NaOH (128.5 mL). Reakční směs byla ochlazena na 0 °C a bylo přidáváno 14.0 g (l.lekv.) di-tcrt-butyldikarbonátu po částech za intenzivního míchání. Reakční směs byla ponechána • * * · · 4 4 · 4 4
44 4 · ·♦· 4 4 · ohřát na teplotu místnosti a byla míchána přes noc. Potom byl THF odpařen a vodná vrstva byla promyta ethylacetátem (3x50 mL). Vodná vrstva byla okyselena KH2PO4 (44 g) a byla vytvořena pěna. Postupně byla pěna nahrazována bílou sraženinou. Směs byla míchána po 2h a po tuto dobu byl pomalu přidáván KH2PO4 (1 g). Sraženina byla odfiltrová a promyta vodou za získání požadovaného produktu (15.2 g, 96%).
MS: 272.1 (M+l pro C]4H25NO4); t.t.: 181 °C (dec); Analýza (C14H25NO4) (Vyp) C: 59.52, H: 9.36, N: 4.76; (nalez.) C: 59.51, H: 9.03, N: 4.87. IR (KBr, cm'1): 3413, 3054, 2933 (br), 1709, 1666, 1531, 1248; NMR (CDC13) δ 1.27-1.58 (m, 19H), 2.29 (s, 2H), 3.12 (d, 2H, J = 6.8 Hz), 4.97 (br, 1 H).
PŘÍKLAD 40: [l-(Acetylamino-methyl)-cyklohexyl]-octová kyselina
(1-Aminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina (2.0 g, 11.7 mmol) byla rozpuštěna v H2O (20 mL), potom byl přidán NaOH (3.1 g, 77.5 mmol, 6.6 ekv.) a acetanhydrid (1.8 mL, 19.3 mmol, 1.7ekv.). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě místnosti po 2 dny. Byl přidán IN HC1 (125 mL) a reakční směs byla extrahována EtOAc (125 mL). Organická vrstva byla oddělena, sušena nad Na2SO4 a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v H2O (100 mL), zpracován s NaOH (0.12 g) a koncentroval ve vakuu. Potom byl vzorek podrobem mžikové chromatografii s 6% MeOH/ CH2C12 za získání požadovaného produktu (0.31 g, 12 %).
MS: 214.1 (M+l C11H19NO3); t.t.: 107-108 °C; Analýza (CnH]9NO3) (vyp) C: 61.95 H: 8.98 N: 6.57 (nalez) C: 61.96 H: 9.03 N: 6.54; TLC 0.31 6% MeOH/ CH2C12; IR (KBr, cm'1): 3286, 3120, 2932, 24401714, 1576, 1419, 1 313, 1208. ‘H NMR (CDC13) δ 1.25-1.51 (m, 10 H), 2.06 (s, 3H), 2.28 (s, 2H), 3.26-3.29 (m, 2H), 6.32 (br, 1 H).
PŘÍKLAD 41: ((3R, 5S)-l-Cyklobutylaminomethyl-3,5-dimethylcyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl • ♦· *
HCI ((3 R, 5S)-l-Aminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl (0.76 g, 3.2 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (45 mL) a zpracována s 1N NaOH (3.2 mL). Byl přidán cyklobutanon (1 mL, 6 ekv.) a následně PtO2 (0.2 g). Reakčni směs byla protřepávána pod atmosférou H2 (50 psi) po 16 h. Potom byla reakčni směs zfiltrována, byl přidán 1N HCI v etheru (35 mL) a reakčni směs byla koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v horkém isopropanolu (150 mL) a filtrován. Potom byly do roztoku přidány aceton (100 mL) a ether (600 mL), které byly ochlazeny na 0 °C. Roztok byl ponechán usadit při 0 °C po 2 h, přičemž byly pozorovány krystaly. Krystaly byly spojena a promyty etherem a acetonem (0.38 g, 41%).
MS: 254.1 (M+l for C15H27NO2); t.t. 200-201 °C; Analýza (Ci5H27NO2.HC1) (Vyp.) C: 62.16, H: 9.74, N: 4.83; (nalez) C: 62.09, H: 9.72, N: 4.68. IR (KBr, cm’1): 2926, 1720, 1 189. !H NMR (CD3OD) δ 0,48-0.57 (m, 1H), 0.850.92 (m, 8H), 1.60-1.73 (m, 5H), 1.78-1.93 (m, 2H), 2.22-2.38 (m, 4H), 2.42 (s, 2H), 3.11 (s, 2H), 3.72-3.78 (m, 1H).
PŘÍKLAD 42: {(3R, 5S)-3,5-Dimethyl-l-[(2-methyl-butylamino)-methylJcyklohexylj-octová kyselina; hydrochloridová sůl
(Y3R 5 S 3-1 - A m i nnm eth vl-3 S-dimethvl-cvklohexvlt-oetnvá kvselinaXX ? - — S ~ ~ '-------~ y ~ ---------j - - ---------j - / ----- ? hydrochloridová sůl (1.0 g, 4.4 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (47 mL) a zpracována s 1N NaOH (4.4 mL), Byl přidán isobutyraldehyd (1 mL, 3 ekv.), následovaný PtO2 (0.17 g). Reakčni směs byla protřepávána pod atmosférou «··· · ♦ · · W 9 · ·«* · · 9 · · · · 9
H2 (50 psi) po 3 h. Potom byla reakční směs filtrována, byl přidán 1N HC1 (10 mL) v etheru a reakční směs byla koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v horkém isopropanolu (100 mL) a filtrován. Potom byl koncentrován ve vakuu a rekrystalizoval z acetonua a hexanu. Krystaly byly spojeny a promyty hexanem za získání požadovaného produktu (0.89 g, 75%). MS: 270.1 (M+l for Ci6H3iNO2); t.t. 171-173 °C; Analýza (Ci6H3iNO2.HC1) (Vyp.) C: 62.82, H: 10.54, N: 4.58; (nalez) C: 62.59, H: 10.43, N: 4.52. IR (KBr, cm'1): 2964 (br), 1721, 1485, 1186, 840. NMR (CD3OD) δ 0.48-0.57 (m, 1H), 0.81-1.07 (m, 12H), 1.23-1.27 (m, 1H), 1.45 -1.72 (m, 6H), 1.83-1.91 (m, 1H), 2.50 (s, 2H), 2.83 (dd, 1H, J = 8.3, 12.5 Hz), 3.00 (dd, 1H, J - 6.1,
12.5 Hz), 3.13-3.29 (m, 4H).
PŘÍKLAD 43: {(3R, 5S)-l-[(2-Hydroxy-l-methyl-ethylamino)-methyl]-3,5dimethyl-cyklohexyl}-octová kyselina; hydrochloridová sůl
((3R, 5S)-l-Aminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochoridová sůl (1.0 g, 4.3 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (45 mL) a zpracována s IN NaOH (4.3 mL). l-Hydroxy-propan-2-on (1 mL, 3 ekv.) byl přidán a následně PtO2 (0.15 g). Reakční směs byla protřepávána pod atmosférou H2 (50 psi) po 82 h. Byl přidán PtO2 (0.1 g) a 1-hydroxy-propan-2on (1 mL) a reakční směs byla třepána pod H2 atmosférou po dalších 24 h. Potom byla reakční směs zfitrována, byl přidán IN HC1 v etheru (35 mL) a reakční směs byla koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v horkém isopropanolu (150 mL) a filtrován. Potom byl koncentrován ve vakuu a rekrvsta 1 iznva 1 7 hnrkéhn isnnronanoln acetonu a etheru Krvstalv hvlv snnienv
- --------. --- - - - - --Ji— - A- - - - J - - - — J r J — Σ' ~ J ? promyty etherem stejně jako acetonem a sušeny (0.30 g, 1.04 mmol, 24%) MS: 258.1 (M+l pro C14H27NO3); t.t. 178-179 °C; Analýza (CI4H27NO3.HC1) (Vyp.) C: 57.23, H: 9.60, N: 4.77; (nalez) C: 56.77, H: 9.39, N: 4.45. IR (KBr, ·· cm’1): 3349, 2897, 1704, 1419, 1 194. *H NMR (CD3OD) δ 0.48-0.57 (m, 1H), 0.82-0.90 (m, 8H), 1.25-1.32 (m, 4H), 1.60-1.75 (m, 5H), 2.47 (s, 2H), 3.23 (d, 2H, J = 5.1 Hz), 3.38 (m, 1H), 3.58 (dd, 1H, J = 12.0, 7.1 Hz), 3.79 (dd, 1H, J = 12.0, 4.2 Hz)
PŘÍKLAD 44: {(3R, 5S)-l-[(2,2-Dimethoxy-ethylamino)-methyl]-3,5dimethyl-cyklohexylj-octová kyselina; hydrochloridová sůl
((3R, 5S)-l-Aminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl (1.0 g, 4.3 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (47 mL). Byl přidán glyoxal 1,1-dímethylacetal (3.7 mL, 3.0 ekv) a reakční směs byla zpracována s PtO2 (0.17 g). Potom byla reakční směs třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 3 h. Reakční směs byla zfiltrována, byl přidán IN HC1 v etheru (10 mL) a reakční směs byla koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v horkém isopropanolu (100 mL) a filtrován. Potom byl filtrát koncentrován a zbytek rekrystalizoval z acetonu a hexanu za získání požadovaného produktu (0.92 g, 75 %).
MS: 288.1 (M+l pro CisH^NCU); t.t. 125 °C (dec); Analýza (C15H29NO4.IICI) (Vyp.) C: 55.63, H: 9.34, N: 4.32; (nalez) C; 55.29, H: 9.48, N; 4.18. IR (KBr, cm'1): 2949, 1715, 1457, 1 191, 1 134, 1077. ‘H NMR (CD3OD) δ 0.47-0.56 (m, 1H), 0.81-0.90 (m, 8H), 1.59-1.71 (m, 5H), 2.46 (s, 2H), 3.18 (d, 2H, J = 5.1 Hz), 3.26-3.29 (m, 2H), 3.45-3.47 (m, 6H), 4.73 (t, 1H, J = 5.1 Hz).
PŘÍKLAD 45: {(3R, 5S)-l-[(Cyklopentylmethyl-amino)-methyl]-3,5dimethyl-cyklehexyl}-oetová kyselina, hydrochloridová sůl
HCI ·♦*· ·· ·· ·· · ··« ((3 R, 5S)-1 -Aminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl (1.0 g, 4.1 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (45 mL) a zpracována s 1N NaOH (4.2 mL). Byl přidán cyklopentankarbaldehyd (1.5 mL, 3 ekv) následovaný PtO2 (0.2 g). Reakční směs byla třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 12 h. Potom byla reakční směs filtrována, byl přidán 1N HC1 v etheru (35 mL) a reakční směs byla koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rpzpuštěn v horkém isopropanolu (150 mL) a filtrován. Roztok byl koncentrován ve vakuu a rekrystalizoval z horkého isopropanolu, acetonu a etheru. Krystaly byly spojeny a promyty etherem a acetonem. (0.40 g, 27%)
MS: 282.1 (M+l for C]7H31NO2); t.t. 187-188 °C; Analýza (C]7H3iNO2.HC1) (Vyp.) C: 64.23, H: 10.15, N: 4.41; (nalez) C: 64.11, H: 10.04, N: 4.34. IR (KBr, cm'1): 2952, 1720, 1452, 1 185. !H NMR (CD3OD) δ 0.48-0.57 (m, 1H), 0.81-0.90 (m, 8H), 1.25-1.32 (m, 2H) 1.60-1.71 (m, 9H), 1.89-1.93 (m, 2H), 2.25-2.29 (m, 1H), 2.49 (s, 2H), 3.01 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 3.20 (s, 2H).
PŘÍKLAD 46: {(3R, 5S)-l-[(Cyklohexylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethylcyklohexylj-octová kyselina; hydrochloridová sůl
((3R, 5S)-1 -Aminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl (1.0 g, 4.2 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (45 mL) a zpracována s 1N NaOH (4.3 mL). Byl přidán cyklohexankarbaldehyd (1.5 mL, 3 ekv.), následovaný PtO2 (0.15 g). Reakční směs byla třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 17 h. Potom byla reakční směs filtrována, byl přidán 1N HC1 v etheru (35 mL) a reakční směs byla koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v horkém isopropanolu (150 mL) a filtrován. Potom byl roztok koncentrován ve vakuu a rekrystalizoval z horkého isopropanolu, acetonu a etheru. Krystaly byly spojeny a promyty etherem a acetonem. (0.46 g, 34%) • · ·«
MS: 296.2 (M+l for C18H33NO2); t.t. 176-177 °C; Analýza (C18H33NO2.HC1) (vyp.) C: 65.13, H: 10.32, N: 4.22; (nalez) C: 64.89, H: 10.36, N: 4.09. IR (KBr, cm'1): 2919, 2851 1721, 1453, 1 192. ’H NMR (CD3OD) δ 0.48-0.57 (m, 1H), 0.81-0.90 (m, 8H), 1.00-1.36 (m, 5H), 1.60-1.71 (m, 11H), 2.49 (s, 2H), 2.88 (d, 2H, J = 6.8 Hz), 3.18 (s, 2H).
PŘÍKLAD 47: ((3R, 5S)-l-Cyklohexylaminomethyl-3,5-dimethylcyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl
((3R, 5S)-l-Aminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl (0.99 g, 4.2 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (45 mL) a zpracována s 1N NaOH (4.2 mL). Byl přidán cyklohexanon (1.5 mL, 3 ekv.), následovaný PtO2 (0.2 g). Reakční směs byla třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 17 h. Potom byla reakční směs zfiltrována, byl přidán 1N HC1 v etheru (3 5 mL) a reakční směs byla koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v horkém isopropanolu (150 mL) a filtrován. Potom byl roztok koncentrován ve vakuu a rekrystalizoval z horkého isopropanolu, acetonu a etheru. Krystaly byly spojeny a promyty etherem a acetonem. (0.33 g, 25%)
MS: 282.1 (M+l pro C17H31NO2); t.t. 210 °C; Analýza (Ci7H3iNO2.HCl) (Vyp.) C: 64.23, H: 10.15, N: 4.41; (nalez) C: 63.89, H: 9.98, N: 4.33. IR (KBr, cm'1) : 2921, 1691, 1452, 1216. ‘H NMR (CD3OD) δ 0.47-0.57 (m, 1H), 0.820.90 (m, 8H), 1.30-1.46 (m, 5H), 1.57-1.63 (m, 2H), 1.69 (d, 4H, J - 12.9 Hz),
1.86 (d, 2H, J = 12.5 Hz) 2.13 (d, 2H, J = 10.3 Hz), 2.46 (s, 2H), 3.04-3.10 (m 1H), 3.21 (s, 2H).
PŘÍKLAD 48: ((3R,5S)-l-KarboxymethyI-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina · ·* *« ·« ·· ·» ···» · · · »·»» • «« * «··· * « * • · ··· · · * · · · * « ·« «·« · » * ···· ·· ·· ·· ·· ·*·*
48a
Example 48
Krok i: Syntéza (8R,10S)-8,10-Dimethyl-2,4-dioxo-3-aza-spiro[5.5]undekan-
1,5-dikarbonitrilu; amoniové soli (48a):
Roztok absolutního ethanolu (40 mL) byl ochlazen na 0 °C a nasycen plynným NH3, potom byl zpracován s cis-3,5-dimethyl-cyklohexanonem (5.0 g, 39.62 mmol) a ethylkyanoacetátem (8.43 mL, 79.24 mmol). Baňka byla utěsněna, ponechána ohřát na teplotu místnosti a míchána přes noc. Sraženina byla filtrována, promyta Et2O a sušena pod vakuem za získání 6.04 g (59%) požadovaného produktu jako mdlé pevné látky.
MS: 260.1 (M+l pro C14H17N3O2); Analýza (C14H17N3O2.NH3.O.88 H2O) (Vyp.) C: 57.55, H: 7.51, N: 19.17 (nalez) C: 57.67, H: 7.45, N: 19.06; IR (KBr, cm’1) 3298, 2954, 2172, 1700, 1575. ]H NMR (CDC13) δ 0.46-0.50 (m, 1 H), 0.82-1.17 (m, 11 H), 1.65-1.98 (m, 3 H), 3.58 (dd, 2 H, J = 13.9, 6.8 Hz).
Krok ii: Syntéza z příkladu 48;
(8S, 10R)-8,10-Dimethyl-2,4-dioxo-3-aza-spiro[5.5]undekan-l ,5-dikarbonitril (48a, 25.36 g, 97.8 mmol) byl zpracován s koncentrovanou H2SO4 (102 mL) a vodou (30 mL). Reakční směs byla zahřívána na 150 °C po 5 h; potom byla ponechána ochladit na teplotu místnosti a míchána přes noc. Reakční směs byla zfiltrována a pevné látky byly spojeny a rozpuštěny v 1 N NaOH. Tento roztok byl filtrován. Potom byl filtrát okyselen koncentrovanou HC1 (40 mL). Sraženina byla spojena a sušena přes noc pod vysokým vakuem. Potom byla sloučenina rozpuštěna v horkém isopropanolu (100 mL) a rekrystalizovala z vody z,a získáni pozadovancho ς οο/Λ
S S Z V J
MS: 229.1 (M+l pro Ci2H20O4); Analýza (Ci2H20O4) (Vyp.) C: 63.14, H: 8.83; (nalez) C: 63.36, H: 8.92. IR (KBr, cm’1): 2950, 2913, 1698. ’H NMR (CD3OD) • 9 • · ·· • 9
99
99«· ·9
99»· •· · •· »·· ·« • 9 99 9 9 δ 0.40-0.48 (m, 1Η), 0.77-0.85 (m, 8H) 1.57-1.77 (m, 5H) 2.41 (s, 2H), 2.56 (s, 2H).
PŘÍKLAD 49: řra«s-((3R, 5S)-l-Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyloctová kyselina, hydrochloridová sůl
Example 48
49a 49b 49c
v
HO °Y°H X
Example 49
krok i & ii: Synthéza (cis/trans)-(7S,9R)-7,9-Dimethyl-2-oxaspiro[4.5]dekan-3-onu (49a):
(i), Di-kyselina (48, 6.36 g, 27.9 mmol) byla suspendována v H2O (93 mL), zpracována s hydroxidem amonným (3.5 mL) a dusičnanem stříbrným (4.73 g, 27.9 mmol) a míchána po 20 minut při teplotě místnosti. Reakční směs byla filtrována a pevná látka byl třikrát resuspendována s H2O, potom sušena pod vakuem ve tmě po 2 dny při 50 °C za získání 41 g of stříbrné di-soli, která byla bezprostředně zpracována (ii). Stříbrná di-sůl (1.24 g, 2.81 mmol) byla vložena do tmavé baňky, zpracováína s CC14 (50 mL) a jodem (0.72 g, 2.81 mmol) a zahřívána při 75 °C přes noc. Reakční směs byla zfiltrována, koncentrována ve vakuu a podrobena chromatografii na silikagelu promýváním 4:1 hexan/EtOAc za získání 0.37 g (72%) požadovaného produktu jako bledého oleje (49a). MS: 183.0 (M+l pro CnHi8O2); Analýza (Cj iHi802.0.05H20) (Vyp.) C: 72.13, H: 9.96 (nalez) C: 71.77, H: 9.69; IR (KBr, cm’1) 3298, 2954, 2172, 1700, 1575, ·
• ··· * 9 * 99 * ··· · · · · · 4 » « * · · · · < 4 « « ··*· *· ·♦ ♦· ·· ·4Μ
1450, 1337. 'Η NMR (CDC13, -1:1 směs cis/trans diastereomerů) δ 0.49-0.59 (m, 1 Η), 0.82-1.02 (m, 10 Η), 1.42-1.53 (m, 2 Η), 1.58-1.72 (m, 3 Η), 2.30 (s, 1 H, projeden isomer), 2.39 (s, 1 H, pro druhý isomer 2), 3.96 (s, 1 H, pro jeden isomer), 4.10 (s, 1 H, pro druhý isomer).
krok iii: Syntéza (cis/trans)-7V-Benzyl-2-((3R,5S)-l-hydroxymethyl-3,5dimethyl-cyklohexyl)-acetamidu (49b a 49c): Lakton (49a, 0.85 g, 4.66 mmol) byl rozpuštěn v THF (18 mL), zpracován s benzylaminem (0.61 mL, 5.60 mmol) a zahříván pod refluxem po dva dny. Reakční směs byla ochlazena na teplotu místnosti , zředěna s EtOAc, promyta nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, sušena nad Na2SO4 a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu promýváním 1:1 hexanem/EtOAc za získání 0.79 g (59%) požadovaného produktu jako čirého oleje (směs cis a trans isomerů, 49b a 49c).
MS: 290.1 (M+l pro CigH^NjC^); olej; TLC; SiO2, Rf 0.16 (2:1 hexan/EtOAc); Analýza (CjgHzvN^) (Vyp.) C: 74.70, H: 9.40, N: 4.84 (nalez) C: 74.41, H: 9.35, N: 4.57.
Krok iv: Separace 49b a 49c: Směs cis- a trans-isomerů (49b a 49c) byla oddělena preparativní HPLC (C18 kolona, promývání s gradientem 60% CH3CN / 40% H2O po 5 minut, potom 45% CH3CN / 55% H2O po 35 minut, všechny mobilní fáze s 0.05% TFA).
Trans-isomer (49b): RT = 23.600 min, 54 mg výtěžek. !H NMR (CDC13) δ 0.36-0.62 (m, 3 H), 0.82 (d, 6 H, J = 6.3 Hz), 1.39-1.70 (m, 5 H), 2.14 (s, 2 H), 2.58 (br, 1 H), 3.60 (s, 2 H), 4.43 (d, 2 H, J = 5.9 Hz), 5.97 (br, 1 H), 7.26-7.37 (m, 5 H).
Cis-isomer (49c): RT = 25.828 min, 87 mg výtěžek, 'Η NMR (CDC13) δ 0.470.56 (m, 1 H), 0.65 (t, 2 H, J = 13.2 Hz), 0.85 (d, 6 H, J = 6.3 Hz), 1.47-1.68 (m, 5 H), 2.38 (s, 2 H), 2.58 (br, 1 H), 3.40 (s, 2 H), 4.45 (d, 2 H, J = 5.9 Hz), 6.03 (br, 1 H), 7.28-7.36 (m, 5 H).
Krok v: Syntéza z příkladu 49: Trans isomer JV-Benzyl-2-(l-hydroxymethylcyklohexyl)-acetamidu (49b, 87 mg, 0.303 mmol) byl odebrán z HPLC, * ♦ rozpuštěn v 5 mL vody a zpracován a s 24 mg NaOH. Reakce byla zahřívána k refluxu po 3 dny. Potom byla ochlazena na teplotu místnosti, zředěna s 1 N NaOH a extrahována EtOAc. Vodná vrstva byla okyselena konc. HC1 (5 mL), a potom byla zředěna 1 N HC1 a produkt byl extrahován EtOAc. Organická vrstva byla promyta solankou a sušena nad Na2SO4. Roztok byl koncentrován za získání 23 mg (61%) požadovaného produktu.
MS: 201 (M+l pro ChH20O3); ’H NMR (CD3OD) δ 0.48-0.57 (m, 1 H), 0.881.00 (m, 8H), 1.40-1.49 (m, 2H), 1.68-1.70 (m, 3H), 2.28 (s, 2H), 4.11 (s, 2H).
PŘÍKLAD 50: cj$-((3R, 5S)-l-Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyloctová kyselina; hydrochloridová sůl
Cis-isomer .V-Benzyl-2-( 1 -hydroxymethyl-cyklohexyl)-acetamidu (49c, 87 mg, 0.303 mmol) byl odebrán z HPLC, rozpuštěn v 5 mL vody a zpracován s 24 mg NaOH. Reakce byla zahřívána pod refluxem po 3 dny, potom byla ochlazena na teplotu místnosti, zředěna 1 N NaOH a extrahována s EtOAc. Vodná vrstva byla okyselena koncentrovanou HC1 (5 mL) a potom zředěna 1 N HC1 a produkt byl extrahován EtOAc. Organická vrstva byla promyta solankou a sušena nad Na2SO4. Roztok byl koncentrován za získání 43 mg (71%) požadovaného produktu.
MS: 201.1 (M+l pro ΟπΗ20Ο3); *H NMR (CD3OD) δ 0.48-0.57 (m, 1H), 0.880.96 (m, 8H), 1.42-1.50 (m, 2H), 1.59-1.69 (m, 3H), 2.37 (s, 2H), 3.94 (s, 2H).
PŘÍKLAD 51: (l-Dimethylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl co2h
HCI • · • · ·· (l-Aminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina (0.51 g, 3.0 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu a byl přidán formaldehyd (3 mL, 2 ekv). Byl přidán 10% Pd/C (1.6 g) a reakční směs byla třepána při teplotě místnosti pod atmosférou vodíku 760 Torr po 12 h. Potom byla reakční směs zpracována s HC1 až bylo pH kolem 2, a rekrystalizovala z acetonu a etheru za získání 1.62 g (87%) požadovaného produktu.
MS: 200.1 (M+l pro C]]H2iNO2); t.t: 140-142 °C; Analýza (Cj iH2iNO2.HC1) (Vyp.) C: 54.99, H: 9.44 N: 5.83; (nalez) C: 54.90, H: 9.36, N; 6.22. lH NMR (CD3OD) δ 1.42-1.59 (m, 10H), 2.63 (s, 2H), 2.96 (s, 6H), 3.26-3.29 (m, 2H).
PŘÍKLAD 52: (l-Butylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl
(l-Aminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina (0.86 g, 5.0 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (100 mL), potom byl přidán Pd/C (10%, 0.86 g) a butyraldehyd (1.44 g, 3 ekv.). Reakční směs byla uložena pod 760 Torr vodíku při teplotě místnosti až do ukončení reakce. Potom byla zfiltrována, okyselena a koncentrována. Zbytek byl rozpuštěn v isopropanolu, filtrován a rekrystalizoval z acetonu a etheru za získání finálního produktu,
MS: 228.1 (M+l pro C13H25NO2); t.t.: 142-154 °C; Analýza (C13H25NO2.HC1) (Vyp.) C: 59.19, H: 9.93, N: 5.31; (nalez) C: 58.85, H: 9.86, N: 5.05. ;Η NMR (CD3OD) δ 0.98 (t, 3H, J = 7.3 Hz), 1.39-1.54 (m, 12H), 1.66-1.72 (m, 2H), 2.57 (s, 2H), 3.01 (t, 2H, J = 9.3 Hz), 3.09 (s, 2H).
PŘÍKLAD 53: {l-[2,2-Dimethoxy-ethylamino)-methyl]-cyklohexyI}-octová kyselina; hydrochloridová sůl
O
co2h HCI (1-Aminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina (2,0 g, 11.7 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (100 mL). Byl přidán glyoxal 1,1 -dimethylacetal (3.7 mL, 3 ekv.) a reakční směs byla zpracována s PtO2 (0.5 g). Potom byla reakční směs třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 4 h. Reakční směs byla filtrována, byla přidána IN HC1 v etheru (15 mL) a reakční směs byla koncentrována ve vakuu. Zbytek rekrystalizoval z horkého isopropanolu (25 mL) a acetonu (700 mL) za získání 0.44 g (52%) požadovaného produktu.
MS: 260.1 (M+l pro C!3H25NO4); t.t. 128-129 °C; Analýza (C]3H25NO2.HC1) (Vyp.) C: 52.79, H: 8.86, N: 4.74; (nalez) C: 52.84, H: 8.94, N: 4.67. IR (KBr, cm’1): 2926, 1693,1457, 1208, 1087. ’H NMR (CD3OD) 5 1.40-1.55 (m, 10H), 2.60 (s, 2H), 3.13 (s, 2H), 3.17 (d, 2H, J = 4.9 Hz), 3.45 (s, 6H), 4.72 (t, 1H, J =
5.1 Hz)
EXAMPLE 54: (l-Methylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl
{l-[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina; hydrochloridová sůl (Příklad 55, 4.1 g, 13.2 mmol) byla rozpuštěna v 95% ethanolu (250 mL). Potom byl přidán 10% Pd/C (1 g) a reakční směs byla třepána při teplotě místnosti pod vodíkovou atmosférou 760 Torr po 1 h. Reakční směs byla zfiltrována a koncentrována, porom rekrystalizovala z acetonu a etheru za získání 2.69 g (92%) požadovaného produktu.
MS: 186.0 (M+l pro CioHipNCh); t.t.: 158-162 °C; Analýza (C10H19NO2.HCI) (Vyp.) C: 53.09, H: 9.13, N: 6.19; (nalez) C: 53.14, H: 8.96, N: 6.34; ’H NMR (CD3OD) δ 1.42-1.54 (m, 10H), 2.50-2.53 (m, 2H), 2.71-2.74 (m, 3H), 3.09-3.11 (m, 2H).
PŘÍKLAD 55: {l-[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina; hydrochloridová sůl • * « · ν O^Oco2h
CH^_J HCI [l-(Benzylamino-methyl)-cyklohexyl]-octová kyselina; hydrochloridová sůl (0.49 g, 1.7 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (45 mL) a zpracována s 1N NaOH (1.8 mL). Byl přidán formaldehyd (1 mL, 5 ekv.) a reakce byla zpracována s PtO2 (0.2 g). Potom byla reakční směs třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 30
h. Reakční směs byla zfiltrována, byl přidán 1N HCI v etheru (10 mL) a reakční směs byla koncentrována ve vakuu za získání 0.31 g (1.14 mmol, 67%) požadovaného produktu.
MS: 274.1 (M-l pro Ci7H25NO2); olej; IR (KBr, cm’1): 3205, 2930, 2261, 1684, 1451, 1 198. HRMS: (vyp) 276.1963 (nalez) 276.1973 (M+l pro C]7H25N02); !H NMR (CD3OD) δ 1.33-1.63 (m, 13H), 2.28 (s, 2H), 3.06 (s, 2H), 4.40 (s, 2H),
7.21-7.34 (m, 5H).
PŘÍKLAD 56: [l-(Fenethylamino-methyl)-cyklohexyl]-octová kyselina, hydrochloridová sůl
(l-Aminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina (2.0 g, 11.7 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (100 mL). Byl přidán fenyl-acetaldehyd (4 mL, 3 ekv.) a reakční směs byla zpracována s 10% Pd/C (0.5 g). Reakčnís měs potom byla třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 3 h. Reakční směs byla zfiltrována, byla přidána 1N HCI v etheru (20 mL) a reakční směs byla koncentrována ve vakuu. Zbytek rekrystalizoval z horkého isopropanolu a etheru za získání 0.15 g (4.1%) požadovaného produktu.
MS: 2/6.1 (M+l pro Ci7H25NO2), LI.
(Vyp.) C: 64.54, H: 8.46, N: 4.43; (nalez) C: 64.54, H: 8.35, N: 4.34. IR (KBr, cm‘I):2929, 2855, 2813, 1693, 1455, 1220. ]H NMR (CD3OD) δ 1.38-1.58 (m,
10H), 2.56 (s, 2H), 3.01-3.06 (m, 2H), 3.14 (s, 2H), 3.23-3.29 (m, 2H), 7.217.34 (m, 5H)
PŘÍKLAD 57: (l-[(3-Fenyl-propylaniino)-inethylI-cyklohexyl}-octová kyselina, hydrochloridová sůl
(l-Aminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina (2.00 g, 11.7 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (100 mL). Byl přidán 3-fenyl-propionaldehyd (4.6 mL, 3 ekv.) a reakční směs byla zpracována s 10% Pd/C (0.5 g). Potom byla reakční směs třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 3 h. Reakční směs byla zfiltrována, byla přidána IN HC1 (20 mL) v etheru a reakční směs byla koncentrována ve vakuu. Zbytek rekrystalizoval z horkého isopropanolu a etheru za získání 0.46 g (12%) požadovaného produktu.
MS: 290.1 (M+l pro ClgH27NO2); t.t. 168-169 °C; Analýza (C18H27NO2.HC1) (Vyp.) C: 66.34, H: 8.66, N: 4.40; (nalez) C: 66.48, H: 8.65, N: 4.17. IR (KBr, cm'1): 2932, 2854, 1686, 1454, 1217. TH NMR (CD3OD) δ 1.38-1.58 (m, 10H), 2.00-2.04 (m, 2H), 2.56 (s, 2H), 2.71 (t, 2H, J = 7.6 Hz) 3.01-3.08 (m, 4H),
7.21-7.34 (m, 5H).
PŘÍKLAD 58: ((3R, 5S)-l-Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cykIohexyl)-octová kyselina; sodná sůl
(7S, 9R)-7,9-Dimethyl-2-oxa-spiro[4.5]dekan-3-on (49a, 1.04 g, 5.71 mmol) byl rozpuštěn ve vodě (25 mL) a zpracován s NaOH (2.5 g). Reakce byla zahřívána k refluxu (115 °C) po 4h. Potom byl roztok ochlazen na teplotu místnosti,
promyt Εΐ2Ο a vodná vrstva byla koncentrována ve vakuu za získání pevné látky (8 g). Zbytek byl promyt IN octovou kyselinou a byl extrahován EtOAc, která pak byla koncentrována. Potom zbytek rekrystalizoval z EtOH, MeOH a hexanu za získání 0.75 g (3.75 mmol, 66%).
MS: 199.0 (M-l pro CnH2o03); HRMS: (vyp) 199.1334 (nalez) 199.1333 (M-l pro C11H20O3); t.t. >250 °C; IR (KBr, cm'1): 2953, 2910, 1777, 1706, 1458, 1168, 1012.
PŘÍKLAD 59: ((3R, 5S)-l-Ethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)octová kyselina; hydrochloridová sůl
((3R, 5S)- 1-Aminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl (59a, 0.418 g, 1.8 mmol), sloučenina 59a, připravená podle postupu z literatury: Bryans, J. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 1997, 7(19), 2481.) byla rozpuštěna v ethanolu (45 mL) a zpracována s IN NaOH (1.8 mL). Acetaldehyd (0.5 mL, 3 ekv.) byl přidán a reakční směs byla zpracována s PtO2 (0.2 g). Potom byla reakční směs třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 3 h. Reakce byla zfiltrována, byl přidán IN HC1 (2 mL) v etheru a reakční směs byla koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v horkém isopropanolu (100 mL) a filtrován. Do filtrátu byl přidán hexan (100 mL) při 0 °C a sraženina byla spojena za získání 31 mg (0.14 mmol, 8%) požadovaného produktu.
MS: 228.1 (M+l pro C]3H25NO2); t.t. 167-168 °C; IR (KBr, cm'1): 2954 (br), 2502, 1685, 1459, 1223. Analýza (C]3H25NO2.HC1) (Vyp.) C: 56.60, H; 9.98, N: 5.11; (nalez) C: 56.60, H: 9.85, N: 4.77. ]H NMR (CD3OD δ 0.47-0.56 (m, 1H), 0.78-0.89 (m, 8H), 1.30-1.36 (m, 3H), 1.61-1.79 (m, 5H), 2.58 (s, 2H), 2.99-
3.10 (m, 4H).
·«··
PŘÍKLAD 60: (l-Aminomethyl-4-ethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl
krok i: Syntéza ethylesteru 2-kyano-(4-ethyl-cyklohexyliden)-octové kyseliny: (60a): 4-Ethylcyklohexanon (13.0 g, 103.0 mmol) byl rozpuštěn toluenu (150 mL) a zpracován s ammonium acetátem (0.79 g, 10.3 mmol), ledovou kyselinou octovou (1.2 mL) a ethylkyanoacetátem (11.65 g, 103.0 mmol). Potom byla reakční směs zahřívána k refluxu po 56 h s Dean-Starkovým chladičem; potom byla ochlazena na teplotu místnosti a promyta H2O (2xl00mL). Vodná vrstva byla zpětně promyta toluenem (2xl50mL).
Organické vrstvy byly spojeny a sušeny nad Na2SO4 a koncentrovány ve vakuu. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu promýváním s 5:1 hexane/ethylacetátem za získání 19.81 g (87%) požadovaného produktu jako čirého žlutého oleje (60a).
MS: 222.1 (M+l pro Ci3H]9NiO2); olej; TLC: SiO2, Rf 0.93 (1:1 hexan/ EtOAc);. IR (KBr, cm’1): 2931, 2225, 1728, 1602, 1233. ]H NMR (CDC13) δ 0.82 (t, 3H, J = 7.4 Hz), 1.11-1.38 (m, 7H), 1.39-1.45 (m, 1H), 1.90-2.09 (m, 3H), 2.20-2.28 (m, 1H), 2.91-2.98 (m, 1H), 3.75-3.79 (m, 1 H)) 4.15-4.20 (m, 2H).
krok ii: Syntéza czs-l-kyanomethyl-4-ethyl-cyklohexankarbonitrilu: (60b);
Ethylester 2-kyano-(4-ethyl-cyklohexyliden)-octové kyseliny (60a, 16.57 g,
74.86 mmol) byl rozpuštěn v EtOH (100 mL) a přidán do suspenze NaCN (3.67 g, 74.86 mmol) v EtOH / H2O (300 mL /16 mL). Reakce byl přes noc zahřívána k refluxu, potom byla ochlazena na teplotu místnosti a filtrována do odstranění soli, která se vysrážela (4.58 g). Filtrát byl koncentrován ve vakuu za získání ···· ·· · 4 čirého, hodně viskozního žlutého oleje. Zbytek byl podroben mžikové chromatografii na silikagelu promýváním s 16:1 hexanem/EtOAc za získáni 11.82 g (77%) (směs 81% cis- a 19% trans-isomerů) produktu jako žlutého oleje (60c).
MS: žádný M+l ion nebyl pozorován (CuHjůNj); olej; TLC: S1O2, Rf 0.55 (2:1 hexan/EtOAc); Analýza (C11H16N2) (Vyp.) C: 74.96, H: 9.15, N: 15.89 (nalez) C: 74.84, H: 8.97, N: 15.74. IR (KBr, cm’1): 2934, 2240,1453. 'H NMR (CD3OD) δ 0.90 (t, 3H, J = 7.6 Hz), 1.18-1.47 (m, 7H) 1.83-1.87 (m, 2H) 2.07-
2.10 (m, 2H), 2.85 (s, 2H).
Krok iii. Syntéza ethylesteru czs-(l-kyano-4-ethyl-cyklohexyl)-octové kyseliny ((60c):
cis-l-Kyanomethyl-4-ethyl-cyklohexankarbonitril (60b, 6.16 g, 34.95 mmol) byl rozpuštěn v EtOH (92 mL) a toluenu (92 mL), ochlazen na 0 °C a nasycen plynným HCI. Roztok byl zazátkován a ponechán míchat přes noc při teplotě místnosti. Potom byl koncentrován ve vakuu za získání nažloutle bílé pevné látky. Zbytek byl rozetřen s ethyletherem (200 mL) a sušen pod vakuem, potom byl zpracován s vodou (90 mL) a byla přidána 1 N HCI (4 mL). Reakční směs byla ponechána míchat přes noc při teplotě místnosti a v roztoku byly pozorovány po 18 hodinách žluté olejové kapičky. Sloučenina byla extrahována EtOAc (3 x 100 mL); organické vrstvy byly spojeny, promyty solankou, sušeny nad Na2SO4 a koncentrovány. Zbytek byl podroben mžikové chromatografii 16:1 hexanem/EtOAc za získání 4,40 g (56%) požadovaného produktu (60c). MS: 224.1 (M+l pro C13H21NO2); olej; TLC: S1O2, Rf 0.38 (CH2CI2); Analýza (Ci3H2iNO2) (Vyp.) C: 69.92, H: 9.48, N: 6.27 (nalez) C: 69.97, H: 9.49, N: 6.17. IR (KBr, cm’1): 2930, 2236, 1736, 1 187. JH NMR (CD3OD) δ 0.87-0.90 (m, 3H), 1.18-1.46 (m, 10H), 1.77-1.80 (m, 2H), 2.05-2.09 (m, 2H), 2.59 (s, 2H), 4.13-4.15 (m, 2H).
Krok iv: Syntéza 8-ethyl-2-aza-spiro [4.5]dekan-3-onu: (60d): cz'5-(l-Kyano-4-ethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, ethylester (60c,2.7 g, 12.1 mmol) byl rozpuštěn v MeOH (250 mL) a zpracován s 10% Rh/ 2% Pd/C (0.5 g) ·
• ·*· a třepán pod atmosférou H2 (50 psi) po 3 h. Potom byla reakční směs zfiltrována, koncentrována ve vakuu a podrobena chromatografii na silikagelu promýváním s 3% MeOH/CH2Cl2 za získání 1.13 g (52%) požadovaného produktu jako bílé pevné látky (60d).
MS: 181.0 (M+l pro C11H19N1O1); t.t. 131-133 °C; TLC: SiO2, Rf 0.22 (4% MeOH/CH2Cl2); Analýza (CnHi8N]Oi) (Vyp.) C: 72.28, H: 10.08, N: 7.66 (nalez) C: 72.66, H: 10.45, N; 7.26. IR (KBr, cm’1): 3197, 2918, 1680. !H NMR (CDCh) δ 0.83-0.97 (m, 5 H), 1.06-1.23 (m, 3 H), 1.31-1.39 (m, 2 H), 1.631.67 (m, 4 H), 2.09-2.11 (m, 2 H), 3.15-3.17 (m, 2 H), 5.73 (br, 1 H).
Krok v: Syntéza z příkladu 60:
8-Ethyl-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-on (60d, 3.8 g, 21.1 mmol) byl zpracován s koncentrovanou HC1 (141 mL) a zpracován při 110 °C po 24 h. Potom byla reakční směs koncentrována a rekrystalizovala z horkého isopropanolu (20 mL) a acetonu za získání 3.3 g (16.6 mmol, 79%) produktu.
MS: 200.1 (M+l pro CnH2iNO2); Analýza (C)iH21NO2.HCl) (Vyp.) C: 56.04, H: 9.41, N: 5.94; (nalez) C: 56.06, H: 9.46, N: 5.88. IR (KBr, cm'1): 2916 (br), 1698, 1526, 1281. ‘H NMR (CD3OD) δ 0.89 (t, 3H, J = 7.3 Hz), 1.02-1.40 (m, 8H), 1.68 (t, 4H, J = 16.1 Hz), 2.38 (s, 2H), 3.13 (s, 2H).
PŘÍKLAD 61: (l-Aminomethyl-4-propyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl
(61 a) (61b)
(61c) (6ld) Example 61
Krok i. Syntéza 2-kyano-(4-propyl-cyklohexyliden)-octové kyseliny, ethyl esteru: (61a): 4-ři-Propyl-cyklohexanon (14.0 g, 99.8 mmol) byl rozpuštěn v • 9 • »·· toluenu (145 mL) a zpracován s ammonium-acetátem (0.77 g, 9.98 mmol), s ledovou kyselinou octovou (1.1 mL) a ethyl-kyanoacetátem (11.3 g, 99.8 mmol). Reakční směs byla zahřívána k refluxu přes noc s Dean-Starkovým lapačem, potom byla ochlazena na teplotu místnosti a promyta H2O (2 x 200 mL). Vodná vrstva byla opětovně promyta toluenem (3 x 200 mL). Organické vrstvy byly spojeny a sušeny nad Na2SO4 a koncentrovány ve vakuu. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu promýváním s 8:1 hexanem/ethylacetátam za získání 21.58 g (92%) požadovaného produktu jako čirého žlutého oleje (61a). MS: 236.1 (M+l pro Ci4H2iN02); olej; TLC: SiO2, Rf 0.57 (8:1 hexan/ EtOAc); Analýza (C14H2!NO2) (Vyp.) C: 71.46, H: 8.99, N: 5.95 (nalez) C: 71.38, H: 8.92, N: 6.10. IR (KBr, cm1): 2929, 2225, 1728, 1603, 1227. NMR (CDC13) δ 0.83 (t, 3H, J = 7.3 Hz), 1.07-1.30 (m, 9H), 1.51-1.56 (m, 1H), 1.91-2.00 (m, 2H), 2.04-2.12 (m, 1H), 2.23-2.30 (m, 1H), 2.95-3.01 (m, 1H), 3.77-3.83 (m, 1H), 4.20 (q, 2H, J = 7.1 Hz).
Krok ii: Syntéza czs-l-kyanoinethyl-4-propy 1-cyklohexankarbonitrilu: (61b): 2-Kyano-(4-«-propyl-cyklohexyliden)-octová kyselina, ethylester (61a, 19.46 g, 82.70 mmol), byl rozpuštěn v EtOH (100 mL) a přidán do suspenze NaCN (4.053 g, 82.70 mmol) v EtOH / H2O (340 mL / 20 mL). Reakční směs byla zahřívána k refluxu přes noc, potom byla ochlazena na teplotu místnosti a filtrována pro odstranění soli, která se vysrážela. Filtrát byl koncentrován ve vakuu za získání čirého, velice viskozního žlutého oleje. Tento olej byl opětovně rozpuštěn v EtOAc a promyt solankou (2 x 150 mL), sušen nad Na2SO4, a koncentrován. Zbytek byl podroben mžikové chromatografii na silikagelu promýváním s 19:1 hexanem/EtOAc za získání 4.69 g 61b. (74% výtěžek).
MS: žádný M+l ion nebyl pozorován (Ci2H]8N2); olej; TLC: SiO2, Rf 0.38 (3:1 hexan/EtOAc); Analýza (Ci2H18N2) (Vyp.) C: 75.74, H: 9.53, N: 14.72 (nalez) C: 76.05, H: 9.58, N: 14.90. IR (KBr, cm’1): 2931, 2239, 1453, 758. !H NMR (CDCI3) δ 0.86 (t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.18-1.34 (m, 7H), 1.42-1.61 (m, 2H), 1.811.83 (m, 2H), 2.06-2.09 (m, 2H), 2.65 (s, 2H).
·· ·· • * · ·
Krok iii. Syntéza cís-(l-kyano-4-propyl-cyklohexyl)-octové kyseliny, ethylesteru (61c):
cis-1 -Kyanomethyl-4-n-propyl-cyklohexankarbonitril (61b, 3.87 g, 20.34 mmol) byl rozpuštěn v EtOH (50 mL) a toluenu (50 mL), ochlazen na 0 °C a sycen plynným HC1 po 20 minut. Roztok byl zazátkován a ponechán míchat přes noc při teplotě místnosti. Potom byl koncentrován ve vakuu za získání nažloutie-bílé pevné látky. Zbytek byl rozetřen s ethyletherem (200 mL) a sušen pod vakuem, potom byl rozpuštěn v H2O (80 mL). Byla přidána 1 N HC1 (4 mL). Reakční směs se vyjasnila po 4 hodinách míchání a byla míchána přes noc při teplotě místnosti. Žluté olejové kapičky byly pozorovány v roztoku po 18 h. Sloučenina byla extrahována s EtOAc (4 x 200 mL); organické vrstvy byly sloučeny, promyty solankou (2 x 200 mL), sušeny nad Na2SO4 a koncentrovány. Zbytek byl podroben mžikové chromatografii s 19:1 hexanem/EtOAc a bylo získáno
3.27 g produktu (61c, 68%).
MS; 238.1 (M+l pro Ci3H2iNO2); olej; TLC: SiO2, Rf0.38 (CH2C12); Analýza (C13H2iNO2) (Vyp.) C: 70.85, H: 9.77, N: 5.90 (nalez) C: 70.65, H: 9.72, N: 5.84. IR (KBr, cm'1): 2929, 2236, 1736, 1 185. ‘H NMR (CDC13) δ 0.85 (t, 3H, J - 7.1 Hz), 1.19-1.55 (m, 10H), 1.71-1.74 (m, 2H), 2.08-2.10 (m, 2H), 2.59 (s, 2H), 4.16 (q, 2H, J = 7.1 Hz).
Krok iv. Syntéza czs-8-propyl-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-onu (61d): cí's-(l-Kyano-4-propyl-cyklohexyl)-octová kyselina, ethylester (61c, 8.27 g, 34.8 mmol), byl rozpuštěn v methanolu (90 mL), zpracován s triethylaminem a 10% Rh / 2% Pd/C, a třepán pod atmosférou H2 (50 psi) po 55 h. Reakční směs byla filtrována a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu promýváním s 5:1 hexanem/EtOAc za získání 6.41 g (61d, 94%) požadovaného produktu.
MS: 196.1 (M+l pro Ci2H2]NO); olej; TLC: SiO2, Rf 0.38 (hexan/EtOAc);
Analýza (C]2H2iNO) (Vyp.) C: 73.80, H: 10.84, N: 7.17; (nalez) C: 73.86, H:
10.76, N: 7.11. IR (KBr, cm’1): 3192, 2924, 1704, 1678. ]H NMR (CDC13) δ
0.83-1.17 (m, 5H), 1.18-1.39 (m, 7H), 1.61-1.65 (m, 2H), 1.71-1.74 (m, 2H)
2.11 (s, 2H), 3.16 (s, 2H), 5.85 (br, 1H).
Krok v: Syntéza z příkladu 61: (l-Aminomethyl-4-propyl-cykíohexyl)octová kyselina; hydrochloridová sůl:
8-Propyl-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-on (61d, 5.8 g, 29.75 mmol) byl zpracován s koncentrovanou HC1 (150 mL) a zahříván na 115 °C přes noc. Potom byla reakční směs ponechána ochladit na teplotu místnosti a byla pozorována sraženina. Ta byla filtrována za získání 3.47 g bílé pevné látky, a filtrát byl ochlazen a opětovně přefiltrován za získání celkově 6.24 g (99%) požadovaného produktu.
MS: 214.1 (M+l pro C12H23NO2); t.t. 142-144 °C; Analýza (Ci2H23NO2.HC1.0.86H2O) (Vyp.) C: 58.91, H: 9.83, N: 5.72; (nalez) C: 59.27, H: 9.60, N: 5.71. *H NMR (CD3OD) δ 0.86-0.90 (m, 3H), 0.97-1.41 (m, 10H), 1.61-1.75 (m, 4H), 2.37 (s, 2H), 3.13 (s, 2H). IR (KBr, cm’1) 2919, 1702, 1525, 1461, 1188.
PŘÍKLAD 62: ((3R, 5S)-3,5-Dimethyl-l-propylaminomethyl-cyklohexyl)octová kyselina; hydrochloridová sůl
((3R, 5S)-1 -Aminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl (59a, 0.50 g, 2.12 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (45 mL) a zpracována s 1.8 mL IN NaOH. Byl přidán propionaldehyd (0.5 mL, 3 ekv.) a reakční směs byla zpracována s PtO2 (0.2 g). Reakční směs potom byla třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 3 h. Reakční směs byla zfiltrována, byl přidán IN HC1 v etheru (5 mL) a reakční směs byla koncentrována ve vakuu . Zbytek byl rozpuštěn v horkém isopropanolu (100 mL) a filtrován. Filtrát byl
• · · • ♦ • · ·♦ ·· · * koncentrován a rekrystalizoval z horkého isopropanolu (4 mL), Et2O (225 mL), a hexanu (150 mL) za získání 200 mg (0.83 mmol, 39%) produktu.
MS: 242.1 (M+l pro Ci4H27NO2); IR (KBr, cm'1): 2952 (br), 1686, 1457, 1218.
Analýza (Ci4H27NO2'HCl-0.24H2O) (Vyp.) C: 59.60, H: 10.17, N: 4.96; (nalez) C: 59.68, H: 10.09, N: 4.64. lH NMR (CD3OD) δ 0.48-0.57 (m, 1H), 0.78-1.05 (m, 11H), 1.61-1.78 (m, 7H), 2.60 (s, 2H), 2.93-3.00 (m, 4H).
PŘÍKLAD 63: [(IR, 3R)-l-(Benzylamino-methyl)-3-methyl-cyklohexyl]octová kyselina, hydrochloridová sůl
HCI ((IR, 3R)-l-Aminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl (Příklad 1, 3.0 g, 13.5 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (80 mL) a zpracována s 1 N NaOH (14 mL, 1+ ekvivalenty). Byl přidán benzaldehyd (4.5 ml), následovaný 10% Pd/C (1.0 g), a reakčni směs byla třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 2,75 h. Reakčni směs byla filtrována, byl přidán 1 M HCI v etheru (20 mL) a roztok byl koncentrován ve vakuu. Potom byl zbytek rozpuštěn v horkém isopropanolu (100 mL), filtrován a koncentrován ve vakuu. Potom byl zbytek rozpuštěn v minimálním nezbytném množství horkého isopropanolu a rekrystalizoval z etheru. Pevné látky byly filtrovány a filtrát byl ochlazen přes noc za získání druhé dávky krystalů. Pevné látky byly spojeny za získání 35 g (36%) požadovaného produktu.
MS: 276.1 (M+l pro Ci7H25NO2); HRMS: (vyp) 276.1963 (nalez) 276.1962 (M+l pro Ci7H25NO2); t.t: 157-158 °C; IR (KBr, cm'1): 2932 (br), 1691, 1450, 1201; Analýza (C17H25NO2-HCl-0.24H2O) (Vyp.) C: 64.58, H: 8.44, N: 4.43; fn.qlř-ζΊ Γ- 64 S7 3+ R 44 N- 4 7R 'W NMR ίΓΠ,ίΊΓη X Π 77-1 69 ím 19H3
V---------- --j , , , . . J - — - - / >
2.42 (s, 2H), 3.21 (s, 2H), 4.25 (s, 2H), 7.43-7.52 (m, 5H).
··
PŘÍKLAD 64: {(IR, 3R)-l-[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-3-methylcyklohexyl}-octová kyselina; hydrochloridová sůl
[(IR, 3R)-1 -(Benzylamino-methyl)-3-methyl-cyklohexyl]-octová kyselina; hydrochloridová sůl (příklad 63, 1.02 g, 3.27 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (40 mL) a zpracována s 1 N NaOH (3.3 mL, 1+ ekv). Byl přidán formaldehyd (2.5 mL) následovaný PtO2 (0.1 g), a reakční směs byla třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 8 h. Reakční směs byla zfiltrována, byl přidán 1 M HC1 v etheru (10 mL) a roztok byl koncentrován ve vakuu. Potom byl zbytek rozpuštěn v horkém isopropanolu (100 mL), filtrován a koncentrován ve vakuu. Potom byl zbytek opětovně rozpuštěn v minimálním množství horkého isopropanolu, nezbytném, a rekrystalizoval z etheru a hexanu. Pevné látky byly spojeny za získání 0.704 g (2.16 mmol, 66%) požadovaného produktu.
MS: 290.1 (CJ8H27NO2); HRMS: 290.2128 (Ci8H27NO2); t.t: 204- 205 °C; IR (KBr, cm'1): 2926 (br), 1720, 1457, 1387, 1203; ’H NMR (CD3OD) δ 0.82-0.98 (m, 5H), 1.24-1.91 (m, 7H), 2.38-2.58 (m, 2H), 2.91 (d, 3H, J = 11.2 Hz), 3.433.54 (m, 2H), 4.33-4.49 (m, 2H), 7.50-7.56 (m, 5H).
PŘÍKLAD 65: ((IR, 3R)-3-Methyl-l-methylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl
{(IR, 3R)-1 -[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-3-methyl-cyklohexyl}-octová kyselina; hydrochloridová sůl (Příklad 64, 0.60 g, 1.84 mmol) byla rozpuštěna v ethanolu (50 mL), 20% Pd/C (0.1 g) a reakční směs byla třepána pod atmosférou H2 (50 psi) po 7 min. Reakční směs byla zfiltrována, byl přidán 1 M HC1 v etheru (5 mL) a roztok byl koncentrován ve vakuu. Potom byl zbytek ··«· ·· ·♦ ·· ·· ···· rozpuštěn v horkém isopropanolu (100 mL), filtrován a koncentrován ve vakuu. Potom byl zbytek rozpuštěn v minimálním nezbytném množství horkého isopropanolu a rekrystalizoval z etheru a hexanu. Krystaly byly za získání 0.15 g (35%) požadovahého produktu.
MS: 200.1 (M+l pro CnH2!NO2); HRMS: (vyp) 200.1650, (nalez) 200.1646 (M+l pro Ci!H21NO2); t.t. 160-161 °C; IR (KBr, cm’1): 2925 (br), 1719, 1457; Analýza (Ci]H2iN02-HC10.40 H2O) (Vyp.) C: 54.38, H: 9.46, N: 5.77; (nalez) C: 54.27, H: 9.36, N: 5.65. 'H NMR (CD3OD) δ 0.83-0.97 (m, 5H), 1.20-1.28 (m, 1H) 1.42-1.74 (m, 6H) 2.38 (s, 2H), 2.73 (s, 3H), 3.23 (s, 2H).
PŘÍKLAD 66: SHRNUTÍ
Použitím ex vivo modelu čerstvě rozpitvané krysí retiny byl zkoumán mechanismus, jímž jsou hladiny glutamátu v mozku udržovány v neurální tkáni v normálních mezích. Anaplerotická glutamátová syntéza může být důležitá pro doplnění glutamátu oxidovaného v glii po neurotransmisi. Body kontroly rychlosti v této de novo dráze byly identifikovány jako pyruvát-karboxylace a amino-transaminace s větvenými řetězci. Pro testování vzájemného vztahu mezi syntézou glutamátu a aktivitou pyruvát-karboxylásy byla měřena syntéza 14Cglutamátu plus ,4C-glutaminu z H14CO3 jako funkce media pyruvátu. Zvýšení pyruvátu z 0.2 na 5 mM zvýšilo syntézu 14C-aminokyseliny o 66 ± 15%. Specifická radioaktivita glutaminu vzhledem k témuž HI4CO3 po 20 minutách inkubace indikovala, že ?30% glutaminu v retině je odvozeno od fixace bikarbonátu. Pro testování závislosti syntézy glutamátu na dostupnosti větvených aminokyselin (BCAA) jako zdroje dusíku byl měřen účinek inhibování neuronální větvené aminotransferasy (BCATc). Gabapentin (GBP) (1 mM), selektivní inhibitor BCATc v neuronech, inhiboval syntézu l4C-glutamátu plus 14C-glutaminu z H14CO3 o 31% bez zpomalení H14CO3 inkorporace do cyklických meziproduktů mléčné a citrónové kyseliny. Inhibice de novo glutamátové syntézy byla obrácena přidáním 0.6 mM BCAA. Údaje indikují, že se pyruvát-karboxyiasa a větvená aminotransferasa podílejí na kontrole rychlosti « · • · • ·· • 9 • · ·♦ syntézy byla obrácena přidáním 0.6 mM BCAA. Údaje indikují, že se pyruvátkarboxylasa a větvená aminotransferasa podílejí na kontrole rychlosti de novo glutamátové syntézy v retině, a že de novo glutamátová syntéza je kvantitativně důležitá pro udržování hladiny retinalního glutamátu.
Metody Experimentální zvířata
Pro všechny experimenty byly použity Sprague Dawley krysy (200-400g). Krysy byly umístěny pod 12hodinovým světlo/tma cyklem, a krmeny a napájeny ad libidum. Po anestezii krys nembutalem (IP) byly oči vyloupnuty a retiny rozřezány v ledově chladném pufru.
COi fixace
Čerstvě izolované poloviční retiny byly preinkubovány při 37 °C po 3 minuty v pufru A (pH 7,4) obsahujícím 118 mM NaCl, 4,7 mM KC1, 2,5 mM CaCl, 1,2 mM KH2PO4, 1,17 mM MgSO4, 20 mM HEPES, 5 mM glukosy, 0,05 mM NH4CI a 25 mM NaH14CO3. Pyruvát (buď 0,2 či 5mM) byl také do pufru začleněn. 1 ml pufru stejně jako plynná fáze ve 20ml ampulích byly vyváženy 95% O2, 5% CO2. Inkubace byly iniciovány přidáním 10 mCi/ml H14CO3. Potom byly nádobky bezprostředně uzavřeny před atmosférou. Většina inkubací probíhala po 20 minut, ačkoliv v některých předchozích sudiích se doby měnily od 10-60 minut. Reakce byla zastaveny odebráním polovičních retin z pufru a jejich vložením do 2% perchlorové kyseliny. Pufr byl samostatně okyselen kyselinou perchlorovou (finální koncentrace 2%) a nezreagovaný 14CO2 byl ponechán, aby se uvolnil z okyselených vzorků.
Celkové množství produktu (netěkavé metabolity uhlíku 14) bylo stanoveno měřením radioaktivity v alikvotnich podílech média a vzorcích tkáně. Metabolity v extraktech byly separovány Dowex-1 acetátovou chromatografii, jak dříve popsali: Williamson, J.R., a Corkey, B. (1969) „Methods in Enzymology“, Vol. 13, ed. Lowenstein, J.M. (Academie Press) str. 434-513, a • · kvantifikovány scintilačním čítačem. Ve většině případů je hodnota individuálního metabolitu uhlíku 14 uvedena jako suma radioaktivity v médiu plus tkáňových extraktech. Kompletní kvantifikaci obsahů l4C-metabolitu v obou, retině a médiu, lze nalézt dále v tabulkách I a II.
Data neznázorněná ve výsledcích a diskusní části byla shromážděna v průběhu hodnocení vlivu pyruvátu na fixaci H14CĎ3 v retině. Obrázek 2 ukazuje pouze vliv pyruvátu na sumu glutamátu plus glutaminu a sumu pyruvátu plus laktátu. Tabulka I uvádí hodnoty pro všechny metabolity, které byly označeny H14CO3 a jejich rozdělení.
Obdobně další data, neuvedená ve výsledcích a diskusní části, byla shromážděna při hodnocení vlivu gabapentinu. V Tabulce II jsou rozšířena i data znázorněná na Obr. 4, a jsou poskytnuty hodnoty pro všechny metabolity označené H14CO3 a jejich rozdělení
Tabulka I
Podmínky rozdělení Gin Glu Asp Lakt TCA cyklus Celkem
Kontrol. (0.2 Pyr) in 0.59 ± 0.05 1.47 ±0.29 0.85 ± 0.06 0.16 ±0.06 1.02 ± 0.26 4.08 ±0.41
out 0.61 ±0.08 0.04 ±0.01 0.08 ±0.01 0.55 ±0.03 0 1.19 ±0.13
sum 1.20 ±0.09 1.51 ±0.29 0.93 ±0.08 0.71 ±0.06 1.02 ±0.26 5.27 ± 0.45
+5.0 Pyr in 0.91 ±0.13 2.67 ± 0.29 1.08 ±0.12 0.29 ±0.04 2.31 ±0.13 7.26 ±0.61
out 0.96 ±0.14 0.06 ±0.01 0.08 ±0.01 1.18 ±0.11 0 2.24 ±0.21
Sluli i 07 1.0/ ±0.23 O ΊΊ z-,. / ± 0.28 1 1 & X . Λ V ±0.12 1.47 ±0.13 ±<M3 9.50 ±0.74
Tabulka Π
Podmiň ky Rozdělení Gin Glu Asp Lakt TCA cyklus Celkem
Kontrol in 0.440 ± 0.032 1.477 ± 0.097 0.634 ±0.038 0.080 ± 0.008 1.096 ±0.105 3.715 ± 0.266
out 0.551 ± 0.036 0.008 ±0.001 0.070 ± 0.003 0.478 ±0.030 0 1.117 ± 0.075
sum 0.991 ±0.054 1.485 ± 0.096 0.704 ± 0.040 0.558 ± 0.031 1.096 ±0.105 4.832 ±0.303
+GBP in 0.389 ± 0.026 1.324 ± 0.025 0.549 ±0.019 0.089 ± 0.006 1.514 ±0.103 3.902 ± 0.122
out 0.545 ± 0.024 0.008 ± 0.002 0.035 ± 0.003 0.516 ±0.030 0 1.066 ± 0.028
sum 0.934 ±0.036 1.332 ± 0.025 0.584 ± 0.022 0.605 ±0.028 1.514 ±0.103 4.968 ± 0.028
+GBP +BCAA in 0.480 ±0.011 1.549 ± 0.070 0.609 ±0.021 0.086 ±0.008 1.220 ± 0.116 3.989 ± 0.043
out 0.806 ±0.086 0.009 ± 0.001 0.093 ± 0.008 0.458 ± 0.048 0 1.322 ±0.076
sum 1.286 ±0.082 1.558 ± 0.070 0.702 ±0.016 0.5445 ± 0.040 1.220 ±0.116 5.311 ± 0.119
Chromatografický postup použitý v tomto příkladu separuje glutamin, glutamát, aspartát a mléčnou kyselinu. Meziprodukty cyklu kyseliny citrónové zůstávají na koloně Dowex a jsou stanoveny jako rozdíl mezi celkovým počtem ve vzorku a počtem, které bylo vyhodnoceno. Průkaznost platnosti této metody byla zveřejněna dříve. Před podrobením vzorků chromatografii byla 14Cpyrohroznová kyselina ve vzorcích konvertována stechiometricky na laktát zpracováním vzorků s přebytkem NADH a laktát dehydrogenasou. Proto jediný zaznamenaný pík laktátu obsahuje všechny uhlíky 14 v obou, laktátu a pyruvátu. Pro stanovení specifické aktivity glutamátu a glutaminu ve vzorcích retiny bylo hmotnostní množství glutamátu měřeno fluorometricky použitím standardního enzymatického postupu: Patel, M.S. (1989) v „Neuromethods: Carbohydrate and Energy Metabolism, Vol II, ed. Boulton, A.A and Baker G.D. (The Humana ťress, lne.) str 309-340“. Elmotnostní množství glutaminu bylo měřeno po chromatografické separaci z glutamátu, následované iuminometrickou determinací, jak byla popsána dříve. ATP a kreatin fosfát byly měřeny fluorometricky použitím enzymatické zkoušky.
Μι »« r· «v ·* ·· « · « « · · · *··« • ·♦ ♦ · · ·* ·· ·
Retinalní protein byl stanoven použitím DC proteinové zkoušky (Bio-Rad, Richmond, CA, USA). Každá polovina retiny obsahovala kolem 0,4 mg proteinu.
Test pyruvát karboxylasy
Aktivita pyruvát karboxylasy byla testována v čerstvých vzorcích celého mozku a vyříznutých retin. Byla použita metoda popsaná Patel Patel, M.S. (1989) v Neuromelhods: Carbohydrate and Energy Metabolism, Vol II, ed. Boulton, A.A and Baker G.D. (The Humana Press, lne.) str 309-340, a zahrnovala měření 14CO2 fixace za optimálních podmínek v sonifikované tkáni.
Western Blot
SDS-PAGE byl proveden, jak popsal Patel, M.S. (1989) v Neuromethods: Carbohydrate and Energy Metabolism, Vol II, ed. Boulton, A.A and Baker G.D. (The Humana Press, lne.) str 309-340, použitím 10% gelů. Pro immunoblotting byl protein přenesen na Immobilon P membrány. Membrány byly blokovány 5% BSA a inkubovány s imunoafinitně purifikovanou králičí proti-krysí BCATc peptidovou protilátkou (1:1000 zředění) nebo imunoafinitně purifikovanou králičí anti-humánní BCATm peptidovou protilátkou (1:1000 zředění). Vazby imunoreaktivního proteinu byly vizualizovány použitím ECL systému podle výrobních instrukcí (Amersham, Arlington Heights, IL, USA).
Výpočty a statistiky
V textu a na obrázcích jsou uvedena data stanovením dpm/mg v konkrétním metabolitu a rozdělením specifickou aktivitou média HCO3. Proto jsou všechny hodnoty uvedeny jako nmoly H!4CO3/mg proteinu pro každý daný metabolit.
100 «· ·· •· * V • ·· * *· · • ·· «·«· ·· ·♦ ·· *· · •· •· · •· * «· ····
Výsledky jsou uvedeny jako střední ± standardní chyba průměru. Statistická významnost byla posouzena párovým t-testem a p<0.05. Počty nezávislých stanovení jsou uvedeny na legendách k obrázku a tabulkám.
VÝSLEDKY
Hladiny pyruvátu karboxylasy jsou podobné v retině a celém mozku
Patel demonstroval, že pyruvát karboxylasa je největším CO2 fixačním enzymem v mozku dospělých hlodavců. Pro posouzení, zda to může být rovněž pravdivé v retině, je aktivita pyruvát karboxylasy při 37 °C v ultrazvuku z neokortexu porovnávána s toutéž z retiny. Hladiny z neokortexu (2,9 ± 0,1 nmol H14CO3 fixovaných /min/mg) byly podobné těm, které byly nalezeny v sonifikované retinální tkáni (3,4 ± 0,4 nmol H14CO3 fixovaných/min/mg), což indikuje, že pyruvát karboxylasa je právě tak aktivní v retině jako v celém mozku.
Rychlosti výskytu 14CO2 fixace a 14C-glutamátu jsou funkcí hladin pyruvátu v retině
V předchozích experimentech byly retiny inkubovány s 0,2 mM pyruvátem, jak je popsáno v metodách pro 10, 20, 40 a óOminutové periody. Byl monitorován celkový i4CO2 stejně jako ATP a hladiny kreatinfosfátu. Hladiny ATP a kreatinfosfátu zůstávaly konstantní jako funkce času a demonstrovaly, že okysličení a regulace pH jsou navzájem adekvátní. Celková CO2 fixace (5,50 ± 0,14 nmol/mg proteinu ) vrcholila mezi 20 a 40 minutami, ale byla již 76 % z maxima (4,2 ± 0,1 nmol/mg) při 10 minutách. Jelikož hladiny ATP (20 ± 0,2 nmol/mg) a kreatinfosfátu (16 + 1,1 nmol/mg) byly vysoké a neměnily se s časem, tento pík indikoval, že rychlost CO2 fixace byla konstantní, ale že
spíše ustálený stav hladiny specifické radioaktivity glutamátu a glutaminu do 20 minut.
101 • * ·♦ · ·
Pro posouzení regulace karboxylace pyruvátu proti syntéze glutamátu byly retiny inkubovány s buď 0,2 nebo 0,5 mM pyruvátem v médiu, a analyzovány intracelulární a extracelulární metabolity. Celkově ’4CO2 fixovaný ve 20 minutách za přítomnosti 0,2 mM pyruvátu byl 5,27 ± 0,45 nmol H14CO3/mg, přičemž ten fixovaný za přítomnosti 5 mM pyruvátu byl 9,50 ± 0,74 nmol H14CO3/mg. Obrázek 2 ukazuje, že zvýšení neznačeného pyruvátu z 0,2 na 5 mM zvýší sumu 14C-glutamátu plus 14C-glutaminu (z 1,74 ± 0,19 na 2,90 ± 0,31 nmol/mg, p<0.005). Obrázek 2 také ukazuje, že vyšší inkubace pyruvátu zvýší hodnoty 14C-laktátu plus 14C-pyruvátu. Proto v ustáleném stavu zvýšení koncentrace pyruvátu z 0,2 na 5 mM zvýšilo inkorporaci H14CO3 do glutamátu a glutaminu o 66%, zatímco zvýšení pyruvátu zvýšilo H14CO3 inkorporaci do pyruvátu a laktátu na 111 %. Uhlík 14 v cyklu pyruvátu a laktátu reprezentuje gliovou recyklaci přes pyruvát karboxylasu, jablečný enzym a fosfoenolpyruvát karboxykinasu, a poprvé demonstruje aktivní dekarboxylaci cyklu kyseliny citrónové v intaktní neurální tkáni.
Tato data dokládají, že zvýšení toku přes pyruvát karboxylasu indukuje zvýšení v de novo syntéze retinalního glutamátu. O něco větší zvýšení v recyklu pyruvátu probíhá současně.
Větší frakce z celkové glutaminové syntézy je odvozena z karboxylace pyruvátu
Důležitost pyruvátové karboxylace jako zdroje pro doplnění glutamátu uvolněného ze zakončení retinalního nervu během neuronálni transmise byla zkoumána na základě stanovení specifické radioaktivity glutaminu v retinální tkáni inkubované s médiem obsahujícím H14CO3. Fixovaný podíl z glutaminové syntézy v retině se odvozuje z neoznačeného glutamátu uvolněného neurony a spojeného Mullerovou glií. Zbytek vychází z gliového a-ketoglutarátu syntetizovaného anapleroticky z pyruvátu a 14CO2. Proto specifická radioaktivita glutaminu vzhledem ke specifické aktivitě H14CO3 poskytuje minimální hodnotu podílu glutaminu odvozeného z anaplerosy. Produktem pyruvát-karboxylasy v glii je [l,4-14C]-oxaloacetát. Obě 1 a 4 pozice jsou označeny, protože uhlík 14
102
• « · * původně zabudovaný na 4-C pozici oxaloacetátu je uspořádán nahodile mezi 1. a 4. pozicí ustavením rovnováhy oxalacetátu se symetrickým fumarátem. Označený oxaloacetát kondenzuje s pyruvátem za vzniku citrátu, který je potom isomerizován na isocitrát. [ 1,4-14C]-isocitrát je oxidován a dekarboxylován na [5- 14C] α-ketoglutarát isocitrát-dehydrogenasou. Proto má a-ketoglutarát syntetizovaný anapleroticky přibližně poloviční specifickou radioaktivitu z původního substrátu H14CO3, v závislosti na stupni nahodilosti značení v oxaloacetátu. To rovněž platí pro glutamin syntetizovaný z [5-14C] aketoglutarátu.
Specifická aktivita glutaminu byla měřena v extraktech retinální tkáně, inkubovaných s 0,2 mM pyruvátem a H14CO3 po 10, 20, 40 a 60 minut. Komentována je pouze tkáň glutaminu (nikoliv média). Specifická radioaktivita glutaminu v tkáni byla konstantní mezi 10 a 60 minutami. Po 20 minutách inkubace bylo hmotnostní množství glutaminu v tkáni 4.50 ±0.44 nmol/mg, a jeho specifická radioaktivita byla 1970 ±115 dpm/nmol nebo 0.158 ± 0.009 dpm/nmol specifické aktivity hydrogenuhličitanu. To indikuje, že kolem 32 % glutaminu bylo produkováno anaplerosou a pyruvát-karboxylasou.
Specifická radioaktivita retinálního glutamátu (269 ± 8 dpm/nmol) byla nižší, než tato u glutaminu, a také konstantní jako funkce času od 10-60 min. Byla pouze 14% ze specifické aktivity glutaminu. To předpokládá, že metabolická přeměna glutamátu v neuronech je rychlá vzhledem k anaplerotické syntéze. Nicméně, jelikož neuronální glutamátová přeměna nemůže doplnit ztrátu na uhlíkovém skeletu glutamátu v průběhu neurotransmise, je anaplerotická dráha prvotně důležitá při udržování hladin neuronáního glutamátu. Předložená data jasně ukazují, že anaplerotická dráha poskytuje větší (kolem 32%) podíl glutaminu požadovaného pro doplnění glutamátu.
Syntéza retinálního glutamátu a glutaminu je částečně závislá ne transaminaci aminokyselin s větvenými řetězci
103
Nedávné studie syntézy glutamátu v kultivovaných astrocytech předpokládaly, že konverze α-ketoglutarátu na glutamát mohou působit jako krok regulující rychlost anaplerotické syntézy glutamátu. Několik skupin uvádělo, že α-aminoskupina glutamátu nemůže být doplněna jako amonium a musí být tudíž doplněna transaminací α-ketoglutarátu s jinou aminokyselinou; Kanamori, K., Ross, B.D., a Kondrat, R.W. (1998) J. Neurochem. 70, 13041315, Laemmli, U.K. (1970) Nátuře 227, 680-885, včetně naší vlastní Haberg,
A., Qu, H., Bakken, I.J., Sande, L.M., White, L.R., Haraldseth, O., Unsgard, G., Assley, J., Sonnewald, U. (1998) Dev. Neurosci. 20, 389-398. Aminokyseliny s větvenými řetězci jsou pravděpodobně kontributory dusíku, jelikož mohou účinně přecházet přes bariéry krev-mozek a krev-retinální bariéry. Hutson a spolupracovníci navrhovali, že dusíkový přesun mezi neurony a glií, který zahrnuje větvené aminokyseliny a dva BCAT isoenzymy, jeden v neuronálním cytosolu (BCATc) a jeden v mitochondrii glie (BCATm), může poskytnout také potřebný dusík: Hutson, S.M., Berkich, D., Down, P., Xu, B., Aschner, M., a LaNoue, K.F. (1998/ J. Neurochem. 71, 863-874. Podle tohoto hypotetického přesunování, neuronální BCATc usnadňuje gliovou BCATm konverzi aketoglutarátu na glutamát poskytnutím BCAA regenerované v neuronech (Obr. O·
Jako první krok ke zkoumání úlohy isoenzymů BCAT v de novo glutamátové syntéze v retině byl použit immunoblotting s BCATm a BCATc specifickými protilátkami ke stanovení, zda jsou BCAT isoenzymy exprimovány v retině krys. Jak je znázorněno na obrázku 3, oba BCATc a BCATm jsou exprimovány v retině v množstvích, která jsou srovnatelná s hodnotami nalezenými v homogenátech z celého mozku. Čerstvě preparovaná krysí retina je vhodný intaktní neurální systém pro testování systému přesunování dusíku mezi neurony a glií.
Leucinový analog gabapentin (GBP) je neuroaktivní léčivo, které inhibuje BCATc, ale ne BCATm: Su, T.-Z., Lunney, E., Campbell, G., Oxender, D.L. (1995) J. Neurochem. 64, 2125-2131. Bylo potvrzeno, že GBP inhibuje syntézu leucinu v čerstvě preparovaných krysích retinách (data nejsou uvedena). Potom * * * « * · · * · · « *·« · * «* · · · «
104 byl měřen vliv GBP na syntézu 14C-glutamátu plus 14C-glutaminu z HI4CO3 v ex vivú krysích retinách. Jak je znázorněno na Obr. 4, 1 mM GBP redukoval vznik 14C-glutamátu plus 14C-glutaminu na 71 % kontrolních hodnot (2,26 ± 0,05 proti 3,18 ± 0.12 nmol/mg, p<0.001). Přidání 200 μΜ leucinu, isoleucinu a valinu zvrátilo inhibici na 89 % kontrolního vzorku (2,84 ±1,15 nmol/mg, p<0,01 versus GBP samotný). Nebyl pozorován žádný vliv GBP ani na ATP ani kreatinfosfát indikující, že GBP nenarušoval retinální bioenergetické procesy. Malé zvýšení zabudování uhlíku 14 do cyklů meziproduktů laktátu a kyseliny citrónové (od 1,93 ± ,06 do 2,12 ± 0,13) nebylo vzhledem k přítomnosti 1 mM GBP podstatné. Inkorporace značení do všech metabolitů je znázorněna v tabulce II.
Prováděly se další experimenty pro prozkoumání vlastností dávky/odezvy GBP. Čerstvě preparované retiny byly inkubovány po 20 minut v pufru A obsahujícím buď 0, 0,2, 1 nebo 5 mM GBP. Jak je znázorněno na obr.5, zvýšení koncentrace GBP nad 1 mM nezvýšilo výrazně rozsah jeho inhibice syntézy 14Cglutamátu plus 14C-glutaminu z H14CO3. GBP opět neovlivňuje tvorbu meziproduktů v cyklu kyseliny citrónové, laktátu a pyruvátu (Obr. 5). Tím je podpořen názor, že místem GBP inhibice glytamátové syntézy je BCAT zprostředkovaná konverze α-ketoglutarátu na glutamát.
Diskuse
Popsané studie hodnotily mechanismus udržování hladin CNS glutamátu. Předchozí studie ukazovaly, že glutaminová syntetasa je požadována v retinách a hippokampálních řezech, aby se zachovaly hladiny neuronálního glutamátu: Su, T.-Z., Lunney, E., Campbell, G., Oxender, D.L. (1995) J. Neurochem, 64, 2125-2131. Imunocytochemická měření indikují, že 90 % nebo více z retinálního a celkově mozkového glutamátu je neuronální, a že inhibice glutaminové syntetasy po 90 minutách vyčerpá zdroj neuronálního glutamátu na zanedbatelné hodnoty: Ottersen, O.P., Zhang, N., a Walberg, F. (1992) Neurosci. 46, 519-534. Toto demonstruje, že glutaminová syntetasa je požadována pro udržení neuronálního glutamátu. Ačkoliv glutamát může být
105 • · · · · «
syntetizován v neuronech z α-ketoglutarátu, nedostatek pyruvát-karboxylasy
ripm ry ketoglutarátu, a takto předchází syntéze čistého glutamátu v neuronech kromě giutaminu přes glutaminasu.
V tomto příkladu byly zdroje a kontrolní vzorky glutaminové syntézy zkoumány prostřednictvím inkubace preparovaných retin s HUCO3 a měřením vzhledu a specifické radioaktivity 14C-glutaminu a 14C-glutamátu. Více !4Cglutaminu je syntetizováno za přítomnosti 5 mM pyruvátu, než za přítomnosti 0,2 mM. To indikuje, že aktivita pyruvát-karboxylasy ovlivňuje rychlosti syntézy giutaminu. Nedostatek citlivosti tohoto kontrolního vzorkuje doložen zjištěním, že pokud je pyruvát zvýšen z 0,2 mM na 5 nM, hodnota zvýšení toku pyruvát-karboxylasy (80,3%) není přímo převedena na odpovídající zvýšení 14Cglutamátu plus I4C-glutaminu (69,0%). Flexibilita kontrolního vzorkuje daná možností dekarboxylace cyklu citrónové kyseliny a recyklováním pyruvátu. Odvislost pyruvátu od celkové HI4CO3 fixace v retinální tkáni byla podobná, jako bylo pozorováno v kultivovaných isolovaných astrocytech: Gamberino, W.C., Berkich, D.A., Lynch, C.J., Xu, B., a LaNoue, K.F (1997) J. Neurochem. 69, 2312-2325. Nicméně v astrocytech, které nemají žádnou cestu k regeneraci endogenní BCAA použité k transaminaci α-ketoglutarátu, nebyla pyruvátem indukovaná zvýšení CO2 fixace převedena na zvýšení hodnou 14C-glutamátu a 14C-glutaminu. Namísto toho se uhlík 14 akumuloval samostatně v meziproduktech cyklu kyseliny citrónové a v „recyklovaném“ pyruvátu.
V retinálních studiích zde uvedených byla specifická radioaktivita giutaminu v ustáleném stavu 0,158 ze specifické aktivity hydrogenuhličitanu. Protože přibližně polovina z 14C zabudovaného do oxalacetátu je zadržena v aketoglutarátu, výsledky ukazují, že přibližně 32 % z giutaminu je odvozeno z H14CO3. To je první přímý odhad přínosu anaplerosy na glutaminovou syntézu v neuronální tkáni. Předchozí odhady byly nepřímé a zahrnovaly isotopomerní analýzu NMR spektra s následnou infusí 13C glukosy (3-5, 1 1-13) na intaktní mozky. Stanovení podílu pyruvátové karboxylace na glutaminovou syntézu použitím těchto NMR metod bylo nižší než tato současná, a v rozmezí od méně
106 tt · · než 1 % (3) do 5-10 % (4,5) do 20-25 %: Shank, R.P., Bennet, G.S., Freytag,
S. O., a Campbell, G.L. (1985) Broin Res 329. 364-367, Griffen, J.L., Rae, C., Radda, G.K., a Matthews, P.M. (1999) Biochim. Biophys. Ada 1450, 297-307, v závislosti zejména na výchozích předpokladech použitých matematických modelů. Současné výsledky naznačují, že karboxylace gliového pyruvátu a konverze meziproduktů cyklu citrónové kyseliny na glutamát a glutamin jsou asi kvantitiativně důležité pro retinální funkci a pravděpodobně pro funkci celého mozku.
Pozorování, že GBP zpomaluje konverzi meziproduktů cyklu kyseliny citrónové na glutamin a glutamát silně naznačuje, že neuronální syntéza BCAA prostřednictvím BCATc je nezbytná pro optimální rychlosti aminace aketoglutarátu na glutamát, Přijatelné schéma pro jejich zapojení v tomto procesu je znázorněno na Obr.l.
Výsledky, které dokládají inhibici syntézy I4C-glutamátu a 1‘'C-glutaminu z HI4CC>3 prostřednictvím GBP a zvrat inhibice prostřednictvím BCAA, jsou konzistentní s popsaným kyvadlovým přesunováním. Hypotéza rovněž umožňuje možné vysvětlení anti-epileptického působení GBP: Taylor, C.P., Gee, N.S., Su,
T. Z., Kocsis, J.D., Welty, D.F., Brown, J.P., Dooley, D.J., Boden, P., Singh, L. (1998) Epilepsy Res. 29, 233-249. Skutečně, snížená glutamátová syntéza je běžným účinkem GBP a anti-epileptických uhlíkatých anhydrasových inhibitorů: Házen, S.A., Waheed, A., Sly, W.S., LaNoue, K.F., Lynch, C.J. (1997) Dev. Neurosci. 19, 162-171. Také onemocnění „ Maple Syrup Urine Disease“, dědičné obtíže způsobené mutací genu pro dehydrogenasu ketokyseliny s větveným řetězcem, pokud je neléčené, indukuje u pacientů vysoké sérum BCAA a následně neurologické abnormality: Chuang, D.I. a Shih, V.E. (1995) v The Metabolic Basis of Inherited Disease, eds. Schriver, C.R., Beaudet, A.L., Sly, S., a Vaile, D. (McGraw-Hill) str. 1239-1277, které mohou být vztaženy na abnormální regulaci glutamátové syntézy. Konečně, implifikace kyvadlového přesunování dusíku v průběhu syntézy glutamátu musí být studována dále ve světle působení GBP na léčení neuropatické bolesti: Ottersen, O.P., Zhang, N., a Walberg, F. (1992) Neurosci. 46, 519-534 a neurodegenerace, Chuang, D.I. a
107
Shih, V.E. (1995) v The Metabolic Basis of Inherited Disease, eds. Schriver,
C' 1? R o i ί rí o t Δ T Q 1 v a Vaile, D. (McGraw-Hill) sir. 1239-1277.
Rothsetin, J.D. a Kunci, R.W. (1995) J. Neurochem. 65, 643-651.
PŘÍKLAD 67
Příprava enzymu:
Zmražené krysí mozky byly rozmraženy na ledu a rozsekány na jemné kousky. Ke každému mozku bylo přidáno 5 ml isotonického pufru [225 mM mannitolu, 75 mM sacharosy, 5 mM MOPS (pH 7,1), 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 1 mM DTT obsahujícího leupeptin, pepstaťin a PMSF]. Vzorky byly homogenizovány v Potterově homogenizeru (B. Bran Biotech International) při 500 ot./min. pro deset zdvihů, následovalo dalších deset zdvihů při 800 ot./min. Homogenáty byly odstředěny na Beckmanově J2-M1 odstředivce s rotorem JA20 při 19 000 ot./min po dobu 1 hodiny. Supernatant byl dialyzován s alepoň třemi změnami dialyzačního pufru (225 mM mannitolu, 75 mM sacharosy, 5 mM MOPS pH 7.1, lm M EDTA, 1 mM EGTA, a 1 mM DTT) po 24 hodiny. Získaný enzym byl uložen při -80 °C pro další testy.
Zkouška BCAT:
Reakce byla prováděna v 1,5 ml Eppendorfových zkumavkách v objemu 100 μΐ obsahujících 50 mM Tris-HCl (pH 8,3), 25 μΜ [’4C] L-leucinu, 10 mM
2-oxoglutarátu, 15 μΜ pyridoxal-fosfátu, 1 mM DTT a enzym. Roztoky pro reakční směsi byly připraveny v 10-násobných koncentracích. Po 10 min inkubace při teplotě místnosti (22 °C), byla reakce zastavena přidáním 100 μΐ 1 5 mM p-nitrofenyl-hydrazinu ve 2 M HC1. Po několika minutách byl přidán 1 ml scintilační tekutiny na bázi toluenu (4,5 g PPO a 0,5 g bis-MSB v 1 litru toluenu), zkumavka byla zakryta víčkem a promíchávána Vortex mixerem. Potom byly zkumavky odstředěny při 13 500 ot/min (Eppendorfova centrifuga 54150) po 10 min Do scintilačních ampulek bylo vloženo 600 μΐ organické vrstvy z každé zkumavky, následovalo přidání 10 ml scintilačního kokteilu pro čítání.
108
Příklad č. rBCATc IC50 (uM)
1 146
1 1 ΊΑ
3 1660
4 2515
5 2934
6 2620
7 2165
8 74
9 120
10 121
11 1387
12 1490
13 >10,000
14 8592
15 82
16 1319
17 >10,000
18 —
19 —
20 469
21 169
22 389
23 2121
24 942
25 170
26 8592
27 1553
28 181
29 391
30 2250
31 908
32 243
33 1018
34 3218
35 1768
36 —
37 1193
38 2618
39 933
40 3800
41 363
42 669
43 2079
44 2728
45 1331
46 1129
47 15580
48 8530
49 84
50 842
51 >10,000
52 2516
53 3340
54 217
55 9242
109 β · • v
56 —
57 —
58 i 79
59 3370
60 11530
61 114
62 4216
63 —
64 —
65 ...
110

Claims (14)

  1. PATENTOVÉ
    NÁROKY
    1, Sloučenina vzorce IV
    R1-R4 jsou vodík nebo alkyl;
    X je NR5 nebo O;
    R5 je vodík nebo alkyl,
    R6 is vodík, alkyl, benzyl, alkanoyl, alkoxyalkanoyl, arylalkyl, alkoxy, cykloalkyl, allyl, alkylcykloalkyl, alkoxy, cykloalkyl, alkylcykloalkyl, trisubstituovaný halogenalkyl;a kde R1-R4 jsou každý vodík, R^ není vodík nebo methyl;
    nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, ester, proléčivo nebo amid.
  2. 2. Sloučenina podle nároku 1, kde R2 a R4 jsou vodík a Ri a R3 jsou alkyl; R2 a R4 jsou vodík a R] a R3 jsou methyl; R1-R4 jsou vodík; R] je alkyl a R2R4 jsou vodík; R( je methyl a R2-R4 jsou vodík; R5 je vodík; X je NR6; X je O; Ró je alkyl; RÉ je benzyl; R6 je acetyl; RÉ je fenylalkyl; R6 je cykloalkyl; R6 je trifluoralkyl; Rfi je alkylcykloalkyl; R<, je alkoxy; a R6 je allyl.
  3. 3. Sloučenina podle nároku 1, kde R2 a R4 jsou vodík a R] a R3 jsou methyl; Ri-R4 jsou vodík; R; je methyl a R2-R4 jsou vodík; R5 je vodík; X je ··
    111
    NRó; Rů je alkyl; R^ je benzyl; R$ je acetyl; R^ je fenylalkyl; Ré je cykloalkyl;
    R í ie trifhinralkvl - R·· ip alkvlrvUnalkvl R- ip alVnw a R, Íp allvl v J · ’ ? - - U J - J - ’ ,--------J - 7 - - V J *“ J 7 — - -VJ J - j -
  4. 4. Sloučenina podle nároku 1, kde R2 a R4 jsou vodík a Rj a R3 jsou methyl; R]-R4 jsou vodík.
  5. 5. Sloučenina podle nároku 1 a zvolená ze skupiny sestávající z následujících: (1 -Allylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
    (1 -Prop-2-yny lamino methyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
    {1-((2,2,2-Tri fluoro-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina;
    {1-((3,3, 3-Trifluoro-propylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina; 1α,3β,5β- (1-Allylaminomethy 1-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
    1α,3β,5β-(3,5-Dimethyl-1 -prop-2-ynylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
    1 α,3β,5β-{ 3,5-Dimethyl-1 -[(2,2,2-trifluoro-ethy lamino)-methyl]-cyklohexyl} octová kyselina;
    1 α,3β,5β-{ 3,5-Dimethyl-1-[(3,3,3-trifluoro-propylamino)-methyl]cyklohexyl}-octová kyselina;
    trans-((lR,3R)-1 -Allylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)-octová kyselina; trans-((l R,3R)-3-Methyl -1 -prop-2-ynylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina;
    trans-{(l R, 3 R)-3-Methyl-1-((2,2,2-tri Huoro-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
    trans-{(l R,3R)-3-Methyl-1 -((3,3,3 - trifluoro-propylamino)-methyl ]cyklohexyl}-octová kyselina;
    trans-{(1 R,3R)-3-Methyl-l -[(4,4,4-trifluoro-butylamino)-methyl] -cyklohexyl} octová kyselina;
    1α,3 β, 5 β- {3,5-Dimethyl-1 - [(4,4,4- tri fluor o-buty lamino )-methyl]- cyklohexyl} octová kyselina;
    1α,3β,5β-{ l-[(Cyklopropylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina;
    *· ** 4« ·· 4« ·· ·««· » · * 4 · · » ♦ 4· ♦ 4 »·· · · Λ
    112 • · · · · · · ·« »··♦ · ·* 4· «Α *··φ tran s-{(1 R,3R)-l-[(Cyklopropylmethyl-amino)-methyl]-3-methyl-cyklohexyl}+ <Λ1> ή b 17 η α 1 1 ΤΛ <1
    U V I V ' μ. x\jovijai«) trans-((1 R,3R)-3-Methyl -1 - methylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina; trans-((lR,3R)-l -Ethylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina; trans-((lR,3R)-3-Methyl-l-propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina; trans-((lR,3R)-l-Butylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyI)- octová kyselina; trans-((lR,3R)-l-Hydroxymethy 1-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina; 1α,3β,5β-{ l-[(Hydroxymethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina;
    1α,3β,5β-(1 -Aminomethyl-3,5-diethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
    1α,3β,5β-(3,5-Dimethyl-1 -propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    la,3p,5p-(l-Ethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    lot,3β,5β-(1 -Benzylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1α,3β,5β-(1 -Dimethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1 a, 3 β,5 β-(1 -Butylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina; hydrochloridová sůl;
    1α,3β,5β-{ 1 - [(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl)octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1 a,3β,5β-(.3,5-Dimethyl -1 -methylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    la.,3p,5p-[l-(Acetylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina;
    1 α,3β,5β-[1 -(Isobuty lamino-methyl)-3,5-dimethyl -cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1 α.,3 β.5 B-[3,5-Dimethyl-l -ífenethylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1α,3β,5 β - {3,5-Dimethyl-1- [(3-fenyl-propyl amino)-methyl {-cyklohexyl} octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    113 • · « · · · {l-[(Cyklobutylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochioiidová sůl,
    1α,3β,5β-[1 -(Isopropylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexylJ- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[(2-Methyl-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[(4,4,4-Trifluoro-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (1-Ethylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[(Cyklopropylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[(2-Hydroxy-l-methyl-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    [1 -(Isobutylamino-methyl)-cyklohexylJ- octová kyselina, hydrochloridová sůl; (1-Propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl; [l-(Isopropylamino-methyl)-cyklohexyl]-octová kyselina, hydrochloridová sůl; (l-Cyklohexylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl; (l-(Benzylamino-methyl)-cyklohexylJ- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    ((lR,3R)-3-Methyl-1 -propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[Cyklopentylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[(Cyklohexylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    [ 1 -(tert-B utoxy kar bony 1 amino -methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, [l-(Acetylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina;
    ((3R, 5S)-1 -Cyklobutylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(3R, 5S)-3,5-Dimethyl-l-[(2-methyl-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(3R, 5S)-1 -[(2-Hydroxy-1 -methyl-ethylamino)-methyl]-3,5-dimethylcyklohexylj-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    114 {(3R, 5S)-1 -[(2,2-Dimethoxy-ethylamino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová. Rysclino Irydrochloridová, sú] j {(3R, 5 S)-1 -[(Cyklopentylmethyl-amino)-methyl] - 3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(3R,5S)-1 -[(Cyklohexylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dímethyl-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    ((3R, 5S)-1 -Cyklohexylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    ((3R,5S)-l-Karboxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; trans-((3R, 5S)-l-Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    cis-((3R, 5S)-l-Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl-octová kyselina, l
    hydrochloridová sůl;
    (1-Dimethylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl; (1-Butylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {1 -[2,2-Dimethoxy-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (l-methylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    [1 -(Fenethylamino-methyl)-cyklohexyl]-octová kyselina, hydrochloridová sůl; {l-[(3-Fenyl-propylamino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    ((3R, 5S)-1 -Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, sodná sůl;
    ((3R, 5S)-1 -Ethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (l-Aminomethyl-4-ethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl; (1-Aminomethyl-4-propyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl; ((3R, 5S)-3,5-Dimethyl-l-propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    [(IR, 3R)-1 -(Benzylamino-methyl)-3-methyl-cyklohexyl]-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    115 {(IR, 3R)-1-[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-3-methyl-cyklohexyl}-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    nebo ((IR, 3R)-3-Methyl-1 -methylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl.
  6. 6. Způsob léčení diabetické retinopatie zahrnující krok podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny vzorců I, II, a/nebo III pacientovi, který to potřebuje
    II
    116 • · · · · · ♦ · · · · • · · · · * · · · · v kde:
    Rg je H; alkyl; cykloalkyl; substitutovaný alkyl obsahující halogen, amin, alkoxy, cykloalkyl, nebo hydroxy; allyl; alkynyl; alkanoyl; alkoxyalkanoyl; sulfonyl; fenyl; benzyl; nebo arylalkyl;
    m a n jsou nezávisle celá čísla 1-3;
    Ri - Rg a Rio - R14 jsou nezávisle H, alkyl, nebo substituovaný alkyl; a
    X = NR14, O, nebo S;
    kde je více než jeden stereoisomer, každé chirální centrum může být nezávisle R nebo S;
    nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl, ester, proléčivo nebo amid.
  7. 7. Způsob podle nároku 6, kde m a n jsou 1; X je NR14; R9 je H; R4 je methyl; R4 a R5 jsou methyl; Rg je methyl; R10 je methyl; R7 a Rg jsou methyl; R4 a Rg jsou methyl; Rj-Rg a R10-R13 jsou H; Rg je alkyl; R9 je benzyl; R]4 je alkyl; Rg je arylalkyl; Rg je cykloalkyl; R]-Rg jsou H; Ri-Rg a Rjq-Rj 1 jsou H; R1-R2 a R7-Rg jsou H; nebo R2 je methyl.
  8. 8. Způsob podle nároku 6, kde R3 je alkyl, Rj-R2 a R4-Ru a R|4 jsou vodík, m a n jsou 1, a X je NRi4; R3 aRn jsou alkyl, Ri-R2 a R4-Rio a R14 jsou
    117 vodík, man jsou 1, a X je NR14; R3 a Rj j jsou alkyl, R]-R2 a R4-R10 a R14 jsou vodík, m a n jsou 1, R; je alkyk a X je NRi^: a Ri-Ri 1 a R14 jsou vodík, man jsou 1, a X je O.
  9. 9. Způsob podle nároku 6, kde je sloučenina zvolena ze skupiny sestávající z následujících:
    (l-Allylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; (l-Prop-2-ynylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
    {1-[(2,2,2-Trifluoro-ethylamino)-inethyl]-cyklohexyl}-octová kyselina;
    {l-[(3,3,3-Trifluoro-propylamino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina; 1α,3β,5β- (l-Allylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
    la^,5P-(3,5-Dimethyl-l-prop-2-ynylaminomethyI-cyklohexyl)-octová kyselina;
    la,3p^-{3,5-Dimethyl-l-[(2,2,2-trifluoro-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
    1α,3β,5β-{3,5-ϋΐιη€ΐ1ιγ1-1-[(3,3,3-ΐΓΪίΊυθΓθ-ριοργ1Ηΐηΐηο)-ιηε1Ιιγ1]cyklohexyl}-octová kyselina;
    trans-((lR,3R)-l-Allylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)-octová kyselina; trans-((lR,3R)-3-Methyl-1-prop-2-ynylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
    trans- {(1 R,3R)-3-Methyl-l-[(2,2,2-trifluoro-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
    trans- {(lR,3R)-3-Methyl-1-[(3,3,3-trifluoro-propylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
    trans-{(l R,3R)-3-Methyl-1 -[(4,4,4-trifluoro-butylamino)-methyl]-cyklohexyl} octová kyselina;
    lα,3β,5β-{3,5-Dimethyl-l-[(4,4,4-trifluoro-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
    1α,3β,5β- {1 -[(Cyklopropylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina;
    trans-{(lR,3R)-l-[(Cyklopropylmethyl-amino)-methyl]-3-methyl-cyklohexyl}octová kyselina;
    118 • · · · trans-(( 1R, 3 R)-3-Methyl -1 -methylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; trans-((!R,3R) 1 Ethylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina; trans-((lR,3 R)-3 - Methyl-1 -pro pyl amino methyl-cyklohexyl)- octová kyselina; trans-((lR,3R)-1 -Butylaminomethy 1-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina, trans-((lR,3R)-l-Hydroxymethyl-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina; 1α,3β,5β-{ 1 -[(Hydroxymethyl-amino)-methyl]-3, 5-dimethyl - cyklohexyl}octová kyselina;
    1α,3β,5β-(1 -Aminomethy 1 -3,5-diethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
    trans-(lR,3R)(l -Aminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
    (l-Aminomethyl-2-methyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochlorid; (l-Aminomethyl-3,3-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochlorid;
    (±)-(trans)-(l-Aminomethyl-3,4-dimethyl-cyklopentyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
    (cis/trans)-(3R)-(l-Aminomethyl-3-methyl-cyklopentyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
    (+)-(trans)-(l-Aminomethyl-3,4-dimethyl-cyklopentyl)- octová kyselina; hydrochlorid;
    (+)-(trans)-(l-Aminomethyl-3,4-dimethyl-cyklopentyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
    1 a, 3 β, 5 p-(l-Aminomethy 1-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
    la,3p,5P-(3,5-Dimethyl-l-propylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    la,3 3,5p-(l-Ethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; hydrochloridová sůl;
    1 a,3β,5P-(l-Benzylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    lcc,3p,5p-(l-Dimethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    • ♦
    119 «««» «· ·· »* «« «*«·
    1 α, 3 β, 5 β-(l-Butylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, i ., j .. „ Λ i„ t j TT a „Al.
    HyUlUUlllUAlUU V U 3U1,
    1α,3β,5β-{ 1 -[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl} octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1 a,3β,5β-(3,5-Dimethy 1-1 -mcthylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1α,3β,5β-[ 1 -(Acetylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina;
    1α,3β,5 Ú-(l-(JsobutyIamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    la,3p,5p-[3,5-Dimethyl-l-(fenethylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1 α,3β,5β-{ 3,5-Dimethy 1-1-[(3-fenyl-propylamino)-methyl]-cyklohexyl} octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[(Cyklobutylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1 a,3β,5β-(l-(Isopropylamino-methy 1)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1-Aminomethyl-l-cyklohexan- octová kyselina;
    1 -Aminomethyl-1 -cyclopentan-octová kyselina;
    1-Aminomenthyl-1-cyklopentan-octová kyselina, sodná sůl;
    1-(hydroxymethyl)cyklohexan-octová kyselina, sodná sůl;
    {l-[(2-Methyl-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {1 -[(4,4,4-Trifluor-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (l-Ethylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {1 -[(Cyklopropylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl} - octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {1 -[(2-Hydroxy-l-methyl-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (l-(Isobutylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (1-Propylaminomethyl-cyklohexyI)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    120 • · · · ««v ·«·* • ·« * ··· · * v [l-(Isopropylamino-methyl)-cykiohexylj- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (1-Cyklohexylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (l-(Benzylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl; ((lR,3R)-3-Methyl-l-propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {1 -[Cyklopentylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl} - octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[(Cyklohexylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    [ 1 -(tert-Butoxykarbonylamino-methyl)-cyklohexylJ- octová kyselina, [1 -(Acetylamino-methyl)-cyklohexyl]-octová kyselina;
    ((3R, 5S)-l-Cyklobutylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(3R, 5S)-3,5-Dimethyl-l-[(2-methyl-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(3R, 5 S)-1-((2-Hydroxy-l-methyl-ethylamino)-methyl]-3,5-dimethylcyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(3R, 5S)-1-((2,2-Dimethoxy-ethylamino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(3R, 5S)-1 -[(Cyklopentylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(3R,5S)-l-((Cyklohexylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    ((3R, 5S)-1 -CykIohexylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    ((3R,5S)- 1-Karboxymethy 1-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; trans-((3R, 5S)-l-Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    cis-((3R, 5S)-l-Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    ·· ·· · · ·· ·· • · W · ··· · · · »
    121 (1-Dimethylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (1 -Ri>tirlom;rinmpthvi.nvVlnbevvloctová kv^elina. hvdrochloridová sůl;
    - - j---------j-j - - j {l-[2,2-Dimethoxy-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (1-methylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {1 -[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    [1-(Fenethylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[(3-Fenyl-propylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    ((3R, 5S)-1 -Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, sodná sůl;
    ((3R, 5S)-l-Ethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (1 -Aminomethyl-4-ethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl; (l-Aminomethyl-4-propyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl; ((3R, 5S)-3,5-Dimethyl-l-propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    [(IR, 3R)-l-(Benzylamino-methyl)-3-methyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(IR, 3R)-l-[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-3-methyl-cyklohexyl) - octová kyselina, hydrochloridová sůl nebo ((IR, 3R)-3-Methyl-1-methylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl.
  10. 10. Způsob inhibice na větvené aminokyselině dependentní aminotransferasy u pacienta, který to potřebuje, zahrnující krok podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny vzorců I, II, a/nebo III
    122 ··· · ·· • φ φφ φφφφ
    Re r5 II
    HO,C \
    X (CH2)n kde:
    123
    Rg je H; alkyl; cykloalkyl; substituovaný alkyl obsahující halogen, amin, alkoxy, cykloalkyl nebo hydroxyskupinu; allyl; alkynvl; alkanovl; alkoxyalkanoyl; sulfonyl; fenyl; benzyl; nebo arylalkyl;
    man jsou nezávisle celé číslo 1-3;
    Ri - R8 a R]0 - R14 jsou nezávisle H, alkyl, nebo substituovaný alkyl; a
    X = NR]4, O nebo S, kde je více než jeden stereoisomer, každé chirální centrum může být nezávisle R nebo S;
    nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl, ester, proléčivo nebo amid.
  11. 11. Způsob podle nároku 10, kde každé m a njsou 1; Xje NR14; R9 je H; R4 je methyl; R4 a R5 jsou methyl; R8 je methyl; R10 je methyl; R7 a Rs jsou methyl; R4 a Rg jsou methyl; Ri-Rs a R10-R13 jsou H; R9 je alkyl; R9 je benzyl; R14 je alkyl; R9 je arylalkyl; R9 je cykloalkyl; Ri-R8 jsou H; RiRs a Rio-Rn jsou H; Ri-R2 a R7-R8 jsou H; nebo R2 je methyl.
  12. 12. Způsob podle nároku 10, kde R3 je alkyl, Ri-R2 a R4-R11 a jsou vodík, a m a njsou 1, a Xje NR14; R3 a Rj 1 jsou alkyl, R1-R2 a R4-R10 a Ri4 jsou vodík, m anjsou 1, a X je NR14; R3 a Ri 1 jsou alkyl, Ri -R2 a R4-R10 a R14 jsou vodík, man jsou 1, R9 je alkyl, a Xje NR14; a Ri-Rj ] a R14 jsou vodík, man jsou 1, a X je O.
  13. 13. Způsob podle nároku 10, kde sloučenina je zvolena z následujících: (l-AIlylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
    (1 -Prop-2-ynyl amin om ethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
    {1-((2,2,2-Trifluoro-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl} -octová kyselina;
    {1-((3,3,3-Trifluoro-propylamino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina;
    1 α,3β,5β- (l-Allylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; 1α,3 β,5β-(3,5-Dimethyl-1-prop-2-ynylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
    • · • ·
    124 ·«·♦ ·· ·9 «« ♦· ·«·· la,3p,5p-{3,5-Dimethyl-l-[(2,2,2-trifluoro-ethylamino)-methyl]-cyk!ohexyl}4. „ , . / 1.,, 1 < η '
    UVLVVU. JVJť □ V 1 1 11 C+ ,
    1 a,3p,5p-{3,5-Dimethyl-l-[(3,3,3-trifluoro-propylamino)-methyl]cyklohexyl}-octová kyselina;
    trans-((lR,3R)-l-Allylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)-octová kyselina; trans-((1R, 3 R)-3-Methyl-1 -prop-2-ynylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
    trans-{(IR, 3 R)-3-Methyl-1 -[(2,2,2-trifluoro-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
    trans-{(IR, 3 R)-3-Methyl-1 -[(3,3,3-trifluoro-propylamino)-methyl]-cyklohexyl} octová kyselina;
    trans-{(lR,3R)-3-Methyl-l -[(4,4,4-trifluoro-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina;
    1 α,3β,5β-{ 3,5-Dimethyl-1 -[(4,4,4-trifluoro-butylamino)-methyI]-cyklohexyl}octová kyselina;
    1α,3β,5β-{ l-[(Cyklopropylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina;
    trans-{(IR, 3 R)-l-[(Cykl opropylmethyl-amino)-methyl]-3-methyl-cyklohexyl }octová kyselina;
    trans-((lR,3R)-3-Methyl-l-methylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; trans-((IR,3R)-l-Ethylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina; trans-((lR,3R)-3-Methyl-l-propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina; trans-((l R,3R)-1-Butylaminomethyl-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina; trans-((l R, 3 R)-1-Hydroxy methy 1-3-methy 1-cyklohexyl)- octová kyselina; 1α,3β,5 β-{ l-[(Hydroxymethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl} octová kyselina;
    1 oc,3β,5P-(1-Aminomethy 1-3,5-diethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
    trans-(1R,3R)(l -Aminomethy 1-3-methyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
    (1-Amino methyl-2-methy l-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochlorid; (l-Aminomethyl-3,3-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina,
    125 hydrochlorid;
    (±)-(trans)-( i -Aniinumeíhyl-3,4-dímethyl ůt-i + trl')A, octová k v s cl i d hydrochlorid;
    (cis/trans)-(3R)-( 1 -Aminomethyl-3-methyl-cyklopentyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
    (+)-(trans)-( 1-Aminomethyl-3,4-dimethyl-cyklopentyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
    1 a,3β,5β-(1-Aminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochlorid;
    1 α,3β,5β-(3,5-Dimethyl-1 -propylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    lα,3β,5β-(l-Ethylaminomethyl-3J5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina;
    hydrochloridová sůl;
    la,3p,5p-(l-Benzylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    Ια, 3β,5β-(1 -Dimethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1 a,3p,5p-(l-Butylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1 α,3β,5β-{ 1 -[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl} octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    la^,5p-(3,5-Dimethyl-l-methylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1α,3β,5β-[l-(Acetylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1α,3β,5β-(1 -(Isobutylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    la^,5p-[3,5-Dimethyl-l-(fenethylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1 a, 3 β,5β-{ 3,5-Dimethyl-1 -[(3-fenyl-propylamino)-methyl]-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    126
    9»·· «· {l-[(Cyklobutylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydíouhlújidova sůl;
    1α,3β,5β-(1 -(Isopropylamino-methyl)-3,5-dimethyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    1-Aminomethyl-l-cyklohexan- octová kyselina;
    1 -Aminomethyl -1 -cyklopentan-octová kyselina;
    1-Aminomenthyl-l-cyklopentan-octová kyselina, sodná sůl;
    1 -(hydroxymethyl)cyklohexan-octová kyselina, sodná sůl;
    {l-[(2-Methyl-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {1-[(4,4,4-Trifluor-butylamino)-methyl]-cyklohexyl}-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (i-Ethylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[(CyklopropylmethyI-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {1 -[(2-Hydroxy-l -methyl-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl} - octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    [l-(Isobutylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl; (l-Propylaminomethyl-cyklohexyl)-octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    [l-(Isopropylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (1-Cyklohexylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    [l-(Benzylamino-methyl)-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    ((1R,3R)-3-Methyl-1 -propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[Cyklopentylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[(Cyklohexylmethyl-amino)-methyl]-cyklohexyl} - octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    [1 -(tert-Butoxykarbonylamino-methyl)-cyklohexyl)- octová kyselina, [1-(Acetylamino-methyl)-cyklohexyl]-octová kyselina;
    127 «·*· · * · *··· • ·· · · ·♦· · · · ((3R, 5S)-l-Cyklobutylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová
    Ί - - — —- 1 » v P Λ 1
    A y ÍV i 1lid, UJ· Ul UVIHVI 1U V » tx iJ vn , {(3R, 5S)-3,5-Dimethyl-l -[(2-methyl-butylamino)-methyl]-cyklohexyl} octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(3R, 5S)-l-[(2-Hydroxy-l-methyl-ethylamino)-methyl]-3,5-dimethylcyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(3R, 5S)-1 -[(2,2-Dimethoxy-ethylamino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(3R, 5S)-l-[(Cyklopentylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(3R,5S)-l-[(Cyklohexylmethyl-amino)-methyl]-3,5-dimethyl-cyklohexyl}octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    ((3R, 5 S)-1-Cyklohexylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    ((3R,5S)-1 -Karboxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)-octová kyselina; trans-((3R, 5S)-l-Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    cis-((3R, 5S)-1-Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (1-Dimethylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl; (1-Butylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {1 -[2,2-Dimethoxy-ethylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    (1-methylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl; {l-[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    [1 -(Fenethylamino-methyl)-cyklohexylJ- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {l-[(3-Fenyl-propylamino)-methyl]-cyklohexyl}- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    ((3R, 5S)-l-Hydroxymethyl-3,5-dimethyl-cyklohexy])- octová kyselina, sodná sůl;
    128 ((3R, 5S)-l-Ethylaminomethyl-3,5-dimethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, (1 -Aminomethyl-4-ethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl; (1 -Aminomethyl-4-propyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl; ((3R, 5S)-3,5-Dimethyl-l-propylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    [(IR, 3R)-l-(Benzylamino-methyl)-3-methyl-cyklohexyl]- octová kyselina, hydrochloridová sůl;
    {(IR, 3R)-l-[(Benzyl-methyl-amino)-methyl]-3-methyl-cyklohexyl} - octová kyselina, hydrochloridová sůl; nebo ((IR, 3R)-3-Methyl-l-methylaminomethyl-cyklohexyl)- octová kyselina, hydrochloridová sůl.
  14. 14. Způsob léčení neurologických poruch, deprese, stavů úzkosti/paniky, mánie, bipolarních chorob, proti zánětlivým onemocněním, léčení glaukomu, bolesti nebo gastrointestinalních chorob, zahrnující krok podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny vzorce IV pacientovi,
    CO2H který to potřebuje , kde
    Rl-R4jsou vodík nebo alkyl;
    X je NR5 nebo O;
    R5 je vodík nebo alkyl,
    R6 je vodík, alkyl, benzyl, alkanoyl, alkoxyalkanoyl, arylalkyl, alkoxy,
    129
CZ20012758A 1999-12-08 2000-11-08 Větvené aminokyselinově dependentní aminotransferasové inhibitory a jejich použití při léčení diabetické retinopatie CZ20012758A3 (cs)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US16963599P 1999-12-08 1999-12-08
US17539900P 2000-01-11 2000-01-11
US23002000P 2000-09-05 2000-09-05

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ20012758A3 true CZ20012758A3 (cs) 2002-09-11

Family

ID=27389690

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20012758A CZ20012758A3 (cs) 1999-12-08 2000-11-08 Větvené aminokyselinově dependentní aminotransferasové inhibitory a jejich použití při léčení diabetické retinopatie

Country Status (33)

Country Link
EP (1) EP1157000B1 (cs)
JP (1) JP2003516379A (cs)
KR (1) KR20010101811A (cs)
CN (2) CN1626069A (cs)
AP (1) AP2001002242A0 (cs)
AR (1) AR037738A1 (cs)
AT (1) ATE308510T1 (cs)
AU (1) AU784553B2 (cs)
BG (1) BG105875A (cs)
BR (1) BR0008443A (cs)
CA (1) CA2361647A1 (cs)
CO (1) CO5280055A1 (cs)
CZ (1) CZ20012758A3 (cs)
DE (1) DE60023657T2 (cs)
DZ (1) DZ3141A1 (cs)
EA (1) EA006597B1 (cs)
EE (1) EE200100416A (cs)
ES (1) ES2252075T3 (cs)
GE (1) GEP20043298B (cs)
HK (1) HK1044933B (cs)
HR (1) HRP20010581A2 (cs)
HU (1) HUP0200570A3 (cs)
IS (1) IS6033A (cs)
MA (1) MA26777A1 (cs)
MX (1) MXPA01008085A (cs)
NO (1) NO20013844L (cs)
OA (1) OA11759A (cs)
PE (1) PE20010929A1 (cs)
PL (1) PL349193A1 (cs)
SK (1) SK11022001A3 (cs)
UY (1) UY26474A1 (cs)
WO (1) WO2001042191A1 (cs)
YU (1) YU57401A (cs)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7186855B2 (en) 2001-06-11 2007-03-06 Xenoport, Inc. Prodrugs of GABA analogs, compositions and uses thereof
AU2002310409C1 (en) * 2001-06-11 2008-04-17 Xenoport, Inc. Orally administered dosage forms of GABA analog prodrugs having reduced toxicity
US6818787B2 (en) 2001-06-11 2004-11-16 Xenoport, Inc. Prodrugs of GABA analogs, compositions and uses thereof
US8048917B2 (en) 2005-04-06 2011-11-01 Xenoport, Inc. Prodrugs of GABA analogs, compositions and uses thereof
MXPA02010231A (es) * 2001-11-27 2004-12-13 Warner Lambert Co Inhibidores aminotransferasa dependientes de aminoacidos de cadena ramificada y su uso en el tratamiento de las enfermedades neurodegenerativas.
MXPA02010430A (es) * 2001-11-27 2003-06-02 Warner Lambert Co Inhibidores aminotransferasa dependientes de aminoacidos de cadena ramificada y su uso en el tratamiento de las enfermedades neurodegenerativas.
US20040058313A1 (en) * 2002-04-24 2004-03-25 Abreu Marcio Marc Compositions, targets, methods and devices for the therapy of ocular and periocular disorders
DE602004010135T2 (de) * 2004-09-20 2008-09-04 Kao Corp. Verfahren zur Herstellung von Lactonen und deren Verwendung als Geruchsstoffe
EP1811986B1 (en) 2004-11-04 2014-03-26 XenoPort, Inc. Gabapentin prodrug sustained release oral dosage forms
WO2008103319A2 (en) * 2007-02-16 2008-08-28 Ark Diagnostics, Inc. Compounds and methods for use in detecting gabapentin
WO2008155619A2 (en) * 2007-06-21 2008-12-24 Pfizer Inc. Preparation of optically-active cyclic amino acids
EP2383255A1 (en) 2010-04-28 2011-11-02 Lacer, S.A. New compounds, synthesis and use thereof in the treatment of pain
EP2481801A1 (en) 2011-01-28 2012-08-01 Deutsches Krebsforschungszentrum Inhibitors of branched-chain-aminotransferase-1 (BCAT1) for the treatment of neoplasia
US10941109B2 (en) 2011-06-13 2021-03-09 Ergon Pharmaceuticals Llc Compositions and methods of treatment using a BCAT1 inhibitor
JP6053768B2 (ja) * 2011-06-13 2016-12-27 エルゴン ファーマシューティカルズ エルエルシー Ｂｃａｔ１阻害剤を使用する治療方法
CN113694202B (zh) * 2020-06-29 2023-03-31 江苏省中医院 Ass1或bckdk抑制剂在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2167717T3 (es) * 1996-03-14 2002-05-16 Warner Lambert Co Nuevos aminoacidos ciclicos sustituidos como agentes farmaceuticos.

Also Published As

Publication number Publication date
WO2001042191A1 (en) 2001-06-14
AU784553B2 (en) 2006-05-04
SK11022001A3 (sk) 2002-11-06
ES2252075T3 (es) 2006-05-16
CN1344245A (zh) 2002-04-10
DE60023657D1 (de) 2005-12-08
BR0008443A (pt) 2001-10-30
EE200100416A (et) 2002-12-16
UY26474A1 (es) 2001-01-31
ATE308510T1 (de) 2005-11-15
BG105875A (en) 2002-05-31
DZ3141A1 (fr) 2001-01-14
CA2361647A1 (en) 2001-06-14
CN1626069A (zh) 2005-06-15
CO5280055A1 (es) 2003-05-30
JP2003516379A (ja) 2003-05-13
PL349193A1 (en) 2002-07-01
HUP0200570A3 (en) 2003-02-28
AR037738A1 (es) 2004-12-01
HK1044933B (zh) 2005-06-03
EA200100791A1 (ru) 2002-04-25
NO20013844D0 (no) 2001-08-07
EP1157000B1 (en) 2005-11-02
GEP20043298B (en) 2004-03-10
EA006597B1 (ru) 2006-02-24
CN1170811C (zh) 2004-10-13
DE60023657T2 (de) 2006-07-20
YU57401A (sh) 2004-05-12
MA26777A1 (fr) 2004-12-20
HUP0200570A2 (en) 2002-06-29
HK1044933A1 (en) 2002-11-08
MXPA01008085A (es) 2002-04-24
OA11759A (en) 2005-07-19
EP1157000A1 (en) 2001-11-28
PE20010929A1 (es) 2001-09-08
HRP20010581A2 (en) 2002-08-31
AU1477901A (en) 2001-06-18
AP2001002242A0 (en) 2001-09-30
IS6033A (is) 2001-07-31
KR20010101811A (ko) 2001-11-14
NO20013844L (no) 2001-10-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ20012758A3 (cs) Větvené aminokyselinově dependentní aminotransferasové inhibitory a jejich použití při léčení diabetické retinopatie
US20240091184A1 (en) Modulators of sestrin-gator2 interaction and uses thereof
US8796335B2 (en) Branched 3-phenylpropionic acid derivatives and their use
US7329746B2 (en) Macrocyclic beta-secretase inhibitors for the treatment of Alzheimer&#39;s disease
AU2003208538B2 (en) Amino acids with affinity for the alpha-2-delta-protein
EA026847B1 (ru) C4-монометилтритерпеноидные производные и способы их применения
CZ293759B6 (cs) Substituovaná cyklická aminokyselina, její použití a farmaceutický prostředek na její bázi
EP3197880A1 (de) Substituierte oxopyridin-derivate
TW201118069A (en) Spirolactam derivatives and uses of same
MXPA04004105A (es) Metodo de tratamiento de tinnitus.
US20030119826A1 (en) Neuroprotective treatment methods using selective iNOS inhibitors
KR20190084270A (ko) Ror 감마 조정제로서의 트리시클릭 술폰
AU2018223810B2 (en) Visual cycle modulators
MXPA05003520A (es) Derivados de acido acetico nitrometilo ciclicos.
ZA200106260B (en) Branched chain amino acid-dependent aminotransferase inhibitors and their use in the treatment of diabetic retinopathy.
UA75572C2 (en) Branched chain amino acid-dependent aminotransferase inhibitors and their use in the treatment of diabetic retinopathy
US20030109522A1 (en) Ophthalmologic treatment methods using selective iNOS inhibitors