EA003511B1

EA003511B1 - Производные пиперазинона и их применение

Info

Publication number: EA003511B1
Application number: EA200100151A
Authority: EA
Inventors: Кристоф Йю; Маргерит Анри; Тьерри Жибуло; Брижитт Лезюр
Original assignee: Лаборатуар Л.Лафон
Priority date: 1998-07-17
Filing date: 1999-07-16
Publication date: 2003-06-26
Also published as: JP2002520401A; CA2337849A1; AU752632B2; NZ509166A; FR2781220B1; CN1188402C; AU4629199A; EP1098888A1; CA2337849C; WO2000004000A1; US6344456B1; EA200100151A1; CN1309648A; FR2781220A1; BR9912839A

Abstract

Изобретение касается соединений формулы I, в которой R, R, R, Rи Rопределены в п.1 формулы изобретения. Эти соединения могут применяться в терапии в качестве антитромботических средств.

Description

Настоящее изобретение относится к новым соединениям, которые являются ингибиторами связывания фибриногена с рецепторами Ср 1ГЬ/111а на тромбоцитах и могут применяться в терапии в качестве антитромботических средств.

При патологических процессах, ведущих к образованию, а затем и разрастанию тромба (сгустка крови), аггрегация тромбоцитов представляет собой ключевую стадию, поскольку от нее зависит степень тяжести этого явления. В частности, с самого начала образования тромба, особенно в артериальном кровотоке, в результате нескольких взаимозависимых биохимических реакций происходит аггрегация все возрастающего числа тромбоцитов путем превращения растворимого фибриногена в нерастворимые фибриновые нити (филаменты), отчего увеличивается размер массы тромбоцитов, сначала в самом месте повреждения артериального сосуда, а затем по возрастающей и в просвете сосуда.

В этом механизме аггрегация тромбоцитов еще больше усиливается вследствие активации рецепторов Ср ГГЬ/Ша. Фибриноген связывается с этими рецепторами через свои два димера и усиливает сцепление между тромбоцитами, что ведет к образованию массы тромбоцитов, образующей тромб на месте разрыва атеросклеротической бляшки.

Этот механизм аггрегации тромбоцитов особенно активен при всех артериальных тромбозах, независимо от того, появляются ли они при проведении кардиологических процедур (транслюминальная перкутанная (подкожная) ангиопластия, вставка растяжек), сердечной хирургии (аортокоронарное шунтирование, операции на клапанах), при острых сердечных заболеваниях (инфаркт миокарда, стенокардия, острые коронарные синдромы и т.п.) или при некоторых типах ишемии мозга, или же при ишемии миокарда, что может вызвать осложнения при проведении антитромботического лечения.

Поэтому снижение или предупреждение активации тромбоцитов, контактирующих с разрушенной атеросклеротической бляшкой, представляет собой новый и эффективный терапевтический подход к лечению тромбозов, особенно артериальных тромбозов, а тем самым и действенное средство профилактики острых коронарных синдромов, включая стенокардию и инфаркт миокарда.

Настоящее изобретение направлено на получение новых конкурентных ингибиторов связывания фибриногена с рецепторами Ср ГГЬ/Ша, которые можно применять в качестве антитромботических лекарств.

Настоящее изобретение также направлено на получение соединений, которые можно вводить перорально, что дает возможность про длить продолжительность действия и избежать риска кровотечения.

Одним из объектов настоящего изобретения являются соединения общей формулы (Г)

где

К.1 означает водород, С₁-С₄-алкил или фенил(С1 -С₄)алкил;

К₂ означает водород, гидроксил или защитную группу для амидиногруппы;

К₃ означает водород,

С₁-С₅алкил, С₃-С₁₂-моно- или бициклический циклоалкил, С₂-С₄алкенил или С₂-С₄алкинил, причем эти группы необязательно могут быть замещены либо галогенами, либо гидроксильной группой, моно-, би- или трициклическую С₆-С₁₄арильную группу, гетероарильную группу, выбранную из пиридила, тиенила, фурила, хинолила, бензодиоксанила, бензодиоксолила, бензотиенила, бензофурила и пиразинила; фенил-(С₁-С₄)алкил или нафтил(С1-С4)алкил, или пиперонил;

К₄ и К₅ означают, независимо друг от друга, водород или С|-С₅алкил. либо вместе с атомом азота они образуют пиперидил или морфолинил;

причем арил и гетероарил необязательно могут быть замещены одной или несколькими группами, выбранными независимо из галогенов, С₁-С₄алкила, трифторометила, С1-С4алкилтио, С1-С4алкилсульфонила, С1-С4-алкилокси, нитрогруппы и групп -СООК, -СН2СООК. и -О-СН2-СООН, где К означает С1-С4алкил, и оксогруппа находится в положении 2 или 3 пиперазина;

а также их соли, образованные фармацевтически приемлемыми кислотами.

В качестве примера арильных групп можно назвать фенил, α-нафтил, β-нафтил и флуоренил.

С₁-С₅алкильные группы могут быть линейными или разветвленными. В качестве примера можно назвать метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил и пентил.

В качестве примера алкинильных групп можно привести этинил, пропаргил и бутинил.

В качестве примера алкенильных групп можно привести винил и аллил.

С1-С4алкоксигруппы также могут быть линейными или разветвленными. В качестве примера можно назвать метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси и изобутокси группы.

Галогены могут быть выбраны из фтора, хлора, брома и иода.

В качестве примера защитных групп для амидиногруппы можно назвать этоксикарбонил, бензилоксикарбонил, паранитробензилоксикарбонил и 1-бутоксикарбонил.

Соли фармацевтически приемлемых кислот означают соли, обладающие биологическими свойствами свободных оснований и не оказывающие нежелательных эффектов. Эти соли могут быть образованы, в частности, минеральными кислотами, такими как соляная кислота, бромисто-водородная кислота, серная кислота, азотная кислота или фосфорная кислота; кислыми солями металлов, такими как двунатриевый ортофосфат или однозамещенный сульфат калия; а также органическими кислотами.

Соединения формулы I можно получить путем: а) реакции между кислотой формулы II ^ζ_Ο^ν^/^~^{0Η (||)} о

где Ζ означает предшественник группы

Р₂—N и амином формулы III

где В'1 означает С₁-С₄алкил или фенил-(С₁С₄)алкил, с получением соединения формулы IV

Ь) превращения группы Ζ в группу

с) при необходимости, превращения группы В'₁в атом водорода.

Кислоты формулы II могут реагировать с аминами формулы III в полярном растворителе, таком как ΌΜΡ, ТНР или этилацетат, в присутствии конденсирующего агента (ЭСС/НОВТ. ВОР, изобутилхлороформиат) при температуре от 15 до 50°С.

Когда Ζ представляет собой группу И=С-, её можно превратить в амидоксим путем присоединения гидроксиламина к нитрильной группе в присутствии подходящего основания (К₂СО₃, Εΐ₃Ν, ЫаОС₂Н₅) в спиртовом растворителе. При гидрогенолизе полученных соединений в присутствии палладия на угле в смеси уксусного ангидрида и уксусной кислоты образуются соединения формулы I, в которых Р₂означает водород (непосредствено образуются соединения, в которых К = Н, когда Р'₁ является бензильной группой).

Когда Ζ представляет собой группу Ν=^, её также можно превратить в имидат путем присоединения этанола в присутствии НС1 в этилацетате. Полученный имидат затем превращается в соединения формулы I, в которых К.₂ означает водород, а -ΝΒ₄Β₅ является либо пиперидилом, либо морфолинилом, путем реакции с соответствующим амином в среде, содержащей этанол/этилацетат.

Соединения формулы II, содержащие 2пиперазинон, когда Ζ является нитрильной группой, можно получить по схеме 1.

Схема 1

При реакции 4-фторобензонитрила с избытком этилендиамина в апротонном растворителе образуется 4-(2-аминоэтил)бензонитрил, который затем подвергается моноалкилированию этилбромоацетатом в полярном растворителе, таком как этанол или ацетонитрил и в присутствии неорганического основания или третичного амина. Ацилирование с помощью хлороацетилхлорида с последующей циклизацией и гидролизом дает кислоту 1.

Соединения формулы II, содержащие 3пиперазинон, когда Ζ является нитрильной группой, можно получить по схеме 2.

4-(2-Аминоэтил)бензонитрил подвергается диалкилированию этилбромоацетатом; циклизация проводится в присутствии третичного амина, неорганического основания или их смеси; и после гидролиза получается кислота 2.

Соли обычно получают путем реакции соединения формулы I с фармацевтически приемлемой кислотой в подходящем растворителе. И наоборот, из этих солей можно получить основания при обработке сильным основанием.

Следующие примеры иллюстрируют получение соединений формулы I.

А. Получение соединений формулы II

1. Синтез 2-[4-(4-цианофенил)-2-оксопиперазино]уксусной кислоты (1)

a) 4-(2-Аминоэтиламино)бензонитрил

Суспензию 4-фторобензонитрила (167 г, 1,38 моль), этилендиамина (330 г, 5,5 моль) и карбоната калия (300 г, 2,17 моль) в 2 л толуола кипятили с дефлегматором в течение 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали и промывали толуолом, фильтрат упаривали до состояния желтого масла, которое перекристаллизовывали из толуола. Продукт отфильтровывали, промывали толуолом и высушивали под вакуумом при 50°С, получая 200 г желтоватого вещества.

Выход = 90%.

Температура плавления = 85°С.

’Η-ΝΜΒ (400 ΜΗζ, СОС1₃): δ 1,2 (Ьз, 2Н),

2,9 (ΐ, 2Η), 3,12 (μ, 2Η), 4,7 (Ьз, 1Η), 6,5 (6, 2Η),

7.3 (6, 2Η).

b) Этил-2-{2-(хлороацетил)-2-(4-цианоанилино)этиламино }ацетат

Этилбромоацетат (84 г, 0,5 моль) добавляли к суспензии 4-(2-аминоэтиламино)бензонитрила (80,5 г, 0,5 моль) и диизопропилэтиламина (65 г, 0,5 моль) в 800 мл ацетонитрила. Продолжали перемешивать в течение 18 ч при комнатной температуре. Большая часть ацетонитрила испарялась, а остаток растворяли в дихлорометане. Эту смесь промывали водой и высушивали над сульфатом натрия; неочищенный продукт пропускали через короткую колонку с диоксидом кремния (элюировали дихлорометаном, а затем смесью дихлорометана с метанолом 20:1), получая масло.

Полученный продукт растворяли в 1 л тетрагидрофурана и добавляли диизопропилэтиламин (51 г, 0,4 моль), после чего медленно при -5°С добавляли хлороацетилхлорид (45 г, 0,4 моль). После перемешивания в течение 18 ч при комнатной температуре добавляли 1 л этилацетата и смесь 3 раза промывали водой, высушивали над сульфатом натрия и упаривали, получая твердое вещество, которое перемешивали со смесью дихлорометана с эфиром (1:3). Суспензию фильтровали, промывали смесью дихлорометана с эфиром (1:3) и высушивали под вакуумом, получая 100 г кристаллического вещества бежевого цвета.

Выход = 62%.

Ή-ΝΜΚ. (400 ΜΗζ, СПС1₃): δ 1,2 (μ, 6Η),

3.3 (т, 4Η), 3,65 (т, 4Η), 3,8 (з, 2Η), 3,9 (6, 4Η),

4,1 (з, 4Η), 4,15 (μ, 4Η), 4,9 (ΐ, 1Η), 5,3 (ΐ, 1Η), 6,5 (66, 4Η), 7,3 (66, 4Η).

c) Этил 2-[4-(4-цианофенил)-2-оксопиперазино]ацетат

Суспензию этил 2-{2-(хлороацетил)-2-(4цианоанилино)этиламино}ацетата (152 г, 0,47 моль), диизопропилэтиламина (73 г, 0,57 моль) и йодистого натрия (85 г, 0,57 моль) в 1,2 л ацетонитрила кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. Растворитель упаривали, а остаток растворяли в дихлорометане, промывали водой, высушивали над сульфатом натрия и упаривали до состояния коричневого масла, которое перекристаллизовывали из смеси циклогексана с этилацетатом, получая 125 г коричневатого кристаллического вещества.

Выход = 93%.

Температура плавления = 108°С.

’Η-ΝΜΒ (400 ΜΗζ, СОС1₃): δ 1,3 (ΐ, 3Η),

3,65 (т, 4Η), 4,05 (з, 2Η), 4,2 (т, 4Η), 6,8 (6, 2Η),

7,5 (6, 2Η).

6) 2-[4-(4-Цианофенил)-2-оксопиперазино] уксусная кислота

Этил-2-[4-(4-цианофенил)-2-оксопиперазино]ацетат (20,7 г, 72 ммоль) растворяли в 80 мл метанола, 80 мл тетрагидрофурана и 100 мл воды, а затем добавляли гидроокись лития в виде моногидрата (4 г, 98 ммоль). Перемешивание продолжали 20 мин, после чего удаляли органический растворитель под вакуумом. К полученной суспензии прибавляли около 100 мл воды и подкисляли эту смесь. Продукт отфильтровывали, промывали водой и высушивали под вакуумом при 50°С, получая 18,5 г порошка бежевого цвета.

Выход = 100%.

Температура плавления = 215°С.

’Η-ΝΜΒ (200 ΜΗζ, ΌΜ8Θ-6₆): δ 3,5 (ΐ, 2Н),

3,65 (ΐ, 2Н), 4,0 (з, 2Н), 4,1 (з, 2Η), 7,0 (6, 2Η), 7,6(6, 2Η).

2. Синтез 2-[4-(4-цианофенил)-3-оксопиперазино]уксусной кислоты (2)

a) Этил-2-[2-(4-цианоанилино)этил(2-этокси-2-оксоэтил)амино]ацетат

Суспензию 4-(2-аминоэтиламино)бензонитрила (1а) (32 г, 0,2 моль), карбоната калия (55 г, 0,4 моль) и этилбромоацетата (67 г, 0,4 моль) в 400 мл ацетонитрила кипятили с обратным холодильником в течение 18 ч. Неочищенный продукт отфильтровывали и пропускали через короткую колонку с диоксидом кремния (элюировали дихлорометаном), получая 58 г коричневого масла.

Выход = 87%.

’Η-ΝΜΒ (200 ΜΗζ, СОС1₃): δ 1,3 (ΐ, 3Η), 3,05 (з, 2Η), 3,4 (з, 2Η), 3,55 (з, 2Η), 3,8 (ΐ, 2Η), 4,2(φ 2Η), 7,45 (6, 2Η), 7,6 (6, 2Η). Μ8-Ο т/ζ: 287 (Μ+Η)⁺

b) 2-[4-(4-цианофенил)-3-оксопиперазино]уксусная кислота

Суспензию этил-2-[2-(4-цианоанилино) этил(2-этокси-2-оксоэтил)амино]ацетата (58 г, 0,174 моль), диизопропилэтиламина (4 г, 0,03 моль) и карбоната калия (24 г, 0,174 моль) в 400 мл ацетонитрила кипятили с дефлегматором в течение 2 дней. Смесь фильтровали и промывали дихлорометаном. Фильтрат упаривали, получая коричневое вещество, которое растворяли в 150 мл метанола и 50 мл воды, а затем добавляли гидроокись лития моногидрат (8,4 г, 0,2

Ί моль). После перемешивания 30 мин при комнатной температуре половину метанола удаляли под вакуумом, получая суспензию. Добавляли примерно 100 мл воды и эту смесь подкисляли при 5°С. Продукт отфильтровывали, промывали водой и высушивали под вакуумом при 50°С, получая 27,2 г порошка бежевого цвета.

Выход = 55%.

Температура плавления = 120°С.

¹Η-ΝΜΒ (200 ΜΗζ, ΌΜ8Ο-ά₆): δ 2,95 (ΐ, 2Η), 3,3 (κ, 2Η), 3,4 (κ, 2Η), 7,65 (ά, 2Η), 7,85 (ά,2Η).

В. Получение промежуточных продуктов формулы IV

1. Синтез этил-3-{[2-(4-(4-цианофенил)-2оксопиперазино)ацетил] амино }-пропаноата (промежуточный продукт В1)

Изобутилхлороформиат (1,39 г, 10 ммоль) добавляли к суспензии 2-[4-(4-цианофенил)-3оксопиперазино]уксусной кислоты (2,59 г, 10 ммоль) и Ν-метилморфолина (2,1 г, 20,8 ммоль) в 30 мл тетрагидрофурана при 5-10°С, после чего смесь перемешивали 10 мин при комнатной температуре, а затем добавляли этил-3аминопропаноат гидрохлорид (1,55 г, 10 ммоль). Продолжали перемешивать в течение 1 ч; растворитель упаривали и остаток очищали методом тонкослойной хроматографии (дихлорометан : метанол =15:1), получая 2 г белого твердого вещества.

Выход = 56%.

¹Η-ΝΜΚ. (200 ΜΗζ, СБС1₃): δ 1,25 (ΐ, 3Η),

2.5 (ΐ, 2Η), 3,5 (άά, 2Η), 3,65 (т, 4Η), 4,05 (κ, 2Η), 4,08 (κ, 2Η), 4,1 (φ 2Η), 6,75 φκ, 1Η), 6,8 (ά, 2Η),

7,55 (ά, 2Η).

Описанный в п.1 метод применяли для получения следующих промежуточных продуктов.

2. Бензил-3-{[2-(4-(4-цианофенил)-2-оксопиперазино)ацетил]амино }пропаноат (промежуточный продукт В2)

Исходный материал - бензил-3-аминопропаноат тозилат. Выход = 71%.

¹Η-ΝΜΚ. (200 ΜΗζ, СБС1₃): δ 2,55 (ΐ, 2Η),

3.5 (φ 2Η), 3,6 (κ, 4Η), 4,0 (κ, 2Η), 4,05 (к, 2Η),

5,1 (κ, 2Η), 6,8 (т, 3Η), 7,3 (т, 5Η), 7,5 (ά, 2Η).

3. Этил-3 -(1,3-бензодиоксол-5-ил)-3-{[2-(4(4-цианофенил)-2-оксопиперазино)-ацетил] амино}пропаноат (промежуточный продукт В3)

Исходный материал - этил-3-амино-3-(1,3бензодиоксол-5-ил)пропаноат гидрохлорид.

Выход = 59%.

Ή-ΝΜΚ. (400 ΜΗζ, СБС1₃): δ 1,15 (ΐ, 3Η),

2.8 (т, 2Η), 3,65 (т, 4Η), 4,1 (т, 6Η), 5,3 φ, 1Η).

5.9 (ά, 2Η), 6,85 (т, 5Η), 6,9 (ά, 1Η), 7,5 (ά, 2Η).

4. Бензил-3 -(1,3-бензодиоксол-5-ил)-3-{[2(4-(4-цианофенил)-2-оксопиперазино)-ацетил]амино}пропаноат (промежуточный продукт В4)

Исходный материал - бензил-3-амино-3(1,3-бензодиоксол-5-ил)пропаноат тозилат.

Выход = 49%.

’Η-ΝΜΚ. (400 ΜΗζ, СБС1₃): δ 2,8 (т, 2Η),

3,55 (κ, 4Η), 4,0 (κ, 2Η), 4,1 φ, 2Η), 5,0 (ά, 2Η),

5,3 φ, 1Η), 5,9 (ά, 2Η), 6,7 (т, 6Η), 7,25 (т, 6Η),

7.5 (ά, 2Η).

5. Этил-3-{[2-(4-(4-цианофенил)-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-3-(пиридил)пропаноат (промежуточный продукт В5)

Исходный материал - этил-3-амино-3-(пиридил)пропаноат дигидрохлорид.

Выход = 54%.

'Η-ΝΜΚ (400 ΜΗζ, СБС1₃): δ 1,05 (ΐ, 3Η),

2,85 (т, 2Η), 3,65 (т, 4Η), 4,1 (т, 6Η), 5,4 ф, 1Η), 6,75 (ά, 2Η), 7,25 φ, 1Η), 7,5 (ά, 2Η), 7,65 (ά, 1Η), 7,75 (Ь8, 1Η), 8,45 (ά, 1Η), 8,55 (κ, 1Η).

6. Бензил-3-{[2-(4-(4-цианофенил)-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-3 -(пиридил)пропаноат (промежуточный продукт В6)

Исходный материал - бензил-3-амино-3(пиридил)пропаноат дитозилат.

Выход = 48%.

'Η-ΝΜΚ (400 ΜΗζ, СБС1₃): δ 2,95 (άά, 2Η),

3.6 (κ, 4Η), 4,0 (κ, 2Η), 4,1 φ, 2Η), 5,0 (κ, 2Н),

5,45 φ, 1Н), 6,75 (ά, 2Η), 7,25 (т, 6Η), 7,5 (ά, 2Η), 7,65 (ά, 1Η), 7,75 (ά, 1Η), 8,5 (ά, 1Η), 8,6 (κ, 1Η).

7. Этил-3-{[2-(4-(4-цианофенил)-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-5-фенилпентаноат (промежуточный продукт В7)

Исходный материал - этил-3-амино-5фенилпентаноат гидрохлорид.

Выход = 63%.

’Η-ΝΜΚ. (400 ΜΗζ, ΌΜ8Ο-ά₆): δ 1,2 (ΐ, 3Η),

1,8 (т, 2Η), 2,5 (άφ 2Η), 2,6 (ΐ, 2Η), 3,6 (άά, 4Η),

4.1 (т, 6Η), 4,2 (т, 1Η), 6,65 (ά, 1Η), 6,75 (ά, 2Η),

7.1 (т, 3Η), 7,2 (т, 3Η), 7,5 (ά, 2Η).

8. Этил-3-{[2-(4-(4-цианофенил)-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-3-циклогексилпропаноат (промежуточный продукт В8)

Исходный материал - этил-3-амино-3циклогексилпропаноат гидрохлорид.

Выход = 59%.

¹Н-NΜΚ. (400 ΜΗζ, ΌΜ8Ο-ά₆): δ 0,9 (т, 2Η), 2,85 (т, 2Η), 1,1 (т, 3Η), 1,15 (ΐ, 3Η), 1,35 (т, 1Η), 1,6 (т, 5Η), 2,3 (άά, 1Η), 2,5 (άά, 1Η), 3,5 (т, 2Η), 3,6 (т, 2Η), 4,0 (т, 7Η), 6,95 (ά,2Η), 7,6(ά,2Η), 7,8(ά,1Η).

9. Этил-3-{[2-(4-(4-цианофенил)-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-5-метилгексаноат (промежуточный продукт В9)

Исходный материал - этил-3-амино-5метилгексаноат гидрохлорид. Неочищенный препарат непосредственно использовали для примера 9.

10. Этил-3-{ [2-(4-(4-цианофенил)-2-оксопиперазино)ацетил]амино}-4,4-диметилпентаноат (промежуточный продукт В10)

Исходный материал - этил-3-амино-4,4диметилпентаноат гидрохлорид. Этот препарат непосредственно использовали для примера 10.

11. Этил-3-{ [2-(4-(4-цианофенил)-2-оксопиперазино)ацетил]амино}-4-метилпентаноат (промежуточный продукт В11)

Исходный материал - этил-3-амино-4метилпентаноат гидрохлорид. Этот препарат непосредственно использовали для примера 11.

12. Этил-3-{ [2-(4-(4-цианофенил)-3-оксопиперазино)ацетил]амино }пропаноат (промежуточный продукт В12)

Изобутилхлороформиат (1,39 г, 10 ммоль) добавляли к суспензии 2-[4-(4-цианофенил)-3оксопиперазино]уксусной кислоты (пример 2Ь) (2,59 г, 10 ммоль) и Ν-метилморфолина (2,1 г, 20 ммоль) в 30 мл тетрагидрофурана, после чего смесь нагревали в течение 5 мин в бане при 40°С; затем добавляли этил-3-аминопропаноат гидрохлорид (1,55 г, 10 ммоль). Продолжали перемешивать при комнатной температуре в течение 18 ч; растворитель упаривали, а остаток очищали методом тонкослойной хроматографии (дихлорометан : метанол =15:1), получая 1,7 г белого твердого вещества.

Выход = 48%.

Ή-ΝΜΒ (200 ΜΗζ, СИС1₃): δ 1,25 (ΐ, 3Н),

2,6 (ΐ, 2Н), 2,95 (ΐ, 2Н), 3,15 (к, 1Н), 3,4 (к, 2Н),

3,55 (бб, 2Н), 3,8 (бб, 2Н), 4,1 (ф 2Н), 7,45 (Ьк, 1Н), 7,5 (б, 2Н), 7,7 (б, 2Н).

Описанный в пункте 12 метод применяли для получения следующих промежуточных продуктов.

13. Бензил-3-{[2-(4-(4-цианофенил)-3оксопиперазино)ацетил]амино}пропаноат (промежуточный продукт В13)

Исходный материал - бензил-3-аминопропаноат тозилат.

Выход = 69%.

Ή-ΝΜΒ (200 МШ, СИС1₃): δ 2,6 (ΐ, 2Н),

2,8 (ΐ, 2Н), 3,1 (к, 2Н), 3,4 (к, 2Н), 3,55 (ф 2Н),

3,65 (бб, 2Н), 5,1 (к, 2Н), 7,3 (к, 5Н), 7,4 (Ьк, 1Н),

7,45 (б, 2Н) 7,6 (б, 2Н).

14. Этил-3-{ [2-(4-(4-цианофенил)-3-оксопиперазино)ацетил]амино }-3-(1,3 -6ензодиоксол-5-ил)пропаноат (промежуточный продукт В14)

Выход = 48%.

15. Бензил-3-{[2-(4-(4-цианофенил)-3-оксопиперазино)ацетил]амино }-3-(1,3 -бензодиоксол-5-ил)пропаноат (промежуточный продукт В15)

Выход = 48%.

Пример 1.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино(гидроксиимино) метил]фенил}-2-оксопиперазино)-ацетил]амино}пропаноат (СВЬ 42656)

Смесь из промежуточного продукта В1 - этил3-{[2-(4-(4-цианофенил)-2-оксопиперазино)ацетил]амино}пропаноата (6,2 г, 17,3 ммоль), триэтиламина (3,8 г, 37,6 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (2,5 г, 6 ммоль) в 150 мл этанола кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. После охлаждения смесь фильтровали, промывали этанолом и высушивали под вакуумом, получая 5,2 г белых кристаллов.

Выход = 77%.

'Н-\\1Я (200 МШ, СИзОИ): δ 1,25 (ΐ, 3Н),

2,55 (ΐ, 2Н), 3,45 (ΐ, 2Н), 3,58 (бб, 2Н), 3,72 (бб, 2Н), 4,0 (к, 2Н), 4,1 (т, 4Н), 7,0 (б, 2Н), 7,6 (б, 2Н).

М8-С1 т/ζ: 392 (М+Н)⁺.

Описанный в примере 1 метод применяли для получения следующих продуктов.

Пример 2. Бензил-3-{[2-(4-{4-[амино(гидроксиимино)метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]амино}пропаноат

Исходный материал - промежуточный продукт В2.

Выход = 71%.

'Н-\\1Я (200 МШ, ИМ8О-б₆): δ 2,55 (ΐ, 2Н), 3,4 (т, 6Н), 3,85 (к, 2Н), 4,0 (к, 2Н), 5,1 (к, 2Н), 5,6 (к, 2Н), 6,9 (б, 2Н), 7,34 (т, 4Н), 7,55 (б, 2Н), 8,05 (ΐ, 1Н), 9,35 (к, 1Н).

Пример 3.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино (гидроксиимино) метил] фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]амино }-3-(1,3-бензодиоксол-5-ил)пропаноат (СВЬ 42789)

Исходный материал - промежуточный продукт В3.

Выход = 77%.

'Н-\\1Я (400 МШ, ИМ8О-б₆): δ 1,1 (ΐ, 3Н),

2,75 (бб, 2Н), 3,4 (Ьк, 2Н), 3,5 (Ьк, 2Н), 3,9 (к, 2Н), 4,0 (к, 4Н), 5,15 (ф 1Н), 5,65 (к, 2Н), 6,0 (к, 2Н), 6,85 (т, 5Н), 7,55 (б, 2Н), 8,4 (б, 1Н), 9,4 (к, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 534 (М-\а)'.

Пример 4.

Бензил-3-{[2-(4-{4-[амино(гидроксиимино)метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]амино }-3-(1,3-бензодиоксол-5-ил)пропаноат

Исходный материал - промежуточный продукт В4.

Выход = 73%.

'Н-\\1Я (400 МШ, ИМ8О-б₆): δ 2,8 (бб, 2Н), 3,45 (т, 2Н), 3,5 (т, 2Н), 3,8 (к, 2Н), 4,0 (к, 2Н), 5,0 (к, 2Н), 5,1 (φ 1Н), 5,6 (к, 2Н), 6,0 (к, 2Н), 6,8 (бб, 2Н), 6,9 (т, 3Н), 7,3 (т, 5Н), 7,55 (б, 2Н), 8,5 (б, 1Н), 9,4 (к, 1Н).

Пример 5.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино (гидроксиимино)метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]амино}-3-(пиридил)пропаноат (СВЬ 42770)

Исходный материал - промежуточный продукт В5.

Выход = 72%.

'Н-\\1Я (400 МШ, ИМ8О-б₆): δ 1,15 (ΐ,

3Н), 3,0 (б, 2Н), 3,45 (Ьк, 2Н), 3,65 (Ьк, 2Н), 4,0 (к, 2Н), 4,05 (д, 2Н), 4,1 (к, 2Н), 5,4 (д, 1Н), 7,0 (б, 2Н), 7,7 (ά, 2Н), 8,1 (άά, 1Н), 8,6 φδ, 1Н), 8,65 (6, 1Н), 8,8 (ά, 1Н), 8,95 (§, 1Н), 9,15 (Ье, 1Н),

9,25 (6, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 469 (М+Н)⁺.

Пример 6.

Бензил-3-{[2-(4-{4-[амино(гидроксиимино)метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]амино }-3-(пиридил)пропаноат

Исходный материал - промежуточный продукт В6.

Выход = 57%.

Ή-ΝΜΒ (400 МНд ΌΜ8Ο-ά₆): δ 2,9 (ά, 2Н), 3,5 (т, 4Н), 3,85 (δ, 2Н), 4,0 (δ, 2Н), 5,0 (δ, 2Н), 5,25 (ц, 1Н), 5,6 φδ, 2Н), 6,85 (ά, 2Н), 7,3 (т, 6Н), 7,5 (ά, 2Н), 7,7 (ά, 1Н), 8,4 (ά, 1Н), 8,5 (δ, 1Н), 8,6 (ά, 1Н), 9,3 (δ, 1Н).

Пример 7.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино(гидроксиимино)метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]амино}-5-фенилпентаноат (СВЬ 42903)

Исходный материал - промежуточный продукт В7.

Выход = 73%.

Ή-ΝΜΒ (400 МНг, ΌΜ8Ο-ά₆): δ 1,2 (ΐ, 3Н),

3,5 (т, 4Н), 1,75 (т, 2Н), 2,45 - 2,7 (т, 4Н), 3,5 (άά, 4Н), 3,85 (δ, 2Н), 4,1 (т, 5Н), 5,7 (δ, 2Н), 6,9 (ά, 2Н), 7,2 (т, 3Н), 7,25 (ΐ, 2Н), 7,6 (ά, 2Н), 7,95 (ά, 1Н), 9,2 (δ, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 518 (\1ιΝ;ι)'.

Пример 8.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино(гидроксиимино)метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]амино}-3-циклогексилпропаноат (СВЕ 42933)

Исходный материал - промежуточный продукт В8.

Выход = 72%.

Ή-ΝΜΒ (400 МН/. ΌΜ8Ο-ά₆): δ 09 (т, 2Н), 1,1 (т, 3Н), 1,15 (ΐ, 3Н), 1,35 (т, 1Н), 1,6 (т, 5Н), 2,3 (άά, 1Н), 2,5 (άά, 1Н), 3,5 (т, 2Н), 3,6 (т, 2Н), 4,0 (т, 7Н), 6,95 (ά, 2Н), 7,6 (6,2Н), 7,8 (ά, 1Н), 9,4 (δ, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 496 (\1ιΝ;ι)'.

Пример 9.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино(гидроксиимино)метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]амино}-5-метилгексаноат (СВБ 42935)

Исходный материал - промежуточный продукт В9.

Выход = 40% (для обеих стадий).

Ή-ΝΜΒ (400 МН/. ΌΜ8Ο-ά₆): δ 0,9 (ΐ, 6Н),

1,17 (ΐ, 3Н), 1,20 (т, 1Н), 1,4 (т, 1Н), 1,6 (т, 1Н), 2,4 (ά, 2Н), 3,4 (т, 2Н), 3,5 (т, 2Н), 3,8 (δ, 2Н), 4,0 (ά, 2Н), 4,1 (ц, 2Н), 4,18 (т, 1Н), 5,65 (δ, 2Н), 6,92 (ά, 2Н), 7,5 (ά, 2Н), 7,8 (ά, 1Н), 9,35 (δ, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 470 (\1ιΝ;ι)'.

Пример 10.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино(гидроксиимино) метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]-амино}-4,4-диметилпентаноат (СВЕ 42963)

Исходный материал - промежуточный продукт В10.

Выход = 39% (для обеих стадий).

Ή-ΝΜΒ (400 МШ, 1)\18О-с1.₆): δ 0,85 (ά, 6Н),

1,20 (ΐ, 3Н), 2,25 (άά, 1Н), 2,6 (άά, 1Н), 3,45 (т, 2Н),

3,5 (т, 2Н), 3,85 (δ, 2Н), 4,05 (т, 5Н), 5,7 (δ, 2Н),

6,95 (ά, 2Н), 7,6 (ά, 2Н), 7,85 (6,1Н) ,9,4(8, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 470 (Μ+Ν)⁺.

Пример 11.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино (гидроксиимино) метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]-амино}-4-метилпентаноат (СВБ 42965)

Исходный материал - промежуточный продукт В11.

Выход = 36% (для обеих стадий).

Ή-ΝΜΒ (400 МНг, ΌΜ8Ο-ά₆): δ 0,85 (ά, 6Н), 1,2 (ΐ, 3Н), 1,75 (т, 1Н), 2,4 (άά, 1Н), 2,55 (άά, 1Н), 3,45 (т, 2Н), 3,55 (т, 2Н), 3,8 (δ, 2Н),

4,1 (т, 5Н), 5,7 (δ, 2Н), 6,95 (ά, 2Н), 7,6 (ά, 2Н),

7,85 (ά, 1Н), 9,45 (δ, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 456 (Μ+Ν)⁺.

Пример 12.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино (гидроксиимино) метил] фенил }-3-оксопиперазино)ацетил]-амино}пропаноат (СВЕ 42655)

Раствор промежуточного продукта В12 этил-3-{2-[4-(4-цианофенил)-3-оксопиперазино))ацетил]амино}пропаноата (4,96 г, 13,9 ммоль), триэтиламина (2,9 г, 28,7 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорида (2 г, 28,8 ммоль) в 200 мл этанола кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч, а затем удаляли растворитель под вакуумом. Добавляли около 30 мл воды и раствор насыщали хлористым натрием. После этого смесь фильтровали, промывали холодной водой и высушивали под вакуумом, получая 3 г вещества бежевого цвета.

Выход = 55%.

Ή-ΝΜΒ (200 МНг, ΌΜ8Ο-ά₆): δ 1,10 (ΐ, 3Н), 2,75 (ΐ, 2Н), 3,0 (δ, 2Н), 3,2 (δ, 2Н), 3,25 (т, 4Н), 3,65 (ΐ, 2Н), 4,0 (ц, 2Н), 5,75φδ, 2Н), 7,25(ά, 2Н), 7,6 (ά, 2Н), 7,95 (Ье, 1Н), 9,5 (δ, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 392 (М+Н)⁺.

Описанный в примере 12 метод применяли для получения следующих продуктов.

Пример 13.

Бензил-3-{[2-(4-{4-[амино(гидроксиимино)метил] фенил }-3-оксопиперазино)ацетил]амино}пропаноат

Исходный материал - промежуточный продукт В13.

Выход = 86%.

Пример 14.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино (гидроксиимино)метил] фенил }-3-оксопиперазино)ацетил]амино }-3-(1,3-бензодиоксол-5-ил)пропаноат (СВЬ 42838)

Ή-ΝΜΒ (400 МНд ΌΜ8Ο-ά₆): δ 1,1 (ΐ, 3Н),

2,8 (т, 4Н), 3,1 (ц, 2Н), 3,35 (δ, 2Н), 3,75 (ΐ, 2Н),

4,0 (д, 2Н), 5,2 (д, 1Н), 5,8 (δ, 2Н), 6,0 (δ, 2Н), 6,8 (бб, 2Н), 7,0 (8, 1Н), 7,3 (б, 2Н), 7,55 (б, 2Н), 8,4 (б, 1Н), 9,65 (8, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 534 (М-Να)'.

Пример 15.

Бензил-3-{[2-(4-{4-амино(гидроксиимино) фенил }-3-оксопиперазино)ацетил]-амино }-3(1,3 -бензодиоксол-5 -ил)пропаноат

Исходный материал - промежуточный продукт В15.

Выход = 92%.

Пример 16.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино(имино)метил]фенил }-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-пропаноатацетат (СКЬ 42673)

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино(гидроксиимино)метил]фенил}-2-оксопиперазино)-ацетил] амино }пропаноат (пример 1) (2,88 г, 7,36 ммоль) растворяли в 100 мл уксусной кислоты и затем добавляли уксусный ангидрид (1,5 г, 14,7 ммоль) и 0,5 г 10% палладия на угле. Эту смесь гидрогенизировали при комнатной температуре при 50 фунт-дюйм² (р81) в течение 3 ч. После этого смесь фильтровали и упаривали досуха под вакуумом, получая порошок. После добавления эфира образовалась суспензия, которую фильтровали, получая 2,8 г розоватого порошка. Его растворяли в 100 мл воды, обрабатывали углем и фильтровали, а фильтрат сублимировали, получая 2,5 г вещества бежевого цвета.

Выход = 78%.

Ή-ΝΜΒ (400 МНг, ИМ8О-б₆): δ 1,3 (ί, 3Н),

1,8 (8, 3Н), 3,4 (бб, 2Н), 3,6 (ί, 2Н), 3,8 (ί, 2Н), 4,0 (б, 4Н), 4,05 (ф 2Н), 7,2 (б, 2Н), 7,85 (б, 2Н), 8,25 (Ь8, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 376 (М+Н)+.

Описанный в примере 16 метод применяли для получения следующих продуктов (с превращением ацетата в гидрохлорид для соединений в примерах 17, 19, 28 и 30).

Пример 17.

Г идрохлорид 3-{[2-(4-{4-[амино(имино) метил] фенил }-2-оксопиперазино)ацетил] амино }пропановой кислоты (СВЬ 42674)

Исходный материал - пример 2.

Выход = 88%.

¹Н^МК (200 МН/. ИМ8О-б₆): δ 2,35 (ί, 2Н), 3,25 (б8, 2Н), 3,35-3,7 (т, 4Н), 4,0 (б, 4Н), 7,0 (б, 2Н), 7,8 (б, 2Н), 8,1 (Ь8, 1Н), 8,85 (Ьб, 2Н), 9,05 (Ь8, 2Н). М8-Е8 т/ζ: 348 (М+Н)⁺.

Пример 18.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино(имино)метил]фенил }-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-3-(1,3бензодиоксол-5-ил)пропаноатацетат (СКЬ 42827)

Исходный материал - пример 3.

Выход = 68%.

¹Н^МВ (400 МН/. ИМ8О-б₆): δ 1,1 (ί, 3Н),

1,7 (8, 3Н), 2,75 (бб, 2Н), 3,5 (ί, 2Н), 3,7 (ί, 2Н), 4,0 (т, 6Н), 5,2 (ф 1Н), 6,0 (8, 2Н), 6,8 (бб, 1Н),

6,85 (б, 1Н), 6,9 (8, 1Н), 7,0 (б, 2Н), 7,75 (б, 2Н),

8,55 (б, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 496 (М+Н)⁺.

Пример 19.

Г идрохлорид 3-{ [2-(4-{4-[амино(имино) метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]амино }-3-(1,3-бензодиоксол-5-ил)пропановой кислоты (СВЬ 42788)

Исходный материал - пример 4.

Выход = 47%.

¹Н-NΜК (400 МН/. ИМ8О-б₆): δ 2,65 (ί, 2Н), 3,5 (Ь8, 2Н), 3,7 (Ь8, 2Н), 4,05 (б, 4Н), 5,2 (ф 1Н), 6,0 (8, 2Н), 6,75 (б, 1Н), 6,8 (б, 1Н), 6,9 (8, 1Н), 7,05 (б, 2Н), 7,8 (б, 2Н), 8,7 (б, 1Н), 9,0 (Ь8, 2Н), 9,1 (Ь8, 2Н), 12,3 (Ь8, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 468 (М+Н)⁺.

Пример 20.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино (имино)метил] фенил }-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-3-(пиридил)пропаноатацетат (СВЬ 42828)

Исходный материал - пример 5.

Выход = 75%.

¹Н-NΜК (400 МН/. ИМ8О-б₆): δ 1,1 (ί, 3Н),

1,75 (Ь8, 3Н), 2,9 (б, 2Н), 3,45 (Ь8, 2Н), 3,7 (Ь8, 2Н), 4,0 (т, 6Н), 5,2 (ф 1Н), 7,0 (б, 2Н), 7,4 (ί, 1Н), 7,8 (Ьб, 3Н), 8,45 (Ь8, 1Н), 8,5 (Ь8, 1Н), 8,8 (Ьб, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 453 (М+Н)⁺.

Пример 21.

3-{[2-(4-{4-[амино(имино)метил]фенил}-2оксопиперазино)ацетил] амино }-3-(пиридил)пропановая кислота ацетат (СКЬ 42799)

Исходный материал - пример 6.

Выход = 67%.

¹Н-NΜК (400 МН/. ИМ8О-б₆): δ 1,9 (8, 6Н), 2,65 (Ь8, 2Н), 3,5 (Ь8, 2Н), 3,7 (Ь8, 2Н), 3,9 (б, 1Н), 4,05 (8, 2Н), 4,2 (б, 1Н), 5,2 (Ь8, 1Н), 6,9 (б, 2Н), 7,3 (бб, 1Н), 7,7 (б, 2Н), 7,75 (б, 1Н), 8,4 (Ь8, 2Н), 8,55 (8, 1Н), 9,4 (Ьб, 1Н), 11,1 (Ь8, 2Н).

М8-Е8 т/ζ: 425 (М+Н)⁺.

Пример 22.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино (имино)метил] фенил }-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-5-фенилпентаноатацетат (СВЬ 42904)

Исходный материал - пример 7.

Выход = 70%.

¹Н-NΜК (400 МН/. ИМ8О-б₆): δ 1,15 (ί, 3Н), 1,73 (8, 3Н), 1,74 (т, 2Н), 2,45 (т, 2Н), 2,6 (т, 2Н), 3,5 (т, 2Н), 3,7 (т, 2Н), 4,0 (т, 7Н), 7,5 (б, 2Н), 7,2 (т, 3Н), 7,26 (ί, 2Н), 7,75 (б, 2Н), 8,0 (б, 1Н).

М8-Е8 т/ζ: 480 (М+Н)⁺.

Пример 23.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино (имино)метил] фенил }-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-3циклогексилпропаноатацетат (СКЕ 42932)

Исходный материал - пример 8.

Выход = 62%.

¹Н-NΜК (400 МН/. И₂О): δ 1,05 (т, 2Н),

1,25 (т, 3Н), 1,3 (ί, 3Н), 1,5 (т, 1Н), 1,75 (т,

5Н), 2,0 (8, 3Н), 2,55 (бб, 1Н), 2,8 (бб, 1Н), 3,68 (т, 2Н), 3,85 (т, 2Н), 4,2 (т, 7Н), 7,12 (б, 2Н),

7,8 (б, 2Н).

М8-Е8 т/ζ: 458 (М+Н)⁺.

Пример 24.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино(имино)метил]фенил }-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-5метилгексаноатацетат (СВЬ 42934)

Исходный материал - пример 9.

Выход = 74%.

¹Η-ΝΜΚ. (400 ΜΗζ, Ό₂Θ): δ 1,15 (ΐ, 3Η), 1,73 (8, 3Η), 1,74 (т, 2Η), 2,45 (т, 2Η), 2,6 (т, 2Η), 3,5 (т, 2Η), 3,7 (т, 2Η), 4,0 (т, 7Η), 7,05 (6, 2Η), 7,2 (т, 3Η), 7,26 (ΐ, 2Η), 7,75 (6, 2Η), 8,0(6, 1Η).

Μ8-Ε8 т/ζ: 432 (Μ+Η)⁺.

Пример 25.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино(имино)метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]амино}-4,4-диметилпентаноатацетат (СВЬ 42964)

Исходный материал - пример 10.

Выход = 74%.

¹Η-ΝΜΚ. (400 ΜΗζ, Ό₂Θ): δ 1,0 (8, 9Η), 1,35 (ΐ, 3Η), 2,05 (8, 3Η), 2,5 (66, 1Η), 2,85 (66, 1Η),

3.7 (т, 2Η), 3,85 (т, 2Η), 4,2 (т, 7Η), 7,15 (6, 2Η), 7,8 (6, 2Η). Μ8-Ε8 т/ζ: 432 (Μ+Η)⁺.

Пример 26.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино (имино) метил] фе нил }-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-4-метилпентаноатацетат (СВЬ 42966)

Исходный материал - пример 11.

Выход =100%.

¹Η-ΝΜΚ. (400 ΜΗζ, Ό₂Θ): δ 1,0 (ΐ, 6Η), 1,35 (ΐ, 3Η), 1,9 (т, 1Η), 2,0 (8, 3Η), 2,55 (66, 1Η), 2,8 (66, 1Η), 3,7 (т, 2Η), 3,8 (т, 1Η), 4,2 (т, 7Η), 7,1 (6, 2Η), 7,8 (6, 2Η). Μ8-Ε8 т/ζ: 418 (Μ+Η)⁺.

Пример 27.

Этил-3-{[2-(4-{4-[амино(имино)метил]фенил }-3-оксопиперазино)ацетил] амино }-пропаноатацетат (СВЬ 42672)

Исходный материал - пример 12.

Выход = 53%.

Ή-ΝΜΚ. (200 ΜΗζ, ΌΜ8Θ-6₆): δ 1,2 (ΐ, 3Η),

1,75 (8, 3Η), 2,5 (8, 2Η), 2,85 (8, 2Η), 3,3 (8, 4Η),

3.8 (8, 2Η), 4,05 (6, 2Η), 7,6 (6, 2Η), 7,8 (6, 2Η),

8,1 (8, 1Η).

Пример 28.

Гидрохлорид 3 -{[2-(4-{4-[амино(имино)метил]фенил}-3-оксопиперазино)ацетил]амино} пропановой кислоты (СВЬ 42675)

Исходный материал - пример 13.

Выход = 70%.

Ή-ΝΜΚ. (400 ΜΗζ, ΌΜ8Θ-6₆): 2,25 (Ь8, 2Η), 2,5 (8, 2Η), 2,8 (Ь8, 2Η), 3,1 (8, 2Η), 3,3 (т, 2Н), 3,8 (Ь8, 2Н), 7,55 (6, 2Н), 7,65 (6, 2Н), 8,2 (Ь8, 1Н), 8,9 (Ь8, 1Η). Μ8-Ε8 т/ζ: 370 (Μ+Να)⁺.

Пример 29.

Этил 3-{[2-(4-{4-[амино(имино)метил]фенил }-3-оксопиперазино)ацетил] амино }-3-(1,3бензодиоксол-5-ил)пропаноатацетат (СВЬ 42837)

Исходный материал - пример 14.

Выход = 80%.

Ή-ΝΜΚ. (400 ΜΗζ, ΌΜ8Θ-6₆): δ 1,1 (ΐ, 3Η),

1.75 (Ь8, 3Η), 2,8 (т, 4Η), 3,1 φ, 2Η), 3,3 (8, 2Η),

3.75 (Ь8, 2Η), 4,0 (д, 2Η), 5,2 (д, 1Η), 6,0 (8, 2Η),

6,75 (т, 2Η), 6,9 (8, 1Η), 7,55 (6, 2Η), 7,8 (6, 2Η),

8,45 (6, 1Η).

Μ8-Ε8 т/ζ: 496 (Μ+Η)⁺.

Пример 30.

Гидрохлорид 3-{ [2-(4-{4-[амино(имино)метил] фенил}-3 -оксопиперазино)ацетил] амино }-3(1,3-бензодиоксол-5 -ил)пропановой кислоты (СВЬ 42839)

Исходный материал - пример 15.

Выход = 76%.

¹Η-ΝΜΚ. (400 ΜΗζ, ΌΜ8Θ-6₆): δ 2,75 (т, 2Η), 3,65 (Ь8, 2Η), 4,1 (т, 6Η), 5,2 φ, 1Η), 5,95 (8, 2Η), 6,8 (т, 2Η), 7,0 (8, 1Η), 7,6 (6, 2Η), 7,9 (6, 2Η), 9,25 (8, 3Η), 9,45 (8, 2Η). Μ8-Ε8 т/ζ: 468 (Μ+Η)⁺.

Пример 31.

Этил 3-({2-[4-(4-(амино[(этоксикарбонил) имино]метил)фенил)-2-оксопиперазино]-ацетил}амино)-3-(1,3-бензодиоксол-5-ил)пропаноат (СВЬ 42960)

Препарат из примера 18 превращали в гидрохлорид добавлением 2Ν раствора соляной кислоты ИС1 с последующим фильтрованием.

К раствору полученного таким образом гидрохлорида (2,2 г, 4,1 ммоль) в 50 мл ΌΜΕ при 5°С последовательно добавляли триэтиламин (1,1 г, 11 ммоль) и этилхлороформиат (0,54 г, 5 ммоль). Перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавляли воду и этилацетат, органическую фазу промывали водой и высушивали над сульфатом натрия. После хроматографии на диоксиде кремния (этилацетат : метанол = 10:1) получали

1.3 г желтоватого твердого вещества.

Выход = 55%.

¹Η-ΝΜΚ. (400 ΜΗζ, СИС1₃): δ 1,3 (ΐ, 3Η),

1,5 (ΐ, 3Η), 2,9 (6д, 2Η), 3,75 (Ь8, 4Η), 4,2 (т, 6Η),

4.4 φ, 2Η), 5,45 (т, 1Η), 6,05 (6, 2Η), 6,9 (т, 5Η),

7,55 (6, 1Η), 8,0 (6, 2Η), 9,75 (Ь8, 1Η).

Μ8-Ε8 т/ζ: 590 (Μ+Ν)⁺.

Пример 32.

Этил-3-{[2-(4-{4-[имино (пиперидино)метил] фенил }-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-5фенилпентаноат (СВЬ 43101)

В смесь этил-3-{[2-(4-(4-цианофенил)-2оксопиперазино)ацетил] амино }-5-фенилпентаноата (промежуточного продукта В7) (3,3 г, 7,1 ммоль) с 5 мл этанола при 5°С добавляли 60 мл 4Ν раствора соляной кислоты в этилацетате. Перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 40 ч. Смесь упаривали досуха, получая желтоватое вещество.

Полученный таким образом имидат (2,1 г, 3,8 ммоль) суспендировали в 10 мл этанола и 50 мл этилацетата и туда добавляли пиперидин (2,6 г, 30,6 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 24 ч смесь фильтровали. Неочищенный продукт перекристаллизовывали из смеси этилацетата и этанола, получая 0,7 г вещества бежевого цвета.

Выход = 65%.

Ή-ΝΜΕ (400 ΜΗζ, ΌΜ8Θ-ά₆): δ 1,15 (ΐ, 3Η), 1,7 (т, 8Η), 2,5 (т, 3Η), 2,6 (т, 1Η), 3,45 (т, 1Η), 3,50 (Ъз, 4Η), 3,70 (Ьз, 4Η), 4,05 (т, 6Η),

7.1 (й, 2Η), 7,2 (т, 3Η), 7,25 (й, 2Η), 7,45 (й, 2Η),

8,15 (й, 1Η), 9,2 (Ъз, 2Η).

Μ8-Ε8 т/ζ: 548 (Μ+Η)⁺.

Описанный в примере 32 метод применяли для получения следующих продуктов.

Пример 33.

Этил-3-{[2-(4-{4-[имино(морфолино)меил] фенил }-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-5фенилпентаноат (СКЬ 43102)

Исходный материал - промежуточный продукт В7 и морфолин.

Выход = 56%.

Ή-ΝΜΕ (400 ΜΗζ, ΌΜδΘ-йЭ: δ 1,15 (ΐ, 3Η), 1,7 (т, 2Η), 2,5 (т, 3Η), 2,6 (т, 1Η), 3,50 (Ъз, 4Η), 3,70 (т, 8Η), 4,05 (т, 7Η), 7,1 (й, 2Η),

7.2 (т, 3Η), 7,25 (й, 2Η), 7,50 (й, 2Η), 8,15 (й, 1Η), 9,4 (Ъз, 2Η).

Μ8-Ε8 т/ζ: 550 (Μ+Η).⁺

Пример 34.

Г идрохлорид этил-3 -(1,3 -бензодиоксол-5ил)-3-{[2-(4-{4-[имино(пиперидино)метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]амино}пропаноата (СКЬ 43103)

Исходный материал - промежуточный продукт В3 и пиперидин.

Выход = 61%.

Ή-ΝΜΕ (400 ΜΗζ, ΌΜδΘ-йЭ: δ 1,15 (ΐ, 3Η), 1,65 (Ъз, 6Η), 2,75 (т, 2Η), 3,45 (т, 4Η),

3,55 (т, 2Η), 3,65 (Ъз, 2Η), 4,00 (т, 6Η), 5,15 (ф 1Η), 6,00 (з, 2Η), 6,8 (й, 1Η), 6,85 (й, 1Η), 6,95 (з, 1Η), 7,05 (й, 2Η), 7,45 (й, 2Η), 8,7 (й, 1Η), 9,15 (Ъз, 2Η).

Μ8-Ε8 т/ζ: 564 (Μ+Η)⁺.

Пример 35.

Г идрохлорид этил-3 -(1,3 -бензодиоксол-5ил)-3-{[2-(4-{4-[имино(морфолино)метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]амино}пропаноата (СКЬ 43104)

Исходный материал - промежуточный продукт В3 и морфолин.

Выход = 65%.

Ή-ΝΜΕ (400 ΜΗζ, ΌΜδΘ-йЭ: δ 1,15 (ΐ, 3Η), 2,75 (т, 2Η), 3,45 (т, 4Η), 3,65 (т, 4Η), 3,8 (Ъз, 4Η), 4,00 (т, 6Η), 5,15 (φ 1Η), 6,00 (з, 2Η),

6,75 (й, 1Η), 6,80 (й, 1Η), 6,90 (з, 1Η), 7,05 (й, 2Η), 7,45 (й, 2Η), 8,65 (й, 1Η), 9,30 (Ъз, 1Η), 9,35 (Ъз, 1Η).

Μ8-Ε8 т/ζ: 566 (Μ+Η)⁺.

Исследование ингибиторной активности соединений формулы I на аггрегацию тромбоцитов проводили ίη νίίτο, то есть при прямом контакте растворов этих соединений в различных концентрациях с тромбоцитами, выделенными из образцов цельной крови, взятых при стандартных условиях у лабораторных животных (морских свинок) и у здоровых людей, не принимавших никаких веществ или медикаментов, которые могли бы повлиять на свертывае мость крови. Подавление аггрегации тромбоцитов также изучали ех νίνο/νίΐτο, то есть после введения заявленных соединений морским свинкам, чтобы измерить интенсивность и продолжительность подавления аггрегации под влиянием той доли испытуемого препарата, что поглощена организмом и циркулирует в крови.

1. Фармакологические исследования ίη νίΐτο

1.1 Исследования на тромбоцитах морских свинок

Кровь отбирали путем внутрисердечной пункции у самцов морских свинок линии Оиикт-ИаП 1су (весом около 330 г) в соотношении 4,5 мл на 0,5 мл тринатриевого цитрата (концентрация водного раствора = 1,55%), чтобы полностью предупредить свертывание. Обогащенную тромбоцитами плазму (РКР) получали центрифугированием пробирок с цельной кровью 15 мин при 150хд.

Использовали объединенные образцы плазмы. Содержание тромбоцитов в таких объединенных образцах подсчитывали с помощью автоматического счетчика клеток для гематологии СоиНсг ΖΜ: при необходимости делали разведения так, чтобы концентрация тромбоцитов в плазме находилась между 200 000 и 400 000 тромбоцитов/мм³. Одновременно другие порции этих объединенных образцов использовали для получения обедненной тромбоцитами плазмы (РРР) путем центрифугирования 15 мин при 1500хд.

Кинетические исследования аггрегации тромбоцитов проводили при добавлении в РКР раствора коллагена (1 мкг/мл) с помощью аггрегометра фирмы Οποηο^ ί.’οΓροηΙίοη (490-Ό1 или 560 У8), в котором применяется оптическая детекция появления тромба.

Определение концентрации 50%-го ингибирования (1С₅₀) проводили, добавляя фиксированный объем растворителя (контроль) или соединений при возрастающих концентрациях: 1,5х10^-8 М, 7х10^-8 М, 1,5х10^-7 М, 3х10^-7 Μ, 7х10^-7М, 1,5х10^-6 Μ и 7х10^-5 М в образцы объединенной РКР. Ингибирование аггрегации измеряли через 3 мин после добавления при 37°С с перемешиванием.

1.2 Исследование на тромбоцитах человека

Отбирали венозную кровь в группе из 10 здоровых лиц одинакового возраста путем прокола вены в локтевом сгибе и собирали в стеклянные пробирки, содержащие 0,129 М раствор цитрата натрия в воде (1 объем цитрата на 9 объемов крови). Каждую пробирку затем центрифугировали, первый раз 15 мин при 100хд и 20°С, получая обогащенную тромбоцитами плазму (РКР); после удаления РКР пробирку еще раз центрифугировали 15 мин при 2000хд и при этом получали обедненную тромбоцитами плазму (РРР).

В каждом из образцов РКР подсчитывали тромбоциты с помощью счетчика клеток ί.'οιι11θΓ

ΖΜ. Затем в них изучали степень ингибирования аггрегации тромбоцитов, вызванной добавлением раствора коллагена в глюкозе Сйготораг Реадеп! фирмы Сои11гошс5 (при концентрации 5 мкг/мл), в зависимости от возрастающих концентраций каждого соединения в пределах от 10^-8 до 10^-5 М (примеры концентраций: 10^-8М, 5х10^-7 М, 3х10^-7 М, 10^-7 М, 8х10^-6 М, 4х10^-6М, 2х10^-6 М, 10^-6 М, 5х10^-5 М, 10^-5 М). Все соединения заранее растворяли в воде при концентрации 10^-3М. Делали контрольную пробу для проверки возможного влияния растворителей (контрольное значение) на аггрегацию тромбоцитов в каждой серии измерений, которые проводились через 3 мин после добавления при 37°С с перемешиванием.

По измерениям процента ингибирования аггрегации тромбоцитов при каждой концентрации рассчитывали концентрации 50%-го ингибирования (1С₅₀) для каждого соединения.

2. Фармакологические исследования ех νίνο/νίίτο на морских свинках

Оценка активности соединений против аггрегации тромбоцитов проводилась на тех же морских свинках, что были указаны выше (линии Пипкш-НаШеу). Каждый препарат в дозах от 150 мг/кг до 10 мг/кг и каждый растворитель (5 мл/кг) вводили через желудок за 1,2,4,6,8 или 12 ч перед взятием крови у морских свинок, не получавших пищи накануне. Животных разбивали на соответствующие группы случайным образом.

Брали образцы крови и обрабатывали в тех же условиях, что описаны выше для опытов ίη νίίτο.

Полученные результаты по ингибированию аггрегации тромбоцитов по каждой из исследованных концентраций дают возможность рассчитать концентрации 1С₅₀ для каждого препарата, а также кинетику эффекта ингибирования и продолжительность его действия.

Результаты опытов по ингибированию вызванной коллагеном аггрегации тромбоцитов представлены в нижеследующей таблице.

Пример	СКЬ со- единения	1С50 (Μ) ιη νίίτο	Ингибирование в % у морских свинок ех νίνο в дозе
150	мг/кг
		Морские свинки	Человек
				1 ч	2 ч
1	42656	>10'³	-	72	73
16	42673	3,8 х 10'⁶	-	75	73
17	42674	4,8 х 10'⁶	5,2 х 10'⁶	43	38
27	42672	3,8 х 10'⁵	-	8	9
28	42675	1,6 х 10'⁵	1,4х10'⁶	28	23
5	42770	1,0 х 10'⁴	-	72	75
19	42788	1,5 х 10'⁷	3,4 х 10'⁷	69	78
3	42789	НО	НО	72	69
21	42799	1,6 х 10'⁷	8,6 х 10'⁷	78	79
18	42827	2,0 х 10'⁷	8,1 х 10'⁵	70	69
20	42828	6,3 х 10'⁷	2,8 х 10'⁵	65	64
30	42839	1,5 х 10'⁵	1,2х10'⁶	14	17
22	42904	5,1 х 10'⁷	7,1 х 10'⁵	-	-

23	42932	4,6 х 10'⁵
24	42934	4,6 х 10'⁶
25	42964	4,4 х 10^-1
26	42966	4,5 х 10'⁶
32	43101	2,4 х 10'⁶
33	43102	6,5 х 10'⁷
34	43103	9,9 х 10'⁷
35	43104	4,7 х 10'⁷

НО: невозможно определить (нерастворимый препарат) -: данные отсутствуют

Некоторые соединения проявляют ингибирование аггрегации тромбоцитов при весьма низких дозах. Таковы, к примеру, СРБ 42789, СКБ 42788 и СРБ 42903, у которых подавление аггрегации ех νίνο у морских свинок, получавших дозу в 10 мг/кг перорально (через желудок) за 1 и 2 ч до измерения аггрегации, составило 69 и 72% (СКЬ 42789), 57 и 24% (СКЬ 42788) или 72% (за 1 ч для СКЬ 42903), соответственно.

Предметом настоящего изобретения поэтому также являются фармацевтические композиции, включающие эффективное количество соединения формулы I или его соли фармацевтически приемлемых кислот.

Предметом изобретения, в частности, являются соединения, ингибирующие аггрегацию тромбоцитов крови и включающие эффективное количество одного из этих соединений.

Предметом изобретения также являются:

- способ ингибирования связывания фибриногена с тромбоцитами крови у млекопитающих, включающий введение млекопитающему эффективного количества одного из этих соединений,

- способ ингибирования аггрегации тромбоцитов крови у пациентов, включающий введение эффективного количества одного из этих соединений пациенту,

- способ лечения тромба у пациентов, включающий введение пациенту эффективного количества одного из этих соединений,

- способ профилактики тромбоза у пациентов, включающий введение пациенту эффективного количества одного из этих соединений.

Соединения формулы I могут применяться, в частности, в следующих областях:

1) Острая профилактика артериального тромбоза при проведении операций на сердце (коронарное шунтирование) и кардиологических процедур (транслюминальная перкутанная (подкожная) ангиопластия, эндартэктомия, вставка растяжек), при этом соединения применяются наряду с признанными средствами профилактики артериального тромбоза; пероральное введение ацетилсалициловой кислоты начинают до операции (150-500 мг/день перорально) и продолжают после нее; внутривенную инфузию нефракционированного гепарина начинают во время операции и продолжают еще 48-96 ч. Соединения формулы I можно вводить либо перорально (0,5-1,5 мг/кг) вместе с приемом аспирина, либо путем внутривенной инфузии (от 0,25 до 1 мг/кг/сутки) вместе с лекарством или без него. Через 48 ч, если соединение вводилось внутривенно, его заменяют на пероральное введение (от 0,25 до 10 мг/кг за два приема с промежутком в 12 ч), чтобы облегчить больничный уход и последующее амбулаторное лечение.

2) Вторичная профилактика артериального тромбоза у пациентов, подверженных приступам стенокардии или инфаркта миокарда; при этом высокая биодоступность заявленных соединений, то есть возможность быстрого достижения эффективных концентраций в крови, способных ингибировать связывание фибриногена с тромбоцитами, дает возможность перорального применения заявленных лекарств именно в тот период, когда пациенты подвергаются риску артериального тромбоза. В таких ситуациях эти соединения предпочтительно вводить перорально за 1-3 приема в день, причем вследствие их высокой биодоступности и продолжительности действия дозу выбирают в пределах от 0,5 до 10 мг/кг.

В состав фармацевтических композиций, включающих одно из действующих начал, описанных в настоящей заявке на патент, активное вещество входит либо в виде основания, либо в виде фармацевтически приемлемой соли, или же в виде предшественника с одной или несколькими защитными группами, которые затем отщепляются ίη νίνο после перорального приема. В состав этих фармацевтических композиций входят вспомогательные компоненты и растворители, известные специалистам в этой области. В их число входит целый ряд фармацевтических средств, признанных в фармакопее. В качестве примера для получения лекарственных форм, предназначенных для перорального введения, можно указать крахмал, стеарат магния, тальк, желатин, агар, пектин, лактозу, полиэтиленгликоли и т.п. Могут применяться следующие лекарственные формы: разрушаемые или неразрушаемые таблетки, гелевые капсулы, пастилки, гранулы, порошки. В зависимости от характеристики патологии и морфологии пациента ежедневная пероральная доза колеблется от 0,02 до 50 мг/кг/день, причем её разбивают на 1-3 приема с равномерными промежутками для того, чтобы поддерживать эффективный уровень занятости рецепторов Ср ПЬ/Ша на тромбоцитах. Что касается внутривенного введения, то лекарственные формы, предназначенные для острой фазы лечения, выбирают таким образом, чтобы иметь возможность подбирать дозу индивидуально на основе максимального ингибирования аггрегации тромбоцитов в зависимости от ближайших последствий операции. В этом плане лиофилизаты и готовые к употреблению растворы для инфузии дают возможность выбирать дозировку индивидуально в пределах от 0,01 до 20 мг/кг/день.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение общей формулы I где В! означает водород, С1-С₄алкил или фенил(С1-С4)алкил;

В₂ означает водород, гидроксил или защитную группу для амидиногруппы;

В₃ означает водород либо С1-С₅алкил, С₃С12моно- или бициклический циклоалкил, С2С4алкенил или С2-С4алкинил, причем эти группы необязательно могут быть замещены либо галогенами, либо гидроксильной группой, моно-, би- или трициклическую С₆-С1₄арильную группу, гетероарильную группу, выбранную из пиридила, тиенила, фурила, хинолила, бензодиоксанила, бензодиоксолила, бензотиенила, бензофурила и пиразинила, фенил-(С1-С₄)алкил или нафтил(С1-С4)алкил, или пиперонил;

В4 и В5 означают, независимо друг от друга, водород или С1-С5алкил, либо же они вместе с атомом азота образуют пиперидил или морфолинил;

причем арил и гетероарил необязательно могут быть замещены одной или несколькими группами, выбранными независимо из галогенов, С1-С4алкила, трифторометила, С1-С4алкилтио, С1-С4алкилсульфонила, С1-С4алкилокси, нитрогруппы и групп -СООВ, -СН₂СООВ и -ОСН₂-СООН, где В означает С1-С₄алкил, и оксогруппа находится в положении 2 или 3 пиперазина;

или их соли фармацевтически приемлемых кислот.
2. Соединение по п.1, выбранное из этил-3-{[2-(4-{4-[амино(гидроксиимино) метил] фенил }-2-оксопиперазино)ацетил] амино }-3-(1,3-бензодиоксол-5-ил)пропаноата, этил-3-{[2-(4-{4-[амино(гидроксиимино) метил]фенил}-2-оксопиперазино)ацетил]амино }-5-фенилпентаноата,
3-{[2-(4-{4-[амино(имино)метил]фенил}-2оксопиперазино)ацетил] амино }-3-(1,3-бензодиоксол-5-ил)пропановой кислоты или их солей фармацевтически приемлемых кислот.

3. Способ получения соединений формулы I по п.1 с помощью

а) реакции между кислотой формулы II где Ζ означает предшественник группы —N

РЦ-Ν и амином формулы III

О где В'₁ означает С₁-С₄алкил или фенил-(С₁С₄)алкил, с получением соединения формулы IV

Ь) превращения группы Ζ в группу

с) при необходимости, превращения группы В'₁ в атом водорода.
4. Терапевтическая композиция, включаю-
5. Применение соединения по п.1 или 2 для приготовления антитромботического средства.
6. Способ ингибирования связывания фибриногена с тромбоцитами крови у млекопитающих, включающий введение млекопитающему эффективного количества соединения по п.1 или

2.
7. Способ ингибирования аггрегации тромбоцитов крови у пациентов, включающий введение пациенту эффективного количества соединения по п.1 или 2.
8. Способ лечения тромбоза у пациентов, включающий введение пациенту эффективного количества соединения по п.1 или 2.
9. Способ профилактики тромбоза у пациентов, включающий введение пациенту эффективного количества соединения по п.1 или 2.

щая в качестве активного начала соединение, определенное в п.1 или 2.