EA001911B1 - Способы увеличения продуцирования окиси азота - Google Patents

Способы увеличения продуцирования окиси азота Download PDF

Info

Publication number
EA001911B1
EA001911B1 EA199801023A EA199801023A EA001911B1 EA 001911 B1 EA001911 B1 EA 001911B1 EA 199801023 A EA199801023 A EA 199801023A EA 199801023 A EA199801023 A EA 199801023A EA 001911 B1 EA001911 B1 EA 001911B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
formula
compound
nitric oxide
cells
endothelial
Prior art date
Application number
EA199801023A
Other languages
English (en)
Other versions
EA199801023A1 (ru
Inventor
Джай П. Сингх
Дэнни Л. Вуд
Original Assignee
Эли Лилли Энд Компани
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эли Лилли Энд Компани filed Critical Эли Лилли Энд Компани
Publication of EA199801023A1 publication Critical patent/EA199801023A1/ru
Publication of EA001911B1 publication Critical patent/EA001911B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4535—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a heterocyclic ring having sulfur as a ring hetero atom, e.g. pizotifen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/4025—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. cromakalim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Inorganic Compounds Of Heavy Metals (AREA)

Abstract

Рассматриваемое изобретение предлагает способы увеличения концентрации окиси азота (NO) в васкулярных эндотелиальных клетках, включающие введение соединения формулы Iили его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.

Description

Данная заявка относится к области органической химии и фармакологии и предлагает соединения и способы, позволяющие увеличить продуцирование эндотелиальной окиси азота (N0); особенно в васкулярных клетках эндотелия.
Обоснование изобретения
Окись азота является регуляторной молекулой, играющей жизненно важную роль в физиологии сердечно-сосудистой, кишечной, центральной нервной и иммунной систем. Окись азота синтезируется из Б-аргинина посредством группы ферментов, известных как ΝΟ-синтетаза (N08). Особенно подходящей для данного изобретения является кальций-зависимая N08, продуцируемая в васкулярных эндотелиальных клетках, известная как еNΟ8. В последнее время проведены многочисленные исследования, которые связали регулирование еNΟ8 гена с гормоном эстрогена. Показано, что эстроген полностью контролирует продуцирование еN08 тРНК и, следовательно, синтез еN08 в эндотелиальных клетках.
Это увеличение количества еN08 позволяет эндотелиальным клеткам продуцировать больше N0 в ответ на соответствующий стимул в сосудистой системе. В сосудистой сети N0 эндотелиального происхождения оказывает ряд воздействий, среди которых ингибирование агрегации тромбоцитов, адгезия воспалительных клеток и пролиферация клеток гладкой мышцы. N0 эндотелиального происхождения является важным регулятором сосудистого тонуса. Зависящая от кровотока дилатация (обычно используемый индекс эндотелиальных функций) в значительной мере опосредована N0.
Механизм регулирования сосудистого тонуса посредством N0 инициируется посредством воздействия стимуляторов, таких как ацетилхолин, брадикинин, стресс сдвига (Шеаг) на эндотелиальные выстилающие клетки. Эндотелиальные клетки в ответ реагируют продуцированием N0 из Б-аргинина посредством еN08. Продуцированный N0 покидает эндотелиальные клетки и стимулирует активность гуанилатциклазы в примыкающих клетках гладкой мышцы. Активация гуанилатциклазы повышает уровень сОМР и заставляет релаксировать гладкие клетки, таким образом, расширяя сосуд и увеличивая кровоток. Для дополнительной информации, см.: Мопсаба е! а1., №\ν Епд. 1. Меб., 329, рр. 2002-2012 (1993) и Уа11апсе, е1. а1., 1. Коу1. Со11. Рйу81с1ап Бопбоп, 28, рр. 209-219 (1994).
Пониженная генерация эндотелиального N0 может привести к ослабленной вазодилатации, аномальному вазоспазму, повышенной агрегации тромбоцитов и повышенной адгезии и инфильтрации воспалительных клеток. Снижение эндотелиального N0 и эндотелиальной функции связаны с факторами риска для заболеваний коронарной артерии, включающими курение, гиперхолестеринемию, гомоцистеинурию и диабет. Изменение ΝΟ-модулированной активности в коронарных артериях может способствовать острому коронарному синдрому, приводящему к инфаркту миокарда. Изменение системы эндотелиального N0 и являющаяся его результатом вазоконстрикция влекут за собой усиливающееся разрушение нейронов в случаях церебральной ишемии, таких как внезапный приступ. Кроме того, последние исследования показали, что эндотелиальный N0 опосредует чувствительность сосудов к инсулину, таким образом, усиленное продуцирование N0 может быть полезно в лечении влияния диабета на сосуды.
Вообще, существует масса доказательств, как экспериментальных, так и клинических, которые указывают на то, что возрастающие уровни N0 в сосудистой сети благотворны во многих патологических состояниях, таких как диабет, внезапный приступ, атеросклероз и гипертензия.
Современная терапия с целью повышения N0 уровней в сосудистой системе может заключаться либо во введении высоких доз Баргинина (еNΟ8-субстрат), либо соединений, таких как нитроглицерин или нитропруссид натрия, метаболически высвобождающих N0. Хотя такая терапия может быть эффективна, для каждой из них определены нежелательные побочные действия. Вдобавок, их недостатком является то, что они не могут поддерживать замедленное высвобождение N0 ввиду быстрого вымывания из организма. Было бы замечательным достижением, если бы новая терапия оказалась способной увеличивать концентрации N0 в сосудистой системе.
Краткое описание изобретения
Данное изобретение предлагает способы увеличения продуцирования N0 эндотелиального происхождения, включающие введение пациенту эффективного количества соединения формулы I,
или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Подробное описание изобретения
Рассматриваемое изобретение связано с открытием того, что выбранная группа 2арилбензо[Ь]тиофенов (соединений формулы I) полезна для увеличения еN08 и концентрации N0 эндотелиального происхождения.
Общие термины, используемые для описания указанных здесь соединений, имеют обычные смысловые значения. К примеру, С1-С4алкил обозначает линейные или разветвленные алифатические цепи с 1-4 углеродными атома3 ми, включающие метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил и тому подобные.
Термин замещенный фенил относится к фенильной группе с одним или двумя заместителями, которые выбирают из группы, включающей С1-С4алкил, С1-С4алкокси, гидрокси, нитро, хлор, фтор или три(хлор или фтор)метил. О(С1-С4алкил) обозначает С1-С4 алкильную группу, присоединенную через кислородный мостик, такую как метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси и тому подобные.
Термин фармацевтически приемлемая соль относится к кислотной, либо основной аддитивной солям, про которые известно, что они не токсичны и обычно используются согласно фармацевтической литературе. Обычно применяемые кислотные аддитивные соли включают: неорганические соли, образующиеся при добавлении серной кислоты, азотной кислоты, хлористо-водородной кислоты, бромистоводородной кислоты, фосфорной кислоты, фосфористой кислоты и тому подобных; или органические соли, образующиеся при добавлении уксусной кислоты, муравьиной кислоты, бензойной кислоты, лимонной кислоты, метансульфокислоты и тому подобных. Обычно используемые основные аддитивные соли включают соли, образованные щелочными или щелочно-земельными гидроокисями, гидроокисью аммония, алкил-или ароматическими аминами и тому подобными. Предпочтительная соль по данному изобретению должна быть хлористо-водородной солью.
Фраза ингибирование физиологических состояний, связанных с недостатком окиси азота или с потребностью в окиси азота (N0) включает предотвращение, предупреждение, сдерживание и замедление, прекращение или обращение развития заболевания, тяжести состояния или возникающего симптома или влияния указанного физиологического состояния. Такие физиологические состояния включают упомянутые в данной заявке, такие как патологическая агрегация тромбоцитов, патологическая вазоконстрикция (сужение сосудов), влияние на сосуды диабета, внезапного приступа, атеросклероза и аномального вазоспазма.
Термин сольват обозначает агрегат, который включает одну или более из молекул растворенного вещества, такого как соединение формулы I, с одним или более молекулами подходящего растворителя.
Гидрохлорид ралоксифена, который является предпочтительным вариантом воплощения данного изобретения, является соединением формулы I, где каждый из заместителей В и В1 обозначает гидроксил; В2 обозначает 1пиперидинил, и представляет собой его хлористоводородную соль. Ралоксифеном называется: гидрохлорид [2-(4-гидроксифенил)-6-гидроксибензо[Ь]тиен-3 -ил] [4-[2-(1 -пиперидинил)этокси] фенил]метанона.
Обычно в рецептурный состав включают, по меньшей мере, одно соединение формулы I и общепринятые эксципиенты, разбавители или носители и прессуют таблетки или получают составы в виде эликсиров или растворов для удобного перорального введения или введения внутримышечным или внутривенным способами. Соединения могут быть введены чрескожно и могут быть составлены в виде стандартных форм замедленного высвобождения и тому подобных.
Соединения, используемые в способах по настоящему изобретению, могут быть получены существующими способами, такими как способы, подробно описанные в патентах США №№ 4.133.814, 4.418.068, 4.380.635 и 5.393.763, включенных в данное описание в качестве литературных ссылок. В основном, способы исходят из бензо[Ь]тиофена, имеющего 6-гидроксильную группу и 2-(4-гидроксифенил)-группу. Исходные соединения защищают, ацилируют и снимают защиту, что приводит к соединениям формулы I. Примеры получения таких соединений приведены в вышеуказанных патентах США.
Используемые по способам данного изобретения соединения образуют фармацевтически приемлемые кислотные и основные аддитивные соли с широким рядом органических и неорганических кислот и оснований и включают физиологически приемлемые соли, часто используемые в фармацевтической химии. Такие соли также являются частью данного изобретения. Характерные неорганические кислоты, используемые для получения таких солей, включают хлористо-водородную, бромистоводородную, иодисто-водородную, азотную, серную, фосфорную, гипофосфорную и тому подобные кислоты. Могут быть также использованы соли, полученные из органических кислот, таких как алифатические моно- и дикарбоновые кислоты, фенилзамещенные алкановые кислоты, алифатические и ароматические сульфокислоты. Такие фармацевтически приемлемые соли таким образом включают ацетат, фенилацетат, трифторацетат, акрилат, аскорбат, бензоат, хлорбензоат, динитробензоат, гидроксибензоат, метоксибензоат, метилбензоат, оацетоксибензоат, нафталин-2-бензоат, бромид, изобутират, фенилбутират, β-гидроксибутират, бутин-1,4-диоат, гексин-1,4-диоат, капрат, каприлат, хлорид, циннамат, цитрат, формиат, фумарат, гликолят, гептаноат, гиппурат, лактат, малат, малеат, гидроксималеат, малонат, манделат, мезилат, никотинат, изоникотинат, нитрат, оксалат, фталат, тетрафталат, фосфат, вторичный кислый фосфат, первичный кислый фосфатметафосфат, пирофосфат, пропиолат, пропионат, фенилпропионат, салицилат, себацинат, сукцинат, суберат, сульфат, бисульфат, пиросульфат, сульфит, бисульфит, сульфонат, бензолсульфонат, п-бромфенилсульфонат, хлорбен5 золсульфонат, этансульфонат, 2-гидроксиэтансульфонат, метансульфонат, нафталин-1-сульфонат, нафталин-2-сульфонат, п-толуолсульфонат, ксилолсульфонат, тартрат и тому подобные. Предпочтительной солью является хлористо-водородная соль.
Фармацевтически приемлемые кислотноаддитивные соли обычно получают по реакции соединения формулы I с эквимолярным или избыточным количеством кислоты. Реагенты обычно смешивают во взаимном растворителе, таком как диэтиловый эфир или бензол. Соль обычно осаждается из раствора за период от одного часа до десяти дней и может быть выделена фильтрованием или растворитель может быть удален общепринятыми способами (например, отпариванием).
Термин эффективное количество, как использован здесь, означает количество соединения формулы I, способное увеличивать концентрацию N0 эндотелиального происхождения у пациента, нуждающегося в таком лечении. Пациенты, нуждающиеся в таком лечении, включают, не ограничиваясь перечисленным, больных, страдающих сужением сосудов или патологической агрегацией тромбоцитов в результате ухудшения состояния эндотелиальных N0 регуляторных проводящих путей факторами риска при коронарном заболевании, диабете и тому подобном. Как представляется в связи с данным изобретением, соединение формулы I может быть полезно в подавлении, улучшении, восстановлении, ограничении или предупреждении патологических последствий, обусловленных ухудшением состояния эндотелиальных N0 регуляторных проводящих путей.
Конкретная доза вводимого по данному изобретению соединения будет, конечно, определяться конкретными обстоятельствами, сопровождающими случай заболевания, включающими, к примеру, вводимое соединение, способ введения, состояние пациента и требующую лечения патологию. Типичная суточная доза должна содержать нетоксичный уровень дозировки, приблизительно от 0,1 мг до 1000 мг/день соединения по данному изобретению, а более конкретно, приблизительно от 15 мг до 80 мг/день при ежедневном приеме от одного до трех раз, или так часто, как требуется для эффективного лечения.
Вдобавок, соединения формулы I могут быть использованы конкурентно или последовательно с другими агентами, которые взаимодействуют с эндотелиальными N0 проводящими путями, например, с нитроглицерином, нитропруссидом натрия, Ь-аргинином и тому подобными.
Под фармацевтически приемлемым составом подразумевается, что носитель, разбавитель, эксципиенты и соль должны быть совместимы с активным ингредиентом (соедине ние формулы I) состава и не должны быть вредными для реципиента.
Фармацевтические составы могут быть получены известными в соответствующей области техники методами. К примеру, соединения по данному изобретению могут быть составлены в композиции с общепринятыми эксципиентами, разбавителями или носителями и сформованы в таблетки, капсулы и тому подобное. Примеры подходящих для таких составов эксципиентов, разбавителей и носителей, включают следующие: наполнители и заменители, такие как крахмал, сахара, маннитол и кремневые производные; связывающие агенты, такие как карбоксиметилцеллюлоза и другие производные целлюлозы, альгинаты, желатин и поливинилпирролидон; увлажняющие средства, такие как глицерин; дезинтегрирующие средства, такие как агар-агар, карбонат кальция и бикарбонат натрия; средства для замедления растворения, такие как парафин; ресорбционные катализаторы, такие как соединения четвертичного аммония; поверхностно-активные вещества, такие как цетиловый спирт, моностеарат глицерина; адсорбционные носители, такие как каолин и бентонир, и смазывающие вещества, такие как тальк, стеарат кальция и магния и твердые полиэтиленгликоли. Конечными фармацевтическими формами могут быть следующие: пилюли, таблетки, порошки, лепешки, сиропы, аэрозоли, саше, облатки, эликсиры, суспензии, эмульсии, мази, суппозитории, стерильные растворы для инъекций или стерильно упакованные порошки, в зависимости от типа используемого эксципиента.
Вдобавок, соединения по данному изобретению хорошо подходят для составления стандартных форм замедленного высвобождения. Фармацевтические составы могут быть также так составлены, что они будут высвобождать активный ингредиент только или предпочтительно в конкретном отделе желудочнокишечного тракта, возможно в течение некоторого периода времени. Такие составы должны включать покрытия, оболочки или защитные матрицы, которые могут быть изготовлены из полимерных материалов или парафинов.
Последующие составы приведены в целях иллюстрации и ни в коей мере не могут рассматриваться как ограничивающие. Общее количество активных ингредиентов в таких составах находится в пределах от 0,1 до 99,9% от веса состава. Термин активный ингредиент обозначает соединение формулы I или его соль или сольват.
Технологии приготовления лекарственных средств
Состав 1. Желатиновые капсулы
Твердые желатиновые капсулы получают, используя следующие ингредиенты:
Ингредиент Количество (мг/капсула) Активный ингредиент 0,1-1000
Крахмал, ΝΡ*-10-650
Крахмал сыпучий, порошок0-650
Силиконовая жидкость
350 сантистокс0-15 * ΝΕ-Национальная Фармакопея США
Ингредиенты смешивают, пропускают через сито № 45 меш. США и распределяют по твердым желатиновым капсулам.
Вышеуказанный состав может быть изменен согласно предложенным приемлемым вариантам.
Таблеточный состав получают, используя следующие ингредиенты:
Состав 2. Таблетки
Ингредиент Количество (мг/таблетка) Активный ингредиент 2,5-1000
Целлюлоза, микрокристаллическая 200-650
Двуокись кремния, тонкоизмельченная 10-650
Стеариновая кислота 5-15
Компоненты смешивают и прессуют, формуя таблетки. Альтернативно, таблетки, каждая из которых содержит 2,5-1000 мг активного ингредиента, получают следующим образом:
Состав 3. Таблетки
Ингредиент Количество (мг/таблетка)
Активный ингредиент 25-1000
Крахмал 45
Целлюлоза, микрокристаллическая 35
Поливинилпирролидон
(в виде 10 % раствора в воде) 4
Натрийкарбоксиметилцеллюлоза 4,5
Стеарат магния 0,5
Тальк 1
Активный ингредиент, крахмал и целлюлозу пропускают через сито № 45 меш. США и тщательно перемешивают. Раствор поливинилпирролидона смешивают с полученным порошком и затем пропускают через сито № 14 меш. США. Полученные таким образом гранулы сушат при 50-60°С и пропускают через сито № 18 меш. США. Затем к гранулам добавляют натрийкарбоксиметилкрахмал, стеарат магния и тальк, предварительно пропущенные через сито № 60 меш. США, и после перемешивания прессуют на таблеточной машине, получая таблетки.
Суспензии, каждая из которых содержит 0,1-1000 мг лекарственного препарата на 5 млдозу, получают следующим образом:
Состав 4. Суспензии
Ингредиент Количество
Активный ингредиент (мг/5 мл) 0,1-1000 мг
Натрий-карбоксиметилцеллюлоза 50 мг
Сироп 1,25 мг
Раствор бензойной кислоты 0,10 мл
Отдушка §.ν.
Краситель §.ν.
Очищенная вода до 5 мл
Лекарственное вещество пропускают через сито № 45 меш. США и смешивают с натрийкарбоксиметилцеллюлозой и сиропом до получения однородной пасты. Раствор бензойной кислоты, отдушку и краситель разбавляют некоторым количеством воды и добавляют при перемешивании. Затем добавляют воду в количестве, достаточном для получения требуемого объема.
Получают аэрозольный раствор, содержащий следующие ингредиенты:
Состав 5. Аэрозоль
Ингредиент
Активный ингредиент
Этанол
Пропеллент 22 (Хлордифторметан)
Количество (вес.%) 0,25 25,75 70,00
Активный ингредиент смешивают с этанолом и смесь добавляют к порции пропеллента 22, охлажденного до 30°С, и переносят в наполняющее устройство. Затем требуемым количеством наполняют контейнер из нержавеющей стали и разбавляют оставшимся пропеллентом. После чего контейнер снабжают запирающим клапаном.
Суппозитории получают следующим образом:
Состав 6. Суппозитории
Ингредиент Количество (мг/суппозиторий) Активный ингредиент 250
Глицериды насыщенных жирных кислот 2.000
Активный ингредиент пропускают через сито № 60 меш. США и суспендируют в глицеридах насыщенных жирных кислот, предварительно расплавленных с применением минимального необходимого нагрева. Затем смесь выливают в матрицу для суппозиториев с номинальной емкостью 2 г и дают охладиться.
Внутривенный состав получают следующим образом:
Состав 7. Внутривенный раствор
Ингредиент Количество
Активный ингредиент 50 мг
Изотонический раствор 1.000 мл
Раствор указанных выше ингредиентов вводят пациенту внутривенно со скоростью порядка 1 мл в минуту.
Методика испытаний
В качестве доказательства полезности соединений по настоящему изобретению для повышения концентрации N0 в эндотелиальной ткани используются следующие тесты.
Культуры клеток
Криогенно законсервированные(сохраненные) единичные донорские человеческие эндотелиальные клетки пупочной вены (НИУЕС) закупают у С1опс0с5 Сотротайои, 8ап Όίедо СА. Эти клетки определяются С1опс0с5. как 1° (клетки первоначального пассажа). Клетки сохраняют в жидком азоте и для каждого эксперимента берут свежие аликвоты. Клетки размораживают и помещают в Т-75-колбы с 75 мл среды. Для всех НИУЕС культур, все лабораторные образцы (консервирование) покрывают 0.2 % желатином (81дша Сйеш1са1 Со) в М199среде (С1Ьсо) в течение двадцати минут при 37°С. Клетки выращивают в не содержащем фенол красный М199. с 10% сыворотки плода коровы (С1Ьсо). 50 мкг/мл добавки для эндотелиального клеточного роста (СоПаЬотайуе Вюс11епнса1 РтобисЦ. ВебГогб МА). 100 мкг/мл свиного гепарина (С1Ьсо). 10 ед/мл пенициллина, 10 мкг/мл стрептомицина и 0.2 мМ Ь-глутамина при 37°С и 5% С02. Когда клетки 2° культуры достигают 70-90% слияния, их разделяют 1:3 в покрытые желатином Т-75-колбах с 15 мл среды, получая клетки 3° культуры. После того, как эти культуры достигнут 70-90% слияния (обычно через 3-4 дня). эти клетки культуры 4° разделяют 1:3 в покрытые 12-ячеечные пластины в 1 мл среды. Все эксперименты проводят с этими клетками четвертого пассажа. Через 72 ч клетки сливают и начинают лекарственную обработку. Старые среды отсасывают и добавляют 1 мл среды для испытуемого лекарства с лекарственным средством (15 % сыворотки мерина (Сеш1ш ВюртобисЦ. Са1аЬа§а8 Са, 10 ед/мл пеницилина, 10 мкг/мл стрептомицина и 0.2 мМ Ьглутамина). Основные растворы испытуемых соединений формулы I или 17-β-эстрадиола готовят при 10 мМ в ДМСО. Клетки обрабатывают лекарственным средством в течение 48 ч при 37°С.
Индукция зависящего от окиси азота сСМР
Три пластины (один опыт) вынимают из инкубатора и помещают на бумажное полотенце для предупреждения охлаждения. С одной пластины к этому времени удаляют среду и добавляют 1 мл теплого НВ 88 (С1Ьсо). Этот НВ 8 8 удаляют и заменяют 0.5 мл равновесного буфе ра +/- 200 мкл Ь-ΝΑΜΕ (метиловый эфир Νнитро-Ь-аргинина, 81дша). Равновесный буфер состоит из НВ88. 10 мМ НЕРЕ8. 1.2 мМ СаС12. 0.6 мМ Мд804 и 0.5 мМ изобутилметилксантина (1ВМХ) и 10 мкМ Ь-аргинина, который добавляют свежим к каждому основному раствору. 1ВМХ готовят в виде 200 мМ основного раствора в ДМСО при 37°С. Клеткам дают уравновеситься в течение 30 мин при 37°С в 5% СО2. После инкубации добавляют в течение 10 мин 0.5 мл стимулирующего буфера со стимулятором. Стимулирующий буфер для контролей состоит из равновесного буфера плюс указанный стимулятор; контролями являются: 1) негативный контроль, 2) позитивный контроль, 1 мМ нитропруссид натрия (81дша). 3) 1 мкМ А-23187 (кальциевый ионофор) (81дша). 4) 1 мкМ А23187 и 200 мкМ Ь-Ν АМЕ Эта контрольная группа демонстрирует, что обнаруженные в этом испытании эффекты (сСМР увеличивается). обусловлены исключительно тем, что N0 продуцируется в эндотелиальных клетках. Испытуемые клетки, обработанные соединениями формулы I. стимулируют с помощью 1 мкМ А23187. Через 10 мин буферы удаляют и добавляют 200 мкл 0.01 н НС1, и сСМР экстрагируют, встряхивая клетки в течение 30 мин при 4°С. Каждую 200-мл аликвоту помещают в пробирку, содержащую 2 мкл 1 н №10Н. Образцы замораживают при -20°С для хранения. К каждой ячейке пластины добавляют 250 мкл 0.5% 8Ό8 в 0.1 н №10Н для солюбилизации прикрепленных клеток. Пластины заворачивают в пластиковую упаковку и замораживают при -20°С для последующего анализа на белок ВСА методом (Р1егсе Сйеш1са1 Со.). Среднее общее количество белка в мг определяют для всех ячеек в эксперименте и используют для нормализации содержания сСМР. Содержание сСМР определяют ферментативным иммуноанализом (Ашегайаш Со.. №N.226) по промышленным инструкциям для методики ацетилирования. Испытания проводят согласно инструкциям, за тем исключением, что ацетилирование 200 мкл-образцов выполняют с 20 мкл реагента вместо 100 мкл для 1 мл образцов. Испытания количественно оценивают на спектрометре Тйегшошах при 450 нМ.
Позитивный контроль 17-β-эстрадиол демонстрирует ожидаемое увеличение количества зависящего от N0 сСМР. Установлено, что соединения формулы I повышают концентрацию N0 и индуцируют сСМР в этих эндотелиальных клетках. В таблице 1 показано повышение уровня зависящего от N0 сСМР для ралоксифенгидрохлорида.

Claims (4)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Способ увеличения продуцирования окиси азота (N0) в васкулярных эндотелиальных клетках нуждающегося в таком лечении пациента, включающий введение указанному пациенту соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
  2. 2. Способ по п.1, где указанным соединением формулы I является гидрохлорид [2-(4гидроксифенил)-6-гидроксибензо[Ь]тиен-3ил] [4-[2-( 1 -пиперидинил)этокси] фенил]мета нона.
  3. 3. Способ подавления физиологического состояния, связанного с отсутствием или недостатком окиси азота, либо с потребностью в окиси азота (N0), включающий введение нуждающемуся в таком лечении пациенту соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
  4. 4. Способ по п.3, где указанным соединением формулы I является гидрохлорид [2-(4гидроксифенил)-6-гидроксибензо[Ь]тиен-3ил][4-[2-(1 -пиперидинил)этокси]фенил]метанона.
EA199801023A 1996-05-21 1997-05-16 Способы увеличения продуцирования окиси азота EA001911B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US1807196P 1996-05-21 1996-05-21
PCT/US1997/008552 WO1997044029A1 (en) 1996-05-21 1997-05-16 Methods of increasing nitric oxide synthesis

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA199801023A1 EA199801023A1 (ru) 1999-06-24
EA001911B1 true EA001911B1 (ru) 2001-10-22

Family

ID=21786089

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA199801023A EA001911B1 (ru) 1996-05-21 1997-05-16 Способы увеличения продуцирования окиси азота

Country Status (14)

Country Link
US (1) US5811437A (ru)
EP (1) EP0954306A1 (ru)
JP (1) JP2000512272A (ru)
KR (1) KR20000015805A (ru)
CN (1) CN1219128A (ru)
AU (1) AU716064B2 (ru)
CA (1) CA2255792A1 (ru)
EA (1) EA001911B1 (ru)
IL (1) IL127152A0 (ru)
NO (1) NO985357D0 (ru)
NZ (1) NZ332841A (ru)
PL (1) PL330146A1 (ru)
WO (1) WO1997044029A1 (ru)
YU (1) YU52498A (ru)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6410565B1 (en) 1999-02-03 2002-06-25 Eli Lilly And Company α1-adrenergic receptor antagonists
BR0112360A (pt) * 2000-07-06 2003-05-06 Wyeth Corp Método para aumentar a atividade da sintase de óxido nìtrico
EP1442415A2 (en) * 2001-11-02 2004-08-04 Siemens Medical Solutions USA, Inc. Patient data mining for quality adherence
US7457731B2 (en) * 2001-12-14 2008-11-25 Siemens Medical Solutions Usa, Inc. Early detection of disease outbreak using electronic patient data to reduce public health threat from bio-terrorism
US7680086B2 (en) 2002-09-09 2010-03-16 Siemens Canada Limited Wireless local area network with clients having extended freedom of movement
EP3977999A1 (en) 2003-11-17 2022-04-06 BioMarin Pharmaceutical Inc. Treatment of phenylketonuria with bh4
US20080275731A1 (en) * 2005-05-18 2008-11-06 Rao R Bharat Patient data mining improvements
US10943676B2 (en) 2010-06-08 2021-03-09 Cerner Innovation, Inc. Healthcare information technology system for predicting or preventing readmissions
US8617555B2 (en) * 2010-07-21 2013-12-31 Oleg I. Epshtein Pharmaceutical compositions comprising activated-potentiated antibodies to human insulin receptor and endothelial nitric oxide (NO) synthase
US9216178B2 (en) 2011-11-02 2015-12-22 Biomarin Pharmaceutical Inc. Dry blend formulation of tetrahydrobiopterin
US10857983B2 (en) 2017-12-13 2020-12-08 Kyle R. Gillin Leveraged trailer lift

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4418068A (en) * 1981-04-03 1983-11-29 Eli Lilly And Company Antiestrogenic and antiandrugenic benzothiophenes
DE69133575T2 (de) * 1990-12-05 2008-04-17 The General Hospital Corp., Boston Verwendung von NO zur Behandlung der persistenten pulmonaren Hypertonie des Neugeborenen
TW366342B (en) * 1992-07-28 1999-08-11 Lilly Co Eli The use of 2-phenyl-3-aroylbenzothiophenes in inhibiting bone loss
TW383306B (en) * 1992-12-22 2000-03-01 Lilly Co Eli New use of 2-phenyl-3-aroylbenzothiophenes in lowering serum cholesterol
US5457113A (en) * 1993-10-15 1995-10-10 Eli Lilly And Company Methods for inhibiting vascular smooth muscle cell proliferation and restinosis
US5447941A (en) * 1993-12-21 1995-09-05 Eli Lilly And Company Methods of inhibiting pulmonary hypertensive diseases with raloxifene and related benzothiophenes
PT664121E (pt) * 1993-12-21 2002-03-28 Lilly Co Eli Inibicao da oxidacao de ldl e aterosclerose
US5441965A (en) * 1993-12-21 1995-08-15 Eli Lilly And Company Methods of inhibiting thrombin
US5543430A (en) * 1994-10-05 1996-08-06 Kaesemeyer; W. H. Method and formulation of stimulating nitric oxide synthesis
US5622975A (en) * 1995-06-01 1997-04-22 Eli Lilly And Company Methods for inhibiting vascular smooth muscle cell migration

Also Published As

Publication number Publication date
NO985357L (no) 1998-11-17
EP0954306A4 (ru) 1999-11-10
PL330146A1 (en) 1999-04-26
AU716064B2 (en) 2000-02-17
JP2000512272A (ja) 2000-09-19
IL127152A0 (en) 1999-09-22
WO1997044029A1 (en) 1997-11-27
AU3134497A (en) 1997-12-09
EP0954306A1 (en) 1999-11-10
YU52498A (sh) 2000-12-28
CA2255792A1 (en) 1997-11-27
US5811437A (en) 1998-09-22
KR20000015805A (ko) 2000-03-15
CN1219128A (zh) 1999-06-09
NZ332841A (en) 2000-06-23
NO985357D0 (no) 1998-11-17
EA199801023A1 (ru) 1999-06-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2100024C1 (ru) Применение 2-фенил-3-ароилбензотиефенов, их солей или сольватов для ингибирования потерь костной ткани, фармацевтическая композиция, содержащая 2-фенил-3-ароилбензотиефены, и их соли или сольваты
US5384332A (en) Methods for inhibiting aortal smooth muscle cell proliferation and restenosis with 1,1,2-triphenylbut-1-ene derivatives
RU2179021C2 (ru) Способ ингибирования межклеточной адгезии и способ ингибирования воспалительного процесса
US5604248A (en) Method for minimizing the uterotrophic effect of tamoxifen and tamoxifen analogs
RU2127592C1 (ru) Средство для ингибирования окисления липидов низкой плотности и подавления атеросклероза
JPH07149644A (ja) 血管形成および血管形成性疾患を抑制する方法
EA001911B1 (ru) Способы увеличения продуцирования окиси азота
JPH07215858A (ja) 機能障害性子宮出血を抑制する方法
KR20010031903A (ko) 에스트로겐 결핍 증후군의 치료에 유용한2-아릴벤조[ｂ]티오펜
HUT71337A (en) Pharmaceutical compositions for inhibiting turner's syndrome containing 2-phenyl-3-aroyl-benzothiophene derivatives and process for their preparation
PT662325E (pt) Inibicao da disgenese do ovario, puberdade atrasada, ou infantilismo sexual
JP2000505455A (ja) ベンゾチオフエン類、それらを含む製剤、および方法
JPH11506787A (ja) カルシウムチャンネルの調節
KR19990064099A (ko) 플라스미노겐 활성인자 억제물질 1의 억제 방법
AU741882B2 (en) Methods for lowering platelet counts
IL111790A (en) Use of benzo [B] thiopines in the preparation of anti-amyloidogenic drugs
KR19990022499A (ko) 칼슘 채널 길항제
MXPA98009706A (es) Metodos para incrementar la sintesis de oxido nitrico
CZ375098A3 (cs) Farmaceutický prostředek pro zvyšování syntézy endothelového oxidu dusičného
US6110942A (en) Method for minimizing the uterotrophic effect of droloxifene
MXPA00011283A (en) Methods for reducing levels of homocysteine and c-reactive protein
MXPA98002759A (en) Methods to inhibit plasminog activator 1 inhibitor
JPH02286617A (ja) 血管新生阻害剤

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU