DK2831238T3 - Kloningsfremgangsmåde - Google Patents

Kloningsfremgangsmåde Download PDF

Info

Publication number
DK2831238T3
DK2831238T3 DK13716982.7T DK13716982T DK2831238T3 DK 2831238 T3 DK2831238 T3 DK 2831238T3 DK 13716982 T DK13716982 T DK 13716982T DK 2831238 T3 DK2831238 T3 DK 2831238T3
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
sequences
sequence
dna
target locus
backbone
Prior art date
Application number
DK13716982.7T
Other languages
English (en)
Inventor
Johannes Andries Roubos
Herman Jan Pel
Bernard Meijrink
Original Assignee
Dsm Ip Assets Bv
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dsm Ip Assets Bv filed Critical Dsm Ip Assets Bv
Application granted granted Critical
Publication of DK2831238T3 publication Critical patent/DK2831238T3/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/102—Mutagenizing nucleic acids
    • C12N15/1024—In vivo mutagenesis using high mutation rate "mutator" host strains by inserting genetic material, e.g. encoding an error prone polymerase, disrupting a gene for mismatch repair
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/66—General methods for inserting a gene into a vector to form a recombinant vector using cleavage and ligation; Use of non-functional linkers or adaptors, e.g. linkers containing the sequence for a restriction endonuclease
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
    • C12N15/90—Stable introduction of foreign DNA into chromosome
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2800/00—Nucleic acids vectors
    • C12N2800/30—Vector systems comprising sequences for excision in presence of a recombinase, e.g. loxP or FRT
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2800/00—Nucleic acids vectors
    • C12N2800/40—Systems of functionally co-operating vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2800/00—Nucleic acids vectors
    • C12N2800/50—Vectors for producing vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2800/00—Nucleic acids vectors
    • C12N2800/80—Vectors containing sites for inducing double-stranded breaks, e.g. meganuclease restriction sites

Landscapes

  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Claims (16)

1. Fremgangsmåde til in vivo-rekombination af to eller flere standardiserede ekspressionskassetter i et mållocus i en værtscelle, hvilken fremgangsmåde omfatter a. at fremstille to eller flere standardiserede ekspressionskassetter ifølge fremgangsmåden, der omfatter trinnene, som går ud på: I. at tilvejebringe to eller flere sæt af elementsekvenser, hvor hvert sæt af elementsekvenser tilsammen omfatter mindst én funktionel ekspressionskassette, hvor hver elementsekvens er flankeret på begge sider af et type Ils-restriktionsendonuklease-kløvningssted efterfulgt af genkendelsesstedet derfor, hvor type Ils-restriktionsendonuklease-genkendelsesstederne og -kløvningsstederne er således valgt, at sættene af elementsekvenser kan samles til en funktionel ekspressionskassette; II. at tilvejebringe mindst to rygradsindgangsvektorer, hvor hver rygradsindgangsvektor omfatter, i denne rækkefølge, (i) et restriktionsenzymkløvningssted med dets genkendelsessted og en første forbindelsessekvens (LF); (11) en vektorrygrad, der omfatter et valgbart markørgen; og (ill) en anden forbindelsessekvens (RF) og et restriktionsenzymgenkendelsessted med dets kløvningssekvens, og (iv) eventuelt, et insert mellem genkendelsesstederne i (i) og (ill), hvor forbindelsessekvenserne er DNA-sekvenser på venstre og højre side, og venstre og højre forbindelsessekvenser er sekvenser, der er egnede til at samles ved hjælp af sekvenshomologi, hvor RF- og LF-forbindelsessekvenserne på enhver rygradsindgangsvektor er således valgt, at de kan samles med en henholdsvis LF- eller RF-forbindelsessekvens på den samme eller en anden rygradsindgangsvektor; og III. at samle de to eller flere sæt af elementsekvenser som funktionelle ekspressionskassetter i de mindst to rygradsindgangsvektorer ved hjælp af en fremgangsmåde baseret på anvendelsen af restriktionsenzymfordøjelse og ligering via kløvningsstederne, hvorved der fremstilles to eller flere standardiserede ekspressionskassetter, hvor
1. RF- og LF-forbindelsessekvenserne omfatter homologe rekombinationssekvenser; og ii. RF- og LF-f orbindelsessekvenserne i en hvilken som helst rygradsindgangsvektor er således valgt, at de ved in vivo-rekombination kan samles med en henholdsvis LF- eller RF-forbindelsessekvens med den samme eller en anden rygradsindgangsvektor og/eller med en sekvens, der flankerer mållocus; og b. at indvinde ekspressionskassetterne fra rygradsindgangsvektorerne, herunder LF- og RF-sekvenserne; og c. at rekombinere de indvundne ekspressionskassetter med hinanden in vivo i mållocus i en værtscelle.
2. Fremgangsmåde til in vivo-rekombination af to eller flere standardiserede ekspressionskassetter i et mållocus i en værtscelle, hvilken fremgangsmåde omfatter a. at fremstille to eller flere standardiserede modulære ekspressionskassetter ifølge fremgangsmåden, der omfatter trinnene, som går ud på I. at tilvejebringe to eller flere sæt af elementsekvenser, hvor hvert sæt af elementsekvenser tilsammen omfatter mindst én funktionel ekspressionskassette, hvor hver elementsekvens er flankeret på begge sider af et type Ils-restriktionsendonuklease-kløvningssted efterfulgt af genkendelsesstedet derfor, hvor type Ils-restriktionsendonuklease-genkendelsesstederne og -kløvningsstederne er således valgt, at sættene af elementsekvenser kan samles til en funktionel ekspressionskassette; II. at tilvejebringe mindst to rygradsindgangsvektorer, hvor hver rygradsindgangsvektor omfatter, i denne rækkefølge, (i) et restriktionsenzymkløvningssted med dets genkendelsessted og en første forbindelsessekvens (LF); (ii) en vektorrygrad, der omfatter et valgbart markørgen; og (ill) en anden forbindelsessekvens (RF) og et restriktionsenzymgenkendelsessted med dets kløvningssekvens, og (iv) eventuelt, et insert mellem genkendelsesstederne i (i) og (lir), hvor forbindelsessekvenserne er DNA-sekvenser på venstre og højre side, og venstre og højre forbindelsessekvenser er sekvenser, der er egnede til at samles ved hjælp af sekvenshomologi, hvor RF- og LF-forbindelsessekvenserne på enhver rygradsindgangsvektor er således valgt, at de kan samles med en henholdsvis LF- eller RF-forbindelsessekvens på den samme eller en anden rygradsindgangsvektor; og III. at samle de to eller flere sæt af elementsekvenser som funktionelle ekspressionskassetter i de mindst to rygradsindgangsvektorer ved hjælp af en fremgangsmåde baseret på anvendelsen af restriktionsenzymfordøjelse og ligering via kløvningsstederne, hvorved der fremstilles to eller flere standardiserede ekspressionskassetter, hvor i. RF- og LF-forbindelsessekvenserne omfatter homologe sekvenser på mindst ca. 9 basepar; og ii. RF- og LF-f orbindelsessekvenserne i en hvilken som helst rygradsindgangsvektor er således valgt, at de ved hjælp af disse sekvenser ved en in vitro-fremgangsmåde kan samles med en henholdsvis LF- eller RF-forbindelsessekvens med den samme eller en anden rygradsindgangsvektor og/eller med en sekvens, der flankerer mållocus; og b. at indvinde ekspressionskassetterne fra rygradsindgangsvektorerne og samle dem in vitro forbundet af LF- og RF-sekvenserne; og c. at rekombinere de samlede og indvundne ekspressionskassetter in vivo i mållocus i en værtscelle.
3. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, hvor mindst to rygradsindgangsvektorer omfatter, i denne rækkefølge, (i) et type II-restriktionsenzymgenkendelsessted efterfulgt af kløvningsstedet derfor og en første forbindelsessekvens (LF) på mindst 25 basepar; (i i) en vektorrygrad, der omfatter et valgbart markørgen; og (i i i) en anden forbindelsessekvens (RF) på mindst 25 basepar og et yderligere kløvningssted for et type Il-restriktionsenzym efterfulgt af kløvningsstedets genkendelsessted, og (iv) eventuelt et insert mellem genkendelsesstederne i (i) og (iii).
4. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 3, hvor rekombinationstrinnet udføres i nærvær af to integrationssekvenser, hvoraf den ene rekombinerer med en første ekspressionskassette og en flankerende sekvens til mållocus, og hvoraf den anden rekombinerer med en anden ekspressionskassette og en flankerende sekvens på den anden side af mållocus.
5. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 4, hvor en første ekspressionskassette i rekombinationstrinnet omfatter en integrationssekvens, der rekombinerer med en flankerende sekvens til mållocus, og en anden ekspressionskassette omfatter en integrationssekvens, der rekombinerer med en flankerende sekvens på den anden side af mållocus.
6. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 5, hvor integrationssekvenserne omfatter yderligere sekvenser til rekombination med et andet mållocus, eventuelt et locus i en værtscelle af en anden art end det første mållocus.
7. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 6, hvor integrationssekvenserne medierer integration via homolog rekombination eller site-specifik rekombination.
8. Fremgangsmåde ifølge krav 6 eller 7, hvor integrationssekvenserne, forbindelsessekvenserne eller andre elementsekvenser omfatter site-specifikke rekombinationssekvenser til rekombination med det andet mållocus, hvilke sekvenser er beliggende uden for de samlede ekspressionskassetter og tillader rekombination i det andet mållocus ved hjælp af site-specifik rekombination, eventuelt i et mållocus i en værtscelle af en anden art end arten af værtscellen for det første mållocus.
9. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 8, hvor de to eller flere ekspressionskassetter samles og rekombineres i en forudbestemt rækkefølge i serier i mållocus.
10. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, hvor mindst én ekspressionskassette er en markørekspressionskassette.
11. Fremgangsmåde ifølge krav 10, hvor markørekspressionskassetten er flankeret af mindst to site-specifikke rekombinationssteder.
12. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, hvor mindst to af sættene af elementsekvenser omfatter et promotorelement, et åbent læserammeelement og et terminatorelement.
13. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, hvor samlingen af hvert sæt af elementer til en funktionel ekspressionskassette i de mindst to rygradsindgangsvektorer udføres i en one-pot-reaktion.
14. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, hvor elementerne i hvert sæt er således defineret, at ekspressionskassetten samles i en forudbestemt rækkefølge.
15. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 2 til 14, hvor værtscellerne er prokaryote eller eukaryote celler.
16. System til produktion af en nukleinsyrekonstruktion af interesse indbygget i et mållocus, hvilket system omfatter: I. et system til fremstilling af to eller flere standardiserede ekspressionskassetter, hvilket system omfatter: a. to eller flere sæt af elementsekvenser, hvor hvert sæt af elementsekvenser tilsammen omfatter mindst én funktionel ekspressionskassette, hvor hver elementsekvens er flankeret på begge sider af et type Ils-restriktionsendonuklease-kløvningssted efterfulgt af genkendelsesstedet derfor, hvor type Ils-restriktionsendonuklease-genkendelsesstederne og -kløvningsstederne er således valgt, at sættene af elementsekvenser kan samles til en funktionel ekspressionskassette; b. mindst to rygradsindgangsvektorer, hvor hver rygradsindgangsvektor omfatter, i denne rækkefølge, (i) et restriktionsenzymkløvningssted med dets genkendelsessted og en første forbindelsessekvens (LF); (11) en vektorrygrad, der omfatter et valgbart markørgen; og (ill) en anden forbindelsessekvens (RF) og et restriktionsenzymgenkendelsessted med dets kløvningssekvens, og (iv) eventuelt, et insert mellem genkendelsesstederne i (i) og (ill), hvor RF- og LF-forbindelsessekvenserne på enhver rygradsindgangsvektor er således valgt, at de kan samles med en henholdsvis LF- eller RF-forbindelsessekvens på den samme eller en anden rygradsindgangsvektor; og II. mindst to integrationssekvenser, hvoraf den ene rekombinerer med en første ekspressionskassette og en flankerende sekvens til mållocus, og hvoraf den anden rekombinerer med en anden ekspressionskassette og en flankerende sekvens på den anden side af mållocus.
DK13716982.7T 2012-03-27 2013-03-27 Kloningsfremgangsmåde DK2831238T3 (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261616254P 2012-03-27 2012-03-27
PCT/EP2013/056623 WO2013144257A1 (en) 2012-03-27 2013-03-27 Cloning method

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DK2831238T3 true DK2831238T3 (da) 2018-04-03

Family

ID=48139896

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK13716982.7T DK2831238T3 (da) 2012-03-27 2013-03-27 Kloningsfremgangsmåde

Country Status (5)

Country Link
US (2) US9738890B2 (da)
EP (1) EP2831238B1 (da)
CN (1) CN104204205B (da)
DK (1) DK2831238T3 (da)
WO (1) WO2013144257A1 (da)

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX367033B (es) 2013-05-31 2019-08-02 Dsm Ip Assets Bv Microorganismos para la produccion de diterpeno.
AR097480A1 (es) 2013-08-29 2016-03-16 Dsm Ip Assets Bv Células de levadura convertidoras de glicerol y ácido acético con una conversión de ácido acético mejorada
WO2015181311A1 (en) * 2014-05-29 2015-12-03 Dsm Ip Assets B.V. Process for producing itaconic acid and itaconic acid esters under anaerobic conditions
US20170191091A1 (en) * 2014-05-29 2017-07-06 Dsm Ip Assets B.V. Recombinant cells producing itaconic acid and methyl esters thereof
WO2016012429A1 (en) 2014-07-24 2016-01-28 Dsm Ip Assets B.V. Yeast cell with improved pentose transport
CN105802866A (zh) * 2014-12-30 2016-07-27 天津大学 一种产紫杉二烯的重组真核菌株及利用该重组真核菌株制备紫杉二烯的方法
WO2016110512A1 (en) 2015-01-06 2016-07-14 Dsm Ip Assets B.V. A crispr-cas system for a yeast host cell
US10590436B2 (en) 2015-01-06 2020-03-17 Dsm Ip Assets B.V. CRISPR-CAS system for a lipolytic yeast host cell
WO2016110453A1 (en) 2015-01-06 2016-07-14 Dsm Ip Assets B.V. A crispr-cas system for a filamentous fungal host cell
WO2016140925A1 (en) 2015-03-02 2016-09-09 Synthetic Genomics, Inc. Regulatory elements from labyrinthulomycetes microorganisms
EP3862426A3 (en) 2015-03-16 2021-11-17 DSM IP Assets B.V. Udp-glycosyltransferases
US11344051B2 (en) 2015-04-03 2022-05-31 Dsm Ip Assets B.V. Steviol glycosides
WO2017025649A1 (en) 2015-08-13 2017-02-16 Dsm Ip Assets B.V. Steviol glycoside transport
US20210161092A1 (en) * 2016-02-16 2021-06-03 Ajikumar Parayil KUMARAN Secondary metabolite screening system
EP3795586A3 (en) 2016-03-16 2021-06-23 Conagen Inc. Production of proteins in labyrinthulomycetes
BR112018074490A2 (pt) 2016-06-14 2019-03-19 Dsm Ip Assets B.V. célula de levedura recombinante
US10913938B2 (en) 2016-07-29 2021-02-09 Dsm Ip Assets B.V. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and uses thereof
KR101808192B1 (ko) * 2016-08-26 2018-01-18 아미코젠주식회사 7-아미노세팔로스포란산의 고농도 생산 재조합 아크레모니움 크리소제눔 균주의 제조방법 및 이 방법으로 제조된 균주
US20200199599A1 (en) 2016-09-23 2020-06-25 Dsm Ip Assets B.V. A guide-rna expression system for a host cell
WO2018073107A1 (en) 2016-10-19 2018-04-26 Dsm Ip Assets B.V. Eukaryotic cell comprising xylose isomerase
US10633454B2 (en) 2016-11-01 2020-04-28 Conagen Inc. Expression of modified glycoproteins and glycopeptides
ES2900151T3 (es) * 2016-11-07 2022-03-16 Genovie Ab Un dispositivo de dos partes para la síntesis del receptor de linfocitos T0 e integración genómica estable en células presentadoras del TCR
EP4039800B1 (en) 2016-11-07 2023-10-25 Genovie AB An engineered multi-component system for identification and characterisation of t-cell receptors and t-cell antigens
WO2018172328A1 (en) 2017-03-21 2018-09-27 Dsm Ip Assets B.V. Improved glycerol free ethanol production
US20200032252A1 (en) 2017-04-06 2020-01-30 Dsm Ip Assets B.V. Self-guiding integration construct (sgic)
CN111315883B (zh) * 2017-07-18 2024-06-18 杰诺维有限公司 用于全长t细胞受体可读框的快速装配和多样化的两组分载体文库系统
CN110129346A (zh) * 2018-02-02 2019-08-16 杭州菁因康生物科技有限公司 一种高效的基因工程载体
EP3891281A1 (en) 2018-12-05 2021-10-13 DSM IP Assets B.V. Crispr guide-rna expression strategies for multiplex genome engineering
WO2020141168A1 (en) 2018-12-31 2020-07-09 Dsm Ip Assets B.V. Novel acetyl-transferases
CN116348609A (zh) 2020-10-05 2023-06-27 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 酵母属酵母细胞及使用其的发酵方法
EP4320258A1 (en) 2021-04-06 2024-02-14 DSM IP Assets B.V. Enzyme composition
CN117178059A (zh) 2021-04-06 2023-12-05 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 酶组合物
BR112023020370A2 (pt) 2021-04-06 2023-11-21 Dsm Ip Assets Bv Composição de enzimas
WO2023285280A1 (en) 2021-07-12 2023-01-19 Dsm Ip Assets B.V. Recombinant yeast cell
MX2024000511A (es) 2021-07-12 2024-03-11 Danisco Us Inc Celula de levadura recombinante.
WO2023285279A1 (en) 2021-07-12 2023-01-19 Dsm Ip Assets B.V. Recombinant yeast cell
EP4426824A1 (en) 2021-11-04 2024-09-11 Danisco US Inc. Recombinant yeast cell
WO2023079049A1 (en) 2021-11-04 2023-05-11 Dsm Ip Assets B.V. Variant polypeptide and recombinant yeast cell
MX2024005284A (es) 2021-11-04 2024-05-17 Danisco Us Inc Proceso para la produccion de etanol y celula de levadura recombinante.
EP4365192A1 (en) 2022-11-04 2024-05-08 DSM IP Assets B.V. Microbial production of growth factors

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020165175A1 (en) * 2001-04-17 2002-11-07 Xiaowu Liang Fast and enzymeless cloning of nucleic acid fragments
US20100291633A1 (en) * 2007-09-03 2010-11-18 Thorsten Selmer Method of cloning at least one nucleic acid molecule of interest using type iis restriction endonucleases, and corresponding cloning vectors, kits and system using type iis restriction endonucleases
MX2011005195A (es) 2008-11-19 2011-09-01 Amyris Inc Composiciones y metodos para el ensamblaje de polinucleotidos.
GB0905458D0 (en) * 2009-03-30 2009-05-13 Gene Bridges Gmbh Method of altering nucleic acids
EP2395087A1 (en) * 2010-06-11 2011-12-14 Icon Genetics GmbH System and method of modular cloning
BR112013001685B1 (pt) * 2010-07-23 2021-10-13 Sigma-Aldrich Co. Llc Método para editar pelo menos uma sequência cromossômica endógena em uma célula pela inserção de uma sequência na sequência cromossômica

Also Published As

Publication number Publication date
US10865407B2 (en) 2020-12-15
US9738890B2 (en) 2017-08-22
CN104204205A (zh) 2014-12-10
CN104204205B (zh) 2017-06-27
WO2013144257A1 (en) 2013-10-03
EP2831238B1 (en) 2018-01-03
US20150050696A1 (en) 2015-02-19
EP2831238A1 (en) 2015-02-04
US20170314011A1 (en) 2017-11-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK2831238T3 (da) Kloningsfremgangsmåde
AU2018220469B2 (en) Method and cell line for production of phytocannabinoids and phytocannabinoid analogues in yeast
DK2785849T3 (da) Gærstammer, der er modificeret til at producere ethanol fra eddikesyre og glycerol
DK2588616T3 (da) Fremgangsmåde til fremstilling af en forbindelse af interesse
KR20190082318A (ko) Crispr/cpf1 시스템 및 방법
CN109661403A (zh) 前导序列修饰的葡糖淀粉酶多肽和具有增强的生物产物产生的工程化的酵母菌株
DK2576605T3 (da) Fremstilling af metabolitter
KR20140092759A (ko) 숙주 세포 및 아이소부탄올의 제조 방법
KR20180084135A (ko) 감소된 clr2 활성을 갖는 사상 진균에서 단백질을 생산하는 방법
DK2683732T3 (da) Vektor-vært-system
KR20140113997A (ko) 부탄올 생성을 위한 유전자 스위치
KR20100118973A (ko) 이소프렌을 생성하기 위한 조성물 및 방법
BRPI0620552A2 (pt) polinucleotìdeo isolado, polipeptìdeo delta-9 elongase, construção recombinante, célula vegetal, método para transformar uma célula, método para produção de uma planta transgênica, sementes transgênicas, método para fabricar ácidos graxos poliinsaturados de cadeia longa, óleos, método para produzir pelo menos um ácido graxo poliinsaturado, plantas de semente oleaginosa, sementes, alimentos, fragmento de ácido nucléico isolado e progênies de plantas
KR20120099509A (ko) 재조합 숙주 세포에서 육탄당 키나아제의 발현
CN101939434A (zh) 用于在大豆中提高种子贮藏油脂的生成和改变脂肪酸谱的来自解脂耶氏酵母的dgat基因
KR20220012327A (ko) 피토칸나비노이드 및 피토칸나비노이드 전구체의 생산을 위한 방법 및 세포
CN111757890A (zh) 发酵工艺
CN110913886A (zh) 包含成纤维细胞生长因子21(fgf21)编码序列的病毒表达构建体
KR20220127844A (ko) 바실러스 리체니포르미스에서 단백질 생산을 향상시키기 위한 조성물 및 방법
CN113227351A (zh) 用于改善糖果利用的工程微生物菌株
KR20180081817A (ko) 감소된 clr1 활성을 갖는 사상 진균에서 단백질을 생산하는 방법
CN113302303A (zh) 经修饰的丝状真菌宿主细胞
KR20240029020A (ko) Dna 변형을 위한 crispr-트랜스포손 시스템
RU2790662C1 (ru) АМИНОАЦИЛ-тРНК-СИНТЕТАЗА, ЭФФЕКТИВНОЕ ВВЕДЕНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ ЛИЗИНА
WO2023215399A1 (en) Assembling synthetic dna constructs from natural dna