DK173511B1

DK173511B1 - Dipeptidylnaphthyridinderivater samt antibakterielle midler, som omfatter disse

Info

Publication number: DK173511B1
Application number: DK198904668A
Authority: DK
Inventors: Daniel Tim-Wo Chu; Robert Hallas
Original assignee: Abbott Lab
Priority date: 1988-09-22
Filing date: 1989-09-21
Publication date: 2001-01-15
Also published as: EP0360258B1; KR900004732A; DE68926941T2; JPH02142786A; IE76284B1; AU616053B2; DK466889A; DK466889D0; ES2092991T3; KR100189474B1; NZ230727A; IE892964L; IL91648A0; GR3021342T3; AU4172489A; DE68926941D1; EP0360258A2; IL91648A; EP0360258A3; ATE141271T1

Description

DK 173511 B1

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte dipeptidyiderivater af naphthyridinfor-bindelser samt antibakterielle midler, som omfatter disse, til anvendelse i mennesker og pattedyr med behov for en antibakteriel behandling. Disse forbindelser har en god opløselighed ved fysiologisk pH-værdi, hvilket fremmer deres orale absorption.

5 Antibakterielle quinolin- og naphthyridinforbindelser er velkendte indenfor området. I US-patentskrift nr. 4.730.000, Chu, udstedt 8. marts 1988, beskrives f.eks. quinolinfor-bindelser med en 7-pyrrolidinsubstituentgruppe med antibakterielle egenskaber, i US-patentskrift nr. 4.616.019, Chu, udstedt 7. oktober, 1986 beskrives naphthyridinforbindelser med en 7-pyrrolidinsubstituentgruppe med antibakterielle egenskaber, i US-patent-10 skrift nr. 4.649.144, Matsumoto et al., udstedt 10. marts 1988 beskrives 1,8-naphthyri-dinforbindelser med en 7-pyrrolidinsubstituentgruppe med antibakteriel aktivitet, og i US-patentskrift nr. 4.735.949, Domagala et al., udstedt 5. april, 1988 beskrives disub-stituerede 7-pyrrolidin-naphthyridmforbindelser med antibakteriel aktivitet. Disse forbindelser har imidlertid begrænset vandopløselighed, hvilket svækker deres anvendelse 15 i injektionsformuleringer til intravenøs, intramuskulær eller subkutan anvendelse. Disse forbindelser har også meget lav opløselighed ved fysiologisk pH-værdi, hvilket reducerer deres orale absorption.

Med henblik på at forbedre opløseligheden af forskellige forbindelser til farmaceutisk anvendelse er deres struktur blevet modificeret. I US-patentskrift nr. 4.479.898, Gilvarg 20 et al., udstedet 30. oktober 1984 beskrives f.eks. peptidkæder, som er substitueret med en nukleofil rest i α-stilling, til anvendelse som prolægemidler til forøgelse af cellemembranpermeabilitet, og i US-patentskrift nr. 4.753.984, Delmotte et al., udstedt 28. juni 1988 beskrives vandopløselige makromolekylære prolægemidler, hvori en polyhydroxyleret polyamin er bundet til et terapeutisk aktivt lægemiddel ved hjælp af en 25 peptidkæde.

Den foreliggende opfindelse angår forbindelser med forøget vandopløselighed.

2 DK 173511 B1

Den foreliggende opfindelse angår nærmere bestemt hidtil ukendte dipeptidylderivater af naphthyridiner, hvor 7-pyrrolidinringen er 3-A-aminosubstitueret, hvori A er en dipeptidylgruppe. Disse hidtil ukendte forbindelser er anvendelige som bredspektrede antibakterielle midler med aktivitet over for både grampositive og gramnegative bakteri-5 er såvel som enterobakterier.

Den foreliggende opfindelse angår nærmere bestemt dipeptidylderivater af naphthyridin-forbindelser, som er ejendommelige ved, at de har følgende formel I:

O

^ C £4 R i.

/ / I_! *' (I)

Alit

S

A

hvori R, er phenyl eller phenyl substitueret med et til tre halogenatomer; R2 er hydrogen eller en carboxybeskyttelsesgruppe valgt blandt alkyl, benzyl, alkoxy, 10 nitrobenzyl, dialkylaminoalkyl, pivaloyloxymethyl eller propionyloxymethyl; A er en dipeptidylgruppe; og farmaceutisk acceptable salte heraf.

Den foreliggende opfindelse angår også et antibakterielt middel, som omfatter en anti-bakteriel effektiv mængde af en forbindelse med formlen I.

De foreliggende midler finder således anvendelse til behandling af bakterielle infektioner 15 i et pattedyr med et behov for en sådan behandling.

En foretrukken gruppe er forbindelser med formlen: 3 DK 173511 B1

O

cooh o <

Vrt s

A

hvori Rj er 4-fluorphenyl eller 2,4-difluorphenyl; A er en dipeptidkæde; og farmaceutisk acceptable salte heraf.

En mere foretrukken gruppe af forbindelser ifølge opfindelsen er forbindelser med den ovennævnte formel, hvori A er Gly-Phe, Ala-Phe, Gly-Nval, Ala-Nval, Gly-Ala, Leu-5 Nval, Ala-Met, Ala-Leu, Leu-Leu, Leu-Met, Leu-Ala, Met-Leu, Met-Ala, D-Ala-L-Ala, Phe-Ala, Val-Ala, Val-Leu, Gly-GIy, Met-Nval, Nval-Gly, Nval-Ala, Nval-Nval, Phe-Gly eller Ala-Ala.

Forbindelser, som er repræsentative for den foretrukne klasse af forbindelser ifølge opfindelsen, omfatter de følgende forbindelser og deres hydrochloridsalte: 10 22. 7-(3-Gly-Phe-ammo-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-1-(4-fluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo- 1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 23. 7-(3-Gly-Phe-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-di fluorphenyl)-l ,4-dihydro-4- oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 30. 7-(3-Nval-Nval-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(4-fluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo- 15 1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 31. 7-(3-Nval-Nval-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difhiorphenyl)-l ,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxyIsyre 4 DK 173511 B1 46. 7-(3-Ala-Phe-amino-l-pyrrolidmyl)-6-fIuor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 47. 7-(3-Ala-Phe-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(4-fluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphtliyridin-3-carboxylsyre 5 53. 7-(3-Ala-Ala-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(4-fluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxylsyre 54. 7-(3-Ala-Ala-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 85. 7-(3-Ala-Nval-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro4-10 oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 86. 7-(3-Leu-Nval-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l- (2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxyIsyre 87. 7-(3-Met-Nval-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 15 88. 7-(3-Gly-Gly-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l ,4-dihydro-4- oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 89. 7-(3-Gly-Nval-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluoiphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 90. 7-(3-Nval-Gly-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l ,4-dihydro-4-20 oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 5 DK 173511 B1 91. 7-(3-Nval-Ala-amino-l-pyrrolidmyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 107. 7-(3-Gly-Ala-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l- (2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro- 4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 5 108. 7-(3-Ala-Met-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4- oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 109. 7-(3-Met-Met-amino-1 -pyrro!idinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 110. 7-(3-Leu-Met-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyI)-l ,4-dihydro-4-10 oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 111. 7-(3-Leu-Leu-amino-l-pyrrolidmyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l ,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 112. 7-(3-Ala-Leu-araino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 15 113. 7-(3-Met-Leu-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4- oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 114, 7-(3-Phe-Ala-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 115. 7-(3-Leu-Ala-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4-20 oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 6 DK 173511 B1 116. 7-(3-Met-AIa-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fIuor-l-(2,4-difluorphenyl)-l ,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 117. 7-(3-Val-Ala-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l ,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 5 118. 7-(3-Val-Leu-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4- oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 119. 7-(3-D-Ala-L-Ala-airrino-l-pyrrolidmyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihy-dro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre.

Som anvendt heri refererer betegnelsen "carboxybeskyttelsesgnippe'' tilencarboxygrap-10 pe, som er blevet esterificeret med en af de sædvanligt anvendte carboxylsyrebeskyttel-sesestergrupper, som anvendes til at blokere eller beskytte carboxylsyrefunktionaliteten. Endvidere kan forbindelser, som indeholder en carboxybeskyttelsesgnippe, anvendes som prolægemidler, hvorved carboxybeskyttelsesgruppen kan hydrolyseres enzymatisk til frigivelse af den biologisk aktive modersyre. Sådanne beskyttede carboxygrupper 15 fremhæves for deres spaltningslethed ved hydrolytiske metoder til den tilsvarende carboxylsyre. Sådanne carboxybeskyttelsesgrupper kan endvidere spaltes til opnåelse af den tilsvarende frie carboxygrappe. Sådanne carboxybeskyttelsesgrupper er velkendte for fagfolk inden for området, og de er blevet anvendt i vidt omfang til beskyttelse af carbo-xylgrupper inden for penicillin- og cephalosporinområdet, som beskrevet i US-patent-20 skriftemenr. 3.840.556 og 3.719.667. Repræsentative beskyttelsesgrupper omfatter C,-Cg-alkyl (f.eks. methyl, ethyl, tertiær butyl), benzyl, alkoxy, nitrobenzyl, dialkylami-noalkyl (f.eks. dimethylaminoethyl), pivaloyloxymethyl og propionyloxymethyl.

Som anvendt heri refererer betegnelsen farmaceutisk acceptable salte" til ikke-toksiske syreadditionssalte og jordalkalimetalsalte af forbindelserne med formlen I. Saltene kan 25 fremstilles in situ under den endelige isolering og oprensning af forbindelserne med 7 DK 173511 B1 formlen I eller separat ved omsætning af de frie base- eller syrefiinktioner med en egnet organisk syre eller base. Repræsentative syreadditionssalte omfatter hydrochlorid-, hybrobromid-, sulfat-, bisulfat-, acetat-, oxalat-, valerat-, oleat-, palmitat-, stearat-, laurat-, botat-, benzoat-, lactat-, phosphat-, tosylat-, mesylat-, citrat-, maleat-, fumarat-, 5 succinat-, tartrat-, ascorbat-, glucoheptonat-, lactobionat- og laurylsulfatsalte.

Repræsentative alkalimetal- eller jordalkalimetalsalte omfatter natrium-, calcium-, kalium- og magnesiumsalte.

Som anvendt heri refererer betegnelsen "halogen" til chlor-, brom-, fluor- og jodgrupper.

10 Som anvendt heri omfatter betegnelsen "alkyl" både ligekædede og forgrenede radikaler med et til seks carbonatomer. Repræsentative eksempler på sådanne radikaler er methyl, ethyl, propyl, isopropyl, t-butyl, sec-butyl, isobutyl, amyl, butyl, neopentyl og hexyl.

Dipeptidylkæden indeholder to aminosyrerester, som er bundet kovalent ved hjælp af peptidbindinger. Aminosyreresteme omfatter de 20 naturligt forekommende standard-15 aminosyrer (som betegnet ved deres tre bogstavssymboler); 4-hydroxyprolin, hydroxyly-sin, demosin, isodemosin, 3-methylhistidin, norvalin (Nval), beta-alanin, gamma-amino-butyrsyre, horaocystein, homoserm, citrullin, omithin og methioninsulfon.

For nemheds skyld og af hensyn til forståelsen er aminosyremes betegnelser med tre bogstaver og et bogstav som følger.

20 3- eller 4-bogstaver 1-bogstav

Alanin Ala A

Arginin Arg R

Asparagin Asn N

8 DK 173511 B1

Asparaginsyre Asp D

Glutaminsyre Glu E

Glutamin Gin Q

Glycin Gly G

5 Histidin His H

Homoserin Hse

Isoleucin Ile I

Leucin Leu L

Lysin Lys K

10 Methionin Met M

Norvalin Nval

Phenylalanin Phe F

Prolin Pro P

Serin Ser S

15 Threonin Thr T

Tryptophan Try O

Tyrosin Tyr Y

Valin Val V

De foretrukne aminosyrerester er sådanne med en ikke-polær gruppe, såsom Ala, Val, 20 Nval, Leu, Met, Gly, Pro, Phe; eller en basisk polær gruppe, såsom Lys.

I den hensigt at skabe klarhed bør det bemærkes, at 3-amino- funktionen i 7-pyrro-lidinylgruppen danner en binding med carboxylgruppen af en α-aminosyrerest, amino-syreresteme bindes til hinanden via konventionel peptidbinding; dvs. a-aminogruppen i den første bundne aminosyrerest bindes til carboxylgruppen i den anden a- amino-25 syrerest etc.

Som anvendt heri refererer betegnelsen "aminobeskyttelsesgruppe" til en gruppe, som beskytter den N-terminale ende af aminosyreresten. α-aminogruppen i hver aminosyre, 9 DK 173511 B1 som anvendes i peptidsyntesen, må beskyttes under koblingsreaktionen for at forhindre sidereaktioner, som involverer den reaktionsdygtige α-aminofunktion. Det bør også erkendes, at visse aminosyrer indeholder reaktionsdygtige, funktionelle sidekædegmpper (f.eks. sulfhydryl, epsilon-amino, carboxyl og hydroxyl), og at sådanne funktionelle 5 grupper også må beskyttes både under det indledningsvise og de efterfølgende koblings trin. Egnede beskyttelsesgrupper er kendte inden for området, se f.eks. Protective Groups in Organic Chemistry, M. McOmie, udgiver, Plenum Press, N.Y., 1973.

Ved udvælgelse af en særlig beskyttelsesgruppe må visse betingelser iagttages. En a-aminobeskyttelsesgruppe (1) må være stabil, (2) må gørea-aminofunktionen inaktiv 10 under de anvendte betingelser i koblingsreaktionen og (3) må være let at fjerne efter koblingsreaktionen under betingelser, som ikke vil fjerne sidekædebeskyttelsesgrupper og ikke vil ændre peptidfragmentets struktur. En sidekædebeskyttelsesgruppe (1) må gøre den lunktionelle sidekædegrappe inaktiv under de anvendte betingelser i koblingsreaktionen, (2) må være stabil under de anvendte betingelser ved Qemelse afa-aminobeskyt-15 telsesgruppen og (3) må være let at fjerne efter fuldendelse af den ønskede aminosyrese-kens under reaktionsbetingelser, som ikke vil ændre peptidkædens struktur.

Det vil være åbenbart for fagfolk inden for området, at de beskyttelsesgrupper, som vides at være anvendelige til peptidsyntese, vil variere i reaktivitet og påvirke udvælgelsen af de midler, som anvendes til deres fjernelse. F.eks. er visse beskyttelsesgrupper, 20 såsom triphenylmethyl og 2-(p-biphenylyl)-isopropyloxycarbonyl meget labile og kan spaltes under milde sure betingelser. Andre beskyttelsesgrupper, såsom t-butyloxycarbo-nyl, t-amyloxycarbonyl, adamantyloxycarbonyl og p-ethoxybenzyloxycarbonyl, er mindre labile og kræver moderat stærke syrer, såsom trifluoreddikesyre, saltsyre eller bortri-fluorid i eddikesyre, til deres fjernelse. Atter andre beskyttelsesgrupper, såsom benzyl-25 oxycarbonyl, halogenbenzyloxycarbonyl, p-nitrobenzyloxycarbonyl, cykloalkyloxycarbo-nyl og isopropyloxycarbonyl, er endnu mindre labile og kræver stærke syrer, såsom hydrogenfluorid, hydrogenbromid eller bortrifluoracetat i trifluoreddikesyre, til deres fjernelse.

10 DK 173511 B1

Illustrative eksempler på aminosyrebeskyttelsesgrupper er anført nedenfor.

A. for en a-aminogruppe kan beskyttelsesgrupper omfatte (a) acyltypegrupper, såsom formyl, trifluoracetyl, phthalyl, p-toluensulfonyl (tosyl), benzensulfonyl, nitrophenylsul-fenyl og lignende; (b) aromatiske urethantypegrupper, såsom benzyloxycarbonyl og sub-5 stitueret benzyloxycarbonyl, såsom f.eks. p-chlorbenzyloxycarbonyl, p-bromben-zyloxycarbonyl, p-nitroben-zyloxycarbonyl og p-methoxybenzyloxycarbonyl, o-chlor-benzyl-oxycarbonyl, 2,4-dichlorbenzyloxycarbonyl, 2,6-dichlorbenzyl- oxycarbonyl og lignende; (c) alifatiske urethantypegrupper, såsom t-butyloxycarbonyl, t-amyloxycarbo-nyl, isopropyloxycarbonyl, 2-(p-biphenylyl)-isopropyloxycarbonyl, allyloxycarbonyl og 10 lignende; (d) cykloalkylurethangrupper, såsom cyklopentyloxycarbonyl, cyklohexyloxy-carbonyl, cykloheptyloxycarbonyl, adamantyloxycarbonyl og lignende; (e) thiourethan-typegrupper, såsom phenylthiocarbonyl; (0 alkyltypegrupper, såsom triphenylmethyl; og (g) trialkylsilangrupper, såsom trimethylsilan. En foretrukken a-aminobeskyttel-sesgruppe er t-butyloxycarbonyl (BOC).

15 B. For epsilon-aminobeskyttelsesgruppen, som er til stede i lysin, kan beskyttelse være ved hjælp af en hvilken som helst af de ovennævnte grupper til beskyttelse af en a-ami-nogruppe. Typiske grupper omfatter f. eks. benzyloxycarbonyl, p-chlor-benzyloxycarbo-nyl, p-brombenzyloxycarbonyl, o-chlorbenzyloxy- carbonyl, 2,6-dichlorbenzyIoxycarbo-nyl, 2,4-dichlorbenzyloxycarbonyl, o-brombenzyloxycarbonyl, p-nitrobenzyloxycarbonyl 20 t- butyloxycarbonyl, isopropyloxycarbonyl, t-amyloxycarbonyl, cyklopentyloxycarbonyl, cyklohexyloxycarbonyl, cykloheptyloxycarbonyl, adamantyloxycarbonyl, p-toluensul-fonyl og lignende. Den foretrukne epsilon-aminobeskyttelsesgruppe er o-chlorbenzyl-oxycarbonyl (ClBzl).

C. For hydroxygruppen i serin, threonin eller tyrosin kan beskyttelse f.eks. være ved 25 hjælp af CrC4-alkyl, såsom methyl, ethyl og t-butyl; benzyl; substitueret benzyl, såsom p-methoxybenzyl, p-nitrobenzyl, p-chlorbenzyl og o-chlorbenzyl; Cj-C3-alkanoyl, såsom

II

DK 173511 B1 formyl, acetyl og propionyl; triphenylmethyl; eller benzoyl. Den foretrukne hydroxyl-beskyttelsesgruppe er benzyl (Bzl).

D. For carboxylgruppen i asparaginsyre eller glutaminsyre kan beskyttelse f.eks. være ved hjælp af esterificering under anvendelse af grupper, såsom benzyl, t-butyl, cyklo-5 hexyl, cyklopentyl og lignende. De for tiden udvalgte grupper er cyklohexyl og cyklo-pentyl.

Som anvendt heri refererer betegnelsen "C"- eller carboxyterminalaktiveringsgruppe" til en gruppe, som gør carboxylgruppen i en aminosyrerestmere tilbøjelig for omsætning med en fri N-terminalaminogruppe (i et peptidfragment).

10 For eksempel kan aminosyren omdannes til et blandet anhydrid ved omsætning af en beskyttet aminosyre med ethylchlorformiat, phenylchlorformiat, sec-butylchlorformiat, isobutylchlorformiat, pivaloylchlorid eller lignende syrechlorider. Aminosyren kan alternativt omdannes til en aktiv ester, såsom 2,4,5-trichlorphenylester, pentachlorphenyl-ester, p-nitrophenylester, en ester dannet ud fra N-hydroxysuccinimid, N-hydroxyphthal-15 imid, eller en ester dannet ud fra 1-hydroxybenzotriazol.

Som anvendt heri, refererer betegnelserne "aralkyloxycarbonyl", "alkyloxycarbonyl" og ’’cyklooxycarbonyl" til aminobeskyttelsesgruppeme som anført ovenfor, hvori aryt-, alkyl- og cykloalkylradikaleme er som defineret heri.

Visse substituenter på pyrrolidinringen kan eksistere i cis- eller trans-stereokemiske 20 former. De rene isomerer eller blandinger deraf er også omfattet af opfindelsen.

Visse forbindelser ifølge opfindelsen kan eksistere i optisk aktive former. De rene R-isomerer, rene S-isomerer såvel som blandinger deraf, herunder de racemiske blandinger, er omfattet af opfindelsen. Yderligere asymmetriske carbonatomer kan være til 12 DK 173511 B1 stede i en substituent, såsom en alkylgruppe. Alle sådanne isomerer såvel som blandinger heraf er tilsigtet at være indbefattet i opfindelsen.

Den stereoisometriske konfiguration af aminosyreme ifølge opfindelsen kan være enten D- eller L-formen eller en blanding af konfigurationer. Aminosyreme har imidlertid 5 fortrinsvis alle L-form. Sekvensen af aminosyrer i en peptidkæde læses fra venstre til højre fra amino(N)-terminalen til carboxy(C)-terminalen, som det konventionelt anvendes inden for området.

Forbindelserne ifølge opfindelsen udviser et bredt antibakterielt spektrum over for gram-positive og gram-negative bakterier.

10 Forbindelserne ifølge opfindelsen er også anvendelige som kemoterapeutisk aktive forbindelser til behandling af pattedyr.

Forbindelserne kan endvidere anvendes i renseopløsninger til overfladeinhibering af bakterievækst, f.eks. på skrankeoverflader og lignende, og som stoffer til konservering af uorganiske og organiske materialer, især alle slags organiske materialer, f.eks. poly-15 merer, smøremidler, malinger, fibre, læder, papir og træ, fødevarer og vand.

Forbindelserne ifølge opfindelsen er særligt aktive over for bakterier og bakterielignende mikroorganismer. De er derfor særligt egnede i human- og veterinærmedicin til profylakse og kemoterapi af lokale og systemiske infektioner, der bæres af patogener, såsom stafylokokker (Staph, aureus og Staph, epidermidis) og streptokokker (Strep, agalactiae, 20 Strept. facealis, Strep, pneumoniae, Strep, bovis og Strept. pyogenes); Neisseria, (Neisseria gonorrhoeme), Enterobacteriaceae, f.eks. Escherichia, Haemophilus influenza, Citrobacter (Citrob freundil og Citrob. divermis), Salmonella og Shigella og Klebsiellae (Klebs. pneumoniae og Klebs. oxyvocs), Micrococcus, Entrobacter (Ent. aerogenes og Ent. agglumerenx), Hafriia, Serratia (Serr. marcescens), Proteus (Pr. mirabillis, Pr.

25 rettgerri og Pr. vulgaris), Providencia, Yersinia og slægten af Acineobacter. Det anti- 13 DK 173511 B1 bakterielle spektrum omfatter også slægten Pseudomonas (Ps. aeruginosa, Ps. cepacia og Ps. maltophilia), slægten Chlamydia, (såsom Chlamydia trachomatis) såvel som anaerobe bakterier, såsom f.eks. bacteroides fragilis, repræsentanter for slægten Peptococ-cus, Peptostreptococcus og slægten Clostridium; og yderligere Mycoplasma (M. pneu-5 moniae, M. hominis og M. urealyticum) og Mycobactria, f.eks. Mycobacterium tuberculosis.

Eksempler på sygdomme, som kan forårsages af patogeneme (eller blandede infektioner som anført ovenfor), og som kan behandles med forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse, er: infektiøse sygdomme i mennesker, såsom otitis, pharyngitis, Iungebetæn-10 delse, peritonitis, pyelonephritis, cystitis, endocarditis, systemiske infektioner, bronkitis (akut og kronisk), septiske infektioner, sygdomme i det øvre luftvejsrør, diffus panbron-chiolitis, lungeemfysem, dysenteri, enteritis, leverabscesser, uretritis, prostatitis, epididymitis, mavetarminfektioner, knogle- og ledinfektioner, cystisk fibrose, hudinfektioner, postoperative sårinfektioner, abscesser, flegmoner, sårinfektioner, inficerede forbræn-15 dinger, brandsår, infektioner i mundregionen, infektioner efter tandoperationer, osteomyelitis, septisk artritis, peritonitis med appendicitis, chlolangitis, intraabdominale abscesser, pancreatitis, sinusitis, mastoiditis, mastitis, tonsillitis, tyfus, meningitis og infektioner i nervesystemet, salpingitis, endometritis, genitalinfektioner, pelveoperitoni-tis og øjeninfektioner.

20 Repræsentative eksempler på dyr og infektioner i sådanne dyr, hvilke infektioner kan behandles, er: gris: coli-diarré, enterotoxæmi, sepsis, dysenteri, salmonellose, metritis-masti-tis-agalactieasyndrom og mastitis; drøvtyggere (kvæg, får, geder): diarré, sepsis, bron-kopneumoni, salmonellosis, pasteurellosis, mycoplasmosis og genitalinfektioner; heste: 25 bronkopneumoni, ledsygdom, puerperale og postpuerperale infektioner og salmonellosis; hunde og katte: bronkopneumoni, diarré, dermatitis, otitis, urinvejsinfektioner og prostatitis; fjerkræ (høns, kalkuner, vagtler, duer, omamentalfugle og andre): mycoplasmosis, 14 DK 173511 B1 E. coli-infektioner, kroniske infektioner i luftvejen, salmonellosis, pasteurellosis og psittacosis.

Bakterieinfektioner i avl og opdræt af kreaturbesætning og omamentalfisk kan ligeledes behandles, idet det antibakterielle spektrum øges ud over de ovennævnte patogener til 5 yderligere patogener, såsom f.eks. Pasteurella, Brucella, Campylobacter, Listeris, Erysipelothrix, Corynebactria, Borellia, Treponema, Nocardia, Rickettsia og Yersinia.

Ud over at udvise meget effektiv antibakteriel aktivitet udviser forbindelserne ifølge opfindelsen forøget og forbedret opløselighedskarakteristika i sammenligning med kendte naphthyridin- og qmnolin-3-carboxylsyreforbindelser. Det menes også, at forbindelserne 10 ifølge opfindelsen kan virke som prolægemidler for kendte naphthyridin- og quinolin-3-carboxylsyreforbindelser, såsom tosufloxacin.

Den foreliggende opfindelse omfatter en eller flere af forbindelserne med formlen I formuleret til midler sammen med en eller flere ikke-toksiske farmaceutisk acceptable bærere, hjælpestoffer eller vehikler, som kollektivt refereres til heri som bærere, til 15 parenteral injektion, oral administration i fast eller flydende form, rektal administration og lignende.

Ikke-toksiske, inaktive farmaceutisk egnede bærere omfatter faste, halvfaste eller flydende fortyndingsmidler, fyldstoffer og formuleringshjælpestoffer af alle typer.

Midlerne kan indgives til mennesker og dyr enten oralt, rektalt, parenteralt (intravenøst, 20 intramuskulært eller subkutant), intfacistemalt, intravaginalt, intraperitonealt eller lokalt (pulvere, salver eller dråber) og til terapi af infektioner i hulrum og legemshulrum.

Midler ifølge opfindelsen til parenteral injektion kan omfatte farmaceutisk acceptable sterile vandige eller ikke-vandige opløsninger, dispersioner, suspensioner eller emulsioner og sterile pulvere til genfortynding til sterile injektionsopløsninger eller -dispersio- 15 DK 173511 B1 ner. Eksempler på egnede vandige og ikke-vandige bærere, fortyndingsmidler, opløsningsmidler eller vehikler omfatter vand, ethanol, polyoler (propylenglycol, polyethy-lenglycol, glycerol og lignende), egnede blandinger heraf, vegetabilske olier (såsom olivenolie) og injicerbare organiske estere, såsom ethyloleat. Korrekt fluiditet kan bibe-5 holdes, f.eks. ved anvendelse af et overtræk, såsom lecitin, ved bibeholdelse af den krævede partikelstørrelse i tilfældet af dispersioner og ved anvendelse af overfladeaktive midler.

Disse midler kan også indeholde hjælpestoffer, såsom konserverings-, befugtnings-, emulgerings- og dispenseringsmidler. Forhindring af virkningen af mikroorganismer kan 10 sikres ved hjælp af forskellige antibakterielle og antifiingale midler, f.eks. parabener, chlorbutanol, phenol, sorbinsyre og lignende. Det kan også være ønskeligt at indbefatte isotoniske midler, f.eks. sukkerarter, natriumchlorid og lignende. Forlænget absorption af den injicerbare farmaceutiske form kan tilvejebringes ved anvendelse af midler, som forsinker absorption, f.eks. aluminiummonostearat og gelatine.

15 Forbindelserne kan om ønsket og til mere effektiv fordeling inkorporeres i afgiftssystemer med langsom frigivelse eller indskudte (eng.: targeted) afgiftssystemer, såsom polymere matrikser, liposomer og mikrosfærer. De kan steriliseres, f.eks. ved filtrering gennem et bakterietilbageholdende filter eller ved inkorporering af sterilisationsmidler i form af sterile faste midler, som kan opløses i sterilt vand, eller et andet sterilt injicer-20 bart medium umiddelbart før brug.

Faste doseringsformer til oral administration omfatter kapsler, tabletter, piller, pulvere og granula. I sådanne faste doseringsformer blandes den aktive bestanddel med mindst en inaktiv, sædvanlig excipiens (eller bærer), såsom natriumcitrat eller dicalciumphos-phat, eller (a) fyldstoffer og strækmidler, såsom f.eks. stivelser, lactose, saccharose, 25 glucose, mannitol og kiselsyre, (b) bindemidler, såsom f.eks. carboxymethylcellulose, alginater, gelatine og polyvinylpyrrolidon, saccharose og akacie, (c) humectanter, f.eks. glycerol, (d) desintegrationsmidler eller sprængemidler, såsom f.eks. agar-agar, calcium- 16 DK 173511 B1 carbonat, kartoffel- eller tapiokastivelse, alginsyre, visse komplekse silikater og natrium-carbonat, (e) opløsningsretarderende midler, såsom f.eks. paraffin, og (f) absoiptionsac-celererende midler, såsom f.eks. kvatemære ammoniumforbindelser, (g) befugtnings-raidler, såsom f.eks. cetylalkohol og glycerolmonostearat, (h) adsorberende midler, 5 såsom f.eks. kaolin og bentonit, og (i) smøre- eller glittemidler, såsom f.eks. talkum, calchimstearat, magnesiumstearat, faste polyethylenglycoler, natriumlaurylsulfat eller blandinger heraf. I tilfældet af kapsler, tabletter og piller kan doseringsformeme også omfatte stødpudegivende midler.

Faste midler af en tilsvarende type kan også anvendes som fyldstoffer i bløde og hårde 10 gelatinekapsler under anvendelse af sådanne excipienser som lactose eller mælkesukker, såvel som højmolekylære polyethylenglycoler.

De faste doseringsformer af tabletter, drageer, kapsler, piller og granula kan fremstilles med overtræk og skaller, såsom enteroovertræk og andre, som er velkendte inden for området. De kan eventuelt indeholde opacitetsgivende midler, og de kan også være af 15 en sådan sammensætning, at de kun eller fortrinsvis frigiver den eller de aktive forbindelser i en bestemt del af tarmkanalen, eventuelt på en forsinket måde, og eksempler på indesluttende midler, som kan anvendes, er polymere substanser og voksarter.

De aktive forbindelser kan også i mikroindkapslet form, hvis det er hensigtsmæssigt, sammen med et eller flere af de ovennævnte excipienser.

20 Flydende doseringsfonner til oral administration omfatter farmaceutisk acceptable emulsioner, opløsninger, suspensioner, sirupper og eliksirer. Ud over de aktive forbindelser kan de flydende doseringsformer indeholde inaktive fortyndingsmidler, der sædvanligvis anvendes inden for området, såsom vand eller andre opløsningsmidler, solubili-serende midler og emulgatorer, såsom f.eks. ethylalkohol, isopropylalkohol, ethylcarbo-25 nat, ethylacetat, benzylalkohol, benzylbenzoat, propylenglycol, 1,3-butylenglycol, dime-thylformamid, olier, især bomuldsfrøolie, jordnøddeolie, majskimolie, olivenolie, 17 DK 173511 B1 ricinusolie og sesamolie, glycerol, glycerolformal, tetrahydrofurfurylalkohol, polyethy-lenglycoler og fedtsyreestere af sorbitan eller blandinger af disse stoffer.

Ud over sådanne inaktive fortyndingsmidler kan midlet også indbefatte hjælpestoffer, såsom befiigtningsmidler, emulgerings- og suspenderingsmidler, sødemidler, aromamid-5 ler og parfumemidler.

Ud over de aktive forbindelser kan suspensioner indeholde suspenderingsmidler, såsom f.eks. ethoxyleredeisostearylalkoholer, polyoxyethylensorbitol og sorbitanestere, mikro-krystallinsk cellulose, alumimummetahydroxid, bentonit, agar-agar og tragant, eller blandinger af disse stoffer.

10 Midler dl rektale administradoner er fortrinsvis suppositorier, som kan fremstilles ved at blande forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse med egnede ikke-irriterende excipienser eller bærere, såsom kakaosmør, polyethylenglycol eller en suppositorievoks, hvilke er faste ved almindelige temperaturer, men flydende ved legemstemperatur og derfor smelter i rektum eller vaginalhulen og frigiver den aktive bestanddel.

15 Doseringsformer dl topisk administration af en forbindelse ifølge den foreliggende opfindelse omfatter salver, pastaer, cremer, geler, pulvere, spraymidler og inhalationsmidler. Den aktive bestanddel blandes under sterile forhold med en farmaceutisk acceptabel bærer og hvilke som helst krævede konserveringsmidler eller puffere, som kan være påkrævede. Oftalmologiske formuleringer, øredråber, øjensalver, pulvere og opløs-20 ninger er også omfattet som værende inden for den foreliggende opfindelses omfang. Salverne, pastaerne, cremerne og gelerne kan ud over en aktiv forbindelse ifølge den foreliggende opfindelse indeholde excipienser, såsom animalske og vegetabilske fedtstoffer, voksarter, paraffiner, stivelse, tragant, cellulosederivater, polyethylenglycoler, siliconer, bentonitter, kiselsyre, talkum og zinkoxid eller blandinger deraf.

18 DK 173511 B1

Pulvere og spraymidler kan ud over forbindelser ifølge den foreliggende opfindelse indeholde excipienser, såsom lactose, talkum, kiselsyre, aluminiumhydroxid, calciumsi-likater og polyamidpulver eller blandinger af disse stoffer. Spraymidler kan endvidere indeholde sædvanlige drivmidler, såsom f.eks. chlorfluorhydrocarboner.

5 Faktiske doseringsniveauer af aktiv bestanddel i midlerne ifølge opfindelsen kan varieres til opnåelse af en mængde af aktiv bestanddel, som er effektiv til at opnå antibakteriel aktivitet i overensstemmelse med den ønskede administrationsmetode. Det valgte doseringsniveau afliænger derfor af naturen af den administrerede aktive forbindelse, administrationsvejen, den ønskede varighed af behandling og andre faktorer.

10 Daglige doseringsniveauer af forbindelserne med formlen I er generelt ca. 0,1 til ca.

750, fortrinsvis ca. 0,25 til ca. 500 og mest foretrukket ca. 0,5 til ca. 300 mg aktiv bestanddel pr. kg legemsvægt og er effektive ved indgivelse til en pattedyrspatient, som lider af en infektion, som er forårsaget af en følsom organisme. Den daglige dosis kan om ønsket deles i flere doser til administration f.eks. to til fire gange dagligt.

15 En individuel enhedsdosis indeholder fortrinsvis den eller de aktive bestanddele ifølge den foreliggende opfindelse i mængder på ca. 0,5 til ca. 80, især 0,5 til 30 mg/kg legemsvægt. Det kan imidlertid være nødvendigt at afvige fra de nævnte doseringer.

Syntese af forbindelserne:

De antibakterielle naphthyridinforbindelser ifølge den foreliggende opfindelse med en 20 7-((3-amino)-1 -pyrrolidinyI)substituentgruppe kan syntetiseres ved konventionelle metoder, som er kendte inden for området, såsom f.eks. dem, der er beskrevet i US-patent-skriftnr. 4.616.019, udstedt7. oktober 1986ellerUS-patentskriftnr. 4.649.144, udstedt 10. marts 1987.

19 DK 173511 B1

Et generelt reaktionsskema til fremstilling af forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse ved standardaminosyrekoblingsteknikker, som det er velkendt inden for området og eksemplificeret ved eksempel 1-3, er som følger: 20 DK 173511 B1 r iDd*”" -*=— '£0” xn o k ^\ H H - ft i" Μχ. n . .

a friglve F^CT" Q ^ « X f3$OT " *· A'™ F Co di ΡγΛ»-Ρι, 1 Ij l\ r fciS-* V k< Fifxfj Q *· ^////frigive

O

F ^ C ^

-cf* L

A^-A.-Vh 21 DK 173511 B1 hvori X* R, er som defineret tidligere; A, og A2 er aminosyrerester, som beskrevet tidligere, og er en aminobeskyttelsesgruppe, og P2 er en carboxyaktiveringsgruppe også som beskrevet tidligere, og Y er en leavinggruppe, såsom en chlor-, brom-, fluoreller thiomethylgruppe.

5 Dipeptidsolubiliseringsgruppeme kan fremstilles ved en hvilken som helst af en varietet af kendte peptidsynteseteknikker, herunder klassiske metoder (opløsning), fastfasemeto-der og de mere nyligt tilgængelige rekombinerede DNA-metoder.

En metode til fremstilling af dipeptidsolubiliseringsgruppeme er ved fastfaseteknikken, hvori aminosyresekvensen konstrueres i rækkefølge fra en initiel uopløselig harpiks-støt-10 tet C-terminalaminosyre. Teknikker til fastfasemetoden er beskrevet af J. Stewart et al. i Solid Phase Peptide Synthesis, Freeman and Co., San Francisco, 1969.

Ved fastfasemetoden forankres aminosyren, som svarer til den C-terminale aminosyre-rest af det ønskede peptid, generelt til en uopløselig harpiksstøtte, og peptidkæden dannes derefter begyndende ved den harpiks-støttede C-terminale aminosyre. Individuel-15 le aminosyrer indføres i rækkefølge, indtil den ønskede aminosyresekvens opnås. Alternativt kan små peptidfragmenter fremstilles og indføres i peptidkæden i den ønskede rækkefølge. Peptidkæden forbliver bundet til harpiksen under syntesen, og efter færdiggørelse af kæden spaltes peptidet fra harpiksen.

Peptidkæden bindes til polystyrenharpiksen ved hjælp af en esterbinding, som dannes 20 mellem carboxylgruppen i den C-terminale enhed og en af de methylengrupper, som er til stede på harpiksmatriksen som steder for en sådan binding. Polystyrenharpiksen er en styrenpolymer, som er tværbundet ved tilsætning af ca. 0,5 til ca. 3 % divinylbenzen, og som er chlormethyleret eller hydroxymethyleret til tilvejebringelse af steder for esterdannelse. Et eksempel på en hydroxymethyleret harpiks er beskrevet af Bodanszky 25 et al. i Chem. Ind. (London), 38,1597-98 (1966). En chlormethyleret polystyrenharpiks er kommercielt tilgængeligt fra Lab System, Inc., San Mateo, Californien. Harpiksen 22 DK 173511 B1 er også beskrevet af Stewart et al., i Solid Phase Peptide Synthesis, Freeman and Co.,

San Francisco, Californien, side 1-6.

Aminosyreme kobles under anvendelse af teknikker, som er velkendte inden for området vedrørende dannelse af peptidbindinger. Bi metode involverer omdannelse af amino-5 syren til et derivat, som vil gøre carboxylterminusgruppen mere modtagelig for reaktion med den frie N-terminale aminogruppe af peptidfragmentet.

En anden koblingsmetode involverer anvendelse af et egnet koblingsmiddel, såsom Ν,Ν’-dicyklohexylcarbodiimid (DCC) eller N,N'-diisopropylcarbodiimid(DIC). Andre hensigtsmæssige kob- lingsmidler vil være nærliggende for fagfolk inden for området.

10 Se Schroder og Lubke, The Peptides, Academic Press, 1965, kapitel ΙΠ.

Efter færdiggørelse af den ønskede peptidsekvens må det beskyttede peptid spaltes fra harpiksstøtten, og alle beskyttelsesgrupper må fjernes. Spaltningsreaktionen og fjernelsen af beskyttelsesgrupperne kan gennemføres samtidigt eller trinvist. Når harpiksstøtten er en chlormethyleret polystyrenharpiks, er bindingen, som forankrer peptidet til harpiksen, 15 en esterbinding, som dannes mellem den frie carboxylgruppe i den C-terminale enhed og en af de mange chlormethylgrupper, som er til stede på harpiksmatriksen. Det vil erkendes, at forankringsbindingen kan spaltes ved hjælp af reagenser, som vides at være i stand til at bryde en esterbinding og penetrere harpiksmatriksen. En særlig hensigtsmæssig metode er ved behandling med flydende hydrogenfluorid. Dette reagens vil ikke 20 kun spalte peptidet fra harpiksen, men vil også gerne alle beskyttelses- og aktiverings-grupper. Anvendelse af dette reagens vil derfor direkte tilvejebringe det ønskede peptid.

Når det ønskes at spalte peptidet uden at gerne beskyttelsesgrupper, kan den beskyttede peptidharpiks undergå methanolyse til opnåelse af det beskyttede peptid, hvori den C-terminale carboxylgruppe er methyleret. Methylesteren kan derefter hydrolyseres 25 under milde, alkaliske betingelser til opnåelse af den frie C-terminale carboxylsyre. Beskyttelsesgrupperne på peptidkæden kan derefter gernes ved behandling med en stærk 23 DK 173511 B1 syre, såsom flydende hydrogenfluorid. En særlig anvendelig teknik til methanolyse er den af G. Moore et al., Peptides, Proc. 5th Amer. Pept. Symp., M. Goodman og J. Meinhofer, udgiver, John Wiley, N.Y., 1977, side 518-521, hvori den beskyttede peptidharpiks behandles med methanol og kaliumcyanid i nærværelse af kroneether.

5 En anden metode til spaltning af det beskyttede peptid fra harpiksen er ved ammonolyse eller ved behandling med hydrazin. Det resulterende C-terminale amid eller hydrazid kan hydrolyseres til den frie C-terminale carboxyl, og beskyttelsesgrupperne kan fernes konventionelt.

Det vil også erkendes, at beskyttelsesgrupperne, som er til stede på den N-terminale 10 a-aminogruppe, kan fjernes fortrinsvis enten før eller efter det beskyttede peptid spaltes fra harpiksstøtten.

Beskyttelsesgrupperne fjernes på anden måde ved passende behandling som kendt inden for området. Fjernelse af dinitrophenylgruppen fra His-holdige peptider udføres sædvanligvis med N-methylmercaptoacetamid i DMF. N-formylgruppen fjernes sædvanligvis 15 fra Try ved behandling med NaOH ved pH-værdi 11,5 i nærværelse af hydrazin. Andre beskyttelsesgrupper fjernes ved behandling med anisol og vandfrit HF.

De følgende eksempler illustrerer en foretrukken metode til fremstilling af repræsentative forbindelser ifølge opfindelsen.

Eksempel 1 20 7-[(3-Gly-L-Phe-amino)-1 -pyrrolidinyl]-1 -(2,4-difluorphenyl)-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxyIsyrehydrochlorid.

a) Til en kold opløsning af 7-(3-amino-l-pyrrolidinyl)-1-(2,4- difluorphenyl)-l,4-dihy-dro-4-oxo-l,8-naphthyridin-3-carboxylsyretosylat (2,08 g) i tørt dimethylformamid 24 DK 173511 B1 (DMF) (80 ml) sættes N-carbobenzyloxy-glycyl-L-phenylalanin-N-hydroxysucci nimid-ester (1,80 g) efterfulgt af N-methylmorfolin (803 mg). Blandingen omrøres i kulde i yderligere 1 time og derefter ved stuetemperatur i ca. 17-18 timer. Den resulterende opløsning udhældes i 500 ml 0,5 N HC1, og blandingen ekstraheres med 2 x 250 ml 5 CHC13. De kombinerede ekstrakter vaskes med en 5% NaHC03-opløsning, og den organiske fase tørres over MgS04 og inddampes til at efterlade en opløsning af DMF og produkt. Det resterende DMF fjernes ved co-destillation med toluen, ethylendichlorid, CHCI3 og CH2C12 til at efterlade 2,66 g af et hvidfarvet skum. Findeling med ether gav 2,56 g af det ønskede produkt. IR- og NMR-analyse bekræftede produktet.

10 NMR-data (CDC13) delta: 3,75(d) 2-H, 4,44(m) 1-H, 4,66 (m) 1-H, 4,92(m) 2-H, 5,40 (m) 1-H, 6,55(m) 1-H, 7,00-7,30(m) i 1-H, 7,35(m) 4-H, 7,92(d) 1-H, 8,47(d) 1-H; IR-data: (CDC13); CO, cm1630, 1665,1720; [a]D =-19° (CHCI3);MS (M+l)+=743 m/z.

b) 7-(3-N-carbobenzyloxy-Gly-L-Phe-amino)- 1-pyrrolidinyl]-1 -(2,4-dif!uorphenyl)-6-15 fluor-l,4-dihydro-4-oxo-I,8-naphthyridin-3-carboxylsyre (2,55 g), 10% Pd/C (tørt) (1,25 g) og 150 ml eddikesyre omsættes i et Parr Shaker-apparat under 60 psi hydrogenatmosfære i et tidsrum på ca. 24 timer. Efter omsætningen er tilendebragt, udluftes hydrogenet, og katalysatoren fjernes ved filtrering, og reaktionsblandingen vaskes intimt. Filtratet inddampes til efteriadelse af en_ rest. Denne rest behandles med 0,5N HC1 i 20 ethanolopløsning og inddampes. Det resterende HC1 fjernes ved co-destillation med ethanol til efteriadelse af 1,77 g af et lysegult pulver. NMR- og IR-analyse bekræftede produktidentifikation. MS (M+1)+=609 m/z. [a]D = +35° (CH3OH).

NMR-data (DMSO): delta: 2,84(m) 2-H, 3,50(m) 2-H, 4,20(m) 1-H, 4,51(m) 1-H, 7,03(m) 1-H, 7,03(m) 1-H, 7,10-7723 (m)'5“-H, 7,35(m) 1-H, 7,60(m) 1-H, 7,80(m) 25 1-H, 8,05(m) 2-H, 8,40(m) 1-H, ll,43(s) 1-H.

IR-data (KBR) CO, cm1: 1630, 1670, 1710.

25 DK 173511 B1

Eksempel 2: udgået Eksempel 3 7-(3-L-norvalin-L-norvalin-amino-l.-pyrrolidinyl)-l-(2,4-difIuorphenyl)-6-fluor-5 1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyrehydrochlorid.

(a) Til en kold opløsning af (3-L-norvalin-amino-l -pyrrolidi- nyl)-l-(2,4-difluorphenyl)- 6-fluor-l ,4-dihydro-4-oxo-l ,8- naphthyridin-3-carboxylsyrehydrochlorid (681 mg) i tørt DMF (20 ml) sættes N-carbobenzyloxy- l-norvalin-N-hydroxyphthal- imidester (500 mg) efterfulgt af methylmorfolin (255 mg). Blandingen omrøres i kulde i yderligere en time 10 og derefter ved stuetemperatur ca. 17-18 timer. Den resulterende opløsning udhældes i 250 ml 0,5N HC1, og blandingen ekstraheres med 2 x 200 ml portioner af CHC13. De kombinerede ekstrakter vaskes med 5 % NaHC03-opløsning, og den organiske fase tørres over MgS04 og inddampes til at efterlade en opløsning af DMF og produkt. Det resterende DMF fjernes ved co-destillation med toluen, med ethylendichlorid, CHCI3 og 15 CH2C12 til efterladelse af 768 mg af et lysegult skum. Resten oprenses ved søjlekromatografi (EM Sciences Silica Gel, 70-230 mesh) til opnåelse af 469 mg af produktet.

[a] D = -2,6° (CHC13); MS (m + 1) = 737 m/z.

NMR-data (DMSO) - delta: 0,8(m) 6-H, l,25(m) 6-H, l,50(m) 4-H, 3,95(m) 2-H, 4,16(m) 2-H, 4,25(m) 1-H, 4,97(m) 2-H, 7,33(m) 5-H, 7,40(m) 1-H, 7,55(m) 1-H, 20 7,75(m) 1-H, 7,85(m) 1-H, 8,05(m) 1-H, 8,15(m) 1-H, 8,77(m) 1-H.

IR-data (CHC13) CO cm ': 1635, 1660, 1720.

(b) En blanding af 7-(3-N-carbobenzyloxy-L-norva1in-L-norvalin-arnino-l-pyrrolidi-nyl)- l-(2,4-difluorphenyl)-6-fluor-l ,4-dihydro-4-oxo-l ,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 26 DK 173511 B1 (449 mg), 10% Pd/C (tørt, 225 mg) og 50 ml eddikesyre omsættes i et Parr Shaker-apparat under 60 psi hydrogenatmosfære i ca. 24 timer. Efter omsætningen er tilendebragt, udluftes hydrogenet, og katalysatoren fjernes ved filtrering, og reaktionsblandingen vaskes grundigt. Filtratet inddampes til efterladelse af en rest. Denne rest behandles med 5 0,5N HC1 i ethanol og inddampes. Det resterende HC1 blev fjernet ved co-destillation med ethanol til efterladelse af 267 mg af et lysegult pulver med smeltepunkt = 218°-220°C, [a]D = +15,4 (CH}OH), MS (M+l)+= 603 m/z.

NMR-data (DMSO) delta: 0,82(m) 6-H, l,25(m) 4-H, l,63(m) 4-H, 3,77(m) 1-H, 4,24(m) 2-H, 7,33(m) 1-H, 7,57(m) 1-H, 7,80(m) 1-H, 8,10(d) 1-H, 8,20(m) 2-H, 10 8,40(m) 1-H, 8,61(m) 1-H, 8,82(s) 1-H.

IR-data: KBRCO, cm'1 - 1630, 1670, 1718.

Eksempel 4-7: udgået

Under anvendelse af metoden som beskrevet i enten eksempel la eller 3a og ved at 15 substituere solubiliseringsgruppen A med Phe-GIy opnås den beskyttede Phe-Gly-for-bindelse (I) (R* = 2,4-difluorphenyl, X=N, R2 = H, A = carbobenzyloxy Phe-GIy).

MS (M+1)+ = 828 m/z.

[a]D = -4,7 (CHC13).

NMR-data: (CDC13) delta: 2,05(m) 2-H, 2,97(m) 1-H, 3,13(m) 1-H, 3.40(d) 1-H, 20 4,23(m) 1-H, 4,50(m) 1-H, 4,89(m) 2-H, 5,22(m) 1-H, 7,05-7,35(m) 16-H, 7.88(d) 1-H, 8,45(m) 1-H.

27 DK 173511 B1 IR-data: (CDC13)C0, cm'1: 1635, 1670, 1710.

Eksempel 9

Under anvendelse af metoden som beskrevet i eksempel 3b med forbindelsen ifølge eksempel 8 opnås det afblokerede Phe-Gly(HCl)-salt (I) (R! = 2,4-difluorphenyl, R2 = 5 Phe-Gly).

NMR-data: (DMSO) delta: l,85(m) 1-H, 2,05(m) I-H, 2,95(m) 1-H, 3,10(m) 1-H, 3,75(m) 2-H, 4,05(m) 1-H, 4,30(m) 1-H, 7,27 (m) 4-H, 7,60(m) 1-H, 7,70(m) 1-H, 8,10(m) 1-H, 8,35(m) 1-H, 8,82(s) 1-H.

IR-data (KBr) CO, cm'1: 1630; 1680, 1720.

10 Eksempel 10

Under anvendelse af metoden som beskrevet i enten eksempel la eller 3a og ved at substituere solubiliseringsgruppen A med Ala-Phe opnås den beskyttede Ala-Phe-for-bindelse (I) (Rj = 2,4-difluorphenyl, 1¾ = H, A = carbobenzyloxy Ala-Phe). MS (M+l)+ = 757 m/z.

15 NMR-data: (CDC13) delta: l,25(m) 3-H, 2,05(m) 1-H, 3,13(m) 3-H, 4,00(m) 1-H, 4,46(m) 1-H, 4,62(m) 1-H, 4,86(m) 1-H, 4,86(m) 1-H, 5,05(m) 1-H, 6,41(m) 1-H, 7,00-7,40(m) 14-H, 7,96(m) 1-H, 8,52(m) 1-H.

Eksempel 11

Under anvendelse af metoden som beskrevet i eksempel 3b med forbindelsen ifølge 20 eksempel 10 opnås det afblokerede Ala-Phe (HCl)-salt, (I)(R, = 2,4-difluorphenyl, R2 = H, A = Ala-Phe), smp. I95-198°C; [a]D - +45,2 (CH3OH). MS (M+l)+ = 623 m/z.

28 DK 173511 B1 IR (KBr) CO, cm*1: 1630, 1670, 1720.

NMR-data: (CD3OD) delta: l,47(m) 3-H, l,90(m) 1-H, 2,96(m) 2-H, 3,90(m) 1-H, 5 4,23(m) 1-H, 4,53(m) 1-H, 6,98(m) 1-H, 7,07(m) 1-H, 7,15(m) 1-H, 7,25(m) 5-H, 7,65(m) 1-H, 8,05(m) 1-H, 8,78(m) 1-H.

Eksempel 12-13: udgået

Eksempel 14

Under anvendelse af metoden som beskrevet i enten eksempel 1 eller 3a og ved at substi-10 tuere solubiliseringsgruppen A med Ala-Ala opnås den beskyttede Ala-AIa-forbindelse (1) (Rj = 2,4-difIuorphenyI, R2 = H, A = carbobenzyloxy Ala-Ala). MS (M+l)+ = 681 m/z. [a]D = -12,1°C (CHC13) eller 4,0 (DMSO), smp. 160-164°C.

NMR-data: delta: l,37(m) 6-H, 2,00(m) 2-H, 3,40(m) 2-H, 4,07(m) 1-H, 4,45(m) 2-H, 4,96(m) 2-H, 5,20(m) 1-H, 6,46(m) 1-H, 7,06(m) 2-H, 7,33(m) 5-H, 7,43(m) 1-H, 15 8,50(d) 1-H.

IR-data: (CDC13) CO cm1: 1630, 1670, 1719.

Eksempel 15

Under anvendelse af metoden som beskrevet i eksempel 3b med forbindelsen ifølge eksempel 14 opnås det afblokerede Ala-Ala (HCl)-salt, (I)(R3 = 2,4-difluorphenyl, 20 = H, A = Ala-Ala), smp. = 202-205°C, [a]D = 10,4° (CH3OH); MS (M+1)+= 547 m/z.

29 DK 173511 B1 NMR-data(DMSO)delta: l,20(t)3-H, 1,30(d) 3-H, l,80(m)2-H,2,03(m)2-H, 3,83(m) 2-H, 4,24(m) 2-H, 7,33(m) 1-H, 7,58(m) 1-H, 7,80(m) 1-H, 8,15(m) 2-H, 8,36(m) 1Ή, 8,61 (m) 1-H, 8,82(s) 1-H.

Eksempel 16-50: udgået 5 Eksempel 51

Under anvendelse af metoden som beskrevet i enten eksempel la eller 3a og ved at substituere solubiliseringsgruppen A med Gly-Nval opnås den beskyttede Gly-Nval-forbindelse (I) (Rt = 2,4-difluorphenyI, R2 H, A = carbobenzyloxy Gly-Nval). MS (m+1)+ = 695 m/z [a]D = - ll,2(CDCl3), smp. 115-117°C.

10 NMR-data: (CDClj) delta: 0,90 (m) 3H, 1,30 (m) 3H, 1,65 (m) 3H, 1,85 (m) IH, 2,03 (m) 2H, 3,30 (m) 2H, 3,85 (m) 4H, 4,57 (m) 4H, 5,05 (s) 2H, 5,52 (m) IH, 6,62 (m) IH, 7,10 (m) 4H, 7,32 (m) 6H, 7,85 (d) IH, 8,43 (d) IH.

IR-data: (CDC13) CO, cm'1: 1630, 1670, 1722.

Eksempel 52 15 Under anvendelse af metoden som beskrevet i eksempel 3b med forbindelsen ifølge eksempel 51 opnås det afblokerede Gly-Nval (HCI)-salt, (I) (Ri = 2,4-difluorphenyl, R2 =H, A - Gly-Nval). smp. = 180-182°C, MS (m+l)+ = 561 m/z, [a]D « 5,3° (CH3OH).

NMR-data: (DMSO) delta: 0,83 (m) 3H, 1,22 (m) 3H, 1,50 (m) 3H, 1,80 (m) IH, 2,02 20 (m) IH, 3,55 (s) 2H, 4,27 (m) 2H, 7,32 (m) IH, 7,60 (m) IH, 7,81 (m) IH, 8,02 (m) 2H, 8,10 (d) IH, 8,41 (m) IH, 8,56 (d) IH, 8,82 (s) IH.

IR-data: (KBr) CO, cm*1: 1630, 1660, 1720.

Eksempel 53 30 DK 173511 B1

Under anvendelse af metoden som beskrevet i enten eksempel la eller 3a, og ved at substituere solubiliseringsgruppen A med Gly-Gly opnås den beskyttede Gly-GIy-for-bindelse (I) (Rj = 2,4-difluorphenyl, R2 = H, A = carbobenzyloxy Gly-Gly). MS 5 (m+l)+ = 653 m/z. smp. = 125-128°C.

IR-data: (CDC13) CO, cm1: 1630, 1672, 1722.

Eksempel 54

Under anvendelse af metoden som beskrevet i eksempel 3b med forbindelsen ifølge eksempel 51 opnås det afblokerede Gly-Gly (HCI)-salt, (I) (R, = 2,4-difluorphenyl, Ri 10 = H, A = Gly-Gly). (m+l)+ = 519 m/z, smp. = 175-178°C.

NMR-data: (DMSO) delta: 1,82 (m) IH, 2,04 (m) IH, 3,34 (m) 2H, 3,60 (m) 2H, 3,77 (m) 2H, 4,30 (m) IH, 7,35 (m) IH, 7,60 (m) IH, 7,80 (m) IH, 8,05 (m) 3H, 8,31 (m) IH, 8,60 (m) IH, 8,83 (s) IH, 15,17 (s) IH.

IR-data: (KBr) CO, cm·1: 1635, 1670, 1720.

15 Eksempel 55

Under anvendelse af metoden som beskrevet i enten eksempel la eller 3a og ved at erstatte solubiliseringsgruppen A med Gly-Ala, Ala-Nval, Ala-Met, Ala-Leu, Leu-Nval, Leu-Leu, Leu-Met, Met-Met, Met-Leu, Met-Ala, Met-Nval, Nval-Gly, Nval-Ala, D-Ala-L-Ala, Phe-Ala, Leu-Ala, Val-Ala eller Val-Leu, og ved at underkaste produkter-20 ne fra disse reaktioner den samme proces som beskrevet i eksempel 3b eller ved at følge en tilsvarende procedure som beskrevet i eksempel 3 la og 31c ved at substituere den ovennævnte gruppe opnås hydrochloridsaltet af de følgende forbindelser.

31 DK 173511 B1 a. 7-(3 -Gly-Ala-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluor-phenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; b. 7-(3-Ala-Nval-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; 5 c. 7-(3-Leu-Nval-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l ,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; d. 7-(3-Met-Nval-ammo-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; e. 7-(3-Nval-Gly-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-10 oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; f. 7-(3-Nval-Ala-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; n. 7-(3-Ala-Met-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxylsyre; 15 o. 7-(3-Met-Met-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxyIsyre; p. 7-(3-Leu-Met-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxylsyre; q. 7-(3-Leu-Leu-amino-l-pyirolidinyI)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyI)-l ,4-dihydro-4-oxo- 20 1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; 32 DK 173511 B1 r. 7-(3-Ala-Leu-amino-1 -pyrrolidmyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxyIsyre; s. 7-(3-Met-Leu-amino- l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxylsyre; 5 t. 7-(3-Phe-Ala-amino-l -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluoiphenyI)-1,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridiii-3-carboxyIsyre; u. 7-(3-Leu-Ala-amino-l-pyiTolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxylsyre; v. 7-(3-Met-Ala-amino-l-pyrroIidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyI)-1,4-dihydro-4-oxo-10 l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; w. 7-(3-Val-AIa-amino-1-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)- i ,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxylsyre; x. 7-(3-Val-Leu-amino-l-pynOlidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyI)-l,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxyIsyre; og 15 y. 7-(3-D-Ala-L-Ala-amino- l-pyrrolidinyl)-6-fluor-1-(2,4-difluorphenyI)-1,4-dihydro- 4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre.

Tabel V

De fysiske data for hydrochloridsaltet af produkterne i de angivne eksempler er som følger:

Eksempel 55b 33 DK 173511 B1

Smp. = 200°-202°C MS (m+l)+ = 575 m/z [a]D = +10,2 (CHjOH) 5 IR (KBr) CO, cm'1: 1630, 1670, 1715 NMR (DMSO-dfi) delta: 0,80 (m) 3H, 1,25 (m) 5H, 1,47 (m) 2H, 1,78 (m) IH, 2,00 (m) IH, 3,80 (m) 2H, 4,18 (m) 2H, 7,30 (m) IH, 7,53 (m) IH, 7,75 (m) IH, 8,05 (d) IH, 8,34 (d) IH, 8,47 (d) IH, 8,77 (s) IH.

Eksempel 55e 10 Smp. = 180°-182°C MS (m+l)+ = 617 m/z [a]D = +19,0 (CHjOH) IR (KBr) CO, cm1: 1630, 1670, 1710 NMR (CD3OD) delta: 0,95 (m) 9H, 1,34 (m) 3H, 1,67 (m) 5H, 1,96 (m) IH, 2,15 (m) 15 IH, 3,87 (m) IH, 4,34 (m) 2H, 7,26 (m) 2H, 7,65 (m) IH, 8,05 (m) IH, 8,78 (s) IH.

Eksempel 55d

Smp. = 170°-172°C MS (m+l)+ = 635 m/z [cc]D = +24,2 (CHjOH) 20 IR (KBr) CO, cm'1: 1630, 1670, 1720 NMR (DMSO-de) delta: 0,85 (m) 3H, 1,28 (m) 3H, 1,53 (m) 3H, 1,95 (m) 2H, 2,05 (m) 3H, 3,85 (m) IH, 4,25 (m) IH, 7,33 (m) IH, 7,55 (m) IH, 7,80 (m) IH, 8,10 (m) IH, 8,15 (m) 2H, 8,38 (m) IH, 8,60 (m) IH, 8,82 (s) IH.

Eksempel 55f 34 DK 173511 B1

Smp. = 195°-197° C MS (m+l)+ = 575 m/z [a]D = +25,6 (CH3OH) 5 IR (KBr) CO, cm1: 1630, 1670, 1720 NMR (CDjOD) delta: 0,95 (m) 3H, 1,34 (m) 3H, 1,45 (m) 2H, 1,83 (m) 2H, 1,95 (m) IH, 2,15 (m) IH, 3,83 (m) 2H, 4,33 (m) 2H, 7,25 (m) 3H, 7,65 (m) IH, 8,03 (m) IH, 8,77 (m) IH.

Eksempel 55n 10 Smp. = 185°-187°C MS (m + l)+ = 607 m/z [a]D = +10,3 (CH3OH) IR (KBr) CO, cm'1: 1630, 1670, 1725 NMR (CDjOD) delta: 1,48 (m) 3H, 2,02 (m) 6H, 2,15 (m) IH, 2,50 (m) 2H, 3,95 (m) 15 IH, 4,40 (m) 2H, 7,28 (m) 2H, 7,68 (m) IH, 8,02 (m) IH, 8,75 (s) IH.

Eksempel 55o

Smp. = 163°-165°C MS (m+l)+ = 667 m/z [oc]D = +24,6 (CH3OH) 20 IR (KBr) CO, cm'1: 1630, 1670, 1720 NMR (CDjOD) delta: 2,10 (m) 1 IH, 2,55 (m) 4H, 3,95 (m) IH, 4,40 (m) 2H, 7,28 (m) 2H, 7,65 (m) IH, 8,05 (m) IH, 8,77 (s) IH.

Eksempel 55d 35 DK 173511 B1

Smp. = 180M83°C MS (m+l)+ = 649 m/z [a]D = +18,9 (CHjOH) 5 IR (KBr) CO, cm’1: 1630, 1665, 1720 NMR (CDjOD) delta: 0,97 (m) 6H, 1,70 (m) 3H, 1,95 (m) IH, 2,05 (m) 3H, 2,50 (m) 2H, 3,87 (m) IH, 4,35 (m) IH, 4,45 (m) IH, 7,25 (m) 2H, 7,65 (m) IH, 8,05 (m) IH, 8,77 (s) IH.

Eksempel 55q 10 Smp. = 194°-195°C MS (m+l)+ = 631 m/z [a]D = +18,5 (CHjOH) IR (KBr) CO, cm-1: 1630, 1675, 1725 NMR (CD3OD) delta: 0,95 (m) 12H, 1,63 (m) 7H, 1,94 (m) IH, 2,15 (m) IH, 3,85 (m) 15 IH, 4,37 (m) 2H, 7,25 (m) 2H, 7,65 (m) IH, 8,05 (m) IH, 8,77 (s) IH.

Eksempel 55r

Smp. = 200°-202°C MS (m+l)+ = 589 m/z [«Id = + 7,8 (CH3OH) 20 IR (KBr) CO, cm'1: 1630, 1670, 1720 NMR (CD3OD) delta: 0,90 (m) 6H, 1,45 (m) 3H, 1,58 (m) 3H, 1,95 (m) IH, 2,13 (m) IH, 3,29 (m) 2H, 3,90 (m) IH, 4,34 (m) 2H, 7,25 (m) 2H, 7,65 (m) IH, 8,03 (m) IH, 8,75 (s) IH.

Eksempel 55s 36 DK 173511 B1

Snip. = 178°-180°C MS (m+1)+ = 649 m/z [a]D = +24,5 (CH3OH) 5 IR (KBr) CO, cm *: 1630, 1670, 1715 NMR (CDjOD) delta: 0,90 (m) 6H, 1,55 (m) 3H, 1,92 (m) IH, 2,10 (m) 4H, 2,55 (m) 2H, 3,29 (m) 2H, 3,95 (m) IH, 4,35 (m) 2H, 7,25 (m) 2H, 7,65 (m) IH, 8,03 (m) IH, 8,75 (s) IH.

Eksempel 55t 10 Smp. = 192°-194°C MS (m+l)+ = 623 m/z [a]D = +20,8 (CHjOH) IR (KBr) CO, cm*1: 1630, 1670, 1720 NMR (CD3OD) delta: 1,34 (m) 3H, 1,95 (m) IH, 2,16 (m) IH, 2,95 (m) IH, 3,20 (m) 15 IH, 4,08 (m) IH, 4,35 (m) 2H, 7,30 (m) 7H, 7,63 (m) IH, 8,04 (m) IH, 8,75 (m) IH.

Eksempel 55u

Smp. = I97°-200°C MS (m+l)+ = 589 m/z [cc]D = +25,0 (CH3OH) 20 IR (KBr) CO, cm1: 1630, 1660, 1720 NMR(CD3OD) delta: 0,98 (m) 6H, 1,34 (m) 3H, 1,70 (m) 3H, 1,95 (m) IH, 2,15 (m) IH, 3,85 (m) IH, 4,35 (m) IH, 7,25 (m) 2H, 7,65 (m) IH, 8,04 (m) IH, 8,78 (s) IH.

Eksempel 55v 37 DK 173511 B1

Smp. = 178°-180°C MS (m+l)+ = 607 m/z [a]D = +31,8 (CHjOH) 5 IR (KBr) CO, cm1: 1630, 1670, 1720 NMR(CDjOD) delta: 1,35 (m) 3H, 1,95 (m) IH, 2,12 (m) 3H, 2,60 (m) 2H, 3,95 (m) IH, 4,34 (m) 2H, 7,27 (m) 2H, 7,66 (m) IH, 8,05 (m) IH, 8,78 (s) IH.

Eksempel 55w

Smp. = 201°-204°C 10 MS (m+l)+ = 575 m/z [a]D = +20,6 (CH3OH) IR (KBr) CO, cm'1: 1630, 1665, 1720 NMR(CD3OD) delta: 1,03 (m) 6H, 1,35 (m) 3H, 1,95 (m) IH, 2,18 (m) IH, 3,65 (m) IH, 4,34 (m) IH, 7,25 (m) 2H, 7,65 (m) IH, 8,05 (m) IH, 8,76 (s) IH.

15 Eksempel 55x

Smp. = 192°-195°C MS (m+l)+ = 617 m/z [a]D = +17,4 (CHjOH) IR (KBr) CO, cm'1: 1630, 1670, 1720 20 NMR (CD3OD) delta: 0,95 (m) 12H, 1,55 (m) 2H, 1,95 (m) IH, 2,18 (m) IH, 3,65 (m) IH, 4,35 (m) IH, 7,25 (m) 2H, 7,65 (m) IH, 8,05 (m) IH, 8,78 (s) IH.

Eksempel 55v

Smp. = 188M90°C

38 DK 173511 B1 MS (m+l)+ = 547 m/z [a]D = + 5,1 (CH3OH) IR (KBr) CO, cm ‘: 1630, 1670, 1710 NMR (CD3OD) delta: 1,33 (m) 3H, 1,48 (m) 3H, 1,95 (m) IH, 2,15 (m) IH, 3,95 (m) 5 IH, 4,28 (m) IH, 4,36 (m) IH, 7,27 (m) 2H, 7,65 (m) IH, 8,05 (m) IH, 8,32 (m) IH, 8,78 (s) IH.

Opløselighed

Forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse viser uventet forbedring i vandig opløselighed, især når N*1-stillingen er substitueret med en substitueret phenylgruppe, 10 som vist i tabel VI nedenfor, hvor forbindelserne fremstillet i eksempel lb, 3b, 11 og 15 med en 2,4-difluorphenylsubstitution i N-1 -stillingen sammenlignes med en moderforbindelse, som er tosufloxacin (dvs. 7-(3-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l- (2,4-difluor-phenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3- carboxylsyre); samt med de 3-A-amino-substituerede tosufloxacinderivater 2b (A=Nval), 5 (A=Phe), 13 (A=Tyr), 17 15 (A=Ala), 19 (A=Val), 21 (A=Leu), 30 (A=Gly-Gly-Nval), 31c (Met-sulfon), 41 (A=Asn), 44c (A=His) og 45 (A=Asp). Som det fremgår, er dipeptidderivater generelt mere opløselige end et aminosyrederivat (når polypeptidet sammenlignes med et hvilket som helst derivat med en aminosyrerest indbefattet i polypeptidet) ved fysiologisk pH-værdi (dvs. 7,4), hvilket kan hjælpe til at forbedre absorption. Se f.eks. Ib, 3b, 11 og 20 15 sammenlignet med eksempel 2b, 5 og 17.

Tabel VI

Eksempel A Salt Vandopløselighed pH 7,4 _mg/ml*_mg/ml tosufloxacin** H Tosylat 0,65 0,01 25 lb Gly-Phe HC1 >98 1,037 39 DK 173511 B1 2b** Nval HC1 >20 0,23 3b Nval-Nval HC1 >40 0,68 5** Phe HC1 >101 0,34

Il Ala-Phe HC1 >20 0,59 5 13** Tyr HC1 >90 0,06 15 Ala-Ala HCL >70 1,07 17** Ala HC1 >20 0,12 19** Val HC1 >10 0,41 21** Leu HCI >35 0,14 10 30** Gly-Gly-Nval HCI > 19 0,62 31c** Met-sulfon HCI >35 0,03 41** Asn HCI >35 0,40 44c** His HCI > 100 0,30 45** Asp HCI 4,1 2,40 15 52 Gly-Nval HCI 6,89 0,08 55b Ala-Nval HCI 26 1,03 54 Gly-Gly HCI 20 0,10 55n Ala-Met HCI 20 2,50 55o Met-Met HCI 22 0,31 20 55p Leu-Met HCI 23 0,06 55q Leu-Leu HCI 19 0,19 55r Ala-Leu HCI 26 2,0 * tegnet > refererer til en omtrentlig værdi, og opløseligheden kan være op til 10% højere.

25 ** (ikke ifølge opfindelsen) 40 DK 173511 B1

In vitro antibakteriel aktivitet

In vitro forsøg

In vitro antibakteriel aktivitet hos testforbindelserne blev bestemt ved konventionelle agarfortyndingsmetoder. Organismerne blev dyrket natten over i hjeme-hjerte-infiision 5 (BHI)-kødafkog (Difco 0037-01-6) ved 36°C. Dobbeltfortyndinger af stamopløsningen (2000 mcg/ml) af testforbindelsen blev foretaget i BHI-agar til opnåelse af en testkoncentration i intervallet fra 200 til 0,005 mcg/ml. Pladen blev podet med ca. 104 organismer. Den blev derefter inkuberet ved 36°C i 18 timer. Den minimale inhiberende koncentration (MIC) var den laveste koncentration af testforbindelsen, som ikke gav nogen 10 synlig vækst på pladen.

Resultaterne af in vitro undersøgelsen af forbindelserne er vist i tabel VII nedenfor, hvor vækstmediet i denne undersøgelse var hjeme-hjerte-infusionsagar (BHIA), moderforbindelsen er tosufloxacin. MIC-resultateme er i /zg/ml.

TABEL VII

15 _ MIC (mg/mn_

Tuso- _15_Ib... floxacin STAPHYLOCOCCUS AUREUS ATCC 653P 1,56 0,1 0,02 STAPHYLOCOCCUS AUREUS CMX 686B 6,2 0,1 0,05 20 STAPHYLOCOCCUS AUREUS A5177 12,5 0,2 0,05 STAPHYLOCOCCUS AUREUS 45 12,5 0,1 0,1 STAPHYLOCOCCUS AUREUS 45 RAR2 25 0,1 0,1 STAPHYLOCOCCUS AUREUS 642A ......

STAPHYLOCOCCUS AUREUS NCTC 10649 ......

25 STAPHYLOCOCCUS AUREUS CMX503A 12,5 0,1 0,05 41 DK 173511 B1 STAPHYLOCOCCUS AUREUS CMX553 12,5 0,2 0,1 STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS 3519 12,5 0,78 0,1 MICROCOCCUS LUTEUS ATCC 9341 >100 6,25 1,56 MICROCOCCUS LUTEUS ATCC 4698 100 0,78 0,78 5 ENTEROCOCCUS FAECIUM ATCC 8043 50 1,56 0,2 STREPTOCOCCUS BOVIS A5169 50 1,56 0,39 STREPTOCOCCUS AGALACTIAE CMX508 12,5 1,56 0,39 STREPTOCOCCUS PYOGENES EES61 12,5 1,56 0,2 STREPTOCOCCUS PYOGENES 930 CONST 12,5 0,78 0,2 10 STREPTOCOCCUS PYOGENES 2548INDUC 12,5 0,78 0,1 ESCHERICHIA COLI JUHL 12,5 3,12 0,02 ESCHERICHIA COLI SS 0,39 0,2 0,005 ESCHERICHIA COLI DC-2 100 100 0,39 ESCHERICHIA COLI H560 6,2 1,56 0,02 15 ESCHERICHIA COLI KNK437 50 25 0,2 ENTEROBACTERAEROGENES ATCC 13048 25 12,5 0,05 KLEBSIELLA PNEUMONIAE ATCC 8045 12,5 12,5 0,02 PROVIDENCIA STUARTn CMX 640 100 100 1,56 PSEUDOMONAS AERUGINOSA BMH10 100 25 0,1 20 PSEUDOMONAS AERUGINOSA A5007 100 25 0,78 PSEUDOMONAS AERUGINOSA K799/WT 50 25 0,78 PSEUDOMONAS AERUGINOSA K799/61 3,1 12,5 0,2 PSEUDOMONAS CEPACIA 2961 50 50 3,1 ACINETOBACTER SP CMX 669 12,5 12,5 0,1 25 I en anden in vitro undersøgelse udført som beskrevet ovenfor og vist i tabel VIII er vækstmediet substitueret med hjerne-hjerte-infusionskødafkog (BHIB), og MIC-niveauet er i μξ/ml.

42 DK 173511 B1

Tabel VIII

MIC l>g/mft

Eksempel Organisme

Stap. Aureus Strep, pyogenes E. Coli Ps. Aeruginosa 5 CMX 553 ESS 61 Juhl A5007 3b 12,5 12,5 25 50 11 16,0 - 16 128

In vivo antibakteriel aktivitet.

Akut muse-beskyttelsesundersøgelse udføres på ti mus med hver tre niveauer af Iæge-10 middel. Musedødelighed anvendes til at beregne en ED50-værdi, dvs. den dosis af lægemiddel, der kræves til beskyttelse af 50% af forsøgsdyrene imod død på grund af podningsudfordringen.

Den akutte musebeskyttelsesundersøgelse udføres på Swiss-hunalbinomus med en vægt på 18-20 g. Musene injiceres intraperitonealt med en 18-timer gammel kultur af den 15 angivne testorganisme fortyndet tilstrækkeligt til at tilvejebringe den ønskede LD50-vær-di. For at kontrollere podningens styrke udføres en titrering af den angivne testorganisme i kontroldyr. Dyrebehandlingsgruppen doseres med testforbindelsen 1 og 5 timer efter infektion og observeres i 7 dage. ED50-værdieme beregnes under anvendelse af de opsamlede dødelighedsdata. Resultaterne er angivet i tabel IX.

20 MIC-niveauet er i jwg/ml, og ED^-værdien er i mg/kg/dag.

43 DK 173511 B1

Tabel IX

IN VIVO DATA

Organisme Eksempel SC (ED50) Oral (ED5a> E. Coli tosufloxacin1 0,2 0,9 5 JUHL lb 0,6 1,8 3b 0,5 4,0 15 0,5 2,0 P. Aeruginosa tosufloxacin1 >25 6,2 A5007 lb 8,0 27,3 10 3b 6,2 9,1 11 9,7 65,3 15 3,1 9,1

Stap. Aureus tosufloxacin1 0,6 1,5 NCTC 10649 lb 0,5 0,7 15 3b 0,5 1,8 11 0,7 2,0 15 0,8 1,3

Tosufloxacin er det generiske USAN-navn for 7-(3-amino-l-pyrrolidinyl)-l(2,4-di-fluorphenyl)-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo- 1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre.

20 Blodniveauer

Forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse kan også virke som prolægemidler; dvs. forbindelserne kan hydrolysere hurtigt i blod til opnåelse af de tilsvarende antibak-terielle moderforbindelser i overensstemmelse med den følgende ligning.

44 DK 173511 B1 — >32r- V -vJ* O i,

h'"* 2. Y

En vandig opløsning af prolægemiddel (Z) sættes til frisk hel blod indeholdende natrium-heparin som et antikoagulationsmiddel. Prøven blandes forsigtigt ved inversion og anbringes i et 37°C varmt vandbad. Med udvalgte tidsintervaller fjernes en 0,5 ml blodprøve og anbringes i et nedkølet 1,5 ml centrifugerør (istemperatur). Prøver centri-5 fugeres ved 13.000 o/m i 2 min. til at separere plasma. En 0,2 ml prøve af plasmaprøven kombineres med 0,2 ml intern standard (7-(4-amino-2-methyl-l-pyrrolidinyl)-l-(2,4-difluorphenyl)-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre i 0,2 M natriumphosphatpuffer, pH-værdi 7,2) og 6 ml CH2Cl2:EtOH (9:1 ved volumen). Prøver forsynes med låg og rystes forsigtigt i 10 min. Prøver centrifugeres ved 2500 o/m i 10 10 min. (4°C). Det vandige lag opsuges til spild, og det organiske lag overføres til et konisk centrifugerør og inddampes til tørhed med en strøm af tør luft og lav varme (-35° C). Prøver genfortyndes med 0,2 ml mobil fase efterfulgt af hvirvling. Prøver centrifugeres ved 2500 o/m i 10 min. til at separere præcipitat. Supematanten overføres til et WlSP-hætteglas med plastindsats til HPLC- analyse.

15 Moderforbindelsen (y) og en intern standardforbindelse og de to toppe fra hvert prolægemiddel separeres fra plasmabestanddele på en 5 cm 2 4,6 mm 3 μτη Spherisorb ODS2-søjle under andendelse af en mobil fase indeholdende 39% acetonitril: 0,04 M H3P04: 0,01 M NaH2P04:0,005 M acetohydroxasyre: 0,2% natrhimdodecylsulfat ved en strømningshastighed på 1,0 ml/min. med kvantitativ bestemmelse af 50-80 μΐ injek-20 tionen ved 270 nm.

Omdannelseshastigheden for forskellige forbindelser (Z) til moderlægemidlet (Y) i helt blod ved 37° C er givet i tabel X.

DK 173511 B1 _ _45 a>

M

ro g co 6

O) H O O

β cn co n <D co

S

Ό

-H

4J

to t7 ro ro ro C <u m μ oo -ri 4J ·» «*.

Μ β H ro <J<

fl) O LO ro CO

> Bi

rH

<o e X co o

H

a ro ε -

O Ό lo σ\ ro E

tv; O C >v>o<# S υ β vo o <n * *

S \ K oo H oo (N

*3 \ 3 åg ο.Π-ί·

li H

s \J- m / \ _ a " -Di rH r-H iH f—I lH . .

>,>,>,>,>, mm β β β β β <S ®

O) OJ d) dJ <1) Ό 4-J

&&&&& |§

0 O O O O

3 β 3 3 3 rag

rH rH rH rH r—I

m iw vw ΜΗ Ή -H

Η “Η -Η -Η ·ιΗ *H

PtJ 73¾¾¾¾ AJiJ

1 I I I I ·? -¾ -tf <4< r r1

> S , ^ , MM

P) N(NNN -Μ ¾ ¾ β β ¾ ¾ Ή -Η β β ro ro rH tn tn rt β β ^ *H *rl

M rH MM

0 lø 0) 0) !3 > > 1 <U d) M 10 H ri Η Λ Λ O rj fØ 10

fø (¾ (¾ a rii Λ XI

>1111

M <ø S <0 (0 il II

O ri ri H ri

<C & 40 < < ME

46 DK 173511 B1

Plasmaniveau

Forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse har vist sig at blive omdannet tilbage til den antibakterielle moderforbindelse i eksperimentelle dyr og at give lægemiddel-plasmaniveau meget højere, end der kan opnås med moderforbindelsen. De har således 5 bedre farmakokinetiske profiler og kan være mere effektive til behandling af infektioner.

De maksimale plasmakoncentrationer (Cmax) og den totale plasmakoncentration med tiden (AUC) af tosufloxacin (fri base) og af flere forbindelser ifølge den foreliggende opfindelse i hund efter en 10 mg ækvivalent/kg oral dosis er angivet i tabel XI. Der kan opnås mere end 3 gange plasmaniveauet for moderforbindelsen med prolægemidleme 10 ifølge opfindelsen. Plasmaprøveme blev opsamlet og bestemt ved HPLC-analyse.

Tabel XI

Forbindelse C max (interval) AUC (0-32t) Antal A_(Mcg/ml) (t mcg/mg) dvr H (tosufloxacin) 0,67 (0,60-7,4) 5,3 4 15 Gly-phe 2,1 (1,8-2,4) 20,2 2

Ala-Norval 2,3 (1,8-3,0) 15,4 3

Ala-Ala 1,9 (1,3-3,2) 10,6 7

Norval-Norval 1,9 (1,5-2,2) 10,2 3

Gly-Norval 1,9 (1,5-2,2) 13,9 3 20 Gly-Gly 1,5 (0,7-2,4) 11,1 3

Claims

1. Dipeptidylderivat af naphthyridinforbindelser, kendetegnet ved, at det har formlen I: O er _ o

2. Forbindelse ifølge krav 1,kendetegnet ved, at R2 er hydrogen.

3. Forbindelse ifølge krav 1,kendetegnet ved, at dipeptidylgruppen er Gly-Phe, Gly-Nval, Ala-Nval, Ala-Met, Ala-Leu, Leu-Leu, Leu-Met, Leu-Ala, Leu-Nval, Gly-Gly, Met-Nval, Met-Met, Met-Leu, Met-AIa, Nval-Gly, Nval-Ala, Gly-Ala, Phe-Gly, D-Ala-L-Ala, Nval-Nval, Phe-Ala, Val-Ala, Val-Leu, Ala-Ala eller Ala-Phe.

4. Forbindelse (Γ) ifølge krav 1,kendetegnet ved, at den har formlen DK 173511 B1 V3V0·' J fj' N ' <Π Y hvori Rj' er 4-fIuorphenyl eller 2,4-difluorphenyl; og A' er Gly-Phe, Phe-Gly, Gly-Nval, Ala-Nval, Ala-Met, Ala-Leu, Leu-Leu, Leu-Met, Leu-Ala, Leu-Nval, Gly-Gly, Met-Nval, Met-Met, Met-Leu, Met-AIa, Nval-Nval, D-5 Ala-L-AIa, Nval-GIy, Nval-Ala, Gly-Ala, Phe-AIa, Val-Ala, Val-Leu, Ala-Phe eller Ala-Ala; og farmaceutisk acceptable salte deraf.

5. Forbindelse ifølge krav 4, kendetegnet ved, at den er valgt blandt: 7-(3-Gly-Phe-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluoiphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxyIsyre; 10 7-(3-Gly-Gly-amino-l -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3 -carboxylsyre; 7-(3-Ala-Nval-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difIuorphenyl)-l,4-dihy-dro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; 7-(3-Ala-Ala-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1-(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-15 naphthyridin-3-carboxylsyre; 7-(3-Gly-Nval-amino-l-pyrrolidmyl)-6-fluor-1-(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo- 1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; DK 173511 B1 7-(3 - Ala-Phe-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxyIsyre; 7-(3-Leu-NvaI-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxykyre; 5 7-(3-Met-Nval-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxykyre; 7-(3-Nval-Gly-araino-l-pyrrolidinyI)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxylsyre,· 7-(3-Nval-Ala-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4-oxo-10 l,8-naphthyridin-3-carboxykyre; 7-(3-Nval-Nval-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorplienyl)-l,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxylsyre; 7-(3-AIa-Met-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorplienyl)-l,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxylsyre; 15 7-(3-Met-Met-ammo-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4-oxo- 1.8- naphthyridin-3-carboxylsyre; 7-(3-Leu-Met-amino-l-pyrrolidinyI)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyI)-l,4-dihydro-4-oxo-l ,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; 7-(3-Leu-Leu-amino-1 -pyrrolidmyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-20 l,8-naphthyridm-3-carboxylsyre; 7-(3-Ala-Leu-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-l -(2,4-difluoiphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8- naphthyridin-3-carboxylsyre; DK 173511 B1 7-(3-Met-Leu-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo- 1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; 5 7-(3-Phe-Ala-amino-l-pyrroIidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l ,4-dihydro-4-oxo-l ,8-naphthyridin-3-carboxyIsyre; 7-(3-Leu-AIa-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4-oxo-l,8- naphthyridin-3-carboxylsyre; 7-(3-Met-Ala-amino-1 -pyrrolidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-10 1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; 7-(3-Val-Ala-amino-1 -pyrroIidinyl)-6-fluor-1 -(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; 7-(3-VaI-Leu-amino-l-pyrrolidinyI)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-l,4-dihydro-4-oxo-l,8-naphthy ridin-3 - carboxylsyre; 15 7-(3-D-Ala-L-Ala-amino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-1-(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; 7-(3-Gly-Ala-amino-i-pyrrolidinyl)-6-fluor-l-(2,4-difluorphenyl)-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; og farmaceutisk acceptable salte deraf.

5 K (I) LJ k> S A hvori Rx er phenyl eller phenyl substitueret med et til tre halogenatomer; R2 er hydrogen eller en carboxybeskyttelsesgruppe, valgt blandt alkyl, benzyl, alkoxy, nitrobenzyl, dialkylaminoalkyl, pivaloyloxymethyl eller propionyloxymethyl; og A er en dipeptidylgruppe; og farmaceutisk acceptable salte deraf.

6. Antibakterielt middel, kendetegnet ved, at det omfatter en antibakteriel 20 effektiv mængde af en forbindelse ifølge krav 1. DK 173511 B1

7. Forbindelse ifølge krav 1,kendetegnet ved, at den er valgt blandt 7-(3-nomlylnorvalylamino-l-pyrrolidinyl)-l-(2,4-difluorphenyl)-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; 7-(3-glycylgIycylamino-1 -pyrrolidinyl)-1 -(2,4-difluorphenyl)-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-5 l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; 7-(3-AIanylnorvalylamino-1 -pyrrolidinyl)-1 -(2,4-difluorphenyI)-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre; 7-(3-glycylnorvalylamino-l -pyrrolidinyl)-1 -(2,4-difluorphenyl)-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxyIsyre; 10 7-(3-aIanylaIanylamino-l-pyrrolidinyl)-l-(2,4-difluoiphenyl)-6-fIuor-1,4-dihydro-4-oxo- l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre og farmaceutisk acceptable salte deraf.

8. Antibakterielt middel, kendetegnet ved, at det omfatter en antibakteriel effektiv mængde af en forbindelse ifølge krav 7. 15