DK169123B1

DK169123B1 - Præparater til parenteral indgivelse og deres anvendelse

Info

Publication number: DK169123B1
Application number: DK414987A
Authority: DK
Inventors: William Steber; Richard Fishbein; Susan Mancini Cady
Original assignee: American Cyanamid Co
Priority date: 1986-08-11
Filing date: 1987-08-10
Publication date: 1994-08-22
Also published as: GR3004138T3; NZ221391A; EP0257368A1; ATE74009T1; JP2571790B2; CA1296627C; JPS6348223A; IE872129L; DK414987A; ES2039219T3; FI873465A0; AU7672587A; FI873465A; AR243079A1; IE65146B1; ZA875898B; HU203662B; DK414987D0; HUT45887A; IL83462A0

Description

i DK 169123 B1

Den foreliggende opfindelse angår et præparat, der på vægtbasis indeholder ca. 2 til ca. 70% væksthormon, somatomedin, vækstfaktor eller biologisk aktivt fragment eller derivat deraf, ensartet dispergeret i ca. 30 til ca. 95% 5 fedtstof eller voks eller blanding deraf, og dette præparat er ejendommeligt ved, at det foreligger i form af mikro-sfærer. I praksis foretrukne udførelsesformer for præparatet ifølge opfindelsen er angivet i krav 2-4 og 6.

Opfindelsen angår også en formulering til parenteral 10 indgivelse og langsom frigørelse af aktivt stof, og denne formulering er ejendommelig ved, at den indeholder et præparat ifølge krav 4 dispergeret i et farmaceutisk og farmakologisk acceptabelt flydende bæremedium.

Der kan forekomme hydrofob interaktion, binding eller 15 belægning af den aktive bestanddel til fedtstoffet eller vokset.

Præparaterne er egnede til parenteral indgivelse til dyr.

Opfindelsen angår endvidere en fremgangsmåde til 20 forøgelse af mælkeproduktionen i mælkeafgivende dyr, især malkekøer, og denne fremgangsmåde er ejendommelig ved, at dyret parenteralt indgives en formulering, som på vægtbasis indeholder et præparat indeholdende ca. 2 til ca. 70% væksthormon, somatomedin, vækstfaktor eller biologisk aktivt 25 fragment eller derivat deraf, ensartet dispergeret i ca. 30 til ca. 95% fedtstof eller voks eller blanding deraf, hvorhos præparatet foreligger i form af mikrosfærer dispergeret i et farmaceutisk og farmakologisk acceptabelt flydende bæremedium. Foretrukne udførelsesformer for denne fremgangsmåde 30 er angivet i krav 8 og 9.

Opfindelsen angår også en fremgangsmåde til forøgelse af vægttilvæksten hos dyr, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at dyret parenteralt indgives en formulering, som på vægtbasis indeholder et præparat indeholdende ca. 2 35 til ca. 70% væksthormon, somatomedin, vækstfaktor eller biologisk aktivt fragment eller derivat deraf, ensartet dis- DK 169123 B1 2 pergeret i ca. 30 til ca. 95% fedtstof eller voks eller blanding deraf, hvorhos præparatet foreligger i form af mikrosfærer dispergeret i et farmaceutisk og farmakologisk acceptabelt flydende bæremedium. Foretrukne udførelsesformer 5 for denne fremgangsmåde er angivet i krav 11 og 12.

Endelig angår opfindelsen en fremgangsmåde til forhøjelse og opretholdelse af forhøjede nivauer i blodet af et væksthormon, somatomedin, vækstfaktor eller biologisk aktivt fragment eller derivat deraf, forbedring af fodernyt-10 tevirkning, forøgelse af væksthastighed, forøgelse af muskelstørrelse, formindskelse af kropsfedt og forbedring af forholdet mellem magert kød og fedt i et dyr, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at dyret parenteralt indgives et præparat, som på vægtbasis indeholder ca. 2 til ca. 70% 15 væksthormon, somatomedin, vækstfaktor eller biologisk aktivt fragment eller derivat deraf, ensartet dispergeret i ca. 30 til ca. 95% fedtstof eller voks eller blanding deraf, hvorhos præparatet foreligger i form af mikrosfærer dispergeret i et farmaceutisk og farmakologisk acceptabelt flydende bære-20 medium. Foretrukne udførelsesformer for denne fremgangsmåde er angivet i krav 14 og 15.

Voks og fedtstoffer, som er egnede til brug i de her omhandlede præparater, har generelt smeltepunkter på over 40°C. Vokset, der anvendes, kan defineres som anført i 25 Hawley's The Condensed Chemical Dictionary, ll.udg., som en lavtsmeltende organisk blanding eller forbindelse med høj molekylvægt, fast ved stuetemperatur og almindeligvis med samme sammensætning som fedtstoffer og olier bortset fra, at det ikke indeholder nogen glycerider. Nogle voksarter er 30 carbonhydrider, andre er estere af fedtsyrer og alkoholer. Disse forbindelser omfatter mættede eller umættede, langkædede Ci0-C24-fedtsyrer, alkoholer, estere, salte, ethere eller blandinger deraf. De er klassificeret blandt lipideme. Voksarter er termoplastiske, men da de ikke er høj polymerer, 35 regnes de ikke til plastgruppen. Almindelige egenskaber er, at de er vandafvisende, har en glat struktur, er ikke-tok- DK 169123 B1 3 siske og er fri for uheldig lugt og farve. De er brandbare og har gode dielektriske egenskaber. De er opløselige i de fleste organiske opløsningsmidler og er uopløselige i vand. Hovedtyperne er de følgende: 5 I. Naturlige 1. Animalske (bivoks, lanolin, shellakvoks, kinesisk insektvoks) 2. Vegetabilske (karnaubavoks, kandelillavoks, myrte-voks, sukkerrørsvoks) 10 3. Mineralske (a) Fossile eller jordvoksarter (ozokerit, ceresin, montan) (b) jordolievoksarter (paraffin, mikrokrystallinsk) (vokssmuld eller mindre raffineret paraffin) 15 II. Syntetiske 1. Ethyleniske polymerer og polyolether-estere ("Car-bowax", sorbitol) 2. Chlorerede naphthalener ("Halowax") 3. Carbonhydrid-type via Ficher-Tropsch-syntese.

20 Det her omhandlede fedtstof kan defineres som anført i Hawley's The Condensed Chemical Dictionary, ll.udg., som en glycerylester af højere fedtsyrer, såsom stearinsyre og palmitinsyre. Sådanne estere og blandinger deraf er faste ved stuetemperatur og har krystallinsk struktur. Fedt og 25 talg er eksempler herpå. Der er ikke nogen kemisk forskel mellem et fedtstof og en olie, idet den eneste forskel er, at fedtstoffer er faste ved stuetemperatur, og olier er flydende. Udtrykket "fedt" refererer sædvanligvis specifikt til triglycerider, medens "lipid" inkluderer alle.

30 Fedtstoffet er fortrinsvis sammensat af mono-, di eller triglycerylestere af langkædede Cio-c24“fedtsYrer· Mono-, di- eller triglyceriderne er overvejende sammensat af stearater, palmitater, laurater, linoleater, linolenater og rester eller blandinger deraf, idet de med smeltepunkter 35 over 50°C er de mest foretrukne. Glyceryltristearat er det mest foretrukne fedtstof. Desuden kan der også anvendes DK 169123 Bl 4 lipofile salte af fedtsyrer, såsom magnesiumstearat og lignende .

De her omhandlede mikrosfærer dispergeres i en farmaceutisk og farmakologisk acceptabel væske til opnåelse 5 af en formulering til parenteral indgivelse og langsom frigørelse af aktivt stof. Bæremediet kan være et vandigt puffersystem eller oliesystem, olien kan hidrøre fra animalske eller vegetabilske kilder eller kan være syntetisk. Eksempler på foretrukne olier er neutrale mono-, di- eller 10 triglycerider eller blandinger deraf. En neutral olie er en olie, som ikke indeholder en residualsyre. Eksempler på bæremedier, der er egnet til brug i den her omhandlede formulering, er vandige systemer, såsom puffersaltopløsninger, organiske opløsningsmidler, såsom glycoler og alkoholer, og 15 med vand ikke-blandbare væsker, såsom olier, afhængig af opløseligheden af den aktive bestanddel, der skal indgives.

Biologisk aktive proteiner, peptider og polypeptider, som er egnet til indgivelse i de her omhandlede præparater, er f.eks. væksthormoner, somatomediner, vækstfaktorer og 20 andre biologisk aktive fragmenter og derivater deraf. Eksempler på foretrukne proteiner er bovine, ovine, equine, porcine, aviære og humane væksthormoner, og omfattet er sådanne, som er af naturlig, syntetisk, rekombinant- eller biosyntetisk oprindelse. Egnet til iblanding i de her omhandlede 25 præparater er desuden metaller eller metalforbindelser associeret med biologisk aktive proteiner, peptider og polypeptider, såvel som syresalte, derivater og komplekser og anti-hydratiseringsmidler.

I de her omhandlede præparater kan der være iblandet 30 stabilisatorer, konserveringsmidler, overfladeaktive midler, salte, puffere eller blandinger deraf. Eksempler på foretrukne stabilisatorer er dehydroeddikesyre, salicylanilid, sor-binsyre, borsyre, benzoesyre og salte deraf, samt natriumnitrit og natriumnitrat. Til brug ifølge opfindelsen anvendes 35 de ovenfor anførte stoffer hensigtsmæssigt i mængder på ca.

0,1 til 20% på vægtbasis.

DK 169123 B1 5

Eksempler på foretrukne overfladeaktive midler til brug i de her omhandlede præparater, som indeholder biologisk aktive makromolekyler, er af ikke-ionisk natur, såsom poly-oxyethylensorbitanmonooleat (20 mol ethoxylering), og blok-5 copolymerer af ethylenoxid og propylenoxid. Til brug ifølge opfindelsen anvendes der hensigtsmæssigt overfladeaktive midler i mængder på ca. 0,1 til 10,0% på vægtbasis.

Det har overraskende vist sig, at der kan opnås og opretholdes øgede væksthormonniveauer i blod i længere tids-10 rum, og at der kan opnås øgede vægttilvækster og øget mælkeproduktion hos mælkegivende dyr ved injicering af dyrene med de her omhandlede præparater i et egnet bæremedium. Forhøjede niveauer i blodet af biologisk aktive proteiner, peptider og polypeptider betragtes og forbindes almindeligvis 15 med gunstige og/eller terapeutiske virkninger. Virkningerne er f.eks. vægttilvækst, forøget væksthastighed, forøget mælkeproduktion hos mælkegivende dyr og dermed forbundet forøget tilgængelighed af mælk til det behandlede dyrs afkom, forbedret muskelstørrelse, forbedret fodernyttevirkning, 20 formindsket kropsfedt og forbedret forhold mellem magert kød og fedt. Opretholdelse af forhøjede niveauer i blodet er tegn på en langsom frigørelse af den aktive bestanddel.

Når der opretholdes forhøjede niveauer i blodet af den aktive bestanddel, iagttages der almindeligvis egenskaber, såsom 25 forøget mælkeproduktion, væksthastighed, forbedret fodemyt-tevirkning og forøgelse i magert kød.

Ved en foretrukken udførelsesform for opfindelsen indarbejdes det biologisk aktive protein, peptid eller poly-peptid i fedt- eller voks-mikrosfærer, som eventuelt også 30 kan indeholde nogle eller alle de ovenfor beskrevne strække-midler, som derpå dispergeres i bæremediet. Mikrosfærerne, fortrinsvis fedt-mikrosfærerne, kan have en diameter på indtil 1000 Mm, idet der til parenteral indgift foretrækkes en gennemsnitsstørrelse på 25-300 μπι. Mikrosfærer indehol-35 dende indtil ca. 70% biologisk aktivt protein, peptid eller polypeptid udviser en forsinket frigørelse af forskellig DK 169123 B1 6 varighed afhængig af den aktive bestanddels opløselighed og arten af anvendt voks eller fedt, overfladeaktivt middel, puffer og bæremedium.

Den foreliggende opfindelse angår som nævnt en for-5 mulering, som indeholder en blanding af et fedtstof eller et voks eller en blanding deraf og et biologisk aktivt protein, peptid eller polypeptid dispergeret i et farmaceutisk og farmakologisk acceptabelt bæremedium. Der kan forekomme mikrosfærer og belagte proteinpartikler i dette depotpræpa-10 rat. Præparatet kan være proteinet opløst i fedtstoffet eller vokset, eller der kan være en hydrofob vekselvirkning eller binding af den aktive bestanddel til fedtstoffet eller vokset. Til hormonindgivelse anvendes der præparater, som på vægtbasis indeholder ca. 1-30% væksthormon, somatomedin, 15 vækstfaktor eller biologisk aktivt fragment eller derivat deraf fortrinsvis med en gennemsnitspartikelstørrelse på mindre end 20 /xm, ca. 5-60%, fortrinsvis ca. 10-48% fedt, voks eller blanding deraf, og eventuelt indeholdende indtil ca. 15% strækkemidler, såsom overfladeaktive midler, stabili-20 satorer, konserveringsmidler, salte eller puffere eller blandinger deraf med en tilstrækkelig mængde af et farmaceutisk og farmakologisk acceptabelt flydende bæremedium til ialt 100%. Bæremediet er igen det vandige puffersystem eller oliesystem beskrevet ovenfor.

25 Til parenteral indgift af væksthormoner, såsom bovint væksthormon, har mikrosfærer, som på vægtbasis indeholder ca. 5-40% af det faste hormon, fortrinsvis med en gennemsnitspartikelstørrelse på mindre end 20 /xm, indeholdende indtil ca. 20% af de øvrige ovenfor beskrevne strækkemidler 30 i ca. 40-95% fedt eller voks eller en blanding deraf, med en gennemsnitspartikelstørrelse på 25-300 μιη vist vedvarende frigørelse af hormonet og vedvarende forøgelse i mælkeproduktion hos mælkegivende malkekøer i ca. 2 uger, og sådanne præparater foretrækkes. Disse foretrukne præparater har 35 vist øget mælkeproduktion, som kan sammenlignes med den mælkeproduktion, der opnås ved daglig injektion af bovin DK 169123 B1 7 væksthormon.

Til indgivelse af præparater indeholdende vandopløselige proteiner, peptider eller polypeptider, såsom bovin væksthormon, foretrækkes der med vand ikke-blandbare væsker, 5 idet der især foretrækkes olier eller flydende fedtstoffer og med vand ikke-blandbare alkoholer og glycoler og blandinger deraf. Bæremedierne vælges således, at de både dis-pergerer og belægger blandingen eller mikrosfærerne og også giver injektionsblandingen en acceptabel viskositet, idet 10 der anvendes HLB-værdier (hydrofil-lipofil-balance) og viskositet som kriterier for deres valg.

På denne basis anvendes der som bæremedier til de her omhandlede præparater fedtsyreglycerider og blandinger deraf, som er flydende ved omgivelsestemperatur, inklusive 15 syntetiske olier, vegetabilske olier, såsom olivenolie, sesamfrøolie, jordnøddeolie, solsikkefrøolie, sojabønneolie, bomuldsfrøolie, majsolie, farvetisselolie, palmeolie, rapsfrøolie og kokosnøddeolie, animalske olier, såsom fiskeolier, fiskeleverolier, spermacetolier eller fraktioner deraf og 20 blandinger deraf, som har HLB-værdier i området fra 1-5 og viskositeter i området fra 10 cps til 1000 cps som målt med et Brookfield viskosimeter RTV under anvendelse af en spindel nr. 1.

De her omhandlede mikrosfærer kan fremstilles ved at 25 indarbejde den aktive bestanddel, som har den ønskede partikelstørrelse, og andre strækkemidler i et smeltet fedtstof, voks eller blanding deraf og derefter forme mikrosfærerne ud fra den resulterende blanding ved anvendelse af en række forskellige teknikker, såsom emulgering eller forstøvning 30 af blandingen, eller ved at bearbejde blandingen af bestanddele og smeltet fedt, voks eller en blanding deraf mekanisk og derefter afkøle den, f.eks. ved anvendelse af en centrifugalskive som beskrevet i international patentansøgning PCT/US85/00827. Alternativt kan blandingen af aktive be-35 standdele, strækkemidler og fedt, voks og blandinger deraf afkøles, hvorved der fås et fast stof, som derpå bearbejdes DK 169123 B1 8 ved procedurer som valsning, formaling og lignende.

De her omhandlede blandinger egnet til injektion fremstilles let ved dispergering af proteinet, peptidet eller polypeptidet, strækkemidlerne, fedtstoffet, vokset 5 eller blandinger deraf ved forhøjede temperaturer direkte i bæremediet og efterfølgende afkøling.

De følgende eksempler tjener til nærmere belysning af opfindelsen.

10 Eksempel 1

Fremstilling af iniicerbare mikrosfærer til parenteral indgivelse af bovint væksthormon.

1. Fremstillingen af bovint væksthormon og additiver i en passende størrelse til indarbejdning i mikrosfærer ved 15 forstøvningstørring kan gennemføres ved at opløse bovin væksthormon i fortyndet ammoniumhydroxidopløsning og derpå tilsætte de ønskede saltopløsninger, såsom natriumbenzoat.

Der tilsættes et ikke-ionisk overfladeaktivt middel, såsom en blokcopolymer af ethylenoxid og propylenoxid, og dette 20 får lov at opløses under konstant forsigtig blanding. Opløsningen forstøvningstørres derpå i et Buehi miniforstøvning-størreanlæg, model nr. 190.

2. Fremstilling af injicerbare mikrosfærer.

Der fremstilles en homogen blanding af aktive be-25 standdele og additiver i det smeltede fedtstof, voks eller blanding deraf, og den fremkomne blanding sprøjtes gennem en luft/væskesprøjtedyse forsynet med en opvarmet kappe for at holde den indkommende luft og den smeltede fase ved en temperatur over smeltepunktet. Mikrosfærerne dannes, efter-30 hånden som de smeltede små dråber afkøles og opsamles på en række sigter i det ønskede størrelsesområde fra ca. 45 til 180 μια og opbevares til senere anvendelse. De mikrosfærer, som ikke har den ønskede størrelse, opsamles til recirkulering. Alternativt kan den homogene blanding ledes til en 35 centrifugalskive, og de således dannede mikrosfærer opsamles som beskrevet ovenfor, eller den smeltede blanding kan af kø- DK 169123 B1 9 les og valses til den ønskede gennemsnitspartikelstørrelse.

Ved at anvende den ovenfor anførte fremgangsmåde med de i tabel I anførte materialer fås der de i tabel II anførte injicerbare mikrosfære-præparater.

DK 169123 B1 10

TABEL I

Navn Betegnelse

5 Glyceryl-monostearat GMS

Glyceryl-distearat GDS

Glyceryl-tristearat GTS

Glyceryl-trilaurat GTL

Soj aolie Soj aolie 10 Bivoks Bivoks

Karnaubavoks Karnauba

Natriumlaurat NaLaurat

Natriumbenzoat NaBenzoat eller NaBz 15 Natriumcarbonat NaCarb

Natriumhydrogencarbonat BiCarb

Calciumbenzoat CaBenzoat

Polyoxyethylen-sorbitan-monooleat Overfl.m. A

(20 mol's ethoxylering, "Tween" 801) 20 Blokcopolymer af ethylenoxid og propylenoxid,

("Pluronic" F682) Overfl.m. B

Glyceryl-dioleat GDO

Polyoxyethylenstearat, 23 mol's POE (23) 25 ethoxylering stearat

Polyethylen-glycol-distearat, PEG 1540

Gennemsnitsmolekylvægt for PEG 1540 distearat

Polyethylen-glycol, gennemsnits-30 molekylvægt 6000 PEG 6000

Polyoxyethylen-sorbitan-monostearat POE (20) sorbitan- monostearat

Med carbonat pufret saltoplosning 35 (pH 9,4) CBS

Polyethylen-glycol PEG

Blanding af kapryl-, kaprin-, laurin- og kapron-triglycerider "Miglyol" 8123 40 farebetegnelse anvendt af ICI Americas, Inc. farebetegnelse anvendt af BASF Wyandotte Corp.

45 3Varebetegnelse anvendt af Dynamit Nobel DK 169123 B1 11 ιΗ o Ό Ό

•H

e λ λ A (\ co in ^ in

^ ι-l «Η O «Η O

•H * *

A O O O O O

yi s_> w w w *-< 9 n < non ο · · * . » η ε ε ε ε ε (0 · · · · ·

i—I Η Η iH i—I iH

<4-1 <M «Μ «Η «Η «Η

Li Li Li L L L

ΦΙΙΙΙΙΙΙΟΦΙΙΦΦΟ) >lllllll>>ll>>> o o o o o o &p n *w» *»

U H

Q)

> λ φ A VO ID

•Η · U· · Li ·> *> 4J in - H (0 o o •H c H ' U w w

fl o w A -Η A A

Ό Z A id A Λ Λ Μ < v «sov. oo

Q) M Μ N A N N

A0) 3 C M G C

id <w id o) (d Q) o)

Ll «ΜΙ I I I I IiAcOOI ICQICQ

id piiiiii(d<d(dii«di(d M n. & ss a » zs H g A 0· W 0) 5 m h £ « eH> ^ <w ^ in in in »· » 0 ajcMf-oooooininoinooo

D 5> NMMHHnjOJHiHHHH

* CQ

•H

E

rH r—-»

X 0) .. H

•H *H Ol ··

Li Η Η in AO w w (d id

£ 1-1 W W

0 DO

in O U

\ \ \ WWW w w £ £ D tH E-< u ϋ O 0 0 u

G

A

id

LiHnjn^iniot'-cocTiOHr'jm'}·

10 r-l ι—I «—I rH rH

O

«

U

(U

DK 169123 B1 12

iH

0) Ό

V

•H

G

4J

£ £ (0 0) •o «3

rH

0)

>11111111111111 O I I I I I I I I I I I I I I

'W

0) Λ ~ > H ^ *H · %

4-i -P W Η H

RS *H G ' in *0 o +> +j +j Ό W (C <0 k m < v o o

O 0) k N N

«Η +> <j) c c W RJ (μι α) o

U «Η CQ CQ

MRS SIIRSIIIIRSIIIIII

Ha aiiuiiiiziiiiii , w (J u w a

03 I

< 0)

EH h H

« «»P

<w m in in t n in in os ^ ^ ^ ^ U >»inioc^int^oainr^t^or^oin CQ rH «Η rH rH H ri fN3 H«~4

•H

s Η H ·· ·· (Ί · 0\ Øl ··

*—I Η Μ M

·· >— *— '— x cn ^

•H '— H O) RS

k ·· -Η Λ P in σι η cs

RS Λί w o RJ

S O RS C

> CQ ti S-(

•H S O RS

AU W X

\ \ \ \

CQ CQ CQ CQ CQ

Eh Eh E* S &

U U u O O

• u c

+J

RS

U

RSinvør'CocnoHnsn^inof'CO

DHHHHHrqnqcMracaNnarjrj tt fc a DK 169123 B1 13

r—I

O

V

n

•H

e _ _ _ _ _ ^ ^

+J ίη *-k (Μ η N N "ΐ N (O

£> ΟΓΊ HHH HC'jHf'J^1 •H k k k k k k k k k k +J O O ooo o o o o o y <k> w w k—· w ^ »—» v«< w 10 CQCQ CQCQCQ D3 CQ < < < (!) ·· ··· ····· n g g e e e e e e e e (0 ·· ··· ·····

rH Η H iHHH Η Η Η Η H

<M <M <M <M <H <U <M<M<H<U<M

Μ Μ Μ Μ Μ Μ Μ Μ Μ M

<D <1)0 ΟΟΦ 0000)0)1 >1 > > I > > > I >>>>>· O I O O I OOO I o o o o o

Te m

M ~ H

φ ,**s, 10 **» > CO r- <0 M <0 Λ

•r*{ · «k < ^ W

4JWO O Η n H O

•H C w wwwv-» O

Μ Ό 0 -P -P -P -P -P *H

O Ό Uh <0 (0 <0 <0 <C Λ 4J rij \ 0 0000 \ (0 Μ N N N N N Λ

PM O C C C G C P

Λ <0 <H 0 OOOO Λ

W & <H (0 030PQCQ O

p « 5)<βΙΙΙ<β<Β«5<βΙΙΙΙΙ<β mm ixzitizzzssiiiiiz; o a <M i k—' q)

M

H « H <M — ω <x> P o *-

W M

CO X x <·η >oooinininininininin<ntnin

EhS ΟΗΗΗΓ*ΝΜ(ΝΜΜΝΝΝΝΜ

•H

M

P

<0

S

•

M

C

P

<0

M

<οσ\θΗΜΠ'ϋ·ιηνο^»οοΗΝ 0Μ<ηηηηηηηηηη*ιι«<ί*ΐ' «

M

Oh DK 169123 B1 14 r·* —^ in o p* - H - 10

0) m H

XJ w w *0 +>

•H A (C

g Λ Λ ’Λ Λ ^ rt Vi Ν Ρ Ρ Ρ Ρ 0) «0 JJHHHHH ιΗ Ο

>..... O+J

•Η Ο Ο Ο Ο Ο 0(0 4Jwwwww C Ή « < < m < < ο·ο IQ · · « · · g

Ο Ε Ε Ε Ε Ε CO

· · · · · (C ^3* fl rt rl rl Η Η 10

H <W <W «Η «Η U-l *H H

i|-l E E k E E A

^00)0)0)0) hU

o > > > > > i i o w i

>OOOOOI t CO &4 I

o op η h Φ h nj > A A Η Η Η Η* •Η · 4-1 ‘ *· * » •ΡΙΟίβΙβΜΜΝΗ ^ Ή C U 0WWW,W A k Ό 0-H*H+J-P+>4J «0Ό«ΛΛ««<β« (04J<\\\0 Ο 0 Ο Α Λ Ε Λ Λ Ν Ν Ν Ν

hk Ο Ε Ε C C C C

0(0 <H rt rt O O O O

«η a (Ηουηηηη ι

«•"Ri 3 rt rt rt rt rt rt I I I I

U & 65 S fe S Ϊ5 O I I I

H Bl

Η I

, « EJ u w « CD <W — K (0 *> * 2 ~ X s •h p>mnroncoinomoin

£ CDcNfnnronHnniNO

'i·

^ PJ

Λ H \ h ·· in

·< N CM

O! '— ·* I

pH Γ*» iH

'-'O »3· o X (0 Ή w n •H Q 1—I >i

k O O 0) Η A

+> \ <C *H &i rt rt El W ·ο Η I El S Eh B* O O C rt

O o in rt (DO

\ T-> Η A

m o >1 10

«10 Λ O

O \ A C

> 05 tt 0 O

•η a s ή e

CQ o O Q I

• u c

A

rt u

rtn-tfinior^æoiOHN

D<i'i<i'i'frf'fininin ft u o« DK 169123 B1 15 i — iH o -- f- — O) —.. C o in γόο o - - —·

Ό E eo h +J

*H CTi i w w »o

E w C +J +J U

IC 10 10 (0

4J 4J 4-> Vi Vi O

> 10 *H (0 «0 -P

*H Vi Λ «-v Λ — C) 0) (0 +J COOOCO Vi O 4J 4-> Ή x α) ...... o - æ ω vi

(04JOrJ,OCO'i*H*H4J φ tø w s-» —- Ό Ό I

Ό O O O ^ C

(0-— OOOO-POO (0 rSnOOOMlOOO+J «ΠίΟΙβΙΟ'-^'ίνΉ ^ W (0 «Q

<l)WOOOW<DOOVl >owwwo-pwwo o CM (¾ Λ Α Λ tø A A w <K=

Vi 0) > •H · 4J <0 -H C ~ Vl Ό O 4J α) ό x; (0 -P < V 01(0 Vi U M 0)

Vl (0 <W O A O-i

«H ft 3 I I I I I III -- Vi A I I I I I III

A

Η I H 0) , U A ft

£r] ILJ

(Q tø <K> CO - & Vi

K

•H >00000 OOO

£ CQ Η <M M <N fM CICMO

X

•H

Vl

.p W W W W W WWW

<0 £ £ £ £ £ SEE

E ο ο ο ο o ooo *

Vi

C

P

(0

Vi _ «ο <n ·* in vs t- eo σι o 0 in in in in in in in ic

ft Vi A

DK 169123 B1 16

Eksempel 2

Effektivitet af iniicerbare mikrosfærer i forskellige bæremedier.

Virkningsf uldheden af forskellige injicerbare præpara-5 ter af mikrosfærer i forskellige bæremedier bestemmes ved at anvende en analyse med en hypofysektomiseret rotte. Den hypofysektomiserede rotte producerer ikke sit eget væksthormon og er modtagelig for injiceret bovin væksthormon. Den målte reaktion er væksten over et tidsrum, såsom 10 dage.

10 Hver enkelt af de hypofysektomiserede albinorotter (Taconic Farms, Sprague Dawley-stamme) injiceres med en tilstrækkelig mængde mikrosfære-præparat fremstillet som beskrevet i eksempel 1, således at det opnås en 10-dages dosis på 800 /xg (80 øg/dag) bovint væksthormon i 0,2 ml bære-15 medium som anført i den følgende tabel III.

TABEL III Bæremedium

Navn Betegnelse

20 Glyceryldioleat GDO

Saltopløsning SAL

Kaprin/Kapryl-triglycerider C/C

Sojaolie Sojaolie

Diethylsuccinat DES

25 Aluminiummonostearat-gel Gel

"Carbowax" (fortykkelsesmiddel) THX

Prøvemetode.

Inden afprøvningen vejes dyrene, og de dyr, der skal 30 anvendes til prøven, udvælges på basis af legemsvægt. Kun de dyr, hvis legemsvægt er en standardafvigelse fra den gennemsnitlige legemsvægt for gruppen, vælges. Den resulterende gruppe deles derpå tilfældigt i behandlingsgrupper bestående af otte rotter pr. gruppe ved hjælp af en rando-35 miseringsprocedure frembragt af en computer. Forsøgsdyrene overføres derpå til et rent bur, og der anbringes fire rotter DK 169123 B1 17 i hvert bur. På den første forsøgsdag vejes forsøgsdyrene, og de dyr, som har en for stor vægttilvækst eller for stort vægttab (±5 g) udskiftes. Derefter anvendes dyrene til forsøget og behandles.

5 Ved afslutningen af den 10 dage lange forsøgsperiode registreres den samlede vægttilvækst for hvert dyr, og derefter bestemmes den gennemsnitlige vægttilvækst pr. rotte for hver behandling. Resultaterne af disse forsøg, som er opsummeret i den følgende tabel IV, viser effektiviteten af 10 det injicerbare præparat af mikrosfærer med forskellige bæremedier.

DK 169123 B1 18

TABEL IV

VIRKNINGSFULDHED AF INJICERBARE MIKROSFÆRER I FORSKELLIGE BÆREMEDIER

5 Mikrosfære- præparat 10-Dages

iflo. eks. 1 Bæremedium Vækst faranH

48 G DO 19,5 32 GDO 17,9 10 18 SAL 19,4 16 GDO 18,5 12 C/C 19,8 16 GDO 15,5 12 SAL 16,6 15 27 SAL 17,4 16 C/C 14,0 16 GDO/DES (4:1) 13,7 32 Sojaolie 15,6 39 Sojaolie 16,0 20 8 8% Gel/Sojaolie 14,0 34 8% Gel/Sojaolie 8,0 42 Sojaolie 12,6 43 Sojaolie 8,0 34 0,5% THX/Sojaolie 17,0 25 37 0,5% THX/Sojaolie 14,0 36 0,5% THX/Sojaolie 13,6 33 0,5% THX/Sojaolie 16,8 35 0,5% THX/Sojaolie 14,5 negative kontroller* 0,7±3,15 30 * Gennemsnitsvækst for 22 negative kontrolgrupper (ingen behandling) DK 169123 B1 19

Eksempel 3

Bedømmelse af væksthormon-mikrosfære-præparater til malkekøer.

Mælkegivende køer opdeles i grupper på 3-8 dyr. Under 5 hele forsøget fodres alle køerne med den samme mængde majsensilage, lucernehø og mælkekoncentrat tilstrækkeligt til at give 25 kg til 30 kg mælk pr. dag. Køerne behandles ikke i 2 uger, og den daglige mælkeproduktion og det bovine væksthormonniveau i blodet registreres for hver gruppe af dyr.

10 Forsøgs- eller kontrolformuleringerne anført i den følgende tabel V indgives derpå i forsøgsperioden. Væksthormonniveauet i blodet hos dyrene bestemmes ved gængse RIA-teknikker pero-disk, og mælkeproduktionsniveauerne registreres dagligt. Resultaterne af disse forsøg, som er opsummeret i tabel VI 15 og VII, viser effektiviteten af de her omhandlede præparater til forøgelse af mælkeproduktion og til forøgelse og opretholdelse af forhøjede væksthormonniveauer i blodet.

20 DK 169123 B1 Μ Ό O' O'

OeOOHOHOOHOHO

ra

S3 D'd'tJ'tJ'O

ρΗΐΟΐβίΟίΟΜίβίβΙβΙβΗ CQ Ό Ό Ό Ό Ό Ό Ό Ό θ' -Η ·Η g O' O' θ' O' g g O' g g O' in g g g - o in o o 0 ra in r\j in in in in •H Hn in ran n ra Ό 0) g o -o

la i—I

(tt o in in in in ca .C - V >-i n ra ra ra CQ O I \ \ \ \

S fe I Η Η Η H

la 0) Λ Λ ^

X ^ \ \ \ a) g \ \ \ X . p .w.w sw Η «Η H 0) H C) Q) H C)

Id *0 O *H 0 *H -H O *H

g 0) >ι Η >ι Η Η >i H

g Η O Η O O H O

H <D O) <0 O' 10 (0 O'«

•Η la K Ή ti *H i—i CQ ti *H ti CQ

•P «CQEOEOCQO E O CQ

mu = cq = wow s cq o > s ►Q C co æ næ H Q) vv CQ > X r> r> t r> < C *h r« r- r« r* tH (0 ^ w w ~ w

P CQ CQ CQ CQ

(-1 (0 I H E-ι I D Η I

0) E I O O I O O I

O' £3 U la

© O

H 0-> 3 (0 p (0 W ·Η O H —* *-k fe *H n ra ra

Λ H H H

(0 - k k

PH O O O

Μ φ w w >_

\ *0 CQ CQ CQ

H *0 · · \ 0) -H g g -»g «*> *0 g · · ra

Ό HH \ —v H

P -Η p <H <H Hra«H

I0g> la U ^ H II

la W *H Q) Q) Λ k Q) <0 O' P > > la O >

Q £3 .¾ O O «'-'O

(B-Η« \ \ 0<J\ la la 0) —» --k -Η · QUO lO 10 CQ g 10 I > (0 k k \ · k

Q)WH Η H ,Q Η H

la C) *H w k-' la P w

IH <11 li M n id la N

tn O > I (0 (0 l(0>(0 I

O fe O I S fe I fe O S !

la M

•h in in in m E fe k k k k > I kJ* kj< I T <ς· i CQ i ra ra I ra ra i « la

fe < CQ U Q W fe U

A

2i DK 169123 B1 in tn

•Η IS

Dl Ο ο *ΰ ο ο D S' S' O' CO S'

IS (0 (β (Μ IS

|Ε Ό Ό Ό ^ Ό β tn tn O' g g σ' e g g in o o 3 r- in in in •Η Η (Ί O Is •C Φ g

Φ *0 k rH

Ri o m in CD ,3 * · \ k <N CM in w o \ \ i \

s fa Η H IH

k 0) ~

β H

X „ v.

Φ g \ \ *· X p s s w Η ·Η Η φ Η Φ

IS Ό O *H O *H H

g Φ >i H >i H CU

ΤΓ“ g Η 0 Η o o tj Η Φ S' IS S' « +» !5 «Η k ·Η ·γ> ·Η ·η W Η

15 4-> WEOEOCQeS

τ' O : td : to ϋ U

Ο & _ C C æ co Φ - i > X O Η *H I «“» ^ c •Hf'' i*· cd in \ Β H ·

, JJ W W CQ ,14 \ CQ

g S å δ S ! g ? ^ £ I = ^ H \ k k Φ 0

Η -P

3 IS

g W

k *H

O Η λ

pH -H CM (N

ja η h iS ·» *

4J H O O

I» 0) - ^

\ -S ffl CQ

ιΗ Ό Φ H g g ΛΊ Ό g ·

Ό Η H

+J -H 4J <H <W

IS g > k k k Kl ·Η φ Φ IS tn 4J > >

Q C X O O

« -H IB \ \ pj ^ φ ^ 0 φ Ό vo io 1 > IS * *>

φ Η Η Η H

k Φ H-i w w W in k n n

<H C Φ « CD

in o > is «s ii o x o z z ii k * -η in in s æ - - , ^

p> Ίί ^ I

CD CQ m ir« p

Z S H b X

DK 169123 B1 22

TABEL· VT

Gennemsnitlige mælkeproduktionsforøgelser fra forsøg med malkekøer.

5 % Forøgelse i mælkeproduktion sammenlig- net med ikke-doserede kontrolkøer_

Formulering nr._ Uae 1 Uae 2 Uae 3 Uae 4 A 10,5 13,9 12,3 14,7 10 B 16,4 21,1 19,2 20,8 C 17,8 19,4 17,3 19,3 D 9,2 16,7 15,6 15,8 E 8,4 7,3 16,0 4,0 F 6,7 4,5 13,8 9,8 15 G 9,6 19,3 9,5 3,7 H 7,4 14,0 6,0 4,0 I 11,1 10,6 4,1 6,3 J 14,2 13,1 20,1 24,5 K 17,7 4,9 3,6 0,1 DK 169123 B1 23

TABEL VII

Gennemsnitlig plasma-BVH-koncentration (ng/ml ved radioim-munoanalyse) ved forsøg med malkekøer.

5 Tid forløbet _Formulering nr._

(Dage i A* B C Di E F

-24 hr 1,3 1,3 1,5 1,2 1,0 1,1 0 hr 1,4 1,2** 1,4** 1,1 1,0** 1,1** 10 3 hr 6,1 2,0 3,3 20,0 25,6 1,1 6 hr 5,2 6,9 8,5 7,2 50,1 1,2 1 dag 2,6 30,8 37,6 1,5 13,5 13,8 2 dage 2,4 9,7 20,1 3,7 7,2 8,4 5 dage 2,8 6,7 9,2 3,9 8,2 5,8 15 7 dage 2,9 7,3 9,9 7,4 8,2 6,9 9 dage 3,4 7,2 9,8 7,8 8,5 7,3 12 dage 3,7 6,4 8,5 3,8 2,9 1,8 14 dage 2,7 4,3** 5,6** 4,0 2,4** 1,5** 16 dage 3,2 14,2 21,2 5,5 45,7 15,7 20 19 dage 3,9 9,9 11,2 7,2 9,6 9,0 21 dage 3,2 14,7 12,9 6,4 8,1 7,5 23 dage 2,4 9,5 8,0 6,3 7,8 6,1 26 dage 2,5 7,8 8,4 5,4 5,4 3,7 28 dage 2,2 4,6 6,1 4,9 5,0 2,8 25 DK 169123 B1 24 TABEL VII (fortsat)

5 Formulering Tid Formulering

Tid forløbet nr._ forløbet nr._

fPaae) J* K (Daae) G* Η I

-24 hr 2,3 5,2 -24 hr 3,0 5,3 3,1 0 hr 4,1 7,3** 0 hr 2,9 3,8** 3,5** 10 1 hr 12,2 34,5 3 hr 15,0 4,6 3,8 2 hr 15,3 57,2 6 hr 10,4 3,7 4,7 4 hr 15,8 127,8 1 dag 5,1 10,2 31,5 6 hr 12,7 102,7 2 dage 4,7 7,8 24,5 1 dag 4,4 107,7 3 dage 4,2 6,2 8,4 15 2 dage 4,0 33,3 4 dage 4,8 6,7 9,2 3 dage 4,1 15,3 5 dage 4,3 6,5 9,7 4 dage 4,7 13,1 6 dage 6,1 8,0 11,2 6 dage 5,7 15,8 7 dage 6,2 9,6** 13,1 8 dage 6,0 17,6 8 dage 6,0 18,0 11,9 20 11 dage 6,7 34,5 10 dage 6,5 16,8 13,1 13 dage 7,9 18,6 11,8 17 dage 5,2 16,5 11,0 20 dage 5,7 17,3 12,6 *Note: Blodprøver udtages inden den daglige injektion 25 ** Injektioner indgives om morgenen på disse dage, efter at blodprøven er taget.

DK 169123 B1 25

Eksempel 4

Langsom frigørelse af præparater ifølge opfindelsen i får.

Ved at anvende praktisk taget samme fremgangsmåde som beskrevet i eksempel 3 indgives præparaterne fremstillet 5 i eksempel 1 og anført i den følgende tabel VIII til grupper af får (3 dyr pr. gruppe). Dyrene doseres med 3 mg BVH mikro-sfæreækvivalenter pr. kg legemsvægt. Der udtages dagligt blodprøver over en 30 dages periode, og disse analyseres for BVH-niveauet som beskrevet tidligere. Resultaterne af 10 disse forsøg, som er opsummeret i den følgende tabel VIII, viser effektiviteten af de her omhandlede præparater til opretholdelse af forhøjede væksthormonniveauer i blodet over et længere tidsrum.

DK 169123 B1 26

H

E

tj cm in oa n o h n η η c N N « ri W

in Λ — Λ 0) •H φ t0 Ό Ό Η Ο) — S Λ ν tn 0 •Η C Η 04 Η CM Π Ο Ο Ο Ο (0 >-Ι Ο Η 04 Η Η Η |Ι Ιβ Η Λ

tO > A

Χϋ 3 w « Η > ‘Η SC - * ΰ (0 I >-ι O) oa [j _< tø I H τ* φ ID N N N PJ Φ HQ) 5

> > S

g S S 3 55 2 ω to h

SS ti) φ E

^ P ·η > "s o oo oooooo 2 ®.·Η0 o o ^ in η h in in o g W C C oa oh h (0

E

ω to _ s § in o t o co o hø) in ø)

C C

+) -H +> -r4 m oa

ø) C 0) C η H

IS II) »III to CO

E > « > e P ri Η Η H S 5 •h o a s o a h(d<d h

TJ go EO O-H-H O

<D w 4J "-4J >1HH >1

g OH OH H00 H

0) W <0 »10 Ø)f0l0 0) h Λ tø CU ffl O ·Η ·η ·η O Η

IB OSOOQS

cq in h in-HO=cowos p to k to o jy p n ^ in in n oj oa <f » H HH Hnnnnm DK 169123 B1 27 i—i e s 0 C •tf m o o o 10 CO H CJ ΙΟ'ίΗΗ — Λ Λ Λ Q) •Η 0 (0 ti Τ) Η α) — β Λ ν 0> 0

•Η C

itik ο 4-> <0 Η Ο Ο j, (0 > ΛΗνο Η η η η η •S § *

Η Η J

5 ί C Η ^ ^ ^ * ΰ (0 k CM Ν « Ν Ν

ζ Κ β Λ 'S' ^ I I I I I

η ω Η rg ν rr *3· *3* <3· Ή Ο *5 ^ > η!

Hk Q1

Η 3 5 S

lH

CU

rH

ο >1 Η 0ι •Η s β = 3 « \ « •ri <1) α) Η Q) Η >0 ·Η ·Η ·· -Η ·· flJrHr—ΙΗι—IHC S Ζ Ζ β Ο Ο "" Ο ^ 0) (0 (ΰ (ΰ k -η ·η cm ·η Μ « Ο Ο Η Ο Η η η to α η α •μ <d k (0

Ocoeo *3* in vo η ftj η -¾1 i* k 04 DK 169123 Bl 28

Eksempel 5

Virknings fuldheden af en blanding af bovint væksthormon ifølge opfindelsen i malkekøer.

Der fremstilles en blanding af bovint væksthormon 5 indeholdende natriumbenzoat (7% w/w) og en blokcopolymer af ethylenoxid og propylenoxid (0,5% w/w) ved forstøvningstørringsmetoden beskrevet i eksempel 1.1.

Den således fremstillede blanding (7,28 g) sættes til en omrørt opløsning af glyceryltristearat (19,5 g) i en 10 4/1 w/w blanding af en blanding af capryl-, caprin-, laurin- og capron-triglycerider ("Miglyol" 812)3/sojaolie (71 ml) ved 75-80°C. Blandingen omrøres ved 75-80°C, indtil den er homogen, hvorpå den afkøles. Det fremkomne præparat, som på vægtbasis indeholder 6,96% bovint væksthormon, 0,51% natrium-15 benzoat, 0,03% overfladeaktivt middel (blokcopolymer) og 73,0% bæremedium indgives til mælkegivende køer ved fremgangsmåden beskrevet i eksempel 3. Resultaterne af disse forsøg, som er opsummeret i den følgende tabel IX, viser effektiviteten af disse præparater til forøgelse af mælkepro-20 duktionen i længere tidsrum.

TABEL IX

Gennemsnitlige mælkeproduktionsforøgelser sammenlignet med ikke-doserede kontrolkøer.

25 % Forøgelse % Forøgelse

Uae 1_ Uge 2_ 15,7 12,0

Claims

1. Præparat, der på vægtbasis indeholder ca. 2 til ca. 70% væksthormon, somatomedin, vækstfaktor eller biologisk aktivt fragment eller derivat deraf, ensartet dispergeret i 5 ca. 30 til ca. 95% fedtstof eller voks eller blanding deraf, kendetegnet ved, at præparatet foreligger i form af mikrosfærer.

2. Præparat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det på vægtbasis indeholder ca. 40 til ca. 95% voks 10 eller fedtstof eller blanding deraf, ca. 5 til ca. 40% væksthormon, somatomedin, vækstfaktor eller biologisk aktivt fragment eller derivat deraf, 0 til ca. 20% overfladeaktivt middel, konserveringsmiddel, stabilisator, salt, puffer eller blanding deraf, hvorhos den gennemsnitlige partikel- 15 størrelse efter vægt af præparatet ligger i området fra 25 til 300 /xm.

3. Præparat ifølge krav 2, kendetegnet ved, at væksthormonet er bovint, porcint eller aviært væksthormon .

4. Præparat ifølge krav 3, kendetegnet ved, at det på vægtbasis indeholder ca. 20 til ca. 40% bovint væksthormon og ca. 55 til ca. 79% glyceryltristearat.

5. Formulering til parenteral indgivelse og langsom frigørelse af aktivt stof, kendetegnet ved, at 25 den indeholder et præparat ifølge krav 4 dispergeret i et farmaceutisk og farmakologisk acceptabelt flydende bæremedium.

6. Præparat ifølge krav 4, kendetegnet ved, at det på vægtbasis indeholder ca. 20 til ca. 40% bovint 30 væksthormon, ca. 55 til ca. 79% glyceryltristearat, 0 til ca. 0,2% mikrobiologisk konserveringsmiddel, 0 til ca. 1% ikke-ionisk overfladeaktivt middel og 0 til ca. 2% natrium-benzoat.

7. Fremgangsmåde til forøgelse af mælkeproduktionen 35. mælkegivende dyr, kendetegnet ved, at dyret parenteralt indgives en formulering, som på vægtbasis inde- DK 169123 B1 holder et præparat indeholdende ca. 2 til ca. 70% væksthormon, somatomedin, vækstfaktor eller biologisk aktivt fragment eller derivat deraf, ensartet dispergeret i ca. 30 til ca. 95% fedtstof eller voks eller blanding deraf, hvorhos præpa-5 ratet foreligger i form af mikrosfærer dispergeret i et farmaceutisk og farmakologisk acceptabelt flydende bæremedium.

8. Fremgangsmåde ifølge krav 7, kendetegnet ved, at præparatet på vægtbasis indeholder ca. 40 10 til ca. 95% voks eller fedtstof eller blanding deraf, ca. 5 til ca. 40% animalsk væksthormon, 0 til ca. 20% overfladeaktivt middel, konserveringsmiddel, stabilisator, salt, puffer eller blanding deraf, og at præparatets gennemsnitlige partikelstørrelse efter vægt er i området fra 25 til 300 Mm.

9. Fremgangsmåde ifølge krav 8, kendeteg net ved, at præparatet på vægtbasis indeholder ca. 20 til ca. 40% bovint væksthormon, ca. 55 til ca. 79% glyceryl-tristearat, og at bæremediet er en neutral mono-, di- eller triglyceridvæske eller blandinger deraf.

10. Fremgangsmåde til forøgelse af vægttilvæksten hos dyr, kendetegnet ved, at dyret parenteralt indgives en formulering, som på vægtbasis indeholder et præparat indeholdende ca. 2 til ca. 70% væksthormon, somatomedin, vækstfaktor eller biologisk aktivt fragment eller 25 derivat deraf, ensartet dispergeret i ca. 30 til ca. 95% fedtstof eller voks eller blanding deraf, hvorhos præparatet foreligger i form af mikrosfærer dispergeret i et farmaceutisk og farmakologisk acceptabelt flydende bæremedium.

11. Fremgangsmåde ifølge krav 10, kendete g-30 net ved, at præparatet på vægtbasis indeholder ca. 40 til ca. 95% fedtstof eller voks eller blanding deraf, ca. 5 til ca. 40% animalsk væksthormon, 0 til ca. 20% overfladeaktivt middel, konserveringsmiddel, stabilisator, salt, puffer eller blanding deraf, og at den gennemsnitlige par-35 tikelstørrelse efter vægt af præparatet er i området fra 25 til 300 Mm. DK 169123 B1

12. Fremgangsmåde ifølge krav 11, kendetegnet ved, at præparatet på vægtbasis indeholder ca. 20 til ca. 40% bovint væksthormon, ca. 55 til ca. 79% glyceryl-tristearat, og at bæremediet er en neutral mono-, di- eller 5 triglyceridvæske eller blanding deraf.

13. Fremgangsmåde til forhøjelse og opretholdelse af forhøjede nivauer i blodet af et væksthormon, somatomedin, vækstfaktor eller biologisk aktivt fragment eller derivat deraf, forbedring af fodernyttevirkning, forøgelse af vækst- 10 hastighed, forøgelse af muskelstørrelse, formindskelse af kropsfedt og forbedring af forholdet mellem magert kød og fedt i et dyr, kendetegnet ved, at dyret paren-teralt indgives et præparat, som på vægtbasis indeholder ca. 2 til ca. 70% væksthormon, somatomedin, vækstfaktor 15 eller biologisk aktivt fragment eller derivat deraf, ensartet dispergeret i ca. 30 til ca. 95% fedtstof eller voks eller blanding deraf, hvorhos præparatet foreligger i form af mikrosfærer dispergeret i et farmaceutisk og farmakologisk acceptabelt flydende bæremedium.

14. Fremgangsmåde ifølge krav 13, kendeteg net ved, at præparatet på vægtbasis indeholder ca. 40 til ca. 95% voks eller fedtstof eller blanding deraf, ca. 5 til ca. 40% animalsk væksthormon, 0 til ca. 20% overfladeaktivt middel, konserveringsmiddel, stabilisator, salt, 25 puffer eller blanding deraf, og at præparatets gennemsnitlige partikelstørrelse efter vægt er i området fra 25 til 300 μια.

15. Fremgangsmåde ifølge krav 14, kendetegnet ved, at præparatet på vægtbasis indeholder ca. 20 til ca. 40% bovint væksthormon, ca. 55 til ca. 79% glyceryl-30 tristearat, og at bæremediet er en neutral mono-, di- eller triglyceridvæske eller blandinger deraf.