DK160877B - Fremgangsmaade til fremstilling af 2-penemforbindelser - Google Patents

Description

DK 160877 B

Den foreliggende opfindelse angår en særlig fremgangsmåde til fremstilling af 2-penemforbindelser med den almene formel 'vKY"5 y*—\ 10 hvori Rj er C^-C^-hydroxyalkylf R2 er Cj-Cg-alky^ der eventuelt er substitueret med hydroxy, carboxy, amino eller en phenylgruppe, R3 er -COORg, hvor Rg er hydrogen eller C2-C,.-alkylen, og 15 Z er svovl eller oxygen, eller farmaceutisk acceptable salte heraf.

Den i den offentliggjorte europæiske patentansøgning nr. 3.960 beskrevne fremgangsmåde indebærer omsætning af en forbindelse med formlen 20 H ZA

H —C—R1 A, 25 \ o chw:„ i o 0=C—r2a hvori Rfl f.eks. er en organisk gruppe, der ved hjælp af et carbonatom er bundet til ringcarbonatomet, eller en 30 fri etherificeret eller esterificeret hydroxy- eller mer-captogruppe, Z er svovl eller oxygen,

A

R^ f.eks. er en organisk gruppe, der ved hjælp af et carbonatom er bundet til ringcarbonatomet, eller en ethe-35 rificeret mercaptogruppe, og R2 sammen med carboxyl-gruppen -(C=0)- danner en beskyttet carboxylgruppe, f. eks. allyloxy, og Eq er en reaktiv esterificeret hydro-xygruppe, f.eks. chlor, med en phosphinforbindelse, så-

DK 160877 B

2 som tri-(lavere alkyl)-phosphin eller en triarylphosphinf eller med et phosphit, såsom et tri-(lavere alkyl)-phosphit, til dannelse af en phosphoraryliden med formlen ?a f

5 c—RXA

B

---N

ff SC = E.

,0 O-C-r/ hvori er en triaryl- eller tri-(lavere alkyl)-phosphor anylidengruppe, eller en phosphonoforbindelse med formlen

ZA

15 R, · S—c—ra h p .Sr-C R,

C

1_.ir ^ \ 20 O CH-E9 °=c-R2 hvori E2 f.eks. er dialkylphosphono. Ringslutning indtræder via ylid-forbindelsen med formlen

K P 2A

25 ia < „ A

H„_J- l^S—C—

D

) « a o=c—r2 hvori betegner en phosphoniogruppe, der er esterifi-ceret tre gange, eller en phosphonogruppe, der er este-rificeret to gange med en kation.

35 . Der er beskrevet forskellige veje til fremstil ling af forbindelserne med formlen A. Én sådan vej indebærer omsætning af en forbindelse med formlen 3

DK 160877 B

ZA

R " A

ja ^s-C-R! n/W --p

E

/-'

A

med en glyoxalforbindelse 0HC-C(O)-R2 eller et passende derivat.

I nævnte offentliggørelse er der også foreslået 10 fremstilling af mellemforbindelser E ved solvolyse af en forbindelse med formlen s. s A/1* H--Y „

Z

15 I

--1 / y i 20 hvori R f.eks. er en allyloxycarbonylgruppe.

Der kræves således mindst fem trin til opnåelse af de ønskede forbindelser ud fra mellemproduktet F, og idet hvert trin kræver isolering og rensning af produktet, før man går videre til det næste trin, tager det 25 langt over 1 uge at fuldende den totale operation og med et slutprodukt, der er en blanding af forbindelser, som kræver adskillige chromatografiske rensninger, før den ønskede forbindelse isoleres i ren form.

Lignende processer, der kræver talrige trin, er 30 beskrevet i den offentliggjorte europæiske patentansøgning nr. 13.662 og i Journal of the American Chemical Society 100 : 26, 8214 (1978).

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at man omsætter en forbindelse med den almene for-35 mel

DK 160877 B

4 \ H Xv

>—K

II ^ s 5 11 J—''v»

V

hvori R^, Rj og Z har de ovennævnte betydninger, og 10 R^' er -COORg, hvor Rg er C2^Cg-alkenyl/ hvorhos enhver carboxy-, hydroxy- eller aminogruppe eventuelt er beskyttet, med en trialkylphosphitforbindelse, hvorefter man fjerner enhver beskyttelsesgruppe og, om 15 ønsket, omdanner en således opnået forbindelse til et farmaceutisk acceptabelt salt heraf.

Den foretrukne trialkylphosphitforbindelse er triethylphosphit.

Der kan benyttes hensigtsmæssige udførelsesfor-20 mer for fremgangsmåden ifølge opfindelsen som angivet i krav 2 og 3.

Forbindelsen med formlen II er fortrinsvis en, der er fremstillet ved omsætning af en forbindelse med følgende almene formel 25 R1 Η χ II ^

S III

--NH

30 S

O

hvori R-jy R2 og Z har de ovenfor for formel II anførte betydninger, med et reaktivt derivat af en syre med følgende almene formel 35 0

11 IV

R3' ^ OH

fortrinsvis et halogenid deraf, hvor halogenet er f.eks.

5

DK 160877B

Cl eller Br, og R^' har den ovennævnte betydning, idet omsætningen udføres i et indifferent opløsningsmiddel i nærværelse af en organisk base, fortrinsvis en tertiær amin.

5 Ved den foregående omsætning dannes der hydrogen- halogenid ved reaktionen og ved sønderdeling af syreha-logenidet.

For at undgå sønderdeling af syrefølsomme mellemprodukter og slutprodukter (hvilket f.eks. kan indtræde, 10 når omdannelsen af en forbindelse med formlen III til en ønsket forbindelse med formlen I udføres, uden isolering af mellemprodukter, i én beholder) er det tilrådeligt på et passende trin ved fremstillingen af forbindelsen med formlen I at tilsætte et syrebindende middel, f.eks. et 15 jordalkalimetalhydrogencarbonat eller fortrinsvis et jordalkalimetalcarbonat. Det syrebindende middel inkorporeres fortrinsvis i reaktionsblandingen af forbindelsen III og et syreha logenid.

Fordelene ved den foreliggende fremgangsmåde sam-20 menlignet med de fremgangsmåder, der er kendt fra de ovennævnte offentliggjorte europæiske patentansøgninger nr. 3.960 og 13.662, kan opsummeres som følger: 1. Den foreliggende fremgangsmåde, indbefattende dannelse af udgangsforbindelsen II, kræver færre trin.

25 2. Foreliggende fremgangsmåde er betydelig mindre tidskrævende.

3. Foreliggende fremgangsmåde giver udbytter på ca. 50% sammenlignet med udbytter på 25% opnået ved de kendte fremgangsmåder.

30 Den fremgangsmåde, som er anvendt i de europæiske patentansøgninger, er kendt som Woodward-metoden.

I J. of Am. Chem. Soc., s. 6138-39, 1982, sammenlignes Woodward-metoden med den foreliggende fremgangsmåde. Fordelene ved den foreliggende fremgangsmåde over-35 for Woodward-metoden er angivet i fodnote 17 i publikationen. Det faktum, at den foreliggende fremgangsmåde giver udbytter på 50%, er angivet i højre spalte på side 6138 i publikationen.

DK 160877 B

6

Foretrukne O- og S-beskyttende grupper til anvendelse ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse er sådanne grupper som 2,2,2-trichlorethoxycarbo-nylf 1,1,l-trichlor-2-methyl-2-propoxycarbonyl, p-nitro-5 benzyloxycarbonyl, allyloxycarbonyl eller 2-chlorallyl, idet 2,2,2-trichlorethoxycarbonyl er mest foretrukket.

Passende carboxybeskyttende grupper er f.eks. ar-alkylgrupper, som konventionelt anvendes til dette formål, f.eks. benzyl eller p-nitrobenzyl, og allyliske 10 grupper, der let kan fjernes ved i teknikken kendte fremgangsmåder, f.eks. ved hydrogenering i tilfælde af ar-alkylgrupper og f.eks. ved den nedenfor beskrevne Mc Combie-metode i tilfælde af allyliske grupper. Passende "allyliske" grupper for Rg (hvori de opfylder en carboxy-15 beskyttende funktion) er vilkårlige grupper med allylisk struktur, f.eks. allyl, halogenallyl, methylallyl og crotyl. Den foretrukne allyliske gruppe er chlorallyl, mest foretrukket 2-chlorallyl. Omsætningen af forbindelsen med formlen II og også omsætningen af azetidinonen 20 med formlen III med syrehalogenidet udføres bekvemt i et indifferent opløsningsmiddel. Med "indifferent opløsningsmiddel" menes ethvert organisk eller uorganisk opløsningsmiddel, hvori udgangsforbindelsen og reagenserne er opløselige, og som ikke griber forstyrrende ind i 25 fremgangsmåden under reaktionsbetingelserne herfor, således at der fremkaldes et minimum af konkurrerende sidereaktioner. Af indifferente opløsningsmidler, der kan anvendes ved den omhandlede fremgangsmåde, kan der nævnes aromatiske carbonhydrider (f.eks. benzen, toluen og lig-30 nende), alifatiske ethere (f.eks. diethylether og dipro-pylether), cycliske ethere (f.eks. dioxan og tetrahydro-furan) og fortrinsvis halogenerede carbonhydrider, såsom methylenchlorid og chloroform.

Almindeligvis foretrækkes sådanne indifferente 35 opløsningsmidler (f.eks. halogenerede carbonhydrider), som har de ovenfor omtalte opløselighedsegenskaber, og som har et kogepunkt i området fra 40°C til 80°C, således at når de forbindelser med formlen II, der anvendes, 7

DK 160877B

opnås ved den heri definerede fremgangsmåde, kan det samme opløsningsmiddel anvendes både ved fremstillingen af forbindelsen il og omsætningen heraf med en trialkylphosphitforbindelse, og hele operationen kan 5 fordelagtigt udføres i én beholder, uden at det er nødvendigt at isolere forbindelsen II.

Ved udøvelsen af fremgangsmåden ifølge opfindelsen omsætter man sædvanligvis imidoforbindelsen II i et indifferent opløsningsmiddel med to molækvivalenter af 10 et trialkylphosphit (sædvanligvis tri-ethylphosphit), og der tilsættes hensigtsmæssigt en opløsning af trialkylphosphittet i et indifferent opløsningsmiddel til en opløsning af forbindelsen II i et indifferent opløsningsmiddel, og reakti-15 onsopløsningen holdes ved en temperatur i området fra 20°C til 80°C som nærmere angivet ovenfor, sædvanligvis fra 40°C til 60°C, sædvanligvis i et tidsrum på fra 6 til 24 timer.

Der opnås større udbytter af N- og O-beskyttede 20 forbindelser med formlen I, når der sættes en trialkyl-phosphitopløsning til en opløsning af forbindelsen II over et tidsrum på fra 2 til 3 timer. De bedste udbytter af produktet med formlen I opnås desuden, når omsætningen udføres ved 40°C til 60°C.

25 Når tyndtlagschromatografi (TLC) viser fraværel sen af imidomellemprodukt II, kan det ønskede produkt (dvs. forbindelsen med formlen I) isoleres og renses ved konventionelle metoder, sædvanligvis chromatografiske metoder efterfulgt af krystallisation.

30 Almindeligvis omfatter fremstillingen af en for bindelse med formlen II fortrinsvis omsætning af en aze-tidinon med formlen III i et indifferent opløsningsmiddel (som defineret ovenfor), sædvanligvis ved en temperatur i området fra 5°C til 25°C, fortrinsvis fra 10°C 35 til 15°C, sædvanligvis med en ækvimolær mængde af et sy-rehalogenidderivat af syren med formlen IV og en tertiær amin, i nærværelse af et jordalkalimetalcarbonat, fortrinsvis calciumcarbonat, i en mængde, der er mindst æk-

DK 160877 B

8 vimolær (og fortrinsvis er mere end ækvivalent) i forhold til azetidinonen med formlen III.

Der kan anvendes en vilkårlig tertiær amin (f.eks. triethylamin) ved den omhandlede fremgangsmåde, idet di-5 isopropyl-ethylamin foretrækkes.

Ved udførelsen af N-acyleringen af azetidinonen med formlen III anvendes der sædvanligvis ca. 1,2 mol af hver af den tertiære amin og et derivat af syren med formlen IV og et stort overskud af calciumcarbonat (f.

10 eks. 10 mol) pr. mol af azetidinonen III med et molært forhold mellem opløsningsmiddel og azetidinon III på 10:1.

Ved en foretrukken udførelsesform anvendes der et syrehalogenid, som er allyloxyoxalylchlorid eller for-15 trinsvis chlorallyloxyoxalylchlorid, den tertiære amin er di-isopropyl-ethylamin, og jordalkalimetalcarbonatet er calciumcarbonat.

N-acyleringen af azetidinonen III kan kontrolleres ved tyndtlagschromatografi (TLC), indtil der ikke 20 påvises udgangsmateriale. På dette tidspunkt kan reaktionsopløsningen , der indeholder imidomellemprodukt II, filtreres til fjernelse af alt syrebindende middel, og den filtrerede opløsning kan vaskes med vand til fjernelse af det under reaktionen dannede tertiære aminsalt 25 og derefter tørres og fortyndet med yderligere indifferent opløsningsmiddel før omsætningen med et trialkyl-phosphit. Alternativt kan reaktionsblandingen fortyndes direkte med yderligere indifferent opløsningsmiddel, således at det molære forhold mellem udgangsazetidinon III 30 (og således også mellem imidomellemprodukt II) og opløsningsmiddel er ca. 1:50.

Forbindelserne med formlen I har flere chirali-tetscentrer, og afhængig af konfigurationen af udgangsforbindelsen vil fremgangsmåden ifølge den foreliggende 35 opfindelse give enten chirale forbindelser med en specifik konfiguration eller isomere blandinger.

Forbindelserne med formlen I kan fremstilles som deres racemiske blandinger, f.eks. dannes der en 5R,6S,

DK 160877 B

9 8R-forbindelse med dens enantiomer (spejlbillede), dvs. en 5S,6R,8S-forbindelse, i lige store mængder, når udgangsforbindelsen med formlen II er en racemisk blanding.

De to enantiomere kan adskilles ved konventionelle meto-5 der, f.eks. fraktioneret krystallisation af optisk aktive saltformer, f.eks. salte afledt af optisk aktive ami-noforbindelser, f.eks. (-)-brucin eller (+)- og (-)-ephe-drin.

Alternativt kan forbindelserne fremstilles i de-10 res rene enantiomere former ved anvendelse af optisk aktive udgangsmaterialer med formlen II ved syntesefremgangsmåden.

Et foretrukket aspekt af den foreliggende opfindelse er rettet på en fremgangsmåde til fremstilling af 15 OR,.

I ^ forbindelser med formlen I, hvori R^ er R^—CH—, R2 er methyl eller ethyl, og Z er svovl, idet R4 er C^-C^-al-kyl, navnlig fremstilling af de foregående forbindelser, hvori R^ er methyl, og R^ er en hydroxybeskyttende gruppe eller 20 fortrinsvis hydrogen. Den foretrukne konfiguration af de foregående forbindelser er den, hvori konfigurationen ved C-5 og C-6 er henholdsvis den absolutte stereokemiske konfiguration R og S. De to hydrogenatomer knyttet til 5- og 6-carbonatomerne er således i trans-stilling i for-25 hold til hinanden. Den stereokemiske konfiguration ved ORc C-8 carbonatomet (dvs. carbonatomet i gruppen —CH—) kan betegnes som enten R eller S afhængig af den nøjagtige art af R2“substituenten. F.eks. vil de for-50 bindeiser, hvori R^ er methyl, have den stereokemiske konfiguration 8R. Den mest foretrukne udførelsesform for fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse vedrører således fremstillingen af forbindelser med den følgende formel med en stereokonfiguration betegnet 5R, 6S, 55 8R og med følgende repræsentative rumlige konfiguration.

.......i_ 10

DK 160877B

J-N-\ O COORg hvori R2' er methyl eller ethyl.

En foretrukken udførelsesform for den omhandlede 10 fremgangsmåde beskrives i det følgende undar henvisning til nedenstående rutediagram: „ OTCE „

"« f s 3 JSEt „ OTCE

T"‘......Η H

15 ch3 s

J-h COf* CH3 I J

0 * /—-1\ C

A' 0/ V° / V* / P(OEt)^ 20 OTCE ψ

H, f Η H

'Τ'", f 5 ^SEt 25 )---\ /sf o cof

Ved udførelsen af denne foretrukne operation i overensstemmelse med den foreliggende opfindelse sættes der til 30 azetidinonen med formlen A' (der er en forbindelse med ORc I ^ formlen II, hvori R^ er CH^-C-H, hvor R^ er den O-beskyttende gruppe trichlorethoxycarbonyl betegnet med "TCE" i formel A'), med stereokonfigurationen 3S,4R,5R, 35 i en chloroformopløsning ved 10°C, hvortil der er blevet sat et molært overskud af calciumcarbonat i forhold til azetidinonen A*, 1,2 molækvivalenter, i forhold til azetidinonen A', af allyloxyoxalylchlorid (dvs. en forbin-

DK 160877 B

11 delse med formlen III, hvori R^ er carboxyallyl) efterfulgt af 1,2 molækvivalenter, i forhold til azetidinonen A', af di-isopropylethylamin i methylenchlorid. Efter 15 minutters reaktionstid frafiltreres overskuddet af calci-5 umcarbonat, den organiske opløsning vaskes med vand, og der tilsættes chloroform til opnåelse af et forhold på 50:1 mellem chloroform og udgangsforbindelse. Chloroform-opløsningen af imidomellemproduktet C bringes derefter op på tilbagesvalingstemperaturen, ved hvilken tempera-10 tur der over et tidsrum på 3 timer sættes en opløsning af 2 ækvivalenter triethylphosphit i chloroform dertil.

Efter tilbagesvaling i yderligere 18 timer isoleres den ønskede forbindelse med formlen I', dvs. allyl-(5R,6S, 8R) -6- (1-trichlorethoxy-carbonyloxy-ethyl) -2- (ethylthio)-15 penem-3-carboxylat, ved chroma tograf i på silicagel og krystallisation af ether-hexan.

Det ovennævnte produkt kan derefter behandles til opnåelse af en bakterielt aktiv forbindelse ved fjernelse af den O-beskyttende gruppe ved C-8 (dvs. trichlor-20 ethoxycarbonylet) ved kendte fremgangsmåder, f.eks. via zink/eddikesyre, og fjernelse af allylbeskyttelsesgrup-pen i 3-carboxylsyrefunktionen. Allylgruppen fjernes mest foretrukket ved hjælp af McCombie-metoden, der er beskrevet i den offentiggjorte europæiske patentansøg-25 ning nr. 0013663. Ved McCombie-metoden til fjernelse af beskyttelsesgrupper anvendes et passende aprotisk opløsningsmiddel, såsom tetrahydrofuran, diethylether eller methylenchlorid, med kalium- eller natrium-2-ethylhexa-noat eller 2-ethylhexansyre og en blanding af en palla-30 diumforbindelse og triphenylphosphin som katalysator. Anvendelsen af kalium- eller natrium-2-ethylhexanoat giver det tilsvarende salt, medens anvendelse af 2-ethylhexansyre giver den frie syre, dvs. forbindelsen natrium- eller kalium-5R,6R,8R-6-(1-hydroxyethyl)-2~ethylthio-2-35 penem-carboxylat eller den frie syre deraf.

McCombie-metoden til fjernelse af beskyttelsesgrupper er særlig egnet til følsomme (3-lactamcarboxyla-ter ifølge den foreliggende opfindelse.

12

DK 160877B

Ved at følge den ovennævnte procedure og behandle allyl-(5R,6S,8R)-6-(1-trichlorethoxy-carbonyloxy-ethyl)- 2-(methylthio) -penem-3-carboxylat, fremstilles natrium-5R, 6S,8R-6-(1-hydroxyethyl)-2-methylthio-2-penem-carbo-5 xylat eller den tilsvarende frie syre.

De ovennævnte metoder til fjernelse af beskyttelsesgrupper kan anvendes ved fremstilling af saltene og de frie syrer af andre forbindelser inden for opfindelsens omfang, f.eks. af de forbindelser, der er defineret 10 med hensyn til formlerne VI oq VII.

De forbindelser med formlen I, hvori Rg er en me-taboliserbar estergruppe, kan fremstilles direkte eller ved omsætning af det tilsvarende alkalimetalsalt med det tilsvarende halogenid, såsom chlorphthaiid eller pivalo-15 yloxymethylchlorid, i et opløsningsmiddel, såsom dimeth-ylformamid. Der tilsættes fortrinsvis en katalytisk mængde natriumiodid.

Fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse som beskrevet ovenfor betegner en forbedring i forhold 20 til de tidligere nævnte kendte fremgangsmåder til omdannelse af imidoforbindelserne til forbindelser med formlen I. Ved den omhandlede fremgangsmåde kan omdannelsen af en imidoforbindelse med formlen II til en forbindelse med formlen I gennemføres i en enkelt operation, og om-25 dannelsen af azetidinonforbindelser til imidomellempro-duktet gennemføres ligeledes i et enkelt trin. Ved foretrukne udførelsesformer for den omhandlede fremgangsmåde kan omdannelsen af en azetidinon til det ønskede slutprodukt, i disse to trin, udføres i en enkelt reaktions-30 beholder og fuldendes på mindre end 1 dag. Det bemærkes også, at den omhandlede fremgangsmåde ikke involverer et ylid-mellemprodukt, såsom det med formlen D ved den ovenfor omtalte kendte fremgangsmåde.

Cycliseringen ved fremgangsmåden ifølge den fore-35 liggende opfindelse antages at forløbe via en carben-me-kanisme, der involverer et kortvarigt eksisterende carbe-noid eller carben afledt af imidoforbindelsen II efter reaktion med en trialkylphosphitforbindelse,

DK 160877 B

13 hvilket carbenoid og carben f.eks. i den ovenfor beskrevne foretrukne udførelsesform for den omhandlede fremgangsmåde antages at have henholdsvis følgende strukturer J' og K'.

5

OTCE OTCE

10 0^ ''@.0-<P)(0Et)3 0 '''j

fev oXoJ

Forbindelserne II og III til den omhandlede fremgangsmåde er enten kendte forbindelser eller kan frem-15 stilles ved kendte fremgangsmåder. Azetidinoner med formlen III, hvori X er svovl, såsom nærmere beskrevet i præparationerne og eksemplerne og under omtalen af de foretrukne fremgangsmådetyper ifølge den foreliggende opfindelse, er således beskrevet i de offentliggjorte 20 europæiske patentansøgninger nr. 13.662 og 3.960. Andre azetidinon- og imido-udgangsforbindelser er også kendte eller kan fremstilles ved kendte fremgangsmåder.

Den foreliggende opfindelse omfatter også de hidtil ukendte forbindelser med følgende almene formel: 25

Ru H c.

\-0 ~ R2 I / 30 { R3 hvori , R2 og har de ovenfor for formel I an førte betydninger, og farmaceutisk acceptable salte heraf.

35 En gruppe af forbindelser med den ovenstående al

mene formel VI er forbindelser med formlen VII

14

DK 160877B

OH

A._pA-

r—L

^ A

hvori G er C^-Cg-alkoxy, og farmaceutisk acceptable salte heraf.

10 Repræsentative forbindelser, der kan fremstilles ved anvendelse af fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse er følgende:

Natrium- (5R, 6S,8R) -2- (isopropylthioM” (1-hydroxyethyl) - 2- penem-3-carboxylat, 15 Dinatrium-(5R,6S,8R)-2-(3-carboxy-l-propylthio)-6-(1-hy-droxyethyl)-2-penem-3-carboxylat,

Kalium-(5R,6S,8R)-2-(t-butylthio)-6-(1-hydroxyethyl)-2-penem-3-carboxylat,

Natrium-(5R,6S,8R)-2-ethoxy-6-(1-hydroxyethyl)-2-penem-20 3-carboxylat,

Natrium-(5R,6S,8R)-2-butoxy-6-(1-hydroxyethyl)-2-pen em- 3- carboxylat,

Natrium-(5R,6S,8R)-2-propoxy-6-(1-hydroxyethyl)-2-penem- 3-carboxylat, 25 (5R,6S,8R)-2-(2 *-Aminoethoxy)-6-(1-hydroxyethyl)-2-penem-carboxylsyre,

Natrium-(5R,6S,8R)-2-methoxy-6-(1-hydroxyethyl)-2-penem-carboxylat, (5R,6S,8R,2'S) -2-[(2'-Amino-2'-carboxyethy1)thio]-6-(Ι-ΒΟ hydroxyethyl)-2-penem-3-carboxylsyre-pyridinium- eller -natriumsalt,

Dinatrium-(5R,6S,8R)-2-(2'-carboxyethylthio)-6-(1-hydroxyethyl) -2-penem-carboxylat,

Natrium-(5R,6S,8R)-2-(21-hydroxyethylthio)-6-(hydroxy-35 ethyl)-2-penem-3-carboxylat,

Natrium-(5R,6S,8R)-2-(2'-ethylthio)-6-(1-fluorethyl) -2-penem-3-carboxylat, og de forskellige forbindelser inden for omfanget af den 15

DK 160877B

ovenfor definerede formel I, som er anført i de offentliggjorte europæiske patentansøgninger nr. 0013662 og 00 35188.

Forbindelserne med formlen I og farmaceutisk ac-5 ceptable salte heraf har antibakteriel virkning, herunder ved formlerne VI til VII definerede hidtil ukendte forbindelser.

De omhandlede antibakterielt aktive forbindelser er aktive mod både gram-positive organismer, 10 såsom Staphylococcus epidermis og Bacillus subtilis, og sådanne gram-negative organismer som E. coli og Salmonella.

Forsøgsrapport 15 Følgende forbindelser blev underkastet en sammen lignende undersøgelse.

Forbindelse 1: 2-ethylthio-penem-3-carboxylsyre, beskrevet i tysk offentliggørelsesskrift nr. 28 19 655,offent-2Q liggjort 23. november , 1978.

Forbindelse 2: Natrium (5R,6S,8R)-2-ethylthio-6-(1-hydroxy-ethyl)-penem-3-carboxylat.

Forbindelse 3: Natrium (5R,6S,8R)-2-methylthio-6-(l-hydroxy-ethyl)-penem-3-carboxylat.

25 Forbindelse 4:Dinatrium (5R,6S,8R)-2-(2-carboxyethylthio)- 6-(1-hydroxyethyl)-penem-3-carboxylat.

Forbindelse 5:Natrium (5R,6S,8R)-2-(2-hydroxyethylthio)- 6-(1-hydroxyethyl)-penem-3-carboxylat.

30 Testmetode: Bestemmelse af middelværdi af inhiberende koncentration (MIC) i Mueller-Hinton agar i yg/ml.

DK 160877 B

16

Testbakterie Testforbindelser 12 3*5

Enterobacter

Wert PI 1 0,5 1 ^ Rahal W,tson >6* 0,5 1 4 0,5 E. Coll ATCC 10536 1 0,5 1 0,5 0,5 ATCC 11775 2 0,25 1 0,5 0,5 JR 66 0,5 0,25 0,5 0,25 0,125

Okla Jordan 1 >64 0,5 1 10 Rosenthal Bold 1 8 0,25 1 0,5 0,25

Winnipeg 4195 >64 1 2 1,0 0,5

St.M. 589 8 0,5 1 0,5 0,25

Klebsiella

Georgetown 3020 4 0,5 2 0,5 1,0 15 76021704 1 0,5 1 0,5 0,25

Brooke Meads >64 2 1 0,5 0,25

Adler 17 32 0,5 1 0,5 0,25

Okla Brown 64 0,25 0,5 0,5 0,25

Georgetown 3694 32 0,25 1 0,5 0,25

Ptovidencia + Proteus 20 Hewitt 104 8 12-- 75082824 16 2 4 2.2 164 16 0,5 2 - 1,0 76012805 > 64 1 4

Rahal Garro > 64 2 4

Salmonella

Mayo Clinic GRC2

Newport 0,5 0,25 0,5 0,25 0,125 76061701 > 64 0,5 1 0,5 0,5

Serratia

Rahal Dalton > 64 4 4 30 Rosenthal 3 > 64 4 4 16 4 B. subtilis ATCC 6633 1 0,03 - 0,0625 0,0625 76111901 16 0,03 0,125

Staphylococcus 35 AF1 2 0,125 0,25 2.0 0,25

Giorgio 4 0,06 0,125 - 209 P 1 0,06 0,125 1,0 0,125 1613 1 0,125 0,125 2,0 0,25 76070106 2 0,25 0,5 8,0 0,5 17

DK 160877B

Den administrerede dosis af de omhandlede antibak-terielt aktive forbindelser er afhængig af alderen og vægten af den person eller den dyreart, der behandles, administreringsmåden og typen og alvorligheden af den 5 bakterieinfektion, der forebygges eller nedkæmpes. Den pr. dag administrerede dosis vil typisk ligge i området fra 5 til 200 mg/kg, idet 20 til 80 mg/kg foretrækkes.

Til oral administrering kan de antibakterielt aktive forbindelser formuleres i form af tabletter, kaps-10 ler, eliksirer eller lignende. De kan ligeledes blandes med dyrefoder. De kan også anvendes topisk i form af salver, både hydrofile og hydrofobe, i form af lotioner, der kan være vandige, ikke-vandige eller af emulsionstypen, eller i form af cremer.

15 De kan også anvendes i flydende form, såsom op løsninger, suspensioner og lignende til otisk og optisk anvendelse, og de kan også administreres parenteralt ved intramuskulær injektion.

De efterfølgende præparationer og eksempler be-20 lyser fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse.

I disse præparationer og eksempler betegner "IWR" kernemagnetiske resonansspektrer, "rotation" betegner optisk rotation for forbindelserne i et passende opløsningsmiddel, "MS" betegner massespektrer, "UV" betegner ultraviolette 25 spektrer, og "IR" betegner infrarøde spektrer. Chromato-grafi udføres på silicagel, med mindre andet er anført.

Præparation A Allyloxyoxalylchlorid.

30 Allylchlorid (11,6 g) sættes dråbevis under omrø ring til en kold (0°C) opløsning af oxalylchlorid (25,4 g) i tør ether (50 ml), idet reaktionsblandingens temperatur under tilsætningen holdes på 10°C til 12°C. Reaktionsblandingen omrøres derefter natten over, hvor-35 efter man fjerner opløsningsmidlet i en rotationsinddamper. Den opnåede remanens destilleres til opnåelse af allyloxyoxalylchlorid som en farveløs væske (16 g), kp. 68-70°C/44 mm.

DK 160877B

18

Præparation B

(3S,4R,5R)-3-(1-Trichlorethoxycarbonyloxy-ethyl)-4-[(etfr-oxy)carbonothioylthio]—azetidin-2-on.

Carbondisulfid (4 ml) sættes dråbevis til en op-5 løsning af ethanol (50 ml) indeholdende 1 N natriumhydroxidopløsning (10 ml), og blandingen omrøres i 10 minutter, hvorefter den dråbevis sættes til en opløsning af (3S,4R,5R)-[1-(2-methoxy-l,2-dioxoethyl)]-3-(l-tri-chlorethoxycarbonyl-oxyethyl)-4-chlorazetidin-2-on (4,1 10 g) i ethanol. Reaktionsblandingen omrøres, indtil TLC-analyse angiver, at der ikke er udgangsforbindelse til stede (ca. 4 timer), hvorefter den fortyndes med ethyl-acetat, og opløsningen vaskes med mættet natriumchlorid, tørres over magnesiumsulfat og inddampes. Den opnåede 15 remanens chromatograferes på silicagel (40 g), idet der elueres med 30% ether-hexan. De ens eluater, som bestemt ved TLC, hældes sammen og inddampes til en remanens, der er den i overskriften anførte forbindelse. IR = 5,65 μ.

NMR: δ 5,5 ppm (lH,d,J=2 Hz) 20 3,4 ppm (lH,q,J=8 og 2 Hz).

Udbytte: 85% af det teoretiske.

Eksempel 1 (Mellemprodukt)

Allyl-(5R,6S,8R)-6-(1-trichlorethoxy-carbonyloxyethyl) -25 2-ethylthio-2-penem-3-carboxylat.

Til en opløsning af (3S,4R,5R)-3-(trichlorethoxy-ethylcarbonyl-oxyethyl)-4-[(ethylthio)-carbonothioylthio] -azetidin-2-on (0,628 g) i methylenchlorid (6 ml) afkølet til 10°C sættes der under omrøring calciumcarbo-30 nat (0,6 g) efterfulgt af allyloxyoxalylchlorid (0,263 g, 1,2 ækv.). En opløsning af diisopropylethylamin (0,32 ml, 1,2 ækv.) i methylenchlorid (1 ml) sættes dertil over et tidsrum på 5 minutter, medens temperaturen holdes i området fra 10 til 15°C. Efter at TLC ikke vi-35 ser nogen udgangsforbindelse (efter f.eks. 15 minutter ved 15°C), overføres blandingen til en skilletragt under anvendelse af ethanolfrit chloroform. Den ene opløsning vaskes 2 gange med is/vand, filtreres til fjernelse af

DK 160877 B

19 overskud af calciumcarbonat, tørres over vandfrit natri-umsulfat og overføres til en 100 ml trehalset kolbe. Opløsningens rumfang indstilles på ca. 50 ml med chloroform og opvarmes til tilbagesvalingstemperaturen under 5 tilsætning af en opløsning af triethylphosphit (0,6 ml, 2 ækv.) i chloroform (20 ml) over et tidsrum på 3 timer. Blandingen tilbagesvales i yderligere 18 timer, inddampes og chromatograferes på 14 g silicagel, idet der elu-eres med 25% ether-hexan. De ens eluater hældes sammen 10 og inddampes til opnåelse af en remanens (420 mg), der omfatter den i overskriften anførte forbindelse (58% udbytte) . Remanensen renses ved krystallisation af ether-hexan til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse i krystallinsk form. Udbytte 330 mg (46% af det 15 teoretiske).

Eksempel 2 (Mellemprodukt)

Allyl-(5R,6S,8R)-6-(trichlorethoxycarbonyloxyethyl)-2-ethoxy-2-penem-3-carboxylat.

20 Allyloxyoxalylchlorid (0,52 g) sættes under omrø ring til en kold opløsning af (3S,4R,5R)-3-(l-trichlor-ethoxycarbonyl-oxyethyl)-4-[(ethoxy)-carbonothioylthio]-azetidin-2-on i methylenchlorid (10 ml) indeholdende calciumcarbonat (1,0 g). En opløsning af di-isopropyl-ethyl-25 amin (0,62 ml) i methylenchlorid (2 ml) sættes til denne reaktionsopløsning med en sådan hastighed, at reaktionstemperaturen holdes mellem 10 og 15°C. Efter 15 minutters forløb vaskes opløsningen 2 gange med kold mættet natriumchloridopløsning, filtreres, tørres, overføres 30 til en trehalset kolbe og fortyndes til 45 ml med methylenchlorid. Opløsningen tilbagesvales under tilsætning af en opløsning af triethylphosphit (1,3 ml) i methylenchlorid (15 ml) over et tidsrum på 3,6 timer. Reaktionsblandingen tilbagesvales i yderligere 17 timer, afkøles og inddampes. Den opnåede tilbageblevne olie chromatogra-35 feres på 30 g silicagel og elueres med 35% ether-hexan til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse.

DK 160877 B

20

Produktet renses ved krystallisation af ether-hexan til opnåelse af farveløse nåle (300 mg).

Smp.: 84-85°C. Ea]D + 167° (chloroform) IR; 5,60, 5,75 y.

5 NMR (CDC13) δ 5,55 ppm (d, IH, J 1,5 Hz), 4,22 ppm (q,2H).

MS; M+ 474.

Præparation C

(3S, 4R, 5R) -3- (Trichlorethoxycarbonyloxy-ethyl) -4- [ (meth-10 oxy) -carbonothioylthio] -azetidin-2-on.

Ved at gå frem som under præparation B, men anvende methanol i stedet for ethanol, opnås der den i overskriften anførte forbindelse som farveløse krystaller. Smp. 97-99°C, IR 5,65 y.

15 NMR: δ 4,2 ppm (3H,S) 5,47 ppm (lH,d,J=2,5 Hz) 3,4 ppm (lH,q,J=7; 2,5 Hz).

Udbytte; 83% af det teoretiske.

20 Præparation D

(3S, 4R, 5R) -3- (Trichlorethoxycarbonyloxy-ethyl) -4- [ (prop-oxy) -carbonothioylthio] -azetidin-2-on.

Ved at gå frem som under præparation B, men anvende propylalkohol i stedet for ethanol, opnås der den 25 i overskriften anførte forbindelse som en farveløs olie, IR 5,65 y.

NMR: δ 5,45 ppm (lH,d,J=2,0 Hz) 3,4 ppm (lH,q,J=8; 2,0 Hz) 4,57 ppm (2H,t,J=6 Hz).

30 Udbytte: 82% af det teoretiske.

Præparation E

(3S,4R,5R)-3-(Trichlorethoxycarbonyloxy-ethyl)-4-[(but-oxy) -carbonothioylthio] -azetidin-2-on.

35 Ved at gå frem som under præparation B, men an vende butylalkohol i stedet for ethanol, opnås der den i overskriften anførte forbindelse som en farveløs olie, IR 5,65 y.

DK 160877 B

21 NMR: 5,47 ppm (lH,d,J=2,5 Hz) 3,4 ppm (lH,q,J=8; 2,5 Hz) 4,61 ppm (2H,t,J -1 Hz).

Udbytte: 81% af det teoretiske.

5

Præparation P

(3S,4R,5R)-3-(Trichlorethoxycarbonyloxyethyl)-4-[(2'-allyloxycarbonylamino)ethoxy-carbonothioylthio]-azetidin- 2-on.

10 Ved at gå frem som under præparation B, men an vende N-allyloxycarbonylaminoethanol i stedet for ethanol, opnås der den i overskriften anførte forbindelse.

NMR: 5,44 ppm (lH,d,J=2,4 Hz) 3,38 ppm (lH,q,J=6,6; 2,4 Hz) 15 [a]Q + 114° (chloroform).

Udbytte: 82% af det teoretiske.

Præparation G

(3S,4R,5R,2'S) -3-(1-Trichlorethoxycarbonyloxyethyl)-4-20 [ (2'-allyloxycarbonylamino-2' -carboxyethyl-thioallyl- ester) -carbonothioylthio]-azetidin-2-on.

En opløsning af bis-(N-allyloxycarbonyl)-D-cyste-in-bis-allylester (14,76 g) i methanol (150 ml) indeholdende zinkstøv (15 g) afkøles til 0°C og omrøres under 25 tilsætning af koncentreret saltsyre (10,4 ml) med en sådan hastighed, at temperaturen holdes på 0-6°C. Efter tilsætningen af syren omrøres blandingen i yderligere 2 minutter, hældes ud i is/vand (200 ml) og filtreres, og det organiske lag af filtratet vaskes med vand, tørres 30 over natriumsulfat og inddampes til tørhed. Den opnåede olie opløses i ethanol (140 ml) og behandles med 1 N natriumhydroxidopløsning (60,5 ml) efterfulgt af carbondi-sulfid (30 ml) , og den opnåede opløsning sættes dråbevis under omrøring til en opløsning af (3S,4R,5R)-3-(tri-35 chlorethoxycarbonyloxyethyl) -4-acetoxyazetidinon (19 g) i ethanol (100 ml) ved -15°C, således at reaktionsblandingens temperatur ved afslutningen af tilsætningen er ca. 1°C. Efter ca. 45 minutters forløb ved denne tempe- 22

DK 160877B

ratur og når tyndtlagschromatografi angiver udgangsmaterialets forsvinden, oparbejdes reaktionsblandingen ved udhældning i is/vand (200 ml) , ekstraktion med ethylace-tat (400 ml) , vaskning af ekstrakten med saltopløsning, 5 tørring og inddampning. Den opnåede viskose gule væske chromatograferes på silicagel (500 g). Ved eluering med 20% ethylacetat/hexan opnås den i overskriften anførte forbindelse som et orangegult glas.

IR 5,6, 5,7, 5,8 y, 10 [<x]D + 139° (chloroform) NMR (CDC13) 1,5 (d,3H,J=6 Hz) 3,42 (dd,lH, J=2; 7 Hz) 5,65 (d,lH,J=2 Hz).

Udbytte: 65% af det teoretiske.

15

Eksempel 3 (Mellemprodukt)

Allyl- (5R, 6S, 8R) -6 - (1-trichlorethoxycarbonyloxyethyl) - 2-methoxy-2-penem-3-carboxy lat.

Den under præparation C fremstillede forbindelse 20 underkastes den i eksempel 2 beskrevne N-acylering og cycliseringsproces til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse som farveløse krystaller, IR 5,56 y.

NMR: δ 5,62 ppm (lH,d,J=l,8 Hz) 3.9 ppm (lH,q,J=7? 1,8 Hz) 25 4,02 ppm (3H,S) MS: M- 459, 461.

Udbytte: 45% af det teoretiske.

Eksempel 4 (Mellemprodukt) 30 Allyl-(5R,8R) -6- (1-trichlorethoxycarbonyloxyethyl) -2-propoxy- 2 -penem- 3 -c ar boxy 1 a t.

Den under præparation D fremstillede forbindelse underkastes den i eksempel 2 beskrevne N-acylerings- og cycliseringsproces til opnåelse af den i overskriften 35 anførte forbindelse som farveløse krystaller, smp. 81-82°C, IR 5,58 y.

NMR: δ 5,58 ppm (lH,d,J=l,8 Hz) 3.9 ppm (lH,q,J=8; 1,8 Hz) 4,1 ppm (2H,t,J=7 Hz)

DK 160877 B

23 MS: M- 487, 489.

Udbytte: 45% af det teoretiske.

Eksempel 5 (Mellemprodukt) 5 Allyl- (5R,6S,8R) -6- (1-trichlorethoxycarbonyloxyethyl) -2-butoxy-2-penem-3-carboxylat.

Den under præparation E fremstillede forbindelse underkastes den i eksempel 2 beskrevne N-acylerings- og cycliseringsproces til opnåelse af den i overskriften 10 anførte' forbindelse som en farveløs olie, IR 5,58 μ.

NMR: 5,6 ppm (lH,d,J=l,8 Hz) 3,9 ppm (lH,q,J=8; 1,8 Hz) 4,2 ppm (2H,t,J=7 Hz) MS: M - 501, 503.

15 Udbytte: 45% af det teoretiske.

Eksempel 6 (Mellemprodukt)

Ally- (5R, 6S,8R) -6- (1-trichlorethoxycarbonyloxyethyl) -2-(21 -allyloxycarbonylamino-ethoxy) -2-penem-3-carboxylat.

20 Den under præparation F fremstillede forbindelse underkastes den i eksempel 2 beskrevne N-acylerings- og cycliseringsproces til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse som et krystallinsk fast stof, smp. 71-76°C.

25 [a]^ + 59° (chloroform) NMR: 5,59 ppm (lH,d,J=l,8 Hz) 3,88 ppm (lH,q,J=8,8; 1,8 Hz) MS: M- 572, 574

Udbytte: 40% af det teoretiske.

30

Eksempel 7 (Mellemprodukt)

Allyl- (5R,6S,8R,2 ' S) -2- ([2 1 -allyloxycarbonyl-amino-2' -carbonyloxyethyl] thioallylester) -6- (1-trichlorethoxycar-bonyloxyethyl) -2-penem-3-carboxylat.

35 En opløsning af (3S,4R,5R,2's)-3-(l-trichloretho- xycarbonyloxyethyl) -4 - [ (2 ' -allyloxycarbonylamino-2'-carboxyethyl-thioallylester) carbonothioylthio] -azetidin- 2-on (24,7 g) i methylenchlorid (200 ml) indeholdende 24

DK 160877B

calciumcarbonat (25 g) afkøles til 5°C og behandles med en opløsning af allyloxyaxalylchlorid (7,29 g) i methylen-chlorid (30 ml). Reaktionsblandingen omrøres godt under tilsætning af diisopropylethylamin (8,42 ml) i methylen-5 chlorid (30 ml) med en sådan hastighed, at reaktionstem-peraturen holdes under 7°C. Blandingen omrøres i yderligere 10 minutter og oparbejdes derefter ved tilsætning af is/vand (100 ml) under kraftig omrøring. Blandingen filtreres, og det organiske lag af filtratet vaskes med 10 is/vand (100 ml), tørres i et isbad med natriumsulfat og fortyndes til 1500 ml med ethanolfrit chloroform i en 2 liters trehalset kolbe. Den fortyndede opløsning tilbagesvales under tilsætning af en opløsning af triethylphos-phit (16,7 ml) i chloroform (50 ml) i løbet af 3 1/2 ti-15 me under anvendelse af en sprøjtepumpe. Reaktionsblandingen tilbagesvales under nitrogen natten over og inddampes derefter under formindsket tryk. Den tilbageblevne olie chromatograferes på silicagel (250 g). Ved eluering med 20% ETOAC/hexan opnås den i overskriften anførte forbin-20 delse (21,2 g) som en farveløs olie.

[a]D + 111,6° (chloroform) IR (nujol) 5,58, 5,70, 5,80 y.

NMR (CdC13): 1,55 (d,3H,J=7 Hz) 3,45 (d,2H,J=5 Hz) 25 3,90 (dd,lH,J=2 Hz) 5,65 (d,lH,J=2 Hz)

Eksempel 8 (Slutprodukt)

Natrium- (5R,6S,8R) -6- (1-hydroxyethyl) -2-ethoxy-2-penem-30 3-carboxylat.

En opløsning af allyl-(5R,6S,8R)-6-(l-trichlor-ethoxycarbonyloxyethyl) -2-ethoxy-2-penem-3-carboxylat (0,2 g) i tetrahydrofuran (2 ml) indeholdende vand (0,5 ml) og eddikesyre (1 ml) afkøles til -20°C og omrøres i 35 2 1/2 time med zinkstøv (0,2 g). Opløsningen filtreres derpå, og filtratet fortyndes med ethylacetat, vaskes med saltopløsning og 10% natriumhydrogencarbonat, tørres og inddampes til opnåelse af allyl-(5R,6S,8R)-6-(l-hy-

DK 160877 B

25 droxyethyl)-2-ethoxy-2-penem-3-carboxylat som en olie (132 mg), der opløses i methylenchlorid (1 ml). Opløsningen omrøres derefter med tetrakis(triphenylphosphin)-palladium (30 mg), triphenylphosphin (30 mg) og 0,5 M 5 2-ethylhexansyre-natriumsalt (0,8 ml). Efter 20 minutters forløb ekstraheres reaktionsblandingen med koldt vand (5 x 2 ml), og den vandige ekstrakt lyofiliseres til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse.

NMR: δ (D2) 5,6 ppm (lH,d,J=l,8 Hz) 10 4,22 ppm (2H,q,J=6 Hz) 3,85 ppm (lH,q,J=6; 1,8 Hz)

Udbytte: 90% af det teoretiske.

Eksempel 9 (Slutprodukt) 15 a. 3S,4R,5R-3-(1-Trichlorethoxycarbonyloxyethyl)-4-(2-allyloxycarbonylethylenthiocarbothioylthio)-azetidin-2-on.

6,5 g methyl-(5R,6S,8R)-6-(1-trichlorethoxycarbo-nyloxyethyl)-penicillanat opløses i 100 ml methylenchlo-20 rid og afkøles til -20°C. Der tilsættes en opløsning af carbontetrachlorid indeholdende 34,5 mmol chlor, og man lader reaktionen forløbe i 30 minutter. Reaktions blandingen inddampes. Der tilsættes 25 ml carbontetrachlorid, og opløsningen geninddampes til en remanens. Remanensen 25 opløses i 200 ml methylenchlorid, og opløsningen ozoneres ved -70°C, indtil der er opnået en dybblå farve. Der tilsættes 10 ml dimethylsulfid, og reaktionsblandingen omrøres i 30 minutter, hvorefter den inddampes til en remanens.

30 Remanensen opløses i 100 ml methylenchlorid, og der tilsættes ved -20°C en thiocarbonatopløsning, der fremstilles som følger: 60 mmol (8,8 g) allyl-3-mercap- topropionat opløses i 100 ml ethanol, og der afkøles til -20°C. Der tilsættes 45 ml 1,0 molær vandig kalium-35 hydroxidopløsning efterfulgt af 10 ml carbondisulfid. Reaktionsblandingen omrøres i 30 minutter ved -20°C. Me-thylenchloridopløsningen af det ovenfor fremstillede chlorlactam tilsættes. Reaktionsblandingen omrøres ved 26

DK 160877B

-20°C i 45 minutter, hvorefter der tilsættes en tofaset opløsningsmiddelblanding af vand og ethylether. Ether-laget vaskes med en opløsning af natriumhydrogencarbonat, hvorefter etheropløsningen tørres over magnesiumsulfat.

5 Etheropløsningen inddampes til en remanens, og der chro-matograferes på silicagel under anvendelse af en stigende koncentration af ether i methylenchlorid som elue-ringsmiddel. Ens fraktioner hældes sammen og inddampes til opnåelse af en tyk gul olie (3,8 g) . PMR (CDClg) 10 1,53(d,J=7Hz,2H), 2,82 (m,2H), 3,46(dd,J=2,5 og 8Hz,lH), -3,65(m,2H), 4,64(d,J=6Hz,2H) , 4,80(s,2H), 5,1-5,5(m,3H), 5,68(d,J=2,5 Hz,IH), 5,6-6,2(m,lH) og 6,8(br,s,IH udskiftning med D2O).

15 b. Allyl-5R,6S,8R-2-(2-allyloxycarbonylethylenthio)-6-(1-trichlorethoxycarbonyloxyethyl) -penem-3 -carboxylat.

35,5 -g af produktet fra trin A opløses i 400 ml methylenchlorid, og der afkøles til 0-5°C og tilsættes . 12,4 g allyloxyoxalylchlorid. 10,8 g diisopropylethyl-20 amin tilsættes dråbevis under omrøring. Der omrøres i 10-20 minutter ved 0-5°C, hvorefter der behandles med iskold 1 N svovlsyre. Lagene adskilles, og det organiske lag vaskes med vand og tørres over magnesiumsulfat. Der filtreres, og filtratet fortyndes med 350 ml ethanolfrit 25 chloroform. Den opnåede opløsning tilbagesvales under nitrogen. 23 g triethylphosphit tilsættes over et tidsrum på 3 timer, blandingen inddampes til en remanens, og der chromatograferes på silicagel under anvendelse af di-chlomethan^hexan, og derpå dichlormethan og til sidst 2% ethylether i dichlorraethan son'elueringsiniddel. Ens fraktioner hældes sammen og inddampes til opnåelse af produktet ifølge det foreliggende trin som en gul olie. Udbytte 16,0 g. IR max (CH2C12) 1795, 1755, 1730, 1695 cm”"1. PMR (CDCI3) 1,37 (d,J=7Hz,3H), 2,6(m,2H), 3,l(m,2H), 4,77(dd,J=8 og 2Hz, 35 IH), 4,4-4,7(m,4H), 4,64(s,2H), 4,9-5,4(d,J=2Hz,lH), 5,54(d,J=2H, IH) og 5,6-6,1 (m,2H).

DK 160877 B

27 C. Allyl-5R,6S,8R-6- (1-hydroxyethyl) -2-(allyloxycarbo-nylethylenthio) -2-penem-3-carboxylat.

1,6 g af det ved fremgangsmåden ifølge trin A og B frent-stillede produkt opløses i 15 ml tetrahydrofuran, 1,5 ml 5 vand og 1,5 ml eddikesyre ved 0-5°C under omrøring. Der tilsættes 2,0 g zinkstøv og omrøres, indtil tyndtlags-chromatografi angiver et spor af udgangsmateriale. Reaktionsblandingen filtreres, det faste stof vaskes med ethylacetat, de organiske opløsninger hældes sammen, og 10 der vaskes efter hinanden med 10% vandig vinsyre, vand og med vandig natriumhydrogencarbonatopløsning. Opløsningsmiddelfasen tørres over magnesiumsulfat og koncentreres til en remanens. Remanensen krystalliseres af ether-hexan til opnåelse af produktet ifølge det fore-15 liggende trin som fine hvide nåle, smp. 95-96°C. IR

(CH2C12) max 3500, 1790, 1725 og 1695 cm"1. PMR (CDC13) ; 1,35 (d,J=7Hz,3H) , 1,86 (d, J=:7Hz,lH, udskiftning med D20) , 2,75 (m,2H) , 3,20(m,2H), 3,73(dd,J=8 og 2 Hz, IH) , 4,24 (m,IH), 4,55-4,8(m,4H) , 5,1-5,6(m,4H), 5,67(d,J=2Hz, IH) 20 og 5,7-6,15 (m,2H) . Udbytte: ca. 95% af det teoretiske.

D. Dinatrium- (5R, 6S,8R) -6- (l-hydroxyethyl-2- (2-carboxy-ethylenthio) -penem-3-carboxylat.

6,4 g af det ifølge trin A-C fremstillede produkt 25 opløses i 190 ml methylenchlorid, og der tilsættes 5,32 g natrium-2-ethylhexanoat i 190 ml ethylacetat. Der tilsættes en blanding af 0,46 g triphenylphosphin og 0,46 g tetrakis (triphenylphosphin) palladium. Der omrøres i 1,5 timer og centrifugeres. Bundfaldet vaskes med ethylace-30 tat og tørres i højvakuum til opnåelse af et lysebrunt pulver. Udbytte 6,2 g. [α]^g (H20) = + 153,7°. PMR(D20) : 1,36(d,J=7Hz,2H) , 2,6(m,2H), 3,2(m,2H), 3,93(dd,J=8 og 2Hz, IH), 4,28(m,IH) og 5,71 (d,J=2Hz,lH).

35 Eksempel 10 (Slutprodukt) A. (3S,4R,5R) -3- (1-Trichlorethoxycarbonyloxyethyl) -1-4- (2-hydroxyethylthiocarbothioyl) -azetidin-2-on.

10 g methyl-(5R,6S ,8R)-2-(2,2-dimethyl)-6-(1-tri- 28

DK 160877B

chlorethoxycarbonyloxyethyl)penam-3-carboxylat opløses i 150 ml methylenchlorid ved 0-5°C, og der tilsættes 7,36 ml sulfurylchlorid og omrøres i 1 time ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen hældes ud i et overskud af van-5 digt natriumhydrogencarbonat linder omrøring. De to væskefaser adskilles, og den organiske fase tørres og inddampes til en remanens. Man opløser remanensen i 100 ml methylenchlorid og behandler med ozon ved -78°C, indtil den blå farve vedvarer, derefter sætter man 5 ml dimethyΙ-ΙΟ sulfid til reaktionsblandingen ved stuetemperatur i løbet af 1 time, og derefter sætter man det til en omrørt iskold trithiocarbonatopløsning, der er fremstillet ud fra 10 ml β-mercaptothioethanol og 6 g kaliumhydroxid i 200 ml 50% vandig ethanol afkølet til 0°C og behandlet 15 med 28 ml carbondisulfid. Man lader blandingen af chlor-lactamen og trithiocarbonatopløsningen reagere ved 0°C i 45 minutter under omrøring og fortynder derefter med vand.

Man ekstraherer reaktionsblandingen med methylenchlorid, vasker med vandigt natriumhydrogencarbonat, tørrer over 20 magnesiumsulfat og inddamper til en remanens. Man chro-matograferer remanensen på silicagel, idet man eluerer med en stigende koncentration af ethylether i methylenchlorid til 30%. Man sammenhælder ens fraktioner, der indeholder den i overskriften anførte forbindelse som 25 bestemt ved tyndtlagschromatografi, og inddamper til opnåelse af produktet ifølge det foreliggende trin som en lysegul olie. Udbytte: 8,1 g. IR (CI^C^) 3550, 1770, 1750 cm"1.

B. (3S,4R*5R)-3-(1-Trichlorethoxycarbonyloxyethyl)-4-30 [2-(t-butyldimethylsilyloxy)-ethylthiocarbothiolthio]-azetidin-2-on.

7,07 g af produktet fra trin A opløses i en blanding af 50 ml methylenchlorid og 1,43 ml pyridin, 2,64 g t-butylchlordimethylsilan og 0,1 g imidazol. Opløsningen 35 omrøres ved stuetemperatur i 2 dage, vaskes med vand og inddampes til en remanens. Remanensen chromatograferes på silicagel under anvendelse af dichlormethan:hexan og derefter methylenchlorid med stigende koncentrationer af 29

DK 160877B

ethylether. Man sammenhælder ens fraktioner, der indeholder den i overskriften anførte forbindelse som bestent ved tyndtlagschroma tograf i, og inddamper til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse som en lysegul 5 olie. Udbytte: 8,4 g. IR 3400, 1770 og 1750 cm C. Allyl-(5R,6S,8R)-2-[21 -(t-butylmethylsilyloxy)ethyl-thio] -6-(l-trichlorethoxycarbonyloxy) -penem-3-carboxylat.

8,4 g af produktet fra trin B opløses i 50 ml methylenchlorid indeholdende 2,69 g allyloxyoxalylchlo-10 rid, og der omrøres ved 0-5°C under dråbevis tilsætning af 2,32 g diisopropylethylamin i 15 ml methylenchlorid. Reaktionsblandingen omrøres i yderligere 1/2 time ved 0-5°C og vaskes med vand, med fortyndet saltsyre og med fortyndet vandig natriumhydrogencarbona topløsning. Den 15 organiske opløsningsmiddelfase tørres over magnesiumsulfat, filtreres og inddampes til en remanens. Remanensen opløses i 100 ml ethanolfrit chloroform, og der tilsættes 1,0 g calciumcarbonat under tilsætningen af 5 g triethyl-phosphit over et tidsrum på 3 timer. Opløsningen tilba-20 gesvales i yderligere 18 timer, afkøles og chromatogra-feres på silicagel, idet der elueres med methylenchlorid: hexan, methylenchlorid og til sidst med 1% ethylether i methylenchlorid. Man sammenhælder ens fraktioner, der indeholder den i overskriften anførte forbindelse som 25 bestemt ved tyndtlagschroma tograf i, til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse som en gullig olie.

Ή NMR (CDC13) : 0,10 (s,6), 0,92(s,9), 1,54 (d,3,J=7), 3,07( ,2), 3,84(m,3), 4,76(m,2), 4,79(s,2), 5,1-5,6(m,3), 5,64(d,l,J»2,5) og 5,7-6,2 (m,l) . Udbytte: 50% af det 30 teoretiske.

D. Allyl- (5R, 6S,8R) -2-(2-hychDxyethylthio) -6- (1-trichlor-ethoxy-carbonyloxy) -penem-3-carboxylat.

4,46 g af produktet fra trin C opløses i en blan-35 ding af 32 ml tetrahydrofuran, 4 ml vand og 4 ml eddikesyre. Opløsningen omrøres i 18 timer ved stuetemperatur med 2,4 g tetra-n-butylammoniumfluorid. Reaktionsblandingen hældes i et tofaset opløsningsmiddelsystem bestå- 30

DK 160877B

ende af methylenchlorid og vand under omrøring. Den organiske fase vaskes med vandigt natriumhydrogencarbonat.

Den organiske fase tørres over magnesiumsulfat, filtreres og inddampes til en remanens. Remanensen chromato-5 graferes på silicagel under anvendelse af ethylether; methylenchlorid som elueringsmiddel. Man sammenhælder ens fraktioner, der indeholder den i overskriften anførte forbindelse som bestemt ved tyndtlagschromatografi, og inddamper til opnåelse af forbindelsen ifølge det fo-10 religgende eksempel som en gullig olie. Udbytte: 2,9 g.

Ή NMR (CDClg):1,49(d,3,J=7),2,17]m,l,udskiftning med D20, 3,12 (m,Z) , 3,7-4,0 (m,3) ,4,72 (m,2) , 4,76(s,2), 5,1-5,6(m,3), 5,67(d,2,J=2,5) og 5,7-6,2(m,l).

E. Allyl-(5R,6S,8r)-2-(2-hydroxyethylthio)-6-(1-hydroxy-ethyl)-penem-3-carboxylat.

15 1,4 g af produktet fra trin D opløses i en blan ding bestående af 1,5 ml eddikesyre, 1,5 ml vand og 15 ml tetrahydrofuran. Der tilsættes 1,25 g zinkstøv, og blandingen omrøres ved 0-5°C. Reaktionen følges ved tyndtlagschromatografi, indtil alt udgangsmaterialet er i det 20 væsentlige omdannet (ca. 1 time). Man filtrerer og vasker det faste stof med ethylacetat og filtratet med mættet natriumhydrogencarbonatopløsning. Man tørrer filtratet over magnesiumsulfat, filtrerer og indamper filtratet til en remanens. Remanensen krystalliseres af ethylether: 25 methylenchlorid til opnåelse af forbindelsen ifølge det foreliggende trin som hvide nåle. Udbytte: 0,5 g, smp. 83-85°C.

Ή NMR (CDCl^): 1,37(d,e,J=7), 2,5-2,7(n,Z, udskiftning med D20), 3,14 (m, 2) , 3,73 (dd,l,J=8,25) , 3,84 (g,J«7), 4,23 30 (m,l), 4,76(m,2), 5,2-5,6(m,2), 5,67(d,l,J=2,5) og 5,8- 6,25(m,l).

F. Natrium-(5R,6S,8R)-2-(2-hydroxyethylthio)-6-(1-hydro-xyethyl)-penem-3-carboxylat.

200 mg af produktet fra trin E opløses i 4 ml 35 methylenchlorid, og 0,105 g natrium-2-ethylhexanoat opløses i 2 ml ethylacetat, og de to opløsninger blandes.

31

DK 160877B

Til den opnåede opløsning sættes 14 mg triphenylphosphat og 14 m? tetrakis(triphenylphosphin)palladium, og blandingen omrøres ved stuetemperatur under nitrogen i 1 time. Reaktionsblandingen fortyndes med 20 ml ethylacetat og 5 ekstraheres med vand (3 x 10 ml). Man passerer en nitrogenstrøm gennem den vandige ekstrakt til fjernelse af tilbageværende organiske opløsningsmidler, filtrerer og lyofiliserer det vandige lag til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse som et lysebrunt pulver.

10 Udbytte: 190 mg.

Ή NMR (D20): 1,24(d,3,J=7), 3,0(m,2), 3,77(t,2,J=7), 3,63(dd,l,J=6,2), 4,15(m,l) og 5,60(d,l,J=2).

Præparation H

15 (3S,4R,5R)-(2-Methoxy-l,2-dioxoethyl)-3-(1-trichloreth-oxycarbonyloxyethyl)-4-chlor-azetidin-2-on. a) En opløsning af methyl-(5R,6S,8R)-6-(1-trichlor-ethoxycarbonyloxyethyl) -penicillanat (5,0 g) i CH2C12 (50 ml) ved 0 til 5°c behandles med sulfurylchlorid (6,2 20 g). Efter omrøring ved 0-5°C i 15 minutter og derefter ved stuetemperatur i 1 time sættes blandingen til en isafkølet natriumhydrogencarbonatopløsning under omrøring.

Efter at C02-udviklingen er ophørt, tørres den organiske fase over magnesiumsulfat og inddampes. Remanensen oplø-25 ses i dichlormethan (50 ml), omrøres og afkøles til -70^3, og der indføres ozon, hvorved reaktionsblandingen skifter til en permanent dybblå farve. Overskuddet af ozon fjernes ved hjælp af en kortvarig strøm af nitrogen, og derefter tilsættes der dimethylsulfid (5 ml), og opløs-30 ningen holdes ved stuetemperatur i 2 timer til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse.

Udbytte: 80% af det teoretiske.

b) (3S,4R,5R) -3- (1-Trichlorethoxycarbonyloxyethy]) -4- (t-butylthio-carbothioylthio)-azetidin-2-on.

35 En thiocarbonatopløsning fremstilles ved 0°C på kendt måde ud fra 1 M vandig KOH-opløsning (43 ml) med t-butylthiol (4 g) i ethanol (70 ml) efterfulgt af CS2 (10 ml). Efter omrøring i 10 minutter ved 0-5°C tilsæt- 32

DK 160877B

tes den under afsnit a) opnåede opløsning, og blandingen omrøres i 45 minutter ved 0°C. Blandingen oparbejdes, og det rå produkt chromatograferes på silica, idet der elu-eres med CH2Cl2-hexan, derefter med CH2C12 og til sidst 5 med 2% ether i CH2C12. Rene fraktioner inddampes til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse som en dybgul olie.

PMR (CDCI3), 6: 1,57 (d,3,J=7), 1,66 (S,9), 3,49 (dd,l,J= 2,5 og 9) 4,86 (s,2), 5,36 (m,l), 5,67 (s,l,J=2,5) og 10 6,9 (br.s,l). Udbytte: 90% af det teoretiske.

Præparation I

(3S, 4R, 5R) -3- (1-Trichlorethoxycarbonyloxyethyl) -4-(isopropyl thiocarbothioylthio) -azetidin-2-on.

15 Man går frem som under præparation H, idet man dog anvender en ækvivalent mængde propan-2-thiol i stedet for t-butylthiol i trin (b) til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse som en gul olie. PMR (CDCI3) «$: 1,48 (d,6,J=7), 1,53 (d,3,J=7), 3,46 (dd,l, 20 J=2,5 og 9), 4,19 (m,l), 4,81 (s,2), 5,27 (m,l), 5,67 (d,l,J=2,5) og 7,0 (br.s,l).

Udbytte: 85% af det teoretiske.

Præparation 12 25 (3S,4R,5R) -3- (1-Trichlorethoxycarbonyloxyethyl) -4-(3- allyloxycarbonyl-l-propylthiocarbothioylthio) -azetidin-2-on.

Man går frem som under præparation H, idet man dog anvender en ækvivalent mængde allyl-3-mercaptobuty-30 rat i stedet for t-butylthiolet i trin (b) til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse som en lysegul olie.

PMR (CDCI3) <5: 1,53 (d,3,J=7) , 2,10 (m,2) , 2,53 (m,2) , 3,47 (m,3), 4,62 (m,2), 4,85 (s,2), 5,2-5,5 (m,3), 5,68 35 (d, 1,J=2,5), 5,8-6,2 (m,l) og 7,1 (br.s.l).

Udbytte: 85% af det teoretiske.

DK 160877 B

33

Eksempel 11 (Slutprodukt) A. i) Allyl-(5R,6S,8R)-2-(t-butylthio)-6-(l-trichloreth-oxycarbonyloxy-ethyl) -penem-3-carboxylat.

22 g (3S,4R,5R) -1-(2-methoxy-l,2-dioxoethyl) -3-5 (1-trichlorethoxycarbonyloxyethyl) -4-chlor-azetidin-2-on omrøres ved 0 til 5°C i CH2C12 (40 ml) med allyloxy-oxalylchlorid (1,3 g). Diisopropylethylamin (1,1 g) sættes dråbevis til reaktionsopløsningen i 5 ml CH2C12/ og blandingen omrøres ved 0 til 5°C i 15 minutter, vaskes 2 10 gange med 50 ml vand, tørres og filtreres.

Den opnåede opløsning fortyndes med ethanolfrit chloroform (50 ml) og opvarmes under tilbagesvaling med calciumcarbonat (0,5 g) under tilsætningen, i løbet af 2 1/2 time, af en opløsning af 2 g triethylphosphit i 10 15 ml CH2C12. Efter tilbagesvaling i 18 timer filtreres og inddampes opløsningen, og remanensen chromatograferes på silicagel, idet der elueres med CH2Cl2-hexan efterfulgt af CH2C12· Rene fraktioner inddampedes til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse som 20 en lysegul olie. IR (CH2C12) v 1790, 1755 og 1690 cm-1. Udbytte: 55% af det teoretiske.

ii) Allyl-(5R,6S,8R)-2-(isopropylthio)-6-(1-trichloreth-oxycarbonyloxyethyl) -penem-3-carboxylat.

25 Man går frem som under afsnit A(i), idet man an vender (3S,4R,5R) -3- (1-trichlorethoxycarbonyloxyethyl) -4-(isopropylthio-carbothioylthio) -azetidin-2-onet fra præparation I til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse, efter chromatografi og krystallisation af 30 ether, som nåle, smp. 60-62°C. [a]2g + 206,1° (CHCl^). Udbytte: 55% af det teoretiske.

Analyse:

Beregnet for C17H21N06C13S2: C 40,37, H 4,18, N 2,77,

Cl 21,03 35 Fundet : C 40,42, H 3,85, N 2,72,

Cl 21,05.

DK 160877 B

34 iii) Ailyl-(5R,6S,8R)-2-(3-allyloxycarbonyl-l-propyl-thio) -6- (1- (trichlorethoxycarbonyloxyethyl) -penem-3-carb-oxylat.

Man går frem som under afsnit A(i) , idet man an-5 vender (3S,4R,5R) -3- (1-trichlorethoxycarbonyloxyethyl) -4- (3-alkyloxycarbonyl-l-propylthiocarbothioylthio) -aze-tidin-2-onet fra præparation Z2 til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse som en lysegul olie.

IR (CH2C12) v 1790, 1760, 1735 og 1695 cm”1.

10 PMR (CDC13) 6: 1,53 (d,3,J=7), 2,05 (m,2), 2,48 (t,2,J= 7), 3,00 (t,2,J=7), 3,89 (dd,l,J=l,5 og 9), 4,5-4,8 (m, 4), 4,76 (s,a), 5,1-5,5 (m,5), 5,65 (d,l,J=2,5) og 5,7- 6,2 (m,2) . udbytte: 50% af det teoretiske.

15 b. (i) Allyl-(5R,6S,8R)-2-(t-butylthio)-6-(1-hydroxyeth-yl)-penem-3-carboxylat.

En blanding af allyl-(5R,6S,8R)-2-(t-butylthio)-6-trichlorethoxycarbonyloxyethyl) -penem-3-carboxylat (0,5 g), zinkstøv (0,5 g), tetrahydrofuran (5 ml), vand (0,5 20 ml) og eddikesyre (0,5 ml) omrøres ved 0-5°C i 1/2 time og derefter ved stuetemperatur, indtil der ikke er udgangsmateriale tilbage, blandingen oparbejdes i ethylace-tat -Η20, vaskes med vandigt natriumhydrogencarbonat, tørres og inddampes, og produktet isoleres på en præpa-25 rativ silicagel-tyndtlagschromatografiplade, idet der elueres med 5% ether-CH2Cl2. Produktet opnås som en lysegul olie. IR (CH2C12) vmax 3450, 1790 og 1690 cm”1.

PMR (CDC13) δ: 1,33 (d,3,J=7), 1,50 (s,9) , 2,75 (br.s,l), 3,73 (dd,l,J=1 og 7,5), 4,22 (m,l), 4,70 (m,2), 5,1-5,5 30 (m,3), 5,58 (d,l,J=l) og 5,8-6,2 (m,l).

Udbytte: 95% af det teoretiske.

(ii) Ailyl-(5R,6S,8R)-2-(isopropylthio)-6-(1-hydroxyethyl) -penem-3-carboxylat.

35 Man går frem som under afsnit B (i), idet man an vender allyl-(5R,6S,8r)-2-(isopropylthio)-6-(1-trichlor-ethoxycarbonyloxyethyl)-penem-3-carboxylat til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse i rå form, der 35

DK 160877B

efter oparbejdning og omkrystallisation af ether-hexan opnås som fibrøse, hvide nåle, smp. 70-71°C. PMR-spek-trum (CDC13): 1,3-1,6 (m,9), 2,9(br.s;l), 3,75(dd,l,J= 8 og 1,5), 4,3 (m,l), 4,75(m,2), 5,2-5,6(m,2), 5,70(d,l, 5 J=l,5) og 5,8-6,2 (m,l). Udbytte: 95% af det teoretiske.

(iii) Allyl-(5R,6S,8R)-2-(3-allyloxycarbonyl-l-propyl-thio) -6- (1-hydroxy et hyl) -penem-3-carboxylat.

Man går frem som under afsnit B (i) , idet man an-10 vender allyl-(5R,6S,8R) -2- (3-allyloxycarbonyl-l-propyl-thio) -6- (1-trichlorethoxycarbonyloxyethyl) -penem-3-carb-oxylat til opnåelse af produktet, efter chromatografisk rensning, som en lysegul olie. PMR (CDCl^) δ: 1,37(d,3, J=7), 2,2(m,2), 2,44(br.s,l), 2,53(t,2,J=7), 3,04(t,2, 15 J=7), 3,75(dd,l,J=l,5 og 8), 4,27 (m,l), 4,55-4,85 (m,4), 5,15-5,6(m,4) , 5,69 (d,l,J*l,5) og 5,8-6,2 (m,2) .

Udbytte: 95% af det teoretiske.

C. (i) Natrium-(5R,6S,8R)-2-(t-butylthio)-6-(1-hydroxy-20 ethyl)-penem-3-carboxylat.

0,07 g allyl-(5R,6S,8R)-2-(t-butylthio)-6-(1-hy-droxyethyl)-penem-3-carboxylat i CI^C^ (2 ml) omrøres under nitrogen med 0,45 ml af en 0,5 M opløsning af na-trium-2-ethylhexanoat i ethylacetat. Pd(PPh3)^ (0,01 g) 25 og PPh3 (0,01 g) sættes til den opnåede opløsning, og blandingen omrøres ved stuetemperatur, indtil der ikke er udgangsmateriale tilbage (0,5 timer). Der tilsættes ether (20 ml), og produktet ekstraheres 2 gange med 10 ml vand. De samlede vandige ekstrakter ekstraheres med 10 30 ml ethylacetat, behandles Ted en nitrogenstrøm til fjernelse af opløste organiske opløsningsmidler og lyofili-seres til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse som et lysegult pulver. IR (nujol) 1785 og 1600 cm Udbytte: 90% af det teoretiske.

35 (ii) Natrium- (5R, 6S, 8R) -2 - (isopropyl thio) -6- (1-hydroxy-ethyl)-penem-3-carboxylat.

Man går frem som under afsnit C (i), idet man an- 36

DK 160877B

vender allyl-(5R,6S,8R)-2-isopropylthio)-6-(1-hydroxyeth-yl)-penem-3-carboxylat til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse efter lyofilisering som et flødefarvet hygroskopisk pulver. IR (nujol) vmax 1780 og 5 1610 cm"1.

Udbytte: 92% af det teoretiske.

(iii) Dinatrium-(5R,6S,8R)-2r(3-carboxy-l-propylthio)- 6-(1-hydroxyethyk)-penem-3-carboxylat.

10 Man går frem som under afsnit C (i), idet man an vender allyl-(5R,6S,8R)-2-(3-allylcarbonyl-l-propylthio)- 6-(l-hydroxyethyl)-penem-3-carboxylat, men anvender den dobbelte mængde af natrium-2-ethylhexanoat. Efter lyofilisering opnås den i overskriften anførte forbindelse 15 som et lysegult pulver. PMR (D20) 6: 1,30 (d,3,J=7), 1,92 (m,2), 2,17 (m,2) , 2,92 (m,2), 3,90 (dd,l,J=l,5 og 8), 4,25 (q,l,J=8) og 5,68 (d,l,J=l,5).

Udbytte: 91% af det teoretiske.

20 Eksempel 12

Kalium-(5R,6S,8R)-2-(benzylthio)-6-(1-hydroxyethyl)-penem-3-carboxylat (r2 = benzyl)

Ved at gå frem som beskrevet i de foregående eksempler opnåedes den i overskriften anførte forbindelse 25 som et næsten hvidt, fast stof.

IR~spektrum (nujol) $ 3450, 1170, 1600 cm"1 1H-NMR spektrum (i DMSO); S 1,12 (d,3H,J=7 Hz), 3,50 (d,2H,J=8 Hz), 3,6-4,3 (m), 5,49 (br,s,lH) og 7,34 (s,5H).

Claims (2)

1. 2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg net ved, at der anvendes 2 molækvivalenter trialkyl-phosphit pr. mol af forbindelsen med formlen II, og at omsætningen udføres ved en temperatur på fra 20°C til DK 160877 B 38 80°Cf fortrinsvis fra 40°C til 60°C.
2. 3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 , kendetegnet ved, at man fremstiller forbindelsen natrium- eller kalium-(5R,6S,8r)-6-(1-hydroxyethyl)-2-ethylthio-pe-5 nem-3-carboxylat eller natrium- eller kalium-(5r,6S,8R)- 6- (1-hydroxyethyl)-2-methylthio-penem-3-carboxylat.