DK159264B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af d-(threo)-1-aryl-2-acylamido-3-fluor-1-propanolforbindelser - Google Patents

Description

DK 159264 B

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte D-(threo)-1-aryl-2-acylamido-3-fluor-1-propanolforbin-delser. Fremgangsmåden er ejendommelig ved det i krav 5 1's kendetegnende del angivne.

Der kendes visse bredspektrede antibiotika, der kan klassificeres som D-(threo)-1-p-substituerede phenyl- 2-dihalogenacetamido-l,3-propandioler, og eksempler på denne klasse af antibiotika er chloramphenicol (D-(threo)-10 l-p-nitrophenyl-2-dichloracetamido-l,3-propandiol), thi-amphenicol (D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-dichlor-acetamido-1,3-propandiol), fluor-thiamphenicol (D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-difluoracetamido-1,3-propandi ol) , tevenel (D~(threo)-l-p-aminosulfonylphenyl-2-di-15 chloracetamido-1,3-propandiol) og fluortevenel, der er difluoracetamido-analogen af tevenel. Desuden kendes der forskellige estere af de ovenstående forbindelser, som eksempler på hvilke estere der kan nævnes palmitatet og hemisuccinatet.

20 Det er kendt, at der i almindelighed kan foreta ges strukturelle ændringer i 2-halogenacetamido-sidekæ-den og i phenyldelen i det grundlæggende chlorampheni-col-molekyle for den ovenstående klasse, uden at der optræder signifikant tab i biologisk virkning. Imidlertid 25 er det hidtil blevet konstateret, at strukturelle ændringer ved den primære hydroxygruppe i stilling 3 i propan-dioldelen, herunder udskiftning med chlor eller brom, ødelægger eller i betydelig grad nedsætter den biologiske virkning. Se f.eks.: 30 F.E. Hahn, Antibiotics, Ed.Gottlieb og Shaw, Springer-Ver lag, New York, (1967), side 308, F.E. Hahn et al., Antibiotics and Chemotherapy, £, nr. 9, 531 (1956), L. Cima og A. Ilecto, Il Farmaco, Ed. Sc. 12, nr. 6, 535 35 (1957), S. Mitsuhasi et al., Jap. J. Microbiol.· 13, nr. 2, 177-180 (1969), og M. Kono et al., Jap. J. Microbiology 15 (3), 219-227 (1971).

DK 159264B

2

Det har nu overraskende vist sig, at 3-hydroxy-gruppen i propandioIdelen i det grundlæggende chloram-phenicol-molekyle kan erstattes med fluor uden at øde-5 lægge den biologiske virkning af molekylet. Faktisk kan der på denne måde opnås hidtil ukendte 3-fluor-derivater, der er bredspektrede antibakterielle midler, som er nyttige til behandling af gram-positive, gram-negative og rickettsielle infektioner, og som også kan være dræben-10 de over for bakterier, der er resistente over for chloramphenicol og beslægtede kendte antibiotika fra denne gruppe.

Ifølge den foreliggende opfindelse fremstilles der hidtil ukendte D-(threo)-1-aryl-2-acylamido-3-fluor-15 1-propanolforbindelser med den almene formel I (se krav 1), i hvilken formel: R betegner en alkylgruppe med 1 eller 2 carbonatomer, hvilken gruppe kan være substitueret med ét eller flere halogenatomer, eller betegner methylsulfo-20 nylmethyl,: X betegner hydrogen, nitro eller en gruppe R^A, hvori A er svovl, sulfinyl eller sulfonyl, og R^ er alkyl med 1-3 carbonatomer, og Z er hydrogen eller en acylgruppe fra en carboxylsyre 25 med op til 16 carbonatomert eller farmaceutisk acceptable salte af de forbindelser med formlen I, hvor Z er en acylgruppe afledet af en dicarboxylsyre eller aminosyre.

^ Gruppen R kan være methyl, ethyl eller methylsulfonylmethyl, eller mere foretrukket en methyl- eller ethylgruppe substitueret med ét eller flere halogenatomer .

Blandt de halogensubstituerede alkylgrupper er de 35 foretrukne grupper halogensubstituerede methylgrupper,

DK 159264 B

3 idet halogensubstituenten fortrinsvis er en fluor- eller chlorsubstituent. Specielt kan der nævnes gruppen (Hal^'CH-, hvor Hal, der kan være ens eller forskellige, betegner et fluor- eller chloratom, dvs. F2CH-, C^CH-5 og FC1CH-. Andre eksempler på halogensubstituerede me-thylgrupper er mono- og trifluormethyl, mono- og tri-chlormethyl, mono- og dibrommethyl og mono- og diiodme-thyl. Som eksempler på blandede halogensubstituerede me-thylgrupper kan der nævnes bromchlormethyl, bromfluorme-10 thyl, dichlorfluormethyl og difluorchlormethyl.

De foretrukne halogensubstituerede ethylgrupper er a- og β-monohalogensubstituerede ethyl- og α,α- og α,β-dihalogensubstituerede ethylgrupper. Også her kan halogensubstituenterne i de polyhalogensubstituerede 15 grupper være ens eller forskellige. Halogensubstituenten er fortrinsvis fluor eller chlor.

Under definitionerne for X i formel I omfatter gruppen R^A -SC^R.], -SOR-j og -SR^hvor R1 har den for formel I anførte betydning og er isopropyl, n-propyl, 20 ethyl eller fortrinsvis methyl.

Selv om den nøjagtige art af X ikke betragtes som væsentlig, for så vidt angår den foreliggende opfindelse, er en foretrukken gruppe forbindelser sådanne, hvori X er -SOCH^ og navnlig -SC^CH^ og nitro.

25 De to asymmetriske centre i forbindelserne med formel I giver anledning til fire stereoisomere, af hvilke de omhandlede forbindelser som vist har den absolutte konfiguration D og den relative konfiguration threo.

Dvs., de omhandlede forbindelser har samme konfigurati-30 on som de kendte antibiotika chloramphenicol, dets di-fluoracetyl-analog thiamphenicol, fluorthiamphenicol og tevenel.

For forbindelserne med formlen I er Z hydrogen eller, som angivet, en acylgruppe fra en carboxylsyre 35 med op til 16 carbonatomer. Acylgrupperne fra carboxyl-syrerne med op til 16 carbonatomer kan være mættede eller umættede, ligekædede eller forgrenede, alifatiske, alicycliske, alicyclisk-alifatiske, aromatiske, aryl-

DK 159264 B

4 alifatiske, alkyl-aromatiske eller heterocycliske og indbefatter sådanne grupper afledet af aminosyrer og hydroxysyrer, og endvidere kan de Være substitueret med ét eller flere halogenatomer eller med alkoxygrupper in-5 deholdende 1-5 carbonatomer.

Typiske acylgrupper er sådanne, der er afledet af carbonhydridcarboxylsyrer, såsom alkansyrer, f.eks. de alifatiske syrer myresyre, eddikesyre, propionsyre, smørsyre, isosmørsyre, valerianesyre, isovalerianesyre, 10 pivalinsyre, hexansyre, t-butyleddikesyre, heptansyre, octansyre, decansyre, undecylsyre, laurinsyre og palmi-tinsyrej substituerede alifatiske syrer, f.eks. phenoxy-eddikesyre, trifluoreddikesyre, β-chlorpropionsyre og pantothensyre ; alicycliske og alicyclisk-alifatiske sy-15 rer, såsom cyclopentylpropionsyre og adamantancarboxyl-syre? aromatiske og substituerede aromatiske syrer, såsom benzoesyre, toluylsyre, p-chlorbenzoesyre, p-fluor-benzoesyre, p-methoxybenzoesyre og 3',5'-dimethylbenzoe-syrej ary1-alifatiske syrer, såsom phenyleddikesyre, 20 phenylpropionsyre og β-benzoylamino-isosmørsyre? umættede syrer, såsom acrylsyre, kanelsyre og sorbinsyre, og fortrinsvis dibasiske syrer, såsom phthalsyre og ravsyre, og dibasiske hydroxysyrer, såsom vinsyre.

De aminosyrer, hvoraf den af Z repræsenterede 25 acylgruppe kan være afledet, er aminosyrer indeholdende op til 12 carbonatomer, f.eks. tryptophan, threonin, serin, hydroxyprolin, prolin, tyrosin, phenylalanin, iso-leucin, valin, alanin, glycin, ornithin, lysin og diami -nosmørsyre.

30 Foretrukne estere med den almene formel I er så danne, der er i stand til at danne farmaceutisk acceptable salte, navnlig vandopløselige farmaceutisk acceptable salte, idet sådanne estere er dem, hvor Z i den almene formel I er en acylgruppe afledet af en dicarbo-35 xylsyre eller en aminosyre.

For sure estere, dvs. hvor Z er en monovalent a-cylgruppe afledet af en dicarboxylsyre, såsom ravsyre, er egnede salte kationiske salte, såsom alkalimetal- el-

DK 159264 B

5 ler jordalkalimetalsalte, f.eks. natrium-, kalium- og calciumsalte og desuden aluminiumsalte. Andre egnede kationiske salte er dem, der dannes med aminer, såsom trialkylaminer, procain, dibenzylamin, N-benzyl-p-phen-5 ethylamin, Ν,Ν'-dibenzylethylendiamin, Ν,Ν'-bis-dehy-droabietylethylendiamih, N- (lavere) alkylpiperidiner (f.eks. N-ethylpiperidin) og N-methyl-glucamin.

Disse kationiske salte kan fremstilles på kendt måde, såsom ved at behandle den sure ester, f.eks. hemi-10 succinatet, i vandig opløsning med en ækvimolær mængde af den nødvendige base, f.eks. natriumhydroxid eller tri-methylamin, og lyofilisere den opnåede opløsning.

Når Z er en acylgruppe afledet af en aminosyre, er egnede salte syreadditionssalte dannet med mineral-15 syrer eller organiske syrer, såsom saltsyre, svovlsyre, phosphorsyre, salpetersyre, hydrogenbromidsyre, eddikesyre, propionsyre, æblesyre, ascorbinsyre, citronsyre eller ravsyre. Fortrinsvis er den aminosyre, af hvilken Z er afledet, en α-aminosyre, såsom glycin. Foretrukne 20 ester-syreadditionssalte er glycinat-hydrochloridsaltet og -sulfatsaltet. Syreadditionssaltene kan fremstilles på kendt måde ved at neutralisere den basiske aminosyre-ester, f.eks. glycinatesteren, med en passende mængde af den nødvendige syre, f.eks. saltsyre, til opnåelse af en 25 pH-slutværdi på ca. 4,5 til 5.

Foretrukne forbindelser blandt de omhandlede indbefatter: D- (threo)-l-p-nitrophenyl-2-dichloracetamido-3-fluor-l-propanol, D- (threo) -l-p-nitrophenyl-2-dif luoracetamido-3-f luor-l-propanol, D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-dichloracetamido-3-fluor-l-propanol, D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-difluoracetamido-3-fluor-l-propanol, D-(threo)-l-p-nitropheny1-2-(R,S-chlorfluoracetamido)-^ 3-fluor-l-propanol, og D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-(R,S-chlorfluor-acetamido)-3-fluor-l-propanol,

DK 159264B

6 samt de tilsvarende 2-dih.alogendeuterio-analoge a£ de ovenstående såsom: D-(threo)-1-p-nitrophenyl-2-dichlordeuterioacetamido-3-fluor-l-propanol, 5 D- (threo)-1-p-nitrophenyl-2-di£luordeuterioacetaMido-3-fluor-l-propanol, D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-dichlordeuterio-acetamido-3-fluor-l-propanol/ og D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-difluordeuterio-10 acetamido-3-fluor-l-propanol.

Andre forbindelser, der specielt kan nævnes, er: D-(threo)-1-p-methylsulfinylphenyl-2-dichloracetamido-3-fluor-l-propanol, og D-(threo)-1-p-methylsulfinylpheny1-2-difluoracetamido-3-15 fluor-l-propanol.

Foretrukne esterderivater af de omhandlede forbindelser er hemisuccinatesterne, navnlig i form af de kationiske natrium- og trimethylaminsalte, og glycinat-esteren, navnlig i form af dens hydrochlorid- eller sul-20 fat-syreadditionssalt. Som specielt foretrukne esterderivater kan der nævnes natrium- og triraethylaminsaltet af D-(threo)-1-p-nitrophenyl-2-dichloracetamido-3-fluor-1-propyl-hemisuccinat og hydrochlorid- og sulfat-syread-ditionssaltet af D~(threo)-l-p-nitrophenyl-2-dichloracet-25 amido-3-fluor-l-propyl-glycinat. De farmaceutisk acceptable salte af de nærmere angivne forbindelser med den almene formel I, såsom de ovennævnte salte, er sædvanlige vis hvide eller næsten hvide faste stoffer, der almindeligvis er opløselige i vand, tungtopløselige i polære 30 opløsningsmidler og uopløselige i ikke-polære opløsningsmidler.

Ifølge den foreliggende opfindelse tilvejebringes der en fremgangsmåde til fremstilling af forbin delserne med den almene formel I.

En første generel fremgangsmåde til fremstilling af forbindelserne med den almene formel I består i,, at man

DK 159264B

7

A) N-acylerer en amin med den almene formel II

F

CH0 OZ

5 . l·2 i H«N.. -C- .. Φ

X

hvori X og z har de for formel I anførte betydninger, idet Z mest foretrukket er hydrogen, med <en fri,,syre eller med et reaktivt derivat af en syre med formlen 15 R.COOH, hvor R har den i krav 1 anførte betydning.

N-Acyleringen kan udføres på i og for sig kendt måde, idet det reaktive derivat af syren R.COOH passende er et syreanhydrid, et syrehalogenid (f.eks. syre-chloridet) eller, navnlig når R er en halogensubstitue-20 ret methyl- eller ethylgruppe, et lavere-alkylesterderi-vat (f.eks. en methylester).

2-(Usubstitueret amino)-3-fluor-l-propanolforbin-delserne med den almene formel II, samt de tilsvarende N-beskyttet-amino-forbindelser, er 25 hidtil ukendte forbindelser, der kan fremstilles ved en fremgangsmåde, som indbefatter det trin, at man erstatter hydroxygruppen med et fluoratom i 3-stiliingen i en tilsvarende 2-N-beskyttet-amino-l,3-propandiolforbindel-se med den almene formel III 30

OH

CHn OZ

Rr^ I 2 i

- C-^*H

R3 1 I III

φ

X

8

DK 159264 B

hvorved den primære 3-hydroxygruppe erstattes med fluor, i hvilken formel III X og Z har de for formel I anførte betydninger, idet Z mest foretrukket er hydrogen, og R2 og R^ hver for sig eller tilsammen betegner amino-beskyttende 5 grupper. Selv om der kan benyttes vilkårlige egnede beskyttelsesgrupper, er foretrukne grupper sådanne, der er afledet af dicarboxylsyrer, såsom phthalsyre og ravsyre, hvor gruppen R^R^N- da repræsenterer henholdsvis phthal-imido og succinimido. be frie aminoforbindelser svarende 10 til forbindelserne med formlen III er kendte forbindelse, der kan beskyttes ved aminofunktionen på konventionel måde.

Fluoreringstrinnet kan udføres ved, at man som fluoreringsmiddel anvender et svovl-trifluorid-sekundær-15 amin-addukt, såsom svovl-trifluorid-morpholin, svovl-tri-fluorid-piperidin eller fortrinsvis et dialkylamin-svovl-trifluorid, såsom diethylamin-svovl-trifluorid.

Fluoreringen kan typisk udføres under anvendelse af ækvimolære mængder af svovl-trifluorid-sekundær-amin-20 adduktet og udgangsmaterialet med den almene formel III i et indifferent opløsningsmiddel og ved en temperatur, der ligger i området fra ca. -10 til +50°C, fortrinsvis fra ca. 0°C og op til stuetemperatur. Den opnåede forbindelse svarende til , 2-N-beskyttet-amino-3-fluor- 1-propa-25 nolforbindelser. kan derefter behandles til fjernelse af disse beskyttelsesgrupper under anvendelse af kendte metoder til opnåelse af den ønskede frie aminoforbindel-se med den almene formel II. Når f.eks. 2-N-beskyttet-aminogruppen er phthalimido, kan den tilsvarende beskyt-30 telsesgruppe passende fjernes ved behandling i ethanol med hydrazinhydrat eller hydroxylamin.

En anden generel fremgangsmåde til fremstilling af forbindelserne med den almene formel I består i, at man B) foretager ringåbning, under samtidig fluorering i propandelens 35 3-stilling, af en oxazolidin med den almene formel IV ( se krav 1), hvori R, X og Z har de for formel I anførte betydninger, idet Z mest foretrukket er hydrogen. Ringåbningen kan passende gennemføres ved at behandle oxazoli- 9

DK 159264B

dinen med hydrogenfluorid i nærværelse af en fluoridion, f.eks. lithiumfluorid, og fortrinsvis i nærværelse af en sur katalysator, navnlig bortrifluorid-dietherat. Reaktionen kan udføres under anvendelse af flydende hydrogen-5 fluorid som reaktionsmedium, idet man træffer passende forsigtighedsforanstaltninger, såsom anvendelse af en teflonforet bombe som reaktionsbeholder.

Oxazolidin-udgangsmaterialerne kan fremstilles på kendt måde. Således kan et udgangsmateriale svarende til 10 det ønskede slutprodukt med den almene formel I, bortset fra at det har en 3-hydroxygruppe i stedet for 3-fluor-substituenten (f.eks. chloramphenicol selv), omdannes til den tilsvarende trifluormethylsulfonat- eller 3-p-toluensulfonatester, som derefter cycliseres ved behand-15 ling med en base. Omdannelsen til den krævede sulfonat-ester kan bekvemt udføres ved anvendelse af trifluorme-thylsulfonylchlorid i pyridin eller p-toluensulfonyl-chlorid i pyridin.

En yderligere fremgangsmåde til fremstilling af 20 forbindelserne med den almene formel I består i, at man C) oxiderer et udgangsmateriale med den almene formel IIA (se krav 1), hvori R har den for formel I anførte betydning, og X' er en tilsvarende gruppe R^S- eller R^SO-, der kan omdannes til henholdsvis den ønskede gruppe 25 R1 SO- eller R-,S02-.

Denne fremgangsmåde kan udføres under anvendelse af oxidationsmidler og -betingelser, der almindeligvis anvendes til omdannelse af en arylthioethergruppe til sulfinyl og til omdannelse af en arylsulfinylgruppe 3^ til sulfonyl. F.eks. til omdannelse af thioether til sulfinyl er der benyttet natriummetaperiodat som oxidationsmiddel .

De ved de ovenstående fremgangsmåder opnåede forbindelser kan underkastes forskellige fakultative slut-35 trin, nemlig esterificering eller hydrolyse ved 2-hydro-xyfunktionen og dannelse af et farmaceutisk acceptabelt salt. Disse sluttrin kan udføres under anvendelse af kendte metoder.

10

DK 159264 B

Forbindelser med den almene formel I, hvori Z er en acylgruppe, fremstilles fortrinsvis ved passende es-terificering af den tilsvarende forbindelse med den almene formel I, hvor 2 er hydrogen, idet den således op-5 nåede ester isoleres som sådan eller, hvis det er hensigtsmæssigt, i form af et farmaceutisk acceptabelt salt.

Fremstillingen af forbindelserne med den almene formel I belyses nærmere ved hjælp af de efterfølgende eksempler.

11

DK 159264 B

Eksempel 1 D- (Threo) -l-p-hitrophenyl-2-dichloracetamido-3-£ luor-1-propanol.

A. D-(Threo)-l-p-nitrophehyl-2-phthalimido-l,3-propan-5 diol.

21/2 g (0,1 mol) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-ami-no-l,3-propandiol, 15 ml triethylamin og 14,8 g (0,1 mol) phthalsyreanhydrid sættes til 600 ml toluen i en kolbe forsynet med en ovenover anbragt omrører og en Dean-10 Stark-vandkollektor. Reaktionsblandingen omrøres ved tilbagesvalingstemperatur i 4 timer og afkøles under omrøring til ca. 50°C, hvorefter der tilsættes 300 ml ethanol. Reaktionsblandingen omrøres ved stuetemperatur i 1 time, hvorefter man lader den forblive ved stuetemperatur 15 i 18 timer. Det dannede hvide bundfald fraskilles ved filtrering, og remanensen vaskes med ethanol og tørres til opnåelse af D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-phthalimido- 1,3-propandiol, udbytte 28,4 g (83% af det teoretiske), smp. 228-229°C (dekomp.). Massespektrum:(M++l) 343.

20 PMR (dmso-dg): 6 6,93-8,33 (aromatiske hydrogenatomer), 5,93 (d, J=4,0 Hz, benzylisk OH), 5,27 (m,H-l), 4,83 (bred t, primær OH), 3,77-4,62 (m, CH^) j 3,5 (m, H-2).

B. D-(Threo)-l-p-nitrophenyl-2-phthalimido-3-fluor-1-propanol.

25 Til en omrørt opløsning af 42,76 g (0,125 mol) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-phthalimido-l,3-propandiol i 800 ml tørt tetrahydrofuran, holdt ved 0°C, sættes dråbevis 17,5 ml diethylaminosvovltrifluorid. Reaktionsblandingen omrøres ved 0°C i 30 minutter, hvorefter man la-30 der den opvarme til stuetemperatur og omrører den ved stuetemperatur i yderligere 5 timer. Tetrahydrofuranet afdampes i vakuum, og den opnåede remanens chromatogra-feres på en silicagelsøjle (2 kg), idet man eluerer med en blanding af chloroform og ethanol (99:1 på volumenba-35 sis). De homogene eluater, der indeholder det ønskede produkt som bestemt ved tyndtlagschromatografi, hældes sammen og inddampes i vakuum til opnåelse af en remanens af D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-phthalimido-3-fluor-1- 12

DK 159264 B

propanol, udbytte 32 g (74,4% af det teoretiske). Man renser yderligere ved omkrystallisation af ethylacetat: petroleumsether, smp. 188-190°C, [a]j?^= -55,6° (1% i di-methylformamid). Massespektrum: (M +1) 345, M 344.

5 PMR (dmso-dg): δ 7,70-8,42 (aromatiskehydrogenatomer), 6,20 (d, J=4,0 (d, 4,0 Hz, benzylisk OH), 5,3 (m, H-l), 4,1-4,95 (m, CH2F, H-2). Analyse:

Beregnet for C^H^N^OgF: 0=59,29%, H=3,80%, N=8,13%, F=5,52%. Fundet: 0=59,17%, H=3,93%, N=7,80%, F=5,40%.

10 C. D-(Threo)-l-p-nitrophenyl-2-amino-3-fluor-l-propanol.

En blanding af 25,8 g (5 mmol) D-(threo)-l-p-ni-trophenyl-2-phthalimido-3-fluor-l-propanol, 4 g (99%, 80 mmol) hydrazinhydrat og 460 ml ethanol opvarmes til tilbagesvalingstemperaturen i 4 timer, hvorefter man lader 15 reaktionsblandingen henstå ved stuetemperatur i 18 timer. Det faste materiale fraskilles ved filtrering og vaskes med en lille smule ethanol. Det samlede filtrat og ethanolvaskevæske koncentreres i vakuum, og den opnåede remanens ekstraheres med 700 ml af en chloroform/ 20 ethanol-blanding (90:10 på volumenbasis). Chloroform/ ethanol-ekstrakterne hældes sammen og inddampes i vakuum til opnåelse af 18,1 g af en remanens omfattende D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-amino-3-fluor-l-propanol, der kan anvendes uden yderligere rensning ved den i det ef-25 terfølgende eksempel beskrevne fremgangsmåde.

Til fremstilling af en analytisk prøve chromato-graferes den ovennævnte remanens på silicagel, idet man eluerer med en blanding af chloroform, methanol og ammoniumhydroxid (30:5:0,1 på volumenbasis). De ens frak-30 tioner, der indeholder det ønskede produkt som bestemt ved tyndtlagschromatografi, hældes sammen, og de samlede eluater inddampes til en remanens bestående af D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-amino-3-fluor-l-propanol, smp. 145-147°C, [aj^= -59° (0,3% i dimethylformamid). Mas-35 sespektrum: (M +1) 215. PMR (dmso-dg): δ 7,42-8,30 (aro-matiske hydrogenatomer), 4,78 (d, J=4,0 Hz, H-l), 3,8- 4,78 (m, 0Η2)/ 2,8-3,3 (m, H-2). Analyse: 13

DK 159264 B

Beregnet for G9H;qN203F: C=50,47%, H=5,18%, N=13,08%.

Fundet: C=50,86%, H«5,53%, N=12,70l.

D. D-(Threo)-l-p-nitrophenyl-2-dichloracetamido-3-fluor- 1-propanol.

5 Til 18,1 g D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-amino-3- fluor-l-propanol, fremstillet som beskrevet i eksempel 1C, sættes 80 ml af en opløsning indeholdende methyldi-chloracetat og 7 ml methanol. Reaktionsblandingen opvarmes til 100°C i 4 timer. Reaktionens fremadskriden kon-10 trolieres ved tyndtlagschromatografi, idet man langsomt tilsætter ca. 1 ml triethylamin, efterhånden som reaktionen skrider frem. Opløsningsmidlerne fjernes i vakuum, og den opnåede remanens vaskes med 200 ml petroleums-ether. Den vaskede remanens opløses i ca. 700 ml chloro-15 form, opløsningen koncentreres i vakuum, og den opnåede remanens chromatograferes på en silicagelsøjle (2 kg), idet der elueres med en blanding af chloroform og ethanol (98:2 på volumenbasis). De ens fraktioner, der indeholder det ønskede produkt som bestemt ved tyndtlagschro-20 matografi, hældes sammen, og de samlede fraktioner inddampes i vakuum til en remanens bestående af D-(threo)- l-p-nitrophenyl-2-dichloracetamido-3-fluor-l-propanol, udbytte 19,9 g (81,5% af det teoretiske). Der renses yderligere ved opløsning af remanensen i 200 ml chloro-25 form (koncentrering til et rumfang på ca. 100 ml) og tilsætning af ca. 300 ml petroleumsether. Det dannede bundfald fraskilles ved filtrering til opnåelse af renset D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-dichloracetamido-3-fluor- 2 g l-propanol, udbytte 16,6 g, smp. 103-104,5°C, [a]n = r> 30 -23,4° (0,3% i dimethylformamid). Massespektrum: M 325.

PMR (dmso-dg): δ 8,62 (d, J=9,0 Hz, NH), 7,54-8,30 (aromatiske hydrogenatomer), 6,5 (s, CHC^) , 6,2 (d, J=4,0 Hz, benzylisk OH), 4,0-5,2 (m, C^F, H-l og H-2) . Analyse: Beregnet for C^-jH^^O^FC^: C=40,64%, Η=3,41%, N= 35 8,62%, Cl=21,81%, F=5,84%. Fundet: C=41,27%, H=3,74%, N«8,51%, Cl=21,06%, F=6,07%.

14

DK 159264 B

Eksempel 2 D-(Threo)-l-p-nitrophenyl-2-difluoracetamido-3-fluor-1-propanol.

Til 0,428 g (2 mmol) D-(threo)-1-p-nitrophenyl-5 2-amino-3-fluor-l-propanol, fremstillet som i eksempel 1C, sættes 5 ml ethanol og 0,5 g ethyldifluoracetat. Reaktionsblandingen opvarmes til tilbagesvalingstemperatur i 2 timer, hvorefter opløsningsmidlet fjernes i vakuum, og den opnåede remanens chromatograferes på sili-10 cagel (50 g), idet der elueres med en blanding af chloroform og ethanol (95:5 på volumenbasis). De ens fraktioner, der indeholder det ønskede produkt som bestemt ved tyndtlagschromatografi, hældes sammen, og de samlede fraktioner inddampes i vakuum til en remanens bestående 15 af D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-difluoracetamido-3-fluor- 1-propanol, udbytte 0,47 g (80% af det teoretiske), smp. 97-98°C. Massespektrum: (M++l) 293. PMR (dmso-dg): δ 8,8 (d, J=8,0 Hz, NH ) , 7,49-8,32 (aromatiske hydrogenatomer), 6,12 (t, J=54,0 Hz, CHF2)/ 6,10 (d, J=4,0 Hz, benzylisk 20 OH), 4,05-5,05 (m, CH2F, H-l og H-2).

Eksempel 3 D-(Threo)-1-p-nitrophenyl-2-trifluoracetamido-3-fluor- 1- propanol.

På lignende måde som beskrevet i eksempel 2 be-25 handles D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-amino-3-fluor-l-pro-panol i ethanol med ethyltrifluoracetat. Det dannede produkt isoleres og renses på lignende måde som beskrevet i eksempel 2 til opnåelse af D-(threo)-1-p-nitrophenyl- 2- trifluoracetamido-3-fluor-l-propanol, smp. 123-124°C.

30 Massespektrum: m/e 152 (HOHC-^ y—N02) ' 158 + \=/ F3CCONH=CHCH2F). PMR (dmso-dg): δ 9,5 (d, J=9,0 Hz, NH), 7,5-8,3 (aromatiske hydrogenatomer), 6,1 (d, J=4,0 Hz, benzylisk OH), 4,1-5,3 (m, -CH2, H-l og H-2).

\

DK 159264B

15

Eksempel 4 D-(Threo)-l-p-nitrophenyl-2-acetamido-3-fluor-l-propanol. Fremgangsmåde Å.

Til 0,428 g (2 mmol) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-5 amino-3-fluor-l-propanol, fremstillet som i eksempel 1C, sættes 5 ml ethanol, hvorefter der under omrøring tilsættes 0,3 g (3 mmol) acetanhydrid. Efter 30 minutter ved stuetemperatur fjernes opløsningsmidlet i vakuum, remanensen chromatograferes, og produktet isoleres på lig-10 nende måde som beskrevet i eksempel 2 til opnåelse af D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-acetamido-3-fluor-l-propanol.

Fremgangsmåde B.

Til 0,428 g (2 mmol) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-amino-3-fluor-l-propanol, fremstillet som i eksempel 1C, 15 sættes 5 ml ethanol og 0,202 g (2 mmol) triethylamin. Opløsningen afkøles til 5°C under omrøring, hvorefter der dråbevis tilsættes 0,157 g (2 mmol) acetylchlorid.

Efter 30 minutter ved stuetemperatur isoleres og renses det dannede produkt på lignende måde som beskrevet under 20 fremgangsmåde A til opnåelse af den i overskriften anførte forbindelse.

Eksempel 5 D-(Threo)-l-p-nitrophenyl-2-(R,S-chlorfluoracetamido)-3-fluor-l-propanol.

25 0,2 ral triethylamin sættes til en opløsning af 1,1 g D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-amino-3-fluor-l-propa-nol (fremstillet som beskrevet i eksempel 1C) og 0,5 ml ethylchlorfluoracetat i 14 ml ethanol. Der opvarmes til tilbagesvalingstemperatur under et beskyttelseslag 30 af nitrogen i 2 timer. Der tilsættes en yderligere mængde på 0,5 ml ethylchlorfluoracetat, og opvarmningen fortsættes, indtil reaktionen er i det væsentlige fuldendt som angivet ved fraværelse af udgangsforbindeIse som bestemt ved tyndtlagschromatografi under anvendelse af 35 en blanding af chloroform og methanol (9:1 på volumen-basis) som opløsningsmiddelsystem. Opløsningsmidlerne afdampes i vakuum, og den opnåede remanens chromatogra- 16

DK 159264 B

feres på silicagel (40 g) under anvendelse af chloroform som elueringsmiddel. De ens fraktioner, der indeholder det ønskede produkt som bestemt ved tyndtlagschromatograr fi, opsamles og inddampes til tørhed i vakuum til opnå-5 else af D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-(R,S-chlorfluoracet-amido)-3-fluor-l-propanol (udbytte 0,97 g). Massespektrum: M+ 309, m/e 157, 156, 153, 152, 139, 137, 136, 122, 106, 105, 102,- 94, 78, 77, 76, 70, 67, 62, 60, 52, 51 og 50.

10 Eksempel 6

Andre D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-acylamido-3-fluor-1-propanoler.

A. 2-Polyhalogenacetamido- og 2-a,a-dihalogenpropionami-doderivater.

15 På lignende måde som beskrevet i eksempel 2 be handles D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-amino-3~fluor-l-pro-panol i methanol eller ethanol med hver af følgende substituerede eddikesyre- eller propionsyreestere.

1) Methyl-trichloracetat, 20 2) Methyl-dibromacetat, 3) Methyl-dichlorfluoracetat, 4) Methyl-a,a-difluorpropionat, 5) Methyl-α,a-dichlorpropionat, 6) Methyl-chlordifluor-acetat.

25 Hvert af de dannede produkter isoleres og renses på lignende måde som beskrevet i eksempel 2 til opnåelse af henholdsvis 1) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-trichloracetamido-3-pro-panol, 30 2) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-dibromacetamido-3-fluor-1-propanol, 3) D-(threo)-1-p-nitrophenyl-2-dichlorfluoracetamido-3-fluor-l-propanol, 4) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-α,α-difluorpropionamido- 35 3-fluor-l-propanol, 5) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-α,a-dichlorpropionamido- 3-fluor-l-propanol, 17

DK 159264 B

6) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-chlordifluoracetamido-3-fluor-l-propanol.

B. 2-Monohalogenalkanoylamino- og 2-a,3-dihalogenpropi-onamidoderivater.

5 På lignende måde som beskrevet i eksempel 4 (fremgangsmåde B) behandles D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-amino-3-fluor-l-propanol i methanol eller ethanol med hver af følgende substituerede eddikesyre- eller propi-onsyrechlorider: 10 7) Fluoracetylchlorid, 8) Chloracetylchlorid, 9) Bromacetylchlorid, 10) lodacetylchlorid, 11) Propionylchlorid, 15 12) a-Fluorpropionylchlorid, 13) a-Chlorpropionylchlorid, 14) a-Brompropionylchlorid, 15) a-Iodpropionylchlorid, 16) β-Chlorpropionylchlorid, 20 17) β-Brompropionylchlorid, 18) β-Iodpropionylchlorid, 19) a,β-Dichlorpropionylchlorid, 20) a,β-Difluorpropionylchlorid.

Hvert af de dannede produkter isoleres og renses 25 på lignende måde som beskrevet i eksempel 2 til opnåelse af henholdsvis 7) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-fluoracetamio-3-fluor-1-propanol, 8) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-chloracetamido-3-fluor-30 1-propanol, 9) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-bromacetamido-3-fluor-l-propanol, 10) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-iodacetamido-3-fluor-l-propanol , 35 11) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-propionamido-3-fluor-l-propanol , 12) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-a-fluorpropionamido-3-fluor-l-propanol, 18

DK 159264 B

13) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-a-chlorpropionamido-3-fluor-l-propanol, 14) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-a-brompropionamido-3-fluor-l-propanol, 5 15) D-(threo)-1-p-nitrophenyl-2-a-iodpropionamido-3-fluor-l-propanol, 16) D- (threo)-l-p-nitrophenyl-2-l3-chlorpropionamido-3-fluor-l-propanol, 17) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-|3-brompropionamido-3-10 fluor-l-propanol/ 18) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-|3-iodpropionamido-3-fluor-l-propanol, 19) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-α,Ø-dichlorpropionamido- 3-fluor-l-propanol, 15 20) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-α,β-difluorpropionamido- 3-fluor-l-propanol.

På lignende måde som beskrevet i eksempel 6A og 6B ovenfor kan der fremstilles andre polyhalogenpropion-amidoderivater, ligesom der kan fremstilles de tilsva-20 rende blandede polyacylderivater af de ovenstående.

C. Azidoacetamido- og methylsulfonylacetamidoderivater.

På lignende måde som beskrevet i eksempel 2 behandles D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-amino-3-fluor-l-pro-panol i methanol eller ethanol med methyl- eller ethyl-25 azidoacetat og methyl- eller ethyl-methylsulfonylacetat til opnåelse af henholdsvis: D-(threo)-1-p-nitrophenyl-2-azidoacetamido-3-fluor-l-propanol , og D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-methylsulfonylacetamido-3-30 fluor-l-propanol. For sidstnævnte forbindelses vedkommende opnåedes der følgende data: PMR (dmso-dg): <5 ^91 (3H/ s, CH3S02CH2), 4,04 (2H, s, CH3S02CH2), 6,08 (IH, d, J=5,0 Hz, benzylisk OH), 7,86 (4H, center af AA', BB' quartet, aromatiske hydrogenatomer).

19

DK 159264 B

Eksempel 7 D-(Threo)-l-p-nitrophenyl-2-dichlordeuterioacetamido-3-fluor-l-propanol.

0,7 ml triethylamin sættes til en omrørt opløs-5 ning af 0,75 g D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-dichloracet-amido-3-fluor-l-propanol i 7 ml methylalkohol-d (dvs.

CH^OD), og opløsningen omrøres ved stuetemperatur i 18 timer. Der koncentreres i vakuum, og den opnåede remanens tørres natten over i vakuum over phosphorpentoxid.

10 Remanensen opløses i 5 ml methanol, og der inddampes til tørhed. Denne proces gentages endnu 1 gang. Det opnåede produkt omkrystalliseres af en blanding af ethylacetat og n-hexan til opnåelse af D-(threo)-1-p-nitropheny1-2-dichlordeuterioacetamido-3-fluor-l-propanol (udbytte 15 0,59 g). Massespektrum: (M+ + 1) 326. PMR (dmso-dg): δ 8,6 (d, J=8Hz, NH), 7,96 (ABq, J=10Hz, aromatiske hy-drogenatomer), 6,15 (d, J^SHz, benzylisk OH).

Eksempel 8

Natrium-D-(threo)-1-p-nitrophenyl-2-dichloracetaraido-3-20 fluor-l-propyl-hemisuccinat.

Til 1,3 g (4 mmol) D-(threo)-1-p-nitropheny1-2-dichloracetamido-3-fluor-l-propanol i 12 ml dioxan sættes 0,92 g (8 mmol) ravsyreanhydrid og 2,4 ml triethyl-arain. Man lader opløsningen henstå ved stuetemperatur i 25 6 timer, inddamper derefter til et lille rumfang og opløser den opnåede remanens i 200 ml chloroform. Chloro-formopløsningen vaskes med fortyndet saltsyre og derefter med vand, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og inddampes. Den opnåede remanens omkrystalliseres af di-30 ethylether til opnåelse af D-(threo)-l-p-nitro-2-dichlor-acetamido-3-fluor-l-propyl-succinat,udbytte 950 mg (56% af det teoretiske.

850 mg (2 mmol) D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-di-chloracetamido-3-fluor-l-propanol-succinat opløses i 35 vand, opløsningen tilsættes 168 mg (2 mmol) natriumhy-drogencarbonat, omrøres i 15 minutter og filtreres, og filtratet tilsættes vand og inddampes derefter til en 20

DK 159264 B

remanens bestående af natrium-D- (threo) -1-p-nitroph.enyl- 2-dichloracetamido-3-fluor-l-propyl-hemisuccinat, udbytte 800 mg. PMR (D2O): <$ 2,68 (4H, m, CH2 fra hemisucci-natet), 6,1 (IH, d, J=3,0 Hz, benzylisk H) 6,28 (IH, s, 5 CHC12)/ 7,8 (4H, center af AA, BB quartet, aromatiske hydrogenatomer).

Eksempel 9 D-(Threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-dichloracetamido-3-fluor-l-propanol.

10 A. D-(Threo)-l-p-methylsulfonylph.enyl-2-phthalimido-l,3-propandiol.

71 g (200 mmol) thiamphenicol suspenderes i 300 ml vand indeholdende 25 ml koncentreret saltsyre. Reaktionsblandingen omrøres ved tilbagesvalingstemperatur i 15 6 timer og inddampes derefter til tørhed i vakuum. Til den opnåede remanens sættes 100 ml toluen, og der inddampes. Denne proces gentages, og man tørrer remanensen, der består af l-p-methylsulfonylphenyl-2-amino-l,3-pro-pandiol-hydrochlorid. Den ovennævnte tørrede remanens 20 omrøres i 1400 ml toluen, hvorefter der under omrøring tilsættes 29,9 g triethylamin og 44 g phthalsyreanhydrid. Reaktionsblandingen opvarmes til tilbagesvalingstemperatur i 6 timer i en kolbe forsynet med en Dean-Stark-vandfjerner. Reaktionsblandingen afkøles, opløsningsmid-25 let afdampes i vakuum, den opnåede remanens opløses derefter i 1,5 liter ethylacetat, ethylacetatopløsningen vaskes med 800 ml 1 N saltsyre, saltsyrevaskevæsken eks-traheres 2 gange med ethylacetat (500 ml), og ethylacetat ekstrakt erne hældes derefter sammen med den oprinde-30 lige ethylacetatopløsning. De samlede ethylacetatopløs-ninger tørres over natriumsulfat og inddampes til tørhed. Den opnåede remanens omrøres i 300 ml ethanol og sættes derefter til side i 2 timer. Det dannede faste stof fraskilles ved filtrering, og remanensen vaskes med 35 en lille mængde ethanol og tørres til opnåelse af D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-phthalimido-l,3-pro-pandiol (udbytte 35 g).

DK 159264B

21

Til opnåelse af yderligere produkt inddamper man de samlede ethanolfiltrater i vakuum, opløser den opnåede remanens i ethylacetat, vasker ethylacetatopløsningen med 5%'s vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og tør-5 rer ethylacetatet over natriumsulfat og inddamper det derpå i vakuum. Den opnåede remanens tritureres med ethar nol, og der filtreres til opnåelse af yderligere D-(threo)-l-p-methyl-sul£onylphenyl-2-phthalimido-l,3-pro- pandiol (yderligere udbytte 7,3 g), smp. 209-211°C.

+ 10 Massespektrum m/e 190 (PhtN=CHCHo0H), 186 + Δ (ch3so2c6h5ch2oh).

B. D-(Threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-phthalimido-3-fluor-l-propanol.

25 ml diethylamin-svovltrifluorid sættes dråbevis 15 til en omrørt suspension af 66 g (0,176 mmol) D-(threo)- l-p-methylsulfonylphenyl-2-phthalimido-l,3-propandiol i 750 ml tetrahydrofuran holdt ved 0°C ved udvendig køling. Efter endt tilsætning omrøres der i 30 minutter ved 0°C og derefter i 6 timer ved stuetemperatur. Blan-20 dingen stilles i et køleskab natten over. Opløsningsmidlet fjernes ved afdampning i vakuum, og den opnåede remanens chromatograferes på en silicagelsøjle (4 kg), i-det der elueres med en blanding af chloroform og ethanol (99:1 på volumenbasis). Ens fraktioner, der indeholder 25 'det ønskede produkt som bestemt ved tyndtlagschromatograf i, hældes sammen, og de samlede fraktioner inddampes i vakuum til opnåelse af en remanens af D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-phthalimido-3-fluor-l-propanol, udbytte 24 g, smp. 166-168°C. Massespektrum: m/e 192 30 (Pht N=CHCH2F), 186 (CH3S02C6H5CH2$H). PMR (dmSo-dg): δ 7,6-8,3 (aromatiske hydrogenatomer), 6,1 (d, J=s4,0 Hz, benzylisk OH), 3,95-5,4 (m, H-l, H-2 og CH2F), 3,23 (s, so2ch3).

22

DK 159264 B

C. D-(Threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-amino-3-fluor-l-propanol.

0,16 g 99%'s hydrazinhydrat sættes til en opløs-5 ning af 1,14 g (3 mmol) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphe-nyl-2-phthalimido-3-fluor-l-propanol i 20 ml ethanol.

Der opvarmes til tilbagesvalingstemperatur i 4 timer og afkøles til stuetemperatur, og det dannede faste stof fjernes ved filtrering. Filtratet inddampes til en re-10 manens bestående af D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl- 2- amino-3-fluor-l-propanol.

D. D-(Threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-dichloracetami-do-3-fluor-l-propanol.

Det i eksempel 9C fremstillede D-(threo)-1-p-me-15 thylsulfonylphenyl-2-amino-3-fluor-l-propanol opløses i 5 ml methanol, og der tilsættes 1 g methyl-dichlorace-tat. Reaktionsblandingen opvarmes til tilbagesvalingstemperatur i 2 timer, opløsningsmidlerne fjernes ved afdampning i vakuum, og den opnåede remanens ekstraheres 20 med 100 ml af en blanding af chloroform og ethanol (75: 25 på volumenbasis). Ekstrakterne med de organiske opløsningsmidler inddampes i vakuum, og den opnåede remanens chromatograferes på en silicagelkolonne (90 g), i-det der elueres med en blanding af chloroform og ethanol 25 (93:7 på volumenbasis). De ens eluater, der indeholder det ønskede produkt som bestemt ved tyndtlagschromatogra-fi, hældes sammen og inddampes i vakuum til en remanens af D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-dichloracetami-do-3-fluor-l-propanol, udbytte 0,5 g, smp. 146-147°C.

30 Massespektrum: M+ 358. PMR (dmso-dg): δ 8,3 (d, J=8,0 Hz, NH) , 7,18-7,75 (aromatiske hydrogenatomer), 6,43 (s, C0CHC12)/ 6,07 (d, J=4,0 Hz, benzylisk OH), 3,9-5,1 (m,H-l, H-2 og -CH2F), 3,14 (s, S02CH3).

Eksempel 10 35 D-(Threo)-1-p-methylsulfonylphenyl -2-difluoracetamido-r 3- fluor-l-propanol.

Det i eksempel 9C fremstillede D-(threo)-1-p-methylsulfony lphenyl-2-amino-3-fIuor-1-propanol opløses i 5 ml 23

DK 159264 B

ethanol, og der tilsættes 1 g ethyl-difluoracetat. Reaktionsblandingen opvarmes til tilbagesvalingstemperatur i 2 timer, opløsningsmidlerne fjernes ved afdampning i vakuum, og den opnåede remanens ekstraheres med 100 ml af 5 en blanding af chloroform og ethanol (75:25 på volumenbasis) . De samlede ekstrakter inddampes i vakuum, og den opnåede remanens chromatograferes på silicagel (90 g), idet der elueres med en blanding af chloroform og ethanol (93:7). De ens fraktioner, der indeholder det ønske-10 de produkt som bestemt ved tyndtlagschromatografi, hældes sammen og inddampes i vakuum til opnåelse af D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-difluoracetamido-3-fluor-l-propanol, smp. 141-142 C. Massespektrum: (M +1) 326. PMR (dmso-dg): 68,88 (d, J-8,0 Hz, NH), 7,5-8,1 15 (aromatiske hydrogenatomer), 6,2 (t, J=54 Hz, COCHI^), 6,07 (d, J=4,0 Hz, benzylisk OH), 3,7-5,1 (m, H-l, H-2 og CH2F), 3,2 (s, S02CH3).

Eksempel 11

Andre D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-acylamino-3-20 fluor-l-propanoler.

A. På lignende måde som beskrevet i eksempel 9D be handles D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-amino-3-fluor-l-propanol i methanol med methyl-trifluoracetat og med hver af de substituerede eddikesyreester og sub-25 stituerede propionsyreester-udgangsforbindelser ifølge eksempel 6A. Hvert af de dannede produkter isoleres og renses på lignende måde som beskrevet til opnåelse af henholdsvis 1) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-trifluoracetami-30 do-3-fluor-l-propanol, 2) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-trichloracetami-do-3-fluor-l-propanol, 3) D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-dibromacetamido- 3-fluor-l-propanol, 35 4) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-dichlorfluor-acetamido-3-fluor-l-propanol, 5) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-α,α-difluorpro- 24

DK 159264 B

pionamido-3-fluor-l-propanol, 6) D- (threo) -l-p-methylsulfonylphenyl-2-α, a-dichlorpro-pionamido-3-fluor-1-propanol, og 7) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-chlordifluoracet- 5 amido-3-fluor-l-propanol.

B. På lignende måde som beskrevet i eksempel 4 (fremgangsmåde B) behandles D-(threo)-1-p-methylsulfo-nylphenyl-2-amino-3-£luor-l-propanol i methanol eller ethanol med hver af de substituerede eddikesyrechlorid-10 og substituerede propionsyrechlorid-udgangsforbindelser ifølge eksempel 6B. Hvert af de dannede produkter isoleres og renses på lignende måde som beskrevet til opnåelse af henholdsvis 8) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-fluoracetamido- 15 3-fluor-l-propanol, 9) D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-chloracetamido- 3-fluor-l-propanol, 10) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-bromacetamido- 3-fluor-l-propanol, 20 11) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-iodacetamido-3-fluor-l-propanol, 12) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-propionamido- 3-fluor-l-propanol, 13) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-a-fluorpropion- 25 amido-3-fluor-l-propanol, 14) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-a-chlorpropion-amido-3-fluor-l-propanol, 15) D-(threo)-1-p-methylsulfonylpheny1-2-α-brompropion-araido-3-fluor-l-propanol, 30 16) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-a-iodpropion-amido-3-fluor-l-propanol, 17) D-(threo)-1-p-methylsulfonylpheny1-2-3-chlorpropion-amido-3-fluor-l-propanol, 18) D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-8-brompropion- 35 amido-3-fluor-l-propanol, 19) D-(threo)-l-p-methylsul£onylphenyl-2-3-iodpropion-amido-3-fluor-l-propanol, 20) D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-α,Ø-dichlorpro-

DK 159264B

25 pionamido-3-fluor-l—propanol, og 21) D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-α,(3-dif luorpro-pionamido-3-fluor-l-propanol.

Eksempel 12 5 D- (Threo) -l-p-methylthiophenyl-2-dichloracetamido-3-fluor-1-propanol.

A. D-(Threo)-l-p-aminophenyl-2-phthalimido-3-fluor-1-propanol.

En opløsning af 11 g (32 mmol) D-(threo)-1-p-ni.-10 trophenyl-2-phthalimido-3-fluor-l-propanol opløses i en opløsning af 120 ml dioxan, 60 ml isopropanol og 10 ml vand i en 500 ml hydrogeneringskolbe. Der tilsættes 1 g 10% palladium-på-kul og 3 ml koncentreret saltsyre og hydrogeneres ved et tryk på 3/4 atmosfærer. Hydrogene- ....

15 ringen følges, indtil alt udgangsmaterialet er omdannet til det tilsvarende p-aminophenylderivat (R^=0,49/ tyndt-lagschromatografi på silicagel, blanding af dichlorme-than og acetone, (90:10 på volumenbasis)). Katalysatoren fjernes ved filtrering og vaskes med 20 ml isopropanol.

20 Det samlede filtrat og isopropanolvaskevæske koncentreres i vakuum, og den opnåede remanens opløses i 30 ml 1 molært natriumhydroxid. Den vandige opløsning ekstrahe-res flere gange med dichlormethan, og de samlede ekstrakter tørres over vandfrit magnesiumsulfat og koncen-25 treres. Den opnåede remanens omkrystalliseres af vandfri ethanol:diethylether, og det dannede bundfald fra-filtreres og tørres til opnåelse af D-(threo)-1-p-amino-phenyl-2-phthalimido-3-fluor-l-propanol, udbytte 6,2 g (19,7 ramol, 62% af det-teoretiske), smp. 145,5-147°C.

-f 30 Massespektrum: M 314. Analyse: Beregnet for C17H15°3N2F: c=64'97%' H«4,81%, N«8,91%, F=6,05%. Fundet: C=65,23%, H=4,96%, »«8,79%, F=5,75%.

B. D-(Threo)-l-p-methylthiophenyl-2-phthalimido-3-fluor-l-propanol .

35 Til en opløsning af 3 g (9,6 mmol) D-(threo)-1- p-aminophenyl-2-phthalimido-3-fluor-l-propanol i 60 ml methylenchlorid afkølet til 0°C sættes en opløsning af 26

DK 159264 B

nitrosylchlorid i methylenchlorid (11 ml/ 70 mg pr. ml).

Der omrøres ved 0°C i 20 minutter. Der tilsættes 0/8 g natriumthiomethylat og 10 ml ethanol og omrøres ved stuer temperatur i 18 timer. Der tilsættes yderligere 0,2 g 5 natriumthiomethylat og omrøres i 1 time. Reaktionsblandingen filtreres, og filtratet inddampes til en remanens bestående af D-(threo)-l-p-methylth.iophenyl-2-phthalimido-3-fluor-l-propanol, der anvendes uden yderligere rensning i fremgangsmåden i eksempel 12C.

10 C. D-(Threo)-l-p-methylthiophenyl-2-amino-3-fluor-l-propanol.

Det i eksemoel 12C fremstillede D-(threo)-1-p-methylthiophenyl-2-phthalimido-3-flour-l-propanol opløses i 20 ml absolut ethanol, og der tilsættes 0,55 ml hydrazinhydrat. Der 15 opvarmes til tilbagesvalingstemperatur i 3 timer og filtreres derpå.

Filtratet, der indeholder D-(threo)-1-p-methyl-thiophenyl-2-amino-3-fluor-l-propanol, anvendes uden yderligere rensning ved fremgangsmåden i det følgende 20 eksempel 12D.

D. D-(Threo)-l-p-methylthiophenyl-2-dichloracetamido-3-fluor-l-propanol.

1,4 ml methyl-dichloracetat sættes til det i eksempel 12C fremstillede filtrat, der indeholder D-25 (threo)-l-p-methylthiophenyl-2-amino-3-fluor-l-propanol. Reaktionsblandingen opvarmes til tilbagesvalingstemperatur i 2 timer og inddampes i vakuum, og den opnåede remanens chromatograferes på en silicagelsøjle (90 g), i-det der elueres med en blanding af methylenchlorid, 2-30 propanol og koncentreret ammoniumhydroxid (28%) (90:6:0,1 på volumenbasis). De ens fraktioner, der indeholder det ønskede produkt som bestemt ved tyndtlagschromatografi, hældes sammen, og de samlede ens eluater inddampes til en remanens af D-(threo)-l-p-methylthiophenyl-2-dichlor-35 acetamido-3-fluor-l-propanol, udbytte 1,1 g. Massespektrum: M+ 325, 153 (CH3SCgH4CH2OH) .

27

DK 159264 B

Eksempel 13 D-(Threo)-l-phenyl-2-dichlor-acetamido-3-fluor-l-propa-nol.

A. D- (Threo)-l-phenyl-2-phthalimido-3-fluor-l-propanol.

5 Til en opløsning af 800 mg D-(threo)-1-p-amino- phenyl-2-phthalimido-3-fluor-l-propanol, fremstillet som beskrevet i eksempel 12Ά/ i 40 ml methylenchlorid afkølet til 0°C sættes en opløsning af nitrosylchlorid i methylenchlorid (3 ml, 70 mg pr. ml). Der omrøres ved 0°C 10 i 20 minutter, hvorefter det dannede bundfald fraskilles ved filtrering og vaskes med methylenchlorid til opnåelse af diazoniumchloridsaltet af D-(threo)-1-p-aminophe-nyl-2-phthalimido-3-fluor-!-propanol.

Det ovennævnte diazoniumchloridsalt opløses i 6 15 ml koldt vand, og opløsningen sættes hurtigt til 1,6 g 50%'s hypophosphorsyrling, der på forhånd er blevet afkølet i et vandbad. Man lader reaktionsblandingen opvarme til 25°C og omrører den derefter i 3 timer ved 25°C. Reaktionsblandingen ekstraheres med methylenchlorid (i 20 alt 75 ml), de samlede methylenchloridekstrakter vaskes med fortyndet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning, og methylenchloridopløsningen tørres over vandfrit magnesiumsulfat og inddampes til en remanens bestående af D-(threo)-l-phenyl-2-phthalimido-3-fluor-l-propanol (ud-25 bytte 0,7 g), der anvendes uden yderligere rensning ved fremgangsmåden i eksempel 13B.

B. D-(Threo)-l-phenyl-2-amino-3-fluor-l-propanol.

Det i eksempel 13A fremstillede D-(threo)-1-phe-nyl-2-phthalimido-3-fluor-l-propanol opløses i 10 ml ab-30 solut ethanol, og der tilsættes 0,12 ml hydrazinhydrat og opvarmes til tilbagesvalingstemperatur i 3 timer, hvorefter der filtreres, og filtratet inddampes til en remanens bestående af D-(threo)-l-phenyl-2-amino-3-fluor-l-propanol, der anvendes uden yderligere rensning 35 ved fremgangsmåden i det nedenstående eksempel 13C.

28

DK 159264B

C. D-(Threo)-l-phenyl-2-dichloracetamido-3-fluor-l-pro-panol.

Det i eksempel 13B fremstillede D-(threo)-1-phe-nyl-2-amino-3-fluor-l-propanol opløses i 6 ml methanol, 5 og der tilsættes 1,4 ml methyl-dichloracetat og opvarmes til tilbagesvalingstemperatur, idet reaktionsblandingen holdes ved pH 8 ved tilsætning af triethylamin. Tilbagesvalingen fortsættes, indtil alt udgangsmaterialet er blevet forbrugt som vist ved tyndtlagschromatografi på 10 silicagel under anvendelse af en blanding af chloroform og ethanol (97:3 på volumenbasis) som opløsningsmiddel, hvorefter reaktionsblandingen koncentreres. Den opnåede remanens renses ved chromatografi på en silicagelsøjle (2,8 x 30 cm), idet der elueres med en blanding af chlo-15 roform og ethanol (99:1 på volumenbasis), og idet der tages 4 ml-fraktioner, 2 minutter pr. reagensglas. De ens fraktioner, der indeholder det ønskede produkt som bestemt ved tyndtlagschromatografi, hældes sammen og inddampes til en remanens bestående af D-(threo)-1-phe-20 nyl-2-dichloracetamido-3-fluor-l-propanol, udbytte 0,4 g, (1,43 mmol, 56% af det teoretiske). Massespektrum: 280 (M+ +1), 282 (M+ +1), 107 (Hi=CH-phenyl). PMR (dmso-dg): δ 5,86 (benzylisk OH), 6,51 C^'CH-, 7,31 (phenyl).

Eksempel 14 25 D-(Threo)-1-p-methylsulfinylphenyl-2-dichlor-acetamido- 3-fluor-l-propanol.

Til en opløsning af 910 mg (2,8 mmol) D-(threo)-l-p-methylthiophenyl-2-dichloracetamido-3-fluor-l-propanol (forbindelse ifølge eksempel 12) i 10 ml 95%'s di-30 oxan ved 0°c sættes 600 mg natriummetaperiodat, og der omrøres i 30 minutter. Eventuelt overskud af natriummetaperiodat sønderdeles ved tilsætning af ethylenglycol, indtil reaktionsblandingen giver negativ reaktion på stivelse-iodid-papir. Man tilsætter dioxan (2 gange re-35 aktionsblandingens rumfang) og frafiltrerer de dannede salte. Dioxanfiltratet inddampes, og til den opnåede remanens sættes 50 ml af en blanding af chloroform og e- 29

DK 159264 B

thanol (3:1 på volumenbasis), hvorefter det dannede faste stof frafiltreres og vaskes med blandingen af chloroform og ethanol (3:1). Filtratet og vaskevæsken hældes sammen og inddampes, og den opnåede remanens chromato-5 graferes på en 15 grams silicagelsøjle (1,8 x 30 ml), i-det der elueres med en blanding af chloroform og ethanol (99:1 på volumenbasis). De ens fraktioner, der indeholder det ønskede produkt som bestemt ved tyndtlagschroma-tografi, hældes sammen og inddampes til en remanens be-10 stående af D-(threo)-l-p-methylsulfinylphenyl-2-dichlor-acetamido-3-fluor-l-propanol (udbytte 247 mg). Massespektrum: 342 (M++l), 344 (M++3), 169 (HO=CHC6H5SOCH3). PMR(dmso-dg): δ 5,98 (d, J=3,0 Hz, benzylisk OH), 6,45 (s, C^CHCO-), 7,58 (s, aromatisk), 2,67 (s,CH3S02).

15 Eksempel 15 D-(Threo)-l-p-nitrophenyl-2-dichloracetamido-3-fluor-1-propanol.

En blanding af 1 g D-(threo)-2-dichlormethyl-4- 2 para-nitrophenyl-hydroxymethyl-Δ -oxazolin, 0,5 g lithium-20 fluorid, >0,1 g bortrifluorid-etherat og flydende hydrogenfluorid omrøres i en teflonforet bombe i 24 timer. Det gasformige hydrogenfluorid afdampes til en passende fælde, hvorefter den opnåede remanens opløses i chloroform, og chloroformopløsningen vaskes to gange med vand og der-25 på tørres over magnesiumsulfat og inddampes. Den opnåede remanens chromatograferes på silicagel under anvendelse af chloroform som elueringsmiddel. Ens fraktioner, der indeholder det ønskede produkt som bestemt ved tyndtlags-chromatografi, opsamles og inddampes i vakuum til opnå-30 else af en remanens bestående af D-(threo)-1-para-nitro-phenyl-2-dichloracetamido-3-fluor-l-propanol.

Eksempel 16 D-(Threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-difluoracetamido-3-fluor-1-propyl —glycinat-trifluoreddikesyresalt.

35 1,29 g D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-di- fluoracetamido-3-fiuor-l-propanol, fremstillet som i ek- 30

DK 159264B

sempel 10, 1,1 g N-p-methoxybenzyloxycarbonylglycin, 1,1 g Ν,Ν-dicyclohexylcarbodiimid og 0,5 ml pyridin opløses i 50 ml acetonitril. Der omrøres i 4 timer og inddampes derpå i vakuum ved 50°C, og den opnåede remanens chroma-5 tograferes på silicagel (200 mg), idet der elueres med 1 voi-%'s ethanol i chloroform. Ens fraktioner, der indeholder rent D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-di-fluoracetamido-3-fluor-l-propanol-N-p-methoxybenzyloxy-carbonylglycinat som bestemt ved tyndtlagschromatografi, 10 hældes sammen og inddampes. Den opnåede remanens opløses under vandfri betingelser i 20 ml trifluoreddikesyre.

Der sættes 100 ml diethylether til opløsningen, og det dannede bundfald fraskilles ved filtrering. Bundfaldet opløses i vand, og den vandige opløsning filtreres og 15 lyofiliseres til opnåelse af D- (threo)-1-p-methyksulfonylphenyl 2-difluoracetamido-3-fluor-1-propanol-glycinat-trifluor-eddikesyresalt, udbytte 1,23 g,j PMR (dmso-dg): 6 7,84 (ABq, J=8Hz, aromatisk hydrogen), 6,25 (d, J= 3Hz, H-l), 6,05 (t, J=53Hz, CH2P), 4,07 (s, glycyl CH2), 3,17 (s, 20 S02CH3).

Eksempel 17 D-(Threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-difluoracetamido-3-fluor-1-propy 1 —ornithat-trifluoreddikesyresalt.

D-(Threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-difluoracet-25 amido-3-fluor-l-propanol behandles på lignende måde som beskrevet i eksempel 16, idet der dog anvendes 2,3 g di-N-p-methoxybenzyloxycarbonylornithin i stedet for p-me-thoxybenzyloxycarbonylglycin, til opnåelse af D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-difluoracetamido-3-fluor-l-30 propanol-ornithat-trifluoreddikesyresalt, udbytte 0,84 g, PMR (dmso-dg) : <5= 7,87 (ABq, J-8Hz, aromatisk hydrogen), 6,19 (d, J=3Hz, H-l), 6,07 (t, J=53HZ, CH2F), 3,2 (s, S02CH3), 1,92 (bred, ornithin CH2-CH2), 3,0 (bred, or-nithin CH).

31

DK 159264 B

Eksempel 18

Svovlsyresaltet af D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-difluoracetamido-3-£luor-l-propanol-glycinat og af D-(threo)-l-p-methylsulfonyl-2-difluoracetamido-3-fluor-5 propanol-ornithat.

(1) Trifluoreddikesyresaltproduktet fra eksempel 16 opløses i tetrahydrofhran, og der tilsættes 0,5 molækvivalenter svovlsyre. Tetrahydrofuranet afdampes i vakuum, hvorefter den opnåede remanens genopløses i te-10 trahydrofuran, og der inddampes igen. Denne proces gentages, indtil alt trifluoreddikesyren er erstattet af svovlsyre, som eftervist ved NMR-data til opnåelse af D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-difluoracetamido-3-fluor-l-propanol-glycinat-svovlsyresalt.

15 (2) Trifluoreddikesyresaltet fra eksempel 17 behandles på lignende måde som beskrevet ovenfor til opnåelse af D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-difluoracetami-do-3-fluor-l-propanol-ornithat-svovlsyresalt.

Eksempel 19 20 D-(Threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-difluoracetamido-3-fluor-l-propyl —lysinat-trifluoreddikesyresalt.

D-(Threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-difluoracet-amido-3-fluor-l-propanol behandles på lignende måde som beskrevet i eksempel 16, idet der dog anvendes 3,06 g 25 di-N-p-methoxybenzyloxycarbonyllysin i stedet for p-meth-oxybenzyloxycarbonylglycin, til opnåelse af D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-di£luoracetamido-3-fluor-l-pro-panol-lysinat-trifluoreddikesyresalt, udbytte 3,1 g, PMR (dmso-dg): 6= 7,81 (ABq, J-8Hz, aromatiske hydrogenato-30 mer), 6,19 (d, J=3HZ, H-l) , 6,08 (t, J=53Hz, CH2F) , 3,23 (s, S02CH3), 2,90 (bred, lysin CH), 1,90 (bred, lysin (¾) .

Som tidligere' omtalt udviser forbindelserne med den almene formel I antibakteriel virkning og er i al-35 mindelighed bredspektrede antibiotika, der er nyttige til behandling af gram-negative, gram-positive og rik- 32

DK 159264 B

ettsielle infektioner og desuden kan være dræbende over for bakterier, som er resistente over for de tilsvarende 3—hydroxy-analoge, f.eks. chloramphenicol. I denne sammenhæng er tilvejebringelsen af forbindelser, som mang-5 ler den primære 3-hydroxyfunktion, særlig nyttig, når den pågældende organisme inaktiverer ved hjælp af en mekanisme, der indebærer O-acetylering af den primære hy-droxyfunktion.

Den antibakterielle virkning og toksiciteten af 10 de omhandlede forbindelser kan belyses ved henvisning til data opnået med følgende forbindelser:

Forbindelse A: D-(threo)-l-p-nitrophenyl-2-dichloracet-amido-3-fluor-l-propanol,

Forbindelse B: D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-di-15 chloracetamido-3-flUor-l-propanol,

Forbindelse C: D-(threo)-1-p-methylsulfonylphenyl-2-di-fluoracetamido-3-fluor-l-propanol.

Ved standard-fortyndingsprøver udviste forbindelserne A-C in-vitro-virkning mod gram-positive bakterier 20 (såsom Staphylococcus aureus) og mod gram-negative bakterier (såsom Escherichia coli, Hemophilus influenzae, Klebsielle, Salmonella, Shigella, Proteus, Enterobacter og Serratia, herunder visse bakterier som er resistente over for de 3-hydroxy-analoge antibiotika.

25 In-vivo-virkningen af forbindelserne A-C bestem tes på mus under anvendelse af musebeskyttelsesprøver, ved hvilke forbindelserne administreredes oralt ca. 1 time efter infektion, og musene derefter holdtes under observation i 7 dage for overlevelse.Resultaterne ud-30 tryktes som PD^Q-værdier og er anført i tabel A nedenfor. Til sammenligning er der også anført resultater opnået med chloramphenicol (forbindelse D) og thiampheni-col (forbindelse E).

DK 159264B

33

Tabel A

In-vivo-virkning

Bakteriestamme PD50 (mi?/kg)

A B C D E

5 Enterobacter -Charlott 130 25 20 350 300

Providencia 0828508 70 55 30 220 200

Serratia 10 -Brooke 1 120 15 30 230 >200

Staphylococcus 0413717 75 45 45 160 160

Af tabel A ses det, at forbindelse A, 3-desoxy-3-fluorderivatet af chloramphenicol, var betydeligt mere 15 aktivt end chloramphenicol selv (forbindelse D). Tilsvarende var forbindelse B, 3-desoxy-3-fluorderivatet af thiamphenicol, betydelig mere aktiv end tMamdhenicol selv (forbindelse E), ligesom forbindelse C, 2-difluoracet-amido-analogen af forbindelse B, var det.

20 Toksicitetsdata for forbindelserne A til C er an ført i tabel B nedenfor. Bestemmelserne af den akutte toksicitet udførtes med grupper på 5 til 7 hanlige CF-1 mus. LD^Q-værdierne beregnedes på basis af overlevende dyr fundet 18 og 48 timer efter dosering.

25 Tabel B

Akut toksicitet

Forbindelse LD50 (m<?/kg) (Oral) A 1650 30 B >3000 C 880

Ved deres anvendelse som antibakterielle midler kan forbindelserne med den almene formel I anvendes alene eller sammen med andre antibiotika..

34

DK 159264 B

Forbindelserne med den almene formel I finder i-midlertid deres .anvendelse ved, at de fremkalder en antibakteriel respons hos et varmblodet dyr med en påvirkelig bakterieinfektion. De er således indicerede som 5 værende nyttige ved oral administrering eller injektion til terapeutisk behandling af infektionssygdomme, herunder sygdomme i de øvre åndedrætsveje, f.eks. pneumonia og bakteriel septicemia, og infektioner i den urogenitale region og i mave-tarm-kanalen og til topisk behand-10 ling af øjen-, øre- og hudinfektioner.

Forbindelserne med den almene formel I kan administreres i vilkårlig passende form, såsom i form af opløsninger eller suspensioner til otisk og optisk anvendelse, og de kan også administreres parenteralt ved in-15 tramuskulær injektion.

Injektionsopløsningen eller -suspensionen administreres sædvanligvis i en dosis på fra ca. 1 mg til 15 mg af forbindelsen pr. kg legemsvægt pr. dag, delt i ca.

2 til ca. 4 doser. Den nøjagtige dosis afhænger af in-20 fektionens stadium og alvorlighed, den inficerende organismes følsomhed over for det antibakterielle middel og de individuelle karakteristika for den dyreart, der behandles .

Til oral administrering kan forbindelserne med 25 den almene formel I oparbejdes i form af tabletter, kapsler eller eliksirer, eller de kan endog blandes med dyrefoder. Det er i disse doseringsformer, at forbindelserne anses for mest effektive til behandling af diarréfremkaldende bakterieinfektioner i mave-tarm-kanalen.

30 Forbindelserne med den almene formel I kan også anvendes topisk i form af salver, både hydrofile og hydrofobe, i form af lotioner, der kan være vandige, ikke-vandige eller af emulsionstypen, eller i form af cremer. Farmaceutiske bærere, der er nyttige til fremstilling af 35 sådanne formuleringer, indbefatter sådanne stoffer som vand, olier, smørefedter, polyestere, polyoler og lignende.

Almindeligvis indeholder de topiske præparater 35

DK 159264 B

fra ca. 0,1 til ca. 3 g af forbindelsen med den almene formel I pr. 100 g salve, creme eller lotion. De topiske præparater påføres sædvanligvis på læsioner ca. 2 til 5 gange om dagen.

5 Typiske farmaceutiske præparater, der indeholder en forbindelse med den almene formel I som aktive bestanddele, belyses ved hjælp af de efterfølgende formuleringseksempler .

Formuleringseksempler 10 De følgende formuleringseksempler er baseret på, at den aktive bestanddel er en af følgende forbindelser: D-(threo)-l-p-nitrolhenyl-2-dichloracetamido-3-fluor-1-propanol, D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-dichloracetamido-3-15 fluor-l-propanol og D-(threo)-l-p-methylsulfonylphenyl-2-difluor-acetamido- 3-fluor-l-propanol, men der kan dog anvendes ækvivalente mængder af andre forbindelser med formlen I.

20 Formulering 1

Oral suspension mg/ml

Aktiv bestanddel, mikroniseret 20,0

Sorbitolopløsning, USP 250,0 25 Methylparaben, USP 0,5

Propylparaben, USP 0,1

Propylenglycol, USP 50,0

Kolloidt magnesiumaluminiumsilicat (Veegum HU kvalitet specielt anvendt) 10,0 30 Natriumcarboxymethylcellulose 5,0

Overfladeaktivt middel (Pluronic kvalitet F-68 specialt anvendt) 0,2

Smagsstof (om ønsket)

Renset vand, USP q.s. ad 1 ml 36

DK 159264 B

Frems tillingsmåde

Det kolloide magnesiumaluminiumsilicat og natri-umcarboxymethylcellulosen dispergeres i varmt vand (80°C). Sorbitolopløsningen tilsættes under omrøring ef-5 terfulgt af den mikroniserede aktive bestanddel. Det overfladeaktive middel tilsættes efter først at være opløst i en portion varmt vand (80°C). Blandingen afkøles til 30°C. Methyl- og propylparabenet opløses i pro-pylenglycolet. Opløsningen sættes til blandingen. Smags-10 stoffet sættes til blandingen. Man blander, indtil den er homogen.

Formulering 2 Salve 15 Aktiv bestanddel, mikroniseret 20,0

Mineralolie, USP 50,0

Hvid vaseline, TJSP q.s. ad 1,0 g

Fremstillingsmåde

Den aktive bestanddel dispergeres i en del af mi-20 neralolien og underkastes derefter formaling. Det hvide vaseline og resten af mineralolien opvarmes til 65°C og blandes, indtil det er ensartet. Blandingen afkøles til 50-55°C under omrøring. Man tilsætter mineraloliedispersionen af den aktive bestanddel under omrøring og lader 25 derefter den opnåede Salve afkøle til stuetemperatur.

Formulering 3 Créme mg/g

Aktiv bestanddel, mikroniseret 20,0 30 Hvid vaseline, USP 150,0

Mineralolie, USP 50,0

Emulgeringsmiddel (en polyethylenglycol-monocetylether forhandlet under betegnelsen Cetomacrogol 1000 anvendtes) 22,0 35 Cetylalkohol 40,0

Stearylalkohol, USP 40,0 37

DK 159264 B

\

Formulering 3 (fortsat)

Creme mg/q

Natriumphosphat, monobasisk 4,0 5 Propylenglycol, USP 50,0

Renset vand q.s. ad 1 g

Fremstillingsmåde

Propylenglycolet og det monobasiske natriumphos-phat opløses i renset vand ved 80-90°C. Det hvide vaseli-10 ne, Cetomacrogol 1000, cetylalkoholen og stearylalkoho-len opvarmes til 70-75°C og blandes, indtil det er ensartet. Den smeltede voksblanding sættes til den vandige blanding under omrøring og under afkøling til 45-50°C.

Den aktive bestanddel opslemmes og formales i en i for-15 vejen tilbageholdt portion af Cetomacrogol 1000 opløst i en portion af vandet, der også i forvejen er holdt tilbage. Den den aktive bestanddel indeholdende opslemning sættes under omrøring til blandingen af de øvrige bestanddele, og man lader derefter den opnåede creme af-20 køle til stuetemperatur.

Formulering 4 Lotion mq/q

Aktiv bestanddel 20,0 25 Propylenglycol, USP 350,0

Alkohol, USP 350,0

Hydroxypropylcellulose 2,5

Renset vand q.s. ad 1 g

Fremstillingsmåde

30 Den aktive bestanddel opløses i det til 50-60°C

opvarmede propylenglycol. Man afkøler til 30-35°C. Alkoholen og det rensede vand tilsættes under omrøring. Hy-droxypropylcellulosen dispergeres under omrøring. Man afkøler til stuetemperatur.

38

DK 159264 B

Formulering 5 Injektionsopløsning mg/ml

Aktiv bestanddel 250,0 5 Matriumtartrat 1,0

Vinsyre 4,0 N,N-dimethylacetamid 500,0

Vand til injektion q.s. ad 1,0 ml

Fremstillingsmåde 10 Natriumtartratet og vinsyren opløses i en portion vand til injektion. Den aktive bestanddel opløses i N,N-dimethylacetamidet. Opløsningerne blandes og indstilles til det krævede slutrumfang med vand til injektion. Opløsningen filtreres aseptisk gennem en steril teflon-15 milliporemembran med en porestørrelse på 0,22 mikron.

Formulering 6 Sterilt pulver

Det sterile pulver er beregnet til rekonstituti-on med vand til injektion eller normal saltopløsning til 20 opnåelse af en opløsning, der er egnet til parenteral anvendelse og har en koncentration på 100 mg af den aktive bestanddel pr. ml opløsning.

Aktiv bestanddel, lyofiliseret: 1,0 g

Fremstillingsmåde 25 Man fremstiller en passende opslemning af det ak tive stof med vand til injektion og lyofiliserer den derefter.

39

DK 159264 B

Formulering 7 Kapsler (indeholdende 25, 50 eller 250 mg pr. kapsel)

Nr. Bestanddel_ mg/kap. ’ ' mg/kap.' mg/kap.

5 1. Aktiv bestanddel 25 50 250 2. Lactose, yderst fint pulver 222 197 185 3. Majsstivelse 50 50 60 4. Magnesiumstearat 3,0 3,0 5,0 10 I alt 300 mg 300 mg 500 mg

Fremstiriingsmåde

Bestanddelene nr. 1, 2 og 3 blandes i et passende blandeapparat. Blandingen formales til at passere gennem en nr. 40 sigte (U.S.standard). Man tilsætter bestanddel 15 nr. 4 og blander i 3-5 minutter. Blandingen indkapsles i todelte hårde gelatinekapsler under anvendelse af en passende kapselfremstillingsmaskine.

Formulering 8 Tabletter 20 (indeholdende 25, 50 eller 250 mg/tablet)

Nr. Bestanddel_mg/tab._mg/ tab. mg/tab.

1. Aktiv bestanddel, mikroniseret 25 50 250 2. Lactose, yderst 25 fint pulver 202,0 177,0 234 3. Mikrokrystallinsk cellulose 30,0 30,0 60,0 4. Majsstivelse (10% pasta i vand) 10,0 10,0 20,0 30 5. Majsstivelse 30,0 30,0 30,0 6. Magnesiumstearat 3,0 3,0 3,0 I alt 300 mg 300 mg 600 mg

Fremstillingsmåde

Bestanddelene nr. 1, 2 og 3 blandes i et passende 35 blandeapparat. Man tilsætter bestanddel nr. 4 og blander, indtil der er dannet en fugtig masse. Massen formales til at passere gennem en grov sigte (f.eks. en nr. 6 U.s.

i

DK 159264 B

40 standardsigte) til opnåelse af et granulat. Granulatet tørres i 8-16 timer ved 40-50°C. Det tørrede granulat formales til at passere gennem en nr. 20 sigte (U.S. standard). Bestanddel nr. 5 sættes til det formalede grar 5 nulat/ og der blandes i 5-10 minutter. Bestanddel nr. 6 tilsættes, hvorefter der blandes yderligere i 3-5 minutter. Blandingen presses til tabletter under anvendelse af en passende tabletpresse.

Claims (8)

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af Dt(threo)-1-aryl-2-acylamido-3-fluor-1-propanolforbindelser med den almene formel I F

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, fremgangsmåde A, kendetegnet ved, at i arain-udgangsmaterialet med den almene formel II er Z hydrogen, og X er nitro eller gruppe R^A, hvor A er sulfinyl eller sulfonyl, 10 og R1 er alkyl med 1-3 carbonatomer.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 2, kendetegnet ved, at X er nitro eller methylsulfonyl.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1, fremgangsmåde A, eller krav 2 eller krav 3, kendetegnet ved, 15 at i det reaktive derivat af syren med formlen R.COOH betegner R (Hal^-CH., hvor Hal uafhængigt betegner et chlor- eller fluoratom.

5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, fremgangsmåde A, eller et vilkårligt af kravene 2-4, kendetegnet 20 ved, at det reaktive derivat af syren med formlen R.COOH er en lavere alkylester.

5 B ) foretager ringåbning, under samtidig fluorering i propandelens 3-stilling, af en oxazolidin med den almene formel IV sO-CH- OZ 10 "S,..!_H i I Λ V x hvori R, X og Z har de for formel I anførte betydniit-ger, idet Z mest foretrukket er hydrogen, C) oxiderer et udgangsmateriale med den almene formel 20 IIA F o <!:h2 oh R-ϋ-ΝΗ... C-6 — λ I IIA

25 A T x' 30 hvori R har den for formel I anførte betydning, og X' er en tilsvarende gruppe R^ S- eller R^O-, der kan omdannes til henholdsvis den ønskede gruppe R^SO- eller R1S02“ ' 35 til opnåelse af den ønskede forbindelse med formlen I, hvorpå man, om ønsket, efter den blandt fremgangsmåderne A til C valgte fremgangsmåde udfører ét eller flere af følgende trin: DK 159264 B (i) esterificering eller hydrolyse ved 2-hydroxyfunk-tionen, og (ii) dannelse af et farmaceutisk acceptabelt salt, når Z er en acylgruppe afledet af en dicarboxylsyre el-5 ler en aminosyre.

5. OZ j! I 2 : R-C-NH. . . C-C -^H ‘ λ ίο X i hvilken formel: R betegner en alkylgruppe med 1 eller 2 carbonatomer, hvilken gruppe kan være substitueret med ét eller flere 15 halogenatomer, eller betegner methylsulf'o- nylmethyl, X betegner hydrogen, nitro eller en gruppe R^A, hvori A er svovl, sulfinyl eller sulfonyl, og R^ er alkyl 20 med 1-3 carbonatomer, og Z er hydrogen eller en acylgruppe fra en carboxylsyre med op til 16 carbonatomer, eller farmaceutisk acceptable salte af de forbindelser med formlen I, hvori Z er en acylgruppe afledet af en 25 dicarboxylsyre eller en aminosyre, kendetegnet ved, at man udfører en af følgende fremgangsmåder A til C, ved hvilke man A) N-acylerer en amin med den almene formel XI F

30 I CH0 OZ ) i NH«. . .C- C-^βΗ 11 Λ 35 X i DK 159264 B hvori X og Z har de for formel I anførte betydninger, idet Z mest foretrukket er hydrogen, med en fri syre eller med et reaktivt derivat af en syre med formlen R.COOH, hvor R har den for formel I anførte betydning,

6. Fremgangsmåde ifølge et vilkårligt af de foregående krav, kendetegnet ved, at en således opnået forbindelse med den almene formel I, hvori Z er 25 hydrogen, esterificeres med en aminosyre, og den således opnåede ester isoleres som sådan eller i form af et syreadditionssalt .

7. Fremgangsmåde ifølge krav 6, kendetegnet ved, at aminosyren er en α-aminosyre valgt blandt 30 ornithin, lysin og glycin.

8. Fremgangsmåde ifølge krav 7, kendetegnet ved, at den således opnåede ester isoleres som sulfatsaltet eller hydrochloridsaltet.