DK145698B

DK145698B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 2-alkoxyadeninderivater

Info

Publication number: DK145698B
Application number: DK188279AA
Authority: DK
Inventors: T Naito; S Nakagawa; T Yamasaki; T-A Okita; H Yamashita
Original assignee: Bristol Myers Co
Priority date: 1978-05-09
Filing date: 1979-05-07
Publication date: 1983-01-31
Also published as: FR2429793B1; JPS55373A; US4172829A; GB2020655A; GB2097785B; IE790878L; FR2429793A1; FI791456A7; SE449864B; SE436033B; AU4689679A; NL7903650A; DE2918261A1; LU81238A1; FR2432519A1; FI66615C; GB2020655B; AU532056B2; DK188279A; JPS62116583A

Description

i 145698

Den foreliggende opfindelse angår en ånalogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 2'-alkoxyadeninderi vater, der er værdifulde som non-adrenergiske hronchodilatorer.

Theophyllin, der normalt administreres som ethylendiåmin-sal-05 tet (aminophyllin) eller cholin-saltet, er en kraftig og værdifuld non-adrenergisk bronchodilator, der almindeligt foreskrives til behandling af bronchialastma. Da aminophyllin er let opløselig har det i mange år været accepteret som en effektiv bronchodilator til oral indgivelse. Aminophyllin vides 10 imidlertid at have visse ulemper, fx. gastrisk irritation samt kardiovaskulære og centralnerve-system bivirkninger, der ret- · færdiggør en søgning efter nye non-adrenergiske bronchodila-torer, som kan have mere fordelagtige egenskaber såsom forøget styrke og/eller reducerede bivirkninger.

15 I relation til de her omhandlede hidtil ukendte forbindelser har et meget stort antal purin-derivater været beskrevet i patentlitteraturen og den videnskabelige litteratur. De følgende referencer er illustrative herfor: 1. J. Am. Chem. Soc., 81, 197-201 (1959) omhandler synte- 20 sen af forbindelser med formlen rr>

R

hvori R er eyclohexyl eller 2-cyclohexeneyl. Forbindelserne fremstilledes som poténtielle anticancer—midler.

2. USA-patentskrift nr. 3.917.837 omhandler brugen af for- 25 bindeisen 11¾ 2 145698 ό-“ som et anti-inflammatorisk middel.

3. USA-patentskrift nr. 3.930.005 omhandler forbindelser med formlen R2 R*.

N/ 05 rr

i jQ

0¾ 0 2 3 1 hvori R og R inter alia kan være hydrogen og R inter alia kan være (lavere)alkoxy. Forbindelserne anføres at besidde anti-inflammatorisk aktivitet.

4. Belgisk patentskrift nr. 853.086 (Farmdoc 70719Y) om- 10 handler forbindelser med formlen

X

1 I )

Q I

y 145698 3 hvori enten X er C^-Cgalkoxy eller -NHR, R er H eller (lavere)alkyl, Y er C^-Cgalkyl, C^-C^Qcycloalkyl eller hydroxycycloalkyl, phenyl, halophenyl, trifluormethyl-phenyl, bicycloalkyl eller hydroxybicycloalkyl med ind-05 til 12 carbonatomer, eller -AR^, A er methylen eller ethylen, R er phenyl, halophenyl, trifluormethyl-phenyl, bicycloalkyl eller hydroxybicycloalkyl med indtil 12 carbonatomer, Q er H, C1-Cgalkyl, C3-C10cycloalkyl eller hydroxycycloalkyl, bicycloalkyl eller hydroxybi-10 cycloalkyl med indtil 12 carbonatomer, phenyl, halo phenyl, trifluormethyl-phenyl eller AR·1", eller X er halogen eller (lavere)dialkylamino, Y er methyl, ethyl, cyclopentyl, phenyl, halophenyl, trifluormethyl-phenyl eller benzyl og Q har den ovenfor anførte betydning.

15 Forbindelserne anføres at være værdifulde til behandling af psoriasis.

5. Vesttysk offentligt tilgængelig patentansøgning nr.

2.610.985 (Farmdoc 70863Y) omhandler forbindelser med formlen 20 I f

COX

w 1 2 hvori R og R er OH eller ONO„, eller tilsammen danner ^ 4 C2~C^alkyliden, aralkyliden eller CR.R^, R er H eller C^-C^alkyl, R5 er ORg eller NR^Rg, R6 er C1~C7alkyl, R og R er eventuelt substitueret C^-C^alkyl eller 25 C^-C^cycloalkyl, eller tilsammen danner en C2~C5alkylen- gruppe, hvori den ene C^-gruppe eventuelt erstattes 4 145698 3 af et heteroatom, R er C^-C^alkyl eller alkoxy, eventuelt substitueret phenyl eller Η, X er ORg eller NR^q R,R9 er C,-C_alkyl, C~-C_cycloalkyl, eventuelt sub-il i / J ' 10 11 stitueret phenyl eller aralkyl, R og R er H, eventu- 05 elt substitueret C^-C^alkyl, alkenyl eller alkynyl, even tuelt substitueret Cg-C^cycloalkyl, substitueret phenyl, benzylamino, 2-methylfuryl eller adamantyl, eller den ene kan være H og den anden en gruppe med formlen

-(C%)n-HH-0C

O

H1 R2 10 hvori n er 2-16, eller R^® og R^ tilsammen danner en C^-C^alkylen-gruppe, hvori den ene CH^-gruppe kan erstattes af et heteroatom. Forbindelserne anføres at have kredsløbsmæssig, kardial og metabolisk aktivitet.

6. Chem. Pharm. Bull., 23(4), 759-774 (1975) omhandler in-15 ter alia forbindelser med formlen jOo T?

OH OH

5 145693 hvori R er (lavere)alkyl. Forbindelsen anføres at besidde koronar-vasodilaterende aktivitet.

7. Japansk offentligt tilgængelig patentansøgning nr. 52-71492 (Farmdoc 53190Y) omhandler forbindelser med formlen NHg

fO

os r^s R3 hvori R1 er C^-C.^ ligekædet eller forgrenet alkyl, C5~ C1Q cycloalkyl, C.j-C.^aralkyl eller piperazinethyl med formlen ΓΛ , -0¾ -0¾ -N_ H-Hf 2 10 hvori R er Cy-C^aralkyl, mono-substitueret aralkyl, cinnamyl eller fluorenyl, R3 er C^-C^g li9ekaedet eller forgrenet alkyl, C5-C10cycloalkyl, C-j-C-^aralkyl eller piperazinethyl med den ovenfor anførte betydning, 1 3 med undtagelse af forbindelser hvori R og R er methyl, 1 3 1 15 R er methyl og R er ethyl og R er C,--C^qcycloalkyl og R3 er C^-C^alkyl, C^-C10cycloalkyl eller C 7-C .^aralkyl.

Forbindelserne anføres at udvise en inhibitor! sk virkning på blodplade-aggregering samt at have koronar-dilaterende aktivitet.

20 8. Chem. Pham. Bull., 25(7), 1811-1821 (1977) omhandler fremstilling af 2-thioadenosin-derivater inklusive inter alia en forbindelse med formlen ’ 1¾ 6 U5S98 Q-sX^JLv

O

Ovennævnte forbindelse anføres at være en smule effektiv som plade-aggregeringsinhibitor. Forfatterne bemærker, at den tilsvarende forbindelse med en ribose-sukkerdel 05 i 9-stillingen var langt mere effektiv og konkluderer, at ribosyl-delen af 2-thioadenosin-derivater er essentiel til effektiv inhibering af plade-aggregering og at den ikke kan erstattes af andre substituenter.

Der er ikke f tindet kendt teknik som omhandler 2,9-di subs ti tue-10 rede adenin-derivater med en alkoxysubstituent i 2-stillingen og en cycloalkyl- eller cycloalkenylgruppe i 9-stillingen.

De ifølge den foreliggende opfindelse fremstillede hidtil u-kendte purin-derivater inhiberer effektivt bronchial konstrik-tion som induceres af histamin eller andre bronchial-konstrik-15 tive stoffer. Forbindelserne hører til den non-adrenergiske klasse af bronchodilatorer og de er værdifulde til administrering' til pattedyr og mennesker for behandling af astma, herunder bronchialastma, allergisk astma, bronchitis, pulmonar emphysema og andre kroniske åndedrætsygdomme som involverer bron-20 chospasmer. De foretrukne forbindelser som fremstilles ifølge opfindelsen er ved standard-farmakologiske testmetoder påvist at have højere bronchodilatorisk aktivitet end aminophyllin med reducerede kardiovaskulære og centralnerve-system bivirkninger.

25 De omhandlede forbindelser har den almene formel 7 7 145898 I IT)8 R0T^n^T^K/9 R1 eller er farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf, hvori R betegner C.-Ccalkyl og R1 er _ _

Ό ·“· O

Udtrykket "farmaceutisk acceptable syreadditionssalte" som an-05 vendt her, omfatter de salte, som dannes med mineralsyrer såsom saltsyre, hydrogenbromidsyre, hydrogeniodidsyre, salpetersyre, svovlsyre, fosforsyre o.1. samt organiske syrer såsom eddikesyre, citronsyre, pivalinsyre, mælkesyre, vinsyre, oxal- / syre, ravsyre, æblesyre o.l. Enhver non-toksisk syre som danner 10 et salt med de foreliggende forbindelser er egnet. Saltene fremstilles ved hjælp af i og for sig kendte konventionelle metoder.

De ovenfor nævnte C^-Cgalkylgrupper omfatter sådanne med enten ligekædede eller forgrenede carbonhydridkæder. Særligt foretrukne alkylgrupper er sådanne med fra 1-4 carbonatomer. Eksempler 15 på egnede C-^-Cgalkylgrupper omfatter methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, t-butyl, n-p:entyl, n-hexyl o.l.

De mest foretrukne forbindelser som er omfattet af formel I er sådanne hvori R er , n-C^H^-, iso-C^Hg-, n-CgH^ og n-CgH^· ‘Sådanne forbindelser udviste ved standard in vitro og in vivo tests for 20 bronchodilatorisk aktivitet forbedret styrke i forhold til ami-nopiyllin. De udviste også reducerede kardiovaskulære og centralnerve -sys tem bivirkninger sammenlignet med aminophyllin som referencemiddel.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at man 25 opvarmer en forbindelse med formlen 145698 δ NHg NHg i £ > i T \

Cl^^l eller «Α^ * II 111 med et alkalimetalalkoxid med formlen RO-alk, hvori alk betyder natrium eller kalium og R har den ovenfor anførte betydning, og eventuelt, når R^ i den fremstillede forbindelse er 05 cyclohexenyl, omdanner denne ved katalytisk hydrogenering til den tilsvarende forbindelse, hvori er cyclohexyl, og om ønsket omdanner en fremstillet forbindelse på i og for sig kendt måde til et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.

10 Forbindelserne med formel II og II' er hidtil ukendte og disses fremstilling samt omdannelse til forbindelser med formel I er belyst i følgende reaktionsskema.

145893

Cl 9 I Π M = Na, K, TI, Ag eller HgCl O- / mx O·

ν' N. X = Cl, Br, I

Cl Cl katalytisk ^ T |Τ\ ^J-V hydrogenering ^„Λ/ 6 ’ o ” NH, NH-, v V 5 NH, NH2 I * X w hA^n. .

|T katalytisk v JL J

hydrogenering ^ Cl ·Ν/^·Ν

Cl

O ” O

RO-alk RO-alk

v/ V

λ2 T2

N^N^N

I |[ y katalytisk \ i II A

RC/^N^N hydrogenering rq Ajp^r/ 0 · ό, 145698 10

Forbindelserne med formel I hvori er 2-cyclohexenyl kan fremstilles ud fra 2,6-dichlorpurin, en kendt forbindelse, ved hjælp af følgende trin i rækkefølge, hvor trin 1) - 3) belyser fremstillingen af udgangsmaterialet: 1) man omsætter 2,6-dichlorpurin med ca. et ækvivalent HgCl- + + + + ^ 05 eller en kilde for Na , K , TI eller Ag (d.v.s. et salt som dissocierer til dannelse af den ønskede ion) i et inert opløsningsmiddel til fremstilling af et metalderivat med formlen

Cl 1 11 cr5^ n

III

10 hvori M betyder HgCl, Na, K, TI eller Ag, 2) kondenserer iuetalderivat III i et i det væsentlige vandfrit inert organisk opløsningsmiddel med en 3-halogen-cyclohexen med formlen 0

IV

15 hvori X betyder chlor, brom eller iod til fremstilling af et mellemprodukt med formlen

Cl 1 JL> V (j 145698 11 3) underkaster mellemproduktet V aminering med NH^ i et inert opløsningsmiddel til fremstilling af et mellemprodukt med formlen NHg JTT>

II

/ og 05 4) opvarmer mellemproduktet II med et alkalimetal-alkoxid med formlen RO-alk, hvori alk betyder natrium eller kalium og R har den ovenfor anførte betydning i et inert opløsningsmiddel til fremstilling af den Ønskede frie baseforbindelse med formel I og# om ønsket, omdanner 10 forbindelsen på i og for sig kendt måde til et farmaceu tisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.

Forbindelser med formel I, hvori R^ er cyclohexyl kan fremstilles ved katalytisk hydrogenering af de tilsvarende forbindelser 1 hvor R = cyclohexenyl. Som eksempel på en egnet fremgangs-15 måde kan en forbindelse med formel I opløses i et egnet ikke-

Cl reducerende inert opløsningsmiddel (fx. methanol, ethanol, vand, vandig methanol, vandig ethanol) og dernæst hydrogeneres under anvendelse af en konventionel hydrogenerings-katalysator. Eksempler på egnede katalysatorer omfatter palla-20 dium "black", Pd-BaSO^, Pd-C, PtC^, Ru-C, Rh-C, Raney nikkel,

CuCrO, RhCl [P (CgH5) 3) 3 og RuCl [P (CgHj.) 3] 3· En foretrukken katalysator er palladium-på-kul. Selvom temperatur og tryk ikke er kritiske for hydrogeneringstrinet er fordelagtige resultater opnået under betingelser med stuetemperatur og atmosfærisk 25 tryk.

En alternativ fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formel I, hvori R^ betegner cyclohexyl omfatter følgende trin i rækkefølge; hvor trin 1) - 3) belyser fremstillingen af udgangsmaterialet: 145638 12 1) man omsætter 2,6-dichlorpurin med ca. et ækvivalent HgC^ eller en kilde for Na+, K+, Tl+ eller AG+ i et inert opløsningsmiddel til fremstilling af metal-derivatet III, 05 2) kondenserer metal-derivatet III i et i det væsentlige vandfrit inert organisk opløsningsmiddel med en cyclo-hexylhalid med formlen O"· IV' hvori X betyder chlor, brom eller iod til fremstilling 10 af et mellemprodukt med formlen 0 3) underkaster mellemproduktet V aminering med NH^ i et inert opløsningsmiddel til fremstilling af et mellemprodukt med formlen 13 145698 γ* λ,Ι.>

Cl II» Q i °9 4) opvarmer mellemprodukt II' med et alkalimetal-alkoxid med formlen RO-alk, hvori a3k betyder natrium eller kalium og R har den ovenfor anførte betydning i et inert 05 opløsningsmiddel til fremstilling af den ønskede frie baseforbindelse med formel I og, øm ønsket, omdanner forbindelsen på i og for sig kendt måde til et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.

Fremstillingen af 2,6-dichlorpurin-metalderivaterne med for-10 mel III kan ske ved hjælp af tidligere i litteraturen beskrevne fremgangsmåder.

Sølv-derivatet af 2,6-dichlorpurin kan fremstilles i henhold til den almene fremgangsmåde som omhandlet i J. Am. Chem.

Soc., 73, 1650 (1951), d.v.s. at 2,6-dichlorpurinen opløses 25 i kogende vand, opløsningen gøres basisk (fx. med vandig ammoniak) og en vandig opløsning af ca. et ækvivalent af et sølvsalt (fx. AgNO^) tilsættes til dannelse af det ønskede 2,6-dichlorpurin-sølvsalt.

Natriumsaltet af 2,6-dichlorpurin kan fremstilles i henhold 20 til den almene metode som er beskrevet i Chem. Pharm. Bull., 25, 1811 (1977), d.v.s. at 2,6-dichlorpurinen suspenderes i et inert opløsningsmiddel såsom dimethylformamid og ca. et ækvivalent af en natrimsalt såsom NaOH eller NaOCH^ tilsættes til dannelse af det ønskede salt in situ.

14 145593

Kaliumsaltet af 2,6-dichlorpurin kan fremstilles i henhold til de almene fremgangsmåde som er omhandlet i J. Org. Chem..·

Soc., 81, 197 (1959) og J. Org. Chem., 81, 2310 (1963), d.v.s. at 2,6-dichlorpurin opløses i et inert opløsningsmiddel såsom 05 dimethylsulfoxid eller dimethylformamid og en ækvimolær mængde af et kaliumslat såsom I^CO^ tilsættes til dannelse af det ønskede metalsalt in situ.

Thallium (I)-saltet af 2,6-dichlorpurin kan fremstilles i henhold til den almene fremgangsmåde som er omhandlet i J. Org.

10 Chem., 34, 1170 (1969), d.v.s. ved tilsætning af et thallium- (I)-salt såsom thallium (X)-ethoxid til en opløsning af 2,6-dichlorpurin i et inert opløsningsmiddel såsom ethanol.

Chlormerkurisaltet af 2,6-dichlorpurin kan fremstilles ved hjælp af metoder som tidligere har været anvendt for andre 15 puriner, se fx. J. Org. Chem., 22, 954-959 (1957). 2,6-di-chlorpurinen sættes til ca. et vægt-ækvivalent HgC^ i et inert vandigt eller vandigt organisk opløsningsmiddel, fx. en vandig C^-Cgalkano1 såsom 50% ethanol. En base såsom en vandig opløsning af et alkalimetalhydroxid (fx. NaOH, KOH) 20 tilsættes dernæst under omrøring. Der anvendes en tilstrækkelig mængde base til at frembringe en permanent let gul farve (p.g.a. HgO-dannelse) der indicerer reaktionstrinets afslutning. Chlormercurisaltet er det foretrukne metalderivat til anvendelse ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende op-25 findelse.

Metalderivatet III kondenseres med en 3-halogencyclohexen, fortrinsvis 3-bromcyclohexen, eller et cyclohexylhalogenid til frembringelse af henholdsvis mellemprodukt V eller V'. Reaktionsbetingelserne kan være i det væsentlige det samme 30 som anvendt i den konventionelle nukleosid-syntese [se fx.

J, Am. Chem. Soc., 81, 197-201 (1959)]. I en foretrukken udførelsesform sættes 3-halogencyclohexenen eller cyclohexyl-halogenidet, fortrinsvis i overskud, til forbindelse III i 15 145693 et inert i det væsentlige vandfrit organisk opløsningsmiddel såsom et aromatisk carbonhydrid (fx. benzen, xylen, toluen) og reaktionsblandingen opvarmes under tilbagesvaling til dannelse af mellemproduktet V eller V.

05 Aminering af det således dannede mellemprodukt til erstatning af 6-chlor-substituenten med en 6-aminogruppe kan udføres ved hjælp af konventionelle metoder [se fx. Chem. Fhar. Bull., 23, 759-774 (1975)]. I en foretrukken udførelsesform suspenderes mellemprodukt V eller V1 i et inert opløsningsmiddel 10 (fx. vand, methanol, ethanol), suspensionen mættes med gas- formig ammoniak (fortrinsvis ved en reduceret temperatur.såsom /W0°C) ©g den mættede reaktionsblanding opvarmes dernæst til en temperatur fra lige over stuetemperatur til kogepunktet for reaktionsblandingen. En mest foretrukken amineringsmetode 15 omfatter opvarmning af en opløsning af det passende mellempro- o dukt i methanolisk ammoniak i et lukket rør ved ca. 100 C.

Forbindelserne II eller II' underkastes dernæst en nukleofil substitueringsreaktionsomdannelse af 2-chlor-substituenten til en 2-alkoxygruppe, som angivet i krav l's kendetegnende del. I en 20 foretrukken udførelsesform opvarmes mellemproduktet II eller II' med en opløsning af et alkalimetal (lavere)alkoxid (RONa eller ROK, hvor R er C-^-Cgalkyl) i et inert opløsningsmiddel (fx. benzen, dime-thylformamid eller C^-Cgalkanol). Såfremt der som opløsningsmiddel anvendes en (lavere)alkano1 bør både alkanolen og al-25 koxidet som anvendes i dette trin, indeholde den samme "R"-substituent. Selvom temperaturen for reaktionen ikke er kritisk foretrækkes det at udføre substitueringen ved tilbagesvalingstemperatur for at maksimere udbyttet og minimere reaktionstiden. Ved reaktionens afslutning neutraliseres even-30 tuelt overskydende base i reaktionsblandingen med syre og den ønskede frie base udvindes såsom ved fordampning til tørhed.

145698 16

Frie baser med formel I, XI eller II' kan omdannes til farma-deutisk acceptable syreadditionssalte ved hjælp af konventionelle metoder. Således kan den frie base fx. opløses i et inert opløsningsmiddel, omsættes med ca. en ækvivalentvægt af 05 en egnet organisk eller uorganisk syre til dannelse af det ønskede salt og saltet udvindes såsom ved opløsningsfældning eller lyofilisering.

Til reduktion af bronchial konstriktion hos et menneske eller pattedyr som lider af denne tilstand administreres til indi-10 videt en effektiv bronchodilatorisk mængde af en forbindelse med den. almene formel I eller et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.

Forbindelserne kan anvendes i et farmaceutisk præparat på enhedsdosisform. Et sådant præparat omfatter som aktiv bestand-15 del en effektiv bronchodilaterende mængde af en forbindelse med formel I ovenfor eller et farmaceutisk acceptabelt syre-additionssait deraf, i blanding med en farmaceutisk acceptabel bærer eller fortyndingsmiddel. De foretrukne præparater er sådanne, hvori den aktive bestanddel er en forbindelse med 20 formel I nævnt ovenfor, som særlig foretrukken.

De omhandlede farmakologisk aktive forbindelser kan administreres enten som individuelle terapeutiske midler eller som blandinger med andre terapeutiske midler. De kan administeres alene, men indgives i almindelighed i form af farmaceutiske 25 præparater. Eksempler på sådanne præparater omfatter tabletter, hostepastiller, kapsler, pulvere, aerosol-sprays, vandige eller olieagtige suspensioner, siruper, elikserer og vandige opløsninger. Forbindelserne administreres fortrinsvis oralt, men kan også indgives ved inhalation eller injektion.

30 Arten af det farmaceutiske præparat og den farmaceutiske bærer eller fortyndingsmidlet vil naturligvis afhænge af den ønskede administreringsvej. Fx. kan orale præparater være i form af tabletter eller kapsler og kan indeholde konventionelle strækkemidler såsom bindemidler (fx. sirup, akacia, ge- 145698 17 latine, sorbitol, tragakant. eller polyvinylpyrrolidon), fyldstoffer (fx. laktose, slikker, majsstivelse, kalciumfosfat, sorbitol eller glycin), smøremidler (fx. magnesiumstearat, talkum, polyethylenglycol eller silika), opløsningsmidler 05 (fx. stivelse) eller befugtningsmidler (fx. natriumlauryl- sulfat). Orale flydende præparater kan være i form af vandige eller olieagtige suspensioner, opløsninger, emulsioner, siruper, elikseref osv. og kan før anvendelsen præsenteres som et tørprodukt til rekonstituering med vand eller en anden 10 passende bærer. Sådanne flydende præparater kan indeholde konventionelle tilsætningsstoffer såsom suspensionsmidler, smagsmidler, fortyndingsmidler eller emulsionsmidler. Til parenteral administrering eller inhalering kan anvendes opløsninger eller suspensioner af en forbindelse med formlen I med kon-15 ventionelle farmaceutiske bærere, fx. som aerosol-spray til inhalation, som en vandig opløsning til intravenøs injektion eller som en olieagtig suspension til intramuskulær injektion.

Forbindelserne med formlen I eller farmaceutiske præparater deraf kan administreres til pattedyr (inklusive især mennes-20 kelige patienter) i orale doser fra 0,1 til 20 mg/kg/dag aktiv bestanddel. Til intravenøs administrering til mennesker kan anvendes enkelt-doser fra 0,02-5 mg/kg/dosis aktiv bestanddel. Passende humane doser til aerosol administrering ligger i området mellem ca. 0,1-20'mg/dosis aktiv bestanddel.

25 Disse værdier er imidlertid kun illustrative , og det er selvfølgelig lægen, der i sidste ende vil bestemme den passende dosis for en bestemt patient på grundlag af faktorer såsom alder, vægt, alvor af symptomerne og arten af midlet, som skal administreres.

30 Repræsentative forbindelser fremstillet ifølge den foreliggende opfindelse underkastes sammenlignende tests med aminophyllin til bestemmelse af den broncho dilatoriske aktivitet in vitro og in vivo og den hypotensiske aktivitet in vivo (en måling af kardiovasku-lære bivirkninger).

145698 18

Bronchodilatorisk aktivitet in vitro

Trachea-kæder af marsvin præparedes efter metoden beskrevet af A. Akcasu i Arch. Int. Pharmacodyn. Ther., 122, 201 (1959). Reaktionen på hver test-forbindelse optegnedes ved hjælp af 05 Magnus-metoden og udtryktes som en procentdel af maximum- .reaktionen opnået med 0,1 mcg./ml isoproterenol før hvert eksperiment. Den bronchodilatoriske aktivitet (in vitro) af aminophyllin og testforbindelserne udtrykkes i nedenstående tabel X som en EC-værdi (koncentration in mcg./ml som frem-10 bringer en afspænding som er 50% af maximum-reaktionen til 0,1 mcg./ml isoproterenol).

Bronchodilatorisk og hypotensisk aktivitet in vivé Den bronchodilatoriske aktivitet af aminophyllin og testforbindelserne in vivo bedømtes på grund af en forøgelse af det intra-15 tracheale tryk (ITP) i marsvin gennem en modifikation af. metoden beskrevet af James i J. Pharm. Pharmac., 21,379 (1969).

Kanyler førtes til trachea hos anæstetiserede marsvin og ITP optegnedes på en polygraf ved kunstig ventilering. Det arterielle blodtryk (ABP, måling af hypotensisk aktivitet) måltes 20 også ved eksperimentet. Data opnåedes både for intravenøs og intraduodenal administrering. Tabel I viser den bronchodilatoriske aktivitet (ITP) in vivo for hver forbindelse som ED,-_-værdi (dosis img/kg resulterende i en 50%ig formindskel-o0 se af intratracheal tryk) og den hypotensiskeaktivitet (ABP) 25 som ED2Q-værdi (dosis i mg/kg, som reducerer det arterielle blodtryk med 20%).

Separation af bronchodilatoriske og kardiovaskulære virkninger

Til adskillelse mellem den ønskede bronchodilatoriske aktivi-30 tet og den uønskede kardiovaskulære (hypotensiske) virkning af test-forbindelserne beregnedes forholdet mellem hypotensisk ED_n/bronchodilatorisk ED-._ som vist i tabel I. Forbin-ZU DU

delserne med de højeste ABP/ITP forhold viste den største adskillelse af kardiovaskulære bivirkninger fra bronchodila-35 torisk aktivitet.

19 145698 Οι 4J Η °> °.

Μ S > 5 Ift Ch 04 ι|Ι 1 H s ,S ΐ '4j ns & ni

Φ -P

3^3 o-j *ll +> to S c \ · -=f Ό (Upra <u->. oo oo cvi ‘ s S is g H h w ^ -S35^ W C S <d •Η *H Ό £t •a +>

•H *H rH C

HoH

i* 3 £ t ‘d 31 +j +j +! ,·> · w ·*» <S w θ' "ni "ni Φ rt ^ ^ ri ri OH tn O fH ^ II II II > gag >

Η H 3J c H

CU

Eh 00 σ\ 00 H · \ « w n w in ^ w

Pj H VO I · I Η Λ I

,, W .=*· *\

lii < H

id ίηΊ jj in · H .0 5 S Γ- > “> Ί o o » p 3 u b|S s 0J ^ ,-Λ ΓΛ ίΛ 4 N Λ β) Λ Μ Η ^ «Ρ -1 ΑΛΑ ΛΑ" ω j> Φ id ο*·~ η ·Ρ jj ιη · ο "SR in ϊ ^ * . *> Α Ο (ΛΡΛνο (Λ Φ·Η gl ° ° ° A A jv ° Ο Ο ίΛ ΚΛ ΓΛ Ο Βθ αΛΛ ΑΛΑ ο οΗ y ο in - 2 -ρ 3 ε vom co c— ιη _ ρ -Η \ C00JCUH co οι d· η η Μ > » /-{ Ο Ο ίΛ CO =* Ο Ο Ο ^ m Ό <ΰ Ο t£ ...... .....

i« C Η Ο Ο Ο Ο Ο Η Η Ο Ο Ο Ο Ο m νο ΗΗ _£ Λ f)H'0.....ο-···· ώΐ)Η-ΐ S—(\ Λ* « β 5 Η «——( u - ; Ο Ο Η r>n^v ΟΛΟΟ <J\ Ο Ο >> r « OCKHlA ΟΟΚΗίΛ Λ

Km Ν- σ\ η η t- σ» -=»· η η ρ.

Ο ΪΕ W Ο W « Ο W Κ Ο κ κ ο in to 4- ι in ο in tn =r ι in ιο c rsooouu κ o o o o υ h CM I I Μ I I CM i I ιο I I g OCC-HC« O CC-HCfi ej 145698 20

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere i de følgende eksempler.

Eksempel 1 9-'(2-cyclohexenyl) -2-n-propoxy-9H-adenin rry 05

n-CjE^O

A. HgCl-salt af 2,6-dichlorpurin

Cl rV\ clA,AAgci

En opløsning af 7/38 g (27,2 mmol) HgCl^ i 100 ml 50% ethanol omrørtes og der tilsattes 5,15 g (27,2 mmol) 2,6-dichlor-10 purin. Efter 5 minutter sattes 10% NaOH (VLQ ml) til opløsningen indtil farvereaktionen standsede (gul p.g.a. HgO).

Blandingen omrørtes i 30 minutter og bundfaldet frafiltre-redes, vaskedes i denne rækkefølge med vand, ethanol og di-ethylether og tørredes til opnåelse af 6,91 g (64% udbytt^) 15 af titel-saltet.

B. 9-(2-cyclohexenyl)-9H-2,6-dichlorpurin 21 U5698

Cl 0

En blanding af 6,91 g (16,3 mmol) af produktet af trin A og 6,91 g "Celite" (diatoméjord) i benzen inddampedes azeotropt til fjernelse af fugtighed. Til den resulterende blanding 05 sattes 100 ml tør xylen og 4 ml (339 mmol) 3-bromcyclohexen. Blandingen tilbagesvaledes i 2,5 timer under omrøring, afkøledes og filtreredes. Filtreringsmassen vaskedes med en lille smule CHCl^. Filtratet og vaskevæsken inddampedes til tørhed. Remanensen opløstes i 50 ml benzen og opløsningen 10 vaskedes med 20% KI-opløsning (3 gange) og vandig NaCl (én gang) og tørredes med Na2S0^. Filtratet inddampedes og remanensen rensedes ved hjælp af kromatografi på silikagel til opnåelse af 3,87 g (88%) af titel-mellemproduktet, „ smp. 133-135°C. IR(KBr): 2930, 1590, 1565, 1405, 15 1355, 1315, 1210, 875, 835 cm-1. UV: 276 nm (ε 9500).

IuciX

NMR (CDC13): 62,00 (6H, m), 5,60 (1H, m), 6,00 (2H, m) , 8,11 (IH, s).

Anal. ber. for c1iH10N4CL2: C' 49'09' H' 3'75' N' 20,82, Cl, 26,35.

20 Fundet : C, 48,54, H, 3,48, N, 20,34, Cl, .25,54.

C. 2-chlor-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin 11¾ 22 145698 ''r \ 0

Ammoniakgas bobledes til en blanding af 2,8 g (10,3 mmol) 9-(2-cyclohexenyl)-9H-2,6-dichlorpurin i 50 ral CH^OH ved 0°C indtil gas-absorptionen standsede. Blandingen opvarmedes ved 05 100°C i 4 timer i et forseglet rør, afkøledes dernæst og kon centreredes til afsætning af krystaller, som frafiltreredes til opnåelse af 2,39 g af titel-forbindelsen.

Et yderligere udbytte (112 mg) opnåedes fra filtratet ved kromatografisk adskillelse på silikagel. Total udbytte = 10 2,50 g (96%), smp. 195-197°C. IR(KBr) : 3120, 1640, 1590, 1320,

1300, 1225, 1190, 920 cm"1. UV: 266 nm (ε14600), NMR

ItlclX

(CDC13): δ 0,89 (IH, m) , 1,26 (IH, m) , 2,00 (4H, m) , 5,30 (IH, m), 6,00 (2H, m) , 8,11 (IH, s).

D. 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-propoxy-9H-adenin 15 En opløsning af 2,4 g (9,2 mmol) 2-chlor-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin i 60 ml IN natrium-n-propoxid i n-propanol opvarmedes under tilbagesvaling natten over under en nitrogen-atmosfære. Reaktionsblandingen hældtes i is-vand indeholdende en tilstrækkelig mængde eddikesyre til neutralisering af det 20 overskydende alkoxid. Blandingen inddampedes i vakuum.

Remanensen opløstes i CHCl^ under omrøring. CHC1^ekstrakterne vaskedes med vand, tørredes med Na^O^ og inddampedes til opnåelse af 2,35 g (90%) af titel-produktet, smp. 157-159°C. IR(KBr): 3450, 3110, 1630, 1585, 25 1470, 1390, 1335 cm"1. UV: λ“®°Η 266 nm (ε13200). NMR(CDC1,):

IUQ.X J

δ 1,03 (3H, t, 7Hz), 1,80 (8H, m), 4,15 (2H, t, J=7Hz), 5,03 (2H, m), 5,88 (IH, m), 6,56 (2H, m) * 7,4 (IH, s).

145698 23

Eksempel 2 9-cyclohexyl-2-n-propoxy-9H-adenin NHp 1 I ) η-Ο^ΗγΟ ^ir

En opløsning af 2,21 g (7,8 mmol) 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-05 propoxy-9H-adenin i 30 ml 90%ig ethanol hydrogeniseredes natten over med 250 mg 10%ig Pd-C og filtreredes dernæst.

Filtratet inddampedes i vacuum til opnåelse af en remanens som udkrystalliseredes fra ethylacetat-n-hexan. Udbytte 1,85 g (76%), smp. 148-150°C. IR(KBr): 3510, 2930, 1670, 10 1640, 1595, 1405 cm”1. UV: 252 nm U8360), 269 nm (e 13200). NMR(CDC13): δΐ,03 (3H, t, J=7Hz), 1,80 (12H, m) , 4,20 (2H, t, J=7Hz), 4,35 (IH, m), 6,02 (2H, s), 7,55 (IH, s).

Anal. ber. for C14H21N50: C, 61,07, H, 7,69, N, 25,43.

Fundet : C, 61,07, H, 7,89, N, 25,48.

15 Eksempel 3 9-(2-cyclohexenyl)2-ethoxy-9H-adenin NEj rx> 0 145698 24

En blanding af 2-chlor-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin (310 mg, 1,24 mmol) og en opløsning af natriumethoxid i ethanol (0,25-1N, ~Ί0 ml) tilbagesvaledes natten over under en nitrogenatmosfære. Reaktionsblandingen ekstraheredes med ethylacetat 05 (20 ml) . Ekstrakterne vaskedes med vand, tørredes over Na^O^ og filtreredes. Filtratet inddampedes og remanensen underkastedes dernæst en silikagel-kromatografi (7 g silikagel, elueret med 1% CH^OH-CHCl^ til opnåelse af titel-produktet med 93% udbytte, smp. 67-72°C. IR 10 (KBr): 3320, 2940, 1640, 1595, 1465, 1410, 1385, 1340 cm"1.

UVs 243 nm (ε8400) , 269 nm (ε12600). NMR(CDCl-): 1,44

IuaX O

(3H, t, J=7Hz), 2,00 (6H, m), 4,45 (2H, q, J=7Hz), 5,20 (IH, m), 5,95 (2H, m) , 6,16 (2H, s), 7,62 (IH, s).

Eksempel 4 .

15 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-butoxy-9H-adenin 15¾ o

Fremgangsmåden ieksempel 3 gentoges med undtagelse af at natriumethoxidet i ethanol-opløsning erstattedes med en ækvivalent mængde af natrium-n-butoxid i n-butanol. Titel-produk-20 tet (som hygroskopisk pulver) fremstilledes med 40% udbytte.

IR(KBr): 3310, 3160, 2930, 1640, 1595, 1410, 1345 cm-1. UV: λ 254 nm (ε8300) , 270 nm (ε11500) . NMR(CDC1J : 1,80 (13H, m), 4,23 (2H, t, J= 7Hz), 5,02 (IH, m), 5,84 (2H, m), 6,06 (2H, s), 7,58 (IH, s).

25 Eksempel 5 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-pentyloxy-9H-adenin 145698 25 n“C5Hll° \ΛΚ/ o

Fremgangsmåden i eksempel 3 gentoges med undtagelse af at natriumethoxidet i ethanolopløsning erstattedes af en ækvivalent mængde natrium-n-pentyloxid i n-pentanol. Titel-pro-05 duktet (som en hygroskopisk pulver) fremstilledes med 48% udbytte. IR (rent): 3500, 3320, 2970, 1635, 1590, 1500, 1465, 1400, 1335 cm"1. UV: XEt0H 253 nm (ε8400), 269 nm (ε12500).

max NMR(CDC13): 1,80 (15H, m), 4,25 (2H, t, J= 6,5 Hz), 5,07 (IH, m), 5,89 (2H, m) , 6,08 (2H, s), 7,56 (IH, s).

10 Eksempel 6 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-hexyloxy-9H-adenin

NEU

»¥iAiX

0

Fremgangsmåden i eksempel 3 gentoges med undtagelse af at natriumethoxidet i ethanolopløsning erstattedes med en ækvi-15 valent mængde natrium-n-hexyloxid i n-hexanol. Titel-produktet (som en hygroskopisk pulver) fremstilledes med 26% udbytte.

IR(rent): 3500, 3320, 1635, 1590, 1460, 1395, 1340 cm”1.

UV: 252 nm (ε6900), 268 nm (ε10200). NMR(CDC1 ): 1,50 145698 26 (17H, ία) , 4,25 (2Η, t, J=6Hz), 5,08 (IH, m) , 5,86 (2H, m) , ' 6,01 (2H, s), 7,60 (IH, s).

Eksempel 7 9-(2-cyclohexenyl)-2-isobutoxy-9H-adenin NHp rV> o5 iso-CjjKgO .

u

Fremgangsmåden i - eksempel 3 gentoges med undtagelse af at natriumethoxidet i ethanolopløsning erstattedes med en ækvivalent mængde natrium-isobutoxid i isobutanol. Titel-produktet fremstilledes med 66% udbytte, smp. 132-135°C. IR(rent): 10 3025, 1630, 1590, 1460, 1395, 1375, 1350 cm"1. UV: 253

Itlcl2C

nm (ε8600), 269 nm (ε13000). NMR(CDC13): 0,98 (6H, d, J=6,5 Hz), 1,90 (7H, m), 3,96 (2H, d, J=6,5 Hz), 5,02 (IH, m), 5,83 (2H, m), 6,18 (2H, s), 7,50 (IH, s).

Eksempel 8 15 2-ethoxy-9-cyclohexyl-9H-adenin NHp &>

CÆO I

ό 145698 27

En blanding af 9-(2-cyclohexenyl)-2-ethoxy-9H-adenin (0,5 mmol) og 10% palladiura-på-trækul (35 mg) i ethanol (6 ml) hydrogeneredes ved stuetemperatur og under atmosfærisk tryk. Reaktionsblandingen filtreredes og filtratet inddampedes. Re-05 manensen lyofiliseredes til opnåelse af titel-produktet med 40% udbytte, smp. 134-136°C. IR(KBr): 3280, 2995, 1705, 1615, 1525, 1415, 1310, 1010 cm"1. UV: λΕ^°Η 253 nm (ε6800) , 269 ΙΠαΧ nm (ε, 10200). NMR(CDC13): 1,44 (3H, t, J=7Hz), 2,00 (10H, m), 4,45 (2H, q, J=7Hz), 4,50 (IH, m) , 8,07 (IH, s), 8,60 10 (2H, s).

Eksempel 9 2-n-butoxy-9-cyclohexyl-9H-adenin fa

fO

η-°4Εο°/^Ν·Χ^'ί|

O

Fremgangsmåden :± eksempel 8 gentoges med undtagelse af at 15 9-(2-cyclohexenyl)-2-ethoxy-9H-adeninen erstattedes med en ækvivalent mængde af 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-butoxy-9H-adenin. Titel-produktet fremstilledes med 47% udbytte, smp. 138-141 °C. IR(KBr): 3300, 2930, 1660, 1640, 1590, 1405, 1345 cm-1.

UV: AEt0H 253 nm (ε7600), 269 nm (ε11500). NMR(CDCl-): 1,50 ITlclX o 20 (17H, m), 4,30 (IH, m), 4,31 (2H, t, J=6Hz), 6,40 (2H, s), 7,67 (IH, s).

Eksempel 10 2-n-pentyloxy-9-cyclohexyl-9H-adenin 145698 28 NBg 11) n-c5Hl1°^^N^-N/ ό

Fremgangsmåden i eksempel 8 gentoges med undtagelse af at 9-(2-cyclohexenyl)-2-ethoxy-9H-adeninen erstattedes med en ækvivalent mængde af 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-pentyloxy-9H- 05 adenin. Titel-produktet fremstilledes med 90% udbytte, smp.

64-68°C. IR(rent): 3500, 3320, 1635, 1590, 1460, 1395, 1340, 1325, 1265 cm-1. UV: 253 nm (ε10900), 269 nm (ε16800).

max NMR(CDC13): 1,50 (19H, m), 4,20 (IH, m), 4,26 (2H, t, J=6,5 Hz), 6,25 (2H, s), 7,56 (IH, s).

10 Eksempel 11 2-n-hexyloxy-9-cyclohexyl-9H-adenin NHp Λ> o

Fremgangsmåden i eksempel 8 gentoges med undtagelse af at 9-(2-cyclohexenyl)-2-ethoxy-9H-adeninen erstattedes med en 15 ækvivalent maeagde af 9- (2-cyclohexenyl) -2-n-hexyloxy-9H-adenin.

Titel-produktet fremstilledes med 90% udbytte, smp. 57-60°C.

IR(rent): 3500, 1635, 1595, 1500, 1465, 1420, 1400 cm”1. UV: 253 ran (ε7200), 270 nm (ε10900). NMR(CDC1,): 1,5 (21H, max o 145698 29 m), 4,25 (2H, t, J=6,5Hz), 4,40 (IH, m), 6,07 (2H, s), 7,54 (IH, s).

Eksempel 12 2-isobutoxy-9-cyclohexyl-9H-adenin KHg iso-C4HQ0 05 *

Fremgangsmåden i- eksempel 8 gentoges med undtagelse af at 9-(2-cyclohexenyl)-2-ethoxy-9H-adenin erstattedes med en ækvivalent mængde af 9-(2-cyclohexenyl)-2-isobutoxy-9H-adenin. Titel-produktet fremstilledes med 60% udbytte, smp. 123-134°C.

10 IR(rent): 3320, 3160, 2940, 1635, 1590, 1395, 1375 cm-1. UV: AEt°H 253 HH (ε7000), 269 nm (sllOOO). NMR(CDCl-): 1,05 (6H,

ITlcLX O

d, J=6,5 Hz), 1,90 (11H, m), 4,05 (2H, d, J=6,5 Hz), 4,24 (IH, m) , 6,14 (2H, s), 7,55 (IH, s).

Eksempel 13 15 9-(2-cyclohexenyl)-2-methoxy-9H-adenin Γ2 1 1 ) o 145698 30 Når. fremgangsmåden i eksempel 4 gentoges og natriumetho-xidet i ethanol erstattedes med en ækvivalent mængde natrium-methoxid i methanol/ fremstilledes titel-produktet, smp.235-240°C.

Eksempel 14 2-methoxy-9-cyclohexyl-9H-adenin NHg ! Γ)

05 CHjO

o Når fremgangsmåden i. eksempel 8 gentoges og 9-(2-cyclohexe-nyl)-2-ethoxy-9H-adeninen erstattedes med en ækvivalent vægt af 9-(2-cyclohexenyl)-2-methoxy-9H-adenin/ fremstilledes titel-produktet, smp. 233-236°C.

10 Eksempel 15 2-n-butoxy-9-cyclohexyl-9H-adenin (alternativ fremgangsmåde) rr> 0 145698 31 A. 9-cyclohexyl-9H-2,6-dichlorpurin

Cl 11) o Når fremgangsmåden i ' eksempel IB gentoges og 3-bromcyclo-hexenen erstattedes med en ækvivalent mængde cyclohexylbro-05 mid, fremstilledes titel-mellemproduktet.

B. 2-chlor-9-cyclohexyl-9H-adenin ό Når fremgangsmåden i eksempel 1C gentoges og 9-(2-cyclohexe-nyl) -9H-2,6-dichlorpurin erstattedes med en askvi valent mæng-10 de 9-cyclohexyl-9H-2/6-dichlorpurin, fremstilledes titelmellemproduktet.

C. 2-n-butoxy-9-cyclohexyl-9H-adenin Når fremgangsmåden i eksempel 4 gentoges og 2-chlor-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin erstattedes med en ækvivalent mæng-15 de 2-chlor-9-cyclohexyl-9H-adenin, fremstilledes titel-produktet j som var identisk med det i eksempel 9 fremstillede.

145698 32

Eksempel 16 2-n-butoxy-9-cyclohexyl-9H-adenin (alternativ fremgangsmåde) A. 2-chlor-9-cyclohexyl-9H-adenin 05 En blanding af 2-chlor-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin^ (252 mg, 1,0 mmol) i ethanol hydrogeneredes med 10% palladium-på-træ-kul (93 mg) ved stuetemperatur og under atmosfærisk tryk. Reaktionsblandingen filtreredes og filtratet inddampedes. Remanensen rensedes med silikagel-kromatografi til opnåelse af 10 139 mg (55%) af titel-forbindelsen, smp. 206-209°C. IR (KBr):

3360, 3150, 2905, 1645, 1595, 1570, 1540 cm"1. UV: lC2H5OH

max 267 nm (ε15.300). NMR(CDC13): S 1,80 (10H, m), 4,47 (IH, m), 6,23 (2H, s), 7,82 (IH, s).

1. Fremstillet af 2,6-dichlorpurin i.h.t. fremgangsmåden i 15 eksempel 1.

B 2-n-butoxy-9-cyclohexyl-9H-adenin Når fremgangsmåden i eksempel 4 gentoges og 2-chlor-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin erstattedes med en ækvivalent mængde 2-chlor-9-cyclohexyl-9H-adenin, fremstilledes titel-produktet, som var identisk med det i eksempel 9 fremstillede.

20

Claims

145698

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af 2-alkoxyadeninderi-vater med den almene formel; 11¾ i l) R?· hvori R betyder C1-Cgalkyl og R1 betyder -/ \ eller y=\ '— 05 -< > i eller et farmaceutisk acceptabelt syreadditions- salt deraf, kendetegnet ved, at man opvarmer en forbindelse med formlen o o II 11’ med et alkalimetalalkoxid med formlen RO-alk, hvori alk bety-10 der natrium eller kalium og R har den ovenfor anførte betydning, og eventuelt, når R1 i den fremstillede forbindelse er cyclohexenyl,omdanner denne ved katalytisk hydrogenering til den tilsvarende forbindelse, hvori R·*· er cyclohexyl, og om ønsket omdanner en fremstillet forbindelse på i og for