DK142546B

DK142546B - Analogifremgangsmåde til fremstilling af 2,6-diamino-9-alkoxymethyl-purinderivater eller salte deraf.

Info

Publication number: DK142546B
Application number: DK88977AA
Authority: DK
Inventors: Howard John Schaeffer
Original assignee: Wellcome Found
Priority date: 1976-03-01
Filing date: 1977-03-01
Publication date: 1980-11-17
Also published as: BE851974A; JPS52111594A; ZA771219B; IL51572A; AT360552B; FR2342971A1; FR2342971B1; SE7702231L; DK88977A; AU506227B2; JPS6222994B2; ES456407A1; DK142546C; ES467943A1; NZ183468A; CH632759A5; CH629807A5; GB1569393A; IL51572A0; HU180321B

Description

OD FREMLÆGGELSESSKRIFT 142546 (¾

\RB

DANMARK <51) lnt·Cl3 G 07 D ^73/i6 ± dji/idtøt (21) Ansøgning nr. 889/77 (22) Indleveret den 1. mar. 1977 f(24) Løbedeg 1. mar. 1977 (44) Ansøgningen fremlagt og fremlæggelsssskriftet offentliggjort den 1 7 · nOV. 1 980

DIREKTORATET FOR

PATENT-OG VAREMÆRKEVÆSENET (30) Prioritet begæret fra den

1. mar. 1976, 662899, UB

(71) THE WELLCOME FOUNDATION LIMITED, 183-192 Euston Road, London N.W.1, GB.

(72) Opfinder: Howard John Schaeffer, 3208, Hawthorne Avenue, Richmond,

Virginia, US.

(74) Fuldmægtig under segens behandling:

Internationalt Patent-Bureau,_^___ (54) Analogifremgangsmåde til fremstilling af 2, 6-diatnino-9-alkoxymethyl-purinderivater eller salte deraf.

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af 2,6-diamino-9-alkoxymethyl-purinderivater med formlen I (se krav 1) hvori betegner et hydrogenatom eller al-kanoyl med 1-4 carbonatomer, benzoyl eller naphthylcarbonyl, og n betegner 2 eller 3, eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf.

De hidtil ukendte -forbindelser med formlen I som defineret i krav 1 har antiviral virkning over for forskellige familier af DNA- og RNA-virus in vitro. Forbindelserne er navnlig særligt aktive over for vaccinia og herpes vira, omfattende simplex, zoster og varicella, hos pattedyr, der fremkalder sådanne sygdomme som for eksempel herpetisk keratitis hos kaniner og herpetisk encephalitis hos mus.

142546 2

Den mest foretrukne forbindelse er 2,6-diamino-9-[2-(2-hy-droxyethoxy)-ethoxymethyl]-purin og navnlig på grund af dens særligt høje antivirale virkning over for Herpes eller Vaccinia.

Salte, der er særligt hensigtsmæssige for terapeutisk anvendelse, er salte af farmaceutisk acceptable organiske syrer, såsom mælkesyre, eddikesyre, æblesyre eller p-toluensulfonsyre, såvel som salte af farmaceutisk acceptable mineralsyrer, såsom saltsyre, phos-phorsyre eller svovlsyre. Når R er hydroxy, kan der anvendes farmaceutisk acceptable alkalimetalsalte, navnlig natriumsaltet. Andre salte kan også fremstilles og derefter ved sædvanlige dobbeltkomponeringsmetoder omdannes til salte, der er direkte egnede til behandling af virale infektioner hos pattedyr.

Det bemærkes, at det fra beskrivelsen til dansk patentansøgning nr. 3926/75 er kendt, at forbindelser, som er nært beslægtede med ovennævnte forbindelser med formlen I, har antivirale egenskaber. Imidlertid har forbindelserne med formlen I fordelagtige egenskaber i forhold til disse kendte forbindelser, som vil gøre dem mere egnede ved den praktiske anvendelse.

Dette skyldes navnlig, at forbindelserne, som fremstilles efter fremgangsmåden ifølge nærværende ansøgning, har en væsentlig bedre opløselighed i vand end de nævnte kendte forbindelser. Således er opløseligheden for den mest foretrukne af de fra ovennævnte ansøgning kendte forbindelser, nemlig 9-(2-hydroxyethoxymethyl)-gua-nin, mindre end 10 mg/ml i vand, medens forbindelsen 2,6-diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy)-ethoxymethyl]-purin har en opløselighed i vand større end 50 mg/ml og derfor ved oral administrering i højere grad vil kunne absorberes fra fordøjelseskanalen end førstnævnte kendte stof. Alene herfor kan der administreres mindre doser af forbindelserne, som fremstilles efter fremgangsmåden ifølge opfindelsen, til opnåelse af den samme terapeutiske effekt, som ville kræve væsentligt større doser af de kendte mere tungtopløselige forbindelser.

Hertil kommer, at forbindelsen 2,6-diamino-9-[2-(2-hydroxy-ethoxy)-ethoxymethyl]-purin har den overraskende fordel i forhold til 9-(2-hydroxyethoxymethyl)-guanin, at den i modsætning til sidstnævnte har god aktivitet mod vacciniavirus. Dette fremgår af det nedenfor beskrevne plaque-hæmningsforsøg.

Disse forsøg blev udført med VERO-celler, idet sammenhængende 3 142546 monolag af celler blev inficeret med en tilstrækkelig mængde virus til at fremkalde dannelse af en sammenhængende spredning af plaque. Efter tilføjelse af et fast overlag blev en skive filtrerpapir imprægneret med en opløsning af prøveforbindelsen (normalt 50 pg/ski-ve) anbragt centralt på overlaget. Kulturerne blev inkuberet ved 37°C i 96-120 timer i en atmosfære med 5% carbondioxid. Efter dette tidsrum blev cellerne fikseret med 10% formalin og derpå farvet med 0,05% methylviolet. Resultaterne vurderes afhængigt af diameteren af plaque-hæmningszonen som følger: ++ Hæmningszonens diameter større end 25 mm + Hæmningszonens diameter 5-25 mm + Hæmningszonens diameter 0-5 mm Negativt resultat.

Ved denne prøve gav 2,6-diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy)-etho-xymethyl]-purin resultatet ++, medens den kendte forbindelse 9-(2-hydroxyethoxymethyl)-guanin gav resultatet -.

Fremgangsmåden er ifølge opfindelsen ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del anførte.

En foretrukken udførelsesform for fremgangsmåde a) er ejendommelig ved, at M og G hver betegner en azidogruppe, idet forbindelsen I i dette tilfælde let kan opnås ved at reducere begge azi-dogrupper under anvendelse af en egnet katalysator, såsom palladium.

En tilsvarende reaktion kan anvendes, når kun et af symbolerne M og G betegner en azidogruppe. Når M betegner et chloratom, kan dette udskiftes med en aminogruppe ved aminolyse. Disse fremgangsmåder, sammen med andre velkendte fremgangsmåder, kan findes i "Heterocyclic compounds - Fused Pyrimidines Part II Purine ed. by D.J.Brown (1971) published by Wiley-Interscience".

De forbindelser, der indeholder precursorer for aminogrupper-ne og/eller halogenatomet, og som kan omdannes til forbindelser med formlen I, kan betragtes som mellemprodukter ved syntesen af disse forbindelser og kan fremstilles analogt ved fremgangsmåde c). Alternativt kan,når i formlen I K*· er hydrogen, mellemproduktsforbindelser med formlen II fremstilles analogt ved fremgangsmåde c) efterfulgt af fjernelse af en beskyttende gruppe E ved fremgangsmåde f).

En foretrukken udførelsesform for fremgangsmåde b) er ejendommelig ved, at både 2- og 6-aminogruppen er blokeret med en tri-alkylsilylgruppe, og at denne blokerende gruppe fjernes ved solvo-lyse eller alkoholyse, idet den ønskede forbindelse herved lader sig fremstille i godt udbytte. Udgangsmaterialet ved denne udførelses- 4 142546 form vil være produktet fra kondensationen af en trialkylsilyleret purin og en halogenmethylether eller acyloxymethoxyether beskrevet i fremgangsmåde c). Sådanne blokerende grupper er meget labile og kan fjernes ved solvolyse med alkoholisk eller vandig ammoniak eller ved alkoholyse.

En anden foretrukken udføreisesform for fremgangsmåde b) er ejendommelig ved, at både 2- og 6-aminogruppen er blokeret med en aktiveret acylgruppe eller en benzyloxycarbonylgruppe, hvilke blokerende grupper fjernes ved reduktiv spaltning. Som eksempler på aktiverede acylgrupper, der kan blokere aminogrupperne ved denne udførelsesform, kan nævnes trihalogenacylgrupper, f.eks. trichlorace-tylgrupper, der sammen med de aminogrupper, som de blokerer, danner trichloracetamidogrupper. Disse grupper kan ligesom benzyloxycarbo-nylgrupperne fjernes ved reduktiv spaltning til opnåelse af forbindelsen I i godt udbytte.

Alternativt bliver et metalsalt, såsom mercurichloridsaltet eller thallosaltet af en purin, kondenseret med en halogenmethylether som ovenfor defineret,! et opløsningsmiddel af den aromatiske organiske type. Forud for fremstilling af saltet bliver imidlertid alle reaktive substituenter på purinen fortrinsvis blokeret, og det sidste trin ved denne fremgangsmåde er derfor fjernelse af blokerende grupper fra de blokerede substituenter.

Ved fremgangsmåde c) er det bortgående atom eller den bortgående gruppe A fortrinsvis en reaktiv rest af en organisk eller uorganisk syre og kan derfor være et halogenatom eller en sulfonatgrup-pe, og Q er hydrogen eller metalsalt, for eksempel natrium eller thallium. Den foretrukne fremgangsmåde omfatter kondensationen af en purin med en halogenmethylether med den almene formel: ZCHo.0(CHo.CHo.0) R1 z z z n hvor Z er halogen, og n er et helt tal fra 2 til 10, for eksempel 2-(2-benzoyloxyethoxy)-ethoxymethylchlorid, i et stærkt, polært opløsningsmiddel, såsom dimethylformamid (DMF), og i nærværelse af en protonacceptor, såsom en base, f.eks. natriumhydrid. Reaktionen gennemføres fortrinsvis ved stuetemperatur over en langvarig tidsperiode, dvs. at adskillige timer eller endog dage kan kræves for at opnå rimelige udbytter.

En foretrukken udførelsesform for fremgangsmåde d) er ejendommelig ved, at det acylerende middel er en carboxylsyre, et ali-fatisk eller aromatisk anhydrid, et alifatisk eller aromatisk syre- U2546 5 halogenid eller et blandet carbonisk-carboxylisk anhydrid, idet disse forbindelser er egnede til indførelse af den ønskede acylgruppe. Forbindelser med formlen I, hvori R1 er hydrogen, kan fremstilles ved fremgangsmåde a), b) eller e).

Ved fremgangsmåde e) udføres den base-katalyserede hydrolyse af en acylgruppe fortrinsvis under anvendelse af en primær eller sekundær amin, et alkoholisk alkoxid eller et vandigt eller alkoholisk hydroxid, såsom natriumhydroxid, idet de ønskede forbindelser herved fås i godt udbytte. Fjernelse af arylmethylgrupper opnås ved hydrogeno lyse under anvendelse af hydrogen og en metal-katalysator, såsom palladium, og det samme er tilfældet med fjernelsen af triphe-nylmethyl, der også kan fjernes ved syre-katalyseret hydrolyse.

Det blokerede udgangsmateriale med formlen V kan fremstilles ved kondensation af en passende blokeret purin, der har en yderligere blokerende gruppe i 9-stillingen, med en forbindelse med formlen VII:

x.o.ch2o.(ch2.ch2o) X1 VII

hvor X og X^ er blokerende grupper, som ovenfor defineret, og kan være ens eller forskellige. En sådan kondensation er syre-katalyseret. Den blokerede purin fremstilles ved at behandle den pågældende purin med et syreanhydrid eller andre acyleringsmidler, såsom syreha-logenider. Forbindelser med formlen Vil kan fremstilles ved at behandle 1,3-dioxolan med et syreanhydrid under anvendelse af en syrekatalysator, såsom p-toluensulfonsyre. Syreanhydridet kan være et blandet anhydrid, hvorved der fremstilles en forbindelse med formlen VII, hvor X og X^ er forskellige.

Den under f) nævnte basiske hydrolyse kan i almindelighed opnås ved opvarmning med vandig methylamin.

Arylmethoxy-blokeringsgrupper, såsom benzyloxy, fjernes ved hydrogenolyse, enten katalytisk, såsom med hydrogen og Raney-nikkel eller palladium-på-trækul, eller kemisk, såsom med natrium i flydende ammoniak. Når der anvendes natrium i flydende ammoniak, tjener et overskud af ammoniak som opløsningsmiddel. Til katalytisk hydrogenolyse er en alkanol det foretrukne opløsningsmiddel, men en række indifferente opløsningsmidler, f.eks. ikke-halogen-og ikke-sulfid- eller -mercapto-holdige opløsningsmidler kan anvendes, forudsat at de opløser det acyl-blokerede substrat, f.eks. sådanne opløsningsmidler som benzen, tetrahydrofuran eller dioxan.

Fremgangsmåder a) til f) er alle baseret på mellemprodukter, 6 142546 der kan fremstilles ud fra simpelt substituerede puriner. Sådanne puriner er naturligvis let tilgængelige ved i og for sig kendt teknik, der findes omtalt i litteraturen og sådanne lærebøger som "Heterocyclic compounds-Pused Pyrimidines Part II Purine, ed. by. D.J. Brown (1971) published by Wiley-Interscience".

Forbindelserne med formlen I og deres farmaceutisk acceptable salte kan oparbejdes til lægemidler med farmaceutisk acceptable bærere. Farmaceutisk acceptable bærere er materialer, der er anvendelige i forbindelse med medikamentets benyttelse, og kan være faste, flydende eller luftformige materialer, der i øvrigt er indifferente og medicinsk acceptable og er forenelige med de aktive bestanddele.

Disse lægemidler kan indgives parenteralt eller oralt, anvendes som et suppositorie eller pessar, påføres lokalt som salve, creme, aerosol eller pulver eller gives som øjen- eller øre-dråber, osv., alt efter om præparatet anvendes til at behandle interne eller externe virale infektioner.

Til interne virusinfektioner anvendes kompositionerne oralt eller parenteralt ved effektivt ikke-toksisk antiviralt dosisniveau, beregnet som den fri base, på ca. 0,1 til 250 mg pr. kg legemsvægt af pattedyret, fortrinsvis 0,5 til 50 mg/kg og anvendes til mennesker i en enhedsdosisform, der indgives nogle få gange daglig i en mængde på 1 til 250 mg pr. enhedsdosis.

Til oral indgift kan fine pulvere eller granuler indeholde fortyndende, dispergerende og/eller overfladeaktive bestanddele og kan gives i en drik, i vand eller i en sirup, i kapsler eller poser i tør form eller i en ikke-vandig opløsning eller suspension, hvori der kan være indeholdt suspensionsmidler, i tabletter, hvori der kan være indeholdt bindemidler og smøremidler, eller i en suspension i vand eller en sirup. Når det er ønskeligt eller nødvendigt, kan der være inkluderet smags/duft-, præserverings-, suspensions-, fortyknings- eller emulgeringsmidler. Tabletter og granuler foretrækkes, og disse kan være belagt.

Til parenteral indgift eller til anvendelse som dråber, såsom til øjeninfektioner, kan forbindelserne gives i vandig opløsning i en effektiv ikke-toksisk dosis i en koncentration på fra ca. 0,1 til 10%, fortrinsvis 0,1 til 1%, navnlig 0,2% vægt/volumen. Opløsningen kan indeholde antioxidanter, puffere osv.

Alternativt bliver til infektioner af øjnene, eller andre externe væv, f.eks. mund og hud, kompositionerne fortrinsvis påført den inficerede del af patientens legeme som en lokal salve eller U2546 7 creme i en effektiv ikke-toksisk dosis. Forbindelserne kan foreligge i en salve, for eksempel med en vandopløselig salvebasis, eller i en creme, for eksempel med en olie-i-vand-cremebasis, i en koncentration på fra ca. 0,1 til 10%, fortrinsvis 0,3 til 3%, navnlig 1% vægt/volumen.

Anvendelsen sker fortrinsvis ved lokal påføring eller ad den orale eller parenterale vej.

Opfindelsen skal beskrives nærmere gennem følgende eksempler.

Eksempel 1 2-Amino-6-chlor-9- [2- (2-benzoyloxyethoxy) -ethoxymethyl] -purin.

Tørt luftformigt hydrogenchlorid blev i 4 timer ved 0°C boblet gennem en blanding af diethylenglycolmonobenzoat (21,8 g) og paraformaldehyd (3,1 g) i tør dichlormethan (180 ml). Reaktionsblandingen blev tørret over vandfrit calciumchlorid og molekylarsig-ter, filtreret og inddampet meget hurtigt ved 45°C og ca. 20 mm Hg, hvorved vandtes en gul væske, der vejede 26 g og bestod af en blanding af 2-(2-benzoyloxyethoxy)-ethoxymethylchlorid og saltsyre. Destillation af dette materiale gav rent 2-(2-benzoyloxyethoxy)-ethoxymethylchlorid som en farveløs væske i hovedsageligt kvantitativt udbytte, kp. 143-145°C.

En blanding af 2-amino-6-chloropurin (3,0 g) og vandfrit ka-liumcarbonat (2,44 g) i tørt dimethylformamid (50 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i flere timer. Til denne blanding blev der sat 2-(2-benzoyloxyethoxy)-ethoxymethylchlorid (5 g). Reaktionsblandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 4 dage og derefter hældt i is og vand. Den resulterende blanding blev ekstraheret med chloroform tre gange, og chloroformekstrakten blev vasket med 10% vandig eddikesyre og med vand og derefter tørret over vandfrit natriumsulfat. Opløsningen blev filtreret, og chloroformen blev afdampet ved stuetemperatur og reduceret tryk (indledningsvis ca. 20 mm og til slut ca. 1 mm Hg). Den som inddampningsrest vundne gule olie blev anbragt på en søjle indeholdende silicagel (200 g) i 1:1 ether:chloroform. Søjlen blev elueret med 1:1 ether:chloroform efterfulgt af chloroform, der atter efterfulgtes af methanol (5%):chloroform (95%). Det ønskede produkt, 2-amino-6-chloro-9-[2-(2-benzoyloxyethoxy)-ethoxymethyl] -purin, blev elueret i methanol:chloroform-eluatet. De fraktioner, der viste en enkelt plet ved silicagel-tyndtlagschromatogra-fi, mobil fase methanol (2%):chloroform (98%), blev samlet og inddampet, hvorved vantes en bleggul olie, der gradvis størknede. Denne

14254 G

8 blev omkrystalliseret af benzen, hvorved vandtes 2-amino-6-chlor-9-[2- (2-benzoyloxyethoxy)-ethoxymethyl]-purin (1,5 g), smp. 111-112°C.

2,6-Diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy)-ethoxymethyl]-purin.

En blanding af 2-amiho-6-chlor0-9-[2-(2-benzoyloxyethoxy)-ethoxymethyl]-purin (1,2 g), fremstillet som ovenfor, og methanol mættet med ammoniak (65 ml) blev opvarmet i en bombe ved 80°C natten over. Methanolen og overskud af ammoniak blev afdampet, og inddamp-ningsresten blev opdelt mellem ether og vand. Den vandige opløsning blev inddampet, hvorved vandtes en gummiagtig inddampningsrest, der blev opløst i en minimal mængde vand, og opløsningen blev anbragt på en stærkt basisk ionbyttersøjle (Rexyn 201, 9,0 g). Søjlen blev elu-eret med vand. De første 75 ml blev opsamlet og inddampet, hvorved vandtes 0,6 g af en olie. Denne blev opløst i 1:1 methanol:chloroform (40 ml), og silicagel (2 g) blev tilsat. Opløsningsmidlet blev afdampet, og den som inddampningsrest vundne blanding blev overført til en søjle af silicagel (20 g) i chloroform. Søjlen blev elueret med chloroform (800 ml) og derefter med methanol (5%):chloroform (95%). Fraktioner på ialt 800 ml af methanol:chloroform-eluatet blev bortkastet, og de næste 1400 ml blev opsamlet og inddampet, hvorved vandtes 520 mg af en olieagtig inddampningsrest. Denne blev opløst i acetone og bratkølet, hvorved vandtes 2,6-diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy) -ethoxymethyl]-purin som aff-white nåle (250 mg, smp. 76-82°C). Elementæranalyse viste, at krystallerne forelå som et partielt ace-tonat. NMR-analyse var i overensstemmelse med den fastlagte struktur.

Eksempel 2 9-(10-Benzoyloxy-2,5,8-trioxadecyl)-2,6-diaminopurin.

Benzoesyre (61,06 g), triethylenglycol (150,17 g) og 50-100 mesh kationbytterharpiks AG-50W-X4 (15 g) i hydrogenform blev sat til toluen (183 ml), og blandingen blev opvarmet med tilbagesvaling i 18 timer i et apparat udstyret med en opfanger for at fjerne dannet vand. Toluenen blev derefter fjernet ved inddampning under reduceret tryk. Den som inddampningsrest vundne væske blev destilleret under tryk, hvorved vandtes 8-benzoyloxy-3,6-dioxaoctylalkohol (85,3 g), kp. 172-175°C/0,1 mm Hg.

Luftformigt hydrogenchlorid blev ledt gennem en afkølet (0°C) omrørt grød af 8-benzoyloxy-3,6-dioxaoctylalkohol (10,0 g) og para-formaldehyd (1,18 g) i tør dichlormethan (100 ml), indtil blandingen var mættet. Den olieagtige suspension blev natten over tørret over 9 1425-46 calciumchlorid og 3A molekylarsigter, filtreret og inddampet meget hurtigt ved en badtemperatur på 30°C, hvorved vandtes 10-benzoyl-oxy-2,5,8-trioxadecylchlorid (11,9 g) som en farveløs olie. NMR bekræftede strukturen.

En vandfri opløsning af 2,6-diaminopurin i dimethylformamid blev fremstillet ved at opvarme monohydratet (3,45 g) i opløsningsmidler (250 ml) på et dampbad, indtil det var opløst, hvorefter der blev afkølet og henstillet over friske molekylarsigter i 18 timer.

Til denne blanding blev der sat en 57% mineraloliedispersion af natriumhydrid (0,95 g). Efter omrøring af grøden natten over blev der dråbevis tilsat 10-benzoyloxy-2,5,8-trioxadecylchlorid (6,2 g), fremstillet som beskrevet ovenfor, og reaktionsblandingen blev omrørt ved stuetemperatur natten over.

Efter filtrering blev de faste stoffer vasket med chloroform, og samlingen af modervæske og vaskevæsker blev inddampet meget hurtigt ved 60°C.

Den resulterende olie blev revet med varm benzen og derefter omkrystalliseret af ethanol eller et egnet opløsningsmiddel. Udbytte 20%.

Eksempel 3 2,6-Diamino-9-[10-benzoyloxy-2,5,8-trioxadecyl]-purin.

En blanding af 10 g tris-trimethylsilyl-2,6-diaminopurin, 4,8 ml triethylamin og 10 g 10-benzoyloxy-2,5,8-trioxadecylchlorid i 50 ml tør toluen blev opvarmet under tilbagesvaling under nitrogen i 18 timer. Den rødlige opløsning blev flash-tørret og remanensen behandlet med methanol på dampbad i 30 minutter og derpå inddampet til tørhed. Remanensen blev ekstraheret adskillige gange med kogende methanol og de sammenblandede ekstrakter koncentreret og afkølet. Det resulterende bundfald blev genopløst i methanol og inddampet med silicagel. Det resulterende faste stof blev i chloroform påført en kolonne af 72 g silicagel og den ønskede 9-isomer blev elueret med methanol/chloroform (5/95) . Opløsningsmidlet blev inddampet, og remanensen omkrystal-liseret fra ethanol til opnåelse af 2,6-diamino-9-[10-benzoyloxy- 2,5,8-trioxadecyl]-purin.

U254G

ίο

Eksempel 4 2.6- Diamino-9-[2-(2-formyloxyethoxy)ethoxymethyl]ourin.

800 mg 2,6-diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy)ethoxymethyl]-purin blev opløst i 5 ml 97%'s myresyre, og opløsningen omrørt ved stuetemperatur i 18 timer. Opløsningen blev fortyndet med 200 ml ethylacetat og afkølet. Det resulterende bundfald blev omhyggeligt ekstraheret i et Soxhlet-apparat med 300 ml aceto-nitril. Acetonitrilen blev særdeles afdampet og afkølet til opnåelse af 2,6-diamino-9-[2-(2-formyloxyethoxy)ethoxymethyl]purin.

Eksempel 5 2.6- Diamino-9-[2-(2-acetoxyethoxy)ethoxymethyl]purin.

1,2 g 2,6-diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy)ethoxymethyl]purin blev opløst i 25 ml tør dimethylformamid under opvarmning. Opløsningen. blev derpå afkølet og 4,6 ml tør pyridin og 4,6 ml eddieksyreanhydrid tilsat. Den resulterende opløsning blev omrørt ved stuetemperatur i 18 timer. Opløsningen blev fortyndet med ethylacetat til et volumen på 400 ml og afkølet. Et harpiks-agtigt hvidt bundfald blev dannet, hvilket bundfald blev fjernet ved filtrering. Et yderligere udbytte blev opnået ved yderligere fortynding med ethylacetat. De forenede udbytter blev opløst i methanol og inddampet sammen med silicagel. Det resulterende faste stof blev i chloroform påført en kolonne af 10 g silicagel og elueret med methanol/chloroform (10/90). Eluatet blev inddampet, og remanensen omkrystalliseret to gange fra ethanol og en gang fra acetxnitril til opnåelse af 2,6-diamino-9-[2-(2-acetoxyethoxy)-ethoxymethyl]purin.

Eksempel 6

En blanding af 1,60 g 2,6-diaminopurin-triacetat, 2,37 g 2-(2-benzoyloxyethoxy)ethoxymethyl-acetat og 32 mg p-toluensul-fonsyre samt 5,2 g mineralolie blev opvarmet til 120°C under omrøring i 18 timer. Reaktionsblandingen blev afkølet og mineralolien dekanteret fra. Remanensen blev tritureret med benzen,og benzenen dekanteret fra. Til remanensen blev sat 10 ml 40%'s vandig methylamin, og blandingen blev opvarmet på dampbad i 30 minutter. Vand og methylamin blev fjernet under reduceret tryk, og remanensen ekstraheret med varm ethanol. Det i ethanol uopløselige materiale blev opløst i kogende methanol, filtreret,

14254G

11 koncentreret til 125 ml samt afkølet til stuetemperatur, hvorved 166 mg urent produkt blev udfældet. Dette produkt blev fjernet ved filtrering. Filtratet blev afkølet og der blev opnået 2,6-diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy)ethoxymethyl]purin med smp. 76-82 C.

Eksempel 7 2.6- Diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy)ethoxymethyl]purin.

3,0 g 2,6-diamino-9-[2-(2-benzoyloxyethoxy)ethoxymethyl]-purin,fremstillet som beskrevet i eksempel 5, blev opløst i 40%'s vandig methylamin og opvarmet på dampbad i 30 minutter. Den vandige methylamin blev afdampet under reduceret tryk, og remanensen omhyggeligt tritureret med ether. Den uopløselige remanens blev omkrystalliseret fra methanol til opnåelse af 2,6-diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy)ethoxymethyl]purin (1,3 g), smp. 76-82°C.

Eksempel 8

Natriumsalt af 2,6-diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy)ethoxymethyl]-purin.

500 mg 2,6-diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy)ethoxymethyl]pu-rin suspenderes i 30 ml vand. Suspensionens pH-værdi indstilles under omrøring til ca. 11 med 1 N natriumhydroxid. Omrøringen fortsættes i ca. 5 minutter, hvorpå eventuelt tilbageværende faste stoffer fjernes ved filtrering. Den resulterende opløsning fryses og frysetørres til opnåelse af et kvantitativt udbytte af natriumsaltet af 2,6-diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy)ethoxymethyl]-purin.

Eksempel 9 2.6- Diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy)ethoxymethyl]purin-hydrochlorid.

0,25 g 2,6-diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxy)ethoxymethyl]purin opløses i 50 ml varm ethanol, og opløsningen afkøles i isbad.

Til den kolde opløsning sættes tilstrækkelig med HCl-mættet ethanol til opnåelse af pH 1,0. Derpå tilsættes 50 ml tør ether og blandingen afkøles kraftigt. Det resulterende faste stof isoleres ved filtrering og vaskes med kold ethanol. Omkrystallisation fra methanol giver 2,6-diamino-9-[2-(2-hydroxyethoxyjethoxymethyl ]-purin-hydrochlorid.

Claims

12 142546

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af 2,6-diamino- 9—alkoxymethyl-purinderivater med formlen X nh2 &> H2N I CH„0(CH_CHo0) R 2. λ 2 n hvori R^ betegner et hydrogenatom eller alkanoyl med 1-4 carbonato-mer, henzoyl eller naphthylcarbonyl, og n betegner 2 eller 3, eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, kendetegnet ved, at man (a) omdanner en forbindelse med formlen II M Ljl) I ! CH„0 (CHoCH_0) R-1- , 2 2 2 n hvori Rx og n har den ovenfor anførte betydning, og M betegner et halogenatom eller en amino- eller azidogruppe, og G betegner en amino- eller azidogruppe, idet M og G ikke samtidig kan betegne NH2, til en forbindelse med formlen I ved ammonolyse af et halogenatom og/eller ved katalytisk reduktion af en azid-gruppe, eller (b) fjerner blokerende lavere alkanoyl-, benzoyl-, naphthylcarbonyl- eller trialkylsilylblokerende grupper fra 2- og 6-sub-stituenterne ved katalytisk reduktion under anvendelse af hydrogen til fjernelse af lavere alkanoyl-, benzoyl- eller naphthyl-carbonylgrupper eller ved hydrolyse, alkoholyse eller ammono-lyse til fjernelse af trialkylsilylgrupper, eller (c) når R^ i forbindelsen med formlen I skal være alkanoyl med 1-4 carbonatomer, benzoyl eller naphthylcarbonyl, omsætter en forbindelse med formlen III U254G 13 NH Λ - i I 7 //^Ν^Ν'Ν// Η2Ν ί Q hvori Q betegner et hydrogen-, alkalimetal- eller thalliumatom, med en forbindelse med formlen IV A-CHo0(CHoCHo0) R1 IV 2 2 2 n hvori R^· betegner alkanoyl med 1-4 carbonatomer, benzoyl eller naph-thylcarbonyl, og A betegner halogen eller sulfonat, og n har den ovenfor anførte betydning, under tilstedeværelse af et polært opløsningsmiddel og en base, eller (d) når R1 i forbindelsen med formlen I skal betegne en alkanoyl-gruppe med 1-4 C-atomer, en benzoyl- eller naphthylcarbonylgruppe, omsætter en forbindelse med formlen I, hvori R"*- betegner hydrogen, med et acyleringsmiddel, eller (e) når R i forbindelsen med formlen I skal betegne et hydrogenatom, fra en forbindelse med formlen V NHX XHN CH20(CH2CH20)nX hvori X betegner en alkanoyl-, benzoyl- eller naphthylcarbonyl gruppe eller en triphenylmethyl- eller arylmethylgruppe, fjerner gruppen X ved basekatalyseret hydrolyse af acylgrupper, ved syrekatalyseret hydrolyse af triphenylmethylgrupper eller ved katalytisk hydrogenering af triphenylmethyl- eller arylmethyl-grupper, eller (f) når R·*" i forbindelsen med formlen I skal betegne et hydrogenatom, fjerner en gruppe E fra en forbindelse med formlen VI