DE7122001U - Vorrichtung zur herstellung von lagerfaehigen transfundierbaren zellen - Google Patents
Vorrichtung zur herstellung von lagerfaehigen transfundierbaren zellenInfo
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- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Die Neuerung betrifft eine Vorrichtung zur Herstellung
von lagerfähigen transfundierbarsn Zellen, insbesondere
Erythrocyten, unter Verwendung von Beuteln und Verbindungsteilen aus thermoplastischen Materialien, in
einem sterilen System von der Blutentnahme an, das sich analog auch für Blutkörperchen und auch für das
Waschen eingefrorener und wieder aufgetauter Blutkörperchen und Zellen anwenden läßt.
In den letzten Jahren besteht in zunehmende« Haße
die Tendenz, die früher übliche Voilbluttransfusicn durch eine "Therapie nach Maß" zu ersetzen. Hierunter
versteht man eine der Indikation entsprechende Transfusionstherapie mit einzelnen Blutbestandteilen
wie ζ. B. Erythrocyten, Thrombocyten, Lymphooyten,
Leukocyten, Plasma, Serum, Fibrinogen, antihämophiles Globulin, Gammeglahu!ins Humenalbumin, oie
Aufteilung in diskrete Einzelbestandteile erfolgt dabei fast ausschließlich auf physikalischem Wege,
Durch die heute übliche dreimalige Uasohung der
Erythrocyten mit physiologincher Kochsalzlösung
nach der Abtrennung des Plasmas entfernt man weitgehend Thrombocyten, Lymphocyten, Leukocyten und
Begleitproteine, dia in vielen Fällen zu Unverträglichkeitserscheinungen oder allergischen Reaktionen
bei einer Transfusion führen« Bei Flassivtransfusionen
usrdsn daher geusschene Erytbroeyten bevorzugt! dis
Thrombosegefahr uird dann stark verringert , Oarüberhinaus uird durch das Waschen die Gefahr einer He«
patitisinfektion herabgesetzt, da die Hepatitisviren uohl überuiegend im Plasma souie an der Blutkörperchenoberfläche vorliegen.
Der Zentrifugier - und Uaschprozeß uird bisher in
einer Glasflasche oder einen Kunststoffbehälter durchgeführt, uobei nach jedem Vorgang das Behältnis
mittels eines übertragungsgsrätes wieder angestochen
uird· In einem derartigen "offenen" System besteht
eine große Gefahr der Sekundärinfektion. Aus diesem
Grunde ist nach den geltenden Bestimmungen ( U.S. Minimum requirements? Deutsche Bluttransfusionsgeseilschaft
) hierfür nur aine maximale Aufbewahrungszeit von 48 Stunden erlaubt. Nach denselben Bestimmungen
kann hingegen in einem "geschlossenen11 sterilen
System z.B. ACD-Vollblut bis zu drei Wochen
bei 4-80C aufbewahrt und anschließend transfundiart werden,,
Diese Lagerungszeit im geschlossenen System gilt jedoch nicht für gewaschene Erythrocyten, da diese
nach wainigen Tagen durch ihren eigenen Stoffwechsel zerstört werden. Die gewaschenen Erythrocytsn müssen
daher in einer Konssarv.ic>rungslösunci aufbewahrt uerden,
die den Stoffwechsel ermöglicht und damit die Blutkörperchen funktionsfähig erhält.
Gegenstand der Neuerung ist ein Beutelsystem aus synthetischem Material mit dessen Hilfe es möglich
ist, Lösungen verschiedener Zusammensetzung getrennt zu sterilisieren und aufzubewahren. Dieses System
besteht aus üblichen Kunststoffbeuteln und Schlauchverbindungen und ist dadurch gekennzeichnet, daß
mindestens vier Kunststoffbeutel über Y-Stücke mit Schläuchen lösbar miteinander se verbunden sind,
daß die Beutel jeweils einzeln gefüllt, sterilisiert und steril miteinander verbunden oder als Gesamt-
system mit aufgesetzten Schlauchklemmen sterilisierbar
sind.
Es müssen mindestane vier Beutel in dom System zusammengefaßt
sein, weil der angestrebte Effekt der Herstellung von lagerungsfähigen Zellen nur erreicht
uird, uenn das behandelte Material dreimal geuaschen
und dann konserviert uird. Unter Umständen kann es vorteilhaft sein, bis tu sieben Beutel in dem System
zusammenzufassen. Die Schläuche in dam neuen System müssen aus einem blutfrsundlichen Material bestehen
und durchsichtig,, sterilisierbar und zum Abknoten elastisch sein. Besonders vorteilhaft haben sich
Schläuche aus Polyvinylchlorid erwiesen, gut geeignet sind auch Schläuche aus Polyäthylen und Polypropylen,
die die vorstehend geschilderten Bedingungen erfüllen.
Uenn das Gesamtsystem sterilisiert uird, arbeitet man z.B. im Autoklaven 20 Minuten bei 121 C.
Die Beutel des Systems müssen aus einem Material bestehen, das den Anforderungen genügt, uie sie an
die Schläuche gestellt werden mit der Ausnahme, daß sie natürlich nicht verknotbar sein müssen. Die
Beutel können verschieden groß sein und sind vorzugsweise 500 ecm groß.
Dia sterile Verbindung der einzelnen Systemteile findet zweckmäßig unter einer Reinluftzone statt
C clean-bench ).
Das Beutelsystem uird nachsteh&nd mit Bezug auf
die beiliegende Zeichnung näher erläutert;
In der Zeichnung ist ein neuas Blutbeutelsystem gezeigt, bei dem fünf Beutel 1, 2, 3, 4, 5 verbunden
sind.
Ein neues Beutelsystem ist z.B. wie folgt kombiniert:
Fünf Kunststoffbeutel 1-5 mit Schläuchen Sl - S 9 sind über Verbindungsstücke so verbunden, daß vom
Beutel 1, in den durch eine Kanüle K das zu behandelnde Material eingeführt uird und der durch eine
Schlauchklemme SK 1 abklemmbar ist, eine Verbindung S 4 über eine Schlauchklemme SK 4 und Verbindungsteile
S 7 und S 8 mit der Schlauchklemme SK 7 zum Beutel 3 und über die Verbindungsteile S 7, S 9
und der Schlauchklemme SK 8 zum Beutel 4, außerdem über die Verbindungsteile S 4 und S β und die
Schlauchklemmen SK 4 und SK 6 zum Beutel 2 besteht, uobei gegebenenfalls auch vom Beutel 2 und vom
Beutel 1 über die Verbindungsteile S 2, S 3, 3 5 und di<3 Schlauchklemmen SK 2, SK 3 SK 5 eine Verbindung
zum Beutel 5 besteht.
Zur Herstellung von geuaschenen Erythrocyten aus
Vollblut ( Verfahren a ) uird der Beutel 1 mit einer Lösung ainas Arstikoagulans gefüllt, Osr Bsutsl 2 snt=
hält eine Uaschlösung für Erythrocyten, z.9. physiologische, 0,9 #ige Kochsalzlösungen oder gepufferte,
physiologische Salzlösungen, Natriumbicarbonatlösung oder isotonische Zuckerlösungen. Im Beutel 3 liegt
ebenfalls eine Uaschlösung vor. Der in der Zeichnung dargestellte Beutel 4, der Schlauch S 9 und die Schlauchklemme
SK 8 entfallen. Der Beutel 5 enthält ebenfalle Uaschlösung.
Die Blutentnahme uird durch die Kanüle K nach Abnahme der Schutzhaube SH und der Schlauchklemme SK 1 in den
500 ml-Beutel 1 vorgenommen. Durch Aufstecken der
Schlauchklemme SK 1 uird der Entnahmeschlauch S 1 wieder verschlossen und das gesamte System nach Verteilung
auf zuei Zentrifugenbecher zentrifugiert. Als Zentrifugierbedingungen können gewählt werden»
1-10 Minuten bei 5.000 g
5-20 Minuten bei 3.000 g
10 - 60 Minuten bei 1.000 g
ft
Hierbei scheiden sich die geformten Blutbestaind»
tsile ( Zdllan ) in der unteren HMlfte dea Beutels-I ab. Nach vorsichtigem Herannehmen aua den Bechern nach der Zentrifugation uird dar Beutel 1
in einer Plasmaquetache durch Abdrücken in den Beutel 5 nach Abnahme der Schlauchklemmen SK 2 und
SK 3 durch den Schlauch S 2 vom überstehenden Plasma befreit. Der Schlauch S 5 kann mit zwei fsstsn
Knoten versehen warden und nach Durchschneiden des Schlauches S 5 zwischen den beiden Kneten läßt sich
der Beutel 5 mit dem Plasma abtrennen.
Aus dem 500 mi-Beutel 2 werden 250 ml der Uaschlö'sung
nach Entfernen der Schlauchklemmen SK 4 und SK 6 durch Hochheben des Beutels 2 in den Beutel 1 überführt. Schlauchklemme SK 4 uird wiederum aufcjestackt
und das Zellen - Uaschmittelgemisch im Beutel 1
durch Hin - und Herschuenken gründlich durchgemischt*
Das Gesamtsystem uird wieder wie zuvor beschrieben
zentrifugiert und dis überstehende Uaechlösung
nach dem Zentrifugierprozaß nach Abnahme der
Schlauchklemme SK 4 durch die Schläuche S 4 und S 6 in den Beutel 2 UbergedrücktJ Schlauchklemme SK 6
uird zum Abklemmen dee Beutele 2 wieder aufgesteckt.
lä!3t man atwe, die Hälfte der im 500 ml-Beutel 3
befindlichen Uaschiösung durch Hochheben des Beutels 3 in den Beutel I einlaufen, v/erschließt die
Schläuche S 4 und S 8 wiederum mit Schlauchklemme, mischt das Gemisch im Beutel 1 und zentrifugiert.
Die überstehende Uaschlösung kann nach der Zentrifugation
durch die Schläuche S 4 und S 6 nach Abnahme
der Schlauchklsramsn SK 4 und isK 6 in den Beutel
2 übergedrückt werden. Die Schläuche S 6 and S 3 werden wiederum zweimal abgeknotet, die Schläuche
zwischen den beiden Knoten durchgeschnitten, so daß der Beutel 2 nunmehr mit 500 ml Uaschlösung gefüllt
abgetrennt werden kann·
Die noch verbleibenden etwa 25C ml Uaschlösung läßt man durch die Schläuche S 8, S 7 und S 4 nach Abnahme
der Schlauchklemmen SK 7 nnü SK 4 durch Hochheben
des Beutels 3 in den Beutel 1 einlaufen. Die Schlauchklemme SK 4 wird wieder aufgesteckt, das
Zellen-Uaschlcsungsgemisch im Beutel 1 durch Hin- und Herschwenken durchgemischt und das Gesamtsystem
wiederum wie oben beschrieben zentrfugiert. Die überstehende Uaschlösung IMGt sich nach Abnahme der
Schlauchklemme SK 4 und Einbringen des Beuteis 1 in die Plasmaquetsche in den Eleutel 3 überdrucken.
Der Beutel 3 kann nach zweimal:igem Abknoten des
Schlauches S 8 und Abschneiden des Schlauches zwi-
sehen den Knoten uiederum abgetrennt werden.
Im Beutel 1 befindet sich nun die qsuaschsne Erythrocytenkonserve,
die durch Anschluß eines Tranafusionsgerätes
an die Auatrittsöffnung AT transfundiert warden kann.
Zur Herstellung gewaschener Erythrocyten aus Vollblut
mit anschließender Konservierung ( Verfahren b ) erfolgen die Blutentnahme, Abtrennung des Plasmas
und der Uaschprozeß analog wie beschrieben^ Beutel
2 ist hier 3 und Beutal 3 ist hier 4e Zu den dreifach
gewaschenen Erythrocyten in Beutel 1 läßt man den Inhalt der in Beutel 2 aus 5 und 2 vereinigten
Konservierungslösung durch Abnahme der Schlauchklemmen SK 6 und 5K 4 und Hochheben des Beutels 2
zufließen.
Bei Verwendung einer Phosphat-Dextrose-Lösung ( Gemisch aus 5-50 mMol/l Na2HPQ4 χ 2 H3O mit
NaCl isotonisch eingestellter Lösung mit 5 Jfciger
Glucoselösung im Verhältnis 10 : 1 bis 1:1, nach getrennter Sterilisation in zwei verschiedenen
Beuteln erfolgt die Vereinigung ), der zur Reduzierung des Hämolysegrades während der Lagerung
Protein - oder Plasmaersatzlösungen, uie z.B. Kumanserum, Humanalburnin, Plasmaproteinlösung.
Dextran-, Stärke- oder Gelantineplasmaersatzmittel,
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zugesetzt uerden können, ist die in-vitro Uberlebensrate
der Erythrocyten, gemessen am auf die GesamthämugiuijiiikCinzüniration bszoyensn AdsriüS.lri=--
Triphosphatgehalt, ebenso gro3 uie die der ACD-Uollblutkonserve
von ein - und demselben Spender.
Ourch Abknoten der Schläuche S 6 und S 2 und Abschneiden
dieser Schläuche läßt sich Beutel 2 abtrennen. Er kann jedoch auch zusammen mit Beutel 1
gelagert uerden, um die überstehende Konservierungslösung aufzunehmen , falls diese nach der Lagerungazeit
nicht zusammen mit dsn Erythrocyten transfundiert usrden soll. Dia Transfusion kann rnittsls
AnschluG eines Transfusionsgerätes an die Austritte-Öffnung AT vorgenommen uerden.
UiIl man zuvor mit einer Schutzlösung eingefrorene und aufgetaute Zellen waschen, bestehen verschiedene
Möglichkeiten.
Falls nur eine Uaschung und damit Befreiung von der Kryoprotektiven Substanz durchgeführt uerden soll,
kann die für Verfahren a genannte Beutelanordnung gewählt uerden. Die aufgetauten Zellen uerden durch
die Kanüle K in dan Beutel 1 eingebracht, die nach der ersten Zentrifugation überstehende Lösung in
den Beutel 5 übergedrückt und die ueiteren Uasch-
- 11 ■-
vorgänge analog dem Verfahren a durchgeführt.
Sollen die aufgetauten Zslicn nach der Uaschuno
konserviert werden, dann muß analog Verfahren b gearbeitet werden.
Das beschriebene System erlaubt die Verwendung einer Zellen-Konservierungslösung, die infolge ihrer
Alkalität zur Karamellisierung der Dextrose und damit zur Unbrauchbarkeit führt, wenn sie nicht, wie
hier beschrieben, getrennt sterilisiert und dann steril vereinigt wird.
In daa System kann durch die Kanüle K Blut entnommen,
2:entrifugiert, vom Plasma getrennt, die geformten
B]Lutbestandteile unter strrilen Bedingungen isoliert, mehrfach gewaschen und einige Uochen konserviert
werden.
Durch die im System gewählte Anordnung und Methode ist es möglich, die für eine therapeutische Effektivität
erforderliche dreimalige ( oder mehr ) Blutkörperchenwaschung und Konservierung in einem
nehrfachbeutelsystem durchzuführen.
Durch die Kanüle K lassen sich gemäß einem weiteren
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Merkmal der Neuerung nach dem Auftauen zuvor mit
kryoprotektiven Substanzen eingefrorene Zellbestandteile
- B crythrocyten, Leukocyten, Lymphocyten,
Thrombocyten, Geuebs-, Organ- und sonstige
Zellarten, in das Beutelsystem einbringen, unter sterilen Bedingungen durch mehrfaches Waschen won
den kryoprotektiven Schutzsubstanzen befreien und durch Zugabe einer Konserv/ierun^slösung versand-
und lagerungsf äh.ig machen.
Auf diese Ueise uird es unter anderem möglich,
Blutkörperchen im flüssigen Zustand einige Uochen Ipgerungs-, funktions- und damit transfusionsfähig
zu erhalten,
Herstellung gewaschener Erythrocyten aus l/ollblut:
1 : 500 ml Beutel mit 50 ml 4 ^iger Natriumzitrat-
lösung oder 75 ml ACD Lösung ( Zitronensäure,
Natriumzitrat und Dextrose, wie in der United
States Pharmacopeia XUIII, Seite 47 beschieben) oder mit einer anderen Antikoagulantienlösung.
2 : 500 ml Beutel mit 250 ( oder bis zu 500 ) ml
0,9 % iger Kochsalz- oder anderer Uaschlösung.
3 : 500ml Beutel mit 500 ml oder weniger 0,9
Kochsalz- oder anderer Uascnlösung.
- 13 -
: 300 ( oder 500 ) ml Beutel mit etua 3 ml
0,9 /aiger Kochsalzlösung.
Herstellung gewaschener Erythrooyten aus Vollblut mit anschließender Konservierung:
500 ml Beutel mit 50 ml 4 /Siger Natriumzitratiösung
oder 75 ml ACD-Lösung ( Zitronensäure, Natriumzitrat und Dextrose, uie in der United
States Pharmacopeia XUIII, Seite 47 beschieben) oder mit einer anderen Antikoagulantienlösung.
300 ( oder 500 ) ml Beutel mit 20 - 200 ml 5 %iger Dextroselösung.
500 ml Beutel mit 250 ( oder bis zu 300 ) ml 0,9 J&iger Kochsalz- oder anderer Uaschlösung.
500ml Beutel mit 500 ml oder weniger 0,9 ?£iger
Kochsalz- oder anderer Uaschlösung.
300 ( oder 500 ) ml Beutel mit 230 - 50 ml isotonischer Natrium-Phosphat/KochsaIzlösung
oder anderer KonseruierungslösungJ nach der
Sterilisation wird der Inhalt dieses Beutels in Beutel 2 überführt.
Claims (4)
1.) Vorrichtung zur Herstellung von lagerfähigen,
transfundierbaren Zellen, bestehend aus einem
Bsutelsystem aus synthetischem Material und Schlauchverbindungen,
dadurch gekennzeichnet, daß mindestens vier Kunststoffbeutel über Y-Stücke mit Schläuchen
lösbar miteinander so verbunden sind, daß dia Beutel jeueils einzeln gefüllt, sterilisiert und
6teril miteinander zu verbinden oder als Gesamtsystem mit aufgesetzten Schlauchklemmen sterilisierbc
r sind.
2.) Vorrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet,
daß die Schläuche in dem System aus durchsichtigem, sterilisierbarem, elastischem Material
bestehen, insbesondere aus Polyvinylchlorid.
3.) Vorrichtung nach Ansprüchen 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Beutel des Systems aus
einem durchsichtigen, elastischen Material bestehen, insbesondere Polyvinylchlorid, und vorzugsweise
500 ecm fassen.
4.) Vorrichtung nach Ansprüchen 1-3, dadurch
- 15 -
gekennzeichnet, daß fünf Kunststoffbeutel ( 1 - 5 )
mit Schläuchen ( S 1 - S 9 ) über Verbindungsstücke so verbunden sind^ daß vom Beutel ( 1 ), in den durch
eine Kanüle (K) das zu behandelnde Material eingeführt uird und der durch eine Schlauchklemme ( SK 1 )
abklemmbar ist, eine Verbindung ( S 4 ) über eine Schlauchklemme ( SK 4 ) und Verbindungsteile ( S 7,
S 8 ) und der Schlauchklemme ( SK 7 ) zum Beutel ( 3 ), und über die Verbindungsteils ( S 7t S 9 ) und der
Schlauchklemme ( SK 8 ) zum Beutel ( 4 ), außerdem über die Verbindungsteile ( S 4, S 6 ) und die Schlauchklemmen
( SK 4, SK 6 ) zum Beutel ( 2 ) und vom Beutel ( 1 ) über die Verbindungsteile ( S 2, S 3 , S 5 )
und dia Schlauchklemmen ( SK 2, SK 3, SK 5 ) eine Verbindung zum Beutel ( 5 ) besteht,
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19717122001 DE7122001U (de) | 1971-06-07 | 1971-06-07 | Vorrichtung zur herstellung von lagerfaehigen transfundierbaren zellen |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19717122001 DE7122001U (de) | 1971-06-07 | 1971-06-07 | Vorrichtung zur herstellung von lagerfaehigen transfundierbaren zellen |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE7122001U true DE7122001U (de) | 1975-01-16 |
Family
ID=6621765
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE19717122001 Expired DE7122001U (de) | 1971-06-07 | 1971-06-07 | Vorrichtung zur herstellung von lagerfaehigen transfundierbaren zellen |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DE (1) | DE7122001U (de) |
-
1971
- 1971-06-07 DE DE19717122001 patent/DE7122001U/de not_active Expired
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