DE69811997T2 - Verfahren zur Reindarstellung von Nukleinsäurederivaten - Google Patents
Verfahren zur Reindarstellung von Nukleinsäurederivaten Download PDFInfo
- Publication number
- DE69811997T2 DE69811997T2 DE69811997T DE69811997T DE69811997T2 DE 69811997 T2 DE69811997 T2 DE 69811997T2 DE 69811997 T DE69811997 T DE 69811997T DE 69811997 T DE69811997 T DE 69811997T DE 69811997 T2 DE69811997 T2 DE 69811997T2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- bis
- hydroxymethyl
- alkali metal
- cyclopropan
- compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 21
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 title claims description 7
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 title claims description 7
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 title claims description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- -1 alkali metal alkoxide Chemical class 0.000 claims description 25
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 claims description 25
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims description 22
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 18
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 8
- SGSSKEDGVONRGC-UHFFFAOYSA-N N(2)-methylguanine Chemical compound O=C1NC(NC)=NC2=C1N=CN2 SGSSKEDGVONRGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 5
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 4
- YXNRJANWWNPPRK-UHFFFAOYSA-N [Na].CNC=1NC(C=2NC=NC2N1)=O Chemical compound [Na].CNC=1NC(C=2NC=NC2N1)=O YXNRJANWWNPPRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000004703 alkoxides Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Substances OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 43
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N Guanine Natural products O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 20
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- RYYIULNRIVUMTQ-UHFFFAOYSA-N 6-chloroguanine Chemical compound NC1=NC(Cl)=C2N=CNC2=N1 RYYIULNRIVUMTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- KMEBCRWKZZSRRT-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-7h-purine Chemical compound CC1=NC=C2NC=NC2=N1 KMEBCRWKZZSRRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- PQVSTLUFSYVLTO-UHFFFAOYSA-N ethyl n-ethoxycarbonylcarbamate Chemical compound CCOC(=O)NC(=O)OCC PQVSTLUFSYVLTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M lithium hydroxide monohydrate Substances [Li+].O.[OH-] GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229940040692 lithium hydroxide monohydrate Drugs 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- MFRIHAYPQRLWNB-UHFFFAOYSA-N sodium tert-butoxide Chemical compound [Na+].CC(C)(C)[O-] MFRIHAYPQRLWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CLUAPHLVNMJKCH-UHFFFAOYSA-N 7-(bromomethyl)-4,4-diphenyl-3,5-dioxabicyclo[5.1.0]octane Chemical compound O1CC2(CBr)CC2COC1(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 CLUAPHLVNMJKCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVEPXKSDVJTASH-NZUVGVKCSA-N CCCOC1NC(N)=Nc2c1nc[n]2C[C@@]1(CO)[C@H](CO)C1 Chemical compound CCCOC1NC(N)=Nc2c1nc[n]2C[C@@]1(CO)[C@H](CO)C1 PVEPXKSDVJTASH-NZUVGVKCSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- 230000002152 alkylating effect Effects 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BDAWXSQJJCIFIK-UHFFFAOYSA-N potassium methoxide Chemical compound [K+].[O-]C BDAWXSQJJCIFIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N potassium tert-butoxide Chemical compound [K+].CC(C)(C)[O-] LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- QDRKDTQENPPHOJ-UHFFFAOYSA-N sodium ethoxide Chemical compound [Na+].CC[O-] QDRKDTQENPPHOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
- Gebiet der Erfindung
- Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Nucleinsäurederivaten, die sich als antivirale Mittel eignen. Insbesondere betrifft die Erfindung ein Verfahren zur Reinigung von Nucleinsäurederivaten, die durch Alkylieren einer Purinbase erhalten worden sind, sowie Zwischenprodukte, die bei der Reinigung anfallen.
- Stand der Technik
- (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin der Formel (II)ist für seine hohe antivirale Aktivität bekannt (JP-A-78357/1993).
- Die vorerwähnte Verbindung wird durch ein Verfahren hergestellt, bei dem eine geschützte Purinbase gemäß JP-A-80670/1994 und JP-A-316155/1995 alkyliert wird. Diese Alkylierung erfolgt sowohl in der 7- als auch in der 9-Stellung des Purinrings. Um die erfindungsgemäß angestrebte 9-substituierte Verbindung zu erhalten, mussten eine 7-substituierte Verbindung und nicht-umgesetzte Purinbase durch Chromatographie abgetrennt werden.
- Erfindungsgemäß zu lösende Aufgaben Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, ein industrielles Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (II) bereitzustellen, bei dem ein kompliziertes Verfahren, wie eine Chromatographie oder dergl., nicht durchgeführt wird.
- Maßnahmen zur Lösung der Aufgaben
- Die Erfinder haben eingehende Untersuchungen zur Lösung der vorstehenden Aufgaben durchgeführt und dabei festgestellt, dass sich die gewünschte 9-substituierte Verbindung der Formel (I) in hoher Reinheit und mit hohem Wirkungsgrad erhalten lässt, indem man ein 2-Amino-6-chlorpurin mit einer Verbindung, die durch Substitution einer Hydroxylgruppe von (15,5R)-3-Oxa-2-oxobicyclo[3.1.0]hexan-lmethanol durch eine austretende Gruppe erhalten worden ist, umsetzt, das erhaltene Gemisch aus dem angestrebten (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin und dem Nebenprodukt 7-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin in einem Alkohol oder einem wässrigen Alkohol suspendiert oder löst, einen beliebigen Bestandteil aus der Gruppe Alkalimetallhydroxid, wässrige Lösung eines Alkalimetallhydroxids, alkoholische Lösung eines Alkalimetallhydroxids, Alkalimetallalkoxid und alkoholische Lösung eines Alkalimetallalkoxids zugibt, anschließend das erhaltene Gemisch abkühlt und die ausgefallenen Kristalle isoliert. Dieser Befund führte zur vorliegenden Erfindung.
- Somit betrifft die vorliegende Erfindung ein Reinigungsverfahren, welches das Suspendieren oder Auflösen eines Gemisches, das (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin und 7-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin enthält, in einem Alkohol oder einem wässrigen Alkohol und das Umsetzen der Suspension oder der Lösung mit einem Alkalimetallhydroxid oder -alkoxid und das selektive Ausfällen von Kristallen von Nucleinsäurederivaten der Formel (I)worin M ein Alkalimetall darstellt, umfasst.
- Ausführungsform zur Durchführung des Erfindung
- (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin der Formel (II), das ein Ausgangsmaterial der vorliegenden Erfindung darstellt, läßt sich gemäß dem Verfahren von JP-A-80670/1994 und JP-A-316155/1995 herstellen.
- Beispielsweise wird 2-Amino-6-chlorpurin mit 1-Brommethyl-4,4-diphenyl-3,5-dioxabicyclo[5,1,0]octan in N,N-Dimethylformamid als Lösungsmittel in Gegenwart von Kaliumcarbonat umgesetzt. Das erhaltene 2-Amino-6-chlor-9-(4',4'-diphenyl-3',5'-dioxabicyclo[5,1,0]octyl-1')-methylpurin wird in Ameisensäure unter Erwärmen hydrolysiert. Man erhält das angestrebte (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin in Form einer wässrigen Lösung. Diese Lösung wird zur Trockene eingeengt und sodann in wässriger Natriumhydroxidlösung gelöst, mit Essigsäureethylester gewaschen und mit Salzsäure neutralisiert. Man erhält das angestrebte (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin in kristalliner Form.
- Alternativ wird 2-Amino-6-chlorpurin mit (3-Oxa-2-oxobicyclo[3,1,0]hexan-l-yl)-methylmethansulfonat in N,N-Dimethylformamid in Gegenwart von Kaliumcarbonat umgesetzt. Das erhaltene 2-Amino-6-chlor-9-(3'-oxa-2'-oxobicyclo[3,1,0]hexan-1'-yl)-methylpurin wird mit Salzsäure hydrolysiert und neutralisiert. Man erhält 9-(3'-Oxa-2'-oxobicyclo[3,1,0]hexan-1'-yl)-methylguanin in kristalliner Form. Diese Verbindung wird mit Natriumborhydrid in Ethanol als Lösungsmittel reduziert und mit einer Säure behandelt. Die so behandelte Substanz wird der Substitution mit einer wässrigen Natriumhydroxidlösung unterzogen und neutralisiert. Man erhält das angestrebte (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin in kristalliner Form.
- Die nach diesen Verfahren erhaltenen Kristalle enthalten, wie vorstehend erwähnt, das angestrebte (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-y1]-methylguanin sowie zusätzlich 7-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin der nachstehenden Formel (III), worin die 7-Stellung von Guanin substituiert ist, und Guanin.
-
- Die angestrebte Verbindung der Formel (I) kann erfindungsgemäß aus dem beim vorerwähnten Verfahren erhaltenen Gemisch auf die nachstehend angegebene Weise gereinigt und erzeugt werden.
- Zunächst wird die Ausgangsverbindung (II), die Verunreinigungen, wie 7-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin und dergl. enthält, in einem Alkohol-Lösungsmittel, wie Methanol, Ethanol oder 2-Propanol, oder in einem Alkohol-Lösungsmittel mit einem Gehalt an Wasser in einem Volumenanteil von 0 bis 50% suspendiert. Dabei beträgt die Konzentration vorzugsweise 2 bis 15% (Gew.-/Gew.). Sodann wird ein beliebiger Bestandteil aus der Gruppe Alkalimetallhydroxid, wässrige Alkalimetallhydroxidlösung, Alkohollösung eines Alkalimetallhydroxids, Alkalimetallalkoxid und Alkohollösung eines Alkalimetallalkoxids in einer Menge von 1 bis 5 Äquivalenten, bezogen auf die Verbindung (II), zu dieser Suspension gegeben. Die Umsetzung wird bei 0°C bis zur Rückflusstemperatur des Lösungsmittels 0,5 bis 50 Stunden durchgeführt. Anschließend wird das Reaktionsgemisch auf 0 bis 30°C und vorzugsweise auf 0 bis 10°C gekühlt und 0,5 bis 50 Stunden gealtert. Man erhält die angestrebte Verbindung der Formel (I) in Form von Kristallen. Diese Verbindung lässt sich leicht durch Filtration isolieren.
- Alternativ wird die Ausgangsverbindung (II) in einer wässrigen alkalischen Lösung (bei der es sich um eine .
- wässrige Natriumhydroxidlösung, eine wässrige Kaliumhydroxidlösung oder eine wässrige Lithiumhydroxidlösung handelt) gelöst. Die Lösung wird mit einem Alkohol-Lösungsmittel, wie Methanol, Ethanol oder 2-Propanol, versetzt. Die angestrebte Verbindung der Formel (I) wird durch Abkühlen ausgefällt und lässt sich in Form von Kristallen erhalten.
- Die erfindungsgemäße Verbindung der Formel (I) lässt sich auch durch die Formel (I') wiedergeben,worin M ein Alkalimetall darstellt.
- Zu Beispielen für das erfindungsgemäße Alkalimetall gehören Natrium, Kalium und Lithium. Zu Beispielen für das Alkalimetallhydroxid gehören Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid und Lithiumhydroxid. Zu Beispielen für das Alkalimetallalkoxid gehören feste Verbindungen, wie Natriummethylat, Natriumethylat, Natrium-tert.-butylat, Kaliummethylat und Kalium-tert.-butylat; sowie entsprechende Alkohol-Lösungen.
- In bezug auf eine bevorzugte Kombination gibt es ein Verfahren, bei dem eine Methanollösung von Natriummethylat zu einer Methanolsuspension gegeben wird. Der Grund hierfür ist, dass das Reagenz leicht unter geringen Kosten erhältlich und auch leicht handhabbar ist, sich eine hochwertige kristalline Beschaffenheit ergibt sowie eine hohe Reinheit und eine hohe Ausbeute erzielt werden.
- Die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren gebildeten Kristalle der Verbindung der Formel (I) lassen sich in hoher Reinheit erhalten. Die Anteile an isomeren Verunreinigungen und Guanin, die schwer zu entfernen sind, lassen sich auf ein annehmbares Niveau senken. Beim erfindungsgemäßen Verfahren erübrigt es sich, komplizierte und wirtschaftlich nachteilige Maßnahmen der Reinigung mit einer Kieselgelsäule, die zur Entfernung der vorerwähnten Verunreinigungen verwendet wird, durchzuführen. Ferner lässt sich die Verbindung der Formel (I) in einfacher Weise durch Hydrolyse in die Verbindung der Formel (II) umwandeln.
- Beispiele
- Nachstehend wird die Erfindung anhand der folgenden Beispiele näher erläutert.
- Beispiel 1
- Herstellung von (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin-natriumsalz
- Verfahren 1
- (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin wurde gemäß dem Verfahren von JP-A-80670/1994 ohne Durchführung einer Reinigung mittels Kieselgel-Säulenchromatographie hergestellt. Man erhielt 44,8 g Rohprodukt. Dieses Produkt enthielt 63,6% des angestrebten Produkts und 21,9% des 7-Positionsisomeren.
- Dieses Gemisch wurde in 40 ml 4,5 N wässriger Natriumhydroxidlösung gelöst und unter Rühren bei Raumtemperatur mit 730 ml Methanol versetzt. Sodann wurde die Reaktionslösung
2 Stunden unter Rühren auf einem Eisbad gekühlt. Die ausgefallenen Kristalle wurden abfiltriert und mit einer geringen Menge an wässrigem Methanol gewaschen. Die erhaltenen Kristalle wurden 3 Stunden bei 70°C unter vermindertem Druck getrocknet. Man erhielt 22,3 g der vorerwähnten Verbindung. Im Produkt betrug der Anteil der vorerwähnten Verbindung 88,9% (Ausbeute 64,2%). Der Gehalt an dem 7-Positionsisomeren war auf 0,25% verringert. - Verfahren 2
- Ungereinigtes (–)-9-[1'5,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin wurde gemäß dem Verfahren von JP-A-316155/1995 hergestellt. Man erhielt 39,9 g Rohprodukt. Der Gehalt an dem angestrebten Produkt, am 7-Positionsisomeren und an Guanin betrugen 67,9%, 9,9% bzw.
- 3,8%. Dieses Gemisch wurde in Methanol suspendiert. Die Suspension wurde bei 45°C unter Zugabe einer Methanollösung von Natriummethoxid gerührt. Nach 1-stündigem Rühren des Gemisches wurde die Reaktionslösung auf 10°C abgekühlt. Die ausgefallenen Kristalle wurden abfiltriert und mit einer geringen Menge an Methanol gewaschen. Die erhaltenen Kristalle wurden bei 50°C unter vermindertem Druck getrocknet. Man erhielt 28 g der vorerwähnten Verbindung als Einzelsubstanz (Gehalt 94,4%, Ausbeute 90,2% in Form von weißen Kristallen.
1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 0,46 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 0,99 (dd, J = 8,8, 5,2 Hz, 1H), 1,36 (tt, J = 8,8, 6,2 Hz, 1H), 3,35 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 3,47 (dd, J = 11,9, 8,8 Hz, 1H), 3,58 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 3,75 (dd, J = 11,9, 6,5 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 14,4 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H).
13C-NMR (75 MHz, CD3OD) δ: 14,9, 25,6, 28,7, 49,3, 62,5, 62,8, 119,0, 138,0, 153,1, 162,1, 169,1.
Massenspektrum (FAB) 288 (MH+)
F. 220–230°C - Beispiel 2
- Herstellung von (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylquanin-kaliumsalz
- Ungereinigtes (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin (0,5 g; die Anteile an dem angestrebten Produkt, am 7-Positionsisomeren und an Guanin betrugen 85,7%, 5,3% bzw. 3,2%), das nach dem Verfahren von JP-A-316155/1995 erhalten worden war, wurde in 3 ml Methanol suspendiert. Eine Lösung von Kaliumhydroxid in Methanol (0,23 g/3 ml) wurde unter Rühren zugegeben. Nach Lösen dieser Bestandteile wurden die ausgefallenen Kristalle abfiltriert und mit einer geringen Menge Methanol gewaschen. Die erhaltenen Kristalle wurden 5 Stunden unter vermindertem Druck bei 45°C getrocknet. Man erhielt 0,35 g (Ausbeute
61 ,2 %) der vorerwähnten Verbindung. Im Produkt betrug der Anteil der vorerwähnten Verbindung 98,5%. Die Anteile an dem 7-Positionsisomeren und an Guanin betrugen 0,78% bzw. 0,3%.
Weiße Kristalle
1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 0,46 (t, J = 5,4 Hz, 1H), 0,99 (dd, J = 8,6, 5,2 Hz, 1H) 1,35 (tt, J = 8,6, 6,1 Hz, 1H), 3,34 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,46 (dd, J = 11,8, 8,8 Hz, 1H), 3,58 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 3,76 (dd, J = 11,9 Hz, 6,4 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 14,6 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 14,6 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H).
13C-NMR (75 MHz, CD3OD) δ: 14,9, 25,6, 28,7, 49,3, 62,5, 62,7, 119,0, 138,0, 153,1, 162,1, 169,0.
Massenspektrum (ESI) 304 (MH+)
F. 186–188°C - Beispiel 3
- Herstellung von (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin-lithiumsalz
- Ungereinigtes (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin (0,5 g; die Anteile an dem angestrebten Produkt, am 7-Positionsisomeren und an Guanin betrugen 85,7%, 5,3% bzw. 3,2%), das nach dem Verfahren von JP-A-316155/1995 erhalten worden war, wurde in 6 ml Methanol suspendiert. 0,18 g Lithiumhydroxid-monohydrat wurden unter Rühren bei Raumtemperatur zugegeben. Nach Lösen dieses Bestandteils wurden die ausgefallenen Kristalle abfiltriert und mit einer geringen Menge Methanol gewaschen. Die erhaltenen Kristalle wurden 5 Stunden unter vermindertem Druck bei 45°C getrocknet. Man erhielt 0,48 g (Ausbeute 93,9 %) der vorerwähnten Verbindung. Im Produkt betrug der Anteil der vorerwähnten Verbindung 96,8%. Die Anteile an dem 7-Positionsisomeren und an Guanin betrugen 1,1% bzw. 1,4%.
- Verfahren 2
- Ungereinigtes (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin (0,5 g; die Anteile an dem angestrebten Produkt, am 7-Positionsisomeren und an Guanin betrugen 85,7%, 5,3% bzw. 3,2%), das nach dem Verfahren von JP-A-316155/1995 erhalten worden war, wurde in 7 ml Ethanol suspendiert. 0,18 g Lithiumhydroxid-monohydrat und 0,5 ml Wasser wurden unter Rühren bei Raumtemperaturzugegeben. Die ausgefallenen Kristalle wurden abfiltriert und mit einer geringen Menge Ethanol gewaschen. Die erhaltenen Kristalle wurden 5 Stunden unter vermindertem Druck bei 45°C getrocknet. Man erhielt 0,5 g (Ausbeute 97,8%) der vorerwähnten Verbindung. Im Produkt betrug der Anteil der vorerwähnten Verbindung 98,8%. Die Anteile an dem 7-Positionsisomeren und an Guanin betrugen 0,6% bzw. 0,3%.
Weiße Kristalle
1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 0,48 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 1,02 (dd, J = 8,7, 4,9 Hz, 1H), 1,37 (m, 1H), 3,35 (--CD3OD--), 3,47 (dd, J = 12,1, 8,7 Hz, 1H), 3,59 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 3,76 (dd, J = 11,9 Hz, 6,5 Hz, 1H), 3,85 (d, J = 14,6 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 14, 3 Hz, 1H), 7,65 (s, 1H) .
Massenspektrum (FAB) 272 (MH+)
F. 257°C - Beispiel 4
- Hydrolyse von (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin-natriumsalz
- (–)-9-[1'S,2'R-Bis-(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin-natriumsalz (21,7 g), das nach dem Verfahren 2 von Beispiel 1 hergestellt worden war, wurde unter Rühren in 410 ml Wasser gelöst. Anschließend wurde 3 N Salzsäure zugegeben, bis der pH-Wert der Lösung einen neutralen Wert erreicht hatte. Die erhaltene Lösung wurde bei 30°C 2 Stunden gerührt. Die ausgefallenen Kristalle wurden abfiltriert und mit wenig Wasser gewaschen. Die erhaltenen Kristalle wurden sodann über Nacht bei 70°C unter vermindertem Druck getrocknet. Man erhielt 18,8 g (Gehalt 96,8%, Ausbeute 96,5%) an hochreinem (–)-9-[1'S,2'R-Bis(hydroxymethyl)-cyclopropan-1'-yl]-methylguanin. Die Eigenschaften der Verbindung stimmten völlig mit den in JP-A-78357/1993 beschriebenen Eigenschaften überein.
- In Übereinstimmung mit der vorliegenden Erfindung können Salze von Nucleinsäurederivaten mit antiviraler Aktivität leicht und in guter Ausbeute erhalten werden und ein 7-Positionsisomeres und andere Verunreinigungen können während der Herstellung vollständig entfernt werden.
Claims (5)
- Reinigungsverfahren, welches das Suspendieren oder Auflösen eines Gemisches, das (–)-9-[1'S,2'R-Bis(hydroxymethyl)cyclopropan-1'-yl]methylguanin und (7-[1'S,2'R-Bis(hydroxymethyl)cyclopropan-l'-yl]methylguanin enthält, in einem Alkohol oder einem wässerigen Alkohol und das Umsetzen der Suspension oder der Lösung mit einem Alkalimetallhydroxid oder Alkoxid und das selektive Ausfällen von Kristallen von Nukleinsäurederivaten der Formel (I)umfaßt, worin M ein Alkalimetall darstellt.
- Reinigungsverfahren nach Anspruch 1, wobei das Alkalimetallhydroxid Natriumhydroxid ist.
- Reinigungsverfahren nach Anspruch 1, wobei das Alkalimetallalkoxid Natriumalkoxid ist.
- Nukleinsäurederivat der Formel (I)worin M ein Alkalimetall darstellt.
- (–)-9-[1'S,2'R-Bis(hydroxymethyl)cyclopropan-1'-yl]methylguanin-Natriumsalz.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9185343A JPH1129572A (ja) | 1997-07-10 | 1997-07-10 | 核酸誘導体の精製法 |
| JP18534397 | 1997-07-10 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE69811997D1 DE69811997D1 (de) | 2003-04-17 |
| DE69811997T2 true DE69811997T2 (de) | 2004-01-08 |
Family
ID=16169138
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE69811997T Expired - Lifetime DE69811997T2 (de) | 1997-07-10 | 1998-06-24 | Verfahren zur Reindarstellung von Nukleinsäurederivaten |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6114525A (de) |
| EP (1) | EP0890574B1 (de) |
| JP (1) | JPH1129572A (de) |
| DE (1) | DE69811997T2 (de) |
| ES (1) | ES2190009T3 (de) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH11255768A (ja) * | 1998-03-09 | 1999-09-21 | Ajinomoto Co Inc | 抗ウイルス剤の製造方法 |
| EP3020712B1 (de) | 2011-11-10 | 2018-07-04 | Aratana Therapeutics NV | Verfahren zur herstellung von cyclopropan-derivaten |
| WO2013107515A1 (en) | 2012-01-20 | 2013-07-25 | Okapi Sciences Nv | Eye drop composition |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0184473A1 (de) * | 1984-10-26 | 1986-06-11 | Merck & Co. Inc. | Regiospezifische Synthese von 9-substituierten Purinazyklonukleosidverbindungen |
| DK0502690T3 (da) * | 1991-03-05 | 2000-05-22 | Ajinomoto Kk | Cyclopropanderivat |
| US5874578A (en) * | 1992-07-13 | 1999-02-23 | Bristol-Myers Squibb | Process for preparing guanine-containing antiviral agents and purinyl salts useful in such process |
| JP3769737B2 (ja) * | 1994-03-30 | 2006-04-26 | 味の素株式会社 | シクロプロパン誘導体及びその製造法 |
| IT1276126B1 (it) * | 1995-11-14 | 1997-10-27 | Archimica Spa | Procedimento per la preparazine di 9-((2-idrossietossi)metil) guanina |
-
1997
- 1997-07-10 JP JP9185343A patent/JPH1129572A/ja not_active Withdrawn
-
1998
- 1998-06-24 ES ES98111622T patent/ES2190009T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-06-24 DE DE69811997T patent/DE69811997T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-06-24 EP EP98111622A patent/EP0890574B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-07-10 US US09/113,509 patent/US6114525A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US6114525A (en) | 2000-09-05 |
| EP0890574B1 (de) | 2003-03-12 |
| DE69811997D1 (de) | 2003-04-17 |
| JPH1129572A (ja) | 1999-02-02 |
| EP0890574A1 (de) | 1999-01-13 |
| ES2190009T3 (es) | 2003-07-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CH493528A (de) | Verfahren zur Herstellung neuer substituierter Aminopyrimidine | |
| DE1620694B2 (de) | Verfahren zur Herstellung von 5-Methyl-7-diäthylamino-s-triazolo [1,5-a] pyrimidin und seinen Salzen mit Säuren | |
| EP2099773A1 (de) | Neues verfahren zur herstellung von 4,4'-(1-methyl-1,2-ethandiyl)-bis-(2,6-piperazindion) | |
| DE69811997T2 (de) | Verfahren zur Reindarstellung von Nukleinsäurederivaten | |
| DE69027084T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Purinverbindungen | |
| EP0252353B1 (de) | 4-Benzyloxy-3-pyrrolin-2-on-1-yl-acetamid, dessen Herstellung und Verwendung | |
| AT266315B (de) | Verfahren zur Reinigung von roher 7-Aminocephalosporansäure | |
| DE69936350T2 (de) | Verfahren zur herstellung fluorierter benzoesäuren | |
| EP0154122B1 (de) | Verfahren zur selektiven Hydrierung von Chlor enthaltenden Pyrimidinen und neue Pyrimidine | |
| DE2026040C3 (de) | Imidazolribosylcyclophosphate | |
| EP0115295B1 (de) | Verbessertes Verfahren zur Herstellung von Riboflavin | |
| EP0293814A1 (de) | Neue Mono- und Polyhydroxyacyl-Derivate polyoxygenierter Labdane, ein Verfahren zu deren Herstellung und ihre Verwendung als Medikamente | |
| DE69902115T2 (de) | Verfahren zur Reinigung von 2-Amino-6-chlor-9-[(1'S,2'R)-1',2'-bis(hydroxymethyl)cyclopropan-1'-yl]methylpurin | |
| DE830511C (de) | Verfahren zur Herstellung von neuen diquartaeren Salzen von Pyrimidylaminochinolinen | |
| DE3135840C1 (de) | 2-Azido-3-benzyloxy-propionsaeure-benzylester und Verfahren zu dessen Herstellung | |
| EP0065748B1 (de) | Verfahren zur Herstellung eines Cephemcarbonsäurederivats | |
| DE69619196T2 (de) | 2-Amino-6-chlorpurin und Verfahren zu seiner Herstellung | |
| DE879102C (de) | Verfahren zur Herstellung und Isolierung von monomeren Alkoxy-imino-isoindoleninen oder deren Kernsubstitutionsprodukten | |
| EP0158932B1 (de) | Verfahren zur Herstellung von 3-Cyano-4-aminoacetophenonen | |
| DE3325853C2 (de) | ||
| CH345016A (de) | Verfahren zur Herstellung von p-Oxy-phenylamiden | |
| EP0466164B1 (de) | Verfahren zur Herstellung 2-Chlor-1,7-dihydropurin-6-on und Verfahren zu dessen Reinigung | |
| CH650006A5 (en) | Process for the preparation of 5-fluorouracil derivatives | |
| DE2033971A1 (en) | Antimicrobial n-subst 6,7-methylenedioxy-4- - quinolone derivs prepn | |
| DE69704480T2 (de) | Verfahren zur herstellung von 2-amino-6-iodopurin |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 8364 | No opposition during term of opposition |