DE69710488T2 - Verfahren zur herstellung eines ganodericsäure enthaltenden extraktes aus ganoderma lucidum - Google Patents

Description

• Diese Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung eines neuen Extrakts aus Ganoderma lucidum (dem glänzenden Lackporling; Ling-Zhi-Pilz), der signifikante Mengen an entzündungshemmenden Ganodersäuren enthält.
• Ganoderma lucidum ist seit vielen Jahrhunderten in der traditionellen chinesischen und japanischen Medizin als Komponente zur Behandlung von Krankheiten mit einer entzündlichen Komponente verwendet worden. In neuerer Zeit sind die entzündungshemmenden Eigenschaften von Zubereitungen und Verbindungen, die von Ganoderma abgeleitet sind, durch pharmakologische Forschungen bestätigt worden. Zwei Untersuchungen sind besonders erwähnenswert. Kohda et al., Chem. Pharm. Bull, 33(4), 1367 bis 1374, (1985), fraktionierten Lösungsmittelextrakte von Ganoderma und fanden mit invitro-Tests signifikante entzündungshemmende Aktivität, wie die Hemmung der Histaminfreisetzung aus Mastzellen. Es hat sich herausgestellt, dass diese Aktivität speziell mit der Verbindung Ganodersäure C verbunden war, die mutmaßlich ein vielversprechendes nicht-steroidales entzündungshemmendes Arzneimittel (NSAID)ist.
• Diese Befunde sind in neuerer Zeit von W. B. Stavinoha, Poroc. 6. Int. Symp. Ganoderma Ivcidum, 3, (1995) und R. T. Streeper, N. Satsangi, W. B. Stavinoha, S. T. Weintraub, Supelco Reporter, 14(5), 1 bis 3 (1995) bestätigt worden, die die pharmakologischen Wirkungen eines Ethylacetatextrakts von Ganoderma untersuchten und sowohl topische als auch systemische entzündungshemmende Aktivität durch Standardtierversuche zeigten, wie die Crotonöl-induzierten Entzündungstests am Mauseohr.
• Die Patentzusammenfassung von Japan 19, 124 (C-1035) vom 16. März 1993 (JP-A-04304890) offenbart die Extraktion von Ganoderma lucidum mit konventionellen Lösungsmitteln.
• Journal of Chromatography 697, 1, 1995, 115 bis 122, betrifft die Extraktion von Naturprodukten aus Quellen wie Pilzen, Pflanzen und Mikroorganismen mit überkritischem flüssigem Kohlendioxid.
• Ganodersäuren (und die verwandten Lucidensäuren) sind eine strukturell verwandte. Klasse von Verbindungen auf Grundlage des Lanostanskeletts, das auf einer Triterpenstruktur basiert.
• In den vergangenen Jahren ist die Verwendung von verflüssigtem Kohlendioxid zum Extrahieren auf die Herstellung von Fraktionen aus Naturstoffen angewendet worden, die reich an biologisch aktiven Verbindungen sind, insbesondere Terpenoiden.
• Flüssiges Kohlendioxid hat eine hohe Selektivität, ist in der Lage, unpolare Verbindungen mit niedriger Molmasse zu solubilisieren, während in der Matrix Wachse und Lipide mit höherem Molekulargewicht zurückbleiben, die ansonsten das Volumen eines Extrakts erhöhen und den Gehalt an aktivem Material verdünnen würden.
• Flüssiges Kohlendioxid ist konventionellen unpolaren organischen Lösungsmitteln dahingehend überlegen, dass es nicht entflammbar ist, so dass das gebrauchte Lösungsmittel sicher in die Atmosphäre entlüftet werden kann und keine Abfallentsorgungs- oder Rückführungsprobleme mit sich bringt. Durch die inhärente Ungiftigkeit und hohe Flüchtigkeit von Kohlendioxid werden jegliche Probleme der Beseitigung von Restlösungsmittelgehalten umgangen.
• Erfindungsgemäß wird ein Verfahren zur Herstellung eines Ganodersäure enthaltenden Extrakts bereitgestellt, bei dem schrittweise Ganoderma lucidum mit flüssigem Kohlendioxid extrahiert wird und das Kohlendioxid von der resultierenden Mischung verdampfen gelassen wird.
• Der resultierende Restextrakt ist möglicherweise reich an Ganodersäure und kann entzündungshemmende Aktivität zeigen, die einem konventionell erhaltenen Ethylacetatextrakt von Ganoderma lucidum vergleichbar ist. Die Entfernung des restlichen Ethylacetats von dem Produkt wird jedoch vermieden.
• Es kann ein zusätzliches Lösungsmittel verwendet werden, beispielsweise ein polares Zusatzlösungsmittel wie C&sub1;- bis C&sub4;-Alkohol, vorzugsweise Ethanol. Es kann eine zusätzlche Lösungsmittelmenge von 5 bis 20 Gew.-%, vorzugsweise 20 Gew.-% verwendet werden.
• Bevorzugte Verfahren beinhalten Extraktion bei einem Druck von 1500 bis 4500 psi (100 bis 310 bar), vorzugsweise etwa 1500 psi (100 bar), und bei einer Temperatur im Bereich von 20 bis 35ºC, vorzugsweise etwa 28ºC.
• Die Erfindung wird mittels eines Beispiels näher erläutert, das jedoch nicht im einschränkenden Sinne wirken soll.
BEISPIEL
• Eine Menge grob gemahlene Ganoderma Lucidum-Pilze wurde in ein geeignetes Druckgefäß eingebracht. Ein Volumen flüssiges Kohlendioxid im Verhältnis von ungefähr 6 ml auf 1 g pflanzliches Material wurde mit einer Rate von ungefähr 1 ml/Minute durch das Rohmaterial geleitet. Das flüssige Kohlendioxid wurde dann aufgefangen und der Druck entspannt, so dass das Kohlendioxid in die Atmosphäre entlüften gelassen wurde. Der Extrakt verblieb in Abhängigkeit von den genauen Extraktionsbedingungen als Öl oder halbfestes Material in dem Sammelgefäß.
• Es wurden die folgenden Extraktionsbedingungen verwendet:
• Die chemische Zusammensetzung der Extrakte wurde unter Verwendung des von Kohda et al. veröffentlichten Dünnschichtchromatographieverfahrens untersucht.
• Ganodersäure B und Ganodersäure C wurden in allen Extrakten durch die charakteristischen roten Flecken nach Behandlung mit Cer(IV)sulfatreagenz mit Rf-Werten von ungefähr 0,25 und 0,42 identifiziert, wie von Kohda et al. beschrieben ist. Es wurde zudem gefunden, dass diese Komponenten eine charakteristische Fluoreszenz zeigen, wenn sie UV-Licht mit 254 nm ausgesetzt werden.
• Ein Ethylextrakt von Ganoderma Lucidum wurde zu Vergleichszwecken hergestellt. Das DC-Profil der Extrakte mit flüssigem Kohlendioxid war im Wesentlichen mit dem des Ethylacetatextrakts identisch, und die Extrakte enthielten vergleichbare Gehalte an Ganodersäuren B und C.

Claims (10)

1. Verfahren zur Herstellung von Ganodersäure enthaltendem Extrakt, mit den Schritten der Extraktion von Ganoderma Lucidum mit flüssigem Kohlendioxid und des Verdampfenlassens des Kohlendioxids aus der resultierenden Mischung.

2. Verfahren nach Anspruch 1, bei dem die Extraktion mit einer Mischung aus flüssigem Kohlendioxid und einem polaren zusätzlichen Lösungsmittel durchgeführt wird.

3. Verfahren nach Anspruch 2, bei dem das zusätzliche Lösungsmittel ein C&sub1;- bis C&sub4;-Alkohol ist.

4. Verfahren nach Anspruch 3, bei dem das zusätzliche Lösungsmittel Ethanol ist.

5. Verfahren nach einem der Ansprüche 2 bis 4, bei dem die Menge an zusätzliche Lösungsmittel 5 bis 20 Gew.-% beträgt.

6. Verfahren nach Anspruch 5, bei dem die Menge an zusätzliche Lösungsmittel 20 Gew.-% beträgt.

7. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, bei dem die Extraktion bei einem Druck von 100 bis 310 bar (1500 bis 4500 psi) durchgeführt wird.

8. Verfahren nach Anspruch 7, bei dem die Extraktion bei einem Druck von 100 bar (1500 psi) durchgeführt wird.

9. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, bei dem die Extraktion bei einer Temperatur von 20 bis 35ºC durchgeführt wird.

10. Verfahren nach Anspruch 9, bei dem die Temperatur 20ºC beträgt.