DE69217989T2

DE69217989T2 - 5-0-Desosaminylerrythronolide-Derivate

Info

Publication number: DE69217989T2
Application number: DE69217989T
Authority: DE
Inventors: Toshifumi Asaka; Katsuo Hatayama; Masato Kashimura; Yoko Misawa; Shigeo Morimoto
Original assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1991-12-27
Filing date: 1992-12-25
Publication date: 1997-06-12
Anticipated expiration: 2012-12-26
Also published as: WO1993013115A1; KR940703842A; EP0619319B1; DE69217989D1; KR100265916B1; EP0619320A1; ES2104118T3; DE69219900T2; AU3172893A; EP0619319A4; AU663145B2; KR100266183B1; ES2101290T3; JP3132002B2; ATE149508T1; KR940703841A; US5631354A; EP0619320B1; AU667334B2; AU3172793A

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue Derivate eines Antibiotikums Erythromycin. Sie betrifft insbesondere neue Derivate von 5-O-Desosaminylerythronolid-Derivaten und die pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionssalze davon.
Erythromycin ist ein Antibiotikum, das klinisch vielfach als Mittel zur Heilung infektiöser Krankheiten, die durch grampositive Bakterien, einige gramnegative Bakterien, Mycoplasmen usw. verursacht werden. Es wurden viele Erythromycinderivate zur Verbesserung der biologischen und/oder pharmakodynamischen Eigenschaften von Erythromycm hergestellt. Als 5-O-Desosaminylerythronolid-Derivate wurden beispielsweise 3-O-Acyl-5-O-desosaminylerythronolid-Derivate in der U.S. Patentschrift 3 923 784 beschrieben. Es wurde jedoch allgemein angenommen, daß 5-O-Desosaminylerythronolid-Derivate eine schlechte antibakterielle Aktivität aufweisen, und die antibakterielle Aktivität der obigen als Beispiele aufgeführten Derivate ist ebenfalls sehr schwach. In der EP-A-0 487 411 werden verschiedene Erythromycinderivate, ein Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Anwendung als Arzneimittel beschrieben. Der vorliegenden Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, neue Antibiotika mit starker antibakterieller Aktivität zur Verfügung zu stellen.
Die genannten Erfinder haben verschiedene Untersuchungen hinsichtlich der antibakteriellen Aktivität von 5-O-Desosaminylerythronolid-Derivaten durchgeführt und als Folge gefunden, daß Verbindungen, die durch Einführung einer Carbamoylgruppe in 5-O-Desosaminylerythronolid-Derivate in der 3-Stellung erhalten werden, eine unerwartet starke antibakterielle Aktivität besitzen, wodurch die vorliegende Erfindung zustande gekommen ist.
Die erfindungsgemäßen 5-O-Desosaminylerythronolid-Derivate werden durch die Formel
dargestelllt [worin jeder Substituent R¹ und R² ein Wasserstoffatom, eine Phenylgruppe, eine substituierte Phenylqruppe mit 1 bis 5 Substituenten, ausgewählt aus Halogenatomen, Nitrogruppen und Aminogruppen, eine C&sub1;-C&sub1;&sub5;-Alkylgruppe, eine C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Alkylgruppe, die mindestens ein Stickstoffatom, Sauerstoffatom oder Schwefelatom enthält, eine C&sub7;-C&sub1;&sub5;-Aralkylgruppe oder eine C&sub7;-C&sub1;&sub5;-Aralkylgruppe, die mindestens ein Stickstoffatom, Sauerstoffatom oder Schwefelatom enthält, bedeuten, R¹ und R² zusammen mit dem benachbarten Stickstoffatom einen Ring bilden können, Z ein Stickstoffatom oder eine Gruppe, die durch die Formel =N-O-R³ dargestellt wird, bedeutet (worin R³ ein Wasserstoffatom, eine C&sub1;-C&sub1;&sub8;-Alkylgruppe, eine C&sub2;-C&sub1;&sub8;-Alkylgruppe, die mindestens ein Stickstoffatom, Sauerstoff oder Schwefelatom enthält, eine Benzylgruppe oder eine substituierte Benzylgruppe mit 1 bis 5 Substituenten, ausgewählt aus Halogenatomen und C&sub1;-C&sub4;-Alkylgruppen ist), V eine Hydroxylgruppe bedeutet und W ein Wasserstoffatom oder eine Hydroxylgruppe bedeutet, oder V und W zusammen mit den Kohlenstoffatomen in den 11- und 12-Stellungen eine Gruppe der Formel
oder eine Gruppe der Formel
bedeuten, R ein Wasserstoffatom, eine C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Alkoxycarbonylgruppe, eine C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Alkoxycarbonylgruppe, die mindestens ein Sauerstoffatom in ihrer Alkylgruppierung enthält, eine C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Acylgruppe, eine C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Acylgruppe, die mindestens ein Sauerstoffatom enthält, oder eine Pyridylcarbonylgruppe] bedeutet und die pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionssalze davon.
In der vorliegenden Erfindung sind die Halogenatome Fluor-, Chlor-, Brom- und Iodatome. Der Ausdruck "Alkylgruppe" bedeutet eine lineare oder verzweigte Gruppe. Als Beispiele für die C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Alkylgruppe, die mindestens ein Stickstoffatom, Sauerstoff oder Schwefelatom enthält, können eine Aminoethylgruppe, Dimethylaminoethylgruppe, Benzylaminoethylgruppe, N-Benzyl-N-methylaminoethylgruppe, Dibenzylaminoethylgruppe, 2,3-Dihydroxypropylgruppe, 3-Aminopropylgruppe und 2-Hydroxy-3-aminopropylgruppe genannt werden. Als Beispiele für die C&sub7;-C&sub1;&sub5;- Aralkylgruppe können die Benzylgruppe, Phenethylgruppe und Diphenylmethylgruppe genannt werden. Als Beispiele für die C&sub7;-C&sub1;&sub5;-Aralkylgruppe, die mindestens ein Stickstoffatom, Sauerstoff oder Schwefelatom enthält, können die Nitrobenzylgruppe, Methoxybenzylgruppe, Methylthiobenzylgruppe, Aminobenzylgruppe und Dimethylaminobenzylgruppe genannt werden. Der Ausdruck "C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Alkoxycarbonylgruppe" bedeutet eine substituierte Carbonylgruppe mit einer Alkoxygruppe als Substituent, und ein Beispiel ist die Methoxycarbonylgruppe.
Als C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Alkoxycarbonylgruppe, die mindestens ein Sauerstoffatom in ihrer Alkylgruppierung enthält, können als Beispiele die 2-Methoxyethoxycarbonylgruppe, 2-[2-(2-Methoxyethoxy)ethoxy]ethoxycarbonylgruppe und 2-[2-(2-Ethoxyethoxy)ethoxy]ethoxycarbonylgruppe genannt werden. Beispiele für die C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Acylgruppe sind die Acetylgruppe, Propionylgruppe und Benzoylgruppe. Der Ausdruck "C&sub2;-C&sub1;&sub5;- Acylgruppe, die mindestens ein Sauerstoffatom enthält" bedeutet eine substituierte Acylgruppe mit beispielsweise einer Alkoxycarbonylgruppe als Substituenten, und die Ethylsuccinylgruppe ist ein Beispiel dafür. Als pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze können als Beispiele die Acetate, Propionate, Butyrate, Formiate, Trifluoracetate, Maleate, Tartrate, Citrate, Stearate, Succinate, Ethylsuccinate, Lactobionate, Gluconate, Glucoheptonate, Benzoate, Methansulfonate, Ethansulfonate, 2-Hydroxyethansulfonate, Benzolsulfonate, p-Toluolsulfonate, Laurylsulfate, Malate, Aspartate, Glutaminate, Adipate, Cysteinsalze, Hydrochloride, Hydrobromide, Phosphate, Sulfate, Hydroiodide, Nicotinate, Oxalate, Picrate, Thiocyanate, Undecanoate, Polyacrylate und Carboxyvinylpolymersalze genannt werden.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen umfassen auch solche, bei denen die Koordination in der 3-Stellung natürlich ist (3S-Formen), und solche, bei denen die Koordination in der 3-Stellung nicht natürlich ist (3R-Formen). Die erfindungsgemäßen Verbindungen können beispielsweise wie folgt hergestellt werden.

[Herstellungsverfahren 1]

Verfahren, bei dem 5-O-Desosaminyl-6-O-methylerythronolid A als Ausgangsmaterial verwendet wird.

Stufe (1):

5-O-Desosaminyl-6-O-methylerythronolid A wird mit einem Säureanhydrid der Formel R&sub2;O (worin R die oben gegebene Definition besitzt, mit Ausnahme eines Wasserstoffatoms) oder einem Halogenid der Formel R-X (worin R die oben gegebene Definition besitzt, mit Ausnahme eines Wasserstoffatoms, und X ein Halogenatom bedeutet) und einer Base in einem inerten Lösungsmittel bei einer Temperatur von 0ºC bis 30ºC umgesetzt, wobei eine Verbindung der Formel (a)
erhalten wird, worin R die oben gegebene Definition besitzt. Als geeignetes inertes Lösungsmittel kann hier Dichlormethan, Dichlorethan, Aceton, Pyridin, Ethylacetat, Tetrahydrofuran usw. verwendet werden. Als Säureanhydrid oder Halogenid können Anhydride und Halogenide der Essigsäure, Propionsäure, Benzoesäure und Pyridincarbonsäure, und Kohlensäureesterhalogenide, wie 2-[2-(2-Methoxyethoxy)ethoxy]ethylchlorformiat verwendet werden. Als Base können Natriumhydrogencarbonat, Natriumcarbonat, Kaliumcarbonat, Triethylamin, Pyridin, Tributylamin usw. verwendet werden.

Stufe (2):

Die bei der Stufe (1) erhaltene Verbindung wird mit 1,1'- Carbonyldiimidazol in einem inerten Lösungsmittel bei einer Temperatur von 0ºC bis 80ºC umgesetzt, wonach ein Amin der Formel
(worin R¹ und R² die oben gegebenen Definitionen besitzen) zugegeben wird und die Reaktion bei einer Temperatur von 0ºC bis 30ºC durchgeführt wird, wobei eine erfindungsgemäße Verbindung der Formel (b)
erhalten wird, worin R die oben gegebene Definition besitzt. Die Verbindung der Formel (b) kann ebenfalls unter Verwendung eines geeigneten Isocyanats und einer Base erhalten werden.

Stufe (3):

Die bei der Stufe (2) erhaltene Verbindung wird in einem niedrigen Alkohol bei Raumtemperatur bis 100ºC umgesetzt, wobei eine erfindungsgemäße Verbindung der Formel (c)
erhalten wird. Hier können als niedriger Alkohol Methanol, Ethanol, Propanol, Butanol usw. verwendet werden.

Stufe (4):

Die bei der Stufe (2) erhaltene Verbindung wird mit einem Reagens, wie einem Phosgendimeren oder Phosgentrimeren, unter Eiskühlen in einem geeigneten inerten Lösungsmittel in Anwesenheit einer Base, wie Pyridin, umgesetzt, wobei eine Verbindung der Formel (d)
erhalten wird, worin R die oben gegebene Definition besitzt. Hier ist das geeignete inerte Lösungsmittel das gleiche, wie es bei der Stufe (1) verwendet wurde.

Stufe (5):

Die Verbindung der Formel (d) kann ebenfalls durch Umsetzung der Verbindung, die bei der Stufe (1) erhalten wurde, auf gleiche Weise wie bei der Stufe (4), Zugabe eines Amins der Formel
(worin R¹ und R² die oben gegebenen Definitionen besitzen) in den gleichen Reaktor, und dann Durchführung der Reaktion bei einer Temperatur von 0ºC bis Raumtemperatur erhalten werden. Dann wird die Verbindung (d) auf gleiche Weise wie bei der Stufe (3) umgesetzt, wobei eine erfindungsgemäße Verbindung der Formel (e)
erhalten wird.

[Herstellungsverfahren 2]

Verfahren unter Verwendung des 6-O-Methylerythromycin-A-9- oxims als Ausgangsmaterial

Stufe (6):

6-O-Methylerythromycin-A-9-oxim wird mit einer Säure in einem niedrigen Alkohol bei einer Temperatur von 0ºC bis 30ºC umgesetzt, wobei eine Verbindung der Formel (f) erhalten wird
Hier ist der niedrige Alkohol der gleiche, wie er bei der Stufe (3) verwendet wird. Als Säure kann Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure usw. verwendet werden.

Stufe (7):

Die bei Stufe (6) erhaltene Verbindung wird mit einem Reagens der Formel R³D (worin R³ die oben gegebene Definition besitzt und D ein Halogenatom bedeutet) und einer Base in einem inerten Lösungsmittel bei einer Temperatur von 0ºC bis 30ºC umgesetzt, wobei eine Verbindung der Formel (g)
erhalten wird, worin R³ die oben gegebene Definition besitzt. Anschließend wird diese Verbindung auf gleiche Weise wie bei den Stufen (1), (2) und (3) umgesetzt, wobei eine erfindungsgemäße Verbindung der Formel (h) gebildet wird
worin R³ die oben gegebene Defintion besitzt. Hier können als inerte Lösungsmittel Dimethylformamid, N-Methylpyrrolidon, Tetrahydrofuran, Acetonitril und die Mischungen dieser Lösungsmittel verwendet werden. Als Base kann Natriumhydrid, Kaliumhydroxid, Natriumbistrimethylsilylamid usw. verwendet werden.

Stufe (8): (ist eine Alternative zur Stufe (7))

Die Verbindung der Formel (g) wird auf gleiche Weise wie bei den Stufen (1) und (2) und dann auf gleiche Weise wie bei Stufe (4) umgesetzt, um sie in ein 11,12-cyclisches Carbonat zu überführen, welches auf gleiche Weise wie bei Stufe (3) umgesetzt wird, wobei eine erfindungsgemäße Verbindung der Formel (i) erhalten wird
worin R³ die oben gegebene Definition besitzt.

Stufe (9): (ist eine Alternative zur Stufe (7))

Die bei der Stufe (6) erhaltene Verbindung wird auf gleiche Weise, wie bei Stufe (1) beschrieben, umgesetzt, um die Hydroxylgruppe in der 2'-Stellung und die Hydroxylgruppe des Oxims in der 9-Stellung zu schützen, danach wird das Reaktionsprodukt auf gleiche Weise wie bei den Stufen (2) und (3) umgesetzt, wobei eine erfindungsgemäße Verbindung der Formel (j)
erhalten wird.

Stufe (10): (ist eine Alternative zu Stufe 7))

Die bei der Stufe (6) erhaltene Verbindung wird auf gleiche Weise, wie bei Stufe (1) beschrieben, umgesetzt, um die Hydroxylgruppe in der 2'-Stellung und die Hydroxylgruppe des Oxims in der 9-Stellung zu schützen, danach wird das Reaktionsprodukt auf gleiche Weise wie bei den Stufen (2), (4) und dann (3) umgesetzt, wobei eine erfindungsgemäße Verbindung der Formel (k)
erhalten wird.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können oral oder parenteral verabreicht werden. Ihre pharmazeutischen Formen für die Verabreichung sind Tabletten, Kapseln, Pulver, Pastillen (Lutschbonbons), Salben, Suspensionen, Suppositorien, Injektionen usw. Diese können nach an sich bekannten Verfahren hergestellt werden.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen besitzen eine starke antibakterielle Aktivität gegenüber Erythromycin-empfindlichen Bakterien und resistenten Bakterien. Daher sind die erfindungsgemäßen Verbindungen nützlich als antibakterielle Mittel zur Heilung von infektiösen Krankheiten, die durch Bakterien in Menschen und Tieren (einschließlich Nutztieren) hervorgerufen werden.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung.

Beispiel 1

Herstellung von 3-O-(2,3,4,5,6-Pentafluorphenyl)aminocarbonyl-5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid-A-11, 12-cylisches-Carbonat
(1) Zu einer Lösung von 11,78 g (0,02 mol) 5-O-Desosaminyl-6-O-methylerythronolid A in 100 ml Aceton wurden 2,27 ml (0,024 mol) Essigsäureanhydrid unter Eiskühlung zugegeben, und anschließend wurde bei Raumtemperatur 6 Stunden gerührt. Das Aceton wurde bei verringertem Druck verdampft, und der Rückstand wurde mit Dichlormethan extrahiert. Die Dichlormethanschicht wurde mit einer gesättigten Natriumhydrogencarbonatlösung und dann mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, danach wurde das Lösungsmittel bei verringertem Druck eingedampft. Der Rückstand wurde aus Ether - n-Hexan umkristallisiert, wobei 12,17 g 2'-O-Acetyl-5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid als weißes Pulver erhalten wurden.
Fp. 158 - 160ºC
Masse (FAB) m/z; 632 [MH]+
¹H-NMR (200 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,07 (3H, s), 2,26 (6H, s), 2,95 (3H, s), 3,26 (3H, S), 3,96 (1H, s)
IR (KBr, cm&supmin;¹); 3469, 1750, 1733, 1693
(2) 1,90 g (3,0 mmol) der Verbindung, die oben bei (1) erhalten wurde in 25 ml Dichlormethan gelöst, und 3,63 ml (45 mmol) Pyridin und 0,90 ml (7,5 mmol) Trichlormethylchlorformiat wurden unter Eiskühlung zugegeben, und dann wurde 3 Stunden gerührt. Danach wurden 2,75 g (15 mmol) 2,3,4,5,6-Pentafluoranilin zugegeben, und das entstehende Gemisch wurde bei Raumtemperatur 15 Stunden gerührt. Ein Stück Eis und 0,5 g Natriumhydrogencarbonat wurden zugegeben, und dann wurde mit Ethylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mittels Silicalgelsäulenchromatographie (Eluierungsmittel Hexan : Aceton : Triethylamin = 10 : 6 : 0,2) gereinigt, wobei 1,29 g 2'-O-Acetyl-3-O-(2,3,4,5,6- pentafluorphenyl)aminocarbonyl-5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid-A-11,12-cyclisches-Carbonat erhalten wurden.
(3) 450 mg (0,52 mmol) der Verbindung, erhalten gemäß (2) oben, wurden in 30 ml Methanol gelöst, und die entstehende Lösung wurde 24 Stunden lang gerührt, danach wurde das Lösungsmittel verdampft, wobei 375 mg der Titelverbindung erhalten wurden.
Fp. 227 - 229ºC (kristallisiert aus Methanol)
Masse (FAB) m/z; 825 [MH]+
¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,30 (6H, s), 2,99 (3H, s)
IR (KBr, cm&supmin;¹); 3420, 1813, 1747, 1721

Beispiel 2

Herstellung von 3-O-Imidazolylcarbonyl-5-O-desosaminyl-6- O-methylerythronolid-A-9-[O-(2,4,6-trimethylbenzyl)oxim]
(1) 500 g (0,655 mol) 6-O-Methylerythromycin-A-9-oxim wurden in 1 Liter 1N Chlorwasserstoffsäure gelöst, und die Lösung wurde bei Raumtemperatur 24 Stunden stehengelassen. Der pH der Lösung wurde dann mit einer wäßrigen Natriumhydroxidlösung auf 10 eingestellt, und die ausgefallenen Kristalle wurden abfiltriert. Die Kristalle wurden in Dichlormethan gelöst, und die entstehende Lösung wurde mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen und dann über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Danach wurde das Dichlormethan bei verringertem Druck verdampft, und der Rückstand wurde aus Methanol kristallisiert, wobei 259,8 g 5-O-Desosaminyl-6-O-methylerythronolid-A-9-oxim als weißes Pulver erhalten wurden.
Fp. 257 - 260ºC
Masse (FAB) m/z; 605 [MH]+
¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 1,42 (3H, s), 2,34 (6H, s), 2,99 (3H, s), 3,26 (1H, s), 3,57 (1H, s), 4,37 (1H, s), 4,42 (1H, d, J=7Hz), 5,23 (1H, dd, J=11hz, 2Hz), 7,43 (1H, breit- s)
IR (KBr, cm&supmin;¹); 3523, 3370, 1712, 1188, 1169, 1085
(2) 1,73 g (2,87 mmol) der oben bei (1) erhaltenen Verbindung und 726 mg (4,30 mmol) 2,4,6-Trimethylbenzylchlorid wurden in 20 ml N,N-Dimethylformamid gelöst, und anschließend wurden 138 mg (3,44 mmol) 60%iges Natriumhydrid zugegeben, und die Reaktion erfolgte bei Raumtemperatur während 6 Stunden, wobei 2,34 g 5-O-Desosaminyl-6-O-methylerythronolid-A-9-[O-(2,4,6-trimethylbenzyl)oxim] als weiße schaumartige Substanz erhalten wurden.
(3) In 20 ml Aceton wurden 2,34 g (3,18 mmol) der oben bei (2) erhaltenen Verbindung mit 0,39 ml (4,13 mmol) Essigsäureanhydrid umgesetzt, wobei 1,74 g 2'-O-Acetyl-5-O- desosaminyl-6-O-methylerythronolid-A-9-[O-(2,4,6-trimethylbenzyl)oxim] als weiße schaumartige Substanz erhalten wurden.
(4) 900 mg (1,16 mmol) der oben bei (3) erhaltenen Verbindung wurden in 12 ml Dichlormethan gelöst, anschließend wurden 940 mg (85,8 mmol) 1,1'-Carbonyldiimidazol und 156 mg (1,28 mmol) 4-Dimethylaminopyridin zugegeben, und das entstehende Gemisch wurde am Rückfluß 7,5 Stunden erhitzt. Die Reinigung durch Silicalgelsäulenchromatographie (Eluierungsmittel Chloroform : Methanol : Ammoniak = 20 : 1 : 0,3) ergab 117 mg der Titelverbindung und 290 mg 2'-O- Acetyl-3-O-imidazolylcarbonyl-5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid-A-9-[O-(2,4,6-trimethylbenzyl)oxim] als weiße schaumartige Substanzen.
Die Titelverbindung:
¹H-NMR (200 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,26 (3H, s), 2,37 (9H, s); 2,41 (3H, s), 2,99 (3H, s)s 4,06 (1H, s), 5,70 (2H, s), 6,85 (2H, s), 7,11 (1H)
2'-O-Acetyl-3-O-imidazolylcarbonyl-5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid-A-9-[O-(2,4,6-trimethylbenzyl)oxim]:
¹H-NMR (200 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,20 (3H, breit-s), 2,26 (3H, s), 2,36 (12H, s), 2,98 (3H, s), 3,29 (1H, s), 4,60 (1H, s), 5,70 (2H, s); 6,84 (2H, s), 7,19 (1H), 7,49 (1H), 8,20 (1H)

Beispiel 3

Herstellung von 3-O-(2,4-Difluorphenyl)aminocarbonyl-5-O- desosaminyl-6-O-methylerythronolid-A-11,12-cyclisches-Carbonat
(1) 50 g (84,8 mmol) Verbindung erhalten in Beispiel 1, (1) wurden in 500 ml Dichlormethan gelöst, und 102,6 ml (1,27 mol) Pyridin wurden unter Eiskühlung zugegeben. Bei der gleichen Temperatur wurden 40 ml einer Lösung aus 25,4 ml (212 mmol) Trichlormethylchlorformiat in Dichlormethan tropfenweise zugegeben, und das entstehende Gemisch wurde 5,5 Stunden gerührt. Geringe Mengen an kaltem Wasser und eine gesättigte Natriumhydrogencarbonatlösung wurden zu dem Reaktionsgemisch zugegeben, und anschließend wurde mit Dichlormethan extrahiert. Die Dichlormethanschicht wurde mit einer gesättigten Natriumhydrogencarbonatlösung und dann einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, danach wurde das Lösungsmittel bei verringertem Druck verdampft.
Der Rückstand wurde durch Silicalgelsäulenchromatographie (Eluierungsmittel Aceton : n-Hexan : Triethylamin = 6-10 : 10 : 0,2) gereinigt, wobei 41,93 g 2'-O-Acetyl-5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid-A-11,12-cyclisches-Carbonat als weiße schaumartige Substanz erhalten wurden.
¹H-NMR (200 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,05 (3H, s), 2,25 (6H, s), 2,92 (3H, s), 4,57 (1H, d, J=9Hz), 4,74 (1H, s), 4,75 (1H, dd, J=10Hz, 9Hz), 5,13 (1H, dd, J=l2Hz, 2Hz)
(2) 450 mg (0,685 mmol) der oben bei (1) erhaltenen Verbindung wurden in 10 ml Tetrahydrofuran gelöst, und anschließend wurden dazu 0,41 ml (3,425 mmol) 2,4-Difluorphenylisocyanat und 0,08 ml (1,028 mmol) Pyridin gegeben, und das entstehende Gemisch wurde bei Raumtemperatur 18 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit Ethylacetat extrahiert, und der Extrakt wurde mit einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen und dann durch Silicalgelsäulenchromatographie (Eluierungsmittel Chloroform : Methanol : 25%iges wäßriges Ammoniak = 20 : 1 : 0,1) gereinigt.
(3) 40 mg der bei (2) erhaltenen Verbindung wurden in Methanol am Rückfluß 3 Stunden zur Entfernung der Acetylgruppe erhitzt, wonach 40 mg Titelverbindung als weiße schaumartige Substanz erhalten wurden.
¹H-NMR (200 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 1,30 (3H, s); 2,22 (6H, s); 3,03 (3H, s); 4,03 (1H, d, J=7Hz), 4,76 (1H, s), 5,02 (1H, d, J=9Hz), 6,82-6,95 (2H), 7,18 (1H, breit-s), 8,02-8,15 (1H)

Beispiel 4

Herstellung von 3-O-(3-Nitrophenyl)aminocarbonyl-5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid-A-11,12-cyclisches-Carbonat
1,65 g der Titelverbindung wurden erhalten, indem eine Kombination aus 1,90 g (3,0 mmol) der Verbindung, erhalten gemäß Beispiel 1, (1), 3,63 ml (45 mmol) Pyridin und 0,90 ml (7,5 mmol) Trichlormethylchlorformiat und dann 2,07 g (15 mmol) 3-Nitroanilin verwendet wurden, und indem auf gleiche Weise wie in Beispiel 1 umgesetzt wurde.
Masse (FAB) m/z; 780 [MH]+
¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,18 (6H, s); 3,04 (3H, s); 7,79 (1H, breit-s), 7,51 (1H, m), 7,88 (1H, m), 7,93 (1H, m), 8,38 (1H, m)
IR (KBr, cm&supmin;¹); 3346, 1818, 1742, 1706

Beispiel 5

Herstellung von 3-O-[2-(Dimethylamino)ethyl]aminocarbonyl- 5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid-A-11,12-cylisches- Carbonat
0,86 g der Titelverbindung wurden unter Verwendung eines Gemisches aus 1,90 g (3,0 mmol) der Verbindung, erhalten gemäß Beispiel 1, (1), 3,63 ml (45 mmol) Pyridin und 0,90 ml (7,5 mmol) Trichlormethylchlorformiat und dann 1,63 g (15 mmol) N,N-Dimethylethylendiamin und Umsetzung auf gleiche Weise, wie in Beispiel 1 beschrieben, erhalten.
Masse (FAB) m/z; 730 [MH]+
¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,26 (6H, s); 2,30 (6H, s), 3,02 (3H, s), 5,43 (1H, t)
IR (KBr, cm&supmin;¹); 3387, 1815, 1738, 1713

Beispiel 6

Herstellung von 3-O-[2-(Dimethylamino)ethyl]aminocarbonyl-5-O-desosaminyl-6-methylerythronolid A
2,95 g (5,0 mmol) 5-O-Desosaminyl-6-O-methylerythronolid A wurden in 25 ml Tetrahydrofuran gelöst, und anschließend wurden dazu 2,43 g (15 mmol) N,N'-Carbonyldiimidazol zugegeben, und das entstehende Gemisch wurde 5 Stunden am Rückfluß erhitzt. Nach der Extraktion mit Ethylacetat wurde das Lösungsmittel verdampft, und der Überschuß an N, N'-Carbonyldiimidazol wurde mittels Silicalgelsäulenchromatographie (Eluierungsmittel Aceton : Chloroform) entfernt. 2,96 g des so erhaltenen farblosen caramelartigen Produktes wurden in 20 ml Ethylacetat gelöst, und anschließend wurden dazu 1,09 g (10,0 mmol) N,N-Dimethylethyldiamin gegeben, und das entstehende Gemisch wurde bei Raumtemperatur 3 Tage gerührt. Nach der Extraktion mit Ethylacetat wurde der Extrakt durch Silicalgelsäulenchromatographie (Eluierungsmittel 8-15%iger Methanol - Chloroform) gereinigt, wobei 0,53 g der Titelverbindung als farbloses kristallines Pulver erhalten wurden.
Masse (FAB) m/z; 704 [MH]+
¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,23 (6H, s), 2,28 (6H, s); 3,06 (3H, s)
IR (KBr, cm&supmin;¹); 3455, 3327, 1738, 1723, 1697

Beispiel 7

Herstellung von 3-O-(3-Aminopropyl)aminocarbonyl-5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid A
(1) 1,26 g (2,0 mmol) der in Beispiel 1, (1) erhaltenen Verbindung wurden in einer Lösungsmittelmischung aus 15 ml Dichlorethan und 10 ml Tetrahydrofuran gelöst, und anschließend wurden dazu 1,30 g (8 mmol) N,N'-Carbonyldiimidazol gegeben, und das entstehende Gemisch wurde am Rückfluß 8 Stunden erhitzt. Das Lösungsmittel wurde verdampft, und der Rückstand wurde der Silicalgelsäulenchromatographie (Eluierungsmittel Aceton : Hexan : Triethylamin = 5 : 10 : 0,1) unterworfen, wobei 1,14 g 2'-O-Acetyl-3-O-imidazolylcarbonyl-5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid A erhalten wurden.
(2) 1 g der Verbindung, erhalten in (1) oben, wurden in 10 ml Tetrahydrofuran gelöst, und anschließend wurden dazu 0,22 ml (2,5 mmol) 1,3-Diaminopropan gegeben, und das entstehende Gemisch wurde bei Raumtemperatur 16 Stunden gerührt. Das Lösungsmittel wurde bei verringertem Druck verdampft, und der Rückstand wurde mit Methylenchlorid extrahiert. Dann wurde der Extrakt durch Silicalgelsäulenchromatographie (Eluierungsmittel Chloroform : Methanol wäßriges Ammoniak = 100 : 20 : 0,5) gereinigt, wobei 0,74 g der Titelverbindung erhalten wurden, welche farblos und schaumartig war.
Mas
se (FAB) m/z; 690 [MH]+
¹H-NMR(300 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,28 (6H, s), 3,05 (3H, s)
IR (KBr, cm&supmin;¹); 3414, 1724

Beispiel 8

Herstellung von 3-O-(2,3-Dihydroxypropyl)aminocarbonyl-5- O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid A
1,81 g (2,5 mmol) einer Verbindung, erhalten auf gleiche Weise wie in Beispiel 7, (1), wurden in einer Lösungsmittelmischung aus 15 ml Tetrahydrofuran und 10 ml N,N-Dimethylformamid gelöst, und anschließend wurden dazu 683 mg (7,5 mmol) 3-Amino-l,2-propandiol gegeben, und das entstehende Gemisch wurde bei Raumtemperatur 20 Stunden gerührt. Das Lösungsmittel wurde bei verringertem Druck verdampft, und der Rückstand wurde mit Ethylacetat extrahiert. Das Lösungsmittel wurde verdampft, und 1,72 g der farblosen und schaumartigen Verbindung, die so erhalten wurde, wurde in 10 ml Methanol gelöst, danach wurde die entstehende Lösung 15 Stunden gerührt. Das Lösungsmittel wurde verdampft, und der Rückstand wurde durch Silicalgelsäulenchromatographie (Eluierungsmittel Chloroform : Methanol : wäßriges Ammoniak = 100 : 10 : 0,1) gereinigt, wobei 1,17 g farblose und schaumartige Verbindung erhalten wurden.
Masse (FAB) m/z; 707 [MH]+
¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,48 (6H, s), 3,04 (3H, s)
IR (KBr, cm&supmin;¹); 3436, 1735

Beispiel 9

Herstellung von 3-O-(3-Amino-2-hydroxy)propyl]aminocarbonyl-5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid A
0,82 g der Titelverbindung, die farblos und schaumartig war, wurden unter Verwendung von 1,5 g (2,07 mmol) einer Verbindung, erhalten auf gleiche Weise wie in Beispiel 7, (1) und 372 mg (4,13 mmol) 1,3-Diamino-2-propanol und Umsetzung auf gleiche Weise, wie in Beispiel 8 beschrieben, erhalten.
Masse (FAB) m/z; 706 [MH]+
¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,30 (6H, s), 3,04 (3H, s), 5,71 (1H, breit-s)
IR (KBr, cm&supmin;¹); 3437, 1808, 1736

Beispiel 10

Herstellung von 3-O-(1-Methylpiperazin-4-yl)carbonyl-5-O- desosaminyl-6-O-methylerythronolid A
1,43 g der Titelverbindung wurden unter Verwendung von 3,2 g (4,41 mmol) der Verbindung, erhalten auf gleiche Weise wie in Beispiel 7, (1) und 1,94 ml (17,6 mmol) von 1-Methylpiperazin und Umsetzung auf gleiche Weise, wie in Beispiel 8 beschrieben, erhalten.
Masse (FAB) m/z; 716 [MH]+
¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,33 (9H, s), 3,06 (3H, s)
IR (KBr, cm&supmin;¹), 3459, 1814, 1737, 1703

Beispiel 11

Herstellung von 3-O-(1-Methylpiperpazin-4-yl)carbonyl-5-O- desosaminyl-6-O-methylerythronolid-A-11,12-cyclisches-Carbonat
(1) 1,26 g der Verbindung, erhalten gemäß Beispiel 10, wurden in 15 ml Aceton gelöst, und anschließend wurden dazu 0,25 ml (2,64 mmol) Essigsäureanhydrid gegeben, und das entstehende Gemisch wurde bei Raumtemperatur 20 Stunden gerührt. Die Extraktion mit Ethylacetat ergab 1,31 g wasserfreies und schaumartiges 2'-O-Acetyl-3-O-(1-methyl- piperazin-4-yl)carbonyl-5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid A.
(2) 1,31 g der Verbindung, erhalten gemäß (1) oben, wurden in 20 ml Dichlormethan gelöst, und 2,13 ml (26,4 mmol) Pyridin und 0,53 ml (4,4 mmol) Trichlormethylchlorformiat wurden unter Eiskühlung zugegeben, und dann wurde 3 Stunden gerührt. Ein Eisstück und Natriumhydrogencarbonatpulver wurden zugegeben, und der pH der wäßrigen Schicht wurde auf 7 eingestellt, danach wurde das Lösungsmittel bei verringertem Druck verdampft. Nach der Extraktion mit Ethylacetat wurde das Lösungsmittel erneut bei verringertem Druck verdampft. Der Rückstand wurde durch Silicalgelsäulenchromatographie (Eluierungsmittel 5-10% Methanol- Chloroform) gereinigt, wobei 0,81 g 2'-O-Acetyl-3-O-(1-methylpiperaz in-4-yl)carbonyl-5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid-A-11,12-cyclisches-Carbonat erhalten wurden.
(3) 0,54 g der Titelverbindung wurden durch Auflösen von 0,81 g der Verbindung, erhalten gemäß (2) oben, in 20 ml Methanol und Rühren der entstehenden Lösung während eines Tages erhalten.
Masse (FAB) m/z; 742 [MH]+
¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,30 (6H, s), 2,32 (3H, s), 3,02 (3H, s)
IR (KBr, cm&supmin;¹); 3459, 1814, 1742, 1704

Beispiel 12

Herstellung von 3-O-(2-Cyanoimino-1, 3-oxazolidin-4-yl)methylaminocarbonyl-5-O-desosaminyl-6-O-methylerythronolid A
353 mg (0,5 mmol) der Verbindung, erhalten gemäß Beispiel 9, wurden in 10 ml Ethanol gelöst, und 146 mg (1,0 mmol) S,S'-Dimethyl-N-cyanodithioiminocarbonat wurden zugegeben, und dann wurde 7 Stunden gerührt. Das Lösungsmittel wurde bei verringertem Druck verdampft, und der Rückstand wurde mit Ethylacetat extrahiert. Durch Silicalgelsäulenchromatographie (Eluierungsmittel Chloroform : Methanol : wäßriges Ammoniak 20 : 1 : 0,1) wurden 318 mg der Titelverbindung erhalten.
Masse (FAB) m/z; 757 [MH]+
¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ(ppm); 2,30 (6H, s), 3,05 (3H, s), 5,55 (1H, breit-s)
IR (KBr, cm&supmin;¹), 3424, 2195, 1738, 1656

Testbeispiel (antibakterielle in-vitro-Aktivität)

Die antibakterielle in-vitro-Aktivität einer erfindungsgemäßen Verbindung gegenüber verschiedenen Testbakterien wurde gemäß dem MIC-Meßverfahren der Japanese Chemotherapeutic Association unter Verwendung sensitiver Scheibenmedien (erhältlich von Eiken Chemical, Co.) geprüft. 6-O-Methylerythronolid A wurde als Vergleichsmittel verwendet. Die Ergebnisse sind als MIC-Werte (minimale Inhibitor-Konzentration; µg/ml) angegeben. Tabelle 1 antibakterielle in-vitro-Aktivität MIC-Wert (µg/ml)

Claims

1. 5-O-Desosaminylerythronolidderivat, dargestellt durch die Formel

worin jeder der Substituenten R¹ und R² ein Wasserstoffatom, eine Phenylgruppe, eine substituierte Phenylgruppe mit 1 bis 5 Substituenten, ausgewählt aus Halogenatomen, Nitrogruppen und Aminogruppen, eine C&sub1;-C&sub1;&sub5;-Alkylgruppe, eine C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Alkylgruppe, die mindestens ein Stickstoffatom, Sauerstoffatom oder Schwefelatom enthält, eine C&sub7;- C&sub1;&sub5;-Aralkylgruppe oder eine C&sub7;-C&sub1;&sub5;-Aralkylgruppe, die mindestens ein Stickstoffatom, Sauerstoffatom oder Schwefelatom enthält, bedeuten, R¹ und R² fähig sind, zusammen mit dem benachbarten Stickstoffatom einen Ring zu bilden, Z ein Sauerstoffatom oder eine Gruppe, die durch die Formel =N-0-R³ dargestellt wird (worin R³ ein Wasserstoffatom, eine C&sub1;-C&sub8;-Alkylgruppe, eine C&sub1;-C&sub1;&sub8;-Alkylgruppe, die mindestens ein Stickstoffatom, Sauerstoffatom oder Schwefelatom enthält, eine Benzylgruppe oder eine substituierte Benzylgruppe mit 1 bis 5 Substituenten, ausgewählt aus Halogenatomen und C&sub1;-C&sub4;-Alkylgruppen, bedeutet), bedeutet, V eine Hydroxylgruppe bedeutet und W ein Wasserstoffatom oder eine Hydroxylgruppe bedeutet, oder V und W zusammen mit den Kohlenstoffatomen an den 11- und 12-Stellungen einer Gruppe, dargestellt durch die Formel

oder eine Gruppe, dargestellt durch die Formel

bedeuten, R ein Wasserstoffatom, eine C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Alkoxycarbonylgruppe, eine C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Alkoxycarbonylgruppe, die mindestens ein Sauerstoffatom in ihrer Alkylgruppierung enthält, eine C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Acylgruppe, eine C&sub2;-C&sub1;&sub5;-Acylgruppe, die mindestens ein Sauerstoffatom oder eine Pyridylcarbonylgruppe enthält, bedeutet und die pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionssalze davon.