DE68918649T2 - Lebende Newcastle-Krankheit-Virus-Vakzine. - Google Patents

Lebende Newcastle-Krankheit-Virus-Vakzine.

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Description

  • Die Erfindung bezieht sich auf Lebendimpfstoffe gegen Newcastle-Krankheit-Virus (Newcastle Disease Virus, NDV) für Geflügel, auf ein Verfahren zur Herstellung derselben und auf einen neuen NDV-Stamm.
  • ND ist eine Störung des Atmungstraktes, des Legeverhaltens, des Darmes und des zentralen Nervensystems, die häufig bei Geflügel auftritt.
  • Durch die Krankheit entstehen erhebliche wirtschaftliche Verluste in der Geflügelzucht. Neben der Sterblichkeit der Tiere verursacht die Krankheit respiratorische und nervöse Symptome und bei Legehennen verminderte Produktion aufgrund einer Schädigung des Legesystems.
  • Die Krankheit wird durch das Impfen der Tiere mit einem lebenden oder einem inaktivierten Impfstoff kontrolliert. Zum Beispiel werden schon seit langer Zeit Impfungen mit Lebendimpfstoffen basierend auf unter anderem dem Hitchner-Stamm oder dem De la Sota-Stamm durchgeführt. Die Verwendung von auf den besagten bekannten NDV-Stämmen basierenden Impfstoffen ist zwar verhältnismäßig sicher und effektiv, es wurde jedoch festgestellt, daß bei der Impfung von jungen Hühnern trotzdem eine starke Impfreaktion auftritt, wenn die Impfung mit einem Stamm durchgeführt wird, der einen guten Schutz bietet. Andererseits ist der Schutz nicht vollständig, wenn die Impfung mit einem Stamm durchgeführt wird, der eine geringe Impfreaktion hervorruft. In diesem Zusammenhang spielt die mütterliche Immunität eine wichtige Rolle, denn damit die Impfung bei Hühnern mit mütterlicher Immunität wirksam wird, sind Impfstämme erforderlich, die eine starke Impfreaktion auslösen.
  • Ein weiterer Nachteil der auf den bekannten Stämmen basierenden NDV-Impfstoffe besteht darin, daß die Impfung mit Kombinationsimpfstoffen gegen ND und infektöse Bronchitis (IB) wegen des Auftretens von unannehmbar starken Impfreaktionen nicht möglich ist.
  • Das Dokument BE-A-853 923 beschreibt Newcastle-Krankheit- Viren des Stammes P/77/8, die von Stamm P/76/5 abgeleitet sind. Viren des Stammes P/77/8 unterscheiden sich deutlich von Viren des Stammes NDW durch die Wärmeunbeständigkeit ihres Hämagglutinins. Das Hämagglutinin von Viren des Stammes P/77/8 ist stark wärmeunbeständig, während das Hämagglutinin von NDW wärmebeständig ist und daher den Viren der pathogenen Newcastle-Krankheit-Viren, wie zum Beispiel den Essex-Stamm- Viren, mehr ähnelt, die jedoch nicht für den Impfgebrauch geeignet sind.
  • US-A-2 798 835 bezieht sich auf Newcastle-Krankheit-Viren im allgemeinen, von welchen nur der Blacksburg B-1-Stamm ausdrücklich angeführt wird.
  • Es wurde beschrieben, daß dieser Newcastle-Krankheit-Virus- Stamm B1 (bei alleiniger Verabreichung, als Impfstoff) schlechte Wirksamkeit besitzt, besonders bei Vögeln mit von der Mutter abgeleiteten Antikörpern (G. Bennejan et al (1978); Avian Pathology 7, 15-27). Im Gegensatz dazu stellte sich heraus, daß die Impfung mit dem erfindungsgemäßen NDW- Virusstamm einen guten Schutz bei Hühnern mit hoher mütterlicher Immunität gewährt.
  • GB-A-2 062 461 bezieht sich auf das Newcastle-Krankheit-Virus des russischen Stammes a-Bor-74NGNKI. Dieser Stamm ist ebenso viel weniger wirksam als der erfindungsgemäße Stamm. Der russische Stamm soll jungen Hühnern zweimal verabreicht werden, um zu einem ausreichenden Schutz zu gelangen (siehe Seite 2, linke Spalte, Zeilen 15-24 der GB-A-2 062 461), während die Beispiele der vorliegenden Erfindung zeigen, daß ein ausreichender Schutz von einen Tag alten Hühnern schon nach einer einzigen Impfung erreicht ist.
  • Es wurde nun überraschenderweise festgestellt, daß man ND- Impfstoffe erhält, die nicht den zuvor erwähnten Nachteil aufweisen, wenn der verwendete NDV-Stamm der Stamm NDW ist, der beim CNCM des Institut Pasteur in Paris unter der Nummer I-781 registriert ist.
  • Es wurde festgestellt, daß auf dem Stamm NDW basierende Lebendimpfstoffe vollkommen sicher und prompt wirksam sind, auch zum Schutz von Hühnern mit hoher mütterlicher Immunität. Daher kann der erfindungsgemäße Impfstoff schon in einem Alter der Hühner von einem Tag verwendet werden.
  • Weiterhin wurde festgestellt, daß ein allgemein bekanntes Problem, das bei der Verabreichung von Impfstoffen enthaltend mehr als einen lebenden Virusbestandteil auftritt, nämlich die Tatsache, daß die kombinierten Viren weniger immunogen werden aufgrund einer gegenseitigen Beeinflussung (sogenannte Interferenz, siehe Am. J. Vet. Res. 36 (1965), S. 4, 524 und 525; und Avian Diseases 12 (1968), S. 577), nicht auftritt, wenn der NDW-Stamm mit anderen lebenden Virusstämmen kombiniert wird.
  • Der NDW-Virusstamm kann auf eine per se bekannte Art zu einem für die Verabreichung geeigneten Impfstoff verarbeitet werden. Dieser Impfstoff kann den Hühnern ab einem Alter von einem Tag oder zu einem späteren Zeitpunkt verabreicht werden, auch wenn sie eine hohe mütterliche Immunität haben, falls erwünscht kombiniert mit einem oder mehreren IB- Virusstämmen. Die Verabreichung kann zum Beispiel mittels Spray oder Augentropfen durchgeführt werden.
  • Die Erfindung wird nun unter Bezug auf die folgenden Experimente detaillierter beschrieben.
    • EXPERIMENT I Wirksamkeit der Impfung mit dem Stamm NDW
  • 24 Vögel von einer Gruppe von einen Tag alten Hühnchen wurden zur Bestimmung der mütterlichen Immunität nach der HI-Methode verwendet. Der mittlere Titer betrug ²log 10,7.
  • 43 Hühner wurden mit ¹&sup0;log 5,4 EID&sub5;&sub0; pro Vogel mittels Sprühimpfung geimpft. 3 und 6 Wochen nach der Impfung wurden 21 bzw. 22 Vögel einer Infizierung ausgesetzt, wobei pro Vogel ¹&sup0;log 6 ELD&sub5;&sub0; des Herts 33 Virus über das Auge verabreicht wurde. Als Kontrollgruppe wurden zum Zeitpunkt der Infizierung 2 SPF-Hühner, die 1 Woche älter als die Hühnchen waren, hinzugefügt und ebenfalls infiziert.
  • Nach der Infizierung, 3 Wochen nach der Impfung, überlebten alle 21 Vögel, während nach der Infizierung, 6 Wochen nach der Impfung, 20 von 22 Vögeln überlebten. Die SPF-Kontrollen starben.
  • Von diesem Experiment kann man erkennen, daß die Impfung mit dem NDW-Stamm von Hühnern mit hoher mütterlicher Immunität hervorragenden Schutz gegen eine Infektion mit virulentem ND- Virus während der Mastzeit bietet.
    • EXPERIMENT II Wirksamkeit der Impfung mit dem NDW-Stamm als Bestandteil eines ND/IB-Kombinationsimpfstoffes
  • 48 Hühnchen mit einem mittleren mütterlichen Antikörpertiter von ²log 10,7 HI-Einheiten wurden mittels Sprühimpfung im Alter von einem Tag mit einem Kombinationsimpfstoff bestehend aus ¹&sup0;log 5,4 EID&sub5;&sub0; NDW und ¹&sup0;log 4,0 EID&sub5;&sub0; H120/84-3 pro Dosis geimpft.
  • 3 und 6 Wochen nach der Impfung wurden 23 bzw. 25 Vögel einer Infizierung über das Auge mit ¹&sup0;log 6,5 ELD&sub5;&sub0; des Herts 33 Virus pro Vogel ausgesetzt. Als Kontrollgruppe wurden zum Zeitpunkt der Infizierung 2 SPF-Hühner hinzugefügt und auch infiziert.
  • Nach der Infizierung, 3 Wochen nach der Impfung, überlebten 21 von 23 Tieren. Nach der Infizierung, 6 Wochen nach der Impfung, überlebten alle 25 Vögel. Die SPF-Kontrollvögel starben.
  • Von diesem Experiment kann man erkennen, daß der als Bestandteil eines ND/IB-Kombinationsimpfstoffes verabreichte NDW-Stamm hervorragenden Schutz gegen eine Infektion mit virulentem ND-Virus während der Mastzeit bietet, trotz des hohen mütterlichen Antikörpertiters der Hühner zum Zeitpunkt der Impfung.
    • EXPERIMENT III Wirksamkeit der Impfung mit dem NDW-Stamm als Bestandteil eines ND/IB-Kombinationsimpfstoffes
  • 25 Vögel wurden aus einer Gruppe von 75 einen Tag alten Hühnchen herausgenommen zur Bestimmung des mütterlichen Antikörpertiters nach der HI-Methode. Der mittlere Titer betrug ²log 8,7. Die restlichen Hühner wurden in zwei Gruppen zu je 25 aufgeteilt. Die erste Gruppe wurde mit einem Kombinationsimpfstoff NDW/H120/84-3 auf die gleiche Art wie in Beispiel II geimpft. Die zweite Gruppe bildete die ungeimpfte Kontrollgruppe. Ein Vogel aus dieser Gruppe starb in dem Zeitraum vor der Infizierung. Beide Gruppen wurden 32 Tage nach der Impfung mit ¹&sup0;log 6,5 ELD&sub5;&sub0; des Herts 33 Virus pro Vogel infiziert. Zwei SPF-Hühner im Alter von etwa 6 Wochen wurden hinzugefügt und ebenfalls infiziert.
  • Einer der 25 geimpften Vögel starb nach der Infizierung. 21 der 24 ungeimpften Kontrollvögel starben. Die SPF-Kontrollen starben.
  • Von diesem Experiment kann man erkennen, daß der als Bestandteil eines ND/IB-Kombinationsimpfstoffes verabreichte NDW-Stamm hervorragenden Schutz gegen eine Infektion mit virulentem ND-Virus bietet, was die Schlußfolgerung von Experiment II bestätigt.
    • EXPERIMENT IV Kleiner Feldversuch
  • Einen Tag alte Hühnchen wurden auf eine Reihe von Verschlägen verteilt und mit Poulvac IB Primer (IB-Stamm H120/84-3) oder mit einem Kombinationsimpfstoff bestehend aus Poulvac IB Primer und NDW-Impfstoff geimpft. Ein paar Verschläge wurden nicht geimpft und dienten als Kontrollgruppe. In jedem Verschlag waren 400 Hühner untergebracht.
  • Die Trachea-Lesion-Bewertung, 10 Tage nach der Impfung bestimmt, war
  • - 0,0 für die ungeimpften Vögel
  • - 0,1 - 0,6 - 0,7 - 1,1 für die mit IB Primer geimpften Vögel (4 Gruppen zu je 10 Vögel)
  • - 0,0 - 0,0 - 0,2 - 0,8 für die mit dem Kombinationsimpfstoff IB Primer/NDW geimpften Vögel (4 Gruppen zu je 10 Vögel)
  • Der mittlere ND-HI-Titer, der 0, 3 und 6 Wochen nach der Impfung bestimmt wurde, betrug
  • - 8,2 (mütterliche Immunität), 4,0 bzw. 4,0 für die mit IB Primer geimpften Vögel,
  • - 8,2, 5,2 bzw. 6,4 für die mit dem Kombinationsimpfstoff IB Primer/NDW geimpften Vögel.
  • Bei dem durchschnittlichen Gewicht, das 6 Wochen nach der Impfung bestimmt wurde, zeigten sich keine wesentlichen Unterschiede zwischen den Gruppen.
  • Eine Infizierung mit virulentem ND-Virus, Stamm Herts 33/56, die 4, 5 und 6 Wochen nach der Impfung durchgeführt wurde, ergab einen Schutz von 90%, 100% bzw. 92% bei der mit dem Kombinationsimpfstoff IB Primer/NDW geimpften Gruppe. Die mit IB Primer geimpfte Gruppe als auch die ungeimpfte Gruppe waren völlig ungeschützt gegen eine Infektion mit virulentem ND (0% Schutz) in allen drei Fällen.
  • Eine Infizierung mit virulentem IB-Virus, die 4 Wochen nach der Impfung durchgeführt wurde, sowohl mit dem Stamm Voet als auch mit einem virulenten Stamm D274, ergab
  • - einen Schutz von 100% gegen Voet und 80-100% gegen D274 für die mit IB Primer geimpften Vögel
  • - einen Schutz von 100% gegen Voet und 60-100% gegen D274 für die mit dem Kombinationsimpfstoff IB Primer/NDW geimpften Vögel
  • - keinen Schutz (beide Stämme 0% Schutz) für die ungeimpften Vögel.
  • Von diesem Experiment kann man erkennen, daß der NDW-Stamm als Bestandteil eines IB/ND-Kombinationsimpfstoffes
  • - völlig unschädlich ist
  • - einen hervorragenden Schutz gegen eine Infektion mit virulentem ND-Virus bietet
  • - die restlichen Bestandteile des Impfstoffes nicht stört, so daß diese auch voll wirksam bleiben.

Claims (4)

1. Lebendimpfstoff gegen Newcastle-Krankheit, dadurch gekennzeichnet, daß er ein Virus des Stammes NDW umfaßt, der beim CNCM des Institut Pasteur in Paris unter der Nummer I-781 registriert ist.
2. Impfstoff nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß er eine Virusmenge > ¹&sup0;log 5,5 EID&sub5;&sub0; pro Dosis umfaßt.
3. Impfstoff nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß er auch einen oder mehrere infektöse Bronchitisvirusstämme umfaßt.
4. Virusstamm NDW, der beim CNCM des Institut Pasteur in Paris unter der Nummer I-781 registriert ist.
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