DE684420C

DE684420C - Process for the representation of highly effective substances with sex hormone-like effects

Info

Publication number: DE684420C
Application number: DESCH91671D
Authority: DE
Original assignee: Schering AG
Current assignee: Bayer Pharma AG
Priority date: 1929-09-29
Filing date: 1929-09-29
Publication date: 1939-11-28

Description

Verfahren zur Darstellung von hochwirksamen Stoffen mit sexualhormonartiger Wirkung Die fabrikmäßige Darstellung von Stoffen mit sexualhormonartiger Wirkung von über 300 ooo bis 400 ooo Mäuseeinheiten je Gramm ist bisher nicht gelungen.Process for the representation of highly effective substances with sex hormone-like Effect The factory presentation of substances with sex hormone-like effects of more than 300,000 to 400,000 mouse units per gram has not yet been achieved.

Es wurde nun gefunden, daß sich Hormonöle mit einem Gehalt von etwa i bis z Millionen Mäuseeinheiten je Gramm und mehr erhalten lassen, wenn man weitgehend vorgereinigte Öle, z. B. 51e mit einem Gehalt von etwa 3oo ooo bis 4oo ooo Mäuseeinheiten je Gramm, der Behandlung mit Säuren unterwirft und .den alkalilöslichen Teil des Hormons abscheidet. Zur Erleichterung der Einwirkung der Säure empfiehlt es sich dabei, das hormonhaltige Ausgangsöl in geeigneten Lösungsmitteln, wie z. B. Äthylalkohol, zu lösen oder aber eine innige Mischung mit der Säure durch Zusatz emulsionsfördernder Stoffe, wie z. B. isopropylnaphthalinsulfosauren Salzen und ähnlichen, zu bewerkstelligen.It has now been found that hormone oils with a content of about I can get up to z million mouse units per gram and more, if one largely pre-cleaned oils, e.g. B. 51e containing about 300,000 to 400,000 mouse units per gram, the treatment with acids and .the alkali-soluble part of the Secretes hormone. It is recommended to facilitate the action of the acid while, the hormone-containing starting oil in suitable solvents, such as. B. ethyl alcohol, to dissolve or an intimate mixture with the acid by adding emulsion-promoting Substances such as B. isopropylnaphthalenesulfonic acid salts and the like to accomplish.

Weitgehend vorgereinigte Hormonöle mit einem Gehalt von z. B. 300 000 bis 400 000 Mäuseeinheiten je Gramm, wie sie dem Verfahren nach vorliegender Erfindung unterworfen werden sollen, lassen sich z. B. erhalten, indem man angesäuerten Harn mit Äther oder anderen organischen Lösungsmitteln extrahiert und durch vorsichtige Behandlung mit Alkalicarbonat saure Bestandteile entfernt. Ein solches Rohöl wird darauf durch Verteilung zwischen wäßrigem Alkohol und I'etroläther in eine Petrolätherphase, die Benzoesäure, Cholesterin u. dgl. enthält, und eine hormonhaltige Alkoholphase getrennt. Das aus der letzteren durch Zusatz von Wasser und Ausäthern erhaltene Öl wird dann durch Verteilung zwischen 70 °1oigem Alkohol und Benzol in eine Alkoholphase und eine hormonhaltige Benzolpbase geschieden, aus der sich ein Hormonöl von 300 000 bis 400 000 Mäuseeinheiten je Gramm isolieren läßt, das als Ausgangsprodukt für das vorliegende Verfahren dienen soll.Largely pre-purified hormone oils with a content of z. B. 300,000 to 400,000 mouse units per gram, as they are to be subjected to the method according to the present invention, z. B. obtained by extracting acidified urine with ether or other organic solvents and removing acidic components by careful treatment with alkali carbonate. Such a crude oil is then separated into a petroleum ether phase, which contains benzoic acid, cholesterol and the like, and a hormone-containing alcohol phase, by partitioning between aqueous alcohol and tetrolether. The oil obtained from the latter by adding water and ether is then separated into an alcohol phase and a hormone-containing benzene base, from which a hormone oil of 300,000 to 400,000 mouse units per gram can be isolated by distribution between 70 ° 1oigem alcohol and benzene to serve as the starting product for the present process.

Arbeiten zur Gewinnung von Zubereitungen des weiblichen Sexualhormons aus Plazenta-und Ovarialrohextrakten wurden bereits von Zondek (Klin. Wo. 1925, S. 2445) und Laquer, Hart und de Jough (Chem. Zentr albl. 1927, 11, S. 448) ausgeführt. Z o n d e k löst aus den Rohextrakten das Hormon mittels Essigsäure heraus und verwendet diese Lösung nach ihrer Neutralisation. Nach dem vorliegenden Verfahren dagegen wird das Hormon in einer bislang unerreichten Reinheit mit einer Wirksamkeit von 1,5 bis 1,75 Millionen Mäuseeinheiten gewonnen, indem stark vorgereinigtes Rohmaterial mit einer Wirksamkeit von etwa 400 000 Mäuseeinheiten einer Säurebehandlung, kombiniert mit einem Extraktionsverfahren, mittels Alkalilösungen unterworfen wird.Work on obtaining preparations of the female sex hormone from crude placenta and ovarian extracts has already been carried out by Zondek (Klin. Wo. 1925, p. 2445) and Laquer, Hart and de Jough (Chem. Zentr albl. 1927, 11, p. 448) . Z ondek dissolves the hormone from the raw extracts using acetic acid and uses this solution after it has been neutralized. According to the present process, however, the hormone is obtained in an unprecedented purity with an effectiveness of 1.5 to 1.75 million mouse units by highly pre-purified raw material with an effectiveness of about 400,000 mouse units of an acid treatment, combined with an extraction process, using alkali solutions is subjected.

Nach der zweiten Arbeit (L a q u e r und Mitarbeiter) gelingt es zunächst :durch Behandlung des Plazentaextraktes mit verdünnter Salzsäure, ein Präparat von einer Wirksamkeit von iö öoo bis zö öoo Mäuseeinheiten zu erhalten, welches dann durch komplizierte Weiterreinigung und Dialyse in ein höherwirksames Präparat übergeführt werden' kann. Demgegenüber erhält man nach i' beanspruchten Verfahren in einfache bequemer Weise ohne umständliche un lustreiche Dialvse ein hochwirksames produkt, wozu noch bemerkt werden muB, daB dieses in Alkali lösliche, aber in verdünnter Säure unlösliche Produkt mit dem von T_ aq u er erhaltenen, in Wasser oder verdünnter Säure löslichen Präparat kaum identisch sein dürfte.After the second work (L aquer and coworkers) it is initially possible: by treating the placenta extract with dilute hydrochloric acid, a preparation with an effectiveness of 10,000 to 10,000 mouse units is obtained, which is then converted into a more effective preparation through complicated further purification and dialysis ' can. In contrast, according to i ' claimed method in simple convenient way without inconvenient un lustful dialvse a highly effective one product, for which it must also be noted that this product, which is soluble in alkali but insoluble in dilute acid, is hardly identical to the preparation obtained from T_aq uer, which is soluble in water or dilute acid.

Ferner wird in .der Arbeit von G1 i m m und W a d eh n (.Biochem. Zeitschr. Bd. 2o7, 1929, S. 361 ff., insbesondere S. 365, Abs. z) über die Behandlung hormonhaltiger Zubereitungen mit Säuren berichtet. Nach dieser Veröffentlichung wird das mit Säure behandelte Hormonpräparat durch Extraktion mittels Äthers in einen ätherlöslichen und einen ätherunlöslichen Teil zerlegt, von denen nur der in Äther lösliche ein Produkt darstellt, welches nur wenig reiner ist als das Ausgangsmaterial; der durch dieses Verfahren erzielte Effekt ist also ein sehr geringer. Demgegenüber werden, wenn man nach dem beanspruchten Verfahren verfährt, also an die Säurebehandlung eine Trennung des Hormons in einen alkalilöslichen und in einen alkaliunlöslichen Teil durchführt, Produkte von einer bislang unbekannt hohen Wirksamkeit erzielt. Beispiel .. Hormonöl mit einem Gehalt von etwa -40o ooo Mäuseeinheiten wird in Äthylalkohol gelöst, mit dem dritten Teil des Volumens ;verdünnter z n-Salzsäure versetzt und einige ;'Zeit auf dem Wasserbad erwärmt. Die mit Wasser verdünnte Lösung wird mit Äther extrahiert, die ätherische Lösung mit Natriumbicarbonat und Natriumcarbonat gewaschen und mit verdünnter Natronlauge durchgeschüttelt. 6o % des Hormons gehen in die Natronlauge, aus der sie nach dem Ansäuern, z. B. mit Schwefelsäure, wieder mit Äther zu extrahieren sind. Diese ätherische Lösung hinterläßt nach dem Trocknen und Verdunsten des Lösungsmittels ein Hormonöl der Wirksamkeit 1,5 bis 1,75 Millionen Mäuseeinheiten. Die im ersten ätherischen Auszug verbleibenden Hormonreste werden einem neuen Arbeitsgang zugeführt.Furthermore, the work of G1 imm and W ad eh n (. Biochem. Zeitschr. Vol. 2o7, 1929, p. 361 ff., In particular p. 365, paragraph z) reports on the treatment of hormone-containing preparations with acids. According to this publication, the acid-treated hormone preparation is broken down into an ether-soluble and an ether-insoluble part by extraction with ether, of which only the ether-soluble part is a product that is only slightly purer than the starting material; the effect achieved by this process is therefore very small. In contrast, if one proceeds according to the claimed method, that is to say separating the hormone into an alkali-soluble and an alkali-insoluble part after the acid treatment, products of a hitherto unknown high effectiveness are obtained. Example .. Hormone oil with a content of about 40,000 mouse units is dissolved in ethyl alcohol, mixed with the third part of the volume, dilute hydrochloric acid and warmed for some time on a water bath. The solution diluted with water is extracted with ether, the ethereal solution is washed with sodium bicarbonate and sodium carbonate and shaken with dilute sodium hydroxide solution. 6o % of the hormone go into the sodium hydroxide solution, from which it is acidified, e.g. B. with sulfuric acid, are to be extracted again with ether. This essential solution, after drying and evaporation of the solvent, leaves a hormone oil with an effectiveness of 1.5 to 1.75 million mouse units. The hormone residues remaining in the first essential extract are fed to a new process.

Claims

PATENT CLAIM: Process for the preparation of highly effective sex hormones, characterized in that one has strongly pre-purified hormone preparations per se known exposure to acids, optionally in z. B. alcoholic solution or with the addition of emulsifying agents, subjects and the alkali-soluble part the hormone preparation separates from the alkali-insoluble.