DE701956C

DE701956C - Process for obtaining hormone-like substances

Info

Publication number: DE701956C
Application number: DE1935B0169203
Authority: DE
Inventors: Dr Fritz Johannessohn; Dr Erich Rabald; Dr Hermann Voss
Original assignee: Boehringer Mannheim GmbH
Current assignee: Roche Diagnostics GmbH
Priority date: 1935-03-28
Filing date: 1935-03-28
Publication date: 1941-01-27

Description

Verfahren zur Gewinnung hormonartig wirkender Stoffe Es wurde gefunden, daß man aus Rohcholesterin oder es enthaltenden Stoffgemischen, wie z. B. Wollfett oder Walrat, durch Behandlung mit Alkalien geringe Mengen von Substanzen gewinnen kann, die schon in sehr kleinen Dosen hormonartige Wirkungen an Kastraten hervorrufen. Die Tatsache, daß die wirksamen Stoffe nur in geringer Menge. erhalten werden, legt die Vermutung nahe, daß sie nicht aus dem Cholesterin selbst, sondern aus diesen Stoff begleitenden Stoffen abgesondert oder in Freiheit gesetzt werden. Man gewinnt die hormonwirksamen Stoffe dadurch, daß man die Ausgangsstoffe mit alkalischen Lösungen, z. B. wäßrigem Alkali, behandelt, die so erhaltenen Umsetzungsgemische ansäuert, zweckmäßig nach Abtrennung der abgeschiedenen festen Bestandteile, und nach den für die Anreicherung und gegebenenfalls Trennung und Isolierung von Sexualhormonen aus natürlichen Vorkommen üblichen Verfahren, wie z. B. Verteilung zwischen zwei nicht mischbaren Flüssigkeiten, Adsorption und anderen für diesen Zweck geeigneten Arbeitsweisen, aufarbeitet. In den auf diese Weise erhältlichen mehr oder minder angereicherten Stoffgemischen sind sowohl weibliche als auch männliche Hormonwirkung besitzende Substanzen enthalten.Process for obtaining hormone-like substances It was found that from crude cholesterol or mixtures of substances containing it, such as. B. wool fat or whale rat, obtain small amounts of substances by treatment with alkalis which can cause hormone-like effects on neutered animals even in very small doses. The fact that the active substances are only in small quantities. are obtained, lays it seems likely that it is not from the cholesterol itself, but from it Substances accompanying the substance can be separated or set free. One wins the hormone-active substances by mixing the starting materials with alkaline solutions, z. B. aqueous alkali treated, acidifying the reaction mixtures thus obtained, expediently after separation of the deposited solid constituents, and after for the enrichment and, if necessary, separation and isolation of sex hormones common methods from natural occurrences, such as B. Distribution between two immiscible liquids, adsorption and others suitable for this purpose Working methods, worked up. In the more or less available in this way Enriched mixtures of substances are both female and male hormone effects contain owning substances.

Man hat wohl schon Cholesterin mit Alkalien behandelt und auch Wollfett mit Alkali verseift und die erhaltenen Seifen zu analytischen Zwecken mit Säure zerlegt. Es war bisher aber noch nicht erkannt, daß bei einem solchen Vorgehen in die alkalische Lösung hormonwirksame Stoffe übergehen, die aus ersteren gewonnen werden können. Demgegenüber haben wir erstmals die Anwesenheit hormonwirksamer Stoffe in dem als Rohcholesterin bezeichneten Stoff und es enthaltenden anderen Materialien festgestellt und die Verwendung dieser Ausgangsstoffe für die Gewinnung von Hormonen in Vorschlag gebracht.-.Cholesterol has probably already been treated with alkalis and wool fat saponified with alkali and the soaps obtained with acid for analytical purposes disassembled. However, it had not yet been recognized that with such a procedure in the alkaline solution pass hormone-active substances obtained from the former can be. In contrast, we have the presence of hormone-active substances for the first time in the substance known as crude cholesterol and other materials containing it established and the use of these raw materials for the production of hormones brought up in proposal.

In der britischen Patentschrift 38426o ist auch schon ein Verfahren zur Herstellung hormonartig wirkender Stoffe aus tierischen und pflanzlichen Ölen und Fetten beschrieben, das darin besteht, daß man die Fette oder Öle, wie Lebertran oder Sesamöl, mit solchen Lösungsmitteln behandelt, die die Fette und Öle nicht oder nur beschränkt lösen, worauf dann die in die Auszüge übergegangenen Stoffe gegebenenfalls noch verseift werden können. Das in der genannten britischen Patentschrift beschriebene Verfahren ist für die Behandlung der nach vorliegender Erfindung zu verwendenden Ausgangsstoffe, auch soweit es sich dabei um Fette handelt, nicht mit Erfolg anwendbar, da die wirksamen Bestandteile dieser Fette bei der Behandlung mit diese nur beschränkt lösenden Flüssigkeiten sowohl in dem Auszug wie auch, und zwar in höherem Grade, in dem Rückstand vorgefunden werden. Nachstehende Tabelle veranschaulicht diesen Sachverhalt für das Wollfett. Löst an Wirkung des Lösungsmittel Wollfett - °% (etwa) Auszuges Rückstands Aceton....... q0 -f- -i- (-E-) Benzin ...... 30 -f- + (-@-) Äthanol... ... io -f- -f- (-E-) Äthanol 6o%ig (heiß) ..... 6 -@- -f- (-f-) Nachfolgende Beispiele sollen, ohne auf eine höchstmögliche Anreicherung der wirksamen Stoffe gerichtet zu sein, das neue Verfahren näher erläutern.British Patent 38426o describes a process for the production of hormone-like substances from animal and vegetable oils and fats, which consists in treating the fats or oils, such as cod liver oil or sesame oil, with solvents that remove the fats and oils not dissolve or only to a limited extent, whereupon the substances that have passed into the extracts can optionally still be saponified. The method described in the above-mentioned British patent specification cannot be used with success for the treatment of the starting materials to be used according to the present invention, even if they are fats, since the active components of these fats both when treated with these liquids which dissolve only to a limited extent in the extract as well as, to a greater extent, in the residue. The table below illustrates this situation for wool fat. Dissolves the effect of the Solvent wool grease - % (Approx.) Extract residue Acetone ....... q0 -f- -i- (-E-) Petrol ...... 30 -f- + (- @ -) Ethanol ... ... io -f- -f- (-E-) Ethanol 6o% (hot) ..... 6 - @ - -f- (-f-) The following examples are intended to explain the new process in more detail, without being aimed at the highest possible enrichment of the active substances.

Beispiele i. 259 Cholesterin >,Merck« werden mit ioo ccm o,5 bis n Natronlauge 24 Stunden geschüttelt. Nach Abfiltrieren und Ansäuern der alkalischen Flüssigkeit werden mittels Chloroform 4 mg eines Stoffes mit weiblicher Hormonwirksamkeit ausgezogen, der in weniger als 25Y i M. E. enthält.Examples i. 259 Cholesterol "Merck" are shaken with 100 cc of 0.5 to 1 sodium hydroxide solution for 24 hours. After the alkaline liquid has been filtered off and acidified, 4 mg of a substance with female hormone activity which contains less than 25% i ME are extracted by means of chloroform.

2. 5oo g Rohwollfett werden mit 11 2o%iger alkoholischer Natronlauge etwa, 8 Stunden auf dem Wasserbad erwärmt. Man säuert zwecks leichteren Aufarbeitens des stark schäumenden, seifigen Produkts zunächst an und zieht dann mit einem organischen Lösungsmittel aus. Der gewaschene und eingedampfte Auszug wirkt in 5o y und darunter östrogen.2. 500 g of raw wool fat are heated with 1 1 2o% alcoholic sodium hydroxide solution for about 8 hours on a water bath. For the purpose of easier working up of the strongly foaming, soapy product, it is first acidified and then extracted with an organic solvent. The washed and evaporated extract has an estrogenic effect in 50 y and below.

3. Rohwollfett wird gemäß Beispiel z mit Natronlauge aufgeschlossen und mit Säure behandelt. Das angesäuerte Gut wird dann zwischen Wasser und einem Gemisch von gleichen Volumteilen Ligroin und Alkohol verteilt, wobei drei Phasen, zwei flüssige und eine pastös-feste, entstehen. Die feste Phase wird von den beiden flüssigen Phasen getrennt und in Tetrachlorkohlenstoff gelöst. Die Lösung wird gewaschen und eingedampft. Der erhaltene Rückstand zeigt in einer Menge von 6o mg im Mitosen-Test nach V o ß und Loewe (Deutsche medizinische Wochenschrift 193o, S. 1256) männliche Wirksamkeit. Das Aufarbeiten der Ligroin-Alkohol-Fraktion führt zu Produkten weiblicher Wirksamkeit.3. Raw wool fat is digested according to example z with sodium hydroxide solution and treated with acid. The acidified good is then between water and a Mixture of equal parts by volume of ligroin and alcohol distributed, with three phases, two liquid and one pasty-solid arise. The solid phase is made by the two liquid phases separated and dissolved in carbon tetrachloride. The solution is washed and evaporated. The residue obtained shows an amount of 60 mg in the mitosis test according to V o ß and Loewe (German medical weekly publication 193o, p. 1256) male Effectiveness. The work-up of the ligroin-alcohol fraction leads to products of women Effectiveness.

Claims

PATENT APPLICATIONS z. Process for obtaining hormone-like substances, characterized in that crude cholesterol or mixtures of substances containing it treated with alkaline solutions, acidifying the reaction mixtures obtained in this way and according to the usual for the enrichment of sex hormones from natural sources Processes worked up.

2. The method according to claim r, characterized in that parent substances of cholesterol, especially wool fat, are saponified with alkalis, the um-. Acidified setzangsgernisch and the product obtained in this way at the same time with a aqueous and a non-aqueous liquid treated, with three phases, one solid, an aqueous and a non-aqueous, arise, of which the solid one contains male active portion, while the non-aqueous contains female active Substances are located, whereupon the further processing according to the for the enrichment of Sex hormone usual procedure takes place.