DE60203290T2

DE60203290T2 - Oxytocin agonisten

Info

Publication number: DE60203290T2
Application number: DE60203290T
Authority: DE
Inventors: Robert Gary Tidworth PITT; Bryan Michael ROE; Philip David ROOKER
Original assignee: Ferring BV
Current assignee: Ferring BV
Priority date: 2001-06-25
Filing date: 2002-06-24
Publication date: 2006-02-02
Anticipated expiration: 2022-06-25
Also published as: DE60203290D1; ES2239717T3; NZ530035A; ZA200309626B; ATE291021T1; RU2003136152A; EP1399436A2; RU2309156C2; IL159289A0; MXPA03011980A; NO20035772L; PT1399436E; CA2450480A1; HK1064666A1; WO2003000692A2; JP2005500317A; GB0115515D0; WO2003000692A3; HUP0400368A2; CN1606553A

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft eine Reihe von Nicht-Peptid-Oxytocin-Agonisten, sowie pharmazeutische Mittel, die derartige Verbindungen enthalten. Die Mittel sind geeignet zur Behandlung von bestimmten physiologischen Störungen, wie Erektionsstörungen.
HINTERGRUND
Neurophysen-Hormone
Die Neurophysen-Hormone Oxytocin (OT) und Vasopressin (VP) sind cyclische Nonapeptide, die von dem Hypophysenhinterlappen sekretiert werden. Die Struktur von Oxytocin ist unten angegeben.
Oxytocin – cyclo^1,6-Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH₂
Vasopressin unterscheidet sich von Oxytocin indem es in 3-Stellung anstelle von Isoleucin Phenylalanin und in 8-Stellung anstelle von Leucin Arginin enthält. Beide Hormone werden in vivo als größere Vorläufer, Neurophysine, gebildet, die einer posttranslationalen Weiterverarbeitung zur Freisetzung der reifen Peptide unterliegen. OT und VP wirken über eine Gruppe von Heptahelix-Rezeptoren. Nur ein OT-Rezeptor wurde bisher charakterisiert, während drei VP-Rezeptoren bekannt sind. Diese werden als V_1a, V_1b und V₂ Rezeptoren bezeichnet.
Die ersten Zielorgane, die für OT identifiziert wurden, waren der Uterus, wo es am Einsetzen und Fortschreiten der Wehen beteiligt ist, und die Brustdrüsen, wo es an der Regulation der Milchbildung beteiligt ist. Andere Organe haben ebenfalls OT- Rezeptoren und es ist klar, dass OT eine Reihe von physiologischen Rollen spielt, die noch nicht vollständig aufgeklärt sind. Insbesondere wurde angegeben, dass OT, das in dem ZNS wirkt, beteiligt ist an der Erektionsreaktion bei Männern und der Regulierung von weiblichem und männlichem Sexual-Arousal. Z.B. ist OT erektogen, wenn es männlichen Ratten i.c.v. verabreicht wird. Es hat auch erektogene Aktivität, wenn es i.v. verabreicht wird, aber die erforderlichen Dosen sind um bis zu zwei Größenordnungen größer, was mit einer zentralen Wirkungsweise übereinstimmt.
Vasopressin wirkt auf die Blutgefäße, wo es ein wirksames gefäßverengendes Mittel ist, und auf die Nieren, wo es die Wiederaufnahme von Wasser fördert, was zu einem antidiuretischen Effekt führt.
Oxytocin-Agonisten und Antagonisten
Eine Anzahl von Peptid-Analogen von OT ist aus der Literatur bekannt. Diese umfassen sowohl Agonisten als auch Antagonisten. OT und seine Agonisten werden z.B. verwendet, um die Wehentätigkeit zu beschleunigen und den Tonus der Gebärmuttermuskulatur zu erhöhen, um die Blutung nach der Geburt zu kontrollieren, und ein Antagonist, Atosiban, wurde kürzlich zur Behandlung von vorzeitigen Wehen registriert. Die Peptid-Natur dieser Verbindungen bedeutet jedoch, dass sie nach der oralen Verabreichung nicht leicht biologisch verfügbar sind oder in das ZNS übergehen. Um Arzneimittel zu erhalten, die oral verabreicht werden können und in der Lage sind, die zentralen Wirkungen von OT zu zeigen, wurde zunehmend Nicht-Peptiden Beachtung geschenkt. Als Ergebnis gibt es viele Veröffentlichungen, die Nicht-Peptid-OT-Antagonisten in einer frühen Stufe der Entwicklung beschreiben. Bisher gibt es jedoch keine Veröffentlichungen über Nicht-Peptid-OT-Agonisten. Das ist nicht unerwartet, da allgemein bekannt ist, dass es leichter ist, einen Rezeptor-Antagonisten zu finden als einen Agonisten.
So bestehet weiterhin Bedarf an Nicht-Peptid-OT-Rezeptor-Agonisten. Derartige Verbindungen sollten vorzugsweise selektiv für den OT-Rezeptor gegenüber dem VP-Rezeptor sein. Es kann erwartet werden, dass sie therapeutisch geeignet sind für männliche und weibliche Sexual-Störungen, insbesondere Erektionsstörungen beim Mann, Förderung der Wehentätigkeit, Kontrolle der Blutung nach der Geburt, Erhöhung der Milchproduktion sowie eine Anzahl anderer Indikationen.
ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Es wird eine Reihe von wirksamen und spezifischen OT-Rezeptor-Agonisten beschrieben. Gemäß einem ersten Aspekt betrifft die vorliegende Erfindung neue Verbindungen der allgemeinen Formel 1 und pharmazeutisch annehmbare Salze davon.
In der allgemeinen Formel 1 ist G¹ eine Gruppe der allgemeinen Formel 2 oder 3
G² ist eine Gruppe der allgemeinen Formel 4, 5, 6, 7, 8 oder 9
A¹ ist CH₂, CH(OH), NH, N-Alkyl, N-(CH₂)_n-R²⁷, O oder S; A² ist CH₂, CH(OH); C(=O) oder NH; A³ ist S, NH, N-Alkyl, -CH=CH- oder -CH=N-; A⁴ und A⁵ sind jeweils CH oder N; A⁶ ist CH₂, NH, N-Alkyl oder O; A⁷ und A¹¹ sind C oder N; A⁸ und A⁹ sind CH, N, NH, N(CH₂)_mR²⁶ oder S; A¹⁰ ist-CH=CH-, CH, N, NH, N-(CH₂)_m-R²⁶ oder S; A¹² und A¹³ sind N oder C und A¹⁴, A¹⁵ und A¹⁶ sind NH, N-CH₃, S, N oder CH; mit der Maßgabe, dass nicht mehr als eines von A⁸, A⁹ und A¹⁰ NH, N-(CH₂)_m-R²⁶ oder S ist; dass A⁷ und A¹¹ nicht beide gleichzeitig N sind; dass weder A⁷ noch A¹¹ N ist, wenn eines von A⁸, A⁹ und A¹⁰ NH, N-(CH₂)_m-R²⁶ oder S ist; dass wenn A¹⁰ -CH=CH- ist, dann A⁸ N ist, A⁹ CH ist und A⁷ und A¹¹ beide C sind; dass wenn A¹⁰ nicht -CH=CH- ist, dann eines von A⁸, A⁹ und A¹⁰ NH, N-(CH₂)_m-R²⁶ oder S ist oder eines von A⁷ und A¹¹ N ist; dass nicht mehr als eines von A¹⁴, A¹⁵ und A¹⁶ NH, N-CH₃ oder S ist, dass A¹² und A¹³ nicht beide gleichzeitig N sind, dass wenn eines von A¹⁴, A¹⁵ und A¹⁶ NH, N-CH₃ oder S ist dann A¹² und A¹³ beide C sind und eines von A¹⁴, A¹⁵ und A¹⁶ NH, N-CH₃ oder S ist oder eines von A¹² und A¹³ N ist.
X¹ ist O und NH; X² ist NR¹⁶, CH-NR¹⁷R¹⁸, CH-CH₂NR¹⁷R¹⁸, N⁺R¹⁹R²⁰, CH-N⁺R²¹R²²R²³ oder CH-CH₂N⁺R²¹R²²R²³ und Y ist O oder S;
R¹, R² und R³ sind jeweils H, Alkyl, O-Alkyl, F, Cl oder Br;
R⁴ und R⁵ sind jeweils H, O-Alkyl, O-Benzyl oder F oder R⁴ und R⁵ sind zusammen =O, -O(CH₂)_aO- oder -S(CH₂)_aS- und R⁶ ist eine Gruppe einer der allgemeinen Formeln 10 bis 25

R⁷ ist H, Alkyl, oder irgendeiner Gruppe, wie für R³ definiert; R⁸, R⁹ und R¹⁰ sind unabhängig H oder Alkyl oder R⁸ und R⁹ können zusammen -(CH₂)_g- sein; R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴ und R¹⁵ sind alle Alkyl oder R¹¹ und R¹² zusammen oder R¹⁴ und R¹⁵ zusammen können -(CH₂)_g- sein; R¹⁶, R¹⁷ und R¹⁸ sind unabhängig H oder Alkyl oder R¹⁷ und R¹⁸ können zusammen -(CH₂)_j- sein; R¹⁹, R²⁰, R²¹, R²² und R²³ sind alle Alkyl oder R¹⁹ und R²⁰ oder R²¹ und R²² können zusammen -(CN₂)_j sein; R²⁴ und R²⁵ sind unabhängig Alkyl, Ar oder -(CH₂)_k-Ar, R²⁶ ist H, Alkyl, gegebenenfalls substituiertes Phenyl, Pyridyl Thienyl, OH, O-Alkyl, NH₂, NH-Alkyl, N(Alkyl)₂, CO₂H, CO₂-Alkyl, CONH₂, CONH-Alkyl, CON(Alkyl)₂, CN oder CF₃ und R²⁷ ist OH, O-Alkyl, O-CO-Alkyl, NH₂, NH-Alkyl oder N(Alkyl)₂, Ar ist Thienyl oder gegebenenfalls substituiertes Phenyl;
a ist 2 oder 3, b ist 1, 2 oder 3, c ist 1 oder 2, d ist 1, 2 oder 3, e ist 1 oder 2, f ist 1, 2 oder 3, g ist 4, 5 oder 6, h ist 1, 2 oder 3, i ist 1, 2, 3 oder 4, j ist 4, 5 oder 6, k ist 1, 2 oder 3, l ist 1 oder 2, m ist 1, 2 oder 3 und n ist 2, 3 oder 4.
Gemäß einem zweiten Aspekt betrifft die vorliegende Erfindung pharmazeutische Mittel von diesen neuen Verbindungen, wobei die Mittel u.a. zur Behandlung von Erektionsstörungen beim Mann geeignet sind. Gemäß weiteren Aspekten betrifft die vorlie gende Erfindung die Verwendung derartiger Mittel bei der Therapie sowie therapeutische Methoden unter Verwendung dieser Mittel.
DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Gemäß einem ersten Aspekt betrifft die Erfindung neue Benzyl-carbamate und Harnstoffe der allgemeinen Formel 1
In dieser allgemeinen Formel sind die Substituenten R¹, R² und R³ unabhängig ausgewählt aus Wasserstoff (H), Alkyl-Gruppen, Alkoxy (-Alkyl) Gruppen und den Halogenen Fluor (F), Chlor (Cl) und Brom (Br). Vorzugsweise ist zumindest eines von R¹, R² und R³ H und mindestens eines nicht H. Insbesondere ist eines von R¹, R² und R³ eine Alkyl-Gruppe oder ein Halogen und die anderen sind H. Vor allem ist R¹ Methyl oder cl und R² und R³ sind beide H.
Die Substituenten R⁴ und R⁵ können unabhängig ausgewählt sein aus H, O-Alkyl, O-Benzyl und F. Wahlweise können R⁴ und R⁵ zusammen O= sein, um (zusammen mit dem Kohlenstoffatom, an das sie gebunden sind) die Carbonyl-Gruppe eines Ketons zu bilden. Schließlich können R⁴ und R⁵ zusammen -O(CH₂)_aO- oder -S(CH₂)_aS- sein, wobei a 2 oder 3 ist, um (zusammen mit dem Kohlenstoffatom, an das sie gebunden sind) ein 1,3-Dioxolan, ein 1,3-Dithiolan, ein 1,3-Dioxan oder ein 1,3-Dithian zu bilden. Vorzugsweise sind R⁴ und R⁵ beide H oder eines ist H und das andere ist O-Alkyl. Insbesondere sind R⁴ und R⁵ beide H oder eines ist H und das andere ist Methoxy. Ferner ist es bei Ausführungsformen, bei denen eines von R⁴ und R⁵ F ist, ist es bevorzugt, dass das andere auch F sein sollte.
Die Verbindungs-Gruppe X¹ ist ausgewählt aus Sauerstoff (O) und unsubstituiertem Stickstoff (NH), Vorzugsweise ist X¹ NH.
Y ist ausgewählt aus O und Schwefel (S).
Die Gruppe G¹ ist ein mono- oder disubstituiertes Stickstoffatom, so, dass die C(=Y)-G¹-Bindung eine Amid- oder Thioamid-Bindung ist. Ein Erfordernis für G¹ ist, das Vorhandensein von mindestens einem basischen Stickstoffatom oder einem von einem basischen Stickstoffatom abgeleiteten quaternären Salz innerhalb der Gruppe. Das basische Stickstoffatom kann als primäre, sekundäre oder tertiäre Amino-Gruppe oder Pyridyl-Stickstoff vorliegen. Wenn G¹ mehr als ein solches basisches Stickstoffatom enthält, können diese gleich oder verschieden sein. Folglich ist G¹ ausgewählt aus einer acyclischen Gruppe der allgemeinen Formel 2 und einer cyclischen Gruppe der allgemeinen Formel 3.
In der allgemeinen Formel 2 können R⁶ und R⁷ gleich oder verschieden sein. R⁶ ist ausgewählt aus einer Gruppe der allgemeinen Formeln 10 bis 25.
Bei den oben angegebenen Formeln ist festzustellen, dass jede der Gruppen, die ein basisches Stickstoffatom enthält, (d.h. in den allgemeinen Formeln 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22 und 24) ein entsprechendes quaternäres Derivat existiert (d.h. 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23 bzw. 25). Bei den Polymethylen-Abstandsgruppen ist b 1, 2 oder 3, c ist 1 oder 2, d ist 1, 2 oder 3, e ist 1 oder 2 und f ist 1, 2 oder 3. R⁸, R⁹ und R¹⁰ sind unabhängig ausgewählt aus H und Alkyl. Wahlweise können R⁸ und R⁹ zusammen eine Polymethylen-Kette -(CH₂)_g- sein, wobei g 4, 5 oder 6 ist, um zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Pyrrolidin-, Piperidin- oder Perhydroazepin-Ring zu bilden. R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴ und R¹⁵ sind alle Alkyl oder R¹¹ und R¹² zusammen oder R¹⁴ und R¹⁵ zusammen können -(CH₂)_g- sein, was wieder Pyrrolidin- Piperidin- oder Perhydroazepin-Ringe ermöglicht.
Bei den Gruppen der allgemeinen Formeln 12 und 13 kann die Bindung des Pyridin-Ringes in 2-, 3- oder 4-Stellung vorliegen.
R⁷ kann irgendeine der oben für R⁶ beschriebenen Gruppen sein oder es kann eine nicht-basische Gruppe sein, ausgewählt aus H und Alkyl.
Bei der Gruppe der allgemeinen Formel 3 ist h 1, 2 oder 3 und i ist 1, 2, 3 oder 4. X² ist ausgewählt aus den basischen Gruppen NR¹⁶, CH-NR¹⁷R¹⁸, CH-CH₂NR¹⁷R¹⁸ und den entsprechenden quaternären Gruppen N⁺R¹⁹R²⁰, CH-N⁺R²¹R²²R²³ und CH-CH₂N⁺R²¹R²²R²³. R¹⁶, R¹⁷ und R¹⁸ sind unabhängig ausgewählt aus H und Alkyl oder R¹⁷ und R¹⁸ können zusammen -(CH₂)_j sein, wobei j 4, 5 oder 6 ist, so dass R¹⁷, R¹⁸ und das Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Pyrrolidin-, Piperidin- oder Perhydroazepin-Ring bilden können. R¹⁹, R²⁰, R²¹, R²² und R²³ sind alle Alkyl oder R¹⁹ und R²⁰ oder R²¹ und R²² können zusammen -(CH₂)_j- sein
Die Gruppe G² ist ein disubstituierter Stickstoff, so, dass die C(=O)-G²-Bindung eine Amid-Bindung ist. G² ist ausgewählt aus einer acyclischen Gruppe der allgemeinen Formel 4, einer kondensierten bicyclischen Gruppe der allgemeinen Formeln 5, 7 und 8 und einer kondensierten tricyclischen Gruppe der allgemeinen Formeln 6 und 9.
In der allgemeinen Formel 4 sind R²⁴ und R²⁵ unabhängig ausgewählt aus Alkyl, Ar und -(CH₂)_k-Ar, wobei k 1, 2 oder 3 ist und Ar ausgewählt ist aus Thienyl und gegebenenfalls substituiertem Phenyl. Geeignete Substituenten für die Phenyl-Gruppe sind Alkyl-Gruppen, OH, Alkoxy-Gruppen, Halogene, NH₂, NH-Alkyl und N(Alkyl)₂. Die Phenyl-Gruppe kann mit bis zu drei derartigen Substituenten, die gleich oder verschieden sein können, substituiert sein.
Bei der allgemeinen Formel 5 ist A¹ ausgewählt aus CH₂, CH(OH), NH, N-Alkyl, N-(CH₂)_n-R²⁷, O und S; wobei n 2, 3 oder 4 ist und R²⁷ ausgewählt ist aus ist OH, Alkoxy-Gruppen, Acyloxy-(O-CO-Alkyl) Gruppen, NH₂, NH-Alkyl und N(Alkyl)₂. A² ist ausgewählt aus CH₂, CH(OH), C(=O) und NH; und I ist 1 oder vorzugsweise 2. Es ist bevorzugt, dass, wenn A² NH ist, dann A¹ CH₂ ist. Es ist ebenfalls bevorzugt, dass, wenn A² C(=O) ist, dann A¹ NH oder N-Alkyl ist.
In den allgemeinen Formeln 5, 6 und 9 ist A³ ausgewählt aus S, NH, N-Alkyl, -CH=CH- und -CH=N- und A⁴ und A⁵ sind jeweils ausgewählt aus CH und N. Bei einer bevorzugten Ausführungsform ist A³ S und A⁴ und A⁵ sind beide CH, um einen Thiophen-Ring zu bilden. Bei einer anderen bevorzugten Ausführungsform ist A³ -CH=CH- und A⁴ und A⁵ sind beide CH, um einen Benzol-Ring zu bilden. Bei einer weitern bevorzugten Ausführungsform ist A³ -CH=N- und A⁴ und A⁵ sind beide CH, um einen Pyridin-Ring zu bilden. Bei noch einer anderen bevorzugten Ausführungsform ist A³ -CH=CH-, A⁴ ist CH und A⁵ ist N, um wieder einen Pyridin-Ring zu bilden.
In den allgemeinen Formeln 6 und 7 ist A⁶ ausgewählt aus CH₂, NH, N-Alkyl und O, A⁷ und A¹¹ sind ausgewählt aus C und N; A⁸ und A⁹ sind ausgewählt aus CH, N, NH, N-(CH₂)_m-R²⁶ und S und A¹⁰ ist ausgewählt aus -CH=CH-, CH, N, NH, N-(CH₂)_m-R²⁶ und S, wobei m 1, 2 oder 3 ist und R²⁶ ausgewählt ist aus H, Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, Pyridyl Thienyl, OH, O-Alkyl, NH₂, NH-Alkyl, N(Alkyl)₂, CO₂H, CO₂-Alkyl, CONH₂, CONH-Alkyl, CON(Alkyl)₂, CN und CF₃. Geeignete Substituenten für die Phenyl-Gruppe sind Alkyl-Gruppen, OH, Alkoxy-Gruppen, Halogene, NH₂, NH-Alkyl und N(Alkyl)₂. Die Phenyl-Gruppe kann mit bis zu drei derartigen Substituenten, die gleich oder verschieden sein können, substituiert sein.
Der durch A⁷, A⁸, A⁹, A¹⁰ und A¹¹ gebildete Ring ist aromatisch und folglich müssen die Gruppen bestimmte Forderungen erfüllen. Wenn A¹⁰ -CH=CH- ist, ist der Ring ein sechsgliedriger Ring. Als solcher kann er nur Atome (Gruppen) der Art -C(R)= und -N= umfassen. Daher müssen A⁷ und A¹¹ beide C sein und A⁸ und A⁹ müssen entweder CH oder N sein. Es hat sich gezeigt, dass eine geeignete Aktivität nur erreicht wird, wenn A⁸ N und A⁹ CH ist. Wenn A¹⁰ nicht -CH=CH- ist, ist der Ring ein fünfgliedriger Ring. In diesem Falle muss eines, und nur eines, der Atome in dem Ring S oder ein trigonaler Stickstoff sein. In diesem Zusammenhang ist ein "trigonaler Stickstoff" ein Stickstoffatom, das kovalent an drei unterschiedliche Atome gebunden ist. Zwei dieser Atome sind die unmittelbaren Nachbarn des Stickstoffatoms in dem fünfgliedrigen Ring. Das dritte ist eine Wasserstoff-, Kohlenstoff- oder anderes Atom, das an den fünfgliedrigen Ring gebunden ist. So folgt, dass, wenn A¹⁰ nicht -CH=CH- ist, dann eines (und nur eines) von A⁷, A⁸, A⁹, A¹⁰ und A¹¹S oder ein trigonaler Stickstoff sein muss. So unterliegt die Auswahl von A⁷, A⁸, A⁹, A¹⁰ und A¹¹ den folgenden Beschränkungen.

1) Wenn A¹⁰ nicht -CH=CH- ist, dann ist eines von A⁸, A⁹ und A¹⁰ NH, N-(CH₂)_m-R²⁶ oder S oder eines von A⁷ und A¹¹ ist N.
2) Nicht mehr als eines von A⁸, A⁹ und A¹⁰ kann NH, N-(CH₂)_m-R²⁶ oder S sein.
3) A⁷ und A¹¹ können nicht beide gleichzeitig N sein.
4) Weder A⁷ noch A¹¹ können N sein, wenn eines von A⁸, A⁹ und A¹⁰ NH, N(CN₂)_mR²⁶ oder S ist.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform ist A⁶ NH. Bei einer anderen bevorzugten Ausführungsform ist A⁸ NH oder N-(CH₂)_m-R²⁶, Bei einer besonders bevorzugten Ausführungsform ist A⁸ NH oder N-(CH₂)_m-R²⁶, A⁹ ist N und A¹⁰ ist CN.
In den allgemeinen Formeln 8 und 9 sind A¹² und A¹³ ausgewählt aus N und C und A¹⁴, A¹⁵ und A¹⁶ sind ausgewählt aus NH, N-CH₃, S, N und CH. Wieder bilden diese Atome einen aromatischen fünfgliedrigen Ring und so muss eines, und nur eines, S oder trigonaler Stickstoff sein. Daher unterliegt die Auswahl von A¹², A¹³, A¹⁴, A¹⁵ und A¹⁶ den folgenden Beschränkungen.

1) Eines von A¹⁴, A¹⁵ und A¹⁶ ist NH, N-CH₃ oder S oder eines von A¹² und A¹³ ist N.
2) Nicht mehr als eines von A¹⁴, A¹⁵ und A¹⁶ ist NH, N-CH₃ oder S.
3) A¹² und A¹³ können nicht beide gleichzeitig N sein.
4) Wenn eines von A¹⁴, A¹⁵ und A¹⁶ NH, N-CH₃ oder S ist, dann sind A¹² und A¹³ beide C.

Wie er hier verwendet wird, soll der Ausdruck "Alkyl" niedere Alkyl-Gruppen bezeichnen, d.h. gesättigte Kohlenwasserstoff-Gruppen mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen einschließlich linearer, verzweigter und cyclischer Alkyl-Gruppen. Beispiele für "Alkyl" umfassen, sind aber nicht beschränkt auf C₁ – Methyl, C₂ – Ethyl, C₃ – Propyl, Isopropyl, Cyclopropyl, C₄ – n-Butyl, sek.-Butyl, Isobutyl, tert.-Butyl, Cyclobutyl, Cyclopropylmethyl, Methylcyclopropyl, C₅ – n-Pentyl, Neopentyl, Cyclopentyl, Cyclopropylethyl, Dimethylcyclopropyl, und C₆ – n-Hexyl, Cyclohexyl, Bicyclo[3.1.0]hexyl.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen, die ein basisches Stickstoffatom enthalten, können Additionssalze mit Wasserstoofsäuren, wie Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Essigsäure, Trifluoressigsäure, Benzoesäure, Maleinsäure, Citronensäure, Fumarsäure, Methansulfonsäure u.ä. bilden. Solche Verbindungen, die ein quaternäres Stickstoffatom enthalten, liegen als Salze mit einem geeigneten Gegenion wie Chlorid, Bromid, Iodid, Sulfat, Phosphat, Acetat, Trifluoracetat, Benzoat, Maleat, Citrat, Fumarat, Methansulfonat u.ä. vor. Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch eine saure Gruppe, wie eine Carbonsäure-Gruppe an R²⁶ enthalten. Diese Verbindungen können als innere Salze (Zwitterionen) oder als Salze, wie Natrium-, Kalium-, Magnesium-, Calcium- oder Tetraalkylammonium-Salze vorliegen. Soweit derartige Salze pharmazeutisch annehmbar sind, fallen sie ebenfalls in den Rahmen der Erfindung.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen haben alle mindestens ein stereogenes Zentrum ("asymmetrisches Kohlenstoffatom") und können so optische Isomerie zeigen. Der Umfang der vorliegenden Erfindung umfasst alle Epimere, Enantiomere und Diastereomere von Verbindungen der allgemeinen Formel 1, einschließlich einzelne Isomere, Gemische und Razemate.
Besonders bevorzugte Ausführungsformen im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind solche Verbindungen, bei denen zwei oder mehr der oben angegebenen bevorzugten Merkmale kombiniert sind. Eine besonders bevorzugte Ausführungsform ist ein Thioamid der allgemeinen Formel 26
Bei der allgemeinen Formel 26 ist R^1A Methyl oder Cl und R^4A ist H oder O-Methyl. G¹ und G² sind wie oben definiert.
Eine andere bevorzugte Ausführungsform ist ein Amid der allgemeinen Formel
In der allgemeinen Formel 27 sind R^1A, R^4A, G¹ und G² wie oben definiert.
Eine weitere besonders bevorzugte Ausführungsform ist eine Verbindung der allgemeinen Formel 28
In der allgemeinen Formel 28 sind R¹, R⁴, R⁵, R¹⁶, G² und Y wie oben definiert.
Eine weitere besonders bevorzugte Ausführungsform ist eine Verbindung der allgemeinen Formel 29
In der allgemeinen Formel 29 sind R^1A, R^4A, R²⁶, A³, und Y wie oben definiert. Eine ganz besonders bevorzugte Ausführungsform ist eine Verbindung der allgemeinen Formel 30
In der allgemeinen Formel 309 sind R^1A, R^4A, R¹⁶, R²⁶, A³, und Y wie oben definiert.
Einzelne bevorzugte Verbindungen im Rahmen der Erfindung umfassen:
4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzodiazepin-4-on-1-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin,
4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin-5-ylcarbonyl)-benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin,
4,4-Dimethyl-1-(N-(2-methyl-4-(1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin-5-ylcarbonyl)-benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepinium-iodid,
4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin,
4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzyloxycarbonyl)-L-prolyl)perhydro-1,4-diazepin,
(4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin-N-methyl-N-(2-picolyl)amid und
1-((4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-4-methoxy-L-prolyl)-4-(1-pyrrolidinyl)piperidin.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können nach chemischen Standard-Arbeitsweisen hergestellt werden. Allgemein können Verbindungen der allgemeinen Formel 1 als aus vier Komponenten bestehend angesehen werden.

• Komponente C¹ entspricht G²
• Komponente C² entspricht der substituierten Benzoyl-Einheit
• Komponente C³ entspricht der Pyrrolidin-Einheit
• Komponente C⁴ entspricht G¹.

Diesen Komponenten entsprechende Zwischenprodukte werden hergestellt und dann unter Bildung des Endproduktes zusammengefügt. Diese vier Komponenten sind:

(i) für C¹ ein sekundäres Amin G²-H
(ii) für C² eine substituierte Benzoesäure
(iii) für C³ ein Prolin-Derivat
(iv) für C⁴ ein primäres oder sekundäres Amin H-G¹

Es ist zu erkennen, dass die substituierte Benzoesäure für C² und das Prolin-Derivat für C³ beide zwei funktionelle Gruppen haben, die während des Zusammensetzens der Endverbindung zeitweilig geschützt werden müssen. Die Prinzipien des Schutzes von funktionellen Gruppen sind bekannt und z.B. beschrieben in J.F.W. McOmie "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, 1973; T.W. Greene und P.G.M. Wuts "Protective Groups in Organic Synthesis", 2. Aufl. John Wiley, 1991 und in P.J. Kociensky, "Protecting groups" Georg Thieme Verlag, 1994. Die Carbonsäure-Gruppe wird üblicherweise als ein Ester, wie Methyl-, Benzyl- oder tert.-Butyl-ester geschützt. Das sekundäre Amin von Prolin und das primäre Amin der Benzoesäure (wenn X¹ = NH ist) wird üblicherweise als Carbamat-Derivat, wie als tert.-Butylcarbamat (BOC-Derivat), Benzylcarbamat (CBZ- oder einfacher Z-Derivat) oder 9-Fluorenylmethyl-carbamat (Fmoc-Derivat) geschützt. Wenn X¹ = O ist, wird die erhaltene Alkohol-Funktion üblicherweise als ein Ester, wie Acetat, oder als ein Ether, wie Methoxymethyl-, Tetrahydropyranyl- oder Trialkylsilyl-ether geschützt. Andere funktionelle Gruppen können einen Schutz erfordern. Z.B. kann die Gruppe G¹ eine oder mehrere primäre oder sekundäre Amino-Gruppen umfassen, die geschützt werden müssen. In der folgenden allgemeinen Beschreibung der Synthese-Methoden wird angenommen, dass ein solcher Schutz, soweit erforderlich, angewandt wird.
(i) Herstellung von sekundärem Amin für C¹
Acyclische sekundäre Amine, entsprechend HNR²⁴R²⁵ sind bekannt. Viele sind Handelsprodukte. Solche, die es nicht sind, können nach veröffentlichten Methoden oder durch einfache Modifizierung derartiger Methoden hergestellt werden. Einige besonders geeignete Methoden sind unten angegeben.

a) Alkylierung
(Diese Methode ist nur anwendbar in Fällen, in denen eine weitere Alkylierung vermieden werden kann.)
b) Reduktive Aminierung
(wenn R^aCHR^b R²⁵ entspricht)
c) Amid Reduktion
(wenn R^aCH₂ R²⁵ entspricht)

Das Ausgangs-Amid kann selbst nach bekannten Methoden hergestellt werden.
Sekundäre Amine, entsprechend C¹, bei denen G² eine Gruppe, entsprechend der allgemeinen Formeln 5–9 ist, sind im allgemeinen nicht im Handel erhältlich. Sie können nach veröffentlichten Methoden oder nach offensichtlichen Modifikationen solcher Methoden hergestellt werden. Besonders geeignete Methoden sind beschrieben in Aranapakam et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1993, 1733; Artico et al., Farmaco. Ed. Sci. 24, 1969, 276; Artico et al., Farmaco. Ed. Sci. 32, 1977, 339; Chakrabarti et al., J. Med. Chem. 23, 1980, 884; Chakrabarti et al., J. Med. Chem. 32, 1989, 2573; Chimirri et al., Heterocycles 36, 1993, 601; Grunewald et al., J. Med. Chem. 39, 1996, 3539; Klunder et al., J. Med. Chem. 35, 1992, 1887; Liegéois et al., J. Med. Chem. 37, 1994, 519; Olagbemiro et al., J. Het. Chem. 19, 1982, 1501; Wright et al., J. Med. Chem. 23, 1980, 462; Yamamoto et al., Tet. Lett. 24, 1983, 4711 und Internationale Patentanmeldung WO99/06403.
(ii) Herstellung von substituierter Benzoesäure für C²
Substituierte Benzoesäuren, entsprechend C² sind im allgemeinen Handelsprodukte, aber sie können unter Anwendung veröffentlichter Methoden oder durch einfache Variation derartiger Methoden hergestellt werden. Die schwierigste Aufgabe ist im all gemeinen die Erarbeitung der -CH₂X¹H Funktion in 4-Stellung Einige geeignete Umwandlungen sind unten angegeben.

a) Bromierung/Substitution
b) Sandmeyer-Reaktion/Reduktion

(iii) Herstellung des Prolin-Derivats für C³
Prolin- und Hydroxyprolin-Derivate sind Handelsprodukte. Andere Prolin-Derivate, entsprechend C³ können nach den Methoden hergestellt werden, die angegeben sind in Dugave et al., Tet. Lett. 39, 1998, 1169; Petrillo et al., J. Med. Chem. 31, 1988, 1148 und Smith et al., J. Med. Chem. 31, 1988, 875.
(iv) Herstellung des primären oder sekundären Amins für C⁴
Wie oben unter (i) angegeben, sind viele Amine im Handel erhältlich und andere sind unter Anwendung von üblichen chemischen Verfahren leicht zugänglich. Die quaternären Ammonium-Salze können allgemein hergestellt werden durch Behandeln eines primären, sekundären oder tertiären Amins mit einem Überschuss an Alkylierungs-Mittel.
Mit den vier Komponenten, soweit erforderlich entsprechend geschützt, erfordert der Zusammenbau der Endverbindung die Bildung von drei Bindungen: zwischen C¹ und C², zwischen C² und C³ und zwischen C³ und C⁴. Diese Stufen zur Bildung der Bindungen können in beliebiger Reihenfolge durchgeführt werden. So können die folgenden Sequenzen vorgeschlagen werden. C1 + C2 → C1C2 → C1C2C3 → C1C2C3C4 C3 + C4 → C3C4 → C2C3C4 → C1C2C3C4 C2 + C3 → C2C3 → C2C3C4 → C1C2C3C4 C2 + C3 → C2C3 → C1C2C3 → C1C2C3C4 C1 + C2 → C1C2 ; C3 + C4 → C3C4 ; C1C2 + C3C4 → C1C2C3C4
(i) Bildung der C¹-C² Bindung
Die Bindung zwischen C¹ und C² ist eine einfache Amid-Bindung. Die Chemie zur Bildung derartiger Bindungen aus einer Carbonsäure und einem sekundärem Amin ist in der organischen Synthese, und besonders auf dem Gebiet der Peptid-Synthese, bekannt. Die Carbonsäure kann in eine reaktionsfähigere Form, wie ein Säurechlorid (unter Verwendung von beispielsweise Oxalylchlorid oder Thionylchlorid) oder ein gemischtes Anhydrid (unter Verwendung von Isobutyl-chlorformiat) umgewandelt werden. Diese reaktionsfähige Form wird dann in einem geeigneten Lösungsmittel, im allgemeinen einem aprotischen Lösungsmittel, wie Dichlormethan oder Dimethylformarid, in Gegenwart einer Base, wie Triethylamin oder 4-Dimethylaminopyridin, zu dem sekundären Amin zugegeben und die Reaktion kann bei einer Temperatur zwischen –20°C und dem Siedepunkt des Lösungsmittels ablaufen. Die Wahl der Temperatur und der Zeit für die Reaktion hängt von der Reaktionsfähigkeit der beiden Komponenten ab.
Wahlweise können die Carbonsäure und das sekundäre Amin in einem geeigneten Lösungsmittel, wie oben, gegebenenfalls in Gegenwart einer Base, vermischt und ein Kondensationsmittel zugegeben werden. Geeignete Kondensationsmittel umfassen Carbodiimide, wie Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) und N-Ethyl-N'-dimethylaminopropylcarbodiimid (ECD, auch WSCDI für wasserlösliches Carbodiimid), phosphorhaltige Reagenzien, wie (Benzotriazol-1-yloxy)-tris(dimethylamino)phosphonium-hexafluorphosphat (BOP), (Benzotriazol-1-yloxy)-tripyrrolidinophosphonium-hexafluorphosphat (PyBOP^®) und Bromtripyrrolidinophosphonium-hexafluorphosphat (PyBroP^®), sowie Harnstoffe, wie O-(Benzotriazol-1-yl)N,N,N',N'-tetramethyluronium-hexafluorphosphat (HBTU).
(ii) Bildung der C²-C³ Bindung
Die Bindung zwischen C² und C³ ist eine Carbamat- (wenn X¹ = O) oder Harnstoff (wenn X¹ = NH) Bindung. Die erste Stufe der Bildung dieser Bindung ist allgemein die Umsetzung des Prolin-Derivats mit Phosgen oder einem Phosgen-Äquivalent, wie Trichlormethyl-chlorformiat, Bis(trichlormethyl)carbonat oder Carbonyldiimidazol. Wieder werden im allgemeinen ein aprotisches Lösungsmittel und eine tertiäre Amin-Base verwendet. Das in dieser Stufe gebildete Zwischenprodukt wird üblicherweise nicht iso liert. Der Alkohol (X¹ = O) oder das Amin (X¹ = NH) wird zugegeben und die Reaktion kann fortschreiten unter direkter Bildung des Carbamats oder Harnstoffs. Als Alternative kann, wenn X¹ = NH ist, das reaktionsfähige Zwischenprodukt durch Reaktion von C² mit dem Phosgen-Äquivlent durchgeführt und Prolin in dem zweiten Teil der Synthese zugegeben werden.
(iii) Bildung der C³-C⁴ Bindung
Wenn Y = O ist, ist die Bindung zwischen C³ und C⁴ ist eine einfache Amid-Bindung und sie kann nach den oben für die Bildung der C¹-C² Bindung beschriebenen Methoden erzeugt werden. Wenn Y = S ist, ist die Bindung Thioamid. Dieses wird im allgemeinen gebildet, indem zunächst das einfache Amid hergestellt und dieses dann mit Lawesson-Reagenz (2,4-Bis(4-methoxyphenyl)-1,3-dithia-2,4-diphosphetan-2,4-disulfid) behandelt wird.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind geeignet zur Therapie bei Menschen und Tieren. Wenn sie so verwendet werden, werden sie im allgemeinen in geeigneter Weise zubereitet. So betrifft ein zweiter Aspekt der Erfindung eine pharmazeutische Zubereitung, die eine Verbindung wie oben beschrieben als Wirkstoff enthält. Ein dritter Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft die Verwendung einer Verbindung gemäß dem ersten Aspekt zur Herstellung eines solchen Mittels.
Das erfindungsgemäße Mittel kann in irgendeiner bekannten Form vorliegen. Z.B. kann die Zubereitung als Tablette, Kapsel, Pulver, Suppositorium, Creme, Lösung oder Suspension oder in einer komplexen Form, wie einem Klebepflaster, vorliegen. Die Zubereitung enthält im allgemeinen ein oder mehrere Exzipientien, wie Verdünnungsmittel, Masse bildende Mittel, Bindemittel, Dispergiermittel, Lösungsmittel, Konservierungsmittel, Geschmacksmittel u.ä. Wenn die Zubereitung als Tablette oder Kapsel vorliegt, können die Exzipientien gegebenenfalls ein oder mehrere Mittel zur Steuerung der Freisetzung der Wirkstoffe umfassen, wie einen Überzug aus einem Polymer, das bei niedrigem pH unlöslich aber bei neutralem oder hohen pH löslich ist. Ein solcher Überzug (bekannt als "enteraler Überzug") verhindert die Freisetzung des Wirkstoffs im Magen aber ermöglicht die Freisetzung im Darm. Die Zubereitung kann auch eine oder mehrere zusätzliche pharmazeutisch aktive Substanzen enthalten. Vorzugsweise enthält die Zubereitung keine derartigen zusätzlichen Wirkstoffe.
Gemäß weiteren Aspekten betrifft die vorliegende Erfindung die Verwendung solcher Mittel und damit der erfindungsgemäßen Verbindungen, zur Therapie bei Menschen und Tieren, sowie Behandlungsmethoden, bei denen die Mittel und Verbindun gen verwendet werden. Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind wirksame und selektive Oxitocin-Rezeptor-Agonisten, und so sind die Mittel geeignet zur Behandlung von Zuständen, bei denen eine unzureichende oxitocinartige Aktivität an der Pathophysiologie beteiligt ist. Derartige Zustände umfassen, sind aber nicht beschränkt auf Sexualstörungen, wie Erektions- und Ejakulationsstörungen beim Mann, Sexulastörungen bei der Frau, Krebs der Prostata, Brust, des Eierstocks und der Knochen, Osteoporose, gutartige Prostata-Hyperplasie, Blutungen nach der Geburt und Depression. Die Mittel können auch angewandt werden, um die Wehen oder die Plazenta-Ablösung einzuleiten, den arteriellen Blutdruck herabzusetzen, übermäßige Stressreaktionen zu verringern und die Schmerzschwelle zu erhöhen.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform wird das Mittel zur Behandlung von Sexualstörungen beim Mann und bei der Frau verwendet und insbesondere bei Erektionsstörungen.
Wenn sie als therapeutische Mittel verwendet werden, können die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen auf irgendeine geeignete bekannte Route verabreicht werden. Z.B. können sie oral, bukkal, sublingual, rektal, intravaginal, nasal, pulmonal oder transdermal verabreicht werden. Wahlweise können sie durch Injektion verabreicht werden, einschließlich intravenös, subkutan und intramuskulär. Die verabreichte Menge wird bestimmt durch den behandelnden Arzt, der alle entsprechenden Faktoren berücksichtigt. Allgemein umfasst eine einzelne Dosis zwischen 0,1 und 1000 mg, vorzugsweise zwischen 1 und 250 mg der aktiven Verbindung. Die Dosis kann einmal oder wiederholt verabreicht werden. Wenn sie wiederholt verabreicht wird, kann sie in regelmäßigen Intervallen, wie einmal, zweimal oder dreimal am Tag, oder nach Bedarf, entsprechend dem zu behandelnden Zustand verabreicht werden.
Für eine Langzeit-Behandlung kann eine Alternative zu einer wiederholten Verabreichung die Verabreichung einer Depot-Dosis sein. Für diese Verabreichungs-Methode wird der Wirkstoff im allgemeinen in eine Matrix aus einem biologisch abbaubaren Polymer, wie einem Copolymer aus Milch- und Glykolsäuren, eingebaut und die Zubereitung wird entweder s.c. oder i.m. verabreicht, um ein Depot zu erzeugen, von dem der Wirkstoff freigesetzt wird indem das Polymer abgebaut wird.
Die obige Beschreibung wird in den folgenden Beispielen näher erläutert, die die Anwendung der Erfindung zeigen aber nicht ihren Umfang einschränken sollen.
BEISPIELE
Es werden die folgenden Abkürzungen verwendet:

Bu: Butyl – Alkyl-Reste können ferner als n (normal d.h. unverzweigt), i (Iso) und t (tertiär) bezeichnet werden.
DIEA: N,N-Diisopropylethylamin
DMF: Dimethylformarid
Et: Ethyl
HOBt: 1-Hydroxybenzotriazol
HPLC: Hochdruck-Flüssigkeits-Chromatographie
h: Stunde(n)
Me: Methyl
MS: Massenspektrum
NMR: Kernmagnetisches Resonanzspektrum
OVA: Ornithin-vasotocin-Analoges
Pet.ether: Petrolether, Siedebereich 60–80°C
Ph: Phenyl
Pn: Pentyl
Pr: Propyl
RT: Raumtemperatur
THF: Tetrahydrofuran
WSCD: wasserlösliches Carbodiimid (N-Ethyl-N'(3-dimethylaminopropyl)carbodiimid-hydrochlorid

Beispiele 1 bis 10 beschreiben die Synthese von Zwischenprodukten. Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind in den Beispielen 11 bis 105 beschrieben
Beispiel 1 1-Benzyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin
1A: Ethyl-5-amino-1-benzylpyrazol-4-carboxylat
Benzylhydrazin-dihydrochlorid (4,29 g, 22 mmol) wurde zu einer Lösung von Ethyl(ethoxymethylen)cyanoacetat (3,38 g, 20 mmol) und Triethylamin (6,15 ml, 44 mmol, 2Äq.) in Ethanol (40 ml) gegeben und das Gemisch 18 h unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 60% Pet.ether/40% Ethylacetat) gereinigt unter Bildung eines blass gelben Feststoffs, der als Ethyl-5-amino-1-benzylpyrazol-4-carboxylat identifiziert wurde. (4,3 g, 88%).
1B: Ethyl-1-benzyl-5-(2'-nitrophenylamino)pyrazol-4-carboxylat
Natriumhydrid (60% Dispersion in Öl, 520 mg, 13 mmol) wurde in einzelnen Anteilen bei 0°C zu einer Suspension von Ethyl-5-amino-1-benzylpyrazol-4-carboxylat (2,2 g, 9 mmol) in wasserfreiem THF (30 ml) gegeben. Das Gemisch konnte sich auf Raumtemperatur erwärmen und wurde 2 h gerührt, dann wurde 1-Fluor-2-nitrobenzol (1,26 g, 9 mmol) zugegeben und die erhaltene tief purpurfarbene Suspension wurde 18 h bei RT gerührt. Es wurde 1M KHSO₄ zugegeben, um die Reaktion abzubrechen und das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in Ethylacetat gelöst und die Lösung wurde mit 0,3M KHSO₄, ges. NaHCO₃ und Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 75% Pet.ether/25% Ethylacetat) gereinigt unter Bildung von Ethyl-1-benzyl-5-(2'-nitrophenylamino)pyrazol-4-carboxylat (2,5 g, 76%.)
MS [M+H]⁺ 366,8
1C: Ethyl-5-(2'-aminophenylamino)-1-benzylpyrazol-4-carboxylat
Ethyl-1-benzyl-5-(2'-nitrophenylamino)pyrazol-4-carboxylat (2,5 g, 6,8 mmol) wurde in Ethylacetat/Ethanol (1:1, 100 ml) gelöst und über 10% Pd/C-Katalysator 70 min hydriert. Das Gemisch wurde durch Celite^® Filterhilfe filtriert und das Filtrat im Vakuum eingeengt unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als Ethyl-5-(2'-aminophenylamino)-1-benzylpyrazol-4-carboxylat identifiziert wurde. (1,5 g, 86%).
MS [M+H]⁺ 337,2
1D: 1-Benzyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4b][1,5]benzodiazepin-4(5H)-on
Eine Lösung von Ethyl-5-(2'-aminophenylamino)-1-benzylpyrazol-4-carboxylat (1,75 g, 5,2 mmol) in Essigsäure/2-Propanol (1:9, 40 ml) wurde 3 Tage unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde azeotrop mit Toluol destilliert unter Bildung eines weißlichen Feststoffs, der durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 35% Pet.ether/65% Ethylacetat) gereinigt wurde unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als 1-Benzyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin-4(5H)-on identifiziert wurde. (780 mg, 52%).
MS [M+H]⁺ 291,1
1E: 1-Benzyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin
LiAlH₄ (365 mg, 10 mmol) wurde in einzelnen Anteilen zu einer Suspension von 1-Benzyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin-4(5H)-on (780 mg, 2,7 mmol) in wasserfreiem THF (15 ml) innerhalb von 10 min bei 0°C zugegeben. Die erhaltene Suspension wurde 18 h unter Rückfluss erhitzt und konnte sich dann auf Raumtemperatur abkühlen. Es wurde ein weiterer Anteil LiAlH₄ (90 mg, 2,5 mmol) zugegeben und das Gemisch 3 h unter Rückfluss erhitzt. Das Gemisch wurde auf 0°C abgekühlt, 35%ige Ammoniak-Lösung (1 ml) innerhalb von 10 min zugetropft und das Gemisch 1 h bei RT gerührt. Die erhaltene Suspension wurde durch Celite^® Filterhilfe filtriert und das Filtrat im Vakuum eingeengt unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als 1-Benzyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin identifiziert wurde. (450 mg, 60%).
MS [M+H]⁺ 276,9
Beispiel 2 1-Methyl-4,10-dihydropyrazolo[4,5-c.]pyrido[2,3-b][1,4]diazepin
2A: Ethyl-1-methyl-2-(3'-nitro-2'-pyridylamino)pyrazol-4-carboxylat
Natriumhydrid (60% Dispersion in Öl, 600 mg, 15 mmol) wurde in einzelnen Anteilen bei 0°C zu einer Suspension von Ethyl-5-amino-1-methylpyrazol-4-carboxylat (1,69 g, 10 mmol) in wasserfreiem THF (15 ml) gegeben. Das Gemisch und wurde 2 h bei RT gerührt, dann wurde 2-Chlor-3-nitropyridin (1,58 g, 10 mmol) zugegeben und die erhaltene tief rote Suspension wurde 18 h bei RT gerührt. Es wurde 1M KHSO₄ zugegeben, um die Reaktion abzubrechen und das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in Ethylacetat gelöst und die Lösung wurde mit 0,3M KHSO₄, ges. NaHCO₃ und Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 30% Pet.ether/70% Ethylacetat) gereinigt unter Bildung von Ethyl-1-methyl-2-(3'-nitro-2'-pyridylamino)pyrazol-4-carboxylat (1,95 g, 67%.) MS [M+H]⁺ 292,0
2B: Ethyl-2-(3'-amino-2'-pyridylamino)-1-methylpyrazol-4-carboxylat
Eine Lösung von Ethyl-1-methyl-2-(3'-nitro-2'-pyridylamino)pyrazol-4-carboxylat (1,95 g, 6,7 mmol) in Ethanol (100 ml) wurde über 10% Pd/C-Katalysator 3 h hydriert. Das Reaktionsgemisch wurde durch Celite^® Filterhilfe filtriert und das Filtrat im Vakuum eingeengt unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als Ethyl-2-(3'-amino-2'-pyridylamino)-1-methylpyrazol-4-carboxylat identifiziert wurde. (1,5 g, 86%).
2C: 1-Methyl-4,10-dihydropyrazolo[4,5-c]pyrido[2,3-b][1,4]benzodiazepin-4(5H)-on
Eine Lösung von Ethyl-2-(3'-amino-2'-pyridylamino)pyrazol-1-methylpyrazol-4-carboxylat (1,5 g, 5,75 mmol) in Essigsäure/2-Propanol (1:9, 50 ml) wurde 3 Tage unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand azeotrop mit Toluol destilliert. Der Rückstand wurde durch Umkristallisieren aus Ethanol und dann durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 95% Chloroform/4% Methanol/1% Essigsäure) gereinigt unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als 1-Methyl-4,10-dihydropyrazolo[4,5-c]pyrido[2,3-b][1,4]diazepin-(5H)-on identifiziert wurde. (560 mg, 45%).
2D: 1-Methyl-4,10-dihydropyrazolo[4,5-c]pyrido[2,3-b][1,4]diazepin
LiAlH₄ (365 mg, 10 mmol) wurde in einzelnen Anteilen zu einer Suspension von 1-Methyl-4,10-dihydropyrazolo[4,5-c]pyrido[2,3-b][1,4]benzodiazepin-4(5H)-on (560 mg, 2,6 mmol) in wasserfreiem THF (30 ml) innerhalb von 10 min bei 0°C zugegeben. Die erhaltene Suspension wurde 18 h unter Rückfluss erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde auf 0°C abgekühlt und 35%ige Ammoniak-Lösung (1 ml) innerhalb von 10 min zugetropft und das Gemisch 1 h bei RT gerührt. Die erhaltene Suspension wurde durch Celite^® Filterhilfe filtriert und das Filtrat im Vakuum eingeengt unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als 1-Methyl-4,10-dihydropyrazolo[4,5-c]pyrido[2,3-b][1,4]diazepin identifiziert wurde. (410 mg, 78%). MS [M+H]⁺ 202,1
Beispiel 3 tert.-Butyl-N-methyl-N-(2-picolyl)carbamat
Di-tert.-butyl-dicarbonat (546 mg, 2,5 mmol) wurde zu einer eiskalten Lösung von 2-(Aminomethyl)pyridin (260 mg, 2,4 mmol) und Triethylamin (340 μl, 2,4 mmol) in Dichlorethan (10 ml) zugegeben. Die Lösung wurde 2 h bei RT gerührt und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in wasserfreiem THF (10 ml) gelöst und auf 0°C gekühlt. Es wurde Natriumhydrid (60% Dispersion in Öl, 200 mg, 3 mmol) zugegeben, das Gemisch 30 min gerührt und dann Iodmethan (186 μl, 3 mmol) zugegeben. Die erhaltenen Suspension wurde 18 h bei RT gerührt. Die Reaktion wurde mit Wasser abgebrochen und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in Ethylacetat gelöst, mit Salzlösung gewaschen und dann über Na₂SO₄ getrocknet. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 98% Chloroform/2% Methanol) gereinigt unter Bildung eines gelben Gummis, der als tert.-Butyl-N-methyl-N-(2-picolyl)carbamat identifiziert wurde. (100 mg, 19%).
Beispiel 4 tert-Butyl-4-aminomethyl-3-chlorbenzoat
4A: tert.-Butyl-3-chlor-4-methylbenzoat
Thionylchlorid (11 ml, 150 mmol) wurde zu einer Suspension von 3-Chlor-4-methyl-benzoesäure (5,12 g, 30 mmol) in Toluol (25 ml) gegeben und das Gemisch wurde 2 h unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde dreimal azeotrop mit Toluol destilliert, dann in wasserfreiem THF (40 ml) gelöst und auf 0°C gekühlt. Es wurde Lithium-tert.-butoxid (2,4 g, 30 mmol) zugegeben und das Gemisch 3 Tage bei RT gerührt. Es wurde Wasser (5 ml) zugegeben und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in Ethylacetat gelöst. Die Lösung wurde mit 0,3M KHSO₄, ges. NaHCO₃ und Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt unter Bildung eines blass-gelben Gummis, der als tert.-Butyl-3-chlor-4-methylbenzoat identifiziert wurde (5,4 g, 79%).
4B tert.-Butyl-4-brommethyl-3-chlorbenzoat
N-Bromsuccinimid (4,27 g, 24 mmol) und 2,2'-Azo-bis(2-methylpropionitril) (394 mg, 2,4 mmol) wurden zu einer Lösung von tert.-Butyl-3-chlor-4-methylbenzoat (5,4 g, 23,8 mmol) in Tetrachlorkohlenstoff (75 ml) zugegeben und das Gemisch 18 h unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 95% Pet.ether/5% Ethylacetat) gereinigt unter Bildung eines weißen Festsstoffs, der als tert.-Butyl-4-brommethyl-3-chlorbenzoat identifiziert wurde. (5,7 g, 78%).
4C: tert-Butyl-4-aminomethyl-3-chlorbenzoat
Ethanol (100 ml) wurde mit Ammoniak gesättigt, dann wurde tert.-Butyl-4-brommethyl-3-chlorbenzoat (5,7 g, 18,7 mmol) zugegeben und das Gemisch 2 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand mit Diethylether verrieben unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als tert-Butyl-4-aminomethyl-3-chlorbenzoat identifiziert wurde. (4,1 g, 91%).
Beispiel 5 4-(tert.-Butyloxycarbonylaminomethyl)-3-chlorbenzoesäure
5A: Methyl-4-brommethyl-3-chlorbenzoat
Zu einer Lösung von Methyl-3-chlor-4-methylbenzoat (5,0 g, 27,1 mmol) in Tetrachlorkohlenstoff (50 ml) wurde N-Bromsuccinimid (5,8 g, 32,0 mmol) und 2,2'-Azo-bis(2- methylpropionitril) (0,442 g, 2,70 mmol) gegeben. Das Gemisch wurde 18 h unter Rückfluss erhitzt und konnte sich dann auf Raumtemperatur abkühlen und wurde im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens Pet.ether → 5% Ethylacetat/95% Pet.ether) gereinigt unter Bildung eines Öls, das als Methyl-4-brommethyl-3-chlorbenzoat identifiziert wurde. (5,96 g, 84%).
5B: 4-(tert.-Butyloxycarbonylaminomethyl)-3-chlorbenzoesäure
Zu einer gesättigten Lösung von Ammoniak in Ethanol (170 ml) wurde Methyl-4-brommethyl-3-chlorbenzoat von Beispiel 5A (5,5 g, 20,9 mmol) zugegeben. Das Gemisch wurde 1 h bei Raumtemperatur gerührt und dann im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde mit Diethylether verrieben und die erhaltenen weißen Kristalle wurden abfiltriert und mit weiterem Diethylether gewaschen. Zu einer Lösung dieses Feststoffs in Wasser (100 ml) wurden Lösungen von Di-tert.-butyl-dicarbonat (5,0 g, 23,0 mmol) in Dioxan (100 ml) und Natriumhydroxid (1,86 g, 46,0 mmol) in Wasser (100 ml) gegeben. Das Gemisch wurde 18 h bei Raumtemperatur gerührt und dann im Vakuum eingeengt. Der wässrige Rückstand wurde mit Citronensäure angesäuert und mit Chloroform/-2-Propanol extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser gewaschen über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als 4-(tert.-Butyloxycarbonylaminomethyl)-3-chlorbenzoesäure identifiziert wurde. (2,8 g, 67%).
Beispiel 6 4-(tert.-Butyloxycarbonylaminomethyl)-3-nitrobenzoesäure
4-Brommethyl-3-nitro-benzoesäure (4,75 g, 18,2 mmol) wurde nach der Methode des Beispiels 5B umgesetzt unter Bildung eines gelben Feststoffs, der als 4-(tert.-Butyloxycarbonylaminomethyl)-3-nitrobenzoesäure identifiziert wurde. (2,6 g, 49%).
Beispiel 7 4-Cyano-3-methylbenzoesäure
Zu einer Lösung von 4-Brom-2-methylbenzonitril (2,0 g, 10,2 mmol) in THF (100 ml) wurde bei –78°C unter Stickstoffatmosphäre eine 2,5M Lösung von n-Butyllithium (4,48 ml 11,2 mmol) zugetropft. Das Gemisch wurde 1 h bei –78°C gerührt und dann auf festes Kohlendioxid (5 g) in THF (50 ml) gegossen. Das Gemisch konnte sich auf Raumtemperatur erwärmen. Es wurde Wasser (200 ml) zugegeben und das Gemisch mit Diethylether (3 mal) extrahiert. Die wässrige Schicht wurde durch Zugabe von konz. HCl angesäuert und mit Chloroform (3 mal) extrahiert. Die vereinigten Chloroform-Auszüge wurden mit Wasser gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als 4-Cyano-3-methylbenzoesäure identifiziert wurde. (1,2 g, 73%).
Beispiel 8 4-Cyano-2-methylbenzoesäure
4-Brom-3-methylbenzonitril (2,0 g, 10,2 mmol) wurde nach der Methode von Beispiel 7 umgesetzt. Das Produkt wurde mit Hexan verrieben unter Bildung eines gelben Feststoffs, der als 4-Cyano-2-methylbenzoesäure identifiziert wurde. (0,96 g, 59%).
Beispiel 9 4-(tert.-Butyloxycarbonylaminomethyl)-2-fluorbenzoesäure
9A: 2-Fluor-4-methylbenzoesäure
4-Brom-fluortoluol (8,33 g, 44,07 mmol) wurde nach der Methode des Beispiels 7 umgesetzt unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als 2-Fluor-4-methylbenzoesäure identifiziert wurde. (4,89 g, 72%).
9B: Methyl-2-fluor-4-methylbenzoat
Zu einer Lösung von 2-Fluor-4-methylbenzoesäure (6,04 g, 39,18 mmol) in Toluol (80 ml) wurde Thionylchlorid (65 ml, 89,11 mmol) zugegeben. Das Gemisch wurde 2,5 h unter Rückfluss erhitzt, abgekühlt und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan (50 ml) gelöst und es wurde Methanol (50 ml) zugegeben. Das Gemisch wurde 2,5 h bei Raumtemperatur gerührt und dann im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan (100 ml) gelöst, mit gesättigter Natriumbicarbonat-Lösung und Salzlösung gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt unter Bildung eines lohfarbenen Feststoffs, der als Methyl-2-fluor-4-meihylbenzoat identifiziert wurde. (5,07 g, 77%).
9C: Methyl-4-brommethyl-2-fluorbenzoat
Methyl-2-fluor-4-methylbenzoat (5,07 g, 30,16 mmol) wurde nach der Methode des Beispiels 5A umgesetzt. Das Produkt wurde durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 20% Ethylacetat/80% Pet.ether) gereinigt unter Bildung eines Öls, das als Methyl-4-brommethyl-2-fluorbenzoat identifiziert wurde. (5,9 g, 80%).
9D: 4-(tert.-Butyloxycarbonylaminomethyl)-2-fluorbenzoesäure
Methyl-4-brommethyl-2-fluorbenzoat (5,9 g, 24,13 mmol) wurde nach der Methode des Beispiels 5B umgesetzt. das Produkt wurde aus Dioxan/Pet.ether umkristallisiert unter Bildung weißer Kristalle, die als 4-(tert.-Butyloxycarbonylaminomethyl)-2-fluorbenzoesäure identifiziert wurden. (2,46 g, 38%).
Beispiel 10 4-Cyano-3,5-dimethylbenzoesäure
10A: 4-Brom-2,6-dimethylbenzonitril
4-Brom-2,6-dimethylanilin (4,49 g, 22,4 mmol) wurde in Wasser (25 ml) aufgenommen und es wurde konz. HCl (8,0 ml) zugegeben. Das Gemisch wurde zur Bildung einer feinen Suspension beschallt und dann auf 0°C abgekühlt. Dann wurde eine Lösung von Natriumnitrit (1,67 g, 24,2 mmol) in Wasser (5 ml) zugetropft, um die Reaktionstemperatur zwischen 0 und 5°C zu halten. Das Gemisch wurde 30 min bei 0 bis 5°C gerührt und dann durch Zugabe von festem Natriumbicarbonat neutralisiert. Die erhaltene Lösung wurde dann in einzelnen Anteilen zu einer Lösung von Kupfercyanid (2,42 g, 27,0 mmol) und Kaliumcyanid (3,65 g, 56,1 mmol) in Wasser (25 ml) bei 70°C zugegeben. Das Gemisch wurde 30 min bei 70°C gerührt, konnte sich dann abkühlen und wurde dann mit Toluol (2 mal) extrahiert. Die vereinigten Auszüge wurden mit Wasser und Salzlösung gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 5% Ethylacetat/95% Pet.ether) gereinigt unter Bildung eines orangefarbenen Feststoffs, der als 4-Brom-2,6-dimethylbenzonitril identifiziert wurde. (3,2 g, 68%).
10B: 4-Cyano-3,5-dimethylbenzoesäure
4-Brom-2,6-dimethylbenzonitril (3,20 g, 15,2 mmol) wurde nach der Methode des Beispiels 7 umgesetzt unter Bildung eines lohfarbenen Feststoffs, der als 4-Cyano-3,5-dimethylbenzoesäure identifiziert wurde. (1,5 g, 56%).
Beispiel 11 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzodiazepin-4-on-1-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin
11A: 1-(N-Benzyloxycarbonyl-L-prolyl)-4-(tert.-butyloxycarbonyl)perhydro-1,4-diazepin
HOBt (3,04 g, 20 mmol), WSCD (5,3 g, 26 mmol) und N-Benzyloxycarbonyl-L-prolin (4,7 g, 18,8 mmol) wurden zu einer Lösung von tert.-Butyl-homopiperazin-1- trocknet und im Vakuum eingeengt unter Bildung eines blass-gelben Gummis, der als 1-(N-Benzyloxycarbonyl-L-prolyl)-4-(tert.-butyloxycarbonyl)perhydro-1,4-diazepin identifiziert wurde. (8,1 g, 100%).
11B: 1-(N-Benzyloxycarbonyl-L-thioprolyl)-4-(tert.-butoxycarbonyl)perhydro-1,4-diazepin
Lewesson Reagenz (6,79 g, 16,8 mmol) wurde zu einer Lösung von 1-(N-Benzyloxycarbonyl-L-prolyl)-4-(tert.-butyloxycarbonyl)perhydro-1,4-diazepin (12 g, 28 mmol) in Toluol (200 ml) gegeben und 1 h bei 90°C und dann 18 h bei 85°C gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 98% Chloroform/2% Methanol) gereinigt unter Bildung von 1-(N-Benzyloxycarbonyl-L-thioprolyl)-4-(tert.-butyloxycarbonyl)perhydro-1,4-diazepin. (8,4 g, 67%). MS [M+N]⁺ 447,3
11C: 1-(N-Benzyloxycarbonyl-L-thioprolyl)-4-methylperhydro-1,4-diazepin
Eine Lösung von 1-(N-Benzyloxycarbonyl-L-thioprolyl)-4-(tert.-butyloxycarbonyl)perhydro-1,4-diazepin (8,4 g, 18,1 mmol) in 4N HCl/Dioxan (20 ml) wurde 35 min bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde azeotrop mit Toluol destilliert. Der erhaltene Gummi wurde in Essigsäure/Methanol (1:9, 100 ml) gelöst und bei 0°C gerührt. Es wurde Formaldehyd (20%ige Lösung, 8,4 ml, 56 mmol) zugegeben, die Lösung wurde 20 min gerührt, dann Natrium-cyanoborhydrid (2,35 g, 37 mmol) zugegeben und die Lösung 18 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 95% Chloroform/3% Methanol/1 % Triethylamin) gereinigt unter Bildung eines farblosen Gummis, der als identifiziert wurde. (6,56 g, 97%).
MS [M+H]⁺ 362,2
11D: 4-Methyl-1-L-thioprolylperhydro-1,4-diazepin
1-(N-Benzyloxycarbonyl-L-thioprolyl)-4-methylperhydro-1,4-diazepin (3 g, 8,3 mmol) wurde in eiskalter 30%iger HBr/Essigsäure (20 ml) gelöst. Die erhaltene braune Lösung wurde 3 h bei RT gerührt, das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand azeotrop mit Toluol destilliert. Es wurde ges. NaHCO₃ (100 ml) zugegeben bis die Lösung einen pH>8 zeigte. Die Lösung wurde mit Diethylether (2 × 40 ml) gewaschen dann im Vakuum eingedampft und azeotrop mit Toluol destilliert. Der erhaltene Feststoff wurde mit heißem Chloroform (3 × 100 ml) extrahiert und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt unter Bildung eines braunen Gummis, der als 4-Methyl-1-L-thioprolylperhydro-1,4-diazepin identifiziert wurde. (1,72 g, 91%)
MS [M+H]⁺ 228,1
11E: 1-(4-Cyano-3-methylbenzoyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzo-diazepin-4-on
Thionylchlorid (0,4 ml, 6,0 mmol) wurde zu einer Suspension von 4-Cyano-3-methylbenzoesäure (322 mg, 2,0 mmol) in Toluol (10 ml) gegeben und das Gemisch 90 min unter Rückfluss erhitzt, dann auf RT abgekühlt und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde azeotrop mit Toluol destilliert, dann in Dichlormethan (5 ml) gelöst und zu einer Suspension von 2,3,4,5-Tetrahydro-1,5-benzo-diazepin-2-on (324 mg, 2,0 mmol) und Triethylamin (280 μl, 2,0 mmol) in Dichlormethan (3 ml) zugegeben. Das Gemisch wurde über Nacht bei RT gerührt und dann im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde zwischen Dichlormethan und 0,3M KHSO₄ verteilt. Die organische Phase wurde mit ges. NaHCO₃ und Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt unter Bildung eines roten Feststoffs, der als 1-(4-Cyano-3-methylbenzoyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzo-diazepin-4-on identifiziert wurde (600 mg, 98%)
11F: 1-(4-Aminomethyl-3-methylbenzoyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzo-diazepin-4-on
Natriumborhydrid (734 mg, 19,3 mmol) wurde in einzelnen Anteilen zu einer eiskalten Suspension von 1-(4-Cyano-3-methylbenzoyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzodiazepin-4-on (590 mg, 1,93 mmol) und CoCl₂.6H₂O (920 mg, 3,86 mmol) in Methanol (10 ml) gegeben. Das Gemisch wurde 1 h bei RT gerührt, (die Reaktion) dann mit 1M HCl abgebrochen und im Vakuum eingeengt. Der wässrige Rückstand wurde mit 1M HCl (50 ml) verdünnt und durch Celite^® Filterhilfe filtriert. Das Filtrat wurde mit Diethylether (2 × 50 ml) gewaschen, dann mit 4M NaOH alkalisch gemacht und mit Chloroform (3 × 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt unter Bildung eines blass gelben Feststoffs, der als 1-(4-Aminomethyl-3-methylbenzoyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzodiazepin-4-on identifiziert wurde. (300 mg, 50%).
11G: 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzodiazepin-4-on-1-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin
1,1'-Carbonyldiimidazol (18 mg, 0,11 mmol) wurde unter Stickstoffgas zu einer Lösung von 1-(4-Aminomethyl-3-methylbenzoyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzo-diazepin-4-on (31 mg, 0,1 mmol) und DIEA (54 μl, 0,3 mmol) in DMF (2 ml) gegeben und die Lösung 1 h bei RT gerührt. Eine Lösung von 4-Methyl-1-L-thioprolylperhydro-1,4-diazepin (22,7 mg, 0,1 mmol) und DIEA (54 μl, 0,3 mmol) in DMF (2 ml) wurde zugegeben und die Lösung unter Stickstoffgas 18 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vaku um entfernt und der Rückstand durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 97% Chloroform/2% Methanol/1 % Triethylamin) gereinigt unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzodiazepin-4-on-1-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin identifiziert wurde. (17 mg, 30%). MS [M+H]⁺ 563,2
Beispiel 12 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin-5-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin
12A: 5-(4-Cyano-3-methylbenzoyl)-1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin
Thionylchlorid (1,8 ml, 27 mmol) wurde zu einer Suspension von 4-Cyano-3-methylbenzoesäure (1,29 g, 8,0 mmol) in Toluol (25 ml) gegeben und das Gemisch 2 h unter Rückfluss erhitzt, dann auf RT abgekühlt und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde azeotrop mit Toluol destilliert, dann in Dichlormethan (10 ml) gelöst und zu einer Suspension von 1-Methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin (1,6 g, 8 mmol) und Triethylamin (1,4 ml, 10 mmol) in Dichlormethan (15 ml) zugegeben. Das Gemisch wurde über Nacht bei RT gerührt und dann im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde zwischen Chloroform und 0,3M KHSO₄ verteilt. Die organische Phase wurde mit Chloroform/2-Propanol (80:20) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit NaHCO₃ und Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 95% Chloroform/5% Methanol) gereinigt unter Bildung eines blass gelben Feststoffs, der als 5-(4-Cyano-3-methylbenzoyl)-1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin identifiziert wurde. (2,4 mg, 87%).
12B: 5-(4-Aminomethyl-3-methylbenzoyl)-1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin
Natriumborhydrid (1,27 g, 33,5 mmol) wurde in einzelnen Anteilen zu einer eiskalten Suspension von 5-(4-Cyano-3-methylbenzoyl)-1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin (1,15 g, 3,35 mmol) und CoCl₂.6H₂O (1,59 g, 6,7 mmol) in Methanol (35 ml) gegeben. Das Gemisch wurde 1 h bei RT gerührt, dann mit 1M KHSO₄ abgebrochen und im Vakuum eingeengt. Der wässrige Rückstand wurde mit 1M KHSO₄ (40 ml) verdünnt und durch Celite^® Filterhilfe filtriert. Das Filtrat wurde mit Diethylether (2 × 50 ml) gewaschen, dann mit 2M NaOH alkalisch gemacht und mit Chloroform extrahiert. Die organische Phase wurden über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt unter Bildung eines braunen Feststoffs, der als 5-(4-Aminomethyl-3-methylbenzoyl)-1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin identifiziert wurde. (745 mg, 64%)
12C: 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin-5-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin
1,1'-Carbonyldiimidazol (267 mg, 1,65 mmol) wurde unter Stickstoffgas zu einer Lösung von 5-(4-Aminomethyl-3-methylbenzoyl)-1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin (520 mg, 1,5 mmol) und DIEA (276 μl, 1,5 mmol) in DMF (10 ml) gegeben und die Lösung 1 h bei RT gerührt. Eine Lösung von 4-Methyl-1-L-thioprolylperhydro-1,4-diazepin (374,7 mg, 1,65 mmol) und DIEA (276 μl, 1,5 mmol) in DMF (10 ml) wurde zugegeben und die Lösung unter Stickstoffgas 18 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand durch Schnell- Chromatographie über Silicagel (Eluens 96% Chloroform/3% Methanol/1% Triethylamin und dann 92% Chloroform/6% Methanol/2% Triethylamin) gereinigt unter Bildung eines cremefarbenen Feststoffs, der als 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin-5-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin identifiziert wurde. (568 mg, 63%).
NMR (270MHz, CDCl₃) δ 1,91–2,77 (18H, m), 3,33–3,43 (2H, m), 3,62–3,64 (1H, m), 3,73 (3H, s), 3,75–3,95 (3H, m), 4,11–4,29 (2H, m), 4,55–4,57 (1H, m), 5,05–5,06 (1H, m), 5,85–5,91 (1H, m), 6,65–6,77 (3H, m), 6,94–6,98 (4H, m), 7,21–7,24 (1H, m) ppm. MS [M+H]⁺ 600,7
Beispiel 13 4,4-Dimethyl-1-(N-(2-methyl-4-(1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin-5-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepiniumiodid
Iodmethan (13,9 mg, 6,1 μl, 0,098 mmol) wurde zu einer Lösung von 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin-5-ylcarbonyl)-benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin (30 mg, 0,049 mmol) in THF (10 ml) gegeben und das Gemisch 4 h bei RT gerührt. Der erhaltene Feststoff wurde gesammelt und in Wasser (5 ml) gelöst. Die Lösung wurde mit Ethylacetat (2 × 10 ml) gewaschen und lyophilisiert unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als 4,4-Dimethyl-1-(N-(2-methyl-4-(1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]benzodiazepin-5-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepinium-iodid identifiziert wurde.
(29 mg, 79,6%). MS [M+H]⁺ 615,3
Beispiel 14 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl]-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin
1,1'-Carbonyldiimidazol (20 mg, 0,12 mmol) wurde unter Stickstoffgas zu einer Lösung von 4-(4-Aminomethyl-3-methylbenzoyl)-5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin (36 mg, 0,1 mmol) und DIEA (50 μl, 0,3 mmol) in DMF (10 ml) gegeben und die Lösung 1 h bei RT gerührt. Eine Lösung von 4-Methyl-1-L-thioprolylperhydro-1,4-diazepin (34 mg, 0,15 mmol) und DIEA (50 μl, 0,3 mmol) in DMF (10 ml) wurde zugegeben und die erhaltene Lösung unter Stickstoffgas 18 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 96% Chloroform/3% Methanol/1 % Triethylamin) und dann durch halbquantitative HPLC (Vydac C₁₈ Säule; 30% → 80% 0,1 % TFA/Acetonitril in 0,1 % TFA/Wasser 40 min mit 6 ml/min) gereinigt. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen wurden zusammengegeben und lyophilisiert unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin-trifluoracetat identifiziert wurde. (17 mg, 25%).
NMR (270MHz, CD₃OD) δ 1,79–2,32 (10H, m), 2,71–2,99 (5H, m), 3,40–3,91 (10H, m), 4,26–4,53 (3H, m), 4,86–5,10 (2H, m), 6,27–6,28 (1H, m), 6,79–6,81 (1H, m), 7,13–7,41 (3H, m) ppm. MS [M+H]⁺ 574,2
Beispiel 15 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzyloxycarbonyl)-L-prolyl)perhydro-1,4-diazepin
15A: 4-(4-Carboxy-3-methylbenzoyl)-5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin
Eine Suspension von 4-(4-Cyano-3-methylbenzoyl)-5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin (1 g, 3,3 mmol) in konz. Schwefelsäure/Wasser (1:1, 30 ml) wurde 5 h unter Rückfluss erhitzt. Die erhaltene Lösung wurde auf RT abgekühlt, mit Wasser (20 ml) verdünnt und mit Chloroform (3 × 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit ges. NaHCO₃ (2 × 20 ml) extrahiert. Die vereinigten wässrigen Auszüge wurden mit 1M KHSO₄ angesäuert und mit Chloroform (3 × 20 ml) extrahiert. Diese Chloroform-Auszüge wurden zusammengegeben, mit Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt unter Bildung eines blass braunen Feststoffs, der als 4-(4-Carboxy-3-methylbenzoyl)- 5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin identifiziert wurde. (225 mg, 23%).
15B: 4-(4-Hydroxymethyl-3-methylbenzoyl)-5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin
Isobutyl-chlorformiat (250 μl, 2 mmol) wurde zu einer Lösung von 4-(4-Carboxy-3-methylbenzoyl)-5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin (470 mg, 1,48 mmol) und Methylmorpholin (230 μg, 2,1 mmol) in THF (15 ml) bei 0°C zugegeben und das Gemisch 1 h gerührt. Die erhaltene Suspension wurde filtriert und das Filtrat wurde zu einer Lösung von Natriumborhydrid (131 mg, 3,45 mmol) in Wasser (15 ml) bei 0°C gegeben. Die Lösung wurde 2 h bei RT gerührt, dann ges. NH₄Cl (5 ml) zugegeben und das THF im Vakuum entfernt. Die verbliebene Lösung wurde mit Wasser verdünnt und mit Chloroform (3 × 20 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt unter Bildung eines blass braunen Feststoffs, der als 4-(4-Hydroxymethyl-3-methylbenzoyl)-5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin identifiziert wurde. (330 mg, 74%).
15C: 4-(4-(1-Imidazolcarbonyloxymethyl)-3-methylbenzoyl)-5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin
1,1'-Carbonyldiimidazol (36 mg, 0,22 mmol) wurde unter Stickstoffgas zu einer Lösung von 4-(4-Hydroxymethyl-3-methylbenzoyl)-5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin (60 mg, 0,17 mmol) in DMF (2 ml) gegeben und die Lösung wurde 18 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 97% Chloroform/3% Methanol) gereinigt unter Bildung eines farblosen Gummis, der als 4-(4-(1-Imidazolcarbonyloxymethyl)-3-methylbenzoyl)-5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin identifiziert wurde. (65 mg, 45%).
15D: 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzyloxycarbonyl)-L-prolyl)perhydro-1,4-diazepin
Eine Lösung von 4-(4-(1-Imidazolcarbonyloxymethyl)-3-methylbenzoyl)-5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin (27,24 mg, 0,12 mmol), 4-Methyl-1-L-prolylperhydro-1,4-diazepin (47 mg, 0,12 mmol), DIEA (45 μl, 0,125 mmol) in Ethylacetat (20 ml) wurde 48 h unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 96% Chloroform/3% Methanol/1% Triethylamin) und dann durch halb-quantitative HPLC (Vydac C₁₈ Säule; 25% → 65% 0,1 % TFA/Acetonitril in 0,1%TFA/Wasser 40 min mit 6 ml/min) gereinigt. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen wurden zusammengegeben und lyophilisiert unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-ylcarbonyl)benzyloxycarbamoyl)-L-prolyl)perhydro-1,4-diazepin-trifluoracetat identifiziert wurde. (11 mg, 13%).
NMR (270MHz, CD₃OD) δ 1,80–2,46 (15H, m), 2,92–2,98 (5H, m), 3,29–3,79 (11H, m), 4,07–4,15 (1H, m), 4,84–5,13 (3H, m), 6,21–6,25 (1H, m), 6,75–6,78 (1H, m), 7,02–7,21 (3H, m) ppm. MS [M+H]⁺ 585,3
Beispiel 16 (4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin-N-methyl-N-(2-picolyl)amid
16A: (4R)-N^α-(4-(tert.-Butyloxycarbonyl)2-chlorbenzylcarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin-methyl-ester
1,1'-Carbonyldiimidazol (800 mg, 4,8 mmol) wurde unter Stickstoffgas zu einer Lösung von tert.-Butyl-4-(Aminomethyl)-3-chlorbenzoat (967 mg, 4 mmol) und DIEA (1 ml, 6 mmol) in DMF (30 ml) gegeben und die Lösung 1 h bei RT gerührt. Eine Lösung von (4R)-4-Methoxy-L-prolin-methyl-ester (663 mg, 4,17 mmol) in DMF (10 ml) wurde zugegeben und die Lösung 18 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand in Ethylacetat gelöst. Die Lösung wurde mit 0,3M KHSO₄, ges. NaHCO₃ und Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 80% Pet.ether/20% Ethylacetat) gereinigt unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als identifiziert wurde. (940 mg, 55%).
16B: (4R)-N^α-(4-(tert.-Butyloxycarbonyl)-2-chlorbenzylcarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin
Lithium-hydroxid (139 mg, 3,3 mmol) wurde zu einer Lösung von (4R)-N^α-(4-(tert.-Butyloxycarbonyl) 2-chlorbenzylcarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin-methyl-ester (930 mg, 2,18 mmol) in Dioxin/Wasser (1:1, 30 ml) gegeben und das Gemisch wurde 1 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde zwischen Ethylacetat und 0,3M KHSO₄ verteilt. Die wässrige Schicht wurde mit Ethylacetat (2 × 30 ml) extrahiert. Die organischen Phasen wurden zusammengegeben, mit Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als (4R)-N^α-(4-(tert.-Butyloxycarbonyl)2-chlorbenzylcarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin identifiziert wurde. (890 mg, 99%).
16C: (4R)-N^α-(4-(tert.-Butyloxycarbonyl)2-chlorbenzyfcarbamoyf)-4-methoxy-L-prolin-N-methyl-N-(2-picolyl)amid
tert.-Butyl-N-methyl-N-(2-picolyl)carbamat (100 mg, 0,45 mmol) wurde in 4N HCl/Dioxan (10 ml) gelöst und die Lösung 1 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde azeotrop mit Toluol destilliert. Der erhaltene Gummi wurde in Dichlormethan (5 ml) gelöst und es wurde Triethylamin (140 μl, 1 mmol) zugegeben unter Bildung einer Lösung von N-Methyl-2-picolylamin.
In einem zweiten Kolben wurden HOBt (107 mg, 0,7 mmol) und WSCD (106 mg, 0,55 mmol) bei 0°C zu einer Lösung von (4R)-N^α-(4-(tert.-Butyloxycarbonyl)2-chlorbenzylcarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin (185 mg, 0,45 mmol) in Dichlormethan (10 ml) gegeben. Die erhaltene Lösung konnte sich auf RT erwärmen und wurde 30 min ge rührt. Die Lösung von N-Methyl-2-picolylamin wurde zu dieser Lösung zugegeben und das Reaktionsgemisch wurde 18 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand in Ethylacetat gelöst. Die Lösung wurde mit 0,3M KHSO₄, ges. NaHCO₃ und Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 96% Chloroform/4% Methanol) gereinigt unter Bildung eines weißen Gummis, der als (4R)-N^α-(4-(tert.-Butyloxycarbonyl)2-chlorbenzylcarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin-N-methyl-N-(2-picolyl)amid identifiziert wurde. (170 mg, 73%).
16D: (4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylycarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin-N-methyl-N-(2-picolyl)amid
(4R)-N^α-(4-(tert.-Butyloxycarbonyl)-2-chlorbenzylcarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin-N-methyl-N-(2-picolyl)amid (60 mg, 0,12 mmol) wurde in 60% TFA/DCM (10 ml) gelöst und die Lösung wurde 90 min bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde in Dichlormethan (10 ml) gelöst und dann auf 0°C gekühlt. 5,6,7,8-Tetrahydrothieno[3,2-b]azepin (20 mg, 0,12 mmol), WCSD (48 mg, 0,25 mmol), 4-Dimethylaminopyridin (15 mg, 0,12 mmol) und Triethylamin (56 μl, 0,4 mmol) wurden zugegeben und die Lösung 1 h unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand in Ethylacetat gelöst. Die Lösung wurde mit 0,3M KHSO₄, ges. NaHCO₃ und Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 97% Chloroform/3% Methanol) gereinigt unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als (4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylycarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin-N-methyl-N-(2-picolyl)amid identifiziert wurde. (32 mg, 45%).
NMR (270MHz, CDCl₃) δ 1,74–2,26 (8H, m), 2,86–2,89 (3H, m), 3,07–3,32 (4H, m), 3,44–4,97 (10H, m), 6,12–6,16 (1H, m), 6,58–6,65 (1H, m), 6,99–7,28 (4H, m), 7,53–7,70 (2H, m), 8,17–8,44 (1H, m) ppm. MS [M+H]⁺ 596,2
Beispiel 17 1-((4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylycarbamoyl)-4-methoxy-L-prolyl)-4-(1-pyrrolidinyl)piperidin
17A: (4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylycarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin-methylester
1,1' Carbonyldiimidazol (197,8 mg, 1,22 mmol) wurde unter Stickstoffgas zu einer Lösung von 4-(4-Aminomethyl-3-chlorbenzoyl)-5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin (400 mg, 1,11 mmol) und DIEA (306 μl, 1,66 mmol) in DMF (10 ml) gegeben und die Lösung 1 h bei RT gerührt. Eine Lösung von (4R)-4-Methoxy-L-prolin-methyl-ester (176 mg, 1,11 mmol) in DMF (10 ml) wurde zugegeben und das Gemisch unter Stickstoffgas 18 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 98% Chloroform/1% Methanol/1% Essigsäure) gereinigt unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als (4R)- N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylycarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin-methylester identifiziert wurde. (550 mg, 98%).
17B: (4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylycarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin
Eine Lösung von Lithium-hydroxid (68,5 mg, 1,63 mmol) und (4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylycarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin-methylester (555 mg, 1,08 mmol) in THF/Wasser (1:1, 40 ml) wurde 1 h bei RT gerührt. Das Dioxan wurde im Vakuum entfernt und der wässrige Rückstand wurde mit 1N HCl angesäuert und mit Ethylacetat (3 × 50 ml) extrahiert. Die organischen Auszüge wurden zusammengegeben, mit Wasser gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als (4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylycarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin identifiziert wurde. (490 mg, 92%).
17C: 1-((4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylycarbamoyl)-4-methoxy-L-prolyl-4-(1-pyrrolidinyl)piperidin
HOBt (14,8 mg, 0,097 mmol) und WSCD (22,68 mg, 0,11 mmol) und 4-(Pyrrolidinyl)piperidin (13,7 mg, 0,089 mmol) wurden zu einer eiskalten Lösung von (4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylycarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin (40 mg, 0,081 mmol) und Triethylamin (18 μl, 0,12 mmol) in Dichlormethan (10 ml) gegeben. Die erhaltene Lösung wurde 18 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand in Ethylacetat gelöst. Die Lösung wurde mit ges. NaHCO₃ und Salzlösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand durch Schnell-Chromatographie über Silicagel (Eluens 94% Chloroform/4% Methanol/2% Triethylamin) gereinigt unter Bildung eines weißen Feststoffs, der als 1-((4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-ylcarbonyl)benzylycarbamoyl)-4-methoxy-L-prolyl-4-(1-pyrrolidinyl)piperidin identifiziert wurde. (40,9 mg, 80%).
NMR (270MHz, CDCl₃) δ 1,11–1,33 (7H, m), 1,76–2,15 (12H, m), 2,60–2,73 (3H, m), 2,88–2,92 (2H, m), 3,28 (3H, s), 3,29–3,32 (1H, m), 3,67–3,70 (1H, m), 3,95–4,23 (3H, m), 4,61–4,83 (2H, m), 4,76–4,78 (1H, m), 4,86–4,89 (1H, m), 6,16–6,17 (1H, m), 6,65–6,67 (1H, m), 7,02–7,05 (1H, m), 7,24–7,26 (3H, m) ppm. MS [M+H]⁺ 628,3
Die folgenden Verbindungen wurden nach analogen Methoden hergestellt.
Beispiel 106
In vitro Untersuchungen
Es wurden Verbindungen untersucht, um ihre Fähigkeit zu bestimmen, die Bindung von [¹²⁵I]OVA an ein Zellmembran-Präparat von OT-Rezeptoren zu hemmen (Bindungs-Assay) und die zellulären Folgen der OT-Stimulierung auf intakte Zellen nachzuahmen (Funktions-Assay). Bei dem Bindungs-Assay zeigen die erfindungsgemäßen Verbindungen allgemein eine deutliche Hemmung der Bindung des Radio-Liganden bei Konzentrationen von 50 μM oder weniger. Bei dem Funktions-Assay führen die erfindungsgemäßen Verbindungen zu einer deutlichen Tell-Aktivierung bei Konzentrationen von 30 μM oder weniger. Bevorzugte Verbindungen führen zu einer deutlichen Aktivierung bei Konzentrationen von 300 nM oder weniger und können die gleichen maximalen Wirkungen erreichen wie OT. Die Verbindungen sind entweder deutlich weniger aktiv oder zeigen keinerlei Aktivität bei Assays für die vasopressin-artige Aktivität.
Beispiel 107
In vivo Untersuchungen
Repräsentative Verbindungen wurden auf ihre Aktivität in dem Uterus-Kontraktions-Modell bei Ratten, was ein anerkannter Test auf OT-Agonismus ist, untersucht.
Die Verbindungen erhöhten die Stärke und Frequenz der Uterus-Kontraktionen bei Dosen unterhalb von 50 mg/kg. Ausgewählte Verbindungen wurden entweder i.c.v. oder i.v. an männliche Ratten verabreicht und ihre Erektions-Reaktion wurde bestimmt.
Beispiel 108
Tabletten zur oralen Verabreichung
Tabletten, enthalten 100 mg der Verbindung des Beispiels 11 als Wirkstoff wurden aus der folgenden Zusammensetzung hergestellt.

Verbindung nach Beispiel 11 200,0 g

Maisstärke 71,0 g

Hydroxypropylcellulose 18,9 g

Carboxymethylcellulose-calcium 13,0 g

Magnesiumstearat 3,0 g

Lactose 195,0 g

Gesamt 500,0 g
Die Materialen wurden vermischt und verpresst unter Bildung von 2000 Tabletten zu 250 mg, enthaltend jeweils 100 mg der Verbindung nach Beispiel 11.
Das oben Gesagte zeigt, dass die erfindungsgemäßen Verbindungen als Agonisten an dem Oxytocin-Rezeptor wirken und folglich können sie Anwendung finden als pharmazeutische Mittel zur Behandlung von Zuständen, wie Sexual-Störungen, einschließlich Erektionsstörungen und Ejakulationsstörungen beim Mann, Sexual-Störungen bei der Frau, Krebs der Prostata, Brust, Eierstöcke und Knochen, Osteoporose, gutartige Prostata-Hyperplasie, Blutungen nach der Geburt und Depressionen.
Die Verbindungen können auch angewandt werden zur Einleitung der Wehen oder der Ablösung der Plazenta, zur Verringerung des arteriellen Blutdrucks, zur Herabsetzung von überschießenden Stressreaktionen und zur Erhöhung der Schmerzschwelle.
Der Umfang der vorliegenden Erfindung wird durch die folgenden Ansprüche näher definiert.

Claims

Verbindung der allgemeinen Formel 1, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon
wobei G¹ ausgewählt ist aus einer Gruppe der allgemeinen Formel 2 und einer Gruppe der allgemeinen Formel 3,
G² ausgewählt ist aus einer Gruppe der allgemeinen Formel 4, einer Gruppe der allgemeinen Formel 5, einer Gruppe der allgemeinen Formel 6, einer Gruppe der allgemeinen Formel 7, einer Gruppe der allgemeinen Formel 8 und einer Gruppe der allgemeinen Formel 9

A¹ ausgewählt ist aus CH₂, CH(OH), NH, N-Alkyl, N-(CH₂)_n-R²⁷, O und S; A² ausgewählt ist aus CH₂, CH(OH), C(=O) und NH; A³ ausgewählt ist aus S, NH, N-Alkyl, -CH=CH- und -CH=N-; A⁴ und A⁵ jeweils ausgewählt sind aus CH und N; A⁶ ausgewählt ist aus CH₂, NH, N-Alkyl und O; A⁷ und A¹¹ ausgewählt sind aus C und N; A⁸ und A⁹ ausgewählt sind aus CN, N, NH, N(CH₂)_mR²⁶ und S; A¹⁰ ausgewählt ist aus -CH=CH-, CH, N, NH, N(CH₂)_mR²⁶ und S; A¹² und A¹³ ausgewählt sind aus C und N; A¹⁴, A¹⁵ und A¹⁶ ausgewählt sind aus NH, N-CH₃, S, N und CH; X¹ ausgewählt ist aus O und NH; X² ausgewählt ist aus NR¹⁶, CH-NR¹⁷R⁸, CH-CH₂NR¹⁷R¹⁸, N⁺R¹⁹R²⁰, CH-N⁺R²¹R²²R²³ und CH-CH₂N⁺R²¹R²²R²³; Y ausgewählt ist aus O und S; R¹, R² und R³ jeweils ausgewählt sind aus H, Alkyl, O-Alkyl, F, Cl und Br; R⁴ und R⁵ jeweils ausgewählt sind aus H, O-Alkyl, O-Benzyl und F oder R⁴ und R⁵ zusammen =O, -O(CH₂)_aO- oder -S(CH₂)_aS- sind; R⁴ ausgewählt ist aus einer Gruppe der allgemeinen Formel 10, einer Gruppe der allgemeinen Formel 11, einer Gruppe der allgemeinen Formel 12, einer Gruppe der allgemeinen Formel 13, einer Gruppe der allgemeinen Formel 14, einer Gruppe der allgemeinen Formel 15, einer Gruppe der allgemeinen Formel 16, einer Gruppe der allgemeinen Formel 17, einer Gruppe der allgemeinen Formel 18, einer Gruppe der allgemeinen Formel 19, einer Gruppe der allgemeinen Formel 20, einer Gruppe der allgemeinen Formel 21, einer Gruppe der allgemeinen Formel 22, einer Gruppe der allgemeinen Formel 23, einer Gruppe der allgemeinen Formel 24 und einer Gruppe der allgemeinen Formel 25;
R¹ ausgewählt ist aus H, Alkyl, und irgendeiner Gruppe, wie für R⁶ definiert; R⁸, R⁹ und R¹⁰ unabhängig ausgewählt sind aus H und Alkyl oder R⁸ und R⁹ zusammen -(CH₂)_g- sein können; R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴ und R¹⁵ alle Alkyl sind oder R¹¹ und R¹² zusammen oder R¹⁴ und R¹⁵ zusammen -(CH₂)_g- sein können; R¹⁶, R¹⁷ und R¹⁸ unabhängig ausgewählt sind aus H und Alkyl oder R¹⁷ und R¹⁸ zusammen -(CH₂)_j- sein können; R¹⁹, R²⁰, R²¹, R²² und R²³ alle Alkyl sind oder R¹⁹ und R²⁰ zusammen oder R²¹ und R²² zusammen -(CH₂)_j- sein können; R²⁴ und R²⁵ unabhängig ausgewählt sind aus Alkyl, Ar und -(CH₂)_k-Ar; R²⁶ ausgewählt ist aus H, Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, Pyridyl Thienyl, OH, O-Alkyl, NH₂, NH-Alkyl, N(Alkyl)₂, CO₂H, CO₂-Alkyl, CONH₂, CONH-Alkyl, CON(Alkyl)₂, CN und CF₃; R²⁷ ausgewählt ist aus OH, O-Alkyl, O-CO-Alkyl, NH₂, NH-Alkyl und N(Alkyl)₂, Ar ausgewählt ist aus Thienyl und gegebenenfalls substituiertem Phenyl; a 2 oder 3 ist, b 1, 2 oder 3 ist, c 1 oder 2 ist, d 1, 2 oder 3 ist, e 1 oder 2 ist, f 1, 2 oder 3 ist, g 4, 5 oder 6 ist, h 1, 2 oder 3 ist, i 1, 2, 3 oder 4 ist, j 4, 5 oder 6 ist, k 1, 2 oder 3 ist, I 1 oder 2 ist, m 1, 2 oder 3 ist und n 2, 3 oder 4 ist; mit der Maßgabe, dass: nicht mehr als eines von A⁸, A⁹ und A¹⁰ NH, N(CH₂)_mR²⁶ oder S ist; A⁷ und A¹¹ nicht beide gleichzeitig N sind; weder A⁷ noch A¹¹ N ist, wenn eines von A⁸, A⁹ und A¹⁰ NH, N(CH₂)_mR²⁶ oder S ist; wenn A¹⁰ -CH=CH- ist, dann A⁸ N ist, A⁹ CH ist und A⁷ und A¹¹ beide C sind; wenn A¹⁰ nicht -CH=CH- ist, dann eines von A⁸, A⁹ und A¹⁰ NH, N(CH₂)_mR²⁶ oder S ist, oder eines von A⁷ und A¹¹ N ist; nicht mehr als eines von A¹⁴, A¹⁵ und A¹⁶ NH, N-CH₃ oder S ist; A¹² und A¹³ nicht beide gleichzeitig N sind; wenn eines von A¹⁴, A¹⁵ und A¹⁶ NH, N-CH₃ oder S ist, A¹² und A¹³beide C sind, und eines von A¹⁴, A¹⁵ und A¹⁶ NH, N-CH₃ oder S ist, oder eines von A¹² und A¹³ N ist.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei mindestens eines von R¹, R² und R³ H ist und eines nicht H ist.
Verbindung nach einem der vorangehenden Ansprüche, wobei eines von R¹, R² und R³ ausgewählt ist aus Alkyl, F, Cl und Br und die anderen H sind.
Verbindung nach einem der vorangehenden Ansprüche, wobei R¹ Methyl oder Cl ist und R² und R³ H sind.
Verbindung nach einem der vorangehenden Ansprüche, wobei eines von R⁴ und R⁵ H ist und das andere O-Alkyl ist.
Verbindung nach einem der vorangehenden Ansprüche, wobei eines von R⁴ und R⁵ H ist und das andere O-Methyl ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei R⁴ und R⁵ beide H sind.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei R⁴ und R⁵ beide F sind.
Verbindung nach einem der vorangehenden Ansprüche, wobei X¹ NH ist.
Verbindung nach einem der vorangehenden Ansprüche, wobei G¹ eine Gruppe der allgemeinen Formel 2 ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9, wobei G¹ eine Gruppe der allgemeinen Formel 3 ist.
Verbindung nach einem der vorangehenden Ansprüche, wobei G² eine Gruppe der allgemeinen Formel 4 ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11, wobei G² eine Gruppe der allgemeinen Formel 5, 6, 7, 8 oder 9 ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11, wobei G² eine Gruppe der allgemeinen Formel 5 ist, A¹ CH₂ ist und A² NH ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11, wobei G² eine Gruppe der allgemeinen Formel 5 ist, A¹ NH oder N-Alkyl ist und A² C(=O) ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11, wobei G² eine Gruppe der allgemeinen Formel 5, 6 oder 9 ist, A³ S ist und A⁴ und A⁵ beide CH sind.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11, wobei G² eine Gruppe der allgemeinen Formel 5, 6 oder 9 ist A³ -CH=CH- ist und A⁴ und A⁵ beide CH sind.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei R¹ Methyl oder Cl ist, R² und R³ beide H sind, R⁴ H oder O-Methyl ist, R⁵ H ist, X¹ NH ist und Y S ist.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei R¹ Methyl oder Cl ist, R² und R³ beide H sind, R⁴ H oder O-Methyl ist, R⁵ H ist, X¹ NH ist und Y O ist.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei R² und R³ beide H sind, X¹ NH ist und G¹
ist.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei R¹ Methyl oder Cl ist, R² und R³ beide H sind, R⁴ H oder O-Methyl ist, R⁵ H ist, X¹ NH ist und G²
ist.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei R¹ Methyl oder Cl ist, R² und R³ beide H sind, R⁴ H oder O-Methyi ist, R⁵ H ist, X¹ NH ist, G¹
ist und G²
ist.
Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzodiazepin-4-on-1-yl-carbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin, 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]-benzodiazepin-5-ylcarbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin, 4,4-Dimethyl-1-(N-(2-methyl-4-(1-methyl-4,10-dihydropyrazolo[5,4-b][1,5]-benzodiazepin-5-yl-carbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepinium-iodid, 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-yl-carbonyl)benzylcarbamoyl)-L-thioprolyl)perhydro-1,4-diazepin, 4-Methyl-1-(N-(2-methyl-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-yl-carbonyl)benzyloxycarbonyl)-L-prolyl)perhydro-1,4-diazepin, (4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-yl-carbonyl)benzylcarbamoyl)-4-methoxy-L-prolin-N-methyl-N-(2-picolyl)amid und 1-((4R)-N^α-(2-Chlor-4-(5,6,7,8-tetrahydrothieno[3,2-b]azepin-4-yl-carbonyl)benzylcarbamoyl)-4-methoxy-L-prolyl)-4-(1-pyrrolidinyl)piperidin.
Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 23 als Wirkstoff.
Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 24, in Form einer Tablette oder Kapsel zur oralen Verabreichung.
Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 24 oder 25 zur Behandlung von Erektionsstörungen bei Mann.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 23 zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung.
Verwendung nach Anspruch 27, wobei die pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung von Erektionsstörungen bei Mann vorgesehen ist.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 23 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von Sexualstörungen beim Mann oder bei der Frau.
Ein oder mehrere optische Isomere einer Verbindung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 22.